KR20230092805A - (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 신규한 산부가염 및 결정형 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 신규한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 옥살산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 말레인산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 팔미트산염 및 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형을 제공한다. 이러한 신규한 산부가염 및 결정형은 흡습성이 낮고 고온 및 고습 조건에서의 가혹안정성이 우수하여, 약학적으로 사용이 가능하다.

Description

(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 신규한 산부가염 및 결정형{Novel acid addition salt and crystalline form of (2R, 3S)-2-(3-(4,5-dichloro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)propyl)piperidin-3-ol}
본 발명은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 약학적으로 허용가능한 산부가염 및 결정형에 관한 것이다.
약학적으로 허용 가능한 염 및 이의 결정다형(polymorphs)의 선정은 신약 연구 개발 과정에서 매우 중요한 단계이다. 이는 특정 염 형태 및 이의 결정다형이 원료의약품 제조 공정 개발, 완제의약품 설계 및 제형에 중요한 영향을 미칠 수 있기 때문이다.
구체적으로, 염의 종류 및 이의 결정다형은 원료의약품 제조 최종 단계, 즉 재결정 및 정제 과정에서 재결정 수율, 공정 속도 및 순도에까지 영향을 미칠 수 있다. 특히, 결정의 크기나 모양에 따라 결정화 공정에서의 속도가 달라질 수 있어, 원료의약품의 생산성 및 제조 원가 측면에서도 염 및 결정다형의 선정이 중요하다.
또한, 특정 약물에 염을 부가하는 것은 약물의 화학적 구조를 변형시키지 않으면서 생리화학적 특성 및 생물학적 특성을 변화시키는 수단이 될 수 있다. 약제학적 측면에서 흡습성, 안정성, 용해도, 입자의 흐름성, 용출률 등의 물리화학적 특성은 염의 형태 및 이의 결정다형에 영향을 받기 때문이다. 이에 따라, 염의 형태 및 이의 결정다형은 완제의약품의 생산공정, 생산 및 보관 조건, 유통기한 등을 결정하는 요인이 된다.
따라서, 특정 약물의 제제를 제조함에 있어서, 더 양호한 안정성 및 더 양호한 생체 이용률을 나타낼 수 있는 염 및 결정다형의 선정에 대한 지속적인 연구가 필요하다.
한편, 본 발명자들은, 아미노아실-tRNA 합성효소(aminoacyl-tRNA synthetase; ARS) 패밀리 효소군 중의 하나이면서 단백질 합성을 위해 아미노산을 활성화시키는 역할을 하는 PRS(prolyl-tRNA synthetase) 효소를 저해할 수 있는 신규한 활성 의약 물질로 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올을 확인한 바 있다.
이러한 PRS는 EPRS(Glutamyl-Prolyl-tRNA Synthetase) 형태의 다중합성효소 복합체(multisynthetase complex, MSC) 상태로 존재하는데, 다양한 MSC 중에서도 EPRS는 혈관신생(angiogenesis)의 핵심인자인 VEGF A(vascular endothelial growth factor A)의 생성을 억제하는 전사침묵자(translational silencer)로서 기능을 하며, 또한 다양한 고형암과 밀접한 관련성이 있다고 보고된 바 있어(Nat. Rev. Cancer, 2011, 11, 708-718), 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 활성 의약 물질은 PRS(prolyl-tRNA synthetase) 항섬유화제, 항염제, 자가면역 치료제, 또는 단독 또는 기존 표적 항암제와의 병용하여 사용할 수 있는 차세대 항암제로 유용하게 적용될 수 있다
이에, 본 발명자들은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 생체 이용률 및 안정성을 향상시킬 수 있는 약학적으로 허용 가능한 염 및 이의 결정다형의 선정에 대한 연구를 진행한 결과, 특정 산부가염 형태로 제조 시 흡습성은 낮추면서 가혹 조건에서의 안정성은 향상시킬 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 흡습성이 낮고 안정성이 우수한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 약학적으로 허용 가능한 산부가염을 제공하기 위한 것이다.
또한, 본 발명은 흡습성이 낮고 안정성이 우수한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 약학적으로 허용 가능한 산부가염의 결정형을 제공하기 위한 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은,
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염을 제공한다.
또한, 본 발명은,
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염으로서, 상기 산부가염이 옥살산염, 말레인산염, 또는 팔미트산염인, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염을 제공한다.
또한, 본 발명은,
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형을 제공한다.
한편, 신규한 활성 의약 물질인 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올은 하기 화학식 1로 표시된다:
[화학식 1]
Figure pat00001
상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 저감된 독성을 나타내면서 PRS 효소 활성을 억제할 수 있으며, 이에 따라 PRS 활성 이상에 의하여 야기되는 질환의 예방 또는 치료에 사용할 수 있다. 따라서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 PRS 활성 이상에 의하여 야기되는 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 섬유화증의 예방 또는 치료에 유용하게 적용될 수 있다.
여기서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염이다. 이러한 산부가염은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기(free base) 및 부가하고자 하는 산을 특정 비율로 반응시켜 제조할 수 있다.
또한, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 결정 형태를 나타낼 수 있다. 이러한 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염의 결정형은 염의 열역학적 특성 및 동적 특성에 따라 선택된, 증발 결정화법, 용석 결정화법, 반응 결정화법, 용매 매개 다형전이법, 고체 상태 다형전이법 등의 다양한 결정화 방법에 의해 제조될 수 있다.
이 때, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염의 결정형은 X선 분말 회절(X-ray powder diffraction) 분석을 통해 확인 가능하다. 구체적으로, 상기 결정형은 X선 분말 회절 패턴(X-ray powder diffraction pattern)에서 특징적인 피크를 나타내는 회절각(2θ) 및 각각의 회절각(2θ)에 따른 피크의 강도를 통하여 구분될 수 있다. 여기서, 회절각(2θ)은 측정용 샘플의 제조 기술, 측정용 샘플의 고정 절차, 측정 기기 등의 여러 인자에 의해 ±0.2°, 또는 바람직하게는 ±0.1°로 변동될 수 있다.
또한, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염 및 이의 결정형은 각각 시차 주사 열량 분석에서의 흡열 개시 온도 및 최대 흡열 피크를 나타내는 흡열 온도를 통해서도 구분될 수 있다. 여기서, 온도는 측정용 샘플의 제조 기술, 측정 기기, 온도 변화의 속도 등의 여러 인자에 의해 ±3℃, 바람직하게는 ±2℃, 또는 더욱 바람직하게는 ±1℃로 변동될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염, 옥살산염, 말레인산염 및 팔미트산염
한편, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기(free base, 프리체(free form)) 형태는 안정성이 좋지 않은 것으로 알려져 있다. 이에, 이러한 화합물의 안정성을 개선하기 위해 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염으로 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 이염산염(dihydrochloride)이 연구되어 왔다.
그러나, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염은 흡습성이 높아 의약품으로 제조하는 것이 바람직하지 않았다. 이에, 본 발명자들은 흡습성이 낮으면서도 화합물의 안정성을 향상시킬 수 있는 산부가염에 대하여 예의 연구한 결과, 상기 화합물과 특정 종류의 산이 특정한 당량비로 결합되는 경우 흡습성은 낮추면서 가혹 조건에서의 안정성은 향상시킬 수 있음을 확인할 수 있었다.
구체적으로, 바람직한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염(monohydrochloride)이다.
상기와 같은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염(monohydrochloride)은 이염산염(dihydrochloride)에 비하여 이온화가 될 수 있는 수소이온과 염소이온이 적어 공기 중 존재하는 수분과의 결합을 적게 하기 때문에 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염 대비 낮은 흡습성 및 가혹 조건에서 우수한 안정성을 나타낼 수 있다.
그리고, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염은 시차 주사 열량(Differential scanning calorimeter) 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68 ±3℃이고, 흡열 온도 281.04 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다. 반면, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 이염산염은 시차 주사 열량분석에서 2 개의 흡열 피크(흡열 개시 온도가 233.09℃이고 피크 내 최대 흡열 피크의 흡열 온도가 242.09℃인 제1 피크 및 흡열 개시 온도가 271.95℃이고 흡열 피크의 흡열 온도가 275.07℃인 제2 피크)를 나타내며, 이는 후술하는 시험예 2에서 확인 가능하다. 따라서, 보다 높은 흡열 개시 온도를 나타내는 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염이 이염산염에 비하여 열에 대한 안정성이 높음을 알 수 있다.
또한, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염은 결정형일 수 있다. 상기 일염산염이 결정형인 것이 무정형 또는 결정형과 무정형의 혼합물인 것에 비하여 안정성 향상 및 흡습성 개선 측면에서 유리하다.
또한, 바람직한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 하기와 같다:
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 옥살산염(oxalate);
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 말레인산염(maleate); 및
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 팔미트산염(palmitate).
이 때, 흡습성 개선 측면에서 상기 산부가염은 이옥살산염(dioxalate), 헤미-옥살산염(hemi-oxalate), 헤미-말레인산염(hemi-maleate), 또는 일팔미트산염(monopalmitate)인 것이 보다 바람직하다.
일 구현예에서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 이옥살산염이다. 상기 이옥살산염은 제조 방법에 따라, 이옥살산염 Ⅰ 및 Ⅱ가 생성될 수 있다.
구체적으로, 상기 이옥살산염, 다시 말하여 이옥살산염 Ⅰ은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 210.42 ±3℃이고, 흡열 온도 213.66 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
또한, 상기 이옥살산염, 다시 말하여 이옥살산염 Ⅱ는 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 193.84 ±3℃이고, 흡열 온도 203.92 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
다른 구현예에서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 헤미-옥살산염이다.
상기 헤미-옥살산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 253.72 ±3℃이고, 흡열 온도 255.62 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
또 다른 구현예에서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 헤미-말레인산염이다.
상기 헤미-말레인산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 90.69 ±3℃이고, 흡열 온도 110.16 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
또 다른 구현예에서, 상기 팔미트산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 92.32 ±3℃이고, 흡열 온도 98.59 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
한편, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 하기 단계를 포함하는 제조 방법에 따라 제조될 수 있다:
1) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 이염산염을 염기와 혼합하여 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기를 제조하는 단계; 및
2) 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 및 산을 유기 용매의 존재 하에서 혼합 및 교반하는 단계.
상기 단계 1)은 제조 방법이 알려진 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 이염산염을 염기와 혼합하여, 염산이 제거된 프리체를 제조하는 단계로, 제조된 프리체는 끈적한 액체 상태를 나타낸다.
이 때, 염기로는 수산화나트륨, 수산화리튬 및 수산화칼륨으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 강염기가 사용될 수 있다.
또한, 상기 단계 1)에서의 pH는 약 9 내지 약 12인 것이 염산의 제거에 바람직하다.
또한, 상기 단계 2)는 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 및 산을 유기 용매의 존재 하에서 혼합 및 교반하여, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올과 산이 화학적으로 결합된 염을 제조하는 단계이다.
상기 단계 2)에서, 상기 산은 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 1 당량 대비 최종 생성하고자 하는 결합 비율에 따라 조절하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 유리 염기와 1가의 산이 결합된 1가 산부가염을 제조하고자 하는 경우, 상기 산을 상기 유리 염기 1 당량 대비 0.8 내지 1.2 당량, 바람직하게는 1 당량 사용할 수 있다. 또한, 상기 유리 염기와 2가의 산이 결합된 2가 산부가염을 제조하고자 하는 경우, 상기 산을 상기 유리 염기 1 당량 대비 1.8 내지 2.2 당량, 바람직하게는 2 당량 사용할 수 있다. 또한, 2가의 유리 염기와 1가의 산이 결합된 헤미(hemi)-산부가염을 제조하고자 하는 경우, 상기 산을 상기 유리 염기 1 당량 대비 0.4 내지 0.6 당량, 바람직하게는 0.5 당량 사용할 수 있다.
여기에서, 상기 유기 용매로는 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴, 이소프로판올, 부탄올, 테트라하이드로퓨란, 아세톤, 디메틸포름아마이드 및 메틸설폭사이드로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용할 수 있다. 이러한 유기 용매는 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 중량 대비 5 배 내지 60 배의 부피의 양(mL/g)으로 사용될 수 있다. 바람직하게는, 상기 유기 용매는 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 중량 대비 20 배 내지 50 배의 부피의 양(mL/g)으로 사용될 수 있다.
다음으로, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기, 산 및 유기 용매의 혼합된 용액을 교반하는 단계는 20℃ 내지 30℃의 온도에서 30 분 내지 30 시간 동안 수행될 수 있다. 이 때, 교반 속도는 50 내지 300 rpm의 범위 내일 수 있다. 상기 범위에서 고수율 및 고순도의 염이 생성될 수 있다.
상기 제조 방법에 의해 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 감압 여과 공정에 의해 용액으로부터 회수될 수 있다. 필요에 따라, 회수된 산부가염을 세척 및 진공 건조하여 고순도의 산부가염을 얻을 수 있다. 또한, 상기 제조 방법들에 기재된 용매의 비율, 온도 범위, 공정 시간 등의 반응 조건은 선택되는 용매에 따라 조절될 수 있다.
또는, 염산염을 제외한, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염은 하기 단계를 포함하는 제조 방법에 의해서도 제조될 수 있다:
1) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염을 염기와 혼합하여 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기를 제조하는 단계; 및
2) 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 유리 염기 및 염산 이외의 산을 유기 용매의 존재 하에서 혼합 및 교반하는 단계.
(2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형
한편, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 X선 분말 회절 패턴(X-ray powder diffraction pattern)에서 15.0°, 17.2°, 19.8°, 23.6°및 27.8°의 회절각(2θ±0.2°)에서 피크를 가질 수 있다.
구체적으로, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 X선 분말 회절 패턴(X-ray powder diffraction pattern)에서 15.0°, 17.2°, 19.8°, 20.9°, 23.6°, 25.1°, 27.8°, 28.9°및 31.3°의 회절각(2θ±0.2°)에서 피크를 가질 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 X선 분말 회절 패턴에서 7.5°, 12.5°, 15.0°, 16.5°, 17.2°, 18.9°, 19.8°, 20.9°, 22.3°, 23.6°, 24.8°, 25.1°, 26.1°, 27.8°, 28.9°, 30.1°, 30.9°, 31.3° 및 32.4°의 회절각(2θ±0.2°)에서 피크를 가질 수 있다.
또한, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68 ±3℃이고, 흡열 온도 281.04 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타낼 수 있다.
상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 이염산염의 결정형과는 다른 결정 구조를 나타내며, 이염산염(dihydrochloride)에 비하여 이온화가 될 수 있는 수소이온과 염소이온이 적어 공기 중 존재하는 수분과의 결합을 적게 하기 때문에 상기 이염산염의 결정형 대비 흡열 개시 온도가 높아 비교적 고온까지 안정하여 높은 열적 안정성을 나타낼 수 있다.
이러한 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 증발 결정화 방법 혹은 용석 결정화 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
일 구현예에서, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 하기 단계를 포함하는 증발 결정화 방법에 따라 제조된다:
1) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염을 C1-8 지방족 알코올, 펜탄, 헥산, 헵탄, 사이클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 디클로로메탄, 에틸에테르, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매에 용해 또는 현탁시켜 용액 또는 현탁액을 제조하는 단계; 및
2) 상기 용액 또는 현탁액에서 상기 용매를 증발시켜 상기 일염산염을 결정화하는 단계.
상기 단계 1)은 상기 일염산염을 완전히 용해시킬 수 있는 양용매(good solvent) 또는 현탁 용매를 사용하여 일염산염을 용해시키는 단계로서, 20℃ 내지 30℃에서, 바람직하게는 실온에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 용매는 상기 일염산염 중량 대비 5 내지 200 배의 부피의 양(mL/g)으로 사용될 수 있다.
이 때, 상기 C1-8 지방족 알코올로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, n-부탄올, 또는 n-옥탄올이 사용될 수 있다.
상기 단계 2)는 상기 단계 1)에서 제조된 용액 또는 현탁액으로부터 용매를 증발시킴으로써 용액 또는 현탁액을 과포화 상태로 만들어 일염산염을 결정화하는 단계로서, 20℃ 내지 30℃의 온도에서, 바람직하게는 실온에서 1 일 내지 4 일 동안 수행될 수 있다.
다르게는, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형은 하기 단계를 포함하는 용석 결정화 방법에 따라 제조될 수 있다:
1) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염을 C1-8 지방족 알코올 용매에 용해시켜 용액을 제조하는 단계; 및
2) 상기 용액에 C1-8 지방족 알코올, 펜탄, 헥산, 헵탄, 사이클로헥산, 벤젠, 톨루엔, 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 디클로로메탄, 에틸에테르, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 결정화 용매를 투입 및 교반하여 상기 염산염을 결정화하는 단계.
상기 단계 1)은 상기 일염산염을 완전히 용해시킬 수 있는 양용매를 사용하여 일염산염을 용해시키는 단계로서, 실온에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 용매는 상기 일염산염 중량 대비 5 내지 200 배의 부피의 양(mL/g)으로 사용될 수 있다.
상기 단계 2)는 상기 단계 1)에서 제조된 용액에 비용매(anti-solvent)를 투입하여 용해도를 변화시켜 염산염을 결정화하는 단계로서, 상기 단계는 20℃ 내지 30℃의 온도에서 1 일 내지 4 일 동안 수행될 수 있다.
또한, 상기 결정화 용매는 상기 일염산염 중량 대비 5 내지 200 배의 부피의 양(mL/g), 또는 바람직하게는 5 내지 150 배의 부피의 양(mL/g)으로 사용될 수 있으며, 상기 단계 1)의 용매와 상기 단계 2)의 결정화 용매의 부피비는 1:1 내지 1:2 일 수 있다. 상기 범위에서, 결정 생성 시간의 증가 및 용매의 과량 사용으로 인한 경제적 손실 없이 고수율, 고순도의 결정이 생성될 수 있다.
상기 증발 결정화 방법 또는 용석 결정화 방법에 의해 생성된 결정은 감압 여과 공정에 의해 용액으로부터 회수될 수 있다. 필요에 따라, 회수된 결정을 세척 및 진공 건조하여 순도가 높은 염산염의 결정형을 얻을 수 있다. 또한, 상기 제조 방법들에 기재된 용매의 비율, 온도 범위, 공정 시간 등의 반응 조건은 선택되는 용매에 따라 조절될 수 있다.
한편, 본 발명은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 옥살산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 말레인산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 팔미트산염 및 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는, 약학 조성물을 제공한다.
보다 구체적으로, 본 발명은 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 옥살산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 말레인산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 팔미트산염 및 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 섬유화증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
이러한 약학 조성물은 통상적으로 사용되는 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 담체는 통상적으로 제제 시에 이용되는 것으로서, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸하이드록시 벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 약학 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제등을 추가로 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은 경구 투여하거나, 정맥내, 근육내, 복강내, 피하 및 경피 투여를 포함한 비경구로 투여될 수 있다.
이때, 약학 조성물은 치료학적 유효량, 예를 들어 약 0.001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg per day의 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 용량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 나이, 체중, 성병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 또는 반응 감응성에 따라 변경될 수 있다.
상기 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 연고, 크림등의 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액 등을 비롯하여 약학적 제제에 적합한 형태라면 제한 없이 사용 가능하며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 신규한 산부가염 및 결정형들은, 흡습성이 낮고 고온 및 고습 조건에서의 가혹안정성이 우수하여, 약학적으로 사용하기에 적합하다.
도 1은 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 실시예 1-2에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅰ의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 실시예 1-3에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅱ의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 실시예 1-4에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-옥살산염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 실시예 1-5에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-말레인산염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 실시예 1-6에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 팔미트산염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 온도에 대한 가혹 시험 1 주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 온도에 대한 가혹 시험 8 주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 온도에 대한 가혹 시험 1 주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다
도 11은 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 온도에 대한 가혹 시험 8 주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다
도 12는 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형에 대한 X선 분말 회절 패턴을 나타낸 것이다.
도 13은 비교예 2에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 결정형에 대한 X선 분말 회절 패턴을 나타낸 것이다.
도 14는 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형에 대한 시차 주사 열량 및 열중량 분석 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의하여 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
제조예: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base)의 제조
Figure pat00002
단계 1-1) 화합물 1-3(터트-부틸 (2R,3S)-3-((터트-부틸디메틸실릴)옥시)-2-(3-((3,4-디클로로-2-니트로페닐)아미노)프로필)피페리딘-1-카르복실레이트)의 제조
화합물 1-1인 터트-부틸 (2R,3S)-2-(3-아미노프로필)-3-((터트-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트(1.0 g, 2.7 mmol)를 N,N-디메틸포름아마이드(25 mL, 0.67 M)에 넣어 녹인 후, 화합물 1-2인 1,2-디클로로-4-플루오로-3-나이트로벤젠(629.97 mg, 3.0 mmol), N,N-디아이소프로필에틸아민(0.93 mL, 5.4 mmol)을 넣고 60℃로 2시간 동안 가열 교반하였다. 반응이 완결되면 에틸아세테이트로 희석하여 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 모아 황산나트륨으로 건조 및 여과하고, 감압 농축한 후, 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=5:1)로 정제하여, 화합물 1-3(1.2 g, 수율 81%)을 얻었다.
1H NMR (500 MHz, MeOD): δ 7.43 (d, 1H), 6.89 (d, 1H), 4.08 (s, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.24 (m, 2H), 2.76 (s, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.74 (m, 2H), 1.58 (m, 3H), 1.48 (s, 10H), 1.45 (s, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.07 (d, 6H)
단계 1-2) 화합물 1-4(터트-부틸 (2R,3S)-2-(3-((2-아미노-3,4-디클로로페닐)아미노)프로필)-3-((터트-부틸디메틸실릴)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트)의 제조
상기 단계 1-1에서 얻은 화합물 1-3(2.6 mg, 4.9 mmol)을 메탄올(25 mL, 0.2 M)에 녹인 후 레이니 니켈을 적당량 가하고 수소 풍선을 연결한 후에 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면 반응액을 셀라이트로 여과하고 감압 농축하여, 화합물 1-4를 얻었다. 얻은 화합물을 정제하지 않고 다음 단계에 사용하였다.
단계 1-3) 화합물 1-5(터트-부틸 (2R,3S)-3-((터트-부틸디메틸실릴)옥시)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-1-카르복실레이트)의 제조
상기 단계 1-2에서 얻은 화합물 1-4를 톨루엔(30 mL, 0.16 M)에 넣어 녹인 후, 트리메틸오쏘포르메이트(1.6 mL, 14.6 mmol), 파라톨루엔설포닉에시드(168 mg, 0.98 mmol)를 넣어주고 50℃로 6 시간 동안 가열 교반하였다. 반응이 완결되면 용매를 제거하고, 에틸아세테이트로 희석하여 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 모아 황산마그네슘으로 건조 및 여과하고, 감압 농축한 후, 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=1:1)로 정제하여, 화합물 1-5(1.8 g, 수율 74%)를 얻었다.
1H NMR (500 MHz, MeOD): δ 8.30 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.43 (d, 1H), 4.30 (m, 2H), 4.17 (s, 1H), 4.05 (s, 1H), 3.91 (d, 1H), 3.73 (s, 1H), 2.68 (s, 1H), 1.87 (s, 3H), 1.70 (t, 2H), 1.55 (d, 1H), 1.45 (m, 10H), 1.42 (s, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.07 (d, 6H)
단계 1-4) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 제조
상기 단계 1-3에서 얻은 화합물 1-5(1.8 g, 3.6 mmol)을 소량의 테트라하이드로퓨란에 녹인 후, 4N 염화수소 다이옥산 용액(30 mL, 0.12 M)을 넣고 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면, 반응액을 감압 농축하여 용매를 제거하고 소량의 메탄올을 넣어 녹인 후 디에틸에테르로 결정화하여, 화합물 1-6인, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 2HCl(26 mg, 수율 81%)을 얻었다.
1H NMR (500 MHz, MeOD): δ 9.67 (s, 1H). 8.02 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 4.62 (m, 2H), 3.60 (m, 1H), 3.28 (m, 1H), 2.99 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 1.99 (m, 1H), 1.78 (m, 2H), 1.54 (m, 1H)
단계 1-5) (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base)의 제조
상기 단계 1-4에서 얻은 화합물 1-6 200 mg을 비이커에 넣고, 물 2 mL에 녹였다. 여기에, 1N NaOH 1 mL를 넣어 잘 저어준 후 분별 깔대기에 넣었으며, 이 때 pH는 약 9.5였다. 이를 메틸렌 클로라이드(Methylene Chloride; MC)로 추출하고 회전 증발법으로 농축하였고, 이 후 진공 조건 하에서 잔류 용매를 제거하여 끈적한 액체 상태의 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(150 mg, 수율 92%)을 얻었다.
분자량 328.24
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.39 (s, 1H). 7.65 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 4.47 (d, 1H), 4.25 (t, 2H), 2.85 (m, 1H), 2.76 (d, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.82 (m, 1H), 1.73 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.27 (m, 1H), 1.12 (m, 2H)
이하, 실시예에서는 상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base)을 사용하였다.
실시예 1-1: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 제조
Figure pat00003
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 100 mg에 에탄올 4 mL를 넣고 35% HCl 용액 32 mg (1 eq.)을 넣어 실온에서 10 분간 교반하였다. 생성된 흰색 고체를 여과하고 에틸 아세테이트로 세척하여 표제 화합물(103 mg, 수율: 93%)을 얻었다.
분자량 364.70
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.45 (s, 1H). 7.71 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 5.40 (d, 1H), 4.32 (m, 2H), 3.41 (m, 1H), 3.08 (d, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.97 (m, 1H), 1.85 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.65 (m, 1H), 1.52 (m, 1H(, 1.35 (m, 1H)
실시예 1-2: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅰ의 제조
Figure pat00004
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 100 mg에 메탄올 5 mL를 넣고 옥살산 2수화물(oxalic acid dehydrate) 76.9 mg (2 eq.)을 넣어 실온에서 하루 동안 교반하였다. 고체가 생성될 때까지 하루동안 실온에 방치한 후 생성된 고체를 세척하여 표제 화합물(108 mg, 수율 70%)을 얻었다.
분자량 508.31
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.40 (s, 1H). 7.69 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 4.31 (m, 2H), 3.45 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.01 (m, 1H), 1.90 (m, 3H), 1.78 (m, 1H), 1.58 (m, 1H), 1.45 (m, 1H), 1.35 (m, 1H)
실시예 1-3: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅱ의 제조
Figure pat00005
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 100 mg에 Acetonitrile 5 mL를 넣고 옥살산 2수화물 76.9 mg (2 eq.)을 넣어 실온에서 하루 동안 교반하였다. 고체가 생성될 때까지 하루동안 실온에 방치한 후 생성된 고체를 세척하여 표제 화합물(140 mg, 수율 90%)을 얻었다.
분자량 508.31
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.40 (s, 1H). 7.69 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 4.32 (m, 2H), 3.36 (m, 1H), 3.11 (d, 1H), 2.77 (m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.89 (m, 3H), 1.77 (m, 1H), 1.58 (m, 1H), 1.47 (m, 1H), 1.35 (m, 1H)
실시예 1-4: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-옥살산염의 제조
Figure pat00006
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 102.2 mg을 둥근 바닥 플라스크에 넣고 메탄올 5 mL에 완전히 녹여 주었다. 상기 free base가 녹아 있는 플라스크에 옥살산 2수화물을 19.6 mg (0.5 eq.)을 넣고 2 시간 동안 교반 하였다. 실온에서 open 건조하여 고체인 표제 화합물(84 mg, 수율 74%)을 얻었다.
분자량 373.26
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.40 (s, 1H). 7.69 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 3.03 (d, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.02 (m, 1H), 1.88 (m, 2H), 1.80 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.50 (m, 1H), 1.38 (m, 1H), 1.29 (m, 1H)
실시예 1-5: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-말레인산염의 제조
Figure pat00007
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 100 mg을 바이알에 넣고 메탄올 2.5 mL에 완전히 녹여 주었다. 상기 free base가 녹아 있는 바이알에 말레인산 20.4 mg (0.5 eq.)을 넣고 2 시간 동안 교반 하였다. 이 후, 메탄올을 날린 후, 아세토니트릴을 넣어 4 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 open 건조하여 고체인 표제 화합물(88 mg, 수율 74.5%)을 얻었다.
분자량 386.28
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.40 (s, 1H). 7.68 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.98 (d, 1H), 2.62 (m, 2H), 1.98 (m, 1H), 1.80 (m, 3H), 1.69 (m, 1H), 1.45 (m, 1H), 1.29 (m, 2H)
실시예 1-6: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 팔미트산염의 제조
Figure pat00008
상기 제조예에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올(free base) 100 mg을 바이알에 넣고 에탄올 4.8 mL에 완전히 녹여 주었다. 상기 free base가 녹아 있는 바이알에 팔미트산 78.7 mg (1 eq.)을 넣고 2 시간 동안 교반 하였다. 이 후, 에탄올을 날린 후, 에틸 아세테이트를 넣어 4 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 open 건조하여 고체인 표제 화합물(154 mg, 수율 86.5%)을 얻었다.
분자량 584.67
1H-NMR (500 MHz, DMSO): δ 8.39 (s, 1H). 7.66 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 4.26 (m, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.79 (d, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.15 (m, 3H), 1.98 (m, 1H), 1.78 (m, 3H), 1.52 (m, 1H), 1.46 (m, 2H), 1.28 (m, 1H), 1.23 (m, 24H), 1.13 (m, 2H), 0.85 (m, 3H)
비교예 1: (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 제조
Figure pat00009
상기 제조예와 동일하게 단계 1-1 내지 1-4를 수행하여, 표제의 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 2HCl(26 mg, 수율 81%)을 얻었다.
분자량 401.15
1H NMR (500 MHz, MeOD): δ 9.67 (s, 1H). 8.02 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 4.62 (m, 2H), 3.60 (m, 1H), 3.28 (m, 1H), 2.99 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 1.99 (m, 1H), 1.78 (m, 2H), 1.54 (m, 1H)
시험예 1: PRS 효소 활성 억제 실험
상기 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 PRS 효소 활성 억제에 대한 IC50 값을 다음과 같이 측정하였다.
구체적으로, EPRS의 cDNA 중에서 PRS에 상응하는 부분을 서브클로닝하여 수득한 고순도의 PRS 단백질을 정제하여 실험에 사용하였다. 반응 완충액(20 mM KPO4(pH 7.4), 6 mM MgAc, 5 mM ATP, 400 mg/mL tRNA, 0.5 mM DTT, 20 mCi[3H]프롤린(1 mCi/mL))에 상기 실시예에서 제조한 화합물(1 μM)을 넣고 37℃에서 5분 내지 10분 동안 반응시켰다. 반응은 5% TCA를 첨가하여 미리 말려둔 3M 페이퍼에서 종결시켰다. 방사성(radioactivity)은 액체섬광계수기(liquid scintillation counter)를 이용하여 측정하였다. 화합물에 대한 % 저해 및 IC50 값의 산출 및 결과 분석은 마이크로소프트 엑셀 또는 시그마플롯 8.0을 이용하여 수행하였으며, 그 결과 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염은 74 nM의 값을 나타내었다.
이로써, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염은 PRS 효소 활성을 억제하여, PRS 활성 이상에 의하여 야기되는 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 사용 가능함을 알 수 있다.
시험예 2: 산부가염의 시차 주사 열량 및 열중량 분석
상기 실시예 1-1 내지 1-6 및 비교예 1에서 제조한 산부가염에 대하여 시차 주사 열량 및 열중량 분석을 실시하였고, 그 결과를 같이 각각 도 1 내지 7에 나타내었다. 이때, 시차 주사 열량 분석은 시차 주사 열량계(DSC3, Mettler-Toledo사 제조)를 이용하여 밀폐된 팬 내에서 질소 가스 하에서 10℃/min의 스캔 속도로 20℃에서 350℃로 승온하면서 수행되었다. 또한, 열중량 분석(thermogravimetric analysis; TGA)은 열중량분석기(Q50, TA Instrument U.S.A 사 제조) 를 이용하여 질소 가스 하에서 10℃/min의 스캔 속도로 20℃에서 350℃로 승온하면서 수행되었다.
도 1을 참조하면, 상기 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68℃이고, 흡열 온도 281.04℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한, 열중량 분석에서 잔류 용매 및 수분은 확인되지 않았다.
도 2를 참조하면, 상기 실시예 1-2에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅰ은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 210.42℃이고, 흡열 온도 213.66℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다.
도 3을 참조하면, 상기 실시예 1-3에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이옥살산염 Ⅱ는 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 193.84℃이고, 흡열 온도 203.92℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 다만, 상기 도 3의 64℃에서 나타난 피크에 대해 핫스테이지 현미경(Hot stage Microscopy; HSM, BA310Pol, Motic 사 제조)으로 확인한 결과 수분이 아닌 잔류 용매에 의한 피크로 판단된다.
도 4를 참조하면, 상기 실시예 1-4에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-옥살산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 253.72℃이고, 흡열 온도 255.62℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한, 열중량 분석 결과 온도 증가에 따라 용융 되면서 분해됨을 알 수 있다.
도 5를 참조하면, 상기 실시예 1-5에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 헤미-말레인산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 90.69℃이고, 흡열 온도 110.16℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한, 열중량 분석 결과 온도 증가에 따라 용융 되면서 분해됨을 알 수 있다.
도 6을 참조하면, 상기 실시예 1-6에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 팔미트산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 92.32℃이고, 흡열 온도 98.59℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한, 열중량 분석 결과 온도 증가에 따라 용융 되면서 분해됨을 알 수 있다.
도 7을 참조하면, 상기 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염은 2 개의 흡열 피크(흡열 개시 온도가 233.09℃이고 피크 내 최대 흡열 피크의 흡열 온도가 242.09℃인 제1 피크 및 흡열 개시 온도가 271.95℃이고 흡열 피크의 흡열 온도가 275.07℃인 제2 피크)를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한, 열중량 분석에서 잔류 용매 및 수분은 확인되지 않았다.
시험예 3: 흡습성 시험
상기 실시예 1-1 내지 1-6 및 비교예 1에서 제조한 산부가염에 대하여 흡습성 시험을 실시하였다.
각각의 산부가염 시료 40 mg을 10 mL 비이커에 넣고, 이를 하기 표 1과 같이 상온에서 일정한 상대 습도의 조건 하에 여러 염의 포화 수용액이 들어 있는 각각의 유리 데시케이터에 넣고 밀폐 보관하였다. 하루가 지난 후 무게 변화를 측정한 다음 다른 데시게이터로 옮겨 앞의 실험을 반복하였다. 이 때, 수착(sorption) 분석을 위해 시료를 습도가 낮은 데시게이터에서 높은 데시 게이터로 옮겨가며 무게 변화를 측정하였고, 탈착(desorption) 분석을 위해 시료를 습도가 높은 데시게이터에서 낮은 데시게이터로 옮겨가며 무게변화를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
데시케이터 상대습도 염 포화수용액 종류
1 11% RH LiCl2 포화수용액
2 33% RH MgCl2 포화수용액
3 54% RH Mg(NO3)2 ㆍ6H2O 포화수용액
4 75% RH NaCl 포화수용액
5 93% RH KNO3 포화수용액
실시예
1-1		 실시예
1-2		 실시예
1-3		 실시예
1-4		 실시예
1-5		 실시예
1-6		 비교예
1
산부가염
종류		 일염산염 이-
옥살산염 Ⅰ		 이-
옥살산염 Ⅱ		 헤미-
옥살산염		 헤미-
말레인산염		 일-
팔미트산염		 이염산염
수착 11% RH 100 100 100 100 100 100 100
33% RH 100 101.1 100 101.0 100 100 100.9
54% RH 101 101.8 100 101.6 100.7 100.7 108
75% RH 101.6 102.9 101.3 101.9 100.9 100.7 105.4
93% RH 101.6 105.6 101.3 105.4 101.6 102.3 128
탈착 75% RH 101.7 102.9 100.8 103.2 100.5 100.7 105.4
54% RH 100.8 102 100.2 101.9 99.8 100 104.7
33% RH 101.2 101.6 100 101.0 99.8 100 103.9
11% RH 100.8 100 100 101.0 99.5 100 102.9
상기 표 2를 참조하면, 실시예의 산부가염들은 상대 습도의 증가에도 수분에 의한 무게 변화가 거의 없을 뿐 아니라, 비교예 1의 이염산염 대비 93% RH에서 현저히 낮은 흡습성을 나타냄을 알 수 있다.
시험예 4: 안정성 확인 시험
상기 일부 실시예 및 비교예에서 제조한 산부가염에 대하여 고온 및 고습에 대한 안정성 테스트를 실시하였다.
구체적으로, 온도에 대한 가혹 시험은 50 mg의 시료를 바이알에 넣고 뚜껑을 닫은 후 60 ℃ 및 상대습도 10% 미만의 챔버에 보관하면서, 1 주, 2 주, 4 주, 8 주 후에 HPLC(Azura, KNAUER, P6.1 1L, DAD 6.1L)를 이용하여 불순물의 함량을 측정함으로써 진행되었다.
그리고, 수분에 대한 가혹 시험은 50 mg의 시료를 10 mL 비이커에 넣고, 시료가 공기 중 수분과 충분히 접촉할 수 있도록 뚜껑을 닫지 않은 상태로 93 % RH 데시게이터에 보관하면서, 1 주, 2 주, 4 주, 8 주 후에 HPLC(Azura, KNAUER, P6.1 1L, DAD 6.1L)를 이용하여 불순물의 함량을 측정함으로써 진행되었다.
(1) HPLC를 사용한 주성분에 대한 피크 면적 계산
시험 개시 후 정해진 시점에, 각각의 시점 당 1 개의 바이알 또는 비이커를 꺼내어 (시험당 검체수 n=1), 하기 표 3과 같은 조건으로 HPLC를 사용하여 불순물을 분석하였다. 이후, 검출된 모든 피크에 대하여 적분을 통해 피크 면적을 구한 후, 주성분에 대한 상대 피크 면적(%)을 계산하여 평균값으로 나타내었고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
column Agilent Zorbax RX-C8 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm)
Mobile phase A A= pH 5 acetate ammonium salt (물 1 L에 sodium acetate trihydrate 1.36 g을 넣은 후 HCl을 이용하여 pH를 5±0.05로 맞춘다)
Mobile phase B Methanol
UV 260 nm
column temp. 25℃
Flow rate 1.0 mL/min.
Injection volume 10 ㎕
Gradient
Figure pat00010
실시예
1-1		 실시예
1-2		 실시예
1-3		 실시예
1-5		 비교예
1*
산부가염
종류		 일염산염 이옥살산염 Ⅰ 이옥살산염 Ⅱ 헤미-
말레인산염		 이염산염
60℃ 초기 99.9 99.8 99.8 99.8 99.6
1주 후 99.9 99.9 99.9 - 99.7
2주 후 99.8 99.8 99.8 99.8 99.7
4주 후 99.9 99.7 99.8 99.7 99.8
8주 후 99.8 99.8 99.9 99.9 99.7
93% RH 초기 99.9 99.8 99.8 99.8 99.6
1주 후 99.8 99.3 99.7 - 99.7
2주 후 99.9 99.7 99.8 99.8 99.7
4주 후 99.8 99.8 99.9 99.8 99.7
8주 후 99.9 99.8 99.9 99.9 99.7
(*단, 이염산염은 93% RH 조건에서 1주일 안에 조해됨)
상기 표 3 및 4에 나타난 바와 같이, 실시예에서 제조된 산부가염들은 고온 조건 및 고습도 노출 조건 하에서 의미 있는 주성분의 피크면적 감소를 나타내지 않음을 알 수 있다. 따라서, 실시예에서 제조된 결정형들은 가혹 조건 하에서 온도 및 습도의 영향과는 무관하게 불순물의 증가를 억제하여, 우수한 화학적 안정성을 나타냄을 확인할 수 있다.
(2) 시차 주사 열량 분석
실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염 및 비교예 1에서 제조된 2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염에 대하여, 온도에 대한 가혹 시험이 진행 중인 데시게이터에서, 시험 개시 후 1 주 및 8 주 후에 각 비이커를 꺼내어 시차 주사 열량 분석을 실시하였고, 그 결과를 각각 도 8 내지 도 11에 나타내었다. 이때, 시차 주사 열량 분석은 시차 주사 열량계(DSC Q20, TA Instruments사 제조)를 이용하여 밀폐된 팬 내에서 질소 정화 하에서 10℃/min의 스캔 속도로 20℃에서 300℃로 승온하면서 수행되었다.
구체적으로, 도 8 및 9는 각각 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 온도에 대한 가혹 시험 1주 및 8주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다.
또한, 도 10 및 11은 각각 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 온도에 대한 가혹 시험 1주 및 8주 이후의 시차 주사 열량 분석 결과를 나타낸 것이다.
상기 도 8 내지 11을 참조하면, 비교예 1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염은 고온 조건에서 시간의 경과에 따라 앞 부분의 제1 피크가 작아지면서 시차 주사 열량 패턴이 변화된 반면, 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염은 고온 조건에서 8주가 경과한 이후에도 시차 주사 열량 패턴의 변화가 나타나지 않음을 알 수 있다. 이를 통하여, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 화학적 안정성이 우수함이 확인된다.
실시예 2-1: 아세토니트릴 용매를 이용한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형의 제조
상기 실시예 1-1에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염 10 mg을 1 mL의 아세토니트릴 용매에 현탁시킨 후 이를 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 제조된 현탁액을 실온에서 하루 이상 방치하여 용매를 증발시켰다. 결정 생성 후, 감압 여과를 통해 결정을 분리하여 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형 Ⅰ 8 mg을 얻었다.
실시예 2-2 내지 2-9
상기 실시예 2-1에서 아세토니트릴 용매 대신 하기 표 5에 기재된 용매를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 2-1과 동일한 방법으로 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정을 얻었고, 이에 대하여 제조된 결정의 시차 주사 열량 분석 결과 상기 실시예 2-1과 동일한 결정 형태(결정형 Ⅰ)을 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 2-10
상기 실시예 1-1에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염 10 mg을 1 mL의 메탄올 용매에 용해시킨 후 이를 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 제조된 용액을 실온에서 하루 이상 방치하여 용매를 증발시켰다. 결정 생성 후, 감압 여과를 통해 결정을 얻었고, 이에 대하여 제조된 결정의 시차 주사 열량 분석 결과 상기 실시예 2-1과 동일한 결정 형태(결정형 Ⅰ)을 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 2-11
상기 실시예 1-1에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염 10 mg을 0.8 mL의 메탄올 용 매에 용해시켜 용액을 제조하였다. 이후, 제조된 용액에 비용매(anti-solvent)로 1 mL의 아세토니트릴 용매를 투입하고 실온에서 하루 이상 방치하였다. 결정 생성 후, 감압 여과를 통해 결정을 얻었고, 이에 대하여 제조된 결정의 시차 주사 열량 분석 결과 상기 실시예 2-1과 동일한 결정 형태(결정형 Ⅰ)을 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 2-12 내지 2-19
상기 실시예 2-11에서 비용매로 아세토니트릴 대신 하기 표 5에 기재된 용매를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 2-11과 동일한 방법으로 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정을 얻었고, 이에 대하여 제조된 결정의 시차 주사 열량 분석 결과 상기 실시예 2-1과 동일한 결정 형태(결정형 Ⅰ)을 나타냄을 알 수 있었다.
용매 결정형
종류		 용매
/비용매		 결정형
종류
실시예
2-1		 아세토니트릴 결정형 Ⅰ 실시예
2-11		 메탄올
/아세토니트릴		 결정형 Ⅰ
실시예
2-2		 아세톤 결정형 Ⅰ 실시예
2-12		 메탄올
/아세톤		 결정형 Ⅰ
실시예
2-3		 에틸 아세테이트 결정형 Ⅰ 실시예
2-13		 메탄올
/에틸 아세테이트		 결정형 Ⅰ
실시예
2-4		 테트라하이드로퓨란 결정형 Ⅰ 실시예
2-14		 메탄올
/테트라하이드로퓨란		 결정형 Ⅰ
실시예
2-5		 이소프로필알코올 결정형 Ⅰ 실시예
2-15		 메탄올
/이소프로필알코올		 결정형 Ⅰ
실시예
2-6		 디클로로메탄 결정형 Ⅰ 실시예
2-16		 메탄올
/디클로로메탄		 결정형 Ⅰ
실시예
2-7		 에틸 에테르 결정형 Ⅰ 실시예
2-17		 메탄올
/에틸 에테르		 결정형 Ⅰ
실시예
2-8		 톨루엔 결정형 Ⅰ 실시예
2-18		 메탄올
/톨루엔		 결정형 Ⅰ
실시예
2-9		 헥산 결정형 Ⅰ 실시예
2-19		 메탄올
/헥산		 결정형 Ⅰ
실시예
2-10		 메탄올 결정형 Ⅰ
상기 표 5를 참조하면, 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염은 결정화 방법 및 사용되는 용매를 달리하여도 하나의 결정형만이 생성됨을 확인할 수 있다. 특히, 실시예 2-12의 메탄올/아세톤 용매 조건 하에서 제조된 상기 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염은 단결정(single crystal)임을 확인할 수 있었다.
비교예 2: 아세토니트릴 용매를 이용한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 결정형의 제조
상기 비교예 1에서 제조한 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염이 결정형이므로, 이를 비교예 2로 사용하였다.
시험예 5: X선 분말 회절(X-ray powder diffraction) 분석
상기 실시예 2-1 및 비교예 2에서 제조한 결정형에 대하여 X선 분말 회절 분석을 실시하였고, 그 결과를 각각 도 1 및 도 2에 나타내었다. 이때, X선 분말 회절 분석은 X선 분말 회절분광기(D8 Advance, Bruker 사 제조)를 이용하여 45 kV의 전압, 40 mA의 전류량, 1 ˚의 발산 및 산란 슬릿, 0.2 mm의 수광 슬릿 및 주사속도 3˚/분(0.4 초/0.02˚ 간격)의 조건하에서 CuKα 타겟을 사용하여 5° 내지 35°의 회절각(2θ)의 범위에서 수행되었다.
도 12를 참조하면, 상기 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형은 X선 분말 회절 패턴에서 7.5°, 12.5°, 15.0°, 16.5°, 17.2°, 18.9°, 19.8°, 20.9°, 22.3°, 23.6°, 24.8°, 25.1°, 26.1°, 27.8°, 28.9°, 30.1°, 30.9°, 31.3° 및 32.4°의 회절각(2θ)에서 피크를 가짐을 확인할 수 있다.
도 13을 참조하면, 상기 비교예 2에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 결정형은 X선 분말 회절 패턴에서 9.6°, 10.9°, 12.2°, 13.9°, 15.8°, 16.9°, 17.9°, 19.2°, 20.2°, 20.8°, 22.2°, 23.6°, 24.5°, 24.8°, 25.2°, 25.6°, 27.6°, 27.9°, 28.6°, 29.2°, 30.2° 및 31.5°의 회절각(2θ)에서 피크를 가짐을 확인할 수 있다.
또한, 도 12 및 13을 참조하면, 상기 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형과 상기 비교예 2에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 이염산염의 결정형은 서로 상이한 결정형임을 알 수 있다.
시험예 6: 결정형의 시차 주사 열량 분석
상기 실시예 2-1에서 제조한 결정형에 대하여 시차 주사 열량 분석을 실시하였고, 그 결과를 도 14에 나타내었다. 이때, 시차 주사 열량 분석은 시차 주사 열량계(DSC Q20, TA Instrument사 제조)를 이용하여 밀폐된 팬 내에서 질소 정화 하에서 10℃/min의 스캔 속도로 20℃에서 300℃로 승온하면서 수행되었다.
도 14를 참조하면, 상기 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68 ±3℃이고, 흡열 온도 281.04 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타냄을 확인할 수 있다. 따라서, 상기 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형은 이염산염의 결정형에 비하여 흡열 개시 온도가 높을 뿐 아니라 최대 흡열 피크를 갖는 흡열 온도 또한 높아, 이염산염의 결정형 대비 열적 안정성이 개선될 수 있다.
그리고, 상기 실시예 2-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 결정형의 시차 주사 열량 분석 결과는 상기 실시예 1-1에서 제조된 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올 일염산염의 시차 주사 열량 분석 결과와 동일하였다. 따라서, 상기 실시예 1-1에서 제조된 일염산염 또한 결정형이며, 그 결정 형태가 상기 실시예 2-1에서 제조된 일염산염의 결정 형태(결정형 Ⅰ)와 동일함을 알 수 있다.

Claims (15)

  1. (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염.
  2. 제1항에 있어서,
    시차 주사 열량(Differential scanning calorimeter) 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68 ±3℃이고, 흡열 온도 281.04 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염.
  3. (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염으로서,
    상기 산부가염은 옥살산염, 말레인산염, 또는 팔미트산염인,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 산부가염은 이옥살산염인,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 이옥살산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 210.42 ±3℃이고, 흡열 온도 213.66 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 이옥살산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 193.84 ±3℃이고, 흡열 온도 203.92 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  7. 제3항에 있어서,
    상기 산부가염은 헤미-옥살산염인,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 헤미-옥살산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 253.72 ±3℃이고, 흡열 온도 255.62 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  9. 제3항에 있어서,
    상기 산부가염은 헤미-말레인산염인,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 헤미-말레인산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 90.69 ±3℃이고, 흡열 온도 110.16 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  11. 제3항에 있어서,
    상기 산부가염은 팔미트산염인,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 팔미트산염은 시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 92.32 ±3℃이고, 흡열 온도 98.59 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 산부가염.
  13. X선 분말 회절 패턴(X-ray powder diffraction pattern)에서 15.0°, 17.2°, 19.8°, 23.6°및 27.8°의 회절각(2θ±0.2°)에서 피크를 갖는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형.
  14. 제13항에 있어서,
    시차 주사 열량 분석에서 흡열 개시 온도가 279.68 ±3℃이고, 흡열 온도 281.04 ±3℃에서 최대 흡열 피크를 나타내는,
    (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형.
  15. (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 옥살산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 말레인산염, (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 팔미트산염 및 (2R, 3S)-2-(3-(4,5-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)프로필)피페리딘-3-올의 일염산염의 결정형으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 섬유화증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
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Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5190365B2 (ja) * 2006-08-23 2013-04-24 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 フェノキシピリジン誘導体の塩またはその結晶およびそれらの製造方法
PT2320905T (pt) * 2008-08-11 2017-09-19 Glaxosmithkline Llc Novos derivados de adenina
KR102277538B1 (ko) * 2015-06-08 2021-07-14 주식회사 대웅제약 신규한 헤테로 고리 화합물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 약학적 조성물
AR110963A1 (es) * 2017-02-07 2019-05-22 Dae Woong Pharma Compuestos heterocíclicos, su método de preparación y composición farmacéutica que los comprende
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