KR20230089440A - 유산균 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경 질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
유산균 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경 질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 수경재배 인삼 추출물을 발효시켜 항산화력을 보다 증진시키고 이에 따른 신경세포의 산화적 손상에 대한 보호 효과를 확인하여, 이를 신경 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 식품 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 락토코쿠스 락티스 균주를 이용하여 수경재배 인삼 추출물을 발효시키는 경우 항산화 효과가 증가되는 효과가 있는 발명이다. 본 발명은 수경재배 인삼의 부가가치를 창출하고 그 효용을 높일 수 있는 바, 신경 질환에 유용한 주원료로서의 용도를 갖는다.
Description
본 발명은 수경재배 인삼 추출물을 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis)에 의하여 발효시켜 항산화력뿐만 아니라 신경보호에 대한 탁월한 효과가 있는 식품 또는 약제학적 주원료로 활용 가능한 조성물에 관한 것이다.
현대인들은 더욱 복잡한 사회와의 관계 속에서 식생활의 변화, 부족한 운동량, 과중한 정신적 스트레스 등으로 인하여 인체 과산화물(peroxides) 등과 같은 노폐물이 인체 내 누적되게 되고 축적된 과산화물은 신경의 산화적 손상 및 염증을 촉진하고 더 나아가 치매 등을 유발할 수가 있다.
구체적으로 산화물은 인체 내에 존재하는 지질 중 특히 불포화 지방산에서 쉽게 발생하며 여러 가지 요인에 의하여 촉진된다. 그 요인으로는 식품인 경우 산소, 가열, 자외선, 기계적 충격, 금속이온의 존재 등으로 자동적으로 유래되기도 하나 인체 내에서는 리포옥시게네이즈(lipooxygenase)와 같은 지질산화효소에 의하여 생성되기도 한다. 이 물질들은 매우 불안정하고 반응성이 강하여 세포 내 DNA를 공격하여 손상시키며, 지질이 주성분인 세포막에 공격하여 연쇄적인 지방산화를 일으켜 신경세포의 손상을 초래한다.
특히 최근에 항산화에 관한 연구는 천연물 소재로서의 폴리페놀류(polyphenols)는 자유 라디칼을 페놀 고리 (phenol ring) 분자 자체에 흡수시킴으로써 공명화(resonance) 구조로서 안정화됨과 동시에 자유 라디칼 형성에 의한 여러 가지 연쇄적인 산화를 억제하는 것으로 알려져 있다. 폴리페놀류는 식물체 종류에 따라 매우 다양하게 존재하며 그 대표적인 예로서 coumaric acid, ginsenoside, 플라보노이드(flavonoid)를 들 수 있다.
그 예로서 녹차 및 송이버섯 추출물의 항염, 항산화용 조성물이 출원된 바 있고(대한민국특허 제10-2011-0045662호), 김 등은 섬쑥부쟁이 분획물의 항산화 및 항염증 활성을 연구한 바 있다(김한혁, 박근혜, 박강수, 이진영, 안봉전. (2010) Kor. J. Microbial Biotechnol. 38, 434-442).
한편, 인삼은 예로부터 뿌리를 약재로 사용한 대표적인 한국의 한약재이나 환경적인 제약이 있으며 기후에 따라 수확량의 차이 등이 있을 뿐만 아니라 재배 기간이 매우 길며, 재배 시 곤충 및 질병 방지를 위한 여러 가지 농약의 사용으로 잔류농약 등이 문제 시 되고 있다. 이에 대하여 수경재배는 안정된 품질과 수확량 및 잔류농약의 문제점을 해소할 수 있어 최근 주목을 받고 있다.
다만, 천연물에서의 생리활성 물질이 실제 유효 농도에 못 미치어 산업적으로 추출, 농축, 또는 발효를 통한 생물 전환 등 여러 가지 가공법이 필요하다. 천연물에 존재하는 유효성분은 대부분 배당체(glycosides)로 존재하거나 다른 성분과 결합하여 있다.
산화적 손상에 대한 신경보호 효과는 항산화력이 우수하여야 하며 자연의 식물체에서는 항산화력이 있는 성분이 존재하더라도 그 조성이 적고 따라서 목적의 항산화 방지를 위하여 다량의 원료가 필요하며 제품의 원가적인 측면에서 제품의 가격이 고가로서 산업적 가치가 떨어진다. 따라서 소량의 원료로써도 높은 항산화력을 증대시키기 위한 방안이 절실히 요구되는 실정이다.
발효법을 이용하는 경우, 미생물이 생산하는 효소를 이용하여 효율적으로 배당체로부터 유효성분만을 분리 추출할 수 있고 더 나아가 생물 전환까지 진행하면 더욱 높은 생리 기능성을 기대할 수 있다. 예로서 아스퍼질러스(Aspergillus)를 이용한 발효를 통하여 기능성을 더욱 부각한 특허가 출원된 바 있다(대한민국 공개특허공보 제10-2014-0040611호, 대한민국 공개특허공보 제 10-2014-0014025호).
그러나 수경재배 인삼을 발효시켜 신경보호 효과를 확인한 발명에 대해서는 개시된 바 없다.
이에 본 발명자들은 수경 재배 인삼을 락토코쿠스 락티스로 발효시켜 총 폴리페놀 함량을 측정하고, DPPH radical scavenging assay, ABTS radical scavenging assay, reducing power assay 및 β-carotene assay로 항산화력이 우수함을 확인하고, 인간 유래 신경세포에 처리하여 세포 보호 효과를 측정함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 수경재배 인삼 추출물을 락토코쿠스 락티스로 발효시켜 제조한 발효물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 사멸 억제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 사멸 억제용 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 명세서에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안 된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속 하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 수경재배 인삼 추출물을 락토코쿠스 락티스로 발효시켜 제조한 발효물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 사멸 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 락토코쿠스 락티스는 수탁번호 Lactococcus lactis KCCM 11159P로 기탁된 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물의 추출용매는 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물의 총 폴리페놀 함량은 20 내지 40 mg GAE/100g일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 발효물은 0.5 내지 2%(w/v) peptone을 첨가하고 pH를 6 내지 7까지 적정한 뒤 110 내지 130℃, 1.2 내지 1.8 기압에서 10 내지 20분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하고, 완성된 배지에 12시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.0 내지 7.0 Log CFU/mL 접종하여 28 내지 32℃에서 발효한 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 발효 시간은 12시간 내지 24시간 일 수 있다.
본 발명은 상기 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 신경 질환은 기억력 상실, 기억력 손상, 치매, 건망증, 파킨슨병, 알츠하이머병, 피크(Pick)병 및 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeld-Jakob)병일 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 유래된 조성물인 발효 수경재배 인삼은 비발효인 경우보다 항산화의 여러 가지 기작에서 탁월한 것으로, 같은 효과로 적은 양의 원료 사용이 가능하여 원가 절감의 효과를 가질 수 있다. 또한, 천연 물질로서 화학합성 원료로부터 발생되는 부작용이 적고 산업적으로 신경보호 효과에 우수한 효과를 기대할 수 있다. 나아가, 본 발명은 실험을 통하여 수경재배 인삼 추출물을 발효시켜 그 항산화 효과의 증가를 나타냄을 확인할 수 있었으며, 이는 다른 천연물 소재와 혼합하여 생리효과가 더욱 증가됨으로서 신경보호 효과뿐만 아니라 더 나아가 인체 대사의 산화 작용으로 유발되는 신경염, 알츠하이머 질환, 파킨슨병 등 노인성 뇌질환 환자에게 기능성 식품의 주원료로 이용될 수 있다. 본 발명으로부터 수경재배 인삼의 고부가 가치 창출을 위하여 더욱 다양한 기능성으로서 산업적 활용성이 넓어지고 그 소비가 더욱 커질 것으로 농가에서도 재배에 의한 소득이 증대될 수 있다.
도 1은 β-carotene bleaching assay의 결과이다. 12 및 24시간 발효에 따른 시료들의 지방산 산패를 억제하는 정도(%)를 반응시간에 따라 나타내었다. (A)는 2년근 발효 수경재배 인삼 추출물(5 mg/mL)인 경우(2Y)이고 (B)는 대조군인 6년근 수삼 (5 mg/mL)인 경우(6Y)이다. 여기서 NF는 비발효물 시료이다.
도 2는 신경 세포인 SH-SY5Y에 있어서 산화적 손상에 대한 생존율(%)을 통하여 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경보호 효과를 나타낸 것이다. 신경세포의 산화적 손상은 H2O2로 실시하였으며 락토코쿠스 락티스 자체의 세포 보호 효과를 확인하였고, 추출물의 발효는 12시간(F12) 및 24시간(F24)으로 하였다.
도 2는 신경 세포인 SH-SY5Y에 있어서 산화적 손상에 대한 생존율(%)을 통하여 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경보호 효과를 나타낸 것이다. 신경세포의 산화적 손상은 H2O2로 실시하였으며 락토코쿠스 락티스 자체의 세포 보호 효과를 확인하였고, 추출물의 발효는 12시간(F12) 및 24시간(F24)으로 하였다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
상술한 바와 같이, 천연물에서의 유효성분은 대부분 배당체로 존재하며 배당체 형태는 아글리콘 형태보다 그 효율이 낮아 실제 기능성을 위한 유효 농도에 도달하기 위해서는 추출, 농축 또는 발효 등을 통한 여러 가지 가공법이 필요하다. 발효를 이용하는 경우, 미생물이 생산하는 효소를 이용하여 효율적으로 배당체로부터 유효성분만을 분리 추출할 수 있고, 더 나아가 생물 전환까지 진행하면 더욱 높은 생리기능성을 기대할 수 있다. 즉, 수경재배 인삼의 유효물질은 자연에서 그 농도가 적은 문제가 있어 산업적으로 응용이 어려우나, 인체에 무해한 유산균인 락토코쿠스 락티스를 이용한 발효물에서의 유효물질을 증진함으로써 그 기능성이 증대되고 특히 부가적으로 여러 식중독균에 대한 증진된 항균력으로 인하여 산업적인 응용 가능성을 제공한다.
이에, 본 발명자들은 수경재배 인삼을 락토코쿠스 락티스 균주로 발효시킨 인삼 추출물을 제공함으로써, 상술한 문제의 해결 방안을 모색하였다. 본 발명의 조성물은 항산화력이 우수하며, 신경 세포 보호에 효과적이다.
본 발명은 수경재배 인삼 추출물을 락토코쿠스 락티스로 발효시켜 제조한 발효물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 사멸 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 용어 "조성물(composition)"은 본 발명의 추출물에 희석제 또는 담체와 같은 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 혼합물을 의미한다. 조성물은 치료 용도를 위한 조성물뿐만 아니라 화장품 조성물을 포함한다. 일부 실시예에 따르면, 본 발명의 조성물을 그 필요에 따라 대상체에게 투여하는 방법이 제공되어 있다. 일부 실시예에서, 본 발명의 조성물은 인간에게 투여할 수 있다.
본 발명의 조성물 내 활성 성분, 제약상 허용되는 부형제, 및/또는 임의의 추가 성분의 상대량은 치료 대상체의 동일성, 크기, 및/또는 장애에 따라 그리고 조성물이 투여되는 경로에 따라 변할 것이다. 예로서, 조성물은 0.1％ 내지 100％ (w/w) 활성 성분을 포함할 수도 있다.
본 발명의 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다. 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 약학적 조성물의 1일 투여량은 0.0001-1000 ㎎/㎏이다.
본 명세서에서 사용된 용어, "약학적으로 허용되는 담체"는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미 세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히 드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
용어 "신경 세포(neuron)"는 하나의 세포체(cell body), 세포체의 돌기인 하나의 축삭(즉, 액손 또는 뉴라이트) 및 여러 개의 수상 돌기(즉, 덴드라이트)를 포함하는 동물 세포를 의미하며, 예를 들어, 상기 신경 세포는 감각 신경 세포, 운동 신경 세포, 연합 신경 세포일 수 있다. 또한, 상기 신경 세포는 중추 신경계, 뇌, 뇌간, 척수, 중추 신경계와 말초 신경계의 접합부분 등의 구조를 이루는 뉴런, 신경지지 세포, 글리아, 슈만 세포 등을 포함할 수 있다.
용어 "신경 세포의 사멸(death of neuron)"은 상기 신경 세포가 아폽토시스(apoptosis)에 의해 죽는 것을 포함하는 의미로 해석된다. 또한, 용어 "신경 퇴화(neurodegeneration)"는 상기 신경 세포의 사멸을 포함하는 신경 세포의 구조 또는 기능의 점진적인 손상을 의미한다.
신경 세포의 사멸 또는 신경 퇴화는 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증, 알츠하이머 병, 파킨스 병과 같은 다양 한 뇌질환을 야기한다는 것이 당업자에게 널리 알려져 있으며, 상기 질환의 예방 또는 치료를 위해 신경 세포 사멸의 기전에 관한 연구가 진행되고 있다. Nature Reviews Molecular Cell Biology 1:120-130 (2000) 및 Journal of Cellular and Molecular Medicine, 12:2263-2280 (2008)은 신경의 세포 사멸이 알츠하이머 병, 파킨슨 병, 헌팅턴 병, 허혈, 경화 등 다양한 증상의 원인이 되며, 산화적 스트레스(oxidative stress), 미토콘드리아의 기능 장애와 같은 신경세포 사멸에 대한 작용의 연구를 통해 신경 퇴화 질환의 예방 또는 치료의 방법을 제시할 수 있음이 개시되어 있다. 따라서, 신경 세포의 사멸 또는 신경 퇴화를 억제하기 위한 효과를 갖는 화합물을 포함하는 약학적 조성물은 상기 개시한 질병의 예방 또는 치료를 의미한다는 것을 의약 분야의 통상적인 기술자라면 명확하게 인식할 수 있을 것이다.
일 구체예에 따른 상기 조성물은 신경 세포 사멸 억제를 통해 신경 보호를 위한 것이다. 용어 "신경 보호(neuroprotection)"는 신경 세포의 사멸 또는 신경 퇴화로부터 신경 세포를 보호하는 신경계 내에서의 작용을 의미하며, 구체적으로, 신경 상해를 감소, 억제하거나 개선시키는 효과, 또한 신경 상해에 의해 손상된 신경 조직 내의 신경 세포를 보호, 소생 또는 재생시키는 효과를 의미한다. 또한, 상기 용어 신경 보호는, 상기 의미로 당업자들에게 공지되어 일반적으로 널리 사용되고 있는 당업계의 표준 용어이다 (NeuroReport, 9:3955-3959(1998); Chen, J-F., J. Neurosci., 21:RC143(2001) 등). 용어 "신경 세포의 보호(protection of neuron cell)"는 신경성 인설트를 경감 또는 개선(amelioration)하는 작용, 또는 신경성 인설트에 의해 손상을 입은 신경 세포의 보호 또는 회복시키는 작용을 의미한다. 따라서, 상기 약학적 조성 물은 활성 산성종의 감소를 유도하여 산화적 스트레스를 억제함으로써, 신경 세포의 사멸을 막아 상기 다양한 질환의 예방 또는 치료를 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 락토코쿠스 락티스는 수탁번호 Lactococcus lactis KCCM 11159P로 기탁된 락토코쿠스 속 균주인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물의 추출용매는 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출 용매일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물의 총 폴리페놀 함량은 20 내지 40 mg GAE/100g일 수 있다. 본 명세서에서 "GAE"는 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량을 나타내는 단위로서, 갈릭산 (galic acid)을 이용하여 작성한 표준곡선에서 mg/100g garlic acid quivalents(GAE)단위로 나타낸 것을 의미한다.
구체적으로, 본 발명의 실시예 3에서 발효 시간에 따라 폴리페놀 함량을 비교하였으며, 대조군으로 6년근 수삼을 이용하였다. 그 결과 표 2에 나타난 바와 같이, 비발효인 경우보다 발효시킨 경우의 폴리페놀 함량이 증가했으며, 2년근 수경재배 인삼의 폴리페놀 함량이 6년근 수삼과 유사하거나, 12시간 발효시에는 더 높게 나타났다. 상기 추출물의 총 폴리페놀 함량은 20 내지 40 mg of GAE/100g일 수 있고, 바람직하게는 25 내지 35 mg of GAE/100g 일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 수경재배 인삼 추출물을 발효시킨 발효물의 경우, 인삼추출물에 0.5 내지 2%(w/v) peptone을 첨가하고, pH를 6 내지 7까지 적정한 뒤 110 내지 130℃, 1.2 내지 1.8 기압에서 10 내지 20분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하고, 완성된 배지에 8 내지 16시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.0 내지 7.0 Log CFU/mL 접종하여 28 내지 32℃에서 발효한 것일 수 있으며, 바람직하게는, 0.8 내지 1.5%(w/v) peptone을 첨가하고, pH를 6.3 내지 6.8까지 적정한 뒤 115 내지 125℃, 1.3 내지 1.6 기압에서 12 내지 18분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하고, 완성된 배지에 10 내지 14시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.3 내지 6.8 Log CFU/mL 접종하여 28 내지 32℃에서 발효한 것일 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 실시예2에서는 1%(w/v) peptone을 첨가하고 pH를 6.5까지 적정한 뒤 121℃ 1.5 기압에서 15분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하였으며, 완성된 배지에 12시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.5 Log CFU/mL 접종하여 12시간 및 24시간 동안 30℃, 배양시키며 발효하여 이용하였다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 발효 시간은 12시간 내지 24시간 일 수 있다. 구체적인 일실시예에서는 발효시간별로 볼 때 항산화 효과를 비교하였으며, 24시간인 경우 항산화 효과 큰 것으로 나타났다(실시예 4의 표 3 참조). 여기서 이러한 반응 저해 효과는 대조군인 수삼과 큰 유의차는 없는 것으로 나타났다. 실시예의 실험 결과를 고려하는 경우, 24시간 발효시킨 수경재배 인삼 추출물을 이용하는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명은 상기 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본원에서 기술한 약학적 조성물은 약리학 분야에 알려져 있거나 이후 내용에서 전개되는 임의의 방법에 의해 제조될 수도 있다. 일반적으로, 이러한 정제용 방법은 활성 성분을 부형제 및/또는 하나 이상의 다른 보조 성분과 연관시키는 단계를 포함하고, 이어서 필요하거나 원하는 경우 생성물을 원하는 단일- 또는 다중-용량 단위로 성형 및/또는 포장하는 단계를 포함한다.
본원에서 기술한 본 발명의 약학적 조성물은 전형적으로 쉬운 투여 및 균일한 투여를 위하여 투여 단위 형태로 제조된다. 그러나 본 발명의 조성물의 총 일일 용법은 타당한 의학적 판단의 범위 내에서 담당의에 의해 결정될 것임을 이해하게 될 것이다. 임의의 특정 대상체에 대한 특정한 치료 유효 용량 수준은 질환, 장애, 또는 치료 중인 장애 및 장애의 심각도를 포함하는 다양한 인자; 채택된 특정 활성 성분의 활성; 채택된 특정 조성물; 대상체의 나이, 체중, 전반적인 건강, 성별 및 다이어트; 채택된 특정 활성 성분의 투여 시간, 투여 경로, 및 배설율; 치료 기간; 채택된 특정 활성 성분과 조합하거나 동시에 사용한 약물; 및 의료 분야에 잘 알려진 인자 등에 좌우될 것이다.
본 발명의 발효 수경재배 인삼 추출물, 이의 염, 또는 이의 약학적 조성물은 임의의 경로로 투여될 수도 있다. 일부 실시예에서, 발효 수경재배 인삼 추출물, 이의 염, 또는 이의 약학적 조성물은 경구, 정맥내, 근육내, 동맥내, 수질내, 척수강내, 피하, 뇌실내, 경피, 피내, 직장, 질내, 복강내, 국소(분말, 연고, 크림, 및/또는 액적에 의함), 점막, 코, 입, 경장, 설하; 기관내 점적주입, 기관지 점적주입, 및/또는 흡입; 및/또는 경구 스프레이, 비강 스프레이, 및/또는 에어로졸을 포함하는 다양한 경로에 의해 투여된다. 구체적으로 고려되는 경로는 침투성 정맥내 주사, 혈액 및/또는 림프 공급을 통한 국부 투여, 및/또는 환부 부위에 대한 직접 투여이다. 일반적으로 투여의 가장 적합한 경로는 작용제의 특성(예를 들어, 위장관의 환경에서의 안정성), 및 대상체의 장애(예를 들어 대상체가 경구 투여를 참을 수 있는지 여부)를 포함하는 다양한 인자에 좌우될 것이다. 현재 경구 및/또는 비강 스프레이 및/또는 에어로졸 경로가 치료제를 폐 및/또는 호흡기계에 직접 전달하기 위하여 가장 공통으로 이용되고 있다. 그러나 본 발명은 약물 전달 분야에서의 진전을 고려하는 임의의 적절한 경로에 의한 본 발명에 따른 발효 수경재배 인삼 추출물을 포함하는 약학적 조성물의 전달을 포함한다.
특정 실시예에서, 본 발명의 발효 수경재배 인삼 추출물, 이의 염, 또는 이의 약학적 조성물은 매일 대상체 체중의 약 0.001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 40 mg/kg, 약 0.5 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 또는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg을 하루에 1회 이상 전달하기 충분한 투여량 수준으로 투여하여 원하는 치료 효과를 얻을 수도 있다. 목적 투여량은 하루에 세 번, 하루에 두 번, 하루마다, 이틀마다, 삼일마다, 매주마다, 2주마다, 3주마다, 또는 4주마다 전달될 수도 있다. 특정 실시양태에서, 목적 투여량은 다중 투여(예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 회 이상의 투여)를 통해 전달될 수도 있다.
일부 실시예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 하나 이상의 증상 또는 신경 질환의 특징을 치료, 경감, 개선, 완화시키고, 그 개시를 지연시키고, 그 진행을 억제시키고, 그 중증도를 감소시키고, 및/또는 그 발생률을 감소시키는 데 유용한 임의의 치료 활성제 또는 절차 (예를 들어, 수술, 방사선 요법)와 조합하여 투여될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 일실시예에서 락토코쿠스 락티스 및 수경재배 인삼 추출물의 신경세포 보호 효과를 확인하였으며, 발효 시간을 달리하여 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경세포 보호 효과와 비교하였다(실시예 5, 도 2 참조). 발효 후에는 균체수는 약 7.0 CFU이며, 발효추출물에서 균체를 원심분리로 제거하여 신경보호효과를 측정하였다. 발효 수경재배 인삼 추출물과 동일한 수준의 세포 보호 효과를 나타내려면, 균주 자체만을 사용하는 경우 7.0 CFU 이상이 필요하며, 그 이하는 신경보호 효과가 나타나지 않을 수 있다. 혹은, 본 발명에서 이용한 발효를 위한 유산균 수를 단독으로 이용하는 경우, 본 발명에서 달성하고자 하는 신경세포 보호 효과가 나타나지 않을 수 있다. 따라서, 수경재배 인삼 추출물 혹은 균주 자체를 직접 사용한 경우보다, 락토코쿠스 락티스 균주로 수경재배 인삼 추출물을 발효시킨 발효물을 이용하는 경우 신경세포 보호 효과가 현저하게 우수하다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 신경 질환은 기억력 상실, 기억력 손상, 치매, 건망증, 파킨슨병, 알츠하이머병, 피크(Pick)병 및 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeld-Jakob)병일 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물은 신경 질환 예방 또는 개선을 위한 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 발효 수경재배 인삼 추출물을 첨가물로 사용할 경우, 상기 발효 수경재배 인삼 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 발효 수경재배 인삼 추출물은 원료에 대하여 1~20 중량%, 바람직하게는 5~10 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 음료, 껌, 비타민 복합제 또는 건강보조식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다. 식품조성물에는 음료 조성물도 포함되며, 건강기능 식품도 포함될 수 있다.
본 발명의 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라 이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01~0.04 g, 바람직하게는 약 0.02~0.03 g이다.
그 외, 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본원에서 정의되는 "건강기능식품"은 기능성 식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명에 따른 추출물을 식품첨가물로 사용할 경우, 상기 발효 수경재배 인삼 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포 함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
수경재배 인삼 추출물 제조
건조된 수경재배 인삼 2년근을 고속믹서기를 이용하여 10 mm 이하의 크기가 되도록 분쇄하였다. 수경재배 인삼 50 g을 50% 에탄올 용액 500 mL로 혼합하여 60℃에서 24시간 동안 추출한 후 여과하였다. 여과액은 진공 농축을 하고 그 농축액은 동결 건조를 통해 분말 형태로 제조하여 -20℃에서 보관하였다.
수경재배 인삼 추출물의 발효물 제조
수경재배 인삼 추출물의 발효는 김치에서 분리한 유용 유산균인 락토코쿠스 락티스를 이용하였고 액체 발효를 시행하였다. 실시예1을 통해 제작한 수경재배 인삼 추출물 500mL에 미생물의 성장에 필요한 영양원을 보충하기 위해 1%(w/v) peptone을 첨가하고 0.1 N NaOH를 이용하여 pH를 6.5까지 적정한 뒤 121℃ 1.5 기압에서 15분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하였다. 완성된 배지에 12시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.5 Log CFU/mL 접종하여 12시간 및 24시간 동안 30℃, 50 rpm의 속도로 진탕 배양시키면서 발효하였다. 발효 후 0.45 μm membrane filter를 이용하여 남아있는 균체를 제거하고 동결 건조하여 실시예1과 같이 동일하게 분말화하여 보존하였다.
수경재배 인삼 추출물을 발효시킨 후 pH, 생균수 및 고형분 함량을 측정하여 최적 발효조건을 결정하였다. pH는 pH 측정기 (Model 720, WTW Co. Germany)를 이용하여 측정하였으며, 발효물 내 유산균 생균수는 MRS 고체 배지에 발효액을 도말하여 표준 평판배양법을 이용하여 직접 계수하였다. 수경재배 인삼 추출물의 발효 전후의 pH, 유산균 생균수 및 고형분 함량은 [표 1]에 나타내었다.
| 발효 전 | 12시간 발효 | 24시간 발효 | |
| pH | 6.5±0.1 | 4.7±0.1 | 3.5±0.1 |
| 유산균 생균수 (Log CFU/mL) | 6.5±0.2 | 7.5±0.1 | 6.7±0.2 |
| 고형분 함량 (%) | 27.3±0.3 | 0.8±1.2 | 0.8±2.4 |
[표 1]에서 나타난 바와 같이, 수경재배 인삼 추출물의 발효가 12시간 진행되는 동안, 젖산균은 7.5 Log CFU/mL까지 성장하였으며 반면에 pH는 6.5에서 4.7까지 감소하였다. 비발효물에 비해 발효물의 분말 획득 고형분 함량은 감소하였으며, 이는 미생물이 성장하는 동안 배당체 형태의 성분들을 사용하고 이를 당이 분리된 aglycon 형태로 전환되면서 감소한 당의 무게만큼 최종 발효물의 중량이 감소하여 낮아진 것으로 사료된다. 24시간 발효에는 유의차가 크게 나타나지 않았다.
실시예1 및 실시예2의 분말 시료는 각각 50% 에탄올로 용해하고 다시 0.45 μm membrane filter로 균체 및 불용성 물질을 제거하여 다음 실험에 사용하였다.
발효 수경재배 인삼 추출물의 총 폴리페놀 함량
총 폴리페놀함량은 Folin-Ciocalteu법을 변형하여 실행하였다. 시료의 농도를 증류수로 2.5 및 5 mg/mL로 조절하고 50 μL를 1 mL의 2%(w/v) Na2CO3로 혼합한 후 30동안 정치시켰다. 50% (v/v) Folin-Ciocalteu용액 50 μL를 가하여 혼합하고 25℃에서 30분간 정치시킨 후 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 gallic acid를 표준물질로 사용하여 표준 곡선이 작성되었으며 총 페놀함량은 gallic acid equivalents (mg)/dry weight (g)로 계산하였다. 이에 대한 표준 곡선에 의한 등식은 다음과 같다.
y = 1.2715χ- 0.0257, R2 = 0.9966
발효시간에 따르는 총 폴리페놀 함량을 비교한 결과는 [표 2]에 나타내었으며 이때 대조군으로서 산업적으로 널리 사용되는 6년근 수삼 (6Y SG)을 사용하였다.
| 항목 | 비발효 | 12시간 발효 | 24시간 발효 | |
| 총 폴리페놀함량 (mg GAE1/100 g) |
2Y HG | 25.06±1.08b | 31.17±1.08a | 29.14±0.36a |
| 6Y SG | 13.88±0.36c | 25.32±2.16b | 29.65±1.08a | |
그 결과, 폴리페놀의 함량은 발효 12시간까지 증가하지만 24시간은 오히려 감소하는 것으로 나타났으며 이는 폴리페놀이 장시간의 발효 중 변화되거나 다른 물질이 생성되므로 상대적인 조성이 감소하는 것으로 유추된다. 대조군인 6년근 수삼인 경우, 24시간까지는 증가하는 것으로 나타났으나 수경재배 인삼 추출물의 12시간 발효 시의 폴리페놀함량이 유사한 것으로 나타났다.
발효 수경재배 인삼 추출물의 항산화력 측정
실시예에서 제조된 발효 수경재배 인삼추출액의 항산화력은 DPPH radical scavenging assay, ABTS radical scavenging assay, reducing power assay 및 β-carotene assay를 사용하여 측정하였다.
DPPH 라디칼 소거능 측정
수경재배 인삼 추출물 및 그 발효물의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능은 DPPH radical scavenging assay를 이용하여 확인하였다. 에탄올에 용해시킨 100 μM DPPH 용액 1 mL와 증류수에 용해시킨 수경재배 인삼 추출물 열수 추출물 및 발효물 100 μL를 15 분간 암실에서 반응한 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 농도는 62.5, 125, 250 및 500 μg/mL로 하였으며, 라디칼 소거능 (%)는 다음과 같이 계산하였다.
DPPH 자유 라디칼 소거능(%) = 
Acontrol: 수경재배 인삼 추출물 및 발효물이 포함되지 않은 대조군의 흡광도
Asample: 수경재배 인삼 추출물 또는 발효물이 포함된 실험군의 흡광도
ABTS 라디칼 소거능 측정
수경재배 인삼 추출물 및 발효물의 ABTS 라디칼 소거능은 2, 2′-azino-bis-3-ethyl benzthiazoline-6-sulphonic acid(ABTS) radical scavenging assay를 사용하여 확인하였다. ABTS 라디칼은 2 mM ABTS와 2.45 mM의 potassium persulphate를 증류수에서 12시간 동안 반응시켜 생성하였다. 이후, 생성된 ABTS 라디칼을 희석하여 734 nm에서 흡광도가 0.700이 되도록 하여 실험에 사용하였다. ABTS 라디칼 용액 1 mL와 수경재배 인삼 추출물 및 발효물 50 μL를 암실에서 30분간 반응시킨 후, 734 nm에서 흡광도를 측정하였다. 수경재배 인삼 추출물 및 이의 발효물은 62.5, 125, 250 및 500 μg/mL의 농도에서 실험을 진행하였다. ABTS 라디칼 소거능은 trolox를 이용하여 표준 곡선을 작성하여 TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity)로 계산하였다.
Reducing power assay
수경재배 인삼 추출물 및 이의 발효물이 지니는 철 3가 이온 환원력은 다음과 같이 실험하였다. 수경재배 인삼 추출물 및 이의 발효물 및 1% potassium ferricyanide를 0.2M sodium phosphate buffer(pH 6.6)에 용해시켜 각각 200 μL씩 50℃에서 20 분 간 반응시켰다. 이후, 200 μL의 10% trichloroacetic acid를 첨가하여 반응액을 산성화시킨 후 500 μL 0.1% 염화철(Ⅲ) 수용액을 첨가하여 20분간 반응시켜 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 수경재배 인삼 추출물 및 이의 발효물이 철 3가 이온을 철 2가 이온으로 환원되면, 철 2가 이온이 칼륨 이온과 반응하여 푸른색을 나타내며 이를 흡광도를 측정하여 확인하였다. 수경재배 인삼 추출물 및 이의 발효물은 62.5, 125, 250 및 500 μg/mL의 농도로 실험하였다.
Ferric reducing antioxidant power assay (FRAP assay)
300 mM acetate 완충액 (pH 3.6), 10 mM 2,4,6-tri[2-pyridyl]-s-triazine용액 및 20 mM ferric chloride용액을 10:1:1로 혼합하여 37℃의 수조에서 15분간 유지하였다. 시료액 50 μL과 위 용액 950 μL를 혼합한 후 20～25℃에서 30분간 암실에서 정치시킨 후 593 nm에서 비색도를 측정하였다. 이때 표준 곡선은 FeSO4를 표준물질로 하여 작성되었고 각 시료의 항산화력은 다음과 같은 등식으로 계산되었다.
y = 0.054χ+ 0.3279, R2 = 0.9983
β-carotene assay
본 실험은 발효추출물의 유효성분이 β-carotene에 대한 산화 억제능을 보는 것이다. β-carotene solution을 제조하기 위해 15 mL의 chloroform에 β-carotene 3 mg, linoleic acid 66 μL, Tween 80 300 μL를 함께 녹인 후 감압농축기로 용매를 제거하고 증류수 150 mL을 넣었다. 발효액 0.5 mL에 β-carotene solution 4.5 mL을 50℃ 항온수조에 넣고 6시간 반응시킨 다음 470 nm에서 흡광도를 측정하고 그 산화 억제능은 다음과 같이 계산되었다.
β-carotene 산화 억제능 (%) = (반응 후 흡광도/반응 전 흡광도) × 100
그 결과로 각각의 항산화력 측정 결과는 [표 3]에 나타냈다. 전체적으로 대조군인 6년근 수삼보다 수경재배 인삼 2년근 추출물이 항산화력이 유의차가 없거나 높은 것으로 나타났다. 또한, 발효 처리군이 비발효 처리 시료보다 항산화력이 높은 것으로 나타났다.
| 항산화 측정 방법 | 시료(5 mg/mL) | 수경재배 인삼 추출물의 발효시간(h) | ||
| 비발효 | 12 | 24 | ||
| DPPH radical scavenging activity (%) | 2Y HG | 32.6±0.3b | 36.9±0.2b | 41.1±0.1a |
| 6Y SG | 22.5±0.3d | 21.2±0.1d | 26.6±0.2c | |
| ABTS radical scavenging activity (%) | 2Y HG | 62.6±0.8d | 82.9±0.8a | 86.1±0.6b |
| 6Y SG | 54.0±0.2e | 60.0±0.4d | 72.5±0.3c | |
| Reducing power assay (L-Cysteine, μM) | 2Y HG | 14.9±0.1c | 15.2±0.2b | 15.4±0.7a |
| 6Y SG | 14.8±0.1d | 14.8±0.1d | 15.1±0.9b | |
| FRAP assay (μM FeSO4 equivalents) | 2Y HG | 35.4±0.2b | 36.1±0.3a | 35.9±0.2a |
| 6Y SG | 35.2±0.3b | 35.2±0.3b | 35.3±0.2b | |
발효 시간으로 볼 때, 항산화력 시험방법에 따라 약간의 차이가 있었으나 전체적으로 24시간 발효처리 시료에는 12시간 발효한 것보다 높은 것으로 나타났다. 그러나 FRAP assay에서 약간의 감소 추세였으나 유의차는 크지 않은 것으로 나타났다. 이후의 발효시간에 따른 항산화력은 큰 변화가 없는 것으로 나타났다.
β-carotene assay 수행 결과는 도 1에 나타난 바와 같이 반응시간 별로 볼 때 2시간 반응에서 가장 산화 저해 효과가 컸으며 반응시간이 증가할수록 산화 저해 효과가 점차 감소하는 것으로 나타났다. 또한, 발효시간 별로 볼 때 24시간인 경우 항산화 효과 큰 것으로 나타났다. 여기서 이러한 반응 저해 효과는 대조군인 수삼과 큰 유의차는 없는 것으로 나타났다.
따라서 항산화 효과를 위한 발효시간은 24시간이 산업적으로 가장 적당한 것을 알 수 있다.
발효 수경재배 인삼 추출물의 신경보호 효과
Methylthizol-2-yl-2,5-diphenyl tetrazoliumbromide (MTT) assay를 통해 인간 유래 신경 세포인 SH-SY5Y 세포주에 대한 세포보호 효과를 측정하였다. Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)에 106 cells/mL로 현탁한 SH-SY5Y 세포주 100 μL을 96 well-plate에 24시간 동안 배양하였다. H2O2에 대한 신경보호 효과를 측정하기 위해서 수경재배 인삼 추출물 시료 50 μL을 4시간 동안 처리 후 H2O2 250 μM 용액 50 μL로 처리하였다. 20시간 후에 배지를 제거하고 MTT (2.5 mg/mL)을 50 μL 첨가하여 4시간 동안 배양하였다. 배양액을 제거하고 100 μL의 dimethyl sulfoxide(DMSO) 용액을 첨가하여 생성된 결정을 녹였다. 15분간 반응 후 540 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정하여 세포 생존율을 계산하였다.
세포 생존율 (%) =
L.lactis 균체 자체의 신경보호효과 또한 고려하기 위하여 L. lactis의 균체 농도를 저농도(106 CFU/mL) 및 고농도(107 CFU/mL)로 하여 실험하였다. 그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이 저농도의 균체인 경우 비발효 및 발효 수경인삼재배 추출물 보다 세포 생존율이 낮은 것으로 나타났으며, 고농도의 균체인 경우 발효 수경재배 인삼 추출물 보다 신경세포의 생존율이 낮게 나타났다. 처리 농도에서도 10 μg/mL 추출물 처리보다 100μg/mL 농도에서 더욱 높은 생존율을 확인할 수 있었다. 발효 효과에서도 비발효 보다 신경세포 보호 효과가 높게 나타났으며 특히 발효시간으로 보면 24시간 발효에서는 12시간 때보다 높은 것으로 나타났다. 즉, 균주만을 처리한 경우보다 균주를 이용한 발효 수경재배 인삼을 처리한 경우 세포 생존율이 높아지는 것을 알 수 있으며, 이로서 신경 보호 효과가 있음을 확인하였다.
전체적으로 발효 수경재배 인삼의 추출물이 균체 자체 보다 신경세포의 산화적 손상에 대하여 보호 효과가 뛰어난 것을 확인하였다.
Claims (9)
- 수경재배 인삼 추출물을 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis)로 발효시켜 제조한 발효물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 락토코쿠스 락티스는 수탁번호 Lactococcus lactis KCCM 11159P 로 기탁된 락토코쿠스 속 균주인 것을 특징으로 하는 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물의 추출 용매는 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물의 총 폴리페놀 함량은 20 내지 40 mg GAE/100g인 것을 특징으로 하는 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 발효물은 0.5 내지 2%(w/v) peptone을 첨가하고 pH를 6 내지 7까지 적정한 뒤 110 내지 130℃, 1.2 내지 1.8 기압에서 10 내지 20분간 멸균하여 발효를 위한 배지를 제조하고, 완성된 배지에 12시간 배양시킨 락토코쿠스 락티스를 약 6.0 내지 7.0 Log CFU/mL 접종하여 28 내지 32℃에서 발효한 것을 특징으로 하는, 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제5항에 있어서,
상기 발효 시간은 12시간 내지 24시간인 것을 특징으로 하는 신경세포 사멸 억제용 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 신경 질환은 기억력 상실, 기억력 손상, 치매, 건망증, 파킨슨병, 알츠하이머병, 피크(Pick)병 및 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeld-Jakob)병으로 이루어진 군에서 선택한 1종이상의 질환인 것을 특징으로 하는 신경 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 신경 질환 예방 또는 개선을 위한 식품 조성물.
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| KR1020210178064A KR20230089440A (ko) | 2021-12-13 | 2021-12-13 | 유산균 발효 수경재배 인삼 추출물의 신경 질환 예방 또는 치료용 조성물 |
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