KR20230061563A

KR20230061563A - Ert-치료경험이 없는 환자 및 있는 환자에서 파브리병의 치료

Info

Publication number: KR20230061563A
Application number: KR1020237013747A
Authority: KR
Inventors: 제프 카스텔리
Original assignee: 아미쿠스 세라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2016-07-19
Filing date: 2017-07-19
Publication date: 2023-05-08
Also published as: EP3487502A1; TW201806597A; JP2022033749A; AU2017298376A1; CO2018006358A2; TW202408513A; AR109103A1; EP4378524A2; CL2018001677A1; EP4324521A2; US20230321065A1; EP4356911A1; JP2019178140A; WO2018017721A1; KR20190030729A; US20190183869A1; AU2023206175A1; EP4324521A3; IL264301A; JP6752270B2

Abstract

환자의 파브리병을 치료하기 위한 투약 계획이 제공된다. 일부 방법은 ERT-치료경험이 있는 환자 또는 ERT-치료경험이 없는 환자의 치료에 관한 것이다. 일부 방법은 좌심실 질량을 개선시키고/거나 족세포 글로보트리아오실세라미드를 개선시키기 위해 환자에 약 123 mg 유리 염기 당량의 미갈라스타트를 투여하는 것을 포함한다.

Description

ERT-치료경험이 없는 환자 및 있는 환자에서 파브리병의 치료 {TREATMENT OF FABRY DISEASE IN ERT-NAIVE AND ERT-EXPERIENCED PATIENTS}

본 발명의 원리 및 실시양태는 일반적으로는 리소좀 저장 질병의 치료를 위한 약리학적 샤페론의 용도, 특히 파브리 (Fabry) 병의 치료를 위한 미갈라스타트 (migalastat)의 용도에 관한 것이다.

파브리병은 리소좀 효소인 α-갈락토시다제 A (α-Gal A)의 α-Gal A 유전자 (GLA) 내 변이로 인한 결핍에 의해 야기되는, 글리코스핑고리피드 대사의 진행성, X-연관된 선천적 오류이다. X-연관된 질병임에도 불구하고, 여성은 다양한 정도의 임상 증상을 나타낼 수 있다. 파브리병은 발병율이 남성에서는 40,000명 중 1명, 전체 인구에서는 117,000명 중 1명으로 추산되는 희귀 질병이다. 더우기, 파브리병의 여러 가지 지연-발병 표현형은 그들이 전형적인 증상이나 증후로 나타나지 않기 때문에 진단되지 않을 수도 있다. 파브리병에 대한 이와 같은 지연-발병 및 신생아 검진은 파브리병의 실제 발병율이 현재 추산되고 있는 것 보다 높을 수 있다는 것을 암시한다.

파브리병 환자에 있어서 치료 받지 않는 경우의 예상 수명은 단축되며, 신장, 심장 및/또는 중추 신경계에 영향을 미치는 혈관 질환으로 인해 대체로 40대 또는 50대에 사망에 이른다. 효소 결핍은 전신에 걸쳐 혈관 내피 및 내장 조직에 기질인 글로보트리아오실세라미드 (GL-3)의 세포내 축적을 일으킨다. 글리코스핑고리피드 침적에 기인한 점진적인 신기능 퇴화와 고질소혈증은 대체로 30대 내지 50대에 나타나지만, 빠르게는 20대에 나타날 수도 있다. 신장 병변은 반접합체 (남성) 및 이형접합체 (여성) 환자 모두에서 나타난다.

파브리병으로 인한 심장 질환은 대부분의 남성에서 또한 다수의 여성에서 발생한다. 초기 심장 질환 소견은 좌심실 확대, 판막 침범 및 전도 이상을 포함한다. 승모판폐쇄부전증은 전형적으로 아동기 또는 청소년기에 나타나는 가장 빈도가 높은 판막 병변이다. 뇌혈관 증상은 주로 다병소성 소혈관 침범에 기인하며, 혈전증, 일과성 뇌허혈성 발작, 뇌기저동맥 허혈증 및 동맥류, 발작, 편측마비, 편측 감각소실, 실어증, 미로장애 또는 뇌출혈을 포함할 수 있다. 뇌혈관 증상의 평균 발병 연령은 33.8세이다. 성격 변화 및 정신병적 행동은 나이가 들면서 나타날 수 있다.

파브리병에 대해 현재 FDA-승인된 치료법은 효소 대체 요법 (ERT)이다. 두 가지 α-Gal A 제품이 현재 파브리병의 치료에 사용될 수 있으며, 그들은 아갈시다제 알파 (리플라갈 (Replagal)^®; 셔 휴먼 지네틱 써라피즈 (Shire Human Genetic Therapies)) 및 아갈시다제 베타 (파브라자임 (Fabrazyme)^®; 젠자임 코포레이션 (Genzyme Corporation))이다. 이들 두 가지 유형의 ERT는 환자의 불충분한 α-Gal A 활성을 효소의 재조합 형태를 정맥내 투여함으로써 보충하도록 하는 것이다. ERT가 많은 상황에서 유효하지만, 치료에는 또한 한계가 있다. ERT는 뇌졸중의 위험을 감소시키는 것으로 입증된 바가 없으며, 심장 근육은 느리게 반응하고, 신장의 세포 유형 일부에서 GL-3 제거는 제한적이다. 일부 환자는 또한 ERT에 대한 면역 반응을 나타낸다.

따라서, 파브리병 치료법에 대한 요구가 여전히 존재한다.

본 발명의 여러 측면은 ERT-치료경험이 없는 환자 및 ERT-치료경험이 있는 환자에서 미갈라스타트를 사용하여 파브리병을 치료하는 것에 관한 것이다.

본 발명의 하나의 측면은 ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자에서 좌심실 질량지수 (LVMi)를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg 유리 염기 당량 (FBE)이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여를 개시하기 전에 환자에 좌심실비대 (LVH)가 있다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염은 α-Gal A 활성을 상승시킨다.

하나 이상의 실시양태에서, 환자에 약 123 mg의 미갈라스타트 유리 염기가 격일로 투여된다.

하나 이상의 실시양태에서, 환자에 약 150 mg의 미갈라스타트 염산염이 격일로 투여된다.

하나 이상의 실시양태에서, 제제는 경구 투여형을 포함한다. 하나 이상의 실시양태에서, 경구 투여형은 정제, 캡슐제 또는 용액제를 포함한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염은 적어도 18개월 동안 투여된다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염은 적어도 30개월 동안 투여된다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후 약 5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후 약 6.6 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 2 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 3.8 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 있고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 9 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자에서 LVMi를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여를 개시하기 전에 환자에 LVH가 있다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후 약 5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후 약 7.7 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 10 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 17 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 15 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 20.8 g/m²의 LVMi 평균 감소를 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병 환자에서 LVMi를 정상화시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자에서 LVMi를 정상화시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자에서 LVMi를 정상화시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병 환자의 족세포 GL-3를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염은 적어도 6개월 동안 투여된다.

하나 이상의 실시양태에서, 환자는 ERT-치료경험이 없는 환자이다.

하나 이상의 실시양태에서, 환자는 ERT-치료경험이 있는 환자이다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병 환자의 족세포 부피를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 30% 이상의 족세포 부피 평균 감소율을 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 47%의 족세포 부피 평균 감소율을 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병 환자의 족세포 당 GL-3 봉입체 부피를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 30% 이상의 족세포 당 GL-3 봉입체 부피 평균 감소율을 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 투여는 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 50%의 족세포 당 GL-3 봉입체 부피 평균 감소율을 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 좌심실 질량 (LVM)을 감소시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 LVM을 감소시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병을 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 치료를 요하는 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 LVMi를 정상화시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 LVMi를 정상화시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 LVMi를 정상화시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병을 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 치료를 요하는 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 족세포 GL-3를 감소시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병을 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 치료를 요하는 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 족세포 부피를 감소시킨다.

본 발명의 또 다른 측면은 파브리병을 치료하는 방법에 관한 것으로, 그러한 방법은 치료를 요하는 환자에 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제를 격일로 투여하는 것을 포함하며, 유효량은 약 123 mg FBE이고, 제제의 투여는 환자의 족세포 당 GL-3 봉입체 부피를 감소시킨다.

본 발명의 추가의 특징은 하기 상세한 설명 및 첨부된 도면으로부터 자명해질 것이다.
도 1A 내지 1E는 인간 야생형 GLA 유전자의 전체 DNA 서열 (서열 번호: 1)을 나타낸다.
도 2는 야생형 α-Gal A 단백질 (서열 번호: 2)을 나타낸다.
도 3은 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, 기준시에서 미갈라스타트 요법 6/12, 18/24 및 30/36차월 후 까지의 평균 LVMi 변화를 보여준다.
도 4는 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, (A) 기준시에서 미갈라스타트 치료 6개월 후 까지의 족세포 당 GL-3 봉입체 부피의 개별적 변화; (B) 기준시에서 파브리병 환자로부터 얻은 사구체; 및 (C) 치료 6개월 후 파브리병 환자로부터 얻은 사구체를 보여준다.
도 5는 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, (A) 기준시에서 미갈라스타트 치료 6개월 후 까지의 족세포 부피의 개별적 변화; (B) 치료 6개월 후 족세포 부피와 족세포 봉입체 부피 사이의 상관관계; (C) 기준시 및 치료 6개월 후 족세포 내 GL-3 봉입체의 부피 분율 (족세포 봉입체 부피/족세포 부피)을 보여준다.
도 6은 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, (A) 9명의 건강한 대조 환자와 비교한, 기준시 또는 미갈라스타트 치료 6개월 후 파브리병 환자의 평균 족돌기 폭; (B) 족돌기 폭의 변화와 족세포 당 GL-3 봉입체 부피의 변화 사이의 상관관계를 보여준다.
도 7은 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, (A) 기준시에서 미갈라스타트 치료 6개월 후 까지의 혈장 lyso-Gb3의 개별적인 변화; (B) 혈장 lyso-Gb3의 변화와 족세포 내 GL-3 봉입체의 부피 분율의 변화 사이의 개별적인 비교; 및 (C) 혈장 lyso-Gb3의 변화와 GL-3 봉입체 부피의 변화 사이의 개별적인 비교를 보여준다.
도 8은 실시예 1에 기재되어 있는 바와 같이, (A) 24-시간 요단백질의 변화와 족세포 내 GL-3 봉입체의 부피 분율의 변화; 및 (B) 24-시간 요단백질의 변화와 GL-3 봉입체 부피 변화의 독립적인 비교를 보여준다.
도 9는 실시예 3에 기재되어 있는 바와 같이, 미갈라스타트 치료중인 여성 환자의 요중 GL-3 수준을 나타낸다.
도 10은 실시예 3에 기재되어 있는 바와 같이, 미갈라스타트 치료중인 남성 환자의 요중 GL-3 수준을 나타낸다.

본 발명의 몇몇 예시적인 실시양태를 기술하기 이전에, 본 발명이 하기 설명에 기재된 구체적인 구성 및 공정 단계로 한정되지 않는다는 것이 이해되어야 한다. 본 발명은 다른 실시양태일 수 있으며, 여러 가지 방식으로 실시되거나 수행될 수 있다.

본 발명의 여러 가지 측면은 파브리병의 치료를 위해 미갈라스타트와 같은 약리학적 샤페론을 투여하기 위한 투약 계획에 관한 것이다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 투약 계획은 환자의 하나 이상의 심장 파라미터 및/또는 하나 이상의 신장 파라미터를 개선시킨다.

정의

본 명세서에 사용되는 용어는 본 발명의 맥락 및 각각이 사용된 명세서의 문맥 속에서, 일반적으로 기술 분야의 통상적인 의미를 갖는다. 일부 용어는 이하에서 또는 명세서의 다른 부분에서 논의되어 실시자가 본 발명의 조성물 및 방법을 기술하고, 그를 제조 및 사용함에 있어서 추가의 지침을 제공한다.

"파브리 (Fabry) 병"이란 결핍된 리소좀 α-Gal A 활성에 기인한 글리코스핑고리피드 이화작용의 X-연관된 선천적 오류를 이른다. 이러한 결함은 심장, 신장, 피부 및 기타 조직의 혈관 내피 리소좀에 기질인 글로보트리아오실세라미드 ("GL-3", Gb3 또는 세라미드 트리헥소시드로도 알려짐) 및 관련 글리코스핑고리피드의 축적을 야기한다.

"비전형적 파브리병"이란 주로 α-Gal A 결핍의 심장 증상, 즉, 심장, 특히 좌심실의 상당한 확대를 가져오는 심근 세포 내에서의 진행성 GL-3 축적을 나타내는 환자를 이르는 것이다.

"보인자"란 결함이 있는 α-Gal A 유전자를 갖는 X 염색체 하나와 정상 유전자를 갖는 X 염색체 하나를 보유하며, 정상 대립유전자의 X 염색체 불활성화가 하나 이상의 세포 유형에 존재하는 여성을 이른다. 보인자는 종종 파브리병으로 진단된다.

"환자"는 특정 질병을 갖는 것으로 진단되거나 의심되는 개체를 이른다. 환자는 인간 또는 동물일 수 있다.

"파브리병 환자"는 파브리병을 갖는 것으로 진단되거나 의심되는 개체로서 이하 상세히 정의되는 바와 같은 변이된 α-Gal A를 갖는 개체를 이른다. 파브리병의 특징적인 표지는 남성 반접합자 및 여성 보인자에서 같은 유병율로 나타날 수 있으나, 전형적으로는 여성이 덜 심각하게 영향받는다.

"ERT-치료경험이 없는 환자"란 ERT를 받은 적이 전혀 없거나 미갈라스타트 요법 개시전 적어도 6개월 동안 ERT를 받지 않은 파브리병 환자를 이른다.

"ERT-치료경험이 있는 환자"란 미갈라스타트 요법 개시 직전에 ERT를 받고 있던 파브리병 환자를 이른다. 일부 실시양태에서, ERT-치료경험이 있는 환자는 미갈라스타트 요법 개시 직전 적어도 12개월 동안 ERT를 받아왔다.

인간 α-갈락토시다제 A (α-Gal A)는 인간 GLA 유전자에 의해 코딩되는 효소를 이른다. α-Gal A의, 인트론과 엑손을 포함하는 전체 DNA 서열은 진뱅크 (GenBank) 기탁번호 X14448.1로 이용가능하며, 서열 번호 1로서 도 1A 내지 1E에 나타나 있다. 인간 α-Gal A 효소는 429개의 아미노산으로 이루어져 있으며, 진뱅크 기탁번호 X14448.1 및 U78027.1로 이용가능하고, 서열 번호 2로서 도 2에 나타나 있다.

"변이 단백질"은 그를 코딩하는 유전자에 변이가 일어나서 소포체 내에 존재하는 정상적인 조건하에 안정한 구조를 얻을 수 없게 된 단백질을 포함한다. 안정한 구조를 얻는데 실패하면 상당량의 효소는 리소좀으로 운반되기 보다는 분해된다. 그러한 변이는 때때로 "구조적 변이"라고도 일컬어진다. 그러한 변이는 미스센스 변이, 인-프레임 소부분 결실 및 삽입을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에서, "변이 α-Gal A"는 α-Gal A를 코딩하는 유전자에 변이가 일어나서 소포체 내에 존재하는 정상적인 조건하에 효소가 안정한 구조를 얻을 수 없게 된 α-Gal A를 포함한다. 안정한 구조를 얻는데 실패하면 상당량의 효소는 리소좀으로 운반되기 보다는 분해된다.

본 명세서에서, "약리학적 샤페론" ("PC")이란 단백질에 특이적으로 결합하여 하기 한 가지 이상의 효과를 나타내는, 소분자, 단백질, 펩타이드, 핵산, 탄수화물 등을 포함하는 분자를 이른다: (i) 단백질의 안정한 분자 구조의 형성을 향상시키고/거나; (ii) 소포체로부터 다른 세포 위치, 바람직하게는 본래의 세포 위치로의 단백질의 수송을 유도, 즉, 단백질의 소포체-관련 분해를 방지하고/거나; (iii) 미스폴딩된 단백질의 응집을 방지하고/거나; (iv) 단백질에 적어도 부분적인 야생형 기능 및/또는 활성을 회복시키거나 향상시킨다. 예를 들어, α-Gal A에 특이적으로 결합하는 화합물은 그 화합물이 관련 또는 비관련 효소의 총괄적인 군이 아니라, 그 효소에 결합하여 샤페론 효과를 발휘하는 것을 의미한다. 보다 구체적으로, 이 용어는 BiP와 같은 내생 샤페론이나, 글리세롤, DMSO 또는 이중수, 즉, 화학적 샤페론과 같이 다양한 단백질에 대하여 비-특이적 샤페론 활성을 나타내는 비-특이적 기능제를 이르는 것이 아니다. 본 발명의 하나 이상의 실시양태에서, PC는 가역적 경쟁적 억제제일 수 있다.

효소의 "경쟁적 억제제"란 효소 기질의 화학적 구조 및 분자 기하구조와 구조적으로 유사하여 기질과 대략 동일한 위치에서 효소에 결합하는 화합물을 이를 수 있다. 이와 같이, 억제제는 기질 분자와 동일한 활성 부위를 놓고 경쟁함으로써 Km을 증가시킨다. 경쟁적 억제는 억제제를 대치하기에 충분한 기질 분자가 있는 경우에는 대체로 가역적이며, 다시 말해서, 경쟁적 억제제는 가역적으로 결합할 수 있다. 따라서, 효소 억제의 양은 억제제 농도, 기질 농도, 및 활성 부위에 대한 억제제 및 기질의 상대적 친화도에 따라 달라진다.

본 명세서에서, "특이적으로 결합한다"라 함은 약리학적 샤페론과 α-Gal A와 같은 단백질의 상호작용, 구체적으로는 약리학적 샤페론과의 접촉에 직접적으로 관여하는 단백질의 아미노산 잔기와의 상호작용을 이른다. 약리학적 샤페론은 표적 단백질, 예를 들어, α-Gal A에 특이적으로 결합하여 그 단백질에 샤페론 효과를 발휘하며, 관련 또는 비관련 단백질의 총괄적인 군에 샤페론 효과를 나타내는 것이 아니다. 주어진 약리학적 샤페론과 상호작용하는 단백질의 아미노산 잔기는 단백질의 "활성 부위" 내에 있거나 그렇지 않을 수 있다. 특이적 결합은 통상적인 결합 어세이, 또는 예를 들어, 동시-결정화, NMR 등의 구조적 연구를 통해 평가될 수 있다. α-Gal A에 대한 활성 부위는 기질 결합 부위이다.

"결핍된 α-Gal A 활성"이란 환자의 세포 내의 α-Gal A 활성이 파브리병 또는 다른 어떠한 질병 (특히, 혈액 질환)을 갖고 있거나 갖고 있는 것으로 의심되지 않는 정상적인 개인에서의 활성과 (동일한 방법을 사용하여) 비교할 때 정상 범위 미만인 것을 이른다.

본 명세서에서, "α-Gal A 활성을 상승시킨다" 또는 "α-Gal A 활성을 증가시킨다"라고 하는 것은 α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되어 있는 세포 내에서 안정한 구조를 취하는 α-Gal A의 양을, α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되어 있지 않은 세포 (바람직하게는, 예를 들어, 접촉 전의, 동일 유형의 또는 동일한 세포) 내의 양에 비하여 증가시키는 것을 이른다. 이 용어는 또한 α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되어 있는 세포 내에서 α-Gal A의 리소좀으로의 수송을, 그러한 단백질에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되어 있지 않은 경우의 α-Gal A의 수송에 비하여 증가시키는 것을 이른다. 이들 용어는 야생형 및 변이 α-Gal A에 모두에 사용된다. 하나의 실시양태에서, 세포 내 α-Gal A 양의 증가는 PC로 처리한 세포로부터의 용해물 중 인공 기질의 가수분해를 측정하여 측정된다. 가수분해의 증가는 증가된 α-Gal A 활성의 표시이다.

"α-Gal A 활성"은 세포내 야생형 α-Gal A의 정상적인 생리학적 기능을 이른다. 예를 들어, α-Gal A 활성은 GL-3의 가수분해를 포함한다.

"응답자"란 예컨대 파브리병과 같은 리소좀 저장 질환을 갖고 있는 것으로 진단되거나 의심되는 개체로서 PC와의 접촉에 응답하여 그의 세포가 충분히 증가된 α-Gal A 활성, 및/또는 증상의 완화 또는 대체 표지에서의 개선을 나타내는 개체를 이른다. 파브리병에 대한 대체 표지에서의 개선의 비제한적인 예는 lyso-GB3 및 미국 특허출원 공보 US 2010/0113517에 개시된 것들이다.

US 2010/0113517에 개시된 파브리병에 대한 대체 표지에서의 개선의 비제한적인 예는 세포 (예를 들어, 섬유아세포) 및 조직에서 α-Gal A 수준 또는 활성의 증가; GL-3 축적의 감소; 호모시스테인 및 혈관세포 부착분자-1 (VCAM-1)의 혈장 농도 감소; 심근세포 및 혈관 섬유세포 내에서 GL-3 축적 감소; 혈장 글로보트리아오실스핑고신 (lyso-Gb3)의 감소; 심장 비대 (특히 좌심실 비대)의 감소, 심장판막 기능부전 및 부정맥의 완화; 단백뇨의 완화; CTH, 락토실세라미드, 세라미드와 같은 지질의 요중 농도 감소, 및 글루코실세라미드 및 스핑고미엘린의 요중 농도 증가; 사구체 상피세포 내 층을 이룬 봉입체 (제브라 봉입체)의 부재; 신기능의 개선; 발한 감소증의 완화; 각화혈관종의 부재; 고주파수 감음난청, 진행성 난청, 돌발성 난청 또는 이명과 같은 청각 이상의 개선을 포함한다. 신경과적 증상의 개선은 일과성 허혈 발작 (TIA) 또는 뇌졸중의 방지; 및 말단감각이상으로 발현되는 신경성 동통 (극도의 작열감 또는 아린감)의 완화를 포함한다. 파브리병으로 판단될수 있는 다른 유형의 임상적 표지는 유해한 심혈관 증상의 발현이다.

본 명세서에서, "LVMi의 정상화"란 환자의 LVMi를 정상 범위를 초과하는 값에서 정상 범위 내로 감소시키는 것을 이른다. 여성에 있어서 LVMi 정상 범위는 43 내지 95 g/m²이고, 남성에 있어서 LVMi 정상 범위는 49 내지 115 g/m²이다. 따라서, 여성 환자에 있어서의 LVMi 정상화는 LVMi를 95 g/m²를 초과하는 값에서 43 내지 95 g/m²로 감소시키는 것이고, 남성 환자에 있어서의 LVMi 정상화는 LVMi를 115 g/m²를 초과하는 값에서 49 내지 115 g/m²로 감소시키는 것이다.

"제약상 허용되는"이란 인간에 투여시 생리학적으로 허용되고 전형적으로 유해한 반응을 일으키지 않는 분자체 및 조성물을 이른다. 일부 실시양태에서, 본 명세서에서 사용된 바와 같은 "제약상 허용되는"이란 연방정부 또는 주정부의 규제 당국에 의해 승인되거나, 미국 약전 또는 동물, 보다 특히 인간에의 사용에 대해 일반적으로 승인된 기타 약전에 기재된 것을 의미한다. 제약상 담체와 관련하여 "담체"란 화합물과 함께 투여되는 희석제, 보조제, 부형제 또는 비히클을 이른다. 그러한 제약상 담체는 물 및 오일과 같은 멸균 액체일 수 있다. 물 또는 수용액, 생리식염수, 덱스트로스 또는 글리세롤 수용액은, 특히 주사용 용액제에 담체로서 바람직하게 사용된다. 적절한 제약상 담체는 문헌 ("Remington's Pharmaceutical Sciences" by E. W. Martin, 18th Edition 또는 다른 판)에 기재되어 있다.

"효소 대체 요법" 또는 "ERT"는 비-자생 정제 효소를 그러한 효소가 결핍된 개체로 도입하는 것을 이른다. 투여되는 단백질은 천연 공급원으로부터 또는 재조합 발현 (이하 상세히 설명됨)에 의해 얻어질 수 있다. 이 용어는 또한, 예컨대, 효소 부족증으로 인해 정제 효소의 투여가 달리 필요하거나 유익한 개체에 정제 효소를 도입하는 것을 이른다. 도입되는 효소는 시험관내 생산된 정제 재조합 효소, 또는 태반 또는 동물의 젖, 또는 식물과 같은 단리된 조직 또는 액체로부터 정제된 단백질일 수 있다.

본 명세서에서 "단리된"이란 해당 물질이 그것이 정상적으로 존재하는 환경으로부터 회수된 것을 의미한다. 따라서, 단리된 생물학적 물질에는 세포 성분, 즉, 그 물질이 발견되거나 생산되는 세포의 성분들이 없을 수 있다. 핵산 분자의 경우에, 단리된 핵산은 PCR 생성물, 겔 상의 mRNA 밴드, cDNA 또는 제한 단편을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 단리된 핵산은 바람직하게는 그것이 발견될 수 있는 염색체로부터 절제되며, 보다 바람직하게는 염색체에서 발견되었을 때 단리된 핵산 분자에 함유된 유전자의 상류 또는 하류에 위치하는 비-조절, 비-코딩 영역 또는 다른 유전자에 더 이상 연결되어 있지 않다. 또 다른 실시양태에서, 단리된 핵산에는 하나 이상의 인트론이 존재하지 않는다. 단리된 핵산은 플라스미드, 코스미드, 인공 염색체 등으로 삽입된 서열을 포함한다. 따라서, 특정 실시양태에서, 재조합 핵산은 단리된 핵산이다. 단리된 단백질은 세포 내에서 결합되어 있던 것인 다른 단백질 또는 핵산 또는 이들 모두, 또는 막-결합 단백질인 경우에는 세포막과 결합될 수 있다. 단리된 소기관, 세포 또는 조직은 생물체 내 그것이 발견된 해부학적 위치로부터 회수한다. 단리된 물질은 정제될 수 있으나 필수적인 것은 아니다.

"약" 및 "대략"은 일반적으로 주어진 측정 방법의 특성 또는 정확도 측면에서 측정된 양에 대해 허용될 수 있는 오차의 정도를 의미한다. 전형적인 오차 정도의 예는 주어진 수치 또는 수치 범위의 20 퍼센트(%) 이내, 바람직하게는 10% 이내, 보다 바람직하게는 5% 이내이다. 다른 경우에, 특히 생물학적 시스템에서, "약" 및 "대략"은 배수의 범위 내, 바람직하게는 주어진 값의 10- 또는 5-배, 보다 바람직하게는 2-배 이내의 값을 의미할 수 있다. 본 명세서에 주어진 수량은 달리 언급이 없으면 대략적인 것이며, 이는 명확한 언급이 없는 경우에 "약" 또는 "대략"이 추정될 수 있음을 의미한다.

파브리병

파브리병은 희귀하고 진행성인, 치명적 X-연관 리소좀 저장 질환이다. GLA 유전자에서의 변이가 글리코스핑고리피드 대사에 필요한 리소좀 효소인 α-Gal A의 결핍을 초래한다. 낮은 연령에서 시작하여, α-Gal A 활성의 감소는 GL-3 및 혈장 lyso-Gb3를 포함하는 글리코스핑고리피드의 축적을 일으키고, 파브리병의 증상과 수명-제한 후유증에 이르게 하며, 그러한 증상은 통증, 위장관 증상. 신부전, 심근병증, 뇌혈관 사고 및 조기 사망을 포함한다. 치료의 조기 개시 및 평생 치료는 병의 서서한 진행과 기대수명 연장의 기회를 제공한다.

파브리병은 광범위한 질병 심각도 및 발병 연령을 나타내지만, 전통적으로는 "전형" 및 "지연-발병형"의 두 가지 주된 표현형으로 분류된다. 전형적 표현형은 주로 검출이 불가능한 낮은 α-Gal A 활성을 나타내고, 신장, 심장 및/또는 뇌혈관 증상이 조기 발현되는 남성을 이르는 것이었다. 지연-발병 표현형은 주로 보다 높은 잔여 α-Gal A 활성을 나타내고, 이들 병적 증상이 늦게 발현되는 남성을 이르는 것이었다. 이형접합성 여성 보인자는 전형적으로는 지연-발병 표현형을 나타내지만, X-염색체 불활성화 패턴에 따라서 전형적 표현형을 나타낼 수도 있다.

800종류가 넘는 파브리병-유발 GLA 변이가 밝혀졌다. 대략 60%는 미스센스 변이로서 α-Gal A 효소 내 단일 아미노산 치환을 가져온다. 미스센스 GLA 변이는 종종 비정상적으로 폴딩되어 불안정한 형태의 α-Gal A를 생성하며, 대부분은 전형적 표현형과 관련이 있다. 소포체 내의 정상적인 세포 품질 관리 메카니즘은 이들 비정상적 단백질의 리소좀으로의 수송을 차단하고, 조기 분해 및 제거의 대상으로 삼는다. 다수의 미스센스 변이 형태가 α-Gal A-특이적 약리학적 샤페론인 미갈라스타트의 표적이 된다.

파브리병의 임상 증상은 넓은 스펙트럼의 심각도를 나타내며, 개략적으로는 환자의 잔여 α-Gal A 수준과 상관된다. 현재 치료를 받고 있는 환자의 대다수는 전형적 파브리병 환자로 분류되며, 그들 중 대부분이 남성이다. 이들 환자는 신장, 심장 및 뇌를 포함하는 여러 장기의 질병을 경험하고, 질병 증상은 청소년기에 처음으로 나타나서, 전형적으로는 40대 또는 50대에 사망에 이르기까지 중증도가 진행한다. 다수의 최근 연구는 대체로 성인기에 처음으로 나타나는, 손상된 심장 또는 신장 기능 및 뇌졸중과 같은 광범위 파브리병 증후를 나타내는 진단되지 않은 남성 및 여성이 다수 있을 것이라는 것을 시사한다. 지연-발병 파브리병으로 지칭되는 이와 같은 유형의 파브리병이 있는 개인은 전형적 파브리병 환자보다는 높은 잔여 α-Gal A 수준을 갖는 경향이 있다. 지연-발병형 파브리병이 있는 개인은 전형적으로는 질병 증상을 성인기에 처음으로 경험하며, 종종 좌심실 확대 또는 진행성 신장 부전과 같이 단일 장기에 집중된 질병 증상을 갖는다. 또한, 지연-발병형 파브리병은 원인불명의 뇌졸중 형태로도 나타날 수 있다.

파브리병 환자는 진행성 신장 손상을 나타내며, 치료받지 않은 환자는 50대에 이르면 말기 신기능 장애를 나타낸다. α-Gal A 활성의 결핍은 신장 내의 세포를 포함하여 많은 세포 유형에서 GL-3 및 관련 글리코스핑고리피드의 축적을 일으킨다. GL-3는 족세포, 상피세포, 및 원위 세뇨관과 헨레 (Henle) 고리의 세뇨관세포에 축적된다. 신기능의 손상은 단백뇨 및 사구체 여과율 감소로서 나타날 수 있다.

파브리병은 희귀하고, 여러 장기에 관련되며, 발병 연령 범위가 넓고 또한 이질적인 형태로 나타나므로, 적절한 진단은 어려운 과제이다. 건강관리 전문가 사이에서 인식도 낮고, 오진도 빈번하다. 파브리병의 진단은 일단 환자가 증상을 보이면 혈장 또는 말초 혈관 백혈구 (WBC)에서 α-Gal A 활성의 감소에 기초하고, 변이 분석을 병행하여 확정되는 것이 가장 통상적이다. 여성에 있어서는, 보인자의 일부 세포에서 불규칙적인 X-염색체 불활성화에 기인하여 보인자 여성의 효소적 확인의 신뢰도가 떨어지므로 진단이 보다 더 어렵다. 예를 들어, 일부 완전 보인자 (전형적 파브리병 남성의 딸)는 정상 내지 매우 낮은 수준에 이르는 범위의 α-Gal A 효소 활성을 나타낸다. 보인자는 백혈구에서는 정상적인 α-Gal A 효소 활성을 보일 수 있기 때문에, 유전자 시험법에 의한 α-Gal A 변이의 확인만이 정확한 보인자 확인 및/또는 진단을 제공한다.

미갈라스타트에 순응하는 것으로 간주되는 α-Gal A의 변이형은 그것이 굿 래보러토리 프랙티스 (GLP)-검증된 시험관내 어세이 (GLP HEK 또는 미갈라스타트 순응성 어세이)에 따라서 HEK-293 세포에서 발현될 때 ("HEK 어세이"로 지칭), 1.20-배 이상의 상대적 증가 (+10 μM 미갈라스타트) 및 야생형 (WT)의 3.0% 이상의 절대적 증가 (+10 μM 미갈라스타트)를 보이는 것으로 정의된다. 그러한 변이는 또한 본 명세서에서 "HEK 어세이 순응성" 변이라고도 언급된다.

치료 개시 전에 효소 활성 상승을 평가하는 사전 스크리닝법이 제공되어 왔다. 예를 들어, 주어진 변이가 약리학적 샤페론 (예를 들어, 미갈라스타트) 치료에 응답할 것인지를 예측하기 위하여 HEK-293 세포를 사용하는 어세이가 임상 시험에서 이용되어 왔다. 이 어세이에서, cDNA 구조물을 제작한다. 상응하는 α-Gal A 변이형을 HEK-293 세포 내에서 일시적으로 발현시킨다. 이어서, 세포를 미갈라스타트 (17 nM 내지 1 mM)의 존재 또는 부재하에 4 내지 5일 동안 인큐베이션시킨다. 그 후, 세포 용해물 중 α-Gal A 수준을 합성 형광성 기질 (4-MU-α-Gal)을 사용하거나 웨스턴 블롯으로 측정한다. 이 방법은 알려진 질병-유발 미스센스 또는 작은 인-프레임 삽입/결실 변이에 대하여 수행되어 왔다. 이러한 방법을 사용하여 PC (예를 들어, 미갈라스타트)에 응답하는 것으로 이미 확인된 변이는 미국 특허 제8,592,362호에 기재되어 있다.

약리학적 샤페론

리소좀 저장 질환과 관련된 효소의 소분자 억제제의 결합은 변이 효소 및 상응하는 야생형 효소 둘 다의 안정성을 증가시킬 수 있다. 미국 특허 제6,274,597호; 제6,583,158호; 제6,589,964호; 제6,599,919호; 제6,916,829호 및 제7,141,582호를 참조할 수 있으며, 이들 모두가 본 명세서에 원용된다. 특히, 수 종의 표적 리소좀 효소에 대한 특이적, 선택적 경쟁적 억제제인 글루코스 및 갈락토스의 소분자 유도체를 투여하는 것은 시험관 내에서 세포 중 효소의 안정성을 유효하게 증가시켰으며, 따라서 리소좀으로의 효소의 수송을 증가시켰다. 이와 같이, 리소좀 내 효소의 양을 증가시킴으로써 효소 기질의 가수분해는 증가할 것으로 예상된다. 이러한 전략의 배경이 된 원래의 이론은 다음과 같은 것이었다: 변이 효소 단백질이 소포체 내에서 불안정하므로 (Ishii et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 1996; 220: 812-815), 효소 단백질은 정상적인 수송 경로 (소포체→골지체→엔도솜→리소좀)에서 지체되고 조기에 분해된다. 따라서, 변이 효소에 결합하여 안정성을 증가시키는 화합물은 그 효소에 대하여 "샤페론"으로 작용하여 소포체에서 나와서 리소좀으로 이동할 수 있는 효소의 양을 증가시킬 수 있다. 또한, 일부 야생형 단백질의 폴딩 및 수송이 불완전하고, 일부 야생형 단백질의 최대 70%는 세포내 최종 위치에 도달하기 전에 어느 시점에서 분해되므로, 샤페론은 야생형 효소를 안정화시켜 소포체에서 나와서 리소좀으로 수송될 수 있는 효소의 양을 증가시키는데 사용될 수 있다.

하나 이상의 실시양태에서, 약리학적 샤페론은 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함한다. 본 명세서에서, "미갈라스타트"는 (2R,3S,4R,5S)-2-(히드록시메틸)피페리딘-3,4,5-트리올을 이르며, 또한 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 상표명 갈라폴드 (Galafold)^TM로서도 알려져 있다. 또 다른 실시양태에서, 약리학적 샤페론은 미갈라스타트의 염산염을 포함한다. 미갈라스타트는 다음의 구조식을 갖는다:

또는,

본 명세서에서, "유리 염기 당량" 또는 "FBE"는 미갈라스타트 또는 그의 염 중에 존재하는 미갈라스타트의 양을 이른다. 다시 말해서, "FBE"는 미갈라스타트 유리 염기의 양, 또는 미갈라스타트의 염에 의해 제공되는 미갈라스타트 유리 염기에 해당하는 양을 의미한다. 예를 들어, 150 mg의 미갈라스타트 염산염은 염산염의 중량으로 나타낸 것이기 때문에 단지 123 mg의 미갈라스타트를 유리 염기의 형태로 제공한다. 다른 염은 그 염의 분자량에 따라서 상이한 전환 인자를 가지게 될 것이다.

미갈라스타트는 저분자량 이미노당으로서, GL-3의 말단 갈락토스의 유사체이다. 시험관내 및 생체내 약리 연구에서, 미갈라스타트는 약리학적 샤페론으로 작용하여, 야생형 (WT) α-Gal A 및 유전형이 HEK 어세이 순응성 변이인 것으로 간주되는 α-Gal A의 특정 변이형의 활성 부위에 높은 친화도로 선택적, 가역적으로 결합하는 것으로 증명되었다. 미갈라스타트 결합은 소포체 내 이들 α-Gal A 변이형을 안정화시켜, 리소좀으로의 적절한 수송을 촉진하며, 리소좀에서 미갈라스타트가 해리되어 α-Gal A로 하여금 GL-3 및 기타 기질의 수준을 감소시키도록 한다. 파브리병 환자의 대략 30 내지 50%가 HEK 어세이 순응성 변이를 가지며, 변이의 대다수는 질병의 전형적 표현형과 관련이 있다. HEK 어세이 순응성 변이의 목록은 적어도 하기 표 1에 열거된 변이를 포함한다. 하나 이상의 실시양태에서, 이중 변이가 동일 염색체 상에 존재하는 경우 (남성 및 여성에서), 그 환자는 이중 변이가 표 1의 목록 중 하나 (예를 들어, D55V/Q57L)에 존재하면 HEK 어세이 순응성인 것으로 간주된다. 일부 실시양태에서, 이중 변이가 상이한 염색체 상에 존재하는 경우 (여성에서만), 그 환자는 개별 변이 중 어느 하나가 표 1에 존재하면 HEK 어세이 순응성인 것으로 간주된다.

투여량, 제제 및 투여 방식

하나 이상의 실시양태에서, 파브리병 환자에 미갈라스타트 또는 그의 염을 이틀에 1회의 빈도로 ("QOD"라고도 지칭됨) 투여한다. 여러 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 투여량은 미갈라스타트 염산염 또는 동등한 양의 미갈라스타트 또는 염산염이 아닌 그의 다른 염에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 투여량은 미갈라스타트 유리 염기에 관한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 투여량은 미갈라스타트의 염에 관한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 미갈라스타트의 염은 미갈라스타트 염산염이다. 미갈라스타트 또는 그의 염을 투여하는 것을 본 명세서에서는 "미갈라스타트 요법"이라 한다.

150 mg의 미갈라스타트 염산염은 123 mg의 미갈라스타트 유리 염기 형태에 해당한다. 따라서, 하나 이상의 실시양태에서, 투여량은 150 mg의 미갈라스타트 염산염 또는 동등한 양의 미갈라스타트 또는 염산염이 아닌 그의 다른 염을 격일로 1회의 빈도로 투여하는 것이다. 상기 설명된 바와 같이, 이 투여량은 123 mg 미갈라스타트 FBE이다. 또 다른 실시양태에서, 투여량은 150 mg의 미갈라스타트 염산염을 격일로 투여하는 것이다. 다른 실시양태에서, 투여량은 123 mg의 미갈라스타트 유리 염기를 이틀에 1회의 빈도로 투여하는 것이다.

따라서, 여러 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 123 mg 미갈라스타트 FBE를 격일로 투여하는 것, 예를 들어, 150 mg의 미갈라스타트 염산염을 격일로 투여하는 것을 포함한다.

미갈라스타트의 투여는 일정 기간 동안 계속될 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트는 적어도 28일, 예를 들어, 적어도 30, 60 또는 90일, 또는 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 16, 20, 24, 30 또는 36개월, 또는 적어도 1, 2, 3, 4 또는 5년 동안 투여된다. 여러 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 6개월 이상의 장기 미갈라스타트 요법, 예를 들어, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 16, 20, 24, 30 또는 36개월 이상, 또는 1, 2, 3, 4 또는 5년 이상의 장기 요법이다.

본 발명에 따른 미갈라스타트의 투여는 어떠한 투여 경로로나 적절한 제제로 수행될 수 있으나, 바람직하게는 정제, 캡슐제 또는 용액제와 같은 경구 투여형으로 투여된다. 한 예로서, 환자는 각각 150 mg의 미갈라스타트 염산염 또는 동등한 양의 미갈라스타트 또는 염산염이 아닌 그의 다른 염을 함유하는 캡슐을 경구로 투여받는다.

일부 실시양태에서, PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)는 경구로 투여된다. 하나 이상의 실시양태에서, PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)는 주사로 투여된다. PC와 함께 제약상 허용되는 담체가 배합될 수 있으며, 이는 투여 방법에 따라 달라질 수 있다.

본 발명의 하나의 실시양태에서, PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)는 단일요법으로 투여되며, 어떠한 투여 경로로나 적절한 형태로 투여될 수 있으며, 투여 형태는, 예를 들어, 경구 투여를 위한 정제, 캡슐제 또는 액제, 주사용 멸균 수용액제, 또는 투여전 시험관내 효소 응집을 방지하기 위하여 재생 도중 또는 직후에 대체 효소 제제에 가해지는 동결건조 분말제를 포함한다.

PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)가 경구 투여를 위해 제형화될 때, 정제 또는 캡슐제는 통상의 수단으로 제약상 허용되는 부형제와 배합되어 제조될 수 있으며, 부형제는, 예를 들어, 결합제 (예를 들어, 예비젤라틴화 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로오스); 충전제 (예를 들어, 락토스, 미세결정질 셀룰로스 또는 인산수소칼슘); 윤활제 (예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 실리카); 붕해제 (예를 들어, 감자 전분 또는 나트륨 전분 글리콜레이트); 또는 습윤제 (예를 들어, 나트륨 라우릴 술페이트)를 포함한다. 정제는 해당 기술 분야에 잘 알려진 방법으로 코팅될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제는, 예를 들어, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태를 띨 수 있거나, 사용전 물 또는 다른 적절한 비히클로 재생시키기 위한 건조 제제로 제공될 수 있다. 그러한 액상 제제는 통상의 수단으로 제약상 허용되는 첨가제와 배합되어 제조될 수 있으며, 첨가제는, 예를 들어, 현탁화제 (예를 들어, 솔비톨 시럽, 셀룰로스 유도체 또는 식용 수소첨가 지방); 유화제 (예를 들어, 레시틴 또는 아카시아); 비-수성 비히클 (예를 들어, 아몬드 오일, 오일상 에스테르, 에틸 알콜 또는 분별된 식물성 오일); 및 보존제 (예를 들어, 메틸 또는 프로필-p-히드록시벤조에이트 또는 소르브산)을 포함한다. 제제는 또한 적절한 경우 완충염, 향미제, 착색제 및 감미제를 함유할 수 있다. 경구 투여를 위한 제제는 활성 샤페론 화합물의 조절된 방출을 제공하도록 적절히 제형화될 수 있다.

비경구/주사용으로 적절한 PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)의 제제는 일반적으로 (수용성인 경우) 멸균 수용액제, 또는 분산액제 및 멸균 주사 용액제 또는 분산액제의 즉석 제조용 멸균 분말제를 포함한다. 모든 경우에, 제제는 멸균되어야 하며, 시린지에서 용이하게 사용될 수 있는 정도로 유동성을 나타내야 한다. 제제는 제조 및 보관 조건하에 안정하여야 하며, 세균이나 곰팡이 같은 미생물의 오염 작용으로부터 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 폴리에틸렌 글리콜 등), 그들의 적절한 혼합물, 및 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동도는, 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅을 사용하거나, 분산액제의 경우에 필요한 입자 크기를 유지하거나, 계면활성제를 사용하여 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 각종 항세균제 및 항진균제, 예컨대, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 벤질 알콜, 소르브산 등을 사용하여 이루어질 수 있다. 많은 경우에, 당 또는 염화나트륨과 같은 삼투압조절제를 함유하는 것이 바람직하다. 주사용 조성물의 지연 흡수는 조성물에 알루미늄 모노스테아레이트 또는 젤라틴과 같은 흡수 지연제를 사용함으로써 이루어질 수 있다.

멸균 주사용액제는 필요량의 (존재하는 경우) 정제 효소 및 PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)를 적절한 용매 중에, 필요에 따라서는 상기 열거한 다른 각종 성분들과 함께 혼입시킨 다음, 여과 또는 최종 멸균시켜 제조된다. 일반적으로, 분산액제는 각종 멸균 활성 성분을 기초적 분산 매질 및 상기 열거된 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내로 혼입시켜 제조된다. 멸균 주사용액제의 제조를 위한 멸균 분말제의 경우, 바람직한 제조 방법은 활성 성분 및 임의의 바람직한 추가 성분의 분말을 사전 멸균-여과된 용액으로부터 생산해내는 것인 진공 건조법 및 동결 건조법이다.

제제는 부형제를 함유할 수 있다. 제제에 함유될 수 있는 제약상 허용되는 부형제는 완충제, 예를 들어, 시트르산염 완충제, 인산염 완충제, 아세트산염 완충제, 중탄산염 완충제, 아미노산, 우레아, 알콜, 아스코르브산, 포스포리피드; 단백질, 예를 들어, 혈청 알부민, 콜라겐 및 젤라틴; 염, 예를 들어, EDTA 또는 EGTA, 및 염화나트륨; 리포솜; 폴리비닐피롤리돈; 당, 예를 들어, 덱스트란, 만니톨, 솔비톨 및 글리세롤; 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜 (예를 들어, PEG-4000, PEG-6000); 글리세롤; 글리신 또는 다른 아미노산; 및 지질이다. 제제에 사용하기 위한 완충 시스템은 시트르산염, 아세트산염, 중탄산염 및 인산염 완충제를 포함한다. 인산염 완충제는 바람직한 실시양태이다.

샤페론 화합물의 투여 경로는 경구 또는 비경구일 수 있으며, 정맥내, 피하, 동맥내, 복강내, 안내, 근육내, 구강, 직장내, 질내, 안와내, 뇌내, 피내, 두개내, 척수내, 심실내, 척추강내, 뇌조내, 피막내, 폐내, 비내, 경점막, 경피, 또는 흡입에 의한 투여 경로를 포함한다.

샤페론 화합물의 상기 비경구 제제의 투여는 제제를 주기적으로 일시 주입 주사하거나, 외부 (예를 들어, 정맥주사 백) 또는 내부 (예를 들어, 생분해성 이식물)의 저장고로부터 정맥내 또는 복강내 투여하는 것에 의할 수 있다.

약물 제제 및 투여에 관련된 실시양태는 본 발명의 다른 실시양태 어느 것과도 병합될 수 있으며, 예를 들어, 파브리병 환자의 치료 방법, ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자의 치료 방법, ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자의 치료 방법, LVM의 감소 방법, LVMi의 감소 방법, LVMi의 정상화 방법, 족세포 GL-3의 감소 방법, 족세포 부피의 감소 방법, 족세포 내 GL-3 봉입체 부피의 감소 방법, 파브리병을 갖는 것으로 진단되거나 의심되는 환자의 α-Gal A를 상승시키는 방법, α-Gal A에 대한 약리학적 샤페론의 파브리병으로 진단된 환자의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서의 용도, 또는 파브리병으로 진단된 환자의 치료에 사용하기 위한 α-Gal A에 대한 약리학적 샤페론의 용도에 관련된 실시양태 뿐만 아니라 순응성 변이, PC 및 그의 적절한 투여형에 관련된 실시양태와 병합될 수 있다.

하나 이상의 실시양태에서, PC (예를 들어, 미갈라스타트 또는 그의 염)는 ERT와 병행하여 투여된다. ERT는 야생형 또는 생물학적 기능성 효소를 주입에 의해 외부에서 도입시킴으로써 단백질의 양을 증가시킨다. 이러한 요법은 상기 언급된 바와 같이 파브리병과 같은 리소좀 저장 질환을 포함하여 많은 유전적 질환을 위해 개발되어 왔다. 주입 후 외래 효소는 비-특이적 또는 수용체-특이적 메카니즘을 통해 조직에 흡수될 것으로 예측된다. 일반적으로, 흡수 효율은 높지 않고, 외래 단백질의 순환 시간은 짧다. 또한, 외래 단백질은 불안정하고, 급속히 세포내 분해될 뿐만 아니라 후속되는 치료와 유해한 면역 반응을 나타낼 가능성이 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 샤페론은 대체 효소 (예를 들어, 대체 α-Gal A)와 동시에 투여된다. 일부 실시양태에서, 샤페론은 대체 효소 (예를 들어, 대체 α-Gal A)와 함께 제형화된다.

하나 이상의 실시양태에서, 환자는 ERT로부터 미갈라스타트 요법으로 전환된다. 일부 실시양태에서, ERT를 받고 있는 환자가 확인되면, 환자의 ERT는 중단되고, 환자는 미갈라스타트 요법을 받기 시작한다. 미갈라스타트 요법은 본 명세서에 기재된 어느 방법에 따라서나 수행될 수 있다.

좌심실 질량

본 명세서에 기재된 투약 계획은 파브리병 환자에서 LVM 또는 LVMi를 개선시킬 수 있다. 표현형과 무관하게 치료받지 않는 파브리병 환자에서의 LVMi 및 심장 비대의 자연적 이력 (Patel, O'Mahony et al., 2015)은 LVMi에 있어서 +4.07 내지 +8.0 g/m²/년의 점진적 증가이다 (Kampmann, Linhart et al., 2008; Wyatt, Henley et al., 2012; Germain, Weidemann et al., 2013). 치료받지 않는 파브리병 환자는 전형적으로 시간 경과에 따라 LVMi의 증가를 보이므로, LVMi의 감소 및 유지는 모두 미갈라스타트 요법의 유익한 효과의 표시이다. 하기 실시예에 상세히 기재된 바와 같이, 3상 연구는 미갈라스타트 요법이 ERT-치료경험이 있는 환자 및 ERT-치료경험이 없는 환자 모두에서 LVMi를 감소시키며, 기준시에 LVH가 있는 환자에서 LVMi의 감소가 더욱 크다는 것을 밝혀냈다. 이들 3상 연구는 또한 미갈라스타트 요법이 LVH가 있는 일부 환자에서 LVMi를 정상화시킨다는 것을 밝혀냈다. 따라서, 미갈라스타트 요법은 LVH가 있는 환자를 포함하여, ERT-치료경험이 없는 환자 및 ERT-치료경험이 있는 환자에서 LVM을 감소시키고/거나, LVMi를 감소시키고/거나 LVMi를 정상화시킴으로써 파브리병 환자를 치료하는데 사용될 수 있다.

미갈라스타트 요법의 3상 연구는 LVMi를 평가하였으며, 이는 LVM보다 더 정확한 측정 수단으로 여겨진다. 또한, 3상 연구에서, 심장초음파검사를 국소적으로 실시하였으나, 에코카디오그램은 모두 동일한 판독기를 사용하여 중앙에서 판독되었다. 동일한 판독기를 사용하여 에코카디오그램을 중앙에서 판독하는 것은 에코카디오그램을 지역적으로 판독하는 것에 비해 정확도를 개선시킨다.

미갈라스타트 요법은 파브리병 환자에 있어서의 LVMi 증가를 그 환자가 미갈라스타트 요법을 받지 않은 때와 비교하여 감소시킬 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 환자의 LVMi에 있어서 0 g/m² 미만 (즉, 음의 값)의 변화, 예를 들어, 약 -0.5, -1, -1.5, -2, -2.5, -3, -3.5, -4, -4.5, -5, -5.5, -6, -7, -8, -9, -10, -11, -12, -13, -14, -15, -16, -17, -18, -19 또는 -20 g/m²이하의 변화를 제공한다. 달리 말해서, 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 LVMi에 있어서 0 g/m²를 초과하는 감소, 예를 들어, 약 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 g/m²이상의 감소를 제공한다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 g/m² 이상, 예를 들어, 약 6.6 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8 g/m²이상, 예를 들어, 약 8.4 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 0.5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5 또는 4 g/m² 이상, 예를 들어, 약 3.8 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 있고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 있고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 8 또는 9 g/m² 이상, 예를 들어, 약 9 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7 g/m²이상, 예를 들어, 약 7.7 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 18 내지 24개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18 g/m²이상, 예를 들어, 약 18.6 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 또는 17 g/m² 이상, 예를 들어, 약 17 g/m²이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후 약 1 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없고 LVH가 있는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 30 내지 36개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 g/m²이상, 예를 들어, 약 20.8 g/m²이다.

족세포 GL-3 및 족세포 부피

본 명세서에 기재된 투약 계획은 파브리병 환자의 족세포와 관련된 하나 이상의 파라미터를 개선시킬 수 있다. 파브리병 환자에서는 전형적으로 족세포 내에 GL-3가 축적된다. 하기 실시예에 상세히 기재된 바와 같이, 3상 연구는 미갈라스타트 요법이 평균 족세포 부피를 감소시키고, 평균 족세포 GL-3 봉입체 부피를 감소시킨다는 것을 밝혀냈다. 따라서, 미갈라스타트 요법은 족세포 GL-3를 감소시키고/거나, 족세포 부피를 감소시키고/거나, 족세포 내 GL-3 봉입체 부피를 감소시킴으로써 파브리병을 치료하는데 사용될 수 있다.

미갈라스타트 요법의 3상 연구는 두 가지 방법으로 족세포 GL-3를 평가하였다. 첫번째 방법에서, 족세포에 대한 GL-3의 질적 비교를 수행하였으며, 이 연구 시기에는 이용할 수 있는 신뢰성 있는 정량적 접근법이 없었다. 병리의사로 하여금 (치료 내용 및 진료일을 모르게 한 채) 기준시 및 기준시-이후의 생검물의 디지탈 이미지를 나란히 두고 평가하고, 생검물을 족세포 내에 보다 많거나, 보다 적거나 대등한 정도의 GL-3를 함유하는 것으로 분류하게 하였다. 중요한 것은, 보다 많거나 보다 적은 GL-3의 점수를 받으면, 이는 기준시 및 기준시-이후에 GL-3에 있어서 명확한 시각적 변화가 있었음을 의미한다. 3명의 병리의사가 블라인드 방식으로 각 세포 유형에서 한 쌍의 생검물이 "동일한" 수의 GL-3 봉입체를 함유하였는지, 아니면 쌍 중의 하나가 "보다 적거나" 또는 "보다 많은" 수의 봉입체를 함유하였는지를 결정하였다. 두 명의 병리의사가 "보다 적음" 또는 "보다 많음"에 동의한 경우, 동의된 값이 부여되고, 그렇지 않은 경우 "동일"의 표시가 유지된다. 결과를 기준시와 비교하여 GL-3 봉입체의 증가, 감소 또는 변화 없음을 보이는 표본의 퍼센트로서 요약하였다.

두번째 방법에서, 평균 족세포 부피, 족세포 내 GL-3 봉입체의 부피 분율, 및 족세포 당 GL-3 봉입체의 총 부피를 포함하는 구조적 파라미터를 평가하기 위해 입체논리적 원리를 사용한 사후 분석을 수행하였다. 이들 입체논리적 원리는 확률론적 기하구조와 통계학에 기반한 것으로, 편향되지 않고, 효율적이며, 재현가능하도록 설계된 것이다. 체계적이고, 편향되지 않으며, 균일한 무작위 샘플링 방법으로 찍은 사구체 전자현미경 이미지(~30,000 x)를 사용하여 족세포 내 GL-3 봉입체의 부피 분율 (Vv) [Vv(Inc/PC)]을 평가하였다. 적절한 점 밀도를 갖는 격자를 이미지 위에 포개었다. 파라미터는 GL-3 봉입체를 가린 격자점의 수를 사구체 족세포의 세포질을 가린 격자점의 수로 나누어 계산하였다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 파브리병 환자의 족세포 부피를 그 환자가 미갈라스타트 요법으로 치료받지 않았던 때와 비교하여 감소시킬 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 족세포 부피를 약 10% 이상, 예를 들어, 약 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50% 이상 감소시킨다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 10% 이상의 족세포 부피 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50% 이상, 예를 들어, 약 47%이다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 파브리병 환자의 족세포 당 총 GL-3 봉입체 부피를 그 환자가 미갈라스타트 요법으로 치료받지 않았던 때와 비교하여 감소시킬 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 족세포 GL-3 봉입체 부피를 약 10% 이상, 예를 들어, 약 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50% 이상 감소시킨다.

하나 이상의 실시양태에서, 미갈라스타트 요법은 ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후 약 10% 이상의 족세포 당 총 GL-3 봉입체 부피 평균 감소를 제공한다. 여러 실시양태에서, ERT-치료경험이 없는 환자군에서 미갈라스타트 또는 그의 염을 6개월 동안 투여한 후의 평균 감소는 약 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50% 이상, 예를 들어, 약 50%이다.

실시예

실시예 1: ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자를 위한 미갈라스타트 염산염을 사용한 투약 계획

이 실시예는 ERT-치료경험이 없는 파브리병 환자에서 미갈라스타트 요법의 3상 연구를 기재하고 있다.

환자 등록: 등록 가능한 환자는 16 내지 74세로서, 유전적으로 확인된 파브리병이 있고; ERT를 전혀 받은 적이 없거나 ≥ 6개월 에 받은 적이 없고; 등록시에 사용된 인간 배아 신장-293 (HEK) 어세이에 따라 미갈라스타트에 응답하는 변이 단백질을 생산하는 GLA 변이를 가졌으며; eGFR이 30 ml/min/1.73m²을 초과하였으며; 요중 GL-3가 정상치 최고 한계의 4배 이상이었다.

연구 설계: 등록 자격-기준시 평가 후 (2개월), 환자에 무작위로 단계 1 (6개월 동안 이중 블라인드로 150 mg의 미갈라스타트 염산염 또는 위약을 격일로 투여)을 수행하였다. 단계 1을 완수한 모든 환자는 단계 2 (6 내지 12차월) 및 그 후 추가로 1년 (13 내지 24차월) 동안 표지-공개 미갈라스타트 요법을 받을 자격이 되었다. 1차적 목적은 6개월 치료후 간질 모세혈관내 봉입체 수의 조직학적 점수로 평가되는, 신장 GL-3에 관하여 위약에 대한 미갈라스타트의 효과를 비교하는 것이었다. 단계 1의 2차적 목적은 요중 GL-3 수준, 신기능, 24-시간 요단백, 안전성 및 내약성에 관하여 위약에 대한 미갈라스타트의 효과를 비교하는 것이었다. 3차 목적은 심장 기능, 환자-보고 결과, 탐색적 신장 분석 및 백혈구 세포 α-Gal A 활성이었다. 연구 완수자는 이후 최대 5년간의 표지-공개 연장 연구에 등록할 자격이 되었다.

신장 조직 평가: 각 환자에 기준시 신장 생검 및 6차월 및 12차월에 재차 신장 생검을 수행하였다. 각 환자에 대해 기준시, 6차월 및 12차월에서의 신장 간질 모세혈관 당 GL-3 봉입체의 수를 치료와 진료를 비공개로 한 3명의 독립된 병리의사로 하여금 300개의 모세혈관에서 정량적으로 평가하도록 하였다. 주어진 시간에서의 개개의 생검물 각각에 대한 모든 값의 평균을 내어 통계학적으로 분석하였다.

족세포, 내피세포 및 혈관사이세포 내 GL-3 변화, 및 사구체 경화증을 치료와 진료를 비공개로 한 동일한 3명의 병리의사로 하여금 질적으로 평가하도록 하였다.

글로보트리아오실세라미드 및 글로보트리아오실스핑고신: 혈장 lyso-Gb3 및 24-시간 요중 GL-3를 신규의 안정한 동위원소-표지 내부 표준인 13C6-lyso-Gb3 (정량 최저한계: 0.200 ng/mL, 0.254 nmol/L)를 사용하여 액체-크로마토그래피-질량 스펙트럼분석법으로 분석하였다.

신기능 평가: 연간 변화율 (mL/min/1.73m²/년)을 만성신장병역학 공동연구 (Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration)-eGFR_CKD-EPI 및 측정된 이오헥솔 제거-mGFR_iohexol를 사용하여 계산하였다.

심장초음파 검사: LVMi, 좌심실 후측벽 두께, 확장기 심실중격 두께, 확장기 및 기타 파라미터를 비공개, 중앙집중식으로 평가하였다.

환자-보고된 결과: 환자-보고된 결과를 위장관 증상 평가 척도(GSRS), 단축형-36v2TM 및 간이 통증 목록 및 통증 심각도 항목 (Brief-Pain-Inventory-Pain-Severity-Component)으로 평가하였다.

안전성 분석 및 이상반응 사례: 1회 넘게 투약 받은 무작위 선택된 환자를 안전성 분석에 포함시켰으며, 여기에는 활력 징후, 신체 검사, 심전도 검사, 임상 시험 및 이상반응 사례가 포함되었다.

신장 간질 모세혈관 GL-3 기질에 대한 통계적 분석: 1차적 단계 1 (6차월) 평가 변수 (기준시 생검을 한 ITT 집단, n=64)는 미갈라스타트군 및 위약군에서 간질 모세혈관 당 GL-3 봉입체의 50% 이상의 감소를 나타낸 환자의 비율이었다. 다른 두 가지 단계 1 평가 변수 (수정-ITT 집단: 기준시 및 6차월 생검 둘 다를 한 무작위 선택된 환자; n=60)는 간질 모세혈관 당 GL-3 봉입체 퍼센트 변화율, 및 제로 GL-3 봉입체를 나타내는 간질 모세혈관의 퍼센트였다.

간질 모세혈관 당 GL-3 봉입체 및 단계 2 (6 내지 12차월) 및 표지-공개 연장 시험 (12 내지 24차월)의 미리 정해진 다른 평가 변수에 대한 효능 분석은 수정된 치료-의향 집단 (m-ITT: 검증된 어세이에 의해 미갈라스타트 치료에 적절한 것으로 나타난 변이 α-Gal A 효소를 생산하는, 무작위 선택된 환자들로 이루어진 집단; n=50)에 기초하였다.

결과

기준시 특성화: 응답성 변이 α-Gal A를 갖는 67명의 환자 (16 내지 74세; 64%는 여성)를 무작위 선택하였다 (ITT 집단). 표 2는 적절한 변이 α-Gal A를 갖는 ITT 집단 중 50명의 환자에 대한 기준시 특성화 값을 제공한다. 기준시 파라미터에서 통계적으로 유의한 차이는 없었다.

표 2: 기준시 특성화값

파라미터	치료군
파라미터	미갈라스타트 HCl (N=28)	위약→ 미갈라스타트 HCl (N=22)	합계 (N=50)
연령 (년) (n)	28	22	50
평균±표준편차	41.5±13	45.1±8.0	43.1±11
중앙값	37.0	45.5	45.0
체중 (kg) (n)	28	22	50
평균±표준편차	72.6±15.35	76.1±16.52	74.1±15.81
중앙값	72.3	74.0	72.8
파브리병 진단 이후 년수 (n)	28	21	49
평균±표준편차	5.6±6.89	7.3±8.80	6.3±7.73
중앙값	4.1	4.1	4.1
ERT 치료경험이 있는 환자의 수(>기준시 전 6월 ) (%)	4 (14.3%)	7 (31.8%)	11 (22.0%)
기준시에 ACEi/ARB/Ri의 복용	-	-	-
있음 (%)	9 (32.1%)	12 (54.5%)	21 (42.0%)
없음 (%)	19 (67.9%)	10 (45.5%)	29 (58.0%)
단백뇨 >150mg/24h (%)	17 (60.7%)	18 (81.8%)	35 (70.0%)
단백뇨 >300mg/24h (%)	8 (28.6%)	11 (50.0%)	19 (38.0%)
단백뇨 >1000mg/24h (%)	3 (10.7%)	3 (13.6%)	6 (12.0%)
mGFR _Iohexol (mL/min/1.73m ² ) (n)	27	21	48
평균±표준편차	79.95±30.9	83.12±22.8	81.34±27.5
중앙값	84.90	82.20	83.40
eGFR _CKD-EPI (mL/min/1.73m ² )	28	22	50
평균±표준편차	94.4±27.0	90.6±17.1	92.7±23.0
중앙값	96.6	93.5	94.0
Lyso-Gb ₃ (n)	18	13	31
평균 (nmol/L)± 표준편차	47.3±62	41.9±39	45.0±53

적절한 변이를 갖는 환자 (n=50)의 유전형과 관련된 임상적 표현형의 공개된 보고에 따르면, 30명 (60%)은 파브리병의 전형적 표현형과 관련된 변이를 갖고, 1명 (2%)은 비-전형적 표현형과 관련된 변이를 가지며, 3명 (6%)은 양쪽 모두의 표현형과 관련된 변이를 갖고, 16명 (32%)은 아직 분류되지 않았다. 3% 미만의 잔여 WBC α-Gal A 활성이 16명의 남성 중 14명 (87%)에서 나타났으며; 남성 및 여성 31명 중 29명 (94%)은 상승된 혈장 lyso-Gb3을 나타냈으며, 남성 및 여성 50명 중 47명 (94%)은 다중-장기 전신 질환을 나타냈다.

미갈라스타트와 신장 간질 모세혈관 GL-3: 6차월 1차적 결과 분석 (ITT)에서, 미갈라스타트-처리된 환자 32명 중 13명 (41%) 및 위약-처리된 환자 32명 중 9명 (28%)이 응답 (간질 모세혈관 당 GL-3 봉입체에 있어서 50% 이상의 감소)을 나타냈다 (p=0.30). 간질 모세혈관 GL-3에 있어서 기준시로부터의 중앙값 변화는 미갈라스타트-처리군에서 -40.8%, 위약-처리군에서 -5.59%이었다 (p=0.097). 제로 GL-3 봉입체를 나타내는 간질 모세혈관의 퍼센트의 평균 변화 차이는 7.3%로 미갈라스타트-처리군이 우세하였다 (p=0.042).

단계 1 (6차월 사후 분석) 및 단계 2 (12차월 미리 지정된) 분석 (mITT-적합 집단; n=45)에서, 6개월 간의 미갈라스타트 투여는 위약에 비하여 간질 모세혈관 GL-3 (±SEM)에 있어서 상당히 큰 감소와 관련이 있었다: -0.250±0.103 (미갈라스타트) 대 +0.071±0.126 (위약); p=0.008. 6차월에서 간질 모세혈관 GL-3에서의 감소는 추가의 6개월 치료 후에도 안정하게 유지되었다. 간질 모세혈관 GL-3 (±SEM)의 상당한 감소가 6차월에 위약에서 미갈라스타트로 전환한 환자에서 12차월에 관찰되었다 (-0.330±0.152; p=0.014). 검증된 어세이에 따라 미갈라스타트 요법에 적절하지 않은 것으로 판정된 변이 α-Gal A를 갖는 환자는 간질 모세혈관 GL-3에서 어떠한 치료 효과도 나타내지 않았다.

미갈라스타트와 사구체 세포 내 GL-3: 12개월의 미갈라스타트 투여 후 23개의 신장 생검물에 대한 질적 평가에 기초하여, 응답성 변이 α-Gal A를 갖는 환자는 사구체 족세포의 감소 (23개 생검물 중 5개; 22%), 내피 세포의 감소 (23개 생검물 중 6개; 26%), 및 혈관사이세포 GL-3의 감소 (23개 생검물 중 11개; 48%)를 나타냈다. 샘플 중 어느 것도 증가를 나타내지 않았으며, 나머지 샘플은 변화를 나타내지 않았다.

미갈라스타트와 혈장 Lyso-Gb3 수준: 6개월의 미갈라스타트 투여 (mITT-적합)는 위약 투여와 비교하여 혈장 lyso-Gb3 수준에서 상당한 감소와 관련이 있었다 (p=.0033). 혈장 lyso-Gb3는 추가의 6개월 간의 미갈라스타트 투여 후에 더 이상의 감소없이 안정하게 유지되었다. 혈장 lyso-Gb3에 있어서의 상당한 감소가 6차월에서 12차월 사이에 위약에서 미갈라스타트로 전환한 환자 (ITT-적합)에서 나타났다 (p<0.0001). 적절하지 않은 변이 α-Gal A를 갖는 환자에서 혈장 수준은 변화하지 않았다.

미갈라스타트와 요중 GL-3 기질: 적절한 변이 α-Gal A를 갖는 환자에서, 미갈라스타트 및 위약에 대한 (기준시에서 6차월 까지의) 24-시간 요중 GL-3 기질 농도의 평균 변화 (±SEM)는 각각 -361±169 (기준시 555±151) 및 -147±217 (기준시 1017±218) ng/mg 크레아티닌이었다 (p=0.44).

미갈라스타트와 신기능: 기준시에서 6차월 사이의 eGFR_CKD-EPI 또는 mGFR_iohexol변화는 미갈라스타트 및 위약 투약군에서 통계적으로 유의한 차이는 없었다 (mITT-적합).

최대 24개월 동안 미갈라스타트 투여를 계속한 환자 (mITT-적합)에서, eGFR_CKD-EPI및 mGFR_iohexol의 연간 변화 (±SEM)는 각각 -0.30±6.6 및 -1.51±1.33 mL/min/1.73m²이었다. 성별 남성 및 보다 높은 기준시 단백뇨는 보다 높은 연간 변화율 저하와 관련되었다. 24-시간 요중 단백질에 대해서는 처리군 사이에 기준시 수준 또는 기준시로부터의 변화에 통계적으로 유의한 차이는 없었다.

미갈라스타트와 심장초음파 파라미터: 기준시에, 좌심실 질량지수는 처리군 사이에서 대등하였으며, 단계 1에서 유의한 차이는 없었다.

미갈라스타트를 최대 24개월 동안 투여받은 환자 (ITT-적합)에서, 좌심실 질량지수 (LVMi)에 있어서의 통계적으로 유의한 감소가 관찰되었으며 (p<0.05; 95% CI, 0을 포함하지 않음), 전체적으로 기준시에 LV 비대가 있던 환자가 보다 큰 감소를 나타내는 경향이었다. 표 3은 ITT-적합 환자에 있어서 기준시에서 18/24차월 사이의 심장 초음파그래프-유도된 LVMi 변화를 보여준다.

표 3: LVMi 변화 (ITT-적합)

적절한 변이 α-Gal A를 갖는 환자 ¹	기준시 ² 평균±SEM (g/m ² )	기준시에서 18/24차월까지의 변화 ³ 평균±SEM (95% CI)
모든 환자	96.5±5.0 n=44	-7.69±3.7 (-15.4, -0.009)⁴ n=27
기준시에 LVH가 있던 환자	138.9±11 n=11	-18.6±8.3 (-38.2, 1.04) n=8
LVMi, 좌심실 질량지수 (g/m²): 정상: 43-95 (여성), 49-115 (남성); ¹기준시 및 기준시 이후 ECHO가 있고, 미갈라스타트를 18개월 이상 투약받은 환자 포함. ²미갈라스타트로 전환한 위약 환자에 대해서는 6차월이 기준시로 사용됨; 6차월이 없는 경우 기준시 사용. ³18/24차월로 사용된 연장 연구의 기준시. ⁴기준시와는 통계상 유의하게 다름, 95% CI, 0과 중첩되지 않음; p<0.05

심실중격 벽 두께는 기준시 (1.17cm±0.057)로부터 0.061cm±0.051 (5.2%) 감소하였다 (95% CI: -1.67, 0.045); 좌심실 후벽 두께는 최대 24개월 동안 안정하였다. 좌심실 질량지수의 변화는 심실중격 벽 두께 (IVSWT)의 변화와는 상관이 있었으나 (R²=0.26, p=0.006), 좌심실 후벽 두께 변화와는 관련이 없었다 (R²=0.06, p=0.230).

이 연구의 연장 시험에서, LVMi는 30/36차월 미갈라스타트 치료에 걸쳐 계속 감소하였으며, 기준시로부터의 평균 변화는 -17.0 g/m²이었다 ([95% CI -26.2, -7.9]; n=15)]. 기준시에 LVH가 있던 환자 (n=11)에 있어서, 기준시로부터의 변화는 보다 크고 통계적으로 유의하였으며, -20.8 g/m² [-95% CI -57.9, -2.2]이었다. 기준시로부터 미갈라스타트 요법 6/12, 18/24 및 30/36차월 까지의 LVMi 변화가 도 3에 도시되어 있다. 이 연구의 30/36차월 까지의 연장 연구에서, 기준시에 LVH가 있던 환자의 82% (9/11) 및 46% (5/11)가 각각 LVMi의 감소 및 정상화를 나타냈다.

위장관 증상 평가 척도: 위장관 증상은 미갈라스타트-처리된 ITT-적합 환자에서, 5개 영역 중 3개 영역 (설사, 식도 역류, 소화불량)에서 개선을 나타냈으며, 이는 표 4에 나타나 있다.

설사 영역에 있어서는 기준시와 6차월 사이에 (단계 1) 통계적으로 유의한 감소가 있었으며 (p=0.03; ITT-적합); 유의하지 않은 감소도 또한 기준시에 증상이 있던 ITT-적합 환자에서 관찰되었다 (p=0.06). 24개월에 걸친 통계적으로 유의한 변화가 ITT-적합 환자와 기준시에 증상이 있던 ITT-적합 환자에서 관찰되었다 (p<0.05, 95% CI, 0을 포함하지 않음).

식도 역류 영역에서 통계적으로 유의한 개선이 기준시에 증상이 있던 ITT-적합 환자에서 단계 1에서 있었다 (p=0.047). 소화불량 영역에서 24개월에 걸친 통계적으로 유의한 변화가 ITT-적합 환자 및 기준시에 증상이 있던 ITT-적합 환자에 대하여 관찰되었다 (p<0.05, 95% CI, 0을 포함하지 않음). 변비 영역에 있어서 개선의 경향이 있었다.

표 4: 위장관 증상 평가 척도 ¹ 에 있어서의 변화 (ITT-적합)

GSRS 영역	설사		식도 역류		소화불량		변비		복통
처리군	미갈라스타트	위약	미갈라스타트	위약	미갈라스타트	위약	미갈라스타트	위약	미갈라스타트	위약
기준시 평균값 (n)
모든 환자	2.3 (28)	2.1 (22)	1.4 (28)	1.4 (22)	2.5 (28)	2.4 (22)	1.9 (28)	2.0 (22)	2.1 (28)	2.3 (22)
기준시에 증상이있던 환자	3.2 (17)	3.1 (11)	2.1 (10)	2.6 (6)	2.8 (23)	2.7 (19)	2.5 (17)	2.4 (15)	2.4 (22)	2.9 (15)
기준시로부터 6차월까지의 변화 (단계 1, 이중-블라인드)
모든 환자	-0.3*²	+0.2	-0.1	+0.2	-0.1	-0.1	+0.1	+0.2	0.0	0.0
기준시에 증상이있던 환자	-0.6	+0.2	-0.6*³	+0.6	-0.2	-0.2	+0.2	+0.1	-0.1	-0.1
기준시(미갈라스타트) 또는 6차월(위약)에서 24차월(OLE 미갈라스타트 처리)까지의 변화
모든 환자	-0.5 (-0.9, -0.1)*⁴		-0.2 (-0.5, 0.2)		-0.4 (-0.7, -0.04)*⁴		-0.4 (-0.7, +0.0)*⁵		-0.2 (-0.5, +0.1)
기준시에 증상이있던 환자	-1.0 (-1.5, -0.4)*⁴		-0.6 (-1.5, 0.2)		-0.5 (-0.8, -0.06)*⁴		-0.5 (-1.1, +0.0)*⁵		-0.2 (-0.6, 0.1)

*기준치로부터 유의하거나 경계선상 유의한 변화를 나타냄; ¹최소자승은 기준시(BL)로부터의 변화를 의미|² p = 0.03 및 ³ p=0.047 (ANCOVA 사용| ⁴통계적으로 유의하거나 ⁵경향을 보임 (95% CI, 상한계 0).

미갈라스타트와 족세포 GL-3: 미갈라스타트에 순응성인 GLA 변이를 갖는, ERT-치료경험이 없는 남성 파브리병 환자(N=8)로부터, 기준시 및 미갈라스타트 치료 6개월 후에 채취한 신장 생검물 샘플을 마스킹된 비편향 전자현미경 입체학적 방법으로 연구하였다. 모든 환자에 있어서, 족세포 당 GL-3 봉입체 총부피 V(Inc/PC)의 평균±표준편차는 기준시의 2568±1408　μm³에서 미갈라스타트 투여 6개월 후의 1282±792　μm³로 감소하였으며 (p=0.0182), 이는 도 4에 나타나 있다. 따라서, V(Inc/PC)의 감소는 대략 50%였다. 평균 족세포 부피도 기준시의 6680±2835　μm³에서 미갈라스타트 투여 6개월 후의 3525±2084　μm³ (p=0.004)로 상관적인 감소가 있었으며 (r=0.98, p=0.00003), 이는 도 5에 나타나 있다. 따라서, 평균 족세포 부피의 감소는 대략 47%이었다. 이와 같이 밝혀진 결과는 족세포 세포질 수축이 GL-3 소실에 비례하므로, GL-3에 기인한 족세포 세포질 부피 분율은 유의하게 변화한 것이 아니었음을 의미한다. 미갈라스타트 투여 후 족세포 GL-3 부피 감소의 크기는 족돌기 폭의 개선과 관련이 있었으며 (r=0.82, p=0.02), 이는 도 6에 나타나 있다. 평균 혈장 lyso-Gb3도 또한 기준시의 118±48　nM에서 미갈라스타트 투여 6개월 후 75±42　nM로 감소하였으며 (p=0.0004), 이는 도 7에 나타나 있다. 이러한 감소는 족세포 GL-3 부피의 퍼센트 감소율과도 상관이 있었다 (r=0.79, p=0.02). 도 8에 나타낸 바와 같이, 미갈라스타트로 6개월 치료한 후에 족세포 GL-3 부피의 감소와 단백뇨 사이에는 경향성이 있었으나 (r=0.69, p=0.06), 사구체 여과율과는 관련성이 없었다. 이 연구에서, 미갈라스타트 치료는 파브리병 환자에 있어서 족세포 내 GL-3 봉입체의 소실과 관련이 있었다. 사용된 고감도 정량법은 이러한 중요한 세포 유형에 대한 치료 효능을 비교적 단기에 평가할 수 있다. 이 방법은 또한 다른 방법, 예컨대, 이전에 2상 연구에 사용되었던 방법 및 이 실시예 초반에 족세포 GL-3의 질적 평가와 관련하여 기재된 첫번째 방법을 포함하는 다른 방법보다 감도가 높다.

안전성 및 이상반응 사례: 단계 1 도중에, 치료-관련 이상반응 사례는 처리군 사이에 유사하였다. 위약을 투여받는 경우에 비교하여 미갈라스타트를 투여받는 환자에서 더욱 빈도가 높은 이상반응 사례는 두통 (12/34명-35% 대 7/33명-21%) 및 비인두염 (6/34명-18% 대 2/34명 6%)이었다. 가장 빈번하게 보고된 이상반응 사례는 단계 2에서는 두통 (9/63명-14%) 및 절차적 통증 (7/63명-11%-신장 생검과 관련)이었고, 표지-공개 연장 연구에서는, 단백뇨 (9/57명-16%), 두통 (6/57명-11%), 및 기관지염 (6/57명-11%)이었다. 대부분의 이상 증상은 심각도가 경미하거나 중간 정도였다. 어느 이상반응 사례도 미갈라스타트 투여를 중단시키지는 않았다.

단계 1에서는 6명 (2명: 미갈라스타트; 4명: 위약), 단계 2에서는 5명, 표지-공개 연장 연구에서는 11명의 환자가 심각한 이상반응을 경험하였다. 두 가지 심각한 이상반응인 피로 및 감각이상은 조사자에 의해 미갈라스타트와 관련이 있을 수 있는 것으로 평가되었다. 두 증상 모두 동일한 환자에서 12차월 내지 24차월에 일어났으며 해결되었다. > 1명의 환자에서 개개의 심각한 증상이 나타난 사례는 보고되지 않았다. 2명의 환자가 심각한 이상반응으로 미갈라스타트 투약을 중지하였으며, 2명 모두 미갈라스타트와는 무관한 것으로 추정되었다. 사망 사례는 보고되지 않았다.

치료-관련 단백뇨가 9명의 환자 (16%)에서 12차월 내지 24차월 사이에 보고되었으며, 하나의 사례에서, 미갈라스타트와 관련이 있는 것으로 판정되었다. 5명의 환자에서, 24-차월 수치는 기준시 수치와 동일한 범위 내였다. 적절한 변이가 있는 3명의 환자는 명백한 기준시 단백뇨 (>1g/24-h)를 나타냈으며, 이는 24개월에 걸쳐 증가하였다. 기준시 단백뇨가 300 mg/24-h 미만인 28명 중 23명의 환자에 있어서, 24-시간 요단백질은 미갈라스타트 치료 동안 안정하게 유지되었다.

문헌 (Banikazemi et al.)에 정의된 바와 같은 말기 신장 질환으로의 진행, 심장사 및 뇌졸중은 없었다. 일과성 허혈성 발작 사례가 한 건 있었으며, 미갈라스타트와는 관련이 없는 것으로 판정되었다.

활력 징후, 신체 검사, 임상 및 ECG 파라미터의 분석은 미갈라스타트의 어떠한 임상적 관련 효과도 나타내지 않았다.

실시예 2: ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자를 위한 미갈라스타트 염산염을 사용한 투약 계획

이 실시예는 ERT-치료경험이 있는 파브리병 환자에서 미갈라스타트 요법의 3상 연구를 기재하고 있다.

환자 등록: 등록 가능한 환자는 16 내지 74세로서, 유전적으로 확인된 파브리병이 있고; ERT를 12개월 이상 받았고; 등록시에 사용된 인간 배아 신장-293 (HEK) 어세이에 따라 미갈라스타트에 응답하는 변이 단백질을 생산하는 GLA 변이를 가졌으며; eGFR이 30 ml/min/1.73m²이상이었으며; 적어도 3개월 동안 안정적이었던 ERT 투여 수준 및 투약 계획을 가졌다.

연구 설계: 등록 자격-기준시 평가 후, 57명의 환자를 무작위로 추출하여 18개월 동안의 미갈라스타트 요법 또는 ERT, 및 이어지는 12개월의 미갈라스타트 요법을 수행하였다. 미갈라스타트 요법은 150 mg의 미갈라스타트 염산염을 격일로 투여하는 것이었다. 1차적 목적은 18개월 치료후 mGFR_iohexol에 의해 평가되는 신기능에 관해 ERT에 대한 미갈라스타트의 효과를 비교하는 것이었다. 2차적 목적은 신기능 (eGFR 및 24-시간 요중 단백질에 의해 평가); 복합적 임상 결과 (신장, 심장, 뇌혈관 사고 또는 사망에 이르는데 걸리는 시간에 의해 평가); 심기능 (심장 초음파검사에 의해 평가) 및 환자 보고된 결과 (통증 및 삶의 질)에 관해 ERT에 대한 미갈라스타트의 효과를 비교하는 것이었다.

<결과>

미갈라스타트와 심장초음파 파라미터: ERT-치료경험이 있는 환자에 대한 이 연구는 미갈라스타트 요법이 LVMi를 감소시킨다는 것을 밝혀냈다. 18차월에, 기준시로부터의 변화는 미갈라스타트 요법에 있어서 -6.6 g/m² (95% CI -11.0, -2.1; n=31)이고, ERT에 있어서는 -2.0 g/m² (95% CI -11.0, 7.0; n=13)이었다. 기준시에 LVH가 있던 환자에서, 기준시에서 18차월 사이의 LVMi의 변화는 미갈라스타트 요법에 있어서 -8.4 g/m² (95% CI: -15.7, 2.6; n=13)이었고, ERT에 있어서는 4.5 g/m² (95% CI: -10.7, 18.4; n=5)이었다.

미갈라스타트로 치료된 환자는 30차월에서도 계속적으로 LVMi의 감소를 나타냈다 (-3.8 g/m² [95% CI -8.9, 1.3]; n=30). 기준시에 LVH가 있던 환자 (n=13)에서 보다 큰 감소가 관찰되었으며, 미갈라스타트 요법 30개월 후의 기준시로부터의 변화는 -9.0 g/m²이었다. 기준시에 LVH가 있던 환자 중에서, 미갈라스타트 요법 30개월 후에, 85% (11/13명)는 LVMi의 감소를, 31% (4/13명)는 LVMi의 정상화를 나타냈다.

실시예 3: 파브리병 치료를 위한 미갈라스타트 투약 계획의 비교

이 실시예는 파브리병 환자를 위한 미갈라스타트 요법에 관한 일련의 2상 연구를 기재하고 있다.

다양한 투여량 및 투여 지침을 27명의 환자 (남성 18명, 여성 9명)에 대하여 다섯 가지 2상 연구에서 탐구하였다:

● 25, 100 및 250 mg의 미갈라스타트 염산염을 1일 2회 투여 (BID);

● 50 mg의 미갈라스타트 염산염을 1일 1회 투여 (QD);

● 50, 150 및 250 mg의 미갈라스타트 염산염을 격일로 투여 (QOD); 및

● 250 및 500 mg의 미갈라스타트 염산염을 3일-투약 4일-중단 방식으로 투여.

투여량 및 투여 스케쥴의 아홉 가지 상이한 조합 모두가 이들 2상 연구에서 조사되었다. 파브리병은 희귀한 유전적 질병으로서, 희귀 질환에 있어서의 제한된 환자 집단 및 연구 표본 크기로 인하여, 이들 탐구된 투여량 및 투여 지침의 일부는 동일 환자 내에서 또는 환자간에 비교되었으며, 나머지 다른 것들은 연구 간에 비교되었다. 이들 다섯 가지 2상 연구는 미갈라스타트 염산염의 안전성, 약동학 및 약력학을 평가하기 위하여 설계되었으며, 상이한 투여량 및 투여 지침의 효능을 평가하기 위하여 백혈구 (WBC) α-Gal A 활성 및 요중 GL-3 감소의 크기에 초점을 맞추었다. WBC α-Gal A 활성은 상이한 용량의 미갈라스타트 염산염과 관련된 효소 활성 증가의 크기를 재현가능하고 최소한의 방해 요인으로 측정하는 기준을 제공하며, 보다 덜 빈번하게 사용되고, 방해 요인이 있는 피부 및 신장에서의 효소 활성의 측정과 관련이 있다. 요중 GL-3는 작용 경로 메카니즘에서 끝에서 두번째 단계인, 리소좀 내 GL-3 분해의 재현가능하고 최소한으로 방해받는 측정 기준을 제공한다.

이들 2상 연구에서, 150 mg 격일 투여 (QOD)는 미갈라스타트-응답성 변이를 갖는 대상자에서 요중 GL-3의 가장 큰 감소를 나타냈으며, 일반적으로 내약성이 양호하였다. QOD 투약 계획에 대한 요중 GL-3 수준은 도 9 및 도 10에 나타나 있으며, 150 mg QOD 계획에 따르고, HEK-293 세포-기반 어세이에 기초한 순응성 변이를 갖는 8명의 환자는 화살표로 표시되어 있다.

2상 연구 중 하나에서, 환자에 다음과 같은 투약 스케쥴에 따라 미갈라스타트 염산염을 투여하였다: 처음 2주 동안 25 mg BID; 2 내지 4차주 100 mg BID; 4 내지 6차주 200 mg BID; 6 내지 12차주 25 mg BID; 임의의 연장 연구에서 최대 96차주까지 1일 50 mg. 이 연구로부터의 요중 GL-3 결과는 하기 표 5에 나타나 있다.

25, 100 및 250 mg으로 1일 2회 투여는 α-Gal A 활성의 증가를 가져왔다. α-Gal A 활성의 증가는 긍정적 치료 효과 (예를 들어, 효소 기질인 GL-3 축적의 감소)를 나타낼 것으로 예상된다. 예상외로, 상기 표 5는 BID 투약 계획 수행 중인 대상자의 대부분에서 요중 GL-3 증가가 있었음을 보여주는데, 이는 부정적 효과일 수 있음을 시사한다. 요중 GL-3의 이와 같은 증가는 높은 투여 빈도에 기인한 것일 수 있다. 이들 BID 계획 수행 중인 대상자들을 1일 50 mg 투약 계획으로 전환시켰을 때, 일부 환자들은 요중 GL-3의 감소를 나타냈으나, 결과는 모든 환자 사이에서 일관되지는 않았다. 약동학 모델링은 1일 50 mg 투여가 IC₅₀미만 (즉, 억제 미만)에서 노출 저점을 제공할 것으로 나타냈지만, 요중 GL-3는 150 mg QOD에 있어서와 같이 일관되게 감소되지는 않았다. 도 9 및 10과 표 5를 비교하여 알 수 있는 바와 같이, 150 mg QOD가 매일 또는 1일 2회 투여하는 것 보다 요중 GL-3에 있어서 훨씬 크고, 보다 일관된 감소를 제공하였다.

또 다른 연구는 보다 높은 용량의 미갈라스타트를 보다 낮은 빈도로 투여하는 것이 150 mg 격일 투여 계획보다 더 큰 기질 감소를 제공할 수 있는지 그 가능성을 탐구하는 것을 목적으로 하였다. 대상자들을 150 mg 미갈라스타트 염산염 QOD에서, 250 mg 미갈라스타트 염산염을 1일 1회 연속 3일 동안 투여한 후 ("투약"기), 이어서 4일 동안 투여하지 않기 ("중단"기)를 8주간 수행한 다음, 이어서 500 mg으로 (3일 투약, 4일 중단) 적어도 8주 동안 수행하는 계획으로 전환시켰다. 소수의 대상자들이 보다 높은 용량에서 WBC α-Gal A 수준의 증가를 나타냈으나, 일부 대상자들은 또한 요중 GL-3 증가의 징후를 나타냈다. 하기 표 6에 기재되어 있는 바와 같이, 평균 및 중앙값 요중 GL-3 수준은 대상자들이 150 mg QOD에서 250 및 500 mg 3일-투약 4일-중단 계획으로 전환된 후 증가하였다. 평균 및 중앙값 요중 GL-3 수준은 대상자들이 다시 150 mg QOD로 전환되었을 때 하향하였다. 또한, 몇몇 환자들은 보다 높은 용량을 수용하지 못하였다.

이들 연구에 기초하여, 격일제 투약은 매일 또는 1일 2회 투약에서는 나타나지 않는 예상외의 효과를 제공한다. 특히, 격일제 투약은 미갈라스타트-응답성 변이를 갖는 대상자들에서 요중 GL-3의 가장 일관된 감소를 가져왔다. 사실상, 다른 투약 계획의 다수가 요중 GL-3의 증가를 초래하였다. 격일제 투여는 또한 3일-투약 4일-중단 투약 계획보다 요중 GL-3의 보다 일관된 감소를 나타냈으며, 이들 환자의 일부는 또한 3일-투약 4일-중단 투약 기간 중 요중 GL-3의 증가를 보였다. 3일-투약 4일-중단 계획에서 다시 150 mg QOD로 돌아갔을 때 평균 및 중앙값 요중 GL-3 수준이 낮아졌다.

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<110> Amicus Therapeutics, Inc. <120> TREATMENT OF FABRY DISEASE IN ERT-NAIVE AND ERT-EXPERIENCED PATIENTS <130> H19101 <150> US 15/213920 <151> 2016-07-19 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 12436 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 cccttctgta ggggcagaga ggttctactt cattactgcg tctcctggga aggccatcag 60 gactgctggc taaagtggga accaggactc tttgtgagtt aagaatttgt gtatttatat 120 gtgtgttata cacatttttt aaaaaactgt aacgacatca ggttgagcag tcgtctccgg 180 gtggtgaatt atgtgtattt ttaaatttta tactatattg ttatttttca aatgttcgaa 240 attgaatatg tagattgttg ttatcagcag aaaaataaac attattcaaa tactctattc 300 agtaaagtaa tttattgggc gcctttgtca agcacgcatt tgcctagatg tgactctaca 360 gataaaattc acttggggcc tccccttaca gacaatcagg cagtggagac tgagtgcctg 420 aatggataga ccagcactca gaccactatt ttcagtatct gtttttctta actcagggcc 480 gtggttttca aacgtttttc gccttacggt cacccttagg gtcccccgag accggcccag 540 acagacagat atacaaaaac acatacacag tcatgagcgt ccaccatttc cccaccaggc 600 gcagcacagg cggcttcccg gcactgagat gggggggagg 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attgagctga gatcatgcca cctcactcca 11580 gcctgggcaa caaagattcc atctcaaaaa aaaaaaaaaa gccaggcaca gtggctcatg 11640 cctggaatcc cagcactttt ggaagctgag gcaggcagat cacttgaggt taggatttca 11700 agaccagcct ggctaacata gtaaagccct gtctctacta aaaatacaaa aattagccag 11760 gtatggtggc gagcttctgt agccccagct actcaggaga ctgaggcagg agaatcactt 11820 gaacccggga agtggggggg tgcagtgacc caagatcacg ccactgcatt ccagcctggg 11880 caacagagca agactccatc tcaaaaaaaa aagttctatt tccttgaata aaattttccg 11940 aagtttaaac tttaggaata aaactattaa acccgtattt actcatccag atacccaccc 12000 cccttgttga gattctctcc caattatcaa aatgtgtagc atatttaact accaagagct 12060 aaacatcatt aagactgaaa tgtattaaga aggatgtata ggccaggcac ggtgtctcac 12120 gcctgtaatc ccaacacttt gggaggccaa gtcgggcgga tcacgaggtc aggagatgga 12180 gaccatcctg gccaacatgg tgaaaccccc tctctactaa aaatacaaaa attagccagg 12240 caggtggcag gcacctgtaa tcccagctac tccagaggct gaggcaggac aatcacttga 12300 acctgggagg cagaggctgc agtgagctga ggttgtacca attgcactcc agcctaggta 12360 acgagcaaca ctccatctca aaaaaagaaa aaaaaaaaga tgtataattt ggaactgtta 12420 agaggcattt taaaga 12436 <210> 2 <211> 429 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Gln Leu Arg Asn Pro Glu Leu His Leu Gly Cys Ala Leu Ala Leu 1 5 10 15 Arg Phe Leu Ala Leu Val Ser Trp Asp Ile Pro Gly Ala Arg Ala Leu 20 25 30 Asp Asn Gly Leu Ala Arg Thr Pro Thr Met Gly Trp Leu His Trp Glu 35 40 45 Arg Phe Met Cys Asn Leu Asp Cys Gln Glu Glu Pro Asp Ser Cys Ile 50 55 60 Ser Glu Lys Leu Phe Met Glu Met Ala Glu Leu Met Val Ser Glu Gly 65 70 75 80 Trp Lys Asp Ala Gly Tyr Glu Tyr Leu Cys Ile Asp Asp Cys Trp Met 85 90 95 Ala Pro Gln Arg Asp Ser Glu Gly Arg Leu Gln Ala Asp Pro Gln Arg 100 105 110 Phe Pro His Gly Ile Arg Gln Leu Ala Asn Tyr Val His Ser Lys Gly 115 120 125 Leu Lys Leu Gly Ile Tyr Ala Asp Val Gly Asn Lys Thr Cys Ala Gly 130 135 140 Phe Pro Gly Ser Phe Gly Tyr Tyr Asp Ile Asp Ala Gln Thr Phe Ala 145 150 155 160 Asp Trp Gly Val Asp Leu Leu Lys Phe Asp Gly Cys Tyr Cys Asp Ser 165 170 175 Leu Glu Asn Leu Ala Asp Gly Tyr Lys His Met Ser Leu Ala Leu Asn 180 185 190 Arg Thr Gly Arg Ser Ile Val Tyr Ser Cys Glu Trp Pro Leu Tyr Met 195 200 205 Trp Pro Phe Gln Lys Pro Asn Tyr Thr Glu Ile Arg Gln Tyr Cys Asn 210 215 220 His Trp Arg Asn Phe Ala Asp Ile Asp Asp Ser Trp Lys Ser Ile Lys 225 230 235 240 Ser Ile Leu Asp Trp Thr Ser Phe Asn Gln Glu Arg Ile Val Asp Val 245 250 255 Ala Gly Pro Gly Gly Trp Asn Asp Pro Asp Met Leu Val Ile Gly Asn 260 265 270 Phe Gly Leu Ser Trp Asn Gln Gln Val Thr Gln Met Ala Leu Trp Ala 275 280 285 Ile Met Ala Ala Pro Leu Phe Met Ser Asn Asp Leu Arg His Ile Ser 290 295 300 Pro Gln Ala Lys Ala Leu Leu Gln Asp Lys Asp Val Ile Ala Ile Asn 305 310 315 320 Gln Asp Pro Leu Gly Lys Gln Gly Tyr Gln Leu Arg Gln Gly Asp Asn 325 330 335 Phe Glu Val Trp Glu Arg Pro Leu Ser Gly Leu Ala Trp Ala Val Ala 340 345 350 Met Ile Asn Arg Gln Glu Ile Gly Gly Pro Arg Ser Tyr Thr Ile Ala 355 360 365 Val Ala Ser Leu Gly Lys Gly Val Ala Cys Asn Pro Ala Cys Phe Ile 370 375 380 Thr Gln Leu Leu Pro Val Lys Arg Lys Leu Gly Phe Tyr Glu Trp Thr 385 390 395 400 Ser Arg Leu Arg Ser His Ile Asn Pro Thr Gly Thr Val Leu Leu Gln 405 410 415 Leu Glu Asn Thr Met Gln Met Ser Leu Lys Asp Leu Leu 420 425

Claims

효소 대체 요법 (ERT)-치료경험이 있는 파브리병 환자에서 좌심실 질량지수 (LVMi)를 감소시키는데 사용하기 위한 유효량의 미갈라스타트 또는 그의 염을 포함하는 제제로서, 상기 유효량은 123mg 유리 염기 당량 (FBE)이고 환자에 격일로 투여하고, 상기 환자는 A156T, G35R, N215S, P205T, Q279E, R112G, R112H, R301P, R301Q 또는 Y216C로부터 선택된 α-갈락토시다제 A에서의 돌연변이를 갖는 것인 제제.
제1항에 있어서, 상기 제제의 투여를 개시하기 전에 환자는 좌심실비대 (LVH)를 갖는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제제의 투여가 α-갈락토시다제 A 활성을 상승시키는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 유효량이 123mg의 미갈라스타트 유리염기인 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 미갈라스타트 또는 그의 염의 유효량이 150mg의 미갈라스타트 염산염인 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 제제가 경구 투여형을 포함하는 것인 제제.
제6항에 있어서, 경구 투여형이 정제, 캡슐제 또는 용액제를 포함하는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제제가 적어도 18개월 투여되는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제제가 적어도 30개월 투여되는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있는 환자군에게 18개월 상기 제제의 투여 후 5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있는 환자군에게 18개월 상기 제제의 투여 후 6.6 g/m²의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있는 환자군에게 30개월 상기 제제의 투여 후 2 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있는 환자군에게 30개월 상기 제제의 투여 후 3.8 g/m²의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있고 좌심실비대 (LVH)를 갖는 환자군에게 30개월 상기 제제의 투여 후 5 g/m² 이상의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, ERT-치료경험이 있고 좌심실비대 (LVH)를 갖는 환자군에게 30개월 상기 제제의 투여 후 9 g/m²의 LVMi 평균 감소를 나타내는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 제제의 투여를 개시하기 전에 좌심실비대 (LVH)를 갖는 환자에게 상기 제제의 투여시 좌심실 질량지수 (LVMi)를 정상화시키는 것인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 환자는 R112G, N215S 또는 A156T로부터 선택된 α-갈락토시다제 A에서의 돌연변이를 갖는 것인 제제.