KR20220019796A - 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법 - Google Patents

Abstract

신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법이 제공된다. 특정 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물)을 격일마다 1회를 초과하는, 예컨대 4일마다 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 특정 방법은 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3 및/또는 미갈라스타트를 측정하는 단계를 포함한다.

Description

신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법

본 발명의 원리 및 구현예는 일반적으로 파브리 질병의 치료를 위한 약리학적 샤페론의 용도, 특히 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 환자에서의 샤페론의 용도에 대한 것이다.

여러 인간 질병은 그 안정성을 감소시키고 이것이 적절히 폴딩되는 것을 방지할 수 있는 단백질의 아미노산 서열에 변화를 유도하는 돌연변이로 일어난다. 단백질은 일반적으로 소포체, 또는 ER로 알려져 있는 세포의 특정 영역에서 폴딩된다. 세포는 단백질이 일반적으로 단백질 수송으로 언급되는 공정인 ER로부터 세포 내 적절한 목적지로 이동할 수 있기 전에 이의 정확한 3차원 형태로 폴딩되도록 보장하는 품질 제어 기전을 갖는다. 잘못 폴딩된 단백질은 종종 ER에서 최초 보유된 후 품질 제어 기전에 의해 제거된다. 소정 경우에서, 잘못 폴딩된 단백질은 제거되기 전에 ER에 축적될 수 있다. ER 내 잘못 폴딩된 단백질의 보유는 이의 적절한 수송을 방해하고, 생성되는 감소된 생물학적 활성은 손상된 세포 기능 및 궁극적으로 질병으로 이어질 수 있다. 또한, ER 내 잘못 폴딩된 단백질의 축적은 세포 상에서 다양한 유형의 스트레스를 야기할 수 있고, 이는 또한 세포 기능부전 및 질병에 기여할 수 있다.

이러한 돌연변이는 리소좀 저장 장애(LSD)를 야기할 수 있고, 이는 리소좀 효소를 인코딩하는 유전자에서의 돌연변이로 인한 리소좀 효소의 결핍을 특징으로 한다. 생성되는 질병은 지질, 탄수화물 및 다당류를 포함하는 이들 효소 기질의 병리적 축적을 유도한다. 각각의 LSD와 연관된 여러 상이한 돌연변이체 유전형이 존재하지만, 다수의 돌연변이는 덜 안정한 효소의 생성을 야기할 수 있는 미스센스 돌연변이이다. 이들 덜 안정한 효소는 때때로 ER-연관된 분해 경로에 의해 조기 분해된다. 이는 리소좀에서 효소 결핍 및 기질의 병리적 축적을 일으킨다. 이러한 돌연변이체 효소는 때때로 관련 분야에서 "폴딩 돌연변이체" 또는 "입체형태 돌연변이체"로서 언급된다.

파브리 질병은 효소 α-갈락토시다제 A(α-Gal A)를 인코딩하는 GLA 유전자에 대한 돌연변이에 의해 유도되는 LSD이다. α-Gal A는 글리코스핑고지질 대사를 위해 요구된다. 이 돌연변이는 기질 글로보트리아오실세라마이드(Gb3, GL-3, 또는 세라마이드 트리헥소사이드)가 다양한 조직 및 기관에서 축적되도록 유도한다. 질병 유전자가 X 염색체 상에서 인코딩되므로 파브리 질병을 갖는 남성은 반접합체이다. 파브리 질병은 40,000명 내지 60,000명의 남성 중 1명에 영향을 미치는 것으로 추산되며, 여성에서는 덜 빈번하게 일어난다.

파브리 질병의 치료에 대한 몇몇 접근법이 존재해왔다. 파브리 질병을 치료하기 위한 하나의 승인된 치료법은 효소 대체 치료법(ERT)으로, 여기에는 전형적으로 정제된 형태의 대응 야생형 단백질(Fabrazyme®, Genzyme Corp.)의 정맥내, 주입이 수반된다. 그러나 ERT는 몇몇 단점을 갖는다. 효소 대체 치료법으로의 주요 합병증 중 하나는 주입된 단백질의 신속한 분해로, 이는 여러 고가의 고용량 주입에 대한 필요성을 야기한다. ERT는 적절히 폴딩된 단백질의 대규모 생성, 정제 및 보관의 어려움; 글리코실화된 원상태 단백질의 수득; 항-단백질 면역 반응 생성; 및 중추 신경계 병리를 경감시키기 위한 단백질의 혈액-뇌 장벽의 통과 불능(즉, 낮은 생체이용률)과 같은 몇몇 추가 위험부담을 갖는다. 또한, 대체 효소는 파브리 병리에서 현저히 나타나는, 신장 발세포 또는 심장 근세포에서의 기질 축적을 감소시키기 위한 충분한 양으로 심장 또는 신장에 침투할 수 없다.

일부 효소 결핍을 치료하기 위한 또 다른 접근법에는 결핍 효소 단백질의 천연 기질 생성을 감소시켜 병리를 완화시키기 위한 소분자 억제제의 사용이 관여된다. 상기 "기질 감소" 접근법은 글리코스핑고지질 저장 장애를 포함하는 리소좀 저장 장애라는 이름의 약 40 종의 관련된 효소 장애 클래스에 대해 구체적으로 기술되었다. 치료법으로 사용하기 위해 제안된 소분자 억제제는 당지질의 합성에 관여되는 효소의 억제에 특이적으로, 결핍 효소에 의해 분해될 필요가 있는 세포 당지질의 양을 감소시킨다.

파브리 질병을 치료하는 세 번째 접근법은 약리학적 샤페론(PC)으로 불리는 치료였다. 이러한 PC에는 α-Gal A의 소분자 억제제가 포함되며, 이는 α-Gal A에 결합하여 돌연변이체 효소 및 대응 야생형 둘 모두의 안정성을 증가시킬 수 있다.

현재 치료의 하나의 문제는 파브리 환자에서 매우 일반적이며 질병과 함께 진행되는, 신장 손상을 나타내는 환자를 치료하는 데 있어서의 어려움이다. 평균적으로, 환자가 정상 신장 기능에서 중증 신상 손상으로 감퇴하기까지 약 10년 내지 20년이 소요되며, 일부 국가에서는 더 빠른 감퇴를 보고하고 있다. 일부 추정치에 따르면, ERT를 수여받는 환자의 약 10%가 중등도 신장 손상을 가질 수 있다. 또한 ERT를 수여받는 남성의 25% 및 여성의 5%는 중증 신장 손상 또는 심지어 신장 부전에 해당하는 30 미만의 추정 사구체 여과율(eGFR)을 갖는다. 이들 중, 약 절반이 중증 신장 손상을 가지며, 약 절반은 투석을 받고 있다.

불행하게도, 신장 손상은 ERT 치료에도 불구하고 진행될 것이다. eGFR가 30인 환자는 2년 내지 5년 내에 투석을 필요로 하는 정도까지 악화될 수 있다. ERT를 수여받는 환자의 약 30%는 ERT 시작 시점에 따라, 투석을 받거나 신장 이식을 필요로 하는 것까지 도달할 것이다. ERT가 빨리 개시될수록, 신장 기능이 오래 보존될 수 있지만, 파브리 질병이 드물고 종종 오진되기 때문에 ERT의 개시는 지연될 수 있다.

또한, 그리고 상기 논의된 바와 같이, ERT는 종종 기질 축적을 감소시키기 위해 신장을 충분히 투과하지 못하며, 이에 따라 질병 진행 동안 추가 손상을 허용한다. PC 치료에 있어서, 신장은 종종 약물이 신체로부터 제거되는 방식이며, 신장 손상은 약물 약동학 및/또는 약물 약력학에 영향을 줄 수 있다. 따라서, 신장 손상을 갖는 파브리 환자의 치료에 대한 필요성이 여전히 존재한다.

개요

본 발명의 일 양태는 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법에 관한 것이며, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물(FBE)을 격일마다 1회 미만의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는다. 일부 구현예에서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태이다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는다. 일부 구현예에서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 경구 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 28일 동안 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 6개월 동안 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 12개월 동안 투여된다.

본 발명의 제2 양태는 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법에 관한 것이며, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는다. 일부 구현예에서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태이다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는다. 일부 구현예에서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 경구 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 28일 동안 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 6개월 동안 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 12개월 동안 투여된다.

본 발명의 제3 양태는 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법에 관한 것이며, 방법은 제1 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일마다 1회의 제1 빈도로 투여하는 단계; 및 제2 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일 미만의 제2 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도는 3일마다 1회 내지 7일마다 1회의 범위이다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도는 4일마다 1회이다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도는 7일마다 1회이다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도로의 투여는 환자의 eGFR 감소 후에 시작된다. 하나 이상의 구현예에서, eGFR 감소는 30 mL/min/1.73 m² 이상으로부터 30 mL/min/1.73 m² 미만으로, 즉 경도 또는 중등도 신장 손상으로부터 중증 신장 손상으로의 환자의 신장 기능 감소이다.

일부 구현예에서, 방법은 다음을 추가로 포함한다:

(a) 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소(lyso)-Gb3를 측정하는 단계;

(b) 제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

(c) 제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및

(d) (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.

하나 이상의 구현예에서, 방법은 다음을 추가로 포함한다:

(a) 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;

(b) 제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

(c) 제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및

(d) (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.

일부 구현예에서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM이다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트를 측정하는 것은 미갈라스타트 농도를 측정하는 것을 포함하며, 제2 빈도로의 투여는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정된 후에 시작된다. 일부 구현예에서, 미갈라스타트를 측정하는 것은 AUC_0-∞ 또는 C_trough를 측정하는 것을 포함하고, 제2 빈도로의 투여는 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 2배 초과하는 증가가 있은 후에 시작된다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도는 4일마다 1회이고, 방법은 제3 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 제3 빈도로 투여하는 단계를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 방법은 다음을 추가로 포함한다:

(a) 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;

(b) 제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

(c) 제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계;

(d) (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 96시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 빈도로 투여를 시작하는 단계;

(e) 제2 기간 동안 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계; 및

(f) (i) 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제2 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제2 기간 동안의 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제3 빈도로 투여를 시작하는 단계.

하나 이상의 구현예에서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM이다. 일부 구현예에서, 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 측정된다. 하나 이상의 구현예에서, 제2 빈도는 7일마다 1회이다.

일부 구현예에서, 방법은 다음을 추가로 포함한다:

(a) 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;

(b) 제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

(c) 제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및

(d) (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.

하나 이상의 구현예에서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM이다. 일부 구현예에서, 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 측정된다.

하나 이상의 구현예에서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는다. 일부 구현예에서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태이다. 일부 구현예에서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는다. 일부 구현예에서, 미갈라스타트는 경구 투여된다.

본 발명의 다른 양태는 신장 손상을 갖는 환자의 파브리 질병 치료에서의 미갈라스타트의 용도에 관한 것으로서, 여기서 미갈라스타트는 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE 양으로 신장 손상을 갖는 파브리 질병 환자에게 4일 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, 빈도는 4일마다 1회이다. 일부 구현예에서, 빈도는 7일마다 1회이다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는다. 일부 구현예에서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태이다. 일부 구현예에서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는다. 일부 구현예에서, 미갈라스타트는 경구 투여된다.

다양한 구현예가 아래에 기재된다. 아래에 기재된 구현예는 아래에 기재된 바와 같이 뿐만 아니라, 본 발명의 범위에 따른 다른 적합한 조합으로 조합될 수 있음이 이해될 것이다.

도 1a는 CL_CR의 함수로서의 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자의 미갈라스타트 혈장 농도를 나타낸다;
도 1b는 투여-후 시간의 함수로서의 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자의 미갈라스타트 혈장 농도를 나타낸다;
도 1c는 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자의 미갈라스타트 곡선 하 면적(AUC)을 나타낸다;
도 2a 내지 도 2d는 다양한 투약 요법 및 신장 손상 정도에 대한 시간의 함수로서의 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 3a 내지 도 3b는 다양한 투약 요법에 대한 축적 비율 및 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 4는 함수로서 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자에서의 미갈라스타트 AUC_0-∞ 및 48시간 후 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 5는 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자 및 신장 손상을 갖는 2명의 파브리 환자의 eGFR_MDRD 함수로서 48시간 후 혈장 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 6은 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자 및 신장 손상을 갖는 2명의 파브리 환자에 대한 혈장 미갈라스타트 AUC_0-∞를 나타낸다;
도 7a 내지 도 7d는 정상, 중증, 경도 및 중등도 신장 손상 대상체 각각에서의 시간 대비 시뮬레이션된 중앙값 및 관찰된 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 8a 내지 도 8d는 정상, 경도, 중등도 및 중증 신장 손상 대상체에 대한 미갈라스타트 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 각각 나타낸다;
도 9a 내지 도 9d는 정상, 중증, 경도 및 중등도 신장 손상 대상체 각각에 대한 QOD에 있어서의 항정 상태 예측을 나타낸다;
도 10a 내지 도 10d는 정상, 경도, 중등도 및 중증 신장 손상 대상체에 대한 미갈라스타트 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 각각 나타낸다;
도 11의 a는 중등도의 신장 손상을 갖는 환자에서 96시간에 걸친 100 mg 미갈라스타트 투여 후 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 11의 b는 정상 신장 기능을 갖는 환자에서 48시간에 걸친 150 mg 미갈라스타트 투여 후 미갈라스타트 농도를 나타낸다;
도 12a 내지 도 12d는 정상 및 중등도 신장 손상 대상체에 대한, 각각, 미갈라스타트 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 나타낸다;
도 13a 내지 도 13e는 인간 야생형 GLA 유전자의 전체 DNA 서열(SEQ ID NO: 1)을 나타낸다;
도 14는 야생형 GLA 단백질(SEQ ID NO: 2)을 나타낸다; 및
도 15는 시간 경과에 따른 환자 P3의 리소-Gb3 및 eGFR을 나타낸다.

본 발명의 몇몇 예시적인 구현예를 기재하기 전에, 본 발명이 하기 설명에 나타낸 구성 또는 공정 단계의 상세사항에 제한되지 않음이 이해되어야 한다. 본 발명은 다른 구현예가 가능하며, 다양한 방식으로 실시되거나 수행될 수 있다.

본 발명의 다양한 양태는 신장 손상을 갖는 파브리 환자에 대한 미갈라스타트 또는 이의 염의 특정 투약 요법에 관한 것이다. 미갈라스타트는 파브리 질병의 치료에 사용되는 약리학적 샤페론이다. 상기 약리학적 샤페론은 보통 신장에 의해 신체로부터 제거된다. 그러나, 신장 손상을 갖는 환자(파브리 환자에 있어서 일반적인 문제)는 신체로부터 미갈라스타트를 제거하지 못할 수 있고, 파브리 질병 및 신장 손상을 모두 갖는 환자가 어떻게 미갈라스타트 치료법에 반응할지는 이전에 알려지지 않았다. 약리학적 샤페론은 또한 억제제이므로, 미갈라스타트와 같은 약리학적 샤페론의 효소-증강 및 억제 효과를 균형잡는 것은 매우 어렵다. 또한, 파브리 질병 및 신장 기능 간 복잡한 상호작용, 및 약리학적 샤페론의 역할에 대한 지식의 부족으로 인해, 신장 손상을 갖는 파브리 환자에 대한 미갈라스타트 투약은 유의미한 임상 데이터 및/또는 컴퓨터 모델링 없이 확인하기 어렵다.

따라서, 본 발명의 일 양태는 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법에 관한 것이다. 예시적인 구현예에서, 방법은 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일마다 미갈라스타트 또는 이의 염을 투여하는 단계를 포함한다. 4일 또는 7일마다 투여하는 것에 대해 구체적 언급이 되어 있지만, 본원에 개시된 방법 및 용도는, 예를 들어 환자의 신장 상태에 기초하여, 3일, 5일 또는 6일마다와 같은, 다른 간헐적 투약 요법을 이용하여 또한 사용될 수 있다.

하나 이상의 구현예에서, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 4일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 제1 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 4일마다 1회의 빈도로 투여한 후 제2 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함한다. 환자는 경도, 중등도 또는 중증의 신장 손상을 가질 수 있다.

본 발명의 다른 양태는 신장 손상을 갖는 환자의 파브리 질병 치료에서의 미갈라스타트의 용도에 관한 것으로서, 여기서 미갈라스타트는 신장 손상을 갖는 파브리 질병 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE 양으로 4일 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여된다. 환자는 경도, 중등도 또는 중증의 신장 손상을 가질 수 있다. 하나 이상의 구현예에서, 환자는 중등도 또는 중증의 신장 손상을 갖는다. 구체적인 구현예에서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는다. 다른 구체적인 구현예에서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는다.

정의

본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명의 맥락 내에서 그리고 각각의 용어가 사용되는 특정한 맥락에서, 일반적으로 당분야에서의 이의 일반적 의미를 갖는다. 소정 용어는 아래에서 또는 명세서 내 다른 곳에서 논의되어 실시자에게 본 발명의 조성물 및 방법을 설명하고 이를 어떻게 제조하고 사용하는지에 대한 추가 지침을 제공한다.

용어 "파브리 질병"은 결핍 리소좀 α-갈락토시다제 A 활성으로 인한 글리코스핑고지질 이화작용의 X-연관 선천성 오류를 나타낸다. 상기 결함은 심장, 신장, 피부 및 다른 조직의 혈관 내피 리소좀에서 글로보트리아오실세라마이드(세라마이드 트리헥소사이드) 및 관련 글리코스핑고지질의 축적을 유도한다.

용어 "비정형 파브리 질병"은 주로 α-Gal A 결핍의 심장 징후, 즉 심장, 특히 좌심실의 유의미한 비대로 이어지는 심근 세포에서의 진행성 글로보트리아오실세라마이드(GL-3) 축적을 갖는, 환자를 지칭한다.

"보인자"는 결함 α-Gal A 유전자를 갖는 하나의 X 염색체 및 정상 유전자를 갖는 하나의 X 염색체를 가지며, 그에서의 정상 대립유전자의 X 염색체 불활성화가 하나 이상의 세포 유형에 존재하는 여성이다. 보인자는 종종 파브리 질병으로 진단된다.

"환자"는 특정 질병으로 진단된 또는 이를 갖는 것으로 추정되는 대상체를 나타낸다. 환자는 인간 또는 동물일 수 있다.

"파브리 질병 환자"는 파브리 질병으로 진단되거나 이를 갖는 것으로 추정되며 아래에 추가 정의된 바와 같은 돌연변이된 α-Gal A를 갖는 개체를 나타낸다. 파브리 질병의 특징적 마커는 남성 반접합체 및 여성 보인자에서 동일한 유병률로 일어날 수 있지만, 여성이 전형적으로 덜 심하게 영향받는다.

인간 α-갈락토시다제 A(α-Gal A)는 인간 GLA 유전자에 의해 인코딩되는 효소를 나타낸다. 인트론 및 엑손을 포함하는, α-Gal A의 전장 DNA 서열은 GenBank Accession No. X14448.1에서 이용 가능하며 SEQ ID NO: 1 및 도 13a 내지 13e에 나타낸다. 인간 α-Gal A 효소는 429개 아미노산으로 구성되며 GenBank Accession No. X14448.1 및 U78027.1에서 이용 가능하고 SEQ ID NO: 2 및 도 14에 나타낸다.

용어 "돌연변이체 단백질"에는 통상 ER에 존재하는 조건 하에서 단백질의 안정한 입체형태의 달성 불능을 일으키는 단백질을 인코딩하는 유전자에 돌연변이를 갖는 단백질이 포함된다. 안정한 입체형태의 달성 실패는 상당한 양의 효소가 리소좀으로 수송되기보다는 분해되도록 한다. 이러한 돌연변이는 때때로 "입체형태 돌연변이체"로 불린다. 이러한 돌연변이에는 비제한적으로 미스센스 돌연변이 및 프레임-내 소규모 결실 및 삽입이 포함된다.

하나의 구현예에서 본원에서 사용되는 용어 "돌연변이체 α-Gal A"에는 통상 ER에 존재하는 조건 하에 효소의 안정한 입체형태의 달성 불능을 일으키는 α-Gal A를 인코딩하는 유전자에 돌연변이를 갖는 α-Gal A가 포함된다. 안정한 입체형태의 달성 실패는 상당한 양의 효소가 리소좀으로 수송되기보다는 분해되도록 한다.

본원에서 사용되는 용어 "특이적인 약리학적 샤페론"("SPC") 또는 "약리학적 샤페론"("PC")은 단백질에 특이적으로 결합하며 다음 효과 중 하나 이상을 갖는 소분자, 단백질, 펩타이드, 핵산, 탄수화물 등을 포함하는 임의의 분자를 나타낸다: (i) 단백질의 안정한 분자 입체형태의 형성을 증강시킴; (ii) ER로부터 또 다른 세포 위치, 바람직하게는 원상태 세포 위치로의 단백질 수송을 유도함, 즉 단백질의 ER-연관 분해를 방지함; (iii) 잘못 폴딩된 단백질의 응집을 방지함; 및/또는 (iv) 단백질에 적어도 부분적인 야생형 기능 및/또는 활성을 복원하거나 증강시킴. 예를 들어, α-Gal A에 특이적으로 결합하는 화합물은 이것이 효소에 결합하며 관련 또는 미관련 효소의 일반 그룹에서가 아니라 효소 상에서 샤페론 효과를 발휘함을 의미한다. 보다 구체적으로, 상기 용어는 내인성 샤페론, 예를 들어 BiP 또는 다양한 단백질, 예를 들어 글리세롤, DMSO 또는 중수소화수에 대해 비-특이적 샤페론 활성을 실증한 비-특이적 제제, 즉 화학적 샤페론을 나타내지 않는다. 본 발명의 하나 이상의 구현예에서, PC는 가역적인 경쟁적 억제제일 수 있다.

효소의 "경쟁적 억제제"는 기질과 대략 동일한 위치에서 효소에 결합하기 위해 효소 기질의 화학적 구조 및 분자 기하구조와 구조적으로 유사한 화합물을 나타낼 수 있다. 따라서, 억제제는 기질 분자와 동일한 활성 부위에 대해 경쟁하여, Km을 증가시킨다. 경쟁적 억제는 충분한 기질 분자가 억제제를 변위하기 위해 이용 가능한 경우, 즉 경쟁적 억제제가 가역적으로 결합할 수 있는 경우 통상 가역적이다. 따라서, 효소 억제량은 억제제 농도, 기질 농도, 및 활성 부위에 대한 억제제 및 기질의 상대 친화도에 의존한다.

본원에서 사용되는 용어 "특이적으로 결합하는"은 약리학적 샤페론과 단백질, 예를 들어 α-Gal A의 상호작용, 구체적으로 약리학적 샤페론과의 접촉에 직접 참여하는 단백질의 아미노산 잔기와의 상호작용을 나타낸다. 약리학적 샤페론은 표적 단백질, 예를 들어 α-Gal A에 특이적으로 결합하여, 관련 또는 미관련 단백질의 일반 그룹이 아니라 단백질 상에서 샤페론 효과를 발휘한다. 임의의 주어진 약리학적 샤페론과 상호작용하는 단백질의 아미노산 잔기는 단백질의 "활성 부위" 내에 있을 수도 있거나 없을 수도 있다. 특이적 결합은 일상적인 결합 검정을 통해 또는 구조 연구, 예를 들어 공동-결정화, NMR 등을 통해 평가될 수 있다. α-Gal A에 대한 활성 부위는 기질 결합 부위이다.

"결핍 α-Gal A 활성"은 파브리 또는 임의의 다른 질병(특히 혈액 질병)을 갖지 않거나 갖는 것으로 추정되는 정상 개체에서의 활성에 비해(동일한 방법을 사용하여) 정상 범위 미만인 환자로부터의 세포 내 α-Gal A 활성을 나타낸다.

본원에서 사용되는 용어 "α-Gal A 활성을 증강시키는" 또는 "α-Gal A 활성을 증가시키는"은 α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되지 않은 세포에서의 양(바람직하게는 동일한 세포-유형 또는 동일한 세포의, 예를 들어, 더 이른 시기의 양)에 비해, α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉된 세포에서 안정한 입체형태를 채택하는 α-Gal A의 양 증가를 나타낸다. 상기 용어는 또한 단백질에 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉되지 않은 α-Gal A의 수송에 비해, α-Gal A에 대해 특이적인 약리학적 샤페론과 접촉된 세포에서 리소좀으로의 α-Gal A의 수송 증가를 나타낸다. 이들 용어는 야생형 및 돌연변이체 α-Gal A 둘 모두를 나타낸다. 하나의 구현예에서, 세포 내 α-Gal A의 양 증가는 PC로 처리된 세포로부터 용해액 중 인공 지질의 가수분해를 측정함으로써 측정된다. 가수분해의 증가는 증가된 α-Gal A 활성을 시사한다.

용어 "α-Gal A 활성"은 세포에서 야생형 α-Gal A의 정상적인 생리적 기능을 나타낸다. 예를 들어, α-Gal A 활성에는 GL-3의 가수분해가 포함된다.

"반응체"는 리소좀 저장 질병, 예를 들어 파브리 질병으로 진단된 또는 이를 갖는 것으로 추정되는 개체이며, 그 세포는 PC와의 접촉에 반응하여 각각 충분히 증가된 α-Gal A 활성 및/또는 증상의 완화 또는 대리 마커의 개선을 나타낸다. 파브리에 대한 대리 마커 개선의 비제한적 예는 리소-GB3 및 본원에 그 전문이 참조로 포함되는 미국 특허 공개 제US 2010-0113517호에 개시된 것들이다.

US 2010/0113517에 개시된 파브리 질병에 대한 대리 마커 개선의 비제한적 예에는 세포(예를 들어, 섬유아세포) 및 조직 내 α-Gal A 수준 또는 활성의 증가; GL-3 축적 감소; 호모시스테인 및 VCAM-1(혈관 세포 접착 분자-1)의 감소된 혈장 농도; 심근 세포 및 판막 섬유세포 내 감소된 GL-3의 축적; 혈장 글로보트리아오실스핑고신(리소-Gb₃)의 감소; 심장 비대(특히 좌심실)의 감소, 판막 기능부전 및 부정맥의 완화; 단백뇨의 완화; 지질, 예를 들어 CTH, 락토실세라마이드, 세라마이드의 감소된 소변 농도 및 글루코실세라마이드 및 스핑고미엘린의 증가된 소변 농도; 사구체 상피 세포 내 라미네이트된 봉입체(제브라 바디)의 부재; 신장 기능의 개선; 땀감소증의 경감; 혈관각화종의 부재; 및 청각 이상, 예를 들어 고주파수 감각신경 청각 손실 진행성 청각 손실, 돌발 난청 또는 이명의 개선이 포함된다. 신경학적 증상 개선에는 일시적 허혈성 발작(TIA) 또는 뇌졸중의 방지; 및 말단감각이상(화상 또는 사지 저림)으로서 자체 발현되는 신경병 통증의 완화가 포함된다. 파브리 질병에 대해 평가될 수 있는 또 다른 유형의 임상 마커는 유해한 심혈관 발현의 유병률이다. 파브리 질병의 일반적인 심장-관련 징후 및 증상에는 좌심실 비대, 판막 질병(특히 승모판 탈출증 및/또는 역류), 조기 관상 동맥 질병, 협심증, 심근 경색, 전도 이상, 부정맥, 울혈성 심부전이 포함된다.

어구 "약학적으로 허용 가능한"은 인간에게 투여되는 경우 생리적으로 관용 가능하며 전형적으로 원치 않는 반응을 생성하지 않는 분자적 실체 및 조성물을 나타낸다. 일부 구현예에서, 본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용 가능한"은 동물, 보다 구체적으로 인간에서의 사용을 위해 연방 정부 또는 주 정부의 규제 당국에 의해 승인되거나 U.S. 약전 또는 다른 일반적으로 인식되는 약전에 등재됨을 의미한다. 약학적 담체에 대한 용어 "담체"는 화합물과 함께 투여되는 희석제, 애쥬번트, 부형제 또는 비히클을 나타낸다. 이러한 약학적 담체는 멸균 액체, 예를 들어 물 및 오일일 수 있다. 물 또는 수용액 염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 특히, 주사용 용액을 위해, 담체로서 바람직하게 채택된다. 적합한 약학적 담체는 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E. W. Martin, 18th Edition, 또는 다른 편집판]에 기재되어 있다.

용어 "효소 대체 치료법" 또는 "ERT"는 이러한 효소 결핍을 갖는 개체 내로의 비-원상태, 정제 효소의 도입을 나타낸다. 투여되는 단백질은 천연 원천으로부터 또는 재조합 발현에 의해(아래에서 더 상세히 기재됨) 수득될 수 있다. 이 용어는 또한 다른 경우 정제된 효소의 투여를 필요로 하거나 이로부터 이익을 얻을, 예를 들어 효소 부족을 겪는 개체에서의 정제된 효소의 도입을 나타낸다. 도입된 효소는 시험관내 생성된 정제된 재조합 효소, 또는 단리된 조직 또는 유체, 예를 들어 태반 또는 동물 모유로부터, 또는 식물로부터 정제된 단백질일 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "단리된"은 언급되는 물질이 통상 확인되는 환경으로부터 제거되어 있음을 의미한다. 따라서, 단리된 생물학적 물질에는 세포 성분, 즉 물질이 확인되거나 생성되는 세포 성분이 없을 수 있다. 핵산 분자의 경우, 단리된 핵산에는 PCR 산물, 겔 상의 mRNA 밴드, cDNA 또는 제한효소 단편이 포함된다. 또 다른 구현예에서, 단리된 핵산은 바람직하게는 확인될 수 있는 염색체로부터 절제되며, 보다 바람직하게는 염색체에서 확인되는 경우 단리된 핵산 분자에 의해 함유되는 유전자의 상류 또는 하류에 위치하는 비-조절, 비-코딩 영역, 또는 다른 유전자에 더 이상 연결되지 않는다. 또 다른 구현예에서, 단리된 핵산에는 하나 이상의 인트론이 없다. 단리된 핵산에는 플라스미드, 코스미드, 인공 염색체 등으로 삽입된 서열이 포함된다. 따라서, 특정 구현예에서, 재조합 핵산은 단리된 핵산이다. 단리된 단백질은 다른 단백질 또는 핵산 또는 둘 모두와 연관될 수 있고, 이는 세포에서 연관되거나, 막-연관된 단백질인 경우 세포막과 연관된다. 단리된 소기관, 세포 또는 조직은 유기체에서 확인되는 해부학적 부위로부터 제거된다. 단리된 물질은 정제될 수 있으나 반드시 그러할 필요는 없다.

용어 "약" 및 "대략"은 일반적으로 측정의 성질 또는 정밀도에 따라 측정되는 양에 대해 허용 가능한 오차 범위를 의미한다. 전형적인, 예시적인 오차 정도는 주어진 값 또는 값의 범위의 20퍼센트(%) 이내, 바람직하게는 10% 이내, 보다 바람직하게는 5% 이내이다. 대안적으로 그리고 특히 생물학적 시스템에서, 용어 "약" 및 "대략"은 주어진 값의 10배 수준 이내, 바람직하게는 10배 또는 5배 이내, 보다 바람직하게는 2배 이내인 평균 값일 수 있다. 본원에서 주어지는 수치량은 달리 언급되지 않는 한 근사치로서, 명시적으로 언급되지 않는 경우 용어 "약" 또는 "대략"이 추정될 수 있음을 의미한다.

본원에서 사용되는 용어 "유리 염기 등가물" 또는 "FBE"는 미갈라스타트 또는 이의 염에 존재하는 미갈라스타트의 양을 나타낸다. 달리 말하면, 용어 "FBE"는 미갈라스타트 유리 염기의 양, 또는 미갈라스타트 염에 의해 제공되는 미갈라스타트 유리 염기의 동등량을 의미한다. 예를 들어, 하이드로클로라이드 염의 중량으로 인해, 150 ㎎의 미갈라스타트 하이드로클로라이드는 123 ㎎의 미갈라스타트의 유리 염기 형태만큼의 미갈라스타트만을 제공한다. 다른 염은 염의 분자량에 따라 상이한 전환 인자를 가질 것으로 예상된다.

용어 "미갈라스타트"는 구체적으로 반대로 나타내지 않는 한, 미갈라스타트 유리 염기 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염(예를 들어, 미갈라스타트 HCl)을 포괄한다.

파브리 질병

파브리 질병은 희귀하고, 진행성이며, 파괴적인 X-연관 리소좀 저장 장애이다. GLA 유전자의 돌연변이는 글리코스핑고지질 대사에 요구되는 리소좀 효소, α-Gal A의 결핍을 일으킨다. 생애 초기에 시작되며, α-Gal A 활성의 감소는 GL-3 및 혈장 리소-Gb3을 포함하는 글리코스핑고지질의 축적을 일으키고, 통증, 위장관 증상, 신장 부전, 심근병증, 뇌혈관 이벤트, 및 조기 사망을 포함하는 파브리 질병의 증상 및 생명을 위협하는 후유증을 야기한다. 치료법의 조기 개시 및 일생 동안의 치료는 질병 진행을 늦추고 예상 수명을 연장할 기회를 제공한다.

파브리 질병은 질병 중증도 스펙트럼 및 개시 연령을 포괄하지만, 전통적으로는 2개의 주요 표현형인 "전통적" 및 "후기-개시"로 구분되었다. 전통적 표현형은 검출 불가능 내지 낮은 α-Gal A 활성 및 신장, 심장 및/또는 뇌혈관 발현의 더 이른 개시를 갖는 남성이 주로 부여받았다. 후기-개시 표현형은 더 높은 잔여 α-Gal A 활성 및 이러한 질병 발현의 더 후기 개시를 갖는 남성이 주로 부여받았다. 이형접합성 여성 보인자는 전형적으로 후기-개시 표현형을 발현하지만 X-염색체 불활성화 패턴에 따라 전통적 표현형을 나타낼 수도 있다.

800개를 초과하는 파브리 질병-유도 GLA 돌연변이가 확인되었다. 대략 60%는 미스센스 돌연변이로, α-Gal A 효소의 단일 아미노산 치환을 일으킨다. 미스센스 GLA 돌연변이는 종종 비정상적으로 폴딩되고 불안정한 형태의 α-Gal A의 생성을 일으키며, 대부분 전통적 표현형과 연관된다. 소포체에서 정상 세포 품질 제어 기전이 이들 비정상 단백질의 리소좀으로의 이동을 차단하며 이들을 조기 분해 및 제거를 위해 표적화한다. 여러 미스센스 돌연변이체 형태가 α-Gal A-특이적 약리학적 샤페론인 미갈라스타트에 대한 표적이다.

파브리 질병의 임상적 발현은 광범위한 중증도 스펙트럼에 걸쳐 있고 환자의 잔여 α-GAL 수준과 대략적으로 관련된다. 대부분의 현재 치료받고 있는 환자는 전통적 파브리 질병 환자로 언급되며, 이들 대부분이 남성이다. 이들 환자는 신장, 심장 및 뇌를 포함하는 다양한 기관의 질병을 경험하며, 질병 증상은 사춘기에 처음 나타나고 전형적으로 40대 또는 50대에 사망 전까지 중증도가 증가한다. 여러 최근 연구에서 보통 사춘기에 처음 나타나는 다양한 파브리 질병 증상, 예를 들어 손상된 심장 또는 신장 기능 및 뇌졸중을 갖는 진단되지 않은 남성 및 여성이 다수 존재함을 제시한다. 후기-개시 파브리 질병으로 언급되는, 상기 유형의 파브리 질병을 갖는 개체는 전통적 파브리 질병 환자보다 높은 잔여 α-GAL 수준을 갖는 경향성이 있다. 후기-개시 파브리 질병을 갖는 개체는 전형적으로 사춘기에 처음 질병 증상을 경험하며, 종종 단일 기관, 예를 들어 좌심실 확대 또는 진행성 신장 부전에 집중된 질병 증상을 갖는다. 또한, 후기-개시 파브리 질병은 또한 원인이 알려지지 않은 뇌졸중 형태로도 존재할 수 있다.

파브리 환자는 진행성 신장 손상을 가지며, 미치료 환자는 50대 경 최종-단계 신장 손상을 나타낸다. α-Gal A 활성의 결핍은 신장 내 세포를 포함하는 여러 세포 유형에서 글로보트리아오실세라마이드(Gb3) 및 관련된 글리코스핑고지질의 축적을 야기한다. Gb3은 발세포, 상피 세포, 그리고 원위 세관 및 헨레 고리의 관상 세포에 축적된다. 신장 기능의 손상은 단백뇨 및 감소된 사구체 여과율로 발현될 수 있다.

파브리 질병이 신장 기능의 진행성 악화를 유도할 수 있으므로, 신장 손상을 갖는 개체에서 잠재적 치료제, 특히 신장 배출에 의해 우선적으로 제거되는 치료제의 약동학(PK)을 이해하는 것이 중요하다. 신장 기능의 손상은 독성이 될 수 있는 수준까지 치료제의 축적을 야기할 수 있다.

파브리 질병은 희귀하고, 여러 기관이 관여되며, 개시의 연령 범위가 넓고, 반접합성이므로, 적절한 진단이 난제이다. 헬스 케어 전문가 간의 인식이 낮고 오진단이 빈번하다. 환자가 증상성이고 돌연변이 분석과 커플링되면, 파브리 질병의 진단은 혈장 또는 말초 백혈구(WBC)에서 감소된 α-Gal A 활성에 기반하여 가장 자주 확인된다. 여성에서, 보인자 여성의 효소 확인은 보인자의 일부 세포에서 무작위 X-염색체 불활성화로 인해 신뢰도가 덜하므로, 진단이 더욱 더 어렵다. 예를 들어, 일부 절대 보인자(전통적으로 영향받는 남성의 딸)는 정상 내지 매우 낮은 활성 범위의 α-Gal A 효소 활성을 갖는다. 보인자는 백혈구에서 정상 α-Gal A 효소 활성을 가질 수 있으므로, 유전 평가에 의한 α-Gal A 돌연변이의 확인만이 정확한 보인자 확인 및/또는 진단을 제공한다.

미갈라스타트에 적합한 것으로 간주되는 α-갈락토시다제 A의 돌연변이체 형태는 α-갈락토시다제 A의 돌연변이체 형태가 의약품 임상시험 관리기준(GLP)-검증된 시험관내 검정(GLP HEK 또는 미갈라스타트 적합성 검정)에 따라 HEK-293 세포에서 발현되는 경우("HEK 검정"으로 언급됨) 1.20배 이상의 상대 증가(+10 μM 미갈라스타트) 및 야생형(WT)의 3.0% 이상의 절대 증가(+ 10 μM 미갈라스타트)를 나타내는 것으로 정의된다. 이러한 돌연변이는 본원에서 또한 "HEK 검정에 적합한" 돌연변이로 언급된다.

치료 개시 전에 효소 증강을 평가하는 사전 스크리닝 방법이 제공되었다. 예를 들어, 주어진 돌연변이가 약리학적 샤페론(예를 들어 미갈라스타트) 치료에 반응성일 것인지 여부를 예측하기 위해 HEK-293 세포를 사용하는 검정이 임상 시험에서 사용되었다. 상기 검정에서, cDNA 작제물이 생성된다. 대응 α-Gal A 돌연변이체 형태가 HEK-293 세포에서 일시적으로 발현된다. 이어서 세포는 4일 내지 5일 동안 미갈라스타트(17 nM 내지 1 mM)를 포함하거나 포함하지 않고 인큐베이션된다. 이후, α-Gal A 수준이 합성 형광발생 기질(4-MU-α-Gal)을 사용하여 또는 웨스턴 블롯에 의해 세포 용해액에서 측정된다. 이는 공지된 질병-유도 미스센스 또는 소규모 프레임-내 삽입/결실 돌연변이에 대해 수행되었다. 이러한 방법을 사용하여 PC(예를 들어 미갈라스타트)에 반응성인 것으로 이전에 확인된 돌연변이는 본원에 그 전문이 참조로 포함되는 미국 특허 제8,592,362호에 기재되어 있다.

약리학적 샤페론

LSD와 연관된 효소의 소분자 억제제의 결합은 돌연변이체 효소 및 대응하는 야생형 효소 둘 다의 안정성을 증가시킬 수 있다(모두 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 제6,274,597호; 제6,583,158호; 제6,589,964호; 제6,599,919호; 제6,916,829호, 및 제7,141,582호 참고). 특히, 몇몇 표적 리소좀 효소에 대한 특이적이고 선택적인 경쟁적 억제제인 글루코스 및 갈락토스의 소분자 유도체의 투여는 시험관내 세포에서 효소의 안정성을 효과적으로 증가시키며, 이에 따라 리소좀으로의 효소 수송을 증가시켰다. 따라서, 리소좀에서 효소의 양을 증가시킴으로써, 효소 기질의 가수분해가 증가할 것으로 예상된다. 상기 전략 배후의 원래의 이론은 하기와 같았다: 돌연변이체 효소 단백질이 ER에서 불안정하므로(Ishii et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 1996; 220: 812-815), 효소 단백질은 정상 수송 경로(ER→골지 기구→엔도좀→리소좀)에서 지연되며 조기 분해된다. 따라서, 돌연변이체 효소에 결합하고 그 안정성을 증가시키는 화합물은 효소에 대한 "샤페론"으로서 작용하고 ER에서 배출되어 리소좀으로 이동할 수 있는 양을 증가시킬 수 있다. 또한, 일부 야생형 단백질의 폴딩 및 수송이 불완전하므로, 최대 70%의 일부 야생형 단백질은 일부 경우 이의 최종 세포 위치에 도달하기 전에 분해되고, 샤페론은 야생형 효소를 안정화하고 ER에서 배출되어 리소좀으로 이동할 수 있는 효소의 양을 증가시키기 위해 사용될 수 있다.

하나 이상의 구현예에서, 약리학적 샤페론은 미갈라스타트 또는 이의 염을 포함한다. 1-데옥시갈락토노지리마이신(1-DGJ) 또는 (2R,3S,4R,5S)-2-(하이드록시메틸)피페리딘-3,4,5-트리올로도 알려져 있는 화합물 미갈라스타트는 하기 화학식을 갖는 화합물이다:

본원에서 논의된 바와 같이, 미갈라스타트의 약학적으로 허용 가능한 염이 또한 본 발명에서 사용될 수 있다. 미갈라스타트의 염이 사용되는 경우, 염의 투여량은 환자가 수여받는 미갈라스타트의 용량이 미갈라스타트 유리 염기가 사용되었을 때 수여받았을 양과 동등하도록 조정될 것이다. 미갈라스타트의 약학적으로 허용 가능한 염의 하나의 예는 미갈라스타트 HCl이다:

미갈라스타트는 저분자량 이미노당이며 GL-3의 말단 갈락토스의 유사체이다. 시험관내 및 생체내 약리학적 연구는 미갈라스타트가 약리학적 샤페론으로 작용하여, 야생형(WT) α-Gal A 및 그 유전형이 HEK 검정에 적합한 돌연변이로 언급되는 α Gal A의 특정 돌연변이체 형태의 활성 부위에 대해 고친화도로 선택적이고 가역적으로 결합함을 실증하였다. 미갈라스타트 결합은 소포체에서 α-Gal A의 이러한 돌연변이체 형태를 안정화하여 미갈라스타트의 해리가 α-Gal A로 하여금 GL-3 및 다른 기질의 수준을 감소시킬 수 있도록 하는 리소좀으로의 이의 적절한 수송을 촉진한다. 파브리 질병을 갖는 환자의 대략 30%~50%는 HEK 검정에 적합한 돌연변이를 갖는다; 그 대부분은 질병의 전통적 표현과 연관된다. HEK 검정에 적합한 돌연변이의 목록에는 적어도 아래의 표 1에 기재된 돌연변이가 포함된다. 하나 이상의 구현예에서, 이중 돌연변이가 동일한 염색체 상에 존재하는 경우(남성 및 여성), 그 환자는 이중 돌연변이가 표 1에서 하나의 엔트리(예를 들어, D55V/Q57L)에 존재하는 경우 HEK 검정에 적합한 것으로 간주된다. 일부 구현예에서, 이중 돌연변이가 상이한 염색체 상에 존재하는 경우(여성에서만), 그 환자는 개별 돌연변이 중 어느 하나가 표 1에 존재하는 경우 HEK 검정에 적합한 것으로 간주된다. 아래의 표 1에 부가하여, HEK 검정에 적합한 돌연변이는 또한 그 각각의 전문이 본원에 참조로 포함되는, GALAFOLD^TM이 사용 승인된 다양한 국가에서 GALAFOLD^TM에 대한 제품 특징 및/또는 처방 정보의 요약에서 또는 웹사이트 www.galafoldamenabilitytable.com에서 확인될 수 있다.

파브리 환자에서의 신장 기능

신장 기능의 진행성 감퇴는 파브리 질병의 주요 합병증이다. 예를 들어, 전통적 파브리 표현형과 연관된 환자는 투석 또는 신장 이식으로 이어질 수 있는 진행성 신장 손상을 나타낸다.

신장 기능을 평가하기 위해 당분야에서 빈번하게 사용되는 방법은 사구체 여과율(GFR)이다. 일반적으로, GFR은 단위 시간 당 신장 사구체 모세혈관으로부터 보우만 캡슐 내로 여과되는 유체의 부피이다. 임상적으로, GFR의 추정치는 혈청으로부터 크레아티닌의 제거에 기반하여 얻어진다. GFR은 주어진 시간 간격에 걸쳐 혈액으로부터 제거된 크레아티닌의 양을 결정하기 위해 소변을 수집함으로써 추정될 수 있다. 연령, 체격 및 성별도 여기에서의 요인일 수 있다. GFR 수치가 낮을수록, 신장 손상이 더 진행된 것이다.

보다 심각한 단백뇨를 갖거나 보다 중증 만성 신장 질병을 갖는 환자에서 더 신속한 감퇴가 일어날 수 있지만, 일부 연구는 미치료 파브리 환자가 1년 당 7.0 mL/min/1.73 ㎡ 내지 18.9 mL/min/1.73 ㎡의 GFR의 평균 감퇴를 경험하는 반면 효소 대체 치료법(ERT)을 받는 환자는 1년 당 2.0 mL/min/1.73 ㎡ 내지 2.7 mL/min/1.73 ㎡의 GFR의 평균 감퇴를 경험할 수 있음을 시사한다. 따라서, 치료를 받고 있는 환자의 경우에도 환자의 발생하고 있는 신장 기능 손상을 처리하기 위해 적절한 치료제 용량을 결정할 필요가 있다. 용량의 조정은 치료 지수 밖의 수준 또는 환자가 독성을 겪는 수준까지 치료제가 축적되는 것을 피하기 위해 사용될 수 있다.

추정 GFR(eGFR)은 동위원소 희석 질량 분광측정(IDMS) 추적 공식을 사용하여 혈청 크레아티닌으로부터 계산된다. 혈청 크레아티닌으로부터 사구체 여과율(GFR)을 추정하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 공식 중 2가지는 만성 신장 질병 역학 협회(CKD-EPI) 공식 및 신장 질병에서의 식이 변형(MDRD) 연구 공식이다. MDRD 연구 및 CKD-EPI 공식에는 둘 다 연령, 성별, 및 인종에 대한 변수가 포함되며, 이는 정상 참조 간격 내에 속하거나 바로 위로 나타나는 혈청 크레아티닌 농도에도 불구하고 제공자가 CKD가 존재함을 관찰할 수 있도록 할 수 있다.

CKD-EPI 공식은 GFR 및 혈청 크레아티닌, 연령, 성별, 및 인종 간 관계를 모델링하기 위해 2-경사 "스플린(spline)"을 사용한다. CKD-EPI 공식은 단일 공식으로 표현되었다:

GFR = 141 Х min(S_cr/κ, 1)α Х max(S_cr/κ, 1) - 1.209 Х 0.993^연령 Х 1.018[여성인 경우] Х 1.159[흑인인 경우]

식 중,

S_cr은 혈청 크레아티닌(mg/dl)이며,

κ는 여성에 있어서 0.7이고 남성에 있어서 0.9이고,

α는 여성에 있어서 -0.329이고 남성에 있어서 -0.411이고,

min은 S_cr/κ 또는 1 중 최소값을 나타내고,

max는 S_cr/κ 또는 1 중 최대값을 나타낸다.

하기는 IDMS-추적 MDRD 연구 공식이다(IDMS 참조 방법에 대해 검정된 크레아티닌 방법):

GFR(mL/min/1.73 ㎡) =　175　Х (S_cr)^-1.154　Х (연령)^-0.203　Х (여성인 경우 0.742) Х (아프리카계 미국인인 경우 1.212)

이 공식은 결과가 승인된 평균 성인 표면적인 1.73 ㎡ 체표면적에 대해 정규화되어 보고되므로, 체중 또는 신장 변수를 필요로 하지 않는다. 이 공식은 손상된 신장 기능(eGFR 60 mL/min/1.73 ㎡ 미만)을 갖는 18세 내지 70세 연령의 백인 및 아프리카계 미국인 집단에서 광범위하게 검증되었고 모든 일반적인 신장 질병의 원인을 갖는 환자에 있어서 우수한 성능을 나타내었다.

크레아티닌 제거율(eC_Cr)을 추정하기 위한 하나의 방법은 콕크로프트-골트(Cockcroft-Gault) 공식을 사용하는 것이며, 이는 다시 GFR(mL/분)을 추정한다:

크레아티닌 제거율(mL/분) = [(140 - 연령) Х 체중(Kg)^*] ÷ 72 Х 혈청 크레아티닌(㎎/dL)

[^* 여성인 경우 0.85를 곱함]

콕크로프트-골트 공식은 신장 손상 연구를 위해 식약처에서 사용에 대해 제시된 공식이다. 이는 1.73 ㎡의 체표면적에 대해 정규화된 콕크로프트-골트 공식에 의해 계산되는 크레아티닌 제거율에 있어서 일반적이다. 따라서, 상기 공식은 추정 eGFR(mL/min/1.73 ㎡)로 표현될 수 있다. 체표면적에 대해 조정된, GFR의 정상 범위는 40세 연령보다 어린 남성에서 100 mL/min/1.73 ㎡ 내지 130 mL/min/1.73 ㎡이고 여성에서 90 mL/min/1.73 ㎡ 내지 120 mL/min/1.73 ㎡이다.

만성 신장 질병의 중증도는 6개 단계로 정의되었다(또한 표 2 참고): (단계 0) 정상 신장 기능 - GFR 90 mL/min/1.73 ㎡ 초과이고 단백뇨 없음; (단계 1) - GFR 90 mL/min/1.73 ㎡ 초과이고 신장 손상의 증거가 있음; (단계 2) (경도) - GFR 60 mL/min/1.73 ㎡ 내지 89 mL/min/1.73 ㎡이고 신장 손상의 증거가 있음; (단계 3) (중등도) - GFR 30 mL/min/1.73 ㎡ 내지 59 mL/min/1.73 ㎡; (단계 4) (중증) - GFR 15 mL/min/1.73 ㎡ 내지 29 mL/min/1.73 ㎡; (단계 5) 신장 부전 - GFR 15 mL/min/1.73 ㎡ 미만. 아래의 표 2는 해당 GFR 수준을 갖는 다양한 신장 질병 단계를 나타낸다.

투약, 제형화 및 투여

본원에 기재된 투약 요법 중 하나 이상은 어느 정도의 신장 손상을 갖는 파브리 환자에게 특히 적합한다. 아미쿠스 테라퓨틱스(Amicus Therapeutics)는 파브리 환자에서 격일로(QOD) 미갈라스타트 150 mg을 사용하는 2건의 3상 연구를 후원했다. FACETS(011, NCT00925301)는 67명의 효소 대체 치료법(ERT)을 받지 않은 환자에서의, 6개월간의 이중-맹검, 위약-대조군 기간을 포함한, 24개월간의 시험이었다. ATTRACT(012, NCT01218659)는 12개월 공개 연장(OLE)을 갖는 57명의 ERT-경험 환자에서의 활성 대조군, 18개월간의 시험이었다. FACETS 및 ATTRACT 연구 둘 모두는 추정 사구체 여과율(eGFR)이 30 mL/min/1.73 m² 이상인 환자를 포함하였다. 따라서, 두 연구 모두 정상 신장 기능을 갖는 파브리 환자뿐만 아니라 경도 및 중등도 신장 손상을 갖는 환자를 포함했지만, 어느 연구도 중증 신장 손상 환자를 포함하지 않았다.

파브리 환자의 미갈라스타트 치료에 대한 3상 연구는 대리 마커에 의해 나타난 바와 같이 150 mg 격일이 질병의 진행을 늦춘다는 것을 확립하였다. 그러나, 일부 구현예에서, 이들 환자가 신장 악화를 경험할 수 있기 때문에 미갈라스타트 투약 요법은 일부 파브리 환자에서 조정될 수 있다. 신체로부터 약물을 제거하는 능력이 느려짐에 따라 약물에 대한 환자의 노출 증가가 있을 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서 신체로부터의 현재 제거 프로파일을 고려하여 최상의 용량을 의사에게 알리기 위해 용량 조정 프로토콜이 제공된다. 이는 억제제이고, 샤페론이 치료제가 되기에 충분히 다량으로, 그러나 너무 많아서 샤페론이 효소 기능을 억제(이는 질병을 악화시킬 것임)하지는 않게 존재하도록 섬세한 균형에 도달해야 하기 때문에 샤페론에 대해 용량 조정이 특히 어렵다. 따라서, 정확한 투약을 예측하기 어렵고, 이는 미갈라스타트 제거 능력이 감소된 환자에서 더 복잡해진다.

따라서, 하나 이상의 구현예에서, 신장 손상을 갖는 파브리 환자는 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일마다 1회, 3일마다 1회, 4일마다 1회, 5일마다 1회, 6일마다 1회 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여받는다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트 또는 이의 염은 격일마다("QOD" 또는 "Q48H"로도 지칭됨), 4일마다("Q4D" 또는 "Q96H"로도 지칭됨) 또는 7일마다("Q7D" 또는 "Q168H"로도 지칭됨) 1회의 빈도로 투여된다. 일부 구현예에서, 신장 손상을 갖는 파브리 환자는 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 4일마다 1회의 빈도로 투여받는다. 다른 구현예에서, 신장 손상을 갖는 파브리 환자는 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 빈도로 투여받는다. 일부 구현예에서, 보다 긴 간격(예를 들어, 3일마다 내지 7일마다)의 투약 요법은, 약 100 mg 내지 약 300 mg 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일마다 1회의 빈도로 투약하는 요법 후에, 또는 그에 대한 조정으로서 시작될 수 있다.

다양한 구현예에서, 본원에 기재된 용량은 미갈라스타트 하이드로클로라이드 또는 동등 용량의 미갈라스타트 또는 하이드로클로라이드 염 이외의 이의 염에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 이들 용량은 미갈라스타트의 유리 염기에 관한 것이다. 대안적인 구현예에서, 이들 용량은 미갈라스타트의 염에 관한 것이다. 추가 구현예에서, 미갈라스타트의 염은 미갈라스타트 하이드로클로라이드이다. 미갈라스타트 또는 미갈라스타트의 염의 투여는 본원에서 "미갈라스타트 치료법"으로 언급된다.

미갈라스타트 또는 이의 염의 유효량은 약 100 mg FBE 내지 약 300 mg FBE의 범위일 수 있다. 예시적인 용량으로는 약 100 mg FBE, 약 105 mg FBE, 약 110 mg FBE, 약 115 mg FBE, 약 120 mg FBE, 약 123 mg FBE, 약 125 mg FBE, 약 130 mg FBE, 약 135 mg FBE, 약 140 mg FBE, 약 145 mg FBE, 약 150 mg FBE, 약 155 mg FBE, 약 160 mg FBE, 약 165 mg FBE, 약 170 mg FBE, 약 175 mg FBE, 약 180 mg FBE, 약 185 mg FBE, 약 190 mg FBE, 약 195 mg FBE, 약 200 mg FBE, 약 205 mg FBE, 약 210 mg FBE, 약 215 mg FBE, 약 220 mg FBE, 약 225 mg FBE, 약 230 mg FBE, 약 235 mg FBE, 약 240 mg FBE, 약 245 mg FBE, 약 250 mg FBE, 약 255 mg FBE, 약 260 mg FBE, 약 265 mg FBE, 약 270 mg FBE, 약 275 mg FBE, 약 280 mg FBE, 약 285 mg FBE, 약 290 mg FBE, 약 295 mg FBE 또는 약 300 mg FBE가 포함된다.

또한, 150 ㎎의 미갈라스타트 하이드로클로라이드는 123 ㎎의 미갈라스타트의 유리 염기 형태와 동등한 것임이 주지된다. 따라서 하나 이상의 구현예에서, 용량은 2일 1회의 빈도로 투여되는 150 ㎎의 미갈라스타트 하이드로클로라이드 또는 동등 용량의 미갈라스타트 또는 하이드로클로라이드 염 이외의 이의 염이다. 상기 나타낸 바와 같이, 상기 용량은 123 ㎎ FBE의 미갈라스타트로 언급된다. 추가 구현예에서, 용량은 2일 1회의 빈도로 투여되는 150 ㎎의 미갈라스타트 하이드로클로라이드이다. 다른 구현예에서, 용량은 2일 1회의 빈도로 투여되는 123 ㎎의 미갈라스타트 유리 염기이다.

다양한 구현예에서, 유효량은 약 122 mg, 약 128 mg, 약 134 mg, 약 140 mg, 약 146 mg, 약 150 mg, 약 152 mg, 약 159 mg, 약 165 mg, 약 171 mg, 약 177 mg, 약 183 mg, 약 189 mg, 약 195 mg, 약 201 mg, 약 207 mg, 약 213 mg, 약 220 mg, 약 226 mg, 약 232 mg, 약 238 mg, 약 244 mg, 약 250 mg, 약 256 mg, 약 262 mg, 약 268 mg, 약 274 mg, 약 280 mg, 약 287 mg, 약 293 mg, 약 299 mg, 약 305 mg, 약 311 mg, 약 317 mg, 약 323 mg, 약 329 mg, 약 335 mg, 약 341 mg, 약 348 mg, 약 354 mg, 약 360 mg 또는 약 366 mg의 미갈라스타트 하이드로클로라이드이다.

따라서, 하나 이상의 구현예에서, 용량은 4일마다 1회 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여되는, 150 mg 미갈라스타트 하이드로클로라이드 또는 하이드로클로라이드 염 외의 미갈라스타트 또는 이의 염의 등가 용량이다. 추가 구현예에서, 용량은 4일마다 투여되는 150 mg 미갈라스타트 하이드로클로라이드이다. 다른 구현예에서, 용량은 7일마다 투여되는 150 mg 1 미갈라스타트 하이드로클로라이드이다. 다른 구현예에서, 용량은 격일마다 1회, 4일마다 1회 또는 7일마다 1회의 빈도로 투여되는 123 mg의 미갈라스타트 유리 염기이다. 더 긴 투약 간격(예를 들어 3일 내지 7일마다)은 격일마다의 투약 빈도와 비교하여 더 높은 정도의 신장 손상에 유용할 수 있다. 이러한 더 긴 투약 간격으로는 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일마다가 포함된다.

일부 구현예에서, 투약 간격에는 용량 사이에 48시간 초과가 있는 임의의 투약 간격이 포함될 수 있다. 예를 들어, 투약 간격에는 72시간, 96시간, 120시간, 144시간, 또는 168시간마다의 투약이 포함될 수 있다.

일부 구현예에서, 투약 간격에는 평균적으로 주당 3.5회 미만의 투여가 포함될 수 있다. 예를 들어, 투약은 평균적으로 주당 3회, 주당 2회 또는 주당 1회 일어날 수 있다. 일부 구현예에서, 투약은, 평균적으로, 주당 약 2.3회 이하, 주당 약 1.75회 이하, 주당 약 1.4회 이하, 또는 주당 약 1.167회 이하 일어날 수 있다.

일부 구현예에서, 투약 간격은 불규칙할 수 있다. 예를 들어, 투약 간격에는, 화요일, 목요일, 토요일 또는 일요일에는 투여하지 않고, 매주 월요일, 수요일 및 금요일마다 투여하는 것이 포함될 수 있다. 유사하게, 투약 간격에는, 다른 날에는 투여하지 않고, 매주 월요일 및 목요일마다 투여하는 것이 포함될 수 있다.

미갈라스타트의 투여는 소정 시기 동안일 수 있다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트는 적어도 28일의 기간, 예를 들어 적어도 30일, 60일 또는 90일 또는 적어도 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 16개월, 20개월 또는 24개월 또는 적어도 1년, 2년 또는 3년 동안 투여된다. 다양한 구현예에서, 미갈라스타트 치료법은 적어도 6개월, 예를 들어 적어도 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 16개월, 20개월 또는 24개월 또는 적어도 1년, 2년 또는 3년의 장기 미갈라스타트 치료법이다.

본 발명에 따른 미갈라스타트의 투여는 임의의 투여 경로를 위해 적합한 제형물로일 수 있으나, 바람직하게는 경구 투여량 형태, 예를 들어 정제, 캡슐 또는 용액으로 투여된다. 일 실시예로서, 환자에게는 각각 25 mg, 50 mg, 75 mg, 100 mg 또는 150 mg 미갈라스타트 하이드로클로라이드(즉, 1-데옥시갈락토노지리마이신 하이드로클로라이드) 또는 동등 용량의 미갈라스타트 또는 하이드로클로라이드 염 이외의 이의 염을 함유하는 캡슐이 경구 투여된다.

일부 구현예에서, PC(예를 들어, 미갈라스타트 또는 이의 염)는 경구 투여된다. 하나 이상의 구현예에서, PC(예를 들어, 미갈라스타트 또는 이의 염)는 주사에 의해 투여된다. PC는 약학적으로 허용 가능한 담체가 수반될 수 있으며, 이는 투여 방법에 의존할 수 있다.

본 발명의 일 구현예에서, 샤페론 화합물은 단일요법으로서 투여되고, 예를 들어 정제 또는 캡슐 또는 액체 형태로 경구, 또는 주사용 멸균 수용액 중을 포함하는, 임의의 투여 경로에 적합한 형태일 수 있다. 다른 구현예에서, PC는 투여 전 시험관내 효소 응집을 방지하기 위해 재구성 동안 또는 직후에 대체 효소의 제형에 첨가될 건조 동결건조된 분말로 제공된다.

샤페론 화합물이 경구 투여를 위해 제형화되는 경우, 정제 또는 캡슐은 약학적으로 허용 가능한 부형제, 예를 들어 결합제(예를 들어 사전젤라틴화 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스); 충전제(예를 들어, 락토스, 미세결정형 셀룰로스 또는 칼슘 하이드로겐 포스페이트); 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 활석 또는 실리카); 붕해제(예를 들어, 감자 전분 또는 나트륨 전분 글리콜레이트); 또는 수화제(예를 들어, 나트륨 라우릴 설페이트)와 함께 통상적 수단에 의해 제조될 수 있다. 정제는 당분야에 널리 공지된 방법에 의해 코팅될 수 있다. 경구 투여용 액체 조제물은, 예를 들어, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태를 취할 수도 있고, 또는 이들은 사용 전에 물 또는 또 다른 적합한 비히클로의 구성을 위한 건조 제품으로서 제공될 수도 있다. 이러한 액체 조제물은 약학적으로 허용 가능한 첨가제, 예를 들어 현탁화제(예를 들어, 소르비톨 시럽, 셀룰로스 유도체 또는 수소화 식용 지방); 유화제(예를 들어, 레시틴 또는 아카시아); 비-수성 비히클(예를 들어, 아몬드 오일, 유성 에스테르, 에틸 알코올 또는 분획화된 식물성 오일); 및 보존제(예를 들어, 메틸-p-하이드록시벤조에이트 또는 프로필-p-하이드록시벤조에이트 또는 소르브산)와 함께 통상적 수단에 의해 제조될 수 있다. 조제물은 또한 적절한 바에 따라 완충 염, 풍미제, 착색제 및 감미제를 함유할 수 있다. 경구 투여용 조제물은 활성 샤페론 화합물의 제어 방출을 제공하기 위해 적합하게 제형화될 수 있다.

비경구/주사용 용도에 적합한 샤페론 화합물의 약학 제형물에는 일반적으로 멸균 수용액(수용성인 경우), 또는 멸균 주사 용액 또는 분산액의 체외 제조를 위한 분산액 및 멸균 분말이 포함된다. 모든 경우에서, 형태는 멸균성이어야 하며, 용이한 주사 가능성이 존재하는 정도까지 유체여야 한다. 제조 및 보관 조건 하에 안정해야 하며 미생물, 예를 들어 박테리아 및 진균의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜 등), 이의 적합한 혼합물 및 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유체성은, 예를 들어, 코팅, 예를 들어 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기의 유지에 의해 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 미생물의 작용 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 벤질 알코올, 소르브산 등에 의해 일으킬 수 있다. 여러 경우에서, 등장성 제제, 예를 들어, 당 또는 나트륨 클로라이드를 포함시키는 것이 합리적일 것이다. 주사용 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 조성물 중 사용에 의해 일으킬 수 있다.

멸균 주사 용액은 필요한 바에 따라, 상기 열거된 다양한 다른 성분과 함께 적절한 용매 중에 요구되는 양으로 정제된 효소 및 샤페론 화합물을 혼입한 후 필터 또는 말기 멸균화에 의해 제조된다. 일반적으로, 분산액은 기본 분산 매질 및 상기 열거된 것들로부터 요구되는 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내로 다양한 멸균화 활성 성분을 혼입하여 제조된다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우, 바람직한 제조 방법은 이의 사전 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가적인 요망되는 성분의 분말을 산출하는 진공 건조 및 냉동-건조 기법이다.

제형물은 부형제를 함유할 수 있다. 제형물에 포함될 수 있는 약학적으로 허용 가능한 부형제는 완충제, 예를 들어 시트레이트 완충제, 포스페이트 완충제, 아세테이트 완충제, 바이카보네이트 완충제, 아미노산, 요소, 알코올, 아스코르브산 및 인지질; 단백질, 예를 들어 혈청 알부민, 콜라겐 및 젤라틴; 염, 예를 들어 EDTA 또는 EGTA, 및 나트륨 클로라이드; 리포좀; 폴리비닐피롤리돈; 당, 예를 들어 덱스트란, 만니톨, 소르비톨 및 글리세롤; 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜(예를 들어, PEG-4000, PEG-6000); 글리세롤; 글리신 또는 다른 아미노산; 및 지질이다. 제형물과 함께 사용하기 위한 완충제 시스템에는 시트레이트; 아세테이트; 바이카보네이트; 및 포스페이트 완충제가 포함된다. 포스페이트 완충제가 바람직한 구현예이다.

샤페론 화합물의 투여 경로는 정맥내, 피하, 동맥내, 복강내, 안구, 근육내, 협측, 직장, 질, 안와내, 뇌내, 피내, 두개내, 척추내, 심실내, 경막내, 수조내, 관절낭내, 폐내, 비강내, 경점막, 경피부, 또는 흡입을 통하는 것을 포함하는 경구(바람직하게) 또는 비경구일 수 있다.

샤페론 화합물의 상술된 비경구 제형물의 투여는 조제물 볼루스의 주기적 주사에 의할 수도 있고, 또는 외부 저장소(예를 들어 i.v. 백) 또는 내부 저장소(예를 들어, 생체식용 임플란트)로부터의 정맥내 또는 복강내 투여에 의해 투여될 수도 있다.

약학적 제형 및 투여에 관한 구현예는 본 발명의 다른 구현예 중 임의의 것, 예를 들어 파브리 질병 환자를 치료하는 방법, 파브리 질병으로 진단되거나 이를 갖는 것으로 의심되는 환자에서 α-갈락토시다제 A를 증강시키는 방법, 파브리 질병으로 진단된 환자 치료용 의약의 제조를 위한 α-갈락토시다제 A에 대한 약리학적 샤페론의 용도 또는 파브리 질병으로 진단된 환자를 치료하는 데 사용하기 위한 α-갈락토시다제 A에 대한 약리학적 샤페론에 관한 구현예 뿐만 아니라 적합한 돌연변이, PC 및 이의 적합한 투여량에 관한 구현예와 조합될 수 있다.

하나 이상의 구현예에서, 샤페론은 효소 대체 치료법과 조합하여 투여된다. 효소 대체 치료법은 주입으로 야생형 또는 생물학적 기능성 효소를 외인성으로 도입함으로써 단백질의 양을 증가시킨다. 이 요법은, 상기 언급된, 파브리 질병과 같은 리소좀 저장 장애를 포함하는, 많은 유전적 장애에 대해 개발되었다. 주입 후, 외인성 효소는 비-특이적 또는 수용체-특이적 메커니즘을 통해 조직에 의해 흡수되는 것으로 예상된다. 일반적으로, 흡수 효율은 높지 않고, 외인성 단백질의 순환 시간은 짧다. 추가로, 외인성 단백질은 불안정하고 급속한 세포 내 분해가 될 수 있을 뿐만 아니라 후속 치료로 면역학적 부작용의 가능성을 갖는다. 하나 이상의 구현예에서, 샤페론은 대체 효소와 동시에 투여된다. 일부 구현예에서, 샤페론은 대체 효소와 공동-제형화된다.

하나 이상의 구현예에서, 환자는 효소 대체 치료법(ERT)으로부터 미갈라스타트 요법으로 전환된다. 일부 구현예에서, ERT 중인 환자가 확인되고, 환자의 ERT가 중단되고, 환자는 미갈라스타트 요법을 받기 시작한다. 미갈라스타트 요법은 본원에 기재된 방법 중 임의의 것에 따를 수 있다. 다양한 구현예에서, 환자는, 경도, 중등도 또는 중증 신장 손상과 같은, 어느 정도의 신장 손상을 갖는다.

리소-Gb3 및 미갈라스타트 수준 모니터링

리소-Gb3(글로보트리아오실스핑고신)은 기질이 파브리 환자의 신체에서 제거되고 있는지 여부를 결정하기 위해 모니터링될 수 있다. 더 높은 수준의 리소-Gb3는 더 높은 수준의 기질과 상관관계가 있다. 환자가 성공적으로 치료되고 있으면, 리소-Gb3 수준이 떨어질 것으로 예상된다. 파브리 질병에 대한 한 가지 투약 요법은 격일마다 1회의 빈도로 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 환자에게 투여하는 것이다.

시간이 지남에 따라, 리소-Gb3의 수준은 상승할 수 있으며 이는 질병 진행 및/또는 환자의 신체로부터 미갈라스타트를 제거하는 신장의 능력 감소로 인한 것일 수 있다. 보다 높은 수준에서 미갈라스타트는 α-Gal A의 억제제로 작용하여, 효소가 표적 기질에 결합하는 것을 방지하기 때문에, 미갈라스타트 수준이 너무 높은 경우 리소-Gb3 수준이 상승할 것이다. 정상적인 신장 기능을 갖는 개체는 일반적으로 48시간까지 150 mg 용량의 미갈라스타트 하이드로클로라이드를 제거할 것이다(즉, C_48h가 약 5 ng/mL의 정량화 수준 미만까지). 중증의 신장 손상의 경우, C_48h는 250 또는 심지어 300 ng/mL 초과일 수 있다. 달리 높은 수준을 초래할 다른 알려진 상호작용을 미갈라스타트가 갖지 않기 때문에 미갈라스타트의 높은 수준은 손상된 신장 기능에 기인한 것으로 생각된다.

따라서, 본 발명의 다른 양태는 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법에 관한 것이다. 하나 이상의 구현예에서, 방법은 제1 기간 동안 격일마다 1회의 제1 빈도로 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 환자에게 투여하는 단계; 및 제2 기간 동안 더 긴 투약 간격(예를 들어, 3일 내지 7일마다 1회)으로 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 투약 빈도는 리소-Gb3 및/또는 미갈라스타트 수준을 측정한 후에 조정된다. 일부 구현예에서, 투약 빈도는 환자의 신장 기능(예를 들어, eGFR)의 변화 후에 조정된다. 예를 들어, 환자의 eGFR이 경도 신장 손상으로부터 중등도 신장 손상으로의 변화 또는 중등도 신장 손상으로부터 중증 신장 손상으로의 변화를 나타낼 때 투약 빈도가 조정될 수 있다.

일부 구현예에서, 미갈라스타트 또는 이의 염은 제1 기간 동안 제1 빈도로 투여되고, 이어서 제2 기간 동안 제2 빈도로 투여된다. 제1 빈도는 제2 빈도보다 더 크다(즉, 보다 빈번함). 제1 빈도 및 제2 빈도는 본원에 개시된 임의의 투약 간격일 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 빈도는 격일마다이고, 제2 빈도는 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다 또는 7일마다이다. 일부 구현예에서, 제1 빈도는 4일마다이고 제2 빈도는 5일마다, 6일마다, 또는 7일마다이다.

일부 구현예에서, 미갈라스타트 또는 이의 염은 제1 기간 동안 제1 빈도로 투여되고, 이어서 제2 기간 동안 제2 빈도로 투여되고, 이어서 제3 기간 동안 제3 빈도로 투여된다. 제1 빈도는 제2 빈도보다 더 크고(즉, 보다 빈번함), 제2 빈도는 제3 빈도보다 더 크다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 미갈라스타트 또는 이의 염은 제1 기간 동안 격일마다 1회의 제1 빈도로 투여되고, 이어서 미갈라스타트 또는 이의 염은 제2 기간 동안 4일마다 1회의 제2 빈도로 투여되고, 이어서 미갈라스타트 또는 이의 염은 제3 기간 동안 7일마다 1회의 제3 빈도로 투여된다.

일부 구현예에서, 투약 빈도는 환자의 eGFR의 감소에 반응하여 조정된다. 예시적인 구현예에서, 환자의 eGFR이 30 mL/min/1.73 m² 미만으로 감소될 때, 투약 빈도는 격일마다에서 4일마다로 조정될 수 있다. 예시적인 구현예에서, 환자의 eGFR이 20 mL/min/1.73 m² 미만으로 감소될 때, 투약 빈도는 4일마다에서 7일마다로 조정될 수 있다. 투약 빈도의 다른 조정은 상기 기재된 바와 같이 하나의 투약 간격으로부터 더 긴 투약 간격으로 이루어질 수 있다. 일부 구현예에서, 환자는 중증 신장 손상을 앓는다.

일부 구현예에서, 방법은 미갈라스타트 수준을 측정하는 단계를 추가로 포함한다. 하나 이상의 구현예에서, 미갈라스타트 농도(예를 들어, ng/mL)가 측정된다. 일부 구현예에서, 총 곡선하 면적(AUC_0-∞)이 측정된다. 하나 이상의 구현예에서, 다음 용량 전 미갈라스타트가 도달하는 최저 농도(C_trough)가 측정된다. QOD에 대한 C_trough는 48시간(C_48h)에서의 농도일 것이다. Q4D에 대한 C_trough는 96시간(C₉₆)에서의 농도일 것이다. 유사하게, Q7D에 대한 C_trough는 168시간(C₁₆₈)에서의 농도일 것이다. 하나 이상의 구현예에서, 표적화된 C_trough 값은 정량화 수준에 있거나 그 바로 아래(BLQ)이다. 이러한 C_trough 값은 미갈라스타트가 적절한 속도로 신체로부터 제거되고 있음을 나타낸다(즉, 다음 용량 투여 전에 거의 완전히 제거됨).

미갈라스타트 수준은 당업계에 공지된 방법을 통해 측정될 수 있다. 예를 들어, 조직 샘플에서 미갈라스타트를 측정하는 경우, 조직분쇄기(예를 들어 업체[MP Biomedical, Irvine, CA]의 패스트프렙-24(FastPrep-24))를 사용하여 조직 부분표본이 균질화될 수 있다(조직 1 mg 당 물 7 μL). 그 다음 100 μl의 조직 균질액 또는 50 μl의 혈장을 함유하는 미세원심분리기 튜브가 500 ng/mL 13C d2-AT1001 HCl 내부 표준물(업체[MDS Pharma Services]에 의해 제조)로 스파이킹될 수 있다. 그 다음 95/5 MeOH:H₂O 중 5 mM HCl 600 μl 부피가 첨가될 수 있고 튜브가 2분 동안 볼텍싱된 후, 실온에서 10분 동안 21000 x g로 원심분리된다. 그 다음 상청액이 깨끗한, 96-웰 플레이트 내로 수집되고, dH₂O 중 5 mM HCl을 사용하여 희석되고 96-웰 고체상 추출(SPE) 플레이트(Waters Corp., Milford MA)에 적용될 수 있다. 여러 세척 단계 및 깨끗한, 96-웰 플레이트로의 용리 후, 추출물이 N₂ 하에서 건조되고 이동상 A를 사용하여 재구성될 수 있다. 그 다음 미갈라스타트 수준은 액체 크로마토그래피 - 직렬 질량 분광분석(LC-MS/MS)(예를 들어, LC: Shimadzu; MS/MS: ABSciex API 5500 MS/MS)에 의해 결정될 수 있다. 액체 크로마토그래피는 ACN:물:포르메이트 2원 이동상 시스템(이동상 A: 5 mM 암모늄 포르메이트, 95:5 ACN:물 중 0.5% 포름산; 이동상 B: 5 mM 암모늄 포르메이트, 5:47.5:47.5 ACN:MeOH:물 중 0.5% 포름산)을 사용하여 할로(Halo) HILIC 컬럼(150x4.6 mm, 2.7 μm)(Advanced Materials Technology, Inc.) 상에서 0.7 mL/분의 유속으로 수행될 수 있다. MS/MS 분석은 APCi 양이온 모드 하에서 수행될 수 있다. 균질화하지 않는 것을 제외하고 혈장 내 미갈라스타트 측정에 대해 동일한 절차를 따를 수 있다. 다음의 전구체 이온→생성물 이온 전이가 모니터링될 수 있다: 미갈라스타트의 경우 질량/전하(m/z) 164.1→ m/z 80.1 및 내부 표준물의 경우 m/z 167.1→ m/z 83.1. 12-점 보정 곡선 및 품질 제어 샘플이 준비될 수 있다. 그 다음 내부 표준물의 것에 대한 미갈라스타트의 곡선하 면적의 비율이 결정되고 각 샘플에서의 미갈라스타트의 최종 농도는 보정 곡선에 적용된 선형 최소 자승 피팅 방정식(linear least squares fit equation)을 사용하여 계산된다. 대략적인 몰 농도를 유도하기 위해, 조직 1 g이 부피 1 mL로 추정될 수 있다.

미갈라스타트 농도는 신체로부터의 제거를 모니터링하기 위해 다양한 시간에 혈장 샘플에서 측정될 수 있다. 임상적으로 관련된 C_trough의 증가는 혈장 미갈라스타트 농도의 유의미한 축적을 시사한다. 미갈라스타트가 다음 용량 투여 전에 신체로부터 충분히 제거되지 않으면, 미갈라스타트 수준이 축적되어, 아마도 억제 효과로 이어질 수 있다. 따라서, 하나 이상의 구현예에서, 투약 빈도의 변화는 정상 신장 기능 C_trough와 비교하여 C_trough에서의 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9 또는 3.0배 증가 후에 일어난다. 하나 이상의 구현예에서, 정상 신장 기능에서의 C_trough는 BLQ이다. 일부 구현예에서, BLQ는 5 ng/mL의 미갈라스타트이다. 정상 신장 기능을 갖는 사람은 일반적으로 48시간 후에 150 mg의 미갈라스타트 HCl을 제거할 것이다. 따라서, 현재 150 mg의 미갈라스타트 HCl의 QOD 요법을 투약받고 있는 환자는 48시간까지, C_trough 값이기도 한, BLQ에 도달해야 한다. BLQ 초과의 값이 QOD 투약 요법을 받는 환자에서 48시간에 측정되는 경우, 이는 투약 간격을 변화시킬 필요를 나타낼 수 있다. 따라서, 하나 이상의 구현예에서, 신장 손상을 갖는 환자의 C_trough 값(QOD 요법을 받는 경우 C_48h, Q4D 요법을 받는 경우 C₉₆ 또는 Q7D 요법을 받는 경우 C₁₆₈)은 정상 신장 기능을 갖는 사람의 C_trough(C_48h)와 비교될 것이다.

하나 이상의 구현예에서, 투약 빈도의 변화는 정상 신장 기능 AUC_0-∞와 비교하여 AUC_0-∞에서의 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9 또는 3.0배 증가 후에 일어난다.

일부 구현예에서, 샘플은 투여 후 0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 72, 96, 120, 144 및/또는 168시간에 채취될 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 후 48시간에서의 미갈라스타트 농도가 측정된다. 일부 구현예에서, 제2 기간의 투여는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5, 10, 15, 20, 25, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175 또는 200 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정된 후에 시작된다.

추가 구현예에서, 방법은 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3을 측정하는 단계를 추가로 포함한다. 제1 기준선 리소-Gb3 수준은 제1 기간 동안 결정될 수 있다. 본원에 사용된 "기준선 리소-Gb3 수준"은 주어진 기간 또는 투약 요법 동안 측정된 가장 낮은 혈장 리소-Gb3 값을 지칭한다. 따라서, 리소-Gb3 수준이 기준선 리소-Gb3 수준에서 유의미하게 상승하는 경우, 이는 신장 질환 진행 및/또는 미갈라스타트의 부적절한 제거를 나타낼 수 있다. 따라서, 추가 구현예에서, 제2 기간의 투여는 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가(예를 들어, 적어도 약 20, 25, 30, 33, 35, 40, 45 또는 50% 및/또는 1, 1.25, 1.5, 1.75, 2, 2.25, 2.5 또는 3 nM)가 측정된 후 시작된다. 혈장 리소-Gb3에서의 기준선으로부터 33% 및/또는 2 nM 증가는 파브리 환자의 3상 데이터를 기반으로 임상적으로 관련성이 있는 것으로 여겨져 신장 기능 저하 및/또는 질병 상태의 진행 유래의 억제-유도된 미갈라스타트 노출 신호를 나타낸다. 리소-Gb3 수준은 다양한 빈도로 측정할 수 있다(예를 들어 약 2, 3, 4 또는 5개월마다 1회). 일단 투약 요법이 시작되면 기준선 리소-Gb3 수준이 확립되는 데 약 3개월이 걸리는 것으로 생각된다.

리소-Gb3은 인증된 분석을 사용하여 당업계에 공지된 방법을 통해 측정될 수 있다. 미갈라스타트에서와 같이, 리소-Gb3 수준은 액체 크로마토그래피 - 직렬 질량 분광분석(LC-MS/MS)(예를 들어 LC: Shimadzu; MS/MS: ABSciex API 5500 MS/MS)을 사용하여 결정될 수 있다. 예를 들어, 혈장 리소-Gb3을 측정하는 하나의 프로세스가 문헌[Hamler, Rick, et al. "Accurate quantitation of plasma globotriaosylsphingosine (lyso-Gb3) in normal individuals and Fabry disease patients by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)." Molecular Genetics and Metabolism, Volume 114.2 (2015):S51]에 기재되어 있다. 하나 이상의 구현예에서, 리소-Gb3은 환자의 소변 유래 샘플에서 측정된다.

따라서, 예시적인 일 구현예에서, 방법은 다음을 포함한다

제1 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일마다 1회의 제1 빈도로 투여하는 단계;

제2 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 4일마다 또는 7일마다 1회의 제2 빈도로 투여하는 단계;

환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3을 측정하는 단계;

제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

제1 기간 동안 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및

(i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및/또는

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.

추가의 구현예에서, 제2 기간의 투여는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가가 적어도 약 30, 또는 33%이고/이거나 2 nM 및/또는 약 50 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정된 후에 시작할 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 기간의 투여는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가가 적어도 약 30, 또는 33%이고/이거나 2 nM 및/또는 약 50 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서의 1.5배 초과하는 증가가 있은 후에 시작할 수 있다.

추가 구현예에서, 투약은 격일마다로부터 4일마다로 조정된 다음, 7일마다로 추가로 조정된다. 이러한 구현예에서, 제2 기간의 빈도는 4일마다 1회이고, 방법은 제3 기간동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 제3 빈도로 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 또한 추가의 구현예에서, 방법은 다음을 추가로 포함할 수 있다

환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;

제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계;

(i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제2 기간의 투여를 시작하는 단계

제2 기간 동안 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;

(i) 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및

(ii) 제2 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후

제3 기간의 투여를 시작하는 단계.

다른 구현예에서, 투약은 격일마다로부터 4일로의 제1 조정없이 7일마다로 곧바로 조정된다.

예시적인 구현예에서, 파브리 환자는 격일마다 150 mg의 미갈라스타트 HCl을 투여받고 있을 수 있다. 혈장 리소-Gb3 수준을 측정한 즉시, 다음이 측정되는 경우: (1) 현재 용량 요법에 대한 기준선 수준 대비 혈장 리소-Gb3의 증가(예를 들어 적어도 30 또는 33% 증가); 및/또는 (2) 현재 용량 요법에 대한 기준선 수준 대비 혈장 리소-Gb3에서의 적어도 2 nM의 증가, 투약 요법은 4일마다 또는 7일마다 1회로 변화될 수 있다. 환자의 미갈라스타트 수준이 또한 높은 경우, 요법은 또한 4일마다 또는 7일마다 1회로 변화될 수도 있다. 이러한 높은 수준의 미갈라스타트는 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 더 높은(예를 들어 1.5 또는 2배 증가) AUC_0-∞ 및/또는 C_trough의 측정값일 수 있다.

용량 요법이 변화되면, 새로운 혈장 리소-Gb3 기준선 수준이 확립될 것이다. 임의의 새로운 용량 요법 수정은 대상체의 가장 최신 기준선 수준과의 비교에 기반할 것이다. 예를 들어, 새로운 기준선 수준은 다음과 같이 확립될 수 있다: 대상체가 그들의 이전 측정값 대비 혈장 리소-Gb3에서의 감소를 갖는 경우, 확인하는 재시험이 일어날 수 있다. 확인 값 또한 그들의 이전 측정값보다 더 낮으면, 두 값의 평균이 대상체의 새로운 기준선 수준이 될 것이다. 재시험이 대상체의 이전 측정값보다 더 낮지 않으면, 다음 방문 때까지 이전 측정값이 현재 기준선 수준으로 계속될 것이다.

본 명세서에 걸쳐 "하나의 구현예", "소정 구현예", "다양한 구현예", "하나 이상의 구현예" 또는 "구현예"에 대한 언급은 구현예에 관해 기재되는 특정한 특성, 구조, 물질 또는 특징이 본 발명의 적어도 하나의 구현예에 포함됨을 의미한다. 따라서, 본 명세서를 통해 다양한 위치에서 "하나 이상의 구현예에서", "소정 구현예에서", "다양한 구현예에서", "하나의 구현예에서" 또는 "구현예에서"와 같은 어구의 출현이 반드시 본 발명의 동일한 구현예를 언급하는 것은 아니다. 또한, 특정한 특성, 구조, 물질 또는 특징은 하나 이상의 구현예에서 임의의 적합한 방식으로 조합될 수 있다.

본원에서의 발명은 특정한 구현예에 대해 기재되었으나, 이들 구현예는 본 발명의 원리 및 적용을 단순히 예시하는 것임이 이해되어야 한다. 당업자에게는 다양한 변형 및 변이가 본 발명의 정신 및 범위에서 벗어나지 않고 본 발명의 방법 및 장치에 수행될 수 있음이 자명할 것이다. 따라서, 본 발명에는 첨부되는 청구범위 및 이의 균등부의 범위 내인 변형 및 변이가 포함되는 것이다.

특허, 특허 출원, 공보, 제품 설명, 및 프로토콜이 본 출원에 걸쳐 인용되며, 그 개시는 모든 목적을 위해 이의 전문이 본원에 참조로 포함된다.

실시예

실시예 1: 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자에서 미갈라스타트의 약동학

신장 손상을 갖는 비-파브리 대상체에서 미갈라스타트 HCl의 약동학 및 안전성을 연구하기 위해 1상 시험을 수행하였다. 결과는 문헌[Johnson, et al. "An Open-Label Study to Determine the Pharmacokinetics and Safety of Migalastat HCl in Subjects With Impaired Renal Function and Healthy Subjects with Normal Renal Function." American College of Clinical Pharmacology 4.4 (2015): 256-261]에 보고되어 있고, 본원에 또한 기재되어 있다. 경도, 중등도, 및 중증의 신장 손상, 그리고 정상 신장 기능을 갖는 대상체들에게 단일 150 mg 미갈라스타트 HCl 용량을 투여했다. eGFR은 신장 손상 연구를 위한 FDA 지침에 따라 콕크로프트-골트 공식을 사용하여 추정된다.

자원자는 크레아티닌 제거(CL_CR)에 대한 콕크로프트-골트 공식을 사용하여 계산된 신장 기능에 대해 계층화된 2개의 코호트에 등록하였다. 대상체를 콕크로프트-골트 공식을 사용하여 계산된 바와 같이, 스크리닝 시 추정 CL_CR에 기반하여 군 별 할당하였다. 각각의 대상체에 있어서, WinNonlin® 소프트웨어(Pharsight Corporation, Version 5.2)를 사용한 비구획 분석에 의해 하기 혈장 미갈라스타트 PK 파라미터를 결정하였다.

C_max 최대 관찰 농도

t_max 최대 농도까지의 시간

AUC_0-t 증가하는 농도에 대한 선형 제형 규칙 및 감소하는 농도에 대한 로그 규칙을 사용해서 계산된, 시간 0부터 마지막으로 측정 가능한 농도까지의 농도-시간 곡선 하 면적

AUC_0-∞ 하기 식을 사용해서 계산된, 무한대로 외삽된 농도-시간 곡선 하 면적:

AUC0-∞ = AUC0-t + Ct/λZ

식 중, Ct는 측정 가능한 마지막 농도이며 λZ는 겉보기 최종 소실 속도 상수임

λz 겉보기 최종 소실 속도 상수로서, λZ는 최종 기동안 시간 프로필 대비 log 농도의 선형 회귀의 경사 크기임

t_1/2 겉보기 최종 소실 반감기(가능한 경우 항상)

식 중, t1/2 = (ln2)/λZ

CL/F 용량/AUC0-∞로 계산되는, 경구 제거율

Vd/F 용량/AUC0-∞·λZ로 계산되는, 경구 분포 부피

C_48h 투여 48시간 후 농도

결정된 약동학 파라미터는 시간 0부터 투여후 마지막으로 측정 가능한 농도까지의 농도-시간 곡선 하 면적(AUC)(AUC_0-t) 및 무한대로 외삽된 AUC(AUC_0-∞), 최대 관찰 농도(C_max), C_max까지의 시간(t_max), 투여 48시간 후 농도(C_48h), 최종 소실 반감기(t_1/2), 경구 제거율(CL/F), 및 겉보기 최종 소실 속도 상수(λz)(ClinicalTrials.gov 등록: NCT01730469)였다.

크레아티닌 제거율(CL_CR)이 콕크로프트-골트 식을 사용해서 결정된 바와 같이 90 mL/분 미만(즉, CL_CR 90 mL/분 미만)인 경우, 연구 대상체는 신장 손상을 갖는 것으로 정의되었다. 대상체는 신장 기능부전의 정도에 따라 그룹화되었다: 경도(CLcr 60 mL/분 이상 90 mL/분 미만), 중등도(CL_CR 30 mL/분 이상 60 mL/분 미만), 또는 중증(CL_CR 15 mL/분 이상 30 mL/분 미만).

미갈라스타트의 혈장 및 소변 약동학을 건강한 자원자 및 정상 내지 경도 손상된 신장 기능을 갖는 파브리 환자에서 연구하였다. 단회-용량 연구에서, 미갈라스타트는 연구된 용량 범위에 걸쳐 경구 투여 후 대략 3시간째에(범위, 1 hr 내지 6 hr) 최대 농도에 도달하는 중등도 흡수 속도를 가졌다. 평균 C_max 및 AUC0-t 값은 75 ㎎ 내지 1250 ㎎ 미갈라스타트의 경구 용량 후 용량-비례적 방식으로 증가하였다. 평균 제거 반감기(t1/2)는 3.04시간 내지 4.79시간 범위였다. 단회 상승 용량(SAD) 연구에서 평가된 용량으로부터 소변에서 회수된 용량의 평균 백분율은 25 mg, 75 mg, 225 mg, 및 675 ㎎ 용량군에 있어서 각각 32.2%, 43.0%, 49.3%, 및 48.5%였다. 다회 상승 용량 연구에서, 혈장 미갈라스타트의 최소 축적만 관찰되었다. TQT 연구에서, 미갈라스타트는 150 ㎎ 및 1250 ㎎ 단회 용량에서 심장 재분극에 대한 효과에 있어서 부정적이었다(Johnson et al. "Pharmacokinetics and Safety of Migalastat HCl and Effects on Agalsidase Activity in Healthy Volunteers." Clin Pharmacol Drug Dev. 2013 Apr; 2(2):120-32 2013).

비-파브리 대상체에서 수행된 상기 단회 용량 신장 손상 연구에서, 단회 용량 미갈라스타트 HCl 150 ㎎의 혈장 농도는 정상 신장 기능을 갖는 대상체 대비 신장 부전 정도의 증가와 함께 증가하였다. 단회 경구 용량의 미갈라스타트 HCl 150 ㎎ 후, 평균 혈장 미갈라스타트 AUC_0-∞는 건강한 대조군 대상체 대비 경도, 중등도, 또는 중증 신장 손상을 갖는 대상체에서 각각 1.2배, 1.8배, 및 4.5배 증가하였다. 혈장 미갈라스타트 150 mg AUC_0-∞ 값의 증가는 정상 신장 기능을 갖는 대상체 대비 단회-용량 투여 후 중등도 또는 중증 신장 손상을 갖는 대상체에서 통계적으로 유의미하였으나 경도 신장 손상을 갖는 대상체에서는 통계적으로 유의미하지 않았다. 미갈라스타트 t_max는 중증 군에서 약간 지연되었다; C_max는 건강한 대조군 대상체 대비 다양한 정도의 신장 손상을 갖는 대상체에서 단회 경구 용량의 미갈라스타트 HCl 150 ㎎ 후 어느 군에 걸쳐서도 증가하지 않았다. 혈장 미갈라스타트 C_48h 수준은 건강한 대조군 대상체 대비 중등도(Cr_CL 50 mL/분 미만인 대상체로부터 우선적으로) 및 중증 신장 손상을 갖는 대상체에서 상승하였다. 정상 신장 기능을 갖는 대상체 및 경도, 중등도, 또는 중증 신장 손상을 갖는 대상체에서 각각 신장 손상 정도가 증가함에 따라 혈장에서 미갈라스타트의 t_1/2은 증가하였다(산술 평균[min, max]: 6.4[3.66, 9.47] h, 7.7[3.81, 13.8] h, 22.2[6.74, 48.3] h, 및 32.3[24.6, 48.0] h). 평균 CL/F는 신장 부전 정도의 증가와 함게 감소하였고, 경도 내지 중증 신장 손상에서 12.1 내지 2.7 L/hr 범위였다(Johnson et al. 2014).

미갈라스타트 제거는 신장 손상의 증가와 함께 감소하여, 정상 신장 기능을 갖는 대상체 대비 미갈라스타트 HCl 혈장에서 t_1/2, AUC_0-∞, 및 C_48h 증가를 일으켰다. 유해 사례의 발생률은 모든 신장 기능군에 걸쳐 필적하였다.

신장 손상 정도가 증가함에 따라 단회 경구 용량의 150 ㎎ 미갈라스타트 HCl 후 혈장 노출(AUC_0-t로 표현됨)이 증가하였다. 도 1a는 CL_CR 값이 감소함에 따라 미갈라스타트 AUC_0-t 값 증가를 나타낸다. 도 1b는 각각의 신장 기능군에 대한 평균(SE) 혈장 미갈라스타트 농도-시간 프로필을 나타낸다. BLQ 값은 0으로 입력되었고, 평균의 계산에 포함되었다.

도 1c에 실증된 바와 같이, 신장 손상이 악화됨에 따라, 혈장 미갈라스타트 AUC_0-t 값은 비선형 방식으로 증가한다. 결과는, 신장 손상이 악화됨에 따라 혈장 미갈라스타트의 제거가 감소하여, 특히 중증 신장 손상을 갖는 대상체에서, 연장된 t_1/2, 더 높은 C_48h 값, 및 더 높은 전반적 혈장 노출(AUC_0-∞)을 일으킴을 실증하였다. 미갈라스타트는 주로 소변에서 변화 없이 배출된다. 따라서, 혈장 미갈라스타트 노출의 증가는 신장 손상의 악화와 일치한다.

결론: 혈장 미갈라스타트 제거는 신장 손상 정도가 증가함에 따라 감소하였다

PK 결과의 요약을 아래에서 표 3에 나타낸다.

실시예 2: 신장 손상 대상체에 대한 다회 용량 시뮬레이션

실시예 1의 신장 손상 연구에서, 곡선 하 면적(AUC)의 일관된 증가 및 2배 내지 4배의 QOD 투약 48시간 후 미갈라스타트의 최저 농도(C_48h)가 정상 신장 기능을 갖는 대상체 대비 35 mL/분 이하의 eGFR 값에서 관찰되었다.

다양한 정도의 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서 노출 및 IC50 초과하는 시간을 예측하기 위해 집단 PK 모델을 개발하였다. 상이한 범위의 신장 손상(≥30, 20 내지 30, <20 mL/min/1.73 m²)을 갖는 환자에서의 미갈라스타트 노출에 대한 이해를 발전시키기 위해 다양한 투약 요법을 평가하였다. 평가한 투약 요법에는 격일마다 150 mg(QOD), 4일마다 150 mg(Q4D), 및 주 1회 150 mg(Q7D)이 포함되었다.

파브리 환자 하위-집단, 즉 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서 적절한 미갈라스타트 투약을 예측하기 위해 모델-기반 용량 찾기 접근법을 사용하였다. 일반적으로, 모델-기반 약물 개발(MBDD) 방법이 적용될 수 있는 용량 최적화 목표에는 다음이 포함된다: (1) 최초 인간 대상(first-in-human) 용량을 예측하는 것; (2) 안전성과 효능이 가장 잘 균형을 이루는 용량 또는 용량 범위를 찾는 것; (3) 가장 좋은 용량 빈도를 찾는 것; (4) 공동-투여되는 약물에 대한 유망한 조합을 찾는 것; (5) 엄수를 포함하여, 현실적인 대상체 행동을 고려하는 것; (6) 초기 단계 학습을 최대 활용하여 용량 확정을 강화하는 것.

본 실시예는 실시예 1의 신장 손상 대상체 투약의 컴퓨터 시뮬레이션을 제공한다. 핵심 가정은 신장 손상을 갖는 비-파브리 대상체에서 특성규명된 노출이 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서와 동일하다는 것이었다. 소프트웨어 프로그램은 WinNonlin version 5.2 이상이었다. 모델 조건은 아래에 기재된다. BSA-조정 eGFR_{콕크로프트-골트} 35 mL/min/1.73 ㎡ 이하인 11명의 대상체가 모델링 운동에 포함되었다; 3명은 중등도 신장 손상을 가졌지만, 30 mL/min/1.73 ㎡ 이상 35 mL/min/1.73 ㎡ 이하였고, 8명은 14 mL/min/1.73 ㎡ 이상 30 mL/min/1.73 ㎡ 미만이었다. 항정 상태는 7차 용량 경으로 가정되었다.

150 mg 미갈라스타트 HCl을 사용한 4가지 요법을 시뮬레이션하였다: QOD(격일마다 또는 48시간마다), Q3D(3일마다 또는 72시간마다), Q4D(4일마다 또는 96시간마다), 및 Q7D(7일마다/주 1회 또는 168시간마다).

2-구획 모델을 사용하여 단일 용량 데이터로부터 분포 용적(V_d) 및 제거율 상수를 추정하였다. 이들 추정치를 각각의 분자 용량 시뮬레이션 요법에 입력하였다.

도 2a 내지 도 2d는 각각의 요법에 대한 평균 시뮬레이션 그래프를 보여준다. 하기 표 4는 노출 및 축적 비율을 보여준다. AUC에 기반하여, MD 시뮬레이션은 Q7D 투약의 경우 축적이 최소(≤ 5%)임을 시사한다. 파브리 환자에서의 미갈라스타트 최고 노출은 53035 ng*hr/mL로 기록되었으며, 이는 450 mg의 단일 용량을 투여받았다.

하기 표 5는 150 mg 요법에 대한 C_min,ss를 보여준다. C_min,ss에 기반하여, Q7D에 대한 MD 시뮬레이션은 대부분의 대상체에 대한 PPK C_min(8.70 ng/mL)과 유사하다.

도 3a 내지 도 3b는 시뮬레이션된 요법들에 걸친 R_ac 및 C_min 값을 보여준다. 도 3a는 QOD 요법에서 미갈라스타트 축적이 더 크고, 그 다음으로 Q3D, Q4D가 보다 적으며, Q7D에서는 중증의 신장 손상에서 사실상 아무 축적도 없음을 보여준다. 도 3b 또한 이러한 경향을 보여주지만, C_48h 농도에 대한 것이다.

도 4는 실시예 1로부터의 AUC 대 C_48h를 보여준다. 이 스틱 그래프는 모든 수준의 신장 기능에 걸쳐 AUC 대 C_48h 농도의 시각적 상관관계를 제공하고, 두 값이 시각적으로 잘 상관됨을 입증한다.

표 6 내지 표 7은 IC₅₀(억제) 초과하는 시간 및 집단 PK 모델링의 개요를 보여주며 하기에 제공된다.

예측된 노출 데이터에 기반하여, 임상 시험 시뮬레이션은 Q4D 요법이 30 초과 내지 40 mL/min/1.73m² 미만의 eGFR을 갖는 이들에 대해 정상 신장 기능을 갖는 대상체와 유사한 노출을 제공하고 Q7D 요법이 20 초과 내지 30 mL/min/1.73 m² 미만의 eGFR을 갖는 이들에 대해 정상 신장 기능을 갖는 대상체와 유사한 노출을 제공할 것임을 시사한다.

이 모델링은 신장 손상 수준에 기반하여 미갈라스타트의 더 느린 제거를 예측하고 투약 빈도를 조정하여 미갈라스타트의 수준을 효소 활성을 억제하는 수준 미만으로 데리고 온다.

eGFR이 20 mL/min/1.73 m² 미만인 대상체에서 Q7D 후의 시뮬레이션된 미갈라스타트 노출은 정상 신장 기능을 가진 대상체보다 5배 내지 6배 더 높게 유지되었다.

실시예 3: 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서 미갈라스타트의 약동학

상기 컴퓨터 모델링은 혈장 미갈라스타트 노출에 대한 시나리오를 제공하지만, 이는 파브리 환자에서의 신장 손상에 대해서는 설명하지 않는다. 즉, 데이터에는 약력학적 성분(혈장 리소-GB₃)이 포함되지 않는다. 따라서, 신장 손상을 갖는 2명의 파브리 환자를 평가하였다. 1명의 환자(P1)는 중등도 신장 손상을 갖는 반면, 다른 환자(P2)는 중증 신장 손상을 가졌다. 아래에서 표 8은 아미쿠스 테라퓨틱스, 인크에 의한 3상 연구(FACETS 연구, Clinical Trial NCT00925301) 및 실시예 1의 신장 손상 연구로부터의 중등도 손상된 대상체 대비 P1에 대한 혈장 미갈라스타트 농도를 나타낸다. 6개월 간격으로 2개 세트의 미갈라스타트 농도 측정이 있었고, 환자는 이전에 미갈라스타트로 치료받았다. 표 9는 실시예 1의 신장 손상 연구로부터의 중증 손상 환자와 대비된 것을 제외하고, P2에 대해 유사한 정보를 나타낸다. 산발적 혈액 샘플채집으로부터 집단 PK를 수행하는 FACETS 연구를 적합한 돌연변이를 갖는 파브리 환자에서 수행하였다. FACETS 연구로부터의 결과와의 비교는 대부분 정상이지만, 일부 경도 및 소수의 중등도 손상된 파브리 환자를 갖는 파브리 집단에서의 PK의 비교를 가능하게 한다. 연구에서 이들 환자는 제외되었으므로 아무도 중증 신장 손상을 갖지 않았다.

표 8로부터 알 수 있듯이, C_48h 농도는 6개월에 걸쳐 49% 증가했으나, 중등도 신장 손상을 갖는 실시예 1의 비-파브리 대상체와 유사하게 유지된다. C_max는 6개월에 걸쳐 33% 증가했으나, 실시예 1과 유사하게 유지된다. C_24h는 중등도 신장 손상에 있어서 실시예 1과 유사하다. eGFR_MDRD도 역시 중등도 손상에 대한 범위 내에 유지된다(32 mL/분).

괄호 안의 백분율은 변동 계수로, 이는 시간 0 h 또는 시간 48 h 농도에서의 변동성에 대응하며, 비교적 높다. 상기 결과는 중등도 신장 손상을 갖는 실시예 1로부터의 대상체의 절반이 저농도를 가지고, 이들 중 절반이 고농도를 갖는다는 점에 기인할 수 있다.

48시간째의 농도는 P1에 있어서 0시간째에서보다 높지만(3번째 및 4번째 열), 실시예 1로부터의 중등도 손상을 갖는 사람에 있어서는 48시간째의 농도가 0시간째에서와 동일하다. 이는 P1에서 시간 0 및 시간 48에 별도의 혈액 샘플이 채취되었기 때문이다. 그러나, 단회 용량 데이터로부터의 반복 용량 모델링 시뮬레이션 결과를 실시예 1에서 사용하였으므로, 값은 동일한 것이다.

유사한 경향성을 표 9에서도 알 수 있다. 따라서, 표 8 및 9는 유사한 신장 손상을 갖는 파브리 및 비-파브리 환자에서 미갈라스타트의 유사한 약동학을 확인시켜준다.

도 5는 실시예 1의 신장 손상 연구 대비 파브리 환자의 혈장 미갈라스타트 최저 농도(C_48h)를 나타낸다. 도 6은 파브리 환자 추정 AUC 대비 평균(SD) 신장 손상 연구 노출을 나타낸다. 도면으로부터 알 수 있듯이, P1 및 P2는 비-파브리 환자에서의 신장 손상 연구의 일반적 경향성을 따랐다.

하기 표 10은 P1에 대한 리소-GB₃/eGFR을 나타낸다.

eGFR 32 mL/min/1.73 ㎡로의 신장 기능의 계속된 감퇴에도 불구하고, 혈장 리소-GB₃은 이전 방문으로부터 임상적으로 관련된 변화를 나타내지 않았고, 혈장 미갈라스타트 농도는 중등도 신장 손상을 갖는 비-파브리 환자에서 관찰된 것과 유사하게 유지된다.

이 연구는 파브리 환자의 신장 손상 및 약동학적 경향이 비-파브리 환자의 경향과 상관관계가 있음을 입증한다. 따라서, 컴퓨터 모델링에 의존하여 적절한 투약 요법을 선택할 수 있다(즉, 2, 4 또는 7일마다).

실시예 4: 신장 손상 대상체 상의 추가 시뮬레이션

본 실시예는 실시예 1의 신장 손상 대상체의 미갈라스타트 투약의 추가적인 컴퓨터 시뮬레이션을 제공한다.

도 7a 내지 도 7d는 정상, 중증, 경도 및 중등도 신장 손상 대상체에서 각각 시간 대비 시뮬레이션된 중앙값 및 관찰된 미갈라스타트 농도를 나타낸다. 아래에서 표 11은 데이터를 나타낸다:

도 8a 내지 도 8d는 각각 정상, 경도, 중등도 및 중증 신장 손상 대상체에 대한 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 보여준다.

도 9a 내지 도 9d는 QOD에 대한 정상 상태 예측을 보여준다. 점선은 QT 연구로부터의 평균값이다. 도 10a 내지 도 10d는 동일한 시뮬레이션에 대해 각각 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 보여준다.

도 11의 a 내지 도 11의 b는 중등도의 신장 손상을 갖는 환자에서 96시간에 걸친 100 mg 미갈라스타트 투여 후의 미갈라스타트 농도를 정상 신장 기능을 갖는 환자에서 48시간에 걸친 150 mg 미갈라스타트 투여와 비교한다. 도 12a 내지 12d는 동일한 시뮬레이션에 대해 각각 C_max, AUC, C_min 및 C_48h를 비교한다.

실시예 5: 적합한 돌연변이 및 중증 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서 미갈라스타트 HCl의 안전성, 약동학 및 약력학의 평가를 위해 제안된 연구

적합한 돌연변이 및 중증 신장 손상(즉, eGFR < 30 mL/min/1.73 m²)을 갖는 파브리 대상체에서 미갈라스타트 HCl의 안전성, 약동학 및 약력학을 평가하기 위한 연구가 제안된다. 용량을 낮추는 대신(즉, 150 mg 미만) 150 mg의 미갈라스타트 HCl 용량을 유지했지만 덜 빈번하게 투여하였다. eGFR_MDRD가 10 이상 및 20 미만인 대상체는 7일마다(Q7D) 용량을 투여받을 것이다. eGFR_MDRD가 20 이상 및 30 미만인 대상체는 4일마다(Q4D) 용량을 투여받을 것이다. Q4D 용량을 투여받는 대상체가 20 mL/min/1.73 m² 미만으로 감소하는 신장 기능을 갖는 경우, 대상체의 투약 요법은 Q7D로 변화된다. 투석 치료를 시작하거나 신장 이식을 받는 임의의 대상체는 연구에서 중단될 것이다.

이 연구에 참여하는 모든 대상체는 등록 적격성을 확인하기 위해 스크리닝(방문 1)을 받을 것이다. 적격성 기준을 충족하는 대상체는, PK 평가를 포함하여, 스크리닝 30일 내에 기준선 방문(방문 2)을 가질 것이다. 연구-중(on-study) 방문은 총 12개월 동안 3개월마다 예정될 것이다. 각각의 현장 방문으로부터의 PK/PD 결과에 기반하여, 필요에 따라 후속 방문 또는 전화 연락이 1개월 후 예정될 것이다. 용량 요법의 변화가 정당화됨을 PK/PD 결과가 나타내는 경우, 대상체는 용량 사이의 기간을 조정하도록 조언될 것이며 실험실 평가가 국지적으로 또는 현장에서 수행될 것이다.

안전성 분석

안전성 데이터의 계속적인 모니터링이 있을 것이며, 신장 기능 저하의 증거를 나타내는 대상체의 중단을 위해 구체적인 중단 기준이 수립될 것이다. 2회의 연이은 방문에서 eGFR < 10 mL/min/1.73 m²인 대상체는 미갈라스타트를 중단하고 연구로부터 철수될 것이다.

약동학적 샘플링

전체 PK 혈액 샘플링은 각각의 대상체의 시작 미갈라스타트 요법에 따라 방문 2에서 수행될 것이다. Q4D 요법으로 시작하는 대상체는 투약 전 및 투약 후 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 및 96시간에 PK 평가가 수행될 것이다. Q7D 요법으로 시작하는 대상체는 투약 전 및 투약 후 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 96, 및 168시간에 PK 평가가 수행될 것이다. 차후 방문에서, 대상체는 Q4D 요법을 받는 대상체의 경우 투약 후 24, 48, 및 96시간에 그리고 Q7D 요법을 받는 대상체의 경우 24, 48, 96, 및 168시간에 산발적 샘플링을 받을 것이다.

방문 2에서, Q4D 요법을 받는 대상체의 경우 투약 전 1시간 내에 단회뇨 수집이 이루어지고 이어서 0에서 4시간, 4에서 8시간, 8에서 12시간, 12에서 24시간, 24에서 48시간, 48에서 72시간, 및 72에서 96시간에 각 투약 간격의 지속 기간 동안 투약 후 총 소변 수집이 이루어질 것이다. 수집 간격은 96에서 120시간, 120에서 144시간, 및 144에서 168시간에서의 수집을 추가하여 Q7D 요법을 받는 대상체에 대해 동일할 것이다.

용량 요법 변화를 갖는 대상체의 경우, 요법 변화 후 방문 시에 상기 상세히 설명된 전체 PK 혈액 및 소변 수집이 수행될 것이다.

용량 요법 수정

이 프로토콜은 대상체-특이적 기반에 근거한 용량 요법 변화를 가능하게 한다. 각각의 대상체에 대해 시작 용량은, 상기에서 언급된 바와 같이, eGFR에 기반한 요법에서 미갈라스타트 HCl 150 mg일 것이다. Q4D 요법으로 연구를 시작하는 대상체의 경우, 2회의 연이은 방문(후속 방문 포함)에서 eGFR이 20 mL/min/1.73 m² 미만까지 감소하는 것은 자동적으로 Q7D 요법으로의 전환을 촉발시킬 것이다.

혈장 리소-Gb3은 방문마다 모니터링될 것이다. 대상체가 그들의 이전 측정값 대비 혈장 리소-Gb3에서의 증가를 갖는 경우, 확인하는 재시험이 일어날 수 있다. 확인 값 또한 그들의 이전 측정값보다 더 높으면, 두 값의 평균이 대상체의 새로운 참조값이 될 것이다. 재시험이 대상체의 이전 측정값보다 더 높지 않으면, 해당 방문 시 새로운 참조 값이 없을 것이다.

연구 전반에 걸쳐, 중단 기준은 대상체-당 기반으로 적용될 것이다. 2회 연이은 방문에 대해 eGFR_MDRDD가 10 mL/min/1.73 m² 미만이거나 투석 또는 신장 이식을 받는 대상체는 치료로부터 중단될 것이다. 대상체는 또한 조사자 및 의료 모니터링의 재량으로 치료로부터 중단될 수 있다.

연구 치료 지속 기간

30일까지의 스크리닝 기간 후, 등록된 대상체는 12개월 동안 미갈라스타트 치료를 받을 것이다. 12개월의 끝에, 대상체는 별개의 공개 연장 연구에 등록할 적격성이 있을 수 있다.

평가기준

안전성: 안전성 파라미터에는 신체 검사, 활력 징후(혈압, 심박동수, 호흡률, 및 체온), 12-유도 심전도, 임상 실험실 파라미터(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 검사), eGFR, 및 이상 반응이 포함된다.

PK: 다음의 PK 파라미터는, 이용 가능한 경우, 미갈라스타트의 혈장 농도를 기반으로 계산될 것이다: 최대 관찰 농도(C_max), 정상 상태에서 투약 간격의 끝에서의 농도(C_trough), 투약 간격에 걸친 평균 혈장 미갈라스타트 농도(C_avg), 최대 농도까지의 시간(t_max), 겉보기 최종 소실 반감기(t_1/2), 시간 0에서부터 마지막 측정 가능한 농도까지의 농도-시간 곡선하 면적(AUC_0-t) 및 무한대로 외삽된 것(AUC_0-∞), 및 혈장 제거(CL/F).

다음의 PK 파라미터는 소변 미갈라스타트 농도에 기반하여 계산될 것이다: 투약 간격에 걸쳐 배설된 총량(Ae_0-t), 투약 간격에 걸쳐 소변에서 회수된 용량의 분율(Fe), 및 신장 제거(CLr).

PD: PD 파라미터에는 혈장 리소-Gb3, eGFR_MDRD, 및 eGFR_CKD-EPI가 포함된다.

통계적 방법

연속적 PK 혈액 및 소변 샘플링으로부터의 혈장 미갈라스타트 농도는 피닉스(Phoenix)®-윈논린(WinNonlin)® 소프트웨어, 버전 7.0 이상을 사용하는 비구획 분석에 의해 결정될 것이다. 혈장 미갈라스타트 산발적 PK 혈액 샘플링은 집단 PK 모델에 의해 분석될 것이다. 집단 PK 모델은 중증 신장 손상 용량 요법 시뮬레이션을 평가 및 검증할 것이며, 별도의 보고서로 제공될 것이다. PK/PD 모델링은 탐구될 수 있다.

지속적 PD 및 안전성 데이터는 서술 통계(숫자, 평균, 중앙값, 최소값, 및 최대값)를 사용하여 요약될 것이다. 범주형 변수는 숫자(%)로 나타날 것이다.

실시예 6: 중증 신장 손상을 갖는 파브리 환자에서의 미갈라스타트 HCl의 약동학

환자(P3)를 이전의 미갈라스타트 연구에 등록하였지만, 중증의 신장 손상(즉, eGFR <30 mL/min/1.73 m²)의 결과로 2016년 5월에 중단시켰다. 2017년 5월에 시작하여, P3에 미갈라스타트 HCl Q4D를 투약하였다. PK 데이터는 3개월마다 수집하였다. 표 12는 다양한 수준의 신장 기능을 갖는 QOD 투약받은 환자와 비교한 P3의 PK 데이터를 보여준다.

표 13은 다양한 시점에서의 투약 후 P3의 경우의 미갈라스타트 혈장 농도를 보여준다.

표 14는 시간 경과에 따른 P3의 리소-Gb3 및 eGFR을 보여준다.

도 15는 시간 경과에 따른 P3의 리소-Gb3 및 eGFR을 보여준다.

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<110> Amicus Therapeutics, Inc. <120> METHODS OF TREATING FABRY DISEASE IN PATIENTS HAVING RENAL IMPAIRMENT <130> IAMI21P-0002-KR <150> US 62/859,904 <151> 2019-06-11 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 12436 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 cccttctgta ggggcagaga ggttctactt cattactgcg tctcctggga aggccatcag 60 gactgctggc taaagtggga accaggactc tttgtgagtt aagaatttgt gtatttatat 120 gtgtgttata cacatttttt aaaaaactgt aacgacatca ggttgagcag tcgtctccgg 180 gtggtgaatt atgtgtattt ttaaatttta tactatattg ttatttttca aatgttcgaa 240 attgaatatg tagattgttg ttatcagcag aaaaataaac attattcaaa tactctattc 300 agtaaagtaa tttattgggc gcctttgtca agcacgcatt tgcctagatg tgactctaca 360 gataaaattc acttggggcc tccccttaca gacaatcagg cagtggagac tgagtgcctg 420 aatggataga ccagcactca gaccactatt ttcagtatct gtttttctta actcagggcc 480 gtggttttca aacgtttttc gccttacggt cacccttagg gtcccccgag accggcccag 540 acagacagat atacaaaaac acatacacag tcatgagcgt ccaccatttc cccaccaggc 600 gcagcacagg cggcttcccg gcactgagat gggggggagg agggagagag cgcgaggggg 660 gaggggaaag cagagaacga aagaggcgga ggcggccccc gaaccccgct ctggtcttca 720 tcatcaccac ccctgggtcc ccagttccca cccacacacc aacctctaac gataccgggt 780 aattttcctc cttcttccct caaacggcta tagcgagacg gtagacgacg accagaacta 840 cttctgctca cgtaagcgag taatcacgtg agcgcctacg tcatgtgaga tctcggtcac 900 gtgagcaact ctcggcttaa actcgggatc actaaggtgc cgcacttcct tctggtatgg 960 aaatagggcg ggtcaatatc aagaaaggaa gagggtgatt ggttagcgga acgtcttacg 1020 tgactgatta ttggtctacc tctggggata accgtcccag ttgccagaga aacaataacg 1080 tcattattta ataagtcatc ggtgattggt ccgcccctga ggttaatctt aaaagcccag 1140 gttacccgcg gaaatttatg ctgtccggtc accgtgacaa tgcagctgag gaacccagaa 1200 ctacatctgg gctgcgcgct tgcgcttcgc ttcctggccc tcgtttcctg ggacatccct 1260 ggggctagag cactggacaa tggattggca aggacgccta ccatgggctg gctgcactgg 1320 gagcgcttca tgtgcaacct tgactgccag gaagagccag attcctgcat caggtatcag 1380 atattgggta ctcccttccc tttgcttttc catgtgtttg ggtgtgtttg gggaactgga 1440 gagtctcaac gggaacagtt gagcccgagg gagagctccc ccacccgact ctgctgctgc 1500 ttttttatcc ccagcaaact gtcccgaatc aggactagcc ctaaactttc tctgtgtgac 1560 ctttcctggg atgggagtcc ggccagcggc ccctgtttct ttctctctct ctctctctct 1620 cgttctcctt ctctttctct ttctcttctt tcctctctct ttctctctct ccctgcccgg 1680 ttctcttttt tcactgctcc ttgcagagca gggccacccc ataggcagtg tgcccaaagt 1740 agccctgccc ggttctattc agacccttct tgtgaacttc tgctcttcct ctgccgggtg 1800 ctaaccgtta gaacatctag ggtgggtagg aggaatgggg aactaagatt cgtgccattt 1860 tttctccttt tggggtcgtg gatttctcgg cagtatctcg agggagttag agagaccata 1920 aggtcgctga gatctctccc acctcgccca tgagcgtggc atcaggctgg aaggttgaca 1980 tggaggaact ttatacattt acacctttgc gtgagggttg aggctggatt agataggtat 2040 tgaacatatc tgaccctcac aatccttatc tgtaaattgg gattacaacc ttttaatttc 2100 agggagctga caaaaaaaat ctgaaaaata gttcttatct cacacaggtg agttttcaag 2160 gagataacct atttaaagta catagcacag cgcttgacca ttcaactgcg cttacagagc 2220 aaatgttcaa tgggaaaatg aatgtaaatc tacaaatctg aatgaatatg tgtatttttc 2280 tggagagagg atatttacct ttcttcaaat tctcaaaggg ctctgtgatt taaaaaaggt 2340 taggaatcac tgatagatgt tggtaaaagg tggcagtcac agtacatttc tgtgtccata 2400 agttattcct atgaatatct ttatagataa agtcaggatg ttggtcagac atcacagaag 2460 aaattggcct tgtaagtttc atgtgaccct gtggtacagt atgtgtggca attttgccca 2520 tcacggattt ttttttattg gtatttgcat ctgattataa aactaatgca tgatcattgc 2580 aaaaaatgta gataaagaag agcaaaatga aaataaagat ttccccccac cgttccacca 2640 cccagaaata atcatggttt aaatgttaat atacaacctt acaattgttt tctatataaa 2700 tgaaaacata gatttcttta tttcattatt ttccataaaa aatggatcat gtttatgtca 2760 tgtttggcta atggcaagac cctggcaccc agtctgggct caaattctgc ctcattgtta 2820 cttagccctg tgacattggg taaattacac tttttttttt tttttttttt tgagacgggg 2880 tctcgctctg tcgcccaggc tggagtgcag tggcacgatc tcggctcact gcaagtccgc 2940 ctcctgggtt cacgccattc ttctgcctca gcctcccgag tagctgggac tacaggcgcc 3000 tgccaccacg cctggctctt tttttttttt tttttttttt tagtacagac ggggtttcac 3060 catgttagcc agggtggtct caatctcctg acctcgtgat tcgcccgcct cagcctccca 3120 aagtgctggt gtgagccacc gtgcccagcc ttactttttt ttttgagagg gggtctcact 3180 ctgtcaccca ggttggagtg cagtggcgcg atctctgctc agtgcaaact ccacctcccg 3240 ggtttaagca gttctcctgt cgtagtctcc tgagtagctg ggattacagg cacaccacca 3300 cggccagcta atttttgtat tttcagtaga gacgggtttc accatgttgc ccaagctggt 3360 ctcgaactcc tggcctcaag tgatctgccc gccttggcct cccagagtgc tgggattaca 3420 ggtgtgagcc accgcacccg gcctcttttt tcttttttag tctatcatac cttgcaaata 3480 cagtggttct tcctatgtgt tggttttgat atttatgtaa tcaaacacat cagtttttcc 3540 tttctgattt ctgactttgg ggtcatgctg agaaagtcct ttcctacctg aagataatac 3600 agtatatacg tttcttacta gtatttttgt ggatttttaa aatatttaaa tctttagtcc 3660 atctgaactt gttcttctat cagaaatgcc acatttaata aataataagt cccatggtat 3720 cagatggctg gaaggacctc tttcgaaact ttgtttaatt ccattaatct gtgtattctt 3780 attctaatgc taatagttcc acactagctt cctttatctt ttttttcttt tttttttttt 3840 ttttgagctg gagtttcgct cttgttgccc aggctggagt acaatgtcac gatctcggtt 3900 caccgcaacc tccgcctccc aggttcaagc aattctcctg cctcatcctc gcgagtagct 3960 ggaattacag gcatgcgcca ccacgcctag ctattttgta tttttagtag agatggggtt 4020 tctccatgtt ggtcaggctg gtctcaaact cccagcctca ggtgatctgc ctgcctcggc 4080 ctcccaaaat gctgttatta caggcgtgag ccaccacgcc cagccttcat cttttaatga 4140 atgtacatgt atgtaatctt ttaggtgaac tttttgtaat gttgtgccaa gttccttaaa 4200 aagccctttt ggaagctggg caggtggcca cgcctgtaat cccagcattt tgggagtctg 4260 aggcaggtgg atcacttgag gccaggagtt caagactagc ctagccaaaa tgcaaaaccc 4320 tgtctctact aaagatacaa aaattagccg gatgcgatgg cacatgcctg taatctcagc 4380 tactcgggag gctgaggtag aagaatcgct tgaaccgggg aggcagaggt tgcagtgagc 4440 aagatggcgc cactgcactc cagcctgggt gacagaggga gactccatct caaaaaaaaa 4500 aaaaaaaaaa aagataaaaa ggaaacctaa gtactcttgg gctttgttaa ggattttgtt 4560 aaatatacaa aggattgcag ggaaaattaa cttattttta atattgagta tgcttatcca 4620 agagcaaaat aatatttctc catttattca aatcatttag gagcatcata gttttaacat 4680 atgggccttg cacgtatctt aaatttatct ctaggcattt taggttgttc agttgttctt 4740 gtgaatggga tctttttctc caaataggat tattgttgat atctgttgat tatgttaact 4800 ttgtagtttc tgactttact gaactgtctt cttagatcta atactctttt caatttcatc 4860 atatatttct cattcctatt ttgtttgggg tttttagggc gggaatatta acgggataag 4920 agagacaaaa gaaaatctgg aaaaacaatt cattttacct tacattgctt gtgattacta 4980 ccacactatt actgggttgg aaaaaattgt gaaatcccaa ggtgcctaat aaatgggagg 5040 tacctaagtg ttcatttaat gaattgtaat gattattgga atttctcttt cagtgagaag 5100 ctcttcatgg agatggcaga gctcatggtc tcagaaggct ggaaggatgc aggttatgag 5160 tacctctgca ttgatgactg ttggatggct ccccaaagag attcagaagg cagacttcag 5220 gcagaccctc agcgctttcc tcatgggatt cgccagctag ctaattatgt gagtttatag 5280 ataatgttct tgttcattca gaggactgta agcacttctg tacagaagct tgtttagaaa 5340 cagccctcat ggccgggcgt ggtggctcac gctgtaatcc caacactttg ggaggccgag 5400 gcgggtggat cacctgaggt caagagttca agaccagcct ggccaacatg gtgaaacccc 5460 aactctatta aaagtacaaa aaattagctg ggcatggtgg tgaacgcctg taaccccagc 5520 tacttgggag gctgaggcag gagaatcgct tgaacccagg aggtggaagt ttcagtgagc 5580 tgagatcacg ccattgcact ctagcctggg caacaaaaga gaaactccat ctcaaaaaaa 5640 aaaacaagga aaaaaagaaa cagccctcat gacacttaga aagtagaata gctggctgtt 5700 atctgaacat tgaattgtaa ggcttatcag gtggactttg cattccatca gcagacaatt 5760 tttttttttt tttttttttg agatggagtc tcattctgtc tcccaggctg gagggcagtg 5820 gtgcgatctc ggctcactgc aagctccacc tcctgggttc atgccattct cctgcctcag 5880 cctcccaagt agctgggacc acaggcaccc gccaccatgc ccagttaatt ttttgtattt 5940 ttagtagaga cggggtttca ccatgttagc caagatggtc tcgatctcct gacctcgtga 6000 tccgcccacc tcggcctccc aaagtgctgg gattacaggc atgagccacc gcgcctagcc 6060 tacaaatgtt ttgtaatagc tcttgaggcc catcttggag ttctcctttt gctaaaacca 6120 ctgaactctc taggaggaaa aaggaacttg gttcttgaca tatgtgtgca tgtatttcca 6180 tataaccttt aggaagctat tgcaatggta ctataaacta gaattttaga agatagaagg 6240 aaaatattct ggagatcatt gaagagaaat ggagtccaac actagttaaa gatgatgaag 6300 acagattttt ttttttgacg gagtctcgct ctgtcgccca ggctggagtg cagtggcaca 6360 atctcagctc actgcaaccc tccacctctt gggttcaagt gattctcctg cctcagcctc 6420 ccaagtagct gggactacag gcgcacacca ccacgcccgg ctaatttttg tatttttagt 6480 agagacaagg tttcaccata ttcgccaggc tggtctcgaa ctcctgacct tgtaatccgc 6540 ccaccttggc ctcccaaagt gctgggatta caggcatgag ccaccacgcc cggccgatga 6600 agacagattt tattcagtac taccacagta gaggaaagag ccaagttcaa ttccaaatac 6660 aacaaagaca ggtggagatt tatagccaat gagcagattg agggggtcag tggatggaat 6720 atttaagaag acatcaaggg tagggagctt cttgctaaag cttcatgtac ttaaacaaga 6780 agggtggggg atgagggaaa ttgatcagat atcaatggtg gcagtattga cttagcagga 6840 ttcttgctaa gaggtcttgc taggacagac ataggaagcc aaggtggagg tctagtcgaa 6900 aagaaggctc atcagagaag tctaactaaa gtttggtcaa gaagagtctt tgtcaaggta 6960 aatctatcat ttccctcaaa aggtaatttt caggatccca tcaggaagat tagcatggct 7020 gctagctttc tcctcagttc tgggctatag ctcacatgcc tagtttgaac tagctcagca 7080 gaactggggg atttattctt tgtcttccaa caaactcatc tggatgattt tgggggtttg 7140 tggggaaaag cccccaatac ctggtgaagt aaccttgtct cttcccccag cctggaatgg 7200 ttctctcttt ctgctacctc acgattgtgc ttctacaatg gtgactcttt tcctccctct 7260 catttcaggt tcacagcaaa ggactgaagc tagggattta tgcagatgtt ggaaataaaa 7320 cctgcgcagg cttccctggg agttttggat actacgacat tgatgcccag acctttgctg 7380 actggggagt agatctgcta aaatttgatg gttgttactg tgacagtttg gaaaatttgg 7440 cagatggtaa tgtttcattc cagagattta gccacaaagg aaagaacttt gaggccatgg 7500 tagctgagcc aaagaaccaa tcttcagaat tttaaatacc ctgtcacaat actggaaata 7560 attattctcc atgtgccaga gctcccatct cttctctttc agttcattaa ttaattaatt 7620 aattcatgta aaatccatgc atacctaacc atagctaata ttgtgcactt ataattcaag 7680 agggctctaa gagttaatta gtaattgtaa ctctctataa catcatttag gggagtccag 7740 gttgtcaatc ggtcacagag aaagaagcat cttcattcct gcctttcctc aatatacaca 7800 ccatctctgc actacttcct cagaacaatc ccagcagtct gggaggtact ttacacaatt 7860 taagcacaga gcaactgcct gtccctgctg ctagtttaaa catgaacctt ccaggtagcc 7920 tcttcttaaa atatacagcc ccagctgggc atgatggctc atgcctgtaa tcctagcact 7980 ttgggaggct gaggcgggtg gattacttga ggtcaggagt tcgagaccac cctggccaac 8040 atggtgaaac cccatctcta gtaaaaatac aaaaattagc tgactttggt ggcacatgcc 8100 tgtaatccca gctacttggg aagctgagac agaagagtca cttgaacctg ggaaacagag 8160 gttgcagtga gccaagatcg caccactgca ctccaccctg gatgacagac tgaaccccat 8220 ctcaaaaaat taaaataaaa taaaataaaa taactatata tatagcccca gctggaaatt 8280 catttctttc ccttatttta cccattgttt tctcatacag gttataagca catgtccttg 8340 gccctgaata ggactggcag aagcattgtg tactcctgtg agtggcctct ttatatgtgg 8400 ccctttcaaa aggtgagata gtgagcccag aatccaatag aactgtactg atagatagaa 8460 cttgacaaca aaggaaacca aggtctcctt caaagtccaa cgttacttac tatcatccta 8520 ccatctctcc caggttccaa ccacttctca ccatccccac tgctgtaatt atagcctaag 8580 ctaccatcac ctggaaagtc atccttgtgt cttccccttt atttcaccat tcatgtcctg 8640 tctatcaaca gtccttccac cagtatctct aaaatatctc ctgaatcagc ccacttcctt 8700 ccatcttcac tacatgcacc ctggccttcc aagctactat cggctctcaa ccagactgct 8760 gggaccacct gatctctctg cttccactct gtctcaaccc ccatctattt tccaagcagc 8820 actagagtta tcatattaaa atgtaaatat cagttttttt tttaaagaaa aaaaccctga 8880 gacttaacag agttataaaa aatataaatg tcatcatcag ttccctgctt aaaaccctta 8940 actcgcttcc aattgcactt ggaatgaaac caaactgcac tgatccagcc cttgcctgcc 9000 tccccaaagt ccaaggggtc atggctcttt ccctggctac actggttttc tttctgtccc 9060 tcaacactgc aagcctattg ctgccccagg gcctttacac ttgctttttt tctgcctaga 9120 acagttcttc cccaaagatt tttaaagggc cgggctcctt aacattgaag tcgcagacca 9180 aacgccacat atgcagacag ttcttctcta actactttaa aatagccctc tgtccattca 9240 ttcttcatca cattaacctg tttaattttc ttctcagagc tccacactat ttggaagtat 9300 ttgttgactt gttaccatgt ctccccacta gagtgtaagt ttcatgaggg cagggacctt 9360 gtctgacttt gactgtatct ctcgcatatg gttaagtgtt aaatagttat ttatggaatg 9420 aatccctatt attccctcat tatctctgca aaatagtctt ttttctcaac atcttaaacc 9480 tgatatccca cctgcctatc tacaaacttt ttttttgcga cagagtctca ctgtcaccca 9540 ggctagagtg cagtggcgcc atctcggctc actgcaacct ccgcctcccg ggtttaagcg 9600 attctcttgc ctcagcctcc cagtagctgg gattataggc gtgcgctacc acatctggct 9660 aatttttgta tttttagtag agatggtttc accatgttgg ccaggcttgt ctcgaactcc 9720 tgacctcaga tgatccacct gcctcggcct cccaaagtgc tgggattaca ggcatgagcc 9780 accgtgccca gcctctacaa actttttatt ccattaacaa actatatgct gggatttaag 9840 ttttcttaat acttgatgga gtcctatgta attttcgagc ttttaatttt actaagacca 9900 ttttagttct gattatagaa gtaaattaac tttaagggat ttcaagttat atggcctact 9960 tctgaagcaa acttcttaca gtgaaaattc attataaggg tttagacctc cttatggaga 10020 cgttcaatct gtaaactcaa gagaaggcta caagtgcctc ctttaaactg ttttcatctc 10080 acaaggatgt tagtagaaag taaacagaag agtcatatct gttttcacag cccaattata 10140 cagaaatccg acagtactgc aatcactggc gaaattttgc tgacattgat gattcctgga 10200 aaagtataaa gagtatcttg gactggacat cttttaacca ggagagaatt gttgatgttg 10260 ctggaccagg gggttggaat gacccagata tggtaaaaac ttgagccctc cttgttcaag 10320 accctgcggt aggcttgttt cctattttga cattcaaggt aaatacaggt aaagttcctg 10380 ggaggaggct ttatgtgaga gtacttagag caggatgctg tggaaagtgg tttctccata 10440 tgggtcatct aggtaacttt aagaatgttt cctcctctct tgtttgaatt atttcattct 10500 ttttctcagt tagtgattgg caactttggc ctcagctgga atcagcaagt aactcagatg 10560 gccctctggg ctatcatggc tgctccttta ttcatgtcta atgacctccg acacatcagc 10620 cctcaagcca aagctctcct tcaggataag gacgtaattg ccatcaatca ggaccccttg 10680 ggcaagcaag ggtaccagct tagacaggta aataagagta tatattttaa gatggcttta 10740 tatacccaat accaactttg tcttgggcct aaatctattt ttttcccttg ctcttgatgt 10800 tactatcagt aataaagctt cttgctagaa acattacttt atttccaaaa taatgctaca 10860 ggatcatttt aatttttcct acaagtgctt gatagttctg acattaagaa tgaatgccaa 10920 actaacaggg ccacttatca ctagttgcta agcaaccaca ctttcttggt ttttcaggga 10980 gacaactttg aagtgtggga acgacctctc tcaggcttag cctgggctgt agctatgata 11040 aaccggcagg agattggtgg acctcgctct tataccatcg cagttgcttc cctgggtaaa 11100 ggagtggcct gtaatcctgc ctgcttcatc acacagctcc tccctgtgaa aaggaagcta 11160 gggttctatg aatggacttc aaggttaaga agtcacataa atcccacagg cactgttttg 11220 cttcagctag aaaatacaat gcagatgtca ttaaaagact tactttaaaa tgtttatttt 11280 attgccaact actacttcct gtccaccttt ttctccattc actttaaaag ctcaaggcta 11340 ggtggctcat gcctgtaatc ccagcacttt gggaggctga ggcgggcaga tcacctgagg 11400 tcgggacttt gagacccgcc tggacaacat ggtgaaaccc catttctaat aaaaatataa 11460 aaattagcca ggtgtggtgg cgcacctgtg gtcccagcta ctctgggggc tgaggcatga 11520 gaatcgcttg aacccgggag tggaggttgc attgagctga gatcatgcca cctcactcca 11580 gcctgggcaa caaagattcc atctcaaaaa aaaaaaaaaa gccaggcaca gtggctcatg 11640 cctggaatcc cagcactttt ggaagctgag gcaggcagat cacttgaggt taggatttca 11700 agaccagcct ggctaacata gtaaagccct gtctctacta aaaatacaaa aattagccag 11760 gtatggtggc gagcttctgt agccccagct actcaggaga ctgaggcagg agaatcactt 11820 gaacccggga agtggggggg tgcagtgacc caagatcacg ccactgcatt ccagcctggg 11880 caacagagca agactccatc tcaaaaaaaa aagttctatt tccttgaata aaattttccg 11940 aagtttaaac tttaggaata aaactattaa acccgtattt actcatccag atacccaccc 12000 cccttgttga gattctctcc caattatcaa aatgtgtagc atatttaact accaagagct 12060 aaacatcatt aagactgaaa tgtattaaga aggatgtata ggccaggcac ggtgtctcac 12120 gcctgtaatc ccaacacttt gggaggccaa gtcgggcgga tcacgaggtc aggagatgga 12180 gaccatcctg gccaacatgg tgaaaccccc tctctactaa aaatacaaaa attagccagg 12240 caggtggcag gcacctgtaa tcccagctac tccagaggct gaggcaggac aatcacttga 12300 acctgggagg cagaggctgc agtgagctga ggttgtacca attgcactcc agcctaggta 12360 acgagcaaca ctccatctca aaaaaagaaa aaaaaaaaga tgtataattt ggaactgtta 12420 agaggcattt taaaga 12436 <210> 2 <211> 429 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Gln Leu Arg Asn Pro Glu Leu His Leu Gly Cys Ala Leu Ala Leu 1 5 10 15 Arg Phe Leu Ala Leu Val Ser Trp Asp Ile Pro Gly Ala Arg Ala Leu 20 25 30 Asp Asn Gly Leu Ala Arg Thr Pro Thr Met Gly Trp Leu His Trp Glu 35 40 45 Arg Phe Met Cys Asn Leu Asp Cys Gln Glu Glu Pro Asp Ser Cys Ile 50 55 60 Ser Glu Lys Leu Phe Met Glu Met Ala Glu Leu Met Val Ser Glu Gly 65 70 75 80 Trp Lys Asp Ala Gly Tyr Glu Tyr Leu Cys Ile Asp Asp Cys Trp Met 85 90 95 Ala Pro Gln Arg Asp Ser Glu Gly Arg Leu Gln Ala Asp Pro Gln Arg 100 105 110 Phe Pro His Gly Ile Arg Gln Leu Ala Asn Tyr Val His Ser Lys Gly 115 120 125 Leu Lys Leu Gly Ile Tyr Ala Asp Val Gly Asn Lys Thr Cys Ala Gly 130 135 140 Phe Pro Gly Ser Phe Gly Tyr Tyr Asp Ile Asp Ala Gln Thr Phe Ala 145 150 155 160 Asp Trp Gly Val Asp Leu Leu Lys Phe Asp Gly Cys Tyr Cys Asp Ser 165 170 175 Leu Glu Asn Leu Ala Asp Gly Tyr Lys His Met Ser Leu Ala Leu Asn 180 185 190 Arg Thr Gly Arg Ser Ile Val Tyr Ser Cys Glu Trp Pro Leu Tyr Met 195 200 205 Trp Pro Phe Gln Lys Pro Asn Tyr Thr Glu Ile Arg Gln Tyr Cys Asn 210 215 220 His Trp Arg Asn Phe Ala Asp Ile Asp Asp Ser Trp Lys Ser Ile Lys 225 230 235 240 Ser Ile Leu Asp Trp Thr Ser Phe Asn Gln Glu Arg Ile Val Asp Val 245 250 255 Ala Gly Pro Gly Gly Trp Asn Asp Pro Asp Met Leu Val Ile Gly Asn 260 265 270 Phe Gly Leu Ser Trp Asn Gln Gln Val Thr Gln Met Ala Leu Trp Ala 275 280 285 Ile Met Ala Ala Pro Leu Phe Met Ser Asn Asp Leu Arg His Ile Ser 290 295 300 Pro Gln Ala Lys Ala Leu Leu Gln Asp Lys Asp Val Ile Ala Ile Asn 305 310 315 320 Gln Asp Pro Leu Gly Lys Gln Gly Tyr Gln Leu Arg Gln Gly Asp Asn 325 330 335 Phe Glu Val Trp Glu Arg Pro Leu Ser Gly Leu Ala Trp Ala Val Ala 340 345 350 Met Ile Asn Arg Gln Glu Ile Gly Gly Pro Arg Ser Tyr Thr Ile Ala 355 360 365 Val Ala Ser Leu Gly Lys Gly Val Ala Cys Asn Pro Ala Cys Phe Ile 370 375 380 Thr Gln Leu Leu Pro Val Lys Arg Lys Leu Gly Phe Tyr Glu Trp Thr 385 390 395 400 Ser Arg Leu Arg Ser His Ile Asn Pro Thr Gly Thr Val Leu Leu Gln 405 410 415 Leu Glu Asn Thr Met Gln Met Ser Leu Lys Asp Leu Leu 420 425

Claims (50)

1. 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법으로서, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물(FBE)을 4일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
2. 제1항에 있어서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는, 방법.
3. 제1항에 있어서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는, 방법.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 α-갈락토시다제 A에 HEK 분석 적합한 돌연변이를 갖는, 방법.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태인, 방법.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는, 방법.
7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는, 방법.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 경구 투여되는, 방법.
9. 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법으로서, 방법은 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물(FBE)을 7일마다 1회의 빈도로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
10. 제9항에 있어서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는, 방법.
11. 제9항에 있어서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는, 방법.
12. 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 α-갈락토시다제 A에 HEK 분석 적합한 돌연변이를 갖는, 방법.
13. 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태인, 방법.
14. 제9항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는, 방법.
15. 제9항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는, 방법.
16. 제9항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 경구 투여되는, 방법.
17. 신장 손상을 갖는 환자에서 파브리 질병을 치료하는 방법으로서, 방법은 다음을 포함하는, 방법:
    제1 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물(FBE)을 격일마다 1회의 제1 빈도로 투여하는 단계; 및
    제2 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 격일마다 1회 미만의 제2 빈도로 투여하는 단계.
18. 제17항에 있어서, 제2 빈도는 3일마다 1회 내지 7일마다 1회의 범위인, 방법.
19. 제17항 또는 제18항에 있어서, 제2 빈도는 4일마다 1회 또는 7일마다 1회인, 방법.
20. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 빈도로의 투여는 환자의 추정 사구체 여과율(eGFR) 감소 후에 시작되는, 방법.
21. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 다음을 추가로 포함하는, 방법:
    환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소(lyso)-Gb3를 측정하는 단계;
    제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;
    제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및
    (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및
    (ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후
    제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.
22. 제21항에 있어서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM인, 방법.
23. 제21항 또는 제22항에 있어서, 미갈라스타트를 측정하는 단계는 미갈라스타트 농도를 측정하는 단계를 포함하고, 제2 빈도로의 투여는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정된 후에 시작되는, 방법.
24. 제21항 또는 제22항에 있어서, 미갈라스타트를 측정하는 단계는 AUC_0-∞ 또는 C_trough를 측정하는 단계를 포함하고, 제2 빈도로의 투여는 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 2배 초과하는 증가가 있은 후에 시작되는, 방법.
25. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 빈도는 4일마다 1회이고, 방법은 제3 기간 동안 환자에게 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 FBE를 7일마다 1회의 제3 빈도로 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
26. 제25항에 있어서, 다음을 추가로 포함하는, 방법:
    환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;
    제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;
    제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계;
    (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및
    (ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 96시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후
    제2 빈도로 투여를 시작하는 단계;
    제2 기간 동안 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계; 및
    (i) 제2 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및
    (ii) 제2 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제2 기간 동안의 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후
    제3 빈도로 투여를 시작하는 단계.
27. 제26항에 있어서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM인, 방법.
28. 제26항 또는 제27항에 있어서, 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 측정되는, 방법.
29. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 빈도는 7일마다 1회인, 방법.
30. 제29항에 있어서, 다음을 추가로 포함하는, 방법:
    환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 리소-Gb3를 측정하는 단계;
    제1 기간 동안 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 결정하는 단계;
    제1 기간 동안 환자로부터의 하나 이상의 혈장 샘플에서 미갈라스타트 농도, AUC_0-∞ 및/또는 C_trough를 측정하는 단계; 및
    (i) 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가, 및
    (ii) 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여가 측정된 후 48시간에 약 5 ng/mL 초과의 미갈라스타트가 측정되거나, 제1 기간 동안 정상 신장 기능과 비교하여 AUC_0-∞ 및/또는 C_trough에서 1.5배 초과하는 증가가 있은 후
    제2 빈도로 투여를 시작하는 단계.
31. 제30항에 있어서, 제1 기준선 리소-Gb3 수준을 초과하는 증가는 적어도 약 30% 및/또는 2 nM인, 방법.
32. 제30항 또는 제31항에 있어서, 약 10 ng/mL 초과의 미갈라스타트는 제1 기간 동안 미갈라스타트 투여 후 48시간에 측정되는, 방법.
33. 제17항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는, 방법.
34. 제17항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는, 방법.
35. 제17항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태인, 방법.
36. 제17항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는, 방법.
37. 제17항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는, 방법.
38. 제17항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 경구 투여되는, 방법.
39. 제17항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 α-갈락토시다제 A에 HEK 분석 적합한 돌연변이를 갖는, 방법.
40. 신장 손상을 갖는 환자의 파브리 질병 치료에서의 미갈라스타트의 용도로서, 미갈라스타트는 약 100 mg 내지 약 300 mg의 미갈라스타트 또는 이의 염의 유리 염기 등가물(FBE) 양으로 신장 손상을 갖는 파브리 질병 환자에게 격일마다 1회 미만의 빈도로 투여되는, 용도.
41. 제40항에 있어서, 빈도는 3일마다 1회 내지 7일마다 1회의 범위인, 용도.
42. 제40항 또는 제41항에 있어서, 빈도는 4일마다 1회인, 용도.
43. 제40항 또는 제41항에 있어서, 빈도는 7일마다 1회인, 용도.
44. 제40항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 중등도의 신장 손상을 갖는, 용도.
45. 제40항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 중증의 신장 손상을 갖는, 용도.
46. 제40항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 α-갈락토시다제 A에 HEK 분석 적합한 돌연변이를 갖는, 용도.
47. 제40항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 고체 투여 형태인, 용도.
48. 제40항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 123 mg FBE를 투여받는, 용도.
49. 제40항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 약 150 mg 미갈라스타트 HCl을 투여받는, 용도.
50. 제40항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 미갈라스타트는 경구 투여되는, 용도.

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