KR20230057134A - 해죽순 추출물을 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물 - Google Patents

해죽순 추출물을 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 식후 혈당상승억제용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 당뇨병을 유발할 수 있는 식후 혈당조절이나 당뇨병 환자의 혈당조절 또는 혈관합병증, 비만 등을 예방 또는 감소시킬 수 있는 조성물을 제공할 수 있다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 사용하여 쉽고 간단하게 제조할 수 있으며 약효가 우수한 비만, 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공할 수 있다.

Description

해죽순 추출물을 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물{A composition for postprandial anti-hyperglycemia comprising Nipa Fruticans Wurmb extract}
본 발명은 식후 혈당상승억제용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물에 관한 것이다.
최근 미국당뇨병협회(American Diabetes Association, ADA)에 따르면, 인체의 공복 혈당이 126mg/dL 이상이거나 또는 식사 후 2시간이 지난 혈당이 200mg/dL일 때 이를 당뇨병이라고 정의하고 있다.
혈당조절은 당뇨병의 예방 및 치료관리에서 가장 중요한 인자이고, 당뇨병의 합병증 유발 가능성을 결정할 수 있는 가장 중요한 인자로 알려져 있다. 혈당은 공복 혈당, 식후 혈당 및 당화혈 색소가 동시에 조절되어야 한다. 특히 식후 혈당은 당뇨병성 혈관 합병증을 유발하는 주된 병리기전이고, 혈당조절이 양호한 정상군이나 당뇨병의 유병기간이 길지 않은 환자에게서 식후 혈당 조절은 당뇨병의 발병이나 당뇨 합병증을 예방하기 위해 매우 중요한 요인이 되고 있다.
식후 고혈당은 LDL 산화과정을 촉진하고, 내피세포에서 NO 생산과 이용을 감소시킬 뿐 아니라 FMD를 억제하며, 내피세포와 백혈구의 상호작용을 활성화시키고 내피세포에서 다양한 염증유발 및 산화 스트레스를 증가시켜 내피세포 기능을 감소시킨다. 내피세포 기능장애는 심혈관 질환 발생의 첫 단계이자, 가장 초기에 발견될 수 있는 표지자로 알려져 있으므로, 식후 고혈당은 산화스트레스 유발 및 내피세포기능장애에 기여하여 혈관합병증을 유발할 수 있다.
이와 관련하여 한국등록특허 제10-0996985호는 κ-카제인을 유효 성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 GLP-1 분비 촉진제 및 식후 혈당값 상승 억제제, 및 젖 유래의 카제인 단백질을 함유하고, 해당 젖 유래의 카제인 단백질의 60질량% 이상이 κ-카제인인 것을 특징으로 하는 GLP-1 분비 촉진용 음식품 및 식후 혈당값 상승 억제용 음식품을 개시하고 있다.
또한 한국등록특허 제10-0966613호는 혈당상승억제 효능을 갖는 아르기닌 유도체 화합물을 개시하고 있고, 한국등록특허 제10-1155079호는 녹차추출물로부터 분리된 카테킨 칼레이트를 이용한 식후 혈당상승과 비만을 억제하는 조성물을 개시하고 있으며, 한국등록특허 제10-0924478호는 약학적으로 허용되는 음이온 교환 수지인 콜레스티미드를 이용한 식후 과혈당 개선제를 개시하고 있다.
이러한 연구결과에서 알 수 있듯이, 당뇨의 발병 또는 당뇨병 환자에게서 식후 고혈당 조절이 매우 중요하고, 식후 고혈당을 조절할 수 있는 치료약제들이 적절히 투여된다면 당뇨병 또는 당뇨병성 합병증 예방에 도움이 될 수 있을 것이다.
한국등록특허 제10-0996985호 한국등록특허 제10-0966613호 한국등록특허 제10-1155079호 한국등록특허 제10-0924478호
본 발명은 당뇨병을 유발할 수 있는 식후 혈당조절이나 당뇨병 환자의 혈당조절 또는 혈관합병증, 비만 등을 예방 또는 감소시킬 수 있는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 해죽순 추출물은 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 해죽순 추출물은 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
아울러 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 해죽순 추출물은 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
아울러 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 당뇨병을 유발할 수 있는 식후 혈당조절이나 당뇨병 환자의 혈당조절 또는 혈관합병증, 비만 등을 예방 또는 감소시킬 수 있는 조성물을 제공할 수 있다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 사용하여 쉽고 간단하게 제조할 수 있으며 약효가 우수한 비만 또는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 해죽순 추출물의 Rat Intestinal α-glucosidase에 대한 저해 활성을 나타낸다.
도 2는 해죽순 추출물의 porcine pancreatic α-amylase에 대한 저해 활성을 나타낸다.
도 3은 해죽순 추출물의 Rat Intestinal sucrase에 대한 저해 활성을 나타낸다.
도 4는 해죽순 추출물의 Rat Intestinal maltase에 대한 저해 활성을 나타낸다.
도 5는 해죽순 추출물의 Rat Intestinal glucoamylase에 대한 저해 활성을 나타낸다.
도 6은 sucrose에 의한 해죽순 열수 추출물의 식후 혈당상승 저해작용을 나타낸다.
도 7은 starch에 의한 해죽순 열수 추출물의 식후 혈당상승 저해작용을 나타낸다.
도 8은 sucrose에 의한 해죽순 에탄올 추출물의 식후 혈당상승 저해작용을 나타낸다.
도 9는 starch에 의한 해죽순 에탄올 추출물의 식후 혈당상승 저해작용을 나타낸다.
도 10은 해죽순 줄기의 추출물을 4주간 섭취시키면서 측정한 체중을 나타낸다.
이하 실시예를 바탕으로 본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명에 사용된 용어, 실시예 등은 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고 통상의 기술자의 이해를 돕기 위하여 예시된 것에 불과할 뿐이며, 본 발명의 권리범위 등이 이에 한정되어 해석되어서는 안 된다.
본 발명에 사용되는 기술 용어 및 과학 용어는 다른 정의가 없다면 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 나타낸다.
본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물에 관한 것이다.
상기 해죽순 추출물은 해죽순의 줄기 또는 꽃을 용매로 가열 추출하고 여과한 후 감압 농축한 다음 농축액을 동결 건조하여 추출물을 수득할 수 있다.
상기 가열 추출은 해죽순 100중량부에 대하여 용매 500~2,000중량부를 가하고 30~150℃에서 1~10시간 가열하여 추출하는 것이 바람직하다.
상기 용매는 증류수, 에탄올, 메탄올, 헥산, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르에서 선택되는 하나 이상일 수 있다.
가열 추출하고 여과한 후 감압 농축하여 용매를 모두 제거한 다음 농축액을 동결 건조하여 추출물을 수득한다.
상기 해죽순 추출물은 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물에서 선택되는 하나 이상이 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명은 해죽순 추출물로서 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물을 동시에 사용할 수 있으며, 이때 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물의 중량비는 20~40:60~80 인 것이 바람직하다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물로서 해죽순 줄기 추출물 및 해죽순 꽃 추출물을 동시에 사용할 수 있으며, 이때 해죽순 줄기 추출물 및 해죽순 꽃 추출물의 중량비는 60~80:20~40 인 것이 바람직하다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 텍스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀롤로즈, 메틸 셀롤로즈, 미정질 셀롤로즈, 폴리비닐 피톨리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필 히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
식품은 각종 식품류, 캔디, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등의 형태일 수 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 음료 등의 형태로 제공될 수 있다.
또한 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
아울러 본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
이하 실시예를 통해 본 발명을 상세히 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 실시를 위하여 예시된 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
(실시예 1) 해죽순 추출물의 In-vitro 항당뇨 활성
(가) Rat intestinal α-glucosidase inhibition assay
● 효소: 래트 소장 아세톤 분말
● substrate: PNP-glycoside(pNPG, p-Nitrophenyl α-D-glucopyranoside)
래트 소장 아세톤 분말 100mg을 0.9% sodium phosphate buffer(pH 6.9) 3㎖에 첨가하여 30초간 12회 ice water bath에서 초음파처리 후, 10,000rpm, 4℃에서 30분간 원심분리 하였다.
원심분리 후 상층액을 회수하여 Rat intestinal α-glucosidase Inhibition assay에 사용하였다. Rat α-glucosidase solution 100㎕와 Sample solution 50㎕를 넣고 37℃에서 10분간 반응시킨 후, 50㎕의 5mM pNPG 용액을 가하여 37℃에서 15분간 반응시켰다.
반응이 끝난 후, 405nm에서 ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하여 rat intestinal α-glucosidase에 대한 저해활성을 분석하였다.
해죽순 추출물이 나타내는 Rat Intestinal α-glucosidase에 대한 저해 활성은 도 1에 제시된다. 여기서 SWE는 해죽순 줄기의 열수 추출물, FWE는 해죽순 꽃의 열수 추출물, SEE는 해죽순 줄기의 에탄올 추출물, FEE는 해죽순 꽃의 에탄올 추출물을 의미한다.
줄기 및 꽃의 용매별 추출물의 저해활성은 농도 의존적으로 증가하며, α-glucosidase 저해활성은 꽃보다 줄기에서, 에탄올 추출물보다 열수 추출물에서 크게 증가하였다.
(나) Porcine pancreatic α-amylase inhibition assay
● 효소: porcine pancreatic α-amylase
● substrate: 1% starch solution in 0.02M sodium phosphate buffer(pH 6.9)
● coloring reagent: 3,5-dinitrosalicylic acid solution(DNS) in 2M NaOH with 30% sodium potassium tartrate tetrahydrate
0.02M 소듐 포스페이트 버퍼(pH 6.9; 0.006M 소듐 클로라이드 포함)에 녹인 1U 농도의 porcine pancreatic α-amylase 용액 300㎕에 샘플 용액 200㎕을 넣고 25℃에서 10분간 배양시켰다.
이 용액에 25℃에서 10분 동안 예비 배양시킨 1% starch 용액 500㎕를 첨가하여 25℃에서 10분간 반응시켰다.
30% Rochelle 염에 녹인 1% DNS 용액을 1㎖ 첨가하여 반응을 정지시킨 후 boiling water bath에서 5분간 처리한 다음 실온으로 식히고 10㎖의 증류수를 첨가하였다.
α-amylase에 의해서 기질로부터 분해된 당과 DNS 용액과의 반응액을 540nm에서 ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하였으며, 샘플 대신 샘플을 용해시킨 용매를 넣은 것을 대조구로 하였다.
해죽순 추출물이 나타내는 Porcine pancreatic α-amylase에 대한 저해 활성은 도 2에 제시된다.
줄기 및 꽃의 용매별 추출물의 저해활성은 농도 의존적으로 증가하며, α-amylase 저해활성은 줄기보다 꽃에서, 열수 추출물보다 에탄올 추출물에서 크게 증가하였다.
(다) Rat intestinal glucose oxidase assay(Maltose, Sucrose, Glucoamylase)
● 효소: 래트 소장 아세톤 분말
● substrate: 100mM maltose, 200mM sucrose, 1% starch solution
● Oxidase kit: Glucose oxidase/peroxidase reagent(Sigma G3660), O-Dianisidine reagent(Sigma D2679)
효소는 래트 소장 아세톤 분말(Sigma S9765)을 사용하였고 기질은 maltose, sucrose, starch(Junsei)를 사용하였다.
래트 소장 아세톤 분말 100㎎을 3㎖의 0.9% NaCl 용액(Junsei)에 첨가한 후 30초간 12회 iced water bath에서 초음파 조사한 다음 10,000rpm, 4℃에서 30분간 원심 분리하였다. 분리된 상층액을 실험에 사용하였다.
96 clear plate에 100㎕의 rat α-glucosidase 용액에 50㎕의 시료를 넣은 다음 37℃ 인큐베이터에서 10분간 정치시켰다.
각각의 실험 방법에 따라 50㎕의 100mM maltose, 또는 200mM sucrose, 1% starch 용액을 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시키고 30분간 반응 사이에 Glucose oxidase/peroxidase reagent(Sigma G3660)와 O-Dianisidine reagent(Sigma D2679)를 섞은 용액 1㎖을 2㎖ Epp Tube에 넣은 후 37℃ 인큐베이터에서 5분간 방치하여 온도를 37℃로 맞춘 후, 앞서 30분 동안 반응한 래트 소장 아세톤 분말과 샘플, 기질 용액 혼합시약 200㎕을 취하여 1㎖ Glucose oxidase/peroxidase reagent와 O-Dianisidine reagent과 반응시킨 후 37℃ 인큐베이터에서 10분간 반응시켰다.
각각의 2㎖ Epp tube에 12N 황산 1㎖을 첨가하여 반응을 정지시킨 후 96 clear plate에 200㎕씩 넣은 후 540nm에서 ELISA reader를 사용하여 흡광도를 측정하여 Rat intestinal glucose oxidase(maltose, sucrose, glucoamylase)에 대한 저해활성을 분석하였다.
시료 대신 시료를 용해시킨 용매를 넣은 것을 대조구로 하였다.
해죽순 추출물이 나타내는 Sucrase에 대한 저해 활성은 도 3에 제시된다.
추출물 농도에 따라 줄기와 꽃의 용매별 추출물의 저해활성은 농도 의존적으로 크게 증가하였다.
해죽순 추출물이 나타내는 Maltase에 대한 저해 활성은 도 4에 제시된다.
추출물 농도에 따라 줄기와 꽃의 용매별 추출물의 저해활성은 농도 의존적으로 증가하나, 줄기 에탄올 추출물의 경우 보다 낮은 농도 의존적인활성을 보인다.
해죽순 추출물이 나타내는 Glucoamylase에 대한 저해 활성은 도 5에 제시된다.
추출물 농도에 따라 줄기와 꽃 추출물의 저해활성은 농도 의존적으로 증가함을 확인할 수 있다.
아래 표 1은 해죽순 추출물의 Rat intestinal α-glucosidase, Porcine pancreatic α-amylase, Rat intestinal sucrase, Rat intestinal maltase, Rat intestinal glucoamylase에 대한 50% 저해활성 농도(IC50)를 나타내고 있다.
　 The half maximal inhibitory concentration (IC50) (mg/㎖)
열수 추출물 에탄올 추출물
줄기 꽃 줄기 꽃
α-glucosidase 3.653 3.883 2.440 1.541
α-amylase 0.764 - - -
sucrase 0.283 0.254 0.256 0.539
maltase 0.598 0.617 0.761 1.992
glucoamylase 0.571 0.550 0.656 0.479
아래 표 2는 해죽순 줄기 추출물을 혼합하여 사용한 경우, Rat intestinal α-glucosidase에 대한 50% 저해활성 농도(IC50)를 나타내고 있다.
에탄올 추출물:열수 추출물
(중량비)　		 The half maximal inhibitory concentration (IC50) (mg/㎖)
100:0 2.440
90:10 2.385
70:30 1.847
50:50 2.406
0:100 3.653
해죽순 에탄올 추출물 및 해죽순 열수 추출물의 중량비가 70:30 인 경우, 50% 저해활성 농도(IC50)가 가장 낮은 수치를 나타내었다.
본 발명은 해죽순 추출물로서 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물을 동시에 사용할 수 있으며, 이때 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물의 중량비는 20~40:60~80 인 것이 바람직하다.
아래 표 3은 해죽순 에탄올 추출물을 혼합하여 사용한 경우, Rat intestinal α-glucosidase에 대한 50% 저해활성 농도(IC50)를 나타내고 있다.
줄기 추출물:꽃 추출물
(중량비)　		 The half maximal inhibitory concentration (IC50) (mg/㎖)
100:0 2.440
90:10 1.509
70:30 1.162
50:50 1.483
0:100 1.541
해죽순 줄기 추출물 및 해죽순 꽃 추출물의 중량비가 70:30 인 경우, 50% 저해활성 농도(IC50)가 가장 낮은 수치를 나타내었다.
본 발명은 해죽순 추출물로서 해죽순 줄기 추출물 및 해죽순 꽃 추출물을 동시에 사용할 수 있으며, 이때 해죽순 줄기 추출물 및 해죽순 꽃 추출물의 중량비는 60~80:20~40 인 것이 바람직하다.
(실시예 2) 해죽순 추출물의 In-vivo test에 의한 식후 혈당조절 작용
(가) 실험동물
생후 4주령의 수컷 SD rat을 라온바이오로부터 구입하여 동물 사육실에서 사육 후, 생후 6주령 때 건강한 동물만을 선별 후 실험에 사용하였다.
(나) 혈당상승 억제작용 평가
실험동물을 실험 전 20시간 이상 절식시킨 후, 2g/kg body weight의 Sucrose에 해죽순 추출물을 0.1g/kg, 0.5g/kg의 농도로 투여하였으며, 시료는 경구 투여용 존대를 이용하여 경구 투여하였다.
투여군은 5군으로 각 군당 6마리씩 사용하였다. 경구 투여 후 30분, 60분 및 120분에 래트 꼬리 정맥으로부터 채혈하여 정맥혈의 혈당 농도 변화를 혈당계(Caresens Ⅱ)로 측정하였다.
Sucrose에 의한 해죽순 열수 추출물의 식후 혈당상승 저해작용은 도 6에 제시된다.
Sucrose만 투여한 control의 경우 투여 30분 후 222.0±15.0 ㎎/dl으로 혈당이 상승하였으나, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 194.3±15.8 ㎎/dl, 꽃 0.5 g/kg의 경우 181.1±21.5 ㎎/dl 으로 Control 대비 상승하는 혈당 수치가 감소되었다.
30분부터 2시간까지 Control의 경우 192.4±16.2 ㎎/dl, 148.0±12.5 ㎎/dl 로 급격히 혈당이 감소하였고, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 186.4 ± 21.1 ㎎/dl, 153.7 ± 6.7 ㎎/dl 이고, 꽃 0.5 g/㎏의 경우 171.1 ± 23.4 ㎎/dl, 144.6 ± 22.1 ㎎/dl 로 control 대비 식후 혈당 상승이 감소되었다.
따라서 해죽순의 줄기와 꽃의 열수 추출물은 소장상부에서의 흡수를 저해시켜 식후 혈당 상승을 억제하는 효과가 나타낸다.
Starch에 의한 해죽순 열수 추출물의 식후 혈당상승 저해작용은 도 7에 제시된다.
Starch만 투여한 control의 경우 투여 30분 후 202.2 ± 19.2 mg/dl으로 혈당이 상승하였지만, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 175.1 ± 12.2 ㎎/dl, 꽃 0.5 g/㎏는 183.9 ± 17.5 ㎎/dl 로 control 대비 포도당 흡수를 억제하는 것으로 나타났다.
30분부터 1시간까지 Control의 경우 190.3 ± 21.4 ㎎/dl로 급격히 혈당이 감소하였지만, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 176.0 ± 22.5 ㎎/dl로, 꽃 0.5 g/㎏의 경우 180.5 ± 33.2 ㎎/dl 로 control과 달리 다당류 분해효소활성을 보여 혈당상승 억제 효과를 나타낸다.
Sucrose에 의한 해죽순 에탄올 추출물의 식후 혈당상승 저해작용은 도 8에 제시된다.
Sucrose만 투여한 control의 경우 투여 30분 후 211.8 ± 18.3 ㎎/dl 으로 혈당이 상승하였지만, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 165.5 ± 16.3 ㎎/dl, 꽃 0.5 g/kg의 경우 179.1 ± 24.0 ㎎/dl 으로 Control 대비 상승하는 혈당 수치가 감소되었다.
30분부터 2시간까지 Control의 경우 238.3 ± 21.3 ㎎/dl, 181.0 ± 17.8 ㎎/dl 로 급격히 혈당이 감소하였고, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 201.8 ± 6.8 ㎎/dl, 166.5 ± 13.4 ㎎/dl 이고, 꽃 0.5 g/㎏의 경우 206.3 ± 15.4 ㎎/dl, 161.8 ± 7.2 ㎎/dl 로 control 대비 식후 혈당 상승을 감소시킨다.
따라서 해죽순의 줄기와 꽃의 에탄올 추출물은 농도 의존적으로 소장상부에서의 흡수를 저해시켜 식후 혈당 상승 억제효과가 보였고, 열수 추출물과 달리 에탄올추출물에서는 꽃보다는 줄기에서 더 높은 흡수억제 효능을 보였다.
Starch에 의한 해죽순 에탄올 추출물의 식후 혈당상승 저해작용은 도 9에 제시된다.
Starch만 투여한 control의 경우 투여 30분 후 236.6 ± 15.8 mg/dl으로 혈당이 상승하였지만, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 190.8 ± 21.7 ㎎/dl, 꽃 0.5 g/㎏는 176.4 ± 16.3 ㎎/dl 로 control 대비 포도당 흡수를 억제하는 것으로 보인다.
30분부터 1시간까지 Control의 경우 256.3 ± 12.5 ㎎/dl, 168.3 ± 24.2 ㎎/dl 로 급격히 혈당이 감소하였지만, 줄기 0.5 g/㎏의 경우 240.6 ± 14.8 ㎎/dl, 184.4 ± 14.9 ㎎/dl 로, 꽃 0.5 g/㎏의 경우 226.4 ± 15.4 ㎎/dl, 203.3 ± 5.3 ㎎/dl 로 control과 달리 다당류 분해효소 활성이 높아 흡수를 지속시키는 것을 확인하였다.
(실시예 3) 해죽순 추출물의 In-vivo test에 의한 장기투여 결과
(가) 장기투여 평가
동물 실험조건은, 온도 22℃, 습도 50%를 유지하고, 사육 공간(SPF zone)의 모든 공기는 헤파필터를 통한 공기를 사용하였다. Rat의 식이는 고형사료(Teklad 사)로 자율 섭식으로 진행하였고, 깔짚(오리엔트바이오Corncob 1/4)은 이틀에 한 번씩 교체하였다.
사육실의 점등 및 소등 시간은 12시간을 기준으로 나누었으며, 5주령 SD rat를 가지고 4주간에 걸쳐 배합된 농도별 Formula를 섞어준 식이를 자율 섭취시켰다. 식이섭취 전과 식이섭취 4주 후에 다시 20시간 절식을 시킨 후 공복혈당 측정 후 Sucrose + starch 2 g/kg를 ingestion시키고, 이후 3시간 동안 혈액을 채취하여 blood glucose level를 측정하여 blood glucose profile을 분석하였다. 실험중인 동물모델에서 다량의 혈액을 채취하기 어렵기 때문에 꼬리에 작은 상처를 내어 정맥혈을 채혈하여 glucometer로 혈당 측정하고 최종적으로는 심장채혈을 수행하였다.
도 10은 해죽순 줄기의 추출물을 4주간 섭취시키면서 측정한 체중을 나타낸다.
대조군의 경우 26.60 ± 1.60 g, SWE군의 경우 22.77 ± 1.60 g, SEE군의 경우 21.67 ± 2.47 g 로 체중이 증가한 것을 확인할 수 있다.
최종적으로 측정한 체중의 경우, 대조군 대비 각군에서 유의적으로 체중이 감소되는 것을 확인할 수 있다. 따라서 해죽순의 용매별 줄기 추출물을 섭취 시 체중이 감소되는 것으로 판단된다.
또한 해죽순 줄기의 추출물을 4주간 섭취시키면서 측정한 혈당(blood glucose(mg/dL)을 살펴보면, 대조군의 경우 214.01±21.13 이고, SWE의 경우 186.18±15.65이며, SEE 의 경우 178.21±20.65 이므로, 해죽순 줄기 추출물을 장기간 섭취하는 경우 혈당이 감소함을 알 수 있다.

Claims (6)

  1. 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 식후 혈당상승억제용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 해죽순 추출물은 해죽순 열수 추출물 및 해죽순 알코올 추출물에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 식후 혈당상승억제용 조성물.
  3. 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  5. 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  6. 해죽순 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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