KR20230042217A

KR20230042217A - S1pr1 및 s1pr4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20230042217A
Application number: KR1020227042352A
Authority: KR
Inventors: 이봉용; 박양혜; 김은정
Original assignee: 주식회사 넥스트젠바이오사이언스
Priority date: 2021-09-15
Filing date: 2022-05-31
Publication date: 2023-03-28
Also published as: WO2023042996A1; KR102541579B1

Abstract

본 발명은 S1P 수용체의 서브타입 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있는 스핑고지질 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물

스핑고신-1-인산(sphingosine-1-phosphate, S1P)은 스핑고지질의 한 종류로서 G-단백질 결합 수용체(GPCRs)의 한 종류인 스핑고신-1-인산 수용체(sphingosine-1-phosphate receptor, S1PR)와 결합하여, 체내에서 세포분화 및 세포사멸 등에 관여하여 다양한 질병에 관여하는 것으로 알려져 있다. S1P 수용체에는 S1PR1, S1PR2, S1PR3, S1PR4, S1PR5의 5가지 서브타입이 알려져 있고, 특히 S1PR1은 림프구에 발현되어 있어 면역체계와 관련되는 것으로 알려져 있다. 본 발명은 스핑고신-1-인산 수용체의 서브타입 중 S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있는 스핑고지질 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

국소 분절 사구체경화증(FSGS, FOCAL SEGMENTAL GLOMERULOSCLEROSIS)은 신장의 여과 시스템인 사구체 족세포의 구조적 손상(ex. 경화증) 등에 의해 발생되는 여과장애 및 단백뇨유발증으로 말기신부전의 가장 흔한 원인 질환이다. 전 세계 환자수는 약 30만명 이상이며, 미국 환자수는 약 8만명으로 성인 신증후근(Nephrotic Syndrome)의 1/3을 차지하고 있다.

국소 분절 사구체경화증의 치료제로서 종래에는 스테로이드가 사용되었으나, 환자별로 증상 및 질병 경과가 매우 상이하며, 재발과 완화가 반복되는 문제가 있었다. 이러한 문제점을 해결하기 위한 하나의 방법으로 연구자들은 S1PR와의 작용에 관한 연구를 진행하고 있기도 하다. S1P 수용체는 체내의 다양한 세포와 조직에서 중복적으로 존재하기도 하고 뚜렷하게 다른 발현패턴을 나타내기도 하는 것으로 알려져 있다. 근래에 S1P 수용체 작용 물질로 알려진 FTY720(성분명 Fingolimod)은 T형 백혈구가 염증 부위로 이동하는 것을 효과적으로 차단하는 효과가 있는 것으로 확인되었고 FTY720을 유효성분으로 하는 다발성경화증 치료제(상품명 Gilenya)가 2010년 미국 FDA에서 허가를 받았다. FTY720은 체내에서 인산화 과정을 거쳐 FTY72-인산으로 변환되어 혈액 중 면역세포의 숫자를 조절하는 면역조절 활성을 나타내는데 S1P 수용체의 서브타입에 비선택적으로 작용하여 서맥 및 부정맥과 같은 심각한 심혈관 질환을 야기하는 부작용이 발생되는 문제가 있었다.

본 발명자들은 스핑고지질 화합물 중에서 S1P 수용체의 특정한 서브타입에 선택적으로 작용하는 화합물과 그의 의약적 용도에 관한 연구를 진행하던 중, 본 발명에 따른 화합물이 S1PR1과 S1PR4에 특이적으로 결합하여 기능적 저해제(antagonist)의 역할을 함으로써, S1PR 서브타입에 대한 비선택성에 따른 심혈관계 질환 부작용을 야기하지 않는 동시에 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있다는 점을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

한국 공개특허공보 제10-2017-0087813호(2017.07.31)

본 발명은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료의 약리활성을 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함한다.

[화학식 1]

여기서,

R¹은 수소이고;

R²는 수소 또는 아세틸기이며;

X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;

A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;

B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;

C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및

D는 수소, 페닐 및 C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

상기 R²는 수소일 수 있다.

상기 X는 C₂알킬렌일 수 있다.

상기 B는 C_2-11의 직쇄 알킬렌일 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물일 수 있다.

(1) 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(2) 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(3) 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(4) 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올;

(5) (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올;

(6) 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(7) N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드;

(8) N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드; 및

(9) N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드

상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물일 수 있다.

[화학식 2]

본 발명에 따른 약학적 조성물은 경구 투여용 제제일 수 있고 비경구 투여용 제제일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 국소 분절 사구체경화증 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과를 기대할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있다.

특히, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1P 수용체의 서브타입(S1P1, S1P2, S1P3, S1P4 및 S1P5) 중 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여, 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있는 동시에 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과가 있다.

도 1은 NXC736 (3mg/kg/day)의 경구 투여 후 마우스의 전체 T 세포 및 T 세포 서브타입의 세포 수 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2는 NXC736 (10mg/kg/day)의 경구 투여 후 랫드의 전체 T 세포 및 T 세포 서브타입의 세포 수 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 UUO마우스 모델에서 NXC736 (10, 30, 90mg/kg/day)이 신장 섬유화에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.
도 4는 아데닌 유발 CKD 마우스 모델에서 NXC736 (10, 30, 90mg/kg/day)이 신장 섬유화에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.
도 5는 hERG 유전자(hERG gene)가 과 발현된 HEK293 세포에서의 NXC736 (1, 3, 10, 30 μM)의 영향을 평가 시험한 표이다.
도 6은 NXC736 (12.5, 25, 50mg/kg)의 경구 투여 후 비글견의 심박수 측정 결과를 나타낸 그래프이다.

본 명세서 또는 출원에 개시되어 있는 설명들은 단지 본 발명의 기술적 사상에 따른 실시예들을 설명하기 위한 목적으로 예시된 것으로, 본 발명의 기술적 사상에 따른 실시예들은 본 명세서 또는 출원에 개시되어 있는 실시예들 이외에도 다양한 형태로 실시될 수 있으며, 본 발명의 기술적 사상이 본 명세서 또는 출원에 설명된 실시예들에 한정되는 것으로 해석되지 않는다.

본 발명에서의 "예방"이란, 약학적 조성물을 개체에 투여하여 대상 질병의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서의 "치료"란, 약학적 조성물을 개체에 투여하여 대상 질병의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.

이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명한다.

[화학식 1]

여기서,

R¹은 수소이고;

R²는 수소 또는 아세틸기이며;

X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;

A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;

B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;

C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및

상기 R²는 수소일 수 있다.

상기 X는 C₂알킬렌일 수 있다.

상기 B는 C_2-11의 직쇄 알킬렌일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 방법을 제공한다. 개체는 인간 또는 인간을 제외한 동물일 수 있다.

상기 물질은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 방법을 제공할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물의 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 용도를 제공한다.

상기 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 용도를 제공할 수 있다.

또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물일 수 있다.

또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물(이하 'NXC736') 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올일 수 있다.

[화학식 2]

화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있다. 염은 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 사용될 수 있다.

보다 구체적으로, 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 아세트산, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 수득될 수 있다.

또한, 약학적으로 무독한 염은 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함할 수 있다.

산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있다. 예를 들면, 화학식 1로 표시되는 화합물의 유도체를 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜서 제조할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 예를 들면, 화학식 1로 표시되는 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하며, 여액을 증발 및 건조시켜 수득할 수 있다. 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘 염을 제조하는 것이 바람직하다. 또한, 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 수득할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유할 뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함할 수 있다.

화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 경구 투여용 제제 및 약리활성을 나타내는 범위 내에서는 다른 유형의 제제로 변경할 수 있다.

경구 투여용 제제는 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등의 형태가 될 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 경구 투여용 제제로 제제화 하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴(Amylopectin), 셀룰로오스(Cellulose) 또는 젤라틴(Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트(Dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제; 스테아르산 마그네슘(Magnesium stearate), 스테아르산 칼슘(Calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨(Sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스(Polyethylene glycol wax) 등과 같은 활택제; 감미제; 방향제; 시럽제; 등을 사용할 수 있다. 또한, 캡슐제의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.

화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 비경구 투여를 위한 적합한 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.

비경구 투여용 제제는 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등을 들 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 비경구 투여용 제제로 제제화 하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있다. 구체적으로, 비수성용제, 현탁제는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등을 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 연고, 크림 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.

국소 분절 사구체경화증 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제는 오티코 스테로이드 약물, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID), 면역억제제, 세포독성 약물 및 혈관확장제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 보다 구체적으로는 ACE 억제제, ARB 또는 스타틴, 코르티코스테로이드 또는 칼시네룬 억제제(예: 타크로리무스) 등이 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 국소 분절 사구체경화증 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제는 함께 또는 별도로 투여될 수 있다. 별도로 투여되는 경우, 이것은 동시에 또는 어떤 순서로든 순차적으로 투여될 수 있다. 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 다른 치료제의 투여량 및 투여 시기는 원하는 조합 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은, 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. "약학적으로 허용 가능" 하다는 것은, 화합물 투여 시 생물체를 자극하지 않으면서, 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는, 약학 분야에서 통상적으로 사용되는 것을 의미한다.

담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토 덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.

또한, 필요에 따라 본 발명에 따른 약학적 조성물에 부형제, 희석제, 항산화제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제들을 첨가하여 사용할 수 있다. 또한, 필요에 따라 본 발명에 따른 약학적 조성물에 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물의 약리적 유효량 및 인체에 대한 투여량은 상기 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있다. 상기의 투여량은 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 등 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 널리 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 인체 투여량은, 1일 0.1 mg/kg 내지 1,000 mg/kg, 바람직하게는 10 mg/kg 내지 500 mg/kg일 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수 회에 나누어 투여될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에 따른 약학적 조성물이 투여되어 활성성분이 목적하는 해당 부위에 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 비경구 투여하는 방법으로는 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법을 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에서 국소 분절 사구체경화증의 치료용으로 사용될 수 있다. 이때 대상체의 종류는 특별히 제한되지 않으나 포유동물일 수 있으며, 바람직하게는 인간일 수 있다.

S1PR1 수용체는 주로 림프구(lymphocyte)에 존재하며, 림프구(lymphocyte)가 면역세포에서 유리되는 것을 조절하는 역할을 주로 담당하고 있다. S1PR4 수용체 역시 림프구(lymphocyte)에 존재하여 면역세포교환(immune cell trafficking)에 작용할 뿐 아니라, T cell 조절에도 작용을 하여, 염증 반응에 관여를 하고 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 S1PR1 수용체에 기능적 저해제로 작용하여, 림프구(lymphocyte)를 유리를 저해할 뿐 아니라, S1PR4에 작용하고 효과적인 항염증 효과를 나타내어 국소 분절 사구체경화증을 예방 또는 치료하는 효과가 있다.

구체적으로, 본 발명의 화합물은 S1PR1 및 S1PR4에 특이적으로 결합한 후 세포 내로 이들을 유입하여 소실시키는 기전을 통해 이 수용체에 대한 기능적 억제제(functional antagonist)로 작용함으로써, 국소 분절 사구체경화증을 예방 또는 치료하는 효과가 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 - 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조

본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 한국 공개특허공보 제10-2017-0087813호에 기재된 바와 같은 방법을 통해 제조할 수 있고 그 방법은 아래에 기재된 실시예와 같다. 다만, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법이 이에 국한되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 변경 가능한 범위 내에서 변경된 방법으로 제조될 수 있다.

실시예 1 - 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

단계 1: tert-부틸(2,2-다이메틸-5-((트라이아이소프로필실일)부타-1,3-다이인-1-일)-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트의 제조

N₂ 기체 조건하에서, CuCl (10 mg, 0.10 mmol), NH2OH·HCl (1.02 g, 14.67 mmol), n-BuNH₂ (3.87 mL, 39.15 mmol)을 녹인 메탄올(50 mL)의 용액에, 메탄올(30 mL)에 녹인 tert-부틸 5-에티닐-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일 카바메이트(1.25 g, 4.89 mmol)를 첨가한 후, 메탄올(20 mL)에 녹인 2-브로모-1-트라이아이소프로필실일아세틸렌(2.56 g, 9.78 mmol)을 한 방울씩 첨가하고 실온에서 2시간 동안 반응 혼합물을 잘 저어 준 뒤, 반응을 물로 퀀칭(quench)하고 농축시켰다. 이 농축물을 에틸 아세테이트로 희석하고 염수(Brine)로 세척한 뒤, 유기층은 MgSO₄로 건조시키고 진공상태에서 여과한 후 농축시켰다. 이것을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (hexane/EtOAc, 7:1) 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(1.85 g, 4.25 mmol, 87 %).

단계 2: tert-부틸(5-((1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에티닐)-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트의 제조

상기 단계 1에서 제조한 화합물(334 mg, 1.20 mmol)을 녹인 무수 DMF(12 mL) 용액에, 1-아지도데칸(339 mg, 1.86 mmol), CuI(114 mg, 0.60 mmol), DIPEA(N, N-Diisopropylethylamine)(0.63 mL, 3.6 mmol) 및 AgF(182 mg, 1.44 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 반응 혼합물을 12시간 동안 잘 저어준 뒤, 반응을 포화 NH₄Cl으로 퀀칭한 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하고 유기층 추출물을 포화 NH₄Cl과 염수로 씻어주었다. 이것을 MgSO₄로 건조시킨 뒤, 감압하에 농축시켰다. 이 농축물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(hexane/EtOAc, 6:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(439 mg, 0.95 mmol, 79 %).

단계 3: tert-부틸(5-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트

메탄올(30 mL)에 상기 단계 2에서 제조한 화합물(149 mg, 0.32 mmol)을 녹인 용액에 10%의 Pd/C (45 mg, 상기 단계 2에서 제조한 화합물의 30 % wt)을 첨가하였다. 플라스크를 진공으로 만든 뒤, H₂기체로 채워주고 실온에서 1시간 동안 저어주고 혼합물을 셀라이트(Celite)로 여과하여 주고 농축한 뒤 침전물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(hexane/EtOAc, 7:1 or 2:1)로 정제하여 무색 오일의 목적 화합물을 제조하였다(110 mg, 0.24 mmol, 74%).

단계 4: 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

실온에서 상기 단계 3에서 제조한 화합물(65 mg, 0.14 mmol)을 녹인 CH₂Cl₂ (1.40 mL) 용액에 TFA (1.40 mL)를 첨가하였다. 반응물을 12시간 동안 저어주고 감압 하에 용매와 시약을 제거한 뒤, 농축물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH, 100:10:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(36 mg, 0.11 mmol, 78 %).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23-1.29 (m, 14H), 1.85 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.92 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.47 (br s, 4H), 2.78 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.57 (dd, J = 11.2, 26.9 Hz, 4H), 4.27 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 14.03, 19.21, 22.57, 26.50 (2C), 28.95 (2C), 29.03 (2C), 30.19, 31.70, 50.42, 60.05, 63.09 (2C), 121.34, 146.82; IR (CHCl₃) υmax; HRMS (FAB) calcd for C₁₇H₃₅N₄O₂ ([M+H]⁺) 327.2760, found 327.2762.

실시예 2 - 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

1-아지도데칸을 사용하는 대신, 1-아자이도옥탄을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.24-1.29 (m, 10H), 1.84-1.91 (m, 4H), 2.48 (br s, 4H), 2.77 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.54 (q, J = 12.2 Hz, 4H), 4.28 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H).

실시예 3 - 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

1-아지도데칸을 사용하는 대신, 1-(2-아자이도에틸)-4-헥실벤젠을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실시예 4 - 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 1에 사용되는 2-브로모-1-트라이아이소프로필실일 아세틸렌 대신하여 브로모트라이아이소프로필실란을 사용하고, 단계 2의 1-아지도데칸을 사용하는 것을 대신하여 1-아자이도도데칸(1-azidodoedcane)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 1과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 1.28-1.32 (m, 18H), 1.90-1.92 (m, 2H), 3.89-3.98 (m, 4H), 4.41 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 8.07 (s, 1H).

실시예 5 - (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 2에서 제조한 화합물이 녹아있는 THF(5 mL) 용액을 -78℃로 온도를 낮춘 뒤에 LAH(lithium aluminum hydride)가 녹아있는 THF 용액(0.3 mmol)를 천천히 적가하였다. 0℃에서 세 시간 동안 저어준 뒤에 물로 반응을 퀀칭하고 CH₂Cl₂으로 두번 추출하였다. 유기층은 염수로 씻어주고, MgSO₄로 건조한 뒤, 진공에서 농축하였다. 농축물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 20:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다. 이후, 실시예 1의 단계 4의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다. (24 mg, 0.074 mmol, 74%)

실시예 6 - 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 2에 사용되는 1-아지도데칸을 사용하는 대신에, 8-아자이도옥틸벤젠을 사용하는 것을 제외하고 실시예 1과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실시예 7 - N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 4에서 제조한 화합물(50mg, 1 eq, 0.15 mmol)에 아세트산무수물(0.2 mL), MeOH (1 mL), 포화된 NaHCO₃ 수용액(1 mL)을 첨가하고, 30분 동안 교반한 뒤, 농축하고 염화암모늄 수용액으로 반응을 퀀칭한 뒤, CH₂Cl₂로 두번 추출하여 MgSO₄로 건조시키고, 농축하여 별도의 정제과정 없이 목적 화합물을 98%의 수율로 제조하였다(54 mg, 98%).

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 1.28-1.32 (m, 18H), 1.86-1.96 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 4.02 (q, J = 11.2 Hz, 4H), 4.35 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.84 (s, 1H).

실시예 8 - N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물을 시작물질로 상기 실시예 7에서 수행한 아세틸화 반응과 유사하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23-1.32 (m, 14H), 1.86-1.92 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.99-2.02 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 3.62 (dd, J = 11.2, 26.9 Hz, 4H), 4.31 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H).

실시예 9 - N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 3에서 제조한 화합물을 출발물질로 하여 상기 실시예 7에서 수행한 아세틸화 반응과 유사하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실험예 1: NXC736의 마우스 면역세포에 대한 억제효과 확인

FTY720(Fingolimod)는 림프절 또는 골수에서 림프구의 일부를 가역적으로 포획함으로써 림프구를 이차 림프기관에 격리시켜 중추신경계로의 진입을 억제하거나, 혈류내 순환하는 림프구의 개체 수를 감소시켜 뇌에 도달하는 활성화된 림프구의 개수를 감소시키는 작용 기전을 갖는 다발성 경화증 치료제이다.

S1P 수용체에 작용하는 NXC736도 림프구 감소에 효과를 나타내는지 확인하기 위하여, NXC736이 면역세포에 미치는 영향을 평가하였다. 마우스에 NXC736을 3 mg/kg/day 경구 투여 후 말초 혈류(PB, peripheral blood), 골수(BM, Bone marrow)에서의 임파구 변화를 T cells, CD4 T cells, CD8 T cells로 분류하였으며, 시험물질 투여 후 0, 4, 8, 12, 24, 36 시간별로 FACS 분석을 진행하였다. 세포수(cell number)를 측정하여 0 time 기준으로 백분율(% of control)로 나타내었다.

도 1을 참조하면, NXC736 3 mg/kg 투여에 의해 말초 혈류(PB)에서는 4시간 후부터 T cells, CD4 T cells, CD8 T cells 모두 0시간 40.6%/41.6%, 16.4%/17.6%, 5.9%/9.3% 수준까지 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 12시간까지 감소가 유지되다가, 회복되어 36시간에서는 88.9%로 회복되었다. 용량의존성은 투여 후 24시간에 T cells에서 나타났으며, CD4 T cells, CD8 T cells의 경우 투여 후 4시간부터 24 시간까지 용량 의존적인 감소효과를 확인할 수 있었다.

골수(BM)에서는 NXC736 3 mg/kg 투여 후 4시간 후 135%, 120%, 24시간 후에는 131%, 118%로 T cells 분포를 확인할 수 있었다. 이는 NXC736에 의해 수용체 내재화(Receptor internalization)가 발생하여 T cells 유리가 억제되어 나타나는 현상으로 판단된다.

NXC736 3 mg/kg 투여 후 T cells에서의 세포 수(cell number)는 4시간부터 감소되는 현상이 나타났으며, 24시간까지 억제효과가 어느 정도 유지되다 회복되는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로, NXC736 투여에 의해 혈류내 순환하는 림프구(lymphocyte) 개체수가 감소, 면역억제 효과가 나타나는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 2: NXC736의 랫드 면역세포에 대한 억제효과 확인

NXC736의 랫드 면역세포에 대한 영향을 평가하기 위해 SD랫드에 NXC736을 10 mg/kg/day 경구 투여 후 말초 혈류(PB)및 골수(BM)에서의 T cell, CD4 T cell, CD8 T cell로 분류하였으며, 시험물질 투여 후 0, 4, 8, 12, 24, 36, 48시간별로 FACS 분석을 진행하였다. 세포 수(cell number)를 측정하여 0 time 기준으로 백분율(% of control) 로 나타내었으며, T cell, CD4 T cell, CD8 T cell의 수를 측정하여 0 time 기준으로 % of control로 나타내었다.

도 2를 참조하면, NXC736 투여 후 말초 혈류(PB)에서는 4시간부터 T cell이 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 억제효과는 용량의존적으로 나타났으며(70%, 80%, 87%), NXC73610 mg/kg 투여에 의해 24시간까지 억제효과가 유지되는 것을 확인할 수 있었다. 골수(BM) 에서는 반대로 변화가 없거나 증가하는 경향을 확인할 수 있었다.

본 연구를 통해서 NXC736은 경구투여 후 말초 혈류(PB)에서 림프구 수를 감소시켜 면역억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 골수(BM)에서는 변화가 없거나 증가하는 경향을 확인할 수 있었다. 이러한 효과는 NXC736이 림프절(lymph node), 골수(BM) 등에 존재하는 S1P 수용체에 기능적 길항제로 작용하여 림프구 유리를 억제하는 기전과 관련 있는 것으로 판단된다.

실험예 3: 마우스 신장 섬유화(Kidney fibrosis) 모델을 이용한 섬유화 억제 효능 확인

신장 섬유화 질환모델인 일측성 요로폐쇄 (Unilateral Ureteral obstruction, UUO) 모델을 이용하여 NXC736의 신장 질환에서의 항섬유화 효능을 평가하였다. 마우스 한쪽 요로를 결찰하여 신장 섬유화를 유발 후 NXC736 10, 30, 90 mg/kg/day, 양성 대조물질 텔미사탄(Telmisartan) 30mg/kg/day 을 1일 1회, 2주간 경구 투여하였다.

도 3을 참조하면, 비히클(Vehicle)에서 섬유증 부위(Sirius red positive area (%))와 신장 하이드록시프롤린이 음성대조군(sham) 대비 유의적으로 증가되어 신장 섬유화가 유발되었음을 확인할 수 있었다. 양성 대조물질로 사용한 텔미사탄(Telmisartan)은 신장 하이드록시프롤린을 통계적으로 유의미하게 감소시켰다(p<0.0001). NXC736을 10, 30, 90 mg/kg/day 투여한 모든 군에서 신장 하이드록시프롤린이 통계적으로 유의미하게 (p<0.05, p<0.01, P<0.001) 감소되었으며, 특히 NXC736 90 mg/kg/day에서 신장 하이드록시프롤린이 통계적으로 유의하게(p<0.05) 감소된 것을 확인할 수 있었다. 이로써 NXC736은 섬유화 억제 효과가 있는 물질임을 확인할 수 있었으며, NXC736은 UUO로 유발한 마우스 신장 섬유화모델에서 용량 의존적으로 신장 섬유화 억제효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 4: 아데닌 유발 신부전(Adenine induced renal failure) 랫트 마우스 모델을 이용한 항섬유화 효능 확인

아데닌으로 유발한 만성신장질환모델을 이용하여 NXC736의 항섬유화 효과를 평가하였다. 0.5% 아데닌(in 0.5% CMC)을 마우스에 4주 동안 경구 투여하여 만성신장증후군(chronic kidney disease)을 유발하였고, NXC736를 10, 30, 90mg/kg/day 및 양성 대조물질 텔미사탄(Telmisartan) 10 mg/kg/day를 3주간 경구투여 후 혈청 크레아티닌, 혈청 BUN, 신장 하이드록시프롤린 측정 및 조직병리를 실시하였다. 또한, 상기 측정 결과를 토대로 Tubular-interstitial index 값을 도출하였다.

Biochemical 분석 결과 아데닌에 의해서 유발된 CKD모델에서 비히클(vehicle)군은 컨트롤(control)군 대비 혈청 크레아티닌 수준이 1.15±0.25(mg/dl), 혈청 BUN 수준이 202.3 ± 32.1(mg/dl)로서 유의적으로 증가시켰다. NXC736 90mg/kg/day에서 혈청 크레아티닌의 수준이 비히클(Vehicle) 군 대비 0.90±0.12mg/dl 감소되었으며, 혈청 BUN 수준이 비히클(Vehicle) 군 대비 157.4±32.3(mg/dl)로 감소되었고, NXC736 30 mg/kg/day 투여군에서 신장 하이드록시프롤린 수준이 대조군 군 대비 통계적으로 유의하게 감소되었다. 도 4를 참조하면, Tubular-interstitial index에서는 NXC736을 90mg/kg/day로 경구투여한 군과 텔미사탄(Telmisartan) 투여군에서 통계적 유의성 있게 신장 섬유화가 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로 아데닌에 의해 유발된 만성 신장 섬유화모델에서 NXC736의 항섬유화 효과를 확인할 수 있었다.

실험예 5: NXC736이 심혈관계에 미치는 영향 평가

1) hERG gene이 과발현된 HEK293 cell에서의 NXC736의 영향 평가

hERG(human Ether-

-go-go Related Gene)을 도입하여 hERG 칼륨 이온 채널을 안정하게 발현시킨 HEK-293 세포에 NXC736을 적용하여 hERG channel currents에 미치는 영향을 평가하였다. NXC736은 1, 3, 10 및 30 μM 농도로 설정하였고, 음성대조군(Negative control group)은 external bath solution을 처리하였으며, 각 농도 당 3 개의 세포를 적용하였다. 양성대조군(Positive control group)은 0.1 μM 농도의 E-4031을 처리하였다. 또한, 각 실험당일에는 음성대조물질 또는 각 농도별 시험물질에 대한 hERG channel currents의 기록이 종료된 임의의 1 개 세포에 처리하였다.

도 5를 참조하면, 1, 3, 10 및 30 μM 농도에서의 NCX736(B 내지 E group)의 hERG channel currents 억제율(Compensated suppression rate, %)은 각각 9.94±1.96, 13.98±4.48, 35.03±12.09 및 82.62±7.31% (n=3)이며, 음성대조군(A group)의 hERG channel currents 억제율(Compensated suppression rate, %)은 0±4.12 (n=3) 값을 나타내었다. 즉, 10 및 30μM 농도에서의 NCX736(D 및 E group)은 음성대조군(A group)과 비교하여 통계학적으로 유의한 값의 차이를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

이와 동일한 조건하에서 양성대조군(F group)으로 사용한 0.1 μM 농도의 E-4031을 처리하였다. hERG channel currents 억제율(Compensated suppression rate, %)은 92.64±1.66% (n=5)의 높은 값을 나타내었다. 이러한 결과를 볼 때, 본 시험법은 NCX736의 hERG channel currents에 미치는 영향을 평가하기 위해 적합한 방법인 것으로 판단된다.

상기 조건하에서 hERG 유전자가 도입된 HEK-293 세포를 이용한 hERG channel currents에 미치는 영향 평가에서, 시험물질인 NXC736을 최대 30 μM 농도까지 처리한 결과 hERG channel currents의 억제율(Compensated suppression rate)은 82.62±7.31%을 나타내었으며, K⁺이온채널 저해능(IC50)은 12.94 μM (힐 계수(Hill coefficient): 1.527)로 산출되었다. 따라서, NXC736는 hERG 칼륨 채널 활성을 저해하지 않으며, 심장 이상을 유발하지 하지 않는 물질인 것을 확인할 수 있었다.

2) 비글견을 이용하여 심혈관계에 미치는 영향 확인

원격송신기가 삽입된 무마취 및 무구속 상태의 수컷 비글견 4 마리에 NXC736을 경구투여 하였다. 이후, 비글견 4 마리에 대한 심박수를 측정하여 NXC736이 심혈관계에 미치는 영향을 평가하였으며, 육안으로 이상 증상의 발현 여부를 확인하였다.

본 실험은 비글견 4마리 각각에 대하여, 4차 단계에 걸쳐 실험물질을 투여하였다. 1차 투여 단계(NXC736 0 mg/kg)에서는 대조물질로 부형제인 0.5% MC 수용액을 투여하였으며, 2차 투여 단계에서는 NXC736 12.5 mg/kg를 투여하였고, 3차 투여 단계에서는 NXC736 25 mg/kg를 투여하였으며, 4차 투여 단계에서는 NXC736 50 mg/kg를 투여하였다. 1차 내지 4차의 투여는 1주 간격으로 시행하였다. 또한, 실험물질 투여 전 0 시간(hours), 실험물질 투여 0.5 시간(hours), 1 시간(hours), 2 시간(hours), 3 시간(hours), 4 시간(hours), 6 시간(hours), 8 시간(hours), 12 시간(hours), 및 24 시간(hours) 경과한 후 비글견들의 심박수를 측정하였다.

도 6을 참조하면, NXC736를 12.5, 25, 50 mg/kg 용량으로 투여하더라도 심박수(Heart rate)의 변화가 나타나지 않은 것을 확인할 수 있었다.

또한, 육안으로 비글견에 대해 일반 증상을 관찰할 결과, NXC736를 12.5, 25, 50 mg/kg 용량 투여에 의한 이상 증상은 관찰되지 않았다.

이상과 같이, hERG gene이 과발현된 HEK293 cell에서의 NXC736의 영향 평가 결과 및 NXC736을 투여한 비글견의 심박수 및 육안으로 이상 증상의 발현 여부를 확인한 결과에 의하면, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1P 수용체의 서브타입(S1P1, S1P2, S1P3, S1P4 및 S1P5) 중 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여, 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료 효과가 있는 동시에 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 1]

여기서,
R¹은 수소이고;
R²는 수소 또는 아세틸기이며;
X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;
A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;
B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;
C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및
D는 수소, 페닐 및 C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
제1항에 있어서,
상기 R²는 수소인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 X는 C₂알킬렌인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 B는 C_2-11의 직쇄 알킬렌인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
(1) 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(2) 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(3) 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(4) 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올;
(5) (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올;
(6) 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(7) N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드;
(8) N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드; 및
(9) N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드.
제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 2]
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 약학적 조성물이 경구 투여용 제제 또는 비경구 투여용 제제인 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 약학적 조성물이 국소 분절 사구체경화증 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물은 S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제9항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 것을 특징으로 하는 국소 분절 사구체경화증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.