KR102541578B1

KR102541578B1 - S1pr1과 s1pr4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Info

Publication number: KR102541578B1
Application number: KR1020227042351A
Authority: KR
Inventors: 이봉용; 박양혜; 김은정
Original assignee: 주식회사 넥스트젠바이오사이언스
Priority date: 2022-03-23
Filing date: 2022-05-31
Publication date: 2023-06-13
Also published as: CA3212009A1; CN117396199A; MX2023011554A; WO2023182572A1; JP7465041B1; AU2022448086B2; AU2022448086A1; US20240041836A1; JP2024516936A

Abstract

본 발명은 S1P 수용체의 서브타입 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있는 스핑고지질 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

본 발명은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있는 스핑고지질 화합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

염증성 장질환(Inflammatory Bowel Disease; IBD)은 장내 만성적인 염증과 궤양을 일으키는 질환으로, 유전적 요인과 함께 장내에 정상적으로 존재하는 세균에 대한 우리 몸의 과도한 면역반응 등이 중요한 발병 요인으로 여겨지고 있다. 염증성 장질환으로는 궤양성 대장염(Ulcerative Colitis; UC)과 크론병(Crohn`s Disease; CD)이 대표적이다.

크론병은 입에서 항문까지 소화관 전체에 걸쳐 어느 부위에서든지 발생할 수 있는 만성 염증성 장질환을 의미한다. 크론병은 궤양성 대장염과 달리 염증이 장내의 모든 층을 침범하며, 병적인 변화가 분포하는 양상이 연속적이지 않고 드문드문 나타나는 경우가 많다. 특히, 대장과 소장이 연결되는 부위인 회맹부에 질환이 발행하는 경우가 가장 흔하며 그 다음으로 대장, 회장 말단부, 소장 등에서 흔히 발생한다. 크론병의 원인은 아직 정확히 알려져 있지 않지만, 환경적 요인, 유전적 요인과 함께 장내에 정상적으로 존재하는 세균에 대한 우리 몸의 과도한 면역반응 때문에 발병하는 것으로 여겨지고 있다.

대장 점막에 염증 또는 궤양이 생기는 궤양성 대장염은 대장 점막이 충혈되고 부으면서 출혈을 일으켜 다발성 궤양 형태로 나타나며, 만성 재발성, 만성 지속성, 급성 전격성 대장염의 세 부류로 구분되고 있다. 대체로 궤양성 대장염은 만성 재발성 질환인 경우가 가장 흔하고 이 경우는 재발할 수록 증상이 악화되며, 만성 지속성 대장염은 6개월 정도 지속적으로 심한 증상이 지속된다. 급성 전격성 대장염인 경우 매우 증상이 심각하고 고열이 동반되고 증상이 나타난 후 수 주일 내에 사망할 위험이 있기도 하다. 궤양성 대장염의 발생 원인은 아직까지 명확히 밝혀지지 않았는데, 그 원인으로 불규칙적인 식습관이나 외부적 스트레스 등 환경적 요인이나 가족력과 같은 유전적 요인, 대장벽의 면역학적 이상, 장 내 분포하는 정상 세균에 대한 우리 몸의 이상 면역반응 등이 관련되는 것으로 알려져 있다. 대체적으로, 궤양성 대장염은 육식을 주로 하는 유럽과 북미 지역에서 발병률이 높은 질환이었으나 최근에는 서구화된 식습관으로 인해 우리나라를 포함한 동아시아 지역에서도 발병률이 증가하는 추세를 보이고 있다. 궤양성 대장염의 치료방법으로 수술적인 처치는 완치를 목적으로 하는 것으로서 병변이 있는 모든 대장 부위를 절제하게 된다. 한편 약물 치료법으로는 설파살라진, 메살라민과 같은 항염증제, 하이드로 코티손, 덱사, 피디, 메드론과 같은 부신피질호르몬제제, 아자치오프린, 퓨리네톨과 같은 면역억제제, 메트로니다졸과 같은 항생제, 레미케이드와 같은 생물학적 제제가 사용되고 있는데, 아직까지 궤양성 대장염을 완치할 수 있는 약물 치료법은 없다. 가장 흔하게는 설파살라진(sulfasalazine), 메살라민(mesalamine)과 같은 항염증제, 부신피질 호르몬제 등의 치료제가 사용되며, 환자의 상태에 따라 면역억제제, 항생제 등의 약물을 적절히 선택하여 사용한다. 이 중 설파살라진은 수십년간 궤양성 대장염의 표준적인 치료방법으로 사용되어 왔으나 고용량 및 장기 복용에 의해 산화 스트레스를 유발하고 구역질, 속쓰림, 두통, 어지러움, 빈혈, 피부발진 등의 부작용을 일으킬 수 있으며, 드물게는 이들 약물로 인해 간염, 췌장염, 폐렴 등이 유발되기도 한다. 더구나 직장에만 병적인 변화가 나타나는 궤양성 대장염은 일시적인 약물치료만으로도 완치될 수 있으나, 직장 이상의 부위에서 병적인 변화가 발생한 궤양성 대장염은 재발 빈도가 높으며 장천공, 독성 거대결장과 같은 합병증이나 대장암으로 진행되기도 한다.

이에 염증성 장질환의 치료에 사용될 수 있는 약물 효능이 뛰어나고 부작용 내지 독성 면에서 안전한 의약의 개발이 지속적으로 요구되고 있다.

이에 본 발명자들은 스핑고지질 화합물 중에서 S1P 서브타입 수용체에 선택적으로 작용하는 독립적인 화합물을 개발하기 위해 예의 노력하던 중, 본 발명에 따른 화합물이 S1PR1과 S1PR4 수용체에 특이적으로 결합하여 기능적 저해제(antagonist)의 역할을 함으로써, S1PR 서브타입에 대한 비선택성에 따른 심혈관계 질환 부작용을 야기하지 않는 동시에 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있다는 점을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

한국 공개특허공보 제10-2017-0087813호(2017.07.31)

본 발명은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않으며, 염증성 장질환의 예방 또는 치료의 약리활성을 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함한다.

[화학식 1]

여기서,

R¹은 수소이고;

R²는 수소 또는 아세틸기이며;

X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;

A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;

B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;

C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및

D는 수소, 페닐 및 C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

상기 R²는 수소일 수 있다.

상기 X는 C₂알킬렌일 수 있다.

상기 B는 C_2-11의 직쇄 알킬렌일 수 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물일 수 있다.

(1) 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(2) 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(3) 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(4) 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올;

(5) (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올;

(6) 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;

(7) N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드;

(8) N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드; 및

(9) N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드

상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물(이하 'NXC736') 일 수 있다.

[화학식 2]

본 발명에서 염증성 장질환은 궤양성 대장염 또는 크론병일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 경구 투여용 제제 또는 비경구 투여용 제제일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 염증성 장질환의 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과를 기대할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있다.

특히, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1P 수용체의 서브타입(S1P1, S1P2, S1P3, S1P4 및 S1P5) 중 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여, 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있는 동시에 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과가 있다.

도 1은 NXC736 (3mg/kg/day)의 경구 투여 후 마우스의 전체 T 세포 및 T 세포 서브타입의 세포 수 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2는 NXC736 (10mg/kg/day)의 경구 투여 후 랫드의 전체 T 세포 및 T 세포 서브타입의 세포 수 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 DSS 유발 대장염 마우스 모델에서 NXC736 (5, 10mg/kg/day)이 염증성 장질환 억제에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.
도 4는 hERG 유전자(hERG gene)가 과 발현된 HEK293 세포에서의 NXC736 (1, 3, 10, 30 μM)의 영향을 평가 시험한 표이다.
도 5는 NXC736 (12.5, 25, 50mg/kg)의 경구 투여 후 비글견의 심박수 측정 결과를 나타낸 그래프이다.

본 명세서 또는 출원에 개시되어 있는 설명들은 단지 본 발명의 기술적 사상에 따른 실시예들을 설명하기 위한 목적으로 예시된 것으로, 본 발명의 기술적 사상에 따른 실시예들은 본 명세서 또는 출원에 개시되어 있는 실시예들 이외에도 다양한 형태로 실시될 수 있으며, 본 발명의 기술적 사상이 본 명세서 또는 출원에 설명된 실시예들에 한정되는 것으로 해석되지 않는다.

본 발명에서의 "예방"이란, 약학적 조성물을 개체에 투여하여 대상 질병의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서의 "치료"란, 약학적 조성물을 개체에 투여하여 대상 질병의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.

이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명한다.

[화학식 1]

여기서,

R¹은 수소이고;

R²는 수소 또는 아세틸기이며;

X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;

A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;

B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;

C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및

상기 R²는 수소일 수 있다.

상기 X는 C₂알킬렌일 수 있다.

상기 B는 C_2-11의 직쇄 알킬렌일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다. 개체는 인간 또는 인간을 제외한 동물일 수 있다.

상기 물질은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 염증성 장질환의 예방 또는 치료 방법을 제공할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물의 염증성 장질환의 예방 또는 치료 용도를 제공한다.

상기 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 염증성 장질환의 예방 또는 치료 용도를 제공할 수 있다.

또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물일 수 있다.

또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올일 수 있다.

[화학식 2]

화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있다. 이 때 염은 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 사용될 수 있다.

보다 구체적으로, 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 아세트산, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 수득될 수 있다.

또한, 약학적으로 무독한 염은 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함할 수 있다.

산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있다. 예를 들면, 화학식 1로 표시되는 화합물의 유도체를 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜서 제조할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 예를 들면, 화학식 1로 표시되는 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하며, 여액을 증발 및 건조시켜 수득할 수 있다. 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘 염을 제조하는 것이 바람직하다. 또한, 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 수득할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유할 뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등에서 선택된 물질을 유효성분으로 포함할 수 있다.

화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 경구 투여용 제제 및 약리활성을 나타내는 범위 내에서는 다른 유형의 제제로 변경할 수 있다.

경구 투여용 제제는 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등의 형태가 될 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 경구 투여용 제제로 제제화 하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴(Amylopectin), 셀룰로오스(Cellulose) 또는 젤라틴(Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트(Dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제; 스테아르산 마그네슘(Magnesium stearate), 스테아르산 칼슘(Calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨(Sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스(Polyethylene glycol wax) 등과 같은 활택제; 감미제; 방향제; 시럽제; 등을 사용할 수 있다. 또한, 캡슐제의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.

화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 비경구 투여를 위한 적합한 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.

비경구 투여용 제제는 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등을 들 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 비경구 투여용 제제로 제제화 하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있다. 구체적으로, 비수성용제, 현탁제는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등을 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 연고, 크림 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.

염증성 장질환의 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제는 오티코 스테로이드 약물, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID), 면역억제제, 세포독성 약물 및 혈관확장제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 보다 구체적으로는 ACE 억제제, ARB 또는 스타틴, 코르티코스테로이드 또는 칼시네룬 억제제(예: 타크로리무스) 등이 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 염증성 장질환의 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제는 함께 또는 별도로 투여될 수 있다. 별도로 투여되는 경우, 이것은 동시에 또는 어떤 순서로든 순차적으로 투여될 수 있다. 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 다른 치료제의 투여량 및 투여 시기는 원하는 조합 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은, 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. "약학적으로 허용 가능" 하다는 것은, 화합물 투여 시 생물체를 자극하지 않으면서, 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는, 약학 분야에서 통상적으로 사용되는 것을 의미한다.

담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토 덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.

또한, 필요에 따라 본 발명에 따른 약학적 조성물에 부형제, 희석제, 항산화제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제들을 첨가하여 사용할 수 있다. 또한, 필요에 따라 본 발명에 따른 약학적 조성물에 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물의 약리적 유효량 및 인체에 대한 투여량은 상기 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있다. 상기의 투여량은 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 등 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 널리 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 인체 투여량은, 1일 0.1 mg/kg 내지 1,000 mg/kg, 바람직하게는 10 mg/kg 내지 500 mg/kg일 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수 회에 나누어 투여될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에 따른 약학적 조성물이 투여되어 활성성분이 목적하는 해당 부위에 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 비경구 투여하는 방법으로는 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법을 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장질환의 치료용으로 사용될 수 있다. 이때 대상체의 종류는 특별히 제한되지 않으나 포유동물일 수 있으며, 바람직하게는 인간일 수 있다.

S1PR1 수용체는 주로 림프구(lymphocyte)에 존재하며, 림프구(lymphocyte)가 면역세포에서 유리되는 것을 조절하는 역할을 주로 담당하고 있다. S1PR4 수용체 역시 림프구(lymphocyte)에 존재하여 면역세포교환(immune cell trafficking)에 작용할 뿐 아니라, T cell 조절에도 작용을 하여, 염증 반응에 관여를 하고 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 S1PR1 수용체에 기능적 저해제로 작용하여, 림프구(lymphocyte)를 유리를 저해할 뿐 아니라, S1PR4에 작용하고 효과적인 항염증 효과를 나타내어 염증성 장질환을 예방 또는 치료하는 효과가 있다.

구체적으로, 본 발명의 화합물은 S1PR1 및 S1PR4에 특이적으로 결합한 후 세포 내로 이들을 유입하여 소실시키는 기전을 통해 이 수용체에 대한 기능적 억제제(functional antagonist)로 작용함으로써, 염증성 장질환을 예방 또는 치료하는 효과가 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 - 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조

본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 한국 공개특허공보 제10-2017-0087813호에 기재된 바와 같은 방법을 통해 제조할 수 있고 그 방법은 아래에 기재된 실시예와 같다. 다만, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법이 이에 국한되는 것은 아니며, 통상의 기술자가 변경 가능한 범위 내에서 변경된 방법으로 제조될 수 있다.

실시예 1 - 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

단계 1: tert-부틸(2,2-다이메틸-5-((트라이아이소프로필실일)부타-1,3-다이인-1-일)-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트의 제조

N₂ 기체 조건하에서, CuCl (10 mg, 0.10 mmol), NH2OH·HCl (1.02 g, 14.67 mmol), n-BuNH₂ (3.87 mL, 39.15 mmol)을 녹인 메탄올(50 mL)의 용액에, 메탄올(30 mL)에 녹인 tert-부틸 5-에티닐-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일 카바메이트(1.25 g, 4.89 mmol)를 첨가한 후, 메탄올(20 mL)에 녹인 2-브로모-1-트라이아이소프로필실일아세틸렌(2.56 g, 9.78 mmol)을 한 방울씩 첨가하고 실온에서 2시간 동안 반응 혼합물을 잘 저어 준 뒤, 반응을 물로 퀀칭(quench)하고 농축시켰다. 이 농축물을 에틸 아세테이트로 희석하고 염수(Brine)로 세척한 뒤, 유기층은 MgSO₄로 건조시키고 진공상태에서 여과한 후 농축시켰다. 이것을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (hexane/EtOAc, 7:1) 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(1.85 g, 4.25 mmol, 87 %).

단계 2: tert-부틸(5-((1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에티닐)-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트의 제조

상기 단계 1에서 제조한 화합물(334 mg, 1.20 mmol)을 녹인 무수 DMF(12 mL) 용액에, 1-아지도데칸(339 mg, 1.86 mmol), CuI(114 mg, 0.60 mmol), DIPEA(N, N-Diisopropylethylamine)(0.63 mL, 3.6 mmol) 및 AgF(182 mg, 1.44 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 반응 혼합물을 12시간 동안 잘 저어준 뒤, 반응을 포화 NH₄Cl으로 퀀칭한 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하고 유기층 추출물을 포화 NH₄Cl과 염수로 씻어주었다. 이것을 MgSO₄로 건조시킨 뒤, 감압하에 농축시켰다. 이 농축물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(hexane/EtOAc, 6:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(439 mg, 0.95 mmol, 79 %).

단계 3: tert-부틸(5-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)-2,2-다이메틸-1,3-다이옥산-5-일)카바메이트

메탄올(30 mL)에 상기 단계 2에서 제조한 화합물(149 mg, 0.32 mmol)을 녹인 용액에 10%의 Pd/C (45 mg, 상기 단계 2에서 제조한 화합물의 30 % wt)을 첨가하였다. 플라스크를 진공으로 만든 뒤, H₂기체로 채워주고 실온에서 1시간 동안 저어주고 혼합물을 셀라이트(Celite)로 여과하여 주고 농축한 뒤 침전물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(hexane/EtOAc, 7:1 or 2:1)로 정제하여 무색 오일의 목적 화합물을 제조하였다(110 mg, 0.24 mmol, 74%).

단계 4: 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

실온에서 상기 단계 3에서 제조한 화합물(65 mg, 0.14 mmol)을 녹인 CH₂Cl₂ (1.40 mL) 용액에 TFA (1.40 mL)를 첨가하였다. 반응물을 12시간 동안 저어주고 감압 하에 용매와 시약을 제거한 뒤, 농축물을 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH, 100:10:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다(36 mg, 0.11 mmol, 78 %).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23-1.29 (m, 14H), 1.85 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.92 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.47 (br s, 4H), 2.78 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.57 (dd, J = 11.2, 26.9 Hz, 4H), 4.27 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 14.03, 19.21, 22.57, 26.50 (2C), 28.95 (2C), 29.03 (2C), 30.19, 31.70, 50.42, 60.05, 63.09 (2C), 121.34, 146.82; IR (CHCl₃) υmax; HRMS (FAB) calcd for C₁₇H₃₅N₄O₂ ([M+H]⁺) 327.2760, found 327.2762.

실시예 2 - 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

1-아지도데칸을 사용하는 대신, 1-아자이도옥탄을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.24-1.29 (m, 10H), 1.84-1.91 (m, 4H), 2.48 (br s, 4H), 2.77 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.54 (q, J = 12.2 Hz, 4H), 4.28 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H).

실시예 3 - 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

1-아지도데칸을 사용하는 대신, 1-(2-아자이도에틸)-4-헥실벤젠을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실시예 4 - 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 1에 사용되는 2-브로모-1-트라이아이소프로필실일 아세틸렌 대신하여 브로모트라이아이소프로필실란을 사용하고, 단계 2의 1-아지도데칸을 사용하는 것을 대신하여 1-아자이도도데칸(1-azidodoedcane)을 사용하는 것을 제외하고 실시예 1과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 1.28-1.32 (m, 18H), 1.90-1.92 (m, 2H), 3.89-3.98 (m, 4H), 4.41 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 8.07 (s, 1H).

실시예 5 - (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 2에서 제조한 화합물이 녹아있는 THF(5 mL) 용액을 -78℃로 온도를 낮춘 뒤에 LAH(lithium aluminum hydride)가 녹아있는 THF 용액(0.3 mmol)를 천천히 적가하였다. 0℃에서 세 시간 동안 저어준 뒤에 물로 반응을 퀀칭하고 CH₂Cl₂으로 두번 추출하였다. 유기층은 염수로 씻어주고, MgSO₄로 건조한 뒤, 진공에서 농축하였다. 농축물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 20:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물을 제조하였다. 이후, 실시예 1의 단계 4의 반응 과정과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다. (24 mg, 0.074 mmol, 74%)

실시예 6 - 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올의 제조

실시예 1의 단계 2에 사용되는 1-아지도데칸을 사용하는 대신에, 8-아자이도옥틸벤젠을 사용하는 것을 제외하고 실시예 1과 동일하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실시예 7 - N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 4에서 제조한 화합물(50mg, 1 eq, 0.15 mmol)에 아세트산무수물(0.2 mL), MeOH (1 mL), 포화된 NaHCO₃ 수용액(1 mL)을 첨가하고, 30분 동안 교반한 뒤, 농축하고 염화암모늄 수용액으로 반응을 퀀칭한 뒤, CH₂Cl₂로 두번 추출하여 MgSO₄로 건조시키고, 농축하여 별도의 정제과정 없이 목적 화합물을 98%의 수율로 제조하였다(54 mg, 98%).

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 3H), 1.28-1.32 (m, 18H), 1.86-1.96 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 4.02 (q, J = 11.2 Hz, 4H), 4.35 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.84 (s, 1H).

실시예 8 - N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물을 시작물질로 상기 실시예 7에서 수행한 아세틸화 반응과 유사하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

¹H NMR (300 MHz, MeOD) δ 0.86 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23-1.32 (m, 14H), 1.86-1.92 (m, 2H), 1.94 (s, 3H), 1.99-2.02 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 3.62 (dd, J = 11.2, 26.9 Hz, 4H), 4.31 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H).

실시예 9 - N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드의 제조

실시예 3에서 제조한 화합물을 출발물질로 하여 상기 실시예 7에서 수행한 아세틸화 반응과 유사하게 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.

실험예 1: NXC736의 마우스 면역세포에 대한 억제효과 확인

FTY720(Fingolimod)는 림프절 또는 골수에서 림프구의 일부를 가역적으로 포획함으로써 림프구를 이차 림프기관에 격리시켜 중추신경계로의 진입을 억제하거나, 혈류내 순환하는 림프구의 개체 수를 감소시켜 뇌에 도달하는 활성화된 림프구의 개수를 감소시키는 작용 기전을 갖는 다발성 경화증 치료제이다.

S1P 수용체에 작용하는 NXC736도 림프구 감소에 효과를 나타내는지 확인하기 위하여, NXC736이 면역세포에 미치는 영향을 평가하였다. 마우스에 NXC736을 3 mg/kg/day 경구 투여 후 말초 혈류(PB, peripheral blood), 골수(BM, Bone marrow)에서의 임파구 변화를 T cells, CD4 T cells, CD8 T cells로 분류하였으며, 시험물질 투여 후 0, 4, 8, 12, 24, 36 시간별로 FACS 분석을 진행하였다. 세포수(cell number)를 측정하여 0 time 기준으로 백분율(% of control)로 나타내었다.

도 1을 참조하면, NXC736 3 mg/kg 투여에 의해 말초 혈류(PB)에서는 4시간 후 T cells, CD4 T cells, CD8 T cells 모두 0시간 기준 40.6%, 16.4%, 5.9% 수준까지 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 12시간까지 감소가 유지되다가, 회복되어 36시간에서는 88.9%로 회복되었다.

골수(BM)에서는 NXC736 3 mg/kg 투여 후 0시간 기준 4시간 후 135%, 24시간 후에는 131%로 T cells 분포를 확인할 수 있었다. 이는 NXC736에 의해 수용체 내재화(Receptor internalization)가 발생하여 골수(BM)으로부터 말초혈류로 T cells 유리가 억제되어 나타나는 현상으로 판단된다.

NXC736 3 mg/kg 투여 후 T cells에서의 세포 수(cell number)는 4시간부터 감소되는 현상이 나타났으며, 24시간까지 억제효과가 어느 정도 유지되다 회복되는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로, NXC736 투여에 의해 혈류내 순환하는 림프구(lymphocyte) 개체수가 감소, 면역억제 효과가 나타나는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 2: NXC736의 랫드 면역세포에 대한 억제효과 확인

NXC736의 랫드 면역세포에 대한 영향을 평가하기 위해 SD랫드에 NXC736을 10 mg/kg/day 경구 투여 후 말초 혈류(PB)및 골수(BM)에서의 T cell, CD4 T cell, CD8 T cell로 분류하였으며, 시험물질 투여 후 0, 4, 8, 12, 24, 36, 48시간별로 FACS 분석을 진행하였다. 세포 수(cell number)를 측정하여 0 time 기준으로 백분율(% of control) 로 나타내었으며, T cell, CD4 T cell, CD8 T cell의 수를 측정하여 0 time 기준으로 % of control로 나타내었다.

도 2를 참조하면, NXC736 투여 후 말초 혈류(PB)에서는 4시간부터 T cell이 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 골수(BM) 에서는 반대로 변화가 없거나 증가하는 경향을 확인할 수 있었다.

본 연구를 통해서 NXC736은 경구투여 후 말초 혈류(PB)에서 림프구 수를 감소시켜 면역억제 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 골수(BM)에서는 변화가 없거나 증가하는 경향을 확인할 수 있었다. 이러한 효과는 NXC736이 림프절(lymph node), 골수(BM) 등에 존재하는 S1P 수용체에 기능적 길항제로 작용하여 림프구 유리를 억제하는 기전과 관련 있는 것으로 판단된다.

실험예 3: 마우스 DSS 유발 모델을 이용한 염증성 장질환의억제 효능 확인

Dextran Sulfate Sodium(DSS) induced Colitis 모델을 이용하여 NXC736의 염증성 장질환에 대한 유효성 평가를 진행하였다. 상기 마우스 모델은 DSS를 2.5%의 농도로 음수로 마우스에게 투여하여 염증성 장질환을 유발하였다. 치료군은 NXC736을 투여하는 시험군, 오자니모드(Ozanimod) 또는, MTX(methotrexate)를 투여하는 양성대조군, 비이클(Vehicle) 군 및 정상대조군으로 이루어지고 각 군은 n=10이다. 상기 염증성 장질환이 유발된 모델을 대상으로 본 발명의 화합물인 NXC736을 7일 동안 1일 1회 5, 10 mg/kg 용량으로 각각 경구 투여하였고, 양성대조물질로 오자니모드(Ozanimod)는 5 mg/kg를 1일 1회 경구 투여하였으며, 양성대조물질로 MTX(methotrexate)는 3 mg/kg를 주 3회 복강주사 투여하였다.

도 3에서는 DSS 유발 대장염 마우스의 질병활성지수(DAI) 및 DSS 유발 대장염 마우스의 질병활성지수 곡선하 면적(AUC)을 나타내었다. DAI는 마우스의 초기 체중과 비교한 체중 감소, 대변 농도(Stool consistency), 및 장출혈 정도의 합계 점수를 나타낸 것이다. DAI의 산출 기준은 하기 표 1과 같으며, DAI는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 및 8일에 평가하였다.

점수	초기 체중 대비 체중 감소량	대변 농도 (Stool consistency)	장 출혈 정도 (Intestinal bleeding)
0	<1%	정상	잠혈 미검출(Negative hemoccult)
1	1-5%	다소 무름(Soft but still formed)	잠혈 검출 (약한 루미놀 강도)
2	6-10%	무름(Soft)	잠혈 검출(강한 루미놀 강도)
3	11-18%	매우 무름(Very soft; wet)	육안에 의한 대변 혈흔 확인
4	>18%	물 설사(Watery diarrhea)	장 출혈

도 3을 참조하면, 양성대조물질 MTX 3 mg/kg, 오자니모드(Ozanimod) 5 mg/kg, NXC736 5 mg/kg, 및 NXC736 10 mg/kg 투여군 모두에서 음성대조군(Vehicle) 대비 통계적으로 유의한 감소효과를 확인할 수 있었다.

특히, NXC736 5 mg/kg, 및 NXC736 10 mg/kg 투여한 결과, 종래 궤양성 대장염의 표적 치료제로 사용되던 오자니모드(Ozanimod) 대비, 체중 감소량, 대변 농도, 및 장 출혈 정도에 따른 임상지표가 동등 이상을 나타냄을 확인할 수 있었다.

상기의 평가 결과는 음성대조군과 시험군 또는 두시험군 간의 통계분석을 수행하였고 군간의 비교를 위하여 Student's t-test 혹은 Mann Whitney U test에서 p value가 0.05 이하로 유의수준을 나타내었다.

이로써, NXC736은 염증성 장질환의 억제 효과가 있는 물질임을 확인할 수 있었다.

실험예 4: NXC736이 심혈관계에 미치는 영향 평가

1) hERG gene이 과발현된 HEK293 cell에서의 NXC736의 영향 평가

hERG(human Ether-

-go-go Related Gene)을 도입하여 hERG 칼륨 이온 채널을 안정하게 발현시킨 HEK-293 세포에 NXC736을 적용하여 hERG 채널 전류(hERG channel currents)에 미치는 영향을 평가하였다. NXC736은 1, 3, 10 및 30 μM 농도로 설정하였다. 또한, 각 실험당일에는 음성대조물질 또는 각 농도별 시험물질에 대한 hERG 채널 전류(hERG channel currents)의 기록이 종료된 임의의 1 개 세포에 처리하였다.

도 4를 참조하면, 1, 3, 10 및 30 μM 농도에서의 NCX736(B 내지 E group)의 hERG 채널 전류(hERG channel currents)의 보상된 억제율(Compensated suppression rate, %)은 각각 9.94±1.96, 13.98±4.48, 35.03±12.09 및 82.62±7.31% (n=3)이며, 음성대조군(A group)의 hERG 채널 전류(hERG channel currents)의 보상된 억제율(Compensated suppression rate, %)은 0±4.12 (n=3) 값을 나타내었다. 즉, 10 및 30μM 농도에서의 NCX736(D 및 E group)은 음성대조군(A group)과 비교하여 통계학적으로 유의한 값의 차이를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

이와 동일한 조건하에서 양성대조군(F group)으로 0.1 μM 농도의 E-4031을 처리하였다. hERG 채널 전류(hERG channel currents)의 보상된 억제율(Compensated suppression rate, %)은 92.64±1.66% (n=5)의 높은 값을 나타내었다. 이러한 결과를 볼 때, 본 시험법은 NCX736의 hERG 채널 전류(hERG channel currents)에 미치는 영향을 평가하기 위해 적합한 방법인 것으로 판단된다.

상기 조건하에서 hERG 유전자가 도입된 HEK-293 세포를 이용한 hERG 채널 전류(hERG channel currents)에 미치는 영향 평가에서, 시험물질인 NXC736을 최대 30 μM 농도까지 처리한 결과 hERG 채널 전류(hERG channel currents)의 보상된 억제율(Compensated suppression rate, %)은 82.62±7.31%을 나타내었으며, K⁺이온채널 저해능(IC50)은 12.94 μM (힐 계수(Hill coefficient): 1.527)로 산출되었다. 따라서, NXC736는 hERG 칼륨 채널 활성을 저해하지 않으며, 심장 이상을 유발하지 하지 않는 물질인 것을 확인할 수 있었다.

2) 비글견을 이용하여 심혈관계에 미치는 영향 확인

원격송신기가 삽입된 무마취 및 무구속 상태의 수컷 비글견 4 마리에 NXC736을 경구투여 하였다. 이후, 비글견 4 마리에 대한 심박수를 측정하여 NXC736이 심혈관계에 미치는 영향을 평가하였으며, 육안으로 이상 증상의 발현 여부를 확인하였다.

본 실험은 비글견 4마리 각각에 대하여, 4차 단계에 걸쳐 실험물질을 투여하였다. 1차 투여 단계(NXC736 0 mg/kg)에서는 대조물질로 부형제인 0.5% MC 수용액을 투여하였으며, 2차 투여 단계에서는 NXC736 12.5 mg/kg를 투여하였고, 3차 투여 단계에서는 NXC736 25 mg/kg를 투여하였으며, 4차 투여 단계에서는 NXC736 50 mg/kg를 투여하였다. 1차 내지 4차의 투여는 1주 간격으로 시행하였다. 또한, 실험물질 투여 전 0 시간(hours), 실험물질 투여 0.5 시간(hours), 1 시간(hours), 2 시간(hours), 3 시간(hours), 4 시간(hours), 6 시간(hours), 8 시간(hours), 12 시간(hours), 및 24 시간(hours) 경과한 후 비글견들의 심박수를 측정하였다.

도 5를 참조하면, NXC736를 12.5, 25, 50 mg/kg 용량으로 투여하더라도 심박수(Heart rate)의 변화가 나타나지 않은 것을 확인할 수 있었다.

또한, 육안으로 비글견에 대해 일반 증상을 관찰할 결과, NXC736를 12.5, 25, 50 mg/kg 용량 투여에 의한 이상 증상은 관찰되지 않았다.

이상과 같이, 마우스 DSS 유발 모델을 이용한 염증성 장질환 억제 효능 평가 결과 및 NXC736을 투여한 비글견의 심박수 및 육안으로 이상 증상의 발현 여부를 확인한 결과에 의하면, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 또한, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 S1P 수용체의 서브타입(S1P1, S1P2, S1P3, S1P4 및 S1P5) 중 S1PR1과 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하여, 염증성 장질환의 예방 또는 치료 효과가 있는 동시에 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로,
[화학식 1]

여기서,
R¹은 수소이고;
R²는 수소 또는 아세틸기이며;
X는 단일결합, C₂알킬렌, 또는 C₂ 알케닐렌이고;
A는 N원자 3개를 포함하는 5원환의 헤테로 아릴렌이며;
B는 C_2-11의 직쇄 또는 측쇄 알킬렌이고;
C는 단일결합 또는 페닐렌이고; 및
D는 수소, 페닐 및 C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화합물인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
(1) 2-아미노-2-(2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(2) 2-아미노-2-(2-(1-옥틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(3) 2-아미노-2-(2-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(4) 2-아미노-2-(1-도데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)프로판-1,3-다이올;
(5) (E)-2-아미노-2-(1-데실-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)바이닐-1,3-다이올;
(6) 2-아미노-2-(2-(1-(8-페닐옥틸)-1H-1,2,3-트라이아졸부틸-4-일)에틸)프로판-1,3-다이올;
(7) N-(2-(1-도데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1,3-디하이드로옥시프로판-2-일)아세트아미드;
(8) N-(4-(1-데실-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드; 및
(9) N-(4-(1-(4-헥실펜에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)-1-히드록시-2-(히드록시메틸)부탄-2-일)아세트아미드.
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제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 2]
제1항 또는 제6항에 있어서,
상기 염증성 장질환은 궤양성 대장염 또는 크론병인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항 또는 제6항에 있어서,
상기 약학적 조성물이 경구 투여용 제제 또는 비경구 투여용 제제인 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항 또는 제6항에 있어서,
상기 약학적 조성물이 염증성 장질환의 치료에 적합한 하나 이상의 다른 치료제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항 또는 제6항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 S1PR1 및 S1PR4에 대한 기능적 저해제로 작용하는 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제10항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 심혈관 질환 부작용을 야기하지 않는 것을 특징으로 하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.