KR20230032662A - 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물 - Google Patents
계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물을 섭취하면 항염증 및 항알레르기 효과를 나타내므로 비염, 중이염, 부비동염, 인후두염, 천식 및 아토피 등과 같은 염증성 질환을 완화 또는 개선할 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품조성물에 관한 것이다.
염증(inflammation)은 병원체의 침입 또는 손상된 조직 제거를 개시하기 위해 상처부위에 대해 나타나는 지역적인 반응이다. 염증의 긍정적인 역할에도 불구하고 인간질병을 위한 가장 일반적인 발병 메커니즘의 하나가 되었다. 활성화된 백혈구(monocytes) 및 대식세포에 의한 산화질소(NO)의 생성이 강력한 염증 반응을 개시하고, 세균 병원체에 대한 초기 면역반응에서 가장 중요한 부분이 된다 (Bogdan C., Nat. Immunol., 2:907, 2001).
염증 반응은 조직(세포)의 손상이나 외부감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증 매개인자 및 면역세포가 관련되어 효소 활성화, 염증매개물질 분비, 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 발열, 통증 등 외적 증상을 나타낸다. 정상인 경우 염증반응은 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능 회복작용을 하지만, 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하거나 지속적으로 일어나면 오히려 점막손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 발생시킬 수 있는 원인이 된다. 따라서, 부작용이 없으면서도 지속적으로 염증 반응을 예방할 수 있는 천연 항염증제의 개발이 필요한 실정이다.
일 양상은 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
일 양상은 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 계지(Cinnamomum cassia)는 장나무과의 상록교목식물인 계수나무(또는 계피나무라고도 함)의 어린 가지일 수 있다.
상기 개똥쑥은 국화과 쑥 속에 속하는 한해살이풀일 수 있다.
일 구체예에 따르면, 상기 계지 및 개똥쑥의 중량비는 1:1 일 수 있다.
일 구체예에 따르면, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 클로로포름, 아세톤, 프로필렌글리콜, 초산에틸, 부틸렌글리콜, 및 에테르로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 혼합 용매로 추출한 것일 수 있다. 예를 들면, 물과 에탄올이 혼합된 용매 또는 주정일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 상기 계지 및 개똥쑥 추출물은 당업계에 알려진 방법, 이의 변형된 방법 또는 본 발명에 의한 방법으로 제조하여 사용할 수 있다. 예를 들면, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출, 또는 가열추출법 등의 추출방법 추출한 후, 여과하고 감압 농축하여 추출물을 얻는 것일 수 있다.
일 구체예에 따르면, 상기 염증성 질환은 비염, 중이염, 부비동염, 인후두염, 천식 및 아토피인 것일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 계지 및 개똥쑥 추출물은 지질다당류(lipopolysaccharide: LPS)에 의하여 자극된 대식세포에서 염증성 사이토카인 생성을 억제하였다. 상기 지질다당류(lipopolysaccharide: LPS)는 염증유도 물질로서, 염증 반응을 일으키는 염증성 사이토카인(pro-inflammatory)들의 생성을 촉진한다.
상기 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 식품 조성물은 항알레르기 효과를 나타낼 수 있다. 상기 항알레르기란 알레르기 반응이 완화되는 것을 의미하는 것일 수 있다.
일 실시예에 따르면, A23187로 자극하여 면역세포에서 IL-4를 유발한 뒤 상기 계지 및 개똥쑥 추출물을 처리하였을 경우, IL-4가 감소하는 것을 확인하였다. 상기 IL-4는 IgE 분비를 촉발시키므로 알레르기 반응을 유발하므로, IL-4의 감소는 알레르기 반응을 억제하는 것을 의미한다.
상기 알레르기 반응을 나타내는 질환으로는 비염, 천식, 결막염 및 아토피일 수 있으며, 예를 들면 비염 또는 천식일 수 있다.
상기 개선은 본 발명의 조성물의 섭취로 염증 질환의 증세가 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본원에서 상기 "식품"이란, 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 것을 말한다.
본원발명에 따른 염증성 질환 개선용 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본원발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 빵류, 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 캔디류, 쵸코렛류, 껌류, 아이스크림류, 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실 음료, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
또한, 상기 "기능성 식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
또한, 본원발명에서 상기"음료"란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함한다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 염증성 질환 개선용 조성물을 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
나아가 상기 기술한 것 이외에 본원발명의 염증성 질환 개선용 조성물을 함유하는 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있으며, 상기 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본원발명의 염증성 질환 개선용 조성물을 함유하는 식품에 있어서, 상기 본 발명에 따른 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.001중량% 내지 90중량%로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.1중량% 내지 40중량%로 포함할 수 있고, 음료의 경우, 100ml를 기준으로 0.001g 내지 2g, 바람직하게는 0.01g 내지 0.1g의 비율로 포함할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있으므로 상기 범위에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물을 섭취하면 항염증 및 항알레르기 효과를 나타내므로 비염, 중이염, 부비동염, 인후두염, 천식 및 아토피 등과 같은 염증성 질환을 완화 또는 개선할 수 있을 것이다.
도 1은 계지 및 개똥쑥의 비율에 따른 추출물의 NO 발생량을 측정한 데이터이다.
도 2는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 IL-4 발현량을 측정한 데이터이다.
도 3은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 NO 발생량을 측정한 데이터이다.
도 4는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 IL-33 발현량을 측정한 데이터이다.
도 5는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 TLSP 발현량을 측정한 데이터이다.
도 6은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 COX2 발현량을 측정한 데이터이다.
도 7은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 TNF 발현량을 측정한 데이터이다.
도 2는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 IL-4 발현량을 측정한 데이터이다.
도 3은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 NO 발생량을 측정한 데이터이다.
도 4는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 IL-33 발현량을 측정한 데이터이다.
도 5는 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 TLSP 발현량을 측정한 데이터이다.
도 6은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 COX2 발현량을 측정한 데이터이다.
도 7은 계지 및 개똥쑥 추출물, 계지 추출물, 및 개똥쑥 추출물 처리에 따른 사이토카인 TNF 발현량을 측정한 데이터이다.
이하 하나 이상의 구체예를 실시예를 통해 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 계지 및 개똥쑥 추출물의 제조
건조된 계지 및 개똥쑥을 1:0, 0:1, 1:1, 1:2, 1:4, 2:1, 4:1, 2:3 및 3:2 조성비로 총 100g을 분쇄하고 추출용기에 넣은 후, 상기 건조된 계지 및 개똥쑥을 100g을 증류수 500mL 및 주정 500mL와 함께 60℃에서 6시간 이상 환류 및 교반 추출하였다.
상기 계지 및 개똥쑥 주정추출물을 20mesh의 1차 진동체 여과 후 2차 퍼라이트(perlite)로 흡착 및 여과하여 불용성 불순물을 제거하였다. 그런 다음, 상기 여과된 계지 및 개똥쑥 주정추출물을 회전 진공 농축기(EYELA, Tokyo, Japan)를 사용하여 87℃에서 감압농축하고, 상기 감압 농축된 계지 및 개똥쑥 주정추출물을 -80℃에서 동결건조 (Operon, Gimpo-si, Korea)한 후 분말화하였다.
실시예 2: 계지 및 개똥쑥 추출물의 조합 비율 설정
Raw264.7 세포를 10% fetal bovine serum 및 1% antibiotic-antimycotic solution을 함유한 DMEM 배지에서 5% CO2 - 95% 공기, 37℃ 배양조건에서 배양하였다. 상기 배양한 Raw264.7 세포(3×105cells/mL)에 비율이 다른 계지 및 개똥쑥 추출물을 처리한 후, Lipopolysaccharides(LPS, 0.5mM)을 처리하고 18시간 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배양액을 초음파 처리하고 측정용 ELISA KIT(Promega) 로 상등액에서 산화질소(Nitric oxide) 발현량을 측정하였다. 계지 및 개똥쑥 추출물의 비율은 1:1, 1:2, 1:4, 2:1, 4:1, 2:3, 및 3:2로 실시예 1의 방법으로 제조하여 사용하였다. 결과 비교를 위하여, 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 무처리군(NT), LPS만 처리한 음성대조군(LPS), 및 덱사메타손을 처리한 양성대조군(Dex)을 사용하였다.
그 결과 도 1에서 보이는 바와 같이, 계지 및 개똥쑥 추출물은 비율에 상관없이 모두 음성 대조군인 LPS보다는 NO 발생량이 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 1:1 비율로 추출된 계지 및 개똥쑥 추출물의 경우, 다른 비율의 계지 및 개똥쑥 추출물 대비 가장 적게 NO가 발생하였으며, 양성대조군인 덱사메타손을 처리한 세포보다 NO 발생량이 적은 것을 확인하였다. 따라서, 계지 및 개똥쑥 추출물의 계지 및 개똥쑥의 비율은 1:1 조성비가 가장 항염증 효과가 뛰어나다는 것을 확인하였다.
실시예 3: 계지 및 개똥쑥 추출물을 처리한 basophilic RBL-2H3 세포에서 IL-4 발현 억제 효과 확인
RBL-2H3 세포를 10% fetal bovine serum 및 1% antibiotic-antimycotic solution을 함유한 DMEM 배지에서 5% CO2 - 95% 공기, 37℃ 배양조건에서 배양하였다. 상기 배양한 세포(3×105cells/mL)에 1:1 비율의 계지 및 개똥쑥 추출물 (복합물), 계지 추출물 및 개똥쑥 추출물을 각각 50㎍/mL씩 처리한 후, IL-4 발현을 유도하기 위한 A23187(calcium ionophore) 1mM을 처리하고 18시간 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배양액을 초음파 처리하고 IL-4 측정용 ELISA KIT(R&D Systems, Minneapolis, MN, U.S.A.)를 이용하여 상등액의 IL-4의 발현량을 측정하였다. 결과 비교를 위하여, 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 무처리군(NT), A23187만 처리한 음성대조군(A23187), 및 덱사메타손을 처리한 양성대조군(Dex)을 사용하였다.
도 2에서 보이는 바와 같이, A23187만 처리한 음성대조군 대비 계지 추출물, 개똥쑥 추출물, 및 계지 및 개똥쑥 추출물 모두 IL-4 발현량이 현저히 감소하는 것을 확인하였으며, 계지 및 개똥쑥 추출물의 경우 계지 추출물 또는 개똥쑥 추출물보다 IL-4 발현량이 더 현저히 감소하는 것을 확인하였다.
실시예 4: 계지 및 개똥쑥 추출물을 처리한 Raw264.7 세포에서 Nitric Oxide, IL-33, COX2, TSLP 및 TNF 발현 억제 효과 확인
계지 추출물, 개똥쑥 추출물 혹은 계지 및 개똥쑥 추출물을 LPS로 자극한 Raw264.7 세포의 IL-33, TSLP, 및 COX2, TNF 발현에 미치는 영향을 측정하였다.
Raw264.7 세포를 10% fetal bovine serum 및 1% antibiotic-antimycotic solution을 함유한 DMEM 배지에서 5% CO2 - 95% 공기, 37℃ 배양조건에서 배양하였다. 상기 배양한 세포(3×105cells/mL)에 1:1 비율의 계지 및 개똥쑥 추출물 (복합물), 계지 추출물 및 개똥쑥 추출물을 각각 50㎍/mL씩 처리한 후, Lipopolysaccharides(LPS, 0.5mM)을 처리하고 18시간 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배양액을 초음파 처리하고 측정용 ELISA KIT(IL-33, TSLP: ABcam, U.S.A., Nitric oxide: Promega, TNF: R&D Systems, COX2: CUSABIO Biotech Co)로 상등액에서 발현량을 측정하였다. 결과 비교를 위하여, 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 무처리군(NT), LPS만 처리한 음성대조군(LPS)을 사용하였다. 또한, NO 발생 여부에 대한 양성대조군으로는 NO 억제 물질인 메틸아르기닌(LNMMA)을 사용하였고, IL-33, TLSP, COX2 및 TNF 발현량 확인에 대한 양성대조군으로 덱사메타손(Dex)을 사용하였다.
도 3 내지 도 7에서 보이는 바와 같이, NO 발생량, IL-33, TLSP, COX2 및 TNF 발현량은 계지 추출물, 개똥쑥 추출물, 및 계지 및 개똥쑥 추출물 모두 LPS만 처리한 음성 대조군 대비 현저히 감소한 것을 확인하였다. 또한, 계지 및 개똥쑥 추출물의 경우, 계지 추출물 또는 개똥쑥 추출물 대비 NO 발생량, IL-33, TLSP, COX2 및 TNF 발현량이 더 현저하게 감소되는 것을 확인하였다.
이를 통하여 계지 및 개똥쑥 추출물이 항염증 효과가 현저하다는 것을 확인하였다.
Claims (4)
- 계지 및 개똥쑥 추출물을 포함하는 염증성 질환 개선용 식품 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 계지 및 개똥쑥의 중량비는 1:1인,
식품 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 클로로포름, 아세톤, 프로필렌글리콜, 초산에틸, 부틸렌글리콜, 및 에테르로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 혼합 용매로 추출한 것인,
식품 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 염증성 질환은 비염, 중이염, 부비동염, 인후두염, 천식 및 아토피인 것인,
식품 조성물.
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Legal Events
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E902 | Notification of reason for refusal |