KR20230010239A

KR20230010239A - 항-il-33 항체의 제형물

Info

Publication number: KR20230010239A
Application number: KR1020227043324A
Authority: KR
Inventors: 소피아 에키조글로우; 마함마드 사이드 마스타파 아흐메드; 레자 에스판디아리; 아룬 파루푸디
Original assignee: 메디뮨 리미티드
Priority date: 2020-05-11
Filing date: 2021-05-10
Publication date: 2023-01-18
Also published as: CA3181765A1; IL297841A; US20230174638A1; BR112022022620A2; AR122060A1; WO2021228760A1; JP2023524866A; AU2021270839A1; CN115551542A; EP4149521A1

Abstract

본 개시내용은 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 계면활성제, 아르기닌 및 완충액을 포함하는 조성물에 대한 것이다. 조성물을 제조하는 방법 및 대상체에서 질환을 치료하는 방법도 개시된다.

Description

항-IL-33 항체의 제형물

본 출원은 2020년 5월 11일자로 출원된 그리스 특허 출원 제20200100239호에 대한 우선권을 주장한다. 본 출원의 내용은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.

기술분야

본 개시내용은 33_640087-7B의 고농도 수성 제형물을 포함하는 항-IL-33 항체 및 이의 바이오시밀러에 관한 것이다.

33_640087-7B는, 인간 인터루킨(IL)-33에 결합하고 IL-33이 이의 수용체 ST2에 결합하는 것을 방지하고, 이황화 결합(DSB) IL 33으로의 전환을 억제하는 인간 면역글로불린(Ig) G1 단일클론 항체(mAb)이다. 33_640087-7B는 수많은 질환에서 치료학적 잠재성을 갖고 현재 중등도 내지 중증의 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 천식 및 아토피성 피부염(AD), 그리고 당뇨병성 신장 질환(DKD)의 치료를 위해 개발되고 있다.

33_640087-7B는 향후 피하 주사를 통해 투여되는 것을 목표로 하고 있다. 본 개시내용은 이러한 필요성을 다룬다.

33_640087-7B의 1상 임상 연구(연구 D9180C00001)가 완료되었다. 연구 D9180C00001은 33_640087-7B의 안전성, 내약성, PK 및 면역원성을 평가하기 위한 88명의 참가자(파트 I: 경도 아토피 병력이 있는 56명의 건강한 지원자에서의 단회 상승 용량(SAD); 파트 II: 경도 만성 폐쇄성 폐 질환이 있는 24명의 참가자에서의 다중 상승 용량(MAD); 파트 III: 8명의 건강한 일본 지원자에서의 단회 용량)에서의 첫 임상 적용(first in human), 무작위, 위약 대조, 맹검(연구자 및 참가자 맹검, 후원자 비맹검) 임상 연구였다. 33_640087-7B는 일반적으로 안전하고 내약성이 좋은 것으로 밝혀졌으며, 연구의 파트 I 및 III에서 최대 300 mg 33_640087-7B 정맥내(IV) 투여 후 안전성 문제가 없었다. 연구의 파트 2에서, COPD 환자는 3개 용량의 33_640087-7B를 14일 간격으로 피하 제공받았다.

1상 임상 연구를 위해, 33_640087-7B는 멸균된 흰색 내지 회백색의 동결건조된 분말로 바이알에 담겨 공급되었다. 각 바이알은 IV 또는 SC 투여를 위한 활성 33_640087-7B의 공칭 50 mg을 포함했다. 주사용 멸균수 1.2 mL로 재구성 시, 용액은 20 mM L 히스티딘/L 히스티딘-하이드로클로라이드, 80 mM L-아르기닌-하이드로클로라이드, 120 mM 수크로스, 0.02%(중량/부피[w/v]) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 50 mg/mL 33_640087-7B를 포함했다.

33_640087-7B의 예상 유효 용량은 특정 조건의 경우 300 mg(또는 그 이상)일 수 있다. 따라서 저농도 제형물은 특히 만성 질병에서 사용하기 위한, 피하 투여에 대한 장벽을 제공할 수 있다. 만성 장애를 앓고 있는 환자가 치료 용량을 제공받기 위해 6 ml 이상의 완제 의약품을 일상적으로 피하 투여받을 것으로 기대하는 것은 비현실적일 것이다.

이와 같이, 특히 피하 투여를 위해, 약물 제형물에서 33_640087-7B의 농도를 증가시킬 필요가 있다.

그러나, 약물 제형물에서 단백질 농도의 증가는 안정성 문제, 예를 들어 고분자량 종(HMWS)의 형성을 초래하는 단백질 응집을 유발할 수 있다. HMWS, 특히 항체의 고유 구성의 대부분을 보존하는 것들은 일부 단백질 제형물에서 특히 중요할 수 있다. 높은 단백질 농도에 의해 유도된 가역적 자가-연합(RSA)으로 인해 가용성 고차 종이 형성될 수 있다. 응집은 또한 잠재적으로 치료용 단백질의 피하 생체이용률 및 약동학에 영향을 미칠 수 있다. 또한, 고농도에서의 가용성 고차 종의 형성은 용액 점도를 증가시켜, 특히 프리필드 시린지와 같이 배압이 높은 장치로부터, 완제 의약품을 전달하기 어렵게 만들 수 있다.

고농도의 항체를 포함하면서 점도가 낮고 가역적 자가-연합 특성이 감소된 항-IL-33 항체에 대한 개선된 제형물이 본원에 제공된다.

한 양태에서, 본 개시내용은 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌 및 완충액을 포함하는 조성물을 제공하며, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 VHCDR1, SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 VHCDR2, SEQ ID NO: 3의 서열을 갖는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 SEQ ID NO: 5의 서열을 갖는 VLCDR1, SEQ ID NO: 6의 서열을 갖는 VLCDR2, 및 SEQ ID NO: 7의 서열을 갖는 VLCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 계면활성제를 추가로 포함한다.

또 다른 양태에서, 본 개시내용은 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 150 mM 라이신 및 완충액을 포함하는 조성물을 제공하며, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 VHCDR1, SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 VHCDR2, SEQ ID NO: 3의 서열을 갖는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 SEQ ID NO: 5의 서열을 갖는 VLCDR1, SEQ ID NO: 6의 서열을 갖는 VLCDR2, 및 SEQ ID NO: 7의 서열을 갖는 VLCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 계면활성제를 추가로 포함한다.

일부 경우에, 조성물은 액체이다. 일부 경우에, 조성물은 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스 및 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 조성물에 비해 점도가 감소된 것을 특징으로 한다. 일부 경우에, 조성물은 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스 및 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 조성물에서의 항-IL-33 항체의 가역적 자가-연합에 비해 감소된 가역적 자가-연합을 갖는 항-IL-33 항체를 특징으로 한다.

추가 양태에서, 본 개시내용은 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml의 33_640087-7B, 약 0.03%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물을 제공하며, pH는 pH 5.5 ± 0.5이다.

추가 양태에서, 본 개시내용은 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml의 항-IL-33 항체, 약 0.03%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물을 제공하며, pH는 pH 5.5 ± 0.5이다.

추가 양태에서, 본 개시내용은, 예를 들어 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는, 본원에 개시된 조성물을 포함하는 제조 물품을 제공한다.

추가 양태에서, 본 개시내용은, 예를 들어 약 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는, 본원에 개시된 조성물을 포함하는 바이알을 제공한다.

추가 양태에서, 본 개시내용은 대상체에 본원에 개시된 치료 유효량의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 IL-33-매개 장애를 치료하는 방법을 제공한다.

추가 양태에서, 본 개시내용은 약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌, 선택적으로 계면활성제, 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 방법은 (i) 제1 농도의 항체 및 완충액을 포함하는 제1 용액을 아르기닌과 조합하여 약 110 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM의 아르기닌 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계; 및 선택적으로 (ii) 계면활성제를 용액에 첨가하여 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v) 계면활성제의 최종 농도를 달성하는 단계를 포함한다.

추가 양태에서, 본 개시내용은 약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 150 mM 라이신, 선택적으로 계면활성제, 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 방법은 (i) 제1 농도의 항체 및 완충액을 포함하는 제1 용액을 아르기닌과 조합하여 약 110 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 150 mM의 라이신 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계; 및 선택적으로 (ii) 계면활성제를 용액에 첨가하여 약 0.02%(w/v) ± 0.015%(w/v) 계면활성제의 최종 농도를 달성하는 단계를 포함한다.

본 발명의 실시형태는, 예로서, 하기 도면을 참조하여 기재될 것이다:
도 1은 6개월의 기간에 걸쳐 2℃ 내지 8℃에서 보관될 때, 본 개시내용의 조성물 33_640087-7B의 가용성 고차 종의 분포%의 안정성을 나타낸다.
도 2는 시간 경과에 따른(개월 - M) 불용성 응집체 형성의 함수로서 측정된, 본 개시내용의 조성물에서 33_640087-7B의 장기 안정성을 나타낸다. 응집 수준은 유리 바이알 및 프리필드 시린지(PFS)에서의 보관 중 측정되었다. 조성물은 2 내지 8℃에서 보관되었다.
도 3은 시간 경과에 따른(개월 - M) 불용성 응집체 형성의 함수로서 측정된, 본 개시내용의 조성물에서 33_640087-7B의 안정성을 나타낸다. 응집 수준은 유리 바이알 및 프리필드 시린지(PFS)에서의 보관 중 측정되었다. 조성물은 25℃에서 보관되었다.
도 4는 시간 경과에 따른(개월 - M) 불용성 응집체 형성의 함수로서 측정된, 본 개시내용의 조성물에서 33_640087-7B의 안정성을 나타낸다. 응집 수준은 유리 바이알 및 프리필드 시린지(PFS)에서의 보관 중 측정되었다. 조성물은 40℃에서 보관되었다.
도 5는 제형물 점도에 대한 아르기닌 및 온도의 영향을 나타낸다.
도 6은 제형물 점도에 대한 33-640087_7B 농도, 아르기닌 및 온도의 영향을 나타낸다. 점도(Cp)는 5℃, 18℃, 25℃ 및 30℃에서 각 아르기닌 농도에서 각 33-640087_7B 농도에서 측정되었다.

정의

본원에 나타내고 기재된 특정 구현예는 예이며, 어떤 방식으로든 본 출원의 범위를 달리 제한하려는 것이 아님이 이해되어야 한다.

본원에 언급된 공개 특허, 특허 출원, 웹사이트, 회사명, 및 과학 문헌은 각각이 참조로 포함됨을 구체적이고 개별적으로 나타낸 것과 동일한 정도로 이의 전체가 본원에 참조로 포함된다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 단수형("a", "an" 및 "the")은 내용이 문맥에서 명백히 달리 지정되지 않는 한, 이들이 지칭하는 용어의 복수형도 구체적으로 포괄한다.

용어 "약" 또는 "대략"은 부분적으로 값이 어떻게 측정 또는 결정되는지에 따라 좌우되는, 당업자에 의해 결정된 특정 값에 대한 허용 가능한 오차를 의미한다. 특정 실시형태에서, 용어 "약" 또는 "대략"은 1, 2, 3, 또는 4 표준 편차 이내를 의미한다. 특정 실시형태에서, 용어 "약" 또는 "대략"은 주어진 값 또는 범위의 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5% 또는 0.05% 이내를 의미한다. 용어 "약" 또는 "대략"이 2개 이상의 일련의 숫자 값에서 첫 번째 숫자 값 앞에 올 때마다, 용어 "약" 또는 "대략"은 그 일련의 숫자 값 각각에 적용되는 것으로 이해된다.

본원에 개시된 방법의 실행 및 그 개별 단계는 수동으로 및/또는 전자 장비의 도움 또는 전자 장비에 의해 제공되는 자동화로 수행될 수 있다. 프로세스가 특정 경우를 참조하여 설명되었지만, 당업자는 방법과 연관된 행위를 수행하는 다른 방식이 사용될 수 있음을 쉽게 이해할 것이다. 예를 들어, 다양한 단계의 순서는 달리 설명되지 않는 한 방법의 범위 또는 정신을 벗어나지 않으면서 변화될 수 있다. 또한 개별 단계 중 일부가 조합되거나 생략되거나 추가 단계로 더 세분화될 수 있다.

조성물 및 방법은 달리 언급되지 않는 한, 아래에 추가로 설명되는 추가 선택적 요소, 특징 및 단계(도면에 나타낸 것들 포함) 중 하나 이상의 임의의 조합을 포함하는 실시형태를 포함하는 것으로 고려된다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 분야의 당업자에 의해 보편적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 다음을 포함하지만 이에 제한되지 않는 하기 참고문헌은 본 개시내용에서 사용되는 용어 중 다수에 대한 일반적인 정의를 당업자에게 제공한다: Singleton et al., DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY (2d Ed. 1994); THE CAMBRIDGE DICTIONARY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY (Walker Ed., 1988); THE GLOSSARY OF GENETICS, 5th Ed., R. Rieger et al. (Eds.), Springer Verlag (1991); 및 Hale & Marham, THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY (1991).

용어 "항체" 또는 "면역글로불린"은 각각 가변 영역 및 불변 영역을 포함하는, 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄로 구성되는 사량체 당단백질을 지칭한다. 항원 결합 부분은 재조합 DNA 기법에 의해 또는 온전한 항체의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 생성될 수 있다. 용어 "항체"는 단일클론 항체, 폴리클론 항체, 키메라 항체, 인간 항체, 및 인간화 항체를 포함한다.

항체 변이체는 정규 사량체 항체의 구조가 변화된 항체 단편 및 항체 유사 단백질을 포함한다. 전형적으로 항체 변이체는 불변 영역이 변화된 V 영역을 포함하거나, 대안적으로 V 영역을 불변 영역에, 선택적으로 비정규 방식으로 첨가하는 것을 포함한다. 예는 다중특이적 항체(예를 들어, 추가 V 영역이 있는 이중특이적 항체), 항원에 결합할 수 있는 항체 단편(예를 들어, Fab', F'(ab)2, Fv, 단일쇄 항체, 디아바디), 2파라토프성 펩티드 및 전술한 것들을 포함하는 재조합 펩티드를, 이들이 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 포함한다.

항체 단편은 항체가 원하는 생물학적 활성을 보유하는 한, 특히 Fab, Fab', F(ab')2, Fv, 도메인 항체(dAb), 상보성 결정 영역(CDR) 단편, CDR-이식 항체, 단일쇄 항체(scFv), 단일쇄 항체 단편, 키메라 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 미니바디, 선형 항체를 포함하는 항체의 항원 결합 부분(즉, 항원 결합 단편"); 킬레이팅 재조합 항체, 트리바디 또는 바이바디, 인트라바디, 나노바디, 작은 모듈형 면역약제(SMIP), 항원 결합 도메인 면역글로불린 융합 단백질, 단일 도메인 항체(낙타화 항체 포함), VHH 포함 항체, 또는 이의 변이체 또는 유도체, 및 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR 서열과 같은, 폴리펩티드에 특이적 항원 결합을 부여하기에 충분한 면역글로불린의 적어도 일부를 포함하는 폴리펩티드를 포함한다.

용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 본원에 기재된 장애와 연관된 사건, 질환 또는 질병의 임상 증상, 징후 또는 진행을 일시적 또는 영구적으로, 부분적으로 또는 완전히 제거, 감소, 억제 또는 완화하는 것을 지칭한다. 관련 분야에 인식되어 있는 바와 같이, 치료제로 사용되는 약물은 주어진 질환 상태의 중증도를 감소시킬 수 있지만 유용한 치료제로 간주되기 위해 질환의 모든 징후를 없앨 필요는 없다. 유사하게, 예방적으로 시행된 치료는 실행 가능한 예방제를 구성하기 위해 질병의 발병을 방지하는 데 완전히 효과적일 필요는 없다. 단순히 질환의 영향을 감소시키거나(예를 들어, 증상의 수 또는 중증도를 감소시키거나, 또 다른 치료의 효과를 증가시키거나, 또 다른 유익한 효과를 생성함으로써) 대상체에서 질환이 발생하거나 악화될 가능성을 줄이는 것으로 충분하다. 본 개시내용의 한 실시형태는 특정 장애의 중증도를 반영하는 지표의 기준선을 초과하는 지속된 개선을 유도하기에 충분한 양 및 시간으로 환자에게 치료제를 투여하는 단계를 포함하는, 치료의 유효성을 결정하는 방법에 대한 것이다.

본원에 사용된 바와 같은 'IL-33' 단백질은 인터루킨 33, 특히 포유류 인터루킨 33 단백질, 예를 들어 UniProt 번호 095760으로 기탁된 인간 단백질을 지칭한다. IL-33은 환원 및 산화 형태로 존재한다. 용어 "IL-33" 및 "IL-33 폴리펩티드"는 상호 교환적으로 사용된다. 특정 실시형태에서, IL-33은 전장이다. 또 다른 실시형태에서, IL-33은 성숙, 절단된 IL-33(아미노산 112 내지 270)이다. 최근 연구는 전장 IL-33이 활성임을 제시한다(Cayrol and Girard, Proc Natl Acad Sci USA 106(22): 9021-6 (2009); Hayakawa et al., Biochem Biophys Res Commun. 387(1):218-22 (2009); Talabot-Ayer et al, J Biol Chem. 284(29): 19420-6 (2009)). 그러나, 비제한적으로 aa 72 내지 270, 79 내지 270, 95 내지 270, 99 내지 270, 107 내지 270, 109 내지 270, 111 내지 270, 112 내지 270을 포함하는 N-말단 가공되거나 절단된 IL-33은 향상된 활성을 가질 수 있다(Lefrancais 2012, 2014).

본원에 사용된 바와 같은 '산화 IL-33' 또는 'oxIL-33'은 RAGE에 결합하며 RAGE 매개 신호전달을 촉발하는 IL-33의 형태를 지칭한다. 산화 IL-33은, 예를 들어 비환원성 조건 하에 웨스턴 블롯 분석에 의해, 특히 대응하는 환원 형태보다 4 Da 적은 질량을 갖는 구별되는 밴드로서 가시적인 단백질이다. 특히, 이는 시스테인 208, 227, 232 및 259로부터 독립적으로 선택된 시스테인 사이에 1개 또는 2개의 이황화 결합을 갖는 단백질을 지칭한다. 하나의 실시형태에서, 산화 IL-33은 ST2에 대한 결합을 나타내지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 '환원 IL-33' 또는 'redIL-33'은 ST2에 결합하며 ST2 매개 신호전달을 촉발하는 IL-33의 형태를 지칭한다. 특히, 환원 형태의 시스테인 208, 227, 232 및 259는 이황화 결합되지 않는다. 하나의 실시형태에서, 환원 IL-33은 RAGE에 대한 결합을 나타내지 않는다.

본원에 사용된 용어 "IL-33-매개 장애"는 IL-33 축에 의해 매개되거나 이와 연관된 임의의 장애 또는 질병을 지칭한다. 일부 경우에, IL-33-매개 장애는 신체에서 국소적으로 및/또는 전신적으로 IL-33의 수준 또는 활성으로 인해 비정형 증상이 나타날 수 있는 과도한 IL-33 수준 또는 활성과 연관된다. 예시적인 IL-33-매개 장애는 염증성 질병, 면역 장애, 섬유성 장애, 호산구성 장애, 감염, 통증, 중추 신경계 장애, 고형 종양 및 안과 장애를 포함한다. IL-33-매개 장애는, 예를 들어 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, 문헌[Liew et al. Nature Reviews Immunology 10: 103-110, 2010]에 기재되어 있다. "IL33-매개 장애"는 또한 본원에서 "IL33-유도 장애"로 지칭될 수 있다.

일부 경우에, IL-33-매개 염증성 질환은 천식, 패혈증, 패혈증 쇼크, 아토피성 피부염, 알레르기성 비염, 류마티스 관절염, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 천식, COPD 중복 증후군(ACOS), 만성 기관지염, 폐기종, 비용종을 포함하거나 포함하지 않는 만성 비부비동염, 혈관염, GvHD, 포도막염, 만성 특발성 두드러기, 부비동염 또는 췌장염 중 어느 것일 수 있다.

일부 경우에, IL-33-매개 장애는 당뇨병성 신장 질환일 수 있다. 본원에 정의된 당뇨병성 신장 질환은 II형 진성 당뇨병의 진단 및 30 내지 75 ml/분의 추정 사구체 여과율(eGFR)을 지칭한다. 전형적으로 DKD는 100 내지 3000 mg 알부민 대 g 크레아티닌의 UACR 비율의 진단으로서 추가로 정의된다. 용어 "치료 유효량"은 질환 또는 장애와 연관된 질환의 증상 또는 징후를 완화하거나 경감시키는 데 효과적인 치료제의 양을 지칭한다.

가역적 자가-연합이 낮은 조성물

33_640087-7B는 비경구적으로 투여되어 최대 300 mg의 용량으로 인간에서 안전하고 일반적으로 내약성이 있는 것으로 나타났다. 질환 및 인터루킨-33의 국소 생물학에 따라, 33_640087-7B의 치료 유효량은 300 mg 이상일 수 있다.

IL-33이 질환을 매개하는 것으로 생각되는 많은 질병은 만성적이고 오래 지속된다. 이는 환자가 질환의 증상을 효과적으로 관리하기 위해서는 항 IL-33-기반 요법을 만성적으로 시행해야 할 필요가 있을 수 있음을 의미한다. 따라서, 치료 용도에 적합한 33_640087-7B를 포함하는 조성물은, 환자가 장기간의 치료를 가능한 한 편안하게 느끼도록 해야 한다.

이와 같이, 비경구 투여(예를 들어, 피하 또는 정맥내 투여)에 적합한 고농도 제형물이 요망된다. 그러나 단백질 농도가 높은 제형물은 개발 가능성의 관점에서 문제가 될 수 있다. 예를 들어, 33_640087-7B는 적당히 높은 농도(예를 들어, 약 50 mg/ml)에서 가역적으로 자가-연합하는 것으로 나타났다. 가역적 자가-연합(RSA)은 고농도 제형물의 중요한 개발 가능성 매개변수이다. RSA는 대개 가용성, 가역적, 고차 종(예를 들어, 비공유 이량체)의 형태로 나타나며 제조 및 약물 투여 중 문제를 일으킬 수 있다. 예를 들어, RSA의 존재는 점도 증가를 야기할 수 있다. 고점도는, 예를 들어 여과 프로세스 동안 필터를 막음으로써, 제조상의 상당한 문제를 야기할 수 있다. 이는 결과적으로 정제 프로세스 동안 단량체로부터 고차 종이 정제될 때 상당한 양의 원료 의약품이 손실되는 경우 수율 감소를 야기할 수 있다. 또한 증가된 점도는, 특히 약물이 피하 투여와 같이 비경구 투여되는 경우, 항체를 투여하는 데 사용되는 장치의 기능성을 감소시킴으로써 약물 투여에 부정적인 영향을 미칠 수 있다. 이러한 상황에서는, 최종 사용자(예를 들어, 환자 또는 의료 제공자)가 수동으로 주사하는 능력이 고점도로 인해 손상될 수 있다.

고농도의 항-IL-33 항체(100 mg/ml 초과를 의미함), 선택적으로 계면활성제, 고농도의 아르기닌 또는 라이신 및 완충액을 포함하는 장기 또는 단기 보관될 수 있는, 비경구 투여에 적합한 안정한 액체 조성물(즉, "액체 제형물")이 본원에 제공된다. 본원에 사용된 바와 같은 "고농도의 아르기닌"은 약 170 mM 초과, 예컨대 약 190 mM 초과의 아르기닌 농도를 지칭한다. "고농도의 라이신"은 약 150 mM 초과의 라이신 농도를 지칭한다. 본원에 개시된 조성물은 놀랍게도, I상 제형물(실시예 1 참조)에서 더 낮은 33_640087-7B 농도에서 이전에 관찰된 가역적 자가-연합(RSA)에 비해 고농도 액체 조성물에서 33_640087-7B의 RSA를 감소시키는 것으로 나타났다.

특정 경우에, 항-IL-33 항체는 약 100 mg/ml 초과, 및 선택적으로 약 200 mg/ml 미만의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 약 105 mg/ml, 약 110 mg/ml, 약 115 mg/ml, 약 120 mg/ml, 약 125 mg/ml, 약 130 mg/ml, 약 135 mg/ml, 약 140 mg/ml, 약 145 mg/ml, 약 150 mg/ml, 약 155 mg/ml, 약 160 mg/ml, 약 165 mg/ml, 약 170 mg/ml, 약 175 mg/ml, 약 180 mg/ml, 약 190 mg/ml, 또는 약 195 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 약 105 mg/ml 내지 약 190 mg/ml, 약 110 mg/ml 내지 약 180 mg/ml, 약 110 mg/ml 내지 약 170 mg/ml, 약 110 mg/ml 내지 약 165 mg/ml, 약 110 mg/ml 내지 약 160 mg/ml, 약 120 mg/ml 내지 약 160 mg/ml, 약 130 mg/ml 내지 약 160 mg/ml, 또는 140 mg/ml 내지 약 160 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 약 110 mg/ml ± 10%, 약 115 mg/ml ± 10%, 약 120 mg/ml ± 10%, 약 125 mg/ml ± 10%, 약 130 mg/ml ± 10%, 약 135 mg/ml ± 10%, 약 140 mg/ml ± 10%, 약 145 mg/ml ± 10%, 약 150 mg/ml ± 10%, 약 155 mg/ml ± 10%, 약 160 mg/ml ± 10%, 약 165 mg/ml ± 10%, 약 170 mg/ml ± 10%, 약 175 mg/ml ± 10%, 약 180 mg/ml ± 10%, 약 185 mg/ml ± 10%, 약 190 mg/ml ± 10% 또는 약 195 mg/ml ± 10%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 약 150 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다.

일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 계면활성제를 포함한다. 계면활성제는 양친매성인(극성 머리 및 소수성 꼬리를 가짐) 표면 활성제이다. 계면활성제는 계면에 우선적으로 축적되어 계면 장력의 감소를 초래한다. 계면활성제의 사용은 또한 큰 단백질성 입자의 형성을 경감시키는 데 도움이 될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물에 존재하는 계면활성제는 양친매성 및/또는 비이온성 계면활성제이다. 예시적인 계면활성제는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르(예를 들어, 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80), 알킬아릴 폴리에테르, 예를 들어 옥시에틸화 알킬 페놀(예를 들어, Triton™ X-100), 및 폴록사머(예를 들어, Pluronics®, 예를 들어, Pluronic® F68), 및 계면활성제 클래스 내에서 또는 계면활성제 클래스들 중에서 임의의 전술된 것의 조합을 포함한다. 폴리소르베이트 20 및 폴리소르베이트 80(및 선택적으로 이의 혼합물)이 특히 고려된다. 예시적인 경우에 계면활성제는 약 0.050%(w/v) ± 0.015%(w/v) 이하의 농도로 조성물에 존재한다. 예를 들어, 조성물은 약 0.005%(w/v) 내지 약 0.05%(w/v) 계면활성제, 예를 들어, 약 0.005%(w/v), 약 0.015%(w/v), 약 0.02%(w/v), 약 0.025%(w/v), 약 0.03%(w/v), 약 0.035%(w/v), 약 0.04%(w/v), 약 0.045%(w/v), 또는 약 0.05%(w/v)를 포함할 수 있다. 일부 경우에, 조성물 중 계면활성제는 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v)의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 조성물 중 계면활성제는 0.03%(w/v) ± 0.01%(w/v)의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 조성물 중 계면활성제는 약 0.02%(w/v) 내지 약 0.04%(w/v)의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 개시내용의 조성물은 또한 적어도 약 170 mM 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 적어도 약 190 mM 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 L-아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 L-아르기닌-하이드로클로라이드를 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 190 mM 초과의 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 500 mM 미만의 아르기닌을 포함한다. 예를 들어, 조성물은 약 200 mM, 약 210 mM, 약 220 mM, 약 240 mM, 약 260 mM, 약 280 mM, 약 300 mM, 약 350 mM, 약 400 mM, 또는 약 450 mM 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 220 mM 아르기닌을 포함한다. 고농도의 아르기닌(즉, 약 190 mM 초과의 농도)은 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 33_640087-7B(약 50 mg/ml)를 포함하는 조성물에서 관찰된 가역적 자가-연합에 비해, 안정한 액체 조성물에서 33_640087-7B의 가역적 자가-연합의 놀라운 감소에 기여하는 것으로 밝혀졌다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 조성물이 약 150 mg/ml의 항-IL-33 항체를 포함할 때 약 220 mM 아르기닌을 포함한다.

또 다른 양태에서, 본 개시내용의 조성물은 대안적으로 적어도 약 150 mM의 라이신을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 L-라이신을 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 L-라이신-하이드로클로라이드를 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 150 mM 초과의 라이신을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 500 mM 미만의 라이신을 포함한다. 예를 들어, 조성물은 약 160 mM, 약 170 mM, 약 180 mM, 약 200 mM, 약 220 mM, 약 240 mM, 약 260 mM, 약 280 mM, 약 300 mM, 약 350 mM, 약 400 mM, 또는 약 450 mM 라이신을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 170 mM 라이신을 포함한다. 고농도의 라이신(즉, 약 150 mM 초과의 농도)은 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 33_640087-7B(약 50 mg/ml)를 포함하는 조성물에서 관찰된 점도에 비해, 안정한 액체 조성물에서 33_640087-7B의 놀라운 점도 감소에 기여하는 것으로 밝혀졌다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 조성물이 약 150 mg/ml의 항-IL-33 항체를 포함할 때 약 170 mM 라이신을 포함한다.

일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 조성물에 비해 감소된 가역적 자가-연합을 갖는 항-IL-33 항체를 특징으로 한다. 일부 경우에, RSA는 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 RSA에 비해 2배 감소된다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체의 더 낮은 농도는 50 mg/ml이다. RSA는 단백질 농도와 양의 상관관계가 있다. 따라서, 치료용 단백질의 농도 증가는 치료용 단백질의 RSA 증가를 야기할 것으로 예상된다. RSA는 액체 조성물 중 가용성 종의 단량체 %의 함수로 표현될 수 있다. 예는 예상치 않게 신규 제형물이 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 조성물에서 관찰된 단량체 중량%에 비해, 치료용 단백질의 농도가 3배 증가될 때 단량체 중량%를 2배 증가시킬 수 있음을 나타낸다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 적어도 약 30%, 예를 들어 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 40% 내지 약 45%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 3개월 동안 보관 후, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 3개월 동안 보관 후, 약 40%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 6개월 동안 보관 후, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 6개월 동안 보관 후, 약 40%의 단량체 중량%를 포함한다. RSA 및 단량체%는 농도(mg/mL)의 함수로서 측정된 볼트 단위의 정적 광산란 강도를 사용하여 계산될 수 있다. 그런 다음, 이는 레일리 방정식을 사용하여 각 농도에서 겉보기 분자량(kDa)으로 전환될 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 이 방법은 본원에 개시된 안정한 액체 조성물에서 RSA를 측정하는 데 사용되었다.

본 개시내용의 조성물은 완충액을 포함한다. 완충액은, 예를 들어 유기 완충액일 수 있다. 일부 경우에, 완충액은 25℃에서 pH 5 내지 pH 6.5, 또는 pH 5 내지 pH 6을 중심으로 한다. 일부 실시형태에서, 완충액은 25℃에서 pH 5.4 내지 pH 5.6의 하나의 pH 단위 내에서 pKa를 가질 수 있다. 예시적인 완충액은 25℃에서 약 pH 6.09의 pKa를 갖는 히스티딘/히스티딘 하이드로클로라이드이다. 또 다른 이러한 완충액은 25℃에서 약 4.75의 pKa를 갖는 아세트산/아세테이트이다. 고려되는 다른 대안적 완충액은 프로피오네이트(25℃에서 4.87의 pKa), 말레이트(25℃에서 5.13의 pKa), 피리딘(25℃에서 5.23의 pKa), 피페라진(25℃에서 5.33의 pKa), 및 숙시네이트(25℃에서 5.40의 pKa)를 포함하는 이온에 기반한 완충액을 포함한다. 히스티딘에 기반한 완충액이 특히 고려된다. 일부 경우에, 완충액은 히스티딘이다.

일부 경우에, 조성물 중 완충액은 약 1 mM 내지 약 50 mM, 약 1 mM 내지 40 mM, 또는 약 1 mM 내지 약 30 mM의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 조성물은 약 5 mM 내지 약 50 mM, 약 10 mM 내지 약 40 mM, 약 15 내지 약 30 mM 완충액, 또는 약 15 내지 약 25 mM 완충액을 포함한다. 일부 경우에, 조성물 중 완충액은 약 11 mM, 약 12 mM, 약 13 mM, 약 14 mM, 약 15 mM, 약 16 mM, 약 17 mM, 약 18 mM, 약 19 mM, 약 20 mM, 약 21 mM, 약 22 mM, 약 23 mM, 약 24 mM, 약 25 mM, 약 26 mM, 약 27 mM, 약 28 mM, 약 29 mM 또는 약 30 mM의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 완충액은 약 16 mM 내지 약 24 mM, 약 17 mM 내지 약 24 mM, 약 18 mM 내지 약 24 mM 또는 약 19 mM 내지 약 21 mM의 농도로 존재한다. 일부 경우에, 조성물은 약 20 mM ± 10% 완충액을 포함한다.

경우들에서, 본 개시내용의 조성물은 추가 구성성분을 포함할 수 있다. 다양한 양태에서, 조성물은, 예를 들어 산성화제, 첨가제, 흡착제, 에어로졸 추진제, 공기 변위제, 알칼리화제, 고결 방지제, 항응고제, 항미생물 보존제, 항산화제, 방부제, 염기, 결합제, 완충제, 킬레이트제, 코팅제, 착색제, 건조제, 세제, 희석제, 소독제, 붕해제, 분산제, 용해 증진제, 염료, 연화제, 유화제, 에멀젼 안정제, 충전제, 필름 형성제, 향미 증진제, 향미제, 흐름 증진제, 겔화제, 과립화제, 습윤제, 윤활제, 점막접착제, 연고 기제, 연고, 유성 비히클, 유기 염기, 향정 기제, 안료, 가소제, 광택제, 보존제, 금속이온봉쇄제, 피부 침투제, 가용화제, 용제, 안정제, 좌약 기제, 표면 활성제, 계면활성제, 현탁제, 감미제, 치료제, 증점제, 긴장성 제제, 독성제, 점도 증가제, 수분 흡수제, 수혼화성 공용매, 연수제 또는 수화제를 포함하는 임의의 약학적으로 허용 가능한 성분을 포함한다. 예를 들어, 그 전체가 참조로 포함되는 문헌[the Handbook of Pharmaceutical Excipients, Third Edition, A. H. Kibbe (Pharmaceutical Press, London, UK, 2000)]; 그 전체가 참조로 포함되는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)]을 참고한다.

일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 액체이다. 특정 경우에, 액체는 약 6.0 미만, 선택적으로 약 5.5 미만의 pH를 갖는다. 일부 경우에, pH는 약 5.0 내지 약 6.0 또는 약 5.3 내지 약 5.8, 예를 들어, 약 5.3, 약 5.4, 약 5.5, 약 5.6, 약 5.7, 또는 약 5.8, 약 5.4이다. 일부 경우에, pH는 약 5.5이다.

일부 경우에, 조성물은 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 제형물에 비해 감소된 점도를 특징으로 한다. 일부 경우에, 조성물은 항-IL-33 항체의 농도가 165 mg/mL 미만일 때 23℃에서 약 25 센티포이즈(cP) 미만, 선택적으로 항-IL-33 항체의 농도가 약 150 mg/mL일 때 약 9 cP, 또는 항-IL-33 항체의 농도가 약 130 mg/mL일 때 약 5 cP의 점도를 특징으로 한다. 특정 양태에서, 조성물은 항-IL-33 항체의 농도가 약 150 mg/mL 미만(예를 들어, 약 130 mg/mL, 약 140 mg /mL, 약 150 mg/mL)일 때, 약 5 cP 내지 약 20 cP, 예를 들어, 약 5 cP 내지 약 15 cP, 약 5 cP 내지 약 10 cP, 약 10 cP 내지 약 20 cP, 약 15 cP 내지 약 20 cP, 또는 약 5 cP, 약 6 cP, 약 7 cP, 약 8 cP, 약 9 cP, 약 10 cP, 약 11 cP, 약 12 cP, 약 13 cP, 약 14 cP, 약 15 cP, 약 16 cP, 약 17 cP, 약 18 cP, 약 19 cP, 약 20 cP의 점도를 특징으로 한다. 예시적인 양태에서, 조성물은 항체의 농도가 약 130 mg/mL 내지 약 170 mg/mL일 때 약 10 cP ± 5 cP인 점도를 갖는다. 일부 경우에, 조성물은 항-IL-33 항체의 농도가 약 150 mg/mL일 때 23℃에서 약 10 센티포이즈(cP) 미만의 점도를 특징으로 한다. 일부 경우에, 점도는 약 5 cP 내지 약 20 cP, 선택적으로 약 10 cP 미만, 예컨대 약 9 cP이다. 달리 주지되지 않는 한, 본원에 개시된 모든 점도는 23℃ 및 약 1000 l/s의 전단 속도에서 회전 점도계를 사용하여 측정된 점도를 지칭한다.

예시적인 양태에서, 조성물은 대상체에 대한 피하 투여를 위한 것이고, 따라서 조성물은 의도된 투여 부위와 등장성이다. 예를 들어, 조성물의 삼투압몰 농도는 일부 경우에 약 340 내지 약 520 mOsm/kg, 또는 약 344 내지 약 516 mOsm/kg, 또는 약 400 내지 약 500 mOsm/kg 범위이다. 예시적인 경우에, 액체 약학 조성물은 약 300 mOsm/kg 내지 약 600 mOsm/kg, 또는 약 340 mOsm/kg 내지 약 520 mOsm/kg, 또는 약 360 mOsm/kg 내지 약 500 mOsm/kg 범위의 삼투압몰 농도를 갖는다. 일부 경우에 삼투압몰 농도는 약 452 mOsm/kg이다.

본 개시내용의 조성물은 장기 또는 단기 보관에 유리하게 적합하다. 일부 경우에, 조성물은 냉동 또는 냉장 온도 또는 더 높은 온도에서 장기 또는 단기 보관에 적합하다. 따라서, 본 개시내용의 조성물은 0℃ 미만(예를 들어, 약 -80℃ 내지 약 -10℃, 약 -60℃ 내지 약 -20℃, 또는 약 -30℃)의 온도에서 또는 약 1℃ 내지 약 10℃(예를 들어, 약 2℃ 내지 약 8℃)의 온도에서 보관될 수 있다. 선택적으로, 이러한 온도(10℃ 미만)에서의 보관은 장기 보관, 예를 들어, 적어도 6개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 30개월, 적어도 36개월일 수 있다. 본 개시내용의 조성물은 실온(예를 들어, 약 20℃ 내지 약 30℃, 약 23℃ 내지 약 27℃, 약 25℃, 또는 약 30℃)에서 보관될 수 있다. 일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 실온보다 높은 온도(예를 들어, 30℃ 초과(예를 들어, 약 35℃ 내지 약 45℃, 약 40℃)에서 보관될 수 있다.

일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 매우 안정하고 냉장 또는 냉동 온도에서 장기 보관을 견딜 수 있다. 본 개시내용의 조성물은 액체 또는 고체로서 매우 안정하다. 선택적으로, 약 2℃ 내지 약 8℃(예를 들어, 약 2℃, 약 4℃, 약 8℃, 약 -20℃)에서 약 1개월 내지 약 3개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다. 본원에 사용된 바와 같은 "응집체"는 항-IL-33 항체의 불용성 응집체를 지칭한다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 2℃ 내지 약 8℃(예를 들어, 약 2℃, 약 4℃, 약 8℃, 약 10℃)에서 6개월 또는 12개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 2℃ 내지 약 8℃(예를 들어, 약 2℃, 약 4℃, 약 8℃)에서 18개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 분해된다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 유리 바이알 또는 시린지에서 약 2℃ 내지 약 8℃(예를 들어, 약 2℃, 약 4℃, 약 8℃)에서 18개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 95% 초과가 온전하다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 2℃ 내지 약 8℃(예를 들어, 약 2℃, 약 4℃, 약 8℃)에서 약 18개월 보관 후, 본 개시내용의 조성물 중 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다.

일부 경우에, 본 개시내용의 조성물은 매우 안정하고 실온에서 장기 보관을 견딜 수 있다. 선택적으로, 약 23℃ 내지 약 27℃(예를 들어, 약 23℃, 약 24℃, 약 25℃, 약 26℃, 약 27℃)에서 약 1개월 내지 약 3개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 23℃ 내지 약 27℃에서 약 6개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다. 경우들에서, SEC에 의해 결정될 시 유리 바이알 또는 시린지에 약 23℃ 내지 약 27℃에서 약 6개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 95% 초과가 온전하다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 23℃ 내지 약 27℃에서 약 6개월 보관 후, 본 개시내용의 조성물 중 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)의 항-IL-33 항체가 분해된다.

다양한 경우에, 본 개시내용의 조성물은 매우 안정하고 매우 안정하며 스트레스 보관 조건 하에서 단기 보관을 견딜 수 있다. 일부 경우에, 약 38℃ 내지 약 42℃(예를 들어, 약 38℃, 약 39℃, 약 40℃, 약 41℃, 약 42℃)에서 약 1개월 내지 약 3개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 유리 바이알 또는 시린지에서 약 38℃ 내지 약 42℃(예를 들어, 약 38℃, 약 39℃, 약 40℃, 약 41℃, 약 42℃)에서 약 3개월 보관 후, 항-IL-33 항체의 95% 초과가 온전하다. 일부 경우에, SEC에 의해 결정될 시 약 38℃ 내지 약 42℃(예를 들어, 약 38℃, 약 39℃, 약 40℃, 약 41℃, 약 42℃)에서 약 3개월 보관 후, 본 개시내용의 조성물에서의 항-IL-33 항체의 약 5% 미만(예를 들어, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만)이 응집된다.

특정 경우에서, 조성물은, 예를 들어 1회용 바이알, 1회용 시린지, 또는 유리, 유리 라이닝 또는 유리 코팅 1차 용기에, 보관 또는 사용을 위해 제공된다. 예시적인 경우에, 조성물은 냉동 보관을 위한 일회용 시스템 백 또는 폴리카보네이트 카보이에 제공된다. 대안적인 경우에, 조성물은 보관, 예를 들어 약 2℃ 내지 약 8℃에서의 장기 보관 또는 더 높은 온도(예를 들어, 약 25℃, 약 30℃, 약 40℃)에서의 보관을 위해 유리 바이알 또는 시린지에 포함된다.

특정 경우에, 조성물은, 자가 투여용으로 설계되고/되거나 기성품인 전달 시스템에서 사용하기 위해 제공된다. 특정 경우에, 조성물은 프리필드 시린지 또는 자동주사기, 펜 주사기, 이중 챔버 펜 등에 제공된다. 이러한 제품은 당분야에 알려져 있으며 상업적으로 이용 가능하다. 예를 들어, 문헌[Shire, Steven, Monoclonal Antibodies: Meeting the Challenges in Manufacturing, Formulation, Delivery and Stability of Final Drug Product, Chapter 8: Development of delivery device technology to deal with the challenges of highly viscous mAb formulations at high concentration, Woodhead Publishing, Cambridge, UK, pages 153-162 (2015)]을 참고한다.

본 개시내용의 조성물은 비경구, 특히 피하를 포함하는, 임의의 허용 가능한 경로에 의한 투여에 적합할 수 있다. 예를 들어, 피하 투여는 상박, 위쪽 허벅지 또는 복부에 이루어질 있다. 다른 경로는, 예를 들어 정맥내, 피내, 근육내, 복강내, 결절내 및 비장내를 포함한다. 피하 경로가 바람직하다. 일부 경우에, 정맥내 경로가 바람직하다. 예를 들어, 안정한 액체 조성물은 정맥내 경로를 통한 전달 전에 IV 유체로 희석될 수 있다.

본원에 개시된 조성물은 항-IL-33 항체를 포함한다. IL-1F11로도 불리는 인터루킨-33(IL-33)은 2형 면역 반응의 특성인 세포, 사이토카인 및 면역글로불린의 생성을 자극하는 IL-1 사이토카인 패밀리의 구성원이다. IL-33은 270개의 아미노산 단백질이며, 다음의 2개의 도메인으로 구성된다: 호메오도메인 및 사이토카인(IL-1 유사) 도메인. 호메오도메인은 핵 국재화 신호(NLS)를 포함한다. IL-33은 Th2 세포, 비만 세포 및 광범위한 다른 세포 유형 상에 발현되는 수용체, ST2를 통해 신호 전달을 매개한다.

IL-33의 세포외 형태는 ST2에 결합함으로써 표적 세포를 자극한 후 NFKB 및 MAP 키나제 경로를 활성화하고, 이는 사이토카인 및 케모카인의 생성을 포함하는 다양한 기능적 반응을 야기한다. 가용성 ST2(sST2)는 IL-33 신호전달을 방지하는 유인 수용체인 것으로 여겨진다.

인간에서, IL-33은 평활근에서 그리고 기관지 상피에서 구성적으로 발현되는 것으로 밝혀졌다. 발현은 폐 및 피부 섬유아세포에서 IL-Ιβ 및 TNF-α에 의해 유도될 수 있다(Schmitz et al. (2005)). 가용성 ST2 단백질 및 IL-33 mRNA/단백질 수준은 천식 환자의 혈청 및 조직에서 증가된다(Oboki et al., Allergology International 59: 143-160 (2010)).

생체내에서, IL-33은 IL-4, IL-5 및 IL-13의 발현을 유도하며, 점막 기관에서 중증 병리학적 변화를 야기한다. 마우스에 대한 IL-33의 투여는 대량 혈액 호산구증가증, 증가된 IL-5 및 IgE 혈청 수준, 그리고 점막 표면에서 술잔 세포 과다형성을 포함하는 강력한 염증 효과를 갖는다(Schmitz et al. (2005)). 마우스에 대한 IL-33의 복강내 또는 비강내 투여는 IL-13 및 STAT6-의존적 경로를 통해 폐 및 장 점막에서 호산구성 염증의 유도를 야기하였다(Oboki et al. (2010)). 따라서, IL-33은 천식과 같은 알레르기 질환 및 만성 폐쇄성 폐 장애(COPD)와 같은 염증성 기도 질환에서 역할을 할 수 있다.

따라서 항-IL-33 항체를 포함하는 조성물은 천식 또는 COPD와 같은 IL-33-매개 질환의 치료에서 유용할 수 있는 것으로 고려된다.

일부 경우에, 본 발명의 조성물에 존재하는 항체는 SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 VHCDR1, SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 VHCDR2, SEQ ID NO: 3의 서열을 갖는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 SEQ ID NO: 5의 서열을 갖는 VLCDR1, SEQ ID NO: 6의 서열을 갖는 VLCDR2, 및 SEQ ID NO: 7의 서열을 갖는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.

일부 경우에, 본 발명의 조성물에 존재하는 항체는 (a) SEQ ID NO: 4와 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 아미노산의 서열 또는 SEQ ID NO: 11과 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열인 중쇄 가변 도메인, (b) SEQ ID NO: 8과 적어도 80% 동일한 아미노산의 서열 또는 SEQ ID NO: 12와 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열인 경쇄 가변 도메인, 또는 (c) (a)의 중쇄 가변 도메인 및 (b)의 경쇄 가변 도메인을 포함한다.

일부 경우에, 항체는 인간 항체, 인간화 항체, 키메라 항체, 단일클론 항체, 재조합 항체, 항원 결합 항체 단편, 단일쇄 항체, 단량체 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, Fab 단편, IgG1 항체, IgG2 항체, IgG3 항체, 및 IgG4 항체이다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 IgG1 항체이다.

일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일부 경우에, 조성물은 시험관내 HTRF 경쟁적 결합 검정에서, 33_640087-7B와 IL-33으로의 결합에 대해 경쟁하는 항-IL-33 항체를 포함한다. 항체는 이것이 에피토프에 대한 참조 항체의 결합을 어느 정도 차단하는 정도로 해당 에피토프에 특이적으로 결합하는 경우, 주어진 에피토프에 대한 참조 항체의 결합을 경쟁적으로 억제하는 것으로 언급된다. 경쟁적 억제는 당분야에 알려진 임의의 방법, 예를 들어, 고상 검정, 예컨대, 경쟁 ELISA 검정, 해리-증진 란탄족원소 형광 면역검정(DELFIA^®, Perkin Elmer) 및 방사성리간드 결합 검정에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 당업자는 시험관내 경쟁적 결합 검정, 예컨대, 본원에 참조로 포함되는 WO2016/156440, 단락 881 내지 886에 기재된 HTRF 검정을 사용함으로써 이의 항체가 IL-33으로의 결합에 대해 경쟁하는지 여부를 결정할 수 있었다. 예를 들어, 당업자는 제1 항-IL-33 항체를 공여체 형광단으로 표지하고 다수의 농도를 수신체 형광단 표지된-redIL-33의 고정 농도 샘플과 혼합할 수 있었다. 후속하여, 결합 특성을 확인하기 위해 각 샘플 내에서 공여체 형광단과 수신체 형광단 사이의 형광 공명 에너지 전달이 측정될 수 있다. 경쟁적 결합 항-IL-33 항체를 규명하기 위해, 당업자는 먼저 다양한 농도의 시험 항체를 표 6의 고정된 농도의 표지된 항체와 혼합할 수 있었다. 표지된 항체-단독 양성 대조군에 비해 혼합물이 표지된 IL-33과 함께 인큐베이션될 때의 FRET 신호의 감소는 IL-33에 대한 경쟁적 결합을 나타낼 것이다. 결합 분자 또는 이의 단편은 주어진 에피토프에 대한 참조 항체의 결합을 적어도 90%, 적어도 80%, 적어도 70%, 적어도 60%, 또는 적어도 50%만큼 경쟁적으로 억제하는 것으로 언급될 수 있다.

일부 경우에, 조성물은 항-IL-33 항체 33_640087-7B(본원에 참조로 포함되는 WO2016/156440에 기재된 바와 같음)를 포함한다. WO2016/156440은 33_640087-7B가 특히 고친화도로 redIL-33에 결합하고 ST-2와 RAGE-의존적 IL-33 신호전달 둘 모두를 약화시킨다는 것을 개시한다.

다른 예시적인 항-IL-33 항체는 에토키맙으로 알려진 ANB020(WO2015/106080에 기재된 바와 같음), 9675P(US2014/0271658에 기재된 바와 같음), A25-3H04(US2017/0283494에 기재된 바와 같음), Ab43(WO2018/081075에 기재된 바와 같음), IL33-158(US2018/0037644에 기재된 바와 같음), 10C12.38.H6. 87Y.581 IgG4(WO2016/077381에 기재된 바와 같음) 또는 이의 결합 단편을 포함한다. 다른 예시적인 항-IL-33 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 WO2016/156440, WO2015/106080, US2014/0271658, US2017/0283494, WO2018/081075, US2018/0037644 또는 WO2016/077381에 기재된 임의의 다른 항-IL-33 항체를 포함하며, 모두 본원에 참조로 포함된다.

제조 방법

본 개시내용의 조성물을 제조하는 방법이 본원에 추가로 제공된다. 따라서, 약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌, 예컨대 적어도 약 190 mM 아르기닌, 선택적으로 계면활성제, 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법이 추가로 제공된다. 일부 경우에, 방법은 다음 단계를 포함한다: (i) 용액에서 항체, 아르기닌 및 완충액을 조합하여 약 100 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌, 예컨대 적어도 약 170 mM 아르기닌, 예컨대 적어도 약 190 mM 아르기닌, 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계, 및 (ii) 용액에 계면활성제를 첨가하여 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v)의 최종 계면활성제 농도를 달성하는 단계.

약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 150 mM 라이신, 선택적으로 계면활성제, 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법이 추가로 제공된다. 일부 경우에, 방법은 다음 단계를 포함한다: (i) 용액에서 항체, 아르기닌 및 완충액을 조합하여 약 100 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌, 예컨대 적어도 약 150 mM 라이신, 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계, 및 (ii) 용액에 계면활성제를 첨가하여 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v)의 최종 계면활성제 농도를 달성하는 단계.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 0.03%(w/v) ± 0.01%(w/v) 농도의 계면활성제를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 0.02%(w/v) 내지 약 0.04%(w/v) 농도의 계면활성제를 포함한다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 0.02%(w/v) ± 0.01%(w/v) 농도의 계면활성제를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 0.01%(w/v) 내지 약 0.02%(w/v) 농도의 계면활성제를 포함한다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 150 mg/mL의 항-IL-33 항체를 포함한다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 170 mM 초과의 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 190 mM 초과의 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 500 mM 미만의 아르기닌을 포함한다. 예를 들어, 조성물은 약 200 mM, 약 210 mM, 약 220 mM, 약 240 mM, 약 260 mM, 약 280 mM, 약 300 mM, 약 350 mM, 약 400 mM, 또는 약 450 mM 아르기닌을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 220 mM 아르기닌을 포함한다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 적어도 약 150 mM 라이신을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 500 mM 미만의 라이신을 포함한다. 예를 들어, 조성물은 약 160 mM, 약 170 mM, 약 180 mM, 약 200 mM, 약 220 mM, 약 240 mM, 약 260 mM, 약 280 mM, 약 300 mM, 약 350 mM, 약 400 mM, 또는 약 450 mM 라이신을 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 170 mM 라이신을 포함한다.

일부 경우에, 고농도의 아르기닌을 갖는 안정한 액체 조성물의 점도는 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 액체 조성물에 비해 감소되며, 더 낮은 농도는 안정한 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 농도와 대비된다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물의 점도는 약 10 cP 미만이다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물의 점도는 약 9 cP이다. 일부 경우에, 점도는 23℃에서 측정된다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물 내의 항-IL-33 항체의 가역적 자가-연합(RSA)은 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 RSA에 비해 감소되며, 더 낮은 농도는 안정한 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 농도와 대비된다.

일부 경우에, RSA는 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 RSA에 비해 2배 감소된다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 적어도 약 30%, 예를 들어 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 40% 내지 약 45%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 3개월 동안 보관 후, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 3개월 동안 보관 후, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 3개월 동안 보관 후, 약 40%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 6개월 동안 보관 후, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함한다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 약 6개월 동안 보관 후, 약 40%의 단량체 중량%를 포함한다.

일부 경우에, 계면활성제는 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 20이다. 일부 경우에, 계면활성제는 폴리소르베이트 80이다.

일부 경우에, 완충액은 히스티딘으로 제조된다. 일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 16 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 17 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 18 mM 내지 약 24 mM의 최종 완충액 농도를 갖는다.

일부 경우에, 안정한 액체 조성물은 약 pH 5.5의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 항-IL-33 항체는 본원에 기재된 것들 중 임의의 것이다. 일부 경우에, 항-IL-33 항체는 33_640087-7B이다.

제조 물품, 시린지 및 바이알

본 개시내용은 본원에 개시된 조성물 중 어느 하나, 선택적으로 약 0.5 mL 내지 약 5 mL(예를 들어, 약 0.5 mL 내지 약 4.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 4 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1 mL, 약 1 mL 내지 약 5 mL, 약 1.5 mL 내지 약 5 mL, 약 2 mL 내지 약 5 mL, 약 2.5 mL 내지 약 5 mL, 약 3 mL 내지 약 5 mL, 약 3.5 mL 내지 약 5 mL, 약 4 mL 내지 약 5 mL, 약 4.5 mL 내지 약 5 mL)의 조성물을 포함하는 제조 물품을 제공한다. 일부 경우에, 조성물은 약 100 mg/mL 초과의 항-IL33 항체(예를 들어, 33_640087-7B)를 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 130 mg/mL 내지 약 170 mg/mL 항-IL-33 항체(예를 들어, 33_640087-7B), 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v) 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 mM 내지 약 24 mM 히스티딘을 포함하며, pH는 약 6 미만, 선택적으로 약 pH 5.5이다. 선택적으로, pH는 약 Ph 5.0 내지 약 pH 6.0이다.

본 개시내용은 또한 본원에 개시된 조성물 중 어느 하나, 선택적으로 약 0.5 mL 내지 약 5 mL(예를 들어, 약 0.5 mL 내지 약 4.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 4 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1 mL, 약 1 mL 내지 약 5 mL, 약 1.5 mL 내지 약 5 mL, 약 2 mL 내지 약 5 mL, 약 2.5 mL 내지 약 5 mL, 약 3 mL 내지 약 5 mL, 약 3.5 mL 내지 약 5 mL, 약 4 mL 내지 약 5 mL, 약 4.5 mL 내지 약 5 mL)의 조성물을 포함하는 프리필드 시린지(PFS)를 제공한다. 일부 경우에, 조성물은 약 100 mg/mL 초과의 항-IL33 항체(예를 들어, 33_640087-7B)를 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 130 mg/mL 내지 약 170 mg/mL 항-IL-33 항체(예를 들어, 33_640087-7B), 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v) 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 mM 내지 약 24 mM 히스티딘을 포함하며, pH는 약 6 미만, 선택적으로 약 pH 5.5이다.

또한, 본원에 개시된 조성물 중 어느 하나를 포함하는, 선택적으로 약 0.5 mL 내지 약 5 mL(예를 들어, 약 0.5 mL 내지 약 4.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 4 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 3 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 2 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1.5 mL, 약 0.5 mL 내지 약 1 mL, 약 1 mL 내지 약 5 mL, 약 1.5 mL 내지 약 5 mL, 약 2 mL 내지 약 5 mL, 약 2.5 mL 내지 약 5 mL, 약 3 mL 내지 약 5 mL, 약 3.5 mL 내지 약 5 mL, 약 4 mL 내지 약 5 mL, 약 4.5 mL 내지 약 5 mL)의 조성물을 포함하는 바이알이 제공된다. 일부 경우에, 조성물은 약 100 mg/mL 초과의 항-IL33 항체(예를 들어, 33_640087-7B)를 포함한다. 일부 경우에, 조성물은 약 130 mg/mL 내지 약 170 mg/mL 항-IL-33 항체(예를 들어, 33_640087-7B), 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v) 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 mM 내지 약 24 mM 히스티딘을 포함하며, pH는 약 6 미만, 선택적으로 약 pH 5.5이다.

키트

본 개시내용은 또한 본원에 개시된 임의의 방법을 지시하거나 개시하는 패키지 삽입물, 패키지 라벨, 지침, 또는 기타 표지와 함께 본원에 기재된 조성물을 포함하는 키트를 제공한다. 특정 경우에, 본 개시내용은 단회-용량 투여 단위를 생성하기 위한 키트를 제공한다. 본 개시내용의 특정 경우에, 단일 및 다중 챔버 프리필드 시린지(예를 들어, 액체 시린지)를 포함하는 키트가 포함된다.

치료 방법

본 개시내용은 또한 IL-33-매개 질환을 갖는 대상체를 치료하기 위한 의약의 제조에서, 33_640087-7B, 또는 본원에 개시된 또 다른 항-IL-33 항체, 또는 이의 항원 결합 부분의 용도를 제공한다.

대상체에서 IL-33-매개 질환을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 경우에, 본 개시내용은 대상체에서 IL-33-매개 질환의 치료에서 사용하기 위한 본원에 개시된 조성물을 제공한다. 본원에 제공된 본 개시내용은 또한 IL-33-매개 질환을 갖는 대상체를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 항-IL-33 항체의 용도를 제공하며, 의약은 본원에 개시된 임의의 조성물을 포함한다.

일부 경우에, 본원에 제공된 방법, 사용하기 위한 조성물 또는 용도는 천식, 아토피성 피부염 및 만성 폐쇄성 폐 장애로부터 선택된 IL-33-매개 장애의 치료를 위한 것이다.

일부 경우에, 본원에 제공된 방법, 사용하기 위한 조성물, 또는 용도는 당뇨병성 신장 질환의 치료를 위한 것이다.

일부 경우에, 대상체는 인간이다.

실시형태

1. 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 170 mM 아르기닌 또는 적어도 150 mM 라이신 및 완충액을 포함하는 조성물로서, 항-IL-33 항체가 다음을 포함하는, 조성물:

i. SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 VHCDR1, SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 VHCDR2, SEQ ID NO: 3의 서열을 갖는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및

ii. SEQ ID NO: 5의 서열을 갖는 VLCDR1, SEQ ID NO: 6의 서열을 갖는 VLCDR2, 및 SEQ ID NO: 7의 서열을 갖는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인.

2. 실시형태 1에 있어서, 인간 항-IL-33 항체가

i. 다음과 같은 중쇄 가변 도메인:

i. SEQ ID NO: 4와 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 아미노산의 서열; 또는

ii. SEQ ID NO: 11과 적어도 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열;

ii. 다음과 같은 경쇄 가변 도메인:

i. SEQ ID NO: 8과 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 아미노산의 서열; 또는

ii. SEQ ID NO: 12와 적어도 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열; 또는

iii. (a)의 중쇄 가변 도메인 및 (b)의 경쇄 가변 도메인

을 포함하는, 조성물.

3. 실시형태 1 또는 2에 있어서, 항-IL-33 항체가 IgG1 항체인, 조성물.

4. 실시형태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인, SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 또는 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 조성물.

5. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 또는 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 조성물.

6. 실시형태 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 시험관내 HTRF 경쟁적 결합 검정에서 33_640087-7B와 IL-33으로의 결합에 대해 경쟁하는, 조성물.

7. 실시형태 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 200 mg/ml 미만의 농도로 존재하는, 조성물.

8. 실시형태 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 180 mg/ml 미만의 농도로 존재하는, 조성물.

9. 실시형태 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 160 mg/ml 미만의 농도로 존재하는, 조성물.

10. 실시형태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 100 mg/ml 내지 약 200 mg/ml의 농도로 존재하는, 조성물.

11. 실시형태 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml의 농도로 존재하는, 조성물.

12. 실시형태 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 150 mg/ml ± 10%의 농도로 존재하는, 조성물.

13. 실시형태 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 계면활성제를 추가로 포함하는 조성물.

14. 실시형태 13에 있어서, 계면활성제가 양친매성 및 음이온성인, 조성물.

15. 실시형태 14에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트인, 조성물.

16. 실시형태 15에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80 또는 이의 혼합물인, 조성물.

17. 실시형태 13 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 계면활성제가 약 0.005%(w/v) 내지 약 0.05%(w/v)의 농도인, 조성물.

18. 실시형태 17에 있어서, 0.03%(w/v) ± 0.010%(w/v) 계면활성제를 포함하는 조성물.

19. 실시형태 17에 있어서, 약 0.015%(w/v), 0.03%(w/v), 또는 0.045%(w/v) 계면활성제를 포함하는, 조성물.

20. 실시형태 16 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트 80인, 조성물.

21. 실시형태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 적어도 약 190 mM 아르기닌을 포함하는 조성물.

22. 실시형태 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 약 190 mM 내지 약 250 mM 아르기닌을 포함하는 조성물.

23. 실시형태 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 약 220 mM 아르기닌을 포함하는 조성물.

24. 실시형태 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 아르기닌이 L-아르기닌 하이드로클로라이드인, 조성물.

25. 실시형태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 약 150 mM 내지 약 250 mM 라이신을 포함하는 조성물.

26. 실시형태 25에 있어서, 약 170 mM 라이신을 포함하는 조성물.

27. 실시형태 1 내지 20, 25 또는 26 중 어느 하나에 있어서, 라이신이 L-라이신인, 조성물.

28. 실시형태 1 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 완충액이 숙시네이트, 히스티딘 또는 아세테이트인, 조성물.

29. 실시형태 28에 있어서, 완충액이 히스티딘인, 조성물.

30. 실시형태 29에 있어서, 완충액이 L-히스티딘/L-히스티딘 하이드로클로라이드인, 조성물.

31. 실시형태 1 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 완충액이 약 10 mM 내지 약 30 mM의 농도인, 조성물.

32. 실시형태 31에 있어서, 완충액이 약 16 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 17 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 18 mM 내지 약 24 mM의 농도인, 조성물.

33. 실시형태 31 또는 32에 있어서, 완충액이 약 19 mM 내지 약 21 mM의 농도인, 조성물.

34. 실시형태 1 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 20 mM ± 10% 완충액을 포함하는 조성물.

35. 실시형태 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 액체인 조성물.

36. 실시형태 1 내지 35 중 어느 하나에 있어서, pH가 약 pH 6.0 미만인, 조성물.

37. 실시형태 1 내지 36 중 어느 하나에 있어서, pH가 약 pH 5.0 내지 약 pH 6.0인, 조성물.

38. 실시형태 1 내지 37 중 어느 하나에 있어서, pH가 약 pH 5.2, 약 pH 5.5, 또는 약 pH 5.8인, 조성물.

39. 실시형태 1 내지 38 중 어느 하나에 있어서, pH가 약 pH 5.5인, 조성물.

40. 실시형태 35 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 80 mM 이하의 아르기닌을 포함하는 조성물에 비해 감소된 점도를 특징으로 하는 조성물.

41. 실시형태 35 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 조성물에 비해 감소된 점도를 특징으로 하는 조성물.

42. 실시형태 35 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 23℃에서 약 10 cP 미만의 점도를 특징으로 하며, 항-IL-33 항체의 농도가 약 150 mg/ml ± 10%인, 조성물.

43. 실시형태 35 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 점도가 약 5 cP 내지 약 20 cP, 선택적으로 약 10 cP 미만, 예컨대 약 9 cP인, 조성물.

44. 실시형태 35 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 예를 들어 50 mg/ml를 포함하는 조성물에서의 항-IL-33 항체의 가역적 자가-연합에 비해 감소된 가역적 자가-연합을 갖는 항-IL-33 항체를 특징으로 하는 조성물.

45. 실시형태 35 내지 44 중 어느 하나에 있어서, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함하는 조성물.

46. 실시형태 1 내지 45 중 어느 하나에 있어서, 크기 배제 크로마토그래피(SEC)에 의해 측정될 시 약 2℃ 내지 약 8℃에서 약 12개월 내지 약 18개월 보관 후, 항체의 약 5% 미만, 선택적으로 약 2% 미만이 응집되는, 조성물.

47. 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml 33_640087-7B, 약 0.03%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물로서, pH가 pH 5.5 ± 0.5인, 조성물.

48. 실시형태 47에 있어서, 약 150 mg/ml 33_640087-7B를 포함하는 조성물.

49. 실시형태 47 또는 48에 있어서, 약 18 mM 내지 약 22 mM 히스티딘 완충액, 선택적으로 약 20 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물.

50. 실시형태 47 내지 49 중 어느 하나에 있어서, 아르기닌이 L-아르기닌 하이드로클로라이드인, 조성물.

51. 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml의 항-IL-33 항체, 약 0.03%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물로서, pH가 pH 5.5 ± 0.5인, 조성물.

52. 실시형태 47 내지 51 중 어느 하나에 있어서, 액체인 조성물.

53. 실시형태 1 내지 52 중 어느 하나의 조성물을 포함하고, 선택적으로 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는 제조 물품.

54. 실시형태 1 내지 52 중 어느 하나의 조성물을 포함하고, 선택적으로 약 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는 바이알.

55. 대상체에서 IL-33-매개 장애를 치료하는 방법으로서, 대상체에 치료 유효량의 실시형태 1 내지 52 중 어느 하나의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법.

56. 실시형태 55에 있어서, IL-33-매개 장애가 천식, 아토피성 피부염 또는 만성 폐쇄성 폐 장애인, 방법.

57. 실시형태 55에 있어서, IL-33-매개 장애가 당뇨병성 신장 질환인, 방법.

58. 약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌 또는 약 150 mM 라이신, 계면활성제 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법으로서,

i. 용액에서 항체, 아르기닌 및 완충액을 조합하여 약 100 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌 또는 약 150 mM 라이신, 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계; 및

ii. 용액에 계면활성제를 첨가하여 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v)의 최종 계면활성제 농도를 달성하는 단계

를 포함하는 방법.

59. 실시형태 58에 있어서, 안정한 액체 조성물이 190 mM 초과의 아르기닌을 포함하는, 방법.

60. 실시형태 58 또는 59에 있어서, 안정한 액체 조성물이 약 220 mM 아르기닌을 포함하는, 방법.

61. 실시형태 58 내지 60 중 어느 하나에 있어서, 아르기닌이 L-아르기닌 하이드로클로라이드인, 조성물.

62. 실시형태 58 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체를 포함하는 액체 조성물에서의 항-IL-33 항체의 가역적 자가-연합(RSA)에 비해 안정한 액체 조성물 내의 항-IL-33 항체의 RSA가 감소되는, 방법.

63. 실시형태 58 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 액체 제형물의 점도가 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0을 포함하는 액체 제형물에 비해 감소되는, 방법.

64. 실시형태 58 내지 63 중 어느 하나에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트 80인, 방법.

65. 실시형태 58 내지 64 중 어느 하나에 있어서, 완충액이 히스티딘으로 제조되는, 방법.

66. 실시형태 65에 있어서, 약 16 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 17 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 18 mM 내지 약 24 mM의 최종 완충액 농도를 갖는 안정한 액체 제형물이 생성되는, 방법.

67. 실시형태 58 내지 66 중 어느 하나에 있어서, 약 pH 5 내지 약 pH 6, 선택적으로 약 pH 5.5의 pH를 갖는 안정한 액체 제형물이 생성되는, 방법.

68. 실시형태 58 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 항-IL-33 항체가 실시형태 1 내지 5 중 어느 하나에 정의된 바와 같은, 방법.

69. 실시형태 58 내지 68 중 어느 하나에 있어서, cP가 23℃에서 측정되는, 방법.

실시예

개선된 특성을 갖는 제형물의 생성

33_640087-7B는, 인간 인터루킨(IL)-33에 결합하고 IL-33이 이의 수용체 ST2에 결합하는 것을 방지하고, 이황화 결합(DSB) IL 33으로의 전환을 억제하는 인간 면역글로불린(Ig) G1 단일클론 항체(mAb)이다.

33_640087-7B의 1상 임상 연구(연구 D9180C00001)가 완료되었다. 33_640087-7B는 일반적으로 안전하고 내약성이 좋은 것으로 밝혀졌으며, 최대 300 mg 33_640087-7B 정맥내(IV) 투여 후 안전성 문제가 없었다. 33_640087-7B는 동결건조된 분말로 바이알에 담겨 공급되었다. 각 바이알은 33_640087-7B의 공칭 50 mg을 포함했다. 주사용 멸균수 1.2 mL로 재구성 시, 용액은 20 mM L 히스티딘/L 히스티딘-하이드로클로라이드, 80 mM L-아르기닌-하이드로클로라이드, 120 mM 수크로스, 0.02%(중량/부피[w/v]) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 중 50 mg/mL 33_640087-7B("I상 제형물")를 포함했다.

이 실시예는 후속 임상 연구를 위해 조성물 ml당 더 높은 단위 용량을 달성하기 위해 33_640087-7B를 재제형화하려는 시도의 놀라운 결과를 기재한다.

I상 제형물에서 33_640087-7B의 가역적 자가-연합 특성을 정적 광산란을 사용하여 단량체 및 가용성 가역적 고차 종의 중량%를 수득함으로써 측정했다. 볼트 단위의 정적 광산란 강도를 농도(mg/mL)의 함수로서 측정하며, 이는 레일리 방정식을 사용하여 겉보기 분자량(kDa)으로 전환한다. 단량체 및 가용성 가역적 고차 종의 중량 분율을 효과적인 경질 입자 모델을 사용하여 측정된 겉보기 분자량으로부터 추출했다(Fernandez and Minton (2009) Biophys J 96:1992-8).

표 1은 수성 I상 조성물의 가역적 자가-연합 특성을 나타낸다:

다음으로, 33_640087-7B의 농도를 150 mg/ml로 3배 증가시켰고, 23℃에서 점도를 측정했다. 점도는 약 24 센티포이즈인 것으로 결정되었다.

다음으로 33_640087-7B를 재제형화하려는 시도가 이루어졌다. 조성물 중 부형제 양 변경은 1상 제형물과 비교하여 개선된 RSA 특성을 갖는 제형물을 생성한다는 것이 예상치 않게 밝혀졌다.

표 2는 수성 I상 및 차세대 조성물의 가역적 자가-연합 특성을 나타낸다.

RSA의 감소는 동일한 항체 농도를 포함하는 1상 조성물(약 24℃)의 점도에 비해 23℃에서 측정된 점도의 상당한 개선(약 9 cP)을 야기했다. 특히, 이러한 개선은 단백질 농도의 3배에서 관찰되었다.

또한 RSA 특성이 장기적으로 안정한 것으로 밝혀졌다. 가용성 고차 종의 분포%는 6개월의 기간에 걸쳐 2 내지 8℃에서 보관될 때 크게 변화하지 않았다. RSA 안정성이 다수의 항체 농도의 차세대 조성물에서 관찰되었다(도 3).

표 3은 시간 경과에 따른 단량체, 삼량체 및 육량체(즉, 가용성 고차 종)의 중량% 분포를 나타낸다.

차세대 조성물의 장기 안정성을 다수의 시점에 다수의 온도에서 시험했다. 유리 바이알 또는 프리필드 시린지에 보관된 조성물에 대한 안정성 데이터를 생성하였다.

표 4는 장기 안정성 특성을 원래 항체 농도(약 150 mg/ml)의 백분율로 표현되는 불용성 응집체 형성의 함수로서 나타낸다.

이 데이터는 도 2, 도 3 및 도 4에 그래프로 예시한다.

다음으로, 점도(Cp)의 일변량 분석을 다중 33-640087_7B 및 아르기닌 농도에 걸쳐 수행했다(나머지 제형물 구성성분은 고정됨).

결과를 도 5에 나타낸다. 다수의 높은 아르기닌 농도(150 mM, 190 mM, 220 mM 및 250 mM)에서, 25℃에서의 Cp는 23℃에서 1상 제형물에 대해 계산된 Cp(24 Cp)보다 상당히 낮았다. 5℃에서의 Cp는 아르기닌 농도가 증가함에 따라 개선되었다.

Cp를 또한 다수의 단백질 농도(135 mg/ml, 150 mg/ml 및 165 mg/ml)에서 시험했다. 결과를 도 6에 나타낸다. Cp를 다수의 온도(5℃, 18℃, 25℃ 및 30℃)에서 측정했다. 분석은 높은 단백질 농도에서도 증가하는 아르기닌 농도에서, 특히 18℃ 초과의 온도에서 Cp가 감소함을 드러낸다. 일반적으로 적어도 190 mM 아르기닌이 사용될 때 약 25℃에서의 점도는 제형물이 165 mg/ml 33-640087_7B를 포함할 때 원하는 10 Cp 값 이하이다.

또한 33-640087_7B 제형물 강건성을 여러 온도, pH, 아르기닌 농도 및 부형제 농도에서 분석했다. 제형물을 각각 1, 6 또는 11개월 동안 40℃, 25℃ 또는 2 내지 8℃에서 보관했다. 각 조건 하에서 다수의 시점에 샘플을 채취하고 표준 분석 기법을 사용하여 응집체 형성을 결정했다. 1개월마다 응집체 형성%를 계산했다. 생성된 플롯으로부터의 기울기 구배를 표 5에 나타낸다. 결과는 응집 속도가 시험된 조건 하에 pH, 계면활성제 또는 아르기닌 농도 범위 내에서 안정함을 나타낸다. 1개월 가속 안정성 조건(40℃)에서 pH 5.0에서 응집 속도의 약간의 증가가 관찰되었다.

[표 5]

다수의 추가 제형물을 시험했다. 특히 흥미롭게도, 20 mM 히스티딘/히스티딘-HCl, 170 mM 라이신-HCl, 0.02% PS80, pH 5.5 및 약 160 mg/ml 33-640087_7B를 포함하는 제형물도 23℃에서 Cp의 상당한 개선(8.7 Cp)을 나타냈다. 150 mg/ml 33-640087_7B 및 150 mM 또는 190 mM 라이신(및 20 mM 히스티딘/히스티딘-HCl, 0.02% PS80, pH 5.5)을 포함하는 제형물의 23℃에서의 Cp 분석 또한, 점도의 상당한 개선, 즉, 1상 제형물의 Cp와 비교하여 10 미만의 Cp를 나타냈다.

결론

높은 항체 농도에서 RSA의 놀라운 감소를 야기하는 차세대 제형물을 개발했다. 차세대 제형물은 항-IL-33 항체의 부피당 더 큰 단위 용량의 투여를 가능하게 하여, 더 큰 치료 용량이 투여되도록 할 수 있다. 이는, 예를 들어 피하 전달의 경우, 주사 부위에서 전달될 완제 의약품의 부피를 감소시켜 환자의 불편함을 감소시킴으로써 환자의 순응도 증가를 야기할 수 있다. 이는 또한 임상에서 더 큰 동적 범위의 용량을 탐색할 수 있게 함으로써, 가장 치료적으로 유효한 용량을 발견할 가능성을 증가시킬 수 있다.

또한, 제형물은 허용 가능한 장기 안정성 프로필 및 감소된 점도를 갖는다. 점도 감소는 항체를 투여하는 데 사용되는 장치의 기능성을 증가시켜 약물 투여에 긍정적인 영향을 미칠 수 있다. 유사하게, 의료 제공자 또는 환자가 약물을 환자에게 수동으로 주사하는 능력이 저점도에 의해 개선될 수 있다.

서열

SEQUENCE LISTING <110> MEDIMMUNE LTD <120> FORMULATIONS OF ANTI-IL-33 ANTIBODIES AND METHODS OF USING THE SAME <130> IL33-300-WO-PCT <160> 12 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VH CDR1 <400> 1 Ser Tyr Ala Met Ser 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VH CDR2 <400> 2 Gly Ile Ser Ala Ile Asp Gln Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 17 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VH CDR3 <400> 3 Gln Lys Phe Met Gln Leu Trp Gly Gly Gly Leu Arg Tyr Pro Phe Gly 1 5 10 15 Tyr <210> 4 <211> 126 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VH <400> 4 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Ala Ile Asp Gln Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Lys Phe Met Gln Leu Trp Gly Gly Gly Leu Arg Tyr Pro 100 105 110 Phe Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 5 <211> 11 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VL CDR1 <400> 5 Ser Gly Glu Gly Met Gly Asp Lys Tyr Ala Ala 1 5 10 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VL CDR2 <400> 6 Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 7 <211> 9 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VL CDR 3 <400> 7 Gly Val Ile Gln Asp Asn Thr Gly Val 1 5 <210> 8 <211> 106 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VL <400> 8 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Glu Gly Met Gly Asp Lys Tyr Ala 20 25 30 Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Ile Gln Asp Asn Thr Gly Val 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 9 <211> 456 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> HC <400> 9 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Ser Ala Ile Asp Gln Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Lys Phe Met Gln Leu Trp Gly Gly Gly Leu Arg Tyr Pro 100 105 110 Phe Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 130 135 140 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 165 170 175 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 180 185 190 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 195 200 205 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val 210 215 220 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 275 280 285 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 290 295 300 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 305 310 315 320 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 325 330 335 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 340 345 350 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 355 360 365 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 370 375 380 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 385 390 395 400 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 405 410 415 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 420 425 430 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 10 <211> 212 <212> PRT <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> LC <400> 10 Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Glu Gly Met Gly Asp Lys Tyr Ala 20 25 30 Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Arg Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Ile Gln Asp Asn Thr Gly Val 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn 115 120 125 Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val 130 135 140 Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu 145 150 155 160 Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser 165 170 175 Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser 180 185 190 Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro 195 200 205 Thr Glu Cys Ser 210 <210> 11 <211> 378 <212> DNA <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VH encoding polynucleotide <400> 11 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggc atttctgcaa tagaccaaag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc ccggcagaag 300 ttcatgcagc tatggggggg gggcttgcgt tatcccttcg gctactgggg ccaggggaca 360 atggtcaccg tctcctca 378 <210> 12 <211> 318 <212> DNA <213> ARTIFICIAL SEQUENCE <220> <223> VL encoding polynucleotide <400> 12 tcctatgtgc tgactcagcc accctcagtg tccgtgtccc caggacagac ggccagcatc 60 acctgctctg gagaaggaat gggggataaa tatgctgcct ggtatcagca gaagccaggc 120 cagtcacctg tgctggtcat ctatcgagat acaaagcggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctctggct ccaactctgg gaacacagcc acgttgacca tcagcgggac ccaggctatg 240 gatgaggctg actattactg tggggtgatc caggacaaca ctggggtatt cggcggaggg 300 accaagctca ccgtccta 318

Claims

약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 170 mM 아르기닌 또는 적어도 150 mM 라이신 및 완충액을 포함하는 조성물로서, 항-IL-33 항체가 다음을 포함하는, 조성물:
i. SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 VHCDR1, SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 VHCDR2, SEQ ID NO: 3의 서열을 갖는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및
ii. SEQ ID NO: 5의 서열을 갖는 VLCDR1, SEQ ID NO: 6의 서열을 갖는 VLCDR2, 및 SEQ ID NO: 7의 서열을 갖는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인.
제1항에 있어서, 항-IL-33 항체가
i. 다음과 같은 중쇄 가변 도메인:
i. SEQ ID NO: 4와 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 아미노산의 서열; 또는
ii. SEQ ID NO: 11과 적어도 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열;
ii. 다음과 같은 경쇄 가변 도메인:
i. SEQ ID NO: 8과 적어도 95%, 90%, 85% 또는 80% 동일한 아미노산의 서열; 또는
ii. SEQ ID NO: 12와 적어도 80% 동일한 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 인코딩되는 아미노산의 서열; 또는
iii. (a)의 중쇄 가변 도메인 및 (b)의 경쇄 가변 도메인
을 포함하는, 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-IL-33 항체가 IgG1 항체인, 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인, SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 또는 SEQ ID NO: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 SEQ ID NO: 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 또는 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 시험관내 HTRF 경쟁적 결합 검정에서 33_640087-7B와 IL-33으로의 결합에 대해 경쟁하는, 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 약 200 mg/ml 미만, 선택적으로 약 180 mg/ml 미만, 선택적으로 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml의 농도로 존재하는, 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 150 mg/ml ± 10%의 농도로 존재하는, 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 계면활성제를 추가로 포함하는 조성물.
제9항에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트이고, 선택적으로 계면활성제가 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80 또는 이의 혼합물인, 조성물.
제9항 또는 제10항에 있어서, 계면활성제가 약 0.005%(w/v) 내지 약 0.05%(w/v)의 농도인, 조성물.
제11항에 있어서, 0.03%(w/v) ± 0.010%(w/v) 계면활성제를 포함하는 조성물.
제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트 80인, 조성물.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 약 190 mM 아르기닌, 선택적으로 약 190 mM 내지 약 250 mM 아르기닌을 포함하는 조성물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 약 220 mM 아르기닌을 포함하는 조성물.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 아르기닌이 L-아르기닌 하이드로클로라이드인, 조성물.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 약 150 mM 내지 약 250 mM 라이신, 선택적으로 약 170 mM 라이신을 포함하는 조성물.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 완충액이 히스티딘, 숙시네이트 또는 아세테이트인, 조성물.
제18항에 있어서, 완충액이 히스티딘이고, 선택적으로 완충액이 L-히스티딘/L-히스티딘 하이드로클로라이드인, 조성물.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 완충액이 약 10 mM 내지 약 30 mM, 선택적으로 약 16 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 17 mM 내지 약 24 mM, 선택적으로 약 18 mM 내지 약 24 mM의 농도인, 조성물.
제19항 또는 제20항에 있어서, 완충액이 약 19 mM 내지 약 21 mM, 선택적으로 20 mM ± 10% 완충액의 농도인, 조성물.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 액체인 조성물.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, pH가 약 pH 6.0 미만이고, 선택적으로 pH가 약 pH 5.0 내지 약 pH 6.0인, 조성물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, pH가 약 pH 5.5인, 조성물.
제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 예를 들어 50 mg/ml를 포함하는 조성물에서의 항-IL-33 항체의 점도에 비해 감소된 점도를 특징으로 하는 조성물.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 점도가 약 5 cP 내지 약 20 cP, 선택적으로 약 10 cP 미만, 예컨대 약 9 cP인, 조성물.
제22항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 20 mM 히스티딘, 80 mM 아르기닌, 120 mM 수크로스, 0.02%(w/v) 폴리소르베이트 80, pH 6.0 및 더 낮은 농도의 항-IL-33 항체, 예를 들어 50 mg/ml를 포함하는 조성물에서의 항-IL-33 항체의 가역적 자가-연합에 비해 감소된 가역적 자가-연합을 갖는 항-IL-33 항체를 특징으로 하는 조성물.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 약 35% 내지 약 50%의 단량체 중량%를 포함하는 조성물.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 크기 배제 크로마토그래피(SEC)에 의해 측정될 시 약 2℃ 내지 약 8℃에서 약 12개월 내지 약 18개월 보관 후, 항체의 약 5% 미만, 선택적으로 약 2% 미만이 응집되는, 조성물.
i. 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml 33_640087-7B, 약 0.03%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 220 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액으로서, pH가 pH 5.5 ± 0.5인, 완충액;
ii. 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml 33_640087-7B, 약 0.02%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 170 mM 라이신, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액으로서, pH가 pH 5.5 ± 0.5인, 완충액; 또는
iii. 약 130 mg/ml 내지 약 170 mg/ml 33_640087-7B, 약 0.02%(w/v) ± 0.015% 폴리소르베이트 80, 약 190 mM 아르기닌, 및 약 16 내지 약 24 mM 히스티딘 완충액으로서, pH가 pH 5.5 ± 0.5인, 완충액
을 포함하는 조성물.
제30항에 있어서, 약 150 mg/ml 33_640087-7B를 포함하는 조성물.
제30항 또는 제31항에 있어서, 약 18 mM 내지 약 22 mM 히스티딘 완충액, 선택적으로 약 20 mM 히스티딘 완충액을 포함하는 조성물.
제30항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 액체인 조성물.
제1항 내지 제33항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하고, 선택적으로 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는 제조 물품.
제1항 내지 제33항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하고, 선택적으로 약 0.5 ml 내지 약 5 ml(예를 들어, 1 ml 내지 약 3 ml)의 조성물을 포함하는 바이알.
대상체에서 IL-33-매개 장애를 치료하는 방법으로서, 대상체에 치료 유효량의 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
제36항에 있어서, IL-33-매개 장애가 천식, 아토피성 피부염 또는 만성 폐쇄성 폐 장애, 또는 당뇨병성 신장 질환인, 방법.
약 10 cP 미만의 점도를 갖고 약 100 mg/ml 초과의 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌 또는 약 150 mM 라이신, 계면활성제 및 완충액을 포함하는 안정한 액체 조성물을 제조하는 방법으로서,
i. 용액에서 항체, 아르기닌 및 완충액을 조합하여 약 100 mg/mL 내지 약 200 mg/mL 항-IL-33 항체, 적어도 약 170 mM 아르기닌 또는 약 150 mM 라이신, 및 완충액을 포함하는 용액을 수득하는 단계; 및
ii. 용액에 계면활성제를 첨가하여 약 0.03%(w/v) ± 0.015%(w/v)의 최종 계면활성제 농도를 달성하는 단계
를 포함하는 방법.
제38항에 있어서, 안정한 액체 조성물이 약 220 mM 아르기닌을 포함하고, 선택적으로 아르기닌이 L-아르기닌 하이드로클로라이드인, 방법.
제38항 또는 제39항에 있어서, 계면활성제가 폴리소르베이트 80이고 완충액이 히스티딘으로 제조되는, 방법.
제38항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 약 pH 5 내지 약 pH 6, 선택적으로 약 pH 5.5의 pH를 갖는 안정한 액체 제형물이 생성되는, 방법.
제38항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 항-IL-33 항체가 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은, 방법.
제38항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, cP가 23℃에서 측정되는, 방법.