KR20220149506A - 응애를 사육하기 위한 응애 조성물 및 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 포식성 응애를 대량 사육하기 위한 방법, 응애 조성물, 및 생물학적 방제를 위한 이의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 포식성 응애를 대량 사육하고 농작물에서 해충을 방제하기 위한 시젠스핀스키아 속의 먹의 응애의 용도에 관한 것이다.

Description

응애를 사육하기 위한 응애 조성물 및 방법
본 발명은 포식성 응애를 대량 사육하기 위한 방법, 응애 조성물 및 생물학적 방제를 위한 이의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 포식성 응애를 대량 사육하고 농작물에서 해충을 방제하기 위한 시젠스핀스키아(Czenspinskia) 속의 먹이 응애의 용도에 관한 것이다.
포식성 응애는 통상 광범위한 농업 해충 관리 분야에서 사용된다. 초식성 해충 응애 및 곤충 해충(예를 들어, 가루이(whitefly) 및 총채벌레(thrip))의 생물학적 방제를 위해 광범위한 포식성 응애 종이 제안되거나 상업화되었다.
최근, 주요 절지동물 해충 종은 주로 화학 약품, 즉 살충제에 의해 방제되고 있다. 오늘날, 시장에서 이용 가능한 많은 새로운 살충제는 기존의 화합물보다 더 선택성이 높고 위험성은 낮다. 그러나, 최신의 살충제도 몇몇 주요 문제점, 즉 표적 해충 종에서의 내성 발달; 유용한 등록 살충제 및 살비제(acaricide)의 공급 감소; 바람직하지 않은 잔류물의 침착; 2차 해충 발생을 초래하는 비표적 종에 대한 악영향; 처리된 식물에서 유도된 식물 독성 반응을 나타낸다. 따라서, 화학적 방제에만 의존하는 것이 농업 해충 관리의 문제점에 대한 해결책이 될 수 없다는 것이 점점 더 명백해지고 있다. 이러한 이유로 인해, 많은 농부 및 정원사는 살충제 사용을 줄이기 위한 방법을 탐구하고 채택하고 있다.
화학 약물의 사용에 대한 하나의 대안은 생물학적 방제이다. 생물학적 방제는 해충의 개체군을 제한하기 위해 살아있는 유익한 유기체(천적)의 개체군을 의도적으로 조절하는 것이다. 예를 들어, 응애의 천적으로는 포식자, 기생 곤충, 선충 및 병원체를 들 수 있다. 실제, 거의 모든 해충은 천적이 있으며, 이 같은 천적의 적절한 관리에 의해 많은 해충을 효과적으로 방제할 수 있다. 생물학적 방제의 목적은 해충을 박멸하는 것이 아니라, 주목할 만한 피해를 야기하지 않는 허용 수준으로 이들을 유지하는 것이다. 이와 같이, 생물학적 방제는 효과적이고, 경제적이며, 안전할 수 있다.
수년 동안, 포식성 응애의 개체군은 해충을 방제하기 위해 사용되어 왔다. 특히, 포식성 이리응애(phytoseiid predatory mite)는 현재 초식성 응애, 총채벌레 및 가루이와 같은 해충을 방제하는 데 주로 사용된다. 예를 들어, 네오세이울루스 쿠쿠메리스(Neoseiulus cucumeris; 오우데만스(Oudemans))는 총채벌레의 유충 및 잎응애(spider mite)의 방제에 상업적으로 사용된다. 기타 포식성 응애 종, 특히 메소스티그마티드 및 프로스티그마티드 종은 생물학적 해충의 방제 맥락에서 특별한 관심을 받고 있으며, 일부는 이미 상업화되어 있다.
따라서, 상업적으로 적절한 규모로 포식성 응애의 개체군을 생산하는 데 효과적인 대량 사육 시스템의 개발에 대한 관심이 증가하고 있으며, 이는 허용 가능한 가격으로 이루어지고 있다. 현재, 상업용 사육 시스템은 포식성 응애를 사육하기 위해 운반체 상에서 유지되는 배양액에서 살아있는 먹이를 사용한다. 예를 들어, WO2006/071107 및 WO2013/103295에는 포식성 응애 종의 개체의 개체군, 포식성 응애 개체를 위한 식품 공급원으로서의 먹이 응애 개체군 및 운반체를 포함하는 응애 조성물이 개시되어 있다. 이들 선행 기술문헌에 따른 조성물은 응애 종을 사육하고 해충을 생물학적으로 방제하는 데 적합하다. 포식성 응애를 위한 대량 사육 시스템은 포식자에 적합한 먹이의 이용 가능성에 크게 의존한다. 포식성 응애의 사육에서의 이들의 역할을 고려할 때, 먹이 응애의 사육의 상업적 관련성이 증가하고 있다.
WO2006/057552, WO2008/015393, WO2008/104807 및 WO2007/075081에는 포식성 응애의 대량 사육에서 먹이 응애로서 사용될 아스티그마티드(Astigmatid) 응애의 잠재성이 나타나 있다. 그러나, 현재까지 소수의 아스티그마티드 먹이 응애 종, 즉 타이로파구스 푸트레센티아에(Tyrophagus putrescentiae; 슈랭크(Schrank)), 타이레오파구스 엔토모파고우스(Thyreophagus entomophagous; 라불벤(Laboulbene) & 로빈(Robin)) 및 카르포글리푸스 락티스 L.(Carpoglyphus lactis L.)만이 대량 사육 방법에서 사용된다.
경제적이면서 동시에 번식이 쉬운 생물학적 해충의 방제에 사용하기 위한 새로운 먹이 응애를 식별하는 것은 여전히 어려운 과제로 남아 있다. 이후, 자연에서 포식성 응애가 잡아먹는 응애 대부분은, 예를 들어 이들이 충분히 높은 밀도에 도달하지 못하거나 포식성 응애에 대한 방어 메커니즘이 없기 때문에 이들 포식성 응애를 대량 사육하는 데 적합하지 않은 것으로 밝혀졌다(예를 들어, 문헌[Massaro, M., Martin, J.P.I. and de Moraes G.J. Exp Appl Acarol (2016) 70: 411]; 문헌[Barbosa, M.F.C. and de Moraes, G.J. Exp Appl Acarol (2016) 69: 289]; 문헌[Barbosa, M.F.C. and de Moraes, G.J. Biological Control (2015) 91: 22~26]; 및 문헌[Midthassel, A., Leather, S.R., Wright, D.J. et al. BioControl (2016) 61: 437] 참조). 또한, 농작물 및 최종 소비자에 미치는 먹이 응애의 잠재적인 부정적인 영향은 최소화되어야 한다.
상술한 관점에서, 포식성 응애 개체군의 대량 사육 및 대규모 생산, 이를 포함하는 보다 많은 양의 응애 조성물의 상업적 유통 및 보다 양호한 해충 방제 및 농업 관리를 위해 개선된(보다 효율적인) 응애 조성물을 수득할 필요성이 계속 존재한다.
놀랍게도, 본 발명자들은 먹이 응애로서 시젠스핀스키아 속의 응애를 사용하면 선행 기술분야의 문제점이 극복된다는 것을 발견하였다.
따라서, 본 발명은,
- 포식성 응애 개체군,
- 먹이 응애 개체군, 및
- 상기 개체군의 개체를 위한 운반체를 포함하는 응애 조성물을 제공하며,
이때 상기 먹이 응애 개체군은 시젠스핀스키아 속의 응애를 포함한다.
도 1: 22 ± 1℃ 및 85 ± 5% RH에서 C. 트란스베르소스트리아타(C. transversostriata) 및 C. 락티스(C. lactis)의 혼합 단계를 공급되는 경우에 암컷 A. 스위르스키이(A. swirskii)가 연속 3일 동안 낳은 알의 개수(GLM 이후의 대비; p > 0.05).
도 2: C. 트란스베르소스트리아타 및 C. 락티스의 성체에 대한 A. 스위르스키이 암컷의 포획 성공률(사멸된 암컷 먹이의 비율로서 표시됨). 별표는 먹이 응애 종 사이의 상당한 차이를 나타낸다(GLM 이후의 대비: p < 0.05).
앞서 본원에서 기술된 바와 같이, 본 발명은 응애 조성물을 제공하며, 이때 상기 응애 조성물은,
- 포식성 응애 개체군,
- 먹이 응애 개체군, 및
- 상기 개체군이 개체를 위한 운반체를 포함하며,
이때 상기 먹이 응애 개체군은 시젠스핀스키아 속을 포함한다.
본 발명의 의미에서 "포식성 응애 개체군"이란 용어는 먹이 응애 개체군을 먹고 사는 유익한 응애의 개체군을 의미한다.
본 발명의 의미에서 "먹이 응애 개체군"이란 용어는 적어도 부분적으로는 포식성 응애 개체군이 소비하는 응애의 개체군을 의미한다.
본 발명의 의미에서 "운반체"란 용어는 포식성 응애 개체군 및 먹이 응애 개체군 둘 모두의 개체에 운반체 표면을 제공하기에 적합한 임의의 고체 물질을 의미한다. 운반체는 보통 먹이 응애 개체군 및 포식성 응애 개체군이 돌아다니고, 숨고, 발달하고, 먹이를 먹거나 잡아 먹힐 수 있는 3차원 매트릭스로서 역할을 할 것이다.
시젠스핀스키아(Czenspinskia) 속은 넓은 분포를 가지며, 응애는 본 발명에 사용하기 위해 자연에서 쉽게 분리될 수 있다. 바람직한 종은 시젠스핀스키아 트란스베르소스트리아타이며, 칼볼리아 트란스베르소스트리아타(Calvolia transversostriata) 또는 시젠스핀스키아 로르디(Czenspinskia lordi)로도 알려져 있다.
놀랍게도, 본 발명자들은 본 발명에 따른 응애 조성물이 효율성의 측면에서 보다 양호한 결과를 나타낸다는 것을 관찰하였다. 먹이 응애 개체군이 속한 시젠스핀스키아 속의 응애는 통상적으로 사용되는 아스티그마티드 먹이 응애보다 포식성 응애 개체군에 의해 보다 쉽게 사멸되고, 보다 쉽게 잡아 먹히는 것으로 관찰되었다. 추가적인 이점은, 시젠스핀스키아 먹이 응애의 모든 생애 단계가 쉽게 사멸되는 반면, 기타 아스티그마티드의 성체와 같은 보다 큰 생애 단계는 전혀 사멸되지 않거나 훨씬 낮은 비율로 사멸된다는 것이다. 또한, 고밀도에서도 먹이 응애 개체군은 응애를 대량 사육하기 위해 선행 기술분야에서 사용된 먹이 응애보다 포식성 응애 개체군을 덜 교란시키는 것으로 관찰되었다. 이론에 결부되고 싶지 않지만, 시젠스핀스키아 응애는 선행 기술분야의 먹이 응애와 비교하여 훨씬 낮은 정도로 방충제 휘발물질을 생성하는 것으로 보인다. 이는 시젠스핀스키아 먹이 응애가 포식성 응애 개체군에 미치는 교란 효과를 낮추게 할 수 있다. 따라서, 포식성 응애 개체군의 개체는 보다 빨리 성장할 수 있으며, 따라서 보다 빨리 성숙하여 보다 높은 속도의 번식을 가능케 한다. 이 같은 보다 높은 번식률은 포식성 응애 개체군의 개체 수를 보다 빠르게 증가시킨다. 이러한 이점은 포식성 응애의 사육 및 이를 포함하는 조성물의 생산에 유익할 뿐만 아니라, 작물에서 해충의 방제에 유익하다. 본 발명에서 사용되는 먹이 응애 개체군은 또한 죽은 먹이 응애의 개체군을 포함할 수 있다(또는 이로 이루어질 수 있음)는 것을 유의해야 한다. 본 발명의 먹이 응애가 선행 기술분야의 먹이 응애보다 쉽게 잡아 먹힌다는 관찰은 선행 기술분야의 죽은 먹이 응애와 비교하여 죽은 시젠스핀스키아 응애에 또한 적용된다. 죽은 먹이 응애를 포함하는 먹이 응애 개체군의 사용은 먹이 응애가 먹이 응애를 사멸시키고 소비하는 데 보다 적은 에너지를 필요로 한다는 이점을 제공한다. 시젠스핀스키아 먹이 응애는 암블리세이우스 스위르스키이(Amblyseius swirskii)와 같은 포식성 이리응애 종을 사육하는 데 특히 유용한 것으로 밝혀져 있으며, 이는 적어도 가장 흔히 사용되는 '절대 표준' 카르포글리푸스 락티스 L.만큼 강력하다.
게다가, 시젠스핀스키아 및 특히 시젠스핀스키아 트란스베르소스트리아타는 전 세계적으로 분포되어 있다. 자연에의 광범위한 분포를 고려하면, 본 발명의 응애 조성물은 또한 외래 침입종이 도입될 위험성이 없이 전 세계적으로 안전하게 사용될 수 있다. 또한, 포식성 응애의 대량 사육을 위해 선행 기술분야에서 사용된 몇몇 먹이 응애와 대조적으로, 시젠스핀스키아는 저장 해충도 식물 해충도 아니다. 이와 같이, 환경 및 최종 사용자에게 잠재적인 위험을 야기하지 않는다. 따라서, 본 발명의 먹이 응애는 또한 포식성 응애의 대량 사육을 위한 보다 안전한 해결책을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 먹이 응애는 시젠스핀스키아 트란스베르소스트리아타(오우데만스) 응애이다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 시젠스핀스키아 응애는 식물 손상을 야기하지 않는다. 당업자라면 심각한 식물 손상을 야기하지 않는 시젠스핀스키아 응애를 선택하는 방법을 잘 알고 있다. 또한, 심각한 식물 손상을 유발하지 않는지의 여부는, 예를 들어 선택한 시젠스핀스키아와 함께 식물을 배양하고, 며칠 후 식물이 손상되었는지의 여부를 결정함으로써 쉽게 결정된다. 특정 실시형태에서, 본 발명에 따른 먹이 응애는 시젠스핀스키아 속의 응애를 포함한다.
유리하게는, 본 발명에 따른 조성물은 포식성 응애 및/또는 먹이 응애 개체군을 위한 식품 공급원을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 상기 먹이 응애 개체군을 위한 식품 공급원을 포함한다. 다른 실시형태에서, 식품 공급원은 밀 배아, 꽃가루 또는 진균, 예를 들어 사카로마이세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae)를 포함한다. 당업자에게 알려져 있는 바와 같이, 운반체 및 식품 공급원(예를 들어, 밀 배아) 둘 모두로서 작용하는 운반체가 선택될 수 있다.
유리하게는, 앞서 본원에 설명된 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 진균을 더 포함할 수 있다. 진균이 본 발명에 따른 조성물에 첨가되는 경우에 보다 양호한 효율성 결과가 관찰되었다. 사실, 먹이 응애 개체군은 진균을 먹고 산다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물에 진균을 능동적으로 첨가하면 시젠스핀스키아 응애의 성장을 개선하고 번식 성숙을 가속화시킬 수 있으며, 이는 먹이 응애 개체군의 시젠스핀스키아 개체의 보다 빠른 증가를 초래할 것이다. 또한, 유익한 진균을 능동적으로 첨가하면 사육 배양이 안정화되고, 원치 않는 진균 오염의 증가가 추가로 억제되는 것으로 관찰되었다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물에서 진균을 능동적으로 첨가하면 포식자 응애 개체군의 사육, 이의 대규모 생산 및 본 발명에 따른 조성물의 보다 많은 양의 분포를 간접적으로 향상시킬 것이지만, 또한 농작물에 대한 보다 양호한 해충 방제 효과를 나타낼 것이다. 바람직한 실시형태에서, 진균은 효모, 바람직하게는 사카로마이세스 속과 같은 사카로마이세테스(Saccharomycetes)이다. 바람직한 실시형태에서, 진균은 사카로마이세스 세레비지아에이다. 본원에 사용된 바와 같은 보조 식품 공급원은 먹이 응애 개체군 이외에도 추가로 존재하는 식품 공급원을 지칭한다. 보조 식품 공급원은 먹이 응애보다 비용 효율적인 식품 공급원으로 포식성 응애의 사육에 종종 사용된다. 몇몇 포식성 응애가 추가의 에너지를 얻기 위해 보조 식품을 사용할 수 있지만, 생존, 발생 및 번식을 위해 먹이 응애의 존재를 필요로 한다는 것이 종종 관찰된다. 보조 식품 공급원 사용의 주요 단점은 진균 오염이 발생하기 쉽다는 것이다. 보조 식품 공급원을 본 발명의 먹이 응애와 조합함으로써 이러한 단점을 억제한다. 바람직한 보조 식품의 예로는 천연 식품 공급원(예를 들어, 꽃가루 또는 죽은 응애) 및 인공 식품(문헌[Wackers et al. (2005) Plant-provided food for carnivorous insects: a protective mutualism and its applications 356p]; 문헌[Morales-Ramos et al. (2014) Mass production of beneficial organisms 742p]; 문헌[Cohen (2015) Insect diets. Science and Technology, Second edition, 473p]이 있다. 포식성 응애의 사육을 위한 보조 식품 공급원은 당업자에게 잘 알려져 있다.
앞서 본원에서 언급한 바와 같이, 운반체는 개체에 운반체 표면을 제공하기에 적합한 임의의 고체 물질일 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 운반체는 고체 운반체 요소들의 혼합물이다. 바람직하게는, 운반체는 고체 운반체 요소들의 실질적으로 균질한 혼합물이다. 고체 운반체 요소는 다양한 크기를 가질 수 있지만, 실질적으로 균질한 혼합물은 다양한 크기가 운반체들 사이에 실질적으로 균질하게 분포하고 있다는 것을 지칭한다.
고체 운반체 요소의 평균 최장 축은 전형적으로는 1.0 ㎜ 내지 20.0 ㎜, 보다 구체적으로는 2.0 ㎜ 내지 12.0 mm, 바람직하게는 3.0 ㎜ 내지 9.0 mm이다. 다른 특정 실시형태에서, 운반체는 유사한 크기를 갖는 고체 운반체 요소들의 혼합물이다. 추가의 실시형태에서, 고체 운반체 요소의 90%는 고체 운반체 요소들의 혼합물의 평균 최장 축의 0.1배 내지 10.0배 범위, 특히 0.2배 내지 5.0배 범위, 보다 구체적으로는 0.5배 내지 2.0배의 범위의 최장 축을 갖는다. 본원의 개시내용으로부터 이해되는 바와 같이, 2개 이상의 상이한 유형의 운반체 요소가 사용되고 혼합될 수 있다. 이 경우, 크기 분포는 운반체 요소의 유형별 크기 분포를 지칭한다. 바람직하게는, 운반체는 다공성 매질을 제공하며, 이는 응애 개체군에 의해 생성되는 대사 가스 및 열의 교환을 가능케 한다. 적합한 운반체의 예로는 (밀) 겨, 메밀 껍질, 왕겨, 톱밥, 옥수수 속대 그릿(corn cob grit) 등과 같은 비광합성 식물 물질 또는 질석(vermiculite)과 같은 무기 물질이 있다. 유리하게는, 상기 운반체는 잔디 종의 곡물 또는 이의 임의의 부분, 예를 들어 배아 또는 겨를 포함한다. 바람직하게는, 상기 운반체는 식물의 잎 또는 줄기와 같은 살아있는 녹색 식물 물질을 포함하지 않는다. 특정 실시형태에서, 운반체는 비광합성 식물 물질을 포함한다. 질석, 밀기울, 수수 왕겨, 왕겨 및 메밀 껍질로부터 선택되는 운반체가 특히 바람직하다.
바람직하게는, 상기 운반체는 1.0 ㎜ 내지 20.0 ㎜, 특히 3.0 ㎜ 내지 9.0 ㎜의 평균 최장 축을 갖는 운반체 요소를 포함한다. 운반체 물질은 먹이 응애 및 포식성 응애에 대한 피난처를 제공하여 스트레스 조건 및 식인 행위(cannibalism)를 감소시킨다. 대량 사육 동안, 운반체는 3차원 사육 매트릭스의 생성을 허용하며, 먹이 응애를 위한 먹이 공급원을 제공할 수 있다. 생물학적 방제를 위한 저장 및 유통 동안, 운반체는 증량제(bulking agent)로서의 역할을 하고, 농작물에서 포식성 응애의 보다 균질한 분포를 허용한다.
유리하게는, 먹이 응애 개체군의 개체수에 대한 포식성 응애 개체군의 개체수는 약 1:1 내지 1:500, 예를 들어 약 1:10 내지 1:250, 및 바람직하게는 1:25 내지 1:150이다.
본 발명으로 인해 고밀도의 먹이 응애 및 포식 응애에 도달할 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 1,000마리의 먹이 응애 개체군의 응애, 특히 적어도 2,000마리의 먹이 응애, 보다 구체적으로는 적어도 3,000마리의 먹이 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 응애 조성물은 적어도 5,000마리의 먹이 응애, 적어도 10,000마리의 먹이 응애, 적어도 20,000마리의 먹이 응애, 적어도 30,000마리의 먹이 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 50,000마리의 먹이 응애 개체군의 응애를 포함한다.
다른 특정 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 20마리의 포식성 응애 개체군의 응애, 특히 적어도 30마리의 포식성 응애, 보다 구체적으로는 적어도 50마리의 포식성 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 응애 조성물은 적어도 100마리의 포식성 응애, 적어도 150마리의 포식성 응애, 적어도 200마리의 포식성 응애, 적어도 300마리의 포식성 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 500마리의 포식 응애 개체군의 응애를 포함한다.
본원에 언급된 응애의 개수는 문맥 상 달리 명시하지 않는 한, 알, 유충, 약충(nymph) 및 성충을 포함하는 모든 응애 발달 단계에서의 총 개수를 지칭한다. 본원의 개시내용으로부터 이해되는 바와 같이, 본 발명의 조성물 내의 먹이 응애는 살아있는 먹이 응애일 필요는 없다.
특정 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물의 그램 당 적어도 1,000마리의 알이 아닌 먹이 응애 개체군의 응애, 특히 적어도 2,000마리의 알이 아닌 먹이 응애, 보다 구체적으로는 3,000마리의 먹이 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 응애 조성물은 적어도 5,000마리의 먹이 알이 아닌 응애, 적어도 10,000마리의 먹이 알이 아닌 응애, 적어도 20,000마리의 먹이 알이 아닌 응애, 적어도 30,000마리의 먹이 알이 아닌 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물의 그램 당 적어도 50,000마리의 먹이 응애 개체군의 알이 아닌 응애를 포함한다.
다른 특정 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물의 그램 당 적어도 20마리의 포식성 응애 개체군의 알이 아닌 응애, 특히 적어도 30마리의 알이 아닌 포식성 응애, 보다 구체적으로는 적어도 50마리의 알이 아닌 포식성 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 응애 조성물을 적어도 100마리의 알이 아닌 포식성 응애, 적어도 150마리의 알이 아닌 포식성 응애, 적어도 200마리의 알이 아닌 포식성 응애, 적어도 300마리의 알이 아닌 포식성 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물의 그램 당 적어도 500마리의 포식성 응애 개체군의 알이 아닌 응애를 포함한다.
다른 특정 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 20마리의 포식성 응애 개체군의 성체 응애, 특히 적어도 30마리의 성체 포식성 응애, 보다 구체적으로는 적어도 50마리의 성체 포식성 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 응애 조성물은 적어도 100마리의 성체 포식성 응애, 적어도 150마리의 성체 포식성 응애, 적어도 200마리의 성체 포식성 응애, 적어도 300마리의 성체 포식성 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 500마리의 포식성 응애 개체군의 성체 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서, 본 발명의 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 20마리의 포식성 응애 개체군의 살아있는 성체 응애, 특히 적어도 30마리의 살아있는 성체 포식성 응애, 보다 구체적으로는 적어도 50마리의 살아있는 성체 포식성 응애를 포함한다. 추가의 실시형태에서 응애 조성물은 적어도 100마리의 살아있는 성체 포식성 응애, 적어도 150마리의 살아있는 성체 포식성 응애, 적어도 200마리의 살아있는 성체 포식성 응애, 적어도 300마리의 살아있는 성체 포식성 응애를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 응애 조성물은 조성물 그램 당 적어도 500마리의 포식성 응애 개체군의 살아있는 성체 응애를 포함한다.
명백하게는, 먹이 응애 및 포식 응애의 상술한 개수 범위는 본 발명의 특정 및 바람직한 실시형태에 도달하도록 결합될 수 있다. 따라서, 본 발명은, 예를 들어 조성물 그램 당 적어도 1,000마리의 먹이 응애 개체군의 응애 및 적어도 20마리의 포식성 응애 개체군의 응애를 포함하는 응애 조성물을 제공한다고 하는 결론에 이르게 된다. 다른 예로서, 응애 조성물은 적어도 5,000마리의 먹이 응애 개체군의 응애 및 적어도 100마리의 포식성 응애 개체군의 응애를 포함한다. 또 다른 예로서, 응애 조성물은 적어도 5,000마리의 먹이 응애 개체군의 응애 및 적어도 500마리의 포식성 응애 개체군의 응애를 포함한다.
바람직한 실시형태에서, 상기 포식성 응애는 메소스티그마티드 또는 프로스티그마티드 응애 종이다. 추가의 실시형태에서, 상기 포식 응애는 하기로부터 선택된다:
- 메소스티그마티드 포식성 응애 종, 예를 들어 하기로부터의 것:
i) 파이토세이이다에, 예를 들어 하기로부터의 것:
a) - 암블리세이이나에(Amblyseiinae) 아과, 예를 들어 암블리세이우스(Amblyseius) 속으로부터의 것, 예를 들어 암블리세이우스 안데르소니(Amblyseius andersoni), 암블리세이우스 아에리알리스(Amblyseius aerialis), 암블리세이우스 스위르스키이(Amblyseius swirskii), 암블리세이우스 헤르비콜루스(Amblyseius herbicolus) 또는 암블리세이우스 라르고엔시스(Amblyseius largoensis); 유세이우스(Euseius) 속으로부터의 것, 예를 들어 유세이우스 핀란디쿠스(Euseius finlandicus), 유세이우스 히비스키(Euseius hibisci), 유세이우스 오발리스(Euseius ovalis), 유세이우스 빅토리엔시스(Euseius victoriensis), 유세이우스 스티풀라투스(Euseius stipulatus), 유세이우스 스쿠탈리스(Euseius scutalis), 유세이우스 툴라렌시스(Euseius tularensis), 유세이우스 아도엔시스(Euseius addoensis), 유세이우스 콘코르디스(Euseius concordis), 유세이우스 호(Euseius ho) 또는 유세이우스 시트리(Euseius citri); 네오세이울루스(Neoseiulus) 속으로부터의 것, 예를 들어 네오세이울루스 바르케리(Neoseiulus barkeri), 네오세이울루스 칼리포르니쿠스(Neoseiulus californicus), 네오세이울루스 쿠쿠메리스(Neoseiulus cucumeris), 네오세이울루스 롱기스피노수스(Neoseiulus longispinosus), 네오세이울루스 우메르슬레이이(Neoseiulus womersleyi), 네오세이울루스 이다에우스(Neoseiulus idaeus), 네오세이울루스 아노니무스(Neoseiulus anonymus), 네오세이울루스 파스팔리보루스(Neoseiulus paspalivorus), 네오세이울루스 레둑투스(Neoseiulus reductus) 또는 네오세이울루스 팔라시스(Neoseiulus fallacis); 암블리드로말루스(Amblydromalus) 속으로부터의 것, 예를 들어 암블리드로말루스 리모니쿠스(Amblydromalus limonicus); 타이플로드로말루스(Typhlodromalus) 속으로부터의 것, 예를 들어 타이플로드로말루스 아리포(Typhlodromalus aripo), 타이플로드로말루스 라일라(Typhlodromalus laila) 또는 타이플로드로말루스 페레그리누스(Typhlodromalus peregrinus); 트란세이우스(Transeius) 속으로부터의 것, 예를 들어 트란세이우스 몬트도렌시스(Transeius montdorensis); 파이토세이울루스(Phytoseiulus) 속으로부터의 것, 예를 들어 파이토세이울루스 페르시밀리스(Phytoseiulus persimilis), 파이토세이울루스 마크로필리스(Phytoseiulus macropilis), 파이토세이울루스 롱기페스(Phytoseiulus longipes), 파이토세이울루스 프라가리아에(Phytoseiulus fragariae);
b) 타플로드로미나에(Typhlodrominae) 아과, 예를 들어 갈렌드로무스(Galendromus) 속으로부터의 것, 예를 들어 갈렌드로무스 옥시덴탈리스(Galendromus occidentalis); 타이플로드로무스(Typhlodromus) 속으로부터의 것, 예를 들어 타이플로드로무스 피리(Typhlodromus pyri), 타이플로드로무스 도리나에(Typhlodromus doreenae), 타이플로드로무스 레나누스(Typhlodromus rhenanus) 또는 타이플로드로무스 아티아사에(Typhlodromus athiasae);
c) 파이토세이이나에(Phytoseiinae) 아과, 예를 들어 파이토세이우스(Phytoseius) 속으로부터의 것, 예를 들어 파이토세이우스 마크로필리스(Phytoseius macropilis), 파이토세이우스 피니티무스(Phytoseius finitimus) 또는 파이토세이우스 플루미페르(Phytoseius plumifer);
ii) 아시다에(Ascidae), 예를 들어 프록톨라엘랍스(Proctolaelaps) 속으로부터의 것, 예를 들어 프록톨라엘랍스 피그마에우스(Proctolaelaps pygmaeus)(뮐러(Muller)); 블라티소시우스(Blattisocius) 속으로부터의 것, 예를 들어 블라티소시우스 타르살리스(Blattisocius tarsalis)(베르레세(Berlese)), 블라티소시우스 키가니(Blattisocius keegani)(폭스(Fox)); 라시오세이우스(Lasioseius) 속으로부터의 것, 예를 들어 라시오세이우스 피메토룸 카르그(Lasioseius fimetorum Karg), 라시오세이우스 플로리덴시스 베르레세(Lasioseius floridensis Berlese), 라시오세이우스 비스피노수스 에반스(Lasioseius bispinosus Evans), 라시오세이우스 덴타투스 폭스(Lasioseius dentatus Fox), 라시오세이우스 스카풀라투스(Lasioseius scapulatus)(케네트(Kenett)), 라시오세이우스 아티아사에 나와르 & 나스르(Lasioseius athiasae Nawar & Nasr); 아르크토세이우스(Arctoseius) 속으로부터의 것, 예를 들어 아르크토세이우스 세미시수스(Arctoseius semiscissus)(베르레세); 프로토가마셀루스(Protogamasellus) 속으로부터의 것, 예를 들어 프로토가마셀루스 디오스코루스 맨슨(Protogamasellus dioscorus Manson);
iii) 라엘라피다에(Laelapidae), 예를 들어 스트라티올라엘랍스(Stratiolaelaps) 속으로부터의 것, 예를 들어 스트라티올라엘랍스 시미투스(Stratiolaelaps scimitus)(워머슬리(Womersley))(하이포아스피스(Hypoaspis) 속에도 속함); 가에올라엘랍스(Gaeolaelaps), 예를 들어 가에올라엘랍스 아쿨레이페르(Gaeolaelaps aculeifer)(카네스트리니(Canestrini))(하이포아스피스 속에도 속함); 안드롤라엘랍스(Androlaelaps), 예를 들어 안드롤라엘랍스 카살리스(Androlaelaps casalis)(베르레세);
iv) 마크로켈리다에(Macrochelidae), 예를 들어 마크로켈레스(Macrocheles) 속으로부터의 것, 예를 들어 마크로켈레스 로부스툴루스(Macrocheles robustulus)(베르레세), 마크로켈레스 무스카에도메스티카에(Macrocheles muscaedomesticae)(스코폴리(Scopoli)), 마크로켈레스 마트리우스(Macrocheles matrius)(훌(Hull));
v) 파라시티다에(Parasitidae), 예를 들어 페르가마수스(Pergamasus) 속으로부터의 것, 예를 들어 페르가마수스 퀴스퀼리아룸 카네스트리니(Pergamasus quisquiliarum Canestrini); 파라시투스(Parasitus), 예를 들어 파라시투스 피메토룸(Parasitus fimetorum)(베르레세), 파라시투스 비투베로수스 카르그(Parasitus bituberosus Karg); 파라시텔루스(Parasitellus), 예를 들어 파라시텔루스 푸코룸(Parasitellus fucorum)(데 지어(De Geer));
vi) 디가마세릴다에(Digamasellidae), 예를 들어 디가마세루스(Digamasellus) 속으로부터의 것, 예를 들어 디가마세루스 콰드리세투스(Digamasellus quadrisetus) 또는 디가마세루스 푼크툼(Digamasellus punctum); 덴드로라엘랍스(Dendrolaelaps) 속으로부터의 것, 예를 들어 덴드로라엘랍스 네오디세투스(Dendrolaelaps neodisetus); 및
- 프로스티그마티드(Prostigmatid) 응애 종, 예를 들어 하기로부터의 것:
i) 티데이다에(Tydeidae), 예를 들어 호메오프로네마투스(Homeopronematus) 속으로부터의 것, 예를 들어 호메오프로네마투스 안코나이(Homeopronematus anconai)(베이커(Baker)); 타이데우스(Tydeus) 속으로부터의 것, 예를 들어 타이데우스 람비(Tydeus lambi)(베이커), 타이데우스 카우다투스(Tydeus caudatus)(두게스(Duges)); 프로네마투스(Pronematus) 속으로부터의 것, 예를 들어 프로네마투스 우비퀴토우스(Pronematus ubiquitous)(맥그레거(McGregor));
ii) 케일레티다에(Cheyletidae), 예를 들어 케일레투스(Cheyletus) 속으로부터의 것, 예를 들어 케일레투스 에루디투스(Cheyletus eruditus)(슈랭크(Schrank)), 케일레투스 말라센시스 오우데만스(Cheyletus malaccensis Oudemans);
iii) 쿠낙시다에(Cunaxidae), 예를 들어 콜레오시루스(Coleoscirus) 속으로부터의 것, 예를 들어 콜레오시루스 심플렉스(Coleoscirus simplex)(유잉(Ewing)), 쿠낙사(Cunaxa) 속으로부터의 것, 예를 들어 쿠낙사 세티로스트리스(Cunaxa setirostris)(헤르만(Hermann));
iv) 에리트라에이다에(Erythraeidae), 예를 들어 발라우스티움(Balaustium) 속으로부터의 것, 예를 들어 발라우스티움 푸트마니 스마일리(Balaustium putmani Smiley), 발라우스티움 메디카고엔세 메이어 & 라이크(Balaustium medicagoense Meyer & Ryke), 발라우스티움 무로룸(Balaustium murorum)(헤르만);
v) 스티그마에이다에(Stigmaeidae), 예를 들어 아기스테무스(Agistemus) 속으로부터의 것, 예를 들어 아기스테무스 엑세르투스 곤잘레즈(Agistemus exsertus Gonzalez); 예를 들어 제트젤리아(Zetzellia) 속으로부터의 것, 예를 들어 제트젤리아 말리(Zetzellia mali)(유잉); 및
vi) 타르소네미다에(Tarsonemidae), 예를 들어 아카로네무스(Acaronemus) 속으로부터의 것, 예를 들어 아카로네무스 데스트루크토르(Acaronemus destructor)(스마일리 및 랜드위르(Landwehr)); 예를 들어 덴드로프투스 네아르 수스키 샤로노브 및 리브시트스(Dendroptus near suski Sharonov and Livshits) 속으로부터의 것, 예를 들어 루포타르소네무스 플로리다누스 아티아(Lupotarsonemus floridanus Attiah).
바람직한 실시형태에서, 포식 응애는 파이토세이이다에에 속한다. 특정 실시형태에서, 포식 응애는 암블리세이이나에, 트란세이우스, 네오세이울루스 및 암블리드로말루스로부터 선택되고; 보다 구체적으로는, 포식성 응애는 암블리세이우스 스위르스키이, 트란세이우스 몬트도렌시스, 네오세이울루스 칼리포르니쿠스 및 암블리드로말루스 리모니쿠스로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또한, 본 발명은 본 발명의 조성물을 저장 및 유통하기 위한 상업적 포장을 제공한다. 따라서, 본 발명은 또한 본 발명에 따른 조성물을 포함하는 용기에 관한 것이다. 특히, 용기는 0.2 ℓ 내지 3 ℓ, 바람직하게는 0.5 ℓ 내지 2 ℓ의 내부 부피를 갖는다. 바람직한 실시형태에 따르면, 용기는 바람직하게는 응애의 적어도 하나의 운동성 생애 단계를 위한 출구, 보다 바람직하게는 상기 적어도 하나의 운동성 생애 단계의 지속적 방출을 제공하기에 적합한 출구를 포함한다. 특정 실시형태에서, 용기(예를 들어, 병 또는 샤세(sachet))는 제거 가능한 밀봉부가 구비된 적어도 하나의 출구를 갖는다. 특히, 본원에서 사용된 바와 같은 밀봉부는 아교 접착되거나 열 밀봉된 마개를 지칭한다. 바람직하게는, 용기는, 예를 들어 밀봉부를 농작물 잎 또는 가지에 걸려 있도록 갈고리를 포함시키거나, 밀봉부를 농작물의 표면에 찔러 넣도록 점착 표면을 포함시킴으로써 이를 농작물에 부착시키는 데 적합하다.
본 발명은 또한 포식성 응애를 사육하기 위한 방법에 관한 것으로, 상기 방법은,
- 본 발명의 조성물을 제공하는 단계, 및
- 포식성 응애 개체군의 개체가 상기 먹이 응애 개체군을 먹고 살도록 하는 단계를 포함한다.
바람직하게는, 포식성 응애 개체군의 개체는 응애 조성물을 5℃ 내지 35℃ 및 30% 내지 100%의 상대 습도, 특히 15℃ 내지 35℃ 및 50% 내지 100%의 상대 습도에서 유지하면서 상기 먹이 응애 개체군을 먹고 살도록 허용된다.
본 발명은 또한 농작물에서 해충을 방제하기 위한 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 본 발명에 따른 응애 조성물을 상기 농작물에 제공하는 단계를 포함한다. 본 발명의 응애 조성물은 작물에 직접 살포될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 응애 조성물은 농작물에 근접하여 제공된다. 예를 들어, 본 발명의 응애 조성물은 응애 조성물을 담고 있는 용기를 농작물 근처에 배치하고, 포식성 응애가 상기 용기로부터 빠져나가도록 함으로써 농작물에 제공될 수 있다. 이러한 방식에서, 포식성 응애는 그 자체가 농작물을 통해 확산되어 농작물 해충을 방제한다. 바람직한 실시형태에서, 해충은 절지동물 해충이다.
본 발명의 이들 및 기타 실시형태는 첨부된 청구범위에 나타나 있다.
이제, 본 발명은 본 발명의 상이한 양태의 비제한적인 실시형태를 나타내는 하기 실시예를 참조하여 추가로 기술될 것이다.
실시예
실시예 1 : 상이한 먹이 응애에 대한 암블리세이우스 스위르스키이의 산란율
포식성 이리응애에 대해 사용된 표준 아스티그마티드 먹이 응애와 비교하여 시젠스핀스키아 먹이 응애의 영양 품질을 평가하기 위해 첫 번째 본 실시예를 수행하였다. 보다 구체적으로, 포식성 응애인 암블리세이우스 스위르스키이 아티아(Athias)-헨리오트(Henriot)(아카리(Acari): 메노스티그마타(Mesostigmata): 파이토세이이다에(Phytoseiidae))의 산란율은 WO2006/071107에서 A. 스위르스키이의 사육을 위해 개시된 바와 같은 카르포글리피드(carpoglyphid) 먹이 응애, 즉 카르포글리푸스 락티스 L.(CL)(아카리: 아스티그마타: 카르포글리피다에)와 비교하여 시젠스핀스키아 먹이 응애인 시젠스핀스키아 트란스베르소스트리아타(오우데만스)(아카리: 아스티그마타(Astigmata): 윈테르슈미티이다에(Winterschmidtiidae))에 대해 시험하였다.
먹이 응애를 환기용 뚜껑이 구비된 플라스틱 용기(8 ㎝ x 5.7 ㎝)에 겨, 밀 배아 및 효모를 포함하는 매질에서 배양하였다. 용기를 22 ± 1℃의 온도와 85 ± 5%의 상대 습도로 유지하였다.
임신한 암컷 A. 스위르스키이 한 마리를 대량 사육 시설에서 젖은 면화층 상에 놓인 검은색 PVC 아레나(PVC arena; 2 ㎝ x 4 ㎝) 상으로 옮겼다. 아레나의 가장자리를 응애가 탈출하는 것을 방지하기 위해 휴지로 덮었다. 면사를 갖는 검은색 플라스틱 조각(1 ㎝ x 1 ㎝)을 추가하여 피난처 및 산란 기판을 제공하였다. 먹이 응애는 임의로 제공되었다. 각각의 암컷이 낳은 알의 개수를 연속 4일 동안 매일 계수하였다. 실험 이전에 식이 효과를 제한하기 위해 첫째 날의 산란율을 분석으로부터 생략하였다(Sabelis 1990). 2일, 3일, 4일째 날에 낳은 알의 양의 합을 푸아송 분포(Poisson distribution)를 갖는 GLM 모델과 비교하였다. 처리 간의 대비는 중요하지 않은 인자 수준의 집계를 통한 단계적 모델 단순화에 의해 평가되었다(Crawley 2013). 모든 분석은 통계 소프트웨어 R 3.10(RDevelopment Core Team 2012)을 사용하여 수행되었다.
상기 결과에 따르면 A. 스위르스키이는 시젠스핀스키아 먹이 응애인 C. 트란스베르소스트리아타를 먹고 번식할 수 있는 것으로 나타나 있다. 시젠스핀스키아에 대해 관찰된 산란율은 A. 스위르스키이에 대한 산란율보다 높았지만, 이는 본 실험에서 2개의 먹이 종의 생략된 단계들 사이의 산란율에서의 통계적 유의성에 도달하지는 못하였다((GLM, χ2 = 0.91167, d.f. = 1, p = 0.3397)(도 1). C. 트란스베르소스트리아타 먹이 응애 또는 C. 락티스 먹이 응애 상에서 성장시켰을 때 유사한 양의 알을 낳았다. 결론적으로, 시젠스핀스키아 응애는 A. 스위르스키이와 같은 포식성 응애의 상업용 사육에 적합한 먹이 응애 개체군이다.
실시예 2 : 상이한 먹이 응애의 성체 단계가 제공되는 경우에 A. 스위르스키이의 포획 성공률
이전 연구에 따르면 대부분의 아스티그마티드 먹이 응애의 성체 단계는 이들의 응애의 알 및 유충보다 어렵게 퇴치되거나 소비되는 것으로 보고된 바 있다. 본 실시예에서, 시젠스핀스키아 먹이 응애인 C. 트란스베르소스트리아타 및 카르포글리피드 먹이 응애인 C. 락티스의 성체 단계에 대해 포획 성공률을 평가하였다.
실시예 1에 기술된 바와 같이 포식성 및 먹이 응애를 사육하였다. 임의의 식품 공급원 없이 이들을 검은색 PVC 플레이트로 옮김으로써 실험 시작 전에 암컷 A. 스위르스키이를 16시간 동안 굶겼다. 16시간 후, 실험 1에 기술된 바와 같이 암컷 A. 스위르스키이 한 마리를 검은색 PVC 아레나로 옮겼다. A. 스위르스키이 암컷을 도입하기 전에, 2종의 먹이 응애의 25마리 성체를 실험 아레나로 옮겼다. 포식자를 도입한 후, 5분 동안 또는 성공적인 공격(사멸 및 먹이를 먹고 생존)이 있을 때까지 관찰을 수행하였다. 암컷이 5분 이내에 사멸시키는 데 성공하지 못하면, 이는 실패로 간주되었다. 각각의 처리를 대해 10회의 반복실험이 설정되었다. 데이터는 이항 분포를 갖는 GLM 모델을 사용한 처리 간에 비교하였다. 모든 통계 분석은 컴퓨터 소프트웨어 R 버전 3.1.0(R Core Team 2014)을 사용하여 이루어졌다.
성체 시젠스핀스키아 암컷이 제공되는 경우, 먹이 응애 중 어느 것도 성공적으로 퇴치되지 않은 카르포글리피드 종과 비교하여 높은 비율의 먹이 개체가 퇴치되었다(GLM; χ2 = 4.6911, d.f. = 1, p = 0.0303).
도 2에 나타나 있는 결과로부터, A. 스위르스키이 암컷은 통상적으로 사용되는 아스티그마티드 먹이 응애 종과 비교하여 시젠스핀스키아 먹이 응애인 C. 트란스베르소스트리아타의 성충을 훨씬 더 많이 사멸시키고 소비할 수 있다는 것이 명백하다. 따라서, 시젠스핀스키아 먹이 응애의 경우 성충 단계는 보다 쉽게 퇴치되고 사멸되며, 그 결과 이는 보다 적합한 먹이가 된다.

Claims (15)

  1. - 포식성 응애 개체군,
    - 먹이 응애 개체군, 및
    - 상기 개체군의 개체를 위한 운반체
    를 포함하고, 상기 먹이 응애 개체군은 시젠스핀스키아(Czenspinskia) 속의 응애를 포함하는, 응애 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 응애 개체군을 위한 식품 공급원을 더 포함하는, 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 먹이 응애 개체군을 위한 식품 공급원은 밀 배아; 꽃가루; 또는 진균, 예를 들어, 효모를 포함하는, 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 운반체는 배아 또는 겨와 같은 잔디 종의 곡물 또는 이의 임의의 부분을 포함하는, 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 운반체는 1.0 ㎜ 내지 20.0 ㎜의 평균 최장 축을 갖는 운반체 요소를 포함하는, 조성물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 먹이 응애의 개체의 수 대비 상기 포식성 응애 종의 개체의 수는 약 1:1 내지 약 1:500; 구체적으로는 약 1:50 내지 약 1:200; 보다 구체적으로는 1:75 내지 1:125인, 조성물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 먹이 응애 개체군은 시젠스핀스키아 트란스베르소스트리아타(Czenspinskia transversostriata) 종에서 유래한 응애를 포함하는, 조성물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포식성 응애 종은 메소스티그마티드(mesostigmatid) 또는 프로스티그마티드(prostigmatid) 응애 종, 특히 파이토세이이다에(Phytoseiidae)인, 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 상기 조성물 그램 당 시젠스핀스키아 속의 적어도 200마리의 먹이 응애 및 상기 조성물 그램 당 적어도 10마리의 포식성 응애를 포함하는, 조성물
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 용기.
  11. - 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 조성물을 제공하는 단계, 및
    - 포식성 응애 개체군의 개체가 상기 먹이 응애 개체군을 먹고 살도록 하는 단계
    를 포함하는, 포식성 응애의 사육 방법.
  12. 제11항에 있어서, 상기 응애 조성물을 5℃ 내지 35℃ 및 30% 내지 100% 상대 습도에서 유지하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 적어도 포식성 응애 개체군의 개체를 용기로부터 방출하기 위해 개방되도록 설계된 출구를 갖는 용기에 상기 조성물을 포장하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  14. 농작물에 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 응애 조성물을 제공하는 단계를 포함하는, 농작물의 해충 방제 방법.
  15. 제14항에 있어서, 제10항의 용기를 상기 농작물 내에 또는 이에 근접하게 배치하는 단계를 포함하는, 방법.
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