KR20220102437A - 히알루론산 및 dna 분획물을 포함하는 창상피복재 및 이의 제조방법 - Google Patents

히알루론산 및 dna 분획물을 포함하는 창상피복재 및 이의 제조방법 Download PDF

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KR20220102437A KR1020210004795A KR20210004795A KR20220102437A KR 20220102437 A KR20220102437 A KR 20220102437A KR 1020210004795 A KR1020210004795 A KR 1020210004795A KR 20210004795 A KR20210004795 A KR 20210004795A KR 20220102437 A KR20220102437 A KR 20220102437A
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Abstract

본 발명은 창상피복재 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 히알루론산, DNA 분획물 및 인산완충생리식염수를 포함하여 조직 회복 능력이 우수하여 창상 부위가 회복되는 시간이 짧고, 창상 직후 상처 부위가 확장되는 것을 억제하여 창상에 의한 흉터를 효과적으로 제거할 수 있는 창상피복재 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

히알루론산 및 DNA 분획물을 포함하는 창상피복재 및 이의 제조방법{WOUNDDRESSINGS COMPRISING HYALURONIC ACID AND DNA FRACTION AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}
본 발명은 창상 부위의 조직을 효과적으로 재생시킬 수 있는 창상피복재 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
피부는 인체의 가장 외부에 위치한 방어벽으로써 표피, 진피, 피하지방층의 3개 층으로 구성되어 있다.
창상이란 외부의 압력에 의하여　조직의 연속성이 파괴되는 상태이다. 창상에는 찰과상, 타박상, 열상, 칼날에 의한 절창,　자창(刺創),　할창(割創), 총창(銃創),　폭창, 교창(咬創) 등이 있고, 창상의 형태로,　표피박리창(表皮離創), 피하출혈,　좌상(挫傷),　좌창(挫創), 변상창(弁狀創) 등이 있으나, 크게 나누면 폐쇄창과　개방창으로 나누어진다.
상기 창상과 같이 피부가 손상되었을 때 외부의 오염 및 병원균 등에 무방비로 노출되는 것을 방지하기 위해 창상피복재를 사용한다.
창상피복재는 크게 겔형, 필름형, 폼형, 하이드로콜로이드형 등의 형태로 분류되며 알지네이트, 히알루론산, 콜라겐 등의 천연고분자, 하이드로콜로이드 및 폴리우레탄 등을 이용하여 만들어진 창상피복재가 상용화되었다. 창상피복재는 기본적으로 삼출액의 흡수, 출혈 또는 체액의 손실 및 2차 오염방지, 가스교환이 용이하여야 하고 추가적인 외상없이 제거가 될 수 있어야 한다.
종래 건조 드레싱으로서 상처 치료에 사용되던 밴드, 거즈 등의 제품은 상처부위가 굴곡진 경우 적용이 어려우며 상처 환경을 건조하게 조성하여 새로 재생된 조직들을 보호하지 못하고 제거 시에 고통스럽다는 단점이 있다. 상기 종래 건조 드레싱의 단점을 해결하면서 상처가 났을 때 습윤 상태로 치유하는 과정이 상피세포의 재생을 촉진시킨다는 연구들을 토대로 하여 종래 건조 드레싱을 대신하는 습윤 드레싱이 개발되었다.
하지만 종래 일반적으로 사용되는 습윤 드레싱인 창상피복재는 신체의 자체적인 재생능력을 이용하며, 수동적인 조직 재생이라는 한계가 있다. 따라서 창상 부위의 조직을 효과적으로 재생할 수 있는 창상피복재를 개발하기 위해 항균성, 재생 촉진 물질들을 추가적으로 함유한 제품을 개발하기 위해 노력하고 있다.
본 발명의 목적은 창상 부위의 조직을 종래 습윤 드레싱에 비하여 효과적으로 재생시킬 수 있는 창상피복재를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 창상피복재의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예인 창상피복재는 히알루론산, DNA 분획물 및 인산완충생리식염수를 포함한다.
상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.25 내지 2 중량%일 수 있다.
상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 0.5 내지 4 중량%일 수 있다.
보다 구체적으로 상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.8 내지 1.2 중량%이고, 상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 1.4 내지 1.6 중량%일 수 있다.
상기 인산완충생리식염수는 NaCl, Na2HPO4 및 NaH2PO4를 포함할 수 있으며, pH는 6.9 내지 7.1일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 인산완충생리식염수는 NaCl 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4 4 내지 5 mg/mL 및 NaH2PO4 1 내지 2 mg/mL를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예인 창상피복재의 제조방법은 분자량이 2,000 내지 3,000 kDa 인 히알루론산과 분자량이 2,100 내지 2,500 kDa인 DNA 분획물을 총 중량에 대하여 각각 0.8 내지 1.2 중량% 및 1.4 내지 1.6 중량%로 인산완충생리식염수에 용해하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명에 따라 제조된 히알루론산 및 DNA 분획물(PN)을 포함하는 창상피복재는 체내에서 분해가 가능하여 회복 후 이차적인 제거가 필요하지 않다. 또한, 종래 시판되는 창상피복재에 비하여 조직 회복 능력이 우수하여 창상 부위가 회복되는 시간이 짧으며, 창상 직후 상처 부위가 확장되는 것을 억제하여 창상에 의한 흉터를 효과적으로 제거할 수 있다.
도 1은 슬라이드 글라스 위에 본 발명의 실시예 1 내지 6을 올려놓은 직후의 사진이다.
도 2는 상기 도 1의 실시예 1 내지 6을 30초 간 기울여 실시예들의 흘러내림 정도를 나타낸 사진이다.
도 3은 본 발명의 실시예 6과 비교예 1,2를 실험동물(쥐)의 창상 부위에 적용하여 14일까지 이틀 간격으로 창상의 크기를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실시예 6과 비교예 1,2를 실험동물(쥐)의 창상 부위에 적용하여 4일, 8일 14일의 창상 부위를 촬영한 사진이다.
도 5는 본 발명의 실시예 6과 비교예 1,2를 실험동물(쥐)의 창상 부위에 적용하여 14일이 경과한 후 창상 부위에 H&E staining (Hematoxylin & Eosin)을 실시한 결과를 나타낸 것이다.
이하, 도면을 참고하여 본 발명을 상세하게 설명한다.
이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서, 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들은 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 창상피복재는 히알루론산, DNA 분획물 및 인산완충생리식염수(PBS)를 포함한다.
상기 히알루론산은 음이온성의 다당류로 인체의 결합조직, 신경조직, 상피조직에 많이 분포하고 있는 천연고분자이다. 동물 등의 피부에서 보습 작용의 역할을 하며 조직 재생, 염증 반응, 혈관 형성 과정에도 중요한 역할을 하여 피부의 상처 치유에 관여한다.
상기 히알루론산은 창상피복재 총 중량을 기준으로 0.25 내지 2 중량%인 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 0.8 내지 1.2 중량%일 수 있다. 상기 히알루론산이 총 중량에 대하여 0.25 중량% 미만인 경우 점도가 낮아 상처 부위에 도포시 흘러내리는 문제가 발생할 수 있고, 2 중량% 초과인 경우에는 점도가 높아 제조 공정상의 문제점이 발생할 수 있다.
상기 DNA 분획물은 PDRN(Polydeoxyribonucleotide) 또는 PN (Polynucleotide)으로 어류 정액 또는 정소로부터 분리된 DNA 단편 혼합물이다. 세포 간 구성 물질인 세포 외 기질 생성을 촉진시키고, 인체 안에서 피부치유 능력을 활성화시키는 역할을 함으로써 재생능력을 회복시켜주는 기능을 한다. 또한 연골세포의 분화 및 성장을 촉진하는 역할을 한다는 것이 연구 결과로 밝혀졌다.
상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 0.5 내지 4 중량%인 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 1.4 내지 1.6 중량%일 수 있다. 상기 DNA 분획물이 0.5 중량% 미만인 경우 실질적인 조직 재생 효과를 기대하기 어렵고 4 중량%를 초과하는 경우 점도가 높아져 제조 공정상의 문제점이 발생할 수 있다.
상기 창상피복재는 상기 히알루론산이 총 중량을 기준으로 0.8 내지 1.2 중량%이고, 상기 DNA 분획물이 총 중량을 기준으로 1.4 내지 1.6 중량%인 경우 창상부위에서 흘러내리지 않아 우수한 보습효과를 장시간 유지하면서 세포재생능력을 가장 효과적으로 회복시켜줄 수 있다.
상기 창상피복재는 창상 부위에 도포되어 흘러내리지 않기 위하여 반고체상의 연고인 것이 바람직하며, 상기 히알루론산, DNA 분획물 및 인산완충생리식염수의 함량을 조절하여 점도가 50 내지 60 Pa.s인 경우 창상 부위에서 흘러내리지 않으면서도 보습효과와 세포재생능력 회복 효과가 뛰어날 수 있다.
상기 인산완충생리식염수(PBS)는 상기 히알루론산과 DNA를 용해하는 용매이며, 구체적으로 NaCl, Na2HPO4 및 NaH2PO4를 포함할 수 있다. 상기 창상피복재의 pH는 6.5 내지 7.5일 수 있으며, 상기 pH는 용매인 상기 인산완충생리식염수로 조절할 수 있으며, 상기 인산완충생리식염수의 pH는 6.9 내지 7.1인 것을 사용하는 것이 바람직하다.
상기 인산생리식염수의 pH가 6.9 내지 7.1이 되기 위해서, 상기 인산완충생리식염수는 NaCl 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4 4 내지 5 mg/mL 및 NaH2PO4 1 내지 2 mg/mL를 포함하는 것이 바람직하다.
[실험예 1: NaCl, Na 2 HPO 4 및 NaH 2 PO 4 의 조성에 따른 인산완충생리식염수 pH 측정]
NaCl, Na2HPO4 및 NaH2PO4의 조성 변화에 따른 인산완충생리식염수의 pH를 측정한 실험데이터를 하기 표 1에 나타내었다.
PBS 1 PBS 2 PBS 3
NaCl(mg/mL) 9.00 6.97 7.41
Na2HPO4(mg/mL) 0.73 2.64 4.55
NaH2PO4 (mg/mL) 0.21 0.45 1.22
pH 7.40 7.16 6.98
상기 표 1을 참조하면, NaCl를 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4를 4 내지 5 mg/mL 그리고 NaH2PO4를 1 내지 2 mg/mL로 포함하는 PBS 3의 경우 pH가 6.9에서 7.1 사이인 6.98로 가장 바람직한 것을 알 수 있다.
창상피복재의 삼투압은 히알루론산, DNA 분획물 및 인산완충생리식염수의 조성을 조절하여 조절할 수 있으며, 예를 들어, 상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.8 내지 1.2 중량%이고, 상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 1.4 내지 1.6 중량%이며, 상기 인산완충생리식염수는 총 중량을 기준으로 97.2 내지 97.8 중량%이고, 상기 인산완충생리식염수는 NaCl 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4 4 내지 5 mg/mL 및 NaH2PO4 1 내지 2 mg/mL를 포함하는 경우 본 발명의 일 실시예에 따른 창상피복재의 삼투압은 330 내지 360 mOsm/kg일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 창상피복재 제조방법은 분자량이 2,000 내지 3,000 kDa 인 히알루론산과 분자량이 2,100 내지 2,500 kDa인 DNA 분획물을 총 중량에 대하여 각각 0.8 내지 1.2 중량% 및 1.4 내지 1.6 중량%로 인산완충생리식염수에 용해하는 단계를 포함한다. 예를 들어 본 발명 일 실시예에 따른 창상피복재는 NaCl, Na2HPO4 및 NaH2PO4가 각각 7.41 mg/mL, 4.55 mg/mL 및 1.22 mg/mL로 정제수에 용해된 인산완충생리식염수에 분자량이 2,000 내지 3,000 kDa 인 히알루론산과 분자량이 2,100 내지 2,500 kDa인 DNA 분획물을 총 중량에 대하여 각각 1.0 중량% 및 1.5 중량%로 용해하여 제조할 수 있으나, 상기 예시에 제한되지 않는다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예: 창상피복재의 제조]
상기 표 1의 PBS 3를 용매로 하여, 분자량이 2,000 내지 3,000 kDa인 히알루론산(HA)과 분자량이 2,100 내지 2,500 kDa인 DNA 분획물(PN)을 총 중량에 대하여 하기 표 2의 비율로 하여 본 발명의 일 실시예에 따른 창상피복재를 제조하였다.
HA(중량%) PN(중량%)
실시예 1 0.25 1.0
실시예 2 0.5 1.0
실시예 3 1.0 1.0
실시예 4 0.25 1.5
실시예 5 0.5 1.5
실시예 6 1.0 1.5
실시예 7 0.25 0.5
실시예 8 0.25 4.0
실시예 9 2.0 0.5
[실험예 2: 창상피복재의 점도 측정]
상기 제조예를 통해 제조된 실시예 1 내지 9에 대하여 회전형 레오미터(KINEXUS pro, Malvern panalytical 社)를 이용하여 점도를 측정하였다. 적정량의 시료를 취한 후, 25 ℃에서 shear rate 1 s-1의 조건에서 측정하여 하기 표 3에 나타내었다. 도 1은 슬라이드 글라스 위에 실시예 1 내지 6을 올려놓은 직후의 사진이며, 도 2는 상기 도1의 실시예 1 내지 6을 30초 간 기울여 실시예의 흘러내림 정도를 나타낸 사진이다.
점도(Shear viscosity, Pa.s)
실시예 1 4.64
실시예 2 8.53
실시예 3 33.29
실시예 4 14.82
실시예 5 25.64
실시예 6 57.55
실시예 7 0.7581
실시예 8 174.7
실시예 9 91.67
상기 표 3 및 도 2을 통해, 본 발명을 따른 실시예에서 히알루론산 농도가 높아질수록, DNA 분획물의 농도가 높아질수록 점도가 증가하는 결과가 확인된다. 또한 실시예 3보다 낮은 점도의 경우 조성물이 제자리에 있지 않고 흘러내리는 결과가 확인된다. 그리고 실시예 6의 경우 점도가 50에서 60 Pa.s 사이의 값인 57.55 Pa.s를 가지며 창상피복재로서 가장 우수한 점도를 가지는 것으로 나타난다.
[실험예 3: 창상피복재 상처 치유 효과 평가]
상기 실험예 2에서 가장 우수한 점도를 나타낸 실시예 6을 비교예 1(테가덤, 3M 社)및 비교예 2(듀어덤하이드로액티브겔(컨바텍 社) + 테가덤(3M 社))과 함께 실험동물(쥐)의 창상 부위에 적용하여 14일까지 이틀 간격으로 창상의 크기 변화를 도 3의 그래프로 나타내었으며, 4일, 8일 14일의 창상 부위를 도 4에 나타내었다.
도 3과 4를 참고하면, 본 발명의 실시예 6이 비교예 1 및 비교예 2보다 창상의 크기가 빠르게 감소하는 결과를 확인할 수 있었다.
또한, 상기 실험을 시작한지 14일이 경과한 후 창상 부위에 H&E staining (Hematoxylin & Eosin)을 실시한 결과를 도 5에 나타내었으며, 실시예 6, 비교예 1, 비교예 2 모두 창상을 냈던 부위에 새로운 조직이 형성된 모습을 볼 수 있으며, 그 정도가 유사한 것을 확인할 수 있다.
이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (12)

  1. 히알루론산;
    DNA 분획물; 및
    인산완충생리식염수;를 포함하는 창상피복재.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.25 내지 2 중량%인 창상피복재.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 0.5 내지 4 중량%인 창상피복재.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.8 내지 1.2 중량%이고,
    상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 1.4 내지 1.6 중량%인 창상피복재.
  5. 제1항에 있어서,
    점도가 50 내지 60 Pa.s인 창상피복재.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 인산완충생리식염수는 NaCl, Na2HPO4 및 NaH2PO4를 포함하는 창상피복재.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 인산완충생리식염수의 pH는 6.9 내지 7.1인 창상피복재.
  8. 제1항에 있어서,
    pH가 6.5 내지 7.5인 창상피복재.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 인산완충생리식염수는 NaCl 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4 4 내지 5 mg/mL 및 NaH2PO4 1 내지 2 mg/mL를 포함하는 창상피복재.
  10. 제9항에 있어서,
    삼투압이 330 내지 360 mOsm/kg인 창상피복재.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 히알루론산은 총 중량을 기준으로 0.8 내지 1.2 중량%이고,
    상기 DNA 분획물은 총 중량을 기준으로 1.4 내지 1.6 중량%이며,
    상기 인산완충생리식염수는 총 중량을 기준으로 97.2 내지 97.8 중량%이고,
    상기 인산완충생리식염수는 NaCl 7 내지 8 mg/mL, Na2HPO4 4 내지 5 mg/mL 및 NaH2PO4 1 내지 2 mg/mL를 포함하는 창상피복재.
  12. 분자량이 2,000 내지 3,000 kDa 인 히알루론산과 분자량이 2,100 내지 2,500 kDa인 DNA 분획물을 총 중량에 대하여 각각 0.8 내지 1.2 중량% 및 1.4 내지 1.6 중량%로 인산완충생리식염수에 용해하는 단계;를 포함하는 창상피복재의 제조방법.
KR1020210004795A 2021-01-13 2021-01-13 히알루론산 및 dna 분획물을 포함하는 창상피복재 및 이의 제조방법 KR20220102437A (ko)

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