KR20220092654A - 세포외 소포 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 스캐폴드 단백질 및 하나 이상의(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5개 이상의) 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함할 수 있는 세포외 소포(예를 들어, 엑소좀)의 보관 및 투여용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본원에는 엑소좀을 제조하는 방법 및 엑소좀을 이용하여 다양한 의료 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법이 제공된다.
Description
EFS-WEB을 통해 전자적으로 제출된 서열 목록 참조
본 출원에서 제출된 전자적으로 제출된 서열 목록(명칭: 4000_069PC02_Seqlisting_ST25, 크기: 68,911바이트, 생성 날짜: 2020년 9월 24일)의 내용은 전체가 참조로 본원에 포함된다.
관련 출원에 대한 상호 참조
이 PCT 출원은 2019년 9월 25일에 출원된 미국 가출원 62/906,018; 및 2019년 9월 26일에 출원된 62/906,485의 우선권 이익을 주장하며; 각각 그 전체가 참조로 본원에 포함된다.
개시 분야
본 개시는 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함할 수 있는 세포외 소포(EV), 예를 들어 엑소좀의 보관 및 투여를 위한 조성물, 및 이러한 조성물의 제조 및 사용 방법에 관한 것이다.
배경
EV, 예를 들어 엑소좀은 EV는 세포간 통신의 중요한 매개체이다. 이들은 또한 암을 포함한 많은 질환의 진단 및 예후에서 중요한 바이오마커이다. 약물 전달 비히클로서, EV는 많은 치료 영역에서 새로운 치료 방식으로 기존 약물 전달 방법(예를 들어, 펩티드 면역화, DNA 백신)에 비해 이점을 제공한다. 연구의 한 영역은 EV의 유효성을 손상시키지 않으면서, 환자 투여 전의 긴 보관 기간 동안 EV를 안정적으로 포함할 수 있는 조성물의 제형화이다. 공지된 제형은 결점을 갖고 있다. 예를 들어, 특정 제형, 예를 들어 TRIS 완충액을 함유하는 제형은 pH가 다양한 온도에서 변동하는 것을 방지하지 않는다(즉, 제형이 냉동 또는 해동될 때). pH의 작은 변화라도 EV의 응집을 유도하여 이의 기능성을 감소시키거나 방지할 수 있다. 또한, 공지된 조성물은 외인성 첨가된 폴리펩티드, 예를 들어 인간 혈청 알부민 또는 킬레이트제와 같은 외부 성분을 포함한다.
따라서, 공지된 제형의 단점을 극복하고, 이에 따라 EV 기반 기술의 치료적 사용 및 기타 적용을 더 잘 가능하게 할 수 있는 EV의 보관 및 투여를 위한 효과적인 조성물이 필요하다.
개요
세포외 소포, 예를 들어 엑소좀의 보관 및 투여를 위한 조성물이 본원에서 제공된다. 본 개시의 조성물은 EV의 감소된 응집, EV의 개선된 안정성, EV 구조의 개선된 온전성, EV 상에 또는 EV에 함유된 조작된 단백질의 개선된 안정성, 및 소분자 약물 또는 단백질과 같은 수동적으로 로딩되거나 접합된 물질의 개선된 안정성을 제공한다. 이러한 조성물은 조성물 내에 함유된 EV의 안정성을 손상시키지 않으면서 냉동되고, 다양한 시간에 걸쳐 다양한 온도 범위에서 보관되고, 해동될 수 있다. 본 개시의 EV는 EV, 예를 들어 본원에서 개시된 생물학적 활성 모이어티를 포함하도록 변형된 EV의 투여가 대상체에 유익한 효과를 갖는 복수의 질환 또는 병태를 치료하기 위해 사용될 수 있도록, 생물학적 활성 모이어티를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시는 (a) 세포외 소포; (b) 당류; (c) 염화나트륨 (d) 인산칼륨; 및 (e) 인산나트륨을 포함하는 약학 조성물을 제공하며, 여기서 조성물은 pH 약 7.2의 용액 중에 존재한다. 일부 양태에서, 세포외 소포는 엑소좀이다.
일부 양태에서, 조성물은 4℃의 온도에서 적어도 약 4시간, 적어도 약 5시간, 적어도 약 6시간, 적어도 약 7시간, 적어도 약 8시간, 적어도 약 9시간, 적어도 약 10시간, 적어도 약 11시간, 적어도 약 12시간, 적어도 약 15시간, 적어도 약 20시간, 적어도 약 24시간, 적어도 약 2일, 적어도 약 3일, 적어도 약 4일, 적어도 약 5일, 적어도 약 6일, 또는 적어도 약 7일 동안 보관될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 냉동 및 해동될 수 있으며, 여기서 해동된 조성물은 pH가 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물은 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 또는 7.4의 pH를 갖는다.
일부 양태에서, pI는 약 1 내지 약 6.5의 범위이다.
일부 양태에서, 조성물은 (i) 응집물 감소, (ii) EV의 개선된 안정성, (iii) EV 구조의 개선된 온전성, (iv) EV 상에 또는 EV에 함유된 조작된 단백질의 개선된 안정성, 및 (v) 소분자 약물 또는 단백질과 같은 수동적으로 로딩되거나 접합된 물질의 개선된 안정성을 갖는다.
일부 양태에서, 당류는 단당류, 이당류, 삼당류, 올리고당류, 다당류, 당 알코올, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 약 340.00 g/mol 내지 약 380.00 g/mol의 분자량을 갖는다. 일부 양태에서, 당류는 락토스, 글루코스, 수크로스, 트레할로스, 덱스트로스, 및/또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 약 90.00 g/mol 내지 약 190.00 g/mol의 분자량을 갖는 당 알코올이다. 일부 양태에서, 당 알코올은 글리세롤, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 및/또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 수크로스 또는 트레할로스이다. 일부 양태에서, 당류는 약 5% w/v의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 본 개시는 (i) 세포외 소포 및 (ii) 약 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스인 당류를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 개선된 안정성을 갖는다.
일부 양태에서, 조성물은 약 6 mS/cm 내지 약 10 mS/cm의 전도도를 갖는다. 일부 양태에서, 전도도는 6 mS/cm 내지 약 7 mS/cm, 약 7 mS/cm 내지 약 8 mS/cm, 약 8 mS/cm 내지 약 9 mS/cm, 또는 약 9 mS/cm 및 약 10 mS/cm이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 6 mS/cm, 약 7 mS/cm, 약 8 mS/cm, 약 9 mS/cm, 또는 약 10 mS/cm이다.
일부 양태에서, 조성물은 염화나트륨을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 염화나트륨은 약 10 mM 내지 약 134 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 130 mM, 약 20 mM 내지 약 120 mM, 약 30 mM 내지 약 110 mM, 약 40 mM 내지 약 100 mM, 약 50 mM 내지 약 90 mM, 약 60 mM 내지 약 80 mM, 약 70 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 95 mM, 약 45 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 70 mM, 약 45 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 60 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 또는 약 51 mM 내지 약 54 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM, 약 20 mM, 약 30 mM, 약 40 mM, 약 50 mM, 약 60 mM, 약 70 mM, 약 80 mM, 약 90 mM, 또는 약 100 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 39 mM, 약 40 mM, 약 41 mM, 약 42 mM, 약 43 mM, 약 44 mM, 약 45 mM, 약 46 mM, 약 47 mM, 약 48 mM, 약 49 mM, 또는 약 50 mM이다.
일부 양태에서, 조성물은 인산염 완충액을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 인산칼륨, 인산나트륨, 인산수소이나트륨, 인산이수소칼륨, 인산이칼륨, 및/또는 이의 조합을 포함하는 적어도 하나의 인산염 화합물을 포함한다.
일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 2, 약 1:약 3, 약 1:약 4 또는 약 1:약 5의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 3의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 2의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다.
일부 양태에서, 본 개시는 용액 중 (i) 세포외 소포, (ii) 인산칼륨, 및 (iii) 인산나트륨을 포함하는 약학 조성물을 제공하며, 여기서 인산칼륨 및 인산나트륨의 비는 약 1 내지 약 3 또는 약 1 내지 약 2이다.
일부 양태에서, 용액은 7.1 내지 7.3의 pH를 갖는다.
일부 양태에서, 인산칼륨은 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 19 mM, 약 3 mM 내지 약 18 mM, 약 4 mM 내지 약 17 mM, 약 5 mM 내지 약 16 mM, 또는 약 5 mM 내지 약 15 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 4.5 mM, 약 4.6 mM, 약 4.7 mM, 약 4.8 mM, 약 4.9 mM, 약 5.0 mM, 약 5.1 mM, 약 5.2 mM, 약 5.3 mM, 약 5.4 mM, 또는 약 5.5 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 5.15 mM이다.
일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.0 mM, 약 15.1 mM, 약 15.2 mM, 약 15.3 mM, 약 15.4 mM, 약 15.5 mM, 약 15.6 mM, 약 15.7 mM, 약 15.8 mM, 약 15.9 mM, 약 16.0, 약 16.1 mM, 약 16.2 mM, 약 16.3 mM, 약 16.4 mM, 또는 약 16.5 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 15.4 mM이다.
일부 양태에서, 인산칼륨은 일염기성 인산칼륨이다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 약 10 mM 내지 약 30, 약 11 mM 내지 약 29 mM, 약 12 mM 내지 약 28 mM, 약 13 mM 내지 약 27 mM 또는 약 14 mM 내지 약 26 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 제39항에 있어서, 인산나트륨은 약 14.5 mM, 약 14.6 mM, 약 14.7 mM, 약 14.8 mM, 약 14.9 mM, 약 15.0 mM, 약 15.1 mM, 약 15.2 mM, 약 15.3 mM, 약 15.4 mM, 또는 약 15.5 mM의 농도로 조성물에 존재하는 조성물.
일부 양태에서, 인산나트륨의 농도는 14.9 mM이다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.5 mM, 약 26.6 mM, 약 26.7 mM, 약 26.8 mM, 약 26.9 mM, 약 27.0 mM, 약 27.1 mM, 약 27.2 mM, 약 27.3 mM, 약 27.4 mM, 또는 약 27.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨의 농도는 27.1 mM이다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 이염기성 인산나트륨 칠수화물이다.
일부 양태에서, 조성물은 항산화제를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 항산화제는 D-메티오닌, L-메티오닌. 아스코르브산, 에리소르빈산, 아스코르브산나트륨, 티오글리세롤, 시스테인, 아세틸시스테인, 시스틴, 디티오에리트레이톨, 글루타치온, 토코페롤, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 중황산나트륨, 디티온산나트륨, A-토코페롤, γ-토코페롤, 갈산프로필, 아스코르빌 팔미테이트, 메타중아황산나트륨, 티오우레아, 티오황산나트륨, 갈산프로필 및 티오글리콜산나트륨을 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 동결건조되지 않는다.
일부 양태에서, 조성물은 킬레이트제를 포함하지 않는다.
일부 양태에서, 조성물은 알부민을 포함하지 않는다.
일부 양태에서, 본 개시는 (a) 약 5% w/v 농도의 수크로스, (b) 약 50 mM 농도의 염화나트륨; (c) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨; 및 (d) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함하는 조성물을 제공하며; 여기서 조성물은 pH 7.2 및 전도도 8.8 mS/cm의 용액 중에 존재한다.
일부 양태에서, 본 개시는 (a) 약 5% w/v 농도의 수크로스, (b) 약 40 mM 농도의 염화나트륨; (c) 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨; 및 (d) 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함하는 조성물을 제공하며; 여기서 조성물은 pH 7.2 및 전도도 7.2 mS/cm의 용액 중에 존재한다.
일부 양태에서, 조성물은 약 -20℃ 내지 약 -80℃의 온도에서 보관될 수 있고, 여기서 세포외 소포의 안정성은 감소되지 않는다. 일부 양태에서, 조성물은 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월, 약 6개월, 약 7개월, 약 8개월, 약 9개월, 약 10개월, 약 11개월, 약 12개월, 약 1년, 약 2년, 약 3년, 약 4년 또는 약 5년 동안 보관될 수 있다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 엑소좀이다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 스캐폴드 단백질을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 스캐폴드 X이다. 일부 양태에서, 페이로드는 스캐폴드 단백질에 연결된다. 일부 양태에서, 페이로드는 링커에 의해 스캐폴드 단백질에 연결된다. 일부 양태에서, 링커는 폴리펩티드이다. 일부 양태에서, 링커는 비-폴리펩티드 모이어티이다. 일부 양태에서, 스캐폴드 X는 세포외 소포의 외부 표면에 페이로드를 고정할 수 있는 스캐폴드 단백질이다.
일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 프로스타글란딘 F2 수용체 음성 조절인자(PTGFRN 단백질)를 포함한다.
일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 PTGFRN 단백질 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 서열번호 1 내지 7 및 33 중 어느 하나에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 서열번호 1과 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 약 100% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 생물학적 활성 모이어티에 융합된다. 일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 생물학적 활성 모이어티에 융합되지 않는다.
일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 STING 작용제를 포함한다. 일부 양태에서, STING 작용제는 CL656을 포함한다. 일부 양태에서, STING 작용제는 CL656의 이성질체 A, 이성질체 B, 이성질체 C, 또는 이성질체 D이다. 일부 양태에서, STING 작용제는 스캐폴드 단백질에 융합되지 않는다.
일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 IL-12이다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 CD40L이다. 다른 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 FTL3L이다.
일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 스캐폴드 단백질에 융합된다.
일부 양태에서, 조성물은 비경구, 국소, 정맥내, 경구, 피하, 동맥내, 피내, 경피, 직장, 두개내, 복강내, 비강내, 종양내, 근육내 경로에 의해, 또는 흡입제로서 투여될 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시는 (a) 세포외 소포; (b) 당류; (c) 염화나트륨 (d) 인산칼륨; 및 (e) 인산나트륨을 조합하는 단계를 포함하는 약학 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 세포외 소포는 엑소좀이다.
일부 양태에서, 본 개시는 세포외 소포 및 약 5% w/v의 농도의 수크로스 또는 트레할로스인 당류를 조합하는 단계를 포함하는 약학 조성물의 제조 방법을 제공하며, 여기서 조성물은 1% 내지 4% 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 조성물에 비해 개선된 안정성을 나타낸다.
일부 양태에서, 본 개시는 세포외 소포 및 인산염 화합물을 조합하는 단계를 포함하는 약학 조성물의 제조 방법을 제공하며, 여기서 인산염 화합물은 7.1 내지 7.3의 pH를 생성하는 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다.
일부 양태에서, 조성물의 전도도는 조정될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물의 전도도는 약 7.1 내지 약 7.3 mS/cm이다. 일부 양태에서, 본 개시는 전도도가 7.23 mS/cm임을 제공한다.
일부 양태에서, 본 개시는 본원에서 개시된 조성물을 대상체에 투여하는 단계를 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 질환 또는 병태는 암, 섬유증, 혈우병, 당뇨병, 성장 인자 결핍, 안과 질환, 폼페병, 리소좀 저장 장애, 점액낭종증, 낭성 섬유증, 뒤센 및 베커 근이영양증, 트랜스티레틴 아밀로이드증, 혈우병 A, 혈우병 B, 아데노신-데아미나제 결핍, 레버 선천적 흑암증, X-연관 부신백질영양증, 이색성 백질영양증, OTC 결핍, 글리코겐 저장 질환 1A, 크리글러-나자르 증후군, 원발성 고옥살산혈증 1형, 급성 간헐적 과증식 포르피린증, 페닐케톤뇨, 선천성 고콜레스테롤혈증, 점액다당증 유형 VI, α1 항트립신 결핍, 및 고콜레스테롤혈증이다. 일부 양태에서, 암은 방광암, 자궁경부암, 신세포암, 고환암, 결장직장암, 폐암, 두경부암, 난소암, 림프종, 간암, 교모세포종, 흑색종, 골수종, 백혈병, 췌장암, 또는 이의 조합이다.
일부 양태에서, 본 개시는 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약학 조성물을 제공한다.
일부 양태에서, 본 개시는 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약제의 제조에서 본원에서 개시된 조성물의 용도를 제공한다.
도 1a는 본 개시의 양태에 따른, 단백질 X 및 생물학적 활성 모이어티를 함유하는 엑소좀의 개략도이다. 표면 단백질 CD9, CD81및 TSG101과 스핑고미엘린 지질 도메인을 나타낸다. 엑소좀 구성요소 mRNA, miRNA 및 대사산물을 추가로 나타낸다.
도 1b는 본 개시의 양태에 따른 천연(검은색 사각형) 및 단백질 X-함유 엑소좀(원(circle))의 제타 전위(mV 단위)를 나타내는 그래프이다. X축은 pH이다. Y축은 mV 단위의 제타 전위이다.
도 2a는 본 개시의 양태에 따른 상이한 pH 값에서 천연 엑소좀(검은색 사각형) 및 단백질 X 엑소좀(원)의 Z-평균(nm)을 나타내는 그래프이다. X축은 pH이다. Y축은 nm 단위의 Z 평균이다.
도 2b는 본 개시의 양태에 따른 EV의 안정한 pH 범위(둥근 사각형)를 나타내는 개략도이다. 나타낸 안정한 pH 범위는 7 내지 8이다. 화살표는 pH가 너무 낮거나(EV 응집) 너무 높은 경우(지질 가수분해) EV에 대한 pH 변화 결과를 나타낸다.
도 2c는 본 개시의 양태에 따른, 단백질 X EV를 나타내는 극저온 투과 전자 현미경사진의 확대된 이미지이다. 엑소좀은 건조되지 않고 물에서 유리화되었다. 이 이미지는 얼음 결정이 없는 수중 엑소좀을 나타낸다. 단백질 X EV의 이론적 등전점(pI)은 6.2로 표시된다. 단백질 X 함유 EV의 크기는 약 100 nm로 표시된다.
도 2d는 본 개시의 양태에 따른 다양한 조성물을 함유하는 미세원심분리기 튜브의 사진이다. 튜브 A에는 3회 냉동 및 해동된 수크로스 + 완충액이 들어 있다. 튜브 B에는 3회 냉동 및 해동된 완충액만 들어 있다. 튜브 C에는 3회 냉동 및 해동된 Milli-Q 수(water)만 들어 있다. 튜브는 색상 변화와 탁도 둘 다의 존재를 나타낸다. 또한 소금은 순수한 물 샘플에 비해 어느 정도 보호 기능을 제공함을 나타낸다.
도 3a는 본 개시의 양태에 따라, 0시간 내지 12시간의 기간 동안, -80℃, 4℃ 및 22℃의 온도에서 보관된 엑소좀 함유 완충액을 사용하여 상층액에서 STING 작용제와 비교하여 엑소좀에서 STING 작용제 농도(μM 단위)의 분포를 나타내는 그래프이다. 이 그래프는 도 3b의 0시간 내지 12시간 시점을 나타낸다. X축은 시간 단위의 시간이다. Y축은 μM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 3b는 본 개시의 양태에 따라, 12시간 내지 72시간의 기간 동안, -80℃, 4℃ 및 22℃의 온도에서 보관된 엑소좀 함유 완충액을 사용하여 상층액에서 STING 작용제에 비해 엑소좀 내 STING 작용제 농도(μM 단위)의 분포를 나타내는 그래프이다. X축은 시간 단위의 시간이다. Y축은 μM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 3c는 본 개시의 양태에 따른, 투여 4시간 후 C57BL/6 마우스에서 유전자 발현에 대한 인산염 완충 식염수, 완충액 중 천연 엑소좀, 및 완충액 중 STING 작용제를 함유하는 엑소좀의 투여 효과를 나타내는 막대 그래프이다. 엑소좀 함유 완충액은 4℃ 및 22℃에서 24시간 또는 72시간 동안 보관했다. X축은 상이한 시험 물품이다. Y축은 표준화된 유전자 발현 수준이다.
도 3d는 본 개시의 양태에 따라, 경시적으로 C57BL/6 마우스의 B16-F10 흑색종 종양에서 유리 STING 작용제(파선, 하단) 및 엑소좀-캡슐화 STING 작용제(실선, 상단)의 종양내 농도를 나타내는 그래프이다. X축은 분 단위의 시간이다. Y축은 nM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 4a 내지 도 4c는 본 개시의 양태에 따른 엑소좀에 캡슐화된 STING 작용제를 제조하기 위한 공정의 개략도이다. 도 4a는 엑소좀을 함유하는 완충 용액을 STING 작용제로 포화시켜 STING 작용제의 일부가 엑소좀 내로 확산되도록 함으로써 엑소좀 내로의 STING 작용제의 로딩을 나타낸다. 도 4b는 엑소좀의 정제(즉, 엑소좀 내로 확산되지 않은 STING 작용제의 제거)를 나타낸다. 도 4c는 STING 작용제-함유 엑소좀의 평형(즉, 엑소좀에서 나와 주변 완충액으로의 STING 작용제의 수동 확산)을 나타낸다.
도 5는 엑소좀과 연관된 IL-12 함량(ng/mL)을 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축은 IL-12의 함량(ng/mL)이다. 왼쪽에서 오른쪽으로 막대는 (1) 대조군, 과산화물 없음; (2) 대조군, 0.05% 과산화물; (3) 티오설페이트, 과산화물 없음; (4) 티오설페이트, 0.05% 과산화물; (5) 아스코르베이트, 과산화물 없음; (6) 아스코르베이트, 0.05% 과산화물; (7) 글루타치온, 과산화물 없음; (8) 글루타치온, 0.05% 과산화물; (9) 메티오닌, 과산화물 없음; (10) 메티오닌, 0.05% 과산화물을 나타낸다.
도 6은 상이한 시기 후, 엑소좀의 지름(nm)을 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축은 엑소좀의 지름(nm)이다. 왼쪽에서 오른쪽으로 막대는 (1) 대조군; (2) 제어 및 과산화수소; (3) 티오설페이트; (4) 티오설페이트 및 과산화수소; (5) 아스코르베이트; (6) 아스코르베이트 및 과산화수소; (7) 글루타치온; (8) 글루타치온 및 과산화수소; (9) 메티오닌; (10) 메티오닌 및 과산화수소를 나타낸다.
도 7은 상이한 시기 후, 엑소좀 용액의 PDI를 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축 다분산도 지수.
도 1b는 본 개시의 양태에 따른 천연(검은색 사각형) 및 단백질 X-함유 엑소좀(원(circle))의 제타 전위(mV 단위)를 나타내는 그래프이다. X축은 pH이다. Y축은 mV 단위의 제타 전위이다.
도 2a는 본 개시의 양태에 따른 상이한 pH 값에서 천연 엑소좀(검은색 사각형) 및 단백질 X 엑소좀(원)의 Z-평균(nm)을 나타내는 그래프이다. X축은 pH이다. Y축은 nm 단위의 Z 평균이다.
도 2b는 본 개시의 양태에 따른 EV의 안정한 pH 범위(둥근 사각형)를 나타내는 개략도이다. 나타낸 안정한 pH 범위는 7 내지 8이다. 화살표는 pH가 너무 낮거나(EV 응집) 너무 높은 경우(지질 가수분해) EV에 대한 pH 변화 결과를 나타낸다.
도 2c는 본 개시의 양태에 따른, 단백질 X EV를 나타내는 극저온 투과 전자 현미경사진의 확대된 이미지이다. 엑소좀은 건조되지 않고 물에서 유리화되었다. 이 이미지는 얼음 결정이 없는 수중 엑소좀을 나타낸다. 단백질 X EV의 이론적 등전점(pI)은 6.2로 표시된다. 단백질 X 함유 EV의 크기는 약 100 nm로 표시된다.
도 2d는 본 개시의 양태에 따른 다양한 조성물을 함유하는 미세원심분리기 튜브의 사진이다. 튜브 A에는 3회 냉동 및 해동된 수크로스 + 완충액이 들어 있다. 튜브 B에는 3회 냉동 및 해동된 완충액만 들어 있다. 튜브 C에는 3회 냉동 및 해동된 Milli-Q 수(water)만 들어 있다. 튜브는 색상 변화와 탁도 둘 다의 존재를 나타낸다. 또한 소금은 순수한 물 샘플에 비해 어느 정도 보호 기능을 제공함을 나타낸다.
도 3a는 본 개시의 양태에 따라, 0시간 내지 12시간의 기간 동안, -80℃, 4℃ 및 22℃의 온도에서 보관된 엑소좀 함유 완충액을 사용하여 상층액에서 STING 작용제와 비교하여 엑소좀에서 STING 작용제 농도(μM 단위)의 분포를 나타내는 그래프이다. 이 그래프는 도 3b의 0시간 내지 12시간 시점을 나타낸다. X축은 시간 단위의 시간이다. Y축은 μM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 3b는 본 개시의 양태에 따라, 12시간 내지 72시간의 기간 동안, -80℃, 4℃ 및 22℃의 온도에서 보관된 엑소좀 함유 완충액을 사용하여 상층액에서 STING 작용제에 비해 엑소좀 내 STING 작용제 농도(μM 단위)의 분포를 나타내는 그래프이다. X축은 시간 단위의 시간이다. Y축은 μM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 3c는 본 개시의 양태에 따른, 투여 4시간 후 C57BL/6 마우스에서 유전자 발현에 대한 인산염 완충 식염수, 완충액 중 천연 엑소좀, 및 완충액 중 STING 작용제를 함유하는 엑소좀의 투여 효과를 나타내는 막대 그래프이다. 엑소좀 함유 완충액은 4℃ 및 22℃에서 24시간 또는 72시간 동안 보관했다. X축은 상이한 시험 물품이다. Y축은 표준화된 유전자 발현 수준이다.
도 3d는 본 개시의 양태에 따라, 경시적으로 C57BL/6 마우스의 B16-F10 흑색종 종양에서 유리 STING 작용제(파선, 하단) 및 엑소좀-캡슐화 STING 작용제(실선, 상단)의 종양내 농도를 나타내는 그래프이다. X축은 분 단위의 시간이다. Y축은 nM 단위의 STING 작용제의 농도이다.
도 4a 내지 도 4c는 본 개시의 양태에 따른 엑소좀에 캡슐화된 STING 작용제를 제조하기 위한 공정의 개략도이다. 도 4a는 엑소좀을 함유하는 완충 용액을 STING 작용제로 포화시켜 STING 작용제의 일부가 엑소좀 내로 확산되도록 함으로써 엑소좀 내로의 STING 작용제의 로딩을 나타낸다. 도 4b는 엑소좀의 정제(즉, 엑소좀 내로 확산되지 않은 STING 작용제의 제거)를 나타낸다. 도 4c는 STING 작용제-함유 엑소좀의 평형(즉, 엑소좀에서 나와 주변 완충액으로의 STING 작용제의 수동 확산)을 나타낸다.
도 5는 엑소좀과 연관된 IL-12 함량(ng/mL)을 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축은 IL-12의 함량(ng/mL)이다. 왼쪽에서 오른쪽으로 막대는 (1) 대조군, 과산화물 없음; (2) 대조군, 0.05% 과산화물; (3) 티오설페이트, 과산화물 없음; (4) 티오설페이트, 0.05% 과산화물; (5) 아스코르베이트, 과산화물 없음; (6) 아스코르베이트, 0.05% 과산화물; (7) 글루타치온, 과산화물 없음; (8) 글루타치온, 0.05% 과산화물; (9) 메티오닌, 과산화물 없음; (10) 메티오닌, 0.05% 과산화물을 나타낸다.
도 6은 상이한 시기 후, 엑소좀의 지름(nm)을 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축은 엑소좀의 지름(nm)이다. 왼쪽에서 오른쪽으로 막대는 (1) 대조군; (2) 제어 및 과산화수소; (3) 티오설페이트; (4) 티오설페이트 및 과산화수소; (5) 아스코르베이트; (6) 아스코르베이트 및 과산화수소; (7) 글루타치온; (8) 글루타치온 및 과산화수소; (9) 메티오닌; (10) 메티오닌 및 과산화수소를 나타낸다.
도 7은 상이한 시기 후, 엑소좀 용액의 PDI를 나타내는 그래프이다. X축은 엑소좀이 보관된 시간(일)의 양이다. Y축 다분산도 지수.
본 개시는 EV 및 페이로드의 안정성 및 온전성이 냉동 및 해동을 비롯한 다양한 시기 및 온도를 통해 유지되는 하나 이상의 생물학적 활성 모이어티를 포함할 수 있는 EV, 예를 들어 엑소좀의 보관 및 투여용 조성물에 대한 것이다. 여러 생물학적 활성 모이어티가 EV(예를 들어, 엑소좀)의 외부 표면에 있는 하나 이상의 스캐폴드 모이어티에 부착(또는 연결)될 수 있다. 다양한 양태의 비제한적인 예가 본원에 개시되어 있다.
I. 정의
본 기재를 보다 쉽게 이해할 수 있도록, 먼저 특정 용어를 정의한다. 추가 정의는 상세한 설명 전반에 걸쳐 나타낸다.
"a" 또는 "an" 물체라는 용어는 하나 이상의 해당 물체를 나타낸다; 예를 들어, "뉴클레오티드 서열"은 하나 이상의 뉴클레오티드 서열을 나타내는 것으로 이해된다. 이와 같이, 용어 "a"(또는 "an"), "하나 이상" 및 "적어도 하나"는 본원에서 상호 교환가능하게 사용될 수 있다.
또한, 본원에서 사용된 "및/또는"은 다른 것과 함께 또는 없이 두 개의 지정된 특징 또는 구성요소 각각의 구체적 개시로 간주되어야 한다. 따라서, 본원에서 "A 및/또는 B"와 같은 어구에서 사용된 용어 "및/또는"은 "A 및 B", "A 또는 B", "A"(단독) 및 "B"(단독)를 포함하려는 것이다. 유사하게, "A, B, 및/또는 C"와 같은 어구에서 사용된 "및/또는"이라는 용어는 각각의 하기 양태: A, B, 및 C; A, B 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B와 C; A(단독); B(단독); 및 C(단독)를 포괄하려는 것이다.
양태가 "포함하는"이라는 언어로 본원에 기재되는 곳이면 어디든지 용어 "구성되는" 및/또는 "본질적으로 구성되는"로 기재된 다른 유사한 양태가 또한 제공된다는 것이 이해된다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시가 관련된 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 예를 들어, 문헌[The Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; 및 The Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press]은 본 개시에 사용된 많은 용어의 일반 사전을 당업자에게 제공한다.
단위, 접두사 및 기호는 이의 Systme International de Unites (SI) 허용 형태로 표시된다. 숫자 범위에는 범위를 정의하는 숫자가 포함된다. 달리 표시되지 않는 한, 뉴클레오티드 서열은 5'에서 3' 배향으로 왼쪽에서 오른쪽으로 작성된다. 아미노산 서열은 아미노에서 카복시 배향으로 왼쪽에서 오른쪽으로 작성된다. 본원에 제공된 표제는 전체로서 명세서를 참조하여 가질 수 있는 본 개시의 다양한 양태의 제한이 아니다. 따라서, 바로 아래에서 정의되는 용어는 그 전체가 명세서를 참조하여 보다 완전히 정의된다.
"약"이라는 용어는 본원에서 대략적으로, 대략, 주변, 또는 그 영역을 의미하는 데 사용된다. "약"이라는 용어가 수치 범위와 함께 사용되는 경우, 나타낸 수치 값의 위아래 경계를 확장하여 해당 범위를 수식한다. 일반적으로, "약"이라는 용어는 예를 들어 10퍼센트 위 또는 아래의(더 높거나 더 낮은) 분산에 의해 명시된 값 위 및 아래의 수치 값을 수식할 수 있다.
본원에서 사용되는 "세포외 소포" 또는 "EV"라는 용어는 내부 공간을 둘러싸는 막을 포함하는 세포 유래 소포를 의미한다. 세포외 소포는 이들이 유래된 세포보다 더 작은 지름을 갖는 모든 막-결합 소포(예를 들어, 엑소좀, 나노소포)를 포함한다. 일부 양태에서, 세포외 소포는 지름이 20 nm 내지 1000 nm 범위이며, 내부 공간(즉, 내강) 내에, 세포외 소포의 외부 표면 상에 디스플레이되고/되거나 막을 가로지르는 다양한 거대분자 페이로드를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 페이로드는 핵산, 단백질, 탄수화물, 지질, 소분자, 및/또는 이의 조합을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, EV는 다수의(예를 들어, 2개 이상의) 페이로드 또는 다른 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 특정 양태에서, 세포외 비히클은 하나 이상의 스캐폴드 모이어티를 추가로 포함할 수 있다. 예로서 및 제한 없이, 세포외 소포는 세포사멸체, 세포 단편, 직접 또는 간접 조작(예를 들어, 연속 압출 또는 알칼리성 용액으로 처리)에 의해 세포로부터 유래된 소포, 소포화된 소기관, 및 살아있는 세포에 의해(예를 들어, 직접적인 원형질막 발아(budding) 또는 후기 엔도좀과 원형질막의 융합에 의해) 생산된 소포를 포함한다. 세포외 소포는 살아있는 유기체 또는 죽은 유기체, 외이식된 조직 또는 기관, 원핵 또는 진핵 세포, 및/또는 배양된 세포로부터 유래될 수 있다. 일부 양태에서, 세포외 소포는 하나 이상의 트랜스유전자 산물을 발현하는 세포에 의해 생산된다. 본원에 개시된 EV는 변형되었고, 따라서 자연 발생 EV를 포함하지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "엑소좀"은 지름이 20 nm 내지 300 nm(예를 들어, 40 nm 내지 200 nm)인 세포외 소포를 나타낸다. 엑소좀은 내부 공간(즉, 내강)을 둘러싸는 막을 포함하고, 일부 양태에서 직접 원형질막 발아에 의해 또는 후기 엔도좀과 원형질막의 융합에 의해 세포(예를 들어, 생산체 세포)로부터 생산될 수 있다. 일부 양태에서, 엑소좀은 다수(예를 들어, 2개 이상)의 외인성 생물학적 활성 모이어티(예를 들어, 본원에서 기재된 바와 같음)를 포함한다. 특정 양태에서, 엑소좀은 하나 이상의 스캐폴드 모이어티를 추가로 포함한다. 하기에 기재된 바와 같이, 엑소좀은 생산체 세포로부터 유래될 수 있고, 이의 크기, 밀도, 생화학적 파라미터, 또는 이의 조합에 기반하여 생산체 세포로부터 단리될 수 있다. 일부 양태에서, 본 개시의 EV(예를 들어, 엑소좀)는 하나 이상의 트랜스유전자 산물을 발현하는 세포에 의해 생산된다. 본 개시의 엑소좀은 변형되었고, 따라서 자연 발생 엑소좀을 포함하지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "나노소포"는 지름이 20 nm 내지 250 nm(예를 들어, 30 nm 내지 150 nm)인 세포외 소포를 나타내며, 나노소포가 조작 없이는 세포에 의해 생산되지 않도록 직접 또는 간접 조작에 의해 세포(예를 들어, 생산체 세포)로부터 생산된다. 나노소포를 생산하기 위한 세포의 적절한 조작은 연속 압출, 알칼리성 용액으로의 처리, 초음파 처리 또는 이의 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서, 나노소포의 생산은 생산체 세포의 파괴를 초래할 수 있다. 일부 양태에서, 본원에서 기재된 나노소포 집단은 원형질막으로부터의 직접 출아 또는 원형질막과 후기 엔도좀의 융합에 의해 세포로부터 유래된 소포가 실질적으로 없다. 일부 양태에서, 나노소포는 다수의(예를 들어, 적어도 2개의) 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 특정 양태에서, 나노소포는 하나 이상의 스캐폴드 모이어티를 추가로 포함한다. 일단 생산체 세포로부터 유래된 나노소포는 그 크기, 밀도, 생화학적 매개변수 또는 이의 조합에 기반하여 생산체 세포로부터 단리될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 나노소포는 변형되었고, 따라서 자연 발생 나노소포를 포함하지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "표면-조작 EV, 예를 들어, 엑소좀"(예를 들어, 스캐폴드 X-조작 EV, 예를 들어, 엑소좀)은 막 또는 그 조성이 변형된 표면을 갖는 EV(예를 들어, 엑소좀)를 나타내므로, 조작된 EV(예를 들어, 엑소좀)의 막 또는 표면은 변형 이전의 EV 또는 자연 발생 EV의 것과 다르다. 조작은 EV(예를 들어, 엑소좀)의 표면 상에 또는 EV(예를 들어, 엑소좀)의 막에 있을 수 있으므로 EV, 예를 들어 엑소좀의 표면이 변화된다. 예를 들어, 막은 단백질, 지질, 소분자, 탄수화물 등의 그 조성이 변형된다. 조성은 화학적, 물리적 또는 생물학적 방법에 의해 또는 이전에 세포에서 생산되어 변화될 수 있거나 화학적, 물리적 또는 생물학적 방법에 의해 동시에 변형될 수 있다. 구체적으로, 조성은 유전 공학에 의해 또는 이전에 유전 공학에 의해 변형된 세포로부터 생산되어 변화될 수 있다. 일부 양태에서, 표면-조작 EV, 예를 들어, 엑소좀은 다수의(예를 들어, 적어도 2개의) 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 특정 양태에서, 외인성 생물학적 활성 모이어티는 외인성 단백질(즉, EV, 예를 들어 엑소좀이 자연적으로 발현하지 않는 단백질) 또는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 표면 상에 노출될 수 있는 이의 단편 또는 변이체를 포함할 수 있거나 EV, 예를 들어, 엑소좀의 표면 상에 노출된 모이어티에 대한 고정점(부착)일 수 있다. 다른 양태에서, 표면-조작 EV, 예를 들어, 엑소좀은 EV, 예를 들어 엑소좀의 표면에 노출될 수 있는 천연 엑소좀 단백질(예를 들어, 스캐폴드 X) 또는 이의 단편 또는 변이체의 더 높은 발현(예를 들어, 더 많은 수)을 포함하거나 EV, 예를 들어 엑소좀의 표면 상에 노출된 모이어티에 대한 고정점(부착)일 수 있다.
EV, 예를 들어 본원에서 기재된 엑소좀의 맥락에서 사용될 때 용어 "변형된"은 변형된 EV, 예를 들어 엑소좀이 자연 발생 EV, 예를 들어 엑소좀과 다르도록 하는 EV, 예를 들어 엑소좀 및/또는 그 생산체 세포의 변경 또는 조작을 나타낸다. 일부 양태에서, 변형된 EV, 예를 들어, 본원에서 기재된 엑소좀은 자연 발생 EV, 예를 들어 엑소좀의 막에 비해 단백질, 지질, 소분자, 탄수화물 등의 조성이 상이한 막을 포함한다(예를 들어, 막은 더 높은 밀도 또는 더 많은 수의 천연 엑소좀 단백질을 포함하고/하거나 막은 엑소좀에서 자연적으로 확인되지 않는 다수의(예를 들어, 적어도 2개의) 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 엑소좀에서 자연적으로 확인되지 않는 생물학적 활성 모이어티는 또한 "외인성 생물학적 활성 모이어티"로 기재된다. 특정 양태에서, 막에 대한 이러한 변형은 EV, 예를 들어 엑소좀(예를 들어, 표면-조작 EV, 예를 들어, 본원에서 기재된 엑소좀)의 외부 표면을 변화시킨다.
본원에서 사용되는 용어 "스캐폴드 모이어티"는 페이로드 또는 임의의 다른 관심 외인성 생물학적 활성 모이어티를 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강 표면 상에 또는 EV, 예를 들어 엑소좀의 외부 표면 상에 고정하기 위해 사용될 수 있는 분자를 나타낸다. 특정 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 합성 분자를 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 비-폴리펩티드 모이어티를 포함한다. 다른 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 EV, 예를 들어 엑소좀에 자연적으로 존재하는 지질, 탄수화물, 또는 단백질을 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 EV, 예를 들어 엑소좀에 자연적으로 존재하지 않는 지질, 탄수화물, 또는 단백질을 포함한다. 특정 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 스캐폴드 X이다. 추가 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 스캐폴드 X 및 또 다른 스캐폴드 모이어티를 포함한다. 본 개시과 함께 사용될 수 있는 다른 스캐폴드 모이어티의 비제한적 예는 아미노펩티다제 N(CD13); 네프리라이신(Neprilysin), AKA 막 메탈로엔도펩티다제(MME); 엑토뉴클레오티드 피로포스파타제/포스포디에스터라제 패밀리 구성원 1(ENPP1); 뉴로필린(Neuropilin)-1(NRP1); CD9, CD63, CD81, PDGFR, GPI 고정 단백질, 락타데린, LAMP2 및 LAMP2B를 포함한다.
본원에서 "스캐폴드 X"라는 용어는 최근 엑소좀 표면 상에서 확인된 엑소좀 단백질을 나타낸다. 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, 미국 특허 제10,195,290호를 참고한다. 스캐폴드 X 단백질의 비제한적 예는 프로스타글란딘 F2 수용체 음성 조절인자("PTGFRN 단백질"); 바시긴("BSG 단백질"); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 2("IGSF2 단백질"); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 3("IGSF3 단백질"); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 8("IGSF8 단백질"); 인테그린 베타-1("ITGB1 단백질"), 인테그린 알파-4("ITGA4 단백질"), 4F2 세포 표면 항원 중쇄("SLC3A2 단백질"), 및 ATP 수송체 단백질 클래스("ATP1A1 단백질", "ATP1A2 단백질", "ATP1A3 단백질", "ATP1A4 단백질", "ATP1B3 단백질", "ATP2B1 단백질", "ATP2B2 단백질", "ATP2B3 단백질", "ATP2B 단백질")를 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 X 단백질은 전체 단백질 또는 이의 단편(예를 들어, 기능적 단편, 예를 들어 EV, 예를 들어, 엑소좀의 외부 표면 상에 또는 내강 표면 상에 또 다른 모이어티를 고정할 수 있는 가장 작은 단편)일 수 있다. 일부 양태에서, 스캐폴드 X는 엑소좀의 외부 표면 또는 내강 표면에 모이어티(예를 들어, 페이로드)를 고정할 수 있다.
본원에서 "스캐폴드 Y"라는 용어는 엑소좀의 내강 표면 내에서 새롭게 확인된 엑소좀 단백질을 나타낸다. 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, 국제 공개 번호 WO/2019/099942를 참고한다. 스캐폴드 Y 단백질의 비제한적 예는 미리스토일화된 알라닌 풍부 단백질 키나제 C 기질("MARCKS 단백질"); 미리스토일화된 알라닌 풍부 단백질 키나제 C 기질 유사 1("MARCKSL1 단백질"); 및 뇌 산 가용성 단백질 1("BASP1 단백질")을 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 Y 단백질은 전체 단백질 또는 이의 단편(예를 들어, 기능적 단편, 예를 들어, EV, 예를 들어, 엑소좀의 내강 표면 상에 모이어티를 고정할 수 있는 가장 작은 단편)일 수 있다. 일부 양태에서, 스캐폴드 Y는 모이어티(예를 들어, STING 작용제 및/또는 IL-12 모이어티)를 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강에 고정할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 단백질(예를 들어, 치료 단백질 또는 스캐폴드 X)의 "단편"이라는 용어는 N- 및/또는 C-말단이 결실되거나, 자연 발생 단백질에 비해 단백질의 임의의 부분이 결실된 자연 발생 서열보다 짧은 단백질의 아미노산 서열을 나타낸다. 본원에서 사용된 바와 같이, "기능적 단편"이라는 용어는 단백질 기능을 보유하는 단백질 단편을 나타낸다. 따라서, 일부 양태에서, 스캐폴드 X 단백질의 기능적 단편은 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강 표면 상에 또는 외부 표면 상에 모이어티를 고정하는 능력을 보유한다. 단편이 기능적 단편인지 여부는 웨스턴 블롯, FACS 분석 및 단편과 GFP와 같은 자가형광 단백질과의 융합을 포함하는 EV, 예를 들어 엑소좀의 단백질 함량을 결정하기 위해 공지된 방법으로 평가될 수 있다. 특정 양태에서, 스캐폴드 X 단백질의 기능적 단편은 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 100%의 능력, 예를 들어, 자연 발생 스캐폴드 X 단백질의 모이어티를 고정하는 능력을 보유한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 분자(예를 들어, 기능적 분자, 항원 또는 스캐폴드 X)의 "변이체"라는 용어는 당분야에 공지된 방법에 의한 비교 시 또 다른 분자와 특정 구조적 및 기능적 동일성을 공유하는 분자를 나타낸다. 예를 들어, 단백질의 변이체는 또 다른 단백질에서 치환, 삽입, 결실, 프레임이동 또는 재배열을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 스캐폴드 X의 변이체는 전체 길이의 성숙한 PTGFRN, BSG, IGSF2, IGSF3, IGSF8, ITGB1, ITGA4, SLC3A2 또는 ATP 수송체 단백질 또는 PTGFRN, BSG, IGSF2, IGSF3, IGSF8, ITGB1, ITGA4, SLC3A2 또는 ATP 수송체 단백질의 단편(예를 들어, 기능적 단편)과 적어도 약 70%의 동일성을 갖는 변이체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 PTGFRN 단편의 변이체는 서열번호 1에 따른 PTGFRN 또는 이의 기능적 단편과 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99%의 서열 동일성을 공유한다.
"보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것이다. 염기성 측쇄(예를 들어, 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 비하전 극성 측쇄(예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄(예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지 측쇄(예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄(예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 포함하는 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기 패밀리가 당분야에 정의되었다. 따라서, 폴리펩티드의 아미노산이 동일한 측쇄 패밀리의 또 다른 아미노산으로 대체되는 경우, 치환은 보존적인 것으로 간주된다. 또 다른 양태에서, 아미노산 스트링은 측쇄 패밀리 구성원의 순서 및/또는 조성이 상이한 구조적으로 유사한 스트링으로 보존적으로 대체될 수 있다.
2개의 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열 사이의 "서열 동일성 퍼센트" 또는 "동일성 퍼센트"라는 용어는 2개 서열의 최적 정렬을 위해 도입되어야 하는 부가 또는 결실(즉, 갭)을 고려하여, 비교 창에서 서열이 공유하는 동일한 매칭되는 위치의 수를 나타낸다. 매칭되는 위치는 동일한 뉴클레오티드 또는 아미노산이 표적 및 참조 서열 모두에 제공되는 임의의 위치이다. 갭은 뉴클레오티드 또는 아미노산이 아니기 때문에 표적 서열에 제공된 갭은 계수되지 않는다. 마찬가지로, 참조 서열의 뉴클레오티드 또는 아미노산이 아니라 표적 서열의 뉴클레오티드 또는 아미노산이 계수되기 때문에 참조 서열에 제공된 갭은 계수되지 않는다.
서열 동일성의 백분율은 동일한 아미노산 잔기 또는 핵산 염기가 두 서열에서 발생하는 위치의 수를 결정하여 매칭되는 위치의 수를 산출하고, 매칭되는 위치의 수를 비교창에서의 전체 위치 수로 나누고 결과에 100을 곱하여 서열 동일성의 백분율을 산출함으로써 계산된다. 두 서열 사이의 서열 비교 및 서열 동일성 퍼센트의 결정은 온라인 사용 및 다운로드용으로 모두 쉽게 사용할 수 있는 소프트웨어를 사용하여 수행될 수 있다. 적합한 소프트웨어 프로그램은 다양한 소스로부터 사용할 수 있으며 단백질 및 뉴클레오티드 서열 둘 다의 정렬에 사용할 수 있다. 서열 동일성 퍼센트를 결정하는 한 가지 적합한 프로그램은 미국 정부의 국립 생명공학 정보 센터 BLAST 웹 사이트(blast.ncbi.nlm.nih.gov)에서 사용할 수 있는 BLAST 프로그램 제품군의 일부인 bl2seq이다. Bl2seq는 BLASTN 또는 BLASTP 알고리즘을 사용하여 두 서열 간의 비교를 수행한다. BLASTN은 핵산 서열을 비교하는 데 사용되는 반면 BLASTP는 아미노산 서열을 비교하는 데 사용된다. 다른 적합한 프로그램은, 예를 들어 EMBOSS 생물정보학 프로그램 제품군의 일부인 Needle, Stretcher, Water 또는 Matcher이며 유럽 생물정보학 연구소(EBI)의 www.ebi.ac.uk/Tools/psa에서도 사용할 수 있다.
폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 참조 서열과 정렬되는 단일 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 표적 서열 내의 상이한 영역은 각각 고유한 서열 동일성 퍼센트를 가질 수 있다. 서열 동일성 퍼센트 값은 가장 가까운 10분의 1로 반올림됨이 주지된다. 예를 들어 80.11, 80.12, 80.13, 80.14는 80.1로 내림하고 80.15, 80.16, 80.17, 80.18, 80.19는 80.2로 올림한다. 또한 길이 값은 항상 정수일 것임이 주지된다.
서열 동일성 퍼센트의 계산을 위한 서열 정렬의 생성은 1차 서열 데이터에 의해 독점적으로 구동되는 이진 서열-서열 비교로 제한되지 않는다. 서열 정렬은 다중 서열 정렬로부터 유도될 수 있다. 다중 서열 정렬을 생성하는 데 적합한 프로그램 중 하나는 www.clustal.org에서 사용할 수 있는 ClustalW2이다. 또 다른 적합한 프로그램은 www.drive5.com/muscle/에서 사용할 수 있는 MUSCLE이다. ClustalW2 및 MUSCLE은, 예를 들어 EBI로부터 대안적으로 사용할 수 있다.
또한, 서열 데이터를 구조 데이터(예를 들어, 결정학적 단백질 구조), 기능 데이터(예를 들어, 돌연변이의 위치), 또는 계통발생 데이터와 같은 이종 소스로부터의 데이터와 통합함으로써 서열 정렬이 생성될 수 있음이 이해될 것이다. 다중 서열 정렬을 생성하기 위해 이종 데이터를 통합하는 적절한 프로그램은 www.tcoffee.org에서 사용할 수 있는 T-Coffee이며, 대안적으로 예를 들어 EBI로부터 사용할 수 있다. 또한 서열 동일성 퍼센트를 계산하기 위해 사용된 최종 정렬이 자동 또는 수동으로 큐레이트될 수 있음이 이해될 것이다.
폴리뉴클레오티드 변이체는 코딩 영역, 비-코딩 영역, 또는 둘 다에 변경을 포함할 수 있다. 하나의 양태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 침묵 치환, 부가 또는 결실을 생성하지만 인코딩된 폴리펩티드의 특성 또는 활성을 변경하지 않는 변경을 함유한다. 또 다른 양태에서, 뉴클레오티드 변이체는 유전자 코드의 축퇴성으로 인한 침묵 치환에 의해 생성된다. 다른 양태에서, 5-10개, 1-5개, 또는 1-2개의 아미노산이 임의의 조합으로 치환, 결실 또는 부가되는 변이체. 폴리뉴클레오티드 변이체는 다양한 이유로, 예를 들어 특정 숙주에 대한 코돈 발현을 최적화하기 위해 생성될 수 있다(인간 mRNA의 코돈을 다른 것으로, 예를 들어 대장균과 같은 박테리아 숙주로 변화시킴).
자연 발생 변이체를 "대립유전자 변이체"라고 하며 유기체의 염색체에서 주어진 유전자좌를 차지하는 유전자의 여러 대안적 형태 중 하나를 나타낸다(Genes II, Lewin, B., ed., John Wiley & Sons, New York (1985)). 이들 대립유전자 변이체는 폴리뉴클레오티드 및/또는 폴리펩티드 수준에서 다양할 수 있고 본 개시에 포함된다. 대안적으로, 비-자연 발생 변이체는 돌연변이유발 기법 또는 직접적 합성에 의해 생성될 수 있다.
공지된 단백질 공학 및 재조합 DNA 기술의 방법을 사용하여 변이체를 생성하여 폴리펩티드의 특징을 개선하거나 변경할 수 있다. 예를 들어, 생물학적 기능의 실질적인 손실 없이 분비된 단백질의 N-말단 또는 C-말단에서 하나 이상의 아미노산이 결실될 수 있다. 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 문헌[Ron et al., J. Biol. Chem 268: 2984-2988 (1993)]은 3, 8 또는 27개의 아미노 말단 아미노산 잔기가 결실된 후에도 헤파린 결합 활성을 갖는 변이체 KGF 단백질을 보고하였다. 유사하게, 인터페론 감마는 상기 단백질의 카복시 말단에서 8-10개의 아미노산 잔기를 결실시킨 후 최대 10배 더 높은 활성을 나타냈다(그 전체가 본원에 참조로 포함되는 문헌[Dobeli et al., J. Biotechnology 7:199-216 (1988)]).
더욱이, 충분한 증거가 변이체는 종종 자연 발생 단백질과 유사한 생물학적 활성을 보유함을 실증한다. 예를 들어, Gayle과 동료(그 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌[J. Biol. Chem 268:22105-22111 (1993)])는 인간 사이토카인 IL-1a의 광범위한 돌연변이 분석을 수행했다. 그들은 무작위 돌연변이유발을 사용하여 분자의 전체 길이에 걸쳐 변이체 당 평균 2.5개의 아미노산 변화를 갖는 3,500개 초과의 개별 IL-1a 돌연변이체를 생성했다. 가능한 모든 아미노산 위치에서 다수의 돌연변이를 조사했다. 연구자들은 "[결합 또는 생물학적 활성]에 거의 영향을 미치지 않으면서 대부분의 분자가 변경될 수 있다"는 것을 발견했다. (초록 참조). 실제로 조사된 3,500개 초과의 뉴클레오티드 서열 중 23개의 고유한 아미노산 서열만이 야생형과 활성이 현저히 다른 단백질을 생산했다.
상기 언급된 바와 같이, 폴리펩티드 변이체는, 예를 들어 변형된 폴리펩티드를 포함한다. 변형은, 예를 들어 아세틸화, 아실화, ADP-리보실화, 아미드화, 플라빈의 공유 부착, 헴 모이어티의 공유 부착, 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유도체의 공유 부착, 지질 또는 지질 유도체의 공유 부착, 포스포티딜이노시톨의 공유 부착, 가교, 고리화, 디설피드 결합 형성, 탈메틸화, 공유 가교 형성, 시스테인 형성, 피로글루타메이트 형성, 포르밀화, 감마-카복실화, 글리코실화, GPI 고정부 형성, 하이드록실화, 요오드화, 메틸화, 미리스토일화, 산화, 페길화(그 전체가 본원에 참조로 포함되는 문헌[Mei et al., Blood 116:270-79 (2010)]), 단백분해 가공, 인산화, 프레닐화, 라세미화, 셀레노일화, 황산화, 아미노산의 단백질로의 전달-RNA 매개 부가, 예컨대 아르기닐화 및 유비퀴틴화를 포함한다. 일부 양태에서 스캐폴드 X는 임의의 편리한 위치에서 변형된다.
본원에서 사용되는 용어 "~에 연결된", "~에 접합된" 및 "~에 고정된"은 상호 교환가능하게 사용되며 제1 모이어티 및 제2 모이어티, 예를 들어, 스캐폴드 X 및 외인성 생물학적 활성 모이어티 각각, 예를 들어 세포외 소포 내에서 또는 세포외 소포 상에서 발현되는 스캐폴드 모이어티 및 세포외 소포의 내강 표면에서 또는 외부 표면 상의 항원, 예를 들어 스캐폴드 X(예를 들어, PTGFRN 단백질) 각각 사이에 형성된 공유 또는 비공유 결합을 나타낸다.
"캡슐화된"이라는 용어 또는 문법적으로 다른 형태의 용어(예를 들어, 캡슐화 또는 캡슐화하기)는 2개의 모이어티를 화학적으로 또는 물리적으로 연결하지 않고 제2 모이어티(예를 들어, EV, 예를 들어, 엑소좀) 내부에 제1 모이어티(예를 들어, 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제)를 갖는 상태 또는 공정을 나타낸다. 일부 양태에서, "캡슐화된"이라는 용어는 "~의 내강에서"와 상호 교환가능하게 사용될 수 있다. 제1 모이어티(예를 들어, 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, 항원, 아주반트 또는 면역 조절제)를 제2 모이어티(예를 들어, EV, 예를 들어, 엑소좀) 내로 캡슐화하기의 비제한적인 예는 본원의 다른 곳에 개시되어 있다.
본원에서 사용되는 용어 "생산체 세포"는 EV, 예를 들어 엑소좀을 생산하기 위해 사용되는 세포를 나타낸다. 생산체 세포는 시험관내 배양된 세포 또는 생체내 세포일 수 있다. 생산체 세포는 EV, 예를 들어 엑소좀 생산에 효과적인 것으로 공지된 세포, 예를 들어 HEK293 세포, 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포, 중간엽 줄기 세포(MSC), BJ 인간 포피 섬유아세포, fHDF 섬유아세포, AGE.HN® 신경 전구 세포, CAP® 양막 세포, 지방 중간엽 줄기 세포, RPTEC/TERT1 세포를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특정 양태에서, 생산체 세포는 항원 제시 세포가 아니다. 일부 양태에서, 생산체 세포는 수지상 세포, B 세포, 비만 세포, 대식구, 호중구, 쿠퍼-브로비츠 세포, 이들 세포 중 임의의 것으로부터 유래된 세포, 또는 이의 임의의 조합이 아니다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어, 본 개시에서 유용한 엑소좀은 EV, 예를 들어 엑소좀의 표면 상에 노출된 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 분자 상의 항원을 운반하지 않지만, 대신에 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강에서 또는 스캐폴드 X에 대한 부착에 의해 EV, 예를 들어 엑소좀 표면 상에 항원을 운반할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "단리하다", "단리된" 및 "단리" 또는 "정제하다", "정제된" 및 "정제" 뿐만 아니라 "추출된" 및 "추출"은 상호 교환가능하게 사용되며 하나 이상의 정제 공정, 예를 들어 원하는 EV 제조물의 선택 또는 농축을 거친, 원하는 EV의 제조물의 상태(예를 들어, 복수의 공지되거나 공지되지 않은 양 및/또는 농도)를 나타낸다. 일부 양태에서, 본원에서 사용된 바와 같은 단리 또는 정제는 생산체 세포를 함유하는 샘플로부터 EV의 제거, 부분적(예를 들어, 일부) 제거 공정이다. 일부 양태에서, 단리된 EV 조성물은 검출 가능한 바람직하지 않은 활성을 갖지 않거나, 대안적으로 바람직하지 않은 활성의 수준 또는 양은 허용 가능한 수준 또는 양 이하이다. 다른 양태에서, 단리된 EV 조성물은 허용 가능한 양 및/또는 농도 이상에서 원하는 EV의 양 및/또는 농도를 갖는다. 다른 양태에서, 단리된 EV 조성물은 조성물이 수득되는 출발 물질(예를 들어, 생산체 세포 제조물)에 비해 농축된다. 상기 농축은 출발 물질에 비해 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.9%, 99.99%, 99.999%, 99.9999%, 또는 99.9999% 초과만큼일 수 있다. 일부 양태에서, 단리된 EV 제조물은 잔류 생물학적 산물이 실질적으로 없다. 일부 양태에서, 단리된 EV 제조물은 임의의 오염 생물학적 물질을 100% 비함유, 99% 비함유, 98% 비함유, 97% 비함유, 96% 비함유, 95% 비함유, 94% 비함유, 93% 비함유, 92% 비함유, 91% 비함유, 또는 90% 비함유한다. 잔류 생물학적 산물은 비생물적 물질(화학물질 포함) 또는 원치않는 핵산, 단백질, 지질 또는 대사산물을 포함할 수 있다. 잔류 생물학적 산물이 실질적으로 없다는 것은 EV 조성물에 검출 가능한 생산체 세포가 없고 EV만 검출 가능하다는 것을 의미할 수도 있다.
본원에서 사용되는 용어 "면역 조절제"는 세포외 소포와 접촉하는 표적(예를 들어, 표적 세포)에 작용하고 면역계를 조절하는 제제를 나타낸다. EV(예를 들어, 엑소좀) 및/또는 생산체 세포 내에 도입될 수 있는 면역 조절제의 비제한적인 예는 체크포인트 억제제의 조절제, 체크포인트 억제제의 리간드, 사이토카인, 이의 유도체, 또는 이의 임의의 조합과 같은 제제를 포함한다. 면역 조절제는 작용제, 길항제, 항체, 항원 결합 단편, siRNA, miRNA, lncRNA, mRNA, DNA와 같은 폴리뉴클레오티드, 또는 소분자를 또한 포함할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "페이로드"는 EV와 접촉하는 표적(예를 들어, 표적 세포)에 작용하는 제제를 나타낸다. EV, 예를 들어 엑소좀 상에 포함될 수 있는 페이로드의 비제한적 예는 생물학적 활성 분자, 예를 들어 치료 분자, 아주반트 및/또는 면역 조절제이다. EV, 예를 들어, 엑소좀 및/또는 생산체 세포 내로 도입될 수 있는 페이로드는 뉴클레오티드(예를 들어, 검출 가능한 모이어티 또는 독소를 포함하거나 전사를 방해하는 뉴클레오티드), 핵산(예를 들어, 효소와 같은 폴리펩티드를 인코딩하는 DNA 또는 mRNA 분자, 또는 miRNA, dsDNA, lncRNA 및 siRNA와 같은 조절 기능을 갖는 RNA 분자), 아미노산(예를 들어, 검출 가능한 모이어티 또는 독소를 포함하거나 번역을 방해하는 아미노산), 폴리펩티드(예를 들어, 효소), 지질, 탄수화물 및 소분자(예를 들어, 소분자 약물 및 독소)를 포함한다. 특정 양태에서, 페이로드는 외인성 생물학적 활성 모이어티(예를 들어, 본원에서 개시된 것들)를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 표적화 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 EV, 예를 들어 엑소좀 상에 또는 내로 "수동적으로 로딩"된다. 본원에서 사용되는 용어 "수동적으로 로딩된"은 EV, 예를 들어 엑소좀과 동일한 용액 중에 존재하는 페이로드 사이의 연합을 나타낸다. 수동적 로딩 하에서 페이로드는, 예를 들어 자연적 확산 및/또는 인력에 의해 EV와 연합하게 될 것이다.
본원에서 사용되는 용어 "표적화 모이어티"는 생체내 또는 시험관내(예를 들어, 상이한 품종 세포의 혼합 배양에서) 세포외 소포(예를 들어, 엑소좀, 나노소포)의 분포를 변형할 수 있는 제제를 나타낸다. 표적화 모이어티는 단백질, 펩티드, 지질 또는 탄수화물과 같은 생물학적 분자, 또는 합성 분자일 수 있다. 예를 들어, 표적화 모이어티는 항체(예를 들어, 항-CD19 나노바디, 항-CD22 나노바디), 합성 중합체(예를 들어, PEG), 천연 리간드(예를 들어, CD40L, 알부민), 재조합 단백질(예를 들어, XTEN)일 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 특정 양태에서, 표적화 모이어티는 EV의 표면 상에 디스플레이된다. 표적화 모이어티는 스캐폴드 단백질(예를 들어, 스캐폴드 X)에 융합됨으로써(예를 들어, 유전적으로 인코딩된 융합 분자로서) EV 표면 상에 디스플레이될 수 있다. 일부 양태에서, 표적화 모이어티는 EV 표면 분자에 표적화 모이어티를 부착하는 화학 반응에 의해 EV 표면 상에 디스플레이될 수 있다. 비제한적인 예는 PEG화이다. 일부 양태에서, 본원에서 개시된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 (페이로드에 추가하여) 표적화 모이어티를 추가로 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 기재된 표적화 모이어티는 소분자(예를 들어, STING, ASO), 약물 및/또는 치료 단백질(예를 들어, 항-CD3/항-CD19 항체), 항-메조텔린 항체/친-아폽토시스 단백질)과 같은 기능적 모이어티와 조합될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "생물학적 활성 모이어티"는 구조 단백질, 효소, 사이토카인(예를 들어, 인터페론 및/또는 인터루킨), 항생제, 폴리클로날 또는 모노클로날 항체, 또는 Fv 단편과 같은 이의 유효 부분(상기 항체 또는 이의 부분은 천연, 합성 또는 인간화될 수 있음), 펩티드 호르몬, 수용체, 신호전달 분자 또는 기타 단백질을 포함하지만 이에 제한되지는 않는 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드; 올리고뉴클레오티드 또는 변형된 올리고뉴클레오티드, 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 변형된 안티센스 올리고뉴클레오티드, cDNA, 게놈 DNA, 인공 또는 천연 염색체(예를 들어, 효모 인공 염색체) 또는 이의 부분, mRNA, tRNA, rRNA 또는 리보자임을 포함하는 RNA, 또는 펩티드 핵산(PNA)을 포함하지만 이에 제한되지 않는 하기에 정의된 핵산; 바이러스 또는 바이러스 유사 입자; 변형되거나 변형되지 않을 수 있는 뉴클레오티드 또는 리보뉴클레오티드 또는 이의 합성 유사체; 변형되거나 변형되지 않을 수 있는 아미노산 또는 이의 유사체; 비-펩티드(예를 들어, 스테로이드) 호르몬; 프로테오글리칸; 지질; 또는 탄수화물을 포함하나 이에 제한되지 않는 생물학적 시스템(예를 들어, 세포 또는 인간 대상체)에서 활성을 갖는 제제를 나타낸다. 이러한 항체 또는 이의 일부는 다음과 같을 수 있다. 일부 양태에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머(PMO) 또는 펩티드-접합 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머(PPMO)를 포함한다. 특정 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 치료 분자(예를 들어, 항원), 표적화 모이어티(예를 들어, 항체 또는 이의 항원 결합 단편), 아주반트, 면역 조절제, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 거대분자(예를 들어, 단백질, 항체, 효소, 펩티드, DNA, RNA, 또는 이의 임의의 조합)를 포함한다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 소분자(예를 들어, 안티센스 올리고머(ASO), siRNA, STING, 약학 약물 또는 이의 임의의 조합)를 포함한다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 엑소좀에 대해 외인성이며, 즉 엑소좀에서 자연적으로 확인되지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "치료 분자"는 대상체(예를 들어, 인간 대상체)에서 질환 또는 장애를 치료 및/또는 방지할 수 있는 임의의 분자를 나타낸다. 일부 양태에서, 치료 분자는 항원을 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "항원"은 대상체에 도입될 때 자체에 대한 면역 반응(세포성 또는 체액성)을 유발하는 임의의 제제를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "항체"는 천연이거나 부분적으로 또는 전체적으로 합성 생산된 면역글로불린, 및 이의 단편을 포괄한다. 이 용어는 또한 면역글로불린 결합 도메인과 상동성인 결합 도메인을 갖는 임의의 단백질을 포함한다. "항체"는 항원에 특이적으로 결합하고 이를 인식하는 면역글로불린 유전자 또는 이의 단편으로부터의 프레임워크 영역을 포함하는 폴리펩티드를 추가로 포함한다. 항체라는 용어의 사용은 전체 항체, 폴리클로날, 모노클로날 및 재조합 항체, 이의 단편을 포함하는 것을 의미하고, 단일쇄 항체, 인간화 항체, 뮤린 항체, 키메라, 마우스-인간, 마우스-영장류, 영장류-인간 모노클로날 항체, 항-개별특이형 항체, 예를 들어 scFv, (scFv)2, Fab, Fab' 및 F(ab')2, F(ab1)2, Fv, dAb 및 Fd 단편과 같은 항체 단편, 디아바디 및 항체-관련 폴리펩티드를 추가로 포함한다. 항체는 원하는 생물학적 활성 또는 기능을 나타내는 한 이중특이적 항체 및 다중특이적 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 scFv, scFab, scFab-Fc, 나노바디, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 작용제 항체, 차단 항체, 표적화 항체, 이의 단편, 또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 작용제 항체는 CD40L 작용제이다. 일부 양태에서, 차단 항체는 프로그래밍된 사멸 1(PD-1), 프로그래밍된 사멸 리간드 1(PD-L1), 세포독성 T-림프구-연관 단백질 4, 및 이의 임의의 조합으로부터 선택되는 표적 단백질에 결합한다. 일부 양태에서, 표적화 항체는 CD3및/또는 CD19에 결합한다.
용어 "개체", "대상체", "숙주" 및 "환자"는 본원에서 상호 교환가능하게 사용되며 진단, 치료 또는 치료법이 필요한 임의의 포유류 대상체, 특히 인간을 나타낸다. 본원에서 기재된 조성물 및 방법은 인간 치료법 및 수의학적 적용 모두에 적용 가능하다. 일부 양태에서, 대상체는 포유류이고, 다른 양태에서 대상체는 인간이다. 본원에서 사용된 바와 같은 "포유류 대상체"는 인간, 가축(예를 들어, 개, 고양이 등), 농장 동물(예를 들어, 소, 양, 돼지, 말 등) 및 실험실 동물(예를 들어, 원숭이, 래트, 마우스, 토끼, 기니피그 등)을 포함하나 이에 제한되지 않는 모든 포유류을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "실질적으로 없는"은 EV, 예를 들어 엑소좀을 포함하는 샘플이 질량/부피(m/v) 백분율 농도로 10% 미만의 거대분자를 포함함을 의미한다. 일부 분획은 0.001% 미만, 0.01% 미만, 0.05% 미만, 0.1% 미만, 0.2% 미만, 0.3% 미만, 0.4% 미만, 0.5% 미만, 0.6% 미만, 0.7% 미만, 0.8% 미만, 0.9% 미만, 1% 미만, 2% 미만, 3% 미만, 4% 미만, 5% 미만, 6% 미만, 7% 미만, 8% 미만, 9% 미만, 또는 10% 미만(m/v) 거대분자를 함유할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "거대분자"는 핵산, 오염 단백질, 지질, 탄수화물, 대사산물, 또는 이의 조합을 의미한다.
본원에서 사용되는 용어 "통상적인 엑소좀 단백질"은 CD9, CD63, CD81, PDGFR, GPI 고정 단백질, 락타데린 LAMP2, 및 LAMP2B, 이의 단편, 또는 이에 결합하는 펩티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는, 엑소좀에 풍부한 것으로 이전에 공지된 단백질을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "투여하는"은 약학적으로 허용 가능한 경로를 통해 대상체에게 본원에서 개시된 EV, 예를 들어 엑소좀을 포함하는 조성물을 제공하는 것을 의미한다. 투여 경로는 정맥내, 예를 들어 정맥내 주사 및 정맥내 주입일 수 있다. 추가 투여 경로는, 예를 들어, 피하, 근육내, 경구, 비강 및 폐 투여를 포함한다. EV, 예를 들어 엑소좀은 적어도 하나의 부형제를 포함하는 약학 조성물의 일부로서 투여될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같은 "면역 반응"은 외래 제제 또는 비정상, 예를 들어 암성 세포에 대한 척추동물 내의 생물학적 반응을 나타내며, 이러한 반응은 이들 제제 및 이에 의해 유도되는 질환에 대해 유기체를 보호한다. 면역 반응은 척추동물의 몸에 침입하는 병원체, 병원체로 감염된 세포 또는 조직, 암성 또는 기타 비정상 세포, 또는 자가면역 또는 병리학적 염증의 경우, 정상 인간 세포 또는 조직의 선택적 표적화, 이에 대한 결합, 이에 대한 손상, 이 파괴, 및/또는 이로부터의 제거를 초래하는, 면역계의 하나 이상의 세포(예를 들어, T 림프구, B 림프구, 자연 살해(NK) 세포, 대식구, 호산구, 비만 세포, 수지상 세포 또는 호중구) 및 임의의 이들 세포 또는 간에 의해 생성되는 가용성 거대분자(항체, 사이토카인 및 보체 포함)의 작용에 의해 매개된다. 면역 반응은, 예를 들어 T 세포, 예를 들어 효과기 T 세포, Th 세포, CD4+ 세포, CD8+ T 세포, 또는 Treg 세포의 활성화 또는 억제, 또는 면역계의 임의의 다른 세포, 예를 들어 NK 세포의 활성화 또는 억제가 포함된다. 따라서 면역 반응은 체액성 면역 반응(예를 들어, B-세포에 의해 매개됨), 세포성 면역 반응(예를 들어, T 세포에 의해 매개됨), 또는 체액성 및 세포성 면역 반응 모두를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 면역 반응은 "억제성" 면역 반응이다. 억제성 면역 반응은 자극(예를 들어, 항원)의 효과를 차단하거나 감소시키는 면역 반응이다. 특정 양태에서, 억제성 면역 반응은 자극에 대한 억제성 항체의 생산을 포함한다. 일부 양태에서, 면역 반응은 "자극성" 면역 반응이다. 자극성 면역 반응은 표적 항원(예를 들어, 종양 항원 또는 바이러스)을 파괴하고 제거할 수 있는 효과기 세포(예를 들어, 세포독성 T 림프구)의 생성을 초래하는 면역 반응이다.
본원에서 사용된 바와 같은 "치료하다", "치료" 또는 "치료하는"은, 예를 들어 질환 또는 병태의 중증도 감소; 질환 경과 기간의 감소; 질환 또는 병태와 연관된 하나 이상의 증상의 완화 또는 제거; 질환 또는 병태를 반드시 근치하는 것은 아닌 질환 또는 병태를 가진 대상체에게 유익한 효과의 제공을 나타낸다. 이 용어는 또한 질환 또는 병태 또는 이의 증상의 예방 또는 방지를 포함한다. 하나의 양태에서, 용어 "치료하는" 또는 "치료"는 항원에 대해 대상체에서 면역 반응을 유도하는 것을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "방지하다" 또는 "방지"는 특정 결과의 발생 또는 중증도를 감소시키거나 축소시키는 것을 나타낸다. 일부 양태에서, 결과의 방지는 예방적 치료를 통해 달성된다.
II. 약학 조성물
세포외 소포, 예를 들어 엑소좀의 보관 및 투여를 위한 조성물이 본원에서 제공된다. 위에서 주지된 바와 같이, 본 개시의 조성물은 EV의 감소된 응집, EV의 개선된 안정성, 및 EV 구조의 개선된 온전성, EV 상에 또는 EV에 함유된 조작된 단백질의 개선된 안정성, 및 소분자 약물 또는 단백질과 같은 수동적으로 로딩되거나 접합된 물질의 개선된 안정성을 포함하지만, 이에 제한되지 않는 여러 장점을 제공한다. 본원에서 개시된 조성물은 조성물 내에 함유된 EV의 안정성을 손상시키지 않으면서 냉동되고, 다양한 시기에 걸쳐 일정 온도 범위에서 보관되고, 해동될 수 있다.
본 개시의 조성물을 제형화하는 것과 관련된 다양한 구성요소 및 고려사항을 아래에 나타낸다.
II.A. EV 조성물
본 개시는 세포외 소포를 포함하는 약학 조성물을 제공하며, 여기서 약학 조성물은 냉동 및/또는 보관에 대해 안정하고/하거나 포유류, 예를 들어 인간에서 투여하기에 적합하다. 보관 중 생물학적 제제의 불안정성은 응집, 탈아민화, 이성질체화, 가수분해, 산화 및/또는 변성에 의해 유도될 수 있다. 이러한 구조적 변형은 다양한 상이한 요인: 생물학적 제제의 특성 및/또는 온도, pH, 및 생물학적 제제 및 생물학적 제제와 함께 제형화된 요소의 이온 강도를 포함한 기타 요인으로 인해 발생할 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시의 약학 조성물은 조성물이 킬레이트제 및/또는 알부민, 예를 들어, 재조합 인간 알부민을 필요로 하지 않도록 안정하게 제형화된다.
인간 알부민은 혈액에서 가장 보편적인 단백질이며 약 40 g/L의 양으로 존재한다. 혈액에서 그 역할은 금속, 호르몬, 지방산 및 독소와 같은 수많은 작은 물체의 이동이다. 그러나 그것은 또한 혈액의 콜로이드성 종양(또는 콜로이드성 삼투) 압력의 약 75%를 구성하고 알부민의 단일 유리 시스테인(위치 34)은 혈액에 존재하는 환원 등가물의 대부분을 구성한다. 이러한 모든 특성은 제형 중 알부민의 사용에서 기능적인 속성이다.
알부민은 역사적으로 다양한 제형으로 사용되어 왔다. 원래 혈장 공급 인간 혈청 알부민이 사용되었지만 산업계에서 화학적으로 정의된(재조합) 인간 혈청 알부민을 사용하는 방향으로 변화하고 있다. 재조합 제품은 다음과 같은 요인: 동물 유래 산물의 부재, 공급의 확실성, 고순도, 숙주 유래 프로테아제의 부재, 높은 균질성, 높은 유리 티올 함량, 공지되거나 공지되지 않은 인간 병원체의 부재, 배치-대-배치 일관성 및 확립된 규제 경로의 존재로 인해 유리하다.
제형 중 알부민은 표면 흡착, 응집, 섬유화 및 산화를 방지하고 용해도, 동결건조된 케이크 형성 및/또는 동결건조된 분말로부터의 API의 용해 특성을 개선하는 것으로 보고되었다. 이러한 공지된 이점에도 불구하고, 본 개시는 세포외 소포를 포함하는 안정한 알부민 비함유 약학 조성물을 제공한다.
킬레이트제는 금속 이온과 결합하여 약학 제형의 안정성 및 유효성에 중요한 역할을 하는 성분이다. 킬레이트화 공정은 금속 이온이 임의의 다른 물질과 화학적으로 반응하는 것을 방지하여 금속 이온을 안정화한다. 본 조성물은 킬레이트제를 함유하지 않는 것을 특징으로 할 수 있다.
일부 양태에서, 본원에서 개시된 조성물은 약 1 내지 약 6.5 범위의 pI를 갖는다. 표면 거대분자, 예를 들어, 본원에서 개시된 바와 같은 PTGFRN이 과발현되는 본원에서 개시되는 EV의 pI 범위는 생리적 pH 값에서 콜로이드적으로 안정한 음이온성 엑소좀을 가능하게 한다. 일부 양태에서, 표면 분자는 폴리펩티드, 올리고뉴클레오티드 또는 탄수화물일 수 있다. 일부 양태에서, 6.5를 초과하는 pI는 EV, 예를 들어 엑소좀이 독성 또는 제한된 생체 분포를 초래할 수 있는 유용한 pH 범위에서 중성 전하(불안정) 또는 양이온성 전하를 갖도록 할 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 액체 상태로 제형화되고 조성물의 온도를 냉동 및 냉동 이하 온도로 감소시키는 방식으로 보관을 위해 냉동될 수 있다. 탈수 또는 동결건조를 통한 조성물의 냉동은 고려되지 않는다. 일부 양태에서, 조성물은 동결건조되지 않는다.
II.B. 조성물 I(pH)
한 양태에서, 본 개시는 EV를 안정적으로 제형화할 수 있는 pH를 제공한다. pH는 약 7.0 내지 약 7.4, 예를 들어, 약 7.1 내지 약 7.3, 예를 들어, 약 7.2의 범위일 수 있다. 일부 양태에서, 본 개시의 약학 조성물은 (a) 세포외 소포; (b) 당류; (c) 염화나트륨 (d) 인산칼륨; 및 (e) 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 약 7.2의 pH에서 용액 중에 존재한다. EV는 본원의 다른 곳에서 개시되며, 당류는 단당류, 이당류, 삼당류, 또는 임의의 다른 당류일 수 있고; 염화나트륨은 아래에 나타내고; 인산칼륨과 인산나트륨은 아래에 나타낸다.
일부 양태에서, 냉동 전 및 냉동 후 조성물은 동일하게 유지된다. 예를 들어, 냉동 전 및 냉동 후 조성물은 약 7.1의 pH를 갖는다. 일부 양태에서, 냉동 전 및 냉동 후 조성물은 약 7.2의 pH를 갖는다. 일부 양태에서, 냉동 전 및 냉동 후 조성물은 약 7.3의 pH를 갖는다. 일부 양태에서, 냉동 전 및 냉동 후 조성물은 약 7.4의 pH를 갖는다.
일부 양태에서, 조성물의 pH는 인산염의 농도를 변형함으로써 조정될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물의 pH는 인산칼륨의 농도를 변형함으로써 조정될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물의 pH는 인산칼륨의 농도를 첨가하거나 증가시킴으로써 증가될 수 있다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 인산나트륨의 농도보다 높다.
일부 양태에서, 인산나트륨 및 인산칼륨의 일염기성 및 이염기성 형태의 비율을 사용하여 약학 조성물의 pH를 조정할 수 있다. 일부 양태에서, 일염기성 인산나트륨 및/또는 일염기성 인산칼륨은 약학 조성물의 pH를 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 이염기성 인산나트륨 및/또는 이염기성 인산칼륨은 약학 조성물의 pH를 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 일부 양태에서, 개시된 조성물에 대한 pH 범위는 약 6.8 내지 약 7.6이다. 따라서, 조성물의 pH가 원하는 것보다 낮은 경우, 염(즉, 칼륨 또는 나트륨)의 일염기성 대 이염기성 형태의 비율을 변화시킴으로써 pH를 변화시킬 수 있다. 일부 양태에서, 일염기성 및 이염기성 형태의 인산나트륨 및 인산칼륨의 비율은 조성물의 pH가 7.0 내지 7.4, 예를 들어 7.1 내지 7.3, 예를 들어 7.2가 될 때까지 조성물의 pH를 조정하기 위해 사용될 수 있다. 일부 양태에서, pH의 상한은 비누화로 더 일반적으로 공지된 가수분해를 겪는 개시된 EV, 예를 들어 엑소좀의 지질의 파괴로 인한 것이다. 일부 양태에서, 칼륨 염은 냉동 시 pH를 안정화한다.
일부 양태에서, 약 pH 7.2에서 약학 조성물을 위한 당류는 단당류를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 이당류를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 삼당류를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 올리고당류를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 다당류를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 당 알코올을 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 본원에서 기재된 당류의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 당류는 락토스를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 글루코스를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 덱스트로스를 포함한다. 일부 양태에서, 당류는 본원에서 기재된 당류의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 당류는 당 알코올이다. 일부 양태에서, 당류는 약 90.00 g/mol 내지 약 190.00 g/mol의 분자량을 갖는 당 알코올이다. 일부 양태에서, 당류는 약 180.00 g/mol 내지 약 380.00 g/mol의 분자량을 갖는다,
일부 양태에서, 당 알코올은 글리세롤을 포함한다. 일부 양태에서, 당 알코올은 소르비톨을 포함한다. 일부 양태에서, 당 알코올은 만니톨을 포함한다. 일부 양태에서, 당 알코올은 자일리톨을 포함한다. 일부 양태에서, 당 알코올은 본원에서 기재된 당 알코올의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 당류는 수크로스 또는 트레할로스이다. 일부 양태에서, 약학 조성물은 수크로스를 포함한다. 다른 양태에서, 약학 조성물은 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 수크로스 농도는 약 5% w/v이다.
II.C. 조성물 II(수크로스)
본 개시는 또한 세포외 소포를 포함하는 약학 조성물 중 수크로스 또는 트레할로스의 적절한 농도에 대한 것이다. 조성물 중 수크로스 또는 트레할로스의 적합한 양은 조성물을 안정화하고/하거나 임의의 응집을 감소시킨다. 일부 양태에서, 약학 조성물은 (i) 세포외 소포 및 (ii) 약 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스인 당류를 포함한다.
본원에서 개시된 당류, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스는 1% w/v 수크로스를 포함하는 조성물에 우수한 안정성을 제공할 수 있다. 특히, (i) 세포외 소포, 예를 들어 엑소좀 및 (ii) 약 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스인 당류를 포함하는 약학 조성물은 다음을 포함하지만 이에 제한되지 않는 장점을 제공한다: (i) EV의 응집 감소, (ii) EV의 안정성 개선, (iii) EV 구조의 온전성 개선, (iv) EV 상에 또는 EV에 포함된 조작된 단백질의 안정성 개선, 및 (v) 소분자 약물 또는 단백질과 같은 수동적으로 로딩되거나 접합된 물질의 안정성 개선. 일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v, 예를 들어 1% 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 감소된 응집을 갖는다. 일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v, 예를 들어 1%의 농도로 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 개선된 안정성을 갖는다. 일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v, 예를 들어 1% 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 EV 구조의 개선된 온전성을 갖는다.
일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v, 예를 들어 1%의 농도에서 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 EV 상에 또는 EV에 함유된 조작된 단백질의 개선된 안정성을 갖는다.
일부 양태에서, 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v, 예를 들어 1% 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 소분자 약물 또는 단백질과 같은 수동적으로 로딩되거나 접합된 물질의 개선된 안정성을 갖는다.
다른 양태에서, 조성물은 5.5% w/v, 6% w/v, 7% w/v, 8% w/v, 9% w/v 또는 10% w/v 초과 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 개선된 안정성을 갖는다.
조성물은 염화나트륨, 인산칼륨, 염화나트륨, 또는 본원의 다른 곳에 개시된 이의 임의의 조합을 추가로 포함할 수 있다.
II.D. 염화나트륨
일부 양태에서, 조성물 I 또는 조성물 II는 염화나트륨을 추가로 포함한다.
일부 양태에서, 염화나트륨은 약 10 mM 내지 약 200 mM 염화나트륨의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 염화나트륨은 약 10 mM 내지 약 134 mM, 약 10 mM 내지 약 130 mM, 약 20 mM 내지 약 120 mM, 약 30 mM 내지 약 110 mM, 약 40 mM 내지 약 100 mM, 약 50 mM 내지 약 90 mM, 약 60 mM 내지 약 80 mM, 약 70 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 95 mM, 약 45 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 70 mM, 약 45 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 60 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 또는 약 51 mM 내지 약 54 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 190 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 180 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 170 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 160 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 150 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 140 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM 내지 약 130 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 20 mM 내지 약 120 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 30 mM 내지 약 110 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 40 mM 내지 약 100 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM 내지 약 90 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 60 mM 내지 약 80 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 70 mM 내지 약 80 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 95 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 80 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 70 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 65 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM 내지 약 65 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM 내지 약 60 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM 내지 약 55 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM 내지 약 55 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 51 mM 내지 약 54 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 40 mM 내지 약 60 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 55 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 48 mM 내지 약 53 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 40 mM 내지 약 50 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM 내지 약 50 mM이다.
일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM, 약 20 mM, 약 30 mM, 약 40 mM, 약 50 mM, 약 60 mM, 약 70 mM, 약 80 mM, 약 90 mM, 또는 약 100 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 10 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 20 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 30 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 40 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 60 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 70 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 80 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 90 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 100 mM이다.
일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 110 mM, 약 120 mM, 약 130 mM, 약 140 mM, 약 150 mM, 약 160 mM, 약 170 mM, 약 180 mM, 약 190 mM, 또는 약 200 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 110 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 120 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 130 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 140 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 150 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 160 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 170 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 180 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 190 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 200 mM이다.
일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 39 mM, 약 40 mM, 약 41 mM, 약 42 mM, 약 43 mM, 약 44 mM, 약 45 mM, 약 46 mM, 약 47 mM, 약 48 mM, 약 49 mM, 또는 약 50 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 39 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 40 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 41 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 42 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 43 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 44 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 45 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 46 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 47 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 48 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 49 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 약 50 mM이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 40.0이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 49.6 mM이다.
본원에서 개시된 염화나트륨의 임의의 농도는 부피 당 중량 관점, 예를 들어 mg/ml로 표현될 수 있다. 당업자는 본원에서 개시된 mM 농도를 부피 당 중량 농도로 쉽게 전환할 수 있을 것이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 12 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.9 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.8 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.7 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 11.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 10.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 10 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 9.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 9 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 8.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 8.0 mg/ ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 7.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 7.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 6.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 6.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 5.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg /ml 내지 적어도 약 5.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 4.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 4.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 적어도 약 3.9 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.8 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.7 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 적어도 약 3.6 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.4 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.3 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.1 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 3.0 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.9 mg /ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.8 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.7 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.6 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.5 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.4 mg/ml, 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.3 mg /ml, 또는 적어도 약 0.5 mg/ml 내지 적어도 약 2.1 mg/ml이다.
일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 3.0 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.92 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.9 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.8 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.7 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.6 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.5 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.4 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.34 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.3 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.2 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.1 mg/ml이다. 일부 양태에서, 염화나트륨의 농도는 적어도 약 2.0 mg/ml이다.
일부 양태에서, 조성물 II는 인산염 화합물을 포함하는 인산염 완충액을 추가로 포함한다. 인산염 화합물의 비제한적인 예는 인산칼륨, 인산나트륨, 인산수소이나트륨, 인산이수소칼륨, 인산이칼륨, 및/또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 화합물은 인산칼륨이다. 다른 양태에서, 인산염 화합물은 인산나트륨이다.
II.E. 인산염
일부 양태에서, 조성물 I 또는 조성물 II는 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 20 mM, 약 3 mM 내지 약 20 mM, 약 4 mM 내지 약 20 mM, 약 5 mM 내지 약 20 mM, 약 6 mM 내지 약 20 mM, 약 7 mM 내지 약 20 mM, 약 8 mM 내지 약 20 mM, 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 19 mM, 약 3 mM 내지 약 18 mM, 약 4 mM 내지 약 17 mM, 약 5 mM 내지 약 16 mM, 또는 약 5 mM 내지 약 15 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 4.5 mM, 약 4.6 mM, 약 4.7 mM, 약 4.8 mM, 약 4.9 mM, 약 5.0 mM, 약 5.1 mM, 약 5.2 mM, 약 5.3 mM, 약 5.4 mM, 또는 약 5.5 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 2 mM 내지 약 19 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 3 mM 내지 약 18 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4 mM 내지 약 17 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5 mM 내지 약 16 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5 mM 내지 약 15 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 1 mM 내지 약 10 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 2 mM 내지 약 9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 3 mM 내지 약 8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4 mM 내지 약 7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4 mM 내지 약 6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 3 mM 내지 약 7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 3 mM 내지 약 6 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 3.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 3.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.1 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.2 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.3 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.4 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨은 약 4.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 4.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.1 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.2 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.3 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.4 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 5.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산칼륨은 약 6.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 조성물 중 인산칼륨의 농도는 5.15 mM이다.
일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 15.0 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.1 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.2 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.3 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.4 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.5 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.6 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.7 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.8 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 15.9 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.0 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.1 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.2 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.3 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.4 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨의 농도는 약 16.5 mM이다. 일부 양태에서, 조성물 중 인산칼륨의 농도는 15.4 mM이다.
일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.0 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.1 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.2 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.3 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.4 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.5 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.6 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.7 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.8 mM이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 약 14.9 mM이다.
본원에서 개시된 일염기성 인산칼륨의 임의의 농도는 부피 당 중량 관점, 예를 들어 mg/ml로 표현될 수 있다. 당업자는 본원에서 개시된 mM 농도를 부피 당 중량 농도로 쉽게 전환할 수 있을 것이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.14 mg/ml 내지 적어도 약 2.75 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.14 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.15 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.17 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.2 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.23 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.25 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.5 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.60 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.61 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.62 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.63 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.64 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.65 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.66 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.67 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.68 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.69 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.70 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.71 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.72 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.73 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.74 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 0.75 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 1.0 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 1.25 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 1.50 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 1.75 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.0 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.03 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.04 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.05 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.1 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.2 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.3 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.4 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.5 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.6 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.7 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.8 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 2.9 mg/ml이다. 일부 양태에서, 인산칼륨, 예를 들어 일염기성 인산칼륨의 농도는 적어도 약 3.0 mg/ml이다.
일부 양태에서, 조성물 I 또는 조성물 II는 인산나트륨을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 인산나트륨, 예를 들어 이염기성 인산나트륨 칠수화물은 약 10 mM 내지 약 100 mM, 약 10 mM 내지 약 90 mM, 약 10 mM 내지 약 80 mM, 약 10 mM 내지 약 70 mM, 약 10 mM 내지 약 60 mM, 약 10 mM 내지 약 50 mM, 약 10 mM 내지 약 40 mM, 약 11 mM 내지 약 29 mM, 약 12 mM 내지 약 28 mM, 약 13 mM 내지 약 27 mM, 또는 약 14 mM 내지 약 26 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 11 mM 내지 약 29 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 12 mM 내지 약 28 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 13 mM 내지 약 27 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14 mM 내지 약 26 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.5 mM, 약 14.6 mM, 약 14.7 mM, 약 14.8 mM, 약 14.9 mM, 약 15.0 mM, 약 15.1 mM, 약 15.2 mM, 약 15.3 mM, 약 15.4 mM, 또는 약 15.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 14.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.1 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.2 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.3 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.4 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨의 농도는 14.9 mM이다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 15.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.1 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.2 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.3 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.4 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 16.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 17.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 26.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.1 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.2 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.3 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.4 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.5 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.6 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.7 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.8 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 27.9 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 약 28.0 mM의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 인산나트륨 농도가 27.1 mM인 농도로 조성물에 존재한다.
본원에서 일염기성 인산나트륨의 임의의 농도는 부피 당 중량 관점, 예를 들어 mg/ml로 표현될 수 있다. 당업자는 본원에서 개시된 mM 농도를 부피 당 중량 농도로 쉽게 전환할 수 있을 것이다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.42 mg/ml 내지 적어도 약 14.2 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.4 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.6 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.7 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.8 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 1.9 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.1 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.13 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.2 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.25 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.3 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.4 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.6 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.7 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.75 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.8 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 2.9 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.25 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.75 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.8 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.83 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.85 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 3.9 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 4.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 4.25 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 4.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 4.75 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 5.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 5.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 6.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 6.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 7.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 7.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 8.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 8.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 9.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 9.5 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 10.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 11.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 12.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 13.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 14.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 인산나트륨은 적어도 약 14.0 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 인산나트륨은 이염기성 인산나트륨 칠수화물이다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.1 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.2 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.3 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.4 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.6 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.7 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.8 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6.9 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.1 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.2 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.24 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.3 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.4 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.6 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.7 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.8 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7.9 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 8.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 8.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 9.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 9.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 11.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 11.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 12.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 12.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 13.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 13.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 14.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 14.1 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 14.2 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 14.3 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 14.4 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 약 적어도 14.5 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 15.0 mg/ml의 농도로 이염기성 인산나트륨 칠수화물을 포함한다.
일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 2의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 3의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 4의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 5의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 3의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서, 인산염 완충액은 약 1:약 2의 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함한다.
일부 양태에서, 본 개시는 용액 중 (i) 세포외 소포, (ii) 인산칼륨, 및 (iii) 인산나트륨을 포함하는 약학 조성물을 제공하며, 여기서 인산칼륨 및 인산나트륨의 몰비는 약 1 대 약 3 또는 약 1 대 약 2이다.
II.F. 당류
본 개시의 특정 양태는 세포외 소포, 당류, 염화나트륨, 인산칼륨, 및 인산나트륨을 포함하는 약학 조성물에 대한 것이다. 상기 언급된 바와 같이, 당류는 단당류, 이당류, 삼당류, 또는 임의의 다른 당류일 수 있다. 일부 양태에서, 당류는 수크로스이다. 일부 양태에서, 당류는 트레할로스이다.
일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10%, 적어도 약 2% 내지 적어도 약 9%, 약 3% 내지 적어도 약 8%, 적어도 약 4% 내지 적어도 약 7%, 적어도 약 4% 내지 적어도 약 6%, 적어도 약 3% 내지 적어도 약 7%, 적어도 약 5% 내지 적어도 약 10%, 적어도 약 5% 내지 적어도 약 9%, 적어도 약 5% 내지 적어도 약 8%, 또는 적어도 약 5% 내지 적어도 약 7%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 1%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 2%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 3%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 4%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 5%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 6%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 7%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 8%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 9%의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 10%의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 1%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 2%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 2.5%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 3%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 4%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 5%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 8%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 9%의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10%의 수크로스를 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 1%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 2%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 3%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 4%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 5%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 6%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 7%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 8%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 9%의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10%의 트레할로스를 포함한다.
일부 양태에서, 당류, 예를 들어 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 10 mg/ml 내지 적어도 약 100 mg/ml, 적어도 약 20 mg/ml 내지 적어도 약 90 mg/ml, 적어도 약 30 mg/ml 내지 적어도 약 80 mg/ml, 적어도 약 40 mg/ml 내지 적어도 약 70 mg/ml, 적어도 약 40 mg/ml 내지 적어도 약 60 mg/ml, 적어도 약 30 mg/ml 내지 적어도 약 70 mg/ml, 적어도 약 50 mg/ml 내지 적어도 약 100 mg/ml, 적어도 약 50 mg/ml 내지 적어도 약 90 mg/ml, 적어도 약 50 mg/ml 내지 적어도 약 80 mg/ml, 또는 적어도 약 50 mg/ml 내지 적어도 약 70 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 10 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 20 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 30 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 40 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 50 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 60 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 70 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 80 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 90 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다. 일부 양태에서, 당류, 예를 들어, 수크로스 또는 트레할로스는 적어도 약 100 mg/ml의 농도로 조성물에 존재한다.
일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 20 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 30 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 40 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 50 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 60 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 70 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 80 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 90 mg/ml의 수크로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 100 mg/ml의 수크로스를 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 10 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 20 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 30 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 40 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 50 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 60 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 70 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 80 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 90 mg/ml의 트레할로스를 포함한다. 일부 양태에서, 조성물은 적어도 약 100 mg/ml의 트레할로스를 포함한다.
특정 양태에서, 조성물은 적어도 약 2.5%의 수크로스를 포함하며, 여기서 조성물은 약 2% 미만의 수크로스를 포함하는 유사한 조성물에 비해 개선된 안정성을 갖는다.
II.G. 전도도
일부 양태에서, 본 개시의 조성물 I 또는 조성물 II는 약 6 mS/cm +/- 10% 내지 약 10 mS/cm +/- 10%의 전도도를 갖는다. 일부 양태에서, 전도도는 6 mS/cm +/- 10% 내지 약 7 mS/cm +/- 10%, 약 7 mS/cm+/- 10% 내지 약 8 mS/cm +/- 10%, 약 8 mS/cm+/- 10% 내지 약 9 mS/cm +/- 10%, 또는 약 9 mS/cm +/- 10% 내지 약 10 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 6 mS/cm +/- 10%, 약 7 mS/cm +/- 10%, 약 8 mS/cm +/- 10%, 약 9 mS/cm +/- 10%, 또는 약 10 mS/cm +/- 10%이다.
일부 양태에서, 조성물은 약 6 mS/cm +/- 10% 내지 약 10 mS/cm +/- 10%의 전도도를 갖는다. 일부 양태에서, 전도도는 약 6 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 7 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 8 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 9 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 약 10 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 7.23 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 전도도는 8.8 mS/cm +/- 10%이다.
II.H. 항산화제
일부 양태에서, 본 개시의 조성물 I 또는 조성물 II는 항산화제를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 항산화제는 D-메티오닌, L-메티오닌. 아스코르브산, 에리소르빈산, 아스코르브산나트륨, 티오글리세롤, 시스테인, 아세틸시스테인, 시스틴, 디티오에리트레이톨, 글루타치온, 토코페롤, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 중황산나트륨, 디티온산나트륨, A-토코페롤, γ-토코페롤, 갈산프로필, 아스코르빌 팔미테이트, 메타중아황산나트륨, 티오우레아, 티오황산나트륨, 갈산프로필, 비타민 C, N-아세틸 시스테인, 셀레늄 및 티오글리콜산나트륨을 포함한다. 일부 양태에서 항산화제는 메티오닌이다. 다른 양태에서, 항산화제는 D-메티오닌이다. 다른 양태에서, 항산화제는 L-메티오닌이다.
일부 양태에서, 조성물 I 또는 II 항산화제는 티오설페이트 또는 이의 염을 포함한다. 일부 양태에서, 티오설페이트 또는 이의 염은 티오황산나트륨을 포함한다.
일부 양태에서, 본원에서 개시된 조성물은 항환원제를 포함한다. 일부 양태에서, 항환원제는 EDTA, EGTA, CuSO4, S-아데노실메티오닌, 시스테인, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다.
II.I. 프로테아제 억제제
일부 양태에서, 본원에서 개시된 조성물은 프로테아제 억제제를 포함한다. 티오레독신과 같은 단백질은 디설피드 결합으로 단백질을 환원시킬 수 있다. EDTA, EGTA 및 CuSO4와 같은 억제제를 첨가하면 특히 헥소키나제와 같은 메탈로프로테아제의 활성을 감소시킬 수 있다. EEGTA/EDTA는 2가 양이온을 킬레이팅하여 억제한다. 따라서, 일부 양태에서, 조성물은 EDTA, EGTA, CuSO4, 및 이의 임의의 조합으로부터 선택되는 프로테아제 억제제를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 온도는 프로테아제의 활성을 감소시키기 위해 감소된다.
II.J. 조성물의 특징
본 개시의 조성물은 조성물의 EV가 변동하는 온도 조건 하에, 예를 들어 냉동 및/또는 해동되고/되거나 대상체에 투여되는 경우 안정하도록 제형화되었다. 구애받는 것은 아니지만, 본원에서 개시되는 당류, 예를 들어 약 5% w/v의 수크로스와 본원에서 개시되는 특정 비율의 인산칼륨 및 인산나트륨의 조합은 조성물 및 그 안에 함유된 EV에 우수한 안정성을 제공하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 다양한 시기 및 다양한 온도에서 보관될 수 있으며, 여기서 세포외 소포, 예를 들어 엑소좀의 안정성은 감소되지 않는다. 또한, 일부 양태에서, 본원에서 개시되는 조성물은 상온에서 액체로 제형화될 수 있고, 이어서 조성물을 -80℃ 냉동고에 넣어 냉동한 다음, 해동할 수 있다. 따라서, 일부 양태에서, 냉동 전에 조성물은 액체로 보관될 수 있고, 냉동되는 동안에는 조성물은 고체로 보관될 수 있고, 아래에 설명된 대로, 조성물은 EV의 안정성을 손상시키지 않으면서 해동 후에 액체로 보관될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 냉동 전에 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 25℃ 내지 약 1℃의 온도에서 냉동 전에 액체로 보관될 수 있으며, 여기서 EV, 예를 들어 엑소좀의 안정성은 감소되지 않는다. 일부 양태에서, 조성물은 EV, 예를 들어 엑소좀의 안정성을 손상시키지 않으면서 약 25℃ 내지 약 1℃에서 냉동 전에 액체로 보관될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 냉동 전에 적어도 약 4시간, 적어도 약 10시간, 적어도 약 12시간, 적어도 약 15시간, 적어도 약 20시간, 적어도 24시간 동안 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 냉동 전에 약 4시간 내지 약 12시간, 약 5시간 내지 약 12시간, 약 6시간 내지 약 12시간, 약 4시간 내지 약 24시간, 약 6시간 내지 약 24시간, 약 12시간 내지 약 24시간, 또는 약 4시간 약 16시간 동안 액체로 보관된다.. 일부 양태에서, 조성물은 냉동 전에 36시간 미만, 30일 미만, 24시간 미만, 23시간 미만, 22시간 미만, 21시간 미만, 20시간 미만, 19시간 미만, 18시간 미만, 17시간 미만, 16시간 미만, 15시간 미만, 14시간 미만, 13시간 미만, 12시간 미만, 11시간 미만, 10시간 미만 시간, 9시간 미만, 8시간 미만, 7시간 미만, 6시간 미만, 5시간 미만, 또는 4시간 미만 동안 액체로 보관될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 약 1주일 동안 냉동 전에 약 4℃에서 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 4℃에서 최대 1주일 동안 안정할 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 1주일 동안 냉동 전에 약 4℃에서 액체로 보관된 다음 치료를 필요로 하는 대상체에 투여될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 해동되기 전에 일정 시기 동안 냉동된 고체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 0℃ 및 영하의 온도, 예를 들어, 약 0℃ 내지 -80℃의 온도에서 고체로 보관될 수 있고, 여기서 EV, 예를 들어 엑소좀의 안정성은 감소되지 않는다. 일부 양태에서, 조성물은 약 0℃ 내지 -80℃의 온도에서 냉동된 고체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 0℃ 내지 -50℃의 온도에서 냉동된 고체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 0℃ 내지 -20℃의 온도에서 냉동된 고체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 0℃ 내지 -15℃의 온도에서 냉동된 고체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 -80℃에서 최대 6개월 동안 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 -80℃에서 1년 동안 안정할 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 -80℃에서 2년 동안 안정할 수 있다.
본원에서 개시되는 조성물은 다양한 시기 동안 냉동된 고체로 보관될 수 있고, 그 후 치료를 필요로 하는 대상체에 투여하기 위한 제조에서 해동될 수 있다. 일부 양태에서, 해동된 액체는 EV, 예를 들어 엑소좀의 안정성을 손상시키지 않으면서 투여 전에 다양한 길이 동안 다양한 온도에서 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 1℃ 내지 약 25℃의 온도에서 해동되고 액체로 보관될 수 있으며, 여기서 EV, 예를 들어 엑소좀의 안정성은 감소되지 않는다.
일부 양태에서, 조성물은 약 1℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 2℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 3℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 4℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 5℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 6℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 7℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 8℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 9℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 10℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 11℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 12℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 13℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 14℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 15℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 16℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 17℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 18℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 19℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 20℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 21℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 22℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 23℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 24℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 25℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 약 1주일 동안 4℃에서 해동된 액체로 보관될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 4℃에서 최대 1주일 동안 해동된 액체로 안정할 수 있다.
일부 양태에서, 조성물은 보관될 수 있고, 이어서 치료를 필요로 하는 대상체에 직접 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 25℃에서 최대 24시간 동안 보관된 후 치료를 필요로 하는 대상체에 직접 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 4℃에서 최대 3일 동안 보관된 후 치료를 필요로 하는 대상체에 직접 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 4℃에서 최대 7일 동안 보관된 후 치료를 필요로 하는 대상체에 직접 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물은 -80℃에서 최대 6개월 동안 보관되고, 해동된 다음, 치료를 필요로 하는 대상체에 직접 투여될 수 있다.
II.K. 예시적인 조성물
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 40 mM 내지 약 60 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 4 mM 내지 6 mM 농도의 일염기성 인산칼륨; 및
(e) 약 10 mM 내지 약 20 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물의 전도도는 약 7.2 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물의 전도도는 약 7.2 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 10 mM 내지 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 20 mM 내지 약 40 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물의 전도도는 약 8.8 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물의 전도도는 약 8.8 mS/cm +/- 10%이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 1 mM 내지 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 20 mM 내지 약 40 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 11 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 32 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 60 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 1 mM 내지 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 10 mM 내지 약 40 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 40 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 5 mM 내지 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, 조성물의 pH는 약 7.2이다. 일부 양태에서, 조성물은 용액, 예를 들어 액체 제형이다.
II.K.1. 예시적인 조성물 02
일부 양태에서, 본 개시의 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 30 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.0 내지 약 7.4이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 STING 작용제를 포함한다. 일부 양태에서, STING 작용제는 사이클릭 디뉴클레오티드(CDN) STING 작용제 또는 비-사이클릭 디뉴클레오티드 STING 작용제를 포함한다. 일부 양태에서, STING 작용제는 cGMP, 사이클릭 디-GMP(c-디-GMP), cAMP, 사이클릭 디-AMP(c-디-AMP), 사이클릭-GMP-AMP(cGAMP), 사이클릭 디-IMP(c-디-IMP), 사이클릭 AMP-IMP(cAIMP), 및 이의 임의의 유사체를 포함하며 환자의 면역 또는 염증 반응을 자극하거나 향상시키는 것으로 공지되어 있다. 일부 양태에서, CDN은 사이클릭 디뉴클레오티드를 연결하는 2'2', 2'3', 2'5', 3'3', 또는 3'5' 결합, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 동결건조된다.
II.K.1. 예시적인 조성물 03
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10% 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10% 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10% 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 6.7 내지 약 7.7이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10% 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 IL-12 모이어티를 포함한다. 특정 양태에서, IL-12 모이어티가 본원에서 개시된다. 특정 양태에서, IL-12 모이어티는 서열번호 11, 12, 또는 13(표 1A)에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 11에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 12에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) IL-12 모이어티를 포함하는 세포외 소포로서, IL-12 모이어티는 서열번호 11, 12, 또는 13에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) IL-12 모이어티를 포함하는 세포외 소포로서, IL-12 모이어티는 서열번호 11, 12, 또는 13에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) IL-12 모이어티를 포함하는 세포외 소포로서, IL-12 모이어티는 서열번호 13에 나타낸 아미노산을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) IL-12 모이어티를 포함하는 세포외 소포로서, IL-12 모이어티는 서열번호 13에 나타낸 아미노산을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 세포외 소포는 ASO를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 STAT6 전사체(서열번호 23; 표 1B) 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GAAAGGTTCCGTCGGGC(서열번호 144)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 CTGAGTCGCTGAAGCGG(서열번호 145)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GCCCTTGTACTTTTGCATAG(서열번호 193)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GCAAGATCCCGGATTCGGTC(서열번호 185)를 포함한다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 수크로스;
(c) 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이고;
수크로스는 약 73 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이고;
염화나트륨은 약 50 mM, 약 55 mM, 약 60 mM, 약 65 mM, 약 70 mM, 약 75 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포;
(b) 수크로스;
(c) 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이고;
수크로스는 약 73 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이며;
염화나트륨은 약 50 mM, 약 55 mM, 약 60 mM, 약 65 mM, 약 70 mM, 약 75 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이다. 일부 양태에서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포;
(b) 수크로스;
(c) 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이고;
여기서 수크로스는 약 2.5%, 약 2.6%, 약 2.7%, 약 2.8%, 약 2.9%, 약 3.0%, 약 3.1%, 약 3.2%, 약 3.3%, 약 3.4%, 3.5%, 약 3.6%, 약 3.7%, 약 3.8%, 약 3.9%, 약 4.0%, 약 4.1%, 약 4.2%, 약 4.3%, 약 4.4%, 약 4.5%, 약 4.6%, 약 4.7%, 약 4.8%, 약 4.9%, 및 약 5.0%로부터 선택되는 농도이며;
염화나트륨은 약 50 mM, 약 55 mM, 약 60 mM, 약 65 mM, 약 70 mM, 약 75 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이다. 일부 양태에서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함한다
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 73 mM 내지 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5% 내지 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 73 mM 내지 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5% 내지 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 100 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 STAT6 전사체 내의 핵산 서열과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, ASO는 서열번호 91-93으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함한다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 4.5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 4% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 3.5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 3% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GAAAGGTTCCGTCGGGC(서열번호 144)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GAAAGGTTCCGTCGGGC(서열번호 144)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 CTGAGTCGCTGAAGCGG(서열번호 145)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 CTGAGTCGCTGAAGCGG(서열번호 145)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GCCCTTGTACTTTTGCATAG(서열번호 193)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GCCCTTGTACTTTTGCATAG(서열번호 193)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
특정 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GCAAGATCCCGGATTCGGTC(서열번호 185)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 하기:
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, ASO는 핵산 서열 GCAAGATCCCGGATTCGGTC(서열번호 185)를 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5% 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하며, (f) 조성물의 pH는 약 7.2이다.
일부 양태에서, 조성물은 동결건조된다.
III. 세포외 소포, 예를 들어, 엑소좀
대상체의 면역계를 조절할 수 있는 변형된 EV, 예를 들어 엑소좀이 본원에서 개시된다. 본 개시에서 유용한 EV, 예를 들어 엑소좀은 적어도 하나의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 생산하도록 조작되었다. 일부 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 2개의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 3개의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 다른 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 4개의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 추가 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 5개 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 포함한다.
상기 기재된 바와 같이, 본원에서 기재된 EV, 예를 들어 엑소좀은 약 20-300 nm의 지름을 갖는 세포외 소포이다. 특정 양태에서, 본 개시의 EV, 예를 들어, 엑소좀은 약 20-290 nm, 20-280 nm, 20-270 nm, 20-260 nm, 20-250 nm, 20-240 nm, 20-230 nm, 20-220 nm, 20-210 nm, 20-200 nm, 20-190 nm, 20-180 nm, 20-170 nm, 20-160 nm, 20-150 nm, 20-140 nm, 20-130 nm, 20-120 nm, 20-110 nm, 20-100 nm, 20-90 nm, 20-80 nm, 20-70 nm, 20-60 nm, 20-50 nm, 20-40 nm, 20-30 nm, 30-300 nm, 30-290 nm, 30-280 nm, 30-270 nm, 30-260 nm, 30-250 nm, 30-240 nm, 30-230 nm, 30-220 nm, 30-210 nm, 30-200 nm, 30-190 nm, 30-180 nm, 30-170 nm, 30-160 nm, 30-150 nm, 30-140 nm, 30-130 nm, 30-120 nm, 30-110 nm, 30-100 nm, 30-90 nm, 30-80 nm, 30-70 nm, 30-60 nm, 30-50 nm, 30-40 nm, 40-300 nm, 40-290 nm, 40-280 nm, 40-270 nm, 40-260 nm, 40-250 nm, 40-240 nm, 40-230 nm, 40-220 nm, 40-210 nm, 40-200 nm, 40-190 nm, 40-180 nm, 40-170 nm, 40-160 nm, 40-150 nm, 40-140 nm, 40-130 nm, 40-120 nm, 40-110 nm, 40-100 nm, 40-90 nm, 40-80 nm, 40-70 nm, 40-60 nm, 40-50 nm, 50-300 nm, 50-290 nm, 50-280 nm, 50-270 nm, 50-260 nm, 50-250 nm, 50-240 nm, 50-230 nm, 50-220 nm, 50-210 nm, 50-200 nm, 50-190 nm, 50-180 nm, 50-170 nm, 50-160 nm, 50-150 nm, 50-140 nm, 50-130 nm, 50-120 nm, 50-110 nm, 50-100 nm, 50-90 nm, 50-80 nm, 50-70 nm, 50-60 nm, 60-300 nm, 60-290 nm, 60-280 nm, 60-270 nm, 60-260 nm, 60-250 nm, 60-240 nm, 60-230 nm, 60-220 nm, 60-210 nm, 60-200 nm, 60-190 nm, 60-180 nm, 60-170 nm, 60-160 nm, 60-150 nm, 60-140 nm, 60-130 nm, 60-120 nm, 60-110 nm, 60-100 nm, 60-90 nm, 60-80 nm, 60-70 nm, 70-300 nm, 70-290 nm, 70-280 nm, 70-270 nm, 70-260 nm, 70-250 nm, 70-240 nm, 70-230 nm, 70-220 nm, 70-210 nm, 70-200 nm, 70-190 nm, 70-180 nm, 70-170 nm, 70-160 nm, 70-150 nm, 70-140 nm, 70-130 nm, 70-120 nm, 70-110 nm, 70-100 nm, 70-90 nm, 70-80 nm, 80-300 nm, 80-290 nm, 80-280 nm, 80-270 nm, 80-260 nm, 80-250 nm, 80-240 nm, 80-230 nm, 80-220 nm, 80-210 nm, 80-200 nm, 80-190 nm, 80-180 nm, 80-170 nm, 80-160 nm, 80-150 nm, 80-140 nm, 80-130 nm, 80-120 nm, 80-110 nm, 80-100 nm, 80-90 nm, 90-300 nm, 90-290 nm, 90-280 nm, 90-270 nm, 90-260 nm, 90-250 nm, 90-240 nm, 90-230 nm, 90-220 nm, 90-210 nm, 90-200 nm, 90-190 nm, 90-180 nm, 90-170 nm, 90-160 nm, 90-150 nm, 90-140 nm, 90-130 nm, 90-120 nm, 90-110 nm, 90-100 nm, 100-300 nm, 110-290 nm, 120-280 nm, 130-270 nm, 140-260 nm, 150-250 nm, 160-240 nm, 170-230 nm, 180-220 nm, 또는 190-210 nm의 지름을 갖는다. 본원에서 기재된 EV, 예를 들어 엑소좀의 크기는 하기에 기재된 방법에 따라 측정될 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시의 EV, 예를 들어 엑소좀은 내부 표면 및 외부 표면을 포함하는 이중-지질 막("EV, 예를 들어, 엑소좀, 막")을 포함한다. 특정 양태에서, 내부 표면은 EV, 예를 들어 엑소좀의 내부 코어(즉, 내강)를 향한다. 특정 양태에서, 외부 표면은 엔도좀, 다포체, 또는 생산체 세포 또는 표적 세포의 막/세포질과 접촉해 있을 수 있다
일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀 막은 지질 및 지방산을 포함한다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀 막은 인지질, 당지질, 지방산, 스핑고지질, 포스포글리세라이드, 스테롤, 콜레스테롤, 및 포스파티딜세린을 포함한다.
일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀 막은 내부 첨판 및 외부 첨판을 포함한다. 내부 및 외부 첨판의 조성은 당분야에 공지된 경이중층 분포 검정에 의해 결정될 수 있다(예를 들어, 문헌[Kuypers et al., Biohim Biophys Acta 1985 819:170] 참고). 일부 양태에서, 외부 첨판의 조성은 대략 70-90% 콜린 인지질, 대략 0-15% 산성 인지질, 및 대략 5-30% 포스파티딜에탄올아민이다. 일부 양태에서, 내부 첨판의 조성은 대략 15-40% 콜린 인지질, 대략 10-50% 산성 인지질, 및 대략 30-60% 포스파티딜에탄올아민이다.
일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀 막은 글리칸과 같은 하나 이상의 다당류를 포함한다.
일부 양태에서, EV, 예를 들어, 엑소좀 막은 다수의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 EV, 예를 들어 엑소좀(예를 들어, 내강 표면 상에 또는 외부 표면 상에)에 고정할 수 있는 하나 이상의 스캐폴드 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 다수의 외인성 생물학적 활성 모이어티 중 적어도 하나를 EV에 고정하거나 연결한다. 일부 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 다수(예를 들어, 적어도 2개)의 외인성 생물학적 활성 모이어티 각각을 EV에 고정하거나 연결한다. 특정 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 폴리펩티드("엑소좀 단백질")이다. 다른 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 비-폴리펩티드 모이어티이다. 일부 양태에서, 엑소좀 단백질은 엑소좀 막 상에 농축된 막횡단 단백질, 통합 단백질 및 말초 단백질과 같은 다양한 막 단백질을 포함한다. 이들은 다양한 CD 단백질, 수송체, 인테그린, 렉틴 및 카드헤린을 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 엑소좀 단백질)는 스캐폴드 X를 포함한다. 추가 양태에서, 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 엑소좀 단백질)는 하나를 초과하는 스캐폴드 X 모이어티를 포함한다.
일부 양태에서, 본원에서 개시된 EV, 예를 들어 엑소좀은 하나 이상의 페이로드(예를 들어, 생물학적 활성 모이어티)를 표적에 전달할 수 있다. 따라서, 특정 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 1, 2, 3, 4, 5개 이상의 상이한 페이로드를 포함한다. 페이로드는 EV와 접촉하는 표적(예를 들어, 표적 세포)에 작용하는 제제이다. 접촉은 시험관 내 또는 대상체 내에서 발생할 수 있다. EV 내로 도입될 수 있는 페이로드의 비제한적인 예는 뉴클레오티드(예를 들어, 검출 가능한 모이어티 또는 독소를 포함하거나 전사를 방해하는 뉴클레오티드), 핵산(예를 들어, 효소로서의 폴리펩티드를 인코딩하는 DNA 또는 mRNA 분자 또는 miRNA, dsDNA, lncRNA 또는 siRNA와 같은 조절 기능을 갖는 RNA 분자), MS2와 같은 RNA 결합 단백질, 아미노산(예를 들어, 검출 가능한 모이어티 또는 번역을 방해하는 독소를 포함하는 아미노산), 폴리펩티드(예를 들어, 효소), 지질, 탄수화물 및 소분자(예를 들어, 소분자 약물 및 독소)를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 외인성 생물학적 활성 모이어티(예를 들어, 본원에서 개시된 것들)를 포함한다.
IIIA. 페이로드, 예를 들어, 생물학적 활성 모이어티
일부 양태에서, 페이로드는 생물학적 활성 모이어티를 포함한다. 일부 양태에서, 페이로드는 치료 분자를 포함한다. 특정 양태에서, 치료 분자는 대상체에서 면역 반응을 유도할 수 있는 항원을 포함한다. 특정 양태에서, 항원은 종양 항원을 포함한다. 종양 항원의 비제한적 예는 알파-태아단백질(AFP), 암배아 항원(CEA), 상피 종양 항원(ETA), 뮤신 1(MUC1), Tn-MUC1, 뮤신 16(MUC16), 티로시나제, 흑색종 연관 항원(MAGE), 종양 단백질 p53(p53), CD4, CD8, CD45, CD47, CD80, CD86, 프로그래밍된 사멸 리간드 1(PD-L1), 프로그래밍된 사멸 리간드 2(PD-L2), NY-ESO-1, PSMA, TAG-72, HER2, GD2, cMET, EGFR, 메조텔린, VEGFR, 알파-엽산 수용체, CE7R, IL-3, 암-고환 항원(CTA), MART-1 gp100, TNF-관련 아폽토시스-유도 리간드, Brachyury(흑색종에서 우선적으로 발현되는 항원(PRAME)), 또는 이의 조합을 포함한다. 추가 양태에서, 항원은 신생항원(neoantigen)을 포함할 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "신생항원"은 종양 특이적 돌연변이된 유전자에 의해 코딩되는 항원을 나타낸다. 일부 양태에서, 항원은 박테리아, 바이러스, 진균, 원생동물, 또는 이의 임의의 조합으로부터 유래된다. 일부 양태에서, 항원은 발암성 바이러스로부터 유래된다. 추가 양태에서, 항원은 인간 감마 헤르페스 바이러스 4(엡스타인 바 바이러스), 인플루엔자 A 바이러스, 인플루엔자 B 바이러스, 사이토메갈로바이러스, 스타필로코커스 아우레우스, 미코박테리움 투베르쿨로시스, 클라미디아 트라코마티스, HIV-1, HIV- 2, 코로나 바이러스(예를 들어, MERS-CoV 및 SARS CoV), 필로바이러스(예를 들어, 마르부르그 및 에볼라), 스트렙토코커스 피오게네스(Streptococcus pyogenes), 스트렙토코커스 뉴모니애(Streptococcus pneumoniae), 플라스모디아 종(예를 들어, 비박스 및 팔시파룸), 치쿤군야 바이러스, 인간 유두종 바이러스(HPV), B형 간염, C형 간염, 인간 헤르페스 바이러스 8, 단순 헤르페스 바이러스 2(HSV2), 클레브시엘라(Klebsiella) 종, 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 엔테로코커스(Enterococcus) 종, 프로테우스(Proteus) 종, 엔테로박터(Enterobacter) 종, 액티노박터(Actinobacter) 종, 코아굴라제-음성 스타필로코커스(CoNS), 미코플라즈마(Mycoplasma) 종, 또는 이의 조합을 포함하는 군으로부터 유도된다.
일부 양태에서, 항원은 세포 및/또는 체액성 면역 반응을 유도하기 위해 미코박테리움 투베르쿨로시스로부터 유래된다. 일부 양태에서, 항원은 미코박테리움 투베르쿨로시스의 하나 이상의 에피토프(TB 항원)를 포함한다. ESAT-6, TB10.4, CFP10, Rv2031(hspX), Rv2654c(TB7.7) 및 Rv1038c(EsxJ)를 비롯한 다양한 항원이 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염과 연관된다. 예를 들어, 그 전체가 본원에 포함되는, 문헌[Lindestam et al., J. Immunol. 188(10):5020-31 (2012)]을 참고한다.
일부 양태에서, 항원은 자가-항원을 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "자가-항원"은 숙주 세포 또는 조직에 의해 발현되는 항원을 나타낸다.
일부 양태에서, 치료 분자는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 일부 양태에서, 치료 분자는 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 또는 적어도 5개의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티는 세포 표면 단백질을 표적으로 하는 항체이다. 일부 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 scFv, scFab, scFab-Fc, 나노바디, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 작용제 항체, 차단 항체, 표적화 항체, 이의 단편, 또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 작용제 항체는 CD40L 작용제이다. 일부 양태에서, 차단 항체는 프로그래밍된 사멸 1(PD-1), 프로그래밍된 사멸 리간드 1(PD-L1), 세포독성 T-림프구-연관 단백질 4, 및 이의 임의의 조합으로부터 선택되는 표적 단백질에 결합한다. 일부 양태에서, 표적화 항체는 CD3및/또는 CD19에 결합한다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀은 항-IL12 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 항-CD40L 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀은 BITES, 예를 들어 항-CD3 항체 및 항암제, 예를 들어 항-CD19 항체를 포함한다.
일부 양태에서, 치료 분자는 항체의 단편, 예를 들어 scFv, (scFv)2, Fab, Fab', 및 F(ab')2, F(ab1)2, Fv, dAb 또는 CD33, ICAM4, CD40, CDLEC9A, DEC205 및 TfR을 포함하는 Fd 표적화 항원, 및 이의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 치료 분자는 FVIII을 포함하는 혈액 응고 인자이다.
일부 양태에서, 치료 분자는 시스테인 매듭 펩티드를 포함하는 표적화 펩티드이다.
일부 양태에서, 치료 분자는 Cas9 및 징크 핑거 뉴클레아제, CD39, CD73, 및 리소좀산 글루코실세라미다제를 포함하는 효소이다.
일부 양태에서, 치료 분자는 FRB-FKBP를 포함하는 단백질 이량체화 시스템이다.
상기 기재된 바와 같이, 본 개시의 EV, 예를 들어 엑소좀은 아주반트를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 본원에서 개시된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 1, 2, 3, 4, 5개 또는 그 초과의 상이한 아주반트를 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "아주반트"는 페이로드의 치료 효과를 향상시키는(예를 들어, 항원에 대한 면역 반응을 증가시키는) 임의의 물질을 나타낸다. 따라서, 본원에서 기재된 EV, 예를 들어 엑소좀은 항원에 대한 면역 반응을 참조(아주반트가 없는 대응하는 EV 또는 항원 및 아주반트를 포함하는 비-EV 전달 비히클) 대비 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100% 또는 그 초과 증가시킬 수 있다. 아주반트의 비제한적인 예는 인터페론 유전자 자극제(STING) 작용제, toll 유사 수용체(TLR) 작용제, 염증 매개체 및 이의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 아주반트는 세포질 패턴 인식 수용체의 활성화를 유도한다. 세포질 패턴 인식 수용체의 비제한적 예는 인터페론 유전자 자극제(STING), 레티노산 유도성 유전자 I(RIG-1), 흑색종 분화-연관 단백질 5(MDA5), 뉴클레오티드 결합 올리고머화 도메인, 류신 풍부 반복 및 피린 도메인 함유(NLRP), 인플라솜 또는 이의 조합을 포함한다. 특정 양태에서, 아주반트는 STING 작용제이다. 인터페론 유전자 자극제(STING)는 전형적으로 박테리아에 의해 생산되는 사이클릭 디뉴클레오티드의 세포질 센서이다. 활성화되면 I형 인터페론의 생산을 야기하고 면역 반응을 개시한다. 특정 양태에서, STING 작용제는 사이클릭 디뉴클레오티드 STING 작용제 또는 비-사이클릭 디뉴클레오티드 STING 작용제를 포함한다.
cGMP, 사이클릭 디-GMP(c-디-GMP), cAMP, 사이클릭 디-AMP(c-디-AMP), 사이클릭-GMP-AMP(cGAMP), 사이클릭 디-IMP(c-디-IMP), 사이클릭 AMP-IMP(cAIMP) 및 이의 임의의 유사체와 같은, 그러나 이에 제한되지 않는 사이클릭 퓨린 디뉴클레오티드는 환자에서 면역 또는 염증 반응을 자극하거나 향상시키는 것으로 공지되어 있다. CDN은 사이클릭 디뉴클레오티드를 연결하는 2'2', 2'3', 2'5', 3'3' 또는 3'5' 결합, 또는 이의 임의의 조합을 가질 수 있다.
사이클릭 퓨린 디뉴클레오티드는 퓨린 다이뉴클레오티드의 유사체를 생성하기 위한 표준 유기 화학 기법을 통해 변형될 수 있다. 적합한 퓨린 디뉴클레오티드는 아데닌, 구아닌, 이노신, 하이포잔틴, 잔틴, 이소구아닌, 또는 당분야에 공지된 임의의 다른 적절한 퓨린 디뉴클레오티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 사이클릭 디뉴클레오티드는 변형된 유사체일 수 있다. 포스포로티오에이트, 바이포스포로티오에이트, 플루오리네이트 및 디플루오리네이트 변형을 포함하지만 이에 제한되지 않는 당분야에 공지된 임의의 적합한 변형이 사용될 수 있다.
5,6-디메틸잔테논-4-아세트산(DMXAA), 또는 당분야에 공지된 임의의 다른 비사이클릭 디뉴클레오티드 작용제와 같은 비사이클릭 디뉴클레오티드 작용제가 또한 사용될 수 있다.
본 개시과 함께 사용될 수 있는 STING 작용제의 비제한적 예는 DMXAA, STING 작용제-1, ML RR-S2 CDA, ML RR-S2c-디-GMP, ML-RR-S2 cGAMP, 2'3'-c-디-AM(PS)2, 2'3'-cGAMP, 2'3'-cGAMPdFHS, 3'3'-cGAMP, 3'3'-cGAMPdFSH, cAIMP, cAIM(PS)2, 3'3 '-cAIMP, 3'3'-cAIMPdFSH, 2'2'-cGAMP, 2'3'-cGAM(PS)2, 3'3'-cGAMP, 및 이의 조합을 포함한다. STING 작용제의 비제한적인 예는 미국 특허 제9,695,212호, WO 2014/189805 A1, WO 2014/179335 A1, WO 2018/100558 A1, 미국 특허 제10,011,630 B2호, WO 2017/027646 A1, WO 2017/161349 A1, 및 WO 2016/096174 A1에서 확인되며, 각각 그 전체가 참조로 포함된다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 WO 2016/096174, WO 2016/096174A1, WO 2014/093936, WO 2014/189805, WO 2015/077354에 개시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하며, 그 내용은 전체가 본원에 참조로 포함된다. 문헌[Cell reports 11, 1018-1030 (2015)]도 참고한다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 c-디-AMP, c-디-GMP, c-디-IMP, c-AMP-GMP, c-AMP-IMP, 및 c-GMP-IMP를 포함하고, WO 2013/185052 및 문헌[Sci. Transl. Med. 283,283ra52 (2015)]에 기재되어 있으며, 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 WO 2014/189806, WO 2015/185565, WO 2014/179760, WO 2014/179335, WO 2015/017652, WO 2016/096577, WO 2016/120305, WO 2016/145102, WO 2017/027646, WO 2017/075477, WO 2017/027645, WO 2018/100558, WO 2017/175147, 또는 WO 2017/175156에 개시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하며, 각각 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL606, CL611, CL602, CL655, CL604, CL609, CL614, CL656, CL647, CL626, CL629, CL603, CL632, CL633, CL659 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL606 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL611 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL602 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL655 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL604 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL609 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL614 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL647 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL626 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL629 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL603 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL632 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL633 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL659 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL656 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL656의 이성질체 A 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL656의 이성질체 B 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL656의 이성질체 C 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 STING 작용제는 CL656의 이성질체 D 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다.
본 개시의 STING 작용제는 또한 세포외 소포 또는 엑소좀에서 작용제의 캡슐화를 증가시키거나 제어하도록 변형될 수 있다. 이러한 변형은 작용제를 화학물질 또는 효소로 처리하거나 STING 작용제의 극성 또는 전하를 물리적으로 또는 화학적으로 변경함으로써 지질 결합 태그를 추가하는 것을 포함할 수 있다. STING 작용제는 단일 처리 또는 처리의 조합, 예를 들어 지질 결합 태그만 추가하거나 지질 결합 태그를 추가하고 극성을 변경함으로써 변형될 수 있다. 이전 예는 비제한적인 예시적인 경우를 의미한다. 변형의 임의의 조합이 본 개시에서 실시될 수 있음이 고려된다. 변형은 비변형 작용제의 캡슐화에 비해 엑소좀 내 작용제의 캡슐화를 2배 내지 10,000배, 10배 내지 1,000배, 또는 100배 내지 500배 증가시키거나 제어할 수 있다. 변형은 변형되지 않은 작용제의 캡슐화에 비해 엑소좀 내 작용제의 캡슐화를 적어도 2배, 5배, 10배, 20배, 30배, 40배, 50배, 60배, 70배, 80배, 90배, 100배, 200배, 300배, 400배, 500배, 600배, 700배, 800배, 900배, 1000배, 2000배, 3000배, 4000배, 5000배, 6000배, 7000배, 8000배, 9000배, 또는 10,000배 증가시킬 수 있다.
일부 양태에서, 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 아주반트는 TLR 작용제이다. TLR 작용제의 비제한적인 예에는 TLR2작용제(예를 들어, 리포테이코산, 비정형 LPS, MALP-2 및 MALP-404, OspA, 포린, LcrV, 리포만난, GPI 고정부, 리소포스파티딜세린, 리포포스포글리칸(LPG), 글리코포스파티딜이노시톨(GPI), 자이모산, hsp60, gH/gL 당단백질, 헤마글루티닌), TLR3 작용제(예를 들어, 이중 가닥 RNA, 예를 들어, 폴리(I:C)), TLR4 작용제(예를 들어, 지질다당류(LPS), 리포테이코산, β-디펜신 2, 파이브로넥틴 EDA, HMGB1, 스내핀, 테나신 C), TLR5 작용제(예를 들어, 플라겔린), TLR6 작용제, TLR7/8 작용제(예를 들어, 단일 가닥 RNA, CpG-A, 폴리 G10, 폴리 G3, 레시퀴모드(Resiquimod)), TLR9 작용제(예를 들어, 메틸화되지 않은 CpG DNA), 및 이의 조합을 포함한다. TLR 작용제의 비제한적인 예는 WO2008115319A2, US20130202707A1, US20120219615A1, US20100029585A1, WO2009030996A1, WO2009088401A2, 및 WO2011044246A1에서 확인될 수 있고, 각각 그 전체가 참조로 포함된다.
일부 양태에서, 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 아주반트는 염증성 매개체이다.
일부 양태에서, 본 개시의 EV, 예를 들어 엑소좀은 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 면역 조절제를 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 하나 이상의 면역 조절제는 다른 활성 생물학적 분자, 예를 들어, 본원에서 개시된 것들과 조합하여 발현된다. 일부 양태에서, 하나 이상의 면역 조절제는 EV, 예를 들어 엑소좀의 표면(예를 들어, 외부 표면 또는 내강 표면) 상에서 또는 그 내강에서 발현될 수 있다. 따라서, 특정 양태에서, 하나 이상의 면역 조절제는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 외부 표면 상에 또는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 내강 표면 상의 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 스캐폴드 X)에 연결된다. 추가 양태에서, 하나 이상의 면역 조절제는 엑소좀의 내강에 있다(즉, 스캐폴드 X에 연결되지 않음). 특정 양태에서, 면역 조절제는 폴리뉴클레오티드이다. 이들 양태 중 일부에서, 폴리뉴클레오티드는 mRNA, miRNA, siRNA, 안티센스 RNA, shRNA, lncRNA, 및 dsDNA를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서, 면역 조절제는 단백질, 펩티드, 당지질 또는 당단백질이다.
일부 양태에서, 본 조성물을 위해 제형화된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 IL-12를 포함한다. 일부 양태에서, 본 조성물을 위해 제형화된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 CD40L을 포함한다. 일부 양태에서, 본 조성물을 위해 제형화된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 FLT3L을 포함한다. 일부 양태에서, 본 조성물을 위해 제형화된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 IL-12 및 CD40L을 포함한다. 다른 양태에서, EV(예를 들어, 엑소좀)는 IL-12, CD40L, 및 FLT3L을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11, 12, 또는 13에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다(표 1A). 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 11에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 12에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 특정 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다.
[표 1A]
일부 양태에서, IL-12 모이어티는 p35 폴리펩티드 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 약 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 90% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 96% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 97% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 98% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11과 적어도 약 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 11에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12 모이어티는 신호 펩티드가 없다(표 1A 참고).
일부 양태에서, IL-12 모이어티는 p40 폴리펩티드 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 적어도 약 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 90% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 96% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 97% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 98% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 12와 적어도 약 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 3에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12 모이어티는 신호 펩티드가 없다(표 1A 참고).
일부 양태에서, IL-12 모이어티는 p35 폴리펩티드 또는 이의 단편 및 p40 폴리펩티드 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12 모이어티는 단일 폴리펩티드를 포함하고, 여기서 p35 폴리펩티드 또는 이의 단편은 p40 폴리펩티드 또는 이의 단편에 연결된다. 일부 양태에서, p35 폴리펩티드 또는 이의 단편은 링커에 의해 p40 폴리펩티드 또는 이의 단편에 연결된다. 일부 양태에서, 링커는 펩티드 링커이다. 일부 양태에서, 링커는 하나 이상의 아미노산을 포함한다. 일부 양태에서, 링커는 Gly-Ser(GS) 링커를 포함한다. 일부 양태에서, GS 링커는 (G4S)n을 포함하며(여기서, n은 1 내지 10 사이의 정수이다), 일부 양태에서, GS 링커는 (G3S)n을 포함한다(n은 1 내지 10 사이의 정수이다).
특정 양태에서, IL-12 모이어티는 서열번호 13과 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 적어도 약 100% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 90% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 96% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 97% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 98% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13과 적어도 약 99% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, IL-12는 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열로 구성된다. 일부 양태에서, IL-12는 본질적으로 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열로 구성된다. 일부 양태에서, IL-12 모이어티는 신호 펩티드가 없다(표 1A 참고).
일부 양태에서, 본 조성물을 위해 제형화된 EV(예를 들어, 엑소좀)는 STAT6 전사체(서열번호 23; 표 1B) 내의 핵산과 상보적인 10 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 연속 뉴클레오티드 서열을 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드(ASO)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GAAAGGTTCCGTCGGGC(서열번호 144)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 CTGAGTCGCTGAAGCGG(서열번호 145)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GCCCTTGTACTTTTGCATAG(서열번호 193)를 포함한다. 일부 양태에서, ASO는 핵산 서열 GCAAGATCCCGGATTCGGTC(서열번호 185)를 포함한다.
표 1B.
IIIB. 스캐폴드 모이어티, 예를 들어, 스캐폴드 X 또는 스캐폴드 Y
일부 양태에서, 본 개시의 EV, 예를 들어 엑소좀은 이의 조성이 변형된 막을 포함한다. 예를 들어, 이의 막 조성물은 막의 단백질, 지질, 또는 글리칸 함량을 변화시킴으로써 변형될 수 있다.
일부 양태에서, 표면-조작 EV, 예를 들어 엑소좀은 화학적 및/또는 물리적 방법, 예컨대 PEG-유도 융합 및/또는 초음파 융합에 의해 생산된다. 다른 양태에서, 표면-조작 EV, 예를 들어, 엑소좀은 유전 공학에 의해 생산된다. 유전적으로 변형된 생산체 세포 또는 유전적으로 변형된 세포의 자손으로부터 생산된 EV, 예를 들어 엑소좀은 변형된 막 조성을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 표면-조작 EV, 예를 들어 엑소좀은, 더 높은 또는 더 낮은 밀도(예를 들어, 더 많은 수)의 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 엑소좀 단백질, 예를 들어, 스캐폴드 X)를 갖거나, 스캐폴드 모이어티의 변이체 또는 단편을 포함한다.
예를 들어, 표면(예를 들어, 스캐폴드 X)-조작 EV는 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 엑소좀 단백질, 예를 들어, 스캐폴드 X) 또는 이의 변이체 또는 단편을 인코딩하는 외인성 서열로 형질전환된 세포(예를 들어, HEK293 세포)로부터 생산될 수 있다. 외인성 서열로부터 발현된 스캐폴드 모이어티를 포함하는 EV는 변형된 막 조성을 포함할 수 있다.
스캐폴드 모이어티의 다양한 변형 또는 단편이 본 개시의 양태에 사용될 수 있다. 예를 들어, 결합제에 대한 친화도가 향상되도록 변형된 스캐폴드 모이어티는 결합제를 사용하여 정제될 수 있는 표면-조작 EV를 생산하기 위해 사용될 수 있다. EV 및/또는 막에 보다 효과적으로 표적화되도록 변형된 스캐폴드 모이어티가 사용될 수 있다. 엑소좀 막에 대한 특이적이고 효과적인 표적화에 필요한 최소 단편을 포함하도록 변형된 스캐폴드 모이어티도 사용될 수 있다.
스캐폴드 모이어티의 비제한적 예는 하기: 프로스타글란딘 F2 수용체 음성 조절인자(PTGFRN); 바시긴(BSG); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 2(IGSF2); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 3(IGSF3); 면역글로불린 슈퍼패밀리 구성원 8(IGSF8); 인테그린 베타-1(ITGB1); 인테그린 알파-4(ITGA4); 4F2 세포-표면 항원 중쇄(SLC3A2); 및 ATP 수송체 단백질의 한 클래스(ATP1A1, ATP1A2, ATP1A3, ATP1A4, ATP1B3, ATP2B1, ATP2B2, ATP2B3, ATP2B)를 포함한다. 특정 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 전체 단백질이다. 다른 양태에서, 스캐폴드 모이어티는 단백질 단편(예컨대, 기능적 단편)이다.
다른 양태에서, 본 개시에 유용한 스캐폴드 모이어티, 제1 스캐폴드 모이어티, 제2 스캐폴드 모이어티, 및/또는 제3 스캐폴드 모이어티는 테트라스파닌 분자(예를 들어, CD63, CD81, CD9 등), 리소좀-연관 막 단백질 2(LAMP2 및 LAMP2B), 혈소판-유래 성장 인자 수용체(PDGFR), GPI 고정 단백질, 락타드헤린 및 이의 단편, 이들 단백질 또는 이의 단편 중 어느 하나에 친화도를 갖는 펩티드, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는 통상적인 엑소좀 단백질을 포함한다.
일부 양태에서, 본원에서 기재된 표면(예를 들어, 스캐폴드 X)-조작 EV는 당분야에 공지된 EV에 비해 우수한 특징을 실증한다. 예를 들어, 표면(예를 들어, 스캐폴드 X)-조작 EV는 자연 발생 EV 또는 종래의 엑소좀 단백질을 사용하여 생산된 EV보다 표면 상에 더 고농축된 변형된 단백질을 함유한다. 더욱이, 본 개시의 표면(예를 들어, 스캐폴드 X)-조작 EV는 자연 발생 EV 또는 종래의 엑소좀 단백질을 사용하여 생산된 EV에 비해 더 크거나, 더 특이적이거나, 더 제어되는 생물학적 활성을 가질 수 있다.
일부 양태에서, 스캐폴드 X는 프로스타글란딘 F2 수용체 음성 조절인자(PTGFRN 폴리펩티드)를 포함한다. PTGFRN 단백질은 CD9 파트너 1(CD9P-1), Glu-Trp-Ile EWI 모티프-함유 단백질 F(EWI-F), 프로스타글란딘 F2-알파 수용체 조절 단백질, 프로스타글란딘 F2-알파 수용체-연관 단백질, 또는 CD315로도 나타낼 수 있다. 인간 PTGFRN 단백질의 전장 아미노산 서열(Unitprot 접근 번호 Q9P2B2)은 표 2에 서열번호 1로 나타낸다. PTGFRN 폴리펩티드는 신호 펩티드(서열번호 1의 아미노산 1 내지 25), 세포외 도메인(서열번호 1의 아미노산 26 내지 832), 막횡단 도메인(서열번호 1의 아미노산 833 내지 853), 및 세포질 도메인(서열번호 1의 아미노산 854 내지 879)을 함유한다. 성숙 PTGFRN 폴리펩티드는 신호 펩티드가 없는 서열번호 1, 즉 서열번호 1의 아미노산 26 내지 879로 구성된다. 일부 양태에서, 본 개시에 유용한 PTGFRN 폴리펩티드 단편은 PTGFRN 폴리펩티드의 막횡단 도메인을 포함한다. 다른 양태에서, 본 개시에 유용한 PTGFRN 폴리펩티드 단편은 PTGFRN 폴리펩티드의 막횡단 도메인 및 (i) 막횡단 도메인의 N 말단에서 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개, 적어도 150개 아미노산, (ii) 막횡단 도메인의 C 말단에서 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개 아미노산 또는 (i) 및 (ii) 둘 다를 포함한다.
일부 양태에서, PTGFRN 폴리펩티드의 단편은 IgV와 같은 하나 이상의 기능적 또는 구조적 도메인이 없다.
다른 양태에서, 스캐폴드 X는 서열번호 1의 아미노산 26 내지 879와 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 약 100% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 다른 양태에서, 스캐폴드 X는 서열번호 9와 적어도 약 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 약 100% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 다른 양태에서, 스캐폴드 X는 아미노산 돌연변이 1개, 아미노산 돌연변이 2개, 아미노산 돌연변이 3개, 아미노산 돌연변이 4개, 아미노산 돌연변이 5개, 아미노산 돌연변이 6개, 또는 아미노산 돌연변이 7개를 제외하고, 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함한다. 돌연변이는 치환, 삽입, 결실, 또는 이의 임의의 조합일 수 있다. 일부 양태에서, 스캐폴드 X는 서열번호 9의 아미노산 및 서열번호 9의 N 말단 및/또는 C 말단에 1개 아미노산, 2개 아미노산, 3개 아미노산, 4개 아미노산, 5개 아미노산, 6개 아미노산, 7개 아미노산, 8개 아미노산, 9개 아미노산, 10개 아미노산, 11개 아미노산, 12개 아미노산, 13개 아미노산, 14개 아미노산, 15개 아미노산, 16개 아미노산, 17개 아미노산, 18개 아미노산, 19개 아미노산 또는 20개 이상의 아미노산을 포함한다.
다른 양태에서, 스캐폴드 X는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7과 적어도 약 적어도 약 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 약 100% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 다른 양태에서, 스캐폴드 X는 1개의 아미노산 돌연변이, 2개의 아미노산 돌연변이, 3개의 아미노산 돌연변이, 4개의 아미노산 돌연변이, 5개의 아미노산 돌연변이, 6개의 아미노산 돌연변이, 또는 7개의 아미노산 돌연변이를 제외하고, 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 또는 7의 아미노산 서열을 포함한다. 돌연변이는 치환, 삽입, 결실, 또는 이의 임의의 조합일 수 있다. 일부 양태에서, 스캐폴드 X는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7의 아미노산 서열 및 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 또는 7의 N 말단 및/또는 C 말단에 1개의 아미노산, 2개의 아미노산, 3개의 아미노산, 4개의 아미노산, 5개의 아미노산, 6개의 아미노산, 7개의 아미노산, 8개의 아미노산, 9개의 아미노산, 10개의 아미노산, 11개의 아미노산, 12개의 아미노산, 13개의 아미노산, 14개의 아미노산, 15개의 아미노산, 16개의 아미노산, 17개의 아미노산, 18개의 아미노산, 19개의 아미노산, 또는 20개 이상의 아미노산을 포함한다.
표 2.
다른 스캐폴드 X 단백질의 비제한적 예는 미국 특허 제US 10,195,290 B1호 및 제US 10,561,740 B2호에서 확인될 수 있고, 각각 그 전체가 참조로 포함된다.
일부 양태에서, EV에서 발현된 스캐폴드 모이어티는 페이로드, 예를 들어, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제에 융합되지 않는다.
일부 양태에서, 스캐폴드 X는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 내강 표면 및 외부 표면 상에서 동시에, 임의의 모이어티를 연결하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, PTGFRN 폴리펩티드는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 외부 표면에 더하여 내강 내부에(예를 들어, 내강 표면 상에), 아주반트 및/또는 면역 조절제를 연결하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 특정 양태에서, 스캐폴드 X는 이중 목적, 예를 들어, EV, 예를 들어, 엑소좀의 내강 표면 상의 항원 및 외부 표면 상의 아주반트 또는 면역 조절제, EV, 예를 들어 엑소좀의 외부 표면 상의 항원, 및 내강 표면 상의 아주반트 또는 면역 조절제, EV, 예를 들어 엑소좀의 내강 표면 상의 아주반트 및 외부 표면 상의 면역 조절제, 또는 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강 표면 상의 면역 조절제 및 외부 표면 상의 아주반트를 위해 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 스캐폴드 단백질은 스캐폴드 Y를 포함한다. 본원에서 개시된 조성물 및 방법에서 사용될 수 있는 스캐폴드 Y 단백질의 비제한적인 예는, 예를 들어, 국제 공보 WO/2019/099942 또는 WO 2020/101740에 개시된 스캐폴드 Y 단백질을 포함하며, 각각 그 전체가 본원에 참조로 포함된다. 일부 양태에서, 스캐폴드 Y 단백질은 미리스토일화된 알라닌 풍부 단백질 키나아제 C 기질("MARCKS 단백질"); 미리스토일화된 알라닌 풍부 단백질 키나아제 C 기질 유사 1("MARCKSL1 단백질"); 뇌 산 가용성 단백질 1("BASP1 단백질")로부터 선택된다. 일부 양태에서, 스캐폴드 Y 단백질은 전체 단백질 또는 이의 단편(예를 들어, 기능적 단편, 예를 들어, EV, 예를 들어 엑소좀의 내강 표면 상에 모이어티를 고정할 수 있는 가장 작은 단편)일 수 있다. 일부 양태에서, 스캐폴드 Y는 EV, 예를 들어 엑소좀의 내강에 모이어티(예를 들어, STING 작용제 및/또는 IL-12 모이어티)를 고정할 수 있다.
IIIC. 고정 모이어티
일부 양태에서, 하나 이상의 페이로드는 고정 모이어티에 연결될 수 있다. 일부 양태에서, 페이로드를 EV(예를 들어, 엑소좀)의 외부 표면 및/또는 내강 표면에 연결하기 위해 사용될 수 있는 고정 모이어티는 스테롤(예를 들어, 콜레스테롤), GM1, 지질(예를 들어, 지방산), 비타민, 소분자, 펩티드 또는 이의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 고정 모이어티는 지질이다. 지질 고정 모이어티는 당분야에 공지된 임의의 지질, 예를 들어 팔미트산 또는 글리코실포스파티딜이노시톨일 수 있다. 일부 양태에서, 지질은 지방산, 포스파티드, 인지질(예를 들어, 포스파티딜 콜린, 포스파티딜 세린, 또는 포스파티딜 에탄올아민), 또는 이의 유사체(예를 들어, 포스파티딜콜린, 레시틴, 포스파티딜에탄올아민, 세팔린, 또는 포스파티딜세린 또는 이의 유사체 또는 부분, 예컨대 이의 부분적으로 가수분해된 부분)이다.
일반적으로, 고정 모이어티는 화학적으로 부착된다. 그러나, 고정 모이어티는 효소적으로 페이로드에 부착될 수 있다.
본 개시의 방법을 실시하기 위해 사용될 수 있는 막 고정부의 일부 유형이 하기 표에 제시된다:
일부 양태에서, 본 개시의 고정 모이어티는 본원에서 개시된 2개 이상의 유형의 고정 모이어티를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 양태에서, 고정 모이어티는 2개의 지질, 예를 들어 인지질 및 지방산, 또는 2개의 인지질, 또는 2개의 지방산, 또는 지질 및 비타민, 또는 콜레스테롤 및 비타민을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 본 개시에 유용한 고정 모이어티는 친유성 특성을 갖는 스테롤, 스테로이드, 호파노이드(hopanoid), 하이드록시스테로이드, 세코스테로이드, 또는 이의 유사체를 포함한다. 일부 양태에서, 고정 모이어티는 피토스테롤, 미코스테롤 또는 주스테롤과 같은 스테롤을 포함한다. 예시적인 주스테롤은 콜레스테롤 및 24S-하이드록시콜레스테롤을 포함하며; 예시적인 피토스테롤은 에르고스테롤(미코스테롤), 캄페스테롤, 시토스테롤, 및 스티그마스테롤 등을 포함한다. 일부 양태에서, 스테롤은 에르고스테롤, 7-데하이드로콜레스테롤, 콜레스테롤, 24S-하이드록시콜레스테롤, 라노스테롤, 사이클로아르테놀, 푸코스테롤, 사린고스테롤, 캄페스테롤, β-시토스테롤, 시토스타놀, 코프로스타놀, 아베나스테롤, 또는 스티그마스테롤로부터 선택된다. 스테롤은 유리 스테롤이거나, 아실화되거나(스테롤 에스테르), 알킬화되거나(스테릴 알킬 에테르), 설페이트화되거나(스테롤 설페이트), 글리코시드 모이어티에 연결될 수 있고(스테릴 글리코시드), 이는 자체가 아실화될 수 있다(아실화된 스테롤 글리코시드). 일부 양태에서, 고정 모이어티는 콜레스테롤이다.
일부 양태에서, 고정 모이어티는 스테로이드를 포함한다. 일부 양태에서, 스테로이드는 디하이드로테스토스테론, 우바올, 헤시게닌, 디오스게닌, 프로게스테론 또는 코르티솔로부터 선택된다.
일부 양태에서, 고정 모이어티는 지방산이다. 일부 양태에서, 지방산은 단쇄, 중쇄 또는 장쇄 지방산이다. 일부 양태에서, 지방산은 포화 지방산이다. 일부 양태에서, 지방산은 불포화 지방산이다. 일부 양태에서, 지방산은 단일불포화 지방산이다. 일부 양태에서, 지방산은 폴리불포화 지방산, 예컨대 오메가-3 또는 오메가-6 지방산이다.
일부 양태에서, 고정 모이어티는 인지질을 포함한다. 인지질은 모든 세포막의 주요 성분인 지질의 한 클래스이다. 이들은 양친매성 특징 때문에 지질 이중층을 형성할 수 있다. 인지질 분자의 구조는 일반적으로 2개의 소수성 지방산 "꼬리"와 포스페이트기로 구성된 친수성 "머리"로 구성된다. 예를 들어, 인지질은 하기 화학식에 따른 지질일 수 있다:
여기서, Rp는 인지질 모이어티를 나타내고, R1 및 R2는 동일하거나 상이할 수 있는 불포화를 갖거나 갖지 않는 지방산 모이어티를 나타낸다.
일부 양태에서, 페이로드는 절단 가능한 및/또는 절단 불가능한 링커의 임의의 조합을 포함할 수 있는 링커 조합을 통해 본원에서 개시된 고정 모이어티에 연결된다. 어느 하나의 이론에 구애받지 않고, 링커 조합의 기능 중 하나는 고정 모이어티와 페이로드 사이에 최적 간격을 제공하는 것이다.
IIID. 링커
상기 기재된 바와 같이, 본 개시의 세포외 소포(EV)(예를 들어, 엑소좀 및 나노소포)는 본원에서 개시된 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티를 EV(예를 들어, 외부 표면 또는 내강 표면 상)에 연결하는 하나 이상의 링커를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티는 EV에 직접 또는 하나 이상의 스캐폴드 모이어티(예를 들어, 스캐폴드 X)를 통해 연결된다. 예를 들어, 특정 양태에서, 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티는 스캐폴드 X를 통해 엑소좀의 외부 표면에 연결된다. 추가 양태에서, 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티는 스캐폴드 X를 통해 엑소좀의 내강 표면에 연결된다. 링커는 당분야에 공지된 임의의 화학적 모이어티일 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "링커"는 펩티드 또는 폴리펩티드 서열(예를 들어, 합성 펩티드 또는 폴리펩티드 서열) 또는 비-폴리펩티드, 예를 들어, 알킬 사슬을 나타낸다. 일부 양태에서, 2개 이상의 링커는 일렬로 연결될 수 있다. 다수의 링커가 존재하는 경우, 각각의 링커는 동일하거나 상이할 수 있다. 일반적으로, 링커는 유연성을 제공하거나 입체 장애를 방지/완화한다. 링커는 전형적으로 절단되지 않는다; 그러나 특정 양태에서, 이러한 절단이 바람직할 수 있다. 따라서, 일부 양태에서, 링커는 하나 이상의 프로테아제-절단 가능 부위를 포함할 수 있으며, 이는 링커의 서열 내에 위치하거나 링커 서열의 어느 한 말단에서 링커가 측면에 있을 수 있다.
일부 양태에서, 링커는 펩티드 링커이다. 일부 양태에서, 펩티드 링커는 적어도 약 2개, 적어도 약 3개, 적어도 약 4개, 적어도 약 5개, 적어도 약 10개, 적어도 약 15개, 적어도 약 20개, 적어도 약 25개, 적어도 약 30개, 적어도 약 35개, 적어도 약 40개, 적어도 약 45개, 적어도 약 50개, 적어도 약 55개, 적어도 약 60개, 적어도 약 65개, 적어도 약 70개, 적어도 약 75개, 적어도 약 80개, 적어도 약 85개, 적어도 약 90개, 적어도 약 95개, 또는 적어도 약 100개의 아미노산을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 펩티드 링커는 합성, 즉 비자연 발생이다. 하나의 양태에서, 펩티드 링커는 아미노산의 제1 선형 서열을 자연적으로 연결하거나 자연에서 유전적으로 융합되지 않는 아미노산의 제2 선형 서열에 연결하거나 유전적으로 융합시키는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드(또는 폴리펩티드)(예를 들어, 천연 또는 비자연 발생 펩티드)를 포함한다. 예를 들어, 하나의 양태에서, 펩티드 링커는 자연 발생 폴리펩티드의 변형된 형태인(예를 들어, 부가, 치환 또는 결실과 같은 돌연변이를 포함하는) 비-자연 발생 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
링커는 절단에 취약할 수 있고("절단 가능한 링커"), 이에 의해 외인성 생물학적 활성 모이어티의 방출을 촉진한다.
일부 양태에서, 링커는 "환원 민감성 링커"이다. 일부 양태에서, 환원 민감성 링커는 디설피드 결합을 포함한다. 일부 양태에서, 링커는 "산 불안정성 링커"이다. 일부 양태에서, 산 불안정성 링커는 하이드라존을 함유한다. 적합한 산 불안정성 링커는 또한, 예를 들어 시스-아코니틱 링커, 하이드라지드 링커, 티오카바모일 링커, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, ASO는 링커에 의해 EV, 예를 들어, 엑소좀과 연관된다. 일부 양태에서, 링커는 아크릴 포스포르아미다이트(예를 들어, ACRYDITE™), 아데닐화, 아지드(NHS 에스테르), 디곡시제닌(NHS 에스테르), 콜레스테롤-TEG, I-LINKER™, 아미노 변형제(예를 들어, 아미노 변형제 C6, 아미노 변형제 C12, 아미노 변형제 C6 dT, 또는 Uni-Link™ 아미노 변형제), 알킨, 5' 헥시닐, 5-옥타디이닐 dU, 비오틴화(예를 들어, 비오틴, 비오틴(아지드), 비오틴 dT, 비오틴-TEG, 이중 비오틴, PC 비오틴, 또는 데스티오비오틴), 티올 변형(티올 변형제 C3 S-S, 디티올 또는 티올 변형제 C6 S-S), 또는 이의 임의의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 링커는 네롤리돌, 파르네솔, 리모넨, 리날룰, 게라니올, 카르본, 펜콘, 또는 멘톨과 같은 테르펜; 팔미트산이나 미리스트산과 같은 지질; 콜레스테롤; 올레일; 레티닐; 콜레스테릴 잔기; 콜산; 아다만탄 아세트산; 1-피렌 부티르산; 디하이드로테스토스테론; 1,3-비스-O(헥사데실)글리세롤; 게라닐옥시헥실기; 헥사데실글리세롤; 보르네올; 1,3-프로판디올; 헵타데실기; O3-(올레오일)리토콜산; O3-(올레오일)콜렌산; 디메톡시트리틸; 페녹사진, 말레이미드 모이어티, 글루코리니다아제 유형, CL2A-SN38 유형, 엽산; 탄수화물; 비타민 A; 비타민 E; 비타민 K, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 특정 양태에서, ASO는 콜레스테롤 태그를 포함하고, 콜레스테롤 태그는 EV, 예를 들어, 엑소좀의 막과 연합한다. 일부 양태에서, 링커는 절단 불가능한 링커를 포함한다.
일부 양태에서, 링커는 테트라에틸렌 글리콜(TEG), 헥사에틸렌 글리콜(HEG), 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 숙신이미드, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 링커는 생물학적 활성 분자를 링커에 연결하기 위한 스페이서 단위를 포함한다.
일부 양태에서, 하나 이상의 링커는 함께 연결된 더 작은 단위(예를 들어, HEG, TEG, 글리세롤, C2 내지 C12 알킬 등)를 포함한다. 하나의 양태에서, 결합은 에스테르 결합(예를 들어, 포스포디에스테르 또는 포스포로티오에이트 에스테르) 또는 다른 결합이다.
일부 양태에서, 링커는 화학식 R3-(O-CH2-CH2)n- 또는 R3-(0-CH2-CH2)n-O-를 특징으로 하는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함하며, R3은 수소, 메틸 또는 에틸이고 n은 2 내지 200의 값을 갖는다. 일부 양태에서, 링커는 스페이서를 포함하며, 여기서 스페이서는 PEG이다.
일부 양태에서, PEG 링커는 올리고-에틸렌 글리콜, 예를 들어, 디에틸렌 글리콜, 트리에틸렌 글리콜, 테트라에틸렌 글리콜(TEG), 펜타에틸렌 글리콜, 또는 헥사에틸렌 글리콜(HEG) 링커이다.
IV. 치료 방법
EV의 투여가 대상체에게 유익한 효과가 있는 복수의 질환 또는 병태를 치료하기 위한 본원에서 개시되는 약학 조성물의 투여가 추가로 고려된다. 일부 양태에서, 본원에서 개시된 대상체에서의 질환 또는 병태를 치료하는 방법은 대상체에 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양태에서, 본 개시는 비경구, 국소, 정맥내, 경구, 피하, 동맥내, 피내, 경피, 직장, 두개내, 복강내, 비강내, 종양내, 근육내 경로에 의해, 또는 흡입제로서 투여될 수 있는 조성물을 제공한다. 일부 양태에서, EV를 포함하는 약학 조성물은 정맥내, 예를 들어 주사에 의해 투여된다. 경점막 또는 경피 투여를 위해, 투과될 장벽에 적절한 침투제가 제형에서 사용된다. 이러한 침투제는 일반적으로 당분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 경점막 투여를 위해, 세제, 담즙염 및 푸시딘산 유도체를 포함한다. 경점막 투여는 비강 스프레이 또는 좌제의 사용을 통해 달성될 수 있다. 경피 투여를 위해, 변형된 엑소좀은 당분야에 일반적으로 공지된 바와 같이 연고, 고약, 겔 또는 크림으로 제형화된다.
일부 양태에서, EV는 대상체의 순환계로 정맥내 투여된다. 일부 양태에서, EV는 적합한 액체 중에 주입되고 대상체의 정맥을 통해 투여된다. 일부 양태에서, EV는 대상체의 순환계로 동맥내 투여된다. 일부 양태에서, EV는 적합한 액체 중에 주입되고 대상체의 동맥 내로 투여된다. 일부 양태에서, EV는 경막내 투여에 의해 대상체에 투여된다. 일부 양태에서, EV는 척추관 내로 또는 뇌척수액(CSF)에 도달하도록 지주막하 공간 내로 주사를 통해 투여된다. 일부 양태에서, EV는 대상체의 하나 이상의 종양 내로 종양내 투여된다. 일부 양태에서, EV는 비강내 투여에 의해 대상체에 투여된다. 일부 양태에서, EV는 국소 투여 또는 전신 투여의 형태로 코를 통해 흡입될 수 있다. 특정 양태에서, EV는 비강 스프레이로서 투여된다.
일부 양태에서, EV는 복강 내 투여에 의해 대상체에 투여된다. 일부 양태에서, EV는 적합한 액체 중에 주입되고 대상체의 복강 내로 주사된다. 일부 양태에서, 복강내 투여는 림프관으로의 EV의 분배를 초래한다. 일부 양태에서, 복강내 투여는 흉선, 비장 및/또는 골수로의 EV의 분배를 초래한다. 일부 양태에서, 복강내 투여는 하나 이상의 림프절로의 EV의 분배를 초래한다. 일부 양태에서, 복강내 투여는 경추 림프절, 서혜부 림프절, 종격 림프절, 또는 흉골 림프절 중 하나 이상으로의 EV의 분배를 초래한다. 일부 양태에서, 복강내 투여는 췌장으로의 EV의 분배를 초래한다.
일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀은 눈주위 투여에 의해 대상체에 투여된다. 일부 양태에서, s는 눈주위 조직 내로 주사된다. 눈주위 약물 투여는 결막하, 전방 힘줄-하, 후방 힘줄-하, 및 눈뒤 투여 경로를 포함한다.
일부 양태에서, 치료는 예방적이다. 일부 양태에서, 본 개시를 위한 EV는 면역 반응을 유도하기 위해 사용된다. 일부 양태에서, 본 개시를 위한 EV는 대상체를 백신접종하기 위해 사용된다.
일부 양태에서, 질환 또는 병태는 암, 섬유증, 혈우병, 당뇨병, 성장 인자 결핍, 안과 질환, 폼페병, 리소좀 저장 장애, 점액낭종증, 낭성 섬유증, 뒤센 및 베커 근이영양증, 트랜스티레틴 아밀로이드증, 혈우병 A, 혈우병 B, 아데노신-데아미나제 결핍, 레버 선천적 흑암증, X-연관 부신백질영양증, 이색성 백질영양증, OTC 결핍, 글리코겐 저장 질환 1A, 크리글러-나자르 증후군, 원발성 고옥살산혈증 1형, 급성 간헐적 과증식 포르피린증, 페닐케톤뇨, 선천성 고콜레스테롤혈증, 점액다당증 유형 VI, α1 항트립신 결핍, 및 고콜레스테롤혈증이다.
일부 양태에서, 질환 또는 장애는 이식편 대 숙주병(GvHD)이다. 일부 양태에서, 본 개시로 치료받을 수 있는 질환 또는 장애는 자가면역 질환이다. 자가면역 질환의 비제한적 예는 다발성 경화증, 말초 신경염, 쇼그렌 증후군, 류마티스 관절염, 탈모증, 자가면역 췌장염, 베체트병, 물집유사 물집증, 셀리악병, 데빅병(시신경척수염), 사구체신염, IgA 신장병증, 유별 혈관염, 경피증, 당뇨병, 동맥염, 백반증, 궤양성 결장염, 과민성 대장 증후군, 건선, 포도막염, 전신 홍반성 루푸스, 및 이의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 질환 또는 장애는 감염성 질환이다. 특정 양태에서, 질환 또는 장애는 종양원성 바이러스이다. 일부 양태에서, 본 개시로 치료받을 수 있는 감염성 질환은 인간 감마 헤르페스 바이러스 4(엡스타인 바 바이러스), 인플루엔자 A 바이러스, 인플루엔자 B 바이러스, 사이토메갈로바이러스, 스타필로코커스 아우레우스, 미코박테리움 투베르쿨로시스, 클라미디아 트라코마티스, HIV-1, HIV- 2, 코로나 바이러스(예를 들어, MERS-CoV 및 SARS CoV), 필로바이러스(예를 들어, 마르부르그 및 에볼라), 스트렙토코커스 피오게네스, 스트렙토코커스 뉴모니애, 플라스모디아 종(예를 들어, 비박스 및 팔시파룸), 치쿤군야 바이러스, 인간 유두종 바이러스(HPV), B형 간염, C형 간염, 인간 헤르페스 바이러스 8, 단순 헤르페스 바이러스 2(HSV2), 클레브시엘라(Klebsiella) 종, 슈도모나스 애루기노사, 엔테로코커스 종, 프로테우스 종, 엔테로박터 종, 액티노박터 종, 코아굴라제-음성 스타필로코커스(CoNS), 미코플라즈마 종, 또는 이의 조합을 포함하지만 이에 제한되는 것은 아니다.
일부 양태에서, 암은 방광암, 자궁경부암, 신세포암, 고환암, 결장직장암, 폐암, 두경부암, 난소, 림프종, 간암, 교모세포종, 흑색종, 골수종, 백혈병, 췌장암, 또는 이의 조합이다.
특정 양태에서, 암은 STAT6 단백질의 증가된 발현과 연관된다. 본 개시로 치료받을 수 있는 암의 비제한적인 예는, 결장직장암, 폐암(예를 들어, 비소세포 폐암(NSCLC)), 췌장암(예를 들어, 췌장관 선암종(PDAC)), 백혈병, 자궁암, 난소암, 방광암, 담도암, 위암, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 암은 결장 선암종, 직장 선암종, 췌장 선암종, 췌장관 선암종(PDAC), 난소 장액 낭종 선암종, 급성 골수성 백혈병, 고환암(예를 들어, 고환 생식 세포 종양, 정상피종, 비-정상피종 및 융모암종), 폐 선암종, 뇌 하부 등급 교종, 다형성 교모세포종, 포도막 흑색종, 갑상선 암종, 자궁체 자궁내막 암종, 자궁 암육종, 크롬친화세포종, 곁신경절종, 및 이의 임의의 조합을 포함한다. 특정 양태에서, 암은 골수성이 풍부한 암이다. 일부 양태에서, 암은 간암을 포함한다. 일부 양태에서, 암은 간세포암(HCC)을 포함한다. 일부 양태에서, 암은 췌장관 선암종(PDAC)을 포함하고, 일부 양태에서, 암은 결장직장암종(CRC)을 포함한다. 일부 양태에서, 암은 난소암을 포함한다. 일부 양태에서, 암은 연수막암을 포함한다.
암이 있는 대상체에 투여되는 경우, 특정 양태에서, 본 개시의 EV는 면역 반응을 상향 조절할 수 있고, 대상체의 면역계의 종양 표적화를 향상시킬 수 있다. 일부 양태에서, 치료받는 암은 백혈구(T-세포, B-세포, 대식구, 수지상 세포, 단핵구)의 종양 미세환경 내의 침윤, 또는 소위 "핫(hot) 종양" 또는 "염증성 종양"을 특징으로 한다. 일부 양태에서, 치료받는 암은 종양 미세환경 내로의 백혈구 침윤의 낮은 수준 또는 검출 불가능한 수준, 또는 소위 "콜드(cold) 종양" 또는 "비염증성 종양"을 특징으로 한다. 일부 양태에서, EV는 "콜드 종양"을 "핫 종양"으로 전환시키기에 충분한 양으로 및 그러한 시간 동안 투여되며, 즉, 상기 투여는 종양 미세환경 내로의 백혈구(예컨대 T-세포)의 침윤을 초래한다. 특정 양태에서, 암은 방광암, 자궁경부암, 신세포암, 고환암, 결장직장암, 폐암, 두경부암, 및 난소, 림프종, 간암, 교모세포종, 흑색종, 골수종, 백혈병, 췌장암, 또는 이의 조합을 포함한다. 다른 용어에서, "원위 종양" 또는 "원부 종양"은 원래(또는 원발성) 종양으로부터 원부 장기 또는 원부 조직, 예를 들어, 림프절로 확산된 종양을 나타낸다. 일부 양태에서, 본 개시의 EV는 전이성 확산 후 종양을 치료한다.
V. 조작된 엑소좀을 생산하는 방법
본 개시의 EV, 예를 들어 엑소좀은 시험관내 성장시킨 세포 또는 대상체의 체액으로부터 생산될 수 있다. 시험관내 세포 배양으로부터 엑소좀을 생산하는 경우, 다양한 생산체 세포가 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 생산체 세포는 포유류 세포주, 식물 세포주, 곤충 세포주, 진균 세포주, 또는 원핵 세포주일 수 있다. 특정 양태에서, 생산체 세포는 포유류 세포주이다. 포유류 세포주의 비제한적인 예는 인간 배아 신장(HEK) 세포주, 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포주, HT-1080 세포주, HeLa 세포주, PERC-6 세포주, CEVEC 세포주, 섬유아세포 세포주, 양막 세포 세포주, 상피 세포주, 중간엽 줄기 세포(MSC) 세포주 및 이의 조합을 포함한다. 특정 양태에서, 포유류 세포주는 HEK-293 세포, BJ 인간 포피 섬유아세포, fHDF 섬유아세포, AGE.HN® 뉴런 전구체 세포, CAP® 양막 세포, 지방 중간엽 줄기 세포, RPTEC/TERT1 세포, 또는 이의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 생산체 세포는 일차 세포이다. 특정 양태에서, 일차 세포는 일차 포유류 세포, 일차 식물 세포, 일차 곤충 세포, 일차 진균 세포, 또는 일차 원핵 세포일 수 있다.
일부 양태에서, 생산체 세포는 면역 세포, 예컨대 항원 제시 세포, T 세포, B 세포, 자연 살해 세포(NK 세포), 대식구, T 헬퍼 세포, 또는 조절 T 세포(Treg 세포)가 아니다. 다른 양태에서, 생산체 세포는 항원 제시 세포(예를 들어, 수지상 세포, 대식구, B 세포, 비만 세포, 호중구, 쿠퍼-브로윅즈(Kupffer-Browicz) 세포, 또는 임의의 이러한 세포로부터 유래된 세포)가 아니다.
생산체 세포는 본원에서 기재된 엑소좀을 생산하기 위해 하나 이상의 외인성 서열(예를 들어, 본원에서 개시된 하나 이상의 외인성 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, 면역 조절제, 예를 들어, IL-12 또는 ASO, 예를 들어, STAT6 ASO를 인코딩함)을 포함하도록 유전적으로 변형될 수 있다. 유전적으로 변형된 생산체 세포는 일시적 또는 안정한 형질전환에 의해 외인성 서열을 함유할 수 있다. 외인성 서열은 플라스미드로서 형질전환될 수 있다. 외인성 서열은 생산체 세포의 게놈 서열 내로, 표적 부위 또는 랜덤 부위에 안정적으로 통합될 수 있다. 일부 양태에서, 안정한 세포주는 본원에서 개시된 EV, 예를 들어 엑소좀의 생산을 위해 생성된다.
외인성 서열은 엑소좀 단백질을 인코딩하는 내인성 서열의 상류(5'-말단) 또는 하류(3'-말단) 내에 위치하는, 생산체 세포의 게놈 서열 내로 삽입될 수 있다. 당분야에 공지된 다양한 방법이 생산체 세포 내로의 외인성 서열의 도입을 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 다양한 유전자 편집 방법(예를 들어, 상동 재조합, 트랜스포존-매개 시스템, loxP-Cre 시스템, CRISPR/Cas9 또는 TALEN을 사용하는 방법)을 사용하여 변형된 세포는 본 개시의 범위 내에 있다.
외인성 서열은 본원에서 개시된 스캐폴드 모이어티 또는 이의 단편 또는 변이체를 인코딩하는 서열을 포함할 수 있다. 스캐폴드 모이어티를 인코딩하는 서열의 여분의 카피는 본원에서 기재된 엑소좀을 생산하기 위해 도입될 수 있다(예를 들어, 더 높은 밀도의 스캐폴드 모이어티를 갖거나, EV, 예를 들어, 엑소좀의 표면 상에 또는 내강 표면 상에 다수의 상이한 스캐폴드 모이어티를 발현함). 스캐폴드 모이어티의 변형 또는 단편을 인코딩하는 외인성 서열은 스캐폴드 모이어티의 변형 또는 단편을 포함하는 내강-조작 및/또는 표면-조작 엑소좀을 생산하기 위해 도입될 수 있다.
일부 양태에서, 생산체 세포는 본원에서 기재된 외인성 생물학적 활성 모이어티에 연결된 하나 이상의 스캐폴드 모이어티를 인코딩하는 하나 이상의 벡터로 변형, 예를 들어 형질감염될 수 있다.
VI. 페이로드를 갖는 EV를 생산하는 방법
VIA. 페이로드를 로딩하는 방법
페이로드, 예를 들어 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제는 당분야에 공지된 임의의 적절한 기법을 통해 EV, 예를 들어 엑소좀에 캡슐화될 수 있다. 생체분자를 EV, 예를 들어 엑소좀 내로 로딩하는 모든 공지된 방식이 본원에서 사용하기에 적합한 것으로 간주되는 것으로 고려된다. 이러한 기법은 수동 확산, 전기천공, 화학적 또는 중합체성 형질감염, 바이러스 형질도입, 기계적 막 파쇄 또는 기계적 전단, 또는 이의 임의의 조합을 포함한다. 페이로드, 예를 들어 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제 및 EV, 예를 들어 엑소좀은 캡슐화 동안 적절한 완충액 중 인큐베이션될 수 있다.
한 양태에서, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제는 수동 확산에 의해 EV, 예를 들어, 엑소좀에 의해 캡슐화된다. 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제 및 EV, 예를 들어 엑소좀은 함께 혼합되고 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제가 소포 지질 이중층을 통해 확산하기에 충분한 시기 동안 인큐베이션되고, 이에 의해 EV, 예를 들어 엑소좀에 캡슐화될 수 있다. 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제 및 EV, 예를 들어 엑소좀은 약 1 내지 30시간, 2 내지 24시간, 4 내지 18시간, 6 내지 16시간, 8 내지 14시간, 10 내지 12시간, 6 내지 12시간, 12 내지 20시간, 14 내지 18시간, 또는 20 내지 30시간 동안 함께 인큐베이션될 수 있다. STING 작용제 및 EV, 예를 들어 엑소좀은 약 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 12시간, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간, 24시간, 26시간 또는 30시간 동안 함께 인큐베이션될 수 있다.
EV, 예를 들어 엑소좀 용액의 완충 조건은 또한 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 캡슐화를 증가시키거나 제어하도록 변경될 수 있다. 하나의 양태에서, 완충액은 수크로스를 갖는 인산염 완충 식염수(PBS)일 수 있다. 소포의 구조적 특성에 영향을 미치는 전단 보호제, 점도 변형제, 및/또는 용질과 같은 추가적인 완충액 변형이 또한 사용될 수 있다. 막 연화 물질 및 분자 크라우딩제와 같은 부형제가 또한 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제, 캡슐화의 효율을 개선하기 위해 첨가될 수 있다. 완충액에 대한 다른 변형은 특정 pH 범위 및/또는 염의 농도, 유기 용매, 소분자, 세제, 쯔비터이온(zwitterions), 아미노산, 중합체, 및/또는 여러 농도를 포함하는 상기의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
인큐베이션 동안, EV, 예를 들어 엑소좀 및 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 용액의 온도는 생물학적 활성 모이어티의 캡슐화를 증가시키거나 제어하도록 변화될 수 있다. 온도는 실온일 수 있다. 온도는 약 15℃-90℃, 15-30℃, 30-50℃, 50-90℃일 수 있다. 일부 양태에서, 온도는 약 15℃, 20℃, 35℃, 30℃, 35℃, 37℃, 40℃, 45℃, 50℃, 55℃, 60℃, 65℃, 70℃, 75℃, 80℃, 85℃, 또는 90℃이다.
EV, 예를 들어 엑소좀과 함께 생물학적 활성 모이어티의 인큐베이션 동안 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 농도가 또한 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 캡슐화를 증가시키거나 제어하도록 변경될 수 있다. 예를 들어, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제의 농도는 적어도 0.01 mM 내지 100 mM STING 작용제일 수 있다. 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제의 농도는 적어도 0.01-1 mM, 1-10 mM, 10-50 mM, 또는 50-100 mM일 수 있다. 작용제의 농도는 적어도 0.01 mM, 0.02 mM, 0.03 mM, 0.04 mM, 0.05 mM, 0.06 mM, 0.07 mM, 0.08 mM, 0.09 mM, 0.1 mM, 0.2 mM, 0.3 mM, 0.4 mM, 0.5 mM, 0.6 mM, 0.7 mM, 0.8 mM, 0.9 mM, 1 mM, 2 mM, 3 mM, 4 mM, 5 mM, 6 mM, 7 mM, 8 mM, 9 mM, 10 mM, 15 mM, 20 mM, 30 mM, 35 mM, 40 mM, 45 mM, 50 mM, 55 mM, 60 mM, 65 mM, 70 mM, 75 mM, 80 mM, 85 mM, 90 mM, 95 mM 또는 100 mM일 수 있다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 농도는 적어도 약 1 mM이다.
일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어, STING 작용제는 적어도 약 500 μM, 적어도 약 600 μM, 적어도 약 700 μM, 적어도 약 800 μM, 적어도 약 900 μM, 적어도 약 1000 μM, 적어도 약 1100 μM, 적어도 약 1200 μM, 적어도 약 1300 μM, 적어도 약 1400 μM, 적어도 약 1500 μM, 적어도 약 1600 μM, 적어도 약 1700 μM, 적어도 약 1800 μM, 적어도 약 1900 μM, 또는 적어도 약 2000 μM의 농도로 혼합물 중 인큐베이션된다. 일부 양태에서, CDN은 적어도 약 2500 μM, 적어도 약 2600 μM, 적어도 약 2700 μM, 적어도 약 2800 μM, 적어도 약 2900 μM, 적어도 약 3000 μM, 적어도 약 3100 μM, 적어도 약 3200 μM, 적어도 약 3300 μM, 적어도 약 3400 μM, 적어도 약 3500 μM, 적어도 약 3600 μM, 적어도 약 3700 μM, 적어도 약 3800 μM, 적어도 약 3900 μM, 또는 적어도 약 3000 μM의 농도로 혼합물 중 인큐베이션된다.
일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제는 약 500 μM 내지 약 100 mM, 약 500 μM 내지 약 90 mM, 약 500 μM 내지 약 80 mM, 약 500 μM 내지 약 70 mM, 약 500 μM 내지 약 60 mM, 약 500 μM 내지 약 50 mM, 약 500 μM 내지 약 40 mM, 약 500 μM 내지 약 30 mM, 약 500 μM 내지 약 20 mM, 약 500 μM 내지 약 10 mM, 또는 약 500 μM 내지 약 1 mM의 농도로 혼합물 중 인큐베이션된다. 일부 양태에서, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제는 약 500 μM 내지 약 10 mM, 약 500 μM 내지 약 9 mM, 약 500 μM 내지 약 8 mM, 약 500 μM 내지 약 7 mM, 약 500 μM 내지 약 6 mM, 약 500 μM 내지 약 5 mM, 약 500 μM 내지 약 4 mM, 약 500 μM 내지 약 3 mM, 약 500 μM 내지 약 2 mM, 또는 약 500 μM 내지 약 1 mM로 혼합물 중 인큐베이션된다.
생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제와 인큐베이션되는 세포외 입자의 수가 또한 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제의 캡슐화를 증가시키거나 제어하도록 변경될 수 있다. 정제된 EV, 예를 들어 엑소좀 입자의 수는 적어도 약 106 내지 적어도 약 1020개의 정제된 소포의 총 입자일 수 있다. 정제된 입자의 수는 약 108 내지 1018, 1010 내지 1016, 108 내지 1014, 또는 1010 내지 1012개의 정제된 소포의 총 입자일 수 있다. 정제된 입자의 수는 적어도 약 106, 108, 1010, 1012, 1014, 1016, 1018, 또는 1020개의 정제된 소포의 총 입자일 수 있다.
VIB. EV 정제 방법
본 개시를 위해 제조된 EV, 예를 들어 엑소좀은 생산체 세포로부터 단리될 수 있다. EV, 예를 들어 엑소좀의 모든 공지된 단리 방식은 본원에서 사용하기에 적합한 것으로 간주되는 것으로 고려된다. 예를 들어, EV, 예를 들어 엑소좀의 물리적 특성은, 전기 전하(예를 들어, 전기영동 분리), 크기(예를 들어, 여과, 분자 체질 등), 밀도(예를 들어, 정형 또는 구배 원심분리), 스베드베르그 상수(예를 들어, 외력을 가하거나 가하지 않은 침강 등)에 기반한 분리를 포함하는 매체 또는 다른 원천 물질로부터 이들을 분리하기 위해 사용될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 단리는 하나 이상의 생물학적 특성에 기반할 수 있고, 예를 들어, 침전, 고상으로의 가역적 결합, FACS 분리, 특이적 리간드 결합, 비특이적 리간드 결합 등을 위한 표면 마커를 사용할 수 있는 방법을 포함한다. 또 다른 고려된 방법에서, EV, 예를 들어 엑소좀은 또한 PEG-유도 융합 및/또는 초음파 융합을 포함하는 화학적 및/또는 물리적 방법을 사용하여 융합될 수 있다.
제형화 이전에, EV, 예를 들어 엑소좀은 또한 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제와 인큐베이션 후에 정제되어, 조성물로부터 캡슐화되지 않은, 유리, 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제를 제거할 수 있다. 이전에 개시된 방법의 모든 방식이 또한 EV, 예를 들어 엑소좀의 물리적 또는 생물학적 특성에 기반한 단리를 포함하여, 본원에서 사용하기에 적합한 것으로 간주된다.
단리, 정제, 및 농축은 일반적이고 비-선택적 방식으로(전형적으로 연속 원심분리 포함함) 수행될 수 있다. 대안적으로, 단리, 정제, 및 농축은(예를 들어, 생산체 세포-특이적 표면 마커를 사용하여) 보다 특이적이고 선택적인 방식으로 수행될 수 있다. 예를 들어, 특이적 표면 마커는 면역침전, FACS 정렬, 친화도 정제, 자성 단리를 위한 비드-결합 리간드 등에서 사용될 수 있다.
일부 양태에서, 크기 배제 크로마토그래피는 EV, 예를 들어 엑소좀을 단리 또는 정제하기 위해 사용될 수 있다. 크기 배제 크로마토그래피 기법은 당분야에 공지되어 있다. 예시적인, 비제한적 기법이 본원에서 제공된다. 일부 양태에서, 공극 부피 분율이 단리된 관심 EV, 예를 들어 엑소좀을 포함한다. 일부 양태에서, 예를 들어, 밀도 구배 원심분리는 EV, 예를 들어 엑소좀을 추가 단리하기 위해 사용될 수 있다. 또한, 일부 양태에서, 생산체 세포-유래 EV, 예를 들어 엑소좀을 다른 기원의 EV와 추가 분리하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 생산체 세포-유래 EV, 예를 들어 엑소좀은 생산체 세포에 특이적인 항원 항체를 사용하는 면역흡착 포획에 의해 비-생산체 세포-유래 EV, 예를 들어 엑소좀과 분리될 수 있다.
일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀의 단리에는 크기 배제 크로마토그래피 또는 이온 크로마토그래피, 예컨대 음이온 교환, 양이온 교환, 또는 혼합 모드 크로마토그래피가 관여될 수 있다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀의 단리에는 탈염, 투석, 접선류 여과, 한외여과, 또는 정용여과, 또는 이의 임의의 조합이 관여될 수 있다0. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀의 단리에는 차동 원심분리, 크기-기반 막 여과, 농도 및/또는 속도 구역 원심분리를 포함하지만 이에 제한되지 않는 방법의 조합이 관여될 수 있다. 일부 양태에서, EV, 예를 들어 엑소좀의 단리에는 하나 이상의 원심분리 단계가 관여될 수 있다. 원심분리는 약 50,000 내지 150,000 x g에서 수행될 수 있다. 원심분리는 약 50,000 x g, 75,000 x g, 100,000 x g, 125,000 x g, 또는 150,000 x g에서 수행될 수 있다.
본 개시를 위해 제조된 EV, 예를 들어 엑소좀은 다중 모드 크로마토그래피를 통해 단리될 수 있다. 본 개시의 방법은 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제, 예를 들어 하나 이상의 사이클릭 디뉴클레오티드(CDN, 예를 들어 STING 작용제)와 연관된 세포외 소포를 포함하는 조성물을 제조하는데 유용하며, 세포외 소포를 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제, 예를 들어 하나 이상의 사이클릭 디뉴클레오티드(CDN)와 혼합물 중 인큐베이션하는 단계, 다중 모드 크로마토그래피를 사용하여 세포외 소포를 분리하는 단계를 포함한다.
다중 모드 크로마토그래피는 EV 제조물로부터 유리 생물학적 활성 모이어티, 예를 들어 STING 작용제를 제거하기 위해 사용될 수 있다. EV, 예를 들어 엑소좀 단리의 모든 공지된 방식은 본원에서 사용하기에 적합한 것으로 간주되는 것으로 고려된다. 예를 들어, EV, 예를 들어 엑소좀의 물리적 특성은, 전기 전하(예를 들어, 전기영동 분리), 크기(예를 들어, 여과, 분자 체질 등), 밀도(예를 들어, 정형 또는 구배 원심분리), 스베드베르그(Svedberg) 상수(예를 들어, 외력을 가하거나 가하지 않은 침강 등)에 기반한 분리를 포함하는 매체 또는 다른 원천 물질로부터 이들을 분리하기 위해 사용될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 단리는 하나 이상의 생물학적 특성에 기반할 수 있고, (예를 들어, 침전, 고상으로의 가역적 결합, FACS 분리, 특이적 리간드 결합, 비특이적 리간드 결합 등을 위해) 표면 마커를 사용할 수 있는 방법을 포함한다. 또 다른 추가로 고려된 방법에서, EV, 예를 들어 엑소좀은 또한 PEG-유도 융합 및/또는 초음파 융합을 포함하는 화학적 및/또는 물리적 방법을 사용하여 융합될 수 있다. 일부 양태에서, 다중 모드 컬럼은 CaptoCore 700, Capto MMC, 또는 Capto MMC ImpRes를 포함하는 군으로부터 선택된다. 일부 양태에서, 다중 모드 컬럼은 Captocore 700이다. 일부 양태에서, 다중 모드 컬럼은 Captocore MMC이다. 일부 양태에서, 다중 모드 컬럼은 Capto MMC ImpRes이다.
상기 인용된 모든 참고문헌뿐만 아니라 본원에서 인용된 모든 참고문헌은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
하기 실시예는 예시로서 제공되며, 제한으로서 제공되지 않는다.
실시예
본 개시는 하기 실시예에 의해 추가로 예시된다. 실시예는 단지 예시적인 목적들을 위해 제공되고, 어떤 방식으로든 본 개시의 범위 또는 내용을 제한하는 것으로 해석되지 않는다. 본 개시의 실시는 달리 지시되지 않는 한, 당분야의 기술 내에서 단백질 화학, 생화학, 재조합 DNA 기법 및 약리학의 종래 방법을 사용할 것이다. 이러한 기법은 문헌에서 충분히 설명된다. 예를 들어, 문헌[T.E. Creighton, Proteins: Structures and Molecular Properties (W.H. Freeman and Company, 1993); Green & Sambrook et al., Molecular Cloniing: A Laboratory Manual, 4th Edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2012); Colowick & Kaplan, Methods In Enzymology (Academic Press); Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition (Pharmaceutical Press, 2012); Sundberg & Carey, Advanced Organic Chemistry: Parts A and B, 5 th Edition (Springer, 2007)]을 참고한다.
실시예 1: 천연 엑소좀과 단백질 X 엑소좀의 안정성 평가
다른 pH 조건 하에서의 천연 엑소좀 및 단백질 X-함유 엑소좀의 안정성을 평가하였다. 안정성을 평가하기 위해 선택된 평가 접근은 동적 광 산란 및 제타-전위 분석을 통해 크기 및 표면 전하를 모니터링하는 것이었다.
물질
천연 인간 배아 신장(HEK) 세포 엑소좀을 조작하고 MilliQ 초순수 중 대략 5E12로 제조하였다. 단백질 X 세포외 소포(CB-101)를 조작하고 인산염 완충 식염수 중 약 5E12 P/mL로 제조하였다. 칼슘 또는 마그네슘이 없는 Gibco 인산염 완충 염수 pH 7.2를 구입하였다(PN 20012027, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). 멸균 마이크로원심분리 튜브(1.5 mL, 저잔류)를 구입하였다(PN 3451, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). 추가 물질은 하기를 포함하였다: 시트르산(PN C2404, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), 시트르산나트륨 이수화물(PN BP327, Fisher Scientific Waltham, MA) 및 탄산염-중탄산염 완충액(PN C3041, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). 인산염
2개의 고체(83.01 g Na2HPO4/2 = 41.51 g 및 12.29 g KH2PO4/2 = 6.15 g)를 비커에 첨가하고 400 mL의 Milli-Q 수중 용해시켰다. 1 M HCl 또는 1 M NaOH를 사용하여 필요한 경우 pH를 7.4로 조정하였다. 용액을 0.2 μm 필터 플라스크를 사용하여 눈금 실린더 및 필터에서 500 mL로 만들었다. 생체안전 캐비닛에서, 용액을 50 mL 원심분리 튜브 내로 옮기고 4℃에서 보관하였다. KH2PO4(Cat# 3248-01, Lot# 0000163254) 및 Na2HPO4 7H2O(Cat# 3817-01, Lot# 0000201905)는 JT Baker(Fisher Scientific Waltham, MA)로부터 구입하였다.
동적 광산란(DLS)
DLS는 EV 응집을 측정하기 위해 사용하였으며, 즉 DLS는 안정성을 시사하는 검정이다. 각각의 샘플을 제조하고, 하기 방법에 따라 실행하였다.
샘플을 Malvern Zetasizer Nano ZS 동적 광 산란 기기(DLS), 모델 ZEN3600, 일련 번호 MAL1036117(Malvern, Worcestershire, UK)에서 실행하고 Malvern Zetasizer 소프트웨어 버전 7.13(Malvern Panalytical)으로 분석하였다. Malvern DLS 마이크로-큐벳 및 캡 키트(PN ZEN0040) 및 제타 전위 큐벳(PN DTS1070)을 구입하였다(Malvern, Worcestershire, UK). 엑소좀을 Gibco PBS 1X pH 7.2 중 1E11 P/mL 내지 1E12 P/mL로 희석하였다. 샘플을 저부피 Malvern 큐벳(PN ZEN0040)을 사용하여 측정하고, 3회 측정 전에 25℃에서 4분 동안 평형화시켰다. 각각의 EV 샘플에 대해, 20 μL의 샘플을 마이크로 큐벳에서 180 μL의 여과된 Gibco PBS 내로 희석하고, 반복 피펫팅에 의해 혼합하고, 측정하였다.
Polysciences Inc.로부터의 하기 NIST 폴리스티렌 크기 표준을 본원에서 기재된 실험에 사용하였다:
외관 시험
각각의 샘플을 각 표면에 대해 적어도 5초 동안 무광 백색 및 무광 흑색 배경에 대해 검사하였다. 튜브를 손으로 부드럽게 진탕하여 잠재적 침강물을 휘젓고 Maglite Mini LED 손전등 및 5x 확대경을 사용하여 가시적 입자를 검사하였다. pH는 Oakton Cole-Parmer pH Spear 방수 포켓 pH 시험장치(Cole-Parmer, Vernon Hills, IL)를 사용하여 측정하였다.
연구 설계
연구 설계는 pH 값 3, 5, 7, 9 및 11에서 살펴보았다. 측정은 pH 조정 직후 수행하였다. 천연 및 단백질 X 엑소좀의 농축된 용액을 MilliQ 수 또는 PBS 중에 제조하고, 적절한 완충액을 사용하여 MilliQ 수로 희석하고/하거나 연구 시작 전에 주변 실험실 온도에서 정확한 pH로 조정하였다(도 2d). 산성 pH에 대해서는 시트레이트 완충액을 사용하였고, 중성 pH에 대해서는 인산염 완충액을 사용하였고, 염기성 pH에 대해서는 탄산나트륨 완충액을 사용하였다. 표적 삼투압은 300 mOsm/kg이었다. DLS 및 제타 측정을 위해, 1E11 내지 1E12 P/mL로 20 μL의 EV를 사용하였다. 천연 및 단백질 X 엑소좀에 대한 생성 데이터를 하기 표 2, 3 및 4에 나타낸다.
표 3.
표 4.
이들 데이터는 염을 투석한 다음, 원하는 pH에서 관련 완충액에 분산시킴으로써 생성되었다. PBS의 존재는 더 넓은 pH 범위에 걸쳐 엑소좀을 응집으로부터 보호하는 것으로 관찰되었다. 상기 표에 나타난 결과는 도 2a로서 제시된다.
표 5.
표 5에 나타낸 결과도 도 1b로서 그래프로 제시된다.
실시예 2: 완충액 A의 제형
EV의 보관 및 투여를 위한 엑소좀 완충액 A를 하기에 기재된 바와 같이 제조하였다. 완충액 A에 대해 제형화된 EV는 PTGFRN 단백질을 발현하도록 조작된다.
pH 조정을 위해, 1 N 수산화나트륨 50 mL 및 1 N 염산 50 mL를 제조하였다. 주입용수(0.8 L)를 교반 막대를 갖는 1 L 비커에 첨가하였다. 교반 플레이트(가열되지 않음)를 사용하여 교반하면서, 하기 성분을 첨가하였다: (a) 수크로스 50.00 g, (b) 인산칼륨, 일염기성, 0.70 g, (c) 인산나트륨, 이염기성, 7-수화물 4.00 g 및 (d) 염화나트륨 2.90 g. 모든 분말이 용해될 때까지 pH를 조정하지 않았다. 분말이 용해되지 않으면 혼합 속도를 증가시켰다. 그 다음, pH를 7.1 내지 7.3으로 조정하였다. pH가 7.3보다 크면, 1 N 염산을 조정을 위해 사용하였다. pH가 7.1 미만이면, 1 N 수산화나트륨을 조정을 위해 사용하였다. 용액을 1 L 눈금 실린더 내로 부었다. 주입용수를 첨가하여 총 부피를 1 L로 만들었다. pH 및 전도도를 기록하였다. 표적 pH는 7.1 내지 7.3이었다. 표적 전도도는 6.5 +/- 10% 내지 8.0 +/- 10% mS/cm이다. 이어서, 용액을 0.2 μM 병 상부 필터(cat# 567-0020, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)를 통해 여과 멸균시켰다. 완충액 A에 대한 최종 제형을 하기 표 6에 나타낸다.
표 6.
실시예 3: 완충액 B의 제형
EV의 보관 및 투여를 위한 엑소좀 완충액 B를 하기에 기재된 바와 같이 제조하였다. 완충액 B에 대해 제형화된 EV는 PTGFRN 단백질을 발현하도록 조작되며, CL656을 추가로 포함한다.
pH 조절을 위해, 1 N 수산화나트륨 50 mL 및 1 N 염산 50 mL를 제조하였다. 주입용수(0.8 L)를 교반 막대를 갖는 1 L 비커에 첨가하였다. 교반 플레이트(가열되지 않음)를 사용하여 교반하면서, 하기 성분을 첨가하였다: (a) 수크로스 50.00 g, (b) 인산칼륨, 일염기성, 2.10 g, (c) 인산나트륨, 이염기성, 7-수화물, 7.26 g 및 (d) 염화나트륨 2.34 g. 모든 분말이 용해될 때까지 pH를 조정하지 않았다. 분말이 용해되지 않으면 혼합 속도를 증가시켰다. 그 다음, pH를 7.1 내지 7.3으로 조정하였다. pH가 7.3보다 크면, 1 N 염산을 조정을 위해 사용하였다. pH가 7.1 미만이면, 1 N 수산화나트륨을 조정을 위해 사용하였다. 용액을 1 L 눈금 실린더 내로 부었다. 주입용수를 첨가하여 총 부피를 1 L로 만들었다. pH 및 전도도를 기록하였다. 표적 pH는 7.1 내지 7.3이었다. 표적 전도도는 6.5 내지 8.0 mS/cm이다. 이어서, 용액을 0.2 μM 병 상부 필터(cat# 567-0020, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)를 통해 여과 멸균시켰다. 완충액 B에 대한 최종 제형을 하기 표 7에 나타낸다.
표 7.
실시예 4: 완충액 C의 제형
엑소좀 완충액 C를 아래의 표 8에 나타낸 식에 따라 제조하였다. EV는 IL-12에 융합된 PTGFRN 단백질을 발현하도록 조작하였다.
표 8.
실시예 5: 엑소좀 및 상층액 중 경시적인 STING 작용제의 농도 분포
엑소좀 및 상층액 중 생물학적 활성 모이어티, 즉 STING 작용제의 분포를 평형화 연구에서 연구하였다.
엑소좀에 존재하는 경우, 생물학적 활성 모이어티(도 1a), 예를 들어, STING 작용제는 시간에 따라 엑소좀으로부터 상층액 내로 수동적으로 확산할 수 있다(도 4a-4c). 엑소좀 및 상층액 중 STING 작용제의 분포를 경시적인 STING 작용제의 농도를 계산함으로써 확인하였다. 간략하게, 엑소좀에 STING 작용제를 로딩하고, 완충액 B 중에 보관하였다. 엑소좀-함유 액체 완충액 제형을 72시간 동안 -80℃에서 냉동하거나, 4℃에서 반-냉동하거나, 22℃에서 보관하였다. 기재된 온도에서 완충액 B 중 12시간 보관 후, 엑소좀 중 STING 작용제의 농도를 계산하고, 상층액 중 STING 작용제의 농도와 비교하였다. 그 결과를 도 3a 및 3b에 나타낸다. 나타낸 바와 같이, 72시간 동안 -80℃에서 보관하였을 때, 엑소좀 중 STING 작용제의 최종 농도는 약 5 μM이었고, 상층액 중의 STING 작용제의 최종 농도는 약 4.3 μM이었다. 72시간 동안 4℃에서 보관하였을 때, 엑소좀 중 STING 작용제의 최종 농도는 약 4.5 μM이었고, 상층액 중 STING 작용제의 최종 농도는 약 4.4 μM이었다. 72시간 동안 22℃에서 보관하였을 때, 엑소좀 중 STING 작용제의 최종 농도는 약 4.1 μM이었고, 상층액 중 STING 작용제의 최종 농도는 약 6.5 μM이었다. 도 3a 및 3b에서 그래프화된 데이터를 하기 표 9, 10 및 11에 나타낸다.
본 실시예는 보관 온도가 상층액 중 STING 작용제의 농도 대비 엑소좀 중 STING 작용제의 농도에 유의미한 영향을 미치지 않음을 실증한다.
표 9.
표 10.
표 11.
실시예 6: 유전자 발현에 대한 완충액 B 중 STING 작용제의 효과
C57BL/6 간에서의 유전자 발현에 대한 STING 작동제 CL656을 포함하는 엑소좀의 ㅌ투여 효과를 연구하였다.
해동 후, STING 작용제 CL656을 함유하는 완충액 B 조성물 중의 엑소좀을 실시예 5에 기재된 바와 같이 24시간 또는 72시간 동안 4℃ 및 22℃에서 보관하였다. PBS, CL656(20 μg), 엑소좀 또는 상기 기재된 바와 같이 인큐베이션한 STING 작용제 CL656(마우스 당 600 ng의 CL656)을 함유하는 완충액 B 중의 엑소좀을 C57BL/6 마우스 내로 정맥내 투여하였다. 대조군으로서, -80℃에 보관된 STING 작용제 CL656(마우스 당 6 ng, 60 ng, 및 600 ng)을 함유하는 완충액 B 조성물 중의 엑소좀을 투여하였다(0 h로 간주됨). 4시간 후 쥐를 안락사시키고 간을 수집하였다. 전체 RNA를 RNeasy 지질 미니 키트(Qiagen)를 사용하여 간으로부터 단리하고, IFNβ mRNA의 발현 수준을 RT-qPCR로 결정하였다. 상대적인 발현을 하우스키핑 유전자 RPS13에 대해 표준화하였다. 도 3c는 간 연구로부터의 결과를 제공한다. 나타낸 바와 같이, 1) IFNβ mRNA의 용량 의존적 유도가 0시간 샘플에서 관찰되었고, 2) IFNβ mRNA의 수준은 임의의 보관 조건에서 STING 작용제 CL656(마우스 주사 당 600 ng)을 함유하는 완충액 B 조성물 중의 모든 엑소좀에 걸쳐 유사하였고, 3) STING 작용제가 없는 엑소좀은 IFNβ mRNA를 유도하지 않았고 CL656(20 μg)은 낮은 수준의 IFNβ mRNA를 유도하였다.
이러한 결과는 냉동, 해동 및 대상체에 투여된 완충액 B 중 함유된 STING 작용제의 투여가 어떠한 유의미한 차이 없이 간 조직에서 IFNβ 유전자 발현을 유도하는 데 효과적임을 실증한다.
실시예 7: 종양내 농도에 대한 STING 작동제 및 엑소좀-캡슐화 STING 작동제의 효과
경시적으로 완충액 B 중 STING 작용제의 종양내 농도를 연구하였다.
간략하게, B16-F10 흑색종 세포를 C57BL/6 마우스 내로 피하 이식하였다. 진피 종양이 가시적인 경우, 각 동물은 유리 STING 작용제(0.3 μg의 CL656) 또는 엑소좀-캡슐화 STING 작용제(0.3 μg의 CL656)의 종양내 용량을 수여받았다. 유리 STING 작용제 및 엑소좀-캡슐화 STING 작용제의 종양내 농도는 주사 5, 30, 120, 360, 1440 및 2880분 후 측정되었다. 결과를 도 3d에 제공한다. 나타낸 바와 같이, 유리 STING 작용제의 종양내 농도는 투여 후 유의미하게 감소하였고(파선), 약 360분 후에는 검출 불가능하였다. 도 3d에 추가로 나타낸, 엑소좀-캡슐화 STING 작용제의 농도는 1440분에 약 100 nM로 서서히 감소하였다. 그 후, 엑소좀-캡슐화 STING 작용제의 농도는 마지막 측정이 2880분에 취해질 때까지 약 100 nM에서 안정하였다.
본 실시예는, 유리 STING 작용제에 비해, 엑소좀-캡슐화 STING 작용제를 함유하는 조성물의 투여가 STING 작용제의 종양내 농도에 대한 안정화 효과를 가짐을 실증한다.
실시예 8: 예시적인 조성물 02 제형 개발
제형 개발 개요
STING-작동제-로딩 엑소좀(exoSTING) 조성물 02(C-02) 완제의약품 제형 개발은 정제된 엑소좀을 함유하는 중간체-1의 제형 개발과 동시에 일어났다. 동시 제형 개발의 목적은 하기와 같았다. a) 완제의약품 중 정제된 엑소좀 활성 성분의 안정성이 작용제 활성 성분의 안정성과 반대로 안정화 부형제의 선택에 대한 정보를 제공할 수 있다는 인식 및 b) 이러한 부형제가 완제의약품 내로 혼입될 것이기 때문에 정제된 엑소좀 제형을 C-02 완제의약품과 동일하게 갖는 것은 제조의 용이함을 허용할 것이라는 점. 연구에 사용된 시험 방법은 방출 시험 방법과 동일하지는 않지만 유사하였다. 최종 적격 시험 방법을 최종 제형 스트레스 조건 안정성 연구에 사용하였다. 달리 언급되지 않는 한, C-02 완제의약품(중간체-1 및 중간체-02를 함유함)로 연구를 수행하였다.
초기 완제의약품 스트레스 연구를 수행하였고 기계적, 산화적 및 pH 스트레스 조건을 포함하였다. 연구는 15 mM 일염기성 인산칼륨, 27 mM 이염기성 인산나트륨 완충액, 100 mM 염화나트륨, 5% 수크로스(w/v), pH 7.2를 사용하여 수행하였다. 본 연구는 강력한 진탕과 같은 극심한 기계적 응력을 제외한 모든 것에 대해 완제의약품 제형의 허용 가능한 안정성을 실증하였다. 데이터는 5%(w/v) 수크로스를 함유하는 PBS 제형이 스트레스 조건에 대한 보호를 제공함을 시사하였다.
중간체-01을 사용하여 상이한 완충액에서 수행된 넓은 pH 범위 연구(pH 3.0 내지 11.0)는 6.5 내지 9.0 사이의 pH 범위가 (동적 광 산란(DLS)에 의해) 허용 가능함을 확인하였고 인산염 완충액의 적합성을 확인하였다. DLS뿐만 아니라 추가적인 분석 평가를 사용하는 중간체-01에 대한 9개월 안정성 연구는 5%(w/v) 수크로스를 함유하는 PBS 중 -80℃에서의 안정성을 확인하였다.
중간체-01 및 C-02 완제의약품 둘 다에 대한 최종 제형 조성물을 비경구 투여에 적합한 긴장성을 달성하도록 변형시켰다. 원하는 수크로스 수준 및 긴장성 표적으로 인해 PBS 제형의 염화나트륨 농도를 감소시켰다. 제형의 완충능을 개선하기 위해 PBS의 인산염 농도를 증가시켰다. 또한, 인산나트륨 단독에 비해 인산나트륨 및 인산칼륨 혼합물의 완충액을 선택하였다.
선택된 제형 조성물은 15 mM 일염기성 인산칼륨, 27 mM 이염기성 인산나트륨, 40 mM 염화나트륨, 5%(w/v) 수크로스, pH 7.2였다. 상기 제형을 중간체-01, C-02 완제의약품, 및 C-02에 대한 FB-01 희석제에 사용한다. 최종 제형 완충액은 제형 완충액 01(FB-01)로 나타낸다.
최종 제형에서의 C-02 완제의약품 안정성의 평가는 완제의약품이 냉동-해동 사이클링 및 기계적 역전에 대해 안정함을 실증한다. 분해는 극심한 스트레스 조건 하에서만 발생한다.
완제의약품 냉동-해동 안정성에 대한 동결보호제의 평가
수크로스, 트레할로스 및 D-소르비톨을 포함하는 동결보호제를 310 mM 이염기성 인산나트륨, 90 mM 일염기성 인산칼륨 완충액, pH 7.4 중 제형화된 완제의약품 개발 로트에서 상이한 농도로 평가하였다. 상기 연구는 PTGFRN-과발현 엑소좀과 사이클릭 디뉴클레오티드 STING 작용제의 개발 로트를 사용하였다. 동결보호제는 1.0, 2.5, 5.0, 7.5 및 10.0%(w/v)로 평가하였다. 인산염 완충액 중의 모든 수크로스 및 트레할로스 제형에 대한 이론적 삼투압은 대략 300 mOsm/kg으로 계산되었다. D-소르비톨 제형의 경우, 1% 내지 5%(w/v) 제형의 삼투압도 대략 300 mOsm/kg인 반면, 7.5 및 10.0% D-소르비톨 제형은 각각 대략 400 및 600 mOsm/kg으로 계산되었다. 모든 제형을 0, 3, 및 10 냉동-해동 주기 후 외관 및 동적 광 산란(DLS)에 의한 크기로 평가하였다.
두 대조군(PBS 단독 또는 물)에 대한 외관 시험 결과는 동결보호제를 함유하는 제형에 비해 냉동-해동 주기의 증가와 연관된 더 실질적인 외관 변화를 나타냈다. 변화는 탁도 및 색 증가(PBS) 또는 침전과 함께 가시적인 미립자(물)를 포함하였다. 수크로스 및 D-소르비톨 제형은 둘 다 여러 농도에서 허용 가능한 외관 결과를 나타냈다. 수크로스 또는 D-소르비톨에 비해 더 높은 농도의 트레할로스가 외관 변화를 방지하기 위해 필요하였다.
DLS 시험 결과는 대조군 제형(PBS 단독, 물 단독)에 대한 크기 및 다분산도의 증가가 다회 냉동-해동 주기 시 관찰됨을 나타내었다. 일반적으로, 더 높은 농도의 동결보호제(≥ 2.5%(w/v))를 사용하였을 때에는, 3회 및 10회 냉동-해동 후 크기 또는 다분산도에서 유의미한 변화가 관찰되지 않았다.
상기 냉동-해동 연구의 외관 및 DLS 결과에 기반하여, 수크로스 및 D-소르비톨은 둘 다 ≥ 2.5%(w/v)로 존재하는 경우 허용 가능한 동결보호제이다. 5%(w/v) 수크로스는 충분한 동결보호를 제공하였고, 하기에 기재된 초기 스트레스 연구를 포함하여, 향후 제형 연구를 위해 선택되었다.
수크로스를 함유하는 인산염 완충 식염수의 응력 연구 - 초기 연구
선택된 동결보호제(5%(w/v) 수크로스)와 염화나트륨을 포함하는 인산염 완충액을 사용하여 상이한 조건의 기계적 응력 하에 및 산화 후 안정성을 확인하기 위한 응력 연구를 수행하였다. 이들 연구를 위한 제형은 43 mM 인산염 완충액, 100 mM 염화나트륨, 5%(w/v) 수크로스, pH 7.2였다.
기계적 응력 연구를 위해, 샘플을 상이한 기간 동안 다양한 수준의 기계적 응력(진탕, 혼합)을 사용하여 상온에서 평가하였다. 샘플은 외관, pH, 삼투압, DLS 및 나노입자 추적 분석(NTA)에 의해 평가하였다. 크기 및 다분산도 지수는 대조군(진탕 없음) 대비 시험된 조건 중 어느 것에 있어서도 변화하지 않았다. 수동의 격렬한 진탕만이 외관 시험 변화를 초래했으며; 상기 조건에서 발포가 관찰되었다. 강력한 진탕과 같은 극심한 기계적 스트레스를 제외한 모든 조건에서 완제의약품 제형의 허용 가능한 안정성이 관찰되었다. 다회의 온화한 역전 후 제형의 안정성이 또한 관찰되었다. 시험 샘플의 pH 및 삼투압은 일정하게 유지되었다.
완제의약품에 대한 산화적 스트레스의 효과를 4시간 동안 37℃에서 서로 다른 농도의 과산화수소로 샘플을 처리하여 평가하였다. 처리 후, 샘플을 100 mM 아스코르브산나트륨으로 켄칭하고, 1시간 동안 상온에서 유지하여 시험 전에 과산화수소를 중화시켰다. 상기 연구는 STING 작용제가 로딩된 중간체-01을 사용하였다. 샘플을 외관, DLS, NTA 및 생체내 효능에 의해 분석하였다.
완제의약품은 제한된 세트의 검정으로 시험된 조건 하에 산화적 스트레스를 받았을 때 안정하고 완전히 효력이 있다. 외관, 크기, 또는 엑소좀 농도에 대해 상이한 과산화수소 농도 노출에서 그리고 대조군(과산화수소 처리 없음) 대비 관찰된 실질적인 변화는 없었다. 질적으로, 비장에서 효능의 실질적인 차이는 표준화된 유전자 발현에 의해 평가된 바와 같이 관찰되지 않았다. 과산화수소 시험 농도를 증가시키면서 간에서 효능이 감소하는 경향이 관찰되었지만, 아스코르브산 단독 그룹에서 효능의 실질적인 손실이 또한 그룹 간 및 그룹 내 비교적 넓은 범위의 효능 결과와 함께 관찰되었다. 따라서 대조군(PBS)을 제외하고는 시험군과 대조군 사이에 간에서의 효능이 또한 유사하였다. 데이터는 완제의약품이 사용된 시험 방법에 의한 낮은 수준의 산화적 스트레스에 민감하지 않음을 제시한다.
선택된 최종 제형에서 C-02 완제의약품의 안정성을 추가로 확인하기 위해 후속 스트레스 연구를 설계하였다. 또한, 최종 제형에서 C-02 완제의약품에 대한 가속화된 조건 연구를 수행하였다(데이터는 나타내지 않음).
pH의 선택/중간체-01 연구
완제의약품에 대한 pH 표적 및 범위의 선택은 제형 내 엑소좀의 안정성을 보장하는 것에 초점을 맞추었고, 따라서 중간체-01을 사용하여 연구를 수행하였다. 연구는 pH 값 3, 5, 6, 6.5, 7, 9 및 11에서 안정성을 평가하였다. 시트르산/시트르산나트륨 이수화물 완충액을 사용하여 pH 값 3 및 5를 달성하였다. pH 값 6, 6.5 및 7에 대해서는 일염기성 인산칼륨/이염기성 인산나트륨 칠수화물을 사용하였고, pH 값 9 및 11에 대해서는 탄산염 완충액을 사용하였다. 샘플을 크기 또는 크기 분포의 변화 및 표면 전하의 ζ-전위에 대해 DLS에 의해 분석하였다. 이러한 제한된 데이터의 조합은 6.5 내지 9.0의 pH 범위를 지원하지만, 실제로는 pH 7.2 표적 주위의 제형에 대해 더 좁은 범위(± 0.5)를 선택하였다. 결과에 기반하여, 허용 가능한 DLS 결과 및 인산염 완충액에 대한 예상된 완충능에 기반하여 7.2의 표적 pH를 선택하였다.
중간체-01 및 C-02 완제의약품 제형
중간체-01 pH 연구 데이터는 중간체-01에 대한 PBS 제형의 선택을 지원한다. 완제의약품에 대한 동결보호제 연구는 제형에 대해 5%(w/v) 수크로스를 확인하였다. 중간체-01에 대한 유사한 연구에서도 원하는 동결보호제로서 5%(w/v) 수크로스를 확인하였다(데이터는 나타내지 않음). 중간체-01 및 완제의약품 둘 다에 대한 제형 조성물은 또한 생리학적 유체(대략 300 mOsm/kg)에 가까운 긴장성을 유지한다. 원하는 수크로스 수준 및 긴장성 표적으로 인해 PBS 제형의 염 농도를 감소시켰다. 제형의 완충능을 개선하기 위해 PBS의 인산염 농도를 증가시켰다. 또한, 인산나트륨 및 인산칼륨 혼합물의 완충액을 선택하였다.
이러한 고려사항에 기반하여, C-02 완제의약품에 대해 선택된 하나의 제형 조성은 15 mM 일염기성 인산칼륨, 27 mM 이염기성 인산나트륨, 40 mM 염화나트륨, 5% w/v 수크로스, pH 7.2였다. 제형은 중간체-01, C-02 완제의약품, 및 C-02 완제의약품에 대한 FB-01 희석제에 사용된다. 제형 완충액은 FB-01로 나타낸다.
중간체-01 안정성 연구
FB-01에서 -80℃에서의 장기 보관을 위한 중간체-01의 안정성을 확인하기 위해 개발 안정성 연구를 수행하였다.
최종 완제의약품 제형의 스트레스 연구 - 후속 연구
상이한 조건의 기계적 스트레스 하에 및 산화 후 C-02 완제의약품의 안정성을 확인하기 위해 최종 제형 조성물에서 후속 스트레스 연구를 수행하였다. 상기 연구는 최종 FB-01 제형에서 C-02 완제의약품을 사용하여 수행하였으며, 초기 스트레스 연구 대비 추가적인 분석 방법으로 수행하였다.
연구는 유지 대조군(최대 24 시간 동안 25℃에서), 다회 냉동-해동 주기(최대 10 주기, -80℃로 냉동하고 상온에서 해동함), pH 극한(pH 5 및 9), 산화적 스트레스(최대 24 시간 동안 3% 과산화수소 노출), 및 최대 24 시간 동안 기계적 말단-위-아래 역전을 사용하는 기계적 스트레스를 포함하였다.
냉동-해동 주기 결과는 10회의 냉동-해동 주기를 통해 제품 품질 속성의 변화를 나타내지 않는다.
실시예 9: 예시적인 조성물 03 제형 개발
IL-12-로딩 엑소좀(exoIL-12) 조성물 03(C-03) 완제의약품은 pH 7.2에서, 5 mM 일염기성 인산칼륨, 15 mM 이염기성 인산나트륨, 50 mM 염화나트륨, 146 mM 수크로스의 제형 완충액 중 활성 원료의약품 exoIL-12로 이루어진다.
C-03에 대한 제형 개발은 몇 가지 원리에 의해 안내되었고: 완제의약품 제형은 주사제 용액으로 사용하기 위한 것이며; 제형은 냉동/해동 작업으로부터의 분해를 최소화하기 위해 냉동 보관에 대해 최적화된다. 제형 개발 연구 동안, 초기 분석 시험은 용액 중 엑소좀의 안정성 및 효능에 초점을 맞추었다. 이들 검정은 외관, 동적 광 산란(DLS), IL-12 AlphaLISA, 및 인간 배아 신장(HEK) 세포-기반 리포터 분석을 포함하였다.
정제 후, exo-IL-12 제형은 가시적인 미립자가 없는 반투명 용액으로서 나타난다. 유리 앰플에서 엑소좀 샘플을 유럽 약전 색상 표준과 비교함으로써 색상을 결정하였다. exoIL-12 엑소좀은 0.25 미만의 PDI 값을 가지며 지름이 대략 171 nm로 측정되는 것으로 확인되었다.
C-03에 대한 완충액 및 동결보호제 연구는 품질 및 안정성을 최적화하기 위해 CB-102 원료의약품 및 C-03 완제의약품 제형에 대해 pH 7.2에서 146 mM(5% w/v) 수크로스를 갖는 인산나트륨/인산칼륨 완충액의 선택으로 이어졌다. 잠재적인 안정성-지시 검정에 대한 정보를 얻기 위해 강제 분해 연구를 수행하였다.
완충액의 선택
pH 3, 5, 7, 9의 다양한 완충액으로 승온(37℃, 50℃)을 사용하여 pH 안정성 연구를 수행하였다.
완충액-102를 초기에 milliQ 수중으로 완충액 교환하고, 적절한 완충액의 농축 스톡에 스파이킹함으로써 원하는 pH로 조정하였다. pH 조절 후, 샘플을 외관, 크기 및 크기 분포의 변화에 대한 동적 광 산란(DLS), 및 IL-12 AlphaLISA에 의해 분석하여 유리 대 전체(유리 및 엑소좀-연관), IL-12 함량을 정량하였다.
냉동보호제의 선택
146 mM(5% w/v) 수크로스가 있거나 없는 인산염 완충액 중 exoIL-12를 사용하여 연구를 수행하고, 반복 냉동 및 해동(F/T) 주기를 거쳤다. 동결보호제의 농도는 충분한 인산염 완충 용량(농도)으로, 생리학적 삼투압(대략 290 mOsm/kg)을 달성하도록 선택하였다. milliQ 수(MQ) 및 PBS 단독 중 exoIL-12를 대조군 샘플로 제조하고, 3회 냉동/해동 주기(F/T)를 거쳤다. 146 mM 수크로스를 갖는 인산염 완충액(완충액 선택 연구로부터 선택됨) 중의 exoIL-12를 0, 1, 3 및 10회 F/T에서 평가하였다. 수집된 샘플을 외관, DLS 및 IL-12 AlphaLISA 시험 방법에 의해 평가하였다.
수크로스를 함유하는 시험 샘플은 대략 180 nm로 측정되며, 10회 F/T 주기에 걸쳐 DLS에 의한 크기에 대해 안정하게 유지되었다. 이와 유사하게, 분포 또는 다분산도 지수(PDI)는 최대 3회 F/T 주기에서 0.15로 일관되게 낮게 유지된 반면, 10회 F/T 주기 후에는 0.2로 증가한다. 색 변화 또는 탁도 증가는 관찰되지 않았다. milliQ 수 또는 PBS 중 분산되고 3회 F/T 주기를 거친 대조군 엑소좀은 응집 및 분해의 명확한 징후를 나타내었다. milliQ 대조군 샘플은 혼탁해졌고 약간 적색/오렌지색으로 변화한 반면, DLS에 의한 800 nm 초과 크기는 명확하게 응집을 시사하였다. PBS-단독 엑소좀의 크기는 시험 샘플보다 약간 더 커서 187 nm로 측정되었고, PDI는 수크로스를 함유하는 시험 그룹에 대한 10회 F/T 샘플의 PDI와 유사하였다. PBS 단독 엑소좀은 응집을 시사하는 외관에 의해 탁도의 주지된 변화를 나타내었지만, 색상 변화는 나타나지 않았다.
IL-12 AlphaLISA 결과는 연관된 및 유리 IL-12가 모두 수크로스의 존재 하에 10회 F/T 후, 각각 대략 2300 ng/mL 및 1-3% IL-12로 유사하게 유지됨을 시사한다. 연관된 IL-12의 주목할만한 감소가 milliQ 및 PBS-단독 엑소좀 둘 다에서 관찰되어: 각각 24%, 37% 감소하였다. 유리 IL-12의 양은 각각 5% 및 4%로 약간 증가하였다.
최종 인산염/수크로스 완충액 제형의 삼투압은 대략 300 mOsm/kg이다.
강제 분해 연구
냉동-해동, pH 극한, 산화 및 기계적 스트레스의 스트레스 조건 하에서 완제의약품 안정성을 평가하기 위해 ICH Q1A(R2)에 따라 강제 분해 연구를 수행하였다.
냉동 및 해동 연구 결과는 일반적으로 10회의 F/T 주기를 통해 유의미한 경향을 나타내지 않았다. 관찰된 엑소좀 크기 및 PDI 값은 10회 F/T 후 가장 컸던 반면, 절대적 차이는 엑소좀 안정성에 대한 진정한 영향을 시사하기에 충분히 유의미하지 않았다. 또한, 다른 시험 결과는 10회의 F/T까지 유의미한 경향을 나타내지 않았다. 보수적으로, C-03의 안정성은 최대 5회의 냉동 및 해동 주기에 대해 확인된다.
실시예 10: 예시적인 조성물 04 제형 개발
안티센스 올리고머가 로딩된 엑소좀에 대한 완제의약품 제형을 개발할 것이다. C-03 완제의약품 제형을 출발점으로 사용할 것이다. 인산염 완충액 농도(5 mM 일염기성 인산칼륨 및 15 mM 이염기성 인산나트륨) 및 pH(pH 7.2)는 C-03 완제의약품에 대해 변화시키지 않고 유지할 것이다. 염화나트륨 농도는 약 50 mM 내지 약 150 mM 범위의 농도에서 시험할 것이고, 수크로스 농도는 약 2.5% 내지 5%(약 73 mM 내지 약 146 mM)의 농도에서 시험할 것이다. 상기 실시예 9 및 10에 기재된 방법에 따라 조건을 모니터링할 것이다. 본원에서 개시된 바와 같이, STAT6를 표적화하는 ASO로 로딩된 엑소좀을 포함하여 다양한 ASO-로딩 엑소좀 작제물을 분석할 것이다. 수성 트리스 EDTA 완충액 또는 순수한 물에서, ASO는 엑소좀으로부터 해리되고, 따라서 염화나트륨 및 수크로스의 조합은 로딩된 ASO를 유지하는 역할을 할 가능성이 있다.
개요 및 요약 섹션이 아닌 상세한 설명 섹션이 청구범위를 해석하기 위해 사용되려는 것임이 이해되어야 한다. 개요 및 요약 섹션은 발명자(들)에 의해 고려되는 바와 같은 본 개시의 하나 이상의 예시적인 양태를 나타낼 수 있지만 모든 양태를 나타내는 것이 아니며, 따라서, 본 개시 및 첨부된 청구범위를 어떠한 방식으로든 제한하려는 것이 아니다.
본 개시는 특정된 기능의 구현 및 이의 상관관계를 예시하는 기능적 빌딩 블록의 도움으로 위에서 설명되었다. 이러한 기능적 빌딩 블록의 경계는 설명의 편의를 위해 본원에서 임의로 정의되었다. 특정된 기능 및 이의 상관관계가 적절하게 수행되는 한 대안적 경계가 정의될 수 있다.
특정 양태의 상기 설명은, 다른 사람들이, 당분야 수준의 지식을 적용함으로써, 본 개시의 일반적인 개념으로부터 벗어나지 않고, 과도한 실험 없이, 특정 양태와 같은 다양한 응용을 위해 쉽게 변형하고/하거나 적응시킬 수 있는 본 개시의 일반적인 성질을 그렇게 완전히 드러낼 것이다. 따라서, 이러한 적응 및 변형이 본원에서 제시된 교시 및 안내에 기반하여, 개시된 양태의 의미 및 균등부의 범위 내에 있는 것으로 의도된다. 본원에서의 용어 또는 용법은 설명의 목적을 위한 것이며, 제한하는 것은 아니어서, 본 명세서의 용어 또는 용법은 교시 및 안내에 비추어 당업자에 의해 해석되어야 함이 이해되어야 한다.
본 개시의 폭 및 범위는 전술한 예시적인 양태 중 어느 것에 의해서도 제한되지 않고, 하기 청구범위 및 이의 균등부에 따라서만 정의되어야 한다.
본 출원에서의 청구범위는 모출원 또는 다른 관련된 출원의 청구범위와 상이하다. 따라서 출원인은 본 출원과 관련하여 모출원 또는 임의의 선조 출원에서 작성된 청구범위의 임의의 포기를 취소한다. 따라서 심사관에게는 임의의 이러한 이전 포기 및 회피를 위해 작성된 인용된 언급을 재검토할 필요가 있을 수 있음이 권고된다. 또한 심사관에게는 본 출원에서 작성된 어떠한 포기도 모출원 내로 또는 모출원에 대해 판독되어서는 안 됨을 상기시킨다.
본 출원에서 인용되는 모든 출판물, 특허, 특허 출원 및 기타 문서는 각 개별 출판물, 특허, 특허 출원 또는 기타 문서가 모든 목적을 위해 참조로 포함되는 것으로 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로 모든 목적을 위해 그 전체가 참조로 포함된다.
다양한 구체적인 양태가 예시되고 설명되었지만, 상기 명세서는 제한적이 아니다. 개시(들)의 정신 및 범위에서 벗어나지 않고 다양한 변화가 이루어질 수 있음이 이해될 것이다.
SEQUENCE LISTING
<110> Codiak BioSciences, Inc.
O'NEIL, Conlin
BOURDEAU, Raymond
<120> EXTRACELLULAR VESICLE COMPOSITIONS
<130> 4000.069PC02
<150> US 62/906,018
<151> 2019-09-25
<150> US 62/906,485
<151> 2019-09-26
<160> 193
<170> PatentIn version 3.5
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<212> PRT
<213> Homo sapiens
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85 90 95
Ser Lys Glu His Thr Asp Thr Phe Asn Phe Arg Ile Gln Arg Thr Thr
100 105 110
Glu Glu Asp Arg Gly Asn Tyr Tyr Cys Val Val Ser Ala Trp Thr Lys
115 120 125
Gln Arg Asn Asn Ser Trp Val Lys Ser Lys Asp Val Phe Ser Lys Pro
130 135 140
Val Asn Ile Phe Trp Ala Leu Glu Asp Ser Val Leu Val Val Lys Ala
145 150 155 160
Arg Gln Pro Lys Pro Phe Phe Ala Ala Gly Asn Thr Phe Glu Met Thr
165 170 175
Cys Lys Val Ser Ser Lys Asn Ile Lys Ser Pro Arg Tyr Ser Val Leu
180 185 190
Ile Met Ala Glu Lys Pro Val Gly Asp Leu Ser Ser Pro Asn Glu Thr
195 200 205
Lys Tyr Ile Ile Ser Leu Asp Gln Asp Ser Val Val Lys Leu Glu Asn
210 215 220
Trp Thr Asp Ala Ser Arg Val Asp Gly Val Val Leu Glu Lys Val Gln
225 230 235 240
Glu Asp Glu Phe Arg Tyr Arg Met Tyr Gln Thr Gln Val Ser Asp Ala
245 250 255
Gly Leu Tyr Arg Cys Met Val Thr Ala Trp Ser Pro Val Arg Gly Ser
260 265 270
Leu Trp Arg Glu Ala Ala Thr Ser Leu Ser Asn Pro Ile Glu Ile Asp
275 280 285
Phe Gln Thr Ser Gly Pro Ile Phe Asn Ala Ser Val His Ser Asp Thr
290 295 300
Pro Ser Val Ile Arg Gly Asp Leu Ile Lys Leu Phe Cys Ile Ile Thr
305 310 315 320
Val Glu Gly Ala Ala Leu Asp Pro Asp Asp Met Ala Phe Asp Val Ser
325 330 335
Trp Phe Ala Val His Ser Phe Gly Leu Asp Lys Ala Pro Val Leu Leu
340 345 350
Ser Ser Leu Asp Arg Lys Gly Ile Val Thr Thr Ser Arg Arg Asp Trp
355 360 365
Lys Ser Asp Leu Ser Leu Glu Arg Val Ser Val Leu Glu Phe Leu Leu
370 375 380
Gln Val His Gly Ser Glu Asp Gln Asp Phe Gly Asn Tyr Tyr Cys Ser
385 390 395 400
Val Thr Pro Trp Val Lys Ser Pro Thr Gly Ser Trp Gln Lys Glu Ala
405 410 415
Glu Ile His Ser Lys Pro Val Phe Ile Thr Val Lys Met Asp Val Leu
420 425 430
Asn Ala Phe Lys Tyr Pro Leu Leu Ile Gly Val Gly Leu Ser Thr Val
435 440 445
Ile Gly Leu Leu Ser Cys Leu Ile Gly Tyr Cys Ser Ser His Trp Cys
450 455 460
Cys Lys Lys Glu Val Gln Glu Thr Arg Arg Glu Arg Arg Arg Leu Met
465 470 475 480
Ser Met Glu Met Asp
485
<210> 5
<211> 343
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PTGFRN Protein Fragment #4
<400> 5
Lys Pro Val Asn Ile Phe Trp Ala Leu Glu Asp Ser Val Leu Val Val
1 5 10 15
Lys Ala Arg Gln Pro Lys Pro Phe Phe Ala Ala Gly Asn Thr Phe Glu
20 25 30
Met Thr Cys Lys Val Ser Ser Lys Asn Ile Lys Ser Pro Arg Tyr Ser
35 40 45
Val Leu Ile Met Ala Glu Lys Pro Val Gly Asp Leu Ser Ser Pro Asn
50 55 60
Glu Thr Lys Tyr Ile Ile Ser Leu Asp Gln Asp Ser Val Val Lys Leu
65 70 75 80
Glu Asn Trp Thr Asp Ala Ser Arg Val Asp Gly Val Val Leu Glu Lys
85 90 95
Val Gln Glu Asp Glu Phe Arg Tyr Arg Met Tyr Gln Thr Gln Val Ser
100 105 110
Asp Ala Gly Leu Tyr Arg Cys Met Val Thr Ala Trp Ser Pro Val Arg
115 120 125
Gly Ser Leu Trp Arg Glu Ala Ala Thr Ser Leu Ser Asn Pro Ile Glu
130 135 140
Ile Asp Phe Gln Thr Ser Gly Pro Ile Phe Asn Ala Ser Val His Ser
145 150 155 160
Asp Thr Pro Ser Val Ile Arg Gly Asp Leu Ile Lys Leu Phe Cys Ile
165 170 175
Ile Thr Val Glu Gly Ala Ala Leu Asp Pro Asp Asp Met Ala Phe Asp
180 185 190
Val Ser Trp Phe Ala Val His Ser Phe Gly Leu Asp Lys Ala Pro Val
195 200 205
Leu Leu Ser Ser Leu Asp Arg Lys Gly Ile Val Thr Thr Ser Arg Arg
210 215 220
Asp Trp Lys Ser Asp Leu Ser Leu Glu Arg Val Ser Val Leu Glu Phe
225 230 235 240
Leu Leu Gln Val His Gly Ser Glu Asp Gln Asp Phe Gly Asn Tyr Tyr
245 250 255
Cys Ser Val Thr Pro Trp Val Lys Ser Pro Thr Gly Ser Trp Gln Lys
260 265 270
Glu Ala Glu Ile His Ser Lys Pro Val Phe Ile Thr Val Lys Met Asp
275 280 285
Val Leu Asn Ala Phe Lys Tyr Pro Leu Leu Ile Gly Val Gly Leu Ser
290 295 300
Thr Val Ile Gly Leu Leu Ser Cys Leu Ile Gly Tyr Cys Ser Ser His
305 310 315 320
Trp Cys Cys Lys Lys Glu Val Gln Glu Thr Arg Arg Glu Arg Arg Arg
325 330 335
Leu Met Ser Met Glu Met Asp
340
<210> 6
<211> 217
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PTGFRN Protein Fragment #5
<400> 6
Val Arg Gly Ser Leu Trp Arg Glu Ala Ala Thr Ser Leu Ser Asn Pro
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Ile Glu Ile Asp Phe Gln Thr Ser Gly Pro Ile Phe Asn Ala Ser Val
20 25 30
His Ser Asp Thr Pro Ser Val Ile Arg Gly Asp Leu Ile Lys Leu Phe
35 40 45
Cys Ile Ile Thr Val Glu Gly Ala Ala Leu Asp Pro Asp Asp Met Ala
50 55 60
Phe Asp Val Ser Trp Phe Ala Val His Ser Phe Gly Leu Asp Lys Ala
65 70 75 80
Pro Val Leu Leu Ser Ser Leu Asp Arg Lys Gly Ile Val Thr Thr Ser
85 90 95
Arg Arg Asp Trp Lys Ser Asp Leu Ser Leu Glu Arg Val Ser Val Leu
100 105 110
Glu Phe Leu Leu Gln Val His Gly Ser Glu Asp Gln Asp Phe Gly Asn
115 120 125
Tyr Tyr Cys Ser Val Thr Pro Trp Val Lys Ser Pro Thr Gly Ser Trp
130 135 140
Gln Lys Glu Ala Glu Ile His Ser Lys Pro Val Phe Ile Thr Val Lys
145 150 155 160
Met Asp Val Leu Asn Ala Phe Lys Tyr Pro Leu Leu Ile Gly Val Gly
165 170 175
Leu Ser Thr Val Ile Gly Leu Leu Ser Cys Leu Ile Gly Tyr Cys Ser
180 185 190
Ser His Trp Cys Cys Lys Lys Glu Val Gln Glu Thr Arg Arg Glu Arg
195 200 205
Arg Arg Leu Met Ser Met Glu Met Asp
210 215
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PTGFRN Protein Fragment #6
<400> 7
Ser Lys Pro Val Phe Ile Thr Val Lys Met Asp Val Leu Asn Ala Phe
1 5 10 15
Lys Tyr Pro Leu Leu Ile Gly Val Gly Leu Ser Thr Val Ile Gly Leu
20 25 30
Leu Ser Cys Leu Ile Gly Tyr Cys Ser Ser His Trp Cys Cys Lys Lys
35 40 45
Glu Val Gln Glu Thr Arg Arg Glu Arg Arg Arg Leu Met Ser Met Glu
50 55 60
Met Asp
65
<210> 8
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PTGFRN Protein - Signal Peptide
<400> 8
Met Gly Arg Leu Ala Ser Arg Pro Leu Leu Leu Ala Leu Leu Ser Leu
1 5 10 15
Ala Leu Cys Arg Gly
20
<210> 9
<211> 193
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> PTGFRN Protein Fragment #7
<400> 9
Gly Pro Ile Phe Asn Ala Ser Val His Ser Asp Thr Pro Ser Val Ile
1 5 10 15
Arg Gly Asp Leu Ile Lys Leu Phe Cys Ile Ile Thr Val Glu Gly Ala
20 25 30
Ala Leu Asp Pro Asp Asp Met Ala Phe Asp Val Ser Trp Phe Ala Val
35 40 45
His Ser Phe Gly Leu Asp Lys Ala Pro Val Leu Leu Ser Ser Leu Asp
50 55 60
Arg Lys Gly Ile Val Thr Thr Ser Arg Arg Asp Trp Lys Ser Asp Leu
65 70 75 80
Ser Leu Glu Arg Val Ser Val Leu Glu Phe Leu Leu Gln Val His Gly
85 90 95
Ser Glu Asp Gln Asp Phe Gly Asn Tyr Tyr Cys Ser Val Thr Pro Trp
100 105 110
Val Lys Ser Pro Thr Gly Ser Trp Gln Lys Glu Ala Glu Ile His Ser
115 120 125
Lys Pro Val Phe Ile Thr Val Lys Met Asp Val Leu Asn Ala Phe Lys
130 135 140
Tyr Pro Leu Leu Ile Gly Val Gly Leu Ser Thr Val Ile Gly Leu Leu
145 150 155 160
Ser Cys Leu Ile Gly Tyr Cys Ser Ser His Trp Cys Cys Lys Lys Glu
165 170 175
Val Gln Glu Thr Arg Arg Glu Arg Arg Arg Leu Met Ser Met Glu Met
180 185 190
Asp
<210> 10
<400> 10
000
<210> 11
<400> 11
000
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<400> 12
000
<210> 13
<400> 13
000
<210> 14
<400> 14
000
<210> 15
<400> 15
000
<210> 16
<400> 16
000
<210> 17
<400> 17
000
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<400> 18
000
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<400> 19
000
<210> 20
<400> 20
000
<210> 21
<400> 21
000
<210> 22
<400> 22
000
<210> 23
<211> 3963
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> STAT6
<400> 23
ggggcagcca ctgcttacac tgaagaggga ggacgggaga ggagtgtgtg tgtgtgtgtg 60
tgtgtgtgtg tgtatgtatg tgtgtgcttt atcttatttt tctttttggt ggtggtggtg 120
gaagggggga ggtgctagca gggccagcct tgaactcgct ggacagagct acagacctat 180
ggggcctgga agtgcccgct gagaaaggga gaagacagca gaggggttgc cgaggcaacc 240
tccaagtccc agatcatgtc tctgtggggt ctggtctcca agatgccccc agaaaaagtg 300
cagcggctct atgtcgactt tccccaacac ctgcggcatc ttctgggtga ctggctggag 360
agccagccct gggagttcct ggtcggctcc gacgccttct gctgcaactt ggctagtgcc 420
ctactttcag acactgtcca gcaccttcag gcctcggtgg gagagcaggg ggaggggagc 480
accatcttgc aacacatcag cacccttgag agcatatatc agagggaccc cctgaagctg 540
gtggccactt tcagacaaat acttcaagga gagaaaaaag ctgttatgga acagttccgc 600
cacttgccaa tgcctttcca ctggaagcag gaagaactca agtttaagac aggcttgcgg 660
aggctgcagc accgagtagg ggagatccac cttctccgag aagccctgca gaagggggct 720
gaggctggcc aagtgtctct gcacagcttg atagaaactc ctgctaatgg gactgggcca 780
agtgaggccc tggccatgct actgcaggag accactggag agctagaggc agccaaagcc 840
ctagtgctga agaggatcca gatttggaaa cggcagcagc agctggcagg gaatggcgca 900
ccgtttgagg agagcctggc cccactccag gagaggtgtg aaagcctggt ggacatttat 960
tcccagctac agcaggaggt aggggcggct ggtggggagc ttgagcccaa gacccgggca 1020
tcgctgactg gccggctgga tgaagtcctg agaaccctcg tcaccagttg cttcctggtg 1080
gagaagcagc ccccccaggt actgaagact cagaccaagt tccaggctgg agttcgattc 1140
ctgttgggct tgaggttcct gggggcccca gccaagcctc cgctggtcag ggccgacatg 1200
gtgacagaga agcaggcgcg ggagctgagt gtgcctcagg gtcctggggc tggagcagaa 1260
agcactggag aaatcatcaa caacactgtg cccttggaga acagcattcc tgggaactgc 1320
tgctctgccc tgttcaagaa cctgcttctc aagaagatca agcggtgtga gcggaagggc 1380
actgagtctg tcacagagga gaagtgcgct gtgctcttct ctgccagctt cacacttggc 1440
cccggcaaac tccccatcca gctccaggcc ctgtctctgc ccctggtggt catcgtccat 1500
ggcaaccaag acaacaatgc caaagccact atcctgtggg acaatgcctt ctctgagatg 1560
gaccgcgtgc cctttgtggt ggctgagcgg gtgccctggg agaagatgtg tgaaactctg 1620
aacctgaagt tcatggctga ggtggggacc aaccgggggc tgctcccaga gcacttcctc 1680
ttcctggccc agaagatctt caatgacaac agcctcagta tggaggcctt ccagcaccgt 1740
tctgtgtcct ggtcgcagtt caacaaggag atcctgctgg gccgtggctt caccttttgg 1800
cagtggtttg atggtgtcct ggacctcacc aaacgctgtc tccggagcta ctggtctgac 1860
cggctgatca ttggcttcat cagcaaacag tacgttacta gccttcttct caatgagccc 1920
gacggaacct ttctcctccg cttcagcgac tcagagattg ggggcatcac cattgcccat 1980
gtcatccggg gccaggatgg ctctccacag atagagaaca tccagccatt ctctgccaaa 2040
gacctgtcca ttcgctcact gggggaccga atccgggatc ttgctcagct caaaaatctc 2100
tatcccaaga agcccaagga tgaggctttc cggagccact acaagcctga acagatgggt 2160
aaggatggca ggggttatgt cccagctacc atcaagatga ccgtggaaag ggaccaacca 2220
cttcctaccc cagagctcca gatgcctacc atggtgcctt cttatgacct tggaatggcc 2280
cctgattcct ccatgagcat gcagcttggc ccagatatgg tgccccaggt gtacccacca 2340
cactctcact ccatcccccc gtatcaaggc ctctccccag aagaatcagt caacgtgttg 2400
tcagccttcc aggagcctca cctgcagatg ccccccagcc tgggccagat gagcctgccc 2460
tttgaccagc ctcaccccca gggcctgctg ccgtgccagc ctcaggagca tgctgtgtcc 2520
agccctgacc ccctgctctg ctcagatgtg accatggtgg aagacagctg cctgagccag 2580
ccagtgacag cgtttcctca gggcacttgg attggtgaag acatattccc tcctctgctg 2640
cctcccactg aacaggacct cactaagctt ctcctggagg ggcaagggga gtcgggggga 2700
gggtccttgg gggcacagcc cctcctgcag ccctcccact atgggcaatc tgggatctca 2760
atgtcccaca tggacctaag ggccaacccc agttggtgat cccagctgga gggagaaccc 2820
aaagagacag ctcttctact acccccacag acctgctctg gacacttgct catgccctgc 2880
caagcagcag atggggaggg tgccctccta tccccaccta ctcctgggtc aggaggaaaa 2940
gactaacagg agaatgcaca gtgggtggag ccaatccact ccttcctttc tatcattccc 3000
ctgcccacct ccttccagca ctgactggaa gggaagttca ggctctgaga cacaccccaa 3060
catgcctgca cctgcagcgc gcacacgcac gcacacacac atacagagct ctctgagggt 3120
gatggggctg agcaggaggg gggctgggta agagcacagg ttagggcatg gaaggcttct 3180
ccgcccattc tgacccaggg cctaggacgg ataggcagga acatacagac acatttacac 3240
tagaggccag ggatagagga tattgggtct cagccctagg ggaatgggaa gcagctcaag 3300
ggaccctggg tgggagcata ggaggggtct ggacatgtgg ttactagtac aggttttgcc 3360
ctgattaaaa aatctcccaa agccccaaat tcctgttagc caggtggagg cttctgatac 3420
gtgtatgaga ctatgcaaaa gtacaagggc tgagattctt cgtgtatagc tgtgtgaacg 3480
tgtatgtacc taggatatgt taaatgtata gctggcacct tagttgcatg accacataga 3540
acatgtgtct atctgctttt gcctacgtga caacacaaat ttgggagggt gagacactgc 3600
acagaagaca gcagcaagtg tgctggcctc tctgacatat gctaaccccc aaatactctg 3660
aatttggagt ctgactgtgc ccaagtgggt ccaagtggct gtgacatcta cgtatggctc 3720
cacacctcca atgctgcctg ggagccaggg tgagagtctg ggtccaggcc tggccatgtg 3780
gccctccagt gtatgagagg gccctgcctg ctgcatcttt tctgttgccc catccaccgc 3840
cagcttccct tcactcccct atcccattct ccctctcaag gcaggggtca tagatcctaa 3900
gccataaaat aaattttatt ccaaaataac aaaataaata atctactgta cacaatctga 3960
aaa 3963
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000
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<400> 25
000
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<400> 26
000
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<400> 27
000
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<400> 28
000
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<400> 29
000
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<400> 30
000
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<400> 31
000
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<400> 32
000
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<400> 33
000
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<400> 34
000
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<400> 35
000
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<400> 36
000
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<400> 37
000
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<400> 38
000
<210> 39
<400> 39
000
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<400> 40
000
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<400> 41
000
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<400> 42
000
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<400> 43
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<400> 44
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<400> 45
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<400> 46
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<400> 47
000
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<400> 48
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<400> 49
000
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<400> 50
000
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<400> 51
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<400> 52
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<400> 53
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<400> 54
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<400> 55
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<400> 56
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<400> 57
000
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<400> 58
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<400> 59
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<400> 61
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<400> 64
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<400> 69
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 94
gaaggctagt aacgt 15
<210> 95
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
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ggttccgtcg ggctc 15
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 96
aggttccgtc gggct 15
<210> 97
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 97
aaggttccgt cgggc 15
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 98
aaaggttccg tcggg 15
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 99
gaaaggttcc gtcgg 15
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<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 102
gagtcgctga agcgg 15
<210> 103
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 103
cggattcggt ccccc 15
<210> 104
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 104
ccggattcgg tcccc 15
<210> 105
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 105
cccggattcg gtccc 15
<210> 106
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 106
tcccggattc ggtcc 15
<210> 107
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 107
gatcccggat tcggt 15
<210> 108
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 108
agatcccgga ttcgg 15
<210> 109
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 109
aagatcccgg attcg 15
<210> 110
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 110
tgatacgggg ggatg 15
<210> 111
<211> 15
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 111
cgtgtgcgcg ctgca 15
<210> 112
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 112
actggtgacg agggtt 16
<210> 113
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 113
aactggtgac gagggt 16
<210> 114
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 114
ctcacaccgc ttgatc 16
<210> 115
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 115
cggtcagacc agtagc 16
<210> 116
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 116
ctagtaacgt actgtt 16
<210> 117
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 117
gctagtaacg tactgt 16
<210> 118
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 118
ggctagtaac gtactg 16
<210> 119
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 119
aggctagtaa cgtact 16
<210> 120
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 120
aaggctagta acgtac 16
<210> 121
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 121
aagaaggcta gtaacg 16
<210> 122
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 122
aaaggttccg tcgggc 16
<210> 123
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 123
agaaaggttc cgtcgg 16
<210> 124
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 124
ttcggtcccc cagtga 16
<210> 125
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 125
cggattcggt ccccca 16
<210> 126
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 126
agatcccgga ttcggt 16
<210> 127
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 127
agcaagatcc cggatt 16
<210> 128
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 128
tgatacgggg ggatgg 16
<210> 129
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 129
ttgatacggg gggatg 16
<210> 130
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 130
agaggccttg atacgg 16
<210> 131
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 131
gggttagcat atgtca 16
<210> 132
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 132
tggatctccc ctactcg 17
<210> 133
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 133
actggtgacg agggttc 17
<210> 134
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 134
gctcacaccg cttgatc 17
<210> 135
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 135
cgctcacacc gcttgat 17
<210> 136
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 136
tccgctcaca ccgcttg 17
<210> 137
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 137
ttccgctcac accgctt 17
<210> 138
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 138
accagtagct ccggaga 17
<210> 139
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 139
gccggtcaga ccagtag 17
<210> 140
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 140
agccggtcag accagta 17
<210> 141
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 141
agaaggctag taacgta 17
<210> 142
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 142
aaggttccgt cgggctc 17
<210> 143
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 143
aaaggttccg tcgggct 17
<210> 144
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 144
gaaaggttcc gtcgggc 17
<210> 145
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 145
ctgagtcgct gaagcgg 17
<210> 146
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 146
tctgagtcgc tgaagcg 17
<210> 147
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 147
atcccggatt cggtccc 17
<210> 148
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 148
gatcccggat tcggtcc 17
<210> 149
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 149
agatcccgga ttcggtc 17
<210> 150
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 150
aagatcccgg attcggt 17
<210> 151
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 151
gcaagatccc ggattcg 17
<210> 152
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 152
cggtcatctt gatggta 17
<210> 153
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 153
tgatacgggg ggatgga 17
<210> 154
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 154
ttgatacggg gggatgg 17
<210> 155
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 155
cttgatacgg ggggatg 17
<210> 156
<211> 17
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 156
gaggccttga tacgggg 17
<210> 157
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 157
gggggtccct ctgatatatg 20
<210> 158
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 158
gtggatctcc cctactcggt 20
<210> 159
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 159
agcccaacag gaatcgaact 20
<210> 160
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 160
cgctcacacc gcttgatctt 20
<210> 161
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 161
ccgctcacac cgcttgatct 20
<210> 162
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 162
tccgctcaca ccgcttgatc 20
<210> 163
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 163
agtttgccgg ggccaagtgt 20
<210> 164
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 164
aagggcacgc ggtccatctc 20
<210> 165
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 165
aaagggcacg cggtccatct 20
<210> 166
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 166
caaagggcac gcggtccatc 20
<210> 167
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 167
acaaagggca cgcggtccat 20
<210> 168
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 168
ccggagacag cgtttggtga 20
<210> 169
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 169
tccggagaca gcgtttggtg 20
<210> 170
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 170
agtagctccg gagacagcgt 20
<210> 171
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 171
cggtcagacc agtagctccg 20
<210> 172
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 172
agccggtcag accagtagct 20
<210> 173
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 173
cagccggtca gaccagtagc 20
<210> 174
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 174
gctagtaacg tactgtttgc 20
<210> 175
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 175
aagaaggcta gtaacgtact 20
<210> 176
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 176
gaagaaggct agtaacgtac 20
<210> 177
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 177
agaagaaggc tagtaacgta 20
<210> 178
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 178
gagaaaggtt ccgtcgggct 20
<210> 179
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 179
ggagaaaggt tccgtcgggc 20
<210> 180
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 180
cggattcggt cccccagtga 20
<210> 181
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 181
ccggattcgg tcccccagtg 20
<210> 182
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 182
atcccggatt cggtccccca 20
<210> 183
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 183
agatcccgga ttcggtcccc 20
<210> 184
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 184
aagatcccgg attcggtccc 20
<210> 185
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 185
gcaagatccc ggattcggtc 20
<210> 186
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 186
tgagcaagat cccggattcg 20
<210> 187
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 187
tgatacgggg ggatggagtg 20
<210> 188
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 188
ttgatacggg gggatggagt 20
<210> 189
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 189
gggagaggcc ttgatacggg 20
<210> 190
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 190
gatcaccaac tggggttggc 20
<210> 191
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 191
tgcgtgtgcg cgctgcaggt 20
<210> 192
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 192
gtgcgtgtgc gcgctgcagg 20
<210> 193
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Peptide
<400> 193
gcccttgtac ttttgcatag 20
Claims (115)
- 약학 조성물로서,
(a) 세포외 소포;
(b) 당류;
(c) 염화나트륨;
(d) 인산칼륨; 및
(e) 인산나트륨
을 포함하되, 상기 조성물은 약 7.2의 pH에서 용액 중에 있는 것인, 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 세포외 소포가 엑소좀인, 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물은 4℃의 온도에서 적어도 약 4시간, 적어도 약 5시간, 적어도 약 6시간, 적어도 약 7시간, 적어도 약 8시간, 적어도 약 9시간, 적어도 약 10시간, 적어도 약 11시간, 적어도 약 12시간, 적어도 약 15시간, 적어도 약 20시간, 적어도 약 24시간, 적어도 약 2일, 적어도 약 3일, 적어도 약 4일, 적어도 약 5일, 적어도 약 6일, 또는 적어도 약 7일 동안 보관될 수 있는, 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 냉동되고 해동될 수 있되, 상기 해동된 조성물은 약 7.2의 pH를 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 7.0, 7.1, 7.2, 7.3 또는 7.4의 pH를 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 7.2의 pH를 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 pI가 약 1 내지 약 6.5의 범위인, 조성물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 (i) 감소된 응집물, (ii) EV의 개선된 안정성, (iii) EV 구조의 개선된 온전성, 및 (iv) EV 상에 또는 EV에 함유된 조작된 단백질의 개선된 안정성을 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류가 단당류, 이당류, 삼당류, 올리고당류, 다당류, 당 알코올 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류는 약 180.00 g/mol 내지 약 380.00 g/mol의 분자량을 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류가 락토스, 글루코스, 수크로스, 트레할로스 및/또는 이들의 조합을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류는 약 90.00 g/mol 내지 약 190.00 g/mol의 분자량을 갖는 당 알코올인, 조성물.
- 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당 알코올이 글리세롤, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨 및/또는 이들의 조합을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류가 수크로스 또는 트레할로스인, 조성물.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당류가 약 5% w/v의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- (i) 세포외 소포 및 (ii) 당류를 포함하는 약학 조성물로서, 당류가 약 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스인, 조성물.
- 제16항에 있어서, 상기 조성물은 1% w/v 내지 4% w/v의 농도의 수크로스 또는 트레할로스를 포함하는 참조 조성물에 비해 개선된 안정성을 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 약 6 mS/cm +/- 10% 내지 약 10 mS/cm +/- 10%의 전도도를 갖는, 조성물.
- 제18항에 있어서, 상기 전도도가 6 mS/cm 내지 약 7 mS/cm, 약 7 mS/cm 내지 약 8 mS/cm, 약 8 mS/cm 내지 약 9 mS/cm, 또는 약 9 mS/cm 내지 약 10 mS/cm인, 조성물.
- 제18항 또는 제19항에 있어서, 상기 전도도가 약 6 mS/cm, 약 7 mS/cm, 약 8 mS/cm, 약 9 mS/cm, 또는 약 10 mS/cm인, 조성물.
- 제16항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 염화나트륨을 추가로 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제16항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 염화나트륨이 약 10 mM 내지 약 134 mM의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- 제22항에 있어서, 상기 염화나트륨의 농도가 약 10 mM 내지 약 130 mM, 약 20 mM 내지 약 120 mM, 약 30 mM 내지 약 110 mM, 약 40 mM 내지 약 100 mM, 약 50 mM 내지 약 90 mM, 약 60 mM 내지 약 80 mM, 약 70 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 95 mM, 약 45 mM 내지 약 80 mM, 약 45 mM 내지 약 70 mM, 약 45 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 65 mM, 약 50 mM 내지 약 60 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 약 50 mM 내지 약 55 mM, 또는 약 51 mM 내지 약 54 mM인, 조성물.
- 제22항 또는 제23항에 있어서, 상기 염화나트륨의 농도가 약 10 mM, 약 20 mM, 약 30 mM, 약 40 mM, 약 50 mM, 약 60 mM, 약 70 mM, 약 80 mM, 약 90 mM, 또는 약 100 mM인, 조성물.
- 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 염화나트륨의 농도가 약 39 mM, 약 40 mM, 약 41 mM, 약 42 mM, 약 43 mM, 약 44 mM, 약 45 mM, 약 46 mM, 약 47 mM, 약 48 mM, 약 49 mM, 또는 약 50 mM인, 조성물.
- 제16항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 인산염 완충액을 추가로 포함하는, 조성물.
- 제26항에 있어서, 상기 인산염 완충액이 인산칼륨, 인산나트륨, 인산이수소나트륨, 인산이수소칼륨, 인산이칼륨, 및/또는 이들의 조합을 포함하는 적어도 하나의 인산염 화합물을 포함하는, 조성물.
- 제27항에 있어서, 상기 인산염 완충액이 인산칼륨 및 인산나트륨을 약 1:약 2, 약 1:약 3, 약 1:약 4; 또는 약 1:약 5의 비율로 포함하는, 조성물.
- 제27항 또는 제28항에 있어서, 상기 인산염 완충액이 인산칼륨 및 인산나트륨을 약 1:약 3의 비율로 포함하는, 조성물.
- 제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인산염 완충액이 인산칼륨 및 인산나트륨을 약 1:약 2의 비율로 포함하는, 조성물.
- (i) 세포외 소포, (ii) 인산칼륨, 및 (iii) 인산나트륨을 용액에 포함하는 약학 조성물로서, 상기 인산칼륨 및 인산나트륨의 비율이 약 1 대 약 3 또는 약 1 대 약 2인, 조성물.
- 제16항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 용액은 7.1 내지 7.3의 pH를 갖는, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제27항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인산칼륨이 약 1 mM 내지 약 20 mM, 약 2 mM 내지 약 19 mM, 약 3 mM 내지 약 18 mM, 약 4 mM 내지 약 17 mM, 약 5 mM 내지 약 16 mM, 또는 약 5 mM 내지 약 15 mM의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- 제33항에 있어서, 상기 인산칼륨의 농도가 약 4.5 mM, 약 4.6 mM, 약 4.7 mM, 약 4.8 mM, 약 4.9 mM, 약 5.0 mM, 약 5.1 mM, 약 5.2 mM, 약 5.3 mM, 약 5.4 mM, 또는 약 5.5 mM인, 조성물.
- 제33항 또는 제34항에 있어서, 상기 인산칼륨의 농도가 5.15 mM인, 조성물.
- 제33항에 있어서, 상기 인산칼륨의 농도가 약 15.0 mM, 약 15.1 mM, 약 15.2 mM, 약 15.3 mM, 약 15.4 mM, 약 15.5 mM, 약 15.6 mM, 약 15.7 mM, 약 15.8 mM, 약 15.9 mM, 약 16.0, 약 16.1 mM, 약 16.2 mM, 약 16.3 mM, 약 16.4 mM, 또는 약 16.5 mM인, 조성물.
- 제33항 또는 제36항에 있어서, 상기 인산칼륨의 농도가 15.4 mM인, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제27항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인산칼륨이 일염기성 인산칼륨인, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제27항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인산나트륨이 약 10 mM 내지 약 30, 약 11 mM 내지 약 29 mM, 약 12 mM 내지 약 28 mM, 약 13 mM 내지 약 27 mM, 또는 약 14 mM 내지 약 26 mM의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- 제39항에 있어서, 상기 인산나트륨이 약 14.5 mM, 약 14.6 mM, 약 14.7 mM, 약 14.8 mM, 약 14.9 mM, 약 15.0 mM, 약 15.1 mM, 약 15.2 mM, 약 15.3 mM, 약 15.4 mM, 또는 약 15.5 mM의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- 제39항 또는 제40항에 있어서, 상기 인산나트륨의 농도가 14.9 mM인, 조성물.
- 제39항에 있어서, 상기 인산나트륨이 약 26.5 mM, 약 26.6 mM, 약 26.7 mM, 약 26.8 mM, 약 26.9 mM, 약 27.0 mM, 약 27.1 mM, 약 27.2 mM, 약 27.3 mM, 약 27.4 mM, 또는 약 27.5 mM의 농도로 조성물에 존재하는, 조성물.
- 제39항 또는 제42항에 있어서, 상기 인산나트륨의 농도가 27.1 mM인, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제27항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 인산나트륨이 이염기성 인산나트륨 칠수화물인, 조성물.
- 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 항산화제를 추가로 포함하는, 조성물.
- 제45항에 있어서, 상기 항산화제가 D-메티오닌, L-메티오닌. 아스코르브산, 에리소르빈산, 아스코르브산나트륨, 티오글리세롤, 시스테인, 아세틸시스테인, 시스틴, 디티오에리트레이톨, 글루타치온, 토코페롤, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 중황산나트륨, 디티온산나트륨, A-토코페롤, γ-토코페롤, 갈산프로필, 아스코르빌 팔미테이트, 메타중아황산나트륨, 티오우레아, 티오황산나트륨, 갈산프로필, 및 티오글리콜산나트륨을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 동결건조되지 않은, 조성물.
- 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 킬레이트제를 포함하지 않는, 조성물.
- 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 알부민을 포함하지 않는, 조성물.
- 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서,
a. 약 5% w/v 농도의 수크로스,
b. 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
c. 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
d. 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물;
을 포함하며, pH 7.2 및 전도도 7.23 mS/cm +/- 10%의 용액 중에 있는, 조성물. - 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서,
a. 약 5% w/v 농도의 수크로스,
b. 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
c. 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
d. 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물;
을 포함하며, pH 7.2 및 전도도 8.8 mS/cm +/- 10%의 용액 중에 있는, 조성물. - 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 약 -20℃ 내지 약 -80℃의 온도에서 보관될 수 있고, 상기 세포외 소포의 안정성이 감소되지 않는, 조성물.
- 제52항에 있어서, 상기 조성물은 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월, 약 6개월, 약 7개월, 약 8개월, 약 9개월, 약 10개월, 약 11개월, 약 12개월, 약 1년, 약 2년, 약 3년 또는 약 4년 동안 보관될 수 있는, 조성물.
- 제16항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 소포가 엑소좀인, 조성물.
- 제1항 내지 제15항 및 제16항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 소포가 스캐폴드 단백질을 추가로 포함하는, 조성물.
- 제55항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 스캐폴드 X인, 조성물.
- 제55항 또는 제56항에 있어서, 상기 페이로드가 스캐폴드 단백질에 연결되는, 조성물.
- 제57항에 있어서, 상기 페이로드가 링커에 의해 스캐폴드 단백질에 연결되는, 조성물.
- 제58항에 있어서, 상기 링커가 폴리펩티드인, 조성물.
- 제58항에 있어서, 상기 링커가 비-폴리펩티드 모이어티인, 조성물.
- 제56항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 스캐폴드 X가 페이로드를 세포외 소포의 외부 표면 상에 고정할 수 있는 스캐폴드 단백질인, 조성물.
- 제56항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 프로스타글란딘 F2 수용체 음성 조절인자(PTGFRN 단백질)를 포함하는, 조성물.
- 제55항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 PTGFRN 단백질 또는 이의 단편을 포함하는, 조성물.
- 제55항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 서열번호 1-7 및 33 중 어느 하나에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제55항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 서열번호 1과 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 약 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 소포가 생물학적 활성 모이어티를 포함하는, 조성물.
- 제55항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 생물학적 활성 모이어티에 융합되는, 조성물.
- 제55항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스캐폴드 단백질이 생물학적 활성 모이어티에 융합되지 않은, 조성물.
- 제68항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생물학적 활성 모이어티가 STING 작용제를 포함하는, 조성물.
- 제71항에 있어서, 상기 STING 작용제가 CL656을 포함하는, 조성물.
- 제72항에 있어서, 상기 STING 작용제가 CL656의 이성질체 A, 이성질체 B, 이성질체 C, 또는 이성질체 D인, 조성물.
- 제71항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 STING 작용제가 스캐폴드 단백질에 융합되지 않은, 조성물.
- 제68항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생물학적 활성 모이어티가 IL-12, CD40L, FLT3L, 또는 이들의 임의의 조합인, 조성물.
- 제75항에 있어서, 상기 생물학적 활성 모이어티가 스캐폴드 단백질에 융합되는, 조성물.
- 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 비경구, 국소, 정맥내, 경구, 피하, 동맥내, 피내, 경피, 직장, 두개내, 복강내, 비강내, 종양내, 근육내 경로에 의해, 또는 흡입제로서 투여될 수 있는, 조성물.
- 하기를 조합하는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항의 약학 조성물을 제조하는 방법:
(a) 세포외 소포;
(b) 당류;
(c) 염화나트륨
(d) 인산칼륨; 및
(e) 인산나트륨. - 제78항에 있어서, 상기 세포외 소포가 엑소좀인, 방법.
- 세포외 소포 및 약 5% w/v 농도의 수크로스 또는 트레할로스인 당류를 조합하는 단계를 포함하는 약학 조성물을 제조하는 방법으로서, 조성물이 1 내지 4% 농도의 수크로스 또는 트레할로스만을 포함하는 조성물에 비해 향상된 안정성을 나타내는, 방법.
- 세포외 소포 및 인산염 화합물을 조합하는 단계를 포함하는 약학 조성물을 제조하는 방법으로서, 인산염 화합물이 7.1 내지 7.3의 pH를 생성하는 비율로 인산칼륨 및 인산나트륨을 포함하는, 방법.
- 제78항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물의 전도도가 추가로 조정되는, 방법.
- 제97항에 있어서, 상기 조성물의 전도도가 약 7.1 내지 약 7.3 mS/cm인, 방법.
- 제83항에 있어서, 상기 전도도가 7.23 mS/cm인, 방법.
- 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항의 조성물을 대상체에 투여하는 단계를 포함하는 방법으로서, 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법.
- 제85항에 있어서, 상기 질환 또는 병태가 암, 섬유증, 혈우병, 당뇨병, 성장 인자 결핍, 안과 질환, 폼페병, 리소좀 저장 장애, 점액낭종증, 낭성 섬유증, 뒤센 및 베커 근이영양증, 트랜스티레틴 아밀로이드증, 혈우병 A, 혈우병 B, 아데노신-데아미나제 결핍, 레버 선천적 흑암증, X-연관 부신백질영양증, 이색성 백질영양증, OTC 결핍, 글리코겐 저장 질환 1A, 크리글러-나자르 증후군, 원발성 고옥살산혈증 1형, 급성 간헐적 과증식 포르피린증, 페닐케톤뇨, 선천성 고콜레스테롤혈증, 점액다당증 유형 VI, α1 항트립신 결핍, 및 고콜레스테롤혈증인, 방법.
- 제86항에 있어서, 상기 암이 방광암, 자궁경부암, 신세포암, 고환암, 결장직장암, 폐암, 두경부암, 난소, 림프종, 간암, 교모세포종, 흑색종, 골수종, 백혈병, 췌장암, 또는 이들의 조합인, 방법.
- 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 질환 또는 병태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약학 조성물.
- 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약제의 제조에서 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항의 조성물의 용도.
- 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 약 4% w/v 내지 약 6% w/v, 예를 들어, 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 30 mM 내지 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 내지 약 25 mM의 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 내지 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 6.7 내지 약 7.7인, 조성물. - 제88항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5% w/v 농도의 수크로스;
(c) 약 40 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 15 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 27 mM 농도의 이염기성 인산나트륨 칠수화물
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제88항 또는 제89항에 있어서, 상기 세포외 소포가 STING 작용제를 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 50 mM 내지 적어도 약 300 mM 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 6.7 내지 약 7.7인, 조성물. - 제91항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 적어도 약 1% 내지 적어도 약 10%의 농도의 수크로스;
(c) 적어도 약 10 mM 내지 적어도 약 200 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 적어도 약 1 mM 내지 적어도 약 20 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 적어도 약 5 mM 내지 적어도 약 35 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 6.7 내지 약 7.7인, 조성물. - 제93항에 있어서,
(a) 세포외 소포;
(b) 약 5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제91항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 소포가 IL-12 모이어티를 포함하는, 조성물.
- 제95항에 있어서, 상기 IL-12 모이어티가 서열번호 11, 12 또는 13과 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제95항 또는 제96항에 있어서, 상기 IL-12 모이어티가 서열번호 13에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포;
(b) 수크로스;
(c) 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2이고;
상기 수크로스는 약 73 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도이고,
상기 염화나트륨은 약 50 mM, 약 55 mM, 약 60 mM, 약 65 mM, 약 70 mM, 약 75 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포;
(b) 수크로스;
(c) 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2이고;
상기 수크로스는 약 2.5%, 약 2.6%, 약 2.7%, 약 2.8%, 약 2.9%, 약 3.0%, 약 3.1%, 약 3.2%, 약 3.3%, 약 3.4%, 약 3.5%, 약 3.6%, 약 3.7%, 약 3.8%, 약 3.9%, 약 4.0%, 약 4.1%, 약 4.2%, 약 4.3%, 약 4.4%, 약 4.5%, 약 4.6%, 약 4.7%, 약 4.8%, 약 4.9%, 및 약 5.0%로부터 선택되는 농도이고,
상기 염화나트륨은 약 50 mM, 약 55 mM, 약 60 mM, 약 65 mM, 약 70 mM, 약 75 mM, 약 80 mM, 약 85 mM, 약 90 mM, 약 95 mM, 약 100 mM, 약 105 mM, 약 110 mM, 약 115 mM, 약 120 mM, 약 125 mM, 약 130 mM, 약 135 mM, 약 140 mM, 약 145 mM, 약 146 mM, 및 약 150 mM로부터 선택되는 농도인, 조성물. - 제98항 또는 제99항에 있어서, 상기 ASO가 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 73 mM 내지 약 146 mM의 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되,
(f) 여기서 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5% 내지 약 5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 내지 약 150 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 146 mM 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 50 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 100 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) ASO를 포함하는 세포외 소포로서, 상기 ASO는 서열번호 91-193으로부터 선택되는 핵산 서열을 포함하는, 세포외 소포;
(b) 약 2.5%의 농도의 수크로스;
(c) 약 100 mM 농도의 염화나트륨;
(d) 약 5 mM 농도의 일염기성 인산칼륨;
(e) 약 15 mM 농도의 이염기성 인산나트륨,
을 포함하되, (f) 상기 조성물의 pH가 약 7.2인, 조성물. - 제98항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASO가 서열번호 144에 나타낸 핵산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제98항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASO가 서열번호 145에 나타낸 핵산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제98항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASO가 서열번호 193에 나타낸 핵산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제98항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASO가 서열번호 185에 나타낸 핵산 서열을 포함하는, 조성물.
- 제98항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASO가 링커에 의해 세포외 소포와 연관되는, 조성물.
- 제112항에 있어서, 상기 링커가 콜레스테롤, 토코페롤, 지방산, 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는, 조성물.
- 제112항 또는 제113항에 있어서, 상기 링커가 절단 가능한 링커인, 조성물.
- 제58항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커가 절단 가능한 링커인, 조성물.
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EP3377078A4 (en) * | 2015-11-18 | 2019-09-04 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | EXTRACELLULAR NERVE CELL VESITEL |
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