KR20220082812A

KR20220082812A - 루테인 및 제아잔틴을 포함하는 생체이용가능성이 증강된 크산토필 조성물

Info

Publication number: KR20220082812A
Application number: KR1020227010257A
Authority: KR
Inventors: 수닐 쿠마르 티.케이.; 프라빈 날라와데; 장기르 모한 랄; 압히지트 모르데; 라빈드라 타카레
Original assignee: 옴니액티브 헬스 테크놀로지스 리미티드
Priority date: 2019-10-15
Filing date: 2020-10-10
Publication date: 2022-06-17
Also published as: MX2022003672A; CN116392461A; IL291294A; ZA202202927B; EP4045019A1; AU2020368221B2; CN114502147A; AU2020368221A1; CA3151524A1; CO2022004529A2; US20230255898A1; WO2021074763A1; JP2022551827A; BR112022006701A2; EP4045019A4

Abstract

본 발명은 바람직한 입자 크기인 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 선택적 이성질체 및 약학적으로 및/또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 예컨대 담체, 용해도 증강제, 생체이용가능성 증강 작용제, 항산화제 및 선택적으로 향미제를, 증강된 생체이용가능성을 발휘하는 선택적인 비율로 포함하는 크산토필 조성물에 관한 것이다. 크산토필 조성물은 적어도 65 중량%의 트랜스-R,R 루테인 및 적어도 10 중량%의 트랜스-R,R 제아잔틴으로 구성된 총 크산토필이 적어도 80%이며, 이는 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴의 바람직한 비율을 생성하기 위한 명확한 비율로 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 조합적으로 제조된다.

Description

루테인 및 제아잔틴을 포함하는 생체이용가능성이 증강된 크산토필 조성물

본 발명은 주로 루테인 및 제아잔틴의 선택적 이성질체를 약학적으로 및/또는 기능식품적으로(nutraceutically) 허용가능한 부형제, 용해도 증강제, 항산화제 및 생체-증강 작용제와 함께 포함하여 활성제의 생체이용가능성을 증강시킨 크산토필 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 구체적으로 선택적인 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴 및 적어도 하나의 생체이용가능성 증강 작용제, 용해도 증강제 및 항산화제를 포함하는 크산토필 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 더욱이 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴과 같은 선택적 이성질체로 구성된 총 크산토필이 80% 초과로 포함된 크산토필 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 보다 구체적으로 산업적으로 실행가능한 공정을 사용하여 2개의 상이한 식물 공급원으로부터 추출 공정에 의해 제조된, 적어도 80 중량%의 트랜스-R,R 루테인과 적어도 15 중량%의 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 비히클/담체로서 바람직한 오일에서 선택적 범위의 입자 크기를 얻기 위한 미분화 공정과, 선택적 용해도 증강제, 항산화제 및 생체-증강 작용제를 조합하여 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물의 생체이용가능성을 증강하는 것에 관한 것이다. 이러한 놀랍게도 개선된 생체이용가능성은 비히클로서 바람직한 오일에서 선택적인 범위의 입자 크기를 얻기 위한 미분화 공정과, 용해도 증강을 갖는 선택적인 생체-증강 작용제 및 항산화제가 조합되어 놀랍게도 생체이용가능성의 개선을 나타내는 효과에 기인한다. 추가로 본 발명은 약학적으로 또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 또는 담체 또는 이들의 혼합물을 사용하여, 비드렛, 분말, 오일 현탁액, 과립, 캡슐, 정제, 필름 또는 임의의 다른 적합한 경구, 비경구 또는 국소 투여 형태와 같은 상이한 형태로 추가로 제형화될 수 있는, 루테인 및 제아잔틴의 트랜스-R,R 이성질체를 특정 비율로 포함하는 크산토필 조성물에 관한 것이다. 추가로 본 발명은 R,S 제아잔틴이 실질적으로 없고 다양한 눈 및 뇌 건강 응용분야에서 사용되는 인간 소비에 적합한 크산토필 조성물에 관한 것이다.

천연 크산토필은 다양한 식물 및 동물 공급원에 풍부하게 존재하고 이로부터 유래된다. 천연 크산토필의 유익한 건강 효과와 그 항산화 특성은 과학 문헌 전반에 걸쳐 잘 기록되어 있다. 이들 특성이 신체에서 효과적으로 활용되는 것에 대한 유일한 방해는 이들 영양소의 낮은 생체이용가능성과 고도로 산화가능한 특성이다. 생체이용가능성에 대한 오랫동안 느껴온 필요성을 이해하는 것은 건강 보조제 및 약물에 대한 용량을 최적화하는 데 도움이 된다.

많은 크산토필 영양소의 경구 생체이용가능성은 물리화학적 및 생리학적 과정 예컨대 위장액에서의 낮은 용해도; 위장관 내에서 화학적 변형을 일으키는 분자 구조, 대사 효소; 낮은 상피 세포 투과성, 막 수송체, 장내 미생물총과의 상호작용 등으로 인해 제한된다. 이들 작용제의 생체이용가능성은 위장관 내에서 이들의 방출, 가용화, 수송, 대사 및 흡수를 제어하는 조성물을 구체적으로 설계함에 의해 개선될 수 있다. 인간 또는 수의학적 용도를 위한 기능식품 생성물의 형태로 그 사용을 위한 황반 영양소의 낮은 생체이용가능성의 이들 문제를 해결하기 위해 다양한 접근법이 사용되었지만 생체이용가능성을 개선할 필요가 여전히 크다. 접근법은 식품 등급 용매 및 산업적으로 실행가능한 추출 공정을 사용한 2가지 다른 식물 공급원의 추출물 및 알칼리 처리, 중화, 정제 및 미분화에 의한 선택적 입자 크기로의 추가 제형화로부터 제조된 특정 중량 백분율의 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴 그리고 바람직한 담체 또는 비히클을 생체이용가능성 증강 작용제와 함께 포함하여, 증강된 생체이용가능성을 초래하는 조합 효과를 제공하는 조성물을 포함한다.

US6075058A는 카로티노이드의 증가된 생체이용가능성을 위한 조성물을 교시하고 있다. 미국 특허는 10mg의 콜레스테롤, 100mg의 올리브 오일, 20mg의 난황 인지질, 250마이크로그램의 알파-토코페롤 및 0.375ml의 0.15M 염화나트륨 수용액과 함께, 200마이크로그램의 카로티노이드 루테인 및 125마이크로그램의 카로티노이드 제아잔틴의 혼합물을 교시하고 있다.

WO1999/047001은 카로티노이드의 흡수를 증가시키는 방법, 보다 구체적으로는 리졸레시틴 및 레시틴을 사용하여 인간 및 가금류에서 루테인 및 제아잔틴의 흡수 및 생체이용가능성을 증가시키는 방법에 관한 것이다.

IN 201821036199는 총 크산토필의 80% 초과로 구성되는 (트랜스 R R)-루테인 및 (트랜스 R,R)-제아잔틴을 포함하는 정제된 크산토필 조성물 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 정제된 크산토필 조성물은 적어도 85 중량%의 (트랜스 R,R)-루테인 및 적어도 15 중량%의 (트랜스 R,R)-제아잔틴과 같은 선택적 이성질체로 구성된다. 조성물은 추출 공정에 의해 제조된다. 그것은 산업적으로 실행가능한 공정이고 식품 등급의 극성 및 비극성 용매를 이용하여 정제된다. 본 발명은 주로 조성물의 제조 방법에 대해 언급하고 조성물 제형에 대해서는 일절 언급하지 않는다.

본 발명의 발명자들은, 2가지 상이한 식물 공급원의 추출 및 크산토필 에스테르 풍부 추출물을 알코올성 알칼리로의 처리로부터 제조된, 트랜스-R,R 루테인과 함께 트랜스-R,R 제아잔틴의 선택적 이성질체로 구성된 크산토필 조성물을 제조하기 위해 철저한 실험을 수행하였다. 그 다음, 생성된 반응 혼합물은 식품 등급의 극성 및 비-극성 용매를 사용하여 추출, 단리 및 정제 공정을 거쳐 크산토필 조성물에 적어도 15 중량%의 트랜스-R,R 제아잔틴 이성질체를 적어도 80 중량%의 트랜스-R,R 루테인과 조합하여 선택적으로 갖는다.

본 발명자들은 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물의 생체이용가능성 증강이 비히클로서 바람직한 오일, 선택적인 생체-증강 작용제, 용해도 증강제 및 놀랍게도 생체이용가능성에서 개선을 나타내는 항산화제에서 선택적인 범위의 입자 크기를 얻기 위한 미분화 공정의 조합된 효과에 기인한다는 것을 발견하였다.

본 발명의 주요 목적은 식품 등급 용매와 산업적으로 실행가능한 공정을 사용하고 그리고 증강된 생체이용가능성을 초래하는 약학적 및/또는 기능식품적으로 허용된 부형제로 제형화하여 2가지 상이한 식물 공급원의 추출물로부터 제조된, 트랜스-R,R 루테인과 함께 트랜스-R,R 제아잔틴을 특정 중량 백분율로 선택적으로 포함하는 크산토필 조성물을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 추가의 주요 목적은 비히클로서 바람직한 오일에서 선택적 범위의 입자 크기를 얻기 위한 미분화 공정과, 선택적 생체-강화 작용제, 용해도 증강제 및 항산화제가 조합되어 놀랍게도 개선된 생체이용가능성을 나타내는 효과에 기인한 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물의 생체이용가능성의 증강이다.

본 발명의 추가의 목적은 약학적으로 또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 및/또는 담체를 사용하여 비드렛, 분말, 오일 현탁액, 과립, 캡슐, 정제, 필름 또는 임의의 다른 적합한 경구, 비경구 또는 국소 투여 형태와 같은 상이한 형태로 추가로 제형화되며 특정 비율로 루테인의 트랜스-R,R 이성질체 및 제아잔틴의 트랜스-R,R 이성질체를 포함하는 크산토필 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 시험 제형에 대한 90% 신뢰 구간이 통계적으로 더 유의한, 즉 생체동등성의 기준 80-125% 보다 더 큰 향상된 생체이용가능성을 나타내어 참고 제형(reference formulation)과 비교하여 우수한 생체이용가능성을 나타내는 선택적 생체증강제 및 트랜스-R,R 루테인과 함께 트랜스-R,R 제아잔틴의 크산토필 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 적어도 80 중량%의 트랜스-R,R 루테인 및 적어도 15 중량%의 트랜스-R,R 제아잔틴을 추가로 포함하는, 총 크산토필이 적어도 80% 포함된 크산토필 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 트랜스-R,R 제아잔틴 및 트랜스-R,R 루테인과 같은 선택적 이성질체로 구성되고 R,S 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없는 크산토필 풍부 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 하나의 다른 목적은 유닛 조작과 함께 특정 반응 조건을 사용하여 특정 비율에서의 식품 등급 용매로 처리하여 제조된 크산토필 에스테르를 포함하는 2개의 상이한 식물 공급원의 추출물로부터 수득되는 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 중요한 목적은 마리골드 및 파프리카와 같은 2가지 상이한 식물 공급원의 추출물로부터 제조된 크산토필 풍부 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 2가지 크산토필 에스테르 풍부 추출물을 일정한 비율로 혼합하고 반응 혼합물을 알코올성 알칼리로 처리하고 이어서 중화 단리하고 크산토필 조성물의 원하는 순도를 얻기 위한 정제 공정을 거쳐 제조된 크산토필 조성물의 제조 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 미분화에 의한 입자 크기의 선택 및 선택적 생체-증강제, 용해도 증강제, 항산화제 및 선택적으로 향미제와 함께 비히클로서 적합한 오일의 추가 첨가 및 오일 현탁액의 형태로 크산토필 조성물을 수득하기 위한 혼합을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 비드렛을 제조하기 위해 적어도 하나의 약학적으로 및/또는 기능식품적으로 허용된 부형제와 함께 트랜스-R,R 제아잔틴 및 트랜스-R,R 루테인을 선택적으로 포함하는 크산토필 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 다른 목적은 다양한 눈 및 뇌 건강 응용분야에 사용되어 지도록 R,S 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없고 인간이 섭취하기에 적합한 크산토필 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 하기를 포함하는 크산토필 조성물이 제공된다:

i) 65-85 중량% 범위의 트랜스-R,R 루테인;

ii) 10-30 중량% 범위의 트랜스-R,R 제아잔틴;

iii) 10-80 중량% 범위의 하나 이상의 담체 및/또는 비히클;

iv) 1-10 중량% 범위의 하나 이상의 용해도 증강제;

v) 1-5 중량% 범위의 하나 이상의 향미제;

vi) 1-10 중량% 범위의 하나 이상의 생체이용가능성 증강 작용제; 및

vii) 1 내지 10 중량% 범위의 하나 이상의 항산화제.

여기서 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴은 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 추출되고 4:1 내지 6:1, 바람직하게는 5:1의 비율로 존재하고, 상기 조성물에는 R,S 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없다.

본 발명은 추가로 오일 현탁액 및 비드렛으로 제형의 제조 방법으로 확장된다.

도 1-8에 따르면 제품 A(Micro OS R+)로 지정된 그래프는 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴 조성물로서 판독된다. 참고는 제품 B이다.
도 1은 Micro OS R+ 및 참고에 대한 혈청 트랜스-RR 루테인 농도 대 시간의 기준선 보정된 평균 ± SD의 비교 선형 플롯을 도시한다. 도 1은 투여 후 2 내지 72시간 시점 사이에 Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도가 참고 그룹에 비해 유의하게 더 높았음(P<0.05)을 입증한다.
도 2 및 3은 트랜스-R,R 루테인 약동학적 매개변수 - Cmax, AUC0-72 및 AUC0-T: Micro OS R+ 대 참고를 도시한다. 도 2 및 3은 Micro OS R+ 그룹이 2.5X 배수 Cmax, 2.9X 배수 AUC0-72 및 3.2X 배수 AUC0-T 수준으로부터 명백한 바와 같이 참고 그룹에 비해 트랜스-R,R 루테인에 대해 유의하게 더 높은 흡수를 나타냄을 입증한다.
도 4는 Micro OS R+ 및 참고에 대한 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도 대 시간의 기준선 보정된 평균 ± SD의 비교 선형 플롯을 도시한다. 도 4는 투여 후 4 내지 72시간 시점 사이에 Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도가 참고 그룹에 비해 유의하게 더 높았음(P<0.05)을 입증한다.
도 5 및 도 6은 트랜스-R,R 제아잔틴 약동학적 매개변수 - Cmax, AUC0-72 & AUC0-T: Micro OS R+ 대 참고를 도시한다. 도 5 및 6은 Micro OS R+ 그룹이 1.7X 배수 Cmax 및 2.2X 배수 AUC0-72 & AUC0-T 수준으로부터 명백한 바와 같이 참고 그룹에 비교해 트랜스-R,R 제아잔틴에 대해 유의하게 더 높은 흡수를 나타냄을 입증한다.
도 7은 오일 현탁액의 제조 전 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 입자 크기를 도시한다.
도 8은 오일 현탁액의 제조 후 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 입자 크기를 도시한다.

본 발명은 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴과 같은 선택적 이성질체를 포함하는 크산토필 조성물 및 이의 제조를 위한 공정에 관한 것이다. 본 발명은 구체적으로 80% 초과의 총 크산토필이 포함된 크산토필 조성물에 관한 것으로, 상기 총 크산토필은 추가로 적어도 80 중량%의 트랜스-R,R 루테인 및 적어도 15 중량%의 트랜스-R,R 제아잔틴으로 구성된다. 공정은 2가지 다른 식물 공급원으로부터 수득된 크산토필 에스테르를 함유하는 추출물을 확정된 비율로 혼합하고 추가 처리하여 원하는 백분율로 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴으로 선택적으로 구성된 크산토필 조성물을 얻는 것으로 구성된다. 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물의 생체이용가능성의 증진은 비히클로 선택되는 바람직한 오일에서 선택적 범위의 입자 크기를 얻기 위한 미분화 과정과, 향미제와 선택적 생체-증강 작용제, 용해도 증강제 및 항산화제의 조합된 효과에 기인하여 놀랍게도 기준에 비해 1.5 내지 4배에서 생체이용가능성의 개선을 발휘한다. 4:1 내지 6:1의 특정 비율로 루테인의 트랜스-R,R 이성질체와 제아잔틴의 트랜스-R,R 이성질체로 구성된 이 크산토필 조성물은 약학적으로 또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 및/또는 담체를 사용하여 비드렛, 분말, 오일 현탁액, 과립, 캡슐, 정제, 필름 또는 임의의 다른 적합한 경구, 비경구 또는 국소 투여 형태와 같은 다양한 형태로 추가로 제형화된다. R,S 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없고 인간 섭취에 적합한 크산토필 조성물은 다양한 눈 및 뇌 건강 응용분야에 사용된다.

본 발명의 실시형태에 따르면 식품 등급 용매 및 알칼리, 중화, 단리, 정제 및 그 다음 약학적 및/또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제로의 제형화로 공업적으로 실행가능한 공정 처리를 사용하여 2가지 상이한 식물 공급원의 추출물로부터 제조된 특정 중량 백분율로 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 선택적으로 포함하는 크산토필 조성물은 증진된 생체이용가능성을 초래한다.

본 발명의 맥락 내에서, 용어 '크산토필 조성물'은 2개의 상이한 식물 공급원으로부터 제조되고 식품 등급 용매를 사용함에 의해 정제되어, 조성물이 선택적으로 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴으로 구성되도록 루테인 및 제아잔틴의 선택적 이성질체와 같은 크산토필로 구성된 조성물을 의미한다. 더 중요하게 상기 조성물에는 제아잔틴의 R,S 및 S,S 이성질체가 실질적으로 없다.

본 발명의 주요 실시형태에 따르면, 크산토필 조성물은 적어도 80 중량%의 총 크산토필로 선택적으로 구성되고, 이 중 적어도 65-85 중량%는 트랜스-R,R 루테인이고 적어도 10-30 중량%는 트랜스-R,R 제아잔틴이며 영양 및 건강 관리에 유용하다.

본 발명의 중요한 실시형태에 따르면, 추출에 사용되는 식물 재료는 과일, 꽃 및 채소 예컨대 키위 과일, 포도, 시금치, 오렌지 주스, 주키니(또는 페포호박) 및 다른 종류의 스쿼시, 파프리카, 기타 짙은 녹색 잎 채소, 파슬리, 케일, 난황, 옥수수 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 공급원으로부터 선택될 수 있다. 발명의 실시형태 중 하나에 따라, 조성물의 제조를 위해 선택된 식물 재료는 마리골드 꽃(Tagetes erecta) 및 파프리카의 잡종 종이다. 특히 루테인 에스테르 풍부 추출물은 마리골드 꽃에서 수득되고 제아잔틴 에스테르 풍부 추출물은 특정 파프리카 품종에서 수득된다.

발명의 하나 이상의 실시형태에 따라, 특정 비율의 크산토필 함량을 함유하는 마리골드 꽃이 선택되고 가공되어 펠릿으로 수득되고, 이는 특정 조건 하에서 식품 등급 용매를 사용하여 추출된다. 약 14-17 중량%의 루테인 에스테르를 함유하는 추출물이 추가 처리를 위해 얻어진다.

발명의 하나 이상의 실시형태에 따르면, 약 0.04 - 0.08 중량%의 R,R 제아잔틴 함량을 갖는 신선한 파프리카 과일 꼬투리가 선택되고 특정 수분 수준 및 트랜스-R,R 제아잔틴 함량으로 건조된다. 건조된 칠리(파프리카)를 작은 조각으로 잘라 분말을 얻은 다음, 식품 등급의 용매/들로 처리하여 3-4 중량%의 R,R 제아잔틴 에스테르를 갖는 추출물을 얻는다.

마리골드 꽃(학명-Tagetes erecta, 과-Asteraceae): 멕시코가 원산지인 Tagetes 속의 종이다. 이것은 아시아, 아프리카 및 남미에서 재배된다. 마리골드는 또한 카르나타카 지역, 특히 핫산, 치카망갈루루, 마이소르, 참라즈나가르, 다방게르의 지역에서 재배된다. 추가 처리를 위해 마리골드 꽃은 인도 핫산(카르나타카) 및 캉가얌(타밀나두)에 위치한 공장으로 배송된다. 추출은 트랜스-R,R 루테인과 함께 트랜스-R,R 제아잔틴 이성질체를 특정 중량 백분율로 선택적으로 함유하고 마리골드 꽃의 자연적으로 존재하는 조성물과 명백하게 다르며 따라서 인간 섭취에 안전하고 농후화된 크산토필 풍부 조성물을 제조하기 위해 수동 개입에 의해 수행된다.

본 발명에 사용된 또 다른 공급원은 북아메리카 남부 및 남아메리카 북부에 자생하는 식물 속인 고추(후추) 종인 파프리카(Capsicum annuum)이다. 이 종은 5개 농작물 고추 중에서 가장 흔하고 광범위하게 재배된다. 본 발명의 목적을 위해, 원료는 인도 외부에서 구입하거나 카르나타카에서 Capsicum annuum으로 재배될 수 있다.

크산토필 조성물은 적어도 80 중량%의 총 크산토필로 구성되며, 이 중 적어도 65 중량%는 트랜스-R,R 루테인이고 적어도 10 중량%는 트랜스-R,R 제아잔틴이다.

바람직한 실시형태에 따르면 조성물에는 R,S 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없다.

일 실시형태에서, 크산토필 조성물은 4:1 내지 6:1 비율의 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴으로 구성된다.

일 실시형태에서, 크산토필 조성물은 5:1 비율의 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴으로 구성된다.

일 실시형태에서, 크산토필 조성물은 트랜스-R,R 루테인 10 내지 15mg으로 구성되고 트랜스-R,R 제아잔틴은 2 내지 3mg이다.

일 실시형태에서, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물은 0.1-10 마이크론의 범위이다.

일 실시형태에서, 입자 크기를 갖는 실시예 1에 따라 수득된 오일 현탁액 조성물은 0.1-10 마이크론의 범위이다.

일 실시형태에서, 크산토필 조성물은 참고(제품 B)에 대해 1.5 - 4배의 증가된 생체이용가능성을 포함한다.

본 발명의 또 하나 이상의 실시형태에 따르면, 본 명세서에 기재된 크산토필 조성물은 적어도 하나의 약학적, 기능식품적 또는 식품 등급의 부형제 또는 이의 조합을 사용하여 제형화될 수 있다. 부형제는 생체이용가능성 증강 작용제, 담체/비히클, 과립화제, 불활성 코어, 코팅제, 용매, 희석제, 결합제, 윤활제, 붕해제, 항산화제, 오일, 계면활성제, 가용화제, 유화제, 또는 대상체에게 허용가능한 기호성 투여 형태를 제조하기 위해 필요한 부형제로서 당해 분야의 숙련가에게 알려진 기타 부형제로부터 선택되었다.

본 발명의 추가 실시형태에 따르면, 생체이용가능성 증강 작용제는 나이젤라(블랙 커민 오일), 캐러웨이(카룸 카르비) 오일, 포스파티딜 콜린(레시틴), 나트륨 옥테닐 숙시네이트 전분, 올스파이스 베리, 앰버 에센스, 아니스 시드, 아르니카, 페루의 발삼, 바질, 베이 리프, 벤조인 검, 베르가못, 장미 나무(로즈우드), 카제풋, 카렌듈라(마리골드 포트), 화이트 캠퍼, 캐러웨이 시드, 카다몬, 당근 씨앗, 시더우드, 셀러리, 독일 또는 헝가리 카모마일, 로마 또는 영국 카모마일, 시나몬, 시트로넬라, 클라리 세이지, 클로브버드, 고수풀, 커민, 사이프러스, 유칼립투스, 회향, 시베리아 전나무 바늘, 유향(올리바넘 오일), 마늘, 로즈 제라늄, 생강, 자몽, 우슬초, 재스민 앱솔루트, 호호바, 주니퍼 베리, 라벤더, 레몬, 레몬그라스, 라임, 스위트 마조람, 쑥, 뮬레인 플라워, 몰약 검, 비가라데 네롤리, 육두구, 비터 오렌지, 스위트 오렌지, 오레가노, 패츌리, 페니로열, 블랙 페퍼, 페퍼민트, 쁘띠그레인, 솔잎, 포케 루트, 로즈 앱솔루트, 로즈힙 시드, 로즈마리, 달메이션 세이지, 샌달우드 오일, 사사프라스, 스피어민트, 스피케나드, 스프루스(헴록), 탠저린, 티 트리, 투자(삼나무 잎), 타임, 바닐라 추출물, 베티버트, 윈터그린, 위치 하젤(하마멜리아) 추출물, 또는 일랑(카낭가) 추출물 또는 이의 조합으로부터 선택될 수 있다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 생체이용가능성 증강 작용제는 나이젤라(블랙 커민 오일), 캐러웨이(카룸 카르비) 오일, 포스파티딜 콜린(레시틴)으로부터 선택될 수 있다.

추가 실시형태에 따르면, 생체이용가능성 증강 작용제는 조성물의 1-10 중량% 범위로 존재한다.

추가 실시형태에 따르면, 생체이용가능성 증강 작용제는 조성물의 1-5 중량% 범위로 존재한다.

추가 실시형태에 따르면, 생체이용가능성 증강 작용제는 조성물의 1-3 중량% 범위로 존재한다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 용해도 증강제는 타임 오일, 올리브 오일, 아마씨 오일(flaxseed oil) 또는 이의 혼합물로부터 선택될 수 있다.

추가 실시형태에 따르면, 용해도 증강제는 조성물의 1-10 중량% 범위로 존재한다.

추가 실시형태에 따르면, 용해도 증강제는 조성물의 1-5 중량% 범위로 존재한다.

본 발명의 추가 실시형태에 따르면, 항산화제는 부틸화 하이드록시톨루엔, 부틸화 하이드록시아니솔, 아스코르브산, 아스코르빌 팔미테이트, 아스코르브산나트륨, 혼합된 토코페롤, 알파-토코페롤, 베타-토코페롤, 감마-토코페롤, 델타-토코페롤, 합성 라세미 토코페롤 및 토코페롤 에스테르 또는 이의 조합으로부터 선택될 수 있지만 이에 제한되지 않는다.

추가 실시형태에 따르면, 항산화제의 범위는 조성물의 1-10 중량%이다. 추가 실시형태에 따르면, 항산화제는 조성물의 1-10 중량% 범위로 존재한다. 추가 실시형태에 따르면, 항산화제는 조성물의 1-5 중량% 범위로 존재한다. 추가 실시형태에 따르면, 항산화제는 조성물의 1-3 중량% 범위로 존재한다.

본 발명의 추가 실시형태에 따르면, 담체/비히클은 해바라기유, 코코넛유, 옥수수유, 면실유, 카놀라유, 올리브유, 팜유, 땅콩유, 홍화유, 참기름, 대두유, 평지씨 오일 및 중쇄 트리글리세리드(MCT) 오일 또는 이들의 조합으로부터 선택될 수 있지만 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 추가 실시형태에 따르면, 친수성 담체는 셀룰로오스 예컨대 알킬 셀룰로오스(메틸 셀룰로오스), 하이드록시알킬 셀룰로오스(예를 들어, 하이드록시메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필 셀룰로오스), 카르복시알킬 셀룰로오스(예를 들어, 카르복시메틸 셀룰로오스 및 이의 알칼리 금속 염, 예컨대 나트륨 염), 카르복시알킬알킬 셀룰로오스(예를 들어, 카르복시메틸에틸 셀룰로오스), 카르복시알킬 셀룰로오스 에스테르(예를 들어, 카르복시메틸 셀룰로오스 부티레이트, 카르복시메틸 셀룰로오스 프로피오네이트, 카르복시메틸 셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 및 카르복시메틸 셀룰로오스 아세테이트 프로피오네이트) 또는 이의 조합으로부터 선택될 수 있지만 이에 제한되지 않는다.

폴리아크릴레이트 예컨대 폴리메타크릴레이트, 메타크릴레이트 공중합체(예를 들어, 메타크릴산-메틸 메타크릴레이트 공중합체, 디메틸아미노에틸 메타크릴레이트-부틸 메타크릴레이트-메틸 메타크릴레이트 공중합체, 및 디에틸아미노에틸 메타크릴산-메틸 메타크릴레이트 공중합체) 및 에타크릴레이트 공중합체(예를 들어, 메타크릴산 에타크릴레이트 공중합체) 또는 이의 조합; 포비돈 예컨대 폴리비닐 피롤리돈, 폴리비닐 아세테이트 에스테르(예를 들어, 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트(PVAP) 및 폴리에틸렌 글리콜 폴리비닐아세테이트 공중합체(예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜-폴리비닐카프로락탐-폴리비닐아세테이트 공중합체) 또는 이의 조합.

전분 및 전분 유도체 예컨대 변성 전분, 옥수수 전분, 감자 전분, 전호화 전분, 덱스트린, 산-처리 전분, 알칼리-처리 전분, 표백 전분, 산화 전분, 효소-처리, 인산일전분, 인산이전분, 인산화된 이전분 인산, 아세틸화 이전분 인산, 전분 아세테이트, 아세틸화 이전분 아디페이트, 하이드록시프로필 전분, 하이드록시프로필 이전분 포스페이트, 하이드록시프로필 이전분 글리세롤, 전분 나트륨 옥테닐 숙시네이트, 아세틸화 산화 전분 및 말토덱스트린 또는 이의 조합.

검 예컨대 펙틴 알기네이트, 카라기난 한천, 아라비아 검, 트라가칸트 검, 카라야 검, 가티 검, 구아 검, 로커스트 빈 검, 타라 검, 잔탄 검, 젤란 검 및 웰란 검 또는 이의 조합; 당 예컨대 프럭탄, 수크로스, 글루코스 및 프럭토스 또는 이의 조합.

바람직한 실시형태에 따르면, 담체는 MCT 오일이다. 추가 실시형태에 따르면 MCT 오일은 조성물의 20-80 중량% 범위로 존재한다. 추가 실시형태에 따르면 MCT 오일은 조성물의 50-70 중량% 범위로 존재한다.

바람직한 실시형태에 따르면, 담체는 변성 전분이다. 추가 실시형태에 따르면 전분은 조성물의 10-40 중량% 범위로 존재한다.

추가 실시형태에 따르면, 전분은 조성물의 10-30 중량% 범위로 존재한다. 추가 실시형태에 따르면, 전분은 조성물의 10-20 중량% 범위로 존재한다.

일 실시형태에 따르면, 특정 비율의 루테인 및 제아잔틴의 트랜스 농후화된 트랜스-R,R 이성질체를 포함하는 크산토필 조성물은 약학적으로 또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 및/또는 담체를 사용하여 비드렛, 분말, 오일 현탁액, 과립, 캡슐, 정제, 필름 또는 임의의 다른 적합한 경구, 비경구 또는 국소 투여 형태와 같은 상이한 형태로 추가로 제형화될 수 있으나, 바람직하게는 오일 현탁액 및 비드렛으로 된다.

본 발명의 일 실시형태에 따라, 비드렛의 제작을 위한 공정은 정사각형 챔버에 카로티노이드 에멀젼을 스프레이하고 이를 저온 매트릭스 베드에 포매하는 것으로 구성되며, 여기서 정사각형 챔버는 재킷형 용기를 통한 냉수의 연속적인 회전 및 순환을 제공한다.

본 발명의 일 실시형태에 따라, 카로티노이드 에멀젼의 제조를 위한 공정은 용매상 및 수성상 그리고 2개의 상을 특정 조건에서 교반 하에 혼합하여 에멀젼을 얻는 것으로 구성된다. 본 명세서에 기재된 바와 같은 용매상은 특정 조건에서 유기 용매, 항산화제 및 적어도 하나 이상의 유성 부형제로 구성된 용매상에 활성제를 용해시키고 임의의 불용성 잔류물을 제거하기 위해 여과함에 의해 제조된다. 본 명세서에 기재된 바와 같은 수성상은 친수성 담체 및 항산화제를 물에 용해시킴에 의해 제조된다.

이 발명의 하나 이상의 실시형태에 따라, 용매상은 교반하에 수상에 첨가되어 에멀젼을 얻고 고압 균질화기에서 균질화된다. 이후, 이 균질화된 에멀젼은 용매가 없는 카로티노이드 에멀젼을 얻기 위해 진공 하에서 증발되어 진다.

본 발명의 하나의 중요한 실시형태에 따라, 카로티노이드 비드렛의 제작을 위한 공정은 정사각형 챔버에서 카로티노이드 에멀젼을 스프레이하는 것으로 구성되며, 이는 비드렛을 형성하기 위해 냉각 매트릭스 베드에 포매되고 고화된다.

이 발명의 하나 이상의 실시형태에 따라, 카로티노이드 비드렛의 제작을 위한 공정은 에멀젼의 스프레이 노즐 및 친수성 매트릭스를 위한 2개 유입구를 상부에 제공하는 정사각형 챔버에서 수행된다. 정사각형 챔버는 또한 비드렛 및 미사용 매트릭스 베드를 수집하기 위해 챔버 바닥에 2개 유출구를 갖는다.

이 발명의 하나 이상의 중요한 실시예에 따라, 정사각형 챔버는 내부 온도를 20℃ 미만으로 유지하기 위해 재킷형 용기를 통한 냉수의 순환 뿐만 아니라 연속적인 회전을 제공하다.

본 발명의 주요 실시형태에 따라, 카로티노이드 비드렛의 제작을 위한 공정은 정사각형 챔버의 상부에 있는 하나의 유입구를 통해 매트릭스 베드를 장입하고 순환하는 냉수의 도움으로 그것을 차갑게 유지하는 것으로 구성된다. 에멀젼은 회전하는 정사각형 챔버의 스프레이 노즐을 통해 스프레이되고 액적은 비드렛을 형성하기 위해 차가운 매트릭스 베드의 입자에 포매된다.

상기 공정에 의해 형성된 비드렛은 정사각형 챔버의 바닥에서 유출구를 통해 수집되고 원하는 수분 수준이 얻어질 때까지 건조되어 진다.

본 발명의 하나 이상의 실시형태에 따라, 정사각형 스프레이 챔버에 장입되는 매트릭스 베드는 탈크, 규산, 수소화 지방, 고급 지방산의 금속염 예컨대 스테아르산 칼슘, 알칼리 금속/알칼리 토금속의 규산 알루미늄, 소듐 또는 칼슘 알루미늄 실리케이트, 알루미나, 칼슘 실리케이트, 분말 실리카겔, 탄산 마그네슘 및 산화 마그네슘 또는 이의 조합과 조합한 왁스 변성 옥수수 전분, 전분 및 변성 전분과 같은 전분 유도체로부터 선택되지만 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 따라, 마리골드와 파프리카 올레오레진으로부터 추출함으로써 4:1 내지 6:1의 선택적 비율로 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 수득하는 것으로 구성된 오일 현탁액 형태인 크산토필 조성물의 제조를 위한 공정. 마리골드와 파프리카를 추출하여 얻은 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴은 농축액으로도 지칭되며, 에어 제트 밀을 사용함에 의해 0.1-10마이크론 범위인 입자 크기를 얻는 미분화 과정을 추가로 거친다. 수득된 바람직한 입자 크기를 갖는, 선택된 비율의 미분화된 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴은 실온에서 볼밀을 사용하면서 생체이용가능성 증강 작용제, 용해도 증강제, 항산화제, 담체 오일 및 선택적으로 향미제를 첨가함에 의해 혼합된다. 수득된 오일 현탁액 조성물은 0.1-10마이크론 범위인 입자 크기를 갖는다.

트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 입자 크기는 0.1-10마이크론 범위이다.

담체 오일/비히클, 생체이용가능성 증강 작용제, 용해도 증강제, 안정화제 및 항산화제와 같은 다른 부형제가 볼밀에 첨가된다.

실시예 1에 따라 수득된 오일 현탁액 조성물의 입자 크기는 0.1-10마이크론 범위의 입자 크기를 갖는다.

추가 실시형태에 따라, 증강된 생체이용가능성을 갖는 약학적으로 및/또는 기능식품적으로 허용가능한 부형제 및 크산토필을 포함하는 오일 현탁액 형태인 크산토필 조성물.

이어지는 설명의 시작에서, 뒤따르는 설명은 단지 본 발명의 특정 형태를 예시한다는 것을 이해해야 한다. 그러나, 이러한 특정한 형태는 단지 예시적인 실시형태이고, 본 발명의 범주에 대한 임의의 제한을 의미하기 위해 제한적으로 해석되지 않는다.

실시예 01:

바람직한 실시형태에 따르면 본 발명자들은 공정에서 산업적 실행가능성을 뒷받침하기 위해 소규모에서 대규모까지 다양한 크기의 배치(batch)를 수행했다.

오일 현탁액 조성물 제조; 배치 크기 500g

16.6% 크산토필 함량(분광광도법에 의함) 및 13.6 루테인 함량(HPLC 법에 의함)을 함유하는 마리골드 올레오레진(33.5kg)의 중량 양. 5.7% 크산토필 함량(분광광도법에 의함) 및 3.5% 제아잔틴 함량(HPLC 법에 의함)을 함유하는 파프리카 올레오레진(16.5kg).

각각의 올레오레진을 알코올성 알칼리 수용액(물 15리터 및 에탄올 62.5리터 중 수산화칼륨 10kg)과 함께 반응기에 첨가하였다. 혼합물을 반응기에서 교반하면서 80℃에서 4시간 동안 가열하였다. 가수분해의 정도는 반응 동안 HPLC에 의해 모니터링하였고 반응은 물 250 리터를 첨가하여 종결시켰다. 반응물을 실온에서 균질화하고 액체-액체 추출용 반응기에 에틸 아세테이트(300리터)를 첨가하고 이 과정을 3-5회 반복한다. EA 층을 분리하고 실온에서 물(1:1)로 세정하였다. 물로 세정한 에틸 아세테이트를 추가로 농축하여 농축된 물질을 얻었다. 농축된 물질을 헥산을 사용하여 단리하여 불순물 제거를 하고 크산토필 조성의 반-정제된 결정(22.5kg)을 얻었다. 수득된 반-정제된 결정을 실온에서 에탄올 5 부피로 정제한 후 여과하였다(7.8 kg). 생성된 결정을 약 50 내지 55℃의 온도에서 36시간 동안 진공 건조하였다. 건조된 크산토필 결정의 수율은 9.6kg(9.6%)이었다. 크산토필 함량은 87.2 중량%(UV/가시광선-분광광도법)였으며, 이 중에서 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 함량은 70.3% 및 14.4%였고, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 면적%는 정상(normal phase) HPLC 분석에 의해 결정될 때 각각 80.6%, 및 16.5%였다.

87.2% 크산토필 함량(분광광도법에 의함)을 함유하는 수득된 농축물(2.5kg)을 미분화를 위해 취하였다. 입자 크기(DV90) 1690μm를 함유한 마리골드 파프리카 추출 농축물의 미분화를 에어 제트 밀을 이용하여 미분화하였다. 생성된 미분화된 결정(2.2kg)은 (DV90) 3.24μm를 함유하고(도 8) 크산토필 함량은 89.09 중량%(UV/가시광선-분광광도법)이며, 이 중에서 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 함량은 71.62% 및 14.75%였고, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 면적%는 정상 HPLC 분석에 의해 결정될 때 각각 80.39%, 및 16.56%였다.

87.2% 크산토필 함량(분광광도법 및 HPLC 법에 의함)을 함유하는 미분화된 마리골드 파프리카 추출 농축물(170g)을 사용하여 오일 현탁액으로서 제형을 제조하였다. 미분된 마리골드 파프리카 추출 농축물은 실온에서 볼밀을 사용함에 의해 올리브 오일, 타임 오일, 아마씨 오일(flaxseed oil), D-리모넨, 레시틴(포스파티딜콜린)(해바라기에서 얻음), 혼합 토코페롤과 같은 14%(70g) 다른 성분과 오일(260g) 중쇄 트리글리세리드(MCT)를 첨가함에 의해 혼합되었다. 혼합물을 체질하고 언로딩(500g)하여 입자 크기 (DV90) 2.66μm를 함유하는 것으로 분석되었고(도 7) 크산토필 함량은 28.05 중량%(UV/가시광선-분광광도법)이며 이 중 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 함량은 22.64% 및 4.63%였고, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 면적%는 정상 HPLC 분석에 의해 결정될 때 각각 80.72% 및 16.49%였다.

실시예 02:

오일 현탁액 제조; 배치 크기 18kg

80.97% 크산토필 함량(분광광도법 및 HPLC 법에 의함)을 함유하는 미분화된 마리골드 파프리카 추출 농축물(6.28kg)의 계량된 양을 사용하여 제형을 오일 현탁액으로 제조하였다. 미분된 마리골드 파프리카 추출 농축물은 실온에서 볼밀을 사용함에 의해 올리브 오일, 타임 오일, 아마씨 오일(flaxseed oil), D-리모넨, 레시틴(포스파티딜콜린)(해바라기에서 얻음), 혼합 토코페롤과 같은 14%(2.52kg) 다른 성분과 오일(9.2kg) 중쇄 트리글리세리드(MCT)를 첨가함에 의해 혼합되었다. 혼합물을 체질하고 언로딩(18kg)하여 입자 크기(DV90) 2.62μm를 함유하는 것으로 분석되었고 크산토필 함량은 28.23 중량%(UV/가시광선-분광광도법)이며, 이 중 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 함량은 22.6% 및 4.71%였고, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 면적%는 정상 HPLC 분석에 의해 결정될 때 각각 80.16%, 및 16.68%였다.

실시예 03:

비드렛 제조(15%); 배치 크기 24.2kg

절차:

A. 미분화된 마리골드 파프리카 추출 농축물을 메틸렌 디클로라이드에 용해시키고 이어서 교반 하에 토코페롤을 첨가하였다. 용액이 투명해질 때까지 40-45℃에서 30분 동안 가온하고 실온으로 추가로 냉각시켰다. 용액을 여과하여 투명한 갈색을 띤 색상의 용액을 얻었다.

B. 변성 전분을 물에 용해하고 교반 하에서 투명 용액으로 될 때까지 최대 50-55℃로 가온한다. 수성 시스템을 실온으로 냉각한다.

C. 단계 A 용액을 교반 하에서 단계 B 용액에 혼합하고, 이 혼합물에 아스코르브산나트륨을 첨가하였다.

D. 단계 C 용액을 15,000-20,000rpm에서 5분 간격으로 균질화했다.

E. 단계 D 용액을 회전식 증발기에 첨가하고 수조에서 60℃에서 진공 하에서 4rpm으로 회전시키면서 메틸렌 디클로라이드를 제거하고 실온으로 냉각시켰다.

F. 초기에 105℃에서 4시간 동안 건조된 3.5kg 전분을 스프레이 팬 안으로 첨가하고 드라이아이스를 챔버에 첨가하여 온도를 2℃로 낮추었다. 유동화 하에서 건조 전분 상에 단계 E 용액의 스프레이를 시작하였다.

G. 코팅된 반상 카로티노이드 비드렛은 단계 F 물질을 체질함에 의해 수집하였고 비드렛을 35℃-40℃의 트레이 오븐으로 건조시키고 건조된 비드렛을 메쉬 60 & 40 체를 통해 체질했다.

실시예 04:

비드렛 제조(20%); 배치 크기 31.7kg

절차:

A. 미분화된 마리골드 파프리카 추출 농축물을 디클로로메탄에 용해시키고 이어서 교반 하에 토코페롤을 첨가하였다.

용액이 투명해질 때까지 40-45℃에서 30분 동안 용액을 가온하고 실온으로 추가로 냉각시켰다. 용액을 여과하여 투명한 갈색을 띤 색상의 용액을 얻었다.

C. 단계 A 용액을 교반 하에서 단계 B 용액에 혼합하고, 아스코르브산나트륨을 혼합물에 첨가하였다.

D. 단계 C 용액을 15,000-20,000rpm에서 5분 간격으로 균질화했다.

실시예 05:

비드렛 제조(10%); 배치 크기 19.5kg

절차:

A. 변성 전분 & 아스코르브산나트륨 결합제를 따뜻한 물(50-55℃)에 교반 하에서 분산시켜 투명한 용액을 형성한다.

B. 교반 하에서 단계 A 분산액에 농축-미분화된 마리골드 파프리카 추출물 및 토코페롤을 첨가하여 15분 동안 용액을 형성하였다.

C. 단계 B 용액을 5000 내지 12000RPM에서 15분 동안 결합제 용액 안으로 케이크의 균일한 혼합을 위해 폴리트론 고전단 교반기 하에서 처리하고 용액의 온도와 유동성을 관찰했다.

D. 단계 C 용액을 수평 분쇄기 주입구 안으로 추가하고 다음 공정 매개변수를 사용하여 용액의 크기 감소 및 적절한 유화를 위한 반복된 통과를 위해 처리했다.

E. ATFE 통과 후, 원하는 공정 매개변수에서 유동화된 전분 N 200에 용액을 포획하였다.

F. 5% 미만의 LOD를 달성하기 위해 55℃에서 오븐에서 비드렛을 건조하였다.

오일 현탁액의 형태인 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 크산토필 조성물에 대한 생체이용가능성 연구 설계가 하기 연구 1과 같이 수행되었다:

연구 1:

이해의 편의를 위해, 제품 A에 대한 샘플 명명법은 Micro OS R+이고 제품 B는 참고 샘플이다. 부가하여, 루테인과 제아잔틴이 언급되는 예에서 그것은 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴으로 간주되어야 한다.

목적:

건강한 성인 대상체에서 섭식 상태 하에 제품 B(참고) 제형(캡슐당 트랜스-R,R 루테인 10mg 및 트랜스-R,R 제아잔틴 2mg) 보충제와 제품 A(Micro OS R +)로 단일 경구 용량(오일 현탁액)으로부터 트랜스-R,R 루테인 10mg과 트랜스-R,R 제아잔틴 2mg의 생체이용가능성을 비교하기 위함. 제품 B는 시판 제품 Florglo®(트랜스-R,R 루테인) 및 Optisharp™(트랜스-R,R 제아잔틴)이다.

연구 설계: 이중 맹검, 균형, 무작위, 2회-치료, 단일-기간, 단일-용량, 병렬 연구

준비:

Micro OS R+ 샘플: 5:1 비율로 실시예 01에 따라 준비됨

제품 B: 시판 제품 Florglo 및 Optisharp(FloraGLO® 루테인 20% SAF 및 OPTISHARP™ 천연(제아잔틴) 14% 잇꽃 오일이 계산되고 혼합되어 캡슐당 트랜스-R,R 루테인 10mg 및 트랜스- R,R 제아잔틴 2mg인 5:1 비율로 유지됨).

지원자의 수: 건강한 지원자 90명 (그룹당 지원자 45명)

지원자 수용: 최소량의 루테인 및 제아잔틴으로 식단에 대해 조절하기 위해 연구 전후 7일 수용

약동학(PK) 평가:

트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 기준선 보정된 혈청 농도를 서로 다른 시점에 측정했다:

시점(시): -48, -24, 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20, 24, 48 및 72시간

ㆍ 약동학 매개변수(Ln(Cmax), Ln(AUC0-72), Ln(AUC0-T 및 Tmax))

ㆍ 90% CI, T/R 비율

생물학적분석 절차:

루테인 및 제아잔틴(트랜스-R,R 루테인을 포함하는 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 포함하는 제아잔틴)은 검증된 HPLC 방법을 사용하여 혈청에서 추정되었다.

트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴에 대한 결과

제품 A(Micro OS R+) 및 제품 B(참고)에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도

^* P 값 <0.05

ㆍ Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도는 투여 후 모든-시점(2 내지 72시간)에서 참고 그룹에 비해 유의하게 더 높았다(P<0.05). (도 1)

ㆍ Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도는 참고 그룹과 비교하여 모든 시점에서 2배 초과로 더 높은 흡수율과 Tmax(20시간)에서 3배 더 높은 흡수율을 보여주었다.

트랜스-R,R 루테인에 대한 기준선 보정된 약동학 매개변수

$ 중앙값(최소-최대)

^* P 값 <0.05

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 유의하게 더 높은(P<0.05) 기준선 보정된 로그 변환된 Cmax, AUC0-72 및 AUC0-T로부터 명백한 바와 같이 참고 그룹에 비해 트랜스-R,R 루테인에 대해 유의하게 더 높은 흡수를 나타냈다.

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 20시간에 가장 높은 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도(Tmax)에 도달한 반면, 참고 그룹은 16시간에 가장 높은 혈청 트랜스-R,R 루테인 농도에 도달했다.

ㆍ Cmax 및 AUC 매개변수에 대한 90% 신뢰 구간은 80-125% 생물학적동등성 기준보다 유의하게 더 높았으며 이는 Micro OS R+ 그룹의 생체이용가능성이 참고 그룹에 비해 유의하게 우수함을 입증한다.

기준선 보정된 트랜스-R,R 루테인 PK 매개변수에 대한 참고와 비교한 테스트의 배수.

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 2.5X 배수 Cmax, 2.9X 배수 AUC0-72 및 3.2X 배수 AUC0-T 수준에서 명백한 바와 같이 참고 그룹과 비교하여 트랜스-R,R 루테인에 대해 유의하게 더 높은 흡수를 나타냈다(도 2 및 도 3).

트랜스-R,R 제아잔틴에 대한 결과

제품 A(Micro OS R+) 및 제품 B(참고)에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도

^* P 값 <0.05

ㆍ Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도는 투여 후 4 내지 72시간 시점 사이에 참고 그룹에 비해 유의하게 더 높았다(P<0.05). (도 4)

ㆍ Micro OS R+ 그룹에 대한 기준선 보정된 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도는 참고 그룹에 비해 모든 시점에서 1.5X 배수 초과의 더 높은 흡수율 및 Tmax(20시간)에서 2.9X 배수 더 높은 흡수율을 보였다.

트랜스-R,R 제아잔틴에 대한 기준선 보정된 약동학 매개변수

$ 중앙값(최소 - 최대)

^* P 값 <0.05

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 유의하게 더 높은(P<0.05) 기준선 보정된 Log 변환된 Cmax, AUC0-72 및 AUC0-T로부터 명백한 바와 같이 참고 그룹과 비교하여 트랜스-R,R 제아잔틴에 대해 유의하게 더 높은 흡수율을 보였다.

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 20시간에 가장 높은 혈청 트랜스-R,R 제아잔틴 농도(Tmax)에 도달한 반면, 참고 그룹은 24시간에 가장 높은 혈청 농도에 도달했다.

ㆍ Cmax 및 모든 AUC 매개변수에 대한 90% 신뢰 구간은 80-125% 생물학적 동등성 기준보다 유의하게 높았으며 이는 Micro OS R+ 그룹으로부터의 트랜스-R,R 제아잔틴이 참고 그룹에 비해 유의하게 우수한 생체이용가능성을 입증한다.

기준선 보정된 트랜스-R,R 제아잔틴 PK 매개변수에 대한 참고와 비교한 테스트의 배수.

ㆍ Micro OS R+ 그룹은 1.7X 배수 Cmax 및 2.2X 배수 AUC0-72 & AUC0-T 수준으로부터 명백한 바와 같이 참고 그룹과 비교하여 트랜스-R,R 제아잔틴에 대해 유의하게 더 높은 흡수율을 보였다.

오일 현탁액(Micro OS R+, 제품 A) 조성물에 대한 연구의 결론:

Micro OS R+(제품 A) 조성물은 투여 후 측정된 다중 시점에서 더 높은 혈청 농도를 달성하는 관점에서 참고(제품 B) 조성물과 비교했을 때 2.9 내지 3.2 배수의 범위에서 트랜스-R,R 루테인 및 2.2 배수에서 트랜스-R,R 제아잔틴에 대해 유의하게 더 높은 흡수율을 나타내었고; 더 높은 흡수율, Cmax 및 모든 AUC 매개변수에 대한 90% 신뢰 구간은 80-125% 생물학적 동등성 기준보다 유의하게 더 높았으며 이는 참고 그룹에 비해 Micro OS R+ 그룹의 유의하게 우수한 생체이용가능성을 입증하다.

약어:

용어 의미

Cmax 혈청 내 연구 제품의 최고 농도

AUC0-72 시간 0부터 72시간까지, 혈청 농도 대 시간 곡선 아래의 면적

AUC0-t 시간 0부터 마지막 측정가능한 농도까지, 혈청 농도 대 시간 곡선 아래의 면적

Tmax 시험용 제품이 혈청 내 최대 농도로 존재하는 시간의 양

Claims

a) 65-85 중량% 범위의 트랜스-R,R 루테인;
b) 10-30 중량% 범위의 트랜스-R,R 제아잔틴;
c) 20-80 중량% 범위의 하나 이상의 담체 및/또는 비히클;
d) 1-10 중량% 범위의 하나 이상의 용해도 증강제;
e) 선택적으로 1-5 중량% 범위의 하나 이상의 향미제;
f) 1-10 중량% 범위의 하나 이상의 생체이용가능성 증강 작용제; 및
g) 1-10 중량% 범위의 하나 이상의 항산화제를 포함하고,
여기서 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴은 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 추출되고 4:1 내지 6:1의 비율로 존재하고 상기 조성물에는 R,S 제아잔틴 및 S,S 제아잔틴이 실질적으로 없는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴의 입자 크기는 0.1-10 마이크론의 범위인, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 담체 및/또는 비히클은 중쇄 트리글리세리드(MCT) 오일, 해바라기유, 코코넛유, 옥수수유, 면실유, 카놀라유, 팜유, 땅콩유, 홍화유, 참기름, 대두유, 평지씨 오일 및 중쇄 트리글리세리드 또는 이의 조합, 바람직하게는 MCT 오일로부터 선택되는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 용해도 증강제는 타임 오일, 올리브 오일, 아마씨 오일(flaxseed oil) 또는 이의 혼합물로부터 선택되는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 생체이용가능성 증강 작용제는 나이젤라(블랙 커민 오일), 캐러웨이(카룸 카르비) 오일, 포스파티딜 콜린(레시틴) 또는 이의 혼합물로부터 선택되는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 항산화제는 토코페롤 및 아스코르브산나트륨 또는 이의 혼합물로부터 선택되는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 수득된 조성물의 입자 크기는 0.1-10 마이크론의 범위인, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 조성물은 참고(reference)에 비해 1.5-4 배수의 증가된 생체이용가능성을 갖는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 조성물은 참고에 비해 2-4 배수의 증가된 혈청 농도를 갖는, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 제형은 비드렛, 분말, 오일 현탁액, 과립, 캡슐, 정제, 필름의 형태인, 크산토필 조성물.
제1항에 있어서, 조성물은 오일 현탁액 형태인, 크산토필 조성물.
제10항에 있어서, 오일 현탁액은 하기 단계를 포함함에 의해 제조되는, 크산토필 조성물:
a) 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 4:1 내지 6:1의 선택적 비율로 제1항에 청구된 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 수득하는 단계;
b) 단계 (a)로부터의 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 에어 제트 밀을 사용함에 의해 미분화하여 0.1-10 마이크론의 범위인 입자 크기를 수득하는 단계;
c) 단계 (b)에서 수득된 미분화된 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 담체 및/또는 비히클과 혼합하는 단계;
d) 향미제와 함께 용해도 증강제를 단계 (c)에 첨가하는 단계;
e) 생체이용가능성 증강 작용제 및 항산화제를 단계 (d)에 첨가하는 단계;
f) 볼 밀을 사용하여 단계 (e)에서 수득된 현탁액을 혼합하여 균질한 오일 현탁액을 얻는 단계; 및
g) 단계 (f)에서 수득된 혼합물을 체질하여 결과적인 오일 현탁액의 입자 크기를 얻는 단계.
제10항에 있어서, 비드렛은 하기 단계를 포함함에 의해 제조되는, 크산토필 조성물:
a) 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 4:1 내지 6:1의 선택적 비율로 제1항에 청구된 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 수득하는 단계;
b) 단계 (a)로부터의 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 에어 제트 밀을 사용함에 의해 미분화하여 0.1-10 마이크론의 범위인 입자 크기를 수득하는 단계;
c) 미분화된 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 메틸렌 디클로라이드에 용해시키고 이어서 항산화제 및 선택적으로 생체이용가능성 증강 작용제를 용해시키고; 가온하고 이어서 용액을 냉각시키고 여과하여 투명한 갈색을 띤 색상의 용액을 얻는 단계;
d) 변성 전분을 물에 용해시키고 투명한 용액이 될 때까지 가온하고 실온으로 냉각시키는 단계;
e) 교반 하에서 단계 (c) 용액을 단계 (d) 용액에 혼합하고 균질화 하에서 혼합물에 아스코르브산나트륨을 첨가하는 단계;
f) 단계 (e) 용액을 회전 증발기에 첨가하여 진공 하에서 메틸렌 디클로라이드를 제거하고 냉각시키는 단계;
g) 유동화 하에서 건조 전분 상으로 단계 (f) 용액을 스프레이하는 단계; 및
h) 코팅된 황반 카로티노이드 비드렛을 수집하고 건조시키는 단계.
제10항에 있어서, 비드렛은 하기 단계를 포함함에 의해 제조되는, 크산토필 조성물:
a) 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 4:1 내지 6:1의 선택적 비율로 제1항에 청구된 마리골드 및 파프리카 올레오레진으로부터 수득하는 단계;
b) 단계 (a)로부터의 트랜스-R,R 루테인 및 트랜스-R,R 제아잔틴을 에어 제트 밀을 사용함에 의해 미분화하여 0.1-10 마이크론의 범위인 입자 크기를 수득하는 단계;
c) 변성 전분 및 아스코르브산나트륨을 따뜻한 물에 분산시켜 투명한 용액을 형성하는 단계;
d) 미분화된 토코페롤을 단계 (c) 분산액에 첨가하는 단계; 및
e) 균일한 혼합을 위한 폴리트론 고전단 교반기 하에서 가공하고 크기 감소를 위해 수평 분쇄기에 통과시키는 단계.
제1항, 제12(a)항, 제13(a)항 및 제14(a)항에 있어서, 트랜스-R,R 루테인과 트랜스-R,R 제아잔틴의 비율은 5:1인, 크산토필 조성물.