KR20220074438A - 볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법 - Google Patents
볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 (1) 밀가루를 증자하고 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 밀가루 혼합물을 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지에 소금, 물 및 볶음 콩가루를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 소맥 황국균 발효물 및 상기 소맥 황국균 발효물을 이용하여 제조된 장류에 관한 것이다.
Description
본 발명은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 이용하여 제조된 소맥 황국균 발효물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 소맥 황국균 발효물 및 상기 소맥 황국균 발효물을 이용하여 제조된 장류에 관한 것이다.
된장은 제조방식에 따라 약간의 차이는 있으나 일반적으로 대두를 삶아 찧고, 성형한 다음 자연 상태에서 미생물들이 착생, 번식하도록 한 메주를 소금물에 담군 후 일정기간 동안 발효 숙성시켜 가정에서 제조하는 재래식 된장과, 공장에서 대두와 밀가루 등에 아스퍼질러스 오리재를 접종, 배양하여 코지(koji)를 만들어 제조하는 개량식 된장이 있다. 그러나, 기존의 재래식 된장 제조방법은 메주의 제조방법이 까다롭고 자동화 내지 반자동화가 어려워 노동집약적 비효율성을 감수해야 하며, 또한 메주의 염수 침지 시간이 지나치게 길어 제조 원가상승 요인이 될 소지가 많은 반면에 개량식의 경우 제조시간 단축, 공정의 자동화 내지 반자동화가 가능한 이점은 있으나 전통적 풍미와 특성을 가진 된장으로는 미흡하여 이들의 절충적 방법에 의한 된장의 제조가 선호되고 있는 실정이다.
개량식 장류라 불리는 공장식 장류의 제조는 소맥분에 황국곰팡이(Aspegillus oryza)를 배양하여 제조된 코지(koji)로 콩과 함께 담금하여 제조하고 설비의 기계화로 대량생산이 가능하다. 하지만 사용하는 종균은 일본식 종균에 한정되어 있으며, 맛과 풍미는 단순화되고 획일화되었다. 최근 개량식 된장의 맛과 풍미를 개선하고자 코지와 메주를 혼합 이용하여 전통 풍미를 지닌 개량된장을 제조하고 있으나 업체별, 제품 종류별 품질 차이가 있으며 품질 특성으로는 전통된장과 일본식 된장의 중간 형태를 띠고 있다. 된장 숙성 과정 중의 맛, 향, 색 등의 품질특성은 메주나 코지 제조에 사용하는 균주, 이들의 제조방법에 따라 많은 차이가 있으므로 우수한 품질의 된장을 제조하기 위해서는 우량 균주의 사용이 필요하다.
한국등록특허 제1254057호에는 아스퍼질러스 속 균주를 이용한 발효된장이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2016-0079388호에는 개량식 한식메주를 이용한 된장의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명자는 소맥으로부터 고부가가치 기능성 식품소재를 생산하기 위해, 증자한 밀가루에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주와 볶음 콩가루를 이용하여 발효시킨 소맥 혼합물은 탄수화물분해활성도가 높고 아미노태 질소 및 유리아미노산 함량이 높은 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 밀가루를 증자하고 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 밀가루 혼합물을 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지에 소금, 물 및 볶음 콩가루를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 소맥 황국균 발효물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 소맥 황국균 발효물을 이용하여 제조된 장류를 제공한다.
본 발명에서 사용한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주는 탄수화물분해활성이 뛰어나, 된장 발효과정에서 중요한 효소인 프로테아제 및 아밀라아제의 생산 능력이 높고, 리파아제 활성을 지니면서 발암물질인 아플라톡신을 생산하지 않는 균주로, 상기 특정 균주를 이용하여 특정 제조조건으로 제조한 본 발명의 소맥 발효물은 아미노태 질소 및 유리아미노산 함량이 높고, 저염이면서 안정적인 pH와 색상을 나타내어, 고품질의 장류 제조에 적합한 발효물을 제공할 수 있다.
도 1은 수분 함량을 달리하여 제조한 소맥 코지를 비교한 사진이다.
도 2는 발효 온도를 달리하여 제조한 소맥 코지를 비교한 사진이다.
도 3은 발효 시간을 달리하여 제조한 소맥 코지를 비교한 사진이다.
도 4는 염 농도를 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 5는 발효 온도를 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 6은 발효 시간을 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 7은 볶음 콩가루 첨가 유무에 따른 발효물을 비교한 사진이다.
도 2는 발효 온도를 달리하여 제조한 소맥 코지를 비교한 사진이다.
도 3은 발효 시간을 달리하여 제조한 소맥 코지를 비교한 사진이다.
도 4는 염 농도를 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 5는 발효 온도를 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 6은 발효 시간을 달리하여 제조한 발효물을 비교한 사진이다.
도 7은 볶음 콩가루 첨가 유무에 따른 발효물을 비교한 사진이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 밀가루를 증자하고 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 밀가루 혼합물을 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지에 소금, 물 및 볶음 콩가루를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 소맥 황국균 발효물의 제조방법에서, 상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)로, 한국미생물보존센터에 2020년 10월 15일자로 기탁하였다. 상기 기탁된 특정 균주는 탄수화물분해활성이 뛰어나고, 된장 발효과정에서 중요한 효소인 프로테아제 및 아밀라아제의 생산 능력이 높고, 리파아제 활성을 지니면서 발암물질인 아플라톡신을 생산하지 않는 균주로, 한국미생물보존센터에 2020년 10월 15일자로 기탁하였다(기탁번호: KCCM12804P). 상기 균주를 사용하여 소맥 발효물을 제조할 경우 아미노태질소 및 유리아미노산 함량이 높아 고품질의 장류제조에 적합한 발효물로 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 소맥 황국균 발효물의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 소맥 코지는 바람직하게는 밀가루를 110~130℃에서 15~25분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 38~42%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 접종한 밀가루 혼합물을 28~32℃에서 44~52시간 동안 발효하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 밀가루를 121℃에서 20분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 40%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 접종한 밀가루 혼합물을 30℃에서 48시간 동안 발효하여 제조할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 발효하여 소맥 코지를 제조하는 것이 균주의 번식이 용이하면서 탄수화물분해활성도가 우수한 소맥 코지로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 소맥 황국균 발효물의 제조방법에서, 상기 (2)단계의 소맥 코지 혼합물은 바람직하게는 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 소맥 코지 43~47 중량%, 소금 4~6 중량%, 물 38~42 중량% 및 볶음 콩가루 9~11 중량%를 혼합하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 소맥 코지 45 중량%, 소금 5 중량%, 물 40 중량% 및 볶음 콩가루 10 중량%를 혼합하여 제조할 수 있다. 상기와 같은 비율로 재료들을 혼합하는 것이 안정적인 pH를 나타내면서 아미노태 질소 함량이 높고, 긍정적인 맛을 주는 특정 유리아미노산 함량이 높은 발효물 제조에 적합한 소맥 코지 혼합물로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 소맥 황국균 발효물의 제조방법에서, 상기 (3)단계의 발효는 바람직하게는 43~47℃에서 4~6일 동안 발효할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 45℃에서 5일 동안 발효할 수 있다. 상기와 같은 조건으로 발효하는 것이 물성과 색상이 우수하고 아미노태 질소 함량이 높은 조건으로 발효할 수 있었다.
본 발명의 소맥 황국균 발효물의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(1) 밀가루를 110~130℃에서 15~25분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 38~42%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 접종한 밀가루 혼합물을 28~32℃에서 44~52시간 동안 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계;
(2) 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지 43~47 중량%, 소금 4~6 중량%, 물 38~42 중량% 및 볶음 콩가루 9~11 중량%를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 43~47℃에서 4~6일 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 밀가루를 121℃에서 20분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 40%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 접종한 밀가루 혼합물을 30℃에서 48시간 동안 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계;
(2) 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지 45 중량%, 소금 5 중량%, 물 40 중량% 및 볶음 콩가루 10 중량%를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 45℃에서 5일 동안 발효하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 소맥 황국균 발효물을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 소맥 황국균 발효물을 이용하여 제조된 장류를 제공한다. 본 발명의 상기 장류는 간장, 된장, 쌈장, 청국장 또는 고추장 등일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 소맥 황국균 발효물은 상기 장류 외에, 장류 기반의 다양한 발효소스 제조에도 이용될 수 있다. 상기 발효소스는 이에 한정되지는 않으나, 고기소스, 비빔소스 또는 무침소스 등일 수 있다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 소맥 황국균 발효물 제조
(1) 밀가루를 121℃에서 20분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 40%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 증자 전 밀가루 무게의 0.1%(v/w) 비율로 접종한 밀가루 혼합물을 30℃ 온도 및 80% 습도에서 2일 동안 발효하여 소맥 코지를 제조하였다.
(2) 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지 45.1 중량%, 정제염 5 중량%, 정제수 39.9 중량% 및 볶음 콩가루 10 중량%를 혼합하여 염도를 5%로 맞춰 소맥 코지 혼합물을 제조하였다.
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 45℃에서 5일 동안 발효하였다.
제조예 2. 소맥 황국균 발효물을 이용한 된장
(1) 대두에 물을 첨가하여 12시간 동안 침지하고 물을 뺀 후 121℃에서 30분 동안 증자하고, 바실러스 아밀로리퀴페시언스(Bacillus amyloliquefaciens) 균주를 접종하여 40℃에서 3일 동안 발효하였다. 상기 발효한 발효물에 소금을 11%의 염 농도가 되도록 첨가한 후 40℃에서 14일 동안 발효하여 대두 발효물을 제조하였다.
(2) 상기 (1)단계의 제조한 대두 발효물에 상기 제조예 1의 제조한 소맥 황국균 발효물을 1:1 중량비율로 혼합한 후 30℃에서 7-14일 동안 숙성시켰다.
1. 연구재료 및 연구방법
가) 재료
대두는 국내산(전북 순창군) 대두를 사용하였으며, 볶음콩가루는 외주를 통해 전처리과정을 거친 후 사용하였다. 천일염은 신안산을 사용하였으며 밀은 국내산을 사용하였다. 여기에 보존성을 높이기 위해 식품용 발효주정을 구입하여 사용하였으며 이외 배합용 원부재료는 해당업체에서 구입하여 사용하였다.
본 실험에 사용한 장류용 발효 균주로써 (재)발효미생물산업진흥원으로부터 당해연도 연구를 통해 최종 선정된 곰팡이인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주를 분양받아 사용하였다.
나) 실험방법
(1) 선발미생물의 최적 코지 제조
본 제국에 사용한 탄수화물원으로는 밀을 사용하였으며, (재)발효미생물산업진흥원으로부터 분양받은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종하고 발효조건별(수분함량, 발효온도, 발효시간) 탄수화물분해활성도(α-Amylase activity)를 분석하여 효소활성을 고함량 획득하기 위한 원형제국기 고체발효조건을 확립하고자 하였다. 이후 탄수화물분해활성도가 가장 높은 최적의 조건을 선정하여 소맥 코지를 제조하였다. 여기에 종균을 접종하지 않은 증자된 밀가루('C1')와 시판 황국균으로 접종한 코지('C2')와의 비교를 통해 탄수화물분해활성도가 가장 높은 발효조건을 선정하였다.
(2) 종균을 활용한 저염발효물 제조
저염발효물에 사용하기 위해 탄수화물분해활성도가 가장 높은 조건으로 제국한 소맥 코지를 염수에 투입한 후 각 발효조건별(염농도, 발효온도, 발효시간) pH, 아미노태질소 함량, 수분, 염도, L값, 유리아미노산을 분석하여 저염발효물의 발효조건을 확립하였다.
(3) 수분함량 및 pH 측정
수분함량은 시료를 믹서기로 마쇄 후 적외선 수분측정기(FD-720, Kett Co., Japan)를 이용하여 측정하였고, pH는 시료 무게 5 g을 취하고 증류수를 45 mL에 희석하여 진탕시킨 후 pH 미터(Mettler Toledo Gmbh, Switzerland)를 이용하여 측정하였다.
(4) 탄수화물분해활성도(α-Amylase) 측정
소맥 코지의 품질지표로써 탄수화물분해활성도(α-Amylase)를 현장에서의 품질지표화로 사용하고 있다. α-아밀라아제 활성은 30분간 10 mg의 전분을 분해시켰을 때를 1U(unit)으로 하여 1 g으로 환산하였다. 검체 약 1 g을 정밀히 달아 증류수에 녹여 1000 mL로 정용한 다음 여과하여 검액으로 하고 1.0% 전분용액을 기질용액으로 사용하였다. 효소시험용 시험관에는 1.0% 기질용액 5 mL와 초산염완충액(pH 5.0) 3 mL, 0.1% CaCl2 1 mL를 첨가하고 항온수조(37℃)에서 10분간 예열 후 검액 1 mL를 첨가하였고 효소공시험용으로 다른 시험관에 1.0% 기질용액 5 mL와 초산염완충액(pH 5.0) 3 mL, 0.1% CaCl2 1 mL를 첨가하고 항온수조(37℃)에서 10분간 예열 후 미리 121℃에서 15분 가열처리한 검액 1 mL를 첨가하였다. 또 효소표준용액용 시험관에 1.0% 기질용액 5 mL와 초산염완충액(pH 5.0) 3 mL, 0.1% CaCl2 1 mL를 첨가하고 항온수조(37℃)에서 10분간 예열 후 증류수 1 mL를 첨가하였다. 각 시험관을 잘 흔든 후 정확히 30분간 항온수조(37℃) 내에서 반응시켰다. 반응완료 후 즉시 얼음물로 냉각시키고 시험관에 반응액 0.2 mL를 취하고 0.00025N I2 용액 10 mL를 첨가한 후 660 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.
(5) 아미노태 질소(amino-type nitrogen) 측정
아미노태 질소는 Formol법으로 측정하였다. 시료 1 g을 비커에 취하고 증류수 50 mL를 가하고 240초 동안 진탕 혼합하여 충분히 용해한 다음 0.1N NaOH 용액으로 적정하여 pH 8.4로 한다. 여기에 중성 포르말린 20 mL를 가하고 20초 동안 진탕 혼합한 뒤 다시 0.1N NaOH 용액으로 pH 8.4가 되도록 중화·적정하였다.
(6) 염도 측정
시료 10 g에 증류수 90 mL를 가하여 1분 동안 교반 후 염도계(ATAGO, TM-30D)로 측정하였다.
(7) L값(L-value)
색차계를 백색 교정판을 이용하여 계산하고 시료를 측정기에 평평하게 편 다음 유리를 덮었다. 유리를 고정한 후 L값을 측정하였다.
(8) 유리아미노산 분석
유리아미노산 자동분석기(L-8900, Hitachi High-Technologies, Tokyo, Japan)를 이용하였으며, 시료 2 g을 취한 후 여기에 3차 증류수 50 mL를 첨가하여 초음파(WUC-D22H, Daehan Scientific Co., Ltd) 처리로 20분간 추출한 후 970×g에서 10분간 원심분리하여 상등액을 취하였다. 상등액 2 mL에 5% TCA(trichloroacetic acid) 2 mL를 첨가한 후 10,000 rpm에서 10분간 원심분리한 다음 0.02N-HCl로 희석해 0.2 ㎛ 실린지 필터로 여과하여 아미노산 자동분석기로 분석하였다.
| Instrument | Hitachi L-8900 |
| Column | Hitachi 4.6 ×60 mm (speration) Hitachi 4.6 ×40 mm (ammonia filtering) |
| Detector | UV/Vis (440nm-570nm) |
| Ninhydrin flow rate | 0.35 ml/min |
| Buffer flow rate | 0.40 ml/min |
| Temperature | 50℃ |
| Mobile phase | Column Buffer set (PH-SET KANTO) |
| Injection volume | 20 ㎕ |
실시예 1. 최적화 발효미생물자원 확보
(재)발효미생물산업진흥원으로부터 최종선발된 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487을 분양받아 저염발효물을 제조하기 위한 최적의 발효조건 실험을 진행하였다. 선정된 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주는 아플라톡신을 생성하지 않으면서, 프로테아제, 아밀라아제 및 리파아제 활성을 지니는 균주이다.
| 균주명 (SRCM) |
동정명 | 효소활성 생성능 | Aflatoxine 생성능 |
|||
| protease | amylase | cellulase | lipase | |||
| 102487 | A. oryzae | +++ | + | - | + | ND |
실시예 2. 소맥 코지의 발효조건 확립
1) 수분 함량에 따른 코지의 탄수화물분해활성
코지 제조시 발효온도는 30℃, 발효습도는 80%로 하여 36시간 동안 발효하였으며 수분함량은 35%와 40% 그리고 45%로 구분하여 실험을 진행하였고 발효진행에 따라 품온 상승 시 뒤집기를 실시하여 품온을 유지하고자 하였다. 그 결과 시판 곰팡이(C2)와 선정 곰팡이(Aspergillus oryzae SRCM102487)로 제조한 코지 모두 수분함량 40% 조건에서 발효하였을 때 각 688.5 U/g과 1981.2 U/g의 높은 탄수화물분해활성을 나타내어 최종적인 수분함량은 40%로 선정하였다. 한편 수분함량 35%의 경우 곰팡이가 골고루 소맥에서 번식되었다기보다는 소맥의 형태와 비슷하다는 느낌을 받았으며 뒤집기 시 곰팡이가 서식할 수분의 조건보다 부족하다는 것을 느꼈고 수분함량 45%의 경우 수분함량이 과하여 소맥이 뭉쳐지는 현상이 있어 곰팡이의 번식조건에는 부적절하다고 판단하였다(도 1).
| 구분 | 35% | 40% | 45% |
| C1 | 0 | 0 | 0 |
| C2 | 612.9 | 688.5 | 574.2 |
| Aspergillus oryzae SRCM102487 | 1745.6 | 1981.2 | 1522.8 |
2) 발효온도에 따른 코지의 탄수화물분해활성
상기 실험에서 각 곰팡이별 코지 제조 시 탄수화물분해활성도가 가장 높았던 수분함량 40%로 고정하고 발효습도는 80%로 하여 36시간 발효하였으며, 발효온도는 25℃와 30℃ 그리고 35℃로 구분하여 실험을 진행하였으며 발효진행에 따라 품온 상승시 뒤집기를 진행하여 품온을 유지코자 하였다. 그 결과 시판 곰팡이(C2)와 선정 곰팡이(Aspergillus oryzae SRCM102487)로 제조한 코지 모두 발효온도 30℃ 조건에서 발효하였을 때 각 692.7 U/g과 2028.4 U/g의 높은 탄수화물분해활성을 나타내었으며 이에 따라 최종적인 발효온도는 30℃로 선정하였다. 한편 발효온도가 35℃일때는 일정품온을 유지하는 것에 어려움이 있었고, 발효가 끝날 무렵에는 잡균이 번식하여 끈적끈적한 점질물이 형성되어 탄수화물분해활성이 떨어진 것으로 판단된다(도 2).
| 구분 | 25℃ | 30℃ | 35℃ |
| C1 | 0 | 0 | 0 |
| C2 | 607.5 | 692.7 | 305.3 |
| Aspergillus oryzae SRCM102487 | 1874.1 | 2028.4 | 1008.9 |
3) 발효시간에
따른 코지의 탄수화물분해활성
각 곰팡이별 코지 제조 시 수분함량은 40%, 발효습도는 80%로 하였으며, 발효온도는 상기 실험에서 가장 뛰어난 활성을 보인 30℃로 설정하였다. 여기에 발효시간을 24시간, 36시간, 48시간으로 구분하여 탄수화물분해활성도를 관찰하였다. 그 결과 시판 곰팡이(C2)와 선정 곰팡이(Aspergillus oryzae SRCM102487)로 제조한 koji 모두 발효 48시간에서 각 758.6 U/g과 2253.4 U/g의 높은 활성을 나타내었으며 발효 24시간 이전에는 곰팡이의 발아가 충분하지 못하여 얻어지는 코지가 충분한 아밀라아제 역가를 나타내지 못하는 것으로 판단되어지며 이에 따라 최종적인 발효시간은 48시간으로 선정하였다(도 3).
| 구분 | 24시간 | 36시간 | 48시간 |
| C1 | 0 | 0 | 0 |
| C2 | 388.5 | 718.9 | 758.6 |
| Aspergillus oryzae SRCM102487 | 1328.7 | 2057.8 | 2253.4 |
결과적으로 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487의 원형제국기 고체발효를 위한 조건으로는 수분함량 40%, 발효온도 30℃, 발효시간 48시간이 가장 최적임을 알 수 있으며, 이렇게 원형제국기 고체발효 조건을 확립함으로써 제조시마다 얻어지는 코지 효소의 역가의 큰 편차를 줄이고 최종적으로 얻어지는 저염된장의 품질을 일정 수준으로 유지 관리하고자 하였다.
실시예 3. 염 발효물의 발효조건 확립
당사에서 저염된장을 발효하는데 사용하는 발효균주는 크게 탄수화물 분해능과 단백질 분해능이 우수한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)와 바실러스 아밀로리퀴페시언스(Bacillus amyloliquefaciens)이며 각각의 균주는 각자 전분질 원료인 밀과 단백질 원료인 대두를 분해하여 장류 제품에 맞는 풍미를 생성하게 된다. 본 실험에서는 탄수화물분해활성도가 가장 높은 조건으로 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487을 사용하여 제국한 소맥 코지와 염수를 잘 혼합하여 전분질원료를 분해하는 발효물(이하, 저염발효물)을 제조하였다. pilot scale로 저염발효물을 제조하였을 때 각 발효조건별(염 농도, 발효온도, 발효시간) 실험을 진행하였다.
1) 염 농도
염 농도별에 따른 저염발효물 제조시 발효온도는 45℃로 하여 7일 동안 발효하였으며 염 농도는 0%와 3% 그리고 5%로 구분하여 실험을 진행하였고 발효종료일인 7일째에 샘플링을 하여 수분 함량, 염도, pH, 아미노태질소 함량(AN), L값(L-value)을 측정하였다. 염 농도별 분해정도를 분석한 결과 염 3%와 염 5%에서 안정적인 pH가 나왔으며 AN 함량은 염 농도가 올라갈수록 높게 측정되었다. L값의 경우 염을 추가하지 않았을 때가 가장 밝았으며 염 3%일 때 40.93, 염 5%의 경우는 43.94로 오히려 염 5% 저염발효물이 밝게 측정되었다. 따라서 염 5%에서 저염발효물 제조시 pH와 AN, L값이 최적인 것으로 나타났다(도 4).
| 염 농도 | 수분(%) | 염도(%) | pH | AN(mg%) | L-value |
| 0% | 51.78 | 0.11 | 3.91 | 228.42 | 47.34 |
| 3% | 51.86 | 3.13 | 4.70 | 242.20 | 40.93 |
| 5% | 51.66 | 5.22 | 4.62 | 247.06 | 43.94 |
2) 발효온도
상기 실험 결과에 따라 염 농도는 5%로 동일하게 설정하였으며, 발효온도를 달리하여 7일 동안 발효하였다. 발효온도별 분해정도를 분석한 결과 35℃와 45℃에서 발효한 저염발효물의 pH가 안정적으로 나타났으며 특히 45℃에서 발효한 저염발효물의 AN 함량이 247.06 mg%으로 가장 높게 나타났다. 한편 55℃에서 발효한 저염발효물의 경우 pH와 AN 함량이 다른 조건에 비해 약간 떨어졌으며 특히 발효종료일에는 춘장의 색과 비슷하게 보여 L값의 경우가 확연히 차이가 나는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 저염발효물의 최적 발효온도는 45℃가 적합할 것으로 판단된다(도 5).
| 발효온도 | 수분(%) | 염도(%) | pH | AN(mg%) | L-value |
| 35℃ | 50.59 | 5.00 | 4.54 | 202.40 | 51.48 |
| 45℃ | 51.66 | 5.22 | 4.62 | 247.06 | 43.94 |
| 55℃ | 50.79 | 5.21 | 4.30 | 187.06 | 25.21 |
3) 발효시간
발효시간 설정을 위해 염농도 5%, 발효온도 45℃로 동일하게 설정하고 총 7일에 거쳐 2일 간격으로 샘플링하여 성분에 대한 품질변화를 분석하였다. 발효기간별 수분함량과 염도는 평균적으로 각각 51%와 5%로 나타났으며 pH의 경우도 4.56~4.74로 발효기간별 안정하게 유지되었고 AN은 발효 5일째에 가장 높은 248.54 mg%를 보이고 이후에는 소폭 감소하였고, 또한 L값은 발효시간이 경과됨에 따라 낮아지는 경향을 보였으나 발효 7일까지는 비교적 밝은 색상을 띄었다. 전체적으로 발효시간이 지남에 따라 저염발효물의 물성은 묽어지고 색상에 영향을 미치므로 저염발효물의 발효시간은 5일이 적절한 것으로 판단된다(도 6).
| Days | 수분(%) | 염도(%) | pH | AN(mg%) | L-value |
| 1 | 51.53 | 5.11 | 4.56 | 153.30 | 52.27 |
| 3 | 50.63 | 5.13 | 4.74 | 198.62 | 49.00 |
| 5 | 51.30 | 5.20 | 4.68 | 248.54 | 47.22 |
| 7 | 51.66 | 5.22 | 4.62 | 247.06 | 43.94 |
결과적으로 저염발효물의 pilot scale 제조를 위한 조건으로는 염 5%, 발효온도 45℃, 발효시간 5일이 가장 최적임을 알 수 있으며, 저염된장을 제조하기 위한 1차 발효물으로써의 조건을 최종적으로 확립할 수 있었다.
실시예 4. 볶음콩가루 첨가 여부 결정
상기 실험에서 최종적으로 확립한 저염발효물 제조조건에 볶은콩가루 첨가 유/무에 따른 일반성분 분석 및 유리아미노산 성분 조성의 차이를 보고자 볶은콩가루를 첨가한 저염발효물(이하, RSF)과 볶은 콩가루를 첨가하지 않은 저염발효물(이하, NRSF)로 실험구는 나누었고, 이와 비교를 위해 충무발효(주) 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)와 당사에서 장류제조에 사용 중인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 사용하여 동일한 조건으로 만든 저염발효물을 대조구(이하, Control)로 하였다.
1) 일반성분 분석결과
일반성분 분석결과 NRSF(볶음 콩가루 무첨가)는 pH가 4.80이였으나 RSF(볶음 콩가루 첨가)일때 pH 5.14로 약간 높아져 저염발효물로써 더 안정적인 pH였다. AN의 경우 대조구(Control)의 함량을 100%로 하였을 때, RSF가 대조구에 비해 23% 증가하여 가장 높게 나타났다. L값은 NRSF일 때 가장 밝은 46.86을 나타내었고 RSF의 경우 44.56이였으며 Control의 L값은 42.84로 가장 낮았다.
| 구분 | 수분(%) | 염도(%) | pH | AN(%) | L-value |
| Control | 51.14 | 5.21 | 5.02 | 100 | 42.84 |
| RSF | 51.39 | 5.13 | 5.14 | 123 | 44.56 |
| NRSF | 51.48 | 5.22 | 4.80 | 113 | 46.86 |
2) 유리아미노산 함량
유리아미노산 함량 총 함량은 RSF가 32,737.2 mg/kg로 가장 높게 나타났다. 이 중 긍정적인 맛을 주는 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 라이신(lysine), 알라닌(alanine), 글리신(glycine)의 비율은 RSF가 26.63%으로 가장 높게 나타났으며 NRSF의 경우 23.80%, 대조구는 20.92%로 나타났다.
또한 쓴맛을 주는 아미노산인 발린(valine), 메티오닌(methionine), 이소류시(isoleucine, 류신(leucine), 페닐에틸아민(phenylethylamine)의 비율은 RSF 경우 전체 비율의 20.23%를 보였고, NRSF는 23.55%를 나타내었다. 특히 대조구의 경우 긍정적인 맛을 주는 아미노산에 비해 쓴맛을 형성하는 아미노산의 비율이 더 높았음을 알 수 있었다. 결과적으로 (재)발효미생물산업진흥원으로부터 분양받은 미생물자원으로 제조된 실험구가 추후 저염된장을 제조하였을 때 된장의 맛을 좌우하는 pH나 아미노태질소 함량과 유리아미노산 성분에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 보이며 그 중에서도 볶음콩가루를 첨가하는 경우 감칠맛을 형성하는 유리 아미노산의 함량에 큰 영향을 미치는 것을 알 수 있었다.
| Free Amino Acid | Low salt Fermented product Free Amino Acid content (mg/kg) |
Low salt Fermented product Free Amino Acid content (%) |
||||
| Control | RSF | NRSF | Control | RSF | NRSF | |
| Aspartic acid | 1,571.2 | 2,367.9 | 1,692.1 | 5.0 | 7.2 | 6.0 |
| Glutamic acid | 2,134.0 | 3,247.0 | 2,224.8 | 6.8 | 9.9 | 7.8 |
| Lysine | 482.8 | 525.0 | 499.4 | 1.5 | 1.6 | 1.8 |
| Alanine | 1,547.0 | 1,672.1 | 1,527.7 | 4.9 | 5.1 | 5.4 |
| Proline | 2,677.0 | 2,084.2 | 2,537.3 | 8.5 | 6.4 | 8.9 |
| Glycine | 851.5 | 907.5 | 812.2 | 2.7 | 2.8 | 2.9 |
| Serine | 2,157.0 | 2,001.6 | 1,824.3 | 6.9 | 6.1 | 6.4 |
| Valine | 2,142.1 | 1,892.2 | 1,980.8 | 6.8 | 5.8 | 7.0 |
| Methionine | 659.0 | 628.7 | 621.8 | 2.1 | 1.9 | 2.2 |
| Isoleucine | 1,364.3 | 1,274.6 | 1,255.8 | 4.3 | 3.9 | 4.4 |
| Leucine | 3,033.2 | 2,826.7 | 2,826.7 | 9.6 | 8.6 | 10.0 |
| Threonine | 1,201.1 | 1,231.5 | 1,126.3 | 3.8 | 3.8 | 4.0 |
| Sarcosine | 1,190.0 | 641.0 | 669.1 | 3.8 | 2.0 | 2.4 |
| α-Aminoadipicacid | - | 187.7 | - | - | 0.6 | - |
| α-AminobutyricAcid | 62.8 | 40.9 | 27.8 | 0.2 | 0.1 | 0.1 |
| Tyrosine | 1,114.3 | 1,213.9 | 863.5 | 3.5 | 3.7 | 3.0 |
| Phenylalanine | 1,934.9 | 1,780.2 | 1,738.8 | 6.1 | 5.4 | 6.1 |
| β-Alaine | 925.9 | 1,011.3 | 701.2 | 2.9 | 3.1 | 2.5 |
| γ-AminobutricAcid | 233.7 | 311,.9 | 264.3 | 0.7 | 1.0 | 0.9 |
| Ammonia | 964.5 | 571.1 | 575.4 | 3.1 | 1.7 | 2.0 |
| Ornithine | 63.1 | 62.8 | 76.5 | 0.2 | 0.2 | 0.3 |
| Carmosine | 282.8 | 173.4 | - | 0.9 | 0.5 | - |
| Histidine | 1,020.8 | 1,688.5 | 1,177.7 | 3.2 | 5.2 | 4.1 |
| L-Anserine | 548.1 | 646.1 | 317.5 | 1.7 | 2.0 | 1.1 |
| Arginine | 1,774.8 | 2,306.0 | 1,718.6 | 5.6 | 7.0 | 6.1 |
| Hydroxylysine | 214.2 | 96.2 | 96.5 | 0.7 | 0.3 | 0.3 |
| Hydroxyproline | 1,330.3 | 1,347.2 | 1,225.6 | 4.5 | 4.1 | 4.3 |
| Total | 31,480.4 | 32,737.2 | 28,381.7 | 100.0 | 100.0 | 100.0 |
Claims (5)
- (1) 밀가루를 증자하고 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 접종한 밀가루 혼합물을 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지에 소금, 물 및 볶음 콩가루를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법. - 제1항에 있어서, 상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주는 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)인 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법.
- 제2항에 있어서,
(1) 밀가루를 110~130℃에서 15~25분 동안 증자한 후 증자한 밀가루의 수분 함량이 38~42%(v/w)가 되도록 물을 첨가한 후, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102487 균주(기탁번호: KCCM12804P)를 접종한 밀가루 혼합물을 28~32℃에서 44~52시간 동안 발효하여 소맥 코지를 제조하는 단계;
(2) 소맥 코지 혼합물 총 중량 기준으로, 상기 (1)단계의 제조한 소맥 코지 43~47 중량%, 소금 4~6 중량%, 물 38~42 중량% 및 볶음 콩가루 9~11 중량%를 혼합하여 소맥 코지 혼합물을 제조하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 제조한 소맥 코지 혼합물을 43~47℃에서 4~6일 동안 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 소맥 황국균 발효물의 제조방법. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 소맥 황국균 발효뮬.
- 제4항의 소맥 황국균 발효물을 이용하여 제조된 장류.
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| KR1020200162948A KR20220074438A (ko) | 2020-11-27 | 2020-11-27 | 볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법 |
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|---|---|---|---|
| KR1020200162948A KR20220074438A (ko) | 2020-11-27 | 2020-11-27 | 볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법 |
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| KR1020200162948A KR20220074438A (ko) | 2020-11-27 | 2020-11-27 | 볶음 콩가루 첨가 저염 발효물의 제조방법 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114672382A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-06-28 | 海天醋业集团有限公司 | 一种高氨氮、具有特殊香气的麦曲的制作方法 |
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2020
- 2020-11-27 KR KR1020200162948A patent/KR20220074438A/ko active IP Right Grant
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|---|---|---|---|---|
| CN114672382A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-06-28 | 海天醋业集团有限公司 | 一种高氨氮、具有特殊香气的麦曲的制作方法 |
| CN114672382B (zh) * | 2022-04-08 | 2024-01-30 | 海天醋业集团有限公司 | 一种高氨氮、具有特殊香气的麦曲的制作方法 |
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