KR20220044765A

KR20220044765A - 항-염증 효과가 향상된 외용 피부 치료 조성물

Info

Publication number: KR20220044765A
Application number: KR1020227006730A
Authority: KR
Inventors: 슈앙핑 웨이; 샤샤 왕
Original assignee: 쩌찌앙 양솅탕 인스티튜트 오브 내츄럴 메디케이션 컴퍼니 리미티드
Priority date: 2019-07-30
Filing date: 2020-07-17
Publication date: 2022-04-11
Also published as: CN110731974B; JP7320666B2; WO2021017910A1; JP2022542329A; CN110731974A

Abstract

본 발명은 항-염증 효능이 향상된 피부 국소용 조성물에 관한 것으로서, (A) 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는 농축된 자작나무 수액, 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제를 포함한다.

Description

항-염증 효과가 향상된 외용 피부 치료 조성물

본 발명은 항-염증 효능 (anti-inflammatory efficacy)이 향상된 피부 국소용 조성물에 관한 것으로서, (A) 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는 농축된 자작나무 수액 (concentrated birch sap), 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제를 포함한다.

사회-경제적 수준이 변화하고, 화장품의 타입 및 성분들이 복잡해짐에 따라, 민감성 피부가 나타나고 자극을 받을 가능성이 증가하였으며; 피부 건강 및 미적 기준에 대한 사람들의 인식이 향상됨에 따라, 민감성 피부에 대한 관심이 점차 높아졌다. 화장품 산업에서 민감성 피부를 위한 제품의 위치는 점점 더 중요해질 것이며, 민감성 피부의 다양한 원인 및 성능을 고려하여 활성 항-알레르기 성분이 개발되었다. 기존 시장 조사에 따르면, 일부 화장품 브랜드를 제외하고는, 거의 모든 화장품 브랜드에서 소정의 수 및 상이한 타입의 민감성 피부용 제품을 출시하였다. 외국 브랜드인 예컨대 Avene, Shiseido 및 기타 잘-알려진 브랜드에서는 광범위한 제품을 제공하였다. 국내 브랜드인 Herborist는 최근 새로운 코스메슈티컬 브랜드 (cosmeceutical brands) 예컨대 Yuze 및 Winona와 같은 순수 식물성 코스메슈티컬의 등장과 함께, "생약을 사용한 피부 영양 (nourishing skin with herbal medicine)"이라는 차별화된 브랜드 이미지로 독보적이다. 이러한 "진정 (soothing)" 화장품에는 쇠비름 (purslane), 카모마일 (chamomile), 차 폴리페놀 (tea polyphenols) 및 블루 티슬 오일 (blue thistle oil)과 같은 항-알레르기 및 항-자극 효과가 있는 일부 식물 추출물이 다양한 정도로 부가된다. 이러한 성분들은 항-알레르기 및 항-외부 자극 기능을 가지며, 피부 알레르기를 완화하고, 피부에 천연 보호 장벽을 제공하며, 손상된 피부를 효과적으로 복구하고, 세포 단백질 생화학적 합성 및 세포 재생을 자극하며, 피부 면역계를 재건할 수 있다.

자작나무 (Birch)는 자작나무과 낙엽수로, 현재 전세계적으로 약 100종이 있으며, 주로 북온대 (northern temperate zone) 및 한온대 (cold temperate zone)에 분포한다. 이 중, 중국에는 약 29종이 있으며, 주로 북동, 북서 및 남서 지역에 분포한다. 이는 토양 침식 방지, 환경 개선, 및 바람 및 모래 방지에 중요한 역할을 한다. 자작나무는 대부분 인간의 간섭이 거의 없고, 산업 오염이 없는 외딴 산악 지역에서 자란다. 자작나무 수액 (또한, 자작나무 즙 (birch juice)이라고도 함)은 자작나무 껍질을 자르거나 구멍을 뚫어서 나오는 신선한 즙이다. 자작나무 수액은 무색 또는 담황색이고, 침전물 또는 불순물이 없으며, 가벼운 자작나무 향을 갖는다. 자작나무 수액에는 당, 아미노산, 비타민, 바이오틴, 사이토키닌, 미량 미네랄 원소, 방향족 오일, 베툴린 (betulin) 및 사포닌과 같은 많은 화합물을 함유하고, 우수한 보습, 항-염증, 주름방지, 미백 및 기타 스킨 케어 효능을 갖는다.

발명의 요약

일 양상에서, 본 발명은 항-염증 효능이 향상된 피부 국소용 조성물 중에 (A) 농축된 자작나무 수액, 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제의 조합물의 용도에 관한 것으로서, 상기 농축된 자작나무 수액은 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는다.

다른 양상에서, 본 발명은 항-염증 효능이 향상된 피부 국소용 조성물에 관한 것으로서, (A) 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는 농축된 자작나무 수액, 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제를 포함한다.

본 발명에 관련된 자작나무 수액은 베탈라 알바 (Betala alba), 베툴라 푸베센스 (Betula pubescens), 베툴라 펜둘라 (Betula Pendula) 및 베툴라 플라티필라 (Betula platyphylla)의 4가지 변종을 포함하는, 베툴라 베툴라세에 (Betula Betulaceae)로부터 입수된다. 상기 자작나무 수액은 눈이 녹기 시작할 때부터 나무가 엽상될 때까지 자작나무 줄기의 기저부에 인공적으로 구멍을 뚫고 수집함으로써 얻어지는, 침전물 또는 불순물이 없는 무색의 투명하고, 영양이 있는 자작나무 즙이다. 상기 자작나무 수액은 상업적으로 입수 가능하고, 그대로 사용되며 (이 경우에는 자작나무 수액 원액이라고 함), 예를 들어 이는 Daxinganling Chaoyue Wild Berry Development Co., Ltd.로부터 구입할 수 있다.

본 발명에 따른 농축된 자작나무 수액은 상기에 언급된 상업적으로 입수 가능한 자작나무 수액 원액 제품을 농축하여 수득된다. 가열 농축, 저온 진공 농축 및 멤브레인 농축 (membrane concentration)과 같은 농축 방법이 당해 분야에 알려져 있다. 본 발명에서, 상기 농축은 저온 동결 농축 또는 멤브레인 농축 공정에 의해 수행되는 것이 바람직하다. 예를 들어, 상업적으로 입수 가능한 자작나무 수액 원액을 저온 진공 농축 공정을 위해 저온 건조 장치로 도입하고, 약 -40 내지 -70℃로 냉각시키고, 약 0.1-30 Pa까지 진공하여 상이한 농축도를 갖는 농축된 자작나무 수액을 수득하였다.

추가로, 본 발명자들은 또한 농축된 자작나무 수액의 항-염증 효능이 이의 농축도와 단순한 선형 관계가 아니며, 농축도가 높아지면 먼저 증가하다가, 그 다음에는 감소한다는 것을 발견하였다. 그러므로, 자작나무 수액의 농축도를 제어하는 것이 핵심이다. 본 발명에서, 자작나무 수액의 농축도는 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배로 제어된다.

예기치 않게, 본 발명자들은 농축된 자작나무 수액, 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 또는 디포타슘 글리시리지네이트의 단독 사용과 비교하여, 농축된 자작나무 수액 및 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및/또는 디포타슘 글리시리지네이트의 조합은 항-염증 효능이 유의미하게 우수하고, 이는 이들의 부가 효과 (addition effect)보다 훨씬 더 높으며, 이는 이들간 시너지 효과가 있음을 발견하였다.

상기 성분 (A)의 농축된 자작나무 수액의 함량은 상기 피부 국소용 조성물의 총 중량을 기준으로, 약 18-98%, 바람직하게는 약 20-95%, 더 바람직하게는 약 22-90%, 가장 바람직하게는 약 30-90%이다.

상기 성분 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 또는 디포타슘 글리시리지네이트는 모두 당해 분야에 알려져 있으며, 상업적으로 입수 가능하다.

상기 성분 (B)의 함량은 상기 피부 국소용 조성물의 총 중량을 기준으로, 약 0.01-10%, 바람직하게는 0.1-6%, 더 바람직하게는 0.5-5%이다.

상기 피부 국소용 조성물은 약학적 조성물 또는 화장료 조성물을 포함한다.

상기 피부 국소용 조성물은 추가로 부가된 물을 포함하지 않지만, 각 성분들에 고유하게 함유된 수분을 배제하지 않는다.

바람직한 일 구체예에서, 상기 피부 국소용 조성물은 킬레이트화제 (chelating agent) 예컨대 EDTA 염, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨 및 글루콘산을 포함하지 않는다.

상기 성분들 (A) 및 (B)에 추가하여, 상기 피부 국소용 조성물은 선택적으로 (C) 비히클, 활성 성분 및 부형제 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는, 피부 국소용 조성물 중에 통상 사용되는 성분을 포함할 수 있다. 상기 성분 (C)는 당해 분야에 알려져 있다. 당업자는 필요한 경우 이의 타입 및 양을 선택할 수 있다. 예를 들어, 상기 성분 (C)의 총 함량은 상기 피부 국소용 조성물의 총 중량을 기준으로, 통상 약 2-80%이다.

상기 비히클은 예를 들어 희석제, 분산제 또는 담체 등을 포함한다. 이의 예로는 에탄올, 디프로필렌 글리콜, 부탄디올 및 유사물을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 비히클의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 전형적으로 상기 성분 (C)의 총 중량의 약 0.5-20%이다.

상기 활성 성분에는 피부연화제 (emollient), 보습제, 항-염증 활성 성분 등을 포함한다.

상기 피부연화제의 예는 올리브 오일, 마카다미아 너트 오일, 스위트 아몬드 오일, 포도씨 오일, 아보카도 오일, 옥수수 오일, 참깨 오일, 대두 오일, 땅콩 오일, 메도우폼 시드 오일 (meadowfoam seed oil), 홍화 시드 오일, 개장미 열매 오일 (rosa canina fruit oil), 아르간 커넬 오일 (argania spinosa kernel oil), 호호바 시드 오일 (simmondsia chinensis seed oil), 해바라기 시드 오일, 이테야자 열매 오일 (mauritia flexuosa fruit oil), 스쿠알란, 에틸헥실 팔미테이트, 이소프로필 미리스테이트, 수소화 폴리이소부틸렌, 이소세탄, 이소도데칸, 디에틸헥실 카보네이트, 디옥틸 카보네이트, 이소프로필 라우로일 사르코시네이트, 이소노닐 이소노나노에이트, 수소화 폴리데센, 트리에틸헥사노인, 세틸 에틸 헥사노에이트, 비스-디에톡시디글리콜 사이클로헥산 1,4-디카복실레이트, 카프릴/카프르산 트리글리세리드, 올레일 에루케이트, 옥틸도데칸올 미리스테이트, 옥틸도데칸올, 폴리디메틸실록산, 옥틸 폴리메틸실록산, 세틸 디메티콘, 사이클로펜타디메틸실록산 등 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 고체 피부연화제의 예는 세틸 알코올, 스테아릴 알코올, 세테아릴 알코올, 베헤닐 알코올, 스쿠알릴 알코올, 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 밀랍, 칸델릴라 왁스, 카르나우바 왁스, 라놀린, 오조케라이트, 호호바 시드 왁스, 파라핀 왁스, 미세결정 왁스, 수소화 쌀겨 왁스, 수소화 코코글리세리드, 글리세릴 베헤네이트/에이코사디오에이트, 미리스틸 미리스테이트, 비스-디글리세릴 폴리아실아디페이트-2, 시어나무 (butyrospermum parkii) (시어 버터) 및 야자 (astrocaryum murumuru) 시드 버터 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 피부연화제의 함량은 당해 분야에 알려져 있고, 예를 들어 이는 성분 (C)의 총 중량을 기준으로, 전형적으로 1-50%이다.

상기 보습제의 예는 글리세린, 디글리세린, 부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 1,3-프로판디올, 디프로필렌 글리콜, 1,2-펜탄디올, 폴리에틸렌 글리콜-8, 폴리에틸렌 글리콜-32, 메틸 글루세스 (methyl gluceth)-10, 메틸 글루세스-20, PEG/PPG-17/6 코폴리머, 글리세레스 (glycereth)-7, 글리세레스-26, 글리세릴 글루코시드, PPG-10 메틸 글루코스 에테르, PPG-20 메틸 글루코스 에테르, PEG/PPG/폴리부틸렌 글리콜-8/5/3 글리세롤, 수크로스, 트레할로스, 람노스, 만노스, 라피노스, 베타인, 에리트리톨, 자일리톨, 우레아, 글리세레스-5 락테이트, 소듐 히알루로네이트, 가수분해된 소듐 히알루로네이트, 아세틸화 소듐 히알루로네이트, 소듐 폴리글루타메이트, 가수분해된 스클레로튬 검 (sclerotium gum), 풀루란 (pululan), 트레멜람 (tremellam) 및 타마린드 (tamarindus indica) 시드 폴리사카라이드, 1,2-헥산디올, 천연 보습 인자, 세라마이드 2, 세라마이드 3, 콜레스테롤, 인지질 등 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 보습제의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 전형적으로 상기 성분 (C)의 총 중량의 약 1-30%이다.

항-염증 활성 성분의 예는 쇠비름 (PORTULACA OLERACEA) 추출물, 생물학적 당 검-1 (biological sugar gum-1), β-글루칸, 프룩탄, 황금 (SCUTELLARIA BAICALENSIS) 뿌리 추출물, 가시칠엽수 (AESCULUS HIPPOCASTANUM) 추출물, 4-tert-부틸 사이클로헥사놀, 수소화 레시틴, 민감초 (GLYCYRRHIZA GLABRA) 추출물, 가수분해된 로얄젤리 단백질, 오리자놀 (oryzanol), 피토스핑고신 (phytosphingosine), 케르세틴 (quercetin), 생강 뿌리 추출물, 로즈마리 잎 추출물 등 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 항-염증 활성 성분의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 통상 성분 (C)의 총 중량의 약 0.01-10%이다.

상기 부형제는 예를 들어 유화제, 증점제, 보존제, 향료 및 유사물을 포함한다.

상기 유화제의 예는 세테아릴 올리베이트, 소르비탄 올리베이트, 폴리소르베이트-60, 폴리소르베이트-80, 메틸 글루코스 세스퀴스테아레이트, PEG-20 메틸 글루코스 세스퀴스테아레이트, PEG-40 수소화 캐스터 오일, PPG-26-부테스-26, PEG-4 폴리글리세릴-2 스테아레이트, PEG-60 수소화 캐스터 오일, 스테아레스-2, 스테아레스-21, PPG-13-데실테트라데세스-24, 세테아릴 글루코시드, PEG-100 스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트 SE, 코코 글루코시드, 세테아레스-25, PEG-40 스테아레이트, 폴리글리세릴-3 메틸 글루코스 디스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트 시트레이트, 폴리글리세릴-10 스테아레이트, 폴리글리세릴-10 미리스테이트, 폴리글리세릴-10 디올레에이트, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 폴리글리세릴-10 이소스테아레이트, 폴리글리세릴-10 올레에이트, 폴리글리세릴-10 디이소스테아레이트, 폴리글리세릴-6 라우레이트, 폴리글리세릴-6 미리스테이트, 수크로스 스테아레이트 및 수크로스 폴리스테아레이트 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 유화제의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 전형적으로 상기 성분 (C)의 총 중량의 약 0.5-10%이다.

상기 증점제의 예는 고분자량 폴리머 예컨대 카보머, 아크릴레이트 및 이의 유도체, 크산탄 검, 아라비아 검, 폴리에틸렌 글리콜-14M, 폴리에틸렌 글리콜-90M, 숙시닐 폴리사카라이드, 하이드록시에틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 셀룰로스 및 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 증점제의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 전형적으로 상기 성분 (C)의 총 중량의 약 0.1-10%이다.

상기 보존제의 예는 메틸 하이드록시벤조에이트, 프로필 하이드록시벤조에이트, 페녹시에탄올, 벤질 알코올, 페닐에탄올, 비스(하이드록시메틸)이미다졸리디닐 우레아, 포타슘 소르베이트, 소듐 벤조에이트, 클로로페네신, 소듐 데하이드로아세테이트, 카프릴하이드록삼산, 1,2-헥산디올, 1,2-펜탄디올, p-하이드록시아세토페논, 카프릴일 글리콜, 글리세릴 카프릴레이트, 글리세릴 운데실레네이트, 소르비탄 카프릴레이트, 에틸헥실글리세롤, 모란 (peony) 뿌리 추출물 등 중 하나 이상을 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 상기 피부 국소용 조성물 중 보존제의 함량은 당해 분야에 알려져 있으며, 예를 들어 이는 전형적으로 상기 성분 (C)의 총 중량의 약 0.01-2%이다.

본 발명에 따른 항-염증 효능이 향상된 피부 국소용 조성물은 당해 분야에 알려진 임의의 적절한 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 이는 화장료 분야에서 통상적으로 사용되는 장치, 예컨대 용해 탱크, 유화 포트, 분산기 (disperser), 이송 펌프 등을 사용하여 제조될 수 있다. 제조 중에, 수-용해성 물질을 수성상 용해 케틀 (aqueous phase dissolving kettle)에 충전하고, 오일-용해성 물질을 유상 용해 케틀 (oil phase dissolving kettle)에 충전하며, 상기 2개의 케틀을 각각 약 80℃로 가열하고; 쉽게 응집되는 원료의 경우, 이들은 분산기를 사용하여 사전-분산될 수 있다. 용해가 완료되면, 유상 및 수성상을 유화 포트로 전달하고, 약 5-15분 동안 균질화 및 유화시켰다. 유화가 완료되면, 상기 벌크를 실온으로 냉각시키고, 선택적으로 향료, 보존제 및 유사물을 부가하고, 상기 생성물의 pH를 필요에 따라 조정하였다.

상기 제조 방법은 투여 형태 요건에 따라 가변되거나 또는 조정될 수 있다. 본 발명의 피부 국소용 조성물은 필요에 따라 다양한 투여 형태 예컨대 연고, 크림, 에멀젼, 로션, 에센스, 스프레이, 겔로 제조될 수 있다.

실시예

본 발명은 실시예를 참조하여 하기에 더 상세히 설명된다. 그러나, 이들 실시예 및 비교예는 본 발명을 구체적으로 예시하기 위해서만 사용되는 것으로 이해되어야 하고, 어떠한 방식으로든 본 발명의 첨부된 청구항의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다.

실시예 1: 자극성 접촉 피부염에 대한 다양한 물질 시스템의 효과

본 실시예에서, 자작나무 수액 원액, 농축된 자작나무 수액, 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물 및/또는 판테놀의 항-염증 효능을 자극성 접촉 피부염 마우스 모델 (irritant contact dermatitis mice model)을 기반으로 평가하였다.

1. 실험 동물: ICR 마우스, 수컷

2. 실험 물질: 10% 소듐 도데실 설페이트 용액 (SDS), 제모 크림 (depilatory cream), 자작나무 수액, 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀

3. 실험 방법: ICR 마우스들을 이들의 체중에 따라 무작위로 그룹화하고, 각 그룹에 12마리의 마우스를 배정하고, 정상 그룹 (normal group), 모델 그룹 (model group), 포뮬러 그룹 (formula groups)으로 나누었다. 모델링 하루 전에, 각 그룹의 마우스를 제모 크림으로 처리하여 마우스 복부에서 약 2 x 2 cm 면적의 털을 제거하였다. 모델 그룹 및 포뮬러 그룹의 경우: 모델링 당일에, 10% 소듐 라우릴 설페이트 용액 50 μL를 피펫을 사용하여 흡인하고, 마우스 복부의 노출된 피부에 연속 5일 동안 균일하게 적용하였다. 각 포뮬러 그룹의 용액을 동일한 에어로졸 병으로 분무하고, 각 마우스에게 연속 2일 동안, 1일 3회, 각 회당 2번 균일하게 분무하였다. 정상 그룹에서는 동일한 방법으로 마우스의 복부 털을 제거하고, 이들에게는 대조를 위해 7일 동안 먹이를 제공하였다. 실험 7일차에는 각 그룹의 실험 마우스의 피부 상태를 관찰하였고, 상기 마우스의 혈청을 채취하여 염증 인자 IL-1α의 함량을 결정하였다.

상기 포뮬러는 하기와 같았다:

참고: Form.은 포뮬러 (formula)의 줄임말이다.

자작나무 수액의 1.2배, 4배 및 9배 농축물은 자작나무 수액 원액을 농축하여 수득하였다. 농축 과정은 하기와 같았다: Daxinganling Chaoyue Wild Berry Development Co., Ltd.로부터 구입한 신선한 자작나무 (BETULA ALBA) 수액 원액을 저온 건조 장치에 공급하고, -65℃로 냉각시키고, 0.1 Pa로 진공하여, 각각 1.2배, 4배 및 9배로 농축하였다.

4. 상이한 포뮬러 시스템으로 처리한 후에, 마우스의 혈청 중 염증 인자 IL-α 함량을 하기 표에 개시하였다:

상기 표의 결과로부터, 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물 또는 판테놀 및 자작나무 수액의 조합은 자극성 접촉 피부염을 가진 마우스의 혈청 중에 IL-α의 발현을 유의미하게 억제하였음을 보여주었다. 또한, 1.2배 농축된 자작나무 수액과의 조합이 더 우수한 효능을 보였다.

실시예 2: 알레르기성 접촉 피부염에 대한 상이한 화장료 조성물 시스템의 효과

1. 실험 동물: ICR 마우스, 수컷

2. 실험 물질: 1% DNFB 아세톤 올리브 오일 용액 (4:1), 제모 크림, 자작나무 수액, 알란토인, 비사보롤

3. 실험 방법: ICR 마우스들을 이들의 체중에 따라 무작위로 그룹화하고, 각 그룹에 12마리의 마우스를 배정하고, 정상 그룹, 모델 그룹, 포뮬러 그룹으로 나누었다. 모델링 하루 전에, 각 그룹의 마우스를 제모 크림으로 처리하여 마우스 복부에서 약 2 x 2 cm 면적의 털을 제거하였다. 모델 그룹 및 포뮬러 그룹의 경우: 모델링 당일에, 1% DNFB를 함유하는 아세톤 올리브 오일 용액 100 μL를 흡인하고, 마우스 복부의 노출된 피부에 균일하게 적용하여 마우스의 알레르기성 접촉 피부염 모델의 확립을 감작화 및 자극하였다. 연속 2일 동안 적용하고, 5일차에 20 μL의 1% DNFB 아세톤 올리브 오일 용액을 마우스의 내이 및 외이에 균일하게 적용하여 흥분시켰다. 정상 그룹의 마우스의 복부 및 귀에 대조를 위해 아세톤 및 올리브 오일 용액 (4:1)을 균일하게 적용하였다.

투여는 흥분시키고 12시간 후에 시작되었고, 각 포뮬러 그룹에게 동일한 에어로졸 병을 사용하여 실험 마우스의 내이 및 외이에 균일하게 분무하고, 여기서 각 귀의 내이 및 외이에 연속 2일 동안, 1일 3회, 1번 분무하였다. 모델 그룹은 연속 2일 동안 1일 3회 증류수를 분무하고, 내이 및 외이를 면봉으로 약 5초간 반복적으로 문질러주었다.

상기 포뮬러는 하기와 같았다:

4. 평가 지수:

귀 두께 지수 (Ear thickness index): 흥분시킨 후 12시간 및 48시간에, 마우스 귀의 두께를 측정하였고, 귀들의 평균값을 얻었다.

귀 중량 지수 (Ear weight index): 투여 2일 후에, 홀펀치 (hole punch)로 각 실험 마우스의 왼쪽 귀 디스크를 채취하여, 칭량하였다.

염증 지수 결정: 투여 2일 후에, 마우스의 혈청을 채취하고, ELISA 키트를 사용하여 염증 인자 IFN-γ, IL-4 및 트립타제 함량을 검출하였고, IFN-γ/IL-4를 계산하였다.

5. 실험 결과

상기 결과로부터, 자작나무 수액과 알란토인 또는 비사보롤의 조합은 염증을 유의미하게 억제하고, 혈청 중 IFN-γ/IL-4의 비율을 균형있게 유지하였음을 보여주었다. 또한 1.2배 농축된 자작나무 수액과의 조합은 더 우수한 효능을 보였다.

실시예 3: 비만세포의 탈과립화에 대한 자작나무 수액의 효과

본 실시예에서, 비만세포의 탈과립화 (degranulation)에 대한 자작나무 수액과 디포타슘 글리시리지네이트의 조합의 효과를 제브라피쉬 유충 알레르기 모델 (zebrafish juvenile allergy model)을 이용하여 테스트하고 이를 비교하여, 자작나무 수액 및 디포타슘 글리시리지네이트의 항-염증 효능을 입증하였다.

실험 방법은 하기와 같았다.

1. 실험 동물: 제브라피쉬 (zebrafish).

2. 실험 단계는 하기와 같았다: AB 야생형 제브라피쉬 배아를 수집하였고, E3 버퍼를 사용하여 28.5℃ 인큐베이터에서 5 dpf (days post fertilization)까지 배양하고, 상기 버퍼를 매일 교체하고, 5 dpf의 제브라피쉬를 무작위로 48-웰 세포 배양 플레이트로 옮겼고, 웰당 10미 (tails)로 배정하고, 그룹 당 4개의 중복 웰을 가지며, 하기와 같이 그룹화하였다:

모델 그룹: RO 물 + 15 μg/ml SP

양성 그룹: 케토티펜 + 15 μg/ml SP

테스트할 샘플 그룹:

SP를 포함하는 상기 탈과립화 그룹에 대응하는, SP를 포함하지 않는 음성 대조 그룹을 확립하였고, 그룹당 4개의 중복 웰을 가지며; SP-유도 탈과립화 그룹 및 SP가 없는 음성 대조 그룹에 대응하는, 배경 대조 그룹 (제브라피쉬 유충 없음)을 확립하였고, 그룹당 2개의 중복 웰을 갖는다. 웰의 각 그룹에 남아있는 E3 버퍼를 흡수하고, 각 그룹에 해당하는 용액 250 μl를 부가하였고, 암실의 28.5℃ 인큐베이터에서 60분간 반응시켰다. 60분 후에, 각 그룹의 상등액 200 μl를 96-웰 세포 배양 플레이트에 넣고, 효소 반응 기질인 BAPNA에, 농도가 400 μg/ml에 도달하도록 각각 부가하였다. 상기 96-웰 플레이트를 암실에서 커버하고, 28.5℃ 인큐베이터에 넣고, 2시간 동안 반응시켰다. 전체 플레이트를 2시간 후에 405 nm에서 흡광도 값에 대해 측정하였고, 상기 값은 제브라피쉬의 비만 세포에서 트립타제 분비를 반영한다.

제브라피쉬 유충 비만세포 보호 모델의 실험 결과를 하기 표에 기록하였다.

상기 표의 결과로부터, 자작나무 수액 및 디포타슘 글리시리지네이트의 조합은 비만세포의 탈과립화를 유의미하게 억제하였음을 보여주었다. 또한 1.2배 농축된 자작나무 수액과의 조합은 더 우수한 효능을 나타내었다.

실시예 4: 항-염증 페이셜 크림 조성물

항-염증 페이셜 크림 조성물의 포뮬러는 하기와 같이 나타내었다:

번호	성분	중량%
1	1.2배 농축된 자작나무 수액	55
2	소듐 폴리글루타메이트	0.1
3	가수분해된 소듐 히알루로네이트	0.1
4	잔탄검	0.2
5	알란토인	0.2
6	메틸 하이드록시벤조에이트	0.2
7	수소화 레시틴	0.5
8	판테놀	0.5
9	베타인	3
10	부탄디올	4
11	글리세린	6
12	카보머	0.2
13	프로필 하이드록시벤조에이트	0.1
14	피토스테롤/옥틸도데칸올 라우로일 글루타메이트	1
15	미세결정 왁스	1
16	C10-18 지방산 트리글리세리드	2
17	세테아릴 글루코시드, 세테아릴 알코올	2
18	세테아릴 알코올	2
19	PEG-100 스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트	3
20	카프릴산/카프르산 트리글리세리드	4
21	코코-카프릴레이트/카프레이트	5
22	폴리디메틸실록산	2
23	트로메타민	0.2
24	페녹시에탄올	0.5
25	귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물	7.2

상기 항-염증 페이셜 크림 조성물을 하기와 같이 제조하였다:

1. 원료 4를 원료 11에 균일하게 분산시켰고;

2. 원료 7을 가열하고, 원료 10에 의해 용해시켰고;

3. 원료 1 및 25를 수상 포트에 충전하고, 원료 12와 함께 교반하면서 산재시키고, 원료 12를 완전히 팽윤시킨 후에 원료 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 및 25를 부가하고, 80℃까지 가열하였고;

4. 원료 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22를 유상 포트에 충전하고, 80℃로 가열하였고;

5. 상기 수상 포트내 원료들을 유화 포트로 펌핑하고, 5분 동안 고속으로 균질화하였고;

6. 상기 유상 포트내 원료들을 유화 포트로 펌핑하고, 5분 동안 고속으로 균질화하고, 10분 동안 유지하였고;

7. 교반하면서 50℃로 냉각시키고, 원료 23 및 원료 24를 충전하고, 3분 동안 천천히 균질화하였고;

8. 교반하면서 40℃로 냉각시키고;

9. 제품을 배출하기 전에 테스트하였다.

민감성 피부 및 안면 염증을 가진 39명의 대상체를 선택하고, 3개의 그룹으로 나누었고: 제1 그룹은 상기 페이셜 크림 조성물로 지속적으로 처리하였고; 제2 그룹은 자작나무 수액이 없는 대조군 제품 A로 처리하였으며 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 자작나무 수액은 모두 물로 대체되었음); 제3 그룹은 대조군 제품 B로 처리하였다 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 알란토인, 판테놀 및 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물은 모두 물로 대체되었음).

4주 후의 결과로부터, 2가지 대조군 제품들과 비교하여, 상기 페이셜 크림 조성물은 환자의 안면 염증 반응을 유의미하게 개선하였고, 피부 안정성을 향상시켰음을 보여주었다.

실시예 5: 항-염증 에센스 조성물

항-염증 에센스 조성물의 포뮬러는 하기와 같았다:

번호	성분	중량%
1	2배 농축된 자작나무 수액	70.0
2	소듐 폴리글루타메이트	0.05
3	잔탄검	0.05
4	비사보롤	4.1
5	메틸 하이드록시벤조에이트	0.2
6	PEG-60 수소화 캐스터 오일	0.2
7	가수분해된 소듐 히알루로네이트	0.2
8	트레할로스	0.5
9	PEG/PPG-17/6 코폴리머	1
10	귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물	2
11	디프로필렌 글리콜	3
12	PEG-8	5
13	글리세린	6
14	아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 가교-폴리머	0.05
15	카보머	0.2
16	트리에틸헥사노인	0.5
17	폴리디메틸실록산	1
18	세틸 에틸 헥사노에이트	2
19	트로메타민	0.14
20	페녹시에탄올	0.4
21	스쿠알란	3.41

상기 항-염증 에센스 조성물을 하기와 같이 제조하였다:

1. 원료 3을 원료 11에 균일하게 분산시켰고;

2. 원료 1을 유화 포트에 충전하고, 원료 14 및 15를 교반하면서 산재시키고, 원료 14 및 15를 완전히 팽윤시킨 후에 원료 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13을 부가하고, 교반하면서 80℃로 가열하고, 5분 동안 고속으로 균질화하고, 10분 동안 유지하였고;

3. 교반하면서 50℃로 냉각시키고, 원료 16, 17 및 18을 부가하고, 5분 동안 고속으로 균질화하였고;

4. 교반하면서 50℃로 냉각시키고, 원료 19 및 20을 부가하였고;

5. 교반하면서 40℃로 냉각시키고;

6. 제품을 배출하기 전에 테스트하였다.

본 실시예에서, 민감성 피부 및 안면 염증을 가진 39명의 대상체를 선택하고, 3개의 그룹으로 나누었고: 제1 그룹은 상기 에센스 조성물로 지속적으로 처리하였고; 제2 그룹은 자작나무 수액이 없는 대조군 제품 A로 처리하였으며 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 자작나무 수액은 모두 물로 대체되었음); 제3 그룹은 대조군 제품 B로 처리하였다 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 비사보롤 및 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물은 모두 물로 대체되었음).

4주 후의 결과로부터, 2가지 대조군 제품들과 비교하여, 상기 에센스 조성물은 환자의 안면 염증 반응을 유의미하게 개선하였고, 피부 안정성을 향상시켰음을 보여주었다.

실시예 6: 항-염증 로션 조성물

항-염증 로션 조성물의 포뮬러는 하기와 같았다:

번호	성분	중량%
1	1.2배 농축된 자작나무 수액	74
2	가수분해된 소듐 히알루로네이트	0.05
3	디포타슘 글리시리지네이트	4.05
4	잔탄검	0.1
5	메틸 하이드록시벤조에이트	0.2
6	폴리소르베이트-60	0.3
7	PEG-60 수소화 캐스터 오일	0.5
8	베타인	1
9	디프로필렌 글리콜	4
10	세라마이드	4
11	글리세린	7.1
12	카보머	0.2
13	피토스테롤/옥틸도데칸올 라우로일 글루타메이트	1
14	트로메타민	0.1
15	PEG/PPG-17/6 코폴리머	1
16	페녹시에탄올	0.4
17	알란토인	2

상기 항-염증 로션 조성물을 하기와 같이 제조하였다:

1. 원료 4를 원료 9에 균일하게 분산시켰다.

2. 원료 1을 유화 포트에 충전하고, 원료 11을 교반하면서 산재시키고, 원료 11을 완전히 팽윤시킨 후에 원료 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 17을 부가하였다.

3. 교반하면서 80℃로 가열하고, 5분 동안 고속으로 균질화하고, 10분 동안 유지하였다.

4. 원료 12를 부가하고, 고속으로 5분 동안 균질화하고, 10분 동안 유지하였다.

5. 교반하면서 60℃로 냉각시키고, 원료 13을 부가하였다.

6. 50℃로 냉각시키고, 원료 14 및 15를 부가하고, 3분간 천천히 균질화하였다.

7. 교반하면서 40℃로 냉각시켰다.

8. 제품을 배출하기 전에 테스트하였다.

본 실시예에서, 민감성 피부 및 안면 염증을 가진 39명의 대상체를 선택하고, 3개의 그룹으로 나누었고: 제1 그룹은 상기 로션 조성물로 지속적으로 처리하였고; 제2 그룹은 자작나무 수액이 없는 대조군 제품 A로 처리하였으며 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 자작나무 수액은 모두 물로 대체되었음); 제3 그룹은 대조군 제품 B로 처리하였다 (포뮬러는 상기 표에 기재된 것과 정확히 동일하지만, 디포타슘 글리시리지네이트 및 알란토인은 모두 물로 대체되었음).

4주 후의 결과로부터, 2가지 대조군 제품들과 비교하여, 상기 로션 조성물은 환자의 안면 염증 반응을 유의미하게 개선하였고, 피부 안정성을 향상시켰음을 보여주었다.

전술한 실시예들의 기술적 해결책은 본 발명의 바람직한 구체예이다. 본 발명의 원리를 벗어나지 않고 여러 개선 및 변경이 이루어질 수 있고, 이러한 개선 및 변경은 또한 본 발명의 보호 범위 내에 속하는 것으로 간주되어야 한다.

Claims

항-염증 효능을 가진 피부 국소용 조성물 중에 (A) 농축된 자작나무 수액 (concentrated birch sap), 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제의 조합물의 용도로서, 상기 농축된 자작나무 수액은 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는 조합물의 용도.
청구항 1에 있어서, 상기 피부 국소용 조성물은 추가로 부가되는 물을 포함하지 않는 것인 용도.
청구항 1 또는 2에 있어서, 상기 피부 국소용 조성물은 약학적 조성물 또는 화장료 조성물인 것인 용도.
항-염증 효능을 가진 피부 국소용 조성물로서, (A) 약 1.05-8배, 바람직하게는 약 1.1-4배, 더 바람직하게는 약 1.2-2배의 농축도를 갖는 농축된 자작나무 수액, 및 (B) 귀리 (Avena sativa) 커넬 추출물, 판테놀, 알란토인, 비사보롤 및 디포타슘 글리시리지네이트로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성제를 포함하는 피부 국소용 조성물.
청구항 4에 있어서, 상기 성분 (A) 농축된 자작나무 수액의 함량은 상기 피부 국소용 조성물의 총 중량을 기준으로, 18-98%, 바람직하게는 20-95%, 더 바람직하게는 22-90%, 가장 바람직하게는 30-90%인 것인 피부 국소용 조성물.
청구항 4 또는 5에 있어서, 상기 성분 (B)의 함량은 상기 피부 국소용 조성물의 총 중량을 기준으로, 0.01-10%, 바람직하게는 0.1-6%, 더 바람직하게는 0.5-5%인 것인 피부 국소용 조성물.
청구항 4 내지 6 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피부 국소용 조성물은 추가로 부가되는 물을 포함하지 않는 것인 피부 국소용 조성물.
청구항 4 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피부 국소용 조성물은 약학적 조성물 또는 화장료 조성물인 것인 피부 국소용 조성물.