KR20210151859A - 카세인 키나아제 1ε 억제제 및 약학 조성물 및 그 응용 - Google Patents

카세인 키나아제 1ε 억제제 및 약학 조성물 및 그 응용 Download PDF

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Abstract

본 발명은 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성을 억제하는 치환된 피라졸로피리미딘(pyrazolopyrimidine)류 화합물 및 이의 입체이성질체 또는 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물 및 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성의 억제로부터 이익을 얻는 질병, 장애 또는 병증을 치료하는 약물 제조에의 응용을 제공한다. 상기 화합물은 CK1ε 키나아제와 OCI-LY10 세포, Karpas299 세포에 대해 억제 활성을 가지며, OCI-LY10 피하 이종 모델에서 우수한 항종양 활성을 나타내고, BTK 억제제와 함께 사용하면 우수한 상승적 항종양 활성을 나타낸다. 상기 화합물은 비교적 우수한 약동학적 특성을 가지며, 암, 자가면역 질환 등을 포함하여 카세인 키나아제 1ε 활성의 억제로부터 이익을 얻는 질병, 장애 또는 병증을 치료하기 위해 단독으로 또는 다른 약물과 함께 사용할 수 있다.

Description

카세인 키나아제 1ε 억제제 및 약학 조성물 및 그 응용
본 발명은 의약 분야에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 치환된 피라졸로피리미딘류 카세인 키나아제 1ε 억제제, 약학 조성물 및 그 응용에 관한 것이다.
단백질 키나아제는 신호 전달에 중요한 역할을 하며, 인산화된 기질 단백질을 통해 세포 내 신호 전달을 매개할 수 있는 중요한 약물 표적이다. 카세인 키나아제 1(CK1)은 세린-트레오닌 키나아제(Serine/threonine kinase) 패밀리에 속하며, 포유동물에는 7가지 아형인 α, β, γ1, γ2, γ3, δ 및 ε이 존재한다. 이러한 아형은 Wnt 신호 전달, 일주기 리듬, 세포 신호 전달, 막 수송, DNA 복제, DNA 손상 및 RNA 대사에 관여하며 신체 기능을 조절할 수 있다.
CK1의 인산화 기질은 다양한 세포내 조절에 관여한다. 예를 들어, 종양 억제인자 p53과 발암 유전자 MDM2는 모두 비정상적인 세포 성장을 제어하는 중요한 단백질이며 동시에 CK1의 기질이기도 하다. CK1 키나아제의 아형(주로 CK1ε 및 CK1δ)은 p53 인산화, p53 안정화 및 활성화, p53-MDM2 상호작용과 밀접한 상관성이 있다. 동시에 세포 분열 시 중심체, 방추체를 형성하여 단백질 합성을 조절하거나, TRAIL(종양 괴사 인자 관련 세포 사멸 유도 리간드) 및 FAS의 세포 사멸과도 관련이 있다.
카세인 키나아제 1ε(CK1ε)은 CK1 패밀리의 중요한 아형이며, 다양한 세포 성장 및 생존 과정의 핵심 조절자이다. 일주기 리듬을 조절하는 데 중요한 역할을 할 뿐만 아니라 암의 발생과 진행에서도 중요하다. 예를 들어, 약물 억제 또는 shRNA 매개를 통해 CK1ε을 제거한 후 췌장암, 육종, 유방암, 직장암, 난소암, 백혈병 등을 포함한 다양한 암의 성장과 생존을 방해할 수 있다. 연구에 따르면 CK1 유전자는 기질 특이성이 없기 때문에 CK1ε이 종양 성장과 생존을 조절하는 작용 기전이 불분명하나, Akt, MYC, β-카테닌(β-catenin) 등과 관련이 있을 수 있다(Varghese et al., Scientific Reports, 2018, 8: 13621).
Wnt 신호 경로는 세포 증식 과정을 조절할 수 있으며, 해당 경로의 일부 돌연변이는 피부암, 간암, 뇌종양, 결장암 등 다양한 암을 유발할 수 있다. CK1은 β-카테닌의 인산화를 통해 그 분해를 촉진할 수 있다. CK1ε은 Tcf3의 인산화를 통해 Wnt 신호 전달 경로를 조절할 수 있으며, 인산화된 Tcf3은 β-카테닌과 결합하여 그 분해를 촉진할 수 있다(Knippschild et al., Cellular Signalling, 2005, 17: 675-689).
현재 많은 유형의 CK1 키나아제 억제제의 구조가 보고되었으며, 예를 들어 1) PF-4800567는 치환된 피라졸로피리미딘(pyrazolopyrimidine)류 화합물로, 선택적 CK1ε 억제제이다(IC50=32 nM；Walton 등, J Pharmacol Exp Ther. 2009, 330(2):430-9). 2) PF-670462는 치환된 이미다졸-5-일피리미딘(imidazol-5-ylpyrimidine)류 화합물로, 선택적 CKIε/CKIδ 억제제이다(IC50 값이 각각 7.7 nM, 14 nM임. Badura 등, J Pharmacol Exp Ther. 2007, 322(2):730-8). 3) CK1-IN-1은 이미다졸-5-일피리딘(imidazol-5-ylpyridine)류 화합물이며, 다중 표적 억제제이고, CKIδ, CKIε, p38σ MAPK에 대한 IC50 값은 각각 15 nM, 16nM 및 73 nM이다(WO2015119579A1).
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
또한 Wnt 신호 전달 경로를 조절하는 중요한 부분인 CK1ε은 만성 림프구성 백혈병(CLL)을 발병 및 진행시킬 수 있다. CK1ε은 CLL 환자에서 유의하게 상향 조절된다. CK1ε을 억제함으로써 BCR 관련 경로에 영향을 미치지 않으면서 CLL의 진행을 차단한다. 또한 CK1ε은 BCR 경로 BTK 억제제 이브루티닙(ibrutinib)의 생체내 및 시험관내 항종양 활성을 강화시킬 수 있다. 따라서 CK1ε은 중요한 항종양 표적이다(Janovska et al., Blood, 2019, 11: 1206~1218).
따라서 CK1ε을 억제하는 기능을 가진 약물의 개발은 암과 자가면역질환과 같은 다양한 질병에서 중요한 치료적 역할을 할 것이다.
본 발명의 목적은 신규한 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성을 억제하는 치환된 피라졸로피리미딘(pyrazolopyrimidine)류 화합물 및 이의 입체이성질체 또는 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 상기 화합물 및 이의 입체이성질체 또는 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물을 포함하는 약학 조성물을 더 제공한다.
본 발명은 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성의 억제로부터 이익을 얻은 질병, 장애 또는 병증을 치료하는 약물 제조에서 상기 화합물 및 이의 입체이성질체 또는 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물의 응용을 더 제공한다.
본 발명의 기술적 해결책은 하기와 같다.
본 발명에서 제공하는 CK1ε 억제제는 일반식 I의 구조를 갖는다.
Figure pct00004
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
여기에서,
R1은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C2-C10 알케닐, 치환 또는 비치환된 C2-C10 알키닐, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이다.
m은 1 내지 4의 정수이고, m이 1보다 큰 경우, 복수의 R1은 서로 독립적이며 상이하거나 동일할 수 있다.
R2은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴이다.
R3은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이다.
X는 CR4 또는 N이다.
R4는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실이다.
B는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴, 치환 또는 비치환된 5 내지 12원 헤테로아릴로부터 선택된다.
바람직한 방안에 있어서, 상기 R3과 R4는 동시에 H가 아니다.
더 나아가, 본 발명의 바람직한 화합물은 일반식 II-A, II-B 또는 II-C의 구조를 갖는다.
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
여기에서, R1, m, R2, R3, X, R4, B의 정의는 일반식 I에 정의된 바와 같다.
R5는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 히드록시알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 히드록시알킬, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이다.
o는 1 내지 5의 정수이다.
R6과 R6’은 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실로부터 선택되거나, R6과 R6’은 3 내지 6원 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 된다.
n은 존재하지 않거나 0, 1, 2이다. 여기에서,
n이 존재하지 않는 경우, 즉 Y와 Z가 고리를 형성하지 않는 경우, Y는 CR7R7’ 또는 NR8이고, Z는 CHR7R7’, OH, NHR8이고, Y와 Z 중의 R7은 서로 독립적이며, 동일하거나 상이할 수 있다. 마찬가지로 Y와 Z 중의 R7'는 서로 독립적이며 동일하거나 상이할 수 있다.
n이 0, 1, 2일 때, Y는 CH 또는 N이고, Z는 CR7R7’, O 또는 NR8이다.
R7과 R7’은 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실로부터 선택되거나, R7과 R7’은 3 내지 6원 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 된다.
R8은 H, 알킬(바람직하게는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬), 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, -C(O)-R9, -S(O)2-R10이다.
R9는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 시클로알킬이다.
R10은 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 시클로알킬이다.
더 나아가, 본 발명의 바람직한 화합물은 일반식 III-A, III-B 또는 III-C의 구조를 갖는다.
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
여기에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R6’, Y, Z, n의 정의는 일반식 II-A、II-B、II-C에 정의된 바와 같다.
또한 본 발명의 바람직한 화합물은 일반식 IV-A, IV-B 또는 IV-C의 구조를 갖는다.
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
여기에서,
R1은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택된다.
m은 1 내지 4의 정수로부터 선택된다.
R2는 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필로부터 선택된다.
R5는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택된다.
o는 1 내지 4의 정수로부터 선택된다.
R6 및 R6’은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택된다.
Y는 N 또는 CH로부터 선택된다.
Z는 CH2, O, NR8로부터 선택된다.
R8은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, -C(O)-R9로부터 선택된다.
R9는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬로부터 선택된다.
더 나아가, 본 발명의 바람직한 화합물은 일반식 V-A, V-B 또는 V-C의 구조를 갖는다.
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
여기에서 R1, m, R5 및 Z의 정의는 일반식 IV-A, IV-B 및 IV-C에 정의된 바와 같으며, R2는 메틸 또는 에틸 또는 이소프로필이다.
바람직하게는 본 발명의 바람직한 화합물은 일반식 V-A, V-B 또는 V-C의 구조를 갖는다. 여기에서,
R1은 H, 할로겐(바람직하게는 Cl, F)으로부터 선택된다.
R2는 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필, 페닐로부터 선택된다.
m은 1, 2, 3이다.
R3는 F, Cl, CN, H로부터 선택된다.
X는 C, N, CH이다.
바람직한 방안에 있어서, B는 페닐, 피리딜(보다 바람직하게는 3위치 기, 즉 피리딘-3-일), 할로겐 치환된 피리딜(보다 바람직하게는 Cl, F 치환된 피리딜, 바람직하게는 3위치 기, 즉 Cl, F 치환된 피리딘-3-일), 시클로헥실, 피페리디닐(보다 바람직하게는 4위치 기(즉, 피페리딘-4-일), 1위치(즉, 피페리딘-1-일)), N-아세틸피페리디닐(보다 바람직하게는 4위치 기, 즉 N-아세틸피페리딘-4-일), N-(2-트리플루오로에틸) 치환된 피페리디닐(보다 바람직하게는 4위치 기, 즉 N-(2-트리플루오로에틸) 치환된 피페리딘-4-일), 모르폴리닐(보다 바람직하게는 N위치 기, C위치 기), 피페라지닐(보다 바람직하게는 N위치 기), 디메틸(보다 바람직하게는 C위치 디메틸 치환기) 치환된 피페라지닐(보다 바람직하게는 N위치 기), 트리플루오로메틸 치환(보다 바람직하게는 C위치 트리플루오로메틸 치환기)의 피페라지닐(보다 바람직하게는 N위치 기), 트리플루오로에틸 치환(보다 바람직하게는 N위치 트리플루오로에틸 치환기)된 피페라지닐(바람직하게는 N위치 기), 메틸 치환(보다 바람직하게는 N위치 메틸 치환기)된 피페라지닐(보다 바람직하게는 N위치 기), 아세틸 치환(보다 바람직하게는 N위치 아세틸 치환기)된 피페라지닐(보다 바람직하게는 N위치 기), 3-메톡시 프로필, 2-(테트라히드로푸란-2-일)에틸이다.
바람직하게는, 상기 CK1ε 억제제는 하기 구체적인 화합물로 선택된다.
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
및 상기 화합물의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
바람직하게는, 상기 CK1ε 억제제는 하기 화합물 중 하나로 선택된다.
Figure pct00020
바람직하게는, 상기 화합물은 하기 화합물이다.
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-1)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-1a)
(R)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-1b)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-2)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-2a)
(R)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-2b)
2-(1-(4-아미노-3-(4-에톡시-2,3-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-3)
2-(1-(4-아미노-3-(4-시클로프록시-2,3-디플루오로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-4)
2-(1-(4-아미노-3-(3-클로로-2-플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-5)
3-(4-아미노-1-(1-(4-옥사이도-3-페닐-3,4-디히드로퀴나졸린-2-일)에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3-일)-2-플루오로-6-메톡시벤조니트릴(II-A-6)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-7)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-7a)
(R)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-7b)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-8)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-8a)
(R)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-8b)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-6-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-9)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-8-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-10)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5,8-디플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-11)
2-(1-(4-아미노-3-(2,6-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-12)
2-(1-(4-아미노-3-(2-플루오로-6-메톡시피리딘-3-일-)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-13)
2-(1-(4-아미노-3-(2-플루오로-6-이소프로폭시피리딘-3-일-)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-14)
2-(1-(4-아미노-3-(2-플루오로-6-페톡시피리딘-3-일-)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-15)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온(II-A-16)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-B-1)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-B-2)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-B-2a)
(R)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-B-2b)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(5-플루오로피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-B-3)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-시클로헥실퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-1)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피페리딘-4-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-2)
3-(1-아세틸피페리딘-4-일)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-3)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(1-(2,2,2-트리플루오로에틸)피페리딘-4-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-4)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피페리딘-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-5)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-모르폴린퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-6)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(피페라진-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-7)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(3,3-디메틸피페라진-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-8)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(3-(트리플루오로메틸)피페라진-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-9)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(4-(2,2,2-트리플루오로에틸)피페라진-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-10)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(4-메틸피페라진-1-일)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-11)
3-(4-아세틸피페라진-1-일)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-12)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-13)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-14)
2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-(2-(테트라히드로푸란-2-일)에틸)퀴나졸린-4(3H)-온(II-C-15)
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이다.
바람직하게는, 상기 화합물은 하기 화합물이다.
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 염산염(II-D-1)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 황산염(II-D-2)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 p-톨루엔설폰산염(II-D-3)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 메탄설폰산염(II-D-4)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 염산염(II-D-5)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 황산염(II-D-6)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 인산염(II-D-7)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 p-톨루엔설폰산염(II-D-8)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 메탄설폰산염(II-D-9)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 시트르산염(II-D-10)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 석신산염(II-D-11)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온-L-말산염(II-D-12)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온-D-말산염(II-D-13)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온-L-타타르산염(II-D-14)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 벤조산염(II-D-15)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 말레산염(II-D-16)
(S)-2-(1-(4-아미노-3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 옥살산염(II-D-17)
또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 용매화물이다.
본 발명은 일반식 화합물 I의 제조 방법을 더 제공하며, 상기 방법은 하기 세 가지 방법을 포함한다.
1) 방법 1: 3-요오드-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(화합물 5)과 화합물 4는 염기의 작용 하에 알킬화 반응을 일으켜 화합물 10을 생성한 후, 화합물 7과 커플링 반응하여 일반식 화합물 I을 수득한다.
Figure pct00021
제1단계 반응에 있어서, 반응 용매는 DMF 이외에 THF, MeCN, DMSO 등을 더 선택할 수 있다. 화합물 4와 화합물 5의 몰비는 약 1:(1 내지 3)이고, 보다 바람직하게는 1:(1 내지 2)이다. 염기는 탄산칼륨, 탄산세슘, 탄산나트륨 등으로 선택될 수 있고, 염기와 화합물 5의 몰비는 약 (1 내지 5):1이며, 보다 바람직하게는 (1.5 내지 2.5):1이다. 반응 온도는 실온 내지 60℃이다.
제2단계 반응에 있어서, 화합물 10과 화합물 7은 염기(탄산나트륨, 탄산칼륨) 및 촉매(팔라듐 촉매 등)의 존재 하에서 수행된다. 촉매는 바람직하게는 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(tetrakis(triphenylphosphine)palladium) 등이다. 화합물 10과 화합물 7의 몰비는 1:(1 내지 3)이고, 보다 바람직하게는 1:(1 내지 2)이다. 염기와 화합물 10의 몰비는 1:(1 내지 4)이고, 보다 바람직하게는 1:(2 내지 3)이다. 촉매의 첨가량은 화합물 10 몰의 0.05% 내지 1.0%이다. 반응 용매는 유기 용매 디옥산(dioxane), 테트라히드로푸란(tetrahydrofuran), N,N-디메틸포름아미드(N,N-dimethylformamide) 등과 물의 혼합 용매 등이며, 부피비는 (2 내지 10):1이고, 보다 바람직하게는 (2 내지 5):1이다. 반응 온도는 80℃ 내지 120℃이다.
상기 방법을 선택하는 경우, 바람직하게는, 상기 R2는 바람직하게는 C1~C5 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, 이소프로필, 프로필, 시클로프로필), 페닐이고, 상기 R3은 바람직하게는 H, 할로겐(바람직하게는 F), X는 C-할로겐(바람직하게는 C-Cl, C-F 등), C-CN, CH, N이다.
2) 방법 2: 3-요오도-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(화합물 5)은 염기의 작용 하에 트리페닐메틸 클로라이드(triphenylmethyl chloride)와 반응하여 화합물 6을 생성한 후, 화합물 7과 커플링 반응을 통홰 화합물 8을 생성하고, 탈보호 후 염기의 작용 하에서 화합물 4와 알킬화 반응을 거쳐 하기 일반식 화합물 I을 생성한다.
Figure pct00022
상기 방법에 있어서, 단계 1에서 트리페닐메틸 클로라이드와 화합물 5의 몰비는 (1 내지 5):1이며, 바람직하게는 (1.5 내지 2.5):1이다. 상기 단계에서 염기(바람직하게는 탄산칼륨, 탄산세슘)를 첨가할 수 있으며, 이와 화합물 5의 몰비는 (1 내지 8):1이고, 바람직하게는 (2 내지 5):1이다. 반응 온도는 60℃ 내지 100℃이다.
단계 2에 있어서, 화합물 6과 화합물 7은 염기(탄산나트륨, 탄산칼륨) 및 촉매(팔라듐 촉매 등)의 존재 하에서 수행된다. 촉매는 바람직하게는 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 등이다. 화합물 6과 화합물 7의 몰비는 1:(1 내지 3)이고, 보다 바람직하게는 1:(1 내지 2)이다. 염기와 화합물 6의 몰비는 (1 내지 4):1이고, 보다 바람직하게는 (2 내지 3):1이다. 촉매의 첨가량은 화합물 6 몰량의 0.05% 내지 1.0%이다. 반응 용매는 유기 용매 디옥산, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸포름아미드 등과 물의 혼합 용매 등이며, 부피비는 (2 내지 10):1이고, 보다 바람직하게는 (2 내지 5):1이다. 반응 온도는 80℃ 내지 120℃이다.
단계 3에 있어서, 반응 과정에서 TFA 및 트리이소프로필실란(triisopropylsilane)을 첨가하고, 반응 용매는 디클로로메탄, 클로로포름 등이 될 수 있다. TFA와 화합물 8의 몰비는 (2 내지 8):1이고, 보다 바람직하게는 (3 내지 6):1이다. 트리이소프로필실란과 화합물 8의 몰비는 (2 내지 8):1이고, 보다 바람직하게는 (3 내지 6):1이다.
단계 4에 있어서, 반응 용매는 DMF 이외에 THF, MeCN, DMSO 등을 더 선택할 수 있다. 화합물 9와 화합물 4의 몰비는 약 1:(1 내지 3)이고, 보다 바람직하게는 1:(1 내지 2)이다. 반응 과정에서 염기를 첨가할 수 있으며, 염기는 탄산칼륨, 탄산세슘, 탄산나트륨 등으로 선택될 수 있고, 염기와 화합물 9의 몰비는 약 (1 내지 5):1이며, 보다 바람직하게는 (1.5 내지 2.5):1이다. 반응 온도는 실온 내지 60℃이다.
상기 방법에 있어서, 바람직하게는 R1은 할로겐(바람직하게는 하나 이상의 Cl, 하나 이상의 F 또는 상기 둘의 조합)이고, R2는 C1~C5(메틸, 에틸, 이소프로필 등)이고, R3은 H 및 할로겐 등이다. B는 바람직하게는 페닐, 할로겐(Cl, F) 치환 또는 비치환된 피리딜, 피페리디닐, 메틸 치환된 피페라지닐, Boc 치환된 피페리디닐, N 헤테로피페리디닐, 알킬 치환된 피페라지닐, 트리플루오로메틸 치환된 피페라지닐, 트리플루오로메틸 치환된 알킬 치환된 피페라지닐, 아세틸 치환된 피페라지닐, 치환된 프로필, 프로필, 치환된 에틸 등이다.
3) 방법 3(키랄 화합물의 합성)
Figure pct00023
Figure pct00024
상기 방법은 먼저 키랄 D-메틸 락테이트(D-methyl lactate)와 L-메틸 락테이트를 사용하여, 다단계 반응을 통해 (R)-12 또는 (S)-12를 생성한 후, 각각 중간체 9와 포스핀 리간드 및 아조디카르복실레이트(azodicarboxylate)의 작용 하에서 Mitsunobu 반응이 일어나 (S)-I 또는 (R)-I를 수득한다.
상기 Mitsunobu 반응의 반응 용매는 THF, 디클로로메탄, 톨루엔, 아세토니트릴, DMF 등일 수 있으며, 중간체 9와의 부피비는 (2 내지 10):1, 바람직하게는 (2 내지 5):1이다. 포스핀 리간드는 트리페닐포스핀(triphenylphosphine), 트리-tert-부틸포스핀(tri-tert-butylphosphine)을 선택할 수 있으며, 중간체 9와의 몰비는 (1 내지 4):1이고, 바람직하게는 (1.5 내지 3):1이다. 아조디카르복실레이트는 DEAD, DIAD를 선택할 수 있고, 중간체 9와의 몰비는 (1 내지 4):1이고, 바람직하게는 (1.5 내지 3):1이다. 반응 온도는 15도 내지 30도이며, 바람직하게는 실온이다.
상기 방법을 선택하는 경우, 바람직하게는, 상기 R2는 바람직하게는 C1~C5 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, 이소프로필, 프로필, 시클로프로필), 페닐이고, 상기 R3은 바람직하게는 H, 할로겐(바람직하게는 F), X는 C-할로겐(바람직하게는 C-Cl, C-F 등), C-CN, CH, N이다.
본 발명의 다른 목적은 하기 화합물 9로 표시되는 중간체 및 카세인 키나아제 1ε 활성의 억제로부터 이익을 얻는 질병, 장애 또는 병증에 대한 약물의 제조에서의 그의 용도를 제공하는 데에 있다.
Figure pct00025
여기에서,
R2은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴이다. R2는 바람직하게는 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필이다.
R3은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이다. R3은 바람직하게는 F, Cl, CN, H이다.
X는 CR4 또는 N이다.
R4는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실이다. R4는 바람직하게는 불소이다.
바람직한 방안에 있어서, 상기 R3과 R4는 동시에 H가 아니다.
X는 바람직하게는 CF, N, CH이다.
바람직하게는, 화합물 9로 표시되는 중간체는 하기 화학식으로 표시되는 화합물이다.
Figure pct00026
R2는 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필로부터 선택된다.
용어 설명:
본 발명에서 사용된 용어 "아릴"은 방향족 고리에서 하나의 H를 제거하여 얻은 것으로, 상기 방향족 고리는 5 내지 12개 탄소 원자의 전체 탄소 단환 또는 융합 다환 그룹으로서, 완전 공액 π 전자계를 갖는 것을 의미한다. 방향족 고리의 비제한적인 예시에는 벤젠 고리, 나프탈렌 고리 및 안트라센 고리가 있다. 방향족 고리는 비치환되거나 치환된 것일 수 있다. 방향족 고리의 치환기는 할로겐(바람직하게는 불소, 염소, 브롬, 요오드), 시아노, 니트로, 아미노, 히드록실, C1-C6 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec- 부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸 등), C1-C6 히드록시알킬(바람직하게는 히드록시메틸, 히드록시에틸, 히드록시프로필, 히드록시이소프로필 등), C1-C6 알콕시(바람직하게는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로필옥시, 부톡시, 이소부틸옥시, sec-부틸옥시, tert-부틸옥시 등), 할로겐화 C1-C6 알킬(바람직하게는 할로겐화 메틸, 할로겐화 에틸, 할로겐화 프로필, 할로겐화 이소프로필, 할로겐화 부틸, 할로겐화 이소부틸, 할로겐화 sec-부틸, 할로겐화 tert-부틸 등), 할로겐화 C1-C6 히드록시알킬(바람직하게는 할로겐화 히드록시메틸, 할로겐화 히드록시에틸, 할로겐화 히드록시프로필, 할로겐화 히드록시이소프로필 등), 할로겐화 C1-C6 알콕시(바람직하게는 할로겐화 메톡시, 할로겐화 에톡시, 할로겐화 프로폭시, 할로겐화 이소프로필옥시, 할로겐화 부톡시, 할로겐화 이소부틸옥시, 할로겐화 sec-부틸옥시, 할로겐화 tert-부틸옥시 등), C3-C6 시클로알킬(바람직하게는 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실 등), 할로겐화 C3-C6 시클로알킬(바람직하게는 할로겐화 시클로프로필, 할로겐화 시클로펜틸, 할로겐화 시클로헥실 등), 3 내지 10원 헤테로시클릴(바람직하게는 테트라히드로푸라닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐 등)로부터 선택된다. 방향족 고리의 치환은 일치환(예를들어 오르토(ortho), 메타(meta) 및 파라(para) 치환)이거나 이치환 또는 삼치환 등일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "헤테로아릴"은 5 내지 12개 고리 원자를 갖는 불포화 고리기로, 완전 공액 π 전자계를 갖는 것을 의미한다. 이는 상기 "아릴" 중 하나 이상의 탄소가 산소, 질소, 황 등과 같은 헤테로 원자에 의해 치환된 것에 해당한다. 헤테로방향족 고리는 단환 또는 이환일일 수 있다. 즉, 2개 고리의 융합에 의해 형성된다. 구체적인 헤테로시클릭아릴(헤테로아릴)은 피리딜, 피리미디닐, 피라지닐, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이미다졸릴 등일 수 있다. 헤테로시클릭아릴은 비치환되거나 치환된 것일 수 있다. 헤테로시클릭아릴의 치환기는 할로겐, 시아노, 니트로, 아미노, 히드록실, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐화 C1-C6 알킬, 할로겐화 C1-C6 히드록시알킬, 할로겐화 C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 할로겐화 C3-C6 시클로알킬, 3 내지 10원 헤테로시클릴로부터 선택된다.
본 발명에서 사용되는 용어 "알킬"은 하나의 1 내지 6개 탄소 원자의 직쇄 포화 1가 탄화수소기 또는 하나의 3 내지 6개 탄소 원자의 분지쇄 포화 1가 탄화수소기를 의미한다. 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸 등이다. 알킬은 비치환 또는 일치환 또는 다중치환될 수 있고, 다중치환의 경우 치환기는 동일하거나 상이할 수 있다. 알킬의 치환기는 할로겐, 니트로, 히드록실, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, C3-C10 시클로알킬, 알콕시카르보닐, 알킬티오, 알킬설포닐, 알킬아미도, 하드록시알킬아미도, 설폰아미도, 3 내지 10원 헤테로시클릴, 또는 아미노 또는 일치환 또는 다중치환된 아미노일 수 있다. 여기에서 아미노의 치환기는 동일하거나 상이할 수 있으며, 수소, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, C3-C10 시클로알킬, 3 내지 10원 헤테로시클릴로부터 선택된다.
본 발명에서 사용된 용어 "히드록시알킬"은 -알킬-OH를 나타내며, 여기에서 알킬은 상기 정의된 바와 같다. 본 발명에서 사용되는 "히드록시알킬"의 예시에는 히드록시메틸, 히드록시에틸, 히드록시프로필, 히드록시이소프로필 등이 포함되나 이에 제한되지 않는다. "히드록시알킬"은 치환된 히드록시알킬을 더 포함하며, 이의 치환기는 할로겐, 아미노, 히드록시, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, C1-C6 시클로알킬일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "알콕시"는 -O-알킬을 나타내며, 여기에서 알킬은 상기 정의된 바와 같다. 본 발명에서 사용되는 "알콕시"의 예시에는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시 및 tert-부톡시가 포함되나 이에 제한되지 않는다. "알콕시"은 치환된 알콕시를 더 포함하며, 이의 치환기는 할로겐, 아미노, 히드록시, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, C1-C6 시클로알킬일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "시클로알킬"은 3 내지 10개 탄소 원자를 가진 단환 또는 다환(2개의 단환 사이가 화학 결합으로 연결되거나 가교 또는 스피로 고리 또는 축합됨)의 고리 포화 1가 탄화수소기를 의미하며, 바람직하게는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등이며, 여기에서 1개 또는 2개 탄소 원자는 1개의 옥소기로 치환될 수 있다. 상기 시클로알킬은 비치환 또는 치환될 수 있으며, 이의 치환기는 할로겐, 니트로, 히드록실, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐화 C1-C6 알킬, 할로겐화 C1-C6 히드록시알킬, 할로겐화 C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 할로겐화 C3-C6 시클로알킬, 알콕시카르보닐, 알킬티오, 알킬설포닐, 알킬아미도, 히드록시알킬아미도, 설폰아미도, 3 내지 10원 헤테로시클릴, 또는 아미노 또는 일치환 또는 다치환된 아미노로부터 선택된다. 여기에서 아미노의 치환기는 동일하거나 상이할 수 있으며, 수소, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, C3-C10 시클로알킬, 3 내지 10원 헤테로시클릴로부터 선택된다.
본 발명에서 사용된 용어 "헤테로시클릴"은 3 내지 10개의 고리 원자를 갖는 단환 또는 다환(2개의 단환 사이가 화학 결합으로 연결되거나 가교 또는 스피로 고리 또는 축합됨)의 고리기를 의미하고, 하나 이상의 N, O, S로부터 선택된 헤테로원자를 가지며,
Figure pct00027
Figure pct00028
를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 헤테로시클릴은 비치환 또는 치환된 것일 수 있으며, 이의 치환기는 할로겐, 니트로, 히드록실, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐화 C1-C6 알킬, 할로겐화 C1-C6 히드록시알킬, 할로겐화 C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 할로겐화 C3-C6 시클로알킬, 알콕시카르보닐, 알킬티오, 알킬설포닐, 알킬아미도, 히드록시알킬아미도, 설폰아미도, 3 내지 10원 헤테로시클릴, 또는 아미노 또는 일치환 또는 다치환된 아미노일 수 있으며, 여기에서 아미노의 치환기는 동일하거나 상이할 수 있으며, 수소, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬, C1-C6 알콕시, C3-C10 시클로알킬, 3 내지 10원 헤테로시클릴로부터 선택된다.
본 발명에서 사용된 용어 "알케닐"은 탄소 및 수소 원자로 구성되며, 적어도 하나의 이중 결합이고 2 내지 10개 탄소 원자의 직쇄 또는 분지쇄의 탄화수소 사슬기(즉 C2-C10 알케닐)를 가지고, 비닐, 알릴, 부트-1-에닐, 펜트-1-에닐, 펜트-1,4-디-에닐 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 알케닐은 하나 이상의 치환기에 의해 치환될 수 있고, 상기 치환기는 독립적으로 알킬, 할로겐화 알킬, 알콕시, 할로겐화 알콕시, 히드록시알킬, 할로겐화 히드록시알킬, 시클로알킬, 할로겐화 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 히드록실, 할로겐, 시아노, 니트로이다.
본 발명에서 사용된 용어 "알키닐"은 탄소 및 수소 원자로 구성되며, 적어도 하나의 삼중 결합이고 2 내지 10개 탄소 원자의 직쇄 또는 분지쇄의 탄화수소 사슬기(즉 C2-C10 알키닐)를 가지고, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 알키닐은 하나 이상의 치환기에 의해 치환될 수 있고, 상기 치환기는 독립적으로 알킬, 할로겐화 알킬, 알콕시, 할로겐화 알콕시, 히드록시알킬, 할로겐화 히드록시알킬, 시클로알킬, 할로겐화 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 히드록실, 할로겐, 시아노, 니트로이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 의미하며, 바람직하게는 불소, 염소 또는 브롬이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐화"는 동일한 원자 또는 상이한 원자에 의해 할로겐에 의해 치환되는 것을 의미하며, 이는 이치환 또는 삼치환과 같이 한 번 또는 여러 번 치환될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐화 알킬"은 할로겐(바람직하게는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드)으로 치환된 알킬기를 나타내며, 여기에서 알킬은 상기 정의된 바와 같다. "할로겐화 알킬"은 할로겐으로 1회 이상 치환될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐화 히드록시알킬"은 할로겐(바람직하게는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드)으로 치환된 히드록시알킬기를 나타내며, 여기에서 히드록시알킬은 상기 정의된 바와 같다. "할로겐화 히드록시알킬"은 할로겐으로 1회 이상 치환될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐화 알콕시"는 할로겐(바람직하게는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드)으로 치환된 알콕시를 나타내며, 여기에서 알콕시는 상기 정의된 바와 같다. "할로겐화 알콕시"는 할로겐으로 1회 이상 치환될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "할로겐화 시클로알킬"은 할로겐(바람직하게는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드)으로 치환된 시클로알킬기를 나타내며, 여기에서 시클로알킬은 상기 정의된 바와 같다. "할로겐화 시클로알킬"은 할로겐으로 1회 이상 치환될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "m"은 바람직하게는 1, 2이다. 예를 들어 2개의 동일한 R1 또는 2개의 상이한 R1일 수 있다. R1을 F, Cl로 예를 들면, m이 2일 때, 2개의 상이한 치환 위치를 갖는 Cl, 또는 2개의 상이한 치환 위치를 갖는 F, 또는 2개의 상이한 치환 위치 Cl 및 F의 조합일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "n"은 바람직하게는 존재하지 않거나, 1, 2이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "o"는 바람직하게는 1, 2, 3이다.
본 발명의 화학식 I, 화학식 II-A 내지 II-C, 화학식 IIIA 내지 IIIC, 화학식 IVA 내지 IVC, 화학식 VA 내지 VC의 화합물에서, *C는 키랄성을 가지며, 그 배열은 R-배열 또는 S-배열, 또는 R-배열과 S-배열의 혼합물이다. 보다 바람직하게는 그 배열은 S형이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "용매화물"은 용질(예를 들어, 본 발명의 일반식 I 내지 일반식 V-A 내지 V-C의 화합물) 및 용매에 의해 형성된 가변 화학량론의 복합물을 의미한다. 본 발명의 목적을 위해, 상기 용매는 용질의 생물학적 활성을 방해해서는 안 된다. 적합한 용매의 예시에는 물, 메탄올, 에탄올 및 아세트산을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는, 사용되는 용매는 약학적으로 허용되는 용매이다. 적합한 약학적으로 허용되는 용매는 물, 에탄올 및 아세트산을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 보다 바람직하게는, 사용되는 용매는 물이다.
본 발명에서는 본 발명의 상기 화합물의 염을 제조하기 위하여 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려진 방법을 사용한다. 상기 염은 유기산염, 무기산염 등일 수 있다. 상기 유기산염은 시트르산염, 푸마르산염, 옥살산염, 말산염, 젖산염, 캄포르설폰산염(camphorsulfonic acid), p-톨루엔설폰산염, 메탄설폰산염, 시트르산염, 석신산염, 타타르산염, 말레산염, 벤조산염 등을 포함한다. 상기 무기산염은 할로겐화 수소산염, 황산염, 인산염, 질산염 등을 포함한다. 예를 들어, 메탄설폰산(methanesulfonic acid), 트리플루오로메탄설폰산(trifluoromethanesulfonic acid) 등과 같은 저급 알킬설폰산과 메탄설폰산염(methanesulfonate), 트리플루오로메탄설폰산염(trifluoromethanesulfonate)을 형성할 수 있다. 벤젠설폰산 또는 p-톨루엔설포닉산 등과 같은 아릴설폰산과 p-톨루엔설폰산염, 벤젠설폰산염을 형성할 수 있다. 아세트산, 푸마르산, 타르타르산, 옥살산, 말레산, 말산, 석신산 또는 시트르산 등과 같은 유기 카르복실산과 상응하는 염을 형성할 수 있다. 글루탐산 또는 아스파르트산과 같은 아미노산과 글루탐산염 또는 아스파르트산염을 형성할 수 있다. 할로겐화 수소산(불화 수소산, 브롬화 수소산, 요오드화 수소산, 염화 수소산), 질산, 탄산, 황산 또는 인산 등과 같은 무기산과 상응하는 염을 형성할 수도 있다.
본 발명의 제2 목적은 상기 어느 하나의 기술 방안에 따른 화합물 중 하나 이상을 포함하는 약학 조성물을 제공하는 데에 있다. 본 발명의 상기 약학 조성물은 상기 어느 하나의 기술 방안에 따른 화합물 중 하나 이상과 기타 화합물로 구성되거나, 상기 어느 하나의 기술 방안에 따른 화합물 중 하나 이상으로 구성될 수 있다.
다른 일 양상에 있어서, 본 발명에서 제공하는 것은 본원에 개시된 일반식 I 내지 일반식 V-A 내지 V-C의 화합물 및 그 입체이성질체 또는 그 입체이성질체 혼합물 또는 그 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물을 사용하여 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성을 억제하거나 카세인 키나아제 1ε(CK1ε) 활성의 억제로부터 이익을 얻는 질병, 장애 또는 병증을 치료한다.
보다 바람직한 방안에 있어서, 본 발명은 투여가 필요한 대상에게 치료 유효량의 적어도 하나의 화합물을 함유하는 조성물을 투여함으로써, 상기 대상의 카세인 키나아제 1ε 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 여기에서 상기 화합물의 구조식은 일반식 I 내지 일반식 V-A 내지 V-C 화합물이다.
일부 실시방식에 있어서, 상기 투여가 필요한 대상은 암을 앓고 있다. 상기 암은 혈액 종양 및 고형 종양을 포함하며, 예를 들어 B 세포 림프종, 다발성 골수종, 백혈병, 폐암, 유방암, 전립선암, 방광암, 난소암, 췌장암, 육종, 결장암, 신장암, 간암, 흑색종, 뇌종양이 있다.
추가적 실시방식에 있어서, 상기 투여가 필요한 대상은 B 세포 림프종을 앓고 있다. 예를 들어 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 만성 림프구성 림프종, 만성 림프구성 백혈병, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질구성 림프종/발덴스트롬 거대글로불린혈증(
Figure pct00029
), 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 형질 세포종, 림프절외 변연부 B 세포 림프종, 림프절 변연부 B 세포 림프종, 외투 세포 림프종, 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출성 림프종, 버킷 림프종(Burkitt lymphoma))/백혈병 또는 림프종 유사 육아종증이 있다.
추가적 실시방식에 있어서, 상기 투여가 필요한 대상은 자가면역질환을 앓고 있다. 예를 들어 류마티스 관절염, 전신홍반루푸스, 다발성경화증, 염증성 장염, 크론병, 결장염, 자가면역용혈성빈혈, 강직성척추염, 천포창, 두드러기, 천식, 시신경염, 건선, 만성폐쇄성기도질환, 피부염, 탈모증이 있다.
추가적 실시방식에 있어서, 상기 투여가 필요한 대상은 T 세포 림프종을 앓고 있다. 예를 들어 말초 T 세포 림프종, 역형성 큰세포 림프종, 림프절외 NK/T 세포 림프종, 피부 말초 T 세포 림프종, T 전림프구성 백혈병, 혈관면역모세포 T 세포 림프종, 성인 T 세포 백혈병/림프종, 간비장 T 세포 림프종, 장 T 세포 림프종, 유방 이식물 관련 역형성 큰세포 림프종, T 대형 과립 림프구성 백혈병이 있다.
본 발명은 CK1ε 억제제의 제조에서 본 발명에 따른 화합물 또는 그 약용 가능한 염의 응용을 더 제공하며, 특히 세포 증식 질환 치료의 제조에서의 응용을 제공한다. 상기 세포 증식성 질환에는 암이 포함된다. 즉, 본 발명은 일반식 I 내지 일반식 V-A 내지 V-C의 화합물, 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체의 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물을 단독으로 또는 다른 약물과 함께 증식성 질환(예를 들어 암)의 치료에 응용하는 것을 더 제공한다. 본 발명에서 제공하는 화합물 또는 그 약용 가능한 염과 함께 사용할 수 있는 항종양 약물은 유사분열 억제제(예를 들어, 빈블라스틴(vinblastine), 빈데신(vindesine) 및 비노렐빈(vinorelbine)); 튜불린 분해 억제제(예를 들어, 파클리탁셀(paclitaxel); 알킬화 시약(예를 들어, 시스플라틴(cisplatin), 카보플라틴(carboplatin), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 클로람부실(chlorambucil), 벤다무스틴(bendamustine)); 항대사물질(예를 들어, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 테가푸르(tegafur), 메토트렉세이트(methotrexate), 시타라빈(cytarabine), 히드록시우레아(hydroxyurea)); 삽입 가능 항생제(예를 들어, 아드리아마이신(adriamycin), 미토마이신(mitomycin), 블레오마이신(bleomycin)); 효소(예를 들어, 아스파라기나아제(asparaginase)); 토포이소머라아제(topoisomerase) 억제제(예를 들어, 에토비사이드(etoposide) 및 캄프토테신(camptothecin)), 생물학적 반응 조절제(예를 들어, 인터페론(interferon)), 면역조절제(예를 들어, 레날리도마이드(lenalidomide)); BTK 억제제(예를 들어, 이브루티닙(ibrutinib), 아칼라브루티닙(acalabrutinib)); Bcl-2 억제제(예를 들어, 베네토클락스(venetoclax)); anti-CD20 단일클론성 항체(예를 들어, 리툭시맙(rituximab), 오파투무맙(ofatumumab), 아테졸리주맙(atezolizumab)); mTOR 억제제(예를 들어 라파마이신(rapamycin), AZD8055), mTORC1 억제제(예를 들어 에베로리무스(everolimus), 템시로리무스(temsirolimus)), AKT 억제제(예를 들어 MK-2206, GSD690693), PI3K 억제제(예를 들어 이델라리시브(idelalisib), 듀벨리십(duvelisib)); 프로테아좀 억제제(예를 들어 보르테조밉(bortezomib), 카르필조밉(carfilzomib), 익사조밉(ixazomib)); EGFR 억제제(예를 들어 엘로티닙(erlotinib), 제피티닙(gefitinib), 오시머티닙(osimertinib)), VEGFR 억제제(소라페닙(sorafenib), 카보잔티닙(cabozantinib), 레고라페닙(regorafenib), 렌바티닙(lenvatinib), 아파티닙(apatinib)), CDK 억제제(예를 들어, 팔보시클립(palbociclib), 리보시클립(ribociclib)), PD-1/PD-L1 억제제(펨브로리주맙(pembrolizumab), 니볼루맙(nivolumab), 토리팔리맙(toripalimab), 신틸리주맙(sintilimab)) 중 적어도 하나를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명은 상기 화합물 또는 약학 조성물과 방사선 치료를 조합하여 세포 증식 질병 치료에 사용하는 방법에 더 관한 것이다. 방사선 치료를 수행하는 기술은 당업계에 공지되어 있으며, 이러한 기술은 본 출원에 기재된 조합 요법에 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 하나 이상의 스테로이드 항염증 약물, 비스테로이드성 항염증 약물 또는 면역선택적 항염증 유도체 및 이들의 조합과 함께 사용할 수 있다.
본 출원인의 이전 특허 문헌에서 BTK 비가역적 억제제 및 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물(특허 출원 번호: 201710998664.5)을 보고하였으며, 여기에서 17a가 대표적인 화합물이다. 본 출원의 화합물에 대한 추가 연구를 통해, 본 출원의 화합물과 BTK 억제제를 함께 사용하면 우수한 상승적 항종양 활성을 나타낸다는 것을 발견하였다.
본 발명자는 본 발명의 화합물이 강력한 체외 CK1ε 키나아제 및 체외 항종양 세포 억제 활성을 갖는다는 것을 실험을 통해 확인하였다. OCI-LY10 피하 이종 모델에서 본 발명의 화합물은 단일 약물로 사용했을 때 우수한 항종양 효과를 나타내며, BTK 억제제와 함께 사용했을 때 우수한 상승적 항종양 활성을 나타냈다. 본 발명의 화합물은 우수한 약동학적 특성을 가지며, 단독으로 또는 다른 화합물과 조합하여 카세인 키나아제 1ε 활성의 억제로부터 이익을 얻는 암, 자가면역질환 등을 포함한 질병, 장애 또는 병증 치료에 사용할 수 있다.
이하에서는 실시예를 통해 본 발명의 실행 가능성을 설명한다. 본 기술분야의 당업자는 종래 기술의 시사점을 기반으로 상응하는 기술적 특징을 수정 또는 대체할 수 있으며 이는 본 발명의 보호 범위에 속함을 이해해야 한다.
실시예 1: 중간체 4의 합성
Figure pct00030
단계 1: 250mL 반응 플라스크에 화합물 1(117mmol)과 40mL DMF를 넣고 0℃에서 교반하여 용해한다. 그 다음 프로필 클로라이드(121mmol)를 천천히 점적하며, 점적이 완료되면 대량의 백색 고체가 석출된다. 계속해서 보온하여 1시간 반응시킨 후 물 200mL를 첨가하고 1시간 교반한 후 여과 및 건조하여 고체 생성물 중간체 2를 수득한다.
단계 2: 100mL 반응 플라스크에 중간체 2(10mmol), H2N-B(20mmol), 톨루엔 20mL를 첨가하고 실온에서 교반하며 PCl3(10mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 110℃까지 승온시키고 밤새 환류한다. TLC로 반응 종료를 검출한 후, 에틸 아세테이트와 물로 추출하여 건조, 농축한 후, 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 중간체 3을 수득한다.
단계 3: 100mL 반응 플라스크에 중간체 3(8mmol), 아세트산나트륨(11.2mmol), 빙초산 20mL를 첨가하고 상온에서 교반한 후, 브로민(8mmol)을 천천히 점적한다. 점적이 완료되면 계속해서 실온에서 약 3시간 동안 반응시키며, TLC로 반응이 기본적으로 완료된 것을 검출한다. 티오황산나트륨 수용액을 첨가하고 15분 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 및 물로 추출하여 건조하며, 농축된 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 중간체 4를 수득한다.
상기 중간체 4의 합성 경로와 상기 방법을 사용하여 하기 화합물을 제조한다.
설명의 편의를 위해, 화합물 1은 다음과 같이 정의한다. R1로 치환된 2-아미노벤조산;
Figure pct00031
4a(화합물 1 중 R1은 H, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온; 3단계 반응, 총 수율 55%; LC-MS(ESI-MS):329[M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.91 - 7.76 (m, 2H), 7.71 - 7.49 (m, 5H), 7.22 (dt, J = 7.3, 2.9 Hz, 1H), 4.62 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 2.10 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Figure pct00032
4b(화합물 1 중 R1은 6위치 치환 Cl, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온; 3단계 반응, 총 수율 49%; LC-MS(ESI-MS):363[M+H]+; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.71 (dd, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 14.4, 6.3 Hz, 1H), 7.62 - 7.48 (m, 5H), 7.20 - 7.13 (m, 1H), 4.52 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 2.03 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Figure pct00033
4c(화합물 1 중 R1은 6위치 치환 F, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 28%; LC-MS (ESI-MS): 347[M+H]+；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.73 (dd, J = 13.5, 8.1 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 22.5, 6.9 Hz, 5H), 7.16 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 4.52 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Figure pct00034
4d(화합물 1 중 R1은 5위치 치환 F, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-6-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 39%; LC-MS (ESI-MS): 347 [M+H]+.
Figure pct00035
4e(화합물 1 중 R1은 3위치 치환 F와 6위치 치환 Cl, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-8-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 26%; LC-MS (ESI-MS): 381 [M+H]+.
Figure pct00036
4f(화합물 1 중 R1은 3위치 치환 F와 6위치 치환 F, H2N-B 중 B는 페닐)
2-(1-브로모에틸)-5,8-디플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 20%; LC-MS (ESI-MS): 365 [M+H]+.
Figure pct00037
4g(화합물 1 중 R1은 H, H2N-B 중 B는 피리딘-3-일)
2-(1-브로모에틸)-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 36%; LC-MS (ESI-MS): 330 [M+H]+.
Figure pct00038
4h(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 피리딘-3-일)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린옥사졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 33%; LC-MS (ESI-MS): 364 [M+H]+.
Figure pct00039
4i(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 5-플루오로피리딘-3-일)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(5-플루오로피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 35%; LC-MS (ESI-MS): 382 [M+H]+.
Figure pct00040
4j(화합물 1 중 R1은 H, H2N-B 중 B는 3-메톡시프로필)
2-(1-브로모에틸)-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 45%; LC-MS (ESI-MS): 325 [M+H]+.
Figure pct00041
4k(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 3-메톡시프로필)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 46%; LC-MS (ESI-MS): 359 [M+H]+.
Figure pct00042
4l(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 2-(테트라히드로푸란-2-일)에틸)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(2-(테트라히드로푸란-2-일)에틸)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 30%; LC-MS (ESI-MS): 385[M+H]+.
Figure pct00043
4m(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 시클로헥실)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-시클로헥실퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 18%; LC-MS (ESI-MS): 369 [M+H]+.
Figure pct00044
4n(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 피페리딘-1-일)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(피페리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 36%; LC-MS (ESI-MS): 370 [M+H]+.
Figure pct00045
4o(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 모르폴린-1-일)
2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-모르폴린퀴나졸린-4(3H)-온, 3단계 반응, 총 수율 40%; LC-MS (ESI-MS): 372 [M+H]+.
Figure pct00046
4p(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 4-tert-부톡시카르보닐피페라지닐)
4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥사이도퀴나졸린-3(4H)-일)피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르, 3단계 반응, 총 수율 28%; LC-MS (ESI-MS): 471 [M+H]+.
Figure pct00047
4q(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 3-트리플루오로메틸-4-tert-부톡시카르보닐피페라지닐)
4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥사이도퀴나졸린-3(4H)-일)-2-(트리플루오로메틸)피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르, 3단계 반응, 총 수율 36%; LC-MS (ESI-MS): 539 [M+H]+.
Figure pct00048
4r(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 3,3-디메틸-4-tert-부톡시카르보닐피페라지닐)
4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥사이도퀴나졸린-3(4H)-일)-2,2-디메틸피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르, 3단계 반응, 총 수율 31%; LC-MS (ESI-MS): 499 [M+H]+.
Figure pct00049
4s(화합물 1 중 R1은 6위치 치환된 Cl, H2N-B 중 B는 N-Boc-피페리딘-4-일)
4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥사이도퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르, 3단계 반응, 총 수율 15%; LC-MS (ESI-MS): 470 [M+H]+.
실시예 2: 중간체 9의 합성
Figure pct00050
단계 1; 100ml 반응 플라스크에 화합물 5(5g, 19mmol), 트리페닐메틸 클로라이드(10.7g, 38mmol), 탄산칼륨(10.6g, 76mmol), DMF 50mL를 첨가한 후, 80℃까지 가열하여 약 24시간 동안 반응시키며 TLC를 거쳐 반응 종료를 검출한다. 상온으로 식힌 후 에틸 아세테이트와 물을 넣고 여과하여 불용물을 제거하고 에틸 아세테이트층을 분리하며, 감압 농축한 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 6.75g 생성물 중간체 6을 수득하며, 수율은 73%였다.
단계 2: 500ml 반응 플라스크에 중간체 6(18mmol), 화합물 7(27mmol), 탄산칼륨(54mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(tetrakis(triphenylphosphine)palladium)(0.9mmol), 디옥산 135ml, 물 45ml를 첨가한다. 교반하며 100℃까지 승온하여 14시간 동안 반응시킨 후, TLC로 반응 종료를 검출한다. 실온으로 온도를 낮추고 반응액을 규조토로 여과하며 에틸 아세테이트로 여과 케이크를 헹구고 여액을 회수하여 물 100ml 및 300ml 에틸 아세테이트를 첨가해 추출한다. 에틸 아세테이트층을 분리하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물 중간체 8을 수득한다.
단계 3: 100ml 반응 플라스크에 중간체 8(3.85mmol)과 디클로로메탄 30ml를 넣고 TFA(15.4mmol) 1.15ml와 트리이소프로필실란(15.4mmol) 3.1ml를 넣고 상온에서 18시간 반응 후 TLC로 반응 종료를 검출한 다음 곧바로 용매가 거의 건조될 때까지 감압 회전 증발시킨다. 20ml의 MTBE를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 슬러리화한 후 여과하여 표적 생성물 중간체 9를 수득한다.
상기 중간체 9의 합성 경로와 상기 방법을 사용하여 하기 화합물을 제조한다.
화합물 7에서 공액 고리의 탄소 원자 위치는 다음과 같이 정의한다.
Figure pct00051
Figure pct00052
9a(화합물 7 중: R2는 메틸, X는 CF, R3 는H)
3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민, 3단계 반응, 총 수율 55%; LC-MS (ESI-MS): 278 [M+H]+.
Figure pct00053
9b(화합물 7 중: R2는 이소프로필, X는 CF, R3 는H)
3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민, 3단계 반응, 총 수율 42%; LC-MS (ESI-MS): 306 [M+H]+.
Figure pct00054
9c(화합물 7은 3-플루오로-4-메톡시페닐보론산으로 대체)
3-(3-플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민, 3단계 반응, 총 수율 58%; LC-MS (ESI-MS): 260 [M+H]+.
Figure pct00055
9d(화합물 7은 3-플루오로-4-이소프로필옥시페닐보론산으로 대체)
3-(3-플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민, 3단계 반응, 총 수율 55%; LC-MS (ESI-MS): 288 [M+H]+.
실시예 4: 중간체 10의 합성
Figure pct00056
500ml 반응 플라스크에 3-요오도-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(5.2g, 20mmol), 탄산칼륨(4.2g, 30mmol), DMF 100mL를 넣고 상온에서 교반하며 화합물 4(8.6g, 26mmol)를 첨가한다. 실온에서 약 12시간 동안 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 에틸 아세테이트와 물을 첨가해 추출하고 물로 3회 세척한 후 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 생성물 중간체 10을 수득한다.
Figure pct00057
10a(화합물 4는 2-(1-브로모에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 즉 R1=H)
2-(1-(4-아미노-3-요오도-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온; 수율 83%. LC-MS (ESI-MS): 510 [M+H]+.
실시예 5: 중간체 (R)-12a 내지 (R)-12d의 합성
Figure pct00058
단계 1: 1000ml 반응 플라스크에 (R)-(+)-메틸 락테이트(20g, 192mmol) 및 400mL 메틸 t-부틸 에테르를 첨가하고, 실온에서 교반하며 벤질 브로마이드(benzyl bromide)(36g, 211mmol) 및 산화은(44g, 192mmol)을 첨가한다. 실온에서 약 20시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 반응액을 규조토로 여과하고, 여과 케이크를 메틸 tert-부틸 에테르로 세척하고, 여액을 감압 농축한 후 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 무색 유상 생성물 (R)-2-(벤질옥시)메틸 프로피오네이트 29.8g을 수득하며, 수율은 80%였다. 키랄 순도 ee%: 99.0%, 순상 CHIRALCEL OD-H 칼럼 상에서 키랄-HPLC로 측정, 보류 시간 10.12분(거울상 이성질체 보류 시간 8.07분). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.44 - 7.27 (m, 5H), 4.69 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.44 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
단계 2: 반응 플라스크에 (R)-2-(벤질옥시)메틸 프로피오네이트(11g, 57mmol) 및 메탄올 100mL를 첨가한 다음, 교반하면서 수산화리튬(2.1g, 85mmol)을 첨가하고, 실온에서 대략 5시간 동안 반응시키며 TLC로 반응 종료를 검출한다. 0.1N 염산 수용액을 넣어 중성으로 중화하고 감압 농축하여 대부분의 메탄올을 제거한다. 그 후 에틸 아세테이트와 물을 넣어 추출하고 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물은 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 무색 유상 생성물 (R)-2-(벤질옥시)프로피온산 8.0g을 수득하며, 수율은 78%였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.45 - 7.28 (m, 5H), 4.72 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
단계 3: 반응 플라스크에 치환된 2-아미노-벤조산(19mmol), (R)-2-(벤질옥시)프로피온산(4.0g, 22mmol) 및 트리페닐 포스파이트(triphenyl phosphite)(23g, 76mmol) 및 피리딘 50mL를 첨가한다. 반응 혼합물을 60℃로 가열하고 2시간 동안 교반한 다음, B-NH2(38mmol)를 반응계에 첨가하고, 계속해서 70℃까지 가열하여 교반하며 약 12시간 동안 반응시키며, TLC로 반응 종료를 모니터링한다. 실온으로 냉각하고 감압 농축하여 대부분의 피리딘을 제거한다. 에틸 아세테이트를 첨가하고 2M 황산수소칼륨 수용액으로 3회 세척하며, 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조하며 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색의 고체 생성물 중간체(R)-11을 수득한다.
단계 4: 반응 플라스크에 (R)-11(5.4mmol) 및 디클로로메탄 50mL를 첨가하고 -10℃로 강온시킨다. 점적 농도가 2M인 삼브롬화붕소 디클로로메탄 용액 28mL를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 온도를 높이고 약 2시간 동안 반응시키며 TLC로 반응 종료를 검출한다. 반응 플라스크를 얼음조에 넣고 물을 첨가하여 반응을 ?칭시킨 후, 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 디클로로메탄층을 분리한 후 무수 황산나트륨으로 건조하고 감압 농축하며 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물 (R)-12를 수득한다.
상기 중간체 (R)-12의 합성 경로와 상기 방법을 사용하여 하기 화합물을 제조한다.
Figure pct00059
(R)-12a(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 H이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(R)-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.4g, 마지막 1단계 수율은 97%. LC-MS (ESI-MS): 267 [M+H]+.
Figure pct00060
(R)-12b(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 Cl이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(R)-5-클로로-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.6g, 마지막 1단계 수율은 98%. 키랄 순도 ee%: 98.5%, 역상 CHIRALPAK IG-3 칼럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 52.7분. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.70 - 7.62 (m, 2H), 7.60 - 7.52 (m, 3H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.32 (dd, J = 7.5, 2.2 Hz, 1H), 7.27 - 7.23 (m, 1H), 4.45 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 1.24 (d, J = 6.4 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 301 [M+H]+.
Figure pct00061
(R)-12c(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 F이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(R)-5-플루오로-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.5g, 마지막 1단계 수율은 98%. LC-MS (ESI-MS): 285 [M+H]+.
Figure pct00062
(R)-12d(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 Cl이고, B-NH2 중 B는 피리딘-3-일)
(R)-5-클로로-2-(1-히드록실에틸)-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온, 1.5g, 마지막 1단계 수율은 92%. LC-MS (ESI-MS): 302 [M+H]+.
실시예 6: 중간체 (S)-12a 내지 (S)-12d의 합성
Figure pct00063
실시예 5의 중간체 (R)-12의 제조 방법을 참조하여, (S)-(-)-메틸 락테이트를 출발 물질로 사용하여 하기 화합물을 제조한다.
Figure pct00064
(S)-12a(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 H이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(S)-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.4g, 마지막 1단계 수율은 97%. LC-MS (ESI-MS): 267 [M+H]+.
Figure pct00065
(S)-12b(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 Cl이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(S)-5-클로로-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.5g, 마지막 1단계 수율은 93%. 키랄 순도 ee%: 98.5%, 역상 CHIRALPAK IG-3 칼럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 43.7분. LC-MS (ESI-MS): 301 [M+H]+.
Figure pct00066
(S)-12c(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 F이고, B-NH2 중 B는 페닐)
(S)-5-플루오로-2-(1-히드록실에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온, 1.4g, 마지막 1단계 수율은 91%. LC-MS (ESI-MS): 285 [M+H]+.
Figure pct00067
(S)-12d(치환된 2-아미노-벤조산에서 R1은 6위치 치환 Cl이고, B-NH2 중 B는 피리딘-3-일)
(S)-5-클로로-2-(1-히드록실에틸)-3-(피리딘-3-일)퀴나졸린-4(3H)-온, 1.5g, 마지막 1단계 수율은 92%. LC-MS (ESI-MS): 302 [M+H]+.
실시예 7: 표적 화합물 II-A-1 내지 II-A-6, II-A-12 내지 II-A-15의 합성
Figure pct00068
500ml 반응 플라스크에 화합물 10(2.0mmol), 중간체 7(3.0mmol), 탄산칼륨(4.0mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.02mmol), 용매 디옥산 9ml, 물 3ml를 첨가한다. 그 후 교반하며 100℃까지 승온하여 약 14시간 동안 반응시킨 후, TLC로 반응 종료를 검출한다. 실온으로 온도를 낮추고 반응액을 규조토로 여과하며 에틸 아세테이트로 세척한다. 여액에 물 20ml 및 50ml 에틸 아세테이트를 첨가해 추출하며, 에틸 아세테이트층을 분리하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-1 (R2=CH3, R3=H, X=CF): 백색 고체 생성물, 0.76g, 수율 72%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.89 - 7.72 (m, 2H), 7.61 - 7.40 (m, 2H), 7.31 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.16 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.90 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.03 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.45 (brs, 2H), 3.94 (s, 3H), 1.93 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-2 (R2=CH(CH3)2, R3=H, X=CF): 백색 고체 생성물, 0.78g, 수율 70%. LC-MS (ESI-MS): 554 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-3 (R2=CH2CH3, R3=H, X=CF): 백색 고체 생성물, 0.68g, 수율 63%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.92 - 7.73 (m, 2H), 7.49 (dt, J = 18.2, 7.7 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dt, J = 14.7, 7.3 Hz, 2H), 6.89 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.03 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.38 (brs, 2H), 4.16 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.48 (t, J = 7.0 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 540 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-4 (R2=시클로프로필, R3=H, X=CF): 백색 고체 생성물, 0.41g, 수율 37%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (ddd, J = 11.6, 9.6, 4.3 Hz, 2H), 7.55 - 7.45 (m, 2H), 7.31 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.24 - 7.13 (m, 2H), 6.89 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.03 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.49 (brs, 2H), 3.87 (ddd, J = 9.0, 5.9, 3.1 Hz, 1H), 1.93 (t, J = 6.0 Hz, 3H), 0.89 - 0.82 (m, 4H). LC-MS (ESI-MS): 552 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-5 (R2=CH3, R3=H, X=CCl): 백색 고체 생성물, 0.44g, 수율 41%. LC-MS (ESI-MS): 542 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-6 (R2=CH3, R3=H, X=CCN): 백색 고체 생성물, 0.42g, 수율 39%. LC-MS (ESI-MS): 533 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-12 (R2=CH3, R3=6-플루오로, X=CH): 백색 고체 생성물, 0.36g, 수율 34%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.91 - 7.71 (m, 2H), 7.63 - 7.41 (m, 2H), 7.31 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.24 - 7.18 (m, 1H), 7.15 (dd, J = 14.5, 7.0 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 11.1, 4.4 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.03 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.49 (brs, 2H), 3.94 (s, 3H), 1.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-13 (R2=CH3, R3=H, X=N): 백색 고체 생성물, 0.75g, 수율 74%. LC-MS (ESI-MS): 509 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-14 (R2=CH(CH3)2, R3=H, X=N): 백색 고체 생성물, 0.72g, 수율 67%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (dd, J = 7.9, 0.9 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.89 - 7.75 (m, 2H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.47 (td, J = 7.7, 1.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.16 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.96 - 6.87 (m, 1H), 6.67 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.02 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.60 (brs, 2H), 5.33 - 5.22 (m, 1H), 4.06 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 1.92 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.36 (dd, J = 6.2, 3.0 Hz, 6H). LC-MS (ESI-MS): 537 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-15 (R2=Ph, R3=H, X=N): 백색 고체 생성물, 0.82g, 수율 72%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.96 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.81 (dt, J = 15.0, 7.4 Hz, 2H), 7.51 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.36 - 7.23 (m, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 6.90 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.03 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.46 (brs, 2H), 1.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 571 [M+H]+.
실시예 8: 표적 화합물 II-A-7 내지 II-A-11의 합성
Figure pct00069
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4d]피리미딘-4-아민(1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4(1.1mmol), 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 첨가하고, 40℃로 승온하여 약 15시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 넣어 추출하고 물로 헹구며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 목표 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-7(R1=5-클로로): 백색 고체 생성물, 0.48g, 수율 85%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 11.8, 4.4 Hz, 1H), 7.16 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.93 - 6.84 (m, 2H), 6.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.00 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.33 (brs, 2H), 3.96 (s, 3H), 1.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-8(R1=5-플루오로): 백색 고체 생성물, 0.36g, 수율 66%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 7.71 (dd, J = 13.5, 8.1 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 9.3 Hz, 2H), 6.87 (dd, J = 17.1, 8.6 Hz, 2H), 6.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.00 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.31 (brs, 2H), 3.95 (s, 3H), 1.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 544 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-9(R1=6-플루오로): 백색 고체 생성물, 0.38g, 수율 70%. LC-MS (ESI-MS): 544 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-10(R1=5-클로로-8-플루오로): 백색 고체 생성물, 0.34g, 수율 58%. LC-MS (ESI-MS): 578 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-11(R1=5,8-디플루오로): 백색 고체 생성물, 0.37g, 수율 65%. LC-MS (ESI-MS): 562 [M+H]+.
실시예 9: 표적 화합물 II-A-16의 합성
Figure pct00070
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-이소프로폭시페닐)-1H-피라졸로[3,4d]피리미딘-4-아민(9b, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4c(1.1mmol), 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 첨가하고, 40℃로 승온하여 약 15시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 넣어 추출하고 물로 헹구며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 목표 생성물 II-A-16 0.36g 수득하며, 수율을 63%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.87 (brs, 2H), 7.60 (brs, 2H), 7.47 - 7.28 (m, 2H), 7.24 - 7.02 (m, 3H), 6.79 (brs, 1H), 6.31 (brs, 1H), 5.90 (brs, 1H), 4.71 (brs, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.31 (s, 6H). LC-MS (ESI-MS): 572 [M+H]+.
실시예 10: 표적 화합물 II-B-1 내지 II-B-3의 합성
Figure pct00071
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4(1.1mmol), 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 첨가하고, 40℃로 승온하여 약 15시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 넣어 추출하고 물로 헹구며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 목표 생성물을 수득한다.
목표 생성물 II-B-1(R1=H, R5=H): 백색 고체 생성물, 0.37g, 수율 71%. LC-MS (ESI-MS): 527 [M+H]+.
목표 생성물 II-B-2(R1=5-클로로, R5=H): 백색 고체 생성물, 0.36g, 수율 65%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 2.3 Hz, 0.5H), 8.39 (d, J = 3.6 Hz, 0.5H), 8.30 (d, J = 4.3 Hz, 0.5H), 8.08 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 7.81 - 7.72 (m, 1.5H), 7.67 (td, J = 8.1, 3.9 Hz, 1.5H), 7.58 - 7.50 (m, 1H), 7.38 (dd, J = 8.0, 4.9 Hz, 0.5H), 7.29 - 7.23 (m, 0.5H), 7.20 (t, J = 7.3 Hz, 0.5H), 6.92 - 6.79 (m, 2H), 5.99 (q, J = 6.7 Hz, 0.5H), 5.90 (q, J = 6.8 Hz, 0.5H), 5.39 (brs, 2H), 3.95 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.91 (t, J = 6.1 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 561 [M+H]+.
목표 생성물 II-B-3(R1=5-클로로, R5=5-플루오로): 백색 고체 생성물, 0.35g, 수율 60%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 0.6H), 8.26 (d, J = 2.6 Hz, 0.6H), 8.16 (d, J = 2.5 Hz, 0.6H), 8.12 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.69 (td, J = 8.0, 1.3 Hz, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 1.4H), 7.46 - 7.41 (m, 0.4H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 6.88 (dd, J = 14.2, 7.0 Hz, 1H), 6.69 - 6.57 (m, 0.7H), 5.97 (dq, J = 24.5, 6.7 Hz, 1.3H), 5.33 (d, J = 24.5 Hz, 2H), 3.96 (d, J = 3.3 Hz, 3H), 2.11 - 1.76 (m, 3H). LC-MS (ESI-MS): 579 [M+H]+.
실시예 11: 표적 화합물 II-C-1, II-C-5, II-C-6의 합성
Figure pct00072
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4(1.1mmol), 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 첨가하고, 40℃로 승온하여 약 15시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 넣어 추출하고 물로 헹구며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 목표 생성물을 수득한다.
목표 생성물 II-C-1(Y=CH, Z=CH2): 백색 고체 생성물, 0.41g, 수율 72%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.84 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.36 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.66 (brs, 2H), 4.00 - 3.86 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.73 (qd, J = 12.5, 3.4 Hz, 1H), 2.47 (qd, J = 12.7, 3.4 Hz, 1H), 1.99 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.86 - 1.77 (m, 1H), 1.66 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.44 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.37 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.29 (dd, J = 16.7, 6.7 Hz, 1H), 1.16 - 1.05 (m, 1H), 0.43 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 0.11 (dd, J = 26.0, 13.0 Hz, 1H). LC-MS (ESI-MS): 566 [M+H]+.
목표 생성물 II-C-5(Y=N, Z=CH2): 백색 고체 생성물, 0.40g, 수율 71%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 1H), 7.59 (dt, J = 6.7, 3.3 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 7.7, 1.1 Hz, 1H), 7.25 - 7.17 (m, 1H), 6.84 (dd, J = 11.8, 4.3 Hz, 1H), 6.53 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.54 (brs, 2H), 4.02 - 3.90 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.88 - 3.72 (m, 1H), 2.98 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 2.26 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 1.95 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.78 - 1.68 (m, 3H), 1.58 - 1.45 (m, 1H), 1.29 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 1.22 - 1.06 (m, 1H), 0.45 (dtd, J = 12.9, 9.0, 4.0 Hz, 1H). LC-MS (ESI-MS): 567 [M+H]+.
목표 생성물 II-C-6(Y=N, Z=O): 백색 고체 생성물, 0.31g, 수율 55%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.39 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 11.7, 4.7 Hz, 1H), 6.78 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.48 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.36 (brs, 2H), 4.18 (td, J = 11.2, 3.1 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 14.4, 7.3 Hz, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.80 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 11.4, 9.2 Hz, 1H), 3.37 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.77 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.40 (dd, J = 11.4, 9.2 Hz, 1H), 1.87 (d, J = 6.9 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 569 [M+H]+.
실시예 12: 표적 화합물 II-C-2의 합성
Figure pct00073
단계 1: 20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르(1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 순서대로 첨가한다. 온도를 40℃까지 승온하여 약 15시간 동안 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 그 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척한 후 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.46g 중간체 13을 수득하며, 수율은 69%였다.
단계 2: 20mL 반응 플라스크에 중간체 13(0.6mmol), 디클로로메탄 6mL를 넣고 트리플루오로아세트산 1mL를 첨가한다. 상온에서 약 12시간 동안 반응시키고 TLC로 반응이 기본적으로 완료된 것을 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상은 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하고, 디클로로메탄층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.27g 목표 생성물인 화합물 II-C-2를 수득하며, 수율은 80%였다. LC-MS (ESI-MS): 567 [M+H]+.
실시예 13: 표적 화합물 II-C-3의 합성
Figure pct00074
20mL 반응 플라스크에 화합물 II-C-2(0.3mmol), 디클로로메탄 6mL를 첨가한 후 아세트산(0.3mmol), 1-에틸-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염(1-ethyl-(3-dimethylaminopropyl)carbonyldiimide hydrochloride)(0.6mmol)을 넣는다. 상온에서 약 3시간 동안 반응시키고 TLC로 반응 종료를 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상을 분리하고 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 151mg 백색 생성물: 화합물 II-C-3을 수득하며, 수율은 83%였다. LC-MS (ESI-MS): 609 [M+H]+.
실시예 14: 표적 화합물 II-C-4의 합성
Figure pct00075
20mL 반응 플라스크에 화합물 II-C-2(0.3mmol)와 테트라히드로푸란 4mL를 첨가한 후, 트리플루오로메틸 요오도에탄(0.3mmol), 탄산칼륨(0.6mmol)을 넣고 상온에서 약 2시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 물을 첨가하여 ?칭한 후 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 101mg의 백색에 가까운 생성물 화합물 II-C-4를 수득한다. 수율 52%였다. LC-MS (ESI-MS): 649 [M+H]+.
실시예 15: 표적 화합물 II-C-7의 합성
Figure pct00076
단계 1: 20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르(4p, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 순서대로 첨가한다. 온도를 40℃까지 승온하여 약 15시간 동안 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 그 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척한 후 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.42g 중간체 14를 수득하며, 수율은 63%였다.
단계 2: 20mL 반응 플라스크에 중간체 14(0.6mmol), 디클로로메탄 6mL를 넣고 트리플루오로아세트산 1mL를 첨가한다. 상온에서 약 12시간 동안 반응시키고 TLC로 반응이 기본적으로 완료된 것을 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상은 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하고, 디클로로메탄층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.28g 목표 생성물인 화합물 II-C-7를 수득하며, 수율은 82%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 9.11 (s, 3H), 8.32 (s, 1H), 7.78 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.20 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 13.3, 6.8 Hz, 1H), 4.04 - 3.89 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.45 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 3.02 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.85 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 1.72 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.42 (t, J = 10.8 Hz, 1H). LC-MS (ESI-MS): 567 [M+H]+.
실시예 16: 표적 화합물 II-C-8의 합성
Figure pct00077
단계 1: 20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-2,2-디메틸피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르(4r, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 순서대로 첨가한다. 온도를 40℃까지 승온하여 약 15시간 동안 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 그 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척한 후 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.38g 중간체 15를 수득하며, 수율은 55%였다.
단계 2: 20mL 반응 플라스크에 중간체 15(0.6mmol), 디클로로메탄 6mL를 넣고 트리플루오로아세트산 1mL를 첨가한다. 상온에서 약 12시간 동안 반응시키고 TLC로 반응이 기본적으로 완료된 것을 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상은 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하고, 디클로로메탄층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.28g 목표 생성물인 화합물 II-C-8를 수득하며, 수율은 79%였다. LC-MS (ESI-MS): 596 [M+H]+.
실시예 17: 표적 화합물 II-C-9의 합성
Figure pct00078
단계 1: 20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고, 실온에서 교반하여 용해시킨 후 4-(2-(1-브로모에틸)-5-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-2-(트리플루오로메틸)피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르(4q, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 순서대로 첨가한다. 온도를 40℃까지 승온하여 약 15시간 동안 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 그 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척한 후 에틸 아세테이트층을 분리하며 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.36g 중간체 16을 수득하며, 수율은 49%였다.
단계 2: 20mL 반응 플라스크에 중간체 16(0.6mmol), 디클로로메탄 6mL를 넣고 트리플루오로아세트산 1mL를 첨가한다. 상온에서 약 12시간 동안 반응시키고 TLC로 반응이 기본적으로 완료된 것을 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상은 포화 탄산수소나트륨 수용액으로 세척하고, 디클로로메탄층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.28g 목표 생성물인 화합물 II-C-9를 수득하며, 수율은 75%였다. LC-MS (ESI-MS): 636 [M+H]+.
실시예 18: 표적 화합물 II-C-10의 합성
Figure pct00079
20mL 반응 플라스크에 화합물 II-C-7(0.5mmol)와 테트라히드로푸란 5mL를 첨가한 후, 트리플루오로메틸 요오도에탄(0.5mmol), 탄산칼륨(1.0mmol)을 넣고 상온에서 약 2시간 반응시킨 후 TLC로 반응 종료를 검출한다. 물을 첨가하여 ?칭한 후 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 172mg의 백색에 가까운 생성물 화합물 II-C-10을 수득한다. 수율 53%였다. LC-MS (ESI-MS): 650 [M+H]+.
실시예 19: 표적 화합물 II-C-11의 합성
Figure pct00080
20mL 반응 플라스크에 화합물 II-C-7(0.5mmol)와 테트라히드로푸란 5mL를 첨가한 후, 요오도메탄(0.45mmol), 탄산칼륨(1.0mmol)을 넣고 상온에서 약 2시간 반응시키고 물을 첨가하여 ?칭한 후 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 125mg의 백색에 가까운 목표 생성물 화합물 II-C-11을 수득한다. 수율 43%였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.84 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.50 (dd, J = 13.2, 6.6 Hz, 1H), 5.51 (brs, 2H), 4.23 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.84 (dd, J = 33.7, 10.2 Hz, 2H), 2.40 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.08 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.94 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 582 [M+H]+.
실시예 20: 표적 화합물 II-C-12의 합성
Figure pct00081
20mL 반응 플라스크에 화합물 II-C-7(0.3mmol), 디클로로메탄 6mL를 첨가한 후 아세트산(0.3mmol), 1-에틸-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염(1-ethyl-(3-dimethylaminopropyl)carbonyldiimide hydrochloride)(0.6mmol)을 넣는다. 상온에서 반응 약 3시간 동안 반응시키고 TLC로 반응 종료를 검출하며, 물과 디클로로메탄을 첨가하여 추출한다. 유기상을 분리하고 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 농축한다. 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 155mg 백색 생성물 II-C-12를 수득하며, 수율은 85%였다. LC-MS (ESI-MS): 610 [M+H]+.
실시예 21: 화합물 II-C-13의 합성
Figure pct00082
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고 실온에서 교반하여 용해시킨 후, 2-(1-브로모에틸)-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온(4j, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 첨가하고, 온도를 40℃로 올려 약 15시간 동안 반응시킨다. TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척하며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.35g의 고체 생성물: 화합물 II-C-13을 수득하며, 수율은 67%였다. LC-MS (ESI-MS): 522 [M+H]+.
실시예 22: 화합물 II-C-14의 합성
Figure pct00083
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고 실온에서 교반하여 용해시킨 후, 2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(3-메톡시프로필)퀴나졸린-4(3H)-온(4k, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 첨가하고, 온도를 40℃로 올려 약 15시간 동안 반응시킨다. TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척하며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.36g의 고체 생성물: 화합물 II-C-14을 수득하며, 수율은 65%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.30 (s, 1H), 7.72 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 28.8, 7.5 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.08 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.06 - 3.75 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.05 (s, 3H), 2.96 (brs, 2H), 1.85 - 1.76 (m, 5H). LC-MS (ESI-MS): 556 [M+H]+.
실시예 23: 화합물 II-C-15의 합성
Figure pct00084
20mL 반응 플라스크에 3-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민(9a, 1.0mmol) 및 5mL DMF를 첨가하고 실온에서 교반하여 용해시킨 후, 2-(1-브로모에틸)-5-클로로-3-(2-테트라히드로푸란-2-일)에틸)퀴나졸린-4(3H)-온(4l, 1.1mmol) 및 탄산칼륨(2.0mmol)을 첨가하고, 온도를 40℃로 올려 약 15시간 동안 반응시킨다. TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척하며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 0.30g의 고체 생성물: 화합물 II-C-15를 수득하며, 수율은 52%였다. LC-MS (ESI-MS): 582 [M+H]+.
실시예 24: 표적 화합물 II-A-1a 내지 II-A-1b의 합성
Figure pct00085
반응 플라스크에 중간체 9a(10mmol), (R)-12a 또는 (S)-12a(20mmol), 트리페닐포스핀(5.3g, 20mmol), 테트라히드로푸란 50mL를 첨가하고 0℃로 식힌 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(diisopropyl azodicarboxylate)(3.9mL, 20mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 승온하여 약 6시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 감압 농축하여 대부분의 테트라히드로푸란을 제거하고, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-1a: 3.1g, 수율 58%, 키랄 순도 ee%: 97.8%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 13.86분. LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-1a: 2.9g, 수율 55%, 키랄 순도 ee%: 98.2%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 17.24분. LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
실시예 25: 표적 화합물 II-A-2a 내지 II-A-2b의 합성
Figure pct00086
반응 플라스크에 중간체 9b(10mmol), (R)-12a 또는 (S)-12a(20mmol), 트리페닐포스핀(5.3g, 20mmol), 테트라히드로푸란 50mL를 첨가하고 0℃로 식힌 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(diisopropyl azodicarboxylate)(3.9mL, 20mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 승온하여 약 6시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 감압 농축하여 대부분의 테트라히드로푸란을 제거하고, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-2a: 3.1g, 수율 56%, 키랄 순도 ee%: 98.2%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 14.10분. LC-MS (ESI-MS): 554 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-2b: 3.0g, 수율 54%, 키랄 순도 ee%: 97.8%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 16.90분. LC-MS (ESI-MS): 554 [M+H]+.
실시예 26: 표적 화합물 II-A-7a 내지 II-A-7b의 합성
Figure pct00087
반응 플라스크에 중간체 9a(10mmol), (R)-12b 또는 (S)-12b(20mmol), 트리페닐포스핀(5.3g, 20mmol), 테트라히드로푸란 50mL를 첨가하고 0℃로 식힌 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(diisopropyl azodicarboxylate)(3.9mL, 20mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 승온하여 약 6시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 감압 농축하여 대부분의 테트라히드로푸란을 제거하고, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-7a: 3.1g, 수율 55%, 키랄 순도 ee%: 98.6%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 12.09분. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-7b: 3.0g, 수율 54%, 키랄 순도 ee%: 98.1%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 19.90분. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
실시예 27: 표적 화합물 II-A-8a 내지 II-A-8b의 합성
Figure pct00088
반응 플라스크에 중간체 9a(10mmol), (R)-12c 또는 (S)-12c(20mmol), 트리페닐포스핀(5.3g, 20mmol), 테트라히드로푸란 50mL를 첨가하고 0℃로 식힌 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(diisopropyl azodicarboxylate)(3.9mL, 20mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 승온하여 약 6시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 감압 농축하여 대부분의 테트라히드로푸란을 제거하고, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-A-8a: 3.1g, 수율 57%, 키랄 순도 ee%: 98.7%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 12.75분. LC-MS (ESI-MS): 544 [M+H]+.
표적 화합물 II-A-8b: 3.0g, 수율 55%, 키랄 순도 ee%: 98.2%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 18.99분. LC-MS (ESI-MS): 544 [M+H]+.
실시예 28: 표적 화합물 II-B-2a 내지 II-B-2b의 합성
Figure pct00089
반응 플라스크에 중간체 9a(10mmol), (R)-12d 또는 (S)-12d(20mmol), 트리페닐포스핀(5.3g, 20mmol), 테트라히드로푸란 50mL를 첨가하고 0℃로 식힌 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(diisopropyl azodicarboxylate)(3.9mL, 20mmol)를 점적한다. 점적이 완료되면 실온으로 승온하여 약 6시간 동안 반응시키고, TLC로 반응 종료를 검출한다. 감압 농축하여 대부분의 테트라히드로푸란을 제거하고, 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
표적 화합물 II-B-2a: 2.7g, 수율 48%, 키랄 순도 ee%: 98.0%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 13.42분. LC-MS (ESI-MS): 561 [M+H]+.
표적 화합물 II-B-2b: 2.6g, 수율 46%, 키랄 순도 ee%: 97.8%, 순상 CHIRALCEL OD-H 컬럼에서 chiral-HPLC로 측정, 보류 시간 23.15분. LC-MS (ESI-MS): 561 [M+H]+.
실시예 29: 화합물 II-D-1 내지 II-D-4의 합성
화합물 II-A-1a(231mg, 0.4mmol)를 플라스크에 첨가하고, 6mL의 이소프로판올을 첨가하여 교반한다. 무기산 또는 유기산(0.44mmol)을 첨가하여 가열 환류하고 교반하여 1시간 동안 반응시킨다. 실온으로 천천히 냉각하여 침전, 여과하여 고체를 수집한다. 실온에서 진공 건조하여 고체 생성물을 수득한다.
화합물 II-D-1: 첨가된 산은 염산(0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-1은 백색 고체 241mg이었고 수율은 98.1%였다. LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
화합물 II-D-2: 첨가된 산은 황산(0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-2는 백색 고체 250mg이었고 수율은 99.5%였다. LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
화합물 II-D-3: 첨가된 산은 p-톨루엔설포닉산 일수화물(84mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-3은 백색 고체 273mg이었고 수율은 91%였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.17 (s, 1H), 7.84 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.2, 1.1 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 12.9, 5.1 Hz, 2H), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.37 - 7.25 (m, 1H), 7.22 - 7.04 (m, 4H), 6.93 (dd, J = 11.1, 4.3 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.99 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.78 (d, J = 6.7 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 526[M+H]+.
화합물 II-D-4: 첨가된 산은 메탄설폰산(29μL, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-4는 백색 고체 260mg이었고 수율은 96.5%였다. LC-MS (ESI-MS): 526 [M+H]+.
실시예 30: 화합물 II-D-5 내지 II-D-17의 합성
화합물 II-A-7a(0.4mmol)를 플라스크에 첨가하고, 6mL의 이소프로판올을 첨가하여 교반한다. 무기산 또는 유기산(0.44mmol)을 첨가하여 가열 환류하고 교반하여 1시간 동안 반응시킨다. 실온으로 천천히 냉각하여 침전, 여과하여 고체를 수집한다. 실온에서 진공 건조하여 고체 생성물을 수득한다.
화합물 II-D-5: 첨가된 산은 염산(0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-5는 백색 고체 233mg이었고 수율은 99.5%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.04 (s, 1H), 7.84 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.46 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.20 - 7.05 (m, 2H), 6.87 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.95 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.75 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-6: 첨가된 산은 황산(0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-6은 백색에 가까운 고체 244mg이었고 수율은 99.5%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.06 (s, 1H), 7.84 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.46 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.22 - 7.06 (m, 2H), 6.88 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.96 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.75 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-7: 첨가된 산은 인산(0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-7은 백색에 가까운 고체 207mg이었고 수율은 78.6%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.88 (s, 1H), 7.83 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 13.8, 7.9 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.24 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 12.8, 7.5 Hz, 2H), 6.81 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.31 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.90 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 1.72 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-8: 첨가된 산은 p-톨루엔설포닉산 일수화물(84mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-8은 백색에 가까운 고체 268mg이었고 수율은 91.5%였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.20 - 8.05 (m, 2H), 7.97 - 7.87 (m, 1H), 7.82 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.65 - 7.56 (m, 1H), 7.54 - 7.39 (m, 3H), 7.34 - 7.24 (m, 1H), 7.20 - 7.01 (m, 3H), 6.93 (dd, J = 11.1, 4.3 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.05 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.80 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-9: 첨가된 산은 메탄설폰산(29μL, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-9는 백색에 가까운 고체 262mg이었고 수율은 99.5%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.14 (s, 1H), 7.84 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.47 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.15 (dt, J = 16.3, 7.8 Hz, 2H), 6.92 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.97 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.77 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-10: 첨가된 산은 시트르산(85mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-10은 백색에 가까운 고체 206mg이었고 수율은 68.5%였다. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-11: 첨가된 산은 석신산(52mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-11은 백색에 가까운 고체 198mg이었고 수율은 73.1%였다. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-12: 첨가된 산은 L-말산(66mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-12는 백색에 가까운 고체 213mg이었고 수율은 76.7%였다. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-13: 첨가된 산은 D-말산(59mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-13은 백색에 가까운 고체 201mg이었고 수율은 72.4%였다. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-14: 첨가된 산은 L-타타르산(66mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-14는 백색에 가까운 고체 209mg이었고 수율은 73.6%였다. LC-MS (ESI-MS): 560 [M+H]+.
화합물 II-D-15: 첨가된 산은 벤조산(54mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-15는 백색에 가까운 고체 202mg이었고 수율은 74%였다. LC-MS (ESI-MS): 560[M+H]+.
화합물 II-D-16: 첨가된 산은 D-말레산(51mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-16은 백색에 가까운 고체 220mg이었고 수율은 81.5%였다. LC-MS (ESI-MS): 560[M+H]+.
화합물 II-D-17: 첨가된 산은 옥살산(55mg, 0.44mmol)이다. 최종 생성물 II-D-17은 백색에 가까운 고체 216mg이었고 수율은 83.1%였다. LC-MS (ESI-MS): 560[M+H]+.
실시예 31: 화합물 A와 B의 합성
Figure pct00090
50ml 반응 플라스크에 화합물 10(2.0mmol), 화합물 7(3.0mmol), 탄산칼륨(4.0mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.02mmol), 용매 디옥산 9ml, 물 3ml를 첨가한다. 그 후 교반하며 100℃까지 승온하여 약 14시간 동안 반응시킨 후, TLC로 반응 종료를 검출한다. 실온으로 온도를 낮추고 반응액을 규조토로 여과하며 에틸 아세테이트로 세척한다. 여액에 물 20ml 및 50ml 에틸 아세테이트를 첨가해 추출하며, 에틸 아세테이트층을 분리하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축한다. 조생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체 생성물을 수득한다.
화합물 A(R2=CH(CH3)2): 0.67g, 수율 63%. H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.27 (dt, J = 11.9, 5.8 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.80 (ddd, J = 11.3, 9.6, 4.4 Hz, 2H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 7.47 (td, J = 7.7, 1.1 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 11.5, 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.16 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.07 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 6.89 (td, J = 7.8, 1.1 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.00 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.55 (brs, 2H), 4.60 (dq, J = 12.1, 6.1 Hz, 1H), 1.91 (t, J = 8.9 Hz, 3H), 1.38 (dt, J = 7.0, 3.5 Hz, 6H). LC-MS (ESI-MS): 536 [M+H]+.
화합물 B(R2=시클로프로필): 0.49g, 수율 46%. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.88 - 7.76 (m, 2H), 7.50 (dt, J = 15.1, 7.2 Hz, 2H), 7.36 (ddd, J = 25.8, 18.5, 8.0 Hz, 4H), 7.17 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.00 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.51 (s, 2H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 1.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.92 - 0.78 (m, 4H). LC-MS (ESI-MS): 534 [M+H]+.
실시예 32: 화합물 C의 합성
Figure pct00091
20mL 반응 플라스크에 중간체 9c(1.0mmol)와 DMF 5mL를 첨가하고 상온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4b(1.1mmol)와 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 넣고 40℃로 승온시켜 약 15시간 동안 반응시킨다. TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척하며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 고체 생성물 C 0.42g을 수득하며, 수율은 78%였다. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.92 (brs, 1H), 7.89 - 7.80 (m, 1H), 7.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 16.6, 7.6 Hz, 2H), 7.48 - 7.40 (m, 2H), 7.37 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 1.74 (d, J = 6.1 Hz, 3H). LC-MS (ESI-MS): 544 [M+H]+.
실시예 33: 화합물 D의 합성
Figure pct00092
20mL 반응 플라스크에 중간체 9d(1.0mmol)와 DMF 5mL를 첨가하고 상온에서 교반하여 용해시킨 후 중간체 4c(1.1mmol)와 탄산칼륨(2.0mmol)을 차례로 넣고 40℃로 승온시켜 약 15시간 동안 반응시킨다. TLC로 반응 종료를 검출한 후 에틸 아세테이트를 첨가하여 추출하고 물로 세척하며 에틸 아세테이트층을 분리한다. 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 농축하며 수득한 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 고체 생성물 D 0.32g을 수득하며, 수율은 58%였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 7.71 (td, J = 8.2, 5.4 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 11.4, 1.9 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 13.9, 8.5 Hz, 2H), 7.15 (dd, J = 15.6, 8.0 Hz, 2H), 7.07 (dd, J = 17.1, 8.8 Hz, 1H), 6.88 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.96 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.56 (brs, 2H), 4.60 (dq, J = 12.0, 6.0 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.39 (dd, J = 6.0, 2.5 Hz, 6H). LC-MS (ESI-MS): 554 [M+H]+.
실시예 34: CK1ε 키나아제 활성 측정
본 발명의 화합물의 체외 CK1ε 키나아제 억제 활성 측정 방법:
(1) 1x 키나아제 기본 완충액 및 반응 정지 완충액 준비:
-1 x 키나아제 기본 완충액: 50mM HEPES, pH 7.5; 0.0015% Brij-35;
-반응 정지 완충액: 100mM HEPES, pH 7.5; 0.015% Brij-35; 0.2% Coating Reagent #3, 50mM EDTA.
(2) 시험 대상 화합물의 제조:
-DMSO는 50×("nx"는 희석을 의미함, 이하 동일) 화합물 저장액(10mM, DMSO)으로 제조하고, 수득한 저장액 I은 사용할 수 있도록 준비한다. 96웰 플레이트에 100μL 저장액 I를 첨가하고, 5배 농도 구배 희석 방법에 따라 10개 농도로 각 화합물 샘플을 희석하며 각 웰 중의 약물 농도 부피는 10μl이다. 동시에 100μL DMSO를 첨가하여 블랭크 대조군으로 사용하고, 효소 기질을 첨가하지 않은 음성 대조군을 사용한다.
-다른 하나의 96웰 플레이트를 준비하며, 10μl의 상기 화합물을 취한다.
90μL 1x 키나아제 기본 완충액을 첨가하고 10분간 균일하게 혼합하여 혼합액을 수득한다.
(3) 시험 대상 플레이트 준비:
-상기에서 제조한 96웰 플레이트 중 혼합액 5μL를 384웰 플레이트에 취하며, 각 화합물은 2개의 반복 웰에 취한다.
-2.5x 키나아제 용액을 제조하고, 상응하는 1x 키나아제 기본 완충액을 추가한다.
-2.5x 폴리펩티드 용액을 제조하고, 1x키나아제 기본 완충액에 FAM 표지된 폴리펩티드와 ATP를 첨가한다.
-시험 대상 384웰 플레이트에 2.5×키나아제 용액 10 μl를 넣고 상온에서 10분간 방치한 후 2.5×폴리펩티드 용액 10 μl를 넣고 28℃에서 1시간 동안 반응시킨 후 25μL 반응 정지 완충액을 첨가한다.
-Caliper 프로그램으로 플레이트를 읽고 데이터를 이용해 상응하는 화합물이 키나아제를 억제하는 IC50값을 획득한다. 시험 결과는 표 1과 같다.
표 1 일부 화합물의 CK1ε에 대한 억제 활성
Figure pct00093
Figure pct00094
Figure pct00095
*: 데이터 출처 문헌값: WO2017079558A1.
표 1의 데이터에서 알 수 있듯이, 본 발명에서 획득한 모든 화합물은 CK1ε에 대해 모두 현저한 억제 활성이 있으며, 동시에 본 발명에서 획득한 모든 화합물은 CK1ε에 대한 억제 활성이 화합물 CUX-031723(특허 문헌 공개 번호: WO2017079558A1, CK1ε의 IC50은 9.362 μM), 및 화합물 A~D(4-아미노-이치환 페닐-1H-피라졸[3,4-d]피리미딘-1-일류 화합물)보다 현저히 우수하다. 여기에서 CK1ε 억제에 대한 키랄 화합물 II-A-1a, II-A-2a, II-A-7a, II-A-8a, II-B-2a의 IC50이 각각 108, 88, 45, 60 및 202nM에 도달하였다. 화합물 II-A-2, II-A-4, II-A-7은 각각 화합물 A, B, C와 비교하여 CK1ε 억제 활성이 각각 12, 12, 7.2배 증가하였다. II-A-16은 각각 화합물 D 및 CUX-031773과 비교하여 CK1ε 억제 활성이 각각 12.9배 및 93.6배 증가하였으며, 이는 본 발명의 화합물이 피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일 부분에서 치환기 벤젠 고리 상의 2위치 불소 원자가 CK1ε 억제 활성 향상에 매우 중요함을 설명한다. 이는 본 발명의 화합물이 추가적인 응용 가능성이 있음을 나타낸다.
실시예 35: 체외 항종양 세포 활성 테스트
미만성 거대 B 세포 림프종(OCI-LY10) 세포주를 선택해 합성한 화합물에 대해 체외 항종양 활성의 측정을 수행하였다.
약물 조제법: 약물을 DMSO에 녹여 10mM 저장액으로 조제하고, 일정 비율로 희석하여 7가지 농도(시험 농도 100×)를 획득한다.
종양세포 체외 배양: 배지: IMDM+소태아혈청은 선별된 OCI-LY10 세포를 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 배양하고, 세포 밀도가 70% 내지 90%에 도달하면 계대하여(벽 부착 세포는 Duck's EDTA 소화 후 계대) 후속 실험에 사용한다. 96웰 플레이트 상에 4000개 세포/200μL/웰을 접종하고 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 밤새 배양한다. 각 웰에 화합물 2μL를 첨가하며, 최종 농도 10μM, 2.5μM, 0.625μM, 0.15625μM, 0.039063μM, 0.0097656μM, 0.0024414μM를 모두 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 72시간 동안 배양하고, 대조군으로 DMSO(2%)를 사용하였다. 72시간 후, 20μL의 CCK-8 용액을 첨가하고 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 4시간 동안 방치한다. 상응하는 양의 세포 배양액 및 CCK-8 용액은 첨가하였으나 세포는 첨가하지 않은 웰은 블랭크 대조군으로 사용하였다. 마이크로플레이트 리더로 450nm에서 흡광도(OD값)를 측정하며, 획득한 데이터를 이용하여 IC50을 계산하고 그 결과를 표 2에 나타내었다.
세포 억제율의 계산식은 세포 억제율% = [(대조군 OD값-블랭크군 OD값)-(약물군 OD값-블랭크군 OD값)]/(대조군 세포 OD값-블랭크군 OD값))×100%이며, CalcuSyn 소프트웨어로 반수 억제 농도(IC50)를 계산한다.
표 2 일부 화합물의 OCI-LY10에 대한 억제 활성
Figure pct00096
그 결과, 세포 수준에서 상기 시험 화합물이 OCI-LY10 세포주에 대해 현저한 종양 세포 증식 억제 활성(IC50<0.31μM)을 보였으며, 이는 화합물 D보다 유의하게 우수하였다. 여기에서 화합물 II-A-7의 IC50은 22nM에 도달하였으며, 화합물 C보다 123배 높았다. 이는 본 발명 화합물이 4-아미노피라졸[3,4-d]피리미딘-1-일 부분에서 치환기 벤젠 고리 상의 2위치 불소 원자가 종양세포 억제 활성을 높이는 데 매우 중요함을 더 설명한다. 이는 또한 본 발명의 화합물이 광범위한 항종양 적용 가능성을 갖는다는 것을 의미한다.
실시예 36: 체외 항종양 세포 활성 테스트
인간 역형성 큰세포 림프종(Karpas299) 세포주를 선택하여 합성한 화합물에 대한 체외 항종양 활성을 측정하였다.
약물 조제법: 약물을 DMSO에 녹여 10mM 저장액으로 조제하고, 일정 비율로 희석하여 7가지 농도(시험 농도 100×)를 획득한다.
종양 세포 체외 배양: RPMI-1640+소태아혈청, 선택된 Karpas299 세포를 37℃, 5% CO2 세포 배양 상자에서 배양한다. 96웰 플레이트 상에 4000개 세포/100μL/웰을 접종하고 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 밤새 배양한다. 각 웰에 화합물 5μL를 첨가하며, 최종 농도 10μM, 2.5μM, 0.625μM, 0.15625μM, 0.039063μM, 0.0097656μM, 0.0024414μM를 모두 37℃, 5% CO2 세포 배양상자에서 72시간 동안 배양하고, 대조군으로 DMSO(0.1%)를 사용하였다. 72시간 후 CellTiter-Glo 완충액과 반응 기질을 냉장고에서 꺼내 실온으로 평형을 맞춘 후 기질이 담긴 갈색 병에 완충액을 붓고 뒤집어 기질 분말을 충분히 용해시킨다. 현미경으로 세포를 관찰하고 세포 배양 플레이트를 실온에 방치하고 30분 동안 평형을 유지한다. 조제된 CellTiter-Glo를 96웰 플레이트에 웰당 100μl 첨가한다. 진동기 상에서 10분간 균일하게 혼합한 후 실온에서 10분간 정치한다. 웰 플레이트의 바닥부 상에 백색의 실링 필름을 부착하고, 각 웰의 화학발광 신호를 Enspire 마이크로플레이트 검출기로 검출하여 획득한 데이터를 이용하여 IC50을 계산하였다. 시험 결과는 표 3과 같다.
세포 억제율의 계산식은 세포 억제율% = [(대조군 OD값-블랭크군 OD값)-(약물군 OD값-블랭크군 OD값)]/(대조군 세포 OD값-블랭크군 OD값))×100%이며, CalcuSyn 소프트웨어로 반수 억제 농도(IC50)를 계산한다.
표 3 일부 화합물의 Karpas299에 대한 억제 활성
Figure pct00097
결과에 따르면, 세포 수준에서 시험된 화합물이 Karpas299 세포주에 대해 현저한 종양 세포 증식 억제 활성(IC50<1μM)을 나타냈다. 이는 본 발명의 화합물이 광범위한 항종양 응용 가능성을 갖는다는 것을 더 설명한다.
실시예 37: OCI-LY10 이소성 접종 SCID 마우스 전이 종양 모델의 체내 약력학적 연구
(1) 실험 방법
OCI-LY10 세포는 20% FBS를 포함하는 IMDM 배지에서 배양되고, 5% CO2의 37℃ 포화 습도 배양상자에서 유지한다. 대수 성장기 OCI-LY10 세포를 수집하고 50% Matrigel을 포함하는 IMDM 기본 배지에 재현탁하여 세포 농도를 5x107/mL로 조정한다. 무균 조건에서 0.1mL 세포 현탁액을 5x106/0.1mL/mouse의 접종 농도로 마우스 우측 등 피하에 접종한다. 종양 부피가 약 150mm3에 도달했을 때, 동물을 종양 부피에 따라 무작위로 그룹화하고, 각 그룹의 종양 부피 차이가 평균값의 10% 미만이 되도록 한다. 그룹화한 당일을 Day 0으로 기록하고 동물 체중에 따라 투여를 시작하였다. 투여 기간 동안 개별 동물의 체중이 Day 0에 비해 15% 이상 감소하면(BWL≥15%) 약물 처리를 중단하고, 동물 체중이 회복되면(BWL<15%) 다시 약물을 투여한다. 실험 동안 동물의 체중과 종양의 부피를 주 2회 측정하였고, 동물의 임상증상을 매일 관찰하여 기록하였다.
(2) 평가 지표
종양 부피의 치료 효과는 상대 종양 성장률 T/C를 이용해 평가한다. T/C(%) 계산 공식은 TRTV/CRTV×100%이며, 여기에서 TRTV는 치료군 RTV이고 CRTV는 음성 대조군 RTV이다. 상대 종양 부피(relative tumor volume, RTV) 계산 공식은 Vt/V0이다. 여기에서 V0는 그룹화 시점의 종양 부피이고 Vt는 각 측정 시점의 종양 부피이다. NMPA 지침 원칙에 따르면 T/C≤40%, 약물은 효과적인 것으로 간주된다.
종양 중량의 효능은 TGI를 이용해 평가하며, 종양 중량 억제율(TGI)%=(TWc-TWT)/TWc×100%, TWc: 대조군 종양 중량, TWT: 처리군 종양 중량이다. NIH 지침 원칙에 따르면, TGI≥58%, 약물은 효과적인 것으로 간주된다.
(3) 실험 결과
투여 기간 동안 마우스 체중은 모두 우수한 것으로 나타났으며 실험 동안 약물 관련 동물 사망 및 기타 현저한 약물 관련 부반응이 관찰되지 않았다. 마지막 투여 종료 후 종양 부피를 취한 후 종양을 채취하여 칭량하였으며, 그 결과를 표 4 및 표 5에 나타내었다.
표 4 인간 미만성 거대 B 세포 림프종 OCI-LY10 이종이식 종양 모델에서 종양 부피 및 종양 중량에 대한 시험 물질의 영향(N=5)
Figure pct00098
표 5 인간 미만성 거대 B 세포 림프종 OCI-LY10 이종이식 종양 모델에서 종양 부피 및 종양 중량에 대한 시험 물질의 영향(N=5)
Figure pct00099
표 4 및 표 5의 결과는 시험 화합물 단독 사용군과 복합 사용군의 T/C가 모두 40% 미만이고, TGI가 모두 58%를 초과하는 것으로 나타났으며(표 4 및 표 5), 이는 우수한 항종양 효과를 의미한다. 특히 BTK 억제제 17a(특허출원번호: 201710998664.5)와 함께 투여한 치료군의 종양 억제 효과는 현저하였다. 1) II-A-1+17a: T/C는 17.49%, TGI는 83.96%이다; 2) II-A-7+17a: T/C는 16.59%, TGI는 86.34%이다; 3) II-A-1a+17a: T/C는 10.40%, TGI는 88.06%이다; 4) II-A-7a+ 17a: T/C는 7.52%, TGI는 90.82%이다. 따라서 본 발명에 언급된 화합물은 광범위한 항종양 전망을 갖는다.
실시예 38: 랫트의 생체이용률 연구
실험 방법
실험동물은 SD 랫트를 사용하였고, 10mg/kg을 위내 투여하며, 1mg/kg을 꼬리정맥주사한다. 위내 투여 채혈 시점: 투여 전 및 투여 후 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8 및 24시간, 정맥 투여 채혈 시점: 투여 전 및 투여 후 0.0833, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 24시간. 전혈 0.3mL를 취하여 2000g에서 10분간 원심분리하고 혈장 0.1mL를 분리하며 LC-MS/MS법으로 샘플을 분석한다.
절대 생체이용률의 계산 방법은 다음과 같다. F=(AUCPO/DosePO)/(AUCIV/DoseIV)×100%
표 6 랫트에 경구 투여 후 주요 약동학적 매개변수 요약
Figure pct00100
랫트에서 화합물 유리 상태(II-A-7a) 및 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염(II-D-6)의 랫트 내 약동학적 특성을 조사하였다. 표 6의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 화합물은 경구 흡수할 수 있으며, 약학적으로 허용 가능한 염은 유리 화합물의 체내 노출량을 증가시키고 생체이용률을 현저하게 향상시킬 수 있으며(3.7배) 약물의 경구 흡수를 개선할 수 있다. 따라서 본 발명의 화합물은 경구 흡수 및 투여를 통한 질병의 치료에 사용될 수 있다.

Claims (19)

  1. 화합물에 있어서,
    일반식 I의 구조를 갖거나,
    Figure pct00101

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이고;
    여기에서,
    R1은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C2-C10 알케닐, 치환 또는 비치환된 C2-C10 알키닐, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이고;
    m은 1 내지 4의 정수이고, m이 1보다 큰 경우, 복수의 R1은 서로 독립적이며 상이하거나 동일할 수 있고;
    R2은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴이고;
    R3은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이고;
    X는 CR4 또는 N이고;
    R4는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실이고, 상기 R3과 R4는 동시에 H가 아니고;
    B는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴, 치환 또는 비치환된 5 내지 12원 헤테로아릴로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  2. 제1항에 있어서,
    일반식 II-A, II-B 또는 II-C의 구조를 갖거나,
    Figure pct00102

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이고;
    여기에서,
    R5는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 히드록시알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 히드록시알킬, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이고;
    o는 1 내지 5의 정수이고;
    R6과 R6’은 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실로부터 선택되거나, R6과 R6’은 3 내지 6원 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 되고;
    n은 존재하지 않거나 0, 1, 2이고; 여기에서,
    n이 존재하지 않는 경우, 즉 Y와 Z가 고리를 형성하지 않는 경우, Y는 CR7R7’ 또는 NR8이고; Z는 CHR7R7’, OH, NHR8이고;
    n이 0, 1, 2일 때, Y는 CH 또는 N이고; Z는 CR7R7’, O 또는 NR8이고;
    R7과 R7’은 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실로부터 선택되거나; R7과 R7’은 3 내지 6원 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이 되고;
    R8은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 3 내지 10원 헤테로시클로알킬, -C(O)-R9, -S(O)2-R10이고;
    R9는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬이고;
    R10은 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  3. 제2항에 있어서,
    일반식 III-A, III-B 또는 III-C의 구조를 갖거나,
    Figure pct00103

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제3항에 있어서,
    일반식 IV-A, IV-B 또는 IV-C의 구조를 갖거나,
    Figure pct00104

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이고;
    여기에서,
    R1은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택되고;
    m은 1 내지 4의 정수로부터 선택되고;
    R2는 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필로부터 선택되고;
    R5는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택되고;
    o는 1 내지 5의 정수로부터 선택되고;
    R6 및 R6’은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로부터 선택되고;
    Y는 N 또는 CH로부터 선택되고;
    Z는 CH2, O, NR8로부터 선택되고;
    R8은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, -C(O)-R9로부터 선택되고;
    R9는 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제4항에 있어서,
    일반식 V-A, V-B 또는 V-C의 구조를 갖거나,
    Figure pct00105

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물이고;
    여기에서 R1, m, R5 및 Z의 정의는 일반식 IV-A, IV-B 및 IV-C에 정의된 바와 같으며; R2는 메틸 또는 에틸 또는 이소프로필인 것을 특징으로 하는 화합물.
  6. 제1항에 있어서,
    식 I에서 *로 표시된 C는 R 배열 또는 S 배열인 것을 특징으로 하는 화합물.
  7. 제1항에 있어서,
    이하의 구조식 중 하나이거나,
    Figure pct00106

    Figure pct00107

    Figure pct00108

    Figure pct00109

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 화합물.
  8. 제1항에 있어서,
    이하의 구조식 중 하나이거나,
    Figure pct00110

    Figure pct00111

    또는 이의 입체이성질체 또는 이의 입체이성질체 혼합물 또는 용매화물인 것을 특징으로 하는 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항에 있어서,
    *로 표시된 C는 S 배열인 것을 특징으로 하는 화합물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  11. 카세인 키나아제 1ε 활성의 억제로부터 이익을 얻는 질병, 장애 또는 병증을 치료하기 위해 단독으로 또는 다른 약물과 함께 사용하는 약물 제조에서 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 응용.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 다른 약물은 항종양 약물, 항염증제, 면역 억제제, 스테로이드 및 비스테로이드성 항염증제 중 하나 이상에서 선택하는 응용.
  13. 제11항에 있어서,
    상기 질병은 B 세포 림프종, 다발성 골수종, 백혈병, 폐암, 유방암, 전립선암, 방광암, 난소암, 췌장암, 육종, 결장암, 신장암, 간암, 흑색종, 뇌종양, 류마티스 관절염, 전신홍반루푸스, 다발성경화증, 염증성 장염, 크론병, 결장염, 자가면역용혈성빈혈, 강직성척추염, 천포창, 두드러기, 천식, 시신경염, 건선, 만성폐쇄성기도질환, 피부염, 탈모증으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 응용.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 B 세포 림프종은 미만성 거대 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 만성 림프구성 림프종, 만성 림프구성 백혈병, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질구성 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 형질 세포종, 림프절외 변연부 B 세포 림프종, 림프절 변연부 B 세포 림프종, 외투 세포 림프종, 종격동 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출성 림프종, 버킷 림프종/백혈병 또는 림프종 유사 육아종증을 포함하는 것을 특징으로 하는 응용.
  15. 제11항에 있어서,
    상기 질병은 T 세포 림프종으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 응용.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 T 세포 림프종은 말초 T 세포 림프종, 역형성 큰세포 림프종, 림프절외 NK/T 세포 림프종, 피부 말초 T 세포 림프종, T 전림프구성 백혈병, 혈관면역모세포 T 세포 림프종, 성인 T 세포 백혈병/림프종, 간비장 T 세포 림프종, 장 T 세포 림프종, 유방 이식물 관련 역형성 큰세포 림프종, T 대형 과립 림프구성 백혈병을 포함하는 역형성 큰세포 림프종 응용.
  17. 제12항에 있어서,
    상기 항종양 약물은 유사분열 억제제, 튜불린 분해 억제제, 알킬화 시약, 항대사물질, 삽입 가능 항생제, 효소, 토포이소머라아제 억제제, 생물학적 반응 조절제, 면역조절제, BTK 억제제, Bcl-2 억제제, anti-CD20 단일클론성 항체, mTOR 억제제, mTORC1 억제제, AKT 억제제, PI3K 억제제, 프로테아좀 억제제, EGFR 억제제, VEGFR 억제제, CDK 억제제, PD-1/PD-L1 억제제 중 하나 이상을 포함하는 응용.
  18. 제12항에 있어서,
    상기 항종양 약물은 BTK 억제제인 응용.
  19. 중간체에 있어서,
    구조는 하기와 같고,
    Figure pct00112

    여기에서,
    R2은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C10 시클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C12 아릴이고,
    R3은 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노, 니트로 또는 히드록실이고,
    X는 CR4 또는 N이고,
    R4는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C6 할로겐화 알콕시, 할로겐, 시아노, 아미노 또는 히드록실인 것을 특징으로 하는 중간체.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20240043430A1 (en) * 2020-12-22 2024-02-08 Hangzhou Healzen Therapeutics Co., Ltd. CRYSTAL FORM OF CASEIN KINASE 1e INHIBITOR AND PREPARATION METHOD AND USE THEREOF
CN112830927A (zh) * 2021-03-04 2021-05-25 山西科灜科技有限公司 一种嘌呤喹唑啉酮衍生物及其制备方法
WO2022206583A1 (zh) * 2021-03-29 2022-10-06 浙江大学 吲唑类化合物及其制备方法和应用
CN115232125A (zh) * 2021-05-14 2022-10-25 杭州和正医药有限公司 多取代苯类免疫调节化合物、组合物及其应用
CN113233972B (zh) * 2021-06-22 2022-09-02 南京红杉生物科技有限公司 (r)-2-苄氧基丙酸及其中间体的合成方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004113307A1 (ja) * 2003-06-18 2004-12-29 Ube Industries, Ltd. ピリミジン−４−オン化合物の製造方法
US7476673B2 (en) * 2003-12-30 2009-01-13 Allergan, Inc. Disubstituted chalcone oximes as selective agonists of RARγ retinoid receptors
WO2007089018A1 (ja) * 2006-02-03 2007-08-09 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. トリアゾール誘導体
KR101897881B1 (ko) * 2008-01-04 2018-09-12 인텔리카인, 엘엘씨 특정 화학 물질, 조성물 및 방법
US20110269779A1 (en) * 2008-11-18 2011-11-03 Intellikine, Inc. Methods and compositions for treatment of ophthalmic conditions
PL2870157T3 (pl) * 2012-07-04 2018-01-31 Rhizen Pharmaceuticals S A Selektywne inhibitory pi3k delta
US9475817B2 (en) * 2012-12-21 2016-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Pyrazole substituted imidazopyrazines as casein kinase 1 d/e inhibitors
WO2015001491A1 (en) * 2013-07-02 2015-01-08 Rhizen Pharmaceuticals Sa Pi3k protein kinase inhibitors, particularly delta and/or gamma inhibitors
EP3102207B1 (en) 2014-02-07 2022-05-11 Agency For Science, Technology And Research 2,4,5-tri-substituted azole-based casein kinase 1 inhibitors as inducers for cardiomyogenesis
CN105017256A (zh) * 2014-04-29 2015-11-04 浙江导明医药科技有限公司 多氟化合物作为布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂
CN105777759B (zh) * 2016-04-29 2018-01-26 杭州和正医药有限公司 一种布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂
US20190070183A1 (en) * 2015-11-04 2019-03-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Targeting Casein Kinase-1 and PI3K/AKT/mTOR Pathways for Treatment of c-Myc-Overexpressing Cancers, Organ Transplant Associated Complications and Autoimmune Diseases
CN109310650A (zh) * 2016-05-13 2019-02-05 纽约市哥伦比亚大学理事会 用于减少过表达c-myc的癌症中的c-myc的化合物
CN106146518A (zh) * 2016-06-30 2016-11-23 苏州爱玛特生物科技有限公司 一种布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂中间体及其制备方法
CN107759602B (zh) * 2016-08-17 2020-04-21 中国科学院上海药物研究所 含有共轭联烯结构的化合物、其药物组合物和用途

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