KR20210079291A

KR20210079291A - 셀룰라이트를 치료하기 위한 조성물 및 방법

Info

Publication number: KR20210079291A
Application number: KR1020217011314A
Authority: KR
Inventors: 마이클 맥레인; 매튜 더블유. 데이비스
Original assignee: 엔도 글로벌 에스테틱스 리미티드
Priority date: 2018-09-18
Filing date: 2019-09-04
Publication date: 2021-06-29
Also published as: AU2019341663A1; CA3112437A1; JP2022502478A; BR112021005064A2; IL281501A; WO2020058755A1; MX2021003154A; EP3852715A1; CN113015514A

Abstract

본원 개시내용은 유효량의 콜라게나아제를 투여하고, 셀룰라이트 중증도의 감소를 하나 이상의 척도에 의해 평가하여 인간 피험자에서 허벅지 또는 엉덩이 상 셀룰라이트의 치료 방법에 관한 것이다.

Description

셀룰라이트를 치료하기 위한 조성물 및 방법

관련 출원

본 출원은 2018년 9월 18일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/733,046호, 2019년 1월 6일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/788,916호, 2019년 2월 28일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/812,036호, 2019년 3월 25일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/823,596호, 2019년 7월 11일에 출원된 국제 출원 연속 번호 PCT/US2019/041494, 및 2019년 7월 12일에 출원된 국제 출원 연속 번호 PCT/US2019/41718에 대한 우선권을 주장하고, 이들의 전문이 법이 허용하는 최대 범위까지 본원에 참조로서 포함된다.

기술 분야

본 발명은 셀룰라이트를 평가하고 치료하는 분야에 관한 것이다.

배경

셀룰라이트(부종성 섬유경화성 지방층 병변(edematous fibrosclerotic panniculopathy; EFP)으로도 공지됨)는 피하 접합부에서 구조적 특성과 생체 역학적 특성(즉, 섬세한 봉쇄력 및 압출력) 사이의 불균형으로 이해될 수 있는 미적 상태이다(참조: Rudolph et al, "Structural Gender Dimorphism and the Biomechanics of the Gluteal Subcutaneous Tissue: Implications for the Pathophysiology of Cellulite," Plast. Reconstr. Surg. 2019;143(4):1077-1086). 따라서, 셀룰라이트 치료의 목표는 피하 계면을 강화하고/하거나 다양한 유형의 진피절제술(subcision)을 통해 섬유성 격막(fibrous septae)을 방출하는 것이다(상기 문헌 [Rudolph et al.] 참조). 섬유성 격막은 해부학적 및 이미지 분석 연구를 통해 셀룰라이트의 근본적인 원인이고 셀룰라이트 치료의 표적으로 인식되었다(참조: Hexsel et al, "Side-by-side comparison of areas with and without cellulite depressions using magnetic resonance imaging," Dermatol Surg. 2009;35(10):1471-1477; Hexsel et al. "Magnetic Resonance Imaging of Cellulite Depressed Lesions Successfully Treated by Subcision," Dermatol Surg. 2016;42(5):693-696; Mirrashed F, Sharp JC, Krause V, Morgan J, Tomanek B. "Pilot study of dermal subcutaneous fat structures by MRI in individuals who differ in gender, BMI, and cellulite grading," Skin Res Technol. 2004;10(3):161-168; Nuernberger and Mueller, "So-called cellulite: an invented disease," J Dermatol Surg Oncol.1978;4(3):221-229; Pierard et al, "Cellulite: from standing fat herniation to hypodermal stretch marks," Am J Dermatopath. 2000;22(1):34-37; Querleux et al, "Anatomy and physiology of subcutaneous adipose tissue by in vivo magnetic resonance imaging and spectroscopy: relationships with sex and presence of cellulite," Skin Res Technol. 2002;8(2):118-124). 셀룰라이트를 효과적으로 치료하려면 콜라겐으로 구성된 진피 격막(dermal septa)을 용해하거나 파괴하는 치료 방법이 필요하고(도 1) 많은 여성에게 거슬리는 피부 딤플링(dimpling)을 유발한다.

셀룰라이트를 치료하기 위해 사용된 요법이 있지만; 승인된 약리학적 치료법은 없다. 여러 가지 치료 방식에도 불구하고, 현재의 비-약리학적 치료법 중 어느 것도 유익하다는 과학적 증거는 거의 없다. 사실 대부분의 증거는 일화적이거나 주관적이거나 환자 자체 평가에만 근거한다. EFP에 대한 과거 치료법 중 일부에는 체중 감소, 국소 제제, 마사지, 지방흡입, 메조테라피(mesotherapy), 고주파, 진피절제술, 전동 진피절제술 및 레이저 요법이 포함되었다. 이러한 치료법 중 다수는 바람직하지 않은 부작용을 나타낸다(참조: Avram MM, "Cellulite: a review of its physiology and treatment," J Cosmet Laser Ther. 2004;6(4):181-185; Collis et al, "Cellulite treatment: a myth or reality: a prospective randomized, controlled trial of two therapies, endermologie and aminophylline cream," Plast Reconstr Surg. 1999;104(4):1110-1114; Khan MH, Victor F, Rao B, Sadick NS. "Treatment of cellulite: Part I. Pathophysiology." J Am Acad Dermatol. 2010;62(3):361-370; Hexsel DM, Mazzuco R. "Subcision: a treatment for cellulite." Int J Dermatol. 2000;39(7):539-544; Boyce et al, "Clinical evaluation of a device for the treatment of cellulite: Triactive." Am J Cosmet Surg. 2005;22:233-237; DiBernardo BE. "Treatment of cellulite using a 1440-nm pulsed laser with one-year follow-up." Aesthet Surg J. 2011;31(3):328-341). 따라서 많은 의사들은 미적 상태에 대한 개선을 쉽게 얻지 못한다는 견해를 가지고 있다. 따라서, 셀룰라이트가 있는 여성의 미적 결과를 개선하기 위해 안전하고 효과적인 비수술적 치료에 대한 충족되지 않은 요구가 남아 있다.

요지

본 발명은 상기 요구를 충족시키고, 치료적 유효량의 콜라게나아제를 피하 주사함으로써 인간 환자에서 셀룰라이트를 치료하는 방법에 관한 것이다(상세한 설명에 정의된 바와 같음). 이러한 방법은 환자의 셀룰라이트 중증도 기준선을 설정하기 위해 다양한 척도 및 평가 기술을 사용한 환자의 셀룰라이트 중증도의 치료전 평가에 관한 것이다. 그 다음 콜라게나아제를 피하 주사하여 셀룰라이트를 치료한다. 콜라게나아제의 투약 및 투여는 다양할 수 있고, 콜라게나아제는 콜라게나아제 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물의 형태일 수 있다. 이러한 부형제는 주사용수, pH 조절제, 긴장성 조정제 및 안정제를 포함할 수 있다. 치료 후 평가는 기준선과 비교하여 치료의 효능을 확인하기 위해 수행된다. 본 발명의 치료 방법은 셀룰라이트 외관을 현저하게 감소시킨다.

상세한 설명에서 설명된 바와 같이, 네 단계의 치료가 있지만, 이는 선택 사항이고 순서가 엄격하게 제한되는 것은 아니다.

1. 제1 단계에서 임상의는 치료할 셀룰라이트 딤플(dimple)을 선택한다. 다음으로, 주사 전에 평가가 수행되고, 예를 들어, 임상의 및/또는 환자는 다음의 척도 또는 기타 평가 방법 중 하나 이상을 사용하여 셀룰라이트의 치료전 중증도를 독립적으로 평가한다(상세한 설명에 정의된 바와 같음):

o 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도(Hexsel Cellulite Severity Scale; Hexsel CSS)

o 헥셀 함몰부 깊이 척도(Hexsel Depression Depth Score)

o 리커트 척도(Likert Scale)

o 딤플 분석

o 임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(Clinician Reported Photonumeric Cellulite Severity Scale; CR-PCSS)

o 환자가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(PR-PCSS)

o 연구자의 전반적인 미적 개선 척도(Investigator Global Aesthetic Scale; I-GAIS)

o 피험자의 전반적인 미적 개선 척도(S-GAIS)

o 환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도(Patient Reported Cellulite Impact Scale; PR-CIS)

o 간이형 PR-CIS (PR-CIS Abbreviated)

o 피험자 자가 평가 척도(Subject Self-Rating Scale; SSRS)

o 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도(Subject Satisfaction with Cellulite Treatment; SSCT)

o 셀룰라이트 중증도에 대한 임상의 평가(사진 또는 기타 이미지)

o 바디-Q(Body-Q)

o 피츠패트릭 척도(Fitzpatrick scale)

o 허벅지 셀룰라이트 중증도-환자 (Thigh Cellulite Severity-Patient; TCS-P); 허벅지 셀룰라이트 중증도-임상의 (Thigh Cellulite Severity-Clinician; TCS-C)

o 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용하는 검증된 임의의 광수치 또는 기타 척도(예를 들어, 헥셀-메르츠 척도(Hexsel-Merz Scale) (참조: Hexsel et al., "Validated Assessment Scales for Cellulite Dimples on the Buttocks and Thighs in Female Patients," Dermatologic Surgery: August 2019 (Volume 45) Issue p S2-S11 and poster publication at American Academy of Dermatology meeting 2019).

또한, 임상의와 환자에 의한 치료전 평가는 각각 셀룰라이트 중증도 등급 또는 수준이 상이한 일련의 1개 내지 15개의 사진, 삽화, 그림, 컴퓨터 이미지, 3-D 모델, MRI 이미지, 서모그램(thermogram), 초음파 조영 사진, 환자의 구두 피드백 등을 분석하여 수행될 수 있다.

2. 제2 치료 단계에서, 치료할 딤플은 도트(dot) 또는 기타 표시로 임상의가 표시한다(도 6). 저점(nadir)이 있다면, 이는 통상적으로 딤플의 제일 저점에 배치된다. 더 많은 사진을 찍고 다른 평가를 수행할 수 있다.

3. 제3 치료 단계에서, 치료적 유효량의 콜라게나아제가 하나 이상의 치료 부위에서 단일 용량 또는 분할 용량으로 딤플(들)에 피하 주사된다(상세한 설명에 정의된 바와 같음). 용량 및 주사 기법은 다양하다. 예를 들어, 방법은 다음의 절차에 따라 주사를 포함할 수 있다:

ㆍ 콜라게나아제 조성물 (예를 들면, CCH)를 피험자가 엎드린 위치로 있는 동안 30-게이지 ½ 인치 바늘을 갖는 주사기를 사용하여 피하 주사한다. 도 7에 나타낸 바와 같이 (이후 "치료 I"), 각각의 주사 부위에, 총 주사 용적 0.3 mL에 대해 3회의 0.1 mL 분취량으로 위치 A, B, 및 C에 투여된 콜라게나아제 조성물의 단일 피부 주사를 받는다. 주사의 깊이는 ½ 인치이고, 하향 압력 없이 바늘의 팁에서부터 바늘의 하부까지 치료 바늘의 길이에 상응한다. 각각의 주사 부위에서, 바늘은 피부 표면에 수직으로 90°로 위치하고, 삽입하고, 0.1 mL 분취량의 콜라게나아제 조성물을 주사한다 (위치 A). 바늘을 약간 빼내고 (그러나 피부에서 제거하지 않고), 수직에서 45°로 및 딤플의 장축 위로 위치를 변경하고, 0.1 mL 분취량의 콜라게나아제 조성물을 주사한다 (위치 B, 머리 방향으로). 바늘을 다시 약간 빼내고, 수직에서 대략 45°로 그리고 딤플의 장축 아래로 위치를 변경하고, 0.1 mL 분취량의 콜라게나아제 조성물을 주사한다 (위치 C, 발 방향으로). 주사 후, 피험자는 5 분 동안 엎드린 채로 유지한다.

하나의 예에서, 치료 I은 적어도 21 일 간격으로 발생하는 (+/-3 일 윈도우) 3개 치료 세션(treatment session) 동안 치료 부위당 12회 피하 주사로서 0.84 mg 콜라게나아제 조성물을 투여하기 위해 사용할 수 있다. 예를 들어, 누적 용량 5.04 mg을 투여할 수 있다 (즉, 3회 치료 방문 x 치료 부위당 0.84 mg x 2곳의 치료 부위). 다른 기술은 상세한 설명에서 설명한다.

4. 제4 치료 단계에서는 상기 언급된 척도 및 기타 평가 방법(예를 들어, 멍(bruising) 분석)을 사용하여 주사 후 평가를 수행한다. 특정 콜라게나아제 치료의 효능은 단일 임상의 등급 또는 환자 등급을 기반으로 하거나, 임상의 등급 및 환자 등급을 포함하는 복합 종점(composite endpoint)을 기반으로 할 수 있고, 여기서 개선은 동일한 피험자에 대해 두 척도 모두에서 나타나고, 즉 미리 지정된 개선 수준이 임상의와 환자 척도 모두에서 입증된다.

콜라게나아제는 단일 용량 또는 분할 용량으로 약 0.01mg 내지 약 20mg의 양으로 주사되고, 다음의 특징 중 하나 이상을 나타낸다:

ㆍ 약 0.08 내지 7.70 (SRC 검정), 또는 약 0.3 내지 30.5 (GPA 검정)의 V_max (min^-1)

ㆍ 약 4.1 내지 410 나노몰(nanoMolar) (SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1 mM (GPA 검정)의 K_M

ㆍ 약 1.1 내지 107 (SRC 검정), 또는 약 93 내지 9,179 (GPA 검정)의 K_cat (sec^-1)

ㆍ 약 376 내지 37,222 (SRC 검정), 또는 약 4 내지 428 (GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초(microseconds)

ㆍ 약 5,140 내지 508,814 (SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934 (GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1

ㆍ 약 60 kDa 내지 130 kDa, 또는 약 70 내지 약 130 kDa, 또는 약 80 내지 120 kDa, 또는 약 90 내지 120 kDa, 또는 약 100 내지 110 kDa의 분자 질량.

ㆍ 역상 HPLC(고압 액체 크로마토그래피)로 측정시 적어도 80%의 면적 순도

ㆍ 약 500 내지 30,000 SRC 단위/mg의 효능(Potency) (즉, 비활성도(specific activity))

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 클로스트리파인, 젤라티나제, 및 류펩틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 불순물 면적 1% 이하

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수(bioburden)

본원에 사용된 바와 같이, 관련 동역학 파라미터는 본원에 기재된 바와 같이 큐벳(cuvette) 검정 또는 마이크로플레이트 검정(예를 들어, SRC 큐벳 검정, SRC 마이크로플레이트 검정, GPA 큐벳 검정, 및 GPA 마이크로플레이트 검정)을 사용하여 측정될 수 있다.

일부 실시형태에서, 조성물에 존재하는 콜라게나아제는 대략 1:1의 비로 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II를 포함한다. 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II의 다른 비는 0.1-2:1, 또는 0.25-2:1, 또는 0.5-2:1, 또는 0.75-2:1, 또는 1: 0.1-2, 또는 1: 0.25-2, 또는 1: 0.5-2, 또는 1: 0.75-2, 또는 1:0, 또는 0:1과 같이 이용될 수 있다. 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II 각각은 역상 HPLC로 측정하여 적어도 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 91%, 또는 92%, 또는 93%, 또는 94%, 또는 95%, 또는 96%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99%, 또는 100%의 면적 순도를 가질 수 있다.

또다른 실시형태에서, 콜라게나아제 조성물은 대략 1:1의 AUX I 및 AUX II 비를 갖는 CCH (상세한 설명에 정의된 바와 같음)를 포함한다. AUX I 및 AUX II의 다른 비는 0.1-2:1, 또는 0.25-2:1, 또는 0.5-2:1, 또는 0.75-2:1, 또는 1: 0.1-2, 또는 1: 0.25-2, 또는 1: 0.5-2, 또는 1: 0.75-2, 또는 1:0, 또는 0:1과 같이 이용될 수 있다. AUX I 및 AUX II 각각은 역상 HPLC로 측정하여 적어도 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 91%, 또는 92%, 또는 93%, 또는 94%, 또는 95%, 또는 96%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99%, 또는 100%의 면적 순도를 가질 수 있다.

다른 예에서, 콜라게나아제 조성물은 액체일 수 있거나, 희석제를 사용하여 동결건조된 고체 형태로부터 재구성된다. 혼합물의 용량(dose)은 희석제와 상관없이 존재하는 콜라게나아제의 양에 의해 측정되고, 1회 이상의 주사에서 약 0.1 mg 내지 약 20 mg를 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 투여되는 용량은 1회 이상의 주사에서 약 0.06 mg, 0.48 mg, 0.84 mg, 1.68 mg, 2.52 mg, 3.36 mg, 4.2 mg, 5.04 mg, 5.88 mg, 6.72 mg, 7.56 mg, 또는 8.4 mg이다. 예를 들어, 약 0.06 mg, 0.48 mg, 0.84 mg, 또는 1.68 mg을 약 12회 분할된 주사로 투여한다. 주사되는 콜라게나아제 조성물의 용적은 주사당 0.01 mL 내지 3 mL, 또는 치료 방문당 총 약 0.2 mL 내지 150 mL (상세한 설명에 정의된 바와 같음) 범위일 수 있다. 특정한 실시형태에서, 상기 용량은 CCH를 포함하는 콜라게나아제 조성물에 대한 것이다. 또다른 실시형태에서, 상기 용량은 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는 콜라게나아제 조성물에 대한 것이다:

ㆍ 약 4.1 내지 410 나노몰 (SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1 mM (GPA 검정)의 K_M

ㆍ 약 376 내지 37,222 (SRC 검정), 또는 약 4 내지 428 (GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초

ㆍ 약 60 kDa 내지 약 130 kDa, 또는 약 70 내지 약 130 kDa, 또는 약 80 내지 약 120 kDa, 또는 약 90 내지 약 120 kDa, 또는 약 100 내지 약 110 kDa의 분자 질량.

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 실시형태에서, 약 0.84mg의 CCH가 치료 부위당 약 12회의 균등하게 분할된 주사로 주사된다(약 0.07mg x 12회 주사 = 약 0.84mg). 일부 경우에, 0.84mg을 사용한 이러한 치료는 1회 치료 방문시 발생하거나 2, 3, 4 또는 5회 치료 방문에 대해 10 내지 40일마다 발생한다. 다른 경우에, 2회, 3회, 4회 또는 5회 치료 방문에 대해 10 내지 40일마다 하나 이상의 치료 부위에 0.84mg을 주사한다. 이러한 주사는 5회 이상의 치료 방문시 투여될 수 있다.

또한, 상세한 설명에 기재된 바와 같이, 콜라게나아제 주사는 셀룰라이트 치료에 효과적이다. 예를 들어, 헥셀 함몰부 깊이 척도, 리커트 척도 점수 및 딤플 분석에 의해 셀룰라이트 외관의 현저한 개선이 입증된다.

CCH 주사의 가장 일반적인 부작용은: 멍, 통증, 결절, 가려움, 부종, 경화, 변색 및 홍반을 포함하는 주사 부위 반응이다. 주사 부위 멍은 일반적으로 치료 세션이 지남에 따라 감소한다.

본원 조성물, 척도, 방법 등의 추가 실시형태는 다음의 설명, 도면, 실시예 및 청구범위로부터 명백해질 것이다. 상기 및 다음의 설명으로부터 이해될 수 있는 바와 같이, 본원에 기재된 각각의 그리고 모든 특징, 및 이러한 특징들 중 둘 이상의 각각의 그리고 모든 조합은 이러한 조합에 포함된 특징이 서로 모순되지 않는다면 본 발명의 범위 내에 포함된다. 또한, 임의의 특징 또는 특징의 조합은 임의의 실시형태 또는 측면에서 특별히 제외될 수 있다. 추가의 측면 및 실시형태는 특히 첨부된 실시예 및 도면과 함께 고려될 때 다음의 설명 및 청구범위에 제시된다.

특허 또는 출원 파일은 컬러로 작성된 적어도 하나의 도면을 포함한다. 컬러 도면이 있는 이 특허 또는 특허 출원 공개공보의 사본은 요청시 필요한 비용이 지불되면 해당 특허청에 의해 제공될 것이다.
전술한 실시형태의 특징은 첨부된 도면을 참조하여 다음의 상세한 설명을 참조함으로써 더 쉽게 이해될 것이고, 여기서:
도 1은 콜라겐 격막을 기술하는 피부 및 피하 조직의 단면도이다.
도 2는 AUX-I의 아미노산 서열 목록(서열번호 5)이다.
도 3은 AUX-II의 아미노산 서열 목록(서열번호 6)이다.
도 4는 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도(CSS) (B) 함몰부의 깊이를 보여준다.
도 5는 허벅지 셀룰라이트 중증도-환자 (TCS-P); 허벅지 셀룰라이트 중증도-임상의 (TCS-C) 척도의 예를 도시한다.
도 6은 엉덩이 상 피험자 딤플 및 주사 부위 표시의 예를 도시한다.
도 7는 치료 I에 사용되는 주사 기술을 도시한다.
도 8은, CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 표적 엉덩이에 대해 71일째에 기준선으로부터 2-레벨 이상 또는 1-레벨 이상 중증도가 개선된 환자로서 정의되는, RELEASE-1 및 RELEASE-2 연구에서 복합 응답자의 일차적인 종점(primary endpoint) 및 핵심 이차적인 종점(key secondary endpoint)의 막대 그래프이다.
도 9는 기준선과 비교한 71일째에 CCH 0.84 mg을 사용한 복합 응답의 일련의 사진이다. 도 9a는 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다의 2-레벨 개선을 나타낸다. 도 9b는 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다의 1-레벨 개선을 나타낸다.
도 10은 71일째에 비-표적화된 엉덩이에서 복합 응답자의 일차적인 종점 및 핵심 이차적인 종점의 막대 그래프이다 (데이터 분석 목적을 위해). 복합 응답을 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 71일째에 기준선으로부터 2-레벨 이상 또는 1-레벨 이상 중증도가 개선된 환자로서 정의되었다.
도 11은 치료의향 (ITT; Intent-to-treat) 집단에서 71일째에 PR-PCSS 및 S-GAIS에 대한 응답자 빈도의 막대 그래프이다.
도 12는 변형된 치료의향 (mITT) 집단에서 71일째에 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 개선의 막대 그래프이다. 기준선 값은 71일째 PR-CIS 평가를 하지 않은 여성에 대해 사용되었다.
도 13은 그리드(grid)에 3-D 등록에서 표시-전 이미지 등록을 나타낸다 (1일째 표시-전). 이미지는 3-D 공간에서 그리드에 중심이 있다. 참조로서 그리드를 사용하여, 이미지 분석 기술자 (IAT)는 기준선 이미지를 위치시켜, 대략적인 이미지의 중심을 그리드의 원본에 위치시킨다. 허벅지/엉덩이는 +z-방향으로 전방을 향하고, 상부 허벅지/엉덩이는 +y-방향을 가리키고, 하부 허벅지/엉덩이는 -y-방향을 가리킨다.
도 14는 이미지 등록을 위한 거리별 색상 지도(color-by-distance map)이다.
도 15는 관심 대상 영역 (1)의 일차적인 딤플을 나타낸다. 1일째-표시 후 이미지를 1일째-표시-전 이미지 상 표적 딤플을 위치시키기 위한 참조로서 사용한다. 이어서, 기술자는 추적된, 표시-전 이미지 상 일차적인 딤플의 경계를 추적한다.
도 16은 관심 대상 영역의 일차적인 딤플이 전위(transposing)하는 일련의 사진이다. 추적된, 표시-전 이미지 상 딤플 추적은, 기준선에 대한 각각의 후속조치 이미지의 고유 표면 추적 관계에 기초하여, 22일째, 43일째 및 71일째 후속조치 이미지 상에 전위된다.
도 17은 피험자의 왼쪽 엉덩이에 주사 후 4일, 8일 및 15일에 정상 조직 및 멍든 조직의 윤곽을 기술한다.
도 18a는 왼쪽 엉덩이에 주사 후 4일, 8일 및 15일에 정상 조직 및 멍든 조직의 윤곽을 기술하고, 이러한 조직에서 L*, a* 및 b* 색상 측정값을 제공한다.
도 18b는 왼쪽 엉덩이에 주사 후 4일, 8일 및 15일에 정상 조직 및 멍든 조직의 윤곽을 기술한다. 정상 및 멍든 조직에 대한 평균 색상 및 ΔE는 L*a*b* 색상값에 기초하여 계산된다.
도 19a 내지 19c는 예시적인 딤플 분석을 기술한다. 도 19a는 딤플 분석 파라미터에서 1일 표시 전 이미지로부터 관찰 및 변화를 보여준다. 도 19b는 딤플의 최대 길이와 최대 너비를 보여준다. 도 19c는 딤플 기저부와 보간된(interpolated) 표면 사이의 표면적 및 용적을 보여준다.
도 20은 실시예 3의 표적 엉덩이 (mITT 집단)에 대한 경시적인 평균 PR-PCSS 등급의 선 그래프이다. 하위의 선은 실시예 2 및 3에 기재된 바와 같이 CCH 치료 대 위약 (상위의 선)이다.
도 21은 실시예 3의 비-표적 엉덩이 (mITT 집단)에 대한 경시적인 평균 PR-PCSS 등급의 선 그래프이다. 하위의 선은 실시예 2 및 3에 기재된 바와 같이 CCH 치료 대 위약 (상위의 선)이다.
도 22는 실시예 2의 표적 엉덩이 (mITT 집단)에 대한 경시적인 평균 CR-PCSS 등급 점수의 선 그래프이다. 하위의 선은 실시예 2 및 3에 기재된 바와 같이 CCH 치료 대 위약 (상위의 선)이다.
도 23은 실시예 2의 비-표적 엉덩이 (mITT 집단)에 대한 경시적인 평균 CR-PCSS 등급 점수의 선 그래프이다. 하위의 선은 실시예 2 및 3에 기재된 바와 같이 CCH 치료 대 위약 (상위의 선)이다.
도 24는 71일째에 표적 및 비-표적 엉덩이의 2-레벨 복합 응답자를 나타낸다 (ITT 집단).
도 25는 실시예 5의 연구 설계를 나타낸다.
도 26은 단계 3 (302/-303)에서 1일째부터 71일째까지 그리고 실시예 5 (연구 304)에서 71일째 내지 180일째의 평균 PR-CIS 항목 점수를 나타낸다.
도 27은 단계 3에서 71일째와 비교하여 180일째에 CCH-처리된 대 위약-처리된 SSCTA 응답자의 퍼센트를 나타낸다.
도 28은 연구 202 동안 피험자 배치를 나타낸다. 주 a.: 연구 201 약물 맹검(drug blind)은 후원자에 의해 파기될 때까지, 피험자는 이중-맹검 연구 (201) 1일째 후 90 일에 시작하는 3-개월 기간에 4회 이하 관찰-만 하는 방문을 경험하였다 (즉, 이중-맹검 연구 완료 20 일 ± 4 일 이내). 관찰 단계는 각각의 처리된 치료 부위 내에서 정의되고, 연구 202에서 어떠한 처리도 받지 않는 경우, 연구 202에서 선별 A로부터 첫번째 치료 일 또는 연구 202의 말기까지의 시간 기간으로서 정의된다. 주 b.: 다른 범주는 선별 실패 중 어느 하나, 치료 단계에 참여를 거부하는 피험자, 피험자 등록의 연구 272일째에 현장 폐쇄, 또는 연구 방문을 준수하지 않는 피험자를 포함하였다. 주 c.: 치료 완료시 (치료 단계 71일째), 피험자는 관찰 평가당 3-개월 간격으로 360일째까지 추적되었다. 연구 201에서 CCH로 처리된 피험자의 경우, 처리된 치료 부위는 720일째까지 장기간 지속성에 대해 평가하였다.
도 29는 연구 202에서 CCH-처리된 영역에서 경시적인 평균 PR-PCSS 등급을 나타낸다.
도 30은 연구 202에서 재-노출된 (엉덩이 및 허벅지-처리된) 피험자에 대한 경시적인 평균 PR-PCSS 등급을 나타낸다.
도 31은 연구 202에서 첫번째 및 두번째 치료 과정 동안 재-노출된 엉덩이-처리된 피험자에 대한 경시적인 평균 PR-PCSS 등급을 나타낸다.
도 32는 연구 202에서 CCH-처리된 영역에서 경시적인 평균 CR-PCSS 등급을 나타낸다.
도 33은 연구 202에서 재-노출된 (엉덩이 및 허벅지 처리된) 피험자에 대한 경시적인 평균 CR-PCSS 등급을 나타낸다.
도 34는 연구 202에서 첫번째 및 두번째 치료 과정 동안 재-노출된 엉덩이-처리된 피험자에 대한 경시적인 평균 CR-PCSS 등급을 나타낸다.

상세한 설명

이제 다양한 측면 및 실시형태가 본원에 완전히 설명될 것이다. 그러나, 이러한 측면 및 실시형태는 다수의 상이한 형태로 구현될 수 있고, 제한하는 것으로 해석되어서는 안되고; 오히려, 이러한 실시형태는 본 개시내용이 철저하고 완전할 것이고, 본 주제의 범위를 당해 기술분야의 숙련가에게 완전히 전달할 수 있도록 제공된다. 본원에 인용된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은, 전술되든 후술되든, 이의 전문이 본원에 참조로 포함된다.

A. 정의

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 용어 및 문구는 용어 또는 문구가 사용되는 문맥에서 상반되는 것이 명확하게 표시되거나 명백하지 않는 한, 용어 및 문구가 당해 분야에서 획득한 의미를 포함한다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 이제 특정 방법 및 물질이 설명된다.

달리 명시되지 않는 한, 개별 수치 값의 사용은 수치 값 앞에 "약" 또는 "대략"이라는 단어가 선행된 것처럼 근사치로 명시된다. 유사하게, 달리 분명히 명시되지 않는 한, 본 출원에 지정된 다양한 범위 내의 수치 값은 언급된 범위 내의 최소 및 최대 값이 모두 앞에 "약" 또는 "대략"이라는 단어가 선행된 것처럼 근사치로 명시된다. 이러한 방식으로, 명시된 범위의 위와 아래의 편차가 범위 내의 값과 실질적으로 동일한 결과를 얻기 위해 사용될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 수치 값을 지칭할 때 "약" 및 "대략"이라는 용어는 개시된 주제가 가장 밀접하게 관련된 분야 또는 쟁점이 되고 있는 범위 또는 요소와 관련된 분야의 숙련가에게 평범하고 일반적인 의미를 가져야 한다. 엄격한 수치 경계에서 확장되는 양은 여러 요인에 따라 달라진다. 예를 들어, 고려될 수 있는 몇몇 인자에는 요소의 임계(criticality) 및/또는 주어진 변동량이 청구된 주제의 성능에 미칠 영향, 뿐만 아니라 당해 기술분야의 숙련가에게 공지된 다른 고려 사항이 포함된다. 본원에 사용된 바와 같이, 상이한 수치 값에 대해 상이한 정도의 유효 숫자를 사용한다고 해서 "약" 또는 "대략"이라는 단어를 사용하여 특정 수치 값 또는 범위를 확장하는 방법을 제한하는 것은 아니다. 따라서 일반적으로 "약" 또는 "대략"은 수치 값을 확장시킨다. 또한, 범위의 개시는 최소값과 최대값 사이의 모든 값과 "약" 또는 "대략"이라는 용어의 사용에 의해 제공되는 범위의 확장을 포함하는 연속 범위로 의도된다. 결과적으로, 본원에서 값의 범위를 나열하는 것은 단지 그 범위 내에 있는 각각의 개별 값을 개별적으로 언급하는 약식 방법으로 사용되는 것으로 의도되고, 각각의 개별 값은 마치 본원에 개별적으로 나열된 것처럼 명세서에 포함된다.

본원에 사용된 "환부" 또는 "치료 부위"는 콜라게나아제(하기 정의됨)로 치료를 받거나 치료받은 인간 환자에서의 셀룰라이트 부위를 의미한다. 여기에는 사분면(즉, 왼쪽 엉덩이, 오른쪽 엉덩이, 왼쪽 후외측 허벅지, 오른쪽 후외측 허벅지)이 포함될 수 있다. 환부 또는 치료 부위는 엉덩이 또는 허벅지에 제한되지 않는다. 오히려 셀룰라이트가 있는 신체의 임의의 부위를 치료 부위로 취급할 수 있다.

본원에 사용된 "이상 사례" 또는 "AE"는 신체 구조(징후), 신체 기능(증상), 실험실 결과(예를 들어, 화학, ECG, X-선 등)의 모든 바람직하지 않거나 의도하지 않은 변화 또는 연구 약물과 관련이 있는 것으로 간주되는지 여부에 관계없이 연구 약물의 사용과 일시적으로 관련된 기존 상태의 악화를 의미한다.

본원에 사용된 "바디-Q"는 메모리얼 슬론 케터링 암 센터(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)의 라이센스 하에 상업적으로 이용 가능한 환자가 보고한 결과 도구이다. 이는 환자의 신체 윤곽 및/또는 체중 감소에 대한 인식을 기반으로 한다. 이는 18개의 독립적으로 작동하는 척도를 통해 외모, 건강과 관련된 삶의 질(health-related quality of life; HRQL), 및 의료 서비스에 대한 환자 경험의 세 가지 영역을 측정한다. 환자가 보고한 결과 도구는 문헌(참조: BODY-Q: User's Manual BODY-Q: User's Manual, Version 1.0, July 2015, Memorial Sloan Kettering Cancer Center, McMaster University and Stefan Cano)에 기재되어 있다. 바디-Q에는 셀룰라이트를 측정하는 척도가 포함된다. 문헌(참조: https://www.mskcc.org/sites/default/files/node/174457/documents/body-q-users-guide.pdf (2019. 7. 3 접속))을 참조한다. 셀룰라이트의 경우, 지난주의 기간 동안 "전혀"에서 "대단히 신경쓰임"에 이르는 응답 옵션이 있고, 플레쉬-킨카이드(Flesch-Kincaid) 등급 판독 수준을 가정하는 16개의 척도 항목이 있다. 환자에게 다음과 같이 질문한다: "지난주에 셀룰라이트를 염두에 두고, 얼마나 신경이 쓰였습니까?: [환자가 응답을 1- 대단히 신경쓰임; 2-보통 신경쓰임; 3-조금 신경쓰임; 4-전혀 신경쓰이지 않음으로 순위를 매기는 16개의 질문이 이어짐]. 점수는 16점(대단히 신경쓰임)에서 64점(전혀 아님)까지이다.

통상적으로, 멍의 임상 검사는 피험자의 의학적, 외과적 및 수반되는 약물 이력의 평가와 함께 멍든 부위 및 주변 부위의 육안 검사를 포함한다. 이 해석의 결과는 주관적이고, 관측 기하학(viewing geometry), 주변 조명, 노출되지 않은 주변 피부의 색상, 관찰자의 경험 및 시력을 포함하여, 관련 없는 여러 요인의 영향을 받는다. 본원에 사용된 바와 같은 "멍 분석"은 모든 피험자 이미지에 균일하게 적용된 미국 특허 공개공보 제2019/0035080호에 개시된 객관적 이미지 캡처 및 추적 방법론을 사용하여 피험자의 콜라게나아제-처리된 부위의 이미지로부터 평가된 피부색의 가시적 변화를 감지하는 것을 의미한다. 이 객관적 분석은 피험자 내(상이한 시점에 동일한 피험자 내) 및 피험자 간(상이한 피험자 간) 수준의 멍을 정량화, 구별 및 평가할 수 있는 능력을 제공함으로써 의료인에 의한 멍에 대한 시각적 및 임상 검사를 돕거나 심지어 대체할 가능성이 있다. 이 분석은 두 색상이 동시에 적색과 녹색이 되거나 동시에 황색과 청색이 될 수 없다고 명시한 색-반대 이론(opponent) 후에 모델링된 국제 조명 위원회(Commission Internationale de l'Eclairage; CIE)에서 정의한 L^*a^*b^* 색 공간(color space)을 사용한다. 아래에 표시된 바와 같이, L^*은 밝기/어둡기를 나타내고, a^*는 적색/녹색 좌표이고, b^*는 황색/청색 좌표이다. L^*(ΔL^*), a^*(Δa^*) 및 b^*(Δb^*)에 대한 델타는 양수(+) 또는 음수(-)일 수 있다. 그러나 전체 차이, 델타 E(ΔE^*)는 항상 양수이다.

ㆍ ΔL^*(L^* 샘플 - L^* 표준) = 밝기와 어둡기 간의 차이(+ = 더 밝음, - = 더 어두움); 낮은 숫자(0-50)는 어두움을 나타내고, 높은 숫자(51-100)는 밝음을 나타냄

ㆍ Δa^*(a^* 샘플 - a^* 표준) = 적색과 녹색 간의 차이(+ = 더 적색임, - = 더 녹색임)

ㆍ Δb^*(b^* 샘플 - b^* 표준) = 황색과 청색 간의 차이(+ = 더 황색임, - = 더 청색임)

피험자의 색상을 완전히 설명하려면 세 가지 값이 모두 필요하다(이 경우 피험자의 치료된 부위 이미지에 캡처된 멍). L^*a^*b^* 값의 데이터 출력과 함께 콜라게나아제로 치료된 부위(프로토콜 지정 시점의 치료전 및 치료 후 이미지)의 이미지 분석을 위한 객관적인 방법론을 통해 피부색과 그 안의 임의의 변화를 빠르고 쉽고 정확하고 반복 가능하고 편향되지 않게 정량화할 수 있다. 이 방법론은 이미지의 기존 주관적인 시각적 가정과 관련된 내재된 가변성을 배제한다. ΔE는 다음과 같이 계산된다:

ΔE(멍든 조직과 정상 조직 간의 색상 차이) = SQRT[(L^* _B-L^* _N)² + (A^* _B-A^* _N)² + (B^* _B-B^* _N)²], 여기서

L^* _B = 멍든 조직 L^*

L^* _N = 정상 조직 L^*

A^* _B = 멍든 조직 A^*

A^* _N = 정상 조직 A^*

B^* _B = 멍든 조직 B^*

B^* _N = 정상 조직 B^*

도 18b는 치료 부위의 멍 분석을 보여준다.

본원에 사용된 "CCH"는 클로스트리디움 히스톨리티쿰(Clostridium histolyticum)(하테와야 히스톨리티카(Hathewaya histolytica)로도 공지됨)의 발효로 얻은 대략 1:1 비율의 콜라게나아제의 AUX-I(서열번호 5(도 2)) 및 AUX-II(서열번호 6(도 3)) 혼합물을 의미한다. CCH는 특정 부형제와 함께 AUX-I 및 AUX-II 혼합물을 포함하는 상표 XIAFLEX®로 동결건조 분말로 상업적으로 입수 가능하지만, CCH는 다른 적합한 부형제와 함께 사용될 수 있다.

본원에 사용된 "임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(CR-PCSS)"는 의사/임상의가 사용하고, 셀룰라이트의 중증도를 5개의 단계로 평가하도록 설계된 PCT 특허 출원 PCT/US2018/020551(2018년 9월 7일자로 WO2018/160905로 공개됨)에 설명된 광수치 척도이다.

본원에서 달리 제공된 경우를 제외하고, "콜라게나아제"는 다음 중 어느 것을 의미한다: (a) EC 3.4.24.3(https://www.brenda-enzymes.org/enzyme.php?ecno=3.4.24.3 (2019. 7. 3 접속)에 정의된 활성을 갖는 콜라게나아제(돌연변이 포함); (b) 클로스트리디움 히스톨리티쿰(하테와야 히스톨리티카로도 공지됨)의 발효로 생산된 콜라게나아제; (c) CCH(상기 정의된 바와 같음); (d) BLAST로 결정된 바와 같이 AUX-I과 적어도 50%의 서열 정렬을 갖는 콜라게나아제; (e) BLAST로 결정된 바와 같이 AUX-II와 적어도 50%의 서열 정렬을 갖는 콜라게나아제; (f) 다른 공급 유기체(즉, 비-클로스트리디움 히스톨리티쿰)의 발효로 생산된 콜라게나아제, 예를 들어, 포유류, 갑각류, 균류, 세균성 또는 미생물 콜라게나아제; (g) 재조합 기술로 획득한 콜라게나아제; (h) 분자 질량이 약 65kDa 내지 약 130kDa인 콜라게나아제; (i) 부류 I 또는 부류 II로 지정된 콜라게나아제(콜라게나아제 I(또는 1), 콜라게나아제 II(또는 2), 유형 I 콜라게나아제, 유형 2 콜라게나아제로도 지칭됨); (j) 콜라게나아제 I과 II의 혼합물; (k) 균주 JCM 1403(ATCC 19401) 또는 이의 유도체로부터의 콜라게나아제; (l) 균주 ATCC 21000 또는 이의 유도체로부터의 콜라게나아제; (m) ATCC 69334 또는 이의 유도체로부터의 콜라게나아제; (n) 시. 퍼프링겐스(C. perfringens) 유래 콜라게나아제; (o) 비브리오 알기놀리티쿠스(Vibrio alginolyticus) 유래 콜라게나아제; (p) 스트렙토마이세스(Streptomyces) 유래 콜라게나아제; (q) 슈도모나스(Pseudomonas) 유래 콜라게나아제; (r) 아크로모박터 아이오파거스(Achromobacter iophagus) 유래 콜라게나아제 (s) 워싱턴 바이오케미칼 코포레이션(Worthington Biochemical Corp.)(www. Worthington-biochem.com; "Product Highlights")에 기재된 콜라게나아제; (t) 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)(www.sigma-aldrich.com)에 기재된 콜라게나아제; (u) 다음의 특성 중 하나 이상을 갖는 콜라게나아제:

ㆍ 약 0.08 내지 7.70(SRC 검정), 또는 약 0.3 내지 30.5(GPA 검정)의 V_max(min^-1)

ㆍ 약 4.1 내지 410 나노몰(SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1mM(GPA 검정)의 K_M

ㆍ 약 1.1 내지 107(SRC 검정), 또는 약 93 내지 9,179(GPA 검정)의 K_cat(sec^-1)

ㆍ 약 376 내지 37,222(SRC 검정), 또는 약 4 내지 428(GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초

ㆍ 약 5,140 내지 508,814(SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934(GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1;

(v) 노르트마르크 아르츠나이미텔 게엠베하 운트 콤파니 카게(Nordmark Arzneimittel GmbH & Co. KG)에 기재된 콜라게나아제; (w) 균주 004 유래 콜라게나아제; 또는 (x) 전술한 것들 중 어느 것의 등가물 또는 혼합물. 본원의 개시내용에 사용될 수 있는 콜라게나아제의 비제한적인 예는 미국 특허 제7,811,560호; 제9,757,435호; 제9,744,138호; 및 제WO2012/125948호에 기재되어 있다.

본원에 사용된 "딤플 분석"은 하나 이상의 선택된 딤플의 분석을 의미하고, 여기서 딤플 용적, 길이, 너비 및 표면적과 같은 파라미터가 측정된다. 측정은 에크하우스(Eckhouse) 등 WO 2018/116304 및 WO 2018/116305에 기재된 방법, 체리 이미징(Cherry Imaging)(www.cherryimaging.com) 및 캔필드 사이언티픽, 인코포레이티드(Canfield Scientific, Inc)로부터의 방법과 같은 여러 공지된 방법에 의해 수행될 수 있다. 또한 문헌(참조: Salameh et al., "Novel Stereoscopic Optical System for Objectively Measuring Above-Surface Scar Volume―First-Time Quantification of Responses to Various Treatment Modalities," Dermatol. Surg. 00:1-7 (2017); 및 미국 특허 제9,996,923호)을 참고한다. 이러한 용적, 길이, 너비 및 표면적의 측정은 디지털 3-D 그레이스케일 이미지(X 및 Y 축 회전 기능 포함) 및 디지털 3-D 텍스처 및 리트(lit) 이미지(X 및 Y 회전 기능 포함)를 그러한 이미지를 분석하는 컴퓨터 프로그램과 함께 사용하여 계산할 수 있다. 예로서, 엉덩이 치료 부위 경우, 치료전후의 각 환자에 대해 치료된 왼쪽 엉덩이 및/또는 치료된 오른쪽 엉덩이의 이미지를 촬영할 수 있다. 허벅지 치료 부위의 경우, 치료전후 0도, 45도 및 90도에서 각각의 허벅지 치료 부위의 이미지를 촬영할 수 있다. 허벅지 치료 부위의 경우, 캔필드 사이언티픽의 방법을 사용하여 촬영한 이미지는 치료전후 0도, 45도 및 90도에서 각각의 허벅지 치료 부위를 촬영할 수 있다.

본원에 사용된 "지속성"은 치료 효과가 지속되는 기간을 의미한다. 이 기간은 약 3개월 내지 약 20년, 또는 약 1년 내지 19년, 또는 약 2년 내지 18년, 또는 약 3년 내지 17년, 또는 약 4년 내지 16년, 또는 약 5년 내지 15년, 또는 약 6년 내지 14년, 또는 약 7년 내지 13년, 또는 약 8년 내지 12년, 또는 약 9년 내지 11년의 범위일 수 있다. 상기 기간은 약 6개월, 약 1년, 약 2년, 약 3년, 약 4년, 약 5년, 약 10년, 약 15년 또는 약 20년 동안일 수 있다.

본원에 사용된 "조기 종료 방문"은 연구를 종료하는 모든 피험자를 의미하고, 그녀의 마지막 방문은 조기 종료 방문으로 고려되고, 연구를 완료한 피험자에 대해 71일째에 전형적으로 수행될 평가를 조기 종료 방문시 수행할 것이다.

본원에 사용된 "피츠패트릭 척도"는 표 1에 나타낸 피험자의 피부 유형을 평가하기 위해 사용되는 척도를 의미한다.

본원에 사용된 "헥셀 셀룰라이트 중증도 척도" 또는 "Hexsel CSS" 또는 "셀룰라이트 중증도 척도(CSS)"는 셀룰라이트의 5가지 주요 형태학적 특징을 평가하는 다음의 광수치 척도를 의미한다(표 2):

점수의 합은 다음과 같이 분류된다.

본원에 사용된 "헥셀 함몰부 깊이 척도"는 Hexsel CSS로부터 (B) 함몰부 깊이만 평가하는 것을 의미한다(도 4):

0=함몰부 없음

1=표피상 함몰부

2=중간 깊이 함몰부

3=깊은 함몰부.

본원에 사용된 "이미지(Image or Imagery)"는 사진, 삽화, 그림, 모델, 3-D 모델, 컴퓨터 생성 이미지, MRI 이미지 등을 의미한다.

본원에 사용된 "리커트 척도 점수"는 1일째 치료전(기준선) 셀룰라이트의 사진(2-D 컬러, 3-D 컬러 및 3-D 그레이스케일)을 치료 후 방문에 대한 사진과 비교함으로써 각각의 치료 후 방문시 치료 부위(엉덩이 또는 허벅지)의 변화에 대해 독립적인 맹검 평가자 (또는 환자)에 의해 확인된 점수를 의미한다. 점수는 다음의 5점 리커트 척도에서 캡처된다:

본원에 사용된 용어 "비-표적 허벅지" 또는 "비-표적 엉덩이"는 일차적인 효능 종점(들)을 평가하기 위해 선택되지 않는 허벅지 또는 엉덩이를 의미한다. 이러한 비-표적 영역은 여전히 치료를 받고 이차적인 효능 종점을 평가하기 위해 사용될 수 있다.

"임의의" 또는 "임의로"는 이후에 설명되는 요소, 구성 요소 또는 상황이 발생하거나 발생하지 않을 수 있음을 의미하므로, 설명에는 요소, 구성 요소 또는 상황이 발생하는 경우와 발생하지 않는 경우가 포함된다.

본원에 사용된 "환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도(PR-CIS)"는 6개의 질문으로 구성된 설문 조사를 사용하여 셀룰라이트의 시각적 및 정서적 영향(셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 또는 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임)을 평가하는 것을 의미하고, 각각의 질문은 0(전혀 아님)에서 10(대단히 그러함)까지 숫자 등급 척도로 평가된다. 보다 구체적으로, PR-CIS는 셀룰라이트의 시각적 및 정서적 영향(셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 또는 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임)을 평가하는 6개 항목 고정적 설문지이고; 각각의 항목은 엉덩이 또는 허벅지의 디지털 이미지를 관찰하면서 0(전혀 아님)에서 10(대단히 그러함)까지 11-단계의 숫자 등급 (또는 간격) 척도로 피험자는 응답한다. 이 평가는 각각의 개별 영역을 따로따로 평가하는 것이 아닌 모든 허벅지 및/또는 엉덩이를 함께 평가하는 것일 수 있다. PR-CIS 총점은 6개의 개별 질문으로부터 도출될 수 있다:

질문 1―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트 모습에 얼마나 만족하십니까?

질문 2―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트 모습에 얼마나 신경이 쓰이십니까?

질문 3―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트 모습에 대해 얼마나 남의 시선을 의식합니까?

질문 4―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트 모습에 얼마나 창피합니까?

질문 5―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트로 인해 얼마나 더 나이가 들어 보입니까?

질문 6―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트로 인해 얼마나 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보입니까?

본원에 사용된 "환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도(간이형)"(간이형 PR-CIS)는 5개의 질문으로 구성된 설문 조사를 사용하여 셀룰라이트의 시각적 및 정서적 영향(셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 또는 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임)을 평가하는 것을 의미하고, 각각의 질문은 0(전혀 아님)에서 10(대단히 그러함)까지 숫자 등급 척도로 평가된다. 보다 구체적으로, 간이형 PR-CIS는 셀룰라이트의 시각적 및 정서적 영향(셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 또는 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임)을 평가하는 5개 항목 고정적 설문지이고; 각각의 항목은 엉덩이 또는 허벅지의 디지털 이미지를 관찰하면서 0(전혀 아님)에서 10(대단히 그러함)까지 11-단계의 숫자 등급 (또는 간격) 척도로 피험자는 응답한다. 이 평가는 각각의 개별 영역을 따로따로 평가하는 것이 아닌 모든 허벅지 및/또는 엉덩이를 함께 평가하는 것일 수 있다. 비제한적인 예에서, 간이형 PR-CIS 총점은 5개의 개별 질문으로부터 도출될 수 있다:

질문 5―치료를 위해 선택된 부위를 생각하면, 당신의 셀룰라이트로 인해 얼마나 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보입니까?

간이형 PR-CIS 총점은 전체 PR-CIS의 다른 5개 질문 세트로부터 도출될 수 있다.

본원에 사용된 "환자가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(PR-PCSS)"는 환자가 사용하고, 셀룰라이트의 중증도를 5개의 단계로 평가하도록 설계된 PCT 특허 출원 PCT/US2018/020551(2018년 9월 7일자로 WO2018/160905로 공개됨)에 설명된 광수치 척도이다.

본원에 사용된 "광수치"는 일련의 사진, 삽화, 그림, 모델, 3-D 모델, 컴퓨터 생성 이미지, MRI 이미지, 이미지 등을 사용하여 각각 다른 수준의 셀룰라이트 중증도에 배정하는 것을 의미한다.

본원에 사용된 "순차 방문"은 2회 이상의 임상의 방문 또는 셀룰라이트 변화가 척도로 평가되는 때를 의미한다. 방문 사이의 시간은 약 2주, 약 3주, 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월, 약 6개월, 약 1년, 약 18 개월, 약 2년, 약 3년, 약 4 년, 또는 약 5년 또는 그 이상일 수 있다.

본원에 사용된 "심각한 이상 사례"는 사망을 초래하거나, 즉각적으로 생명을 위협하거나, 환자 입원을 초래하거나 환자 입원 기간을 연장하거나, 영구적 또는 실질적 장애를 초래하거나, 선천성 기형/출생 결함이거나, 또는 중요한 의학적 사건인 것으로 간주되는 이상 사례를 의미한다.

본원에 사용된 "통계학적으로 유의한"은 일반적으로 0.05 미만의 "P" 값을 갖는 통계학적 데이터를 의미한다. 본원 개시내용의 맥락에서, 임상적 시도는 일반적으로 대조군과 비교하여 간섭 우월성(superiority of an intervention) (예를 들면, 이러한 경우, 치료)을 시험하기 위해 설계된다. 임상적 시도가 인간에 관련되는 경우, 이들 각각은 서로에 대해 생리적으로 상이하고, 결과의 변형은 자연스럽게 발생한다. 따라서 통계학을 모든 관찰된 차이가 우연히 야기되는지 간섭 자체로 야기되는지를 결정하기 위해 사용한다. 통계학적 유의성의 측정은 우연으로 인한 연구의 결과의 확률을 수량화한다. "P" 값은, 통계학적 유의성을 측정하기 위해 자주 사용되고, 연구 결과가 실제 치료 효과보다는 우연으로 인한 것일 확률이다. 일반적으로, 통계학적으로 유의한 것으로 고려되는 "P" 값에 대한 종래의 컷 오프(cut off)는 연구 설계 및 결과에 좌우되어 변할 수 있지만 0.05이거나, 5%이다. "P" 값이 0.05 미만인 경우, 이는 연구 결과가 우연으로 인한 것일 가능성이 5% 미만임을 의미한다. "P" 값이 0.05 (5%) 초과인 경우, 처리된 그룹 및 대조 그룹 간의 임의의 차이가 통계학적으로 유의하지 않고- 상기 차이는 치료에 기인하지 않을 수 있고, 대신에 우연으로 인한 것일 수 있음을 의미한다.

용어 "피험자" 또는 "환자"는 본원에서 상호 교환적으로 사용되고, 인간 또는 기타 포유류를 지칭한다.

본원에 사용된 "피험자의 전반적인 미적 개선 척도(S-GAIS)" 및 "연구자의 전반적인 미적 개선 척도(I-GAIS)"는 셀룰라이트 중증도 및/또는 개선을 평가하기 위한 다음의 척도를 의미한다. 피험자는 다음과 같은 입문 질문을 받는다: "치료 후 치료된 셀룰라이트 외관을 어떻게 평가하겠습니까?" 등급은 표 3에 나타낸 바와 같이 피험자의 응답에 따라 -3(매우 많이 악화)에서 +3(매우 많이 개선)까지 다양하다.

본원에 사용된 "셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도"(SSCT)는 -2에서 +2까지 범위의 피험자 만족도 등급을 의미한다. 예로서, 하기 표 4는 엉덩이에 대한 셀룰라이트 치료에 대한 이러한 평가를 제공한다. 환자에게 다음과 같이 질문한다: "오늘, 치료를 받은 엉덩이의 특정 부위 또는 부위들에 받은 셀룰라이트 치료 결과에 얼마나 만족하십니까?" 그 다음 환자는 표 4에 제시된 답변/등급을 선택한다.

표 5는 허벅지에 대한 셀룰라이트 치료에 대한 이러한 평가를 제공한다. 환자에게 다음과 같이 질문한다: "오늘, 치료를 받은 허벅지의 특정 부위 또는 부위들에 받은 셀룰라이트 치료 결과에 얼마나 만족하십니까?" 그 다음 환자는 표 5에 제시된 답변/등급을 선택한다.

본원에 사용된 "피험자 자가 평가 척도(SSRS)"는 표 6에 제시된 0(대단히 불만족)에서 6(대단히 만족)까지 범위의 7 단계 척도의 정수를 사용하여 셀룰라이트와 관련된 외관에 대한 만족도를 평가하기 위해 피험자는 사용하는 척도이다.

본원에 사용된 용어 "표적 허벅지" 또는 "표적 엉덩이"는 일차적인 효능 종점(들)을 평가하기 위해 선택된 허벅지 또는 엉덩이를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "치료적 유효량"은 환자 또는 통계적으로 유의한 환자 집단에서 셀룰라이트의 중증도를 감소시키는데 필요한 콜라게나아제의 양을 지칭한다. 사용되는 콜라게나아제 조성물의 양은 원하는 결과를 달성하기 위해 필요한 콜라게나아제의 양을 전달하는데 필요한 양일 것이다. 실제로 이는 주사되는 콜라게나아제, 주사 기술, 및 치료 부위의 효소 활성에 따라 달라질 것이다.

본원에 사용된 용어 "치료 과정"은 3개 치료 세션 (즉, 치료를 받기 위해 임상의에게 방문 각각)을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "치료로 인한 이상 사례" 또는 "TEAE"는 연구 약물로 치료하기 전에 존재하지 않았지만 치료 후에 나타났거나, 치료 시작시 존재했지만 치료 중에 악화되었거나, 치료 시작시 존재했지만 해결된 후 개인이 치료를 받는 동안 다시 나타난(치료가 시작될 때 AE의 강도와 관계없이) 임의의 상태이다.

본원에 사용된 용어 "허벅지 셀룰라이트 중증도-환자" ("TCS-P") 및 "허벅지 셀룰라이트 중증도-임상의" ("TCS-C")는 허벅지 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하고, 콜라게나아제 효능 평가를 돕기 위해 환자 (TCS-P) 및 임상의 (TCS-C)가 사용하는 도 5에 제시된 광수치 척도(또는 실질적으로 유사한 척도)를 의미한다. 환자가 보고한 척도의 사용은 TCS-P라고 하고; 임상의가 보고한 척도의 사용은 TCS-C라고 한다.

본원에 사용된 용어 "치료 방문" 또는 "치료" 또는 "치료 세션(treatment session)"은 단일 사무실 방문에서 셀룰라이트를 치료하는데 유용한 적어도 하나의 활성제의 치료적 유효량을 사용한 환부(들)에 대한 하나 이상의 주사 또는 치료를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "타당성 검증된", "타당성" 또는 "타당성 검증"은 동일한 결과가 일관되게 얻어질 수 있도록 시각적 평가의 반복성을 포함하여, 특정 척도가 정확하고 신뢰할 수 있는 것으로 입증되는 프로세스를 의미한다. 타당성 검증은 척도의 정밀도, 정확도 및 감도를 추가로 검사하여 측정값이 신뢰할 수 있고, 재현 가능하고 견고하다는 것을 확인한다.

B. 도입

본 발명은 셀룰라이트를 치료하는 방법에 관한 것으로, 하기 기재된 특정 주사 기법의 사용을 통해 셀룰라이트 외관을 갖는 피험자에게 치료적 유효량의 하나 이상의 콜라게나아제를 투여하는 것을 포함한다.

일반적으로, 치료에는 4 단계가 있다: (1) 임상의와 환자는 치료전 기준선을 결정하기 위해 치료전 평가를 수행하고, 임상의는 치료할 딤플을 선택하고; (2) 저점이 있다면, 임상의는 제일 저점에 치료할 딤플을 표시하고; (3) 임상의는 콜라게나아제로 환자를 치료하고; (4) 임상의와 환자는 치료 후 평가를 수행한다. 이러한 단계는 하기에 자세히 설명되어 있다. 단계와 그 안의 스텝은 선택 사항이고, 스텝의 순서가 달라도 유사한 결과를 얻을 수 있으므로 스텝의 순서는 제한되지 않는 것으로 의도된다.

C. 단계 1―치료전 평가

본원에 기재된 셀룰라이트 치료 방법의 제1 단계에서, 임상의는 다음의 기준에 기초하여 치료할 셀룰라이트 딤플을 선택한다:

ㆍ 사진으로 확인된 바와 같이 환자가 이완된 자세(둔근이 이완된 서 있는 자세)로 서 있을 때 딤플이 뚜렷하게 윤곽을 드러내고 자연스럽게 눈에 띄어야 함

ㆍ 선택된 딤플은 임상의가 전체 엉덩이, 허벅지 또는 기타 환부 각각의 미적 외관을 개선할 가능성이 가장 높다고 생각하는 것이어야 함

ㆍ 환자가 이완된 자세로 서있을 때 치료전 환부 사진을 찍음

ㆍ 주사 전에 평가가 수행됨, 즉, 임상의 및/또는 환자가 독립적으로 사진을 평가하고, 다음의 척도 또는 평가 방법 중 하나 이상을 사용하여 결과에 점수를 매김:

o 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도(Hexsel CSS)

o 헥셀 함몰부 깊이 척도

o 리커트 척도

o 딤플 분석

o 임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(CR-PCSS)

o 환자가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도(PR-PCSS)

o 연구자의 전반적인 미적 개선 척도(I-GAIS)

o 피험자의 전반적인 미적 개선 척도(S-GAIS)

o 환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도(PR-CIS)

o 피험자 자가 평가 척도(SSRS)

o 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도(SSCT)

o 허벅지 셀룰라이트 중증도-환자 (TCS-P); 허벅지 셀룰라이트 중증도-임상의 (TCS-C)

o 바디-Q

o 피츠패트릭 척도

o 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용하는 검증된 임의의 광수치 또는 기타 척도 (예를 들면, 헥셀-메르츠 척도)

D. 단계 2―치료할 딤플 표시

본원에 기재된 치료의 제2 단계에서, 임상의는 치료할 딤플을 도트(들)로 표시할 수 있다. 더 많은 사진을 찍을 수 있다. 예를 들면, 도 6 및 15를 참조한다.

E. 단계 3―콜라게나아제 주사

치료의 제3 단계에서, 임상의는 콜라게나아제 주사로 환자를 치료한다.

1. 콜라게나아제의 유형

본 발명에 유용한 콜라게나아제는 상기 정의된 임의의 콜라게나아제를 포함한다. 추가 배경으로, 기질 메탈로프로테이나아제(MMP)는 본원의 정의에 속하는 콜라게나아제로 구성될 수 있다. 예를 들어, MMP-1을 콜라게나아제 1을 포함하고; MMP-8은 콜라게나아제 2/호중구 콜라게나아제를 포함하고; MMP-13은 콜라게나아제 3을 포함하고; MMP-18은 콜라게나아제 4를 포함한다. 또한, 카텝신도 콜라게나아제로 분류될 수 있다.

2. 콜라게나아제 효소 동역학

본 발명에 유용한 콜라게나아제는 또한 이의 효소 동역학에 의해 특성화될 수 있다. 여기서 셀룰라이트를 치료하는데 효과적인 하나 이상의 콜라게나아제의 대략적인 동역학적 값은 다음을 포함한다:

V_max = 최대 속도

K_M = V_max의 50%에서 [기질]

K_cat = 초당 절단되는 기질 분자

1/ K_cat = 기질 분자를 절단하는데 필요한 마이크로초.

이러한 값은 아래 설명된 마이크로플레이트 검정을 사용하여 실험적으로 결정될 수 있지만, 기질과 시간이 다르다. 다른 검정 및 파라미터가 사용될 수 있다.

이러한 값은 미하엘리스-멘텐 방정식(Michaelis-Menten Equation)에 기초한 효소 거동의 정량적 표현을 반영한다:

여기서 V₀은 기질 농도[S]에서의 반응 속도(속도)이고, V_max는 관찰 가능한 최대 속도이고, K_M은 V_max의 50%를 생성하는 기질의 농도와 관련이 있는 미하엘리스 상수이다.

여기서 k₁, k_-1 및 k₂는 다음 단계에 대한 속도 상수이다:

여기서 E는 효소이고, S는 기질이고, ES는 효소-기질 복합체이고, P는 생성물이다.

촉매 상수 K_cat는 전환수(turnover number), 즉 ES 복합체가 E+P로 진행하는 속도를 나타낸다. 이는 각각의 활성 부위가 단위 시간당 겪는 촉매 주기의 수를 반영한다.

특정 실시형태에서, AUX-I 및 AUX-II는 다음의 특성을 갖는다:

ㆍAUX I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ AUX II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

가정:

K_cat = V_max/[AUX] = (nmol 기질/nG AUX*min^-1)/nG AUX

촉매 효율(K_cat/K_M)은 일반적으로 기질을 생성물로 전환하는 효소의 전반적인 능력을 나타내며, 결합 및 촉매 사건을 모두 반영한다. 또다른 실시형태에서, AUX-I 및 AUX-II는 다음의 특성을 포함한다.

ㆍ V_max = 최대 속도

ㆍ K_M = V_max의 50%에서 [기질]

ㆍ K_cat = 초당 절단되는 기질 분자

ㆍ 1/K_cat = 기질 한 분자를 절단하는데 필요한 시간.

ㆍ K_cat/ K_M은 효소의 촉매 효율을 나타내는데 종종 사용된다.

* SRC 마이크로플레이트 검정에 의해

+ GPA 마이크로플레이트 검정에 의해

3. 콜라게나아제(들)의 효능(비활성도)

콜라게나아제의 비활성도(효능)를 결정하기 위한 검정이 개발되고 사용되었다. 이러한 검정은 하위 섹션 a 내지 c에 설명되어 있고, 미리 결정된 효소 농도로 주어진 기간 내에 기질을 생성물로 전환하는 능력에 의해 콜라게나아제를 규정한다. 특정 비-제한적인 실시형태에서, 이러한 검정은 각각의 AUX-I 및 AUX-II, 및 조합된 CCH 약물 생성물(1:1 비율의 AUX-I 및 AUX-II)의 효능을 결정하기 위해 사용된다. SRC 검정(하기 설명됨)은 반응 기질로서 콜라겐을 사용한다. SRC 검정은 기질로서 가용성 래트(꼬리) 콜라겐(SRC)을 사용하고, 유형 I 콜라게나아제 활성을 측정하기 위해 사용되고, 유형 II 콜라게나아제는 콜라게나아제 혼합물의 관찰된 활성의 대략 20%에 기여한다. SRC 검정은 형광 분석법이고, 플루오레사민을 사용하여 SRC의 유형 I 분해에 의해 생성된 펩티드를 검출한다. 반응은 25℃에서 2.5시간 동안 15 mM 2가 칼슘 이온을 함유하는 4-(2-하이드록시에틸)-1-페피라진에탄설폰산(HEPES) 버퍼에서 pH 7.2에서 실행된다.

소 힘줄 콜라겐(bovine tendon collagen; BTC) 검정(하기 설명됨)은 문헌(참조: Keller and Mandl, Arch. Biochem. Biophys. 101: 81-88 (1963))에서 변형된 문헌(참조: Mandl et al., Arch. Biochem. Biophys. 74: 465-475 (1958))의 절차를 기반으로 한다. 또한, 문헌(참조: Rosen, Arch. Biochem. Biophys. 67: 10-15 (1957))을 참조한다. BTC 검정은 불용성 소 힘줄 콜라겐을 기질로 사용하고, 유형 I 및 유형 II 활성(예컨대 AUX-I 및 II 콜라게나아제)을 모두 측정한다. BTC 검정은 비색법이고, 닌하이드린을 사용하여 BTC의 유형 I 및 유형 II 분해에 의해 생성된 펩티드를 검출한다. 이 반응은 pH 7.2에서도 실행되지만, 10mM 2가 칼슘 이온을 함유하는 트리스(하이드록시메틸) 아미노메탄(TRIS) 버퍼에서 37℃에서 22시간 동안 실행된다.

세 번째 콜라게나아제 유형의 검정인, GPA 검정(하기 설명됨)은 가용성의 유도체화된 헥사펩티드(카보벤족시-GPGGPA)를 기질로 사용한다. GPA 검정은 주로 유형 II 활성을 측정하는데 사용되고, 유형 I은 관찰된 활성의 대략 10%에 기여한다. 유형 II 콜라게나아제는 헥사펩티드를 두 개의 트리펩티드로 절단하고, 그 중 하나(GPA)는 플루오레사민과 반응하여 형광 생성물을 제공하는 자유 아미노 말단을 갖는다. GPA 검정은 25℃에서 10분 동안 100 mM 2가 칼슘 이온을 함유하는 HEPES 버퍼에서 pH 7.2에서 실행된다.

SRC 및 BTC 검정은 둘 다 천연 기질(콜라겐)을 분해하고, 이는 콜라게나아제 주사이 치료적으로 수행되도록 설계된 것에 더 가깝다. GPA 검정은 잘 정의된 저분자량 헥사펩티드를 기질로 사용하고 두 개의 잘 정의된 트리펩티드가 생성된다는 장점이 있다. GPA 검정은 형광 신호를 생성하고 매우 민감하다. 마지막으로, GPA 검정은 단일 기질과 초기 효소 속도에 근접한 반응 조건(10분 항온배양)을 사용하기 때문에 미하엘리스-멘텐 동력학 분석에 적합하다. SRC 검정은 콜라겐 결합 도메인이 있는 콜라겐-분해 효소에 적합하지만, GPA 검정은 종종 젤라티나아제라고도 하는, 콜라겐 결합 도메인이 없는 콜라겐-분해 효소에 적합하다.

a. GPA 단위 검정 방법 및 비활성 단위

i. GPA 검정(큐벳)으로 측정된 콜라게나아제 효능

GPA 검정은 주로 부류 II 콜라게나아제의 효능을 측정하기 위해 사용된다. 검정의 첫 번째 단계는 콜라게나아제 샘플에 의해 기질 카보벤족시-글리실-L-프롤릴-글리실-글리실-프롤릴-L-알라닌(zGPGGPA)을 2개의 펩티드, 즉 카보벤족시-글리실-L-프롤릴-글리신(zGPG) 및 글리실-프롤릴-L-알라닌(GPA)으로 분해하는 것을 수반하는 효소 반응을 포함한다. 두 번째 단계는 형광 유도체 플루오레사민으로 유리된 GPA의 후속 측정을 포함한다. 검정은 하기 방법론을 따르지만, 당해 기술분야의 숙련가는 특정 변형(예를 들어, 희석 농도 및 시간)이 이루어질 수 있지만 검정의 목적을 수행할 수 있음을 이해할 것이다.

일반적인 방법론은 다음과 같다. 류신 표준이 준비된다. 콜라게나아제 샘플을 얻고, 콜라게나아제에 의한 zGPGGPA(이하 "기질")의 효소적 절단을 위해 제1 단계에서 사용될 용액을 준비한다. 이 단계 후, 콜라게나아제로 처리된 샘플(유리된 GPA 포함) 및 류신 표준을, 생성된 GPA 및 류신 분자의 유리 아미노 그룹을 각각 형광으로 태그하기 위해 플루오레사민으로 일정 시간 동안 실온에서 처리한다. 480nm에서 각 용액의 형광 방출은 392nm에서 여기 후 측정된다. 이어서 류신 및 콜라게나아제 샘플 곡선의 결과적 기울기는 다음과 같이 효능 단위를 계산하는데 사용된다:

효능(f-GPA 단위/mg) = (M_샘플 / M_류신) x (DF / T)

여기서:

M_샘플 = 콜라게니아제 샘플 효능 곡선의 기울기

M_류신 = 류신 표준 곡선의 기울기

DF = 희석 인자

T = 반응 시간

GPA 검정 방법론에 관한 추가의 비제한적인 세부 사항은 하기에 설명되어 있다.

버퍼 및 시약

1. f-아펠 버퍼(f-Appel's Buffer), pH 7.2(55mM HEPES, 100mM 아세트산칼슘)

2. 1mM 류신 작업 원액(Working Stock Solution)

3. 200mM 보레이트, pH 9.0

4. 아세톤 중 0.5mM 플루오레사민 용액

5. f-아펠 버퍼 중 2mg/mL zGPGGPA 기질

용액 제조

용액은 다음과 같이 제조된다:

f-아펠 버퍼: HEPES 13.0g 및 아세트산칼슘 17.6g을 대략 800mL의 물에 용해한다. 수산화나트륨으로 pH를 7.2로 조정하고, 물을 1L까지 충분히 채운다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

10mM 류신 원액: 류신 65.5mg을 물 50mL에 용해한다. 류신은 저울 위에 있는 100mL(또는 등가) 유리 비커 내로 직접 칭량해야 한다. 대략 65mg(목표 중량)의 류신을 비커에 칭량한다. 칭량된 류신의 중량을 기준으로 하기 방정식을 사용하여 비커에 추가할 물의 양을 계산한다. 계산된 용적의 물을 비커에 첨가하고 류신이 완전히 용해되도록 철저히 혼합한다. 1mL 분취량으로 분배한다. 20℃ 이하에서 보관한다.

여기서:

C2 = 칭량된 류신의 질량(mg)

V1 = 50(mL의 물)

C1 = 65.5(mg의 류신)

V2 = 10mM 원액을 생성하는데 필요한 물의 용적(mL)

1mM 류신 작업 원액: 10mM 류신 원액 바이알을 해동하고, 150μL를 1350μL 물과 배합하여 1mM로 희석한다. 사용 전에 잘 혼합한다.

0.5N HCl: 물로 HCl을 0.5N으로 희석하고 잘 혼합한다. 실온에서 보관한다. 대안적으로, 상업적으로 입수 가능한 0.5N HCl을 사용할 수 있다.

200nM 보레이트, pH 9.0: 2.4g 붕산을 대략 150mL의 물에 용해한다. 수산화나트륨을 사용하여 pH를 9.0으로 조정한다. 물을 200mL까지 충분히 채워, 잘 혼합한다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

0.5mM 플루오레사민 용액: 플루오레사민 15mg을 아세톤 100mL와 혼합하고, 스월링(swirling)하여 용해시킨다. 빛으로부터 보호되는 2 내지 8℃에서 보관한다.

기질 용액(2mg/mL zGPGGPA): f-아펠 버퍼를 사용하여 기질을 2mg/mL로 제조한다. 기계식 진탕/회전 장치에서 완전한 용해를 위해 충분한 시간을 두어 용해한다(약 15분).

류신 표준 곡선

류신 표준 곡선을 표 7에 따라 작성한다.

"L1"은 류신 표준 샘플 1을 의미한다.

이어서 플루오레사민 검출을 위해 각각의 류신 표준 100μL를 별도의 튜브로 옮긴다.

콜라게나아제 샘플 제조

f-아펠 버퍼를 사용하여 콜라게나아제 샘플을 두 단계로 0.01mg/mL로 희석하고, 가볍게 와동하여 혼합한다. 다음은 희석 계획의 예이다:

1. 100μL x 1.0mg/mL -→ 1000μL = 0.1mg/mL

2. 100μL x 0.1mg/mL -→ 1000μL = 0.01mg/mL

블랭크 제조

블랭크는 효소를 불활성화시키기 위해 희석된 제제 45μL와 0.5N 염산 500μL를 배합하여 제조된다. zGPGGPA 기질 용액 455μL를 첨가하고, 와동하여 철저히 혼합한다. 플루오레사민과 반응할 수 있는 불순물의 검출을 위해 각각의 블랭크 100μL를 별도의 튜브로 옮긴다.

효능 곡선

다음과 같이 각각의 콜라게나아제 샘플에 대해 일련의 효능 곡선을 작성한다:

기질과 버퍼를 함유하는 튜브를 25℃의 수욕에서 최소 15분 동안 가온한다. 제2 튜브 세트를 라벨링하고, 0.5N 염산 50μL를 각각에 첨가한다. 10분 항온배양 동안 희석된 콜라게나아제 샘플 제제(0.01mg/mL)를 표 8에 따라 튜브에 첨가하고, 혼합한 다음 25℃의 수욕으로 돌려보낸다. 예열된 기질에 첫 번째 제제를 첨가하면 항온배양 기간이 시작한다.

10분 항온배양에서 1 내지 2분을 남겨두고 수욕에서 제제를 제거하고, 가볍게 와동하여 혼합한다. 첫 번째 제제를 기질에 첨가하고 10분 후 각각의 튜브에서 50μL를 0.5N HCl 50μL를 함유하는 튜브로 옮긴다. 분해를 켄칭하기 위해 제제를 산에 직접 첨가해야 한다. 모든 제제를 켄칭한 후 각각의 튜브를 와동하여 잘 혼합한다.

검출

200mM 보레이트 버퍼 400μL 및 0.5mM 플루오레사민 용액 500μL를, 각각의 제제(블랭크, 콜라게나아제 샘플 효능 곡선, 및 류신 표준) 100μL를 함유하는 모든 검출 튜브에 첨가한다. 철저히 와동하여 혼합한다. 튜브를 실온에서 최소 10분 동안 항온배양한다.

형광측정기 설정

다음의 기기 파라미터로 형광측정기를 설정하고, 1시간의 유도체화로 각 제제의 형광을 판독한다.

계산

480nm(Y축)에서 형광 반응에 대한 각각의 류신 표준(X축)의 농도를 플롯팅한다. 기울기(m)와 결정 계수(R²)를 결정한다. 각 효능 곡선 제제의 평균 형광을 결정한다. 480nm(Y축)에서 평균 형광 반응에 대한 각 제제(X축)의 농도를 플롯팅하여 콜라게나아제 샘플 및 류신 효능 곡선을 작성한다. 결과적 선형 곡선에 대한 기울기(m) 및 결정 계수(R²)를 결정한다.

콜라게나아제 샘플의 효능 결정

효능 (f-GPA 단위/mg) = (M_샘플/M_류신) x (DF/T)

여기서:

M_샘플 = 콜라게니아제 샘플 효능 곡선의 기울기

M_류신 = 류신 표준 곡선의 기울기

DF = 희석 인자(1100μL / 50μL = 22)

T = 반응 시간(10분)

ii. 콜라게나아제 샘플에서 부류 II 콜라게나아제 활성 측정을 위한 GPA 마이크로플레이트 검정

이 방법은 마이크로플레이트에서 수행되는 것을 제외하고는 상기 GPA 검정과 유사하다. 상기 검정과 마찬가지로, 마이크로플레이트 검정은 기질 카벤족시-글리실-L-프롤릴-글리실-글리실-L-프로필-L-알라닌(zGPGGPA)(이하 "기질")의 효소 절단에서 콜라게나아제 샘플의 단백질 분해 활성을 측정한다. 검정은 하기 방법론을 따르지만, 당해 기술분야의 숙련가는 특정 변형(예를 들어, 희석 농도 및 시간)이 이루어질 수 있지만 검정의 목적을 수행할 수 있음을 이해할 것이다.

시약

1. 펩티드 기질(zGPGGPA)(바헴(Bachem) M1260 또는 등가물)

2. 트리펩티드 GPA(바헴 H3615 또는 등가물)

3. 플루오레사민(아크로스(Acros) 191675000 또는 등가물)

4. 정제수(밀리-Q-플러스(Milli-Q-Plus) 18.2 MΩ 시스템 또는 등가물)

5. 1M HEPES 버퍼(깁코(Gibco) 15630-080 또는 등가물)

6. 서팩트(Surfact)-Amps 20™(10% 트윈 용액)(피어스(Pierce) Cat.#28320 또는 등가물)

7. 1M 아세트산칼슘(Ca(C₂H₃O₂)₂)(에메랄드 바이오사이언시즈(Emerald Biosciences) Cat.#EBS-100-CAAC 또는 등가물)

8. 붕산(시그마 B7660 또는 등가물)

9. 2.5N NaOH(제이.티 베이커(J.T Baker) 5666-02 또는 등가물)

10. 0.5N 염산(VWR 101223-134 또는 등가물)

11. 아세톤(시그마 270725 또는 등가물)

용액의 제조

(i) 검정 버퍼(50mM HEPES pH 7.1/0.05% 트윈 20 /5mM (Ca(C₂H₃O₂)₂)의 제조: 1M HEPES 50mL의 양을 탈이온수 800mL에 피펫팅한다. 1M(Ca(C₂H₃O₂)₂) 5mL 및 서팩트-Amps(10% 트윈 20) 5mL를 첨가한다. pH를 확인하고, 필요한 경우 7.1 ± 0.05로 조정한다. 충분한 양의 물을 첨가하여 용적을 1L로 조정하고 용액을 0.22 마이크론 필터를 통해 여과한다. 이 검정 버퍼를 실온에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(ii) 0.1N NaOH의 제조: 2.5N NaOH 2mL의 양을 탈이온수 48mL에 첨가한다. 이 용액을 실온에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(iii) 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액의 제조: 트리펩티드 GPA 400mg(± 1mg)의 양을 0.1N NaOH 10mL에 용해하고, 완전히 용해될 때까지 와동한다. 충분한 양의 검정 버퍼를 첨가하여 용적이 100mL가 되도록 하고, 용액을 0.5mL 분취량으로 분배하고, -70℃에서 보관한다. 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액을 -70℃에서 최대 1년 동안 보관할 수 있다.

(iv) 4mg/mL(6.8mM) 펩티드 기질 zGPGGPA의 제조: 펩티드 기질 zGPGGPA 400mg(+ 1mg)의 양을 0.1N NaOH 10mL에 용해하고, 완전히 용해될 때까지 와동한다. 충분한 양의 검정 버퍼를 첨가하여 용적이 100mL가 되도록 한다. 이 용액을 4℃에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(v) 120mM 붕산 pH 9.0의 제조: 붕산 7.4g(± 0.5g)의 양을 탈이온수 800mL에 용해한다. 용액을 NaOH를 사용하여 pH 9.0으로 적정한다. 용적을 1L로 조정하기 위해 충분한 양의 탈이온수를 첨가한다. 이 용액을 실온에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(vi) 아세톤 중 1mM 플루오레사민의 제조: 플루오레사민 28 ± 2mg의 양을 아세톤 100mL에 용해한다. 이 용액은 신선하게 준비되고, 빛과 습기로부터 보호되어야 하였다.

트리펩티드 GPA 표준 및 연속 희석물의 제조

0.08mg/mL(329μM) 트리펩티드 GPA 표준은 검정 버퍼에 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액을 50배 희석하여 준비된다(예를 들어, 검정 버퍼 980μL 중 4mg/mL 트리펩티드 GPA 20μL). 검정 플레이트, A 행에서, 329μM 트리펩티드 GPA 표준 200μL를 A1 및 A7에 피펫팅한다. 검정 버퍼 100μL의 양을 A2-A6 및 A8-Al2에 피펫팅한다.

트리펩티드 GPA 표준 연속 희석물의 경우, Al에서 A2로 100μL의 양을 옮겨 혼합하고, A2에서 A3으로 100μL의 양을 옮기고, A5까지 반복한다. 최종 용적이 100μL가 되도록 A5 웰로부터 100μL의 양을 취한다. A6 웰에는 버퍼만 포함되어 있다.

두 번째 트리펩티드 GPA 표준 연속 희석물의 경우, A7에서 A8로 100μL의 양을 옮겨 혼합하고, A8에서 A9로 100μL의 양을 옮기고, All 웰까지 반복한다. 최종 용적이 100μL가 되도록 A11 웰로부터 100μL의 양을 취한다. A12 웰에는 버퍼만 포함되어 있다.

콜라게나아제 샘플의 제조

콜라게나아제 샘플(예를 들어, 동결건조된 콜라게나아제 약물 제품)의 경우 샘플을 적어도 10분 동안 실온에 두고, 재구성하여 500ng/mL 원액을 형성한다. 상이한 농도를 사용할 수 있다. 시험용 콜라게나아제 샘플(T1A)은 원액으로부터 검정 버퍼로 희석하여 준비된다. 이 절차를 반복하여 3중 시험 샘플(T1A, T1B, T1C)을 준비한다.

논의

이 방법에서는 50μL의 증가하는 농도의 콜라게나아제 시험 샘플을 96-웰 플레이트에서 50μL의 과잉 기질(2.0mg/mL 최종 농도)과 혼합한다. 검정 버퍼 50μL의 양을 U자 바닥 96웰 폴리프로필렌 반응 플레이트의 C-G 행에 첨가한다. 콜라게나아제 샘플 150μL를 B 행에 피펫팅한다. 이어서, B 행에서 C 행으로 콜라게나아제 샘플 100μL를 옮기고, 혼합하고, G 행에 도달할 때까지 그 과정을 반복하여 다중-채널 피펫을 사용하여 1/1.5 연속 희석을 수행한다. G 행에서 100μL의 양을 꺼내 버린다. 표 9에는 B 행에서 H 행까지 기질 50μL를 첨가한 후의 최종 콜라게나아제 농도가 포함되어 있다.

블랭크는 검정 버퍼 50μL를 H 행에 피펫팅하여 H 행에서 준비된다. 이 행에는 효소가 포함되어 있지 않다. 예시적인 농도는 표 9에 표시되어 있다.

콜라게나아제 반응

zGPGGPA 기질은 실온에서 15분의 항온배양 시간 동안 부류 II 콜라게나아제에 의해 zGPG 및 GPA로 절단된다. 항온배양기와 온도 프로브가 켜져 있다(플레이트에 기질을 첨가하기 전 온도 22 ± 1℃). B-H 행의 1-12 열에 4mg/mL(6.8mM) zGPGGPA 기질 50μL를 열별로 첨가한 다음 혼합한다. 반응 개시 시간은 기질이 첫 번째 열에 첨가된 후 시작된다. 플레이트를 덮고 15 ± 1분의 총 반응 시간 동안 22 ± 1℃ 항온배양기에 넣는다.

항온배양 후, 염산을 첨가하여 반응을 켄칭하고, 방출된 GPA 펩티드의 양을 펩티드의 유리 아미노 말단을 형광 시약인 플루오레사민과 반응시킨 후 정량화한다. 반응을 켄칭하기 위해 100μL의 0.5N HCl을 A 행에서 H 행까지 각 웰에 첨가하고, 열별로 첨가한 다음 혼합한다. 반응 시간은 HCl이 첫 번째 열에 첨가된 후 종료된다.

검출

120mM 보레이트 pH 9.0 195μL의 양을 마이크로플레이트 그라이너(Greiner) 폴리프로필렌 블랙 판독 플레이트의 각 웰에 첨가한다. 켄칭된 반응 혼합물 30μL를 반응 플레이트에서 판독 플레이트의 해당 웰로 옮기고 잘 혼합한다. 이어서 1mM 플루오레사민 75μL를 판독 플레이트의 각 웰에 첨가하고(플루오레사민/아세톤을 분배하기 위해 폴리프로필렌 트레이 사용) 첨가할 때마다 즉시 혼합한다. 플루오레사민 첨가 후 15분 이내에 다음 설정을 사용하여 몰레큘러 디바이시즈(Molecular Devices) M2 형광 플레이트 판독기로 플레이트를 판독한다: 여기 380nm, 방출 473nm, 컷오프 455nm, 6회 판독/웰, PMT 배지.

GPA 농도(μM) 대 473nm에서의 방출 및 콜라게나아제 농도(ng/mL) 대 473nm에서의 방출을 플롯팅한다. 각각의 플롯에 대해, 고정된 파라미터 없이 선형 회귀가 피팅된다. 콜라게나아제 시험 샘플의 경우, 0점 데이터를 선형 피팅에서 제외하고, 각 샘플에 대한 전체 3중 데이터 세트가 플롯을 생성하는데 사용된다. 트리펩티드 GPA 표준과 콜라게나아제 샘플의 기울기를 결정한다.

효능 결정

콜라게나아제 샘플의 비활성도는 다음과 같이 계산할 수 있다:

GPA 마이크로플레이트 검정 단위 = ((콜라게나아제 샘플의 기울기) / (트리펩티드 GPA의 기울기 x 항온배양 시간)) x 10⁶.

콜라게나아제 시험 샘플의 비활성도를 트리펩티드 GPA 표준의 기울기로부터 결정하고, 곡선-피팅 프로그램으로 계산한다. 마이크로플레이트 방법을 사용하면 미하엘리스-멘텐에 따라 효소 동력학을 계산하는데 상이한 농도의 기질 및 상이한 시간을 사용할 수 있다.

iii. GPA 검정으로 측정된 콜라게나아제 효능

본 발명에 유용한 콜라게나아제는 약 100,000 내지 약 300,000 GPA 단위/mg, 또는 약 175,000 내지 약 300,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 가질 수 있다. 다른 실시형태에서, 효능은 약 70,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg, 또는 약 100,000 내지 약 375,000 GPA 단위/mg, 또는 약 125,000 내지 약 350,000 GPA 단위/mg, 또는 약 150,000 내지 약 325,000 GPA 단위/mg, 또는 약 175,000 내지 약 300,000 GPA 단위/mg, 또는 약 200,000 내지 약 275,000 GPA 단위/mg일 수 있다. 대안적으로, 효능은 약 70,000 내지 약 400,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 100,000 내지 약 375,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 125,000 내지 약 350,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 150,000 내지 약 325,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 175,000 내지 약 300,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 230,000 내지 약 430,000 f-GPA 단위/mg, 또는 약 200,000 내지 약 275,000 f-GPA 단위/mg일 수 있다. 콜라게나아제는 또한 약 30,100 내지 87,100, 또는 약 43,000 내지 67,000 GPA 마이크로플레이트 검정 단위의 효능을 가질 수 있다. 상기 GPA 검정은 임의의 콜라게나아제의 비활성도를 분석하는데 사용될 수 있다.

b. SRC 단위 검정 방법 및 비활성도 단위

i. SRC 검정(큐벳)으로 측정된 콜라게나아제 효능

SRC 검정은 주로 부류 I 콜라게나아제의 효능을 측정하기 위해 사용된다. 일반적인 방법론은 다음과 같다. 류신 표준 및 콜라게나아제 샘플 용액이 준비된다. 검정의 첫 번째 단계는 콜라게나아제에 의한 가용성 래트-꼬리 힘줄 콜라겐(SRC)의 분해를 수반하는 효소 반응을 포함한다. 두 번째 단계는 형광 유도체 플루오레사민으로 유리된 펩티드 단편/아미노산의 후속 측정을 포함한다. 검정은 하기 방법론을 따르지만, 당해 기술분야의 숙련가는 특정 변형(예를 들어, 희석 농도 및 시간)이 이루어질 수 있지만 검정의 목적을 수행할 수 있음을 이해할 것이다.

이러한 콜라게나아제 및 류신 표준 샘플은 생성된 GPA를 플루오레사민으로 태그하기 위해 시약으로 처리된다. 류신 표준 및 콜라게나아제 샘플은 각각 392 및 480nm 여기 및 방출 파장에서 각 용액의 형광을 결정하기 전에 실온에서 10분 동안 항온배양되도록 한다. 이어서 류신 및 콜라게나아제 샘플 곡선의 결과적 기울기는 다음과 같이 효능 단위를 계산하는데 사용된다:

효능(f-SRC 단위/mg) = (M_샘플 / M_류신) x (DF / T) x CF

여기서:

M_샘플 = 콜라게니아제 샘플 효능 곡선의 기울기

M_류신 = 류신 표준 곡선의 기울기

DF = 희석 인자(1500μL / 100mL = 15)

T = 반응 시간(2.5시간 x 60분 / 1시간 = 150분)

CF = 전환 계수(1000μg / 1mg = 1000)

SRC 검정 방법론에 관한 추가의 비제한적인 세부 사항은 하기에 설명되어 있다.

버퍼 및 시약

1. F-TC 검정 버퍼, pH 7.2(22g HEPES [4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산], 4.4g 아세트산칼슘)

2. F-효소 버퍼, pH 7.2

3. 200mM 보레이트, pH 9.0

4. 10mM 류신 원액

5. 1mM 류신 작업 원액

6. 아세톤 중 1mM 플루오레사민 용액

7. 0.02N 아세트산 중 2 mg/mL 래트 꼬리 콜라겐

용액 제조

용액은 다음과 같이 제조된다:

F-TC 검정 버퍼: HEPES 22g 및 아세트산칼슘 4.4g을 대략 900mL의 물에 용해한다. 수산화나트륨을 사용하여 pH를 7.2로 조정하고, 물을 1L까지 충분히 채운다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

F-효소 버퍼: F-TC 검정 버퍼 4mL를 물 16mL와 배합하여 희석한다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

10mM 류신 원액: 류신 65.5mg을 물 50mL에 용해한다. 류신은 저울 위에 있는 100mL(또는 상응하는) 유리 비커 내로 직접 칭량해야 한다. 대략 65mg(목표 중량)의 류신을 비커에 넣는다. 칭량된 류신의 중량을 기준으로 하기 방정식을 사용하여 비커에 추가할 물의 양을 계산한다. 계산된 용적의 물을 비커에 첨가하고 류신이 완전히 용해되도록 철저히 혼합한다. 1mL 분취량으로 분배한다. -20℃ 이하에서 보관한다.

여기서:

C2 = 칭량된 류신의 질량(mg)

V1 = 50(mL의 물)

C1 = 65.5(mg의 류신)

V2 = 10mM 원액을 생성하는데 필요한 물의 용적(mL)

0.02N 아세트산: 1N 아세트산 1mL를 물 49mL와 배합하고 잘 혼합한다. 실온에서 보관한다.

200mM 보레이트, pH 9.0: 2.4g 붕산을 대략 150mL의 물에 용해한다. 수산화나트륨을 사용하여 pH를 9.0으로 조정한다. 물을 200mL까지 충분히 채워, 잘 혼합한다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

1mM 플루오레사민 용액: 플루오레사민 15mg을 아세톤 50mL에 용해시키고, 스월링하여 용해시킨다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

기질 용액(2mg/mL 래트 꼬리 콜라겐): 0.02N 아세트산을 사용하여 원액 래트 꼬리 콜라겐을 2mg/mL로 희석한다. 2 내지 8℃에서 보관한다.

류신 표준 곡선

류신 표준 곡선을 표 10에 따라 작성한다.

이어서 플루오레사민 검출을 위해 각각의 류신 표준 100μL를 별도의 원심분리 튜브로 옮긴다.

콜라게나아제 샘플 및 블랭크 제조

F-효소 버퍼를 사용하여 샘플을 두 단계로 0.01mg/mL로 희석하고, 가볍게 와동하여 혼합한다. 다음은 희석 계획의 예이다:

1. 100μL x 1.0mg/mL → 1000μL = 0.1mg/mL

2. 100μL x 0.1mg/mL → 1000μL = 0.01mg/mL

희석된 샘플은 사용시까지 실온에서 유지된다.

블랭크는 표 11에 따라 버퍼와 기질이 첨가되기 전에 효소를 불활성화시키기 위해 우선 샘플과 0.5N 염산을 배합하여 제조된다.

표 11에 따라 라벨링된 튜브의 콜라게나아제 샘플. 튜브 1, 2, 4 및 6은 하나의 제제로부터 준비되고, 튜브 3, 5 및 7은 중복 제제로부터 준비된다.

튜브의 뚜껑을 닫고 가볍게 와동하여 혼합한다. 효능 곡선 제제는 25℃ ± 3℃ 수욕에서 2.5시간 동안 항온배양된다. 항온배양 종료시, 수욕에서 효능 곡선 튜브를 제거한다. 0.5N HCl 750μL를 각각의 제제에 첨가하고 철저히 와동하여 혼합한다. 검출 전 제제를 최대 22시간 동안 2 내지 8℃에서 보관할 수 있다.

검출/ 형광측정기 설정

류신 표준이 상기 기재된 바와 같이 준비된다.

다음의 기기 파라미터를 사용하여 발광 분광기를 설정하고, 1시간의 유도체화로 각각의 제제의 형광을 판독한다.

계산

480nm에서의 형광 반응(Y축)에 대한 각각의 류신 표준의 농도(X축)를 플롯팅한다. 기울기(m) 및 결정 계수(R²)를 결정한다. 강제로 0을 통과하지 않는다. 각각의 중복 제제의 평균 형광을 결정한다. 각각의 콜라게나아제 샘플 제제의 순(net) 형광을 계산한다.

F(순) = 평균 콜라게나아제 샘플(EM₄₈₀) - 블랭크(EM₄₈₀)

순 형광(Y축)에 대한 각각의 제제(X축)에서 콜라게나아제 샘플의 양을 플롯팅한다. 기울기(m) 및 결정 계수(R²)를 결정한다. 강제로 0을 통과하지 않는다.

콜라게나아제 샘플의 효능 결정

효능(f-SRC 단위/mg) = (M_샘플 / M_류신) x (DF / T) x CF

여기서:

M_샘플 = 콜라게니아제 샘플 효능 곡선의 기울기

M_류신 = 류신 표준 곡선의 기울기

DF = 희석 인자(1500μL / 100mL = 15)

T = 반응 시간(2.5시간 x 60분 / 1시간 = 150분)

CF = 전환 계수(1000μg / 1mg = 1000)

상기 SRC 검정은 임의의 콜라게나아제의 비활성도를 분석하는데 사용될 수 있다.

ii. 콜라게나아제 샘플에서 부류 I 콜라게나아제 활성을 결정하기 위한 SRC 마이크로플레이트 검정

이 방법은 마이크로플레이트에서 수행되는 것을 제외하고는 상기 SRC 검정과 유사하다. 상기 SRC 검정과 마찬가지로, 마이크로플레이트 검정은 가용성 쥐-꼬리 콜라겐(SRC) 기질(이하 "기질")에 대한 콜라게나아제 활성을 측정한다. 검정은 하기 방법론을 따르지만, 당해 기술분야의 숙련가는 특정 변형이 이루어질 수 있지만 검정의 목적을 수행할 수 있음을 이해할 것이다.

시약

1. 가용성 래트 콜라겐 기질(비디 바이오사이언시즈(BD Biosciences) 354236)

2. 트리펩티드 GPA(바헴 H3615 또는 등가물)

3. 플루오레사민(아크로스 191675000 또는 등가물)

4. 정제수(밀리포어(Millipore), 밀리-Q-플러스 18.2 MΩ 시스템 또는 등가물)

5. 1M HEPES 버퍼(깁코 15630-080 또는 등가물)

6. 1M 아세트산칼슘(Ca(C₂H₃O₂)₂)(에메랄드 바이오사이언시즈 EBS-100-CAAC 또는 등가물)

7. 서팩트-Amps 20™(10% 트윈 용액)(피어스 Cat.#28320 또는 등가물)

8. 1.0N 아세트산(시그마 318590 또는 등가물)

9. 0.5N 염산(VWR 101223-134 또는 등가물)

10. 붕산(시그마 B7660 또는 등가물)

11. 2.5N 수산화나트륨(제이.티 베이커 5666-02 또는 등가물)

12. 아세톤(시그마 270725 또는 등가물)

용액의 제조

(i) 검정 버퍼(50mM HEPES pH 7.1/0.05% 트윈 20 /5mM (Ca(C₂H₃O₂)₂)의 제조: 1M HEPES 50mL의 양을 800mL 탈이온수에 피펫팅한다. 1M (Ca(C₂H₃O₂)₂) 5mL 및 서팩트-Amps(10% 트윈 20) 5mL를 첨가한다. pH를 확인하고, 필요한 경우 7.1 ± 0.1로 조정한다. 충분한 양의 물을 첨가하여 용적을 1L로 조정하고 용액을 0.22 마이크론 필터를 통해 여과한다. 이 검정 버퍼를 실온에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(iii) 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액의 제조: GPA 트리펩티드 400mg(± 1mg)의 양을 0.1N NaOH 10mL에 용해하고, 완전히 용해될 때까지 와동한다. 충분한 양의 검정 버퍼를 첨가하여 용적이 100mL가 되도록 하고, 용액을 0.5mL 분취량으로 분배하고, -70℃에서 보관한다. 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액을 -70℃에서 최대 1년 동안 보관할 수 있다.

(iv) 0.02N 아세트산의 제조: 1.0N 아세트산 1mL의 양을 정제수 40mL에 첨가한다. 충분한 양의 정제수를 첨가하여 용적을 50mL로 조정한다. 이 용액을 실온에서 최대 1년 동안 보관할 수 있다.

(v) 2mg/mL SRC 기질 원액의 제조: 0.02N 아세트산 23.3mL의 양을 기질이 공급되는 바이알에 직접 첨가한다(하나의 비제한적인 예로 3.75mg/mL에서 100mg SRC로 제공됨). 다른 농도의 SRC 기질이 사용될 수 있다. 계산은 하기와 같다:

100mg ÷ 3.75mg/mL = 26.7mL;

총 용적(mL) = (3.75mg/mL x 26.7mL) / 2mg/mL;

총 용적(50.0mL) - 26.7mL = 23.3mL

용액은 거꾸로 뒤집어 완전히 혼합하고, 2 내지 8℃에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(vi) 0.6mg/mL SRC 기질 작업 용액의 제조: 검정 버퍼 4.2mL의 양을 15mL 원뿔형 튜브에 첨가한다. 이어서 2mg/mL SRC 기질 원액 1.8mL를 첨가하고 용액을 거꾸로 뒤집어 혼합한다. 이 용액은 플레이트에 첨가하기 직전에 준비되어야 한다.

(vii) 120mM 붕산 pH 9.0의 제조: 붕산 7.4g(± 0.5g)의 양을 탈이온수 800mL에 용해한다. 용액을 NaOH를 사용하여 pH 9.0으로 적정하고, 용적을 1L로 조정하기 위해 충분한 탈이온수를 첨가한다. 이 용액을 실온에서 최대 3개월 동안 보관할 수 있다.

(viii) 아세톤 중 1mM 플루오레사민의 제조: 플루오레사민 28 ± 2mg의 양을 아세톤 100mL에 용해한다. 이 용액은 신선하게 준비되고, 빛과 습기로부터 보호되어야 하였다.

트리펩티드 GPA 표준 및 연속 희석물의 제조

0.08mg/mL(329μM) 트리펩티드 GPA 표준은 검정 버퍼에 4mg/mL 트리펩티드 GPA 원액을 50배 희석하여 준비한다(예를 들어, 검정 버퍼 980μL 중 4mg/mL GPA 20μL). 검정 플레이트, A 행에서, 329μM 트리펩티드 GPA 표준 200μL를 A1 및 A7에 피펫팅한다. 검정 버퍼 100μL의 양을 A2-A6 및 A8-Al2에 피펫팅한다.

콜라게나아제 시험 샘플의 제조

콜라게나아제 샘플(예를 들어, 동결건조된 콜라게나아제 약물 제품)의 경우 샘플을 적어도 10분 동안 실온에 두고, 재구성하여 3.0μg/mL 원액을 형성한다. 상이한 농도를 사용할 수 있다. 시험용 콜라게나아제 샘플(T1A)은 원액으로부터 검정 버퍼로 희석하여 준비된다. 이 절차를 반복하여 3중 시험 샘플(T1A, T1B, T1C)을 준비한다.

논의

이 방법에서는 50μL의 증가하는 농도의 콜라게나아제 시험 샘플을 96-웰 플레이트에서 50μL의 과량 기질(0.2mg/mL 최종 농도)과 혼합한다. 검정 버퍼 50μL의 양을 U자 바닥 96웰 폴리프로필렌 반응 플레이트의 C-G 열에 첨가한다. 콜라게나아제 샘플 150μL를 B 열에 피펫팅한다. 이어서, B 열에서 C 열로 콜라게나아제 샘플 100μL를 옮기고, 혼합하고, G 열에 도달할 때까지 그 과정을 반복하여 다중-채널 피펫을 사용하여 1/1.5 연속 희석을 수행한다. G 열에서 100μL의 양을 꺼내 버린다. 블랭크는 검정 버퍼 50μL를 H 열에 피펫팅하여 H 열에서 준비된다. 이 열에는 효소가 포함되어 있지 않다. 표 12에는 B 열에서 H 열까지 기질 50μL를 첨가한 후의 최종 콜라게나아제 농도가 포함되어 있다.

콜라게나아제 반응

항온배양기와 온도 프로브가 켜져 있다(플레이트에 기질을 첨가하기 전 온도 22 ± 1℃). 0.6mg.mL SRC 50μL의 양을 B 행 내지 H 행의 각각의 웰에 첨가하고, 열별로 첨가한 다음 혼합한다. 반응 개시 시간은 기질이 첫 번째 열에 첨가된 후 시작된다. 플레이트를 덮고 45 ± 5분의 총 반응 시간 동안 22 ± 1℃ 항온배양기에 넣는다. 반응을 켄칭하기 위해, 0.5N HCl 100μL를 희석 플레이트의 각각의 웰에 열별로 첨가하고, 혼합한다. 반응 시간은 HCl이 첫 번째 열에 첨가된 후 종료된다.

검출

120mM 보레이트 pH 9.0 195μL의 양을 마이크로플레이트 그라이너 폴리프로필렌 블랙 판독 플레이트의 각 웰에 첨가한다. 켄칭된 반응 혼합물 30μL를 반응 플레이트에서 판독 플레이트의 해당 웰로 옮기고 잘 혼합한다. 이어서 1mM 플루오레사민 75μL를 판독 플레이트의 각 웰에 첨가하고(플루오레사민/아세톤을 분배하기 위해 폴리프로필렌 트레이 사용) 첨가할 때마다 즉시 혼합한다. 플루오레사민 첨가 후 15분 이내에 다음 설정을 사용하여 몰레큘러 디바이시즈 M2 형광 플레이트 판독기로 플레이트를 판독한다: 여기 380nm, 방출 473nm, 컷오프 455nm, 6회 판독/웰, PMT 배지.

GPA 농도(μM) 대 473nm에서의 방출 및 콜라게나아제 농도(ng/mL) 대 473nm에서의 방출을 플롯팅한다. 각각의 플롯에 대해, 고정된 파라미터 없이 선형 회귀가 피팅된다. 콜라게나아제 샘플의 경우, 0점 데이터를 선형 피팅에서 제외하고, 각 샘플에 대한 전체 3중 데이터 세트가 플롯을 생성하는데 사용된다. 트리펩티드 GPA 표준과 콜라게나아제 샘플의 기울기를 결정한다.

비활성도 및 상대 효능 결정

콜라게나아제 샘플 비활성도를 아래와 같이 계산할 수 있다:

SRC 마이크로플레이트 검정 단위 = ((콜라게나아제 샘플의 기울기) / (트리펩티드 GPA의 기울기 x 항온배양 시간)) x 10⁶

iii. SRC 검정으로 측정된 콜라게나아제 효능

본 발명에 유용한 콜라게나아제는 약 500 내지 약 15,000 SRC 단위/mg의 효능을 가질 수 있다. 특정 실시형태에서, 효능은 약 500 내지 약 12,500 SRC 단위/mg, 또는 약 700 내지 약 10,000 SRC 단위/mg, 또는 약 1,000 내지 약 7,500 SRC 단위/mg, 또는 1,500 내지 약 6,000 SRC 단위/mg, 또는 약 2,500 내지 약 5,000 SRC 단위/mg이다. 대안적으로, 효능은 약 5,000 내지 약 35,000 f-SRC 단위/mg, 또는 약 10,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg, 또는 약 13,000 내지 약 23,000 f-SRC 단위/mg, 또는 약 15,000 내지 약 25,000 f-SRC 단위/mg일 수 있다. 콜라게나아제는 또한 약 980 내지 3,510, 또는 약 1,400 내지 2,700 SRC 마이크로플레이트 검정 단위의 효능을 가질 수 있다.

c. BTC 단위 검정에서 콜라게나아제 효능

콜라게나아제에 대한 소 힘줄 콜라겐 검정은 켈러 및 맨들(Keller and Mandl)(1963)에 의해 변형된, 맨들 등(Mandl et al., 1958)의 절차를 기반으로 한다. 소 힘줄 콜라겐은 불용성 기질이기 때문에 미세하게 분할하는 것이 중요하다. 트립신은 변성된 콜라겐 또는 기타 단백질 불순물의 존재를 설명하기 위해 대조군으로 실행된다. 검정은 콜라게나아제 활성에 필요한 칼슘 이온의 존재하에 실행된다. 가용화된 펩티드의 수는 펩티드의 N-말단 아미노 그룹을 닌히드린과 반응시키고 형성된 부가물의 양을 비색적으로 측정함으로써 결정된다(참조: Rosen 1957).

이 절차의 목적은 콜라겐 기질을 사용하여 콜라게나아제 효소의 비활성도를 시험하는 것이다.

시약 및 용액

1. 콜라겐 기질(콜라겐)

2. 탈이온수(물)

3. 트리스 검정 버퍼

4. 트립신 원액

5. 0.5M HCl

6. 류신 표준 검정 용액(1mM 류신)

7. 로젠 버퍼(Rosen Buffer)

8. 3% 닌히드린

9. 50% 이소프로판올

항온배양

다음과 같이 반응 튜브를 설정하고 라벨링한다: 트립신 대조군용 튜브 3개, 기준 용액용 튜브 6개, 시험중인 각 샘플용 튜브 6개. 각 튜브를 라벨링하고, 뚜껑을 연다. 표 13의 순서로 콜라겐 10 ± 1mg을 칭량하고, 칭량된 콜라겐을 각 반응 튜브에 넣는다.

시험중인 샘플의 경우 효소의 양은 반응 튜브당 1.6 내지 5.7nmol leu eq/분(ACT)의 활성을 포함해야 한다. 용해되지 않은 샘플은 분석에 사용되기 전에 먼저 트리스 검정 버퍼에 용해해야 한다. 농도(반응 튜브에 첨가하기 전)는 0.0065mg/mL 이상이어야 한다.

매트릭스 패턴을 갖도록 표 14에 따라 반응 튜브를 설정한다. 다음 표에서는 2개의 시험중 샘플을 추정한다. 더 많거나 적은 샘플이 실행되는 경우, 반응 튜브의 수가 조정되지만 패턴은 유지된다. 용적이 일정한 경우, 이는 표 14에 나열되어 있다.

반응 튜브를 닫는다. 내용물을 온화하지만 철저하게 혼합한다. 반응 튜브를 37℃ 수욕에 놓는다. 22 ± 0.5시간 동안 항온배양한다. 항온배양이 시작된 실제 시간, 37℃, 사용된 수욕의 수, 콜라겐 지질의 로트 번호, 및 사용된 로트에 대한 콜라겐 보정 계수 및 사용된 모든 용액의 로트 번호를 기록한다.

켄칭 및 여과

항온배양된 각 반응 튜브에 해당하도록 여과 튜브를 라벨링한다. 라벨링된 각 여과 튜브에 접힌 여과지를 포함하는 깔때기를 놓는다. 항온배양 기간이 끝나면 수욕에서 반응 튜브를 제거한다. 항온배양이 끝난 실제 시간을 기록한다.

반응 튜브의 뚜껑을 열고 뚜껑을 버린다. 각 반응 튜브에 0.5M HCl 2mL를 분배하여 반응을 켄칭한다. 튜브의 내용물을 철저히 혼합한다. 각 반응 튜브의 내용물을 적절한 여과 튜브로 여과한다.

분해되지 않은 콜라겐은 단시간에 HCl에 의해 용해될 수 있기 때문에 이전의 두 단계는 가능한 한 빨리 완료되어야 한다. 여액은 발색 전 최대 95.5시간 동안 커버가 있는 여과 튜브에서 냉장 보관할 수 있다. 냉장 및 보관 시간을 기록한다.

발색

다음과 같이 비등 튜브를 설정하고 라벨링한다: 물 및 류신 대조군용 튜브 6개(단계 1) 및 각각의 여과통(filtrate tub)용 튜브 2개(단계 1). 다음 양의 물과 류신 표준 검정 용액을 6개의 류신 대조군 튜브에 넣는다.

물 0.8mL를 각각의 비등 튜브에 피펫팅한다(단계 2). 각 샘플에서 여액 0.2mL을 적절하게 라벨링된 비등 튜브에 피펫팅한다. 로젠 버퍼 0.5mL를 각각의 비등 튜브에 분배한다. 봉쇄 후드 아래에서 3% 닌히드린 0.5mL를 각각의 비등 튜브에 분배한다. 와동 믹서에서 각 튜브의 내용물을 철저히 혼합한다. 흄 후드 내의 비등 수욕에 비등 튜브를 놓는다. 15 ± 1분 동안 비등시킨다. 비등 기간이 끝나면 수욕에서 비등 튜브를 제거한다. 봉쇄 후드 아래에서 각각의 비등 튜브에 50% 이소프로판올 5.0mL를 분배하고, 내용물을 철저히 혼합한다. 흡광도를 판독하기 전에 비등 튜브가 주변 온도(적어도 10분)에 도달하도록 한다.

흡광도 판독

봉쇄 후드 아래에서 작업하는 동안 튜브의 흡광도를 판독한다. 분광 광도계를 켜고 예열되도록 한다. 분광 광도계의 파장을 570nm로 설정한다. 50% 이소프로판올에 대해 분광 광도계를 제로화한다. 물, 류신, 트립신 대조군 및 시험중인 샘플의 흡광도(A₅₇₀)를 판독한다. 첫 번째 샘플이 판독된 시간을 시간 단위로 기록한다. 판독 값을 1000 X A₅₇₀으로 기록하고 마지막 샘플이 판독된 시간을 시간 단위로 기록한다. 모든 판독은 1시간 간격 이내로 수행해야 한다.

계산 원리

총 판독 시간 및 총 항온배양 시간을 분 단위로 계산한다. 총 판독 시간은 60분 미만이어야 하고, 총 항온배양 시간은 1290 내지 1350분이어야 한다. 선형 최소 제곱법을 사용하여 류신 표준에 대한 기울기 "b" 및 상관 계수 "r"을 계산한다(x = nmol 류신 대 y = A₅₇₀ 판독 값). "b" 값의 단위는 A₅₇₀/nmol 류신이다. "b" 값을 소수점 둘째 자리까지 기록한다. 류신에 대한 b 값은 2.88 내지 3.33이여야 한다. 트립신 대조군(T)에 대한 평균 판독 값을 계산한다. 트립신 대조군(T)에 대한 평균 판독 값은 221 내지 338이어야 한다. 이 평균을 가장 가까운 정수로 기록한다(단계 A). 각 반응 튜브에 대한 평균 중복 샘플 A₅₇₀ 판독 값. 이 숫자를 가장 가까운 정수로 기록한다. 평균 샘플 A₅₇₀ 판독 값에서 평균 트립신(단계 A)을 빼서 순 샘플 판독 값을 얻는다.

다음과 같이 nmol leu eq/분으로 튜브당 활성(ACT)을 계산한다:

여기서 20은 전개된 반응 혼합물의 양에 대한 희석 인자이고, "b"는 류신 표준 곡선의 기울기이다. 이 숫자를 소수점 한 자리까지 기록한다. 시험중인 샘플의 튜브당 활성은 1.6 내지 5.7 nmol leu eq/분이어야 한다.

다음과 같이 BTC 단위로 활성을 계산한다:

BTC 단위 = 활성(nmol leu eq/분) x 콜라겐 보정 계수.

다음과 같이 샘플 1mL당 BTC 단위로 활성을 계산한다:

다음과 같이 BTC 단위/mm로 샘플의 비활성도를 계산한다:

BTC 단위를 ABC 단위로 전환하는 방법은 다음과 같다:

ABC 단위 = BTC 단위 x 1.09

i. BTC 단위 및 ABC 단위

콜라게나아제가 약 5,000 BTC 단위/mg 내지 약 25,000 BTC 단위/mg, 또는 약 10,000 BTC 단위/mg 내지 약 25,000 BTC 단위/mg, 또는 약 15,000 BTC 단위/mg, 또는 약 17,500 BTC 단위/mg, 또는 약 20,000 BTC 단위/mg, 또는 약 22,500 BTC 단위/mg, 또는 약 9,175 BTC 단위/0.58 mg, 또는 15,817 BTC 단위/mg의 비활성도를 갖는 다양한 콜라게나아제 조성물이 사용될 수 있고, 여기서 "mg"은 (부형제 및 기타 성분과는 다른) 조성물에 존재하는 콜라게나아제(들)의 양을 나타낸다.

또한, 콜라게나아제가 약 5,000 ABC 단위/mg 내지 약 25,000 ABC 단위/mg, 또는 약 10,000 ABC 단위/mg 내지 약 25,000 ABC 단위/mg, 또는 약 15,000 ABC 단위/mg, 또는 약 17,500 ABC 단위/mg, 또는 약 20,000 ABC 단위/mg, 또는 약 22,500 ABC 단위/mg, 또는 약 10,000 ABC 단위/0.58 mg, 또는 17,241 ABC 단위/mg의 비활성도를 갖는 다양한 콜라게나아제 조성물이 사용될 수 있고, 여기서 "mg"은 (부형제 및 기타 성분과는 다른) 조성물에 존재하는 콜라게나아제(들)의 양을 나타낸다.

d. 기타 검정법

표지된 콜라겐을 사용하는 검정 방법은 문헌(참조: Gisslow et al., Anal. Biochem., 68: 70-78 (1975); Robertson et al., Clinica Chimica Acta, 42:43-45 (1972); Sakamoto et al., A New Method for the Assay of Tissue Collagenase (36297) (1972))에 보고되었다. 기타 검정법 중 하나는 워싱턴 바이오케미칼 코포레이션 검정법(http://www.worthington-biochem.com/CLS/assay.html)(2019년 7월 3일 엑세스)이다.

4. 콜라게나아제의 용량

본원에 사용된 콜라게나아제 용량에 대해, 본 발명은 피하 주사시 격막에 결합하고 용해하기에 충분한 콜라게나아제의 치료적 유효량을 제공하여 치료전 기준선에 비해 셀룰라이트의 외관을 감소시킨다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.01mg 내지 약 20mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.05mg 내지 약 15mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.10mg 내지 약 10mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.15mg 내지 약 5mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.20mg 내지 약 3mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.25mg 내지 약 2mg의 양으로 단일 또는 분할 용량으로 주사될 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 0.05mg, 약 0.10mg, 약 0.15mg, 약 0.20mg, 약 0.25mg, 약 0.30mg, 약 0.35mg, 약 0.40mg, 약 0.45mg, 약 0.50mg, 약 0.55mg, 약 0.60mg, 약 0.65mg, 약 0.70mg, 약 0.75mg, 약 0.80mg, 약 0.85mg, 약 0.90mg, 약 0.95mg, 약 1.00mg, 1.05mg, 약 1.10mg, 약 1.15mg, 약 1.20mg, 약 1.25mg, 약 1.30mg, 약 1.35mg, 약 1.40mg, 약 1.45mg, 약 1.50mg, 약 1.55mg, 약 1.60mg, 약 1.65mg, 약 1.70mg, 약 1.75mg, 약 1.80mg, 약 1.85mg, 약 1.90mg, 약 1.95mg, 약 2.00mg, 2.05mg, 약 2.10mg, 약 2.15mg, 약 2.20mg, 약 2.25mg, 약 2.30mg, 약 2.35mg, 약 2.40mg, 약 2.45mg, 약 2.50mg, 약 2.55mg, 약 2.60mg, 약 2.65mg, 약 2.70mg, 약 2.75mg, 약 2.80mg, 약 2.85mg, 약 2.90mg, 약 2.95mg, 약 3.00mg, 3.05mg, 약 3.10mg, 약 3.15mg, 약 3.20mg, 약 3.25mg, 약 3.30mg, 약 3.35mg, 약 3.40mg, 약 3.45mg, 약 3.50mg, 약 3.55mg, 약 3.60mg, 약 3.65mg, 약 3.70mg, 약 3.75mg, 약 3.80mg, 약 3.85mg, 약 3.90mg, 약 3.95mg, 약 4.00mg, 4.05mg, 약 4.10mg, 약 4.15mg, 약 4.20mg, 약 4.25mg, 약 4.30mg, 약 4.35mg, 약 4.40mg, 약 4.45mg, 약 4.50mg, 약 4.55mg, 약 4.60mg, 약 4.65mg, 약 4.70mg, 약 4.75mg, 약 4.80mg, 약 4.85mg, 약 4.90mg, 약 4.95mg, 약 5.00mg, 5.05mg, 약 5.10mg, 약 5.15mg, 약 5.20mg, 약 5.25mg, 약 5.30mg, 약 5.35mg, 약 5.40mg, 약 5.45mg, 약 5.50mg, 약 5.55mg, 약 5.60mg, 약 5.65mg, 약 5.70mg, 약 5.75mg, 약 5.80mg, 약 5.85mg, 약 5.90mg, 약 5.95mg, 또는 약 6.00mg의 양으로 주사될 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 2.6min^-1 내지 5.2min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 3.0min^-1 내지 5.0min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 3.4min^-1 내지 4.8min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 3.5min^-1 내지 4.5min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 2.0min^-1, 약 2.1min^-1, 약 2.2min^-1, 약 2.3min^-1, 약 2.4min^-1, 약 2.5min^-1, 약 2.6min^-1, 약 2.7min^-1, 약 2.8min^-1, 약 2.9min^-1, 약 3.0min^-1, 약 3.1min^-1, 약 3.2min^-1, 약 3.3min^-1, 약 3.4min^-1, 약 3.5min^-1, 약 3.6min^-1, 약 3.7min^-1, 약 3.8min^-1, 약 3.9min^-1, 약 4.0min^-1, 약 4.1min^-1, 약 4.2min^-1, 약 4.3min^-1, 약 4.4min^-1, 약 4.5min^-1, 약 4.6min^-1, 약 4.7min^-1, 약 4.8min^-1, 약 4.9min^-1, 약 5.0min^-1, 약 5.1min^-1, 약 5.2min^-1, 약 5.3min^-1, 약 5.4min^-1, 약 5.5min^-1, 약 5.6min^-1, 약 5.7min^-1, 약 5.8min^-1, 약 5.9min^-1, 또는 약 6.0min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.7min^-1 내지 7.6min^-1의 V_max, 또는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1 내지 6, 또는 약 2 내지 5, 또는 약 3 내지 4min^-1의 V_max를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 135min^-1 내지 268min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 150min^-1 내지 250min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 175min^-1 내지 225min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 130min^-1, 약 135min^-1, 약 140min^-1, 약 145min^-1, 약 150min^-1, 약 155min^-1, 약 160min^-1, 약 165min^-1, 약 170min^-1, 약 175min^-1, 약 180min^-1, 약 185min^-1, 약 190min^-1, 약 195min^-1, 약 200min^-1, 약 205min^-1, 약 210min^-1, 약 215min^-1, 약 220min^-1, 약 225min^-1, 약 230min^-1, 약 235min^-1, 약 240min^-1, 약 245min^-1, 약 250min^-1, 약 255min^-1, 약 260min^-1, 약 265min^-1, 약 270min^-1, 약 275min^-1, 또는 약 280min^-1의 V_max를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 4min^-1 내지 400min^-1의 V_max, 또는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.3 내지 30.5, 또는 약 10 내지 375, 또는 약 20 내지 350, 또는 약 50 내지 300, 또는 약 100 내지 275min^-1의 V_max를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 75mM 내지 147mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 80mM 내지 140mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 85mM 내지 130mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 90mM 내지 120mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 70mM, 약 72mM, 약 75mM, 약 77mM, 약 80mM, 약 82mM, 약 85mM, 약 87mM, 약 90mM, 약 92mM, 약 95mM, 약 97mM, 약 100mM, 약 102mM, 약 105mM, 약 107mM, 약 110mM, 약 112mM, 약 115mM, 약 117mM, 약 120mM, 약 122mM, 약 125mM, 약 127mM, 약 130mM, 약 132mM, 약 135mM, 약 137mM, 약 140mM, 약 142mM, 약 145mM, 약 147mM, 약 150mM, 약 152mM, 약 155mM, 또는 약 157mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 4.4mM 내지 437mM의 K_m, 또는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 5 내지 400, 또는 약 20 내지 375, 또는 약 50 내지 325, 또는 약 100 내지 275, 또는 약 150 내지 250mM, 또는 약 4.1 내지 410 나노몰의 K_m을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.03mM 내지 3.1mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1.00mM 내지 1.60mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1.10mM 내지 1.50mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1.15mM 내지 1.40mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.80mM, 약 0.82mM, 약 0.85mM, 약 0.87mM, 약 0.90mM, 약 0.92mM, 약 0.95mM, 약 0.97mM, 약 1.00mM, 약 1.02mM, 약 1.05mM, 약 1.07mM, 약 1.10mM, 약 1.12mM, 약 1.15mM, 약 1.17mM, 약 1.20mM, 약 1.22mM, 약 1.25mM, 약 1.27mM, 약 1.30mM, 약 1.32mM, 약 1.35mM, 약 1.37mM, 약 1.40mM, 약 1.42mM, 약 1.45mM, 약 1.47mM, 약 1.50mM, 약 1.52mM, 약 1.55mM, 약 1.57mM, 약 1.60mM, 약 1.62mM, 약 1.65mM, 또는 약 1.67mM의 K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.027mM 내지 2.7mM의 K_m, 또는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.1 내지 2, 또는 약 0.5 내지 1.5, 또는 약 1 내지 1.35mM의 K_m을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 36sec^-1 내지 671sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 50sec^-1 내지 600sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 60sec^-1 내지 500sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 70sec^-1 내지 400sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 100sec^-1 내지 350sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 30sec^-1, 약 40sec^-1, 약 50sec^-1, 약 60sec^-1, 약 70sec^-1, 약 80sec^-1, 약 90sec^-1, 약 100sec^-1, 약 110sec^-1, 약 120sec^-1, 약 130sec^-1, 약 140sec^-1, 약 150sec^-1, 약 160sec^-1, 약 170sec^-1, 약 180sec^-1, 약 190sec^-1, 약 200sec^-1, 약 210sec^-1, 약 220sec^-1, 약 230sec^-1, 약 240sec^-1, 약 250sec^-1, 약 260sec^-1, 약 270sec^-1, 약 280sec^-1, 약 290sec^-1, 약 300sec^-1, 약 310sec^-1, 약 320sec^-1, 약 330sec^-1, 약 340sec^-1, 약 350sec^-1, 약 360sec^-1, 약 370sec^-1, 약 380sec^-1, 약 390sec^-1, 약 400sec^-1, 약 410sec^-1, 약 420sec^-1, 약 430sec^-1, 약 440sec^-1, 약 450sec^-1, 약 460sec^-1, 약 470sec^-1, 약 480sec^-1, 약 490sec^-1, 약 500sec^-1, 약 510sec^-1, 약 520sec^-1, 약 530sec^-1, 약 540sec^-1, 약 550sec^-1, 약 560sec^-1, 약 570sec^-1, 약 580sec^-1, 약 590sec^-1, 약 600sec^-1, 약 610sec^-1, 약 620sec^-1, 약 630sec^-1, 약 640sec^-1, 약 650sec^-1, 약 660sec^-1, 약 670sec^-1, 약 680sec^-1, 약 690sec^-1, 약 700sec^-1, 약 710sec^-1, 약 720sec^-1, 약 730sec^-1, 약 740sec^-1, 약 750sec^-1, 또는 약 760sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1sec^-1 내지 107sec^-1의 K_cat, 또는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 10 내지 100, 또는 약 20 내지 80, 또는 약 30 내지 70, 또는 약 40 내지 60sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 90 내지 10,000, 또는 약 41,000sec^-1 내지 약 81,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이 약 45,000sec^-1 내지 약 75,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 50,000sec^-1 내지 약 70,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 55,000sec^-1 내지 약 65,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 35,000sec^-1, 약 37,500sec^-1, 약 40,000sec^-1, 약 42,500sec^-1, 약 45,000sec^-1, 약 47,500sec^-1, 약 50,000sec^-1, 약 52,500sec^-1, 약 55,000sec^-1, 약 57,500sec^-1, 약 60,000sec^-1, 약 62,500sec^-1, 약 65,000sec^-1, 약 67,500sec^-1, 약 70,000sec^-1, 약 72,500sec^-1, 약 75,000sec^-1, 약 77,500sec^-1, 약 80,000sec^-1, 약 82,500sec^-1, 또는 약 85,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1215sec^-1 내지 약 120,000sec^-1의 K_cat, 또는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 2,000 내지 100,000, 또는 약 10,000 내지 90,000, 또는 약 20,000 내지 80,000, 또는 약 30,000 내지 70,000, 또는 약 40,000 내지 60,000sec^-1의 K_cat를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 376 내지 38,000μsec, 또는 약 14,000μsec 내지 약 28,000μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 16,000μsec 내지 약 26,000μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 18,000μsec 내지 약 24,000μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 20,000μsec 내지 약 22,000μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 12,500μsec, 약 12,750μsec, 약 13,000μsec, 약 13,250μsec, 약 13,500μsec, 약 13,750μsec, 약 14,000μsec, 약 14,250μsec, 약 14,750μsec, 약 15,000μsec, 약 15,250μsec, 약 15,500μsec, 약 15,750μsec, 약 16,000μsec, 약 16,250μsec, 약 16,500μsec, 약 16,750μsec, 약 17,000μsec, 약 17,250μsec, 약 17,500μsec, 약 17,750μsec, 약 18,000μsec, 약 18,250μsec, 약 18,500μsec, 약 18,750μsec, 약 19,000μsec, 약 19,250μsec, 약 19,500μsec, 약 19,750μsec, 약 20,000μsec, 약 20,250μsec, 약 20,500μsec, 약 20,750μsec, 약 21,000μsec, 약 21,250μsec, 약 21,500μsec, 약 21,750μsec, 약 22,000μsec, 약 22,250μsec, 약 22,500μsec, 약 22,750μsec, 약 23,000μsec, 약 23,250μsec, 약 23,500μsec, 약 23,750μsec, 약 24,000μsec, 약 24,250μsec, 약 24,500μsec, 약 24,750μsec, 약 25,000μsec, 약 25,250μsec, 약 25,500μsec, 약 25,750μsec, 약 26,000μsec, 약 26,250μsec, 약 26,500μsec, 약 26,750μsec, 약 27,000μsec, 약 27,250μsec, 약 27,500μsec, 약 27,750μsec, 약 28,000μsec, 약 28,250μsec, 약 28,500μsec, 약 28,750μsec, 약 29,000μsec, 또는 약 29,250μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 370μsec 내지 약 36,700μsec의 1/K_cat, 또는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 750 내지 30,000, 또는 약 2,500 내지 25,000, 또는 약 5,000 내지 20,000, 또는 약 10,000 내지 18,000, 또는 약 15,000μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 4μsec 내지 약 430μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 14μsec 내지 약 23μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 16μsec 내지 약 21μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 10.0μsec, 약 10.2μsec, 약 10.4μsec, 약 10.6μsec, 약 10.8μsec, 약 11.0μsec, 약 11.2μsec, 약 11.4μsec, 약 11.6μsec, 약 11.8μsec, 약 12.0μsec, 약 12.2μsec, 약 12.4μsec, 약 12.6μsec, 약 12.8μsec, 약 13.0μsec, 약 13.2μsec, 약 13.4μsec, 약 13.6μsec, 약 13.8μsec, 약 14.0μsec, 약 14.2μsec, 약 14.4μsec, 약 14.6μsec, 약 14.8μsec, 약 15.0μsec, 약 15.2μsec, 약 15.4μsec, 약 15.6μsec, 약 15.8μsec, 약 16.0μsec, 약 16.2μsec, 약 16.4μsec, 약 16.6μsec, 약 16.8μsec, 약 17.0μsec, 약 17.2μsec, 약 17.4μsec, 약 17.6μsec, 약 17.8μsec, 약 18.0μsec, 약 18.2μsec, 약 18.4μsec, 약 18.6μsec, 약 18.8μsec, 약 19.0μsec, 약 19.2μsec, 약 19.4μsec, 약 19.6μsec, 약 19.8μsec, 약 20.0μsec, 약 20.2μsec, 약 20.4μsec, 약 20.6μsec, 약 20.8μsec, 약 21.0μsec, 약 21.2μsec, 약 21.4μsec, 약 21.6μsec, 약 21.8μsec, 약 22.0μsec, 약 22.2μsec, 약 22.4μsec, 약 22.6μsec, 약 22.8μsec, 약 23.0μsec, 약 23.2μsec, 약 23.4μsec, 약 23.6μsec, 약 23.8μsec, 약 24.0μsec, 약 24.2μsec, 약 24.4μsec, 약 24.6μsec, 약 24.8μsec, 약 25.0μsec, 약 25.2μsec, 약 25.4μsec, 약 25.6μsec, 약 25.8μsec, 약 26.0μsec, 약 26.2μsec, 약 26.4μsec, 약 26.8μsec, 약 27.0μsec, 약 27.2μsec, 또는 약 27.4μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.3μsec 내지 약 32μsec의 1/K_cat, 또는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1 내지 30, 또는 약 5 내지 25, 또는 약 10 내지 20, 또는 약 15μsec의 1/K_cat를 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 5,140 mM^-1sec^-1 내지 약 508,814 mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.50 mM^-1sec^-1 내지 약 7.75 mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.75 mM^-1sec^-1 내지 약 7.00 mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 1.00mM^-1sec^-1 내지 약 6.00mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.10mM^-1sec^-1, 약 0.20mM^-1sec^-1, 약 0.30mM^-1sec^-1, 약 0.40mM^-1sec^-1, 약 0.50mM^-1sec^-1, 약 0.60mM^-1sec^-1, 약 0.70mM^-1sec^-1, 약 0.80mM^-1sec^-1, 약 0.90mM^-1sec^-1, 약 1.00mM^-1sec^-1, 약 1.10mM^-1sec^-1, 약 1.20mM^-1sec^-1, 약 1.30mM^-1sec^-1, 약 1.40mM^-1sec^-1, 약 1.50mM^-1sec^-1, 약 1.60mM^-1sec^-1, 약 1.70mM^-1sec^-1, 약 1.80mM^-1sec^-1, 약 1.90mM^-1sec^-1, 약 2.00mM^-1sec^-1, 약 2.10mM^-1sec^-1, 약 2.20mM^-1sec^-1, 약 2.30mM^-1sec^-1, 약 2.40mM^-1sec^-1, 약 2.50mM^-1sec^-1, 약 2.60mM^-1sec^-1, 약 2.70mM^-1sec^-1, 약 2.80mM^-1sec^-1, 약 2.90mM^-1sec^-1, 약 3.00mM^-1sec^-1, 약 3.10mM^-1sec^-1, 약 3.20mM^-1sec^-1, 약 3.30mM^-1sec^-1, 약 3.40mM^-1sec^-1, 약 3.50mM^-1sec^-1, 약 3.60mM^-1sec^-1, 약 3.70mM^-1sec^-1, 약 3.80mM^-1sec^-1, 약 3.90mM^-1sec^-1, 약 4.00mM^-1sec^-1, 약 4.10mM^-1sec^-1, 약 4.20mM^-1sec^-1, 약 4.30mM^-1sec^-1, 약 4.40mM^-1sec^-1, 약 4.50mM^-1sec^-1, 약 4.60mM^-1sec^-1, 약 4.70mM^-1sec^-1, 약 4.80mM^-1sec^-1, 약 4.90mM^-1sec^-1, 약 5.00mM^-1sec^-1, 약 5.10mM^-1sec^-1, 약 5.20mM^-1sec^-1, 약 5.30mM^-1sec^-1, 약 5.40mM^-1sec^-1, 약 5.50mM^-1sec^-1, 약 5.60mM^-1sec^-1, 약 5.70mM^-1sec^-1, 약 5.80mM^-1sec^-1, 약 5.90mM^-1sec^-1, 약 6.00mM^-1sec^-1, 약 6.10mM^-1sec^-1, 약 6.20mM^-1sec^-1, 약 6.30mM^-1sec^-1, 약 6.40mM^-1sec^-1, 약 6.50mM^-1sec^-1, 약 6.60mM^-1sec^-1, 약 6.70mM^-1sec^-1, 약 6.80mM^-1sec^-1, 약 6.90mM^-1sec^-1, 약 7.00mM^-1sec^-1, 약 7.10mM^-1sec^-1, 약 7.20mM^-1sec^-1, 약 7.30mM^-1sec^-1, 또는 약 7.40mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.0048mM^-1sec^-1 내지 약 0.47mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m, 또는 SRC 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 0.009 내지 약 0.3, 또는 약 0.01 내지 약 0.25, 또는 약 0.1 내지 0.25mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 60mM^-1sec^-1 내지 약 6,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 30,000mM^-1sec^-1 내지 약 85,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 36,000mM^-1sec^-1 내지 약 77,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 40,000mM^-1sec^-1 내지 약 70,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 40,000mM^-1sec^-1, 약 42,000mM^-1sec^-1, 약 44,000mM^-1sec^-1, 약 46,000mM^-1sec^-1, 약 48,000mM^-1sec^-1, 약 50,000mM^-1sec^-1, 약 52,000mM^-1sec^-1, 약 54,000mM^-1sec^-1, 약 56,000mM^-1sec^-1, 약 58,000mM^-1sec^-1, 약 60,000mM^-1sec^-1, 약 62,000mM^-1sec^-1, 약 64,000mM^-1sec^-1, 약 66,000mM^-1sec^-1, 약 68,000mM^-1sec^-1, 약 70,000mM^-1sec^-1, 약 72,000mM^-1sec^-1, 약 74,000mM^-1sec^-1, 약 76,000mM^-1sec^-1, 약 78,000mM^-1sec^-1, 약 80,000mM^-1sec^-1, 약 82,000mM^-1sec^-1, 약 84,000mM^-1sec^-1, 약 86,000mM^-1sec^-1, 약 88,000mM^-1sec^-1, 약 90,000mM^-1sec^-1, 약 92,000mM^-1sec^-1, 약 94,000mM^-1sec^-1, 또는 약 96,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 900mM^-1sec^-1 내지 약 90,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m, 또는 GPA 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 약 2,000 내지 80,000, 또는 약 10,000 내지 70,000, 또는 약 20,000 내지 60,000, 또는 약 30,000 내지 50,000, 또는 약 40,000 내지 45,000mM^-1sec^-1의 K_cat/K_m을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 60kDa 내지 약 130kDa의 분자 질량을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 70kDa 내지 약 130kDa의 분자 질량을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 80kDa 내지 약 120kDa의 분자 질량을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 90kDa 내지 약 120kDa의 분자 질량을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 100kDa 내지 약 110kDa의 분자 질량을 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 55kDa, 약 57kDa, 약 60kDa, 약 62kDa, 약 65kDa, 약 67kDa, 약 70kDa, 약 72kDa, 약 75kDa, 약 77kDa, 약 80kDa, 약 82kDa, 약 85kDa, 약 87kDa, 약 90kDa, 약 92kDa, 약 95kDa, 약 97kDa, 약 100kDa, 약 102kDa, 약 105kDa, 약 107kDa, 약 110kDa, 약 112kDa, 약 115kDa, 약 117kDa, 약 120kDa, 약 122kDa, 약 125kDa, 약 127kDa, 약 130kDa, 약 132kDa, 약 135kDa, 또는 약 137kDa의 분자 질량을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 역상 HPLC에 의해 측정된 바와 같이, 적어도 80%의 순도를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 역상 HPLC에 의해 측정된 바와 같이, 약 80%, 약 81%, 약 82%, 약 83%, 약 84%, 약 85%, 약 86%, 약 87%, 약 88%, 약 89%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 또는 약 99%의 순도를 가질 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 면적 기준으로 1% 이하의 클로스트리파인을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 면적 기준으로 1% 이하의 젤라티나아제를 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 면적 기준으로 1% 이하의 류펩틴을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 1 cfu/mL 이하의 생균수를 포함할 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능(즉, 비활성도)을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 2,500 내지 약 25,000 SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 5,000 내지 약 20,000 SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 500, 약 1,000, 약 1,500, 약 2,000, 약 2,500, 약 3,000, 약 3,500, 약 4,000, 약 4,500, 약 5,000, 약 5,500, 약 6,000, 약 6,500, 약 7,000, 약 7,500, 약 8,000, 약 8,500, 약 9,000, 약 9,500, 약 10,000, 약 10,500, 약 11,000, 약 11,500, 약 12,000, 약 12,500, 약 13,000, 약 13,500, 약 14,000, 약 14,500, 약 15,000, 약 15,500, 약 16,000, 약 16,500, 약 17,000, 약 17,500, 약 18,000, 약 18,500, 약 19,000, 약 19,500, 약 20,000, 약 20,500, 약 21,000, 약 21,500, 약 22,000, 약 22,500, 약 23,000, 약 23,500, 약 24,000, 약 24,500, 약 25,000, 약 25,500, 약 26,000, 약 26,500, 약 27,000, 약 27,500, 약 28,000, 약 28,500, 약 29,000, 약 29,500, 또는 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능(즉, 비활성도)을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 7,500 내지 약 25,000 f-SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 10,000 내지 약 20,000 f-SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 2,500, 약 3,000, 약 3,500, 약 4,000, 약 4,500, 약 5,000, 약 5,500, 약 6,000, 약 6,500, 약 7,000, 약 7,500, 약 8,000, 약 8,500, 약 9,000, 약 9,500, 약 10,000, 약 10,500, 약 11,000, 약 11,500, 약 12,000, 약 12,500, 약 13,000, 약 13,500, 약 14,000, 약 14,500, 약 15,000, 약 15,500, 약 16,000, 약 16,500, 약 17,000, 약 17,500, 약 18,000, 약 18,500, 약 19,000, 약 19,500, 약 20,000, 약 20,500, 약 21,000, 약 21,500, 약 22,000, 약 22,500, 약 23,000, 약 23,500, 약 24,000, 약 24,500, 약 25,000, 약 25,500, 약 26,000, 약 26,500, 약 27,000, 약 27,500, 약 28,000, 약 28,500, 약 29,000, 약 29,500, 또는 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 150,000 내지 약 350,000 GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 200,000 내지 약 300,000 GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 100,000, 약 110,000, 약 120,000, 약 130,000, 약 140,000, 약 150,000, 약 160,000, 약 170,000, 약 180,000, 약 190,000, 약 200,000, 약 210,000, 약 220,000, 약 230,000, 약 240,000, 약 250,000, 약 260,000, 약 270,000, 약 280,000, 약 290,000, 약 300,000, 약 310,000, 약 320,000, 약 330,000, 약 340,000, 약 350,000, 약 360,000, 약 370,000, 약 380,000, 약 390,000, 또는 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 175,000 내지 약 500,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 250,000 내지 약 450,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 300,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 175,000, 약 185,000, 약 195,000, 약 205,000, 약 215,000, 약 225,000, 약 235,000, 약 245,000, 약 255,000, 약 265,000, 약 275,000, 약 285,000, 약 295,000, 약 305,000, 약 315,000, 약 325,000, 약 335,000, 약 345,000, 약 355,000, 약 365,000, 약 375,000, 약 385,000, 약 395,000, 약 405,000, 약 415,000, 약 425,000, 약 435,000, 약 445,000, 약 455,000, 약 465,000, 약 475,000, 약 485,000, 또는 약 495,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다.

일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 7,500 내지 약 20,000 ABC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 10,000 내지 약 17,500 ABC 단위/mg의 효능을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 콜라게나아제는 약 5,000, 약 5,500, 약 6,000, 약 6,500, 약 7,000, 약 7,500, 약 8,000, 약 8,500, 약 9,000, 약 9,500, 약 10,000, 약 10,500, 약 11,000, 약 11,500, 약 12,000, 약 12,500, 약 13,000, 약 13,500, 약 14,000, 약 14,500, 약 15,000, 약 15,500, 약 16,000, 약 16,500, 약 17,000, 약 17,500, 약 18,000, 약 18,500, 약 19,000, 약 19,500, 약 20,000, 약 20,500, 약 21,000, 약 21,500, 약 22,000, 약 22,500, 약 23,000, 약 23,500, 약 24,000, 약 24,500, 또는 약 25,000 ABC 단위/mg을 포함할 수 있다.

일부 실시형태에서, 조성물에 존재하는 콜라게나아제는 대략 1:1의 비율로 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II를 포함한다. 0.1-2:1, 또는 0.25-2:1, 또는 0.5-2:1, 또는 0.75-2:1, 또는 1:0.1-2, 또는 1:0.25-2, 또는 1:0.5-2, 또는 1:0.75-2, 또는 1:0, 또는 0:1과 같이 다른 비율의 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II가 사용될 수 있다. 각각의 콜라게나아제 I 및 콜라게나아제 II는 역상 HPLC에 의해 측정될 때 면적 순도가 적어도 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 91%, 또는 92%, 또는 93%, 또는 94%, 또는 95%, 또는 96%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99%, 또는 100%일 수 있다.

또다른 실시형태에서, 콜라게나아제 조성물은 AUX I과 AUX II 비율이 대략 1:1인 CCH를 포함한다. 0.1-2:1, 또는 0.25-2:1, 또는 0.5-2:1, 또는 0.75-2:1, 또는 1:0.1-2, 또는 1:0.25-2, 또는 1:0.5-2, 또는 1:0.75-2, 또는 1:0, 또는 0:1과 같이 다른 비율의 AUX I 및 AUX II를 사용할 수 있다. 각각의 AUX I 및 AUX II는 역상 HPLC에 의해 측정된 바와 같이 적어도 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 91%, 또는 92%, 또는 93%, 또는 94%, 또는 95%, 또는 96%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99%, 또는 100%의 면적 순도를 가질 수 있다.

다른 예에서, 콜라게나아제 조성물은 액체일 수 있거나 희석제를 사용하여 동결건조된 고체 형태로부터 재구성된다. 혼합물의 용량은 희석제와 상관없이 존재하는 콜라게나아제의 양에 의해 측정되고, 1회 이상의 주사에서 약 0.1mg 내지 약 20mg을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 투여되는 용량은 1회 이상의 주사에서 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 1.68mg, 2.52mg, 3.36mg, 4.2mg, 5.04mg, 5.88mg, 6.72mg, 7.56mg, 또는 8.4mg이다.

예를 들어, 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 또는 1.68mg이 약 12회 분할 주사로 투여된다. 주사되는 콜라게나아제 조성물의 용적은 주사당 0.01mL 내지 3mL, 또는 치료 방문당 총 약 0.2mL 내지 150mL의 범위일 수 있다. 특정 실시형태에서, 상기 용량은 CCH를 포함하는 콜라게나아제 조성물에 대한 것이다. 또다른 실시형태에서, 상기 용량은 다음의 특성 중 하나 이상을 갖는 콜라게나아제 조성물에 대한 것이다:

ㆍ 약 5,140 내지 508,814(SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934(GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1

ㆍ 약 60kDa 내지 약 130kDa, 또는 약 70 내지 약 130kDa, 또는 약 80 내지 약 120kDa, 또는 약 90 내지 약 120kDa, 또는 약 100 내지 약 110kDa의 분자 질량.

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능(즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,000 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 클로스트리파인, 젤라티나아제, 및 류펩틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 불순물 면적이 1% 이하

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 실시형태에서, 약 0.84mg의 CCH가 치료 부위당 약 12회의 균등하게 분할된 주사로 주사된다(약 0.07mg x 12회 주사 = 약 0.84mg). 일부 경우에, 0.84mg을 사용한 이러한 치료는 2, 3, 4 또는 5회 치료 방문에 대해 10 내지 40일마다 발생한다. 다른 경우에, 1회 치료 방문시 또는 2회, 3회, 4회 또는 5회 치료 방문에 대해 10 내지 40일마다 하나 초과의 치료 부위에 0.84mg을 주사한다. 다른 실시형태에서, 5회 초과의 치료 방문이 있다.

또다른 측면에서, 치료 부위(들)에 주사될 수 있는 콜라게나아제의 양은 1회 이상의 주사에서 치료 방문당 약 0.001mg 내지 20mg 콜라게나아제이고, 예를 들어, 용량은 약 3 내지 약 100회 주사로 균등하게 분할된다. 콜라게나아제는 액체 형태이거나 희석제를 사용하여 동결건조된 고체로부터 재구성된다. 콜라게나아제의 용량은 희석제와 상관없이 콜라게나아제의 양에 의해 측정되고, 약 0.1mg 내지 1mg, 또는 0.25mg 내지 0.75mg, 또는 0.1mg 내지 2mg, 또는 0.25mg 내지 1.75mg, 또는 0.5mg 내지 1mg, 0.1mg 내지 3mg, 또는 0.25mg 내지 2.75mg, 또는 0.5mg 내지 2.5mg, 또는 0.75mg 내지 2.25mg, 또는 1mg 내지 2mg, 또는 0.1mg 내지 4mg, 또는 0.25mg 내지 3.75mg, 또는 0.5mg 내지 3.5mg, 또는 0.75mg 내지 3mg, 또는 1mg 내지 3mg을 포함할 수 있다. 다른 실시형태에서, 용량은 1회 이상의 주사에서 약 0.001mg, 0.01mg, 0.04mg, 0.05mg, 0.07mg, 0.1mg, 0.2mg, 0.3mg, 0.4mg, 0.5mg, 0.6mg, 0.7mg, 0.8mg, 0.9mg, 1mg, 1.1mg, 1.2mg, 1.3mg, 1.4mg, 1.5mg, 1.6mg, 1.7mg, 1.8mg, 1.9mg, 2mg, 2.25mg, 2.5mg, 2.75mg, 3mg, 3.25mg, 3.5mg, 3.75mg, 4.0mg, 4.25mg, 4.5mg, 4.75mg, 5.0mg, 5.25mg, 5.5mg, 5.75mg, 6mg, 6.25mg, 6.5mg, 6.75mg, 7mg, 7.25mg, 7.5mg, 7.75mg, 8mg, 8.25mg, 8.5mg, 8.75mg, 9mg, 9.25mg, 9.5mg, 9.75mg, 10mg, 11mg, 12,mg, 13mg, 14mg, 15mg, 16mg, 17mg, 18mg, 19mg, 또는 20mg이다.

또다른 실시형태에서, 투여되는 용량은 1회 이상의 주사에서 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 1.68mg, 2.52mg, 3.36mg, 4.2mg, 또는 5.04mg이다. 또다른 예에서, 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 1.68mg, 2.52mg, 3.36mg, 4.2mg, 또는 5.04mg이 치료 부위에 약 12회 분할 주사로 투여된다. 다른 예에서, 콜라게나아제의 용량은 3회 이상의 주사로 분할된다. 주사되는 콜라게나아제 조성물의 용적은 주사당 0.01mL 내지 3mL, 또는 치료 방문당 총 약 1mL 내지 150mL의 범위일 수 있다.

일 측면에서, 상기 기재된 AUX I 및 II 혼합물("CCH")은 1회 이상의 주사에서 치료 방문당 약 0.01mg 내지 10mg 콜라게나아제의 양으로 주사될 수 있고, 예를 들어, 용량은 약 3 내지 약 50회 주사로 균등하게 분할된다. 콜라게나아제는 액체일 수 있거나 희석제를 사용하여 동결건조된 형태로부터 재구성될 수 있다. 혼합물의 용량은 희석제와 상관없이 콜라게나아제의 양에 의해 측정되고, 1회 이상의 주사에서 약 0.1mg 내지 1mg, 또는 0.25mg 내지 0.75mg, 또는 0.1mg 내지 2mg, 또는 0.25mg 내지 1.75mg, 또는 0.5mg 내지 1mg, 0.1mg 내지 3mg, 또는 0.25mg 내지 2.75mg, 또는 0.5mg 내지 2.5mg, 또는 0.75mg 내지 2.25mg, 또는 1mg 내지 2mg, 또는 0.1mg 내지 4mg, 또는 0.25mg 내지 3.75mg, 또는 0.5mg 내지 3.5mg, 또는 0.75mg 내지 3mg, 또는 1mg 내지 3mg, 또는 약 0.05mg, 0.1mg, 0.2mg, 0.3mg, 0.4mg, 0.5mg, 0.6mg, 0.7mg, 0.8mg, 0.9mg, 1mg, 1.1mg, 1.2mg, 1.3mg, 1.4mg, 1.5mg, 1.6mg, 1.7mg, 1.8mg, 1.9mg, 2mg, 2.25mg, 2.5mg, 2.75mg, 3mg, 3.25mg, 3.5mg, 3.75mg, 4.0mg, 4.25mg, 4.5mg, 4.75mg, 5.0mg, 5.25mg, 5.5mg, 5.75mg, 6mg, 6.25mg, 6.5mg, 6.75mg, 7mg, 7.25mg, 7.5mg, 7.75mg, 8mg, 8.25mg, 8.5mg, 8.75mg, 9mg, 9.25mg, 9.5mg, 9.75mg 또는 10mg을 포함할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 투여되는 CCH의 용량은 1회 이상의 주사에서 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 또는 1.68mg, 2.52mg, 3.36mg, 4.2mg, 또는 5.04mg이다. 예를 들어, 약 0.06mg, 0.48mg, 0.84mg, 또는 1.68mg, 2.52mg, 3.36mg, 4.2mg, 또는 5.04mg이 12회 주사로 투여된다. 주사되는 콜라게나아제 조성물의 용적은 주사당 0.01mL 내지 3mL, 또는 치료 방문당 총 약 1mL 내지 80mL의 범위일 수 있다.

콜라게나아제의 용량은 또한 1회 주사당 약 0.001mg 내지 0.5mg, 1회 주사당 약 0.01mg 내지 약 5mg, 또는 1회 주사당 약 0.005mg 내지 약 0.1mg, 또는 약 0.005mg, 0.04mg, 또는 0.07mg과 같이 1회 주사당 mg(희석제와는 무관)으로 표현될 수 있다.

특정 측면에서, 본 발명은 치료 방문당 약 500 ABC 단위 내지 약 50,000 ABC 단위, 또는 치료 방문당 약 10,000 ABC 단위 내지 약 25,000 ABC 단위를 주사하는 것을 고려한다. 또다른 실시형태에서, 1회 주사당 콜라게나아제의 용량은 약 50 ABC 단위 내지 약 2,500 ABC 단위, 또는 약 85 ABC 단위 내지 약 2,000 ABC 단위, 또는 약 150 ABC 단위 내지 약 1,750 ABC 단위, 또는 약 200 ABC 단위 내지 약 1,500 ABC 단위, 또는 약 300 ABC 단위 내지 약 1,250 ABC 단위, 또는 약 500 ABC 단위 내지 약 1,000 ABC 단위이다.

특정 실시형태에서, 다양한 비활성도에 따른 용량은 다음과 같다:

특정 측면에서, 본 발명은 약 5,000 BTC 단위 내지 약 25,000 BTC 단위, 또는 약 10,000 BTC 단위 내지 약 25,000 BTC 단위, 또는 약 15,000 BTC 단위, 또는 약 17,500 BTC 단위, 또는 약 20,000 BTC 단위, 또는 약 22,500 BTC 단위, 또는 약 9,175 BTC 단위, 또는 약 15,817 BTC 단위의 양으로 콜라게나아제를 주사하는 것을 고려한다.

5. 제형

CCH 또는 다른 콜라게나아제는 CCH 또는 콜라게나아제 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 제형의 형태일 수 있다. 이러한 부형제는 멸균수 또는 주사용 염화나트륨/염화칼슘, pH 조절제 및 안정제를 포함할 수 있다.

하나의 비제한적인 예는 재구성용 멸균 동결건조 분말로서 CCH 0.9mg을 함유하는 일회용 유리 바이알로서 출원인에 의해 상업적으로 공급되는 XIAFLEX®이다. 재구성용 멸균 희석제는 일회용 유리 바이알로도 제공된다. 비활성 성분에는 염산, 수크로오스 및 트로메타민이 포함된다. 희석제는 0.9% 염화나트륨에 염화칼슘 이수화물을 함유한다. XIAFLEX® 처방 정보(2018).

또다른 실시형태에서, CCH는 5-mL 바이알에 0.92mg CCH, 수크로오스, 트리스, 만니톨 및 염산을 포함하는 멸균 동결건조 분말이다. 재구성용 멸균 희석제는 개별 5mL 바이알에 채워진 주사용 증류수, 생리식염수, 또는 주사용 증류수 중 0.6% 염화나트륨 및 0.03% 염화칼슘 이수화물을 포함할 수 있다.

콜라게나아제 또는 CCH는 다른 크기의 바이알, 예를 들어, 10mL, 15mL, 20mL, 또는 30mL에 채워질 수 있다. 다른 pH 조절제, 당, 폴리올 및 안정화제는 문헌(참조: Rowe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients (5^th Ed.)]에서 찾을 수 있다.

6. 치료 방법: 주사 기법 및 투여 요법

상기 콜라게나아제 조성물은 인간 대상체에서 셀룰라이트의 중증도를 치료하거나 감소시키는 방법에 유용하다. 본 발명은 인간 환자에서 셀룰라이트의 중증도를 감소시키는 방법에 관한 것으로, 적어도 하나의 콜라게나아제를 포함하는 조성물을 제공하는 단계; 및 치료적 유효량의 조성물을 하나 이상의 딤플에 주사하는 단계를 포함하고, 여기서 환자는 치료전 기준선 중증도 수준과 비교하여 셀룰라이트의 중증도 감소를 나타낸다. 하기에 더 상세히 설명되는 바와 같이, 조성물은 다양한 주사 기법에 의해 투여될 수 있고, 다수의 척도 및 기타 측정 도구에 의해 효능을 측정할 수 있다.

본원에 기재된 콜라게나아제 조성물의 투여는 치료 방문 동안 단일 대상체에서 양측(두 허벅지 또는 두 엉덩이) 또는 모든 4개의 사분면(양쪽 엉덩이 및 양쪽 허벅지)에 투여될 수 있다. 이러한 치료 방문은 1년 기간 동안 2, 3, 4, 5 또는 6회의 치료 방문에 대해 10 내지 40일마다 발생할 수 있다. 그리고, 콜라게나아제를 모든 4 사분면에 높은 누적 용량으로 주사하는 경우조차, 3.36 mg 이하의 피하 CCH 투여 후 혈장 AUX-I 또는 AUX-II 농도를 검출하기 위한 생물분석은, 체순환 중 CCH가 정량화할 수 있는 수준이 아님을 나타내고 (즉, 정량화 검정의 더 낮은 수준 아래), 이는 체흡수가 없음을 나타내고, 추가로 전반적인 안전성을 나타낸다. 예를 들면, 인간에게 3.36 mg으로 투약하고, 래트에게 43 배의 인간 등가 용량 (HED)을 투약하면 이들 양은 양호한-내성이었다(well-tolerated)음을 나타내었다. 출원인의 콜라게나아제 요법의 약동학 연구는 2018년 9월 18일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/733,046호, 2019년 1월 6일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/788,916호, 2019년 2월 28일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/812,036호, 2019년 3월 25일에 출원된 미국 가출원 연속 제62/823,596호, 2019년 7월 11일에 출원된 국제 출원 연속 번호 PCT/US2019/041494, 및 2019년 7월 12일에 출원된 국제 출원 연속 번호 PCT/US2019/41718에 기재되고, 이는 본원에 참조로서 포함된다.

콜라게나아제에 대한 다양한 주사 파라미터 및 환자 치료를 위한 관련 기술의 일반적인 개요가 표 15에 제공된다.

특정 실시형태에서, 약 0.84 mg의 CCH를 약 12회 균등하게 분할된 주사로 사분면 (즉, 오른쪽 또는 왼쪽 엉덩이 또는 오른쪽 또는 왼쪽 허벅지)과 같은 환부에 주사한다 (약 0.07 mg x 12회 주사 = 약 0.84 mg CCH). 일부 경우, 이러한 0.84 mg 치료는 2, 3, 4, 5 또는 6회 치료를 위해 10 내지 40일마다 발생한다. 다른 경우, 하나 초과의 환부 또는 사분면에 2, 3, 4, 5 또는 6회 치료를 위해 0.84 mg을 10 내지 40일마다 주사한다.

일 실시형태에서, 수술적 표시자를 치료를 위해 선택된 각각의 딤플에 원형을 그리기 위해 사용한다. 또다른 실시형태에서, 선택된 치료 부위에 원형은 중복되지 않는다. 또한 또다른 실시형태에서, 선택된 치료 부위에 원형은 중복된다.

특정 실시형태에서, 환자는 치료 I에 따른 절차를 사용하여 표 16에 나타낸 콜라게나아제를 투여받는다 (도 7).

이러한 예에서, 임상의는 각각의 엉덩이 내에서 피험자가 서 있는 경우 잘-정의되고, 명백하고, 치료에 적합한 딤플을 선택할 수 있다. 임상의는 그 또는 그녀의 치료를 위한 딤플 선택을 제한하지 않는다. 치료는 치료 방문당 엉덩이당 (2 엉덩이에서 총 24회 주사) 12회 주사를 포함한다. 치료의 목적이 각각의 전체 엉덩이의 심미적 외관을 개선을 위한 것이기 때문에, 임상의는, 그 또는 그녀의 의견에 따라 각각의 전체 엉덩이의 심미적 외관을 가장 개선시키고 싶은 딤플을 선택할 것을 지시받는다. 엉덩이 내에 동일한 딤플 또는 이전 치료된 것들과 상이한 엉덩이 내에 딤플을 각각의 치료 방문에서 치료받을 수 있지만, 주사는 바람직하게는 3회 방문 각각에서 엉덩이 내에 (엉덩이당 12회 주사) 수행된다. 각각의 엉덩이는, 엉덩이에 치료가능한 EFP 딤플이 없거나 임상의가 엉덩이를 CR-PCSS 0의 점수로 평가하는 경우가 아니라면, 모두 3개 치료를 받는다. 특정한 엉덩이 (오른쪽 또는 왼쪽)에서 어떠한 주사도 치료 방문 2에 제공되지 않는 경우, 피험자는 여전히 치료 방문 2에 반대쪽 엉덩이에서 치료에 대해 평가하고, 치료 방문 3으로 되돌아가고, 각각의 엉덩이를 다시 피험자 (PR-PCSS) 및 연구자 (CR-PCSS)가 평가한다. 연구자가 어느 하나의 또는 둘 다의 엉덩이를 CR-PCSS 0 초과로 평가하는 경우, 치료 방문 3에서 주사를 제공한다. 추가로, 콜라게나아제 치료는 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다:

ㆍ 1 이상 사분면 치료;

ㆍ 크기에 상관없이 딤플 치료;

ㆍ 45세 초과 여성 치료;

ㆍ 피부 이완, 탄력 없음, 또는, 처진 피부가 없는 딤플 치료;

ㆍ 상이한 치료 방문에서 상이한 딤플 치료;

ㆍ ½ 인치 또는 더 긴 바늘 사용;

ㆍ 주사되는 딤플 사이 거리 제한 없음;

ㆍ 주사 위치를 제한하기 위한 간격자, 눈금자, 종이 또는 다른 장치에 좌우되지 않음;

ㆍ 적어도 하나의 주사가 딤플의 최하점에서 발생하는 것을 확실하게 함;

ㆍ 약 1 cm 미만 길이 또는 약 2 cm 초과 길이인 딤플 치료;

ㆍ 서로 약 2 cm 이내 주사 사용;

ㆍ 서로 약 2 cm 미만 이내 주사 사용 ; 및/또는

ㆍ 본원에 기재된 척도 및 방법 중 하나 이상을 사용하여 효능을 측정함.

특정 실시형태에서, 상기 측면을 준수하는 경우, 환자는 요법에 대해 신속한 반응 속도를 경험한다. 도 20-23을 참조한다.

추가로, 특정 구체적인 실시형태에서, 치료 환자를 위한 파라미터는 표 17 및 18에 제공된다.

일 실시형태에서, 재구성 생성물의 삼투압몰농도는 약 50 내지 약 1,000, 약 100 내지 약 900, 약 200 내지 약 800, 약 300 내지 약 700, 약 400 내지 약 600, 약 50, 약 100, 약 150, 약 200, 약 250, 약 300, 약 350, 약 400, 약 450, 약 500, 약 550, 약 600, 약 650, 약 700, 약 750, 약 800, 약 850, 약 900, 약 950, 또는 약 1,000mOsm/kg이다. 또다른 실시형태에서, 재구성 생성물의 삼투압몰농도는 약 512 mOsm/kg, 약 275 mOsm/kg, 약 281mOsm/kg, 또는 약 227mOsm/kg이다.

상기 방법에 추가하여, 본 발명은 이를 필요로 하는 대상체에서 EFP를 치료 또는 감소시키는 방법을 제공하고, 여기서 상기 방법은 EFP의 일반적인 절차 및 치료에 비해 다음 이점 중 적어도 하나를 제공한다:

a. 의사의 사용 용이성;

b. 치료 시간 단축;

c. 미적 상태의 개선을 얻기 어렵다는 의사의 일반적인 견해에 비추어 볼 때 예상치 못한 효능;

d. 히알루로니다아제 사용 불필요;

e. 열 사용 불필요;

f. 레이저 사용 불필요;

g. 진피절제술 없음;

h. 마취 불필요(멍든 경우에도);

i. 압축복(compressive garments) 불필요; 및

j. 진공 미사용.

또다른 실시형태에서, 셀룰라이트의 치료 또는 감소 방법은 치료할 셀룰라이트의 중증도에 제한을 두지 않으며, 예를 들어, 콜라게나아제를 사용한 치료는 셀룰라이트의 유병률이나 중증도에 관계없이 안전하고 효과적이다.

F. 단계 4―치료적 종점 및 및 효능 측정

본원에 기재된 치료는 하기 기재된 다수의 조치에 의해 셀룰라이트를 치료하는데 효과적이다. 일반적으로 본원에 사용된, 용어 "일째(Day)"는 치료 과정 중 첫번째 치료로부터 특정한 치료 부위에서 콜라게나아제 치료의 첫번째 날부터 순차적으로 날마다 측정된 연구일을 의미하고, 선행 연구 71일째로부터 순차적으로 날짜를 측정하는, 하기 실시예 5에 달리 제공된 경우는 제외한다. 예를 들어, 실시예 5에서 설명한 바와 같이, "180일째"는 실시예 2 및 3에서 보고된 71일째 후 180 일을 의미한다. 따라서, 실시예 5 문맥 밖에서, 1일째는 첫번째 치료일이고; 71일째는 1일째 후 70 일이고; 180일째는 1일째 후 179 일이다 ("180일째"가 실시예 5에서와 같이 사용되지 않는 경우, 71일째 후 180 일이거나, 첫번째 치료일 후 251 일이다).

특정 실시형태에서, 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서:

ㆍ 상기 환자의 적어도 50%가 임상의에 의해 실시간 평가된 표적 치료 부위의 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 1 레벨 개선개선됨을 나타낸다.

ㆍ 상기 환자의 적어도 50%가 표적 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 1 레벨 개선됨을 나타낸다.

ㆍ 상기 환자의 적어도 5%가 임상의에 의해 실시간 평가된 표적 치료 부위의 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 2 레벨 개선됨을 나타낸다.

ㆍ 상기 환자의 적어도 5%가 표적 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 2 레벨 개선됨을 나타낸다.

ㆍ 상기 환자의 적어도 5%는 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 딤플 크기 (용적, 길이, 너비, 깊이)의 현저한 감소, 예를 들면, 적어도 5% 감소, 또는 적어도 10% 감소, 또는 적어도 20% 감소를 경험한다.

이들 및 다른 효능 파라미터 및 기준점을 하기에 상세하게 기재한다. 추가로, 하기 실시예에 나타낸 바와 같이, 콜라게나아제 주사는 셀룰라이트 외관을 현저하게 개선시키고, 지속성을 입증하고, 일반적으로 양호한-내성이었다.

1. CR-PCSS 및 PR-PCSS로 측정된 효능

임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수 또는 등급으로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급의 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수 또는 등급의 적어도 25% 개선을 나타내는 임의의 환자이다. 특정 실시형태에서, 본원에 상세하게 설명된 치료 방법은 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

1. CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급이 기준선 대비 적어도 0.1 개선.

2. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 개선.

3. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 개선.

4. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 2-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

5. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 개선.

6. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 개선.

7. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 1-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

8. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 상기 번호 1 내지 7 중 하나 이상이다.

9. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지한다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

10. 180일째에, 기준선으로부터 CR-PCSS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 개선까지의 중간 시간(median time)은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

13. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

14. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS로 측정된 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

15. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS로 측정된 1-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

16. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상은 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 갖고, 여기서, CR-PCSS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

17. 셀룰라이트 중증도의 감소는 첫번째 치료 방문 후 약 7, 또는 14, 또는 21, 또는 30, 또는 35, 또는 40, 또는 45, 또는 50 일 내에 신속하게 발생한다.

18. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 기준선 방문 (선별 방문(screening visit))으로부터 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 최대 감소는 90일째에 처음으로 관찰된다.

19. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 180일째 전 주어진 시점에서 셀룰라이트 중증도 (즉, 음의 변화)의 개선은 180일째 방문에서 유지된다.

20. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 90일째에, 왼쪽 엉덩이 및 왼쪽 허벅지의 기준선으로부터 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 평균 (SD) 변화는 각각 약 -0.8 (0.58) 및 약 -0.6 (0.62)이고, 오른쪽 엉덩이 및 오른쪽 허벅지에서 각각 약 -0.7 (0.73) 및 약 -0.5 (0.70)이다.

21. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 180일째에, 기준선 (선별 방문)으로부터 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 감소는 오른쪽 및 왼쪽에서 일관된다.

22. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 영역에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 2-레벨 개선은 피험자의 적어도 10%에서 90일째에 및 피험자의 적어도 15%에서 180일째에 관찰된다.

22. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 영역에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 2-레벨 개선이 90일째에 피험자의 적어도 10%에서 및 180일째에 피험자의 적어도 15%에서 관찰되고, 응답은 엉덩이 및 허벅지 영역에서 및 왼쪽 및 오른쪽에서 유사하다.

23. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 1-레벨 개선이 90일째에 피험자의 적어도 60% 및 180일째에 피험자의 적어도 65%에서 관찰된다.

24. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 1-레벨 개선이 90일째에 피험자의 적어도 60% 및 180일째에 피험자의 적어도 65%에서 관찰되고, 응답은 엉덩이 및 허벅지 영역에서 및 왼쪽 및 오른쪽에서 유사하다.

25. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 약 80 일에 관찰된다.

26. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1 레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 약 40 일이다.

27. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 상기 환자의 적어도 50%는 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답자이다.

28. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 20%는 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 PR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답자이다.

29. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 35%는 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 복합 응답자이다.

30. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 5%는 71일째에 비-표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 복합 응답자이다.

31. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, PR-PCSS 및/또는 PR-PCSS의 기준선으로부터 평균 변화는 71일째에 표적 엉덩이 (각각 약 0.9 대 약 0.5)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 0.9 대 약 0.5)에서 위약으로 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다.

32. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 1-레벨 PR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답자의 비율은 71일째에 표적 엉덩이 (각각 약 62% 대 약 40%)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 65% 대 40%)에서 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다.

33. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS의 기준선으로부터 평균 변화는 71일째에 표적 엉덩이 (각각 약 0.7 대 약 0.4 [0.72])에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 0.8 대 약 0.3)에서 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다.

34. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 응답자의 비율은 71일째에 표적 엉덩이 (각각 약 58% 대 약 32%)에서, 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 60% 대 약 27%)에서 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다.

35. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 복합 응답자의 비율은 71일째에 표적 엉덩이 (각각 약 42% 대 약 20%)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 44% 대 약 13%)에서 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다.

36. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 본원에 기재된 콜라게나아제 처리의 결과로서 위약보다 적어도 5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 7.5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 10%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 12.5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 15%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 20%보다 더 높게 환자의 집단 중 2-레벨 복합 응답자가 더 많거나 같다.

37. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 본원에 기재된 콜라게나아제 처리의 결과로서 위약보다 적어도 5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 7.5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 10%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 12.5%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 15%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 20%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 25%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 30%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 35%보다 더 높게, 또는 위약보다 적어도 40%보다 더 높게 환자의 집단 중 1-레벨 복합 응답자가 더 많거나 같다.

38. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 기준선 방문 (선별 방문)으로부터 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 최대 감소는 22일째, 71일째, 또는 그보다 더 이르게 처음으로 관찰된다.

39. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 기준선 (치료전)에서, 기준선 (선별 방문)으로부터 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 감소는 오른쪽 및 왼쪽에서 일관된다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

다른 비를 이용할 수 있다 (예를 들면, 0.1-2:1, 또는 0.25-2:1, 또는 0.5-2:1, 또는 0.75-2:1, 또는 1: 0.1-2, 또는 1: 0.25-2, 또는 1: 0.5-2, 또는 1: 0.75-2, 또는 1:0, 또는 0:1). 추가로, 유형 I 및 유형 II 콜라게나아제는 각각 AUX-I 및 AUX-II일 수 있다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 39 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

다른 실시형태에서, 상기 치료에 대한 응답으로, 환자는 평가 시점에 기준선에서 적어도 2 레벨의 CR-PCSS 등급 개선(-2, -3 또는 -4의 변화)을 보인 2 레벨 CR-PCSS 응답자이다. 1 레벨 CR-PCSS 응답자는 평가 시점에 기준선에서 적어도 1 레벨의 CR-PCSS 등급 개선(-1, -2, -3, 또는 -4의 변화)을 나타낸 환자이다. 환자는 평가 시점에 기준선에서 적어도 2 레벨의 PR-PCSS 등급 개선(-2, -3 또는 -4의 변화)을 보인 2 레벨 PR-PCSS 응답자이다. 1 레벨 PR-PCSS 응답자는 평가 시점에 기준선에서 적어도 1 레벨의 PR-PCSS 등급 개선(-1, -2, -3, 또는 -4의 변화)을 나타낸 환자이다. 다른 측면에서, 2-레벨 복합 응답자는 평가 시점에 2-레벨 PR-PCSS 응답자 및 2-레벨 CR-PCSS 응답자 둘 다인 환자이다. 1-레벨 복합 응답자는 평가 시점에 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및 1-레벨 CR-PCSS 응답자 둘 다인 환자이다.

2. 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도(Hexsel CSS)로 측정된 효능

Hexsel CSS에서, 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수에서 적어도 1 레벨 또는 1 등급의 개선이다. 임의의 방문시 환자 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 Hexsel CSS 점수 또는 등급으로부터 평균 Hexsel CSS 점수 또는 등급의 약 0.1 개선이다. 응답자는 기준선에서 최대 총 점수 또는 등급의 적어도 25% 개선을 보이는 임의의 환자이다. 특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명된 치료 방법은 Hexsel CSS로 측정된 다음의 효능 종점 중 하나 이상을 유도한다:

1. 모두 기준선 1일 Hexsel CSS 등급을 받은 환자 집단에서, 적어도 한 번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 콜라게나아제를 주사한 결과 통계적으로 유의한 수의 이러한 환자가 다음의 효능 종점 중 하나 이상을 충족시켰다:

ㆍ 중증에서 증등증으로의 전환(11-15점에서 6-10점으로)

ㆍ 중증에서 경증으로의 전환(11-15점에서 1-5점으로)

ㆍ 중증에서 0으로의 전환(11-15점에서 0으로)

ㆍ 증등증에서 경증으로의 전환(6-10점에서 1-5점으로)

ㆍ 증등증에서 0으로의 전환(6-10점에서 0으로)

ㆍ 경증에서 0으로의 전환(1-5점에서 0으로)

2. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 Hexsel CSS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 변화.

3. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 임상의에 의해 평가된 Hexsel CSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 변화.

4. 임상의 평가에 의한 Hexsel CSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 2-레벨 응답에 의해 입증된 변화.

5. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 Hexsel CSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 증증도의 적어도 1 레벨 변화.

6. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 임상의에 의해 평가된 Hexsel CSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 증증도의 적어도 1 레벨 변화.

7. 임상의 평가에 의한 Hexsel CSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 1-레벨 응답에 의해 입증된 변화.

8. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고 여기서, 상기 변화는 상기 번호 2 내지 7 중 하나 이상이다.

10. 180일째에, 기준선으로부터 Hexsel CSS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 Hexsel CSS 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 Hexsel CSS 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

13. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 Hexsel CSS 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

14. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 Hexsel CSS로 측정된 2-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

15. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 Hexsel CSS로 측정된 1-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

16. 모두 증등증 또는 중증의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상이 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 Hexsel CSS 응답을 갖고, 여기서, Hexsel CSS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 17 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

3. 헥셀 함몰부 깊이 척도로 측정된 효능

헥셀 함몰부 깊이 척도에서, 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선으로부터 평균 헥셀 함몰부 깊이 척도 또는 등급 또는 임의의 이전 평균 헥셀 함몰부 깊이 척도 또는 등급 약 0.1 개선이다. 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수 또는 등급의 적어도 25% 개선을 나타내는 임의의 환자이다. 특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 헥셀 함몰부 깊이 척도로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

1. 모두 기준선 1일째 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 콜라게나아제 주사의 결과로서 통계학적으로 유의한 수의 이러한 환자가 다음 효능 종점 중 하나 이상을 충족시켰다:

ㆍ 깊은 함몰부 (3)에서 중간 깊이 (2)로 이동

ㆍ 깊은 함몰부 (3)에서 피상적 함몰부 (1)로 이동

ㆍ 깊은 함몰부 (3)에서 함몰부 없음 (0)으로 이동

ㆍ 중간 깊이 (2)에서 피상적 함몰부 (1)로 이동

ㆍ 중간 깊이 (2)에서 함몰부 없음 (0)으로 이동

ㆍ 피상적 함몰부 (1)에서 함몰부 없음 (0)으로 이동

2. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 헥셀 함몰부 깊이 척도의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 변화.

3. 임상의 평가에 의한 헥셀 함몰부 깊이 척도의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 2-레벨 응답에 의해 입증된 변화.

4. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 헥셀 함몰부 깊이 척도의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 변화.

5. 임상의 평가에 의한 헥셀 함몰부 깊이 척도의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 1-레벨 응답에 의해 입증된 변화.

6. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 Hexsel CSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 상기 변화는 상기 번호 2 내지 7 중 하나 이상이다.

7. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지한다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

8. 180일째에, 기준선으로부터 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

9. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 헥셀 함몰부 깊이 척도 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

10. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 헥셀 함몰부 깊이 척도 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

11. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 헥셀 함몰부 깊이 척도는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

12. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 헥셀 함몰부 깊이 척도로 측정된 2-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

13. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 헥셀 함몰부 깊이 척도로 측정된 1-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

14. 모두 중간 또는 깊은 함몰부의 헥셀 함몰부 깊이 척도 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상이 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 헥셀 함몰부 깊이 척도 응답을 갖고, 여기서, 헥셀 함몰부 깊이 척도 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

15. 셀룰라이트 중증도의 감소는 첫번째 치료 방문 후 약 7, 또는 14, 또는 21, 또는 30, 또는 35, 또는 40, 또는 45, 또는 50 일 내에 신속하게 발생한다.

16. 하나 이상의 치료 부위에서 점수가 기준선으로부터 71일째까지 약 -0.1 내지 약 -2.0 변화.

17. 통계학적으로 유의한 환자 집단에서, 최소 자승 (LS) 평균은 하나 이상의 치료 부위에 대해 약 -0.1 내지 약 -1.5 (95% 신뢰 간격 (CI))이다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 19 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

4. 심미적 외관에 대해 리커트 척도로 측정된 효능

리커트 척도에서, 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 치료 전 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 치료 전 또는 임의의 이전 평균 리커트 점수 또는 등급으로부터 평균 리커트 점수 또는 등급이 약 0.1 개선이다. 특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 리커트 척도로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

1. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 콜라게나아제의 주사로서 통계학적으로 유의한 수의 이러한 환자가 다음 효능 종점 중 하나 이상을 충족시켰다:

ㆍ "개선된" 리커트 척도 점수 (1)

ㆍ "많이 개선된" 리커트 척도 점수 (2)

ㆍ "매우 많이 개선된" 리커트 척도 점수 (3)

2. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 리커트 척도 점수가 치료 전에서부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 치료 부위 외관 개선.

3. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 리커트 척도 점수가 치료 전에서부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 치료 부위 외관 개선.

4. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 리커트 척도 점수가 치료 전에서부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 치료 부위 외관 개선.

5. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 리커트 척도 점수가 치료 전에서부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 치료 부위 외관 개선.

6. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 리커트 척도 점수의 개선은 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 상기 번호 2 내지 7 중 하나 이상이다.

8. 180일째에, 기준선으로부터 리커트 척도 점수 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

9. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 리커트 척도 점수 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

10. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 리커트 척도 점수 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

11. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 리커트 척도 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

12. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 리커트 척도 점수로 측정된 2-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

13. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 리커트 척도 점수로 측정된 1-레벨 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

14. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상은 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 리커트 척도 점수 응답을 갖고, 여기서, 리커트 척도 점수 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 15 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

5. 딤플 분석

특정 실시형태에서, 콜라게나아제(들)로 셀룰라이트의 치료는 딤플 크기 파라미터를 다음과 같이 감소시킨다:

ㆍ 깊이: 약 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, 또는 20%, 또는 15%, 또는 10%, 또는 5%, 또는 2.5%, 또는 2%, 또는 1%까지

ㆍ 너비: 약 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, 또는 20%, 또는 15%, 또는 10%, 또는 5%, 또는 2.5%, 또는 2%, 또는 1%까지

ㆍ 길이: 약 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, 또는 20%, 또는 15%, 또는 10%, 또는 5%, 또는 2.5%, 또는 2%, 또는 1%까지

ㆍ 전체 용적: 약 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, 또는 20%, 또는 15%, 또는 10%, 또는 5%, 또는 2.5%, 또는 2%, 또는 1%까지

ㆍ 표면적: 약 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, 또는 20%, 또는 15%, 또는 10%, 또는 5%, 또는 2.5%, 또는 2%, 또는 1%까지

일부 실시형태에서, 치료 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하였다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 실시형태에서, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나의 감소를 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나를 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 감소시킨다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나를 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 감소시키고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나를 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 감소시킨다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나의 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 감소를 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 딤플 크기 파라미터 중 적어도 하나의 적어도 5%, 또는 적어도 10% 또는 적어도 20%까지 감소를 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

6. 피험자의 전반적인 미적 개선 척도 (S-GAIS) 및 연구자의 전반적인 미적 개선 척도 (I-GAIS)로 측정한 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 S-GAIS 및 I-GAIS로 측정된 개선된 응답을 야기한다. 2-레벨 S-GAIS 응답자는 S-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 2 (+2 또는 +3)인 피험자이다. 1-레벨 S-GAIS 응답자는 S-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 1 (+1, +2, 또는 +3)인 피험자이다. 2-레벨 I-GAIS 응답자는 I-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 2 (+2 또는 +3)인 피험자이다. 1-레벨 I-GAIS 응답자는 I-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 1 (+1, +2, 또는 +3)인 피험자이다. 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다.

특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 S-GAIS 및/또는 I-GAIS로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

1. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 콜라게나아제의 주사는 다음 효능 종점 중 하나 이상을 만족하는 통계학적으로 유의한 수의 이러한 환자를 야기한다:

ㆍ S-GAIS 및/또는 I-GAIS 점수가 "개선됨" (+1)

ㆍ S-GAIS 및/또는 I-GAIS 점수가 "많이 개선됨" (+2)

ㆍ S-GAIS 및/또는 I-GAIS 점수가 "매우 많이 개선됨" (+3)

2. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 I-GAIS가 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 적어도 2 레벨 개선.

3. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 S-GAIS가 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 적어도 2 레벨 개선.

4. 임상의 평가에 의해 I-GAIS가 적어도 2 레벨 개선되고 환자 평가에 의해 S-GAIS가 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 2-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

5. 임상의에 의해 실시간 평가된 치료 부위의 I-GAIS가 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 적어도 1 레벨 개선.

6. 치료 부위의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 S-GAIS가 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 적어도 1 레벨 개선.

7. 임상의 평가에 의해 I-GAIS가 적어도 1 레벨 개선되고 환자 평가에 의한 S-GAIS가 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 365, 또는 730일째에 1-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 I-GAIS 및/또는 S-GAIS의 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 상기 번호 2 내지 7 중 하나 이상이다.

9. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 이들의 개선 수준을 유지하였다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 개선을 입증하고, 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

10. 180일째에, I-GAIS 및 S-GAIS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

11. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 I-GAIS 및/또는 S-GAIS 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

12. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 I-GAIS 및/또는 S-GAIS 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

13. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 I-GAIS 및/또는 S-GAIS는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

14. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 I-GAIS 및/또는 S-GAIS에 의해 측정된 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

15. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 I-GAIS 및/또는 S-GAIS에 의해 측정된 1-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

16. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상은 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 I-GAIS 및/또는 S-GAIS 응답을 갖고, 여기서, GAIS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

18. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 60%는 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 S-GAIS 응답자이다.

19. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 20%는 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 S-GAIS 응답자이다.

20. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 평균 S-GAIS는 표적 엉덩이에서 위약으로 처리된 피험자와 비교시 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다 (각각 약 1.0 대 약 0.5). 결과는 비-표적 엉덩이와 유사하다 (콜라게나아제 처리된 피험자에서 약 1.0 대 위약 처리된 피험자에서 약 0.5).

21. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율은 표적 엉덩이 (각각 약 70% 대 약 40%)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 약 70% 대 약 40%)에서 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 크다.

22. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 평균 I-GAIS는 표적 엉덩이에서 위약으로 처리된 피험자와 비교시 콜라게나아제로 처리된 피험자가 통계학적으로 유의하게 더 크다 (각각 약 1.0 대 0.3). 결과는 비-표적 엉덩이와 유사하다 (콜라게나아제 처리된 피험자에서 약 0.6 대 위약 처리된 피험자에서 약 0.1).

23. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 1-레벨 I-GAIS 응답자의 비율은 표적 엉덩이 (각각 약 70% 대 25%)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 70% 대 25%)에서 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 크다.

24. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 일련의 교차-표는 PR-PCSS 및 S-GAIS 간의 일관성을 나타낸다. PR-PCSS의 1 레벨 변화는 S-GAIS의 유사한 변화와 연관되었다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 24 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

실시예 2 및 3에서 추가로 기재한 바와 같이, 환자는 표적 및 비-표적 엉덩이에 대한 S-GAIS를 사용하여 기준선과 비교한 치료 후 개선을 평가하였다. 도 11에 나타낸 바와 같이, S-GAIS로 측정된 ≥2-레벨 및 ≥1-레벨 응답에서 나타난 바와 같이 CCH를 사용한 처리는 위약보다 현저하게 우수하였다.

7. PR-CIS로 측정된 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 PR-CIS로 측정하여 개선된 응답을 야기한다. PR-CIS 총 점수는 척도에 대한 6개 항목의 합이다. PR-CIS 총 점수는 0 내지 60 범위일 수 있고, 더 큰 수는 더 큰 셀룰라이트의 부정적인 영향을 반영한다. 피험자가 이들의 셀룰라이트 외관에 대해 얼마나 만족하는지 질문하는 PR-CIS에 대한 항목 #1은 10에서 피험자가 보고한 평가를 빼면 역전된다. PR-CIS 총 점수의 경우, 응답자는 PR-CIS 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 12 감소된 피험자이다. 개별적인 PR-CIS 영향 점수의 경우, 응답은 각 시점에 기준선으로부터 적어도 2 점수 간격 개선이다. 추가로, 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수 적어도 20% 개선을 나타내는 모든 환자이다. 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 추가로, 개선은 기준선으로부터 60 중에서 적어도 1 레벨 변화이다.

특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 PR-CIS로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

ㆍ PR-CIS는 셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 및 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 도메인에 걸쳐서 개선을 나타낸다

ㆍ PR-CIS 총 점수가 기준선으로부터 하나 이상의 평가 시점에서 적어도 12 감소

ㆍ PR-CIS 영향 점수는 기준선으로부터 하나 이상의 평가 시점에서 적어도 2 점수 간격 개선됨을 나타냄

ㆍ 개선은 기준선으로부터 60 중 적어도 1 레벨 변화이다.

2. 치료 부위에 대한 PR-CIS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 12점 개선.

3. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 치료 부위에 대한 PR-CIS의 중증도가 기준선 (치료전 1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 위약을 넘어서서 적어도 12점 통계학적으로 현저한 개선.

4. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지한다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

5. 180일째에, 기준선으로부터 PR-CIS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

6. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 기준선으로부터 하나 이상의 평가 시점에서 적어도 하나의 치료 부위에 대한 PR-CIS 총 점수가 적어도 12 감소하는 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

7. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 PR-CIS 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1 이상, 또는 2분의 1 이상, 또는 3분의 2 이상, 또는 14분의 3 이상이 기준선으로부터 치료-후 71일째까지 하나 이상의 평가 시점에서 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 12의 PR-CIS 총 점수의 감소를 갖고, 여기서, PR-CIS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

9. 셀룰라이트 중증도의 감소는 첫번째 치료 방문 후 약 7, 또는 14, 또는 21, 또는 30, 또는 35, 또는 40, 또는 45, 또는 50 일 내에 신속하게 발생한다.

10. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 변화는 콜라게나아제 처리된 피험자에서 약 -10 대 위약 처리된 피험자에서 약 -5이다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 평균 PR-CIS 기준선으로부터 변화는, 총 점수 (각각 약 -12 대 -6) 및 간이형 점수 (각각 약 -10 대 5), 뿐만 아니라 개별적인 영향 점수 (셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 및 몸매 걱정)에서, 위약 처리 피험자 대비 콜라게나아제 처리된 피험자에게 통계학적으로 유의하게 유리하다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, PR-CIS 응답자의 비율은 총 점수 (각각 약 45% 대 20%)에서 및 간이형 점수 (각각 약 50% 대 25%)에서 위약으로 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 컸다. 추가로, 각각의 개별적인 영향 점수에 대한 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제 처리된 피험자가 더 컸다. 이들 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 12 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

실시예 2 및 3에 추가로 기재된 바와 같이, 환자는 CCH 대 위약에 대해 PR-CIS를 사용하여 기준선과 비교한 치료 후 개선을 평가하였다. 도 11에 나타낸 바와 같이, CCH를 사용한 처리는 위약보다 현저하게 우수하였다.

8. 간이형 PR-CIS로 측정된 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 간이형 PR-CIS로 측정된 개선된 응답을 야기한다. 간이형 PR-CIS 총 점수는 척도에 대한 5개 항목의 합일 것이다. 간이형 PR-CIS 총 점수는 0 내지 50 범위일 수 있고, 더 큰 수는 셀룰라이트의 부정적인 영향을 반영한다. 피험자가 이들의 셀룰라이트 외관에 얼마나 만족하는지 질문하는 PR-CIS에 대한 항목 #1은 10에서 피험자가 보고한 평가를 빼서 반전될 것이다. 간이형 PR-CIS 총 점수의 경우, 응답자는 PR-CIS 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 10 감소된 피험자이다. 개별적인 간이형 PR-CIS 영향 점수의 경우, 응답은 각 시점에 기준선으로부터 적어도 2 점수 간격 개선된다. 추가로, 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수 20% 개선을 나타내는 모든 환자이다. 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 추가로, 개선은 기준선으로부터 50에서 적어도 1 레벨 변화이다.

특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 간이형 PR-CIS로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

ㆍ 간이형 PR-CIS는 셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 및 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 도메인에 걸쳐서 개선을 나타낸다

ㆍ 간이형 PR-CIS 총 점수가 하나 이상의 평가 시점에서 기준선으로부터 적어도 10 감소

ㆍ 간이형 PR-CIS 영향 점수가 하나 이상의 평가 시점에서 기준선으로부터 적어도 2 점수 간격 개선을 나타냄

ㆍ 추가로, 개선은 50에서 적어도 1 레벨의 기준선으로부터 변화이다

2. 치료 부위에 대한 간이형 PR-CIS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 12점 개선.

3. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 치료 부위에 대한 간이형 PR-CIS의 중증도가 위약을 넘어서서 기준선으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 (치료전 1일째) 적어도 10 점 통계학적으로 현저한 개선.

5. 180일째에, 기준선으로부터 간이형 PR-CIS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

6. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에 대해 기준선으로부터 하나 이상의 평가 시점에서 간이형 PR-CIS 총 점수가 적어도 10 감소하는 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

7. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 간이형 PR-CIS 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1 이상, 또는 2분의 1 이상, 또는 3분의 2 이상, 또는 14분의 3 이상이 기준선으로부터 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 하나 이상의 평가 시점에서 간이형 PR-CIS 총 점수가 적어도 10 감소하고, 여기서, PR-CIS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

10. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 간이형 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 변화는 콜라게나아제 처리된 피험자에서 약 -10 대 위약 처리된 피험자에서 약 -5이다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 평균 간이형 PR-CIS 기준선으로부터 변화는, 위약 처리 피험자에 비해 콜라게나아제 처리된 피험자가 총 점수 (각각 약 -12 대 -6) 및 간이형 점수 (각각 약 -10 대 5), 뿐만 아니라 개별적인 영향 점수 (셀룰라이트 외관에 만족함, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 및 몸매 걱정)에서 통계학적으로 유의하게 유리하다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 간이형 PR-CIS 응답자의 비율은, 총 점수 (각각 약 45% 대 20%) 및 간이형 점수 (각각 약 50% 대 25%)에서 위약으로 처리된 피험자에서보다 콜라게나아제로 처리된 피험자가 더 크다. 추가로, 각각의 개별적인 영향 점수에 대한 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 콜라게나아제 처리된 피험자가 더 컸다. 이들 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다.

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기한다.

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

9. 피험자 자가-평가 척도 (SSRS)로 측정된 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 SSRS로 측정하여 개선을 야기한다. SSRS 응답자는 평가 시점에 환부 상 셀룰라이트의 외관에 적어도 약간 만족함 (약간 만족함 [4], 매우 만족함 [5], 또는 대단히 만족함 [6])인 피험자이다. 추가로, 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수가 적어도 17% 개선됨을 나타내는 모든 환자이다. 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 특정 실시형태에서, 치료 방법은 SSRS 등급으로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

ㆍ SSRS 등급 "약간 만족함"

ㆍ SSRS 등급 " 만족함"

ㆍ SSRS 등급 "대단히 만족함 "

2. 치료 부위의 SSRS 등급이 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 개선.

3. 치료 부위의 SSRS 등급이 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 개선.

4. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 SSRS 등급의 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 상기 번호 2 내지 3 중 하나 이상이다.

5. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지한다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

6. 첫번째 주사 후 180일째에, 기준선으로부터 SSRS 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관되었다.

7. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 SSRS 등급 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 SSRS 등급 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

9. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 SSRS 등급은 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

10. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 SSRS 등급에 의해 측정된 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

11. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 SSRS 등급에 의해 측정된 1-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

12. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상이 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 SSRS 등급 응답을 갖고, 여기서, SSRS 등급 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

13. 셀룰라이트 중증도의 감소는 첫번째 치료 방문 후 약 7, 또는 14, 또는 21, 또는 30, 또는 35, 또는 40, 또는 45, 또는 50 일 내에 신속하게 발생한다.

14. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 40%는 71일째에 1-레벨 SSRS 응답자이다.

15. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에, 평균 SSRS 점수는 위약으로 처리된 피험자보다 콜라게나아제로 처리된 피험자에서 더 크게 통계학적으로 유의하다.

16. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 적어도 50%는 1-레벨 SSRS 응답자이다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 16 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

10. 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 (SSCT)로 측정된 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 SSCT로 측정된 개선을 야기한다. 71일째에 SSCT 평가에서 "만족함" 또는 "매우 만족함"으로 응답한 피험자는 효능을 나타내는 응답자로서 고려된다. 임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수 또는 등급으로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 추가로, SSCT에 대해, 개선은 위약과 비교하여 적어도 0.1이다. 특정 실시형태에서, 치료 방법은 SSCT 등급으로 측정하여 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

ㆍ " 만족함"의 SSCT 등급

ㆍ "매우 만족함"의 SSCT 등급

2. 치료 부위의 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 SSCT 등급의 증가 (예를 들면, 1 내지 2 등).

3. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 SSCT 등급의 증가는 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 치료 부위의 SSCT 등급이다.

4. 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 이들의 개선 수준을 유지하였다. 특정한 경우, 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30% 또는, 40% 또는 50%가 초기 투약 후 적어도 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 2 년 또는 3 년, 또는 4 년, 또는 5 년 동안 이러한 수준을 유지하였다. 다른 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 개선을 입증하고, 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타낸다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 투약 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다. 일부 치료의 결과로서 환자의 적어도 10%, 또는 20%, 또는 30%, 또는 40% 또는 50%가 초기 치료, 또는 두번째 치료, 또는 세번째 치료 후 1 개월, 또는 3 개월, 또는 6 개월, 또는 9 개월, 또는 12 개월, 또는 18 개월, 또는 24 개월에 개선의 추가 증가와 동반된 개선을 입증하였다.

5. 180일째에, SSCT 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 치료 부위에서 일관된다.

6. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 SSCT 등급 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

7. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 SSCT 등급은 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 개선된 SSCT 등급를 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

9. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상이 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 개선된 SSCT 등급을 갖고, 여기서, SSCT 등급 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

10. 셀룰라이트 중증도의 감소는 첫번째 치료 방문 후 약 7, 또는 14, 또는 21, 또는 30, 또는 35, 또는 40, 또는 45, 또는 50 일 내에 신속하게 발생한다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 180일째에, 절반이 넘는 환자는 치료에 만족하거나 매우 만족한다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급의 감소는 180일째에 피험자 만족도 조사의 점수와 동반하여 지속되었고, 이는 치료당 12회 피하 주사로 투여된 0.84 mg CCH의 3개 치료 세션은 (x2곳의 치료 부위) 양측 엉덩이 또는 양측 허벅지에 셀룰라이트 감소에 효과적임을 입증한다.

13. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 콜라게나아제로 치료된 환자의 적어도 50%는 이들의 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족한다.

14. 모두 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 콜라게나아제 및 위약 처리 그룹 간에 평균 피험자 만족도 점수에서 통계학적으로 유의한 차이가 있다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기한다.

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 14 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

11. 허벅지 셀룰라이트 중증도-환자 (TCS-P); 허벅지 셀룰라이트 중증도-임상의 (TCS-C)에 의해 측정된 효능

임의의 방문시 개별 환자에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 점수 또는 등급으로부터 적어도 1 레벨 또는 1 등급 개선이다. 임의의 방문시 환자의 그룹에 대한 개선은 기준선 또는 임의의 이전 평균 점수 또는 등급으로부터 평균 점수 또는 등급의 약 0.1의 개선이다. 응답자는 최대 총 점수 또는 등급이 기준선으로부터 적어도 20% 개선됨을 나타내는 모든 환자이다. 특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 TCS-C 및/또는 TCS-P로 측정된 바와 같이 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

1. TCS-C 및/또는 TCS-P 등급이 기준선 대비 적어도 0.1 개선.

2. 표적 허벅지의 임상의에 의해 실시간 평가된 TCS-C의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 개선.

3. 표적 허벅지의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 TCS-P의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 2 레벨 개선.

4. TCS-C의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 TCS-P의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 2-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

5. 표적 허벅지의 임상의에 의해 실시간 평가된 TCS-C의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 개선.

6. 표적 허벅지의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 TCS-P의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 적어도 1 레벨 개선.

7. TCS-C의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선되고 TCS-P의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 1-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선.

8. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 개선은 상기 번호 1 내지 7 중 하나 이상이다.

10. 180일째에, 기준선으로부터 TCS-C 및/또는 TCS-P 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 허벅지에서 일관되었다.

11. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 TCS-C 및/또는 TCS-P 개선까지의 중간 시간은 약 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

12. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1-레벨 TCS-C 및/또는 TCS-P 개선까지의 중간 시간은 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

13. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 TCS-C 및/또는 TCS-P 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

14. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 TCS-C 및/또는 TCS-P에 의해 측정된 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

15. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 71일째에 적어도 하나의 치료 부위에서 TCS-C 및/또는 TCS-P에 의해 측정된 1-레벨 복합 응답을 갖는 피험자의 백분율은 약 1% 내지 10%, 10% 내지 20%, 20% 내지 30%, 30% 내지 40%, 40% 내지 50%, 또는 50% 초과이다.

16. 모두 증등증 또는 중증의 TCS-C 등급을 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1, 또는 2분의 1, 또는 3분의 2, 또는 14분의 3 이상이 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 TCS-C 및/또는 적어도 1-레벨 TCS-P 응답을 갖고, 여기서, TCS-C 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

12. 바디-Q로 측정된 효능

상기 상세하게 설명한 치료 방법은 바디-Q로 측정한 개선된 응답을 야기한다. 셀룰라이트에 대해서, 지난 주의 기간 동안 "전혀"에서 "대단히 신경쓰임"에 이르는 플레쉬-킨카이드 등급 판독 수준을 가정하는 환자 응답 옵션을 갖는 16개 척도 항목이 있다. 점수는 16 (대단히 신경쓰임) 내지 64 (전혀 그렇지 않음)의 범위이다. 바디-Q 총 점수의 경우, 응답자는 바디-Q 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 16 증가된 피험자이다. 개별적인 바디-Q 영향 점수의 경우, 응답은 각 시점에 기준선으로부터 적어도 1 점수 간격 개선이다. 대안적인 실시형태에서, 척도 항목은 16보다 많거나 적을 수 있고, 응답자는 기준선으로부터 최대 총 점수의 적어도 25% 개선을 나타내는 모든 환자이다.

특정 실시형태에서, 상기 상세하게 설명한 치료 방법은 바디-Q로 측정된 다음 효능 종점 중 하나 이상을 야기한다:

ㆍ 바디-Q는 하기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 도메인에 걸친 개선을 나타낸다:

o 바디-Q 총 점수가 하나 이상의 평가 시점에서 기준선으로부터 적어도 16 증가함;

o 개별적인 바디-Q 영향 점수의 경우, 각 시점에 기준선으로부터 적어도 1 점수 간격 개선; 및

o 기준선으로부터 최대 총 점수가 적어도 25% 개선.

ㆍ 하나 이상의 평가 시점에서 기준선으로부터 바디-Q 총 점수가 적어도 16 증가함

ㆍ 바디-Q 영향 점수가 하나 이상의 평가 시점에서 기준선으로부터 적어도 1 점수 간격 개선을 나타냄

ㆍ 90일째 및/또는 180일째에 셀룰라이트의 바디-Q 평가의 기준선으로부터 평균 변화

2. 표적 엉덩이에 대한 바디-Q에서 적어도 16점 증가된 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 중증도의 개선.

3. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 일 기준선 (치료전 1일째)에서 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720일째, 3 년, 4 년, 또는 5 년에 중증도가 위약을 넘어서서 통계학적으로 현저한 개선되고, 표적 엉덩이에 대한 바디-Q가 적어도 16점 증가됨을 나타냄.

5. 첫번째 주사 후 180일째에, 기준선으로부터 바디-Q 등급에서 볼 수 있는 개선은 오른쪽 및 왼쪽 엉덩이에서 일관되었다.

6. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에 대해 기준선으로부터 하나 이상의 평가 시점에서 적어도 16 증가하는 바디-Q 총 점수까지의 중간 시간이 약 15 일, 또는 20 일, 또는 30 일, 또는 40 일, 또는 50 일, 또는 60 일, 또는 70 일, 또는 80 일, 또는 90 일이다.

7. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 평균 피험자 바디-Q 점수는 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리되고, 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 입증한다.

8. 셀룰라이트를 갖는 환자의 집단에서, 환자의 3분의 1 이상, 또는 2분의 1 이상, 또는 3분의 2 이상, 또는 14분의 3 이상이 기준선으로부터 치료-후 71일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 하나 이상의 평가 시점에서 바디-Q 총 점수가 적어도 16 증가하고, 여기서, 바디-Q 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이다.

또다른 실시형태에서, 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 경우, 치료 I에 따른 약 1 mg 내지 약 20 mg의 콜라게나아제의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제는 하기한 특징 중 하나 이상을 갖는다:

ㆍ 약 500 내지 약 30,000 SRC 단위/mg의 효능 (즉, 비활성도)

ㆍ 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능

ㆍ 약 100,000 내지 약 400,000 GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능

ㆍ 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능

ㆍ 1 cfu/mL 이하의 생균수

또다른 예에서, 치료 I에 따른 CCH 약 1 mg 내지 약 20 mg의 주사는 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기한다.

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 적어도 한번의 치료 방문 동안 적어도 하나의 치료 부위에 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

특정 실시형태에서, 대략 1:1 비의 콜라게나아제 유형 I 및 콜라게나아제 유형 II 약 1 mg 내지 약 20 mg을 치료 I을 이용하여 주사하고, 상기 결과 번호 1 내지 9 중 하나 이상을 야기하고, 여기서, 콜라게나아제 I 및 II는 하기한 특징을 갖는다:

ㆍ 유형 I

o 검정: SRC 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70

o K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰

o K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814

ㆍ 유형 II

o 검정: GPA 마이크로플레이트

o V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5

o K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1

o K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179

o 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428

o K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934

13. 3-D 사진/이미지로 측정된 치료 효과 평가

도입. 3-D 사진 또는 기타 이미지는 특히 딤플 및 멍 분석을 위해 치료 효과의 평가에 3-D 사진 또는 기타 이미지가 사용될 수 있다. 3-D 이미지를 사용한 딤플 분석(상기 정의됨)에는 딤플 용적, 길이, 너비 및 면적 계산이 포함될 수 있다. 계산은 에크하우스 등 WO 2018/116304 및 WO 2018/116305에 기재된 방법, 체리 이미징 및 캔필드 사이언티픽, 인코포레이티드로부터 이용 가능한 방법과 같은 여러 공지된 방법에 의해 수행될 수 있다. 이러한 용적, 길이, 너비 및 면적의 측정은 디지털 3-D 그레이스케일 이미지(X 및 Y 축 회전 기능 포함) 및 디지털 3-D 텍스처 및 리트(lit) 이미지(X 및 Y 회전 기능 포함)를 그러한 이미지를 분석하는 컴퓨터 프로그램과 함께 사용하여 계산할 수 있다. 일 실시형태에서, 엉덩이 치료 부위는 치료전후의 각 환자에 대해 치료된 왼쪽 엉덩이 및/또는 치료된 오른쪽 엉덩이의 이미지를 촬영할 수 있다. 또다른 실시형태에서, 허벅지 치료 부위는 치료전후 0도, 45도 및 90도에서 예를 들면 피험자의 후방, 경사, 및 외측의 허벅지 치료 부위 각각의 이미지를 촬영할 수 있다.

임상의 및 환자는 본원에 기재된 척도 및 기타 도구를 사용하거나 사용하지 않고 셀룰라이트의 중증도를 평가하기 위해 사진 및 이미징 도구를 사용할 수 있다. 일 실시형태에서, 임상의/연구자 또는 자격을 갖춘 피지명자는 제공된 표준화된 3-D 카메라를 사용하여 표준화된 방식으로 각 치료 부위(예를 들면, 각 엉덩이 또는 각 허벅지)를 촬영한다. 피험자는 각 사진 세션을 찬성하고, 표준화된 사진 의상을 착용한다. 임상의/연구자 또는 자격을 갖춘 피지명자는 피험자는 일관되고 표준화된 이완된 자세로 서있는 동안 2곳의 치료 부위(예를 들면, 엉덩이 2곳 또는 허벅지 2곳) 각각을 촬영한다. 상기에서 설명된 이러한 사진과 이미지는 하기에 설명된 효능 분석에 사용될 수 있다. 방법론의 추가의 비-제한적이고 선택적인 상세한 설명을 하기에 열거한다.

3-D 사진에 의한 이미지 분석. 치료 효과 평가를 3-D 사진으로 수행하였다. 연구자 또는 적격인 피지명자는 각각의 치료 부위 (양쪽 엉덩이 또는 양쪽 허벅지)를 표준화 방식으로 표준화 디지털 카메라를 사용하여 주사 전에, 치료 1, 22, 및 43일째에 표시 딤플 및 주사 부위 전후에 촬영하였다. 선별 및 모든 다른 비-투약 방문시 각각의 치료 부위의 단일 세트 사진을 촬영하였다. 4, 8, 15, 22, 43, 및 71일째 (연구 말기/ET)에 촬영한 사진을 처리 암(treatment arm) 및 연구 방문일에 대해 맹검된 중앙 평가자가 검토한다.

멍, 용적, 표면적, 및 최대 길이/너비를 평가하기 위해 사용된 표준 이미지 분석 (IA) 절차를 하기에 논의한다. 카메라 시스템은 커스텀 조명, Vectra M1 카메라, 및 Canfield Capture 소프트웨어 (v. 3.5)가 장착된 IntelliStudio(제조원: Canfield Scientific)일 수 있다. 이미지 유형, 속성, 관찰 뷰, 및 방문 윈도우를 정의하고, 디지털 모니터링 시스템 (DMS)으로 직접 입력한다. DMS에서 연구 설정은 다음을 포함하였다:

이미지를 캡취하고 검토를 위해 이용가능한 DMS로 단계화한다. 사진 방문은 다음을 포함할 수 있다: 선별, 1일째/표시-전, 1일째/표시-후, 4일째, 8일째, 15일째, 22일째/ 표시-전, 22일째/ 표시 후, 43일째/표시-전, 43일째 표시-후, 및 71일째/ET.

딤플 분석: 일차적인 딤플이 각 사분면에 지시된 바와 같이 "X"로 표시되는 것을 확인하기 위해 이미지를 검토한다. 일차적인 딤플이 표시되지 않는 경우, 다음 단계를 수행한다:

1. 이미지(들) 및 이미지들의 장소를 파워포인트로 보낸다.

2. 사이트를 접촉하고, 사이트의 연구자에게 일차적인 딤플을 파워포인트 내 이미지 상 X로 표시할 것을 요청한다.

3. 서신을 저장하고, 이미지 분석 (IA) 팀과 공유한다.

딤플 분석을 1 (표시-전), 22, 43 및 71일째에 수행한다. 딤플 분석 파라미터, 최대 길이, 최대 너비, 표면적, 및 딤플 하부와 보간된 표면 사이 용적의 1일째 표시-전 이미지로부터 관찰된 변화를, 22, 43, 및 71일째에 치료 부위 및 주사 유형으로 기술 통계학을 사용하여 요약한다 (예시적인 딤플 분석을 도 19a 내지 19c에 도시한다). 추가로, 용적을 선형 모델을 사용하여 분석한다.

이미지 분석 기술자 (IAT)는 1일째-표시-전 이미지 상 표적 딤플의 위치를 결정하기 위해 1일째-표시 후 이미지를 기준으로 이용한다. 1일째-표시 전에 딤플 오목면의 경계 주위에서 추적된다. 딤플 추적은 22일째-표시 전, 43일째-표시 전, 및 71일째/ET 이미지에서 전위된다. 이러한 추적은 (i) 최대 길이 (즉, 딤플을 가로 지르는 최장 직선 거리); (ii) 최대 너비 (즉, 최대 길이 측정값에 수직인 최장 직선 거리); (iii) 딤플의 표면적; 및 (iv) 딤플의 하부(base)와 보간된 표면 사이의 용적을 측정하기 위해 사용된다.

멍 분석: 이미지를, 각각의 이미지 내에 및 멍 영역 밖에서 존재하는 것을 확인하기 위해 검토한다. 기준 라벨이 존재하지 않거나 멍든 영역을 막는 경우, 이용가능한 경우 재촬영이 당해 방문에서 요청된다. 멍 분석을 1 (표시-전), 4, 8, 및 15일째에 수행한다.

부위 표시 분석: 이미지를 딤플이 1일째 표시-후 방문에서 표시되는 것을 확인하기 위해 검토한다. 딤플이 표시되지 않는 경우, 이용가능한 경우 재촬영이 당해 방문에서 요청된다.

이미지 분석 (IA) 작업흐름: 분석을 위해 선택된 모든 이미지는 이미지 분석 기술자 (IAT)가 조사 부위, 피험자 이차적인 식별자, 및/또는 처리 암과 같은 정보에 대해 맹검되도록 무작위 추적 번호로 할당된다. 특정한 방문에서 수행한 분석 절차는 방문 명칭을 기초로 하여 미리-결정된다. 딤플 분석을 사전-식별된, 일차적인 딤플에서 수행하고, 용적, 표면적, 및 최대 길이/너비의 측정을 포함할 것이다. 멍 분석은 인식된 멍든 영역 및 영향을 받지 않은 피부 상 인식된 멍 밖의 영역에서 L*a*b* 색상 측정을 포함하였다. 부위 표시 분석은 추적의 표면적 측정에 추가하여 최대 길이/너비로 이루어진다.

이미지 등록: 1일째 표시-전 (기준선) 방문을 받을 때, IAT는 표시-전 이미지를 Vectra 분석 모듈 (VAM) 소프트웨어에서 열고, 이미지를 3-D 공간 그리드에 중심에 위치시킨다. 그리드를 기준으로서 사용하여, IAT는 기준선 이미지를 위치시켜 이미지의 대략적인 중심을 그리드의 근원에 위치하도록 한다. 허벅지/엉덩이는 +z-방향으로 전방으로 향하고, 상부 허벅지/엉덩이 점수는 +y-방향으로, 더 낮은 허벅지/엉덩이 점수는 -y-방향으로 향한다 (도 13). 1일째 표시-후를 포함하는 모든 후속 시점의 이미지를 그리드에 기준선 이미지의 위치에 알고리즘 기능을 사용하여 등록한다.

거리-별-색상 맵을 IAT가 등록을 검토하기 위해 사용하는 VAM 내에 생성한다. 거리-별-색상 맵은 +5 내지 -5 밀리미터 (mm)의 색상 척도를 기초로 하여 두개의 (2) 이미지 모델 간의 거리를 나타낸다 (도 14). IAT는 대부분의 이미지가 녹색으로 채색되는 것을 확인하는데, 이는 두개의 이미지 및 그들이 적합하게 정렬된 것들 간에 사소한 거리가 존재함을 나타낸다.

표면 추적 처리: 이미지 등록 후, 1일째 (표시-전), 4일째, 8일째, 15일째, 22일째, 43일째 및 71일째 이미지는 표면 추적 처리를 받는다. IAT는 먼저 1일째의 고-밀도 메쉬 템플레이트(mesh template), 기준선 이미지를 생성하기 위한 스크립트를 사용한다. 임의의 시점에 하나의 후속조치 이미지를 VAM 소프트웨어에서 기준선 및 메쉬 템플레이트와 함께 연다. 시드 랜드마크 추적(tracking seed landmarks)을 기준으로서 식별할 수 있는 피부 소견(features)에 위치시킨다. 추적 스크립트를 실행하여 프로그램으로 만들고, 세개 (3)의 새로운 3-D 이미지, 추적된 기준선 이미지, 추적된 후속조치 이미지, 및 품질 제어 (QC) 이미지를 저장하고, 이는 추적된 후속조치 이미지의 형태이고, 추적 품질에 관한 정보를 전달한다.

품질 체크 IAT는 성공적인 추적을 입증하기 위해 추적된 후속조치 이미지 및 QC 이미지의 품질을 검토한다. 딤플 분석을 받는 방문을 위해, IAT는 또한 QC 이미지를 추적된 후속조치 이미지 위에 중첩시켜 일차적인 딤플 영역에 QC 이미지 상 큰 구멍이 없음을 확인한다. QC 이미지의 메쉬에서 구멍은 탈퇴(drop out) 영역에서 추적 정보의 누락을 나타낸다. 분석 영역 내에 정보의 누락 때문에 IAT가 허용되지 않는 추적으로 생각되는 사건에서, 시드 랜드마크 추적을 조정하고, 추적 스크립트를 다시 수행한다. IAT는 섬광, 깊은 그림자, 옷에 의해 남겨지는 피부 자국, 피험자 위치의 큰 변화 또는 피부 색소의 큰 변화에서 유래되는 열악한 표면 추적 품질과 같이 불가피한 경우를 주의한다. QC 이미지의 메쉬 내 구멍은 강한 멍 영역으로 예상된다.

일차적인 딤플 관심 대상 영역 (AOI) 기술: 성공한 표면 추적 후, IAT는 추적된 기준선 이미지를 열고, 1일째-표시 후 이미지를 VAM에 등록한다. 1일째-표시 후 이미지 상, IAT는 일차적인 딤플 부위 표시의 외부 경계를 추적한다. 이러한 추적은 부위 표시의 표면적, 부위 표시를 가로 지르는 가장 큰 축 (최대 딤플 길이) 및 이의 가장 큰 수직 축의 길이 (최대 딤플 너비)를 측정하기 위해 사용된다. 이러한 추적은 딤플 또는 멍 분석에 대한 AOI를 기술하는데 사용되지 않는다. 일차적인 딤플이 부위에서 확인되지 않는 경우, IAT는 그/그녀가 가장 컸다고 인식하는 딤플을 추적한다.

IAT는 1일째-표시 후 이미지를 기준으로서 사용하여 1일째-표시-전 이미지 상 표적 딤플을 위치시킨다. 이어서, IAT는 추적된, 표시-전 이미지 상 일차적인 딤플의 경계를 추적한다. 추적은 딤플이 오목하게 되고 딤플 분석을 위해 일차적인 딤플 AOI를 기술하는 마루(ridge) 바로 밖에 존재할 때까지 필요에 따라 조정된다 (도 15). 추적된, 표시-전 이미지 상 딤플 추적은 기준선에 대한 각각의 후속조치 이미지의 고유 표면 추적 관계를 기초로 하여 22일째, 43일째 및 71일째 후속조치 이미지 상으로 전위된다 (도 16). IAT는 전위된 AOI에 영향을 주는 열악한 이미지 품질의 모든 경우를 주의한다.

멍 관심 대상 영역 (AOI) 기술: IAT는 "멍든 조직" AOI를 생성하고, 4일째 이미지 상 가장 큰 인지할 수 있는 멍의 둘레 주위를 단일 연속 추적한다 (도 17). IAT는 멍든 피부 및 영향을 받지 않은 피부 간의 피부 색소 차이를 측정할 수 있는 곳의 둘레를 추적한다. 둘러싼 피부 색조와 구별할 수 있는 청색/자주색, 녹색 또는 황색/갈색 색소를 나타내는 경우, 피부는 멍든 것으로 고려된다. 어떠한 멍도 4일째 이미지에서 식별되지 않는 경우, 피험자는 멍 분석 목적을 실패한 것이다.

추가로, IAT는 두번째 추적인, "정상 조직" AOI을 생성한다. 정상 조직 AOI는 옷 압축 선, 비정상 홍반, 또는 피부 소견, 예를 를 들면, 여드름 또는 흉터 조직에 의해 야기되는 피부 감촉 왜곡에 의해 영향을 받지 않은 피부 영역에 생성한다. 가능하고 적용가능한 경우, 정상 조직 AOI는 1일째 표시-전 멍든 조직 AOI의 만곡을 가로질러 존재하는 모든 그림자, 빛, 또는 섬광을 일치시키는 시도를 한다. 정상 조직 AOI의 크기 및 형태는 자연스럽게 나타나는 피부의 양에 좌우되어 피험자에 따라 다양하다. 추적되는 경우, IAT는, 이들의 4일째 이미지에 관련된 표면 추적을 기초로 하여, 4일째 이미지부터 1일째-표시-전, 8일째 및 15일째 이미지까지 멍든 조직 및 정상 조직 AOI 둘 다를 전위시킨다. 멍든 조직 AOI 또는 정상 조직 AOI가 특정한 피험자 또는 피험자의 측면을 위한 다른 멍 분석 방문의 끝을 넘어서서 확장되는 경우, AOI는 모든 방문에 걸쳐서 일치할 때까지 조정된다.

IAT는 수동으로 백색 기준 라벨을 1일째-표시 전, 4일째, 8일째 및 15일째 이미지를 추적하고, 추적 "백색"으로 라벨링한다. 백색 기준 라벨을 멍든 영역에 위치시킨 경우, IAT는 라벨의 경계를 추적하고, 각각의 영향을 받은 방문에서 멍 AOI로부터 이를 공제한다. 어떠한 백색 기준 라벨도 이미지에 존재하지 않는 경우, 당해 이미지는 멍 분석 목적을 실패한 것이다.

품질 제어 (QC) 체크: QC 체크는 이미지에 대한 분석을 수행하는 IAT와 독립적인 IAT에 의해 수행된다. 개별적인 세트의 QC 체크를 주어진 방문을 위한 분석 절차에 좌우되어 수행한다. QC 체크 동안 QC IAT가 만든 모든 조정을 메모하고, 분석으로 넘어가기 전에 또다른 IAT가 다시-QC한다. QC 시간 전에, QC IAT는 이미지 품질 이슈에 관한 본래 IAT로부터 만들어진 모든 메모를 검토한다.

분석 측정: 이미지를 QC에 통과시킨 후, 분석 IAT는 QC IAT로부터의 메모를 검토한다. 이어서, 분석 IAT는 스크립트 분석 절차를 수행한다. 절차 및 분석 종점은 제공된 방문에 좌우되어 이미지 간에 상이하다. 딤플 용적 분석에 대해, 보간된 표면은 일차적인 딤플 AOI의 상부에 걸쳐서 생성된다. 용적 측정은 보간된 표면 및 딤플의 하부 간의 공간을 나타낸다.

표면적은 1일째-표시 후 이미지의 경우 일차적인 딤플 AOI 또는 부위 자국 AOI의 총 표면적으로서 측정된다. 최대 딤플 길이는 일차적인 딤플 AOI를 가로지른 가장 큰 포인트 대 포인트 축으로서 측정된다. 최대 딤플 너비를 가장 큰 포인트-대-최대 딤플 길이 축에 수직인 포인트 거리로서 측정한다.

멍 분석은 2개의 L*a*b* 색상 측정으로 이루어진다. 멍든 조직 및 정상 조직 AOI 내 L*a*b* 색상 값을 측정한다 (도 18a. 다음 표는 수행될 수 있는 분석을 요약한다 (표 19).

데이터 허용: 이미지 분석이 완료된 경우, 분석 IAT는 분석을 위한 이미지를 허용하거나 이미지를 실패한다. 이미지는 부분적으로 실패할 수 있고, 예를 들면, 1일째 표시-전 방문은 4일째 보이지 않는 멍 때문에 멍 분석을 실패할 수 있지만, 여전히 딤플 분석에서 허용가능하다. 모든 실패는 이미지 모델이 왜 분석을 받아들일 수 없었는지를 상세하게 의무적인 실패 메모를 받는다. 이미지 실패는 불량한 이미지 품질, 불량한 추적 품질 또는 AOI 내 방해물과 같은 인자 때문이다. 이미지는 QC IAT에 의해 실패를 권고받고, IAT에 의해 검토된다. 분석 IAT가 실패 권고를 동의하면, 이미지는 실패되는 것이다.

멍 분석. 멍든 조직 및 정상 조직을 1, 4, 8, 및 15일째에 2개의 L*A*B* 색상 측정을 사용하여 3-D 사진 상에서 평가한다 (도 18b). L*A*B* 색 강도 측정치가 더 클 수록, 멍은 더 심하다. 각각의 치료 부위 및 주사 유형에 대한 멍든 조직 대 정상 조직의 2개 색상 사이의 가시적 인식의 변화를 측정한다.

G. 효과의 지속성

본원에 기재된 콜라게나아제 치료는 본원에 개시된 임의의 척도 또는 평가 방법에 의해 측정된 바와 같이 유효성 면에서 지속성을 갖는다. 이러한 지속성은 약 3개월에서 5년 이상까지 다양할 수 있다. 단일 주사 또는 일련의 주사는 셀룰라이트의 개선을 유지하거나 셀룰라이트 외관을 계속 개선하거나 장시간 동안, 예를 들어, 약 6개월, 1년, 2년, 3년, 4년, 또는 5년 또는 그 이상 동안 셀룰라이트 외관의 중증도를 감소시킬 수 있다.

특정 실시형태에서, 콜라게나아제 주사를 받은 환자는 치료 후 약 6개월에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 중 하나 또는 둘 모두에 대해 기준선 대비 ≥1점의 개선을 계속 나타내거나 치료 후 약 12개월에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 중 하나 또는 둘 모두에 대해 기준선 대비 ≥1점의 개선을 나타낸다. 또한, 이러한 환자는 치료 후 약 22일, 43일, 90일, 또는 180일째에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 중 하나 또는 둘 모두에 대해 기준선 대비 ≥1점의 개선을 나타낸다. 예를 들어, 환자의 적어도 약 10%, 또는 15%, 또는 20%, 또는 25%, 또는 30%, 또는 35%, 또는 40%, 또는 45%, 또는 50%, 또는 55%, 또는 60%, 또는 65%, 또는 70%, 또는 75%, 또는 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 95%, 또는 100%가 이러한 지속성을 입증한다.

또다른 측면에서, 치료 방법은 2-레벨 복합 응답자(PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 모두에서 적어도 2 레벨의 셀룰라이트 중증도가 개선된 환자)에 대한 효과의 지속성을 평가한 결과 통계적으로 유의한 수가 치료 후 6개월 및 12개월에 효과의 지속성을 입증한다. 특정 실시형태에서, 환자의 적어도 약 10%, 또는 15%, 또는 20%, 또는 25%, 또는 30%, 또는 35%, 또는 40%, 또는 45%, 또는 50%, 또는 55%, 또는 60%, 또는 65%, 또는 70%, 또는 75%, 또는 80%, 또는 85%, 또는 90%, 또는 95%, 또는 100%가 이러한 지속성을 입증한다.

지속성의 비제한적인 예는 다음을 포함한다:

a. CR-PCSS 등급의 감소는, 양측 엉덩이 또는 양측 허벅지에 치료 부위당 12회 피하 주사(x 2곳의 치료 부위)로 투여된 CCH 0.84mg의 3회 치료 세션의 유효성을 뒷받침하는 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 척도 점수와 결합하여 180일까지 유지된다.

b. 180일째, 기준선(스크리닝 방문)으로부터 CR-PCSS 등급의 감소는 오른쪽과 왼쪽에서 일관된다.

c. 적어도 1곳의 치료 부위에서 CR-PCSS 등급의 2-레벨 개선은 180일째에 관찰된다. 엉덩이와 허벅지 부위 및 왼쪽과 오른쪽에 대한 응답은 비슷하다.

d. 적어도 한 부위에서 CR-PCSS 등급의 1-레벨 개선은 180일째에 관찰된다. 엉덩이와 허벅지 부위 및 왼쪽과 오른쪽에 대한 응답은 비슷하다.

e. 적어도 한 부위에서 가장 빠른 2-레벨 CR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 83일에 관찰된다.

f. 가장 빠른 1-레벨 CR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 41일이다.

g. 180일째에는 환자의 절반 이상이 치료에 만족하거나 매우 만족하였다.

h. Hexsel CSS에 대한 환자의 점수가 처음에 중증(11-15)의 기준선 분류에 비해 증등증(6-10) 또는 경증(1-5)으로 분류되었고, 증등증(6-10) 또는 경증(1-5)으로 계속 분류된 기간.

i. CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS, 헥셀 함몰부 깊이 척도, 리커트 척도, 딤플 분석, I-GAIS, S-GAIS, PR-CIS, 간이형 PR-CIS, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, 바디-Q, 사진 또는 기타 이미지에 의한 평가, 또는 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용하는 임의의 다른 검증된 광수치 또는 기타 척도 중 하나 이상으로 측정된 바와 같이 측정된 개선 일자부터 개선을 입증한 후 환자가 기준선으로 복귀하거나 악화된 날짜까지 측정된 기간.

j. CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS, 헥셀 함몰부 깊이 척도, 리커트 척도, 딤플 분석, I-GAIS, S-GAIS, PR-CIS, 간이형 PR-CIS, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, 바디-Q, 사진 또는 기타 이미지에 의한 평가, 또는 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용하는 임의의 다른 검증된 광수치 또는 기타 척도 중 하나 이상으로 측정된 바와 같이 측정된 개선 일자부터 피험자는 치료에 대한 응답의 관찰 가능한 상실을 보이는 날짜까지 측정된 기간.

k. 치료에 대한 응답의 기준 시점부터 피험자는 응답에 변화(치료에 대한 초기 응답 대비 개선을 포함함)를 보일 때까지 측정된 기간. 응답 및/또는 개선의 변화는 CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS, 헥셀 함몰부 깊이 척도, 리커트 척도, 딤플 분석, I-GAIS, S-GAIS, PR-CIS, 간이형 PR-CIS, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, 바디-Q, 사진 또는 기타 이미지에 의한 평가, 또는 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용하는 임의의 다른 검증된 광수치 또는 기타 척도 중 하나 이상으로 측정될 수 있다. 일부 실시형태에서, 기준 시점은 기준선(투여 전, 1일) 또는 치료 후 71일이다.

l. 피험자가 CR-PCSS 및 PR-PCSS에 따라 2-레벨 복합 응답자가 된 방문 날짜부터 평가 등급이 복귀되고 기준선 등급까지 유지되는 2회 연속 방문의 첫 번째 날짜까지 측정된 기간.

m. 피험자가 CR-PCSS 및 PR-PCSS에 따라 1-레벨 복합 응답자가 된 방문 날짜부터 평가 등급이 복귀되고 기준선 등급으로 유지되는 2회 연속 방문의 첫 번째 날짜까지 측정된 기간.

H. 콜라게나아제 주사의 안전성

지금까지 수행된 연구들 중 일부는 하기 실시예에 상세히 설명되어 있고, 본원에 기재된 치료의 안전성을 확립한다. 예를 들어, 이러한 연구는 4곳의 치료 부위에 CCH 3.36mg을 동시에 피하 투여한 후 콜라게나아제의 전신 노출이 없음을 입증한다. 실제로, 4곳의 치료 부위에 동시 투여시 콜라게나아제의 안전성 프로파일에 대한 새로운 우려는 관찰되지 않았다. 흔히 보고된 사건은 현재 알려진 콜라게나아제의 이상 사례 프로파일과 일치하였다.

CCH로 치료받은 대부분의 피험자는 중증도가 경증 내지 증등증인 적어도 하나의 TEAE를 경험하였다. 허벅지 또는 엉덩이 치료 부위별 TEAE를 경험한 피험자에서 눈에 띄는 차이는 없었다. 가장 흔한 유형의 TEAE는 주사 부위 반응, 특히 주사 부위 멍이었는데, 이는 치료 부위(엉덩이 또는 허벅지) 간에 차이가 없었다. 대부분의 TEAE는 21일 이내에 해결되었다. 임상 및 혈액학 실험실 파라미터, 소변 검사 결과, 활력 징후 또는 병용 약물에 임상적으로 의미 있는 변화가 없었다. 항-약물 항체 또는 중화 항체를 가진 피험자에게서 임상적으로 관련된 소견은 없었다.

본원에 기재되고 도 16 내지 18에 나타낸 바와 같이, 멍 분석을 수행하여 시간 경과에 따른 멍의 정도를 측정할 수 있다. 특정 실시형태에서, 콜라게나아제 치료로 인한 임의의 멍은 치료 방문 후 약 3일, 또는 4일, 또는 5일, 또는 6일, 또는 7일, 또는 8일, 또는 9일, 또는 10일, 또는 11일, 또는 12일, 또는 13일, 또는 14일, 또는 15일, 또는 20일째에 해결되거나 색 강도가 현저하게 감소할 수 있다.

I. 실시예

다음의 실시예는 본 발명의 특정 실시형태를 입증하기 위해 포함된다. 그러나, 당해 기술분야의 숙련가는 본 개시내용에 비추어 볼 때, 개시된 특정 실시형태에서 수정이 이루어질 수 있고, 여전히 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 비슷하거나 유사한 결과를 얻을 수 있음을 인식해야 한다. 따라서 제시된 모든 사항은 제한적인 의미가 아니라 예시적인 것으로 해석되어야 한다. 예를 들어, CCH를 사용하는 연구에서 다른 콜라게나아제가 CCH에 필적하는 활성 및 응답을 생성하기에 충분한 양(치료적 유효량)으로 사용될 수 있다. 하기 설명된 임상 시험 결과에서, 보고된 각 수치 값은 엄격하게 제한하려는 의도가 아님을 이해해야 한다. 본 개시내용의 범위는 본원에 설명된 발명의 사실 및 원리와 일치하는 각 값 주변 범위를 포함한다. 따라서, 각 값은 약 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 100%까지 위아래로 달라질 수 있다. 일부 경우에 특정 값의 맥락 및 상황에 따라 약 125%, 150%, 175%, 200%, 225%, 250%, 275%, 또는 300%까지 위아래로 달라질 수 있다. 예를 들어, 일 실시형태에서, 치료 후 71일째에 허벅지의 딤플 용적에서 기준선 대비 평균 감소율은 10%이다. 그러나 이러한 감소는 30%가 될 수 있다.

실시예 1-EFP의 치료를 위한 CCH의 임상 연구 (연구 205)

개방-표지 단계 2 연구를 수행하고, 여기서, 적어도 2개의 양측 치료 영역 (즉, 양측 엉덩이 또는 양측 후외측 허벅지)에 경증, 증등증, 또는 중증 수준의 셀룰라이트를 갖는 피험자에게 CCH를 할당된 치료 영역에 1, 22, 및 43일째 투여하였다. 후속조치 방문을 90 및 180일째에 모든 피험자에 대해 그리고 각각의 치료 세션 후 1, 3, 6, 및 13 일에 피험자의 부분집합에서 수행하였다. 90 및 180일째에 후속조치 방문 (즉, 1일째 후 각각 89 및 179 일)이 치료 효과를 평가하기 위해 발생하였다 (사진 하위-연구). 당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 이러한 연구 205에서 사용된 "일(Days)"은 연구 205에서 초기 용량 (1일째)에 상대적이었다.

사용된 CCH는, 0.9 mg의 콜라게나아제 클로스트리듐 히스톨리티쿰, 0.5 mg의 염산, 18.5 mg의 수크로스, 및 1.1 mg의 트로메타민을 동결건조된 케이크로 포함하는 멸균 동결건조된 분말이었다. 재구성을 위한 CCH 멸균 희석제는 바이알당 0.6% 염화나트륨 용액, 2.0 mL 중 0.03% 염화칼슘 디하이드레이트였다.

피험자는 선별 방문에서 임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 점수 (CR-PCSS)가 2 (경증) 또는 그 이상의 점수를 갖고, 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도 (CSS) 점수가 13 이하인 양측 치료 부위를 갖는 건강하고, 비-임신 여성 18 세 초과였다 (즉, 양쪽 엉덩이 또는 양쪽 허벅지). 피험자는 이들이 다음 상태 중 어느 하나로 나타나는 경우 제외되었다: 응고 장애; 적어도 5 년내에 재발이 없는 경우 이외 악성 (기저-세포 암종 이외에) 증거 또는 이력; 켈로이드 흉터형성 또는 비정상 상처 치유의 이력; 또는 연구 수행을 방해하거나, 연구 결과의 해석이 틀렸음을 입증하거나, 피험자의 웰빙을 위태롭게 할 수 있는 동시 질환 또는 상태.

피험자에게 치료 세션당 최대 용량 1.68 mg의 CCH를 투여하였다. 0.84 mg 용량의 CCH를 치료 부위당 (즉, 각각의 엉덩이 또는 각각의 허벅지) 12회 피하 주사로서 투여하였다. CCH를 각각 적어도 21 일 간격으로 발생하는 3개 치료 세션 동안 각각의 피험자에게 투여하였다. 누적 용량의 CCH는 5.04 mg이었다 (즉, 3회 치료 방문 x 치료 부위당 0.84 mg x 2곳의 치료 부위).

치료를 위해 선택된 각각의 딤플에 대해, 주사 부위를 선택하였다. 각각의 주사 부위를 수술적 표시자를 사용하여 도트(dot)로 표시하였다. 둥근 딤플의 경우, 도트를 딤플의 중심에 위치시켰다. 길쭉한 딤플의 경우, 도트들을 딤플의 장축에 따라 대략 2 cm 밖으로 이격하였다. 딤플이 1회 초과 주사를 필요로 하는 경우, 딤플 내 주사 부위는 대략 2 cm 간격으로 이격되고, 존재하는 경우 적어도 하나의 주사 부위를 딤플의 최하점에 위치시켰다. 이어서, 수술적 표시자를 치료를 위해 선택된 각각의 딤플에 원형을 그리기 위해 사용하였다. 선택된 치료 부위에 원형은 중복되지 않았다. 예를 들면, 도 6을 참조한다.

CCH를, 피험자가 엎드린 위치로 있으면서, 30-게이지 1/2-인치 바늘을 갖는 주사기를 사용하여 피하 주사하였다. 도 7에 나타낸 바와 같이, 각각의 주사 부위에, 0.3 mL의 총 주사 용적에 대해 위치 A, B, 및 C에 3회의 0.1 mL 분취량으로 투여되는 CCH의 단일 피부 주사를 투여받고, 주사의 깊이는 ½ 인치이고, 이는 하향 압력 없이 바늘의 팁부터 바늘의 하부까지 치료 바늘의 길이에 상응한다. 각각의 주사 부위에서, 바늘을 피부 표면에 수직으로 90°에 위치시키고, 삽입하고, 0.1 mL 분취량의 CCH를 주사하였다 (위치 A). 바늘을 약간 빼내고 (그러나 피부에서 제거하지 않고), 머리를 향해 수직에서 45°로 그리고 딤플의 장축 위로 위치를 변경하고, 0.1 mL 분취량의 CCH를 주사하였다 (위치 B). 바늘을 다시 약간 빼내고, 수직에서 대략 45°로 발을 향해 그리고 딤플의 장축 아래로 위치를 변경하고, 0.1 mL 분취량의 CCH를 주사하였다 (위치 C). 주사 후, 피험자는 5 분 동안 엎드린 채로 유지하였다.

효능. 셀룰라이트의 치료를 위한 CCH의 효능을 CR-PCSS 등급을 사용하여 임상의에 의해 분석하였다. 기준선 방문 (선별 방문)으로부터 CR-PCSS 등급의 최대 감소를 90일째에 처음 관찰하였다. 셀룰라이트 중증도의 이러한 개선 (즉, 음의 변화)은 180일째 방문에서 유지되었다. 대부분의 피험자는 연구 도입시 경증-내지-증등증 CR-PCSS 등급 점수였다. 90일째에, 왼쪽 엉덩이 및 왼쪽 허벅지의 CR-PCSS 등급의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 각각 -0.8 (0.58) 및 -0.6 (0.62)이고, 오른쪽 엉덩이 및 오른쪽 허벅지에서 각각 -0.7 (0.73) 및 -0.5 (0.70)였다. 영역 및 방문에 따른 CR-PCSS 점수는 표 20에 제공한다.

SD = 표준 편차

69명의 피험자는 이들의 양측 엉덩이에 처리받았고, 89명의 피험자는 이들의 양측 허벅지에 처리받았다. CR-PCSS 점수에서 셀룰라이트 중증도의 기준선으로부터 2-레벨 개선을, 90일째에 17 (13.4%)명의 산정가능한(evaluable) 피험자에서 및 180일째에 20 (15.3%)명의 산정가능한 피험자 (62명의 엉덩이에 처리된 피험자 및 82명의 허벅지에 처리된 피험자)에서 적어도 하나의 치료에서 관찰하였다. 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 응답을 성취하는 중간 시간은 83 일이었다. 2-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율 및 2-레벨 CR-PCSS 응답에 대한 중간 시간은 왼쪽 및 오른쪽에 처리된 피험자에서 유사하고, 허벅지 및 엉덩이 처리된 영역에서 유사하였다. 이들 결과는 표 21에 제공된다.

피험자의 대략 4분의 3은 90일째까지 적어도 하나의 치료 부위에서 적어도 1-레벨 응답을 경험하였다. 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS에서 셀룰라이트 중증도의 기준선으로부터 1-레벨 개선은 90일째에 96 (75.6%)명의 산정가능한 피험자에서 관찰되고, 180일째에 90 (68.7%)명의 산정가능한 피험자에서 관찰되었다. 적어도 하나의 영역에서 가장 이른 1-레벨 응답을 성취하는 중간 시간은 41 일에 관찰되었다. 1-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율은 왼쪽 및 오른쪽에 처리된 피험자에서 유사하고, 허벅지 및 엉덩이 처리된 영역에서 유사하였다. 왼쪽 및 오른쪽 상 가장 이른 1-레벨 CR-PCSS 응답을 성취하는 중간 시간은 43 일도 동일하였다. 이들 결과를 표 22에 요약한다.

셀룰라이트의 치료를 위한 CCH의 효능을 또한 피험자 만족도 점수 (셀룰라이트 치료 척도에 대한 피험자 만족도)를 사용하여 피험자에 의해 분석되었다. 180일째에, 130명의 산정가능한 응답자 중에서, 절반 초과(56.1%)는 치료에 만족하거나 매우 만족하였다. 엉덩이에서 치료에 만족하거나 매우 만족한 치료된 피험자의 비율은 71.5%였다. 허벅지에서 치료에 만족하거나 매우 만족한 피험자의 비율은 44.6%였다. 이들 결과를 표 23에 요약한다.

효능에 관한 다른 결론은 다음을 포함한다:

1. 180일째에, 기준선 (선별 방문)으로부터 CR-PCSS 등급의 감소는 오른쪽 및 왼쪽에서 일관되었다. 왼쪽 엉덩이 및 허벅지 (- 0.8 [0.65] 및 -0.6 [0.69] 대 오른쪽 엉덩이 및 허벅지 (-0.7 [0.73] 및 -0.5 [0.70])의 기준선으로부터 평균 (SD) CR-PCSS 등급의 변화는 유사하였다.

2. 적어도 하나의 영역에서 CR-PCSS 등급의 2-레벨 개선은 90일째에 17 (13.4%)명의 산정가능한 피험자 및 180일째에 20 (15.3%)명의 산정가능한 피험자에서 관찰되었다. 응답은 엉덩이 및 허벅지 영역에서 및 왼쪽 및 오른쪽에서 유사하였다.

3. 적어도 하나의 치료 부위에서 CR-PCSS 등급의 1-레벨 개선은 90일째에 96 (75.6%)명의 산정가능한 피험자에서 및 180일째에 90 (68.7%)명의 산정가능한 피험자에서 관찰된다. 응답은 엉덩이 및 허벅지 영역에서 및 왼쪽 및 오른쪽에서 유사하였다.

4. 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 2-레벨 CR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 83 일에 관찰되었다 (범위: 21, 191). 적어도 하나의 치료 부위에서 가장 이른 1 레벨 CR-PCSS 응답까지의 중간 시간은 41 일에 관찰되었다 (범위: 20, 205).

5. 180일째에 (연구 말기/처리 말기), 절반이 넘는 산정가능한 응답자 (56.1%)가 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (만족함: 48 [36.9%]) 또는 매우 만족함: (25 [19.2%]).

6. 피험자 만족도 조사의 점수와 동반하여 180일째에 지속된 CR-PCSS 등급의 감소는, 치료당 12회 피하 주사로서 (x2곳의 치료 부위) 양측 엉덩이 또는 양측 허벅지에 투여된 0.84 mg CCH의 3개 치료 세션이 효과적이었음을 입증한다.

안전성. 대부분의 CCH로 처리된 피험자는, 중증도가 경증 내지 증등증인 적어도 하나의 치료로 인한 이상 사례를 경험하였다. 허벅지 또는 엉덩이 처리된 영역에 따라 치료로 인한 이상 사례를 경험한 피험자에서 주목할만한 차이는 없었다. 이상 사례의 가장 일반적인 유형은 주사 부위 반응, 특히 주사 부위 멍이었고, 이는 치료 영역 간에 상이하였다.

연구는 또한, 후속조치 방문과 동시에 일어나는, 피험자가 각각의 치료 과정 후 1, 3, 6, 및 13 일에 사진을 위해 클리닉으로 되돌아온 동안 사진 하위-연구를 포함한다. 2개 연구 현장에서 사진 하위-연구에 참여하는 37명의 피험자의 허벅지 및 엉덩이 영역의 사진 이미지를 현장별로, 피험자별로, 연구 방문별 연대순으로, 및 각각의 치료 부위 (왼쪽 엉덩이, 오른쪽 엉덩이, 왼쪽 허벅지 및 오른쪽 허벅지)의 콜라겐 누적으로 배치하였다. 연구자는, 이미지 및 사진 콜라겐 검토 후, 주사 부위 멍 외관의 전반적인 관찰을 캡쳐하여 설계된 질문표를 완료하였다. 연구자는 치료 세션 후 주사 부위 멍이 3 및 6 일에 심각하고, 다음 치료 세션 전에 해결되고, 일반적으로 각각의 치료 세션에서 덜 심각해진다는 것을 관찰하였다. 계속된 변색은 헤모시데린 염색에 기인하였다.

치료 세션에 따른 치료-관련 주사 부위 반응의 분석은 후속 치료 세션에서 주사 부위 반응의 발생 정도 및 지속기간이 감소하는 경향을 나타내고, 대부분 21 일 내에 해결되었다. 치료 세션 1, 2, 및 3 동안, 21 일 이하 이내에 해결되는, 치료로 인한 이상 사례를 경험한 피험자의 비율은 각각 76.7%, 85.2%, 및 71%였다.

실시예 2-EFP의 치료를 위한 CCH의 3단계 임상 연구 (연구 302)

단계 3, 무작위, 이중-맹검, 위약-제어 연구를, 각각의 엉덩이에 증등증 또는 중증 수준의 셀룰라이트를 갖는 피험자에게 1, 22, 및 43일째 할당된 치료 영역에 CCH 투여하여 수행하였다. 당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 이러한 연구 302에서 사용된 "일(Days)"은 연구 302에서 초기 용량 (1일째)에 상대적이었다. 셀룰라이트 조성물을 위한 CCH는 0.92 mg의 콜라게나아제 클로스트리듐 히스톨리티쿰, 수크로스, Tris, 만니톨, 및 염산 qs pH 8.5를 포함하는 멸균 동결건조된 분말이었다. CCH를 0.6% 염화나트륨 및 0.03% 염화칼슘 디하이드레이트를 물 중에 재구성하기 위해 멸균 희석하였다. 피험자를 1, 22, 43 및 71일째에 평가하였다. 피험자는 선별 방문에서 및 치료 전 첫번째 치료 세션에서 환자가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 점수 (PC-PCSS) 및 임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 점수 (CR-PCSS) 둘 다를 사용하여 점수 3 또는 4 (증등증 또는 중증)를 갖는 건강한, 비-임신 18 세 이상 여성이었다.

피험자에게 치료 세션당 최대 용량 1.68 mg의 CCH 또는 위약으로 투여하였다. 0.84 mg CCH의 용량을 엉덩이당 12회 피하 주사로서 투여하였다. CCH를 각각의 피험자에게 각각 대략 21 일 간격으로 발생하는 3개 치료 세션 동안 투여하였다. 누적 용량의 CCH는 5.04 mg (즉, 3회 치료 방문 x 치료 부위당 0.84 mg x 2곳의 치료 부위)이었다. CCH를 실시예 1에 기재되고 도 7에 도시한 바와 같이 동일한 방식으로 주사하였다. 피험자의 양쪽 엉덩이에 이들이 무작위 할당된 처리 그룹에 좌우되어 CCH 치료 또는 위약 처리를 받았다.

다음 피험자 집단은 분석되는 집단 중에 존재하였다:

치료의향 (ITT) 집단은 연구 약물이 적어도 1회 주사된 모든 무작위 피험자를 포함하였다. 모든 인구학적 및 기준선 특징 요약은 이러한 집단을 기초로 하였다. 일차적인 및 핵심 이차적인 효능 파라미터는 이러한 집단을 기초로 하였다.

변형된 치료의향 (mITT) 집단은 표적 및 비-표적 엉덩이 둘 다에 대해 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다의 기준선 및 적어도 1회 주사-후 평가를 갖는 모든 ITT 피험자를 포함하였다. 모든 이차적이고 뒷받침되는 효능 평가는 mITT 집단을 기초로 하였다.

임상의는 피험자가 서 있는 경우 명백하고 치료에 적합한 잘-정의된 각각의 엉덩이 내에 딤플을 선택하였다. 치료의 목표는 각각의 전체 엉덩이의 심미적 외관을 개선시키기 위한 것이기 때문에, 임상의는, 각각의 전체 엉덩이의 심미적 외관을 개선시키고 싶은 딤플을 선택할 것을 지시받았다. 엉덩이 내에 동일한 딤플 또는 엉덩이 내에 상이한 딤플은 각각의 치료 세션에서 처리될 수 있지만, 주사는 엉덩이 내에 수행되어야 한다. 각각의 엉덩이에 치료가능한 셀룰라이트 딤플이 없지 않다면 모든 3개 치료를 하고, 임상의는 엉덩이를 CR-PCSS 점수 0으로 평가하였다. 두번째 치료 세션에서 특정한 엉덩이에서 어떠한 주사도 제공하지 않는 경우, 피험자는 여전히 반대쪽 엉덩이에서 치료에 대해 평가하고, 세번째 치료 세션으로 되돌아가고, 엉덩이 각각을 피험자 및 임상의가 다시 평가하였다. 임상의가 어느 하나의 또는 둘 다의 엉덩이를 CR-PCSS 0 초과로 평가한 경우, 세번째 치료 세션 동안 주사를 제공하였다.

모든 피험자는 치료 세션 1 동안 각각의 엉덩이에 전체 12회 주사를 투여받았다. 치료 세션 2에, CCH-처리된 그룹에서 피험자의 88.1% 및 위약-처리된 피험자의 94.8%는 각각의 엉덩이에 12회 주사를 투약받았다. 치료 세션 3에서, CCH-처리된 피험자의 89.0% 및 위약-처리된 피험자의 90.6%는 각각의 엉덩이에 12회 주사를 투약받았다. 치료되는 딤플의 수 및 딤플당 평균 주사 횟수는 2개의 처리 그룹 간에 및 치료 세션에 걸처서 유사하였다. 효능을 다음 셀룰라이트 중증도 등급 시스템을 사용하여 분석하였다: (i) PR-PCSS; (ii) CR-PCSS; (iii) S-GAIS; (iv) I-GAIS; (v) PR-CIS; (vi) SSRS; 및 (vii) 셀룰라이트 치료를 받은 전체 피험자 만족도(SSCT). 피험자, 연구자 및 직원은 표적 엉덩이 및 처리 둘 다를 알지 못하였다. 평가를 피험자 및 연구자가 독립적으로 수행되고, 이들은 서로의 점수를 알지 못하였다. 일차적인 효능 변수는 71일째에 하기 사항을 갖는 피험자로서 한정된 2-레벨 복합 응답자의 비율이었다: (1) 표적 엉덩이의 연구자에 의해 실시간 평가된 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 적어도 2 레벨 개선; 및 (2) PR-PCSS의 중증도가 표적 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 피험자에 의해 평가된 기준선 (1일째)으로부터 적어도 2 레벨 개선. 피험자는, 이들 기준이 당해 피험자의 무작위 표적 엉덩이에서 충족되는 경우, 응답자로 고려되었다.

연구에 사용된 응답자의 정의는 다음과 같았다.

PR-PCSS 응답자. 2 레벨 PR-PCSS 응답자는 PR-PCSS 등급이 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선 (-2, -3 또는 -4의 변화)된 피험자로서 정의되었다. 1 레벨 PR-PCSS 응답자는 PR-PCSS 등급이 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선 (-1, -2, -3, 또는 -4의 변화)된 피험자로서 정의되었다.

CR-PCSS 응답자. 2 레벨 CR-PCSS 응답자는 CR-PCSS 등급이 평가 시점에 기준선으로부터 (-2, -3, 또는 -4의 변화) 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의되었다. 1 레벨 CR-PCSS 응답자는 CR-PCSS 등급이 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선 (-1, -2, -3, 또는 -4의 변화)된 피험자로서 정의되었다.

복합 PR-PCSS/CR-PCSS 응답자. 각각의 엉덩이에 대한 PR-PCSS 응답자 분류 및 CR-PCSS 응답자 분류는 당해 엉덩이에 대한 복합 응답자 분류를 산출하기 위해 사용되었다. 분류가 1 또는 둘 다의 요소 (즉, PR-PCSS 요소 또는 CR-PCSS 요소)에 대해 누락되는 경우, 복합 응답자 분류는 당해 방문에 대해 누락되었다. 2-레벨 복합 응답자는 평가 시점에서 2-레벨 PR-PCSS 응답자 및 2-레벨 CR-PCSS 응답자 둘 다인 피험자로서 정의되었다. 1-레벨 복합 응답자는 평가 시점에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및 1-레벨 CR-PCSS 응답자 둘 다인 피험자로서 정의되었다.

S-GAIS 응답자. 2-레벨 S-GAIS 응답자는 평가 시점에 S-GAIS 등급이 적어도 2 (2 또는 3)인 피험자로서 정의되었다. 1-레벨 S-GAIS 응답자는 S-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 1 (1, 2, 또는 3)인 피험자로서 정의되었다.

I-GAIS 응답자. 2-레벨 I-GAIS 응답자는 평가 시점에 I-GAIS 등급이 적어도 2 (2 또는 3)인 피험자로서 정의되었다. 1-레벨 I-GAIS 응답자는 평가 시점에 I-GAIS 등급이 적어도 1 (1, 2, 또는 3)인 피험자로서 정의되었다.

PR-CIS 응답자. PR-CIS 총 점수의 경우, 응답자는 PR-CIS 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 12 감소된 피험자로서 정의되었다. 간이형 PR-CIS 점수의 경우, 응답자는 평가 시점에 기준선으로부터 PR-CIS 간이형 점수가 적어도 10 감소되는 피험자로서 정의되었다. 개별적인 PR-CIS 영향 점수의 경우, 응답을 각 시점에 기준선으로부터 적어도 2 점수 간격 개선으로 정의되었다.

SSRS 응답자. 1-레벨 SSRS 응답자는 71일째/조기 종료 방문시 그녀의 엉덩이 상 셀룰라이트의 외관에 적어도 약간 만족함 (약간 만족함 [4], 매우 만족함 [5], 또는 대단히 만족함 [6])인 피험자로서 정의되었다.

셀룰라이트 치료를 받은 전체 피험자 만족도 (SSCT). 71일째/조기 종료 방문에서 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 평가에서 "만족함" 또는 "매우 만족함"으로 응답한 피험자는 응답자로 고려되었다.

일차적인 종점은 치료의향 (ITT) 집단에서 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율이었다. 2-레벨 복합 응답자는 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의되었다.

이러한 연구에서, 통계학적으로 유의한 차이 (p = 0.006)는 표 24 및 도 24에서 위약 처리된 피험자 (4 [1.9%])와 비교하여 CCH 처리된 피험자 (16 [7.6%])에서 2 레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율로 나타났다.

8개의 핵심 이차적인 종점 이러한 연구에 포함된 3 부류의 종점이 존재하였다. 전체 8개 종점에서 CCH가 유리한 CCH 및 위약 처리된 피험자 간의 차이는 통계학적으로 유의하였다. 이들 하기 표 25에 요약한다.

PR-PCSS 등급을 각각의 방문에서 수득하고, 기준선으로부터 변화를 조사하였다. 기준선으로부터 음의 변화는 셀룰라이트 중증도 개선을 나타낸다. 기준선에서, 모든 피험자는 PR-PCSS 등급이 증등증 또는 중증이었다. 이미 22일째에, PR-PCSS의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 표적 엉덩이에서 위약으로 처리된 피험자 (-0.1 [0.45])와 비교하여 CCH로 처리된 피험자 (-0.4 [0.67])가 더 컸다. 이러한 차이는 통계학적으로 유의하였다 (p<0.001). 유사한 결과를 비-표적 엉덩이에 대해 입수하였다. 위약 대비 CCH로 처리된 피험자의 관찰된 개선은 71일째를 포함하는 모든 연구 방문에서 표적 및 비-표적 엉덩이에서 통계학적으로 유의하게 유지되고 지속되었다. 이들 결과를 표 26에 요약한다.

표적 및 비-표적 엉덩이에 대한 PR-PCSS 1-레벨 및 2-레벨 응답자의 분석은 위약 대비 CCH로 처리된 피험자의 개선에 대해 통계학적으로 유의한 차이를 입증하였다. 22일째에 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율은 위약-처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 34.8% 대 16.8%)에서 및 비-표적 엉덩이 (각각 34.8% 대 18.8%)에서 더 컸다. 이들 차이는 통계학적으로 유의하고 (p<0.001), 연구 동안 유지되고, 각각의 평가에서 통계학적으로 유의하게 남아있었다. 이들 결과를 표 27에 요약하고, 도 22-23에 나타낸다.

방문까지 CR-PCSS 등급 및 기준선으로부터 변화를 또한 분석하였다. PR-PCSS 등급와 일관되게, 이들은 위약 대비 CCH로 처리된 환자에서 셀룰라이트 중증도가 통계학적으로 현저히 개선됨을 나타낸다. 71일째에, CR-PCSS의 기준선으로부터 평균 변화는 위약 대비 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다. 치료에 대한 응답은 일찍이 22일째에 명백하였다. 22일째에 1-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율은 표적 엉덩이 (각각 33.2% 대 16.8%) 및 비-표적 엉덩이 (36.4% 대 16.8%) 둘 다에서 위약-처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다. 이들 차이는 p<0.001로 통계학적으로 유의하였다. 71일째에, 1-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율은 위약 대비 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다. 결과를 표 28-29 및 도 22-23에 요약한다.

S-GAIS 등급을 분석하였다. 이미 22일째에, 평균 S-GAIS는 위약 대비 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다. 이러한 개선은 통계학적으로 유의하였다 (p<0.001). 개선은 71일째에 여전히 관찰되었다. 표적 및 비-표적 엉덩이에 대한 S-GAIS 1-레벨 및 2-레벨 응답자의 분석은 연구 과정 동안 위약 대비 CCH로 처리된 피험자에 대한 개선의 통계학적으로 유의한 차이를 입증한다. 이들 결과를 표 30-31에 요약한다. 유사한 조사결과를 I-GAIS 등급을 사용하여 관찰하고, 이를 표 32-33에 요약한다.

표 34에 나타난 바와 같이, 71일째에 기준선으로부터 평균 PR-CIS 변화는 총 점수 (-10.9 대 -5.7) 및 간이형 점수 (-10.9 대 -5.7) 뿐만 아니라 개별적인 영향 점수에서 위약-처리된 피험자 대비 CCH-처리된 피험자에서 통계학적으로 유의하게 유리하였다.

기준선에서 평균 SSRS의 처리 그룹간에 통계학적으로 유의한 차이가 없었다. 71일째에, 평균 점수는 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다. 이러한 차이는 통계학적으로 유의하였다 (p<0.001). 결과를 표 35에 제공한다.

SSCT 점수에 대해, 더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자는 위약으로 처리된 피험자보다 이들의 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (각각 54.3% 대 25.8%, p <0.001). 71일째에 평균 (SD) 피험자 만족도 점수에서 CCH (0.4 [1.12]) 및 위약 (-0.4 [1.17]) 처리 그룹간에 통계학적으로 유의한 (p <0.001) 차이가 있었다. 이는 하기 표 36에 나타낸다.

효능 결론

일차적인 종점은 ITT 집단에서 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율이었다. 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자는 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의되었다.

이러한 연구에서, 통계학적으로 유의한 차이 (p = 0.006)가, 위약 처리된 피험자 (4 [1.9%])와 비교하여, CCH 처리된 피험자 (16 [7.6%])에서 2 레벨 PR-PCSS/CR-PCSS 복합 응답자의 비율에서 나타났다.

직교 척도(orthogonal scales)를 사용하여 약물 효과를 확인하기 위해, 일련의 이차적인 종점을 평가하였다. 모든 8개의 핵심 이차적인 종점에서 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자에서 유리한 응답에서 통계학적으로 유의한 차이가 있었다:

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 114 [54.3%] 대 위약 처리된 피험자에서 77 [36.2%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 51 [24.3%] 대 위약 처리된 피험자에서 26 [12.2%], p = 0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 78 [37.1%] 대 위약 처리된 피험자에서 38 [17.8%], p = <0.001).

ㆍ 71일째에 비표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 16 [7.6%] 대 위약 처리된 피험자에서 2 [0.9%], p = <0.001).

ㆍ 71일째에 1-레벨 SSRS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 102 (48.6%] 대 위약 처리된 피험자에서 28 [22.5%], p = <0.001).

ㆍ 71일째에 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화 (CCH 처리된 피험자에서 -10.9 [12.51] 대 위약 처리된 피험자에서 -5.9 [11.62], p = <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 135 [64.3%] 대 위약 처리된 피험자에서 82 [38.5%], p = <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 S-GAIS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 49 [23.3%] 대 위약 처리된 피험자에서 13 [6.1%], p = <0.001).

모든 민감도 분석은 일차적인 및 핵심 이차적인 종점에 대한 결과를 뒷받침하였다. 또한 연구의 71일째까지 모든 뒷받침하는 종점에서 CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자간에 통계학적으로 유의한 차이가 있었다 (그리고 다수의 경우에 통계학적으로 유의한 차이는 CCH로 단일 처리 후만큼 이르게 나타났다). 중증도 평가에서, 기준선으로부터 음의 변화는 셀룰라이트의 개선을 지시한다. 표적 및 비표적 엉덩이에 대한 결과는 하기에 요약되어 있다:

ㆍ 71일째에, PR-PCSS의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 (각각 0.9 [0.93] 대 0.5 [0.88]; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 0.9 [0.90] 대 0.5 [0.83]; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 62.0% 대 40.7%, p <0.001))에서 및 비표적 엉덩이 (각각 65.2% 대 41.6%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, CR-PCSS의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 (각각 0.7 [0.87] 대 0.4 [0.72]; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 0.8 [0.83] 대 0.3 [0.67]; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에 1-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 58.5% 대 32.5%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 60.7% 대 27.7%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 1-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 42.9% 대 20.1%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 44.5% 대 13.7%, p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 평균 (SD) S-GAIS는 위약으로 처리된 피험자와 비교시 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 더 컸다 (각각 1.0 [0.99] 대 0.5 [0.79], p <0.001). 결과는 비표적 엉덩이와 유사하였다 (CCH 처리된 피험자에서 1.0 [0.94] 대 위약 처리된 피험자에서 0.5 [0.76], p <0.001).

ㆍ 71일째에, 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 (각각 73.4% 대 43.2%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 73.9% 대 42.6%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 평균 (SD) I-GAIS는 통계학적으로 유의하게 (p <0.001) 표적 엉덩이에서 위약으로 처리된 피험자와 비교시 CCH로 처리된 피험자에서 더 컸다 (각각 1.0 [0.81] 대 0.3 [0.66]). 결과는 비표적 엉덩이와 유사하였다 (CCH 처리된 피험자에서 0.6 [0.63] 대 위약 처리된 피험자에서 0.1 [0.48]).

ㆍ 71일째에, 1-레벨 I-GAIS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 69.9% 대 28.3%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 74.9% 대 27.2%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에 평균 (SD) PR-CIS 기준선으로부터 변화는 위약 처리 피험자에 비해 CCH 처리된 피험자가 총 점수 (각각 12.5 ([2.63] 대 -6.7 [12.11], p <0.001) 및 간이형 점수 (각각 10.9 [10.72] 대 5.7 [10.23], p <0.001), 뿐만 아니라 개별적인 영향 점수 (셀룰라이트 외관에 만족함 [p <0.001], 신경쓰임 [p = 0.009], 자가의식함 [p <0.001], 창피함 [p = 0.004], 늙어보임 [p = 0.024], 몸매 걱정 [p = 0.005])에서 통계학적으로 유의하게 유리하였다.

ㆍ 71일째에, PR-CIS 응답자의 비율은 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 총 점수 (각각 48.4% 대 24.2%, p <0.001)에서 및 간이형 점수 (각각 52.7% 대 29.5%; p <0.001)에서 더 컸다. 추가로, 각각의 개별적인 영향 점수에 대한 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH 처리된 피험자가 더 컸다. 이들 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다.

추가의 뒷받침되는 결과는 다음을 포함하였다:

ㆍ 71일째에, 평균 (SD) SSRS 점수는 위약으로 처리된 피험자 (2.1 [1.75])에서보다 CCH로 처리된 피험자 (3.3 [1.80])에서 더 컸다. 이러한 차이는 통계학적으로 유의하였다 (p <0.001). 위약으로 처리된 피험자보다 더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자가 1-레벨 SSRS 응답자였다: 각각 54.9% 대 25.1%. 이러한 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다 (p <0.001).

ㆍ 위약으로 처리된 피험자보다 더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자가 이들의 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (각각 54.3% 대 25.8%, p <0.001). 71일째에 피험자 만족도 점수에서 CCH (0.4 [1.12]) 및 위약 (0.4 [1.17]) 처리 그룹 간의 통계학적으로 유의한 (p <0.001) 평균 (SD) 차이가 존재하였다.

ㆍ 일련의 교차-표는 PR-PCSS 및 S-GAIS 간의 일관성을 나타낸다. PR-PCSS의 1 레벨 변화는 유사한 S-GAIS 변화와 연관되었다.

ㆍ 일차적인 및 이차적인 종점의 부위 분석은, 응답이 다중 부위에 걸쳐서 나타나고, 어떠한 단위 부위도 임의의 효능 분석 결과에 현저하게 영향을 주지 않았다는 것을 나타내었다.

결론

이들 임상적 결과는 CCH의 투여가 피험자 집단의 엉덩이에서 셀룰라이트를 치료하는데 효과적이라는 것을 입증한다. 이러한 연구는, 양측 엉덩이의 EFP를 갖는 성인 여성에서 21 일 간격의 3개 치료 세션 이하 동안 각각의 엉덩이에 (총 1.68 mg) 0.84 mg으로 제공되는 경우, 위약 처리된 피험자와 비교하여 CCH 처리된 피험자 중 2 레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율에서, 통계학적으로 유의한 차이를 갖는 이의 일차적인 종점을 만족시킨다. 모든 8개의 핵심 이차적인 종점 및 모든 뒷받침하는 종점에서 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 유리한 응답에서 통계학적으로 유의한 차이가 있었다. CCH 투여 후 어떠한 현저하거나 예상치못한 안전성 우려도 없었다. 대부분의 AE는 주사 부위에서 발생하였고, 14 일 내에 해결되었다. 어떠한 임상적으로 의미 있거나 우려되는 경향도 혈액학 또는 화학 실험실 파라미터, 또는 활력 징후에 관하여 관찰되지 않았다. 면역원성 결과는 이러한 약물을 사용한 다른 임상적 연구에서 나타난 것과 어떠한 잠재적 차이도 나타내지 않았다. 이러한 연구의 결과를 기초로 하여, CCH는 적어도 21 일 간격의 3개 치료 세션에 제공된 엉덩이당 0.84 mg의 용량 (총 용량 1.68 mg)으로 성인 여성의 엉덩이에서 EFP에 대한 안전하고 효과적 치료제이다.

실시예 3-EFP의 치료를 위한 CCH의 3단계 임상 연구 (연구 303)

실시예 2에 기재된 임상 연구와 동일하게 설계된, 무작위, 이중-맹검, 및 위약-제어된 두번째 임상 연구를 수행하였다. 효능은 다수의 분석에서 입증되고, 뒷받침되고, 위약으로 처리된 피험자 (1 [0.5%])과 비교하여 CCH-처리된 피험자 (12 [5.6%]))의 표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율에서 통계학적으로 유의한 차이 (p=0.002)를 관찰함을 포함하고, 이는 CCH-처리된 환자에서 개선된 셀룰라이트 중증도와 일관되었다.

다음 피험자 집단은 분석되는 집단 중에 존재하였다:

치료의향 (ITT) 집단은 연구 약물이 적어도 1회 주사된 모든 무작위 피험자를 포함하였다. 모든 인구학적 및 기준선 특징 요약은 이러한 집단을 기초로 하였다. 일차적인 및 핵심 이차적인 효능 파라미터는 이러한 집단을 기초로 하였다.

변형된 치료의향 (mITT) 집단은 기준선 및 표적 및 비표적 엉덩이 둘 다에 대한 연구자 CR-PCSS 및 피험자 PR-PCSS 둘 다의 적어도 1회 주사후 평가를 갖는 모든 ITT 집단 피험자를 포함하였다. 모든 이차적이고 뒷받침되는 효능 평가는 mITT 집단을 기초로 하였다.

직교 척도를 사용하여 약물 효과를 확인하기 위해, 일련의 이차적인 임상적 종점을 평가하였다. 하기를 포함하는, 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자에서 유리한 응답에서 통계학적으로 유의한 차이가 있었다: (i) 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율; (ii) 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율; (iii) 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율; (iv) 71일째에 1-레벨 SSRS 응답자의 비율; (v) 71일째에 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 변화; (vi) 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율; 및 (vii) 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 S-GAIS 응답자의 비율. 당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 이러한 연구에서 303에서 "일(Days)"은 연구 303에서 초기 용량 (1일째)에 상대적이었다.

실시예 2와 같이, 8개의 핵심 이차적인 종점을 이러한 연구에 포함한 3 부류가 있었다. CCH 및 위약 처리된 피험자 간의 차이는 8 종점 중 7개에서 CCH에서 유리하고, 여기서, 상기 차이는 통계학적으로 유의하였다. 비-표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 경우, 응답자의 비율은 위약과 비교하여 CCH-처리된 피험자가 더 컸지만, 5%의 부류 유형 I 오차 비율을 갖는 다중성 시험을 통해 상기 차이는 통계학적 유의성에 도달하지 못했다. 그러나, 비-표적 엉덩이의 이차적인 종점의 분석을 사용한 이러한 결과는 위약-처리된 피험자보다 CCH-처리된 피험자에서 유리한 비-표적 엉덩이 응답에서 차이의 경향을 강력하게 뒷받침한다. 이들 결과를 하기 표 37에 요약한다.

관련 임상 데이터는 하기 표 38-48에 제공되고, 도 20-21에 나타낸다.

셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도에 대해, 위약으로 처리된 피험자보다더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자가 이들의 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (각각 46.8% 대 13.6%; p <0.001). 71일째에 피험자 만족도 점수에서 CCH (0.3 [1.05]) 및 위약 (-0.6 [1.04]) 처리 그룹 간에 통계학적으로 유의한 (p <0.001) 평균 (SD) 차이가 존재하였다. 이를 하기 표 49에 요약한다.

효능 결론

이러한 연구에서, 통계학적으로 유의한 차이 (p = 0.002)는, 위약 처리된 피험자 (1 [0.5%])와 비교하여, CCH 처리된 피험자(12 [5.6%])에서 2 레벨 CR-PCSS/ PR-PCSS 복합 응답자의 비율에서 나타났다.

직교 척도를 사용하여 약물 효과를 확인하기 위해, 일련의 이차적인 종점을 평가하였다. 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자에서 ITT 집단을 사용하는 8개의 핵심 이차적인 종점 중 7개에서 유리한 응답에서 통계학적으로 유의한 차이가 있었다. 중증도 평가에서, 기준선으로부터 음의 변화는 셀룰라이트 개선을 지시한다. 표적 및 비표적 엉덩이에 대한 결과에 대해 하기에 개요를 서술한다:

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 124 [57.9%] 대 위약 처리된 피험자에서 61 [29.6%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 45 [21.0%] 대 위약 처리된 피험자에서 12 [5.8%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 89 [41.6%] 대 위약 처리된 피험자에서 23 [11.2%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 1-레벨 SSRS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 90 [42.1%] 대 위약 처리된 피험자에서 31 [15.0%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화 (CCH 처리된 피험자에서 -11.5 [12.74] 대 위약 처리된 피험자에서 -6.5 [11.74], p <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 126 [58.9%] 대 위약 처리된 피험자에서 46 [22.3%], p <0.001).

ㆍ 71일째에 표적 엉덩이에서 2-레벨 S-GAIS 응답자의 비율 (CCH 처리된 피험자에서 38 [17.8%] 대 위약 처리된 피험자에서 9 [4.4%], p <0.001).

비표적 엉덩이에서 2-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 경우, 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH 처리된 피험자가 더 컸지만 (각각 13 [6.1%] 대 4 [1.9%], p = 0.033), 이러한 차이는 5%의 부류 유형 I 오차율을 갖는 다중성 시험을 통해 통계학적 유의성에 도달하지 못하였다. 그러나, 위약 처리된 피험자와 비교하여 비표적 엉덩이의 이차적인 종점의 분석의 이러한 결과는 CCH 처리된 피험자에서 유리한 비표적 엉덩이 응답에서 차이의 경향을 강력하게 뒷받침한다. 모든 민감도 분석은 일차적인 및 핵심 이차적인 종점에 대한 결과를 뒷받침하였다.

mITT 집단에서 연구의 71일째까지 모든 뒷받침하는 종점에서 CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자 간에 또한 통계학적으로 유의한 차이가 있었다 (그리고 다수의 경우에 통계학적으로 유의한 차이가 CCH로 단일 처리 후만큼 이르게 보여졌다). 중증도 평가에서, 기준선으로부터 음의 변화는 셀룰라이트의 개선을 나타낸다. 표적 및 비표적 엉덩이에 대한 결과는 하기에 요약되어 있다:

ㆍ 71일째에, PR-PCSS의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 (각각 0.9 [0.89] 대 0.4 [0.64]; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 0.9 [0.84] 대 0.4 [0.67]; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 66.7% 대 31.9%, p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 64.5% 대 35.6%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, CR-PCSS의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 0.8 [0.72] 대 0.2 [0.55]; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 0.8 [0.89] 대 0.2 [0.61]; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 1-레벨 CR-PCSS 응답자의 비율은 표적 엉덩이 (각각 65.4% 대 27.4%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 67.6% 대 28.4%; p <0.001)에서 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 1-레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 48.1% 대 12.1%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 49.7% 대 15.3%, p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 평균 (SD) S-GAIS는 위약으로 처리된 피험자와 비교시 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이에서 더 컸다 (각각 0.9 [0.92] 대 0.2 [0.68], p <0.001). 결과는 비표적 엉덩이와 유사하였다 (CCH 처리된 피험자에서 0.9 [0.94] 대 위약 처리된 피험자에서 0.2 [0.67], p <0.001).

ㆍ 71일째에, 1-레벨 S-GAIS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 67.7% 대 24.1%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 66.7% 대 26.2%; p <0.001)에서 더 컸다.

ㆍ 71일째에, 평균 (SD) I-GAIS는 위약으로 처리된 피험자와 비교시 CCH로 처리된 피험자에서 표적 엉덩이에서 통계학적으로 유의하게 (p <0.001) 더 컸다 (각각 0.9 [0.81] 대 0.3 [0.52]). 결과는 비표적 엉덩이와 유사하였다 (CCH 처리된 피험자에서 0.9 [0.79] 대 위약 처리된 피험자에서 0.3 [0.54]; p <0.001).

ㆍ 71일째에, 1-레벨 I-GAIS 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 표적 엉덩이 (각각 70.8% 대 24.2%; p <0.001)에서 및 비표적 엉덩이 (각각 70.3% 대 21.6%; p <0.001)에서 통계학적으로 유의하게 더 컸다.

ㆍ 71일째에 평균 (SD) PR-CIS 기준선으로부터 변화는 위약 처리 피험자 대비 CCH 처리된 피험자가 총 점수 (각각 13.2 [12.80] 대 -7.0 [12.05], p <0.001) 및 간이형 점수 (각각 12.8 [12.62] 대 6.1 [110.25], p <0.001)에서 통계학적으로 유의하게 유리하였다. 모든 개별적인 영향 점수는 또한 신경쓰임을 제외하고는71일째에 통계학적으로 유의한 차이가 있었고 (셀룰라이트 외관에 만족함 [p <0.001], 자가의식함 [p = 0.012], 창피함 [p <0.001], 늙어보임 [p = 0.009], 몸매 걱정 [p <0.001]), 여기서, 이러한 경향은 CCH 처리된 피험자에서 유리하지만, 통계학적 유의성에 도달하지 못했다 (p = 0.052).

ㆍ 71일째에 PR-CIS 응답자의 비율은 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자가 총 점수 (각각 50.0% 대 26.2%)에서 및 간이형 점수 (각각 52.2% 대 29.3%)에서 더 컸다. 이들 차이는 통계학적으로 유의하였다 (p <0.001). 추가로, 각각의 개별적인 영향 점수에 대한 응답자의 비율은 위약 처리된 피험자보다 CCH 처리된 피험자가 더 컸다. 이들 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다.

추가의 뒷받침되는 결과는 다음을 포함하였다:

ㆍ 71일째, 평균 (SD) SSRS 점수는 위약으로 처리된 피험자 (1.9 [1.55])보다 CCH로 처리된 피험자가 더 컸다 (3.1 [1.68]). 이러한 차이는 통계학적으로 유의하였다 (p <0.001). 추가로, 위약으로 처리된 피험자보다 더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자가 1-레벨 SSRS 응답자였다: 각각 48.4% 대 16.2%. 이러한 차이는 또한 통계학적으로 유의하였다 (p <0.001).

ㆍ 위약으로 처리된 피험자보다 더 높은 비율의 CCH로 처리된 피험자는 이들의 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (각각 46.8% 대 13.6%; p <0.001). 71일째에 CCH (0.3 [1.05]) 및 위약 (0.6 [1.04]) 처리 그룹 간에 통계학적으로 유의한 (p <0.001) 피험자 만족도 점수의 평균 (SD) 차이가 존재하였다.

결론

이러한 연구는 이의 일차적인 종점을 충족시키고, 양측 엉덩이의 EFP를 갖는 성인 여성에서 21 일 간격의 3개 치료 세션 이하 동안 각각의 엉덩이에 0.84 mg (1.68 mg 총)으로 제공되는 경우, 위약 처리된 피험자와 비교하여 CCH 처리된 피험자에서 2 레벨 CR-PCSS/PR-PCSS 복합 응답자의 비율은 통계학적으로 유의한 차이가 있다. 8개의 핵심 이차적인 종점 중 7개에서 및 모든 뒷받침하는 종점에서 위약으로 처리된 피험자보다 CCH로 처리된 피험자에서 유리한 응답은 통계학적으로 유의한 차이가 있었다.

CCH 투여 후 어떠한 현저하거나 예상치못한 안전성 우려도 없었다. 대부분의 AE는 주사 부위에서 발생하였고, 14 일 내에 해결되었다. 혈액학 또는 화학 실험실 파라미터, 또는 활력 징후와 관련하여 어떠한 임상적으로 의미 있거나 우려되는 경향도 관찰되지 않았다. 면역원성 결과는 어떠한 잠재적 차이도 나타내지 않았다. 이러한 약물을 사용한 다른 임상적 연구에서 나타난 것과 어떠한 잠재적 차이도 나타내지 않았다.

이러한 연구의 결과를 기초로 하여, CCH는 적어도 21 일 간격의 3개 치료 세션에 제공된 엉덩이당 0.84 mg의 용량 (총 용량 1.68 mg/치료 세션당)에서 성인 여성의 엉덩이에서 EFP를 위한 안전하고 효과적인 치료제이다.

실시예 4- RELEASE-1/RELEASE-2

상기 실시예 2 및 3은, 치료 부위당 피하 CCH 0.84 mg 또는 위약의 3개 이하의 치료 세션을 받은 양쪽 엉덩이에서 증등증 내지 중증 셀룰라이트 (PR-PCSS 및 CR-PCSS 3-4 등급)를 갖는 성인 여성의 2개의 동일하게 설계된, 다중심, 이중-맹검, 무작위, 위약-제어 단계 3 연구 (RELEASE-1 및 RELEASE-2)을 보고한다.

단계 3 연구는 BMI 또는 헥셀 중증도 척도에 대한 어떠한 한도(cap)(등록 기준)도 갖지 않았다. 헥셀의 등록 기준 부족은 단계 2 연구 설계로부터의 차이였다. 이러한 차이도 불구하고, 연구는 엄격한 일차적인 종점을 성취하고, 16 이차적인 종점 중 15를 통과하였다. 셀룰라이트 중증도에서 헥셀 한도의 제거는 더 높은 BMI를 갖는 피험자 등록이 원인일 수 있고, 이는 단계 3 시도에서 평균 BMI를 증가시켰다. 단계 3에서, 423명의 환자 중 210명은 비만이지만, 94명 중 32명은 단계 2b에서 비만이었다. 약물의 효과는 모든 BMI 그룹에서 나타나고, 어떠한 환자-중심 결과 측정도 BMI 또는 다른 인자에 영향을 주지 않았다. 따라서, 콜라게나아제는 셀룰라이트를 위한 안전하고 효과적인 치료제임을 나타낸다.

완료된 단계 2b 시도로부터의 응답자는 현재 이월 확장 연구를 따르고 있고, 5-년 안전성 및 지속성을 보인다. 추가로, RELEASE-1 및 RELEASE-2로부터의 피험자는 현재 이월 확장 연구에 따르고 있다. 다른 데이터의 분석은 다음 결과를 나타내었다.

843명의 여성은 ≥1 주사를 투여받았다 (CCH 대 위약: RELEASE-1, n = 210 대 n = 213; RELEASE-2, n = 214 대 n = 206). CCH-처리된 여성의 통계학적으로 유의한 더 큰 백분율은 위약 대비 RELEASE-1 (약 7.6% 대 약 1.9%; p=0.006) 및 RELEASE-2 (약 5.6% 대 약 0.5%; p=0.002)에서 2-레벨 이상 복합 응답자이고, RELEASE-1 (약 37.1% 대 약 17.8%; p=<0.001) 및 RELEASE-2 (약 41.6% 대 약 11.2%; p<0.001)에서 1-레벨 이상 복합 응답자이다. PR-PCSS 및 CR-PCSS로 측정된 효능을 나타내는 결과를 도 8 및 9에 나타낸다.

다음 피험자 집단은 분석되는 집단 중에 존재하였다:

변형된 치료의향 (mITT) 집단은 표적 및 비표적 엉덩이 둘 다에 대한 연구자 CR-PCSS 및 피험자 PR-PCSS 둘 다의 기준선 및 적어도 1회 주사후 평가를 갖는 모든 ITT 집단 피험자를 포함하였다. 모든 이차적이고 뒷받침되는 효능 평가는 mITT 집단을 기초로 하였다.

동일하게 설계된 시도 각각의 경우, 샘플 크기를, 표적 엉덩이에 대한 ≥2-레벨 복합 응답자의 백분율이 CCH 그룹에서 ≥12%일 수 있고 위약 그룹에서 ≤3%일 수 있고 (교차 비 ≥4.4), 참여자 중단 비율은 약 10%라는 가정에 기초하여 추정하였다. 이들 가정하에, 각 시도는 1:1 비로 2개 처리 그룹으로 무작위 할당된 420명의 여성의 샘플 크기를 필요로 하였다. 이러한 여성의 분포는 일차적인 및 핵심 이차적인 종점의 통계학적으로 유의한 변화를 검출하기 위해 0.05의 유형 1 오차를 갖는 ≥90% 검정력(power)을 제공하는 것을 의도하였다. 연구 의약의 ≥1 주사를 투여받는 치료에 무작위 할당한 모든 여성을 ITT 및 안전성 집단에 포함시켰다. 일차적인 및 핵심 이차적인 효능 종점에 대한 데이터를 연구 센터 조정과 함께 코크란-만텔-핸스젤(Cochran-Mantel-Haenszel) 시험을 사용하여 분석하였다. PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 71일째까지 변화를 처리 그룹과의 공분산 분석 및 기준선 값 조정 후 인자로서 분석 센터로 평가하였다. 71일째에 효능 데이터가 누락된 여성을 무응답자로 고려하였다. 인구학, 안전성, 및 면역원성 데이터를 기술 통계학을 사용하여 요약하였다. 통계학적 분석을 SAS® 통계학적 소프트웨어 패키지 버젼 9.3 이상을 사용하여 수행하였다 (SAS Institute Inc., Cary, NC).

임상적으로 의미 있는 변화를 미식품의약국으로부터의 가이드를 기초로 하여 앵커-기반 방법을 사용하여 추정하였다 (참조: US Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration. Guidance for industry: patient-reported outcome measures: use in medical product development to support labeling claims. Published December 2009. Available from: https://www.fda.gov/downloads/drugs/guidances/ucm193282.pdf. Accessed April 23, 2019). S-GAIS는 PR-PCSS에 대한 앵커(anchor)로서 적용되었다. 셀룰라이트 중증도 변화를 검출하는 PR-PCSS의 능력은 2 연구로부터 풀링 데이터를 사용하여 분석하였다. 결과를 임상적으로 의미 있는 변화 역치를 결정하기 위해 크루스칼 왈리스(Kruskal-Wallis) 1-방향 ANOVA 모델로 분석된 PR-PCSS (종속 변수) 및 S-GAIS (독립 변수) 데이터를 사용하여 측정하였다.

셀룰라이트의 치료를 위한 CCH의 이전 연구와 일관되게, CCH는 모든 용량 그룹에 의한 단계 3 연구에서 양호한-내성이고, 대부분의 이상 사례 (AEs)가 경증 내지 증등증이고 주로 국소 주사 영역에 한정된다. 시도에서 가장 일반적인 AE는 주사 부위 멍, 주사 부위 통증, 주사 부위 변색, 주사 부위 결절 및 주사 부위 가려움증이었다. 추가로, 각각 대략 4.3% 및 3.7%의 이상 사례로 인해 RELEASE 1 및 2 둘 다에서 CCH 처리된 그룹에서 가장 낮은 중단율이었다.

RELEASE-1/RELEASE-2에서, 평균적으로 10명 중 7명 초과의 피험자는 첫번째 치료 후 PR-PCSS 점수에서 1-레벨 개선을 보였다. 이들 피험자는 또한 PR-CIS 만족 점수에서 상당한 증가(즉, 셀룰라이트 외관에 대한 만족)를 경험하였다 (위약과 비교하여 통계학적으로 현저한 개선, p<0.01). 임상적 시도의 다른 측면에서, 피험자의 50% 초과는 PR-PCSS 점수가 1-레벨 증가하고, 피험자의 65% 초과는 피험자의 전반적인 미적 개선 척도 (S-GAIS)를 사용하여 "개선됨" 또는 "매우 개선됨" 또는 "매우 많이 개선됨" 등급이었다. CR-PCSS, PR-PCSS, I-GAIS, S-GAIS 및/또는 PR-CIS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이었다. 그리고, 현저하게, 정상 체중/BMI를 갖는 여성의 하위집단 내에서, 이들의 셀룰라이트 외관의 개선은 전반적인 연구 집단보다 높았다. 예를 들면, 약 11% 정상 체중 환자, 약 8% 과체중 환자, 및 약 2.5% 비만 환자는 PR- 및 CR-PCSS에 의한 2-레벨 복합 응답자이었다.

도 10은 71일째에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 기준선으로부터 2-레벨 또는 1-레벨 이상 중증도 개선된 환자로서 정의된 비-표적화된 엉덩이에서 복합 응답자의 일차적인 종점 및 핵심 이차적인 종점의 막대 그래프이다 (데이터 분석 목적을 위해).

CCH로 처리된 여성의 현저하게 더 큰 백분율이, 둘 다의 연구에서 위약과 비교하여, 71일째에 표적 엉덩이에 대해 (일차적인 효능 종점) CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다에서 ≥2-레벨 복합 응답자였다 (RELEASE-1, p = .006; RELEASE-2, p = .002; 도 8). 추가로, 여성의 현저하게 더 큰 백분율이, 위약과 비교하여 71일째에 표적 엉덩이에 대한 ≥1-레벨 복합 응답자였다 (RELEASE-1 및 -2, 둘 다에 대해 p < .001; 도 8). 71일째에 비표적 엉덩이에서 (도 10) ≥2-레벨 및 ≥1-레벨 복합 응답자의 백분율은 둘 다의 연구에서 표적 엉덩이에 대한 백분율과 유사하였다. 2-레벨 (도 9a) 및 1-레벨 (도 9b) 복합 응답의 사진 이미지는 기준선과 비교하여 CCH로 치료 후 71일째에 피부 토포그래피가 개선됨을 나타낸다. 추가로, 둘 다의 연구는, 위약을 투여 받은 여성과 비교하여, PR-PCSS (≥1-레벨 개선) 및 S-GAIS 등급 (≥1- 및 ≥2-레벨 개선; 도 11) 및 PR-CIS 총 점수 (도 12)에서 기준선으로부터 71일째까지 CCH로 처리된 여성에 대해 현저한 개선 (모두에 대해 p < .001)을 나타내었다. PR-PCSS에 대한 변화를 검출하는 능력은, 이러한 변화 수준이 외부 고정(external anchor) 변수로서 S-GAIS에 대한 개선 등급과 연관되기 때문에, 1-레벨 개선 변화 역치가 여성의 경우 임상적으로 의미 있는 변화를 가리킨다는 것을 입증하였다. 당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 연구 302 및 303에 사용된 "일(Days)"은 연구 302 및 303에서 초기 용량 (1일째)에 상대적이었다.

둘 다의 연구는, 위약을 투여 받은 여성과 비교하여, PR-PCSS (≥1-레벨 개선) 및 S-GAIS 등급 (≥1- 및 ≥2-레벨 개선; 도 11) 및 PR-CIS 총 점수 (도 12)에서 CCH로 처리된 여성에 대한 기준선으로부터 71일째까지 현저한 개선 (모두에 대해 p < .001)을 나타내었다. PR-PCSS에 대한 변화를 검출하는 능력은, 이러한 변화 수준이 외부 고정 변수로서 S-GAIS에 대한 개선 등급과 연관되기 때문에, 1-레벨 개선 변화 역치가 여성의 경우 임상적으로 의미 있는 변화를 가리킨다는 것을 입증하였다.

콜라게나아제 주사는 신속한 효과가 있었다. 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리하고 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 나타낸 평균 피험자 PR-PCSS 점수를 제공하였다. 또한, 첫번째 치료 후 21 일에 위약에서 분리하고 후속 치료 후 지속적이고 현저한 개선을 나타낸 평균 피험자 CR-PCSS 점수를 제공하였다.

단계 3에서 연구한 환자의 11% 이상은 CR-PCSS 및 PR-PCSS 척도로 측정된 적어도 하나의 엉덩이에서 2-레벨 복합 응답이 있었다.

환자 및 의사 둘 다는 다음과 같은 광수치 척도에서 응답을 나타내었다:

ㆍ 환자의 3분의 2 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다

ㆍ 의사의 3분의 2 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 1-레벨 PR-PCSS 응답을 가졌다

환자 및 의사 둘 다가 다음과 같은 전반적인 개선을 목격하였다:

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 S-GAIS를 사용하여 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 개선을 보였다

ㆍ 의사의 14분의 3 이상이 I-GAIS를 사용하여 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 개선을 보았다

광수치에 대한 환자 응답 및 다른 환자-중심 척도는 다음과 같았다:

ㆍ 환자의 3분의 2 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다

ㆍ 환자의 3분의 2 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다

ㆍ 환자의 14분의 3 이상이 첫번째 치료에서부터 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다

환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도 (PR-CIS)는 모든 도메인 걸쳐서 통계학적 개선을 나타내었다:

ㆍ 셀룰라이트 외관에 불만족

ㆍ 신경쓰임

ㆍ 자가의식함

ㆍ 창피함

ㆍ 늙어보임

ㆍ 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임

CR-PCSS, PR-PCSS, I-GAIS, S-GAIS 및/또는 PR-CIS 결과는 연령, BMI 또는 피부색에 독립적이었다. 그리고, 현저하게, 정상 체중/BMI를 갖는 여성의 하위집단 내에서, 이들의 셀룰라이트 외관의 개선은 전반적인 연구 집단보다 더 높았다.

PR-PCSS가 1-레벨 개선을 보이는 (CCH에 대한) 피험자는 PR-CIS 만족도 점수에서 (위약에 대해 통계학적으로 유의한) 상당한 증가를 보였다. 추가로, 연구에서 응답자는 1번째 주사 후 위약과 상당한 구분을 보였다.

CCH를 투여받은 피험자는 시도의 일차적인 종점에 의해 측정하여 치료제를 사용한 셀룰라이트 외관 개선에서 통계학적으로 유의한 수준을 나타내었고 (RELEASE-1, p=0.006 & RELEASE-2, p=0.002), 위약을 받은 피험자와 비교하여 71일째에 표적 엉덩이에서 셀룰라이트 중증도가 적어도 2-레벨 복합 개선되었다 (도 8). 추가로, RELEASE-1은 8개의 핵심 이차적인 종점 중 8개를 통과하고, RELEASE-2는 8개의 핵심 이차적인 종점 중 7개를 통과하였다. CCH는 활성-처리된 피험자에서 양호한-내성이고, 대부분 이상 사례 (AEs)는 중증도가 경증 내지 증등증이고, 주로 국소 주사 영역에 한정되었다.

표적 또는 비-표적 엉덩이에서 또는 둘 다에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답자인 피험자에서 PR-CIS 만족도 점수를 표 50에 제시한다. 나타낸 바와 같이, CCH 치료는 셀룰라이트 외관에 대한 피험자 만족도를 개선시키기 위해 속효성이었다.

RELEASE-1에 대한 일차적인 종점:

CCH를 투여받은 피험자의 7.6%가, 복합 연구자의 및 환자의 셀룰라이트 외관의 평가에서, 위약 피험자의 단지 1.9%와 비교하여, 71일째에 표적 엉덩이에 대한 임상의가 보고한- 광수치 셀룰라이트 중증도 척도 (CR-PCSS) 및 환자가 보고한- 광수치 셀룰라이트 중증도 척도 (PR-PCSS) 점수 둘 다에서 2-레벨 응답으로 측정된 바와 같이, 매우 현저하게 (p=0.006) 개선됨을 입증하였다.

RELEASE-2에 대한 일차적인 종점:

CCH를 투여받은 피험자의 5.6%는, 위약 피험자의 단지 0.5%와 비교하여, 71일째에 표적 엉덩이에 대한 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다에서 2-레벨 응답으로 측정된 바와 같이, 셀룰라이트 외관의 복합 연구자의 및 환자의 평가에서 매우 현저한 (0.002) 개선을 입증하였다.

RELEASE-1 및 RELEASE-2 둘 다에 대한 이차적인 종점:

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 37.1%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 41.6%는, 각각 위약 피험자의 단지 17.8% 및 11.2%와 비교하여, 71일째에 표적 엉덩이에 대한 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다로 측정된 바와 같이, 셀룰라이트 외관의 복합 연구자의 및 환자의 평가에서 매우 현저한 1-레벨 응답을 입증하였다.

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 24.3%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 21.0%는, 각각 위약 피험자의 단지 12.2% 및 5.8%와 비교하여, PR-PCSS 점수로 측정된 바와 같이, 71일째에 표적 엉덩이에서 셀룰라이트 외관의 환자의 평가에서 통계학적으로 매우 유의한 2-레벨 개선을 입증하였다.

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 54.3%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 57.9%는, 각각 위약 피험자의 단지 36.2% 및 29.6%와 비교하여, PR-PCSS 점수로 측정된 바와 같이 71일째에 표적 엉덩이에서 셀룰라이트 외관의 환자의 평가에서 통계학적으로 매우 유의한 1-레벨 개선을 입증하였다.

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 48.6%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 42.1%는, 각각 위약 피험자의 단지 22.5% 및 15.0%와 비교하여, SSRS (피험자 자가 등급 척도)로 측정된 바와 같이 71일째에 표적 엉덩이에서 셀룰라이트 외관의 환자의 평가에서 통계학적으로 매우 유의한 1-레벨 개선을 입증하였다.

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 54.3%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 46.8%는, 각각 위약 피험자의 단지 25.8% 및 13.6%와 비교하여, 71일째에 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 평가로 평가된 바와 같이, 이들의 셀룰라이트 치료에 "만족함" 또는 "매우 만족함"으로 보고하였다.

ㆍ CCH를 투여받은, RELEASE-1에서 피험자의 73.3%, 및 RELEASE-2에서 피험자의 67.8%는 이들의 셀룰라이트 영역의 전반적인 외관이, 각각 위약 피험자의 단지 43.2% 및 24.1%와 비교하여, 71일째에 표적 엉덩이에서, 피험자- 전반적인 미적 개선 척도로 평가된 바와 같이 "개선됨" 또는 "매우 개선됨" 또는 "매우 많이 개선됨"으로 보고되었다.

ㆍ CCH를 투여받은 피험자는 셀룰라이트 외관의 복합 연구자의 및 환자의 평가가, RELEASE-1 연구에서 71일째에 비-표적 엉덩이에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다의 2-레벨 개선으로 측정된 바와 같이 통계학적으로 현저한 개선됨을 입증하고, RELEASE-2 연구에서 통계학적 유의성을 나타내는데 실패하였다.

콜라게나아제 치료를 받은 환자는 치료 후 약 71 일에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥2-레벨 개선되거나, 약 71 일에 치료-후 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥1-레벨 개선되었다. 이러한 환자는 치료 후 약 6 개월에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥2-레벨 개선되거나, 약 6 개월 치료-후 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥1-레벨 개선되거나, 치료 후 약 12 개월에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥2-레벨 개선되거나, 약 12 개월 치료-후 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥1-레벨 개선되었다. 추가로, 이러한 환자는 치료 후 약 22 일, 43 일, 90 일, 또는 180 일에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥2-포인트 또는 ≥1-레벨 개선되었다.

환자는 약 6 개월 치료-후 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥3-레벨 개선을 나타내거나, 치료 후 약 12 개월에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥3-레벨 개선되거나, 약 12 개월 치료-후 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥3-레벨 개선되었다. 추가로, 이러한 환자는 치료 후 약 22 일, 43 일, 90 일, 또는 180 일에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 점수 둘 다가 기준선으로부터 ≥3-레벨 개선되었다. 또다른 측면에서, 콜라게나아제 치료는 지속성을 나타내었다 (본원에 정의됨).

환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도 (PR-CIS)는 셀룰라이트 외관에 불만족, 신경쓰임, 자가의식함, 창피함, 늙어보임, 및 과체중 또는 몸매가 엉망인 것처럼 보임으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 도메인에 걸쳐서 통계학적 개선을 나타내었다. 치료된 집단에서 표적 엉덩이 치료-후 71일째에 2-레벨 복합 개선에서 "예"로 응답한 응답자 (비-위약 그룹)의 백분율은 약 15.4%였다.

추가 결론은 다음을 포함한다:

1. 환자의 3분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 환자의 3분의 2 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다.

2. 환자의 3분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 환자의 3분의 2 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 모든 환자가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다.

3. 환자의 3분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 환자의 3분의 2 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 모든 환자가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다.

4. 환자의 3분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 환자의 3분의 2 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다. 모든 환자가 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답을 보였다.

5. 의사의 3분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다 의사의 3분의 2 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 모든 의사가 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다.

6. 의사의 3분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 의사의 3분의 2 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 모든 의사가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다.

7. 의사의 3분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 의사의 3분의 2 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 모든 의사가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다.

8. 의사의 3분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 의사의 3분의 2 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다. 모든 의사가 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답을 보았다.

9. 환자의 14분의 3 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 CR-PCSS 및/또는 1-레벨 PR-PCSS 응답을 갖는다.

10. 의사의 14분의 3 이상이 I-GAIS를 사용하여 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 개선을 보았다.

11. 환자의 3분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다.

12. 환자의 3분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 모든 환자가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다.

13. 환자의 3분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 모든 환자가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다.

14. 환자의 3분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다. 모든 환자는 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSRS 응답자였다.

15. 환자의 3분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다.

16. 환자의 3분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 모든 환자는 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다.

17. 환자의 3분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 모든 환자는 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다.

18. 환자의 3분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 환자의 3분의 2 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다. 모든 환자는 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 SSCT 응답자였다.

19. 환자의 14분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다.

20. 환자의 14분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 모든 환자는 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다.

21. 환자의 14분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 모든 환자는 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다.

22. 환자의 14분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 모든 환자는 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 S-GAIS 응답자였다.

23. 환자의 14분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다.

24. 환자의 14분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 모든 환자가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다.

25. 환자의 14분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 모든 환자가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다.

26. 환자의 14분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다. 모든 환자가 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 만족하는 응답자였다.

27. 환자의 14분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다.

28. 환자의 14분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 또한 또다른 실시형태에서, 환자의 14분의 3 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 모든 환자가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다.

29. 환자의 14분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 모든 환자가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다.

30. 환자의 14분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다. 모든 환자가 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 신경쓰여 하는 응답자였다.

31. 환자의 14분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 또다른 실시형태에서, 환자의 2분의 1 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 모든 환자가 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다.

32. 환자의 14분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 모든 환자가 22일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다.

33. 환자의 14분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 환자의 2분의 1 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 또한 또다른 실시형태에서, 환자의 14분의 3 이상이 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 모든 환자가 43일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다.

34. 환자의 14분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 또다른 실시형태에서, 환자의 2분의 1 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 환자의 14분의 3 이상이 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다. 모든 환자가 71일째까지 어느 하나의 엉덩이에서 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및/또는 1-레벨 PR-CIS: 자가의식하는 응답자였다.

35. 현행 연구에서 앵커-기반 분석이 PR-PCSS 점수 변화 ≥1을 나타낸 것은 임상적으로 의미있었다. 둘 다의 연구에서 CCH로 처리된 여성의 절반 이상이 PR-PCSS 점수 변화 ≥1 (54.3% 및 57.9%)를 가졌다. PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다에서 복합 ≥1-레벨 응답을 여성의 >35%에서 관찰하고, ≥1-레벨 S-GAIS 응답을 여성의 >55%에서 관찰하였다.

36. PR-CIS 총 점수의 기준선으로부터 변화에 기초하여, CCH로 처리된 여성은 위약-처리된 여성과 비교하여 셀룰라이트 치료-후 더 낮은 전반적인 시각적 및 정서적 영향을 보고하고, 즉, 삶의 질 및 자부심이 개선되었다.

37. AE는 신속하게 해결되었고, 경증 내지 증등증 강도이고, 드문 연구 중단 원인이었다 (어느 하나의 연구에서 여성의 <5%).

38. 현행 연구는 날짜(date) (N = 843)까지 셀룰라이트 연구에서 가장 큰 결합된 환자 집단 및 각각의 다중심, 무작위, 이중-맹검, 위약-제어 연구 설계를 포함한다.

39. 중증 셀룰라이트를 갖는 여성을 포함하는, 광범위한 연구 도입 기준. 기준선에서 중증 셀룰라이트를 갖는 여성 중에서, 각각 CR-PCSS 및 PR-PCSS로 평가된 CCH-처리된 여성의 >15% 및 >35%이, 71일째에 표적 엉덩이에서 개선되었다. 이전에 언급된 바와 같이, 일차적인 종점, 기준선으로부터 ≥2-레벨 복합 개선은, 엄격한 기준으로 고려되고; 이는, 이러한 결과가 임상적 실행에서 성취하기 어렵다는 것을 고려하면, 한계이다. 그러나, 이러한 엄격한 기준에도 불구하고, CCH를 투여받는 여성의 현저하게 더 큰 백분율이 위약과 비교하여 일차적인 종점을 충족시켰다.

40. 2개의 단계 3 무작위, 위약-제어 연구를 기초로 하여, CCH는 엉덩이에 증등증 내지 중증 셀룰라이트를 갖는 여성을 위한 안전하고 효과적인 치료이다.

실시예 2 및 3에 대한 병렬적 결과 (연구 302 및 303):

실시예 2 및 3에서 수행된 분석이 동일하기 때문에, 실시예 2 및 3에서 일차적인 및 핵심 이차적인 종점의 결과의 병렬적 표를 표 51에 제시한다.

중추적 단계 3 연구 (연구 -302 및 -303; "풀 1"), 및 무작위, 이중-맹검 위약 제어된 연구 (연구 -201, -301, 및 -302; "풀 2")의 풀링 분석으로부터의 결과를 연구를 통한 결과와 비교한다. 연구 -202, -205, 및 -304로부터의 결과는 효과의 지속을 뒷받침하고, 연구 -202의 결과는 CCH에 재-노출시 내성의 결핍 (시간이 경과함에 따라 치료적 용량(들)에 응답하는 능력의 상실)을 뒷받침한다. 개별적인 연구의 일차적인 효능 분석의 결과, (연구-201, 302 및 -303), 및 풀 1 및 2에서 통합된 결과는 셀룰라이트 중증도 감소가, 임상의 (연구자) 및 환자 (피험자) 척도의 복합으로 측정하여, 위약 처리 그룹과 비교하여 CCH 처리 그룹에서 더 빈번하게 관찰됨을 입증하였다.

일차적인 및 핵심 이차적인 효능 종점에 대한 비교 결과 (풀 1- ITT 집단)를 표 52에 제시한다.

관련 임상 데이터는 하기 표 53-61에 제공한다.

2가지 다중심, 무작위, 이중-맹검, 위약-제어 중추적 연구의 결과는 CCH는 위약과 비교하여 71일째 2-레벨 복합 응답자의 비율로 평가하여 셀룰라이트 중증도를 현저하게 감소시킴을 입증하였다. 중추적 단계 3 연구 동안, CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급에서 위약과 CCH 치료의 명백한 구분이 첫번째 치료 세션 후 일찍이 21 일에 관찰되었다.

하위그룹 분석은, 연령, 인종, 민족성, BMI, 피츠패트릭 피부 유형, 셀룰라이트의 부류 이력, 기준선 셀룰라이트 중증도, 또는 면역원성 상태가, 효능에 미치는 영향이 명백하지 않다는 것을 입증하였다. ≥65 세 그룹에서 및 ≥30 kg/㎡ BMI 범주에서 CCH의 효과를 추가로 평가하기 위해, 추가 사후 분석(post-hoc)을 수행하였다. 선택된 사후 분석은 중추적 연구에서 핵심 이차적인 종점이고, 표적 엉덩이에서 1-레벨 복합 응답, 비-표적 엉덩이에서 2-레벨 복합 응답, 및 2-레벨 및 1-레벨 PR-PCSS 응답자 분석을 포함하였다. 이러한 분석을 기초로 하여, 전체 증거는 모든 하위그룹에서 위약과 비교하여 CCH에서 유리한 효능 경향을 뒷받침한다.

CCH 및 위약 처리 그룹 간의 통계학적으로 유의한 차이는 또한 모든 핵심 이차적인 종점에 대한 둘 다의 풀링 분석에서 관찰되었다. 이들은 다음을 포함하였다: 표적 엉덩이의 1-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율, 표적 엉덩이의 2-레벨 PR-PCSS 응답자의 비율, 표적 엉덩이의 1-레벨 복합 응답자의 비율, 비-표적 엉덩이의 2-레벨 복합 응답자의 비율, 1-레벨 SSRS 응답자의 비율, 기준선 (1일째)으로부터 PR-CIS 총 점수의 변화, 표적 엉덩이의 1 레벨 S-GAIS 응답자, 및 표적 엉덩이의 2 레벨 S-GAIS 응답자.

이들 핵심 이차적인 종점은 피험자에게 관련되고 임상적으로 의미 있는 치료 이득의 환자- 보고 영향 측정을 평가한 척도를 포함하였다. PR-CIS는 셀룰라이트의 시각적 및 정서적 영향을 평가하고, SSRS는 이들의 셀룰라이트의 외관에 만족도를 평가하고, S-GAIS는 가시적 외관을 평가하였다. 전반적으로, 환자가 보고한 만족도 및 정서적 영향 측정은 위약 처리 그룹과 비교하여 CCH 처리 그룹에서 더 크거나 통계학적으로 현저한 개선을 나타내었다. 셀룰라이트 중증도의 감소는 치료 부위당 CCH 0.84 mg의 첫번째 치료 세션을 투여한 후 일찍이 21 일에 명백하고, 71-일 이중-맹검 연구 기간 내내 지속되었다. 연구 304의 결과는, 모 연구 완료 후 6 개월 이하 동안 180일째까지 PR-PCSS 및 CR-PCSS에서 지속성 (효과의 지속)을 입증하였다.

실시예 5- 단계 3B, 셀룰라이트의 치료에서 CCH의 응답의 안전성 및 일시적 패턴을 평가하기 위한 개방-표지, 장기간 연구 (연구 304)

이는 상기 실시예 2 및 3으로부터 다중심, 개방-표지, 장기간 후속조치 연구였다. 연구는 71-일 이중-맹검, 위약-제어 연구에서 성인 여성에서 EFP를 갖는 2 양측 엉덩이의 동시 치료에서 엉덩이당 CCH 0.84 mg을 이전에 투여받은 (총 용량 1.68 mg 이하 x 3개 치료 세션) (실시예 2 (연구 302) 또는 실시예 3 (연구 303), 이후 "모 연구들" 또는 "모 연구") 피험자를 평가하였다. 상기한 연구 중 하나의 완료 후, 피험자는 이들 연구에서 CCH에 마지막 노출 후 대략 28 일인, 모 연구의 71일째 (즉, 첫번째 치료 후 70 일)부터 5 년 이하 동안 후속 조치되거나 (될 것이다).

당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 연구 304에 사용된 "일(Days)"은 연구 302 또는 303에서 초기 용량 (1일째)으로부터 71일째에 상대적이다. 셀룰라이트 평가를, 실시예 2 및 3에서 보고된 71일째 후 대략 180 일이고, 피험자의 CCH를 사용한 첫번째 치료 후 대략 251 일인, 이러한 연구의 180일째에 수행하였다. 따라서, 이러한 실시예 5의 목적을 위해 "180일째"는 실시예 2 및 3의 71일째 후 대략 180 일을 의미한다. 이러한 실시예 5에 대한 180일째 평가를 맹검 방식으로 수행하고, 피험자, 연구자 및 사이트 직원은 평가를 완료할 때까지 단계 3 연구에서 받은 치료에 맹검였다.

이러한 연구의 일차적인 목적은 (a) 성인 여성에서 EFP의 치료에서 셀룰라이트를 위한 CCH의 장기간 안전성; (b) 성인 여성에서 EFP의 치료에서 재치료를 위해 사용되는 경우 CCH의 안전성; 및 (c) 성인 여성에서 EFP의 치료 후 CCH의 장기간 면역원성 프로파일을 평가하는 것이다. 이러한 연구의 이차적인 목적은 CCH로 치료된 EFP를 갖는 성인 여성에서 응답의 감소까지의 시간 (TRR), 예를 들면, 치료의 지속성을 평가하는 것이었다. 이러한 연구는 현재 계속 진행 중이다. 이러한 실시예는 2019년 4월 1일을 포함하여 그 때까지 수집한 데이터를 나타낸다. 그날까지 적어도 180일째 평가 방문을 완료한 479명의 피험자를 포함한다.

실시예 2 및 3의 연구를 완료한 755명의 피험자 (CCH 처리된 및 위약 처리된) 중에서, 617명의 피험자 (CCH 처리된 및 위약 처리된)를 이러한 개방-표지 확장 연구에 도입하였다. 이들 피험자는 이러한 연구의 180일째에 맹검 해제(unblinded)하면, 활성 CCH를 투여받은 피험자만이 그후에 이러한 연구에서 유지되었다.

연구 설계는 25에 개요를 서술한다. 180일째 후 평가를 완료하고 (즉, 실시예 2 및 3의 71일째 후 180 일), 사이트를 모 연구에서 각각의 피험자의 연구 치료에 맹검 해제하고 (모 연구의 71일째 후 대략 6 개월, 및 모 연구에서 첫번째 용량의 CCH 후 대략 251 일), 이들 연구 동안 위약을 투여받은 피험자는 철회하고, 연구를 지속하지 않았다. CCH를 투여받은 피험자는 그후에 다음 3 범주의 1개로 분류되었다:

ㆍ 범주 I (1-레벨 복합 응답자)은 모 연구에서 CCH를 투여받은 피험자를 포함하고, 여기서, 모 연구에서 71일째에 어느 하나의 (또는 둘 다) 엉덩이(들)에서 최대 복합 응답은, PR-PCSS 및 CR-PCSS로 평가된 바와 같이 셀룰라이트 중증도가 최대 1-레벨 복합 개선이었다. 양쪽 엉덩이에서 개선되는 경우에, 1 레벨의 복합 개선은 적격(eligible)인 동일한 엉덩이에서 일어나야 한다 (즉, PR-PCSS 및 CR-PCSS 개선은 동일한 엉덩이에서 있어야 한다). 1 척도에서 2 레벨 개선을 나타내지만, 다른 척도에서 단지 1-레벨 개선을 나타내는 피험자는 또한 범주 I 피험자로서 고려되고, 단, 복합 개선은 동일한 엉덩이 내에 존재한다. 범주 I 피험자는 이러한 개방 표지 연구에서 2이하 엉덩이에서 1 추가 재치료 과정에 적격이다 (즉, 대략 21 일 간격으로 3개 치료 세션). 재치료는 평가 후 및 모 연구 동안 피험자 치료의 맹검 해제 후 180일째 시작할 수 있다. 재치료를 위한 선별은, 모 연구로부터 연구 약물 맹검이 파기되는 경우, 180일째 방문에서 시작할 수 있다. 복합 1 이하 레벨 개선된 엉덩이만이 범주 I 피험자에서 재치료될 것이다. 재치료 개시 (치료 방문 1, 치료 일 1) 후 개방 표지 효능의 평가는 이러한 개방-표지 연구의 치료 방문 4 (71일째 + 5 일) 이하에 결정될 것이고, 이후에 피험자는, 5 년 기간 동안 피험자가 재치료를, 2 년 동안 6 개월마다 및 이어서 5 년 (1800일째) 이하 동안 매년 받는 경우에 좌우되어 모 연구 302 및 303의 71일째 후 관찰될 것이다. 추가 재치료를 받지 않을 것을 선택한 범주 I 상태에 적격인 피험자는 관찰 방문 (방문 2 내지 7, 즉, 12, 18, 24, 36, 48 및 60개월)을 가질 것이다.

ㆍ 범주 II (2-레벨 복합 응답자)는, 모 연구에서 CCH를 투여받고, PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다 적어도 하나의 엉덩이에서 모 연구 71일째에 셀룰라이트 중증도가 적어도 2-레벨 복합 개선된 (즉, 2-레벨 복합 응답자) 피험자를 포함한다. 이들 피험자는 모 연구의 71일째로부터 2 년 동안 대략 6 개월마다 및 이어서 5 년 (1800일째) 이하 동안 매년 TRR (하기 정의됨) 및 안전성에 대해 관찰될 것이다. 범주 II 피험자는 재치료에 적격인 어느 한쪽의 또는 양쪽 엉덩이 상에 모 연구의 71일째와 비교하여 적어도 1-레벨 복합 응답 감소되어야 하고, 모 연구에서 1일째와 비교하여 2-레벨 복합 응답을 더 이상 유지하지 않아야 하고, 이후에 그들은 관찰 방문에 참여할 것이다.

ㆍ 범주 III (비-복합 응답자)은 모 연구에서 활성 CCH를 투여받지만 범주 I에서 또는 II에 포함된 기준을 충족하지 않은 모든 다른 피험자를 포함한다. 이들 피험자는 2 년 동안 6 개월마다 및 5 년 (1800일째) 이하 동안 매년 안전성에 대해 관찰될 것이고, 연구 동안 재치료에 적격이 아니다.

재치료에 적격인 범주 I 피험자 및 범주 II 피험자는, 엉덩이에 치료가능한 EFP 딤플이 없고 연구자가 치료 방문 1, 치료 방문 2 및/또는 치료 방문 3에서 엉덩이를 CR-PCSS 0의 점수로 평가하는 경우가 아니라면, 3 재치료 방문에서 연구 약물를 투여받을 것이다. 각각의 재치료 방문 동안, 피험자가 일관된, 표준화된 편안한 자세로 서 있으면서, 표시 딤플 및 주사 부위 전후에 치료될 엉덩이(들) 사진을 찍을 것이다.

치료 부위는 적격의 엉덩이(들)로서 정의된다. 피험자는 어느 한쪽의 또는 양쪽 엉덩이 (즉, 왼쪽 및/또는 오른쪽 엉덩이)에서 180일째 후 치료에 적격일 것이다. 모든 셀룰라이트 평가를 각각의 개별적인 치료 부위 상에서 수행할 것이다. 치료 부위를 개별적으로 평가할 것이다. 각각의 엉덩이 내에서 선택된 딤플은 피험자가 일관된 편안한 자세로 서 있을 때 잘-정의되고, 명백하여야 하고, 치료에 적합하여야 한다. 엉덩이 내에 동일한 딤플 또는 엉덩이 내에 상이한 딤플은 지정된 치료 방문에서 재치료될 수 있지만, 주사는 모든 치료 방문 동안 엉덩이 내에 (예를 들면, 엉덩이당 12회 주사) 수행되어야 한다.

특정한 엉덩이 (오른쪽/왼쪽)에 어떠한 주사도 치료 방문 (예를 들어, 치료 방문, 예를 들면, 치료 방문 2)에서 제공되지 않는 경우, 피험자는, 엉덩이가 치료 방문 1 동안 치료되는 경우에, 당해 방문 (치료 방문 2)에서 반대쪽 엉덩이에서 재치료에 대해 여전히 평가할 것이다. 피험자가 치료 방문 3에 되돌아 오는 경우, 엉덩이 각각은 피험자 (PR-PCSS를 사용함) 및 연구자 (CR-PCSS를 사용함)에 의해 다시 평가될 것이다. 연구자가 적격의 엉덩이(들)에서 CR-PCSS를 사용하여 셀룰라이트 중증도를 0 초과라고 평가하는 경우, 주사를 제공받을 것이다.

연구의 관찰 단계에 참여하는 범주 I 및 범주 II 피험자는 12, 18, 24, 36, 48, 및 60개월에 관찰 방문 동안 셀룰라이트 평가를 완료할 것이다. 이들 관찰 방문에서, 엉덩이(들)가 재치료에 적격인 등급을 나타내고, 피험자가 이전에 이러한 연구 304 (실시예 5)에서 CCH를 투여받지 않기로 한 경우, 피험자는 적격의 엉덩이(들)에 대해 재치료의 1 과정을 제공받을 것이다.

적격의 범주 I 및 범주 II 피험자를 위한 재치료 과정은, 엉덩이에 치료가능한 EFP 딤플이 없는, 즉, 연구자가 치료 방문 1, 2 및/또는 치료 방문 3에서 CR-PCSS 0의 점수 0의 점수로 평가하는 경우가 아니라면, 21 일까지 분리된 3 재치료 세션으로 이루어진다. 각각의 재치료 세션은 각각의 적격인 엉덩이에서 0.84 mg의 용량 및 3.6 mL의 용적 (이중-맹검 연구에 투여된 치료 과정과 동일함)의 CCH의 12회 주사 (주사당 0.07 mg/0.3 mL)로 이루어지고, 2 이하 엉덩이가 동시에 치료된다. 하나 및 단지 1의 재치료 과정은 2 이하의 적격인 엉덩이에서 동시에 이러한 5 년 연구 동안 적격의 범주 I 및 범주 II 피험자에게 제공된다. 재치료 개시 (치료 방문 1에; 치료 1일째) 후, 피험자는 재치료 동안 각각의 주사 일에 안전성에 대해 평가되고, 치료 방문 2 (22일째), 치료 방문 3 (43일째) 및 치료 방문 4 (71일째)에서 안전성 및 셀룰라이트 중증도에 대해 평가된다. 재치료 이후, 이들 피험자는 5 년 기간 동안 피험자가 재치료를 받는 경우에 좌우되어, 모 연구의 71일째 (실시예 2 및 3) 후 2 년 동안 6 개월마다 및 이어서 5 년 (1800일째) 이하 동안 매년 관찰될 것이다.

연구 목적을 위해, 응답의 감소 (즉, 응답의 약화 또는 응답의 상실)는 PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다에서 모 연구의 71일째에 관찰된 셀룰라이트 중증도 개선의 1-레벨 복합 악화로서 정의된다. TRR은, (모 연구의 71일째) 효능을 평가하는 시점에서부터, PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다에서 응답의 복합 1-레벨 상실이 이러한 연구에서 관찰되는 연구 방문까지의 시간으로 정의되었다. 응답의 감소 및/또는 응답이 완전히 상실됨의 확인은 복합 응답의 감소가 처음 검출된 후 대략 2 주 후에 후속조치 연구 방문 동안 확립된다.

디지털 사진은 직접적인 효능 측정은 아니지만; 그러나, 디지털 사진을 특정 효능 측정의 평가에서 이용한다. 각각의 엉덩이를 두 엉덩이의 각각에 대해 하기한 시점에서 상기한 바와 같이 표준화된 방식으로 디지털 카메라를 이용하여 촬영한다:

ㆍ 모든 피험자에 대해 선별, 180일째, 및 확인 방문 (딤플 또는 주사 부위의 어떠한 표시도 없음)

ㆍ 범주 I 및/또는 적격의 범주 II 피험자에 대해 치료 방문 (1, 22, 및 43일째) 동안 표시 딤플 및 주사 부위 (주사 이전) 전 및 후

ㆍ 71일째 방문 (처리 말기/조기 종료) 동안, 관찰 평가 방문 (360, 540, 720, 1080, 1440, 및 1800일째/연구 말기 ("EOS")), 및 확인 방문 (딤플 또는 주사 부위 표시 없음)

180일째 방문 및 이중-맹검 모 연구의 맹검 해제 후, 사진은 범주 I 및 범주 II 피험자에 한정된다.

모 연구에서 연구 약물를 받은 843명 이하의 피험자는 이러한 연구에 참여할 수 있다. 총 617명의 피험자는 모 연구를 완료하고, 이러한 연구에 참여하는 것을 동의하였다. 이들 중에서, 130명은 도입 기준을 만족시키지 않고, 동의를 철회하거나 180일째 방문 전에 후속조치에서 누락되었다. 추가로, 4명의 피험자는 180일째 방문에 참여하지만, 맹검 해제 전에 연구에서 철회하고, 4명의 피험자는 중간의 데이터 컷-오프(cut-off) (2019년 4월 1일) 시점에 맹검 해제하지 않았다. 따라서, 총 479명의 피험자는 180일째 방문을 완료하고, 데이터 컷-오프 시점에 맹검 해제하였다.

이들 479명의 피험자 중에서, 238명은 모 연구에서 위약을 투여받고, 180일째 방문을 완료하고, 이어서, 이러한 연구에 추가 참여를 철회하였다. 따라서, 모 연구에서 CCH를 투여받고 이러한 연구에서 180일째 방문을 완료한 241명의 피험자는 지속하기에 적격이었다. 241명의 적격의 피험자 중에서, 198명은 데이터 컷-오프 (2019년 4월 1일) 시점에 연구의 개방-표지 단계에 참여하는데 동의하였다. 이들 중에서, 30명의 피험자가 적격이고, CCH 재치료를 데이터 컷-오프 전에 받기로 선택하였다(표 62 및 63).

투여 용량 및 방식

셀룰라이트를 위한 CCH는 상기한 바와 같이 0.92 mg의 콜라게나아제 클로스트리듐 히스톨리티쿰을 포함하는 멸균 동결건조된 분말이다. 연구에 적격인 피험자는 엉덩이당 치료 세션당 최대 용량 0.84 mg의 CCH 또는 위약을 (치료 세션당 총 용량 1.68 mg)을 제공받고, 21 일 간격의 3개 치료 세션에서 엉덩이당 12회 피하 주사로 투여받았다 (표 64).

연구 약물은 30-게이지 ½-인치 바늘을 갖는 주사기를 사용하여 피험자가 엎드린 위치로 있는 동안 피하 주사로 주사한다. 각각의 주사 부위에 3회의 0.1-mL 분취량으로서 위치 A, B, 및 C에 투여된 (총 주사 용적 0.3 mL에 대해) 연구 약물의 단일 피부 주사를 도 7에 나타낸 바와 같이 투여받을 것이다. 주사의 깊이는 압력 하향 없이 바늘의 팁부터 바늘의 중심 또는 하부까지 치료 바늘의 길이 (0.5 인치)에 상응한다.

각각의 재치료 방문 동안, 엉덩이당 4개 주사기를 투약을 위해 준비한다. 각각의 주사기는 0.9 mL의 연구 약물 (즉, 각각의 주사기에서 3회 주사)을 포함한다. 주사당 0.3 mL의 12회 (12) 피부 주사를 각각의 치료 방문 동안 재치료된 각각의 적격의 엉덩이 내에 투여한다. 이러한 연구에서 재치료에 적격인 피험자에게 치료 일당 엉덩이당 최대 용량 0.84 mg의 CCH가 제공되고, 21 일 간격의 3회 치료 방문 엉덩이당 12회 이하 피하 주사로서 투여된다.

평가 기준

효능을 CR-PCSS 및 PR-PCSS, 환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도 (PR-CIS), 피험자의 전반적인 미적 개선 척도 (S-GAIS), 피험자 자가-평가 척도 (SSRS), and 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 평가를 사용하여 평가하였다.

안전성 종점은 이상 사례 (AEs), 활력 징후, 신체 검사, 실험실 테스트, 및 면역원성을 포함하였다.

통계학적 방법

다음 분석 집단을 사용하였다:

ㆍ 180일째 관찰 집단은 모 연구로부터 이월된 피험자 모두를 포함한다.

ㆍ 개방-표지 관찰 집단은 개방-표지 연구에 진입하고 모 연구에서 CCH를 투여받은 모든 피험자를 포함한다. 이러한 집단은 범주 I, II, 및 III 피험자 모두를 포함한다.

ㆍ 재치료 집단 전 TRR은 어느 하나/둘 다의 처리된 엉덩이의 경우 모 연구의 71일째에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 적어도 1-레벨 또는 2-레벨 개선된 모든 피험자를 포함한다. 이러한 집단은 범주 I 및 II 피험자를 포함한다. 응답의 감소는 모 연구 동안 처리된 엉덩이 각각에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 적어도 1-레벨 및 2-레벨 개선된 피험자에 대해 개별적으로 평가되었다. 재치료 전 응답의 감소는 이러한 집단을 사용하여 분석한다.

ㆍ 개방-표지 재치료된 (OLR) 집단은 이러한 개방-표지 연구에서 재치료된 TRR 집단에서 모든 피험자를 포함한다.

ㆍ 재치료 집단 후 TRR은, 개방-표지 치료 단계에서 71일째/처리 임상 방문 말기에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 적어도 1-레벨 또는 2-레벨 복합 개선된 OLR 집단에서 모든 피험자를 포함한다. 응답의 감소는 개방-표지 치료 단계 동안 처리된 엉덩이 각각에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 적어도 1-레벨 및 2-레벨 복합 개선된 피험자에 대해 개별적으로 평가되었다. 재치료 이후 응답의 감소는 이러한 집단을 사용하여 분석한다.

효능 분석

연구에 사용된 응답 정의는 다음과 같았다.

셀룰라이트 중증도 척도 (PR-PCSS 및 CR-PCSS)에서 응답의 감소: 응답의 감소를 재치료 전 및 재치료 이후에 대해 개별적으로 평가한다. 표 65는 이러한 연구에서 응답의 감소에 대한 정의를 요약한다.

응답의 감소까지의 시간: 표 66은 TRR을 계산하는 방법의 개요를 서술한다.

셀룰라이트 중증도 척도 (PR-PCSS 및 CR-PCSS)에서 응답의 개선: 이러한 연구에서 재치료를 받은 피험자의 경우, 재치료 단계의 1일째와 비교하여 재치료 단계 (즉, 22, 43, 및 71일째에) 동안 셀룰라이트 중증도의 응답이 개선됨을 다음과 같이 평가한다:

ㆍ 2-레벨 개선 : 이러한 연구의 치료 과정 (치료 세션 1) 1일째에 상응하는 등급과 비교하여 재치료를 받은 후 PR-PCSS 또는 CR-PCSS 등급에서 셀룰라이트 중증도가 적어도 2 레벨 개선됨으로 정의됨 (즉, 기준선 PR-PCSS 및/또는 CR-PCSS 등급으로부터 변화 -2, 또는 -3).

ㆍ 1-레벨 개선 : 이러한 연구의 치료 과정 (치료 세션 1) 1일째에 상응하는 등급과 비교하여 재치료를 받은 후 PR-PCSS 또는 CR-PCSS 등급에서 셀룰라이트 중증도가 적어도 1 레벨 개선됨으로 정의됨 (즉, 기준선 PR-PCSS 및/또는 CR-PCSS 등급으로부터 변화 -1,-2, 또는 -3).

ㆍ 2-레벨 응답자 : 이러한 연구의 치료 과정의 1일째 (치료 세션 1) 등급과 비교하여 PR-PCSS 또는 CR-PCSS 등급이 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의됨.

ㆍ 1-레벨 응답자 : 이러한 연구의 치료 과정의 1일째 (치료 세션 1) 등급과 비교하여 PR-PCSS 또는 CR-PCSS 등급이 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의됨.

ㆍ 1- 또는 2-레벨 복합 개선 을 PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다를 사용하여 평가한다 (예를 들면, 1-레벨 복합 개선의 경우 - 응답이 적어도 1 레벨 개선됨을 동일한 엉덩이에 대해 PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다에서 관찰한다. 2-레벨 복합 개선의 경우 - 적어도 2 레벨 개선을 PR-PCSS 및 CR-PCSS 둘 다에서 동일한 엉덩이에서 관찰한다). 분류가 1 또는 둘 다의 요소 (즉, PR-PCSS 요소 또는 CR-PCSS 요소)에 대해 누락되는 경우, 복합 응답자 분류는 당해 방문에 대해 누락된다.

ㆍ 2-레벨 복합 응답자 : 적어도 2-레벨 PR-PCSS 응답자 및 적어도 2-레벨 CR-PCSS 응답자인 피험자로서 정의됨.

ㆍ 1-레벨 복합 응답자 : 적어도 1-레벨 PR-PCSS 응답자 및 적어도 1-레벨 CR-PCSS 응답자인 피험자로서 정의됨.

PR-CIS 응답자:

ㆍ PR-CIS 총 점수의 경우, PR-CIS 응답자는 PR-CIS 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 12 감소된 (즉, 각 항목에 대해 적어도 2개의 평균) 피험자로서 정의된다.

ㆍ 간이형 PR-CIS 총 점수, PR-CIS 응답자는, PR-CIS 총 점수가 평가 시점에 기준선으로부터 적어도 10 감소된 (즉, 각 항목에 대해 적어도 2개의 평균) 피험자로서 정의된다.

ㆍ 각 항목에 대한 PR-CIS 응답자는 평가 시점에 개방-표지 단계의 71일째에 점수로부터 PR-CIS 항목 점수가 적어도 2 감소된 피험자로서 정의된다.

ㆍ "피험자가 이들의 셀룰라이트 외관에 대해 얼마나 만족하는지" 질문하는 PR-CIS에 대한 항목 #1은 10에서 피험자가 보고한 평가를 빼면 반전된다 (즉, 복합을 목적으로, "만족하는지" 질문에 대한 득점은 반전 (반영)되어 다른 질문과 방향이 일관되게 한다). 이러한 방식으로, 6개 PR-CIS 질문에 대한 더 큰 수는 더 부정적인 영향을 반영할 것이다.

피험자의 전반적인 미적 개선 척도: 2-레벨 S-GAIS 응답자는 S-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 2 (즉, 2, 또는 3)인 피험자로서 정의된다. 1-레벨 S-GAIS 응답자는 S-GAIS 등급이 평가 시점에 적어도 1 (즉, 1, 2, 또는 3)인 피험자로서 정의된다.

셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 평가: 응답자는 평가 동안 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 평가에서 "만족함" 또는 "매우 만족함"으로 응답하는 피험자로서 정의된다.

피험자 자가-평가 척도: 1-레벨 SSRS 응답자는 평가 동안 그녀의 엉덩이 상 셀룰라이트의 외관에 적어도 약간 만족함 (즉, 약간 만족함 [4], 매우 만족함 [5] 또는 대단히 만족함 [6])인 피험자로서 정의된다. 2-레벨 SSRS 응답자는 평가 동안 그녀의 엉덩이 상 셀룰라이트의 외관에 적어도 매우 만족함 (즉, 매우 만족함 [5] 또는 대단히 만족함 [6])인 피험자로서 정의된다.

효능 결과

A. 효능 분석 - 180일째 관찰 집단

1. 셀룰라이트 중증도

a. PR-PCSS 및 CR-PCSS

표 67은 180일째 관찰 집단에서 모 연구에서 1일째부터 모 연구의 71일째까지, 그리고 이러한 연구의 180일째까지 (모 연구의 71일째 후 180 일, 또는 모 연구에서 연구 약물 첫번째 용량 후 대략 251 일) PR-PCSS 및 CR-PCSS의 변화에 대한 개요를 서술한다.

모 연구에서 CCH으로 처리되고 이러한 연구에서 셀룰라이트 중증도의 180일째 평가를 완료한 241명의 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-PCSS의 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.8 (0.85)이고 오른쪽 엉덩이에서 -0.9 (0.92)였다. 이들 동일한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구의 180일째까지 PR-PCSS의 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.7 (0.87)이고 오른쪽 엉덩이에서 -0.7 (0.92)였다.

모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.8 (0.79)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -0.7 (0.76)이었다. 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구의 180일째까지 CR-PCSS의 평균 변화 (SD)는 왼쪽 엉덩이에서 -0.6 (0.83)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -0.6 (0.83)이었다.

모 연구에서 238명의 위약으로 처리된 피험자에서, 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.5 (0.75) 및 -0.5 (0.79)였다. 이러한 연구에서 180일째까지 PR-PCSS의 모 연구에서 1일째부터 평균 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.3 (0.71)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -0.4 (0.80)였다.

위약 처리된 피험자에서, 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.3 (0.64) 및 -0.3 (0.70)이었다. 이러한 연구에서 180일째까지 CR-PCSS의 모 연구에서 1일째부터 평균 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.4 (0.72)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -0.4 (0.72)였다.

1일째부터 71일째까지 (모 연구에서) CR-PCSS 및 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-PCSS의 평균 변화는 180일째 관찰 집단에서 피험자가 모 연구의 집단을 대표함을 나타낸다. 180일째에 CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자 간의 차이는 모 연구에서 나타난 결과와 일관된다.

b. PR-CIS

표 68은 180일째 관찰 집단에서 모 연구에서 1일째부터 모 연구의 71일째까지 및 이러한 연구의 180일째까지 PR-CIS의 변화의 개요를 서술한다.

모 연구에서 CCH으로 처리되고 이러한 연구에서 PR-CIS의 180일째 평가를 완료한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -11.8 (11.77)이었다. 이들 동일한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -10.5 (11.76)였다.

모 연구에서 위약 처리된 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -6.5 (12.12)였다. 이들 동일한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -5.4 (11.30)였다.

간이형 PR-CIS 점수의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) 변화는 -10.3 (9.95)이고, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 간이형 PR-CIS 점수의 평균 (SD) 변화는 -9.3 (9.88)이었다. 위약 처리된 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) 변화는 -5.7 (10.30)이고, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 간이형 PR-CIS 점수의 평균 (SD) 변화는 -5.2 (9.90)였다.

PR-CIS에서 각각의 개별적인 항목에 대한 응답의 변화를 조사하는 경우와 유사한 결과가 나타났다.

PR-CIS 총, 간이형 및 항목 점수의 1일째부터 71일째까지 (모 연구에서) 및 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 변화는 또한 180일째 관찰 집단에서 피험자가 모 연구의 집단을 대표함을 나타낸다. 180일째에 CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자 간의 차이는 모 연구에서 나타난 결과와 일관된다.

2. 치료 효과의 지속

a. PR-PCSS 및 CR-PCSS 180일째 관찰 집단

표 69는 180일째 관찰 집단에서 PR-PCSS 및 CR-PCSS에서 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 변화의 개요를 서술한다.

PR-PCSS의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.2 (0.81)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.2 (0.86)였다. 위약 처리된 피험자에서, PR-PCSS에 대한 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 0.1 (0.76) 및 0.0 (0.84)였다.

CR-PCSS의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.2 (0.78)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.1 (0.76)이었다. 위약 처리된 피험자에서, CR-PCSS에 대한 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.1 (0.74) 및 -0.1 (0.76)이었다.

71일째 및 180일째 사이에 PR-PCSS 및 CR-PCSS의 작은 차이는 CCH로 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다. 이들 결과는 또한 평균 치료 효과가 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 간에 사실상 동일함을 나타낸다.

b. PR-CIS 180일째 관찰 집단

표 70은 180일째 관찰 집단에서 PR-CIS 총, 간이형, 및 항목 점수에서 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 변화의 개요를 서술한다.

180일째 관찰 집단에서, 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 총 PR-CIS 점수의 평균 (SD) 변화는 CCH 처리된 피험자에서 1.2 (11.32)이고, 위약 처리된 피험자에서 1.0 (10.14)이었다. 간이형 PR-CIS 점수의 경우, 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 변화는 CCH 및 위약 처리된 피험자 각각에서 1.0 (9.45) 및 0.4 (8.98)이었다. 유사한 소 평균 (SD) 변화를 개별적인 항목 점수로 나타내었다 (셀룰라이트 외관에 만족함: CCH 0.5 [2.68], 위약 0.1 [2.88]; 신경쓰임: CCH 0.0 [3.55], 위약 0.0 [3.78]; 자가의식함: CCH 0.1 [2.63], 위약 -0.1 [2.92]; 창피함: CCH 0.1 [2.62], 위약 0.1 [2.27]; 늙어보임: CCH 0.3 [2.92], 위약 0.6 [2.42]; 몸매 걱정: CCH 0.3 [2.59], 위약 0.4 [2.56]).

71일째 및 180일째 사이에 PR-CIS 총, 간이형 및 항목 점수의 작은 차이는 CCH로 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다. 추가로, PR-CIS 응답자의 비율은 71일째부터 180일째까지 일관되게 유지되었다.

c. 피험자 자가-평가 척도 180일째 관찰 집단

모 연구에서 71일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 24.7%가 180일째 관찰 집단에서 위약 처리된 피험자의 11.4%와 비교하여 2 레벨 SSRS 응답자였다. 180일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 14.9%가 위약 처리된 피험자의 8.9%와 비교하여 2-레벨 SSRS 응답자였다.

모 연구에서 71일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 51.5%가 180일째 관찰 집단에서 위약 처리된 피험자의 21.2%와 비교하여, 1 레벨 SSRS 응답자였다. 180일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 36.9%가 위약 처리된 피험자의 17.3%와 비교하여 2-레벨 SSRS 응답자였다 (표 71).

이들 결과는 SSRS 응답자의 비율이 경시적으로 CCH 처리된 및 위약 처리된 피험자 둘 다에서 경시적으로 감소함을 나타낸다. 그러나, CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자 간의 SSRS 응답자 차이는 180일째에 모 연구의 71일째에 관찰된 차이와 유사하였다.

B. 효능의 분석- 재치료 집단 전 TRR

재치료 집단 전 TRR은, CCH으로 처리되고, 모 연구에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS가 1-레벨 또는 2-레벨 복합 응답을 갖고, 현재 연구의 개방-표지 단계를 지속하기로 동의한 103명의 피험자로 이루어진다. 이들 피험자 중 19명은 범주 II로서 분류되고, 84명은 범주 I로서 분류되었다.

1. 응답의 2-레벨 감소- CR-PCSS 및 PR-PCSS

모 연구에서 적어도 하나의 엉덩이에서 적어도 셀룰라이트 중증도가 2-레벨 복합 개선된 이러한 연구에서 19명의 피험자가 존재하였다 (범주 II). 이들 피험자 중 누구도 180일째에 셀룰라이트 중증도가 2-레벨 복합 감소하지 않았다. 범주 II 피험자에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS를 개별적으로 고려한 경우, 1 (5.3%)명의 피험자는 CR-PCSS에서 응답이 적어도 2-레벨 감소하고, 4 (21.1%)명의 피험자는 180일째에 PR-PCSS에서 응답이 적어도 2-레벨 감소하고, 이러한 연구에서 304에 정의되었다 (표 72).

엉덩이를 개별적으로 고려한 경우 유사한 결과를 관찰하였다. 상기한 19명의 범주 II 피험자 중에서, 모 연구에서 셀룰라이트가 적어도 2-레벨 복합 개선된 26 총 엉덩이가 존재하였다. 180일째에 1 (3.8%) 엉덩이에서 응답이 적어도 2-레벨 복합 감소하였다. 추가로, CR-PCSS에서 적어도 2-레벨 감소가 4 (15.4%) 엉덩이에서 나타내고, PR-PCSS 응답에서 적어도 2 레벨 감소가 180일째에 5 (19.2%) 엉덩이에서 나타났다.

2. 응답 1-레벨 감소 - CR-PCSS 및 PR-PCSS

재치료 집단 전 TRR에서 19명의 범주 II 피험자가 존재하였다. 이들 중에서, 3 (15.8%)명이 재치료 전 응답이 1-레벨 복합 감소하였다. 재치료 집단 전 TRR에서 84명의 범주 I 피험자 중에서, 10 (11.9%)명이 재치료 전 응답이 1-레벨 복합 감소하였다. 전반적인 (범주 I 및 범주 II 결합된, 103명의 피험자), 13 (12.6%)명의 피험자는 180일째에 응답이 1-레벨 복합 감소하였다 (표 73).

표 74는 재치료 전 셀룰라이트 중증도 등급의 응답이 1 레벨 감소된 엉덩이의 수를 제시한다 (재치료 집단 전 TRR).

[표 74]

엉덩이를 개별적으로 고려한 경우 유사한 결과를 관찰하였다. 상기한 19명의 범주 II 피험자 중에서, 모 연구에서 적어도 2-레벨 복합 응답을 갖는 26 총 엉덩이가 존재하였다. 이들 중에서, 응답의 1-레벨 복합 감소는 6 (23.1%) 엉덩이에서 나타났다. 범주 I 피험자에서, 132 엉덩이 중 19 (14.4%)에서 응답이 1-레벨 감소하였다. 전반적인 (범주 I 및 범주 II, 158 엉덩이), 엉덩이의 15.8%는 180일째에 복합 응답이 1 레벨 감소하였다.

3. 응답의 감소까지의 시간- CR-PCSS 및 PR-PCSS

TRR은 CR-PCSS 및 PR-PCSS에서 응답의 복합 악화를 처음 관찰한 경우 모 연구에서 71일째/EOS부터 현행 시도에서 연구 방문까지 일수로 정의하였다. 어떠한 피험자도 응답이 2-레벨 감소하지 않아서 응답의 2-레벨 감소까지 시간을 계산할 수 없엇다. 응답의 1-레벨 감소까지 평균 (SD) 시간은 범주 I 피험자에서 187.5 (10.87) 일이고, 범주 II 피험자에서 182.7 (17.47) 일이었다.

4. 응답이 완전히 상실됨- CR-PCSS 및 PR-PCSS

응답이 완전히 상실됨을 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 (모 연구의) 기준선으로 되돌아감으로 정의되었다. 어떠한 범주 II 피험자 (모 연구에서 적어도 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자)도 180일째에 응답이 완전히 상실되지 않았다. 84명의 범주 I 피험자 중에서, 4 (4.8%)명은 응답이 완전히 상실되었다 (표 75).

5. 재치료 전 응답의 완전한 상실까지의 시간 - CR-PCSS 및 PR-PCSS

응답의 완전한 상실까지의 시간은 응답이 완전히 상실됨을 처음 관찰한 경우 모 연구에서 71일째/EOS부터 현행 시도에서 연구 방문까지 일수로 정의하였다. 범주 II에서 어떠한 피험자도 응답이 완전히 상실되지 않았다. 범주 I에서 응답의 완전한 상실까지의 평균 (SD) 시간은 183.0 (2.83) 일이었다.

6. 셀룰라이트 중증도- 재치료 집단 전 TRR

a. PR-PCSS 및 CR-PCSS

전반적인 (결합된 범주 I 및 범주 II 피험자에서), 모 연구에서 1일째부터 71일째/EOS까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -1.3 (0.64)이고 오른쪽 엉덩이에서 -1.4 (0.83)였다. 모 연구에서 1일째로부터 180일째까지 PR-PCSS의 전반적인 평균 (SD) 변화는 재치료 집단 전 TRR에서 왼쪽 엉덩이에서 -1.0 (0.80)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -1.1 (0.93)이었다.

범주 I 피험자의 경우 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.2 (0.60) 및 -1.2 (0.80)였다. 모 연구에서 1일째로부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.0 (0.77) 및 -1.1 (0.96)이었다.

범주 II 피험자의 경우 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.7 (0.65) 및 -2.1 (0.62)이었다. 모 연구에서 1일째로부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.1 (0.94) 및 -1.2 (0.79)였다.

모 연구에서 1일째부터 71일째/EOS까지 CR-PCSS의 전반적인 (결합된 범주 I 및 범주 II 피험자) 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -1.2 (0.57)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -1.1 (0.63)이었다. 모 연구에서 1일째로부터 180일째까지 CR-PCSS의 전반적인 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 -0.8 (0.78)이고, 오른쪽 엉덩이에서 -0.9 (0.78)였다.

범주 I 피험자의 경우 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.1 (0.46) 및 -0.9 (0.54)였다. 모 연구에서 1일째로부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.7 (0.74) 및 -0.9 (0.78)였다.

범주 II 피험자의 경우 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.8 (0.63) 및 -1.8 (0.37)이었다. 모 연구에서 1일째로부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -1.2 (0.85) 및 -1.2 (0.76)였다.

이들 결과는 이러한 집단에서 응답의 지속을 뒷받침한다.

b. PR-CIS

유사한 결과가 PR-CIS 총, 간이형, 및 항목 점수에서 나타나고, 이러한 집단에서 응답 지속을 뒷받침한다.

7. 치료 효과의 지속

a. 치료 효과의 지속- CR-PCSS 및 PR-PCSS- 재치료 집단 전 TRR

표 76은 모 연구에서 (연구 302/303) 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 재치료 집단 전 TRR에 대한 CR-PCSS 및 PR-PCSS의 변화를 나타낸다.

범주 I 피험자에서, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.2 (0.68)이고 오른쪽 엉덩이에서 0.2 (0.84)였다. CR-PCSS의 경우, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.4 (0.72)이고 오른쪽 엉덩이에서 0.1 (0.77)이었다.

범주 II 피험자의 경우, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.6 (0.83)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.8 (0.76)이었다. CR-PCSS의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.6 (1.02)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.7 (0.75)이었다.

전반적인 TRR 집단에서, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.3 (0.72)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.3 (0.87)이었다. CR-PCSS의 경우, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.4 (0.79)이고, 오른쪽 엉덩이에서 0.2 (0.80)였다.

71일째 및 180일째 사이에 전반적인 TRR 집단 PR-PCSS 및 CR-PCSS 점수의 작은 차이는 CCH로 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다. 이들 결과는 또한 평균 치료 효과가 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 간에 사실상 동일함을 나타낸다.

b. 치료 효과의 지속- PR-CIS- 재치료 집단 전 TRR

표 77은 재치료 집단 전 TRR에서 연구 302/303 연구에 대한 71일째/EOS부터 이러한 연구에서 180일째/조기 종료까지 PR-CIS 총, 간이형, 및 항목 점수의 변화를 나타낸다.

재치료 집단 전 TRR 전반 (결합된 범주 I 및 범주 II)에서, 총 PR-CIS 점수의 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) 변화는 0.0 (12.21)이었다. 범주 I 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 (SD) 변화는 -0.6 (11.20)이고, 범주 II 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 변화는 2.5 (16.04)였다.

간이형 PR-CIS 점수의 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) 변화는 0.1 (9.80)이었다. 범주 I 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 (SD) 변화는 -0.5 (9.12)이고, 범주 II 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 변화는 2.8 (12.32)이었다.

유사한 소 평균 (SD) 변화를 전반적인 개별적인 항목 점수 (셀룰라이트 외관에 만족함: 0.7; 신경쓰임: -0.2; 자가의식함: -0.2; 창피함: -0.1; 늙어보임: -0.1; 몸매 걱정: -0.1)로 나타내었다.

71일째 및 180일째 사이에 전반적인 TRR 집단 PR-CIS 점수의 작은 차이는 PR-PCSS 및 CR-PCSS 결과를 뒷받침하고, CCH로 처리된 피험자에서 모 연구의 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다.

PR-CIS, S-GAIS, 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도, 및 SSRS 응답자- 재치료 집단 전 TRR

180일째에, 재치료 집단 전 TRR에서 범주 I 및 범주 II에서 피험자는 PR-CIS (총, 간이형, 및 항목 점수), S-GAIS, 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도, 및 SSRS 응답을 표시하였다. 범주 I 피험자보다 더 높은 비율의 범주 II 피험자가 응답자였다.

효능 결론

A. 180일째 관찰 집단

180일째 관찰 집단은 180일째 방문 (셀룰라이트 평가를 포함함)을 완료하고 데이터 컷-오프의 시점 (2019년 4월 1일)에 맹검 해제된 479명의 피험자로 이루어졌다. 180일째 방문은 모 연구의 완료 후 대략 180 일 및 모 연구에서 연구 약물의 첫번째 용량 후 대략 251 일에 발생하였다.

(모 연구에서) 1일째부터 71일째까지 및 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 CR-PCSS, PR-PCSS, 및 PR-CIS의 평균 변화는 180일째 관찰 집단에서 피험자가 모 연구의 집단을 대표함을 나타낸다. 180일째에 CCH 처리된 피험자 및 위약 처리된 피험자 간의 차이는 모 연구에서 나타난 결과와 일관된다.

ㆍ 모 연구에서 CCH으로 처리된 241명의 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-PCSS의 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.8 (0.85) 및 -0.9 (0.92)이고, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-PCSS의 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.7 (0.87) 및 -0.7 (0.92)였다. 모 연구에서 위약으로 처리된 피험자에서, 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.5 (0.75) 및 -0.5 (0.79)였다. 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-PCSS의 평균 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.3 (0.71) 및 -0.4 (0.80)였다.

ㆍ 모 연구에서 CCH으로 처리된 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.8 (0.79) 및 -0.7 (0.76)였다. CR-PCSS 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 변화 (SD)는 왼쪽 엉덩이에서 -0.6 (0.82) 및 오른쪽 엉덩이에서 -0.6 (0.83)이었다. 위약 처리된 피험자에서, 1일째부터 71일째까지 평균 (SD) CR-PCSS 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.3 (0.64) 및 -0.3 (0.70)이었다. 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 CR-PCSS의 평균 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.4 (0.72) 및 -0.4 (0.72)였다.

ㆍ 모 연구에서 CCH으로 처리되고 이러한 연구에서 PR-CIS의 180일째 평가를 완료한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -11.8 (11.77)이었다. 이들 동일한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -10.5 (11.76)였다. 모 연구에서 위약 처리된 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 71일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -6.5 (12.12)였다. 이들 동일한 피험자에서, 모 연구에서 1일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 PR-CIS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -5.4 (11.30)였다. 유사한 변화가 간이형 PR-CIS 및 항목 점수에서 나타났다.

모 연구의 71일째 내지 이러한 연구에서 180일째 사이에 PR-PCSS, CR-PCSS, 및 PR-CIS의 작은 차이는, CCH로 처리된 피험자에서 모 연구의 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다. 추가로, PR-CIS 응답자의 비율은 71일째부터 180일째까지 일관되게 유지되었다. PR-PCSS 및 CR-PCSS에 대한 결과는 또한 평균 치료 효과가 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 간에 사실상 동일하였음을 나타낸다.

ㆍ PR-PCSS의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 0.2 (0.81) 및 0.2 (0.86)였다. 위약 처리된 피험자에서, PR-PCSS에 대한 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 0.1 (0.76) 및 0.0 (0.84)이었다.

ㆍ CR-PCSS의 경우, CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 0.2 (0.78) 및 0.1 (0.76)이었다. 위약 처리된 피험자에서, CR-PCSS에 대한 평균 (SD) 변화는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 -0.1 (0.74) 및 -0.1 (0.76)이었다.

ㆍ 180일째 관찰 집단에서, 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 총 PR-CIS 점수의 평균 (SD) 변화는 CCH 처리된 피험자에서 1.2 (11.32)이고, 위약 처리된 피험자에서 1.0 (10.14)이었다. 간이형 PR-CIS 점수에 대해, 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 변화는 CCH 및 위약 처리된 피험자 각각에서 1.0 (9.45) 및 0.4 (8.98)였다. 유사한 작은 평균 (SD) 변화를 개별적인 항목 점수로 나타내었다.

S-GAIS의 비율, 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도, 및 SSRS 응답자는 180일째에 모 연구에서 CCH 처리된 및 위약 처리된 피험자 둘 다에서 감소하였다. 그러나, CCH 처리된 피험자에서 응답 비율은 이러한 연구에서 180일째에 위약 처리된 피험자보다 더 높게 유지되었다.

ㆍ 모 연구에서 71일째에, CCH로 처리된 피험자의 19.1%는 왼쪽 엉덩이에서 S-GAIS 2 레벨 응답자이고, 21.6%가, 위약 처리된 피험자의 6.3% (왼쪽 엉덩이) 및 7.1% (오른쪽 엉덩이)와 비교하여, 오른쪽 엉덩이에서 2-레벨 응답자였다. 이러한 연구 304의 180일째에, CCH 처리된 피험자의 12.4% 및 11.6%는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 2-레벨 S GAIS 응답자였다. 위약 처리된 피험자의 경우, 180일째에 2-레벨 S GAIS 응답자인 피험자의 백분율은 오른쪽 및 왼쪽 엉덩이 각각에 대해 3.8%였다.

ㆍ 모 연구에서 71일째에, CCH로 처리된 피험자의 70.5%가, 위약 처리된 피험자의 37.4% (왼쪽 엉덩이) 및 37.0% (오른쪽 엉덩이)와 비교하여, 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 S-GAIS 1 레벨 응답자였다. 180일째에, CCH 처리된 피험자의 53.5% 및 51.0%는 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 1-레벨 S-GAIS 응답자였다. 위약 처리된 피험자의 경우, 180일째에 1-레벨 S GAIS 응답자인 피험자의 백분율은 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 각각에서 27.8% 및 28.3%였다.

ㆍ 71일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 50.6%가, 180일째 관찰 집단에서 위약 처리된 피험자의 22.5%와 비교하여, 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다. 180일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 34.4%가, 위약 처리된 피험자의 16.5%와 비교하여, 셀룰라이트 치료에 만족하거나 매우 만족하였다 (도 27).

ㆍ 모 연구에서 71일째에, CCH로 처리된 피험자의 24.7%가, 180일째 관찰 집단에서 위약 처리된 피험자의 11.4%와 비교하여, 2 레벨 SSRS 응답자였다. 180일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 14.9%가, 위약 처리된 피험자의 8.9%와 비교하여, 2-레벨 SSRS 응답자였다.

ㆍ 모 연구에서 71일째에, CCH로 처리된 피험자의 51.5%가, 180일째 관찰 집단에서 위약 처리된 피험자의 21.2%와 비교하여, 1 레벨 SSRS 응답자였다. 180일째에, 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자의 36.9%가, 위약 처리된 피험자의 17.3%와 비교하여, 2-레벨 SSRS 응답자였다.

B. 재치료 집단 전 TRR

재치료 집단 전 TRR은 CCH으로 처리되고 모 연구에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS이 1-레벨 또는 2-레벨 복합 응답을 갖고, 현재 연구의 개방-표지 단계를 지속하는데 동의한 103명의 피험자로 이루어진다. 이들 피험자 중 19명은 범주 II로 분류되고, 84명은 범주 I로 분류되었다.

범주 II에서 어떠한 피험자도 PR-PCSS 및 CR-PCSS로 측정하여 복합 응답 감소되지 않거나 응답이 완전히 상실되지 않고, 범주 I에서 소수의 피험자가 복합 응답 감소되거나 응답이 완전히 상실되었다. 응답의 감소까지의 시간 및 응답의 감소 완료까지의 시간은 데이터 컷-오프까지 연구의 지속기간을 반영한다. 응답의 감소까지의 시간 및 응답의 감소 완료까지의 시간을 하기에 제공하지만, 추가의 장기간 데이터가 이들 데이터로부터 응답의 지속기간에 대한 결론을 도출하는데 필요하다.

ㆍ 모 연구에서 적어도 하나의 엉덩이에서 적어도 셀룰라이트 중증도가 2-레벨 복합 개선된, 이러한 연구에서 19명의 피험자가 존재하였다 (범주 II). 이들 피험자 중 누구도 이러한 연구에서 180일째에 셀룰라이트 중증도가 2-레벨 복합 감소하지 않았다. 범주 II 피험자에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS를 개별적으로 고려한 경우, 1 (5.3%)명의 피험자는 CR-PCSS에서 응답이 적어도 2 레벨 감소하고, 4 (21.1%)명의 피험자는 180일째에 PR-PCSS에서 응답이 적어도 2-레벨 감소하였다. 엉덩이를 개별적으로 고려한 경우 유사한 결과를 관찰하였다.

ㆍ 재치료 집단 전 TRR에서 19명의 범주 II 피험자가 존재하였다. 이들 중에서, 3 (15.8%)명이 재치료 전 응답이 1-레벨 복합 감소하였다. 재치료 집단 전 TRR에서 84명의 범주 I 피험자 중에서, 10 (11.9%)명이 재치료 전 응답이 1-레벨 복합 감소하였다. 전반적인 (범주 I 및 범주 II 결합된, 103명의 피험자), 13 (12.6%)명의 피험자는 180일째에 응답이 1-레벨 복합 감소하였다.

ㆍ 응답이 완전히 상실됨을 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급 둘 다가 (모 연구에서) 기준선으로 되돌아감으로 정의되었다. 어떠한 범주 II 피험자 (모 연구에서 적어도 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자)도 180일째에 응답이 완전히 상실되지 않았다. 84명의 범주 I 피험자중에서, 4 (4.8%)명은 응답이 완전히 상실되었다.

ㆍ TRR은, CR-PCSS 및 PR-PCSS에서 응답의 복합 악화를 처음 관찰한 경우, 모 연구에서 71일째/EOS부터 현행 시도에서 연구 방문까지 일수로 정의하였다. 어떠한 피험자도 응답이 2-레벨 감소하지 않아서 응답의 2-레벨 감소까지 시간을 계산할 수 없었다. 응답의 1-레벨 감소까지 평균 (SD) 시간은 범주 I 피험자에서 187.5 (10.87)이고, 범주 II 피험자에서 182.7 (17.47) 일이었다.

ㆍ 응답의 완전한 상실까지의 시간을 응답이 완전히 상실됨을 처음 관찰한 경우 모 연구에서 71일째/EOS부터 현행 시도에서 연구 방문까지 일수로 정의하였다. 범주 II에서 어떠한 피험자도 응답이 완전히 상실되지 않았다. 범주 I에서 응답의 완전한 상실까지의 평균 (SD) 시간은 183.0 (2.83) 일이었다.

재치료 집단 전 TRR에서 71일째 및 180일째 사이에 PR-PCSS, CR-PCSS, 및 PR-CIS에서 전반적인 작은 차이는 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자에서 71일째 후 6 개월까지 치료 효과의 지속을 나타낸다. 이들 결과는 또한 평균 치료 효과가 왼쪽 및 오른쪽 엉덩이 간에 사실상 동일함을 나타낸다.

ㆍ 범주 I 피험자에서, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.2 (0.68)이고 오른쪽 엉덩이에서 0.2 (0.84)였다. CR-PCSS의 경우 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.4 (0.72)이고 오른쪽 엉덩이에서 0.1 (0.77)이었다.

ㆍ 범주 II 피험자의 경우, 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) PR-PCSS 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.6 (0.83)이고 오른쪽 엉덩이에서 0.8 (0.76)이었다. CR-PCSS의 경우 CCH 처리된 피험자에서 모 연구에서 71일째부터 이러한 연구에서 180일째까지 평균 (SD) 변화는 왼쪽 엉덩이에서 0.6 (1.02)였고, 오른쪽 엉덩이에서 0.7 (0.75)이었다.

ㆍ 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 총 PR-CIS 점수의 평균 (SD) 변화는 0.0 (12.21)이었다. 범주 I 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 (SD) 변화는 -0.6 (11.20)이고, 범주 II 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 변화는 2.5 (16.04)였다.

ㆍ 간이형 PR-CIS 점수의 모 연구의 71일째부터 이러한 연구의 180일째까지 평균 (SD) 변화는 0.1 (9.80)이었다. 범주 I 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 (SD) 변화는 -0.5 (9.12)이고, 범주 II 피험자의 경우 71일째부터 180일째까지 평균 변화는 2.8 (12.32)이었다.

ㆍ 유사한 작은 평균 (SD) 변화는 전반적인 개별적인 항목 점수에서 나타났다 (셀룰라이트 외관에 만족함: 0.7; 신경쓰임: -0.2; 자가의식함: -0.2; 창피함: -0.1; 늙어보임: -0.1; 몸매 걱정: -0.1)

180일째에, 재치료 집단 전 TRR에서 범주 I에서 및 범주 II에서 PR-CIS (총, 간이형, 및 항목 점수), S-GAIS, 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도, 및 SSRS 응답자에 대한 피험자의 비율은 180일째 관찰 집단에서, 및 모 연구에서 나타난 것과 유사하였다.

C. OLR 집단

불충분한 수의 피험자가 개방-표지 재치료 집단에서 효능을 평가하기 위해 데이터 컷-오프의 시점에 재치료를 완료하였다.

안전성

CCH의 안전성 프로파일은 이전 연구의 안전성 결과와 일관되었다. (모 연구에서) CCH 처리된 피험자에 대한 180일째 관찰 기간 동안 AE 프로파일은 모 연구에서 위약으로 처리된 피험자와 매우 유사하고, 이는 데이터 컷-오프의 CCH에 대해 장기간 안전성 우려가 없음을 제시한다. 상이한 피험자 범주 (I, II, 또는 III) 사이에 AE 빈도 또는 유형의 차이는 거의 없다. 유의한 면역원성에 대해 발견되지 않았고, 이는 이전 연구와 일관되었다.

결론

데이터 컷-오프 (2019년 4월 1일)까지 이러한 연구의 결과는 PR-PCSS, CR-PCSS, 및 PR-CIS로 측정된 경우 단계 3 이중-맹검 모 연구 71일째 후 적어도 180 일 (6 개월)의 엉덩이 EFP에 대한 CCH로 처리된 피험자에 대한 치료 효과의 지속을 나타낸다 (도 26). 어떠한 피험자도 이러한 연구에서 복합 응답이 2-레벨 감소하지 않고, 모 연구에서 2-레벨 복합 응답자인 어떠한 피험자도 180일째까지 응답이 완전히 상실되지 않았다. 모 연구에서 CCH로 처리된 피험자에 대한 장기간 안전성 우려 징후가 없었다. 이러한 연구에서 데이터 컷-오프 (2019년 4월 1일)까지 CCH로 재치료된 30명의 피험자의 경우, AE 프로파일은 셀룰라이트에 CCH의 다른 임상적 시도에서 나타난 것과 유사하다.

실시예 6 - 셀룰라이트 치료에서 CCH의 단계 2 개방-표지 확장 연구 (연구 202)

현행 실시예 (연구 202)는, 성인 여성에서 CCH의 안전성 및 유효성을 평가한 이전 연구 (연구 201)의 단계 2, 개방-표지 확장 연구이다. 현행 실시예, 장기간 안전성을 연구 201에서 처리한 적격의 피험자에서 평가하였다. 추가로, 치료 부위당 CCH 0.84 mg에 재-노출시 안전성, 유효, 및 면역원성을 등록하고 이들의 두번째 치료 과정을 받은 피험자에서 평가하였다. 이러한 연구에서, 이전에 CCH를 투여받은 피험자에서 이전에 처리된 치료 부위 (재치료로 언급됨)에서 또는 비처리 치료 부위 (재투약으로 언급됨)에서 재-노출의 안전성을, 평가하였다. 최종적으로, 효과의 지속을 이전 연구 (연구 201, 이중 맹검/개방-표지 평가)로부터 및 이러한 현행 연구 (연구 202, 개방-표지)로부터 CCH-처리된 피험자에서 평가하였다. 이전 연구 (연구 201)에서 CCH로 처리된 피험자에서, 처리된 치료 부위를 대략 2 년 이하 동안 장기간 효과의 지속에 대해 평가하였다. 재노출된 (재치료되거나 재투약된) 피험자에 대해, 치료 부위를 대략 1 년 이하 동안 평가하였다. 당해 실시에에 달리 열거되지 않는 한, 연구 201에서 사용된 "일(Days)"은 연구 201에서 초기 용량 (1일째)에 상대적이었다. 연구 201에서, 0.84 mg의 CCH 또는 위약을 환자당 하나의 치료 부위 (1 엉덩이 또는 1 허벅지)에 투여하였다.

보다 특히, 현재 연구는, 이들이 이러한 연구에서 치료를 받기로 결정 (재-치료 또는 재-투약)하는 것에 상관없이 이러한 연구에 등록하기로 선택된 셀룰라이트를 갖는 모든 피험자에서 1 년 넘게 (2 년 이하) CCH의 장기간 안전성을 일정한 간격으로 평가하였다. 피험자가 이전 연구 (연구 201)에서 받은 치료제의 맹검 해제 후, 적격의 피험자는 CCH 치료을 받도록 선택할 수 있다. 피험자가 연구 201에서 CCH를 투여받고, 치료된 영역의 셀룰라이트 중증도 등급이 되돌아오거나 연구 201 기준선 등급보다 더 높은 경우 (셀룰라이트 중증도 악화를 나타냄), 피험자는 하나의 치료 과정내에서 이전에 처리된 영역이 CCH로 재치료되도록 선택될 수 있다 (재치료로 언급됨). 피험자가 연구 201에서 CCH를 투여받은 경우, 피험자는 연구 201에서 CCH로 처리된 영역과 다른 적격인 영역이 치료되도록 선택될 수 있다 (재투약으로 언급됨). 연구 201에서 위약을 투여받은 피험자는 이러한 연구에서 CCH의 2가지 치료 과정 (과정은 21 일 간격의 3개 치료 세션으로 이루어짐)을 받는 옵션을 가졌다. 각각의 치료 과정은 엉덩이 또는 허벅지의 동일하거나 상이한 적격인 치료 부위에 3 이하 기간 동안 치료 부위당 12회 피하 주사로서 투여된 CCH 0.84 mg를 포함하였다. 치료 과정 2는 재치료되거나 재투약된 피험자를 포함하였다.

어떠한 치료도 받지 않도록 선택된 연구 201로부터 피험자 (관찰-만 하는 피험자, 관찰 단계)는 연구 201에서 2 년 이하 동안 1일째부터 3-개월 간격으로 안전성 및 셀룰라이트 중증도 평가에 대해 후속되었다. 응답의 지속을 연구 201에서 2 년 동안 CCH를 투여받은 피험자를 평가하고, 셀룰라이트 중증도가 적어도 1-레벨 복합 PR-PCSS/CR-PCSS 개선됨을 나타내었다 (이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계). 응답의 지속성을, CR-PCSS 및 PR-PCSS 응답자이고, CCH-처리된 영역에서 이러한 응답을 유지한 (즉, 완전한 상실 부족, 기준선으로 되돌아가지 않거나 악화됨) 피험자로저 정의하였다. 이러한 연구에서 치료를 받은 피험자를 계속해서 이러한 연구에서 CCH에 대한 첫번째 노출 후 71일째에 관찰하고, 이어서 이러한 연구에서 1 년 동안 CCH에 대한 첫번째 노출 후 3-개월 간격으로 각각의 처리된 영역에서 관찰하였다.

재치료 또는 재투약 이전에, 피험자 및 연구자에 의한 독립적인 평가를, 선별시 셀룰라이트 중증도를 평가하기 위해 PR-PCSS, CR-PCSS, 및 Hexsel CSS를 사용하여 피험자의 4곳의 치료 부위 각각 (즉, 왼쪽 엉덩이, 오른쪽 엉덩이, 왼쪽 후외측 허벅지, 및 오른쪽 후외측 허벅지)에서 수행하였다.

A. 전반적인 연구 설계 및 계획

연구 201의 71일째에 안전성 및 셀룰라이트 평가 완료 후, 피험자에서 개방-표지 확장에서 이중-맹검 연구 (선별 A)로 지속할지를 희망하는지를 물어보았다. 현재 연구 도입 시점에, 피험자 및 연구자는 피험자가 연구 201에서 받은 연구 약물의 정체를 알지 못하였다. 연구-201까지 연구 약물 맹검을 파기하고, 피험자 3-개월 간격 ± 7 일에 관찰-만 하는 방문을 겪었고 (연구 201에서 초기 용량에 상대적으로), 여기서, 치료된 치료 부위의 안전성 및 셀룰라이트 중증도 평가 둘 다를 이중-맹검 방식으로 수행하였다 (도 28).

이들이 연구 201에서 받은 치료제의 맹검 해제 후, 적격의 피험자는 CCH 치료를 받은 것을 선택할 수 있었다. 피험자가 치료를 받지 않도록 선택하는 경우, 이들은 관찰 집단에 위치하고, 2 년 이하 동안 관찰되었다. 개방-표지 치료 방문 1일째에 CCH를 사용한 초기 처리 전 14 일까지, 지정된 포함 및 제외 기준이 충족되는지를 결정하고, 경우에 따라, 재치료, 재투약에 의한 치료, 또는 첫번째 치료에 적격인 치료 부위를 결정하는 선별 평가 (선별 B)를 수행하였다. 연구 201에서 CCH를 투여받은 피험자는 동일하거나 상이한 적격인 치료 부위에 치료 과정을 받는 옵션이 있었다. 연구 201에서 위약을 투여받은 피험자는 이러한 연구에서 CCH의 2가지 치료 과정을 받는 옵션을 있었다. 각각의 치료 과정은 각각 동일하거나 상이한 적격인 치료 부위에서 3 이하 기간을 포함하였다. 첫번째 치료 과정 말기 이후 적어도 28 일 후 (예를 들면, 두번째 치료 과정의 선별 B 방문은 첫번째 치료 부위 치료 후 71일째에 수행될 수 있다), 선택된 치료 부위는 재치료되거나 재투약될 수 있다.

추가로 CCH 치료를 받지 않도록 선택하는 피험자 (관찰-만 하는 피험자)는 계속해서 12 개월 또는 그 이상 동안 3-개월 간격으로 안전성 및 셀룰라이트 중증도 평가를 후속하였다. 치료 지속성을 2 년 이하 동안 평가하였다.

선별 B 동안, 피험자의 4곳의 치료 부위 (사분면) (즉, 왼쪽 엉덩이, 오른쪽 엉덩이, 왼쪽 후외측 허벅지, 및 오른쪽 후외측 허벅지) 각각의 사진을 촬영하였다. 피험자는 PR-PCSS의 사용에 대한 지시를 받았고, 후속적으로, PR-PCSS 기구를 갖는 표준화 컴퓨터 모니터에 표시된 이들의 치료 부위 각각 (사분면)의 디지털 이미지를 비교하여, 4곳의 치료 부위 (사분면)의 각각에서 이들의 셀룰라이트의 중증도 비율에 대한 척도로 사용하였다. 이러한 독립적인 자가-평가는 현장 직원의 모든 잠재적 편견을 최소화하기 위해 비공개 설정으로 일어났다. 이어서, 연구자는 CR-PCSS를 사용하여 실시간으로 피험자의 4곳의 치료 부위 (사분면)를 평가하였다. 연구자는 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도 (CSS)를 사용하여 4곳의 치료 부위 (사분면)을 평가하였다. 피험자는 연구의 치료 단계에 포함되는 다음 기준을 충족시키는 적어도 1 사분면을 갖도록 요청받았다:

ㆍ 피험자가 보고한 (PR-PCSS) 점수 3 또는 4 (증등증 또는 중증), 및

ㆍ 연구자가 보고한 (CR-PCSS) 점수 3 또는 4 (증등증 또는 중증), 및

ㆍ Hexsel CSS 점수 13 이하.

피험자는 분석을 위해 다음 집단으로 그룹으로 나누었다:

ㆍ 관찰 집단은 연구 201로부터 이월된 모든 피험자를 포함하였다. 맹검 해제시, 재노출되지 않는 것을 선택하는 피험자는 관찰 집단에 유지된다.

ㆍ 안전성 집단은 이러한 연구에서 적어도 1 용량의 CCH를 받은 모든 피험자를 포함하였다.

ㆍ 유효 집단은 기준선을 갖고 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 현재 연구에서 치료를 위해 선택된 치료 부위에서 적어도 1 기준선-후 평가된 모든 안전성 피험자를 포함하였다.

ㆍ 전반적인 지속성 집단을 치료 과정의 1일째 및 71일째에 및 1일째 후 180 일 또는 그 이후에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 평가 둘 다를 갖는 모든 활성 응답자로서 정의하였다. 활성 응답자는 각각의 척도 (CR-PCSS 및 PR-PCSS)가 치료 과정의 71일째에 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 CCH로 처리된 피험자였다.

- 이중-맹검 처리된 피험자에 대한 지속성 집단은 각각의 척도 (CR-PCSS 및 PR-PCSS)가 이중-맹검 연구 (연구 201)에서 CCH로 처리된 치료 부위에 대해 기준선으로부터 71일째에 적어도 1 레벨 개선을 나타내는 전반적인 지속성 집단에서 모든 피험자로 정의되었다.

- 개방-표지 피험자에 대한 지속성 집단은 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 현행 개방-표지 연구 (연구 202)에서 CCH로 처리된 치료 부위에 대해 기준선으로부터 71일째에 적어도 1 레벨 개선을 나타내는 전반적인 지속성 집단에서 모든 피험자로서 정의되었다.

다음 2 단계를 연구의 통계학적 분석으로 요약하였다:

ㆍ 관찰 단계: 현재 연구 (연구 202)에서 동일한 치료 부위의 선별 A부터 첫번째 치료 일까지 시간 기간, 또는 연구 202에서 동일한 치료 부위에 대해 어떠한 처리도 받지 않는 경우 연구 202의 말기로 정의되었다. 관찰 단계는, 요약이 피험자 레벨 단독에 대한 것이 아니고 치료된 치료 부위를 구별할 수 없는 경우가 아니라면, 각각의 처리된 치료 부위 내에서 정의되었다 (즉, 배치, AE). 피험자-수준 요약의 경우, 관찰 단계는 연구 202에서 선별 A부터 첫번째 치료 일까지 시간 기간, 또는 연구 202에서 어떠한 처리도 받지 않는 경우 연구 202의 말기로 정의되었다.

ㆍ 치료 단계: 연구 202에서 선택된 치료 부위의 첫번째 치료일에서부터 연구 202의 말기까지 시간 기간으로 정의된다. 치료 단계는, 요약이 피험자 레벨 단독에 대한 것이 아니고 치료된 치료 부위를 구별할 수 없는 경우가 아니라면, 각각의 처리된 치료 부위 내에서 정의되었다 (즉, 배치, AE). 피험자-수준 요약의 경우, 치료 단계는 연구 202에서 첫번째 치료일에서부터 연구 202의 말기까지 시간 기간으로 정의되었다. 연구 202에서 첫번째 CCH 치료의 1일째 후 모든 데이터가 포함되었다. 따라서, 관찰 단계로부터의 데이터는 치료 단계에 포함되었다.

그녀가 다리 또는 엉덩이에 하기에서 확인된 타임라인 내에 EFP의 치료를 위해 다음 중 어느 것을 사용하거나, 연구 과정 동안 모든 시간에 다음 중 어느 것을 사용한 경우, 피험자는 연구 중 치료에서 제외되었다 (그러나 관찰 평가에서는 제외되지 않음): (a) CCH 주사 전 12-개월 기간 동안 치료를 위해 선택된 신체 측 상 지방흡입, (b) 주사 (예를 들면, 메조테라피); 고주파 장치 치료; 레이저 치료; 또는 CCH 주사 전 12-개월 기간 동안 선택된 치료 부위 내에 수술 (진피절제술 및/또는 전동 진피절제술을 포함함), (c) CCH 주사 전 6 개월 기간 동안 선택된 치료 부위 내에 Endermologie® 또는 유사한 치료, (d) CCH 주사 전 3-개월 기간 동안 선택된 치료 부위 내에 마사지 요법, 및 (e) CCH 주사 전 2-주 기간 동안 선택된 치료 부위 내에 EFP를 예방하거나 완화시키는 크림 (예를 들면, Celluvera™, TriLastin®).

연구자는, 치료 부위 (사분면)가, 경우에 따라, 적격인지를 결정하기 위해 그/그녀의 평가 및 피험자의 평가를 검토하였다. 개방-표지 연구 202에서 선택되어 치료를 받은 적격의 사분면은 피험자의 재량대로 였다. 피험자가 연구 201에서 CCH를 투여받고, 치료된 영역의 셀룰라이트 중증도 점수가 되돌아오거나 연구 201 기준선 점수보다 더 높은 경우, 피험자는 이전에 CCH로 처리된 사분면을 재치료하도록 선택할 수 있다 (재치료로 언급됨). 피험자가 연구 201에서 CCH를 투여받은 경우, 피험자는 연구 201에서 CCH로 처리된 곳 이외에 적격인 사분면을 치료하도록 선택할 수 있다 (재투약으로 언급됨).

이중-맹검 연구에서 할당된 치료 부위에 활성 약물을 받는 피험자의 경우, 치료 부위는 재치료를 받을 자격이 있기 위해서 PR-PCSS 및 CR-PCSS의 201 기준선 점수보다 동일하거나 (또는 더 큰) 셀룰라이트 중증도 점수를 가져야 한다.

치료 완료시 (치료 단계 71일째), 피험자는 360일째까지 연구 일정당 3-개월 간격으로 추적된다. 피험자가 연구 201에서 위약을 투여받는 경우, CCH의 2가지 이하의 치료 과정을 연구 202에서 적합한 경우 2곳의 치료 부위 (엉덩이 또는 후외측 허벅지)에 걸쳐서, 개별적으로 투여받을 수 있다. 연구 201에서 CCH로 처리된 피험자의 경우, 처리된 치료 부위를 720일째까지 장기간 지속성에 대해 평가하였다.

개방-표지 확장 설계의 사용은 다음에 대해 허용되었다:

ㆍ이러한 집단에서 CCH의 안전성 프로파일을 추가로 한정하는 것을 돕는 12-개월 기간 동안 안전성 데이터이 수집.

ㆍ반복 노출 (재치료/재투약) 후 12-개월 기간 동안 안전성 데이터 및 면역원성의 평가, 뿐만 아니라 12-개월 기간 동안 이전에 CCH로 처리된 피험자 모니터링.

ㆍ이전에 위약-처리된 피험자를 CCH에 노출시킴.

ㆍCCH에 대한 응답 지속성의 평가 (셀룰라이트 중증도 평가).

이러한 연구의 일차적인 목적은 이러한 개방-표지 시도에 등록하는 것을 선택한 EFP를 갖는 모든 피험자에서, 이들이 개방-표지 CCH로 치료 (재치료 또는 재투약)를 받는 것을 선택하거나 치료를 받지 않는 것을 선택하는지에 상관없이, 1 년 (12 개월) 이상 동안 일정 간격으로 CCH 0.84 mg의 장기간 안전성을 평가하는 것이었다.

이러한 연구의 이차적인 목적은 다음과 같았다:

ㆍ 이전에 CCH를 사용한 처리를 받은 피험자를 재치료 또는 재투약할 때 안전성 및 면역원성을 평가하기 위해.

ㆍ PR-PCSS 및 CR-PCSS를 사용하여 연구 CCH-201에서 이전에 활성 치료를 받은 피험자에서 CCH 초기 투약후 12-개월 동안 EFP 중증도에서 CCH에 대한 응답 지속성을 평가하기 위해.

ㆍ PR-PCSS 및 CR-PCSS을 사용하여 이전에 연구 201에서 활성 치료를 받은 피험자에서 CCH 초기 투약-후 12 개월 이후에 EFP 중증도에서 CCH에 대한 응답 지속성을 평가하기 위해.

ㆍ 피험자 만족도, 연구자의 전반적인 미적 개선 척도 (I-GAIS), 및 피험자의 전반적인 미적 개선 척도 (S-GAIS)를 포함하는 EFP의 평가에서 CCH에 대한 장기간 응답을 평가하기 위해.

ㆍ 이러한 연구에서 CCH로 처리된 사분면에서 셀룰라이트 중증도 평가를 평가하기 위해.

ㆍ CCH에 노출 후 면역원성을 평가하기 위해.

CCH 치료 부위당 0.84 mg의 효과의 지속을 2 년 이하 동안 평가하였다. 이는 연구 202에서 처리된 피험자의 경우 효과의 지속 (1 년 이하)을 포함하고, 연구 202로 이월되고 2 년 이하 동안 관찰된 연구 201에서 CCH로 처리된 피험자의 경우 보다 장기간 효과의 지속을 포함하였다.

2가지 치료 과정 (각각의 치료 과정은 3개 치료 세션으로 이루어졌다)에 재-노출에 대한 영향을 162명의 피험자에서 평가하였다. 연구 201에서 또는 현재 연구에서 이들의 첫번째 치료 과정을 받은 피험자는, 적합한 경우, 현재 연구에서 두번째 치료 과정을 받을 수 있다 (영역이 이전에 각각 CCH로 처리되었는지 비처리되었는지에 좌우되어 재치료 또는 재투약으로 언급됨). 연구 201에서 할당된 치료 부위에 CCH를 투여받은 피험자의 경우, 치료 부위는 재치료된 연구 201 기준선보다 동일하거나 (또는 더 큰) 셀룰라이트 중증도 점수를 가져야 한다.

표 78은 현재 연구의 기술을 나타낸다.

적격이고 치료를 받기로 선택된 피험자는 치료 부위당 12회 이하 피하 주사로 투여되는 최대 용량인 0.84 mg의 CCH를 투여받았다 (표 79 참조). 피험자는 CCH의 최대 총 2가지 치료 과정을 받는 것으로 제한되었다. 피험자가 연구 201에서 CCH의 첫번째 과정을 받는 경우, CCH의 두번째 과정을 현재 연구에서 투여하였다. 피험자가 연구 201에서 위약 투여된 경우, CCH의 2가지 이하의 치료 과정을 현재 연구에서 적합한 경우 개별적으로, 2곳의 치료 부위 (양쪽 엉덩이 또는 후외측 허벅지)에 걸쳐서 투여할 수 있다.

주사 전, 연구자 또는 적격인 피지명자는 선택된 치료 부위 내에 서 있는 경우 잘-정의되고, 명백하고, 치료에 적합한 딤플을 선택하였다. 치료의 목적이 전체 치료 부위의 심미적 외관을 개선하기 위한 것이기 때문에, 연구자는, 그 또는 그녀의 의견에 따라 전체 치료 부위의 심미적 외관을 가장 개선시키고 싶은 딤플을 선택할 것을 지시받는다. 치료 부위 내에 동일한 딤플 또는 치료 부위 내에 상이한 딤플을 각각의 치료 세션에서 치료받을 수 있지만, 주사는 모두 전체 3 기간 동안 선택된 치료 부위 내에 수행되어야 한다.

딤플 내 주사 부위는, 딤플이 1회 초과 주사가 필요한 경우, 대략 2 cm 간격으로 이격되었다. 각각의 주사 부위를 수술적 표시자를 사용하여 "도트"로 표시하였다. 둥근 딤플의 경우, "도트"를 딤플의 중심에 위치시키고; 길쭉한 딤플의 경우, "도트들"을 딤플의 장축을 따라서 대략 2 cm 간격으로 이격시켰다. 이어서, 연구자 또는 적격인 피지명자는 치료를 위해 선택된 각각의 딤플에 원형을 그리기 위해 수술적 표시자를 사용하였다. 선택된 치료 부위에 원형은 중복될 수 없다.

각각의 주사 부위에 상기한 셀룰라이트를 위해 CCH의 단일 피부 주사를 받고하고, 3회의 0.1-mL 분취량으로서 위치 A, B, 및 C에 (0.3 mL의 총 주사 용적에 대해) 도 7에 나타낸 바와 같이 투여하였다. 주사의 깊이는 하향 압력 없이 바늘의 팁에서부터 바늘의 중심 또는 하부까지 치료 바늘의 길이 (0.5 인치)에 상응한다. 각각의 치료 세션 동안, 연구자는 4개의 주사기를 공급받았다. 각각의 주사기는 0.9 mL의 CCH (즉, 각각의 주사기 중 3회 이하 주사)를 포함하였다. 주사당 0.3 mL의 12회 이하 피부 주사를 각각의 치료 세션 동안 선택된 치료 부위 내에 투여하였다.

B. 투약 및 투약 시점

이러한 연구를 위해 선택된 용량은 모 연구, 연구 201에서 사용된 용량과 동일한 용량이다. 치료에 적격이고 치료를 받기로 선택된 피험자는 CCH를 3 회, 21 일 간격으로 투여받았다 (연구일 1, 22, 및 43). 연구 201에서 위약을 투여받은 피험자는 이러한 연구에서 치료의 2 과정을 적격인 치료 부위(들)에 받기로 선택할 수 있다. 이러한 연구 (연구 202)에서 투여된 치료 과정 I 및 II는 이러한 연구의 첫번째 과정에서 최종 용량의 CCH 후 28 일 이상까지 분리되었다.

현재 연구는 개방-표지 연구였다. 이러한 연구에 도입시, 피험자 및 연구자는 연구 201에서 투여된 연구 약물의 정체를 맹검으로 유지하였다. 201 연구 약물 맹검이 후원자에 의해 파기될 때까지, 피험자는 관찰-만 하는 방문을 3-개월 간격 ± 7 일 (201에서 초기 용량에 상대적)으로 겪었고, 이 때에 치료된 치료 부위의 안전성 및 셀룰라이트 중증도 평가 둘 다를 이중-맹검 방식으로 수행하였다.

C. 유효 방법론

디지털 사진을 이용하여, 관찰-만 하는 그룹에서 뿐만 아니라 CCH로 재치료하거나 재투약하기로 선택한 그룹에서 피험자에 대해 특정 시점에서 특정 셀룰라이트 중증도 파라미터를 평가하였다. 재투약 또는 재치료를 받기로 선택한 피험자를 위한 선별 B 방문에서, 연구자 또는 적격인 피지명자는 각각의 치료 부위의 사진을 후원자-공급 표준화 디지털 카메라를 사용하여 촬영하였다. 피험자는 각각의 사진 기간 동안 서 있는 위치로 있고, 사진을 위해 표준화 의복를 입었다.

연구자가 수행한 셀룰라이트 평가는 피험자가 수행한 평가와 독립적이었다. 따라서, 모든 피험자 셀룰라이트 평가는 연구자의 셀룰라이트 평가가 수행되기 전에 완료하였다. 선별 B에서, 피험자 및 연구자 둘 다의 평가가 완료된 후, 피험자의 평가를, 치료 부위 적격성을 결정하기 위해 임상의의 평가와 비교하였다. 1개 초과의 치료 부위가 적격인 경우, 피험자는 치료를 위한 1곳의 치료 부위를 선택하였다.

이중-맹검 연구에서 원래 CCH로 처리된 치료 부위를 갖고 360일째 이후에 치료 지속성에 대해 평가한 피험자는, PR-PCSS를 특정 시점에서 완료하였다. 연구 201에서 맹검을 파기한 후 연구 약물 후 재치료 또는 재투약을 선택한 피험자는, 투약 1일째 이전 14 일 내에 재선별되었다 (선별 B 방문 [기준선]).

선별 B에서 적격 목적을 위해 모든 4곳의 치료 부위 (사분면)의 디지털 사진을 찍었다. 이어서, 피험자는 양쪽 엉덩이 및 허벅지에 PR-PCSS를 수행하였다. 방문 초기에 22, 43, 및 71일째 선택된 치료 부위의 디지털 사진을 촬영하고, 선택된 치료 부위에 대한 PR-PCSS를 완료하였다.

관찰-만 하는 그룹에서 피험자는, 비교를 위해 이중-맹검 연구에서 할당된 치료 부위의 치료전 1일째 이미지 (기준선)를 사용하여 특정 시점에서 S-GAIS를 완료하였다. CCH 치료를 받기로 선택한 피험자의 경우, S-GAIS 평가를 특정 시점에서 수행하고, 선택된 치료 부위의 사전-투약 선별 B 이미지 (치료 피험자에 대한 기준선)와 다시 비교하였다. 재치료 또는 재투약을 통해 CCH를 받기로 선택된 피험자는 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 척도 평가를 완료하였다. 관찰-만 하는 그룹에서 피험자의 경우, CR-PCSS를 특정 시점에서 완료하였다.

재치료 또는 재투약으로서 CCH를 받기로 선택된 피험자의 경우, 연구자는, 피험자가 선별 B 방문 (기준선)에서 PR-PCSS를 사용하여 이들의 자가-평가를 완료한 후, 엉덩이 및 허벅지에 대해 CR-PCSS를 사용하여 실시간 평가로 4곳의 치료 부위 (사분면)의 셀룰라이트 중증도를 결정하였다. 선택된 적격의 치료 부위는 피험자의 재량대로 였다. 치료 방문 1, 22 및 43일째 및 방문 71일째에 주사 전에, 연구자는 CR-PCSS를 사용하여 실시간 평가로 선택된 치료 부위를 평가하였다. 360일째 이후에 치료 지속성에 대해 평가한, 이중-맹검 연구에서 원래 CCH로 처리된 피험자의 경우, CR-PCSS를 특정 시점에서 완료하였다.

I-GAIS를, 이중-맹검 연구의 할당된 치료 부위의 치료전 1일째 이미지를 사용하여 최종 연구 방문 (12개월 또는 조기 종료)에서 관찰만 수행한 그룹에서 피험자에 대해 완료하였다. I-GAIS를 치료 과정의 71일째 및 12-개월 또는 EOS 방문에서 CCH 치료를 받기로 선택된 피험자에 대해 완료하였다. 이러한 평가를 수행하기 위해, 연구자는, 71일째 및 12 개월 또는 EOS 방문에 실시간 평가에서 피험자의 선택된 치료 부위의 셀룰라이트를 선별 B 치료전 (기준선) 이미지와 비교하여, 선택된 치료 부위의 선별 B 디지털 이미지로부터 개선 정도를 측정하였다.

관찰-만 하는 그룹에서 피험자에 대해, Hexsel CSS를 특정 시점에서 수행하였다. 재치료를 선택한 피험자에 대해, Hexsel CSS를 특정 시점에서 수행하였다.

셀룰라이트 중증도에 대한 복합 종점은 복합 응답자의 비율이었다. 복합 응답자는 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 (또는 1) 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 (또는 1) 레벨 개선된 치료 부위를 갖는 피험자로서 정의되었다. 이들 종점을 처리된 치료 부위 및 전반적인 (엉덩이 및 허벅지)에 의해 및 적합한 기술 통계학을 사용하는 연구일에 의해 요약하였다.

처리된 치료 부위 (사분면)에 대한 다른 종점은 다음을 포함하였다:

PR-PCSS에서 기준선으로부터 변화.

ㆍ PR-PCSS가 개선된 각 수준에서 비율:

- PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로 정의된 응답자의 비율 (피험자 평가).

- PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로 정의된 응답자의 비율 (피험자 평가).

ㆍ CR-PCSS에 대한 기준선으로부터 변화

ㆍ CR-PCSS가 개선된 각 수준에서 비율:

- CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로서 정의된 연구자 응답자의 비율 (연구자 평가).

- CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로서 정의된 연구자 응답자의 비율 (연구자 평가).

ㆍ I-GAIS의 각 수준에서 응답자의 비율:

- 71일째 및 360일째에 I-GAIS의 각 수준에서 피험자의 비율.

ㆍ S-GAIS의 각 수준에서 응답자의 비율:

- 71일째 및 360일째에 S-GAIS의 각 수준에서 피험자의 비율.

ㆍ 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 척도의 각 수준에서 각 수준에서 응답자의 비율.

ㆍ 선별 방문까지 Hexsel CSS에서 총 점수의 변화.

각각의 처리된 치료 부위에 대한 관찰 종점은 다음을 포함하였다:

ㆍ CR-PCSS 및 PR-PCSS 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 (또는 1) 개선된 피험자로 정의된 복합 응답자의 비율.

ㆍ PR-PCSS의 기준선으로부터 변화.

ㆍ PR-PCSS가 개선된 각 수준의 비율.

- PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 피험자로 정의된 응답자의 비율.

- PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 피험자로 정의된 응답자의 비율.

ㆍ CR-PCSS의 기준선으로부터 변화.

ㆍ CR-PCSS가 개선된 각 수준에서 비율:

ㆍ 360일째에 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 척도의 각 수준에서 응답자의 비율.

ㆍ 연구 201의 71일째에서 360일째 또는 360일째 이후에 장기간 지속성 방문까지 CSS의 총 점수 변화

D. 지속성 방법론

치료 지속성의 평가는 연구 201에서 활성 치료를 받고 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 적어도 1 레벨 개선된 등급을 받은 피험자에서 2 년 이하의 관찰을 포함하였다. 연구 201에서 CCH를 투여받고 현재 연구에서 또한 CCH를 투여받은 피험자의 경우, 연구 201에서 치료된 본래 치료 부위는 개방-표지 연구 동안 치료된 모든 치료 부위 (사분면)에 추가하여 현재 연구의 720일째까지 평가되었다. 지속성 집단은 또한 연구 201에서 CCH를 투여받았지만 이러한 연구에서 추가 치료를 받지 않기로 선택한 피험자 및 연구 201에서 위약을 투여받고 현재 연구에서 CCH를 투여받은 피험자를 포함하였다.

360일째 이후에 지속성에 대해 평가되는 피험자의 경우, 피험자는: (a) 이중-맹검 연구 201에 참여하고 완료하여야 하고, (b) 이중-맹검 연구 201에서 활성 CCH를 투여받아야 하고, (c) 이중-맹검 연구 201에서 동일한 방문에서 71일째에 또는 그전에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 적어도 1 레벨 개선을 성취하여야 하고, (d) 연구에 참여하는 동안 햇빛에 각각의 노출 전에 CCH-201 처리된 치료 부위에 자외선차단제를 자발적으로 도포하여야 한다 (즉, EOS를 통한 선별).

치료 효과의 지속성은 CR-PCSS 및 PR-PCSS에서 셀룰라이트 평가의 종적(longitudinal) 응답을 기초로 하였다. 처리된 치료 부위 (사분면)에 관련된 CR-PCSS, PR-PCSS 및 이들의 조합 (즉, 둘 다의 점수에 대한 복합 점수, 1-레벨 또는 2-레벨 개선)에 대한 각 수준 (즉, 1-레벨 또는 2-레벨 개선)에서 응답자의 수 및 백분율을 연구일별로 요약하였다.

치료 실패를, CR-PCSS 및 PR-PCSS가 특정 후속조치 기간 동안 기준선으로 되돌아가거나 CCH-처리된 치료 부위가 악화된 활성 응답자로서 정의하였다. 수 및 백분율을 연구일 (즉, 180, 360, 540, 및 720일째)별로 요약하였다.

응답자는 다음 2개의 집단이다:

ㆍ 이중-맹검 처리된 피험자에 대한 지속성 집단: 이중-맹검 연구 (연구 201)에서 각각의 척도 (CR-PCSS 및 PR-PCSS)에서 CCH로 처리된 치료 부위에 대해 기준선으로부터 (연구 201의) 71일째에 적어도 1 레벨의 개선을 나타내고 2 년 이하 동안 이어지는 지속성 집단에서 모든 피험자.

ㆍ 개방-표지 피험자에 대한 지속성 집단: 연구 202에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 CCH로 처리된 치료 부위에 대해 기준선으로부터 (연구 202의) 71일째에 적어도 1 레벨 개선을 나타내고 1 년 이하 동안 이어지는 지속성 집단에서 모든 피험자.

E. 안전성 평가

안전성 변수는 다음을 포함하였다: AE, 주사 부위 반응/국소 내성(tolerability), 활력 징후, 임상적 실험실 파라미터 (혈액학, 혈액 화학, 및 소변검사를 포함함), 및 면역원성.

F. 연구 피험자

259명의 피험자는 연구 201로부터 이월되고, 현재 연구에 참여하고, 관찰 집단에 포함되었다 (표 80). 관찰 집단은 이전에 CCH로 처리된 121명의 피험자 및 연구 201에서 이전에 위약으로 처리된 138명의 피험자를 포함하였다. 관찰 집단에서 53 (20.5%)명의 피험자는 이중-맹검 처리된 피험자에 대한 지속성 집단에 포함되었다. 이들 피험자는 동일한 방문에서 연구 201에서 71일째 방문에서 또는 그 전에 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 적어도 1-레벨 개선을 나타내었다.

치료 단계 동안, 200명의 피험자는 이러한 연구에서 적어도 1 용량의 CCH를 투여받았고, 안전성 집단에 포함되었다 (표 81). 안전성 집단에 포함된 피험자 중에서, 193명의 피험자는 현재 연구에서 치료를 위해 선택된 치료 부위에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다 대해 기준선 및 적어도 1 기준선-후 평가를 받고, 유효 집단에 포함되었다. 3명의 피험자는 엉덩이부터 허벅지로 치료 영역의 선택을 바꾸고, 연구 202 치료 과정에서 엉덩이에 이어 허벅지에서 치료를 받고, 8명의 피험자는 연구 202 치료 과정에서 허벅지부터 엉덩이로 치료 영역을 바꾸었다. 이들 피험자를 둘 다의 치료 영역에 대해 계수하였다.

치료 단계 동안, 피험자는 2가지 이하의 치료 과정을 받았다. 연구 201에서 위약을 투여받은 피험자는 2가지 이하의 치료 과정 이러한 연구에서 받을 수 있다. 연구 201에서 CCH를 투여받은 피험자는 이러한 연구에서 1가지 치료 과정을 받았다.

이러한 연구 동안, 163명의 피험자는 이러한 연구에서 두번째 치료 과정을 받고, 안전성 집단에 포함되었다. 이러한 재치료된/재투약된 처리 그룹은, (연구 201에서 이들의 첫번째 치료 과정을 받았던) 이러한 연구에서 이들의 CCH의 두번째 치료 과정을 받은 88명의 피험자 및 이러한 연구에서 이들의 첫번째 및 두번째 치료 과정 둘 다를 받은 75명의 피험자로 구성된다.

유효 집단은 이러한 연구에서 두번째 치료 과정을 받은 162명의 피험자를 포함하였다. 이러한 재치료된/재투약된 처리 그룹은 연구 201에서 이들의 첫번째 치료 과정을 받았던 이러한 연구에서 이들의 CCH의 두번째 치료 과정을 받은 87명의 피험자 및 이러한 연구에서 이들의 첫번째 및 두번째 치료 과정 둘 다를 받은 75명의 피험자로 구성되었다.

지속성 집단에서 42명의 피험자를 이러한 연구에서 치료 단계로 도입시키고, 이중-맹검 처리된 피험자의 지속성 집단에 포함시켰다 (표 81).

개방-표지 처리된 피험자에 대한 지속성 집단은 124명의 피험자로 구성되었다. CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 치료 부위에 대해 기준선으로부터 71일째에 적어도 1 레벨 개선을 나타내는 지속성 집단에서 모든 피험자는, 개방-표지 연구 (연구 202)에서 CCH으로 처리되었다. 이러한 집단은 다음 그룹을 포함하였다:

1. 연구 201에서 CCH를 투여받고 연구 CCH-201에서 치료 과정 1에 응답하고 재투약되거나 재치료된 피험자.

ㆍ 연구 201에서 CCH를 투여받은 피험자는 재치료되고, 치료된 영역의 셀룰라이트 중증도 점수는 되돌아가거나 연구 201 기준선 점수보다 악화되었다. 이들 피험자는 이전에 처리된 영역이 CCH로 재치료되도록 선택될 수 있다

ㆍ 재투약된 피험자는 연구 201에서 CCH를 투여받았다

2. 연구 201에서 위약을 투여받고 초기에 연구 202에서 처리되고, 치료 과정 I에서 응답자인, 피험자.

3. 연구 201에서 위약을 투여받고, 연구 202에서 2가지 치료 과정을 받고, 치료 과정 2에 대한 응답자인, 피험자.

G. 피험자의 배치:

도 28은 피험자가 배치되는 방법을 요약한다.

(i) 피험자의 배치 (관찰 단계): 관찰 단계 동안, 259명의 피험자를 평가하고, 222 (85.7%)명의 피험자가 이러한 단계를 완료하였다 (표 82). 전반적인, 37명의 피험자는 다음 이유로 중단하였다: CCH에 노출되지 않고 호산구가 약간 증가하는 AE (1명의 피험자; 0.4%), 후속조치 상실 (13명의 피험자; 5%), 피험자에 의한 철회 (13명의 피험자, 5%), 및 기타 (10명의 피험자, 3.9%). 다른 범주는 선별 실패, 치료 단계에 참여를 거부하는 피험자, 피험자 등록 연구일 272에 현장 폐쇄, 또는 연구 방문을 준수하지 않는 피험자를 포함하였다.

(ii) 피험자의 배치 (치료 단계): 216명의 피험자를 치료 단계를 위해 선별하고, 200명의 피험자를 등록하고, 156 (78%)명의 피험자는 치료 단계를 완료하였다 (표 83). 전반적으로, 허벅지 처리된 영역보다 엉덩이 처리된 영역이 더 컸다. 104명의 피험자는 엉덩이에서 처리되고, 96명은 허벅지 영역에서 처리되었다.

치료 단계 동안, 163명의 피험자는 CCH에 재-노출되었다. 163명의 재-노출된 피험자의 그룹은 연구 201에서 이들의 첫번째 치료 과정을 받았던 치료 과정 I에서 CCH에 재-노출된 88명의 피험자, 및 치료 과정 2에 재-노출된 75명의 피험자를 포함하였다.

치료 단계 동안, 112명의 피험자는 초기에 치료 과정 1로 처리되고, 88명의 피험자는 치료 과정 1에 재-노출되었다 (82명의 피험자가 재투약되고, 단지 6명의 피험자가 재치료되었다). 82명의 재투약된 피험자는 연구 201에서 CCH를 투여받았고, 연구 201에서 치료된 부위 이외의 적격인 치료 부위에서 치료를 받기로 선택되었다. 재치료된 6명의 피험자는 연구 201에서 CCH를 투여받고, 이들의 처리된 영역의 셀룰라이트 중증도 점수는 기준선 점수으로 되돌아가거나 연구 201 기준선 점수보다 높았다. 이들 피험자는 이전에 처리된 치료 부위가 CCH로 재치료되도록 선택되었다.

75명의 피험자는 연구 202에서 이들의 첫번째 및 두번째 치료 과정 둘 다를 받았다. 정의에 의해, 치료 과정 2에서 모든 피험자는, CCH에 재-노출되었다. 대부분 (73/75명의 피험자; 97.3%)의 피험자는 재투약되고, 단지 2명의 피험자는 재치료된다.

156명의 피험자는 연구를 완료하였다. CCH를 중단한 피험자의 분포는 엉덩이 대 허벅지에 처리된 피험자 (22 [21.2%] 대 22 [22.9%] 피험자)와 유사하였다.

H. 효능 결과

1. 임상적 종점

복합 CR-PCSS/PR-PCSS 종점에 대한 응답을 연구 201로부터의 활성 응답자에서 치료 단계 동안 및 관찰 단계 동안 평가하였다. 셀룰라이트 중증도에 대한 복합 종점을 복합 응답자의 비율로서 정의하였다. 응답자를 (연구 201에서) CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 1 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1-레벨 개선된 피험자로서 정의하였다. 활성 응답자는 연구 201에서 CR-PCSS 및 PR-PCSS 둘 다가 치료 부위에 대해 기준선으로부터 적어도 1-레벨 개선된 CCH로 처리된 피험자였다.

연구 202의 관찰 단계 동안, 연구 201로부터 이월되고 치료된 영역에서 활성 응답자인 피험자를, 2 년 이하 동안 관찰하였다. 피험자를 연구 202의 치료 단계 동안 처리하고, 2-레벨 복합 응답자를 1 년 이하 동안 관찰하였다. 치료 실패를, CCH를 투여받고 CR-PCSS 및 PR-PCSS이 CCH-처리된 영역에서 기준선으로 되돌아간 활성 응답자로서 정의하였다. 치료 효과의 지속성을 치료 실패의 역으로서 계산하였다. 분석을 2-레벨 복합 응답자인 피험자 및 적어도 1-레벨 복합 응답을 갖는 피험자에서 수행하였다.

셀룰라이트 중증도에 대한 복합 종점은 복합 응답자의 비율로서 정의되었다. 이는 (연구 201에서) CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 (또는 1) 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 (또는 1) 레벨 개선된 피험자로 정의되었다. 이러한 분석은 관찰 및 치료 단계에 등록된 피험자에 대해 수행되었다. 관찰 단계 동안 1-레벨 및 2-레벨 복합 응답자에서 응답의 지속성에 대한 연구자의 평가는 이중-맹검 방식으로 수행되었다.

평가는 치료 부위별로 및 피험자별로 수행되었다. 따라서, 응답을 상이한 치료 과정 동안 상이한 치료 부위에서 CCH로 처리된 피험자에 대한 치료 부위별로 개별적으로 평가하였다. 1곳의 치료 부위에서 응답한 피험자는, 치료되는 경우 또다른 치료 부위에서 동일하게 또는 전혀 응답하지 않을 수 있기 때문에, 이용가능한 경우 1-레벨 또는 2-레벨 복합 응답자로서 고려되었다. 응답의 지속성을 연구 201에서 71일째에 적어도 1-레벨 또는 2-레벨 복합 응답을 갖는 피험자에서 평가하였다.

180일째에 또는 그 이후에 2-레벨 복합 응답자인 26명의 피험자가 있었다 (19 엉덩이- 및 7 허벅지-처리된 영역를 포함함). 이들 피험자는 연구 202 동안 1 또는 2가지 치료 과정을 받았다. 연구 202에서 관찰된 모든 산정가능한 피험자는, 180일째 (26명의 피험자; 100%) 및 360일째 (21명의 피험자; 100%)에 2-레벨 응답을 유지하였다. 새로 처리된 영역에 대한 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급이 이들의 기준선 (연구 202에서) 등급으로 되돌아가거나 악화된 2-레벨 복합 응답자인 피험자는 없었다. 이러한 연구에서 처리된 피험자에 대해, 2-레벨 복합 응답은 계속되고, 180 및 360일째에 유사하고, 엉덩이 및 허벅지-처리된 영역에서 유사하였다.

연구 202 동안 180일째에 1-레벨 복합 응답자인 124명의 피험자 (72 엉덩이- 및 54 허벅지-처리된 영역 포함) 및 360일째에 1-레벨 복합 응답을 유지한 114명의 피험자가 있었다. CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급이 이들의 기준선 (연구 202에서) 등급으로 되돌아 가거나 악화되어 치료 실패로서 평가된 피험자는 없었다. 1-레벨 복합 응답은 계속되었고, 180 및 360일째에 유사하고, 엉덩이- 및 허벅지-처리된 영역에서 유사하였다.

2. 효능의 지속

이러한 연구는 선택되어 등록된 셀룰라이트를 갖는 모든 피험자에서 2 년 (24 개월) 동안 예정된 간격으로 CCH의 장기간 안전성을 평가하였다. 적격의 피험자는 1 엉덩이 또는 1 허벅지에서 처리되고, 적격성에 좌우되어, 1 엉덩이 또는 1 허벅지에서 치료의 두번째 과정으로 처리될 수 있다. 응답의 지속을 연구 201에서 CCH으로 처리된 피험자에서 2 년 이하 동안 및 연구 202에서 CCH의 이들의 초기 치료를 받은 피험자에서 12 개월 이하 동안 평가하였다. 연구 201에서 치료받은, 연구 202에서 720일째에 평가된 피험자에서 이용가능한 데이터는 2 년 이하 동안 CR-PCSS 및 PR-PCSS 응답의 지속을 뒷받침하였다.

이러한 연구의 결과는 뒷받침하는 데이터를 2-년 이하 동안 장기간 안전성에 대해 및 CCH 치료 부위당 0.84 mg × 21 일 간격의 3개 치료 세션의 효과의 지속에 대해 제공하였다. 이는 연구 202에서 처리된 피험자의 경우 (1 년 이하) 효과의 지속, 및 연구 201에서 CCH로 처리된 피험자의 보다 장기간 효과의 지속을 포함하고, 2 년 이하 동안 관찰된 연구 202에서 확장 연구에 등록하였다.

피험자는 현행 개방-표지 연구 (연구 202)에 등록하고, 기준선으로부터 CR-PCSS 및 PR-PCSS의 셀룰라이트 중증도가 대략 1 레벨 감소 (즉, 개선)됨을 경험하였다. 이러한 감소의 크기는 이중-맹검 연구에서 피험자가 경험한 CR-PCSS 및 PR-PCSS 감소와 유사하였다.

(a) 1 년 이하 동안 PR-PCSS 응답의 지속: PR-PCSS의 기준선으로부터 변화의 지속은 연구 201에서 CCH로 처리되고, 연구 202에서 처리되고, 연구 202에서 재-노출된 피험자 그룹 간에 일관되었다. 연구 201로부터 연구 202에 등록된 259명의 피험자 중에서, 연구 201에서 71일째에 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는, CCH-처리된 그룹 (n = 121)에서 -1.2 (0.89)이고, 위약-처리된 그룹 (n = 138)에서 -0.6 (0.74)이었다. 1 년 이하 동안 관찰시, CCH-처리된 피험자는 PR-PCSS 등급이 개선됨을 계속해서 나타내었다. CCH-처리된 그룹의 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는 180일째 (n = 119), 270일째 (n = 105), 및 360일째 (n = 96)에 -0.7 (0.88), -0.7 (0.96), 및 -1.0 (0.91)이었다.

연구 202에 등록하고 치료된 피험자 중에서, 193명의 피험자 (103 엉덩이- 및 90 허벅지 처리된 영역)를 치료 과정 1 동안 유효성에 대해 평가하였다. 치료 과정 1을 받은 피험자는 초기에 CCH로 처리된 피험자 및 재치료되거나 재투약된 피험자에 포함되었다. 1-년 이하 동안 관찰시, CCH-처리된 피험자는 PR-PCSS 등급이 기준선으로부터 계속해서 개선됨을 나타내었다. 기준선으로부터 전반적인 평균 (SD) 변화는 180, 270, 및 360일째에 각각 -1.1 (0.85), -1.1 (0.87), 및 -1.0 (0.83)이었다. 응답은 양쪽 엉덩이 (n = 103) 및 허벅지-처리된 영역 (n = 90)과 유사하였다 (도 29).

이러한 연구에서, 재-노출되고 1-년 이하 동안 관찰시 유효성에 대해 평가된 162명의 피험자, CCH-처리된 피험자는 계속해서 PR-PCSS가 기준선으로부터 180 (-1.0 [0.83]) 및 360 (-1.0 [0.83])일째에 개선됨을 나타내었다. 응답은 두번째 치료 과정 후처럼 첫번째 치료 과정 후 엉덩이 및 허벅지-처리된 영역에서 유사하였다 (도 30 및 도 31).

(b) 1 년 이하 동안 CR-PCSS 응답의 지속: CR-PCSS의 기준선으로부터 변화의 지속은 연구 201에서 CCH로 처리되고, 연구 202에서 처리되고, 연구 202에서 재-노출된 피험자의 그룹 간에 일관되었다.

연구 -201로부터 연구 202에 등록된 121명의 CCH-처리된 피험자 중에서, 연구 -201에서 71일째에 기준선으로부터 평균 (SD) 변화는, CCH-처리된 그룹에서 -0.8 (0.88)이고, 위약-처리된 그룹에서 -0.3 (0.6)이었다. 1 년 이하 동안 관찰시, CCH-처리된 피험자는 계속해서 CR-PCSS 등급이 개선됨을 나타내었다. 기준선으로부터 전반적인 평균 (SD) 변화는 180, 270 및 360일째에 각각 -0.6 (0.80), -0.6 (0.76) 및 -0.9 (0.86)였다.

연구 202에 등록하고 치료된 피험자 중에서, 193명의 CCH-처리된 피험자 (103 엉덩이-처리된 영역 및 90 허벅지-처리된 영역)를 이러한 연구의 치료 과정 1 동안 유효성에 대해 평가하였다. 치료 과정 1을 받은 피험자는 초기에 처리된 피험자 및 재치료되거나 재투약된 피험자를 포함하였다. 1 년 이하 동안 관찰시, CCH-처리된 피험자는 CR-PCSS 등급이 개선됨을 계속해서 나타내었다. 기준선으로부터 전반적인 평균 (SD) 변화는 180, 270, 및 360일째에 각각 -1.0 (0.80), -1.1 (0.83), 및 -1.1 (0.82)이었다 (도 32). 응답은 양쪽 엉덩이 (n = 103) 및 허벅지-처리된 영역 (n = 90)과 유사하였다.

연구 202에 재-노출되고 1-년 이하 동안 관찰시 유효성에 대해 평가된 162명의 피험자 중에서, CCH-처리된 피험자는 180 및 360일째에 CR-PCSS가 개선됨을 계속해서 나타내었다. 기준선으로부터 전반적인 평균 (SD) 변화는 180일째에 -1.0 (0.80)이고, 360일째에 -0.9 (0.77)였다. 응답은 두번째 치료 과정 후와 같이 첫번째 치료 과정 후 엉덩이 및 허벅지-처리된 영역에서 유사하였다 (도 33 및 도 34).

(c) 2 년 이하 동안 2-레벨 복합 응답의 지속: 2-레벨 복합 응답자 (5 엉덩이 및 2 허벅지 CCH-처리된 영역)인 7명의 피험자를, 720 일 이하 동안 평가하였다. 720일째에, 7명의 피험자 중 누구도 이들의 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급이 이들의 기준선 점수로 돌아오지 않거나 (연구 201에서) 악화되지 않았다.

(d) 1 년 이하 동안 1-레벨 복합 응답의 지속: ≥1-레벨 복합 응답자 (13 엉덩이 및 10 CCH-처리된 허벅지 영역)인 23명의 피험자는 720 일 이하 동안 평가되었다. 720일째에, 21 (91.3%)명의 피험자에서, 어느 누구도 이들의 CR-PCSS 및 PR-PCSS 등급이 이들의 기준선 점수 (연구 201에서)로 되돌아가거나 악화되지 않았다.

3. 내성 효과

두번째 치료 과정에 대한 내성 (CCH에 재-노출시 시간이 경과함에 따라 치료적 용량(들)에 응답하는 능력의 상실)은 이러한 연구에서 평가하였다. 현재 연구로부터의 데이터는 CCH에 재-노출시 내성의 결핍 (시간이 경과함에 따라 치료적 용량(들)에 응답하는 능력의 상실)을 뒷받침하였다. 163명의 피험자는 치료에 재-노출되었다. 이러한 그룹은 연구 201에서 이들의 첫번째 치료 과정을 받은 적이 있는, 치료 과정 1에 재-노출된 88명의 피험자, 및 치료 과정 2에 재-노출된 75명의 피험자로 구성되었다.

75명의 피험자는 연구 202에서 이들의 첫번째 및 두번째 치료 과정 둘 다를 받았다. 정의에 의해, 치료 과정 2에서 모든 피험자는, CCH에 재-노출되었다. 대부분 (73/75명의 피험자; 97.3%)의 피험자는 재투약되고, 단지 2명의 피험자는 재치료되었다. CCH 치료에 재-노출된 (재투약된 및/또는 재치료된) 피험자에서 임의의 안전성 우려를 시사하는 어떠한 징후도 없다.

(a) PR-PCSS 등급 기준선으로부터 변화 (재치료된/재투약된): 이러한 연구에서, 162명의 피험자 (91 엉덩이- 및 71 허벅지-처리된 영역 포함)를 이들의 첫번째 치료 과정 후 및 이들의 CCH의 두번째 치료 과정 후 PR-PCSS에 대한 유효성에 대해 평가하였다 (1명의 피험자는 누락 평가 때문에 유효 집단에 포함되지 않았다) (표 84).

초기 치료 후 71일째 및 360일째에 평가시, 두번째 치료 과정 후 관찰된 PR-PCSS의 변화는 첫번째 치료 과정 후 동일한 시점에 관찰된 변화와 유사하고 중첩되었다. 360일째에, PR-PCSS 등급의 전반적인 평균 (SD) 변화는 첫번째 치료 과정 후 -1.0 (0.82)이고 (표 84), 두번째 치료 과정 후 -1.0 (0.83)이었다 (표 85). 유사한 감소가 엉덩이- 및 허벅지-처리된 영역에서 관찰되었다. 엉덩이 처리된 영역에서 변화 (도 31)는 허벅지- 및 엉덩이 처리된 영역의 결합된 분석에서 변화 (도 30)와 유사하였다. 연구 202에서 재-노출된 피험자는, 이들의 첫번째 및 단독 치료 과정 후 이중-맹검 연구 (연구 201, 302, 및 303)에서 피험자에서 관찰된 응답과 유사한 크기의 PR-PCSS에서 셀룰라이트 중증도의 감소를 경험하였다.

(b) CR-PCSS 등급 기준선으로부터 변화 (재치료된/재투약된): 이러한 연구에서, 162명의 피험자 (91 엉덩이- 및 71 허벅지-처리된 영역 포함)는 CCH의 이들의 첫번째 및 두번째 치료 과정을 받고, CR-PCSS에 대한 유효성에 대해 평가받았다 (1명의 피험자는누락 평가 때문에 유효 집단에 포함되지 않았다) (표 86).

초기 치료 후 71일째 및 360일째에 평가시, 두번째 치료 과정 후 관찰된 CR-PCSS의 변화는 첫번째 치료 과정 후 동일한 시점에 관찰된 변화와 유사하고 중첩되었다. 360일째, 첫번째 치료 과정 후 CR-PCSS 등급의 전반적인 평균 (SD) 변화는 -1.1 (0.88) (표 86)이었고, 두번째 치료 과정 후 -0.9 (0.77) (표 87)였다. 유사한 감소가 엉덩이 및 허벅지-처리된 영역에서 관찰되었다. 엉덩이 처리된 영역의 변화 (도 34)는 허벅지- 및 엉덩이-처리된 영역의 결합된 분석에 대한 변화와 유사하였다 (도 33). 연구 -202에서 재-노출된 피험자는, 이들의 첫번째 및 단독 치료 과정 후 이중-맹검 연구 (연구 201, 302, 및 303)의 피험자에서 관찰된 응답과 유사한 정도의 CR-PCSS에서 셀룰라이트 중증도 감소를 경험하였다.

(c) 재치료된/ 재투약된 피험자에서 Hexsel CSS 총 등급, I-GAIS, S-GAIS, 및 EFP 치료 척도를 사용한 피험자 만족도의 변화: 재-노출된 피험자에서, 셀룰라이트 중증도를 감소시키는데 있어 CCH의 유효성을 Hexsel CSS로 평가하고, 심미적 외관 개선을 연구자 (I-GAIS)에 의해 및 피험자 (S-GAIS)에 의해, 및 EFP 치료 척도를 사용한 피험자 만족도를 기초로 평가하였다. 이들 척도로 평가된 치료 후 유효성은 치료-비처리 피험자에서 및 치료 후 재-노출된 피험자에서 유사하고, 이는 재치료되거나 재투약된 경우 내성의 결핍 또는 CCH에 대한 타키필락시스(tachyphylaxis)를 뒷받침한다.

I. 안전성 평가

CCH의 안전성 프로파일은 이전 연구의 안전성 결과와 일관되었다. 연구 동안 수반되는 의약에서 어떠한 임상적으로 의미 있는 변화도 없었다. 연구 동안 혈청 화학 파라미터, 혈액학 파라미터, 소변검사 결과, 또는 활력 징후에서 기준선으로부터 평균 변화에서 관찰된 어떠한 임상적으로 의미 있는 경향도 없었다. 항-AUX-I 및 항-AUX-II 항체를 갖는 피험자에서 또는 중화 항체를 갖는 피험자에서 어떠한 임상 관련 조사결과도 없었다.

J. 결과 및 결론의 요약

응답의 지속성 (완전한 상실 부족)을 연구 201로부터의 산정가능한 2-레벨 복합 응답자에서 관찰하였다. 어떠한 피험자도 CCH-처리된 영역에서 기준선 CR-PCSS 및 PR-PCSS 수준으로 되돌아 가거나 악화되지 않았다. 지속적인 응답을 하기 동안 관찰하였다:

ㆍ 180 및 360일째에 각각 19 (100%) 및 16 (100%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 540 및 720일째에 7 (100%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 각각 26 (100%) 및 21 (100%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

응답의 지속성 (완전한 상실 부족)을 연구 -201로부터 산정가능한 1-레벨 복합 응답자에서 입증하였다. 지속적인 응답을 하기 동안 관찰하였다:

ㆍ 180 및 360일째에 각각 50 (94.3%) 및 43 (95.6%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 540 및 720일째에 각각 22 (95.6%) 및 21 (91.3%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 각각 124 (100%) 및 114 (100%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

연구 201로부터 2-레벨 CR-PCSS 활성 응답자 중에서, 2-레벨 응답을 하기 동안 유지하였다:

ㆍ 360일째에 10 (47.6%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 540 및 720일째에 각각 3 (30%) 및 4 (40%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 32 (62.7%) 및 26 (56.5%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

1-레벨 CR-PCSS 활성 응답자 중에서, 1-레벨 응답을 하기 동안 유지하였다:

ㆍ 360일째에 38 (84.4%)명의 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 540일째에 19 (82.6%)명의 이중-맹검 처리된 피험자에서 및 720일째에 16 (69.6%)명의 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 109 (87.9%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자 및 96 (84.2%)명의 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

연구 201로부터 -2-레벨 PR-PCSS 활성 응답자 중에서, 2-레벨 응답을 하기 동안 유지하였다:

ㆍ 180 및 360일째에 각각 10 (31.3%) 및 14 (48.3%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 540 및 720일째에 7 (53.8%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 각각 33 (66.7%) 및 24 (54.5%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

연구 201로부터 1-레벨 PR-PCSS 활성 응답자 중에서, 1-레벨 응답을 하기 동안 유지하였다:

ㆍ 180 및 360일째에 각각 40 (75.5%) 및 35 (77.8%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 관찰 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 각각 19 (82.6%) 및 20 (87.0%)명의 산정가능한 이중-맹검 처리된 피험자에서 장기간 지속성 단계.

ㆍ 180 및 360일째에 각각 103 (83.1%) 및 92 (80.7%)명의 산정가능한 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 단계.

응답의 지속성은 또한 2-레벨 및 1-레벨 CR-PCSS 및 2-레벨 및 1-레벨 PR-PCSS 응답자에서 및 연구 201로부터 관찰 단계, 장기간 지속성 단계 및 치료 단계 동안 응답자에서 관찰되었다.

360일째에 CR-PCSS 등급이 대략 1-레벨 감소됨은 관찰 단계 동안 및 치료 과정 1 및 2를 받은 치료 단계 동안 이중-맹검 및 개방-표지 처리된 피험자에서 관찰되었다. 유사한 유효성은 재투약되고 재치료된 피험자에서 관찰되고; CCH (피험자 재-노출된 대 치료 비처리)의 두번째 치료 후 치료 관찰 360일에서, CR-PCSS 등급의 평균 (SD) 변화는 -0.9 (0.77)였다.

360일째 PR-PCSS 등급의 대략 1-레벨 감소가 관찰 단계 동안 및 이중-맹검 및 개방-표지 처리된 피험자에서 치료 과정 1 및 치료 과정 2를 받는 치료 단계 동안 관찰되었다. 유사한 유효성을 CCH의 두번째 치료 후 관찰 360일째에 재투약되고 재치료된 피험자에서 관찰하였다. PR-PCSS 등급의 CCH (피험자 재-노출된 대 치료-비처리) 평균 (SD) 변화는 -1.0 (0.83)이었다.

셀룰라이트 중증도를 감소시키는데 있어 CCH의 유효성은 관찰, 장기간 지속성, 및 치료 단계 (치료 과정 1 및 2) 동안 Hexsel CSS, I-GAIS, S-GAIS, 및 EFP 치료 척도를 사용한 피험자 만족도에서 관찰되었다. CCH 치료 후 이들 척도의 크가 변화는 재치료되고 재투약된 피험자 및 치료-비처리 피험자 사이에서 비슷하였다.

ㆍ 하기 동안 Hexsel CSS 총 점수:

- 관찰 단계, CCH-처리된 피험자에서, 관찰 방문 360일째에, 위약-처리된 피험자에서 평균 (SD) 변화 -1.2 (1.47)와 비교하여, 71일째 기준선으로부터 Hexsel CSS 총 점수의 평균 (SD) 변화는 -2.2 (2.34)였다.

- 장기간 지속성 단계, 540일째에 기준선으로부터 변화 (연구 201)는 -1.0 (0.83)이고, 720일째에 -2.9 (1.74)였다.

- 치료 단계, 재치료되고 재투약된 피험자에서 360일째 기준선으로부터 변화 (연구 202)는 -2.4 (2.37)였다.

ㆍ 하기 동안 연구자에 의한 I-GAIS:

- 관찰 단계, CCH-처리된 피험자 중 반이 넘는 피험자(64.9%)의 셀룰라이트가, 연구자에 의해 I-GAIS가 매우 많이 개선된 (4.1%), 매우 개선되거나 (23.7%), 또는 개선됨 (37.1%)으로 평가되었다.

- 치료 단계, 치료 과정 1에 대해 360일째에, 총 피험자 중 대략 4분의 3 (73.2%)의 셀룰라이트가, 개선되거나 (81명의 피험자; 49.4%), 매우 개선되거나 (32명의 피험자; 19.5%), 또는 매우 많이 개선됨 (7명의 피험자; 4.3%)으로서 평가되었다.

- 치료 단계, 360일째에 치료 과정 2에 대해 전체 피험자의 반이 넘는 피험자(64.2%)가, 개선되거나 (24명의 피험자; 35.8%), 매우 개선되거나 (16명의 피험자; 23.9%), 또는 매우 많이 개선됨 (3명의 피험자; 4.5%)으로서 평가하였다.

- 치료 단계, 360일째에, 두번째 CCH 치료를 받는 피험자에서, 재치료되고 재투약된 피험자 중 3분의 2 초과 (71.8%)의 셀룰라이트가 개선된 64명 (45.1%), 매우 개선된 33명 (23.2%), 또는 매우 많이 개선된 5명 (3.5%)으로서 평가하였다.

ㆍ 하기 동안 피험자에 의한 S-GAIS:

- 관찰 단계, 총 CCH-처리된 피험자 중 3분의 2 초과 (69.1%)가, 개선되거나 (46명의 피험자; 47.4%), 매우 개선되거나 (18명의 피험자; 18.6%), 또는 매우 많이 개선됨 (3명의 피험자; 3.1%)으로서 이들의 셀룰라이트를 평가하였다.

- 치료 단계 동안, 360일째에 치료 과정 1에 대해, 전체 피험자의 3분의 2 초과 (66.2%)가, 개선되거나 (73명의 피험자; 44.8%), 매우 개선되거나 (18명의 피험자; 11%), 매우 많이 개선된 17명 (10.4%)으로서 이들의 셀룰라이트를 평가하였다.

- 치료 단계 동안, 360일째에, 치료 과정 2에 대해, 피험자 중 대략 반 (51.5%)이, 개선되거나 (24명의 피험자; 35.3%), 매우 개선되거나 (6명의 피험자; 8.8%), 또는 매우 많이 개선됨 (5명의 피험자; 7.4%)으로서 이들의 셀룰라이트를 평가하였다.

- 치료 단계 동안 360일째에 전체 피험자의 반이 넘는 (64.4%) 두번째 CCH 치료를 받은 피험자가, 개선되거나 (64명의 피험자; 44.8%), 매우 개선되거나 (14명의 피험자; 9.8%), 매우 많이 개선된 16명 (11.2%)으로서 이들의 셀룰라이트를 평가하였다.

ㆍ 하기 동안 피험자에 의한 EFP 치료 척도를 사용한 피험자 만족도:

- 관찰 단계, 360일째에, 41명(42.3%) 및 14 (14.4%)의 CCH-처리된 피험자가 치료에 만족하거나 매우 만족한다고 응답하였다.

- 치료 단계 동안, 치료 과정 1 동안 360일째에, 관찰 360일째, 55 (33.7%)명의 피험자는 만족하고, 26 (16.0%)명의 피험자는 치료에 매우 만족하였다.

- 치료 단계 동안, 치료 과정 2 동안 360일째에, 관찰 360일째, 21 (30.9%)명의 피험자는 만족하고, 10 (14.7%)명의 피험자는 치료에 매우 만족하였다.

- 치료 단계 동안, 두번째 CCH 치료를 받는 피험자에서, 50 (35%)명의 피험자는 만족하고, 25 (17.5%)명의 피험자는 치료에 매우 만족하였다.

이러한 연구로부터 데이터는, 193명의 피험자에서 1 년 이하 동안 치료 부위당 CCH 0.84 mg × 3개 치료 세션의 효과의 지속을 입증하였다. 효과의 지속을 또한 2-년 평가 동안 샘플링된 피험자에서 CCH 치료 후 2 년 이하 동안 입증하였다. 결과는 또한 엉덩이 또는 허벅지에 치료 부위당 치료 세션당 피하 0.84 mg 용량 CCH × 21 일 간격의 3개 치료 세션의 투여가, 비처리 피험자 및 재치료되고 재투약된 피험자 둘 다의 치료에 효과적임을 입증하였다. 셀룰라이트 중증도의 감소가 연구자 및 피험자 등급 척도를 포함하는 다중 장치에서 나타났다. 유효 평가의 결과는 엉덩이 및 허벅지-처리된 영역에서 유사하였다.

CCH 치료 부위당 0.84 mg × 3개 치료 세션의 두번째 치료 과정에 재-노출되고, 유효성에 대해 평가된 162명의 피험자에서, 치료에 대한 어떠한 내성도 관찰되지 않았다 (즉, 치료 효과 상실 없음). 이는 연구 202의 결과에 의해 뒷받침되고, 여기서, CR-PCSS 및 PR-PCSS에서 관찰된 감소는 이들의 첫번째 치료 과정 뿐만 아니라 중추적 단계 3 연구에서 관찰된 응답과 비교한 이들의 두번째 치료 과정 후 162명의 피험자의 응답과 유사하였다.

이러한 연구의 결과는 효과의 지속이 PR-PCSS 및 CR-PCSS 등급의 기준선으로부터 변화 및 1 년 동안 계속된 PR-PCSS 및 CR-PCSS의 지속된 응답으로 입증된 바와 같이 1-년 이하 동안 지속되었음을 입증한다. 연구 결과는 또한 2 년 이하 동안 1-레벨 및 2-레벨 복합 응답이 지속됨을 뒷받침하였다.

연구 202에서 CCH에 재-노출된 (즉, 재치료되거나 재투약된) 피험자는, 이들의 첫번째 치료 과정 후 이들 피험자에서 관찰된 응답과 그리고 이중-맹검 연구 (연구 201, 302, 및 303)의 피험자와 유사한 크기의 이들의 두번째 치료 과정 후 CR-PCSS 및 PR-PCSS에서 셀룰라이트 중증도의 감소를 경험하였다.

CCH에 대한 응답 지속성은 관찰, 장기간 지속성, 및 연구의 치료 단계 동안 산정가능한 피험자에서 입증되었다. 연구 201에서 2-레벨 복합 응답자 중에서, 모든 산정가능한 피험자는 누구도 180 및 360일째에 기준선 CR-PCSS 및 PR-PCSS 수준으로 되돌아오지 않고 응답의 지속성을 유지하였다. 연구 201에서 1-레벨 복합 응답자 중에서, 거의 모든 피험자는 180 및 360일째에 지속적인 치료 응답을 유지하였다. 유사한 결과를 이러한 연구에서 치료된 피험자에서 관찰하고; 모든 산정가능한 피험자는 180 및 360일째에 지속적인 응답을 유지하였다.

2 년 이하의 연구 201에서 기준선 점수로부터 장기간 지속성을 산정가능한 2-레벨 및 1-레벨 복합 응답자에서, CR-PCSS 응답자, 및 PR-PCSS 응답자에서 입증하였다. 연구 201에서 기준선으로부터 셀룰라이트 중증도에 미치는 CCH의 효과를 Hexsel CSS 총 점수, I-GAIS, S-GAIS, 및 EFP 치료 점수를 이용한 피험자 만족도로 측정하여, 연구 201에서 기준선으로부터 적어도 1 년 이하까지 유지하였다.

치료 부위당 0.84 mg CCH의 유효성을 이러한 연구에서 치료제 비처리된 및 재-노출된 (재치료된/재투약된) 피험자 둘 다에서 평가하였다. CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS 총 점수, I-GAIS, S-GAIS 및 EFP 치료 점수를 사용한 피험자 만족도로 평가된 유효 측정 결과는 관찰 집단에서의 결과와 일관되고, 셀룰라이트 중증도 개선을 연구자가 또는 피험자가 평가하는지에 상관없이 입증하였다. 유사한 결과를 재치료되고 재투약된 피험자에서 관찰하였다. 두번째 용량을 받기로 선택한 피험자 중에서, 소수의 피험자가 재치료되고, 대부분은 재투약되었음을 유의하는 것이 중요하다.

CCH의 이러한 단계 2 장기간, 개방-표지, 다중심 연구의 전반적인 결과는 EFP의 치료에서 CCH의 안전성, 내성, 유효성, 및 장기간 지속성의 추가 증거를 제공한다.

본원에 기재된 실시형태는 단지 예시하는 것을 의도한다. 당해 기술 분야의 숙련가는 변형 및 변경이 하기 청구범위에 포함되는 발명의 범위를 벗어나지 않고 수행될 수 있다는 것을 이해한다.

Claims

인간 환자의 양쪽 엉덩이(buttocks)에서 셀룰라이트의 중증도를 감소시키는 방법으로서:
a. 하기한 특징 중 적어도 2개를 갖는 콜라게나아제 조성물을 제공하는 단계:
i. 약 0.08 내지 7.70 (SRC 검정), 또는 약 0.3 내지 30.5 (GPA 검정)의 V_max (min^-1);
ii. 약 4.1 내지 410 나노몰 (SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1 mM (GPA 검정)의 K_M;
iii. 약 1.1 내지 107 (SRC 검정), 또는 약 93 내지 9,179 (GPA 검정)의 K_cat (sec^-1);
iv. 약 376 내지 37,222 (SRC 검정), 또는 약 4 내지 428 (GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초;
v. 약 5,140 내지 508,814 (SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934 (GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1;
vi. 약 60 kDa 내지 약 130 kDa, 또는 약 70 내지 약 130 kDa, 또는 약 80 내지 약 120 kDa, 또는 약 90 내지 약 120 kDa, 또는 약 100 내지 약 110 kDa의 분자 질량;
vii. 역상 HPLC(고압 액체 크로마토그래피)로 측정시 적어도 80%의 면적 순도;
viii. 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능;
ix. 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능;
x. 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능;
xi. 클로스트리파인, 젤라티나제, 및 류펩틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 불순물 면적 1% 이하;
xii. 1 cfu/mL 이하의 생균수(bioburden); 및
b. 이에 따라 치료적 유효량의 상기 콜라게나아제 조성물을 양쪽 엉덩이에 딤플(dimple) 내로 주사하는 단계를 포함하고, 여기서, 상기 셀룰라이트 외관 개선이 헥셀 셀룰라이트 중증도 척도 (Hexsel CSS; Hexsel Cellulite Severity Scale), 헥셀 함몰부 깊이 척도, 리커트 척도(Likert Scale), 딤플 분석, 임상의가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도 (CR-PCSS; Clinician Reported Photonumeric Cellulite Severity Scale), 환자가 보고한 광수치 셀룰라이트 중증도 척도 (PR-PCSS; Patient Reported Photonumeric Cellulite Severity Scale), 연구자의 전반적인 미적 개선 척도 (I-GAIS; Investigator Global Aesthetic Improvement Scale), 피험자의 전반적인 미적 개선 척도 (S-GAIS; Subject Global Aesthetic Improvement Scale), 환자가 보고한 셀룰라이트 영향 척도 (PR-CIS; Patient Reported Cellulite Impact Scale), 간이형 PR-CIS(PR-CIS Abbreviated), 피험자 자가-평가 척도 (SSRS; Subject Self-Rating Scale), 셀룰라이트 치료에 대한 피험자 만족도 (SSCT; Subject Satisfaction with Cellulite Treatment), 셀룰라이트 중증도의 임상의 평가 (사진 또는 기타 이미지), 바디-Q(Body-Q), 및 임상의 및/또는 환자가 셀룰라이트 중증도, 개선, 및/또는 환자 만족도를 평가하기 위해 사용되는 검증된 광수치 또는 기타 척도로 이루어진 그룹으로부터 선택된 척도 또는 기타 측정 도구에 의해 확립되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료되는 딤플이 이들의 크기 또는 서로 간의 거리에 좌우되지 않는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료되는 딤플이 피부 이완, 탄력 없음, 또는, 처진 피부가 없는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 환자가 다수의 치료 방문을 갖고, 상이한 딤플이 상이한 치료 방문에서 치료되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 주사가 ½ 인치 바늘로 수행되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 주사가, 상기 주사 위치를 제한하는 간격자, 눈금자, 종이 또는 다른 장치에 좌우되지 않는 임상의에 의해 투여되는, 방법.
제1항에 있어서, 적어도 하나의 주사가 상기 딤플의 최하점(nadir)에서 수행되는, 방법.
제1항에 있어서, 다수의 주사가 서로 2 cm 이내에서 수행되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료되는 딤플이 1 cm 미만의 길이이거나 2 cm 초과의 길이인, 방법.
제1항에 있어서, 상기 환자가 요법에 대해 신속한 응답 속도를 경험하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료가 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 기준선 등급을 갖는 모든 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료가 하기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 결과를 야기하는, 방법:
a. 상기 환자의 적어도 50%가 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 1 레벨 개선됨을 나타냄;
b. 상기 환자의 적어도 50%가 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 1 레벨 개선됨을 나타냄;
c. 상기 환자의 적어도 5%가 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 2 레벨 개선됨을 나타냄;
d. 상기 환자의 적어도 5%가 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 피험자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 2 레벨 개선됨을 나타냄; 및
e. 상기 환자의 적어도 5%가 딤플 크기의 감소를 경험함.
제11항에 있어서, 상기 딤플 크기 감소 파라미터가 용적, 길이, 너비, 및 깊이로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제11항에 있어서, 상기 딤플 크기 감소가 기준선으로부터 22, 43, 또는 71일째에 적어도 10% 감소인, 방법.
제1항에 있어서, 상기 주사되는 누적 콜라게나아제 용량이 약 5.04 mg인, 방법.
제1항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70
ii. K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰
iii. K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814
b. AUX-II (GPA 검정)
i. V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5
ii. K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1
iii. K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934
제1항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 3.8
ii. K_M, mM: 약 2.07x10^-4
iii. K_cat, sec^-1 : 약 53
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 18,799
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 256,977
b. AUX II (GPA 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 15.4
ii. K_M, mM: 약 1.6
iii. K_cat, sec^-1 : 약 4,636
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 216
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 2,997
제1항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 3개를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 4개를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 5개를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 약 1 mg 내지 20 mg의 하나 이상의 콜라게나아제를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 CCH를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 약 10,000 ABC 단위/0.58 mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 약 15,000 ABC 단위/mg 내지 20,000 ABC 단위/mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 10 mg이고, 상기 조성물이 약 20,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg 또는 약 175,000 내지 약 300,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 갖는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제25항에 있어서, 환자의 적어도 10%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제25항에 있어서, 환자의 적어도 20%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타내는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 치료가 CR-PCSS 및/또는 PR-PCSS로 측정된 다음 효능 종점 중 적어도 하나를 야기하는, 방법:
a. 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 2 레벨 개선;
b. 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 환자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 2 레벨 개선;
c. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 환자로서 정의되는 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 2-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선;
d. 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 1 레벨 개선;
e. 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 환자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 1 레벨 개선;
f. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 환자로서 정의되는 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 1-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선; 및
g. 기준선에서 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 등급을 갖는 모든 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 상기 개선은 상기 a. 내지 f. 중 하나 이상이다.
제1항에 있어서, 상기 치료가 딤플 분석에 의해 측정된 다음 효능 종점 중 적어도 하나를 야기하는, 방법:
a. 깊이가 적어도 5% 감소함;
b. 너비가 적어도 5% 감소함;
c. 길이가 적어도 5% 감소함;
d. 전체 용적이 적어도 5% 감소함; 및
e. 표면적이 적어도 5% 감소함.
인간 환자의 양쪽 엉덩이에서 셀룰라이트의 중증도를 감소시키는 방법으로서:
a. 하기한 특징 중 적어도 2개를 갖는 콜라게나아제 조성물을 제공하는 단계:
i. 약 0.08 내지 7.70 (SRC 검정), 또는 약 0.3 내지 30.5 (GPA 검정)의 V_max (min^-1);
ii. 약 4.1 내지 410 나노몰 (SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1 mM (GPA 검정)의 K_M;
iii. 약 1.1 내지 107 (SRC 검정), 또는 약 93 내지 9,179 (GPA 검정)의 K_cat (sec^-1);
iv. 약 376 내지 37,222 (SRC 검정), 또는 약 4 내지 428 (GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초;
v. 약 5,140 내지 508,814 (SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934 (GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1;
vi. 약 60 kDa 내지 약 130 kDa, 또는 약 70 내지 약 130 kDa, 또는 약 80 내지 약 120 kDa, 또는 약 90 내지 약 120 kDa, 또는 약 100 내지 약 110 kDa의 분자 질량;
vii. 역상 HPLC(고압 액체 크로마토그래피)로 측정시 적어도 80%의 면적 순도;
viii. 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능;
ix. 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능;
x. 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능;
xi. 클로스트리파인, 젤라티나제, 및 류펩틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 불순물 면적 1% 이하;
xii. 1 cfu/mL 이하의 생균수; 및
b. 치료 I에 따라서 치료적 유효량의 상기 콜라게나아제 조성물을 양쪽 엉덩이에 딤플 내로 주사하는 단계를 포함하고, 여기서, 멍은 치료 방문 후 약 3 일 내지 20 일에 색 강도(color intensity)가 현저하게 감소되거나 해결되는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 주사되는 누적 콜라게나아제 용량이 약 5.04 mg인, 방법.
제31항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70
ii. K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰
iii. K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814
b. AUX-II (GPA 검정)
i. V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5
ii. K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1
iii. K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934
제31항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 3.8
ii. K_M, mM: 약 2.07x10^-4
iii. K_cat, sec^-1 : 약 53
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 18,799
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 256,977
b. AUX II (GPA 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 15.4
ii. K_M, mM: 약 1.6
iii. K_cat, sec^-1 : 약 4,636
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 216
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 2,997
제31항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 3개를 포함하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 4개를 포함하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 5개를 포함하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 약 1 mg 내지 20 mg의 하나 이상의 콜라게나아제를 포함하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 CCH를 포함하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 약 10,000 ABC 단위/0.58 mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제31항에 있어서, 상기 조성물이 약 15,000 ABC 단위/mg 내지 20,000 ABC 단위/mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제31항에 있어서, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 10 mg이고, 상기 조성물이 약 20,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg 또는 약 175,000 내지 약 300,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 갖는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제43항에 있어서, 환자의 적어도 10%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제43항에 있어서, 환자의 적어도 20%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제31항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타내는, 방법.
인간 환자의 양쪽 엉덩이에서 셀룰라이트의 중증도를 감소시키는 방법으로서:
a. 하기한 특징 중 적어도 2개를 갖는 콜라게나아제 조성물을 제공하는 단계:
i. 약 0.08 내지 7.70 (SRC 검정), 또는 약 0.3 내지 30.5 (GPA 검정)의 V_max (min^-1);
ii. 약 4.1 내지 410 나노몰 (SRC 검정), 또는 약 0.03 내지 3.1 mM (GPA 검정)의 K_M;
iii. 약 1.1 내지 107 (SRC 검정), 또는 약 93 내지 9,179 (GPA 검정)의 K_cat (sec^-1);
iv. 약 376 내지 37,222 (SRC 검정), 또는 약 4 내지 428 (GPA 검정)의 1/ K_cat, 마이크로초;
v. 약 5,140 내지 508,814 (SRC 검정), 또는 약 60 내지 5,934 (GPA 검정)의 K_cat/K_M, mM^-1sec^-1;
vi. 약 60 kDa 내지 약 130 kDa, 또는 약 70 내지 약 130 kDa, 또는 약 80 내지 약 120 kDa, 또는 약 90 내지 약 120 kDa, 또는 약 100 내지 약 110 kDa의 분자 질량:
vii. 역상 HPLC(고압 액체 크로마토그래피)로 측정시 적어도 80%의 면적 순도;
viii. 약 5,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg의 효능;
ix. 약 175,000 내지 약 500,00 f-GPA 단위/mg의 효능;
x. 약 5,000 내지 약 25,000 ABC 단위/mg의 효능;
xi. 클로스트리파인, 젤라티나제, 및 류펩틴으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 불순물 면적 1% 이하;
xii. 1 cfu/mL 이하의 생균수; 및
b. 치료 I에 따라서 치료적 유효량의 상기 콜라게나아제 조성물을 양쪽 엉덩이의 딤플 내로 주사하는 단계를 포함하고, 여기서, 상기 셀룰라이트 외관 개선이 CR-PCSS에 의해 확립되는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 주사되는 누적 콜라게나아제 용량이 약 5.04 mg인, 방법.
제47항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 0.08 내지 7.70
ii. K_M: 약 4.1 내지 410 나노몰
iii. K_cat, sec^-1 : 약 1.1 내지 107
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 376 내지 37,222
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 5,140 내지 508,814
b. AUX-II (GPA 검정)
i. V_max, min^-1 : 약 0.3 내지 30.5
ii. K_M, mM: 약 0.03 내지 3.1
iii. K_cat, sec^-1 : 약 93 내지 9,179
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 4 내지 428
v. K_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 60 내지 5,934
제47항에 있어서, 상기 콜라게나아제 조성물이 하기한 특징을 갖는 AUX-I 및 AUX-II를 포함하는, 방법:
a. AUX-I (SRC 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 3.8
ii. K_M, mM: 약 2.07x10^-4
iii. K_cat, sec^-1 : 약 53
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 18,799
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 256,977
b. AUX II (GPA 검정):
i. V_max, min^-1 : 약 15.4
ii. K_M, mM: 약 1.6
iii. K_cat, sec^-1 : 약 4,636
iv. 1/K_cat, 마이크로초: 약 216
v. k_cat/K_M, mM^-1sec^-1:약 2,997
제47항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 3개를 포함하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 4개를 포함하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 상기 특징 중 적어도 5개를 포함하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 약 1 mg 내지 20 mg의 하나 이상의 콜라게나아제를 포함하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 CCH를 포함하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 약 10,000 ABC 단위/0.58 mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제47항에 있어서, 상기 조성물이 약 15,000 ABC 단위/mg 내지 20,000 ABC 단위/mg의 효능을 갖고, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 20 mg인, 방법.
제47항에 있어서, 상기 치료적 유효량이 약 1 mg 내지 10 mg이고, 상기 조성물이 약 20,000 내지 약 30,000 f-SRC 단위/mg 또는 약 175,000 내지 약 300,000 f-GPA 단위/mg의 효능을 갖는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제59항에 있어서, 환자의 적어도 10%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제59항에 있어서, 환자의 적어도 20%가 상기 초기 투약 후 적어도 71 일 동안 치료전 기준선 대비 이들의 개선 수준을 유지하는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 치료가 환자의 집단에 투여되는 경우, 상기 치료의 결과로서 환자의 적어도 5%가 치료전 기준선 대비 개선을 입증하고 경시적으로 개선의 추가 증가를 나타내는, 방법.
제47항에 있어서, 상기 치료가 CR-PCSS에 의해 측정된 다음 효능 종점 중 적어도 하나를 야기하는, 방법:
a. 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (치료전 "1일째")으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 2 레벨 개선;
b. 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 환자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 2 레벨 개선;
c. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 2 레벨 개선된 환자로서 정의되는 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 2-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선;
d. 임상의에 의해 실시간 평가된 엉덩이의 CR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 1 레벨 개선;
e. 엉덩이의 디지털 이미지를 보면서 상기 환자에 의해 평가된 PR-PCSS의 중증도가 기준선 (1일째)으로부터 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 적어도 1 레벨 개선;
f. CR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선되고 PR-PCSS의 중증도가 기준선으로부터 적어도 1 레벨 개선된 환자로서 정의되는 22, 43, 71, 90, 180 또는 365일째에 1-레벨 복합 응답에 의해 입증된 개선; 및
g. 증등증 또는 중증의 CR-PCSS 또는 PR-PCSS 등급을 갖는 모든 환자의 집단에서, 적어도 하나의 치료 부위에서 개선은 위약과 비교하여 통계학적으로 유의하고, 여기서, 상기 개선은 상기 a. 내지 f. 중 하나 이상이다.