JP2022502478A - セルライトを治療するための組成物および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2018年9月18日に出願された米国仮出願シリアル番号第62/733,046号、2019年1月6日に出願された米国仮出願シリアル番号第62/788,916号、2019年2月28日に出願された米国仮出願シリアル番号第62/812,036号、2019年3月25日に出願された米国仮出願シリアル番号第62/823,596号、2019年7月11日に出願された国際出願番号第PCT/US2019/041494号、および2019年7月12日に出願された国際出願番号第PCT/US2019/41718号は、法律で認められる最大限の範囲で、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
1. 最初の段階では、臨床医が治療すべきセルライトのくぼみの選択を行う。次に、注射前に、評価が行われる。例えば、臨床医および/または患者は、以下の尺度または他の評価方法(詳細な説明に定義されている)の1つ以上を使用して、セルライトの治療前の重症度を独立して評価する。
〇 ヘクセルセルライト重症度尺度(CSS)(ヘクセルCSS)
〇 ヘクセルくぼみ深さスコア
〇 リッカート尺度
〇 陥凹部分析
〇 CR−PCSS(臨床医が報告したフォト数値セルライト重症度尺度)
〇 PR−PCSS(患者が報告したフォト数値セルライト重症度尺度)
〇 調査員グローバル美的改善尺度(I−GAIS)
〇 被験者グローバル美的改善尺度(S−GAIS)
〇 患者報告式セルライトインパクト尺度(PR−CIS)
〇 PR−CIS省略形
〇 被験者自己評価尺度(SSRS)
〇 セルライト治療に対する被験者の満足度(SSCT)
〇 セルライトの重症度の臨床医アセスメント(写真またはその他の画像)
〇 Body−Q
〇 フィッツパトリック尺度
〇 大腿部セルライト重症度−患者(TCS−P)、大腿部セルライト重症度−臨床医(TCS−C)
〇 セルライトの重症度、改善度、および/または患者の満足度を評価するために臨床医および/または患者が使用する検証済みのフォト数値またはその他の尺度(例えば、ヘクセル−Merz尺度(Hexselら、"Validated Assessment Scales for Cellulite Dimples on the Buttocks and Thighs in Female Patients," Dermatologic Surgery: August 2019 (Volume 45) Issue p S2?S11および米国皮膚科学会総会2019でのポスター発表)
● コラゲナーゼ組成物(CCHなど)を、30ゲージの1/2インチ針付き注射器を用いて、被験者がうつ伏せになった状態で皮下に注射する。図7に示すように(以下、「治療I」)、各注射部位には、位置A、B、Cに0.1mLのアリコートを3回、合計0.3mLのコラゲナーゼ組成物を皮膚に1回注射する。注射の深さは、針の先端から根元までの治療針の長さに相当する1/2インチで、下向きの圧力がかかっていない状態である。各注射部位において、針を皮膚表面に対して垂直に90°の位置に配置して挿入し、コラゲナーゼ組成物を0.1mLのアリコートで注射する(位置A)。針をわずかに引き抜き(ただし、皮膚からは離さない)、垂直から45°ずれた位置でくぼみの長軸の上に再配置し、0.1mLアリコートのコラゲナーゼ組成物を注射する(位置B、頭部の方向)。再び針をわずかに引き抜き、くぼみの長軸の下、垂直から約45°の位置に戻し、コラゲナーゼ組成物0.1mLアリコートを注射する(位置C、足の方向)。注射後、被験者は5分間伏せたままとする。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜120kDa、または約90〜120kDa、または約100〜110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
本明細書で使用する場合、関連する速度論的パラメータは、本明細書に記載されているキュベットアッセイまたはマイクロプレートアッセイ(例えば、SRCキュベットアッセイ、SRCマイクロプレートアッセイ、GPAキュベットアッセイ、およびGPAマイクロプレートアッセイ)を使用して測定することができる。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
他に定義されていない限り、本明細書で使用されているすべての用語および語句は、反対のことが明確に示されているか、またはその用語または語句が使用されている文脈から明らかでない限り、その用語および語句が当技術分野で達成した意味を含む。本明細書に記載されているものと類似または同等の任意の方法および材料を本発明の実施または研究に使用することができるが、ここでは特定の方法および材料について説明する。
● ΔL*(L*サンプルからL*スタンダードを引く)=明暗の差(+=明るい、−=暗い)、数字が小さい(0〜50)と暗く、数字が大きい(51〜100)と明るい。
● Δa*(a*サンプルからa*スタンダードを引く)=赤と緑の差(+=より赤、−=より緑)
● Δb*(b*サンプルからb*スタンダードを引く)=黄色と青の差(+=より黄色、−=より青)
物体の色(ここでは被験者の治療領域の画像に写っているあざ)を完全に表現するためには、この3つの値が必要である。L*a*b*値でデータを出力する、コラゲナーゼ治療領域(プロトコルで指定された時点での治療前および治療後の画像)の画像解析の客観的な方法論は、肌の色とその変化を、迅速、容易、正確、反復可能、かつ偏りなく定量化することを可能にする。この方法では、従来の主観的な目視による画像の推定に伴う固有の変動が排除される。ΔEは以下のように計算される。
ΔE(あざのある組織と正常組織間の色の違い)=SQRT[(L* B−L* N)2+(A* B−A* N)2+(B* B−B* N)2]、ここにおいて、
L* B=あざのある組織L*
L* N=正常組織L*
A* B=あざのある組織A*.
A* N=正常組織A*
B* B=あざのある組織B*
B* N=正常組織B*
図18(B)は、治療領域のあざの分析結果を示したものである。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1;
v)Nordmark Arzneimittel GmbH&Co.KGによって記載されたコラゲナーゼ;(w)株004からのコラゲナーゼ;または(x)前記のいずれかの等価物もしくは混合物である。本明細書の開示に使用することができるコラゲナーゼの非限定的な例は、米国特許第7,811,560号、第9,757,435号、第9,744,138号、およびWO2012/125948に記載されている。
0=くぼみなし
1=表面的なくぼみ
2=中程度の深さのくぼみ
3=深いくぼみ
質問1:治療のために選択された領域について考えると、セルライトの外観にどの程度満足しているか?
質問2:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観にどのように悩まされているか?
質問3:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観についてどのくらい自覚があるか?
質問4:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観についてどのくらい恥ずかしいか?
質問5:治療のために選択された領域について考えると、あなたのセルライトのせいでどれくらい老けて見えるか?
質問6:治療のために選択された領域について考えると、セルライトのために太って見えたり、体型が崩れて見えたりすることはあるか?
質問1:治療のために選択された領域について考えると、セルライトの外観にどの程度満足しているか?
質問2:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観にどのように悩まされているか?
質問3:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観についてどのくらい自覚があるか?
質問4:治療のために選択された領域について考えると、あなたはあなたのセルライトの外観についてどのくらい恥ずかしいか?
質問5:治療のために選択された領域について考えると、セルライトのために太って見えたり、体型が崩れて見えたりすることはあるか?
PR−CIS省略形トータルスコアは、PR−CIS本編の他の5つの質問セットから導き出すことができる。
本開示は、以下に説明する特定の注射技術を用いて、セルライトの外観を有する対象者に治療有効量の1つ以上のコラゲナーゼを投与することを有する、セルライトの治療方法に関するものである。
本明細書に記載されているセルライトを治療する方法の第1段階では、臨床医は、以下の基準に基づいて、治療すべきセルライト陥凹部の選択を行う。
● 陥凹部は、写真で確認できるように、患者がリラックスしたポーズ(臀部の筋肉をリラックスさせた状態での立位)をとったときに、自然にはっきりと現れるものでなければならない
● 選ばれる陥凹部は、臀部や大腿部などの患部全体の美観を改善する可能性が最も高いと臨床医が判断したものでなければならない
● 治療前に患者がリラックスした状態で患部を撮影する
● 注射前に評価が行われる。すなわち、臨床医および/または患者が独立して写真を評価し、以下の尺度または評価方法の1つ以上を用いて結果を採点する
〇 ヘクセルセルライト重症度尺度(CSS)(ヘクセルCSS)
〇 ヘクセルくぼみ深さスコア
〇 リッカート尺度
〇 陥凹部分析
〇 臨床医が報告したフォト数値セルライト重症度尺度(CR−PCSS)
〇 患者が報告したフォト数値セルライト重症度尺度(PR−PCSS)
〇 調査員グローバル美的改善尺度(I−GAIS)
〇 被験者グローバル美的改善尺度(S−GAIS)
〇 患者報告式セルライトインパクト尺度(PR−CIS)
〇 被験者自己評価尺度(SSRS)
〇 セルライト治療に対する被験者の満足度(SSCT)
〇 大腿部セルライト重症度−患者(TCS−P)、大腿部セルライト重症度−臨床医(TCS−C)
〇 Body−Q
〇 フィッツパトリック尺度
〇 セルライトの重症度、改善度、および/または患者の満足度を評価するために臨床医および/または患者が使用する検証済みのフォト数値またはその他の尺度(例えば、ヘクセル−Merz尺度)
本明細書に記載された治療の第2段階では、治療すべきくぼみを臨床医がドット(複数)でマークすることができる。さらに写真を撮影してもよい。例えば、図6および15を参照のこと。
第3段階の治療では、臨床医がコラゲナーゼ注射を行う。
本開示で有用なコラゲナーゼは、上記で定義されたコラゲナーゼのいずれかを含む。さらなる背景として、マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)は、本明細書の定義に該当するコラゲナーゼで構成され得る。例えば、MMP−1は、コラゲナーゼ1を有し、MMP−8は、コラゲナーゼ2/好中球コラゲナーゼを有し、MMP−13は、コラゲナーゼ3を有し、MMP−18は、コラゲナーゼ4を有する。さらに、カテプシンもコラゲナーゼに分類することができる。
本開示で有用なコラゲナーゼは、その酵素動態によっても特徴付けられ得る。ここで、セルライトを治療するのに有効な1つ以上のコラゲナーゼのおおよその速度論的値は以下が含まれる:
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
Vmax=最大の速度
KM=Vmaxの50%での[基質]
Kcat=1秒間に切断される基質の分子数
1/Kcat=1分子の基質を切断するのに必要なマイクロ秒
これらの値は、後述のマイクロプレートアッセイを用いて、基質や時間を変えて実験的に決定してもよい。また、他のアッセイやパラメータを採用してもよい。
● AUXI
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● AUXII
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
前提条件
Kcat=Vmax/[AUX]=(nモル 基質/nG AUX*分−1)/nG AUX
触媒効率(Kcat/KM)は一般的に、基質を生成物に変換する酵素の総合的な能力を表し、結合イベントと触媒イベントの両方を反映している。別の実施形態では、AUX−IおよびAUX−IIは、以下の特徴を有する。
コラゲナーゼの比活性(力価)を決定するためのアッセイが開発され、使用されている。そのようなアッセイは、サブセクションa.からc.に記載されており、事前に決定された酵素濃度で所定の時間内に基質を生成物に変換する能力によってコラゲナーゼを特徴付ける。特定の非限定的な実施形態において、これらのアッセイは、AUX−IおよびAUX−IIのそれぞれ、ならびに複合CCH製剤(AUX−IおよびAUX−IIの1:1の比)の力価を決定するために使用される。後述のSRCアッセイでは、反応の基質としてコラーゲンを使用する。SRCアッセイは、基質として可溶性ラット(尾)コラーゲン(SRC)を使用し、I型コラゲナーゼ活性を測定するために使用され、II型コラゲナーゼはコラゲナーゼ混合物の観察された活性の約20%に寄与する。SRCアッセイは、フルオレスカミンを利用して、SRCのI型消化によって生成されたペプチドを検出する。反応は、15mMの2価のカルシウムイオンを含む4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸(HEPES)緩衝液を用いて、pH7.2、25℃で2.5時間行われる。
i.GPAアッセイ(キュベット)で測定したコラゲナーゼ力価
GPAアッセイは、主にクラスIIコラゲナーゼの力価を測定するために用いられる。アッセイの最初の工程では、基質であるカルボベンゾキシ−グリシル−L−プロリル−グリシル−グリシル−プロリル−L−アラニン(zGPGGPA)をコラゲナーゼサンプルによる2つのペプチド:カルボベンゾキシ−グリシル−L−プロリル−グリシン(zGPG)およびグリシル−プロリル−L−アラニン(GPA)への消化を含む酵素反応を含む酵素反応を含む。第2工程では、続いて蛍光誘導体のフルオレスカミンを用いて遊離したGPAを測定する。アッセイは以下の方法に従っているが、当業者であれば、アッセイの目的を達成するために特定の変更(例えば、希釈濃度や希釈時間)を行ってもよいことを理解できるだろう。
力価(f−GPA単位/mg)=(Mサンプル/Mロイシン)×(DF/T)
ここで、
Mサンプル=コラゲナーゼサンプル力価曲線の傾き
Mロイシン=ロイシン標準曲線の傾き
DF=希釈率
T=反応時間
緩衝液および試薬
1.f−アッペルの緩衝液、pH7.2(55mM HEPES、100mM 酢酸カルシウム)
2.1mM ロイシンワーキングストック溶液
3.200mM ホウ酸塩、pH9.0
4.アセトン中の0.5mM フルオレスカミン溶液
5.f−アッペルの緩衝液中の2mg/mL zGPGGPA基質
溶液は以下のように調製される。
f−アッペルの緩衝液:13.0gのHEPESと17.6gの酢酸カルシウムを約800mLの水に溶かす。水酸化ナトリウムでpHを7.2に調整し、水で1LになるようにQSする。2〜8℃で保存する。
10mM ロイシンストック溶液:ロイシン65.5mgを50mLの水に溶かす。ロイシンは、100mL(または同等量)のガラスビーカーに直接秤をかけて量る必要がある。ロイシン約65mg(目標重量)をビーカーに計量する。秤量したロイシンの重量をもとに、ビーカーに加える水の量を以下の式で計算する。算出した量の水をビーカーに加え、ロイシンが完全に溶解していることを確認して十分に混合する。1mLのアリコートに分注する。20℃以下で保存する。
ここで、
C2=計量したロイシンの質量(mg)
V1=50(mLの水)
C1=65.5(mgのロイシン)
V2=10mMストック溶液を生成するために必要な水の量(mL)
1mM ロイシンワーキングストック溶液:10mMロイシンストック溶液のバイアルを解凍し、150μLと1350μLの水を合わせて1mMに希釈する。使用前によく混合する。
0.5N HCl:HClを水で0.5Nに希釈し、よく混ぜる。室温で保存する。市販の0.5N塩酸を使用することもできる。
200nM ホウ酸塩:pH9.0:2.4gのホウ酸を約150MLの水に溶かす。水酸化ナトリウムを用いてpHを9.0に調製する。水で200mLに希釈し、よく混ぜる。2〜8℃で保存する。
0.5mM フルオレスカミン溶液:15mgのフルオレカミンを100mLのアセトンと混合し、振り混ぜて溶解させる。遮光して2〜8℃で保存。
基質溶液(2mg/mL zGPGGPA):2mg/mLの基質をf−アッペルの緩衝液で調製する。機械的シェーカー/ローテーターで、完全に溶解するまで十分な時間をかけて溶解する(約15分)。
コラゲナーゼ試料をf−アッペルの緩衝液で0.01mg/mLに2段階希釈し、穏やかにボルテックスして混合する。希釈方法の一例を以下に示す。
1.100μL×1.0mg/mL−→1000μL=0.1mg/mL
2.100μL×0.1mg/mL−→1000μL=0.01mg/mL
ブランクは、希釈した調製液45μLを500μLの0.5N塩酸と組み合わせて酵素を不活性化して調製する。455μLのzGPGGPA基質溶液を加え、ボルテックスで十分に混合する。各ブランクの100μLを別のチューブに移し、フルオレスカミンと反応する可能性のある不純物を検出する。
各コラゲナーゼサンプルについて、以下のように1セットの力価曲線を作成する。
基質と緩衝液の入ったチューブを25℃のウォーターバスで15分以上温める。2セット目のチューブにラベルを貼り、それぞれに50μLの0.5N塩酸を加える。希釈したコラゲナーゼサンプル製剤(0.01mg/mL)を表8に従ってチューブに加え、10分間インキュベートし、混合して25℃のウォーターバスに戻す。予め温めておいた基質に最初の調製物を加えた時点で、インキュベーション期間を開始する。
各調製液(ブランク、コラゲナーゼサンプル力価曲線、ロイシン標準液)100μLが入ったすべての検出チューブに、400μLの200mMホウ酸緩衝液と500μLの0.5mM フルオレスカミン溶液を加える。十分にボルテックスして混合する。チューブを室温で最低10分間インキュベートする。
各ロイシン標準物質の濃度(X軸)を480nmでの蛍光応答(Y軸)に対してプロットする。傾き(m)と決定係数(R2)を決定する。各力価曲線の調製物の平均蛍光を決定する。各調製物の濃度(X軸)を480nmでの平均蛍光応答(Y軸)に対してプロットすることにより、コラゲナーゼサンプルおよびロイシンの力価曲線を作成する。得られた直線曲線の傾き(m)と決定係数(R2)を決定する。
力価(f−GPA単位/mg)=(Mサンプル/Mロイシン)×(DF/T)
ここで、
Mサンプル=コラゲナーゼサンプル力価曲線の傾き
Mロイシン=ロイシン標準曲線の傾き
DF=希釈率(1100μL/50μL=22)
T=反応時間(10分)
この方法は、マイクロプレートで行われる以外は、上記のGPAアッセイと同様である。上記のアッセイと同様に、マイクロプレートアッセイは、基質であるカルボベンゾキシ−グリシル−L−プロリル−グリシル−グリシル−プロリル−L−アラニン(zGPGGPA)(以下、「基質」という)の酵素的切断におけるコラゲナーゼサンプルのタンパク質分解活性を測定する。このアッセイは、以下の方法論に従っているが、当業者であれば、特定の変更(例えば、希釈濃度および時間)を行っても、アッセイの目的を遂行することができることを理解するであろう。
1.ペプチド基質(zGPGGPA)(Bachem M1260または同等品)
2.トリペプチドGPA(Bachem H3615または同等品)
3.フルオレスカミン(Acros 191675000または同等品)
4.精製水(Milli−Q−Plus 18.2MΩシステムまたは同等品)
5.1M HEPES緩衝液(Gibco 15630−080または同等品
6.Surfact−Amps20(商標)(10% Tween溶液)(Pierce Cat.#28320または同等品)
7.1M 酢酸カルシウム(Ca(C2H3O2)2)(Emerald Biosciences Cat.#EBS−100−CAACまたは同等品)
8.ホウ酸(Sigma B7660または同等品)
9.2.5N NaOH (J.T Baker 5666−02または同等品)
10.0.5N 塩酸(VWR 101223−134または同等品)
11.アセトン(Sigma 270725または同等品)
(i)アッセイ緩衝液(50mM HEPES pH7.1/0.05% Tween20/5mM(Ca(C2H3O2)2)の調製:50mLの1M HEPESをピペットで800mLの純水に混ぜる。5mLの1M (Ca(C2H3O2)2)と5mLのSurfact−Amps(10% Tween20)を加える。pHを確認し、必要に応じて7.1±0.05に調整する。十分な量の水を加えて体積を1Lに調整し、0.22ミクロンのフィルターで溶液をろ過する。このアッセイ緩衝液は、室温で最大3ヶ月間保存することができる。
(ii)0.1N NaOHの調製:48mLの純水に2.5N NaOHを2mL添加する。この溶液は、室温で3ヶ月間まで保存することができる。
(iii)4mg/mL トリペプチド GPAストック溶液の調製:400mg(±1mg)のトリペプチドGPAを10mLの0.1N NaOHに溶解し、完全に溶解するまでボルテックスをかける。十分な量のアッセイ緩衝液を加えて100mLとし、0.5mLのアリコートに分注して−70℃で保存する。4mg/mLのトリペプチドGPAストックは、−70℃で1年間保存可能である。
(iv)4mg/mL(6.8mM)のペプチド基質zGPGGPAの調製:400mg(+1mg)のペプチド基質zGPGGPAを10mLの0.1N NaOHに溶かし、完全に溶けるまでボルテックスする。十分な量のアッセイ緩衝液を加えて100 mLとする。この溶液は、4℃で3ヶ月間保存できる。
(v)120mM ホウ酸 pH9.0の調製:7.4g(±0.5g)のホウ酸を800mLの純水に溶かす。この溶液をNaOHで滴定してpH9.0とし、十分な量の純水を加えて体積を1リットルに調整する。この溶液は、室温で最大3ヶ月間保存することができる。
(vi)アセトン中の1mM フルオレスカミンの調製:28±2mgのフルオレスカミンを100mLのアセトンに溶解させる。この溶液は、新たに調製し、光と湿気から保護する必要があった。
0.08mg/mL(329μM)のトリペプチドGPA標準品は、4mg/mLのトリペプチドGPAストックをアッセイ緩衝液で50倍に希釈して調製する(例えば、20μLの4mg/mLのトリペプチドGPAを980μLのアッセイ緩衝液に入れる)。アッセイプレートのA列では、200μLの329μMトリペプチドGPA標準品をAlおよびA7にピペットで移す。100μLの量のアッセイ緩衝液をA2−A6およびA8−Al2にピペットで移す。
トリペプチドGPA標準品の段階希釈では、AlからA2に100μLを移して混合し、A2からA3に100μLを移して、A5まで繰り返す。A5のウェルから100μLを取り出し、最終容量が100μLになるようにする。A6ウェルには緩衝液のみが入っている。
2つ目のトリペプチドGPA標準液の段階希釈では、A7からA8に100μLを移して混合し、A8からA9に100μLを移して、これをウェルA11まで繰り返す。A11のウェルから100μLが取り出され、最終的な体積が100μLになる。A12ウェルには緩衝液のみが入っている。
コラゲナーゼサンプル(例えば、凍結乾燥したコラゲナーゼ製剤)の場合、サンプルを少なくとも10分間室温に戻し、再構成して500ng/mLのストック溶液を形成する。異なる濃度のものを使用してもよい。ストック液をアッセイ緩衝液で希釈し、テスト用コラゲナーゼサンプル(T1A)を調製する。この手順を繰り返し、3連のテストサンプル(T1A、T1B、T1C)を調製する。
この方法では、96ウェルプレートにおいて、濃度を増加させたコラゲナーゼテストサンプル50μLと過剰な基質50μL(最終濃度2.0mg/mL)を混合する。50μLのアッセイ緩衝液の量を、Uボトムの96ウェルポリプロピレン反応プレートのC−G列に加える。次に、マルチチャンネルピペットを用いて、1/1.5の段階希釈を行い、B列からC列に100μLのコラゲナーゼサンプルを移し、混合し、G列に到達するまで繰り返す。表9は、50μLの基質をB列からH列に加えた後の最終的なコラゲナーゼ濃度を示している。
ブランクは、50μLのアッセイ緩衝液をピペットで移してH列に調製し、この行には酵素を含まない。例示的な濃度を表9に示す。
zGPGGPA基質は、室温で15分間のインキュベーション時間中にクラスIIコラゲナーゼによってzGPGとGPAに切断される。インキュベーターと温度プローブをオンにする(プレートに基質を添加する前の温度は22±1℃)。B−H列のカラム1−12に、50μL 4mg/mL(6.8mM)zGPGGPA基質をカラムごとに添加し、混合する。反応開始時間は、最初のカラムに基質が添加された後に始まる。プレートに蓋をして22±1℃のインキュベーターに入れ、総反応時間を15±1分とする。
インキュベーション後、塩酸を加えて反応をクエンチし、ペプチドの遊離アミノ末端を発色試薬のフルオレカミンと反応させて、放出されたGPAペプチドの量を定量する。反応を鎮めるために、A行からH行までの各ウェルに0.5Nの塩酸を100μLずつ、列ごとに加えて混合する。最初の列にHClが加えられた時点で反応時間が終了する。
195μLの量の120mMホウ酸塩pH9.0をマイクロプレートGreinerのポリプロピレン製ブラックリーディングプレートの各ウェルに加える。クエンチした反応混合物30μLを反応プレートからリーディングプレートの対応するウェルに移し、よく混合する。次に、75μLの1mM フルオレスカミンをリーディングプレートの各ウェルに添加し(フルオレスカミン/アセトンを分注するポリプロピレン製のトレイを使用)、添加するたびに直ちに混合する。フルオレスカミン添加後15分以内に、モレキュラーデバイスM2蛍光プレートリーダーを用いて以下の設定でプレートを読み取る。プレートはフルオレスカミン添加後15分以内にモレキュラーデバイスM2蛍光プレートリーダーで以下の設定で読み取る:励起380nm、発光473nm、カットオフ455nm、6リード/ウェル、PMT培地。
GPAの濃度(μM)対473nmでの発光、コラゲナーゼの濃度(ng/mL)対473nmでの発光をプロットした。各プロットについて、固定パラメータを用いずに線形回帰をフィッティングした。コラゲナーゼテストサンプルでは、ゼロ点データを線形フィットから除外し、各サンプルの3連データセット全体を用いてプロットを作成した。トリペプチドGPA標準サンプルとコラゲナーゼサンプルの傾きを求める。
コラゲナーゼサンプルの比活性は以下のように計算できる:
GPAマイクロプレートアッセイ単位=((コラゲナーゼサンプルの傾き)/(トリペプチドGPAの傾き×インキュベーション時間))×106
コラゲナーゼテストサンプルの比活性は、トリペプチドGPA標準品の傾きから決定し、カーブフィッティングプログラムで算出する。マイクロプレート法を用いて、異なる濃度の基質と異なる時間を用いて、ミカエリス・メンテンによる酵素反応速度を算出することができる。
本開示で有用なコラゲナーゼは、約100,000〜約300,000 GPA単位/mg、または約175,000〜約300,000 f−GPA単位/mgの力価を有していてもよい。他の実施形態では、力価は、約70,000〜約400,000 GPA単位/mg、または約100,000〜約375,000 GPA単位/mg、または約125,000〜約350,000 GPA単位/mg、または約150,000〜約325,000 GPA単位/mg、または約175,000〜約300,000 GPA単位/mg、または約200,000〜約275,000 GPA単位/mgであってもよい。あるいは、力価は、約70,000〜約400,000f−GPA単位/mg、約100,000〜約375,000f−GPA単位/mg、約125,000〜約350,000f−GPA単位/mg、約150,000〜約325,000f−GPA単位/mg、約175,000〜約300,000f−GPA単位/mg、約230,000〜約430,000f−GPA単位/mg、または約200,000〜約275,000f−GPA単位/mgであってもよい。また、コラゲナーゼは、約30,100〜約87,100、または約43,000〜約67,000GPAマイクロプレートアッセイ単位の力価を有していてもよい。上記のGPAアッセイは、任意のコラゲナーゼの比活性を分析するために採用されてもよい。
i.SRCアッセイ(キュベット)で測定したコラゲナーゼ力価
SRCアッセイは、主にクラスIコラゲナーゼの力価を測定するために使用される。一般的な方法は以下の通りである。ロイシン標準液とコラゲナーゼサンプル液を用意する。アッセイの第1工程は、コラゲナーゼによる可溶性ラット尾腱コラーゲン(SRC)の消化を含む酵素反応を含む。第2工程では、遊離したペプチドフラグメント/アミノ酸を蛍光発生誘導体であるフルオレスカミンで測定する。アッセイは以下の方法論に従うが、当業者は、特定の変更(例えば、希釈濃度および時間)がなされても、アッセイの目的を実行できることを理解するであろう。
力価(f−SRC単位/mg)=(Mサンプル/Mロイシン)×(DF/T)×CF
ここで、
Mサンプル=コラゲナーゼサンプル力価曲線の傾き
Mロイシン=ロイシン標準曲線の傾き
DF=希釈率(1500μL/100mL=15)
T=反応時間(2.5時間×60分/1時間=150分)
CF=換算係数(1000μg/1mg=1000)
1.F−TCアッセイ緩衝液、pH7.2(22g HEPES [4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸]、4.4g 酢酸カルシウム)
2.F−酵素緩衝液、pH7.2
3.200mM ホウ酸塩、pH9.0
4.10mM ロイシンストック溶液
5.1mM ロイシンワーキングストック溶液
6.アセトン中の1mM フルオレスカミン溶液
7.0.02N 酢酸中の2mg/mL ラット尾腱コラーゲン
溶液は以下のように調製される:
ここで、
C2=計量したロイシンの質量(mg)
V1=50(mLの水)
C1=65.5(mgのロイシン)
V2=10mMストック溶液を生成するために必要な水の量(mL)
1.100μL×1.0mg/mL→1000μL=0.1mg/mL
2.100μL×0.1mg/mL→1000μL=0.01mg/mL
希釈したサンプルは、使用するまで室温で保存する。
各ロイシン標準物質の濃度(X軸)を480nmでの蛍光反応(Y軸)に対してプロットする。傾き(m)と決定係数(R2)を決定する。強制的にゼロにしてはならない。各重複した調製物の平均蛍光を決定する。各コラゲナーゼサンプルの純蛍光を算出する。
F(ネット)=平均コラゲナーゼサンプル(EM480)−ブランク(EM480)
コラゲナーゼサンプルの力価の測定
力価(f−SRC単位/mg)=(Mサンプル/Mロイシン)×(DF/T)×CF
ここで、
Mサンプル=コラゲナーゼサンプル力価曲線の傾き
Mロイシン=ロイシン標準曲線の傾き
DF=希釈率(1500μL/100mL=15)
T=反応時間(2.5時間×60分/1時間=150分)
CF=換算係数(1000μg/1mg=1000)
この方法は、マイクロプレートで行われる以外は、上記SRCアッセイと同様である。上記のSRCアッセイと同様に、マイクロプレートアッセイは、可溶性ラット尾腱コラーゲン(SRC)基質(以下、「基質」と称する)に対するコラゲナーゼ活性を測定する。このアッセイは、以下の方法論に従っているが、当業者であれば、特定の変更を加えても、アッセイの目的を遂行できることを理解できるであろう。
1.可溶性ラットコラーゲン基質(BD Biosciences 354236)
2.トリペプチドGPA(Bachem H3615または同等品)
3.フルオレスカミン(Acros 191675000または同等品)
4.精製水(Millipore、Milli−Q−Plus 18.2MΩシステムまたは同等品)
5.1M HEPES緩衝液(Gibco 15630−080または同等品)
6.1M 酢酸カルシウム(Ca(C2H3O2)2)(Emerald Biosciences EBS−100−CAACまたは同等品)
7.Surfact−Amps 20(商標)(10% Tween溶液)(Pierce Cat.#28320または同等品)
8.1.0N 酢酸(Sigma 318590または同等品)
9.0.5N塩酸(VWR 101223−134または同等品)
10.ホウ酸(Sigma B7660または同等品)
11.2.5N水酸化ナトリウム(J.T Baker 5666−02または同等品)
12.アセトン(Sigma 270725または同等品)
(i)アッセイ緩衝液(50mM HEPES pH7.1/0.05% Tween20/5mM(Ca(C2H3O2)2)の調製:50mLの1M HEPESをピペットで800mLの純水に混ぜる。5 mLの1 M (Ca(C2H3O2)2)と5 mLのSurfact−Amps(10% Tween20)を加える。pHを確認し、必要に応じて7.1±0.1に調整する。十分な量の水を加えて体積を1Lに調整し、溶液を0.22ミクロンのフィルターでろ過する。このアッセイ緩衝液は、室温で最大3ヶ月間保存することができる。
(ii)0.1N NaOHの調製:48mLの純水に2.5N NaOHを2mL添加する。この溶液は、室温で3ヶ月間まで保存することができる。
(iii)4mg/mL トリペプチド GPAストック溶液の調製:400mg(±1mg)のトリペプチドGPAを10mLの0.1N NaOHに溶解し、完全に溶解するまでボルテックスをかける。十分な量のアッセイ緩衝液を加えて100mLとし、0.5mLのアリコートに分注して−70℃で保存する。4mg/mLのトリペプチドGPAストックは、−70℃で1年間保存可能である。
(iv)0.02N 酢酸の調製:40mLの精製水に1.0 Nの酢酸1mLを加える。十分な量の精製水を加えて50mLに調整する。この溶液は、室温で1年まで保存できる。
(v)2 mg/mL SRC基質ストック溶液の調製:23.3 mL 0.02Nの酢酸を、基質が供給されているバイアルに直接加える(非限定的な一例では、3.75 mg/mLのSRC 100 mgとして供給)。他の濃度のSRC基質を使用してもよい。計算は以下の通りである:
(vi)0.6mg/mL SRC基質ワーキング溶液の調製:15mL コニカルチューブにアッセイ緩衝液を4.2mL加える。15mL コニカルチューブにアッセイ緩衝液を4.2mL加え、2mg/mL SRC基質ストック液を1.8mL加えて転倒混和する。この溶液は、プレートに添加する直前に調製する必要がある。
(vii)120mM ホウ酸 pH9.0の調製:7.4g(±0.5g)のホウ酸を800mLの純水に溶かす。この溶液をNaOHでpH9.0まで滴定し、十分な量のDI水を加えて1Lに調整する。この溶液は、室温で最大3ヶ月間保存することができる。
(viii)アセトン中の1mM フルオレスカミンの調製:28±2mgのフルオレスカミンを100mLのアセトンに溶解させる。この溶液は、新たに調製し、光と湿気から保護する必要があった。
0.08mg/mL(329μM)のトリペプチドGPA標準品は、4mg/mLのトリペプチドGPAストックをアッセイ緩衝液で50倍に希釈して調製する(例えば、20μLの4mg/mL GPAを980μLのアッセイ緩衝液に入れる)。アッセイプレートのA列では、200μLの329μMトリペプチドGPA標準品をAlおよびA7にピペッティングする。A2−A6およびA8−Al2には、100μLのアッセイ緩衝液がピペットで移される。
インキュベーターと温度プローブをオンにする(プレートに基質を添加する前の温度は22±1℃)。B列からH列までの各ウェルに、50μL 0.6mg.mLのSRC基質をカラムごとに添加し、混合する。反応開始時間は、最初のカラムに基質が添加された後に始まる。プレートに蓋をして22±1℃のインキュベーターに入れ、45±5分の総反応時間をかける。反応をクエンチするために、100μLの0.5NのHClを希釈プレートの各ウェルにカラムごとに加え、混合する。最初のカラムにHClを加えた時点で反応時間は終了する。
コラゲナーゼサンプルの比活性は以下のように計算できる:
SRCマイクロプレートアッセイ単位=((コラゲナーゼサンプルの傾き)/(トリペプチドGPAの傾き×インキュベーション時間))×106
本開示で有用なコラゲナーゼは、約500〜約15,000SRC単位/mgの力価を有していてもよい。特定の実施形態では、力価は、約500〜約12,500SRC単位/mg、または約700〜約10,000SRC単位/mg、または約1,000〜約7,500SRC単位/mg、または1,500〜約6,000SRC単位/mg、または約2,500〜約5,000SRC単位/mgである。あるいは、力価は、約5,000〜約35,000f−SRC単位/mg、または約10,000〜約30,000f−SRC単位/mg、または約13,000〜約23,000f−SRC単位/mg、または約15,000〜約25,000f−SRC単位/mgであってもよい。また、コラゲナーゼは、約980〜約3,510、または約1,400〜約2,700のSRCマイクロプレートアッセイ単位の力価を有していてもよい。
コラゲナーゼのためのBovine Tendon Collagen Assayは、Mandlら(1958年)の手順に基づいており、KellerとMandl(1963年)によって修正されている。牛の腱のコラーゲンは不溶性の基質であるため、細かく分割することが重要である。変性したコラーゲンやその他のタンパク質不純物の存在を考慮して、コントロールとしてトリプシンを使用する。このアッセイは、コラゲナーゼ活性に必要なカルシウムイオンの存在下で行われる。可溶化されたペプチドの数は、ペプチドのN−末端アミノ基をニンヒドリンと反応させ、形成された付加物の量を比色的に測定することによって決定される(Rosen 1957)。
1.コラーゲン基質(コラーゲン)
2.脱イオン水(水)
3.トリスアッセイ緩衝液
4.トリプシンストック溶液
5.0.5M HCl
6.ロイシン標準アッセイ溶液(1mM ロイシン)
7.ローゼン緩衝液
8.3% ニンヒドリン
9.50% イソプロパノール
以下のように反応チューブを設定し、ラベルを貼る:トリプシン対照用のチューブ3本、基準液用のチューブ6本、各被検サンプル用のチューブ6本。各チューブにラベルを貼り、キャップを外す。表13の順序で10±1mgのコラーゲンを秤量し、秤量したコラーゲンを各反応チューブに入れる。
インキュベートした各反応チューブに対応する濾液チューブにラベルを貼る。ラベルを貼った各濾液チューブに、濾紙を入れた漏斗と折り畳んだ濾紙を置く。培養期間が終了したら、ウォーターバスから反応チューブを取り出す。培養が終了した実際の時間を記録する。
沸騰したチューブを以下のように設定し、ラベルを貼る:水およびロイシン対照用のチューブ6本(工程1)、各濾液チューブ用のチューブ2本(工程1)。6本のロイシンコントロール用チューブに、以下の量の水とロイシン標準アッセイ液を入れる。
封じ込めフードの下で作業している間、チューブの吸光度を読み取る。分光光度計の電源を入れ、ウォームアップする。分光光度計の波長を570nmに設定する。50%イソプロパノールで分光光度計をゼロにする。水、ロイシン、トリプシンのコントロールとテスト中のサンプルの吸光度(A570)を読み取る。最初のサンプルを読み取った時間を時間単位で記録する。読み取り値を1000×A570として記録し、最後のサンプルを読み取った時間を時間単位で記録する。すべての読み取りは1時間以内に行う必要がある。
総読み取り時間と総培養時間を分単位で計算する。総読み取り時間は60分未満、インキュベーションの総時間は1290〜1350分であることが望ましい。線形最小二乗法を用いて、ロイシン標準サンプル(x=nmol ロイシン vs y=A570読み取り)の傾き「b」と相関係数「r」を算出する。「b」値の単位はA570/nmol ロイシンである。ロイシンのb値は2.88〜3.33の間である必要がある。トリプシン対照(T)の平均値を算出する。トリプシン対照(T)の平均読み取り値は221〜338とする。この平均値を小数点以下の数字で記録する(工程A)。各反応チューブの重複したサンプルA570の読み取り値を平均する。この数値を小数点以下の単位で記録する。平均サンプルA570の読み取り値から平均トリプシン(工程A)を差し引いて、正味のサンプル読み取り値を取得する。
ここで、20は展開された反応混合物の量に対する希釈係数であり、「b」はロイシン標準曲線の傾きである。この数値を小数点以下1桁まで記録する。テスト中のサンプルのチューブあたりの活性は、1.6〜5.7nmol leu eq/分である必要がある。
BTC単位=活性(nmol leu eq/分)×コラーゲン補正係数
ABC単位=BTC単位×1.09
様々なコラゲナーゼ組成物を採用することができ、ここでコラゲナーゼは、約5,000BTC単位/mg〜約25,000BTC単位/mg、または約10,000BTC単位/mg〜約25,000BTC単位/mg、または約15,000BTC単位/mg、または約17,500BTC単位/mg、または約20,000BTC単位/mg、または約22,500BTC単位/mg、または約9,175BTC単位/0.58mg、または15,817BTC単位/mgの比活性を有する、ここで、「mg」とは、組成物中に存在するコラゲナーゼ(単数または複数)の量を意味する(賦形剤および他の構成要素とは異なる)。
標識したコラーゲンを用いたアッセイ法は、Gisslowら、Anal.Biochem., 68: 70-78 (1975); Robertsonら, Clinica Chimica Acta, 42:43-45 (1972); Sakamotoら, A New Method for the Assay of Tissue Collagenase (36297) (1972)により報告されている。他の1つのアッセイは、Worthington Biochemical Corp.Assay(http://www.worthington-biochem.com/CLS/assay.html)である(2019年7月3日アクセス)。
本明細書で採用されるコラゲナーゼの用量に関しては、本開示では、皮下注射時に隔膜を結合して溶解するのに十分な治療有効量のコラゲナーゼが提供され、その結果、治療前のベースラインと比較してセルライトの外観が減少する。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
CCHまたは他のコラゲナーゼは、CCHまたはコラゲナーゼと、薬学的に許容される賦形剤とを有する医薬製剤の形態であってもよい。このような賦形剤としては、注射用の滅菌水や塩化ナトリウム/塩化カルシウム、pH調整剤、安定剤などが挙げられる。
前述のコラゲナーゼ組成物は、ヒト対象のセルライトの重症度を治療または軽減する方法に有用である。本開示は、ヒト患者におけるセルライトの重症度を軽減する方法であって、少なくとも1つのコラゲナーゼを有する組成物を提供する工程と、治療有効量の前記組成物を1つ以上のくぼみに注射する工程と、を有し、前記患者が、治療前のベースラインレベルと比較してセルライトの重症度の軽減を示す方法に関するものである。以下にさらに詳述するように、本組成物は、様々な注射技術によって投与され、多数の尺度および他の測定ツールによって有効性を測定することができる。
●1つ以上の象限を治療する;
●くぼみの大きさに関係なく治療する;
●45歳以上の女性を治療する;
●皮膚のたるみや弛緩、垂れがない陥凹部を治療する;
●異なる陥凹部を、異なる治療訪問で治療する;
●1/2インチ以上の針を使用する;
●注射する陥凹部の距離を制限しない;
●スペーサー、定規、紙などの器具に頼って注射の位置を制限しない;
●陥凹部の直下に少なくとも1回の注射が行われるようにする;
●長さが約1cm未満または約2cm以上の陥凹部を治療する;
●互いに約2cm以内で注射を使用する;
●互いに約2cm未満の範囲内で注射を使用する、および/または
●ここに記載されている1つ以上の尺度と方法を用いて、効果を測定する。
特定の実施形態では、治療が上記の態様を遵守する場合、患者は治療に対する迅速な反応率を経験する。図20〜23を参照。
a.医師が使いやすい;
b.治療にかかる時間の短縮;
c.審美的な症状を改善することは難しいという医師の一般的な見解に照らし合わせても、予想外の効果が得られる;
d.ヒアルロニダーゼを使用する必要がない;
e.熱を加える必要がない;
f.レーザーを使う必要がない;
g.サブシジョンなし;
h.麻酔の必要がない(あざにかかわらず);
i.着圧服の必要がない;
j.バキュームを使用しない。
本明細書に記載されている治療法は、以下に記載されているいくつかの尺度によってセルライトを治療するのに有効である。一般的に本明細書で使用されるように、用語「日」は、先行研究の71日目から日を順次測定する下記の実施例5に別段の定めがある場合を除き、治療コースにおける最初の治療から特定の治療領域におけるコラゲナーゼ治療の最初の日から日ごとに順次測定される研究日を意味する。例えば、実施例5で説明するように、「180日目」は、実施例2および3で報告された71日目から180日後を意味する。したがって、実施例5の文脈以外では、1日目は治療の最初の日であり、71日目は1日目から70日後であり、180日目は1日目から179日後である(「180日目」が実施例5のように、71日目から180日後、または治療初日から251日後であることを意味するように使用される場合を除く)。
●対象治療領域の臨床医がライブで評価したCR−PCSSにおいて、少なくとも50%の患者が、22日目、43日目、または71日目に重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善している。
●対象治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSにおいて、少なくとも50%の患者が、22日目、43日目、または71日目に重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善している。
●対象治療領域の臨床医がライブで評価したCR−PCSSにおいて、少なくとも5%の患者が、22日目、43日目、または71日目に重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善している。
●対象治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSにおいて、少なくとも5%の患者が、22日目、43日目、または71日目に重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善している。
●少なくとも5%の患者が、陥凹部のサイズ(体積、長さ、幅、深さ)の有意な減少、例えば、ベースラインから22日目、43日目、または71日目に少なくとも5%の減少、または少なくとも10%の減少、または少なくとも20%の減少を経験する。
これらおよびその他の有効性パラメータとベンチマークは以下に詳述する。さらに、以下の実施例に示されているように、コラゲナーゼ注射はセルライトの外観を著しく改善し、持続性を示し、一般的に良好な忍容性を示した。
個々の患者の改善とは、ベースラインまたは前回のスコアやレーティングから少なくとも1レベルまたは1レーティングの改善を意味する。患者群の改善とは、ベースラインまたはそれ以前の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1向上したことをいう。応答者とは、ベースラインから最大合計スコアまたは評価の少なくとも25%の改善を示す任意の患者である。特定の実施形態では、本明細書に詳述されている治療方法は、CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSによって測定される以下の有効性評価項目の1つ以上をもたらす:
1.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価がベースラインと比べて少なくとも0.1改善していること。
2.治療領域の臨床医がライブで評価したCR−PCSSにおける重症度が、ベースライン(治療前の「1日目」)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、少なくとも2レベル改善していること。
3.治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSにおける重症度が、ベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、少なくとも2レベル改善していること。
4.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に2レベルの複合応答で示される改善とは、CR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善し、PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善した被験者と定義される。
5.治療領域の臨床医がライブで評価したCR−PCSSにおける重症度が、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、ベースラインから少なくとも1レベル改善していること。
6.治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSの重症度が、ベースラインから22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、少なくとも1レベル改善していること。
7.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、1レベルの複合応答で示された改善とは、CR−PCSSでベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善が見られ、PR−PCSSでベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善が見られた被験者と定義される。
8.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度であった患者集団において、少なくとも1つの治療領域の改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記のNo.1からNo.7の1つ以上である。
9.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、または2回目の治療、または3回目の治療から1ヶ月、または3ヶ月、または6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または24ヶ月に、さらなる改善が見られた。
10.180日目において、ベースラインに対するCR−PCSS評価における改善は、治療領域の左右で一貫して見られた。
11.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く2レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの改善が得られるまでの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
12.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く1レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
13.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、被験者のCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSスコアの平均値が、初回治療の21日後にプラセボから分離し、その後の治療で継続的かつ有意な改善を示した。
14.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者の集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSによって測定される2レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
15.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者の集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSによって測定される1レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
16.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上の患者が、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのCR−PCSSおよび/または少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を有し、CR−PCSSの結果が年齢、BMIまたは肌の色に依存しない。
17.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
18.CR−PCSSおよびPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、ベースライン(スクリーニング訪問)からのCR−PCSSおよびPR−PCSSの評価の最大の低下が90日目で初めて観察された。
19.CR−PCSS及び/又はPR−PCSSの評価が中等度又は重度である患者集団において、180日目前の所定の時点でのセルライト重症度の改善(すなわち、マイナスの変化)が180日目の訪問時にも維持される。
20.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、90日目に、左臀部および左大腿部のCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価のベースラインからの平均(SD)変化は、それぞれ約−0.8(0.58)および約−0.6(0.62)であり、右臀部および右大腿部のCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価のベースラインからの平均(SD)変化は、それぞれ約−0.7(0.73)および約−0.5(0.70)である。
21.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、180日目で、CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価のベースライン(スクリーニング訪問)からの減少が左右で一貫している。
22.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの領域でCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が2レベル改善することが、90日目には被験者の少なくとも10%、180日目には被験者の少なくとも15%で観察された。
22.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、少なくとも1つの領域でCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が2レベル改善することが、90日目に少なくとも10%、180日目に少なくとも15%の被験者で観察され、その反応は臀部と大腿部の領域、および左右の側面で同様であった。
23.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域でCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が1レベル改善することが、90日目の被験者の少なくとも60%および180日目の被験者の少なくとも65%で観察された。
24.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域におけるCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価の1レベルの改善が、90日目の被験者の少なくとも60%および180日目の被験者の少なくとも65%で観察され、その反応は臀部および大腿部の領域および左右の側面で同様である。
25.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く2レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答が得られるまでの時間の中央値は約80日と観察された。
26.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く1レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答が得られるまでの時間の中央値は約40日である。
27.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも50%の患者が71日目に標的臀部で1レベルのPR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答者である。
28.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも20%の患者が71日目に標的臀部で2レベルのPR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答者である。
29.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、71日目で標的臀部において、少なくとも35%の患者が1レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS複合応答者である。
30.全ての患者がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、71日目に非標的臀部で少なくとも5%の患者が2レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS複合応答者である。
31.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、71日目のPR−PCSSおよび/またはPR−PCSSのベースラインからの平均変化量は、コラゲナーゼを投与した被験者の方が、プラセボを投与した被験者よりも、標的臀部(それぞれ約0.9対約0.5)および非標的臀部(それぞれ約0.9対約0.5)で大きかった。
32.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、1レベルのPR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答者の割合は、71日目において、コラゲナーゼを投与した被験者の方が、プラセボを投与した被験者よりも、標的臀部(それぞれ約62%対約40%)および非標的臀部(それぞれ約65%対約40%)で多かった。
33.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、CCHを投与した被験者のCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSのベースラインからの平均変化量は、71日目の標的臀部(それぞれ約0.7対約0.4[0.72])および非標的臀部(それぞれ約0.8対約0.3)において、プラセボを投与した被験者よりも大きかった。
34.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、1レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS応答者の割合は、コラゲナーゼで治療した被験者の方が、プラセボで治療した被験者よりも、71日目の標的臀部(それぞれ約58%対約32%)および非標的臀部(それぞれ約60%対約27%)で多かった。
35.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、1レベルのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS複合応答者の割合は、コラゲナーゼで治療した被験者の方が、プラセボで治療した被験者よりも、71日目の標的臀部(それぞれ約42%対約20%)および非標的臀部(それぞれ約44%対約13%)で多かった。
36.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、本明細書に記載のコラゲナーゼ治療により、プラセボよりも少なくとも5%高い、またはプラセボよりも少なくとも7.5%高い、またはプラセボよりも少なくとも10%高い、またはプラセボよりも少なくとも12.5%高い、またはプラセボよりも少なくとも15%高い、またはプラセボよりも少なくとも20%高い、2レベル以上の複合型応答者が得られる。
37.全員がCR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、本明細書に記載されているコラゲナーゼ治療により、1レベル以上の複合応答者が、プラセボよりも少なくとも5%高い、または少なくとも7.5%プラセボより高い、または少なくとも10%プラセボより高い、または少なくとも12.5%プラセボより高い、または少なくとも15%プラセボより高い、または少なくとも20%プラセボより高い、または少なくとも25%プラセボより高い、または少なくとも30%プラセボより高い、または少なくとも35%プラセボより高い、または少なくとも40%プラセボより高い。
38.CR−PCSSおよびPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、CR−PCSSおよびPR−PCSSの評価のベースライン(スクリーニング)からの最大の減少が、22日目、71日目、またはそれ以前に初めて観察された。
39.ベースライン(治療前)において、CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者の集団において、ベースライン(スクリーニング訪問)からのCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価の低下が左右で一貫している。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
1.ベースラインの1日目 へクセルCSS評価を有する患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たす結果となった:
● 重度から中等度(スコア11〜15から6〜10)への移行
● 重度から軽度(スコア11〜15から1〜5)への移行
● 重度からゼロ(スコア11〜15から0)への移行
● 中程度から軽度(スコア6〜10から1〜5)への移行
● 中程度からゼロ(スコア6〜10から0)への移行
● 軽度からゼロ(スコア1〜5から0)への移行
2.治療領域の臨床医がライブで評価したヘクセルCSSにおいて、ベースライン(治療前の「1日目」)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、少なくとも2レベルの重症度の変化。
3.治療領域のデジタル画像を見ながら臨床医が評価したヘクセルCSSにおいて、ベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、少なくとも2レベルの重症度の変化。
4.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目における2レベルの応答によって示された変化とは、臨床医による評価でヘクセルCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善した被験者と定義される。
5.治療領域の臨床医がライブで評価したヘクセルCSSの重症度がベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目のいずれかで少なくとも1レベルの重症度の変化があること。
6.治療領域のデジタル画像を見ながら臨床医が評価したヘクセルCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目のいずれかにおいて、少なくとも1レベルの重症度の変化があること。
7.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、5年目に1レベルの反応が示された変化とは、臨床医による評価でヘクセルCSSの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義されるものである。
8.へクセルCSS評価が中等度または重度であった患者集団において、少なくとも1つの治療領域の改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その変化が上記のNo.2からNo.7のうち1つ以上であること。
9.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
10.180日目には、ベースラインからのへクセルCSS評価の改善が、治療領域の左右で一貫して見られた。
11.へクセルCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く2レベルのへクセルCSS改善が得られるまでの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
12.へクセルCSS評価が中等度または重度である患者の集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く1レベルのへクセルCSS改善が得られるまでの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
13.へクセルCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、初回治療の21日後に被験者のへクセルCSSスコアの平均値がプラセボから分離し、その後の治療でも継続して有意な改善を示した。
14.全員が中等度または重度のへクセルCSS評価を有する患者の集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でヘクセルCSSにより測定された2レベルの応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
15.全員が中等度または重度のへクセルCSS評価を有する患者の集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でヘクセルCSSにより測定された1レベルの応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
16.中等度または重度のへクセルCSS評価を有する患者の集団において、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのへクセルCSS応答があり、へクセルCSSの結果が年齢、BMI、または肌の色に依存しない患者の3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上である。
17.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
1.ベースラインの1日目ヘクセルくぼみ深さスコア評価を全員が有した患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射した結果、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たした:
●深いくぼみ(3)から中程度の深さ(2)への移行
●深いくぼみ(3)から表面的なくぼみ(1)への移行
●深いくぼみ(3)からくぼみなし(0)への移行
●中程度の深さ(2)から表面的なくぼみ(1)への移行
●中程度の深さ(2)からくぼみなし(0)への移行
●表面的なくぼみ(1)からくぼみなし(0)への移行
2.治療領域の臨床医がライブで評価したヘクセルくぼみ深さスコアの重症度がベースライン(治療前の「1日目」)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において少なくとも2レベルでの変化。
3.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において2レベル応答によって示された変化は、臨床医による評価でヘクセルくぼみ深さスコアの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善した被験者として定義される。
4.治療領域の臨床医がライブで評価したヘクセルくぼみ深さスコアの重症度がベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において少なくとも1レベル変化したこと。
5.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に1レベル応答によって示された変化とは、臨床医による評価でヘクセルくぼみ深さスコアの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義される。
6.へクセルCSS評価で中程度または深いくぼみを有した患者集団において、少なくとも1つの治療領域での改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その変化が上記のNo.2からNo.7の1つ以上であること。
7.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという結果が得られ た。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
8.180日目に、ヘクセルくぼみ深さスコア評価のベースラインからの 改善が、治療領域の左右で一貫して見られた。
9.ヘクセルくぼみ深さスコアの評価が中程度または深いくぼみを有した患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く2レベルのヘクセルくぼみ深さスコアの改善が得られるまでの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
10.ヘクセルくぼみ深さスコアの評価が中程度または深い深さである患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く1レベルのヘクセルくぼみ深さスコアの改善が得られるまでの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
11.ヘクセルくぼみ深さスコアが中程度または深い深さである患者集団において、初回治療の21日後に被験者の平均ヘクセルくぼみ深さスコアがプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示した。
12.全員がヘクセルくぼみ深さスコアの評価が中程度または深い深さである患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でヘクセルくぼみ深さスコアによって測定される2レベルの反応があった被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
13.全員がヘクセルくぼみ深さスコアの評価が中程度または深い深さである患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でヘクセルくぼみ深さスコアによって測定された1レベルの応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
14.ヘクセルくぼみ深さスコアの評価が中程度または深い深さである患者集団において、治療後71日目までに、患者の3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上が、少なくとも1つの治療領域で1レベルのヘクセルくぼみ深さスコアの応答を示し、ヘクセルくぼみ深さスコアの結果は、年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
15.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
16.ベースラインから71日目までのスコアの変化が約−0.1〜約−2.0の1つ以上の治療領域。
17.統計的に有意な患者集団において、1つ以上の治療領域で最小二乗(LS)平均値が約−0.1〜約−1.5(95%信頼区間(CI))であること。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
1.セルライトを有する患者の集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たすことができた:
●リッカート尺度スコアが「改善された」(1)
●リッカート尺度スコアが「大幅に改善された」(2)
●リッカート尺度スコアが「非常に改善された」(3)
2.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目における治療領域の外観が、治療前と比較して、臨床医がライブで評価したリッカート尺度スコアで少なくとも2レベル改善されていること。
3.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目における治療領域の外観が、治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したリッカート尺度スコアで、治療前から少なくとも2レベル改善されていること。
4.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目における治療領域の外観が、治療前と比較して、臨床医がライブで評価したリッカート尺度スコアで少なくとも1レベル改善されていること。
5.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目における治療領域の外観が、治療前と比較して、治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したリッカート尺度スコアで少なくとも1レベル改善されていること。
6.セルライトを有する患者の集団において、少なくとも1つの治療領域におけるリッカート尺度スコアの改善が統計的に有意であり、その改善が上記のNo.2からNo.7のうちの1つ以上であること。
7.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、または50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、または24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
8.180日目に、ベースラインからのリッカート尺度スコア評価で見られた改善は、右と左の治療領域で一貫していた。
9.セルライトを有する患者の集団において、少なくとも1つの治療領域における最も早い2レベルのリッカート尺度スコアの改善までの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
10.セルライトを有する患者の集団では、少なくとも1つの治療領域における最も早い1レベルのリッカート尺度スコアの改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
11.セルライトを有する患者集団において、被験者のリッカート尺度スコアの平均値は、初回治療の21日後にプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示した。
12.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でリッカート尺度スコアによって測定される2レベルの反応を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
13.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でリッカート尺度スコアによって測定される1レベルの応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
14.セルライトを有する患者集団において、3分の1以上、または2分の1、または3分の2、または4分の3の患者が、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのリッカート尺度スコアの反応を有し、リッカート尺度スコアの結果は、年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
15.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
●深さ:約100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、または20%、または15%、または10%、または5%、または2.5%、または2%、または1%
●幅:約100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、または20%、または15%、または10%、または5%、または2.5%、または2%、または1%
●長さ:約100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、または20%、または15%、または10%、または5%、または2.5%、または2%、または1%
●全体の体積:約100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、または20%、または15%、または10%、または5%、または2.5%、または2%、または1%
●表面積:約100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%、25%、または20%、または15%、または10%、または5%、または2.5%、または2%、または1%
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
上記で詳述した治療方法により、S−GAISおよびI−GAISで測定される応答が改善される。2レベルのS−GAIS応答者とは、評価時点でS−GAIS評価が少なくとも2(+2または+3)の被験者である。1レベルのS−GAIS応答者は、評価時点でS−GAIS評価が少なくとも1(+1、+2、+3)の被験者である。2レベルのI−GAIS応答者は、評価時点でI−GAIS評価が少なくとも2(+2または+3)の被験者である。1レベルのI−GAIS応答者とは、評価時点でI−GAIS評価が少なくとも1(+1、+2、または+3)の被験者である。任意の訪問時における個々の患者の改善とは、ベースラインまたはそれ以前のスコアから少なくとも1レベルまたは1評価の改善をいう。患者群の改善とは、ベースラインまたは前回の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1向上することをいう。
1.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たす:
●S−GAISおよび/またはI−GAISのスコアが「改善された」(+1)
●S−GAISおよび/またはI−GAISのスコアが「大幅に改善された」(+2)
●S−GAISおよび/またはI−GAISのスコアが「非常に改善された」(+3)
2.治療領域の臨床医がライブで評価したI−GAISにおいて、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に少なくとも2レベルの改善が見られたこと。
3.治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したS−GAISにおいて、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に少なくとも2レベルの改善が見られたこと。
4.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に2レベルの複合応答で示される改善とは、臨床医の評価でI−GAISが少なくとも2レベル改善し、患者の評価でS−GAISが少なくとも2レベル改善した被験者と定義される。
5.治療領域の臨床医がライブで評価したI−GAISにおいて、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に、少なくとも1レベルの改善が見られたこと。
6.治療領域のデジタル画像を見ながら被験者が評価したS−GAISにおいて、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に、少なくとも1レベルの改善が見られたこと。
7.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、365日目、または730日目に1レベルの複合応答で示される改善とは、臨床医による評価でI−GAISが少なくとも1レベル改善し、患者による評価でS−GAISが少なくとも1レベル改善した被験者と定義される。
8.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域におけるI−GAISおよび/またはS−GAISの改善が、プラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記のNo.2からNo.7の1つ以上である。
9.この治療により、少なくとも5%の患者が初回投与後71日間、その改善レベルを維持した。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。他のケースでは、少なくとも5%の患者が改善を示し、時間の経過とともに改善の度合いがさらに高まった。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
10.180日目において、I−GAISおよびS−GAIS評価に見られる改善は、治療領域の左右で一貫していた。
11.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域における最も早い2レベルのI−GAISおよび/またはS−GAISの改善までの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
12.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域における最も早い1レベルのI−GAISおよび/またはS−GAISの改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
13.セルライトを有する患者集団において、被験者のI−GAISおよび/またはS−GAISの平均値は、初回治療の21日後にプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示した。
14.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でI−GAISおよび/またはS−GAISによって測定される2レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
15.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でI−GAISおよび/またはS−GAISによって測定される1レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
16.セルライトを有する患者集団において、患者の3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上が、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのI−GAISおよび/またはS−GAIS応答を有し、GAIS結果は年齢、BMI、または肌の色に依存しない。
17.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
18.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、少なくとも60%の患者が71日目に標的臀部で1レベルのS−GAIS応答を示した。
19.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも20%の患者が71日目に標的臀部で2レベルのS−GAIS応答を示した。
20.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、71日目では、プラセボで治療した被験者と比較して、標的臀部にコラゲナーゼで治療した被験者で平均S−GAISが大きくなった(それぞれ約1.0対約0.5)。非標的臀部についても同様の結果が得られた(コラゲナーゼ治療を受けた被験者では約1.0、プラセボ治療を受けた被験者では約0.5)。
21.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、71日目で、1レベルのS−GAIS応答者の割合は、標的臀部(それぞれ約70%対約40%)および非標的臀部(それぞれ約70%対約40%)において、コラゲナーゼで治療した被験者がプラセボで治療した被験者よりも多くなった。
22.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、71日目では、標的臀部にコラゲナーゼを投与した被験者の平均I−GAISは、プラセボを投与した被験者と比較して、統計的に有意に大きかった(それぞれ約1.0対0.3)。非標的臀部についても同様の結果が得られた(コラゲナーゼ治療を受けた被験者では約0.6、プラセボ治療を受けた被験者では約0.1)。
23.CR−PCSS及び/又はPR−PCSS評価が中等度又は重度の患者集団において、71日目で、1レベルのI−GAIS応答者の割合は、標的臀部(それぞれ約70%対25%)及び非標的臀部(それぞれ70%対25%)において、コラゲナーゼで治療された被験者がプラセボで治療された被験者よりも多くなった。
24.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者の集団において、一連のクロス集計により、PR−PCSSとS−GAISの間に一貫性があることが示された。PR−PCSSの1レベルの変化は、S−GAISの同様の変化と関連していた。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
以上のような治療方法により、PR−CISで測定される応答が改善される。PR−CISのトータルスコアは、尺度の6つの項目の合計である。PR−CISのトータルスコアは0〜60の範囲で、数値が高いほどセルライトの影響が大きいことを示している。PR−CISの項目1は、セルライトの出現にどの程度満足しているかを問うもので、被験者が報告した評価を10から引くことで逆転する。PR−CISトータルスコアでは、評価時点でPR−CISトータルスコアがベースラインから12以上減少した被験者を応答者とした。個々のPR−CISインパクトスコアについては、各時点でベースラインから少なくとも2つのスコア間隔で改善した場合を応答とする。さらに、応答者とは、最大トータルスコアがベースラインから少なくとも20%の改善を示した患者を指す。また、個々の患者の各訪問時における改善とは、ベースラインまたは前回のスコアから少なくとも1レベルまたは1評価の改善を意味する。また、患者群の改善とは、ベースラインまたは前回の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1向上することである。さらに、改善とは、ベースラインからの変化が60のうち少なくとも1レベルであることをいう。
1.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たす:
●PR−CISは、セルライトの見た目に対する満足度、気になること、自覚、恥ずかしさ、老けて見えること、太って見えること/体型が崩れて見えることからなる群から選択された少なくとも1つの分野において改善を示すこと。
●1つ以上の評価時点で、PR−CISトータルスコアがベースラインから12以上低下すること。
●PR−CISインパクトスコアが、1つ以上の評価時点において、ベースラインから少なくとも2スコア間隔の改善を示すこと。
●改善とは、ベースラインからの変化が60のうち少なくとも1レベルであること。
2.治療領域のPR−CISにおいて、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または、5年目に、ベースライン(治療前の「1日目」)から少なくとも12ポイントの重症度の改善が認められること。
3.セルライトを有する患者集団において、治療領域のPR−CISで、ベースライン(治療前の第1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、重症度がプラセボに対して統計的に有意に少なくとも12ポイント改善すること。
4.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを71日以上維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
5.180日目に、ベースラインからのPR−CIS評価の改善が、治療領域の左右で一貫して見られた。
6.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域について、1つ以上の評価時点でPR−CISトータルスコアがベースラインから少なくとも12減少するまでの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
7.セルライトを有する患者集団において、初回治療の21日後に被験者のPR−CISスコアの平均値がプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示す。8.セルライトを有する患者集団において、3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上の患者が、治療後71日目までに、少なくとも1つの治療領域において、1つ以上の評価時点でベースラインから少なくとも12のPR−CISトータルスコアの減少を有し、PR−CISの結果は、年齢、BMIまたは肌の色に依存しない。
9.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
10.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、71日目のPR−CISトータルスコアのベースラインからの平均変化量は、コラゲナーゼ治療を受けた被験者では約−10、プラセボ治療を受けた被験者では約−5であった。
11.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、71日目のベースラインからのPR−CIS変化量の平均値は、トータルスコア(それぞれ約−12対−6)および短縮スコア(それぞれ約−10対5)、ならびに個人のインパクトスコア(セルライトの外観に対する満足度、煩わしさ、自意識、恥ずかしさ、老けた外観、体型への懸念)において、コラゲナーゼ治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者で統計的に有意に良好であった。
12.71日目にCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、PR−CISの奏効者の割合は、コラゲナーゼを投与された被験者の方が、プラセボを投与された被験者よりも、トータルスコア(それぞれ約45%対約20%)および短縮スコア(それぞれ約50%対約25%)で大きくなった。さらに、個々のインパクトスコアについても、プラセボ投与群よりもコラゲナーゼ投与群の方が、回答者の割合が多かった。これらの差も統計的に有意であった。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
上記の治療方法により、PR−CIS省略形で測定される応答が改善される。PR−CIS省略形のトータルスコアは、尺度の5つの項目の合計になる。PR−CIS省略形のトータルスコアは0〜50の範囲で、数値が高いほどセルライトによる悪影響が大きいことを示している。PR−CISの項目1は、セルライトの出現について被験者がどの程度満足しているかを問うものであり、被験者が報告した評価を10から引くことで逆転する。PR−CIS省略形トータルスコアでは、評価時点でPR−CISトータルスコアがベースラインから10以上減少した被験者を応答者とする。個々のPR−CIS省略形インパクトスコアについては、各時点でベースラインから少なくとも2つのスコア間隔で改善した場合を応答とする。さらに、応答者とは、最大トータルスコアがベースラインから少なくとも20%の改善を示した患者を指す。また、個々の患者については、ベースラインまたは前回のスコアから少なくとも1レベルまたは1評価の改善が見られた場合をいう。また、患者群の改善とは、ベースラインまたは前回の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1向上することである。さらに、改善とは、ベースラインからの変化が50のうち少なくとも1レベルであることをいう。
1.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たす:
●PR−CIS省略形では、セルライトの見た目に対する満足度、気になること、自覚、恥ずかしさ、老けて見えること、太って見えること/体型が崩れて見えることからなる群から選択された少なくとも1つの分野において改善を示すこと。
●1つ以上の評価時点で、PR−CIS省略形の合計スコアがベースラインから10以上低下すること。
●PR−CIS省略形インパクトスコアが、1つ以上の評価時点において、ベースラインから少なくとも2スコア間隔の改善を示すこと。
●さらに、改善とは、ベースラインからの変化が50のうち少なくとも1レベルであること。
2.治療領域のPR−CIS省略形において、22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、ベースライン(治療前の「1日目」)から少なくとも12ポイントの重症度の改善が認められること。
3.セルライトを有する患者集団において、治療領域のPR−CIS省略形において、ベースライン(治療前の第1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、重症度がプラセボに対して統計的に有意に少なくとも10ポイント改善すること。
4.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを71日以上維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらなる改善が見られた。
5.180日目において、PR−CIS省略形評価のベースラインからの改善は、治療領域の左右で一貫して見られた。
6.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域について、1つ以上の評価時点でPR−CIS省略形のトータルスコアがベースラインから少なくとも10減少するまでの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
7.セルライトを有する患者集団において、初回治療の21日後に被験者のPR−CIS省略形スコアの平均値がプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示す。
8.セルライトを有する患者集団において、3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上の患者が、治療後71日目までに、少なくとも1つの治療領域において、1つ以上の評価時点でベースラインから少なくとも10のPR−CIS略式トータルスコアの減少を有し、PR−CISの結果は、年齢、BMIまたは肌の色に依存しない。
9.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
10.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、71日目のPR−CIS省略形トータルスコアのベースラインからの平均変化量は、コラゲナーゼ治療を受けた被験者では約−10、プラセボ治療を受けた被験者では約−5であった。
11.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、71日目のベースラインからのPR−CIS省略形の変化の平均値は、コラゲナーゼ治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者とでは、トータルスコア(それぞれ約−12対約−6)および略式スコア(それぞれ約−10対約5)において統計的に有意に良好であった。また、個々のインパクトスコア(セルライトの外観に対する満足度、煩わしさ、自覚、恥ずかしさ、老けた外観、体型への懸念)においても、コラゲナーゼ投与群とプラセボ投与群の間で統計的に有意な変化が認められた。
12.71日目にCR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、PR−CIS略式化反応者の割合は、コラゲナーゼを投与された被験者の方が、プラセボを投与された被験者よりも、トータルスコア(それぞれ約45%対20%)および略式スコア(それぞれ約50%対25%)で大きくなりた。さらに、個々のインパクトスコアについても、プラセボ投与群よりもコラゲナーゼ投与群の方が、回答者の割合が多かった。これらの差も統計的に有意であった。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
以上のような治療方法により、SSRSで測定される改善効果が得られた。SSRS応答者とは、評価時点で患部のセルライトの外観に少なくともやや満足(やや満足[4]、非常に満足[5]、または極めて満足[6])している被験者のことである。さらに、ベースラインから最大トータルスコアが17%以上改善した患者を応答者とする。任意の訪問時における個々の患者の改善とは、ベースラインまたは前回のスコアから少なくとも1レベルまたは1評価の改善を意味する。任意の訪問時の患者群の改善は、ベースラインまたは任意の以前の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1の改善である。特定の実施形態では、治療方法は、SSRS評価によって測定される以下の有効性評価項目の1つ以上をもたらす:
1.セルライトを有する患者の集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たすことができる:
●「やや満足」のSSRS評価
●「満足」のSSRS評価
●「極めて満足」のSSRS評価
2.ベースライン(治療前の「1日目」)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、治療領域のSSRS評価が少なくとも2レベル改善すること。
3.ベースライン(1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、治療領域のSSRS評価が少なくとも1レベル改善すること。
4.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域におけるSSRS評価の改善が、プラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記のNo.2〜No.3のうちの1つ以上であること。
5.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという治療結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
6.初回注射後180日目に、SSRS評価のベースラインからの改善は、治療領域の左右で一貫して見られた。
7.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早い2レベルのSSRS評価の改善までの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
8.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域における最も早い1レベルのSSRS評価の改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
9.セルライトを有する患者集団において、初回治療の21日後に被験者のSSRS評価の平均値がプラセボから分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示す。
10.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でSSRS評価によって測定される2レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
11.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でSSRS評価により測定される1レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
12.セルライトを有する患者集団において、3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上の患者が、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのSSRS評価応答を有し、SSRS評価結果は、年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
13.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
14.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、71日目に少なくとも40%の患者が1レベルのSSRS応答者となった。
15.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度である患者集団において、71日目で、SSRSスコアの平均値は、コラゲナーゼを投与した被験者がプラセボを投与した被験者よりも統計的に有意に大きい。
16.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、少なくとも50%の患者が1レベルのSSRS応答者である。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
上記に詳述された治療方法により、SSCTで測定された改善が得られる。71日目のSSCT評価で「満足」または「非常に満足」の回答を得た被験者は、有効性を示す応答者とみなされる。個々の患者の改善とは、ベースラインまたは前回のスコアや評価から少なくとも1レベルまたは1評価の改善を意味する。また、患者群の改善とは、ベースラインまたはそれ以前の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1ポイント改善したことをいう。さらに、SSCTでは、プラセボと比較して少なくとも0.1の改善がある。特定の実施形態では、治療方法は、SSCT評価によって測定される以下の有効性評価項目の1つ以上をもたらす:
1.セルライトを有する患者の集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たすことができた:
●「満足」のSSCT評価
●「非常に満足」のSSCT評価
2.治療領域の22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目におけるSSCT評価の上昇(例えば、1から2など)。
3.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域におけるSSCT評価の増加が、プラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、5年目のいずれかの時点であったことが確認された。
4.この治療法により、少なくとも5%の患者が初回投与後71日間、その改善レベルを維持した。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。他のケースでは、少なくとも5%の患者が改善を示し、時間の経過とともに改善の度合いがさらに高まった。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらなる改善が見られた。
5.180日目の時点で、SSCT評価で見られた改善は治療領域の左右で一貫している。
6.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域における最も早いSSCT評価の改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
7.セルライトを有する患者集団において、平均的な被験者のSSCT評価は、最初の治療の21日後にプラセボと分離し、その後の治療でも継続的かつ有意な改善を示す。
8.セルライトを有する患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でSSCT評価が改善された被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%よりも大きい。
9.セルライトを有する患者集団において、治療後71日目までに、患者の3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上が、少なくとも1つの治療領域において改善されたSSCT評価を有し、SSCT評価の結果は、年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
10.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
11.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSの評価が中等度または重度である患者集団において、180日目に半数以上の患者が治療に満足または非常に満足している。
12.CR−PCSSおよびPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、180日目に持続したCR−PCSSおよびPR−PCSS評価の低下と被験者満足度調査のスコアは、0.84mg CCHを1治療あたり12回(×2治療領域)、両側の臀部または両側の大腿部に皮下注射する3つの治療セッションがセルライトの減少に有効であることを示している。
13.CR−PCSSおよび/またはPR−PCSS評価が中等度または重度の患者集団において、コラゲナーゼによる治療を受けた患者の少なくとも50%が、セルライト治療に満足または非常に満足している。
14.CR−PCSSおよびPR−PCSSの評価が中等度または重度の患者集団において、71日目の被験者満足度の平均値に、コラゲナーゼ治療群とプラセボ治療群の間に統計的に有意な差が認められた。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
任意の訪問時における個々の患者の改善とは、ベースラインまたは前回のスコアもしくは評価から少なくとも1レベルまたは1等級の改善を意味する。患者群の改善とは、ベースラインまたは前回の平均スコアまたは評価から、平均スコアまたは評価が約0.1向上したことをいう。応答者とは、ベースラインから最大合計スコアまたは評価の少なくとも20%の改善を示す任意の患者である。特定の実施形態では、上記で詳述した治療方法により、TCS−Cおよび/またはTCS−Pによって測定される以下の有効性評価項目の1つ以上が得られる:
1.TCS−Cおよび/またはTCS−Pの評価がベースラインと比較して0.1以上改善していること。
2.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、標的大腿部の臨床医がライブで評価したTCS−Cの重症度が少なくとも2レベル改善すること。
3.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、標的大腿部のデジタル画像を見ながら被験者が評価したTCS−Pの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも2レベル改善すること。
4.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に2レベルの複合応答で示された改善とは、TCS−Cでベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善があり、TCS−Pでベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善があった被験者と定義される。
5.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、標的大腿部の臨床医がライブで評価したTCS−Cの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善すること。
6.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目において、対象の大腿部のデジタル画像を見ながら被験者が評価したTCS−Pの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善すること。
7.22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に1レベルの複合応答で示された改善とは、TCS−Cでベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善があり、TCS−Pでベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善があった被験者と定義される。
8.TCS−C評価が中等度または重度の患者集団において、少なくとも1つの治療領域での改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記のNo.1〜7の1つ以上であること。
9.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを少なくとも71日間維持するという結果が得られた。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
10.180日目に、ベースラインからのTCS−Cおよび/またはTCS−P評価の改善が、左右の大腿部で一貫して見られた。
11.TCS−C評価が中等度または重度の患者集団において、少なくとも1つの治療領域で最も早く2レベルのTCS−Cおよび/またはTCS−Pの改善が得られるまでの時間の中央値は、約50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
12.TCS−C評価が中等度または重度である患者集団において、少なくとも1つの治療領域において、最も早い1レベルのTCS−Cおよび/またはTCS−Pの改善までの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
13.TCS−C評価が中等度または重度の患者集団において、初回治療の21日後に被験者のTCS−Cおよび/またはTCS−Pスコアの平均値がプラセボと比較して分離し、その後の治療で継続的かつ有意な改善を示した。
14.TCS−C評価が中等度または重度の患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でTCS−Cおよび/またはTCS−Pによって測定される2レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
15.TCS−C評価が中等度または重度の患者集団において、71日目に少なくとも1つの治療領域でTCS−Cおよび/またはTCS−Pによって測定される1レベルの複合応答を有する被験者の割合は、約1%〜10%、10%〜20%、20%〜30%、30%〜40%、40%〜50%、または50%より大きい。
16.全員が中等度または重度のTCS−C評価を有する患者の集団において、治療後71日目までに少なくとも1つの治療領域で少なくとも1レベルのTCS−Cおよび/または少なくとも1レベルのTCS−P応答を有する患者の3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上が、TCS−Cの結果が年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
17.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
上記の治療法により、Body−Qで測定される応答が改善される。セルライトについては、過去1週間の間に「全く気にならない」から「非常に気になる」までの範囲で患者が回答できる16の尺度の項目があり、フレッシュ・キンケイド級の読解力を想定している。スコアの範囲は、16(非常に気になる)から64(全く気にならない)までである。Body−Qトータルスコアでは、評価時点でBody−Qトータルスコアがベースラインから16以上増加した被験者を応答者とする。個々のBody−Qインパクトスコアについては、各時点でベースラインから少なくとも1つのスコア間隔の改善があることが応答である。代替的な実施形態では、尺度項目は16より多くても少なくてもよく、応答者は、ベースラインから最大トータルスコアの少なくとも25%の改善を示す任意の患者である。
1.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1回の治療訪問時に少なくとも1つの治療領域にコラゲナーゼを注射することにより、統計的に有意な数の当該患者が以下の有効性評価項目の1つ以上を満たす:
● Body−Qは、以下からなる群から選択された少なくとも1つの分野で改善を示す:
〇 1つ以上の評価時点で、Body−Qのトータルスコアがベースラインから16以上増加すること
〇 個々のBody−Qインパクトスコアについて、各時点でベースラインから少なくとも1つのスコア間隔の改善があること、および
〇 最大トータルスコアがベースラインから少なくとも25%改善すること。
● 1つ以上の評価時点において、Body−Qのトータルスコアがベースラインから16以上増加する。
● 1つ以上の評価時点で、Body−Qインパクトスコアがベースラインから少なくとも1スコア間隔の改善を示す。
● 90日目および/または180日目のセルライトに関するBody−Q評価のベースラインからの平均変化
2.ベースライン(治療前の「1日目」)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、標的臀部のBody−Qにおいて少なくとも16ポイント増加という重症度の改善。
3.セルライトを有する患者集団において、ベースライン(治療前の1日目)から22日目、43日目、71日目、90日目、180日目、251日目、360日目、431日目、720日目、3年目、4年目、または5年目に、標的臀部のBody−Qにおいて少なくとも16ポイント増加することによって示される、プラセボに対する重症度の統計学的に有意な改善。
4.初回投与後、少なくとも5%の患者が治療前のベースラインに対する改善レベルを71日以上維持するという結果が得られ た。特定のケースでは、少なくとも10%、または20%、または30%、または、40%、または50%の患者が、初回投与後、少なくとも6ヶ月、または9ヶ月、または12ヶ月、または18ヶ月、または2年、または3年、または4年、または5年の間、そのようなレベルを維持した。その他のケースでは、治療前のベースラインに対して少なくとも5%の患者が改善を示し、さらに時間の経過とともに改善の度合いが増加するという結果が得られた。ある治療法では、初回投与から1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、さらに改善の増加が見られた。いくつかの治療法では、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%の患者が改善を示し、初回治療、2回目の治療、3回目の治療の1ヶ月後、3ヶ月後、6ヶ月後、9ヶ月後、12ヶ月後、18ヶ月後、24ヶ月後に、さらに改善が見られた。
5.最初の注射から180日目に、ベースラインからのBody−Q評価の 改善は、左右の臀部で一貫して見られた。
6.セルライトを有する患者集団において、少なくとも1つの治療領域について、1つ以上の評価時点でベースラインからBody−Qトータルスコアが少なくとも16増加するまでの時間の中央値は、約15日、または20日、または30日、または40日、または50日、または60日、または70日、または80日、または90日である。
7.セルライトを有する患者集団において、初回治療の21日後に被験者の平均Body−Qスコアがプラセボから分離し、その後の治療でも継続して有意な改善を示す。
8.セルライトを有する患者集団において、3分の1以上、または2分の1以上、または3分の2以上、または4分の3以上の患者が、治療後71日目までに、少なくとも1つの治療領域において、1つ以上の評価時点でベースラインから少なくとも16のBody−Qトータルスコアの増加を有し、Body−Qの結果は、年齢、BMI、または肌の色とは無関係である。
9.セルライトの重症度の減少は最初の治療訪問の後の約7、または14、または21、または30、または35、または40、または45、または50日以内に急速に起こる。
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● 約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1)
● 約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM
● 約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1)
● 約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒
● 約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1
● 約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量
● 逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度は少なくとも80%
● 約500〜30,000個のSRC単位/mgの力価(すなわち、比活性)
● 約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価
● 約100,000〜約400,000GPA単位/mgの力価
● 約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価
● 約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価
● クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下
● 1cfu/mL以下のバイオバーデン
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
● I型
〇 アッセイ:SRCマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.08〜7.70
〇 KM:約4.1〜410ナノモル
〇 Kcat、秒−1:約1.1〜107
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
● II型
〇 アッセイ:GPAマイクロプレート
〇 Vmax、分−1:約0.3〜30.5
〇 KM、mM:約0.03〜3.1
〇 Kcat、秒−1:約93〜9,179
〇 1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
〇 Kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
他の比率を採用してもよい(例えば、0.1〜2:1、または0.25〜2:1、または0.5〜2:1、または0.75〜2:1、または1:0.1〜2、または1:0.25〜2、または1:0.5〜2、または1:0.75〜2、または1:0、または0:1)。さらに、I型およびII型コラゲナーゼは、それぞれAUX−IおよびAUX−IIであってもよい。
導入 3D写真やその他の画像は、治療効果の評価、特に陥凹部分析やあざの分析に使用することができる。3D画像を用いたくぼみ分析(上記で定義)は、くぼみの体積、長さ、幅、および面積の計算を含むことができる。計算は、EckhouseらのWO2018/116304およびWO2018/116305、Cherry Imagingに記載されているものや、Canfield Scientific,Inc.から入手可能なものなど、様々な既知の方法によって行うことができる。体積、長さ、幅、および面積のそのような測定値は、デジタル3Dグレー尺度画像(XおよびY軸回転機能付き)およびデジタル3Dテクスチャおよび照明付き画像(XおよびY軸回転機能付き)を、そのような画像を分析するコンピュータプログラムとともに使用して計算されてもよい。一実施形態では、臀部の治療領域について、治療前および治療後の各患者について、左の治療された臀部および/または右の治療された臀部の画像を撮影してもよい。別の実施形態では、大腿部の治療領域について、治療の前後に、被験者の後面、斜面、および側面の大腿部の治療領域のそれぞれについて、例えば0度、45度、および90度で画像を撮影してもよい。
画像はDMSに取り込まれてステージングされ、レビューに利用できる。写真の訪問には以下が含まれる:スクリーニング、1日目/プレマーキング、1日目/ポストマーキング、4日目、8日目、15日目、22日目/プレマーキング、22日目/ポストマーキング、43日目/プレマーキング、43日目ポストマーキング、71日目/ET。
1.画像と配置画像をパワーポイントに書き出す。
2.サイトに連絡し、サイトの調査員にパワーポイント内の画像にXで主な陥凹部をマークするように依頼する。
3.通信文が保存され、画像解析(IA)チームと共有される。
あざ分析.1日目、4日目、8日目、および15日目に、2つのL*A*B*色の測定値を用いて、あざのある組織と正常組織を3D写真で評価した(図18(B))。L*A*B*の色の強さの測定値が大きいほど、あざの状態が悪い。治療領域と注射の種類ごとに、あざのある組織と正常な組織の2色の間の視覚的な変化を測定する。
本明細書に記載されているコラゲナーゼ治療法は、本明細書に開示されている尺度または評価方法のいずれかによって測定される効果の耐久性を有する。そのような耐久性は、約3ヶ月から5年またはそれ以上の範囲であり得る。単一の注射または一連の注射により、長期間、例えば、約6ヶ月、1年、2年、3年、4年、または5年、またはそれ以上の期間、セルライトの改善を維持したり、セルライトの外観を改善し続けたり、セルライトの外観の重症度を軽減したりすることができる。
a.CR−PCSS評価の低下は180日目まで維持され、被験者のセルライト治療に対する満足度評価のスコアと相まって、CCH 0.84mgを治療領域ごとに12回(×2治療領域)、両側の臀部または両側の大腿部に皮下注射した3回の治療セッションの有効性が裏付けられた。
b.180日目において、CR−PCSS評価のベースライン(スクリーニング訪問)からの低下が左右で一致していること。
c.180日目に、少なくとも1つの治療領域において、CR−PCSS評価の2レベルの改善が認められる。応答は、臀部と大腿部、および左右で同様である。
d.180日目に少なくとも1つの領域でCR−PCSS評価が1レベル改善されていること。応答は、臀部と大腿部、および左右で同様である。
e.少なくとも1つの領域で最も早く2レベルのCR−PCSS応答が得られるまでの期間の中央値は83日と観察される。
f.最も早い1レベルのCR−PCSS応答が得られるまでの期間の中央値が41日である。
g.180日目には半数以上の患者が治療に満足または非常に満足していた。
h.へクセルCSSのスコアが初めて中等度(6〜10)または軽度(1〜5)に分類され、ベースラインの重度(11〜15)と比較して中等度(6〜10)または軽度(1〜5)に分類され続けていた期間。
i.CR−PCSS、PR−PCSS、へクセルCSS、ヘクセルくぼみ深さスコア、リッカート尺度、陥凹部分析、I−GAIS、S−GAIS、PR−CIS、PR−CIS省略形、SSRS、SSCT、TCS−C、TCS−P、Body−Q、写真またはその他の画像による評価、または臨床医および/もしくは患者がセルライトの重症度、改善度、および/もしくは患者の満足度を評価するために使用するその他の有効なフォト数値もしくはその他の尺度のうちの1つ以上によって測定される改善を実証した後に、改善が測定された日からベースラインまたはそれよりも悪い状態に戻った日までの期間。
j.改善が測定された日から、CR−PCSS、PR−PCSS、へクセルCSS、ヘクセルくぼみ深さスコア、リッカート尺度、陥凹部分析、I−GAIS,S−GAIS、PR−CIS、PR−CIS省略形、SSRS、SSCT、TCS−C、TCS−P、Body−Q、写真またはその他の画像による評価、または臨床医および/もしくは患者がセルライトの重症度、改善度、および/もしくは患者の満足度を評価するために使用するその他の有効なフォト数値もしくはその他の尺度のうちの1つ以上によって測定された、被験者が治療に対する応答の観察可能な喪失を有する日までに測定された期間。
k.治療に対する応答の基準時点から、被験者が応答の変化(治療に対する初期の反応に対する改善を含む)を有するときまでの測定期間。応答の変化および/または改善は、CR−PCSS、PR−PCSS、へクセルCSS、ヘクセルくぼみ深さスコア、リッカート尺度、陥凹部分析、I−GAIS、S−GAIS、PR−CIS、PR−CIS省略形、SSRS、SSCT、TCS−C、TCS−P、Body−Q、写真または他の画像による評価、またはセルライトの重症度、改善、および/または患者の満足度を評価するために臨床医および/または患者によって使用される他の検証されたフォト数値または他の尺度のうちの1つ以上によって測定することができる。いくつかの実施形態では、基準時点は、ベースライン(投与前、1日目)または治療後71日目である。
l.被験者がCR−PCSSおよびPR−PCSSに基づく2レベルの複合型応答者となった訪問日から、評価値がベースライン評価に戻り、および持続する2回の連続した訪問日の最初の日までの期間。
m.被験者がCR−PCSSおよびPR−PCSSに基づき1レベルの複合型応答者となった訪問日から、評価値がベースライン評価に戻り、および持続する2回の連続した訪問日の最初の日までの期間。
現在までに行われた研究、そのいくつかは以下の実施例に詳述されているが、それらにより本明細書に記載された治療法の安全性が立証されている。例えば、これらの研究では、4つの治療領域に3.36mgのCCHを同時に皮下投与しても、コラゲナーゼの全身への曝露がないことが確認された。実際、4つの治療領域に同時投与しても、コラゲナーゼの安全性特性に新たな懸念は見られなかった。一般的に報告されている事象は、現在知られているコラゲナーゼの有害事象特性と一致していた。
以下の例は、本開示の特定の実施形態を示すために含まれている。しかしながら、当業者であれば、本開示に照らして、開示されている特定の実施形態に変更を加えても、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、同様のまたは類似の結果を得ることができることを理解すべきである。したがって、記載されているすべての事項は例示として解釈されるべきであり、限定的な意味で解釈されるべきではない。例えば、CCHを用いた研究では、他のコラゲナーゼを、CCHと同等の活性と反応をもたらすのに十分な量(治療有効量)で使用することができる。後述の臨床研究結果において、報告された各数値は厳密な限定を意図したものではないことが理解されるべきである。本開示の範囲には、本明細書に記載された発明の事実と原理に合致する各数値の周囲の範囲が含まれる。したがって、各値は、約1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、または100%、上下に変化してもよい。いくつかの例では、特定の値の文脈や状況に合わせて、125%、150%、175%、200%、225%、250%、275%、または300%程度、上下に変化することがある。
非盲検の段階2研究が実施され、少なくとも両側の治療領域(両側の臀部または両側の大腿部)に軽度、中等度、または重度のセルライトがある被験者に対して、1日目、22日目、43日目に、指定された治療領域にCCHが投与された。すべての被験者に対しては90日目と180日目に、一部の被験者に対しては各治療セッションの1日後、3日後、6日後、13日後に追跡調査が行われた。治療効果を評価するために、90日目と180日目(すなわち、それぞれ1日目から89日目と179日目)に追跡調査を行った(写真下位研究)。本実施例では、特に明記しない限り、本研究205で用いた「日数」は、研究205の初回投与(1日目)に対するものである。
一次エンドポイントは、ITT集団において、71日目に対象となる臀部で2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答が得られた割合であった。2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者とは、CR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善し、PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善した被験者と定義した。
・71日目に対象となる臀部でPR−PCSSが1レベル応答者の割合(CCH治療を受けた被験者114名(54.3%)対プラセボ治療を受けた被験者77名(36.2%)、p<0.001)。
・71日目に対象となる臀部で2レベルのPR−PCSS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者51[24.3%]対プラセボ治療を受けた被験者26[12.2%]、p=0.001)。
・71日目に対象となる臀部で1レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合(CCH治療を受けた被験者78名(37.1%)対プラセボ治療を受けた被験者38名(17.8%)、p=<0.001)。
・71日目に非対象の臀部で2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合(CCH治療を受けた被験者では16(7.6%)対プラセボ治療を受けた被験者では2(0.9%)、p=<0.001)。
・71日目に1レベルのSSRS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者102名(48.6%)対プラセボ治療を受けた被験者28名(22.5%)、p=<0.001)。
・71日目におけるPR−CIS総合スコアのベースラインからの変化の平均(SD)(CCH投与群:−10.9[12.51]対プラセボ治療を受けた被験者:−5.9[11.62]、p=<0.001)。
・71日目に対象となる臀部でS−GAISの1レベルの応答者の割合(CCH治療を受けた被験者135名(64.3%)対プラセボ治療を受けた被験者82名(38.5%)、p=<0.001)。
・71日目に対象となる臀部で2レベルのS−GAIS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者49名(23.3%)対プラセボ治療を受けた被験者13名(6.1%)、p=<0.001)。
・71日目のPR−PCSSのベースラインからの変化量の平均(SD)は、対象の臀部(それぞれ0.9[0.93]対0.5[0.88]、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ0.9[0.90]対0.5[0.83]、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べて大きかった。
・71日目の時点で、PR−PCSSの1レベル応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者の方が、プラセボ治療を受けた被験者よりも、対象の臀部(それぞれ62.0%対40.7%、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ65.2%対41.6%、p<0.001)で大きかった。
・71日目のCR−PCSSのベースラインからの変化量の平均(SD)は、対象の臀部(それぞれ0.7[0.87]対0.4[0.72]、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ0.8[0.83]対0.3[0.67]、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも大きかった。
・71日目の時点で、1レベルのCR−PCSS応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者の方が、プラセボ治療を受けた被験者よりも、対象の臀部(それぞれ58.5%対32.5%、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ60.7%対27.7%、p<0.001)で大きかった。
・71日目の時点で、1レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べ、対象臀部(それぞれ42.9%対20.1%、p<0.001)および非対象臀部(それぞれ44.5%対13.7%、p<0.001)で高かった。
・71日目のS−GAISの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べ、対象の臀部で大きかった(それぞれ1.0[0.99]対0.5[0.79]、p<0.001)。非対象の臀部でも同様の結果が得られた(CCH治療を受けた被験者1.0[0.94]対プラセボ治療を受けた被験者0.5[0.76]、p<0.001)。
・71日目の時点で、1レベルのS−GAIS応答者の割合は、対象の臀部(それぞれ73.4%対43.2%、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ73.9%対42.6%、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べて多かった。
・71日目のI−GAISの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者と比較して、対象の臀部で統計的に有意(p<0.001)に大きかった(それぞれ1.0[0.81]対0.3[0.66])。この結果は、非対象の臀部でも同様であった(CCH治療を受けた被験者0.6[0.63]対プラセボ治療を受けた被験者0.1[0.48])。
・71日目の時点で、1レベルのI−GAIS応答者の割合は、対象の臀部(69.9%対28.3%、p<0.001)および非対象の臀部(74.9%対27.2%、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも多かった。
・71日目のPR−CISのベースラインからの変化の平均(SD)は、CCH治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者では、総合スコア(12.5([2.63]対−6.7[12.11]、それぞれp<0.001)と略式スコア(10.9[10.72]対5.7[10.23])、および個人の影響スコア(セルライトの外観に対する満足度[p<0.001])において、統計的に有意に良好であった。23]、p<0.001)、および個人の影響スコア(セルライトの外観に対する満足度[p<0.001]、気になる[p=0.009]、自覚[p<0.001]、恥ずかしい[p=0.004]、老いに対する懸念[p=0.024]、体型に対する懸念[p=0.005])があった。
・71日目の時点で、PR−CIS応答者の割合は、総合スコアではCCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも多く(それぞれ48.4%対24.2%、p<0.001)、略式スコアでは(それぞれ52.7%対29.5%、p<0.001)、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも多かった。さらに、個々の影響スコアごとの応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者の方がプラセボ治療を受けた被験者よりも多かった。これらの差も統計的に有意であった。
・71日目のSSRSスコアの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者(3.3[1.80])の方がプラセボ治療を受けた被験者(2.1[1.75])よりも大きかった。この差は統計的に有意であった(p<0.001)。CCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者に比べて、SSRSの1レベルの応答を示した割合が高く、それぞれ54.9%対25.1%であった。この差も統計的に有意であった(p<0.001)。
・CCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者に比べて、セルライト治療に「満足」または「非常に満足」と答えた割合が高かった(それぞれ54.3%対25.8%、p<0.001)。71日目の被験者の満足度スコアの平均値(SD)は、CCH投与群(0.4[1.12])とプラセボ治療を受けた被験者(0.4[1.17])の間で、統計的に有意な差(p<0.001)があった。
・一連のクロス集計では、PR−PCSSとS−GAISの間に一貫性があることを示す。PR−PCSSの1レベルの変化は、S−GAISの同様の変化と関連した。
・一次および二次エンドポイントのサイト別解析では、複数のサイトで応答が認められ、どの有効性解析においても、1つのサイトが結果に大きく影響することはなかった。
これらの臨床結果は、CCH治療が対象者の臀部のセルライトに有効であることを示す。本研究では、両側臀部のEFPを有する成人女性を対象に、両臀部に0.84mgずつ(合計1.68mg)を21日間隔で最大3回投与した結果、CCH治療を受けた被験者ではプラセボ治療を受けた被験者と比較して、CR−PCSS/PR−PCSSの2レベルの複合応答者の割合が統計的に有意に増加し、一次エンドポイント項目を達成した。8つの鍵となる二次エンドポイントおよびすべての支持的評価項目において、CCH治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者の間に統計学的に有意な差が認められた。CCH投与後の安全性については、重大または予期せぬ問題はなかった。AEの大部分は注射部位に発生し、14日以内に消失した。血液学的、化学的検査項目、バイタルサインについては、臨床的に意味のある、あるいは気になる傾向は認められなかった。免疫原性の結果は、本剤の他の臨床研究で認められたものと異なる可能性は認められなかった。本研究の結果から、CCHは成人女性の臀部におけるEFPに対して、1臀部あたり0.84mg(総投与量1.68mg)を21日以上の間隔をおいて3回投与することにより、安全かつ有効な治療法であると考えられる。
2回目の臨床研究は、実施例2に記載された臨床研究と同じデザイン、無作為化、二重盲検、プラセボ対照で行われた。CCH治療を受けた被験者では、プラセボ治療を受けた被験者(1名)と比較して、対象となる臀部において2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合が統計的に有意な差(p=0.002)を示し、CCH治療を受けた被験者でセルライトの重症度が改善されたことを示すなど、有効性が多数の解析によって裏付けられた。
一次エンドポイントは、ITT集団において、71日目に対象となる臀部で2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答が得られた患者の割合であった。2レベルのCR PCSS/PR−PCSS複合応答者とは、CR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善し、PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善した被験者と定義した。
・71日目での対象の臀部の1レベルのPR−PCSS応答者の割合(CCH投与群124名[57.9%]対プラセボ治療を受けた被験者61名[29.6%]、p<0.001)。
・71日目での対象の臀部で2レベルのPR−PCSS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者45[21.0%]対プラセボ治療を受けた被験者12[5.8%]、p<0.001)。
・71日目での対象の臀部で1レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合(CCH治療を受けた被験者89名(41.6%)対プラセボ治療を受けた被験者23名(11.2%)、p<0.001)。
・71日目での1レベルのSSRS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者90名(42.1%)対プラセボ治療を受けた被験者31名(15.0%)、p<0.001)。
・71日目でのPR−CIS総合スコアのベースラインからの変化の平均(SD)(CCH治療を受けた被験者:−11.5[12.74]対プラセボ治療を受けた被験者:−6.5[11.74]、p<0.001)。
・71日目での対象の臀部で1レベルのS−GAIS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者126名(58.9%)対プラセボ治療を受けた被験者46名(22.3%)、p<0.001)。
・71日目での対象の臀部で2レベルのS−GAIS応答者の割合(CCH治療を受けた被験者の38[17.8%]対プラセボ治療を受けた被験者9[4.4%]、p<0.001)を示した。
・71日目のPR−PCSSのベースラインからの変化量の平均(SD)は、対象の臀部(それぞれ0.9[0.89]対0.4[0.64]、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ0.9[0.84]対0.4[0.67]、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも大きかった。
・71日目の時点で、PR−PCSSの1レベルの応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者の方が、プラセボ治療を受けた被験者よりも、対象の臀部(それぞれ66.7%対31.9%、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ64.5%対35.6%、p<0.001)で大きかった。
・71日目のCR−PCSSのベースラインからの変化量の平均(SD)は、対象の臀部(それぞれ0.8[0.72]対0.2[0.55]、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ0.8[0.89]対0.2[0.61]、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも大きかった。
・71日目の1レベルのCR−PCSS応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも、対象の臀部で(それぞれ65.4%対27.4%、p<0.001)、非対象の臀部で(それぞれ67.6%対28.4%、p<0.001)、それぞれ大きかった。
・71日目の1レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べ、対象臀部(それぞれ48.1%対12.1%、p<0.001)および非対象臀部(それぞれ49.7%対15.3%、p<0.001)で大きかった。
・71日目のS−GAISの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者に比べ、対象の臀部で大きかった(それぞれ0.9[0.92]対0.2[0.68]、p<0.001)。非対象の臀部でも同様の結果が得られた(CCH治療を受けた被験者の0.9[0.94]対プラセボ治療を受けた被験者の0.2[0.67]、p<0.001)。
・71日目の1レベルのS−GAIS応答者の割合は、対象の臀部(それぞれ67.7%対24.1%、p<0.001)および非対象の臀部(それぞれ66.7%対26.2%、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも大きかった。
・71日目のI−GAISの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者と比較して、対象の臀部において統計的に有意(p<0.001)に大きかった(それぞれ0.9[0.81]対0.3[0.52])。非対象の臀部についても同様の結果が得られた(CCH治療を受けた被験者の0.9[0.79]対プラセボ治療を受けた被験者の0.3[0.54]、p<0.001)。
・71日目のCCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者に比べて、対象の臀部(70.8%対24.2%、p<0.001)および非対象の臀部(70.3%対21.6%、p<0.001)において、1レベルのI−GAIS応答者の割合が統計的に有意に増加した。
・71日目のPR−CISのベースラインからの変化の平均(SD)は、総合スコア(13.2[12.80]vs−7.0[12.05]、p<0.001)と略式スコア(12.8[12.62]vs6.1[110.25]、p<0.001)において、CCH治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者で統計的に有意に良好であった。また、すべての項目で71日目に統計的に有意な差が見られた(セルライトの外観に対する満足度[p<0.001]、自覚[p=0.012]、恥ずかしい[p<0.001]、老いの外観[p=0.009]、体型への懸念[p<0.001])。ただし、気になる点については、CCH治療を受けた被験者に有利な傾向が見られたが、統計的有意差には至らなかった(p=0.052)。
・71日目のPR−CISが応答者の割合は、総合スコアではCCH治療を受けた被験者がプラセボ治療を受けた被験者よりも多く(それぞれ50.0%対26.2%)、略式スコアでは(それぞれ52.2%対29.3%)、これらの差は統計的に有意であった(p<0.001)。さらに、個々の影響スコアにおいて、CCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者よりも応答者の割合が多かった。これらの差も統計的に有意であった。
・71日目のSSRSスコアの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者(3.1[1.68])の方が、プラセボ治療を受けた被験者(1.9[1.55])よりも大きかった。この差は統計的に有意であった(p<0.001)。さらに、CCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者に比べて、SSRSの1レベルの応答を示した割合が高く、それぞれ48.4%対16.2%であった。この差も統計的に有意であった(p<0.001)。
・CCH治療を受けた被験者は、プラセボ治療を受けた被験者に比べて、セルライト治療に「満足」または「非常に満足」と答えた割合が高かった(それぞれ46.8%対13.6%、p<0.001)。71日目の被験者の満足度スコアの平均値(SD)は、CCH治療を受けた被験者(0.3[1.05])とプラセボ治療を受けた被験者(0.6[1.04])の間で、統計的に有意な差(p<0.001)があった。
・一連のクロス集計は、PR−PCSSとS−GAISの間に一貫性があることを示す。PR−PCSSの1レベルの変化は、S−GAISの同様の変化と関連した。
・一次および二次エンドポイントのサイト別解析では、複数のサイトで応答が認められ、どの有効性解析においても、1つのサイトが結果に大きく影響することはなかった。
本研究では、両側臀部のEFPを有する成人女性を対象に、両臀部に0.84mg(合計1.68mg)を21日間隔で最大3回投与したところ、CCH投与群の2レベルのCR−PCSS/PR−PCSS複合応答者の割合が、プラセボ治療を受けた被験者と比較して統計的に有意な差を示し、一次エンドポイント項目を達成した。8つの鍵となる二次エンドポイントのうち7項目およびすべての補足的評価項目において、CCH治療を受けた被験者とプラセボ治療を受けた被験者の間に統計学的に有意な差が認められた。
上記実施例2および3は、両臀部に中等度から重度のセルライト(PR−PCSSおよびCR−PCSSで評価3−4)を有する成人女性を対象に、治療部位ごとにCCH0.84mgまたはプラセボの皮下投与を最大3回行った、同一のデザインの多施設共同二重盲検無作為化プラセボ対照段階3研究(リリース−1およびリリース−2)について報告する。
・初回治療から71日目までに、3分の2以上の患者がどちらかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を確認した
・3分の2以上の医師が、初回治療から71日目までに、どちらかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのCR−PCSSおよび/または1レベルのPR−PCSSの応答を得た
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者がS−GAISを用いてどちらかの臀部の改善を確認した
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の医師がI−GAISを用いてどちらかの臀部の改善を確認した
・3分の2以上の患者が、初回治療から71日目までに、どちらかの臀部でPR−PCSSが1レベル、および/またはSSRSが1レベルの応答を示した
・初回治療から71日目までに、3分の2以上の患者がいずれかの臀部においてPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSCTの1レベルの応答を示した
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者がどちらかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはS−GAISの1レベルの応答を示した
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者がいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの満足を示す応答および/またはPR−CISの1レベルの満足と示す応答となった
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者が、どちらかの臀部において、1レベルのPR−PCSS応答、および/または、1レベルのPR−CIS:気になる応答を示した
・初回治療から71日目までに、4分の3以上の患者がどちらかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはPR−CIS:自覚の1レベルの応答を示した
・セルライトの見た目への不満
・気になる
・自覚
・恥ずかしい
・老けて見える
・太り過ぎ/体型の崩れの外観
CCHを投与された被験者の7.6%が、71日目に対象となる臀部のセルライトの外観について、調査員および患者による複合評価で非常に有意な改善(p=0.006)を示した(CR−PCSS(臨床医が報告したフォト数値セルライト重症度尺度)(Clinician Reported−Photonumeric Cellulite Severity Scale)およびPR−PCSS(患者が報告したフォト数値セルライト重症度尺度)(Patient Reported−Photonumeric Cellulite Severity Scale)の両スコアで2レベルの応答が見られた)。
CCHを投与された被験者の5.6%が、71日目に対象となる臀部のセルライトの外観に関する調査員と患者の複合評価において、CR−PCSSとPR−PCSSの両スコアが2レベルで改善したのに対し、プラセボ被験者では0.5%しか改善しなかった。
・CCHを投与されたリリース−1の被験者の37.1%、リリース−2の被験者の41.6%が、71日目に対象となる臀部のCR−PCSSとPR−PCSSの両スコアで測定されるセルライトの外観について、調査員と患者の複合評価で1レベルの非常に有意な応答を示したのに対し、プラセボ被験者ではそれぞれ17.8%と11.2%にとどまった。
・CCHを投与したリリース−1の被験者の24.3%、リリース−2の被験者の21.0%が、PR−PCSSスコアで測定した71日目の対象臀部のセルライトの出現に関する患者の評価において、プラセボ被験者の12.2%、5.8%と比較して、統計的に非常に有意な2レベルの改善を示した。
・CCHを投与したリリース−1では54.3%、リリース−2では57.9%の被験者が、PR−PCSSスコアで測定した71日目の対象臀部のセルライトの出現に関する患者の評価において、プラセボ被験者の36.2%と29.6%に比べて、統計的に有意に1レベルの改善を示した。
・CCHを投与されたリリース−1の被験者の48.6%、リリース−2の被験者の42.1%が、SSRS(被験者自己評価尺度)(Subject Self Rating Scale)で測定された71日目の対象臀部のセルライトの外観に関する患者の評価において、プラセボ被験者の22.5%、15.0%と比較して、統計的に有意に1レベルの改善を示した。
・CCHを投与されたリリース−1の被験者の54.3%、リリース−2の被験者の46.8%が、71日目のセルライト治療に対する被験者満足度評価で「満足」または「非常に満足」と答えたのに対し、プラセボ被験者ではそれぞれ25.8%、13.6%にとどまった。
・CCHを投与したリリース−1では被験者の73.3%、リリース−2では被験者の67.8%が、71日目に対象となる臀部のセルライト部位の見た目が「改善した」、「非常に改善した」、「非常に改善した」と報告されたのに対し、プラセボ被験者ではそれぞれ43.2%、24.1%にとどまった。
・CCHを投与された被験者は、リリース−1研究では71日目に非対象の臀部において、CR−PCSSスコアとPR−PCSSスコアの両方が2レベル改善したことで評価される、調査員と患者によるセルライトの外観の複合評価において、統計的に有意な改善を示したが、リリース−2研究では統計的に有意な結果は得られなかった。
1.3分の1以上の患者が、いずれかの臀部において少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。患者の3分の2以上が、いずれかの臀部において少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を認めた。全患者のいずれかの臀部において、少なくとも1レベルのPR−PCSS応答が見られた。
2.3分の1以上の患者が、22日目までにどちらかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。3分の2以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を確認した。すべての患者が、22日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。
3.3分の1以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。3分の2以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を確認した。すべての患者が、43日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。
4.3分の1以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。3分の2以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を確認した。すべての患者が、71日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのPR−PCSS応答を示した。
5.3分の1以上の医師がいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を見た3分の2以上の医師がいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を見たすべての医師が、いずれかの臀部において少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を見た。
6.3分の1以上の医師が、22日目までにどちらかの臀部に少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。3分の2以上の医師が、22日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。すべての医師が、22日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。
7.3分の1以上の医師が、43日目までにどちらかの臀部に少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。3分の2以上の医師が、43日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。すべての医師が、43日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。
8.3分の1以上の医師が、71日目までにどちらかの臀部に少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。3分の2以上の医師が、71日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。すべての医師が、71日目までにいずれかの臀部で少なくとも1レベルのCR−PCSS応答を確認した。
9.71日目までに4分の3以上の患者がどちらかの臀部で1レベルのCR−PCSSおよび/または1レベルのPR−PCSSの応答を得た。
10.43日目には、4分の3以上の医師がI−GAISを用いてどちらかの臀部の改善を確認した。
11.3分の1以上の患者が、いずれかの臀部においてPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSRSの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答者および/または1レベルのSSRS応答者であった。3分の2以上の患者がどちらかの臀部でPR−PCSSの1レベルおよび/またはSSRSの1レベルの応答者であった。
12.3分の1以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSRSの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答者および/または1レベルのSSRS応答者となった。患者の3分の2以上が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSRS応答を示した。
13.3分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSRSの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSRS応答を示した。患者の3分の2以上が、43日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSRS応答を示した。
14.3分の1以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSRSの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSRS応答を示した。患者の3分の2以上が、71日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSRS応答を示した。
15.3分の1以上の患者が、どちらかの臀部においてPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSCTの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、いずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。3分の2以上の患者がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。
16.3分の1以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSCTの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。患者の3分の2以上が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。
17.3分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSCTの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。43日目までに全患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。
18.3分の1以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはSSCTの1レベルの応答を示した。3分の2以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。71日目までに全患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのSSCT応答を示した。
19.4分の1以上の患者が、いずれかの臀部においてPR−PCSSの1レベルの応答および/またはS−GAISの1レベルの応答を示した。患者の2分の1以上が、いずれかの臀部においてPR−PCSSの1レベルの応答および/またはS−GAISの1レベルの応答を示した。4分の3以上の患者が、どちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。全例がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。
20.4分の1以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはS−GAISの1レベルの応答を示した。患者の2分の1以上が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。4分の3以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。22日目までに全患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。
21.4分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはS−GAISの1レベルの応答を示した。2分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。4分の3以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。43日目までに全患者がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。
22.患者の4分の1以上が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。患者の2分の1以上が、71日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。4分の3以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。71日目までに全患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのS−GAIS応答を示した。
23.4分の1以上の患者が、どちらかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはPR−CISの1レベルの応答を示した。2分の1以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答であった。4分の3以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答であった。全例がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答であった。
24.4分の1以上の患者が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。患者の2分の1以上が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。4分の3以上の患者が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。全患者が22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答を示した。
25.4分の1以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。2分の1以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。4分の3以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。全ての患者が43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。
26.4分の1以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。2分の1以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。4分の3以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答となった。全ての患者が71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:満足を示す応答であった。
27.4分の1以上の患者が、どちらかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答および/またはPR−CISの1レベルの「気になるとの応答」であった。2分の1以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。4分の3以上の患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。患者の4分の3以上がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。
28.4分の1以上の患者が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。2分の1以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。さらに別の実施形態では、患者の4分の3以上が、22日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。すべての患者が、22日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答であった。
29.4分の1以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。2分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。4分の3以上の患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。43日目までに全患者がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答を示した。
30.4分の1以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。2分の1以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。4分の3以上の患者が、71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答となった。71日目までに全患者がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:気になるとの応答を示した。
31.患者の4分の1以上が、いずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答者および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。別の実施形態では、患者の2分の1以上が、いずれかの臀部において、1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。4分の3以上の患者が、どちらかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。全患者がいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。
32.4分の1以上の患者が、22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答となった。患者の2分の1以上が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答となった。4分の3以上の患者が、22日目までにいずれかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答となった。すべての患者が22日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答となった。
33.4分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部でPR−PCSSの1レベルの応答者および/またはPR−CISの1レベルの「自覚の」応答となった。2分の1以上の患者が、43日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。さらに別の実施形態では、43日目までに患者の4分の3以上がどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。全ての患者が、43日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。
34.患者の4分の1以上が、71日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。別の実施形態では、患者の2分の1以上が、71日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。4分の3以上の患者が、71日目までにいずれかの臀部において1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。全ての患者が71日目までにどちらかの臀部で1レベルのPR−PCSS応答および/または1レベルのPR−CIS:自覚の応答であった。
35.今回の研究では、アンカーベースの分析により、PR−PCSSスコアの変化が1以上であれば臨床的に意味があるとされた。両研究において、CCH治療を受けた女性の半数以上が、PR−PCSSスコアの変化が1以上であった(54.3%および57.9%)。PR−PCSSとCR−PCSSの両方で1レベル以上の複合応答が35%以上の女性に認められ、S−GAISで1レベル以上の応答が55%以上の女性に認められた。
36.PRCIS総合スコアのベースラインからの変化に基づき、CCHで治療を受けた女性は、プラセボで治療を受けた女性と比較して、治療後にセルライトの視覚的および感情的な影響を総合的に軽減したと報告した。つまり、生活の質と自尊心が向上した。
37.AEは速やかに消失し、強度は軽度から中等度であり、研究中止の原因となる頻度は低かった(いずれの研究でも女性の5%未満)。
38.今回の研究では、これまでのセルライト研究の中で最大の合計患者数(N=843)を含み、それぞれ多施設、無作為化、二重盲検、プラセボ対照の研究デザインを採用する。
39.重度のセルライトを持つ女性を含む広範な研究参加基準を設定した。ベースラインで重度のセルライトを有する女性のうち、CR−PCSSおよびPR−PCSSで評価したCCH治療を受けた女性の15%以上および35%以上が、71日目に対象となる臀部に改善を認めた。前述のように、一次エンドポイントであるベースラインからの2レベル以上の複合的な改善は、厳しい基準と考えられる。しかし、この厳しい基準にもかかわらず、CCHを投与された女性は、プラセボと比較して、一次エンドポイントを満たす割合が有意に高かった。
40.2つの段階3無作為化プラセボ対照研究によると、CCHは中度から重度の臀部のセルライトを持つ女性に対して、安全で効果的な治療法である。
本研究は、上記実施例2および3の多施設、非盲検、長期研究である。本研究では、71日間の二重盲検プラセボ対照研究(実施例2(研究302)または実施例3(研究303)、以下「親研究」("parent studies")または「親研究」("parent study"))において、成人女性のEFPを有する両側臀部2箇所の同時治療(総投与量は最大1.68mg×3回)において、以前にCCHを臀部1箇所あたり0.84mg投与された被験者を評価した。前述のいずれかの研究で終了した後、親研究の71日目(すなわち、初回治療後70日目)から最大5年間、被験者を追跡調査した(今後も追跡調査する予定)。この期間は、これらの研究でCCHに最後にさらされてから約28日後である。
・カテゴリーI(1レベルの複合応答)には、親研究でCCHの投与を受け、親研究の71日目にどちらか(または両方)の臀部で最大の複合応答が得られ、PR−PCSSおよびCR−PCSSで評価したセルライトの重症度が最大で1レベル改善された被験者が含まれる。両臀部で改善が見られた場合、複合的な1レベルの改善が同じ臀部で見られたことが対象となる(すなわち、PR−PCSSおよびCR−PCSSの改善が同じ臀部で見られたことが必要)。また、1つの尺度で2レベルの改善が見られたものの、もう1つの尺度では1レベルの改善しか見られなかった被験者も、複合的な改善が同じ臀部内で起こっていれば、カテゴリーIの被験者とみなされた。カテゴリーIの被験者は、本非盲検研究において、最大2つの臀部に対して1回の追加再治療コース(すなわち、約21日間隔で3回の治療セッション)を受けることができる。再治療は、180日目の評価後、親研究での被験者の治療の盲検化が解除された後に開始できる。親研究からの研究薬の盲検化が解除されていれば、再治療のためのスクリーニングは180日目の来院時に開始しても良い。カテゴリーIの被験者では、複合的な改善度が1レベル以下の臀部のみが再治療の対象となる。再治療開始後(治療開始日1)の非盲検有効性の評価は、本非盲検研究の治療開始日4(71日目+5日目)までとし、その後は、再治療を受けた5年間の時期に応じて、2年間は6ヵ月ごとに、その後は親研究302および303の71日目から最長5年間(1800日目)まで毎年観察する。カテゴリーIに該当する被験者で、追加の再治療を受けないことを選択した場合は、観察期間(第2〜7回、すなわち12、18、24、36、48、60カ月目)が設けられる。
・カテゴリーII(2レベルの複合応答者)には、親研究でCCHの投与を受け、親研究の71日目にPR−PCSSとCR−PCSSの両方で少なくとも1つの臀部のセルライトの重症度が2レベル以上改善した被験者が含まれる(すなわち、2レベルの複合応答者)。これらの被験者は、親研究の71日目から2年間は約6カ月ごとに、その後は最大5年間(1800日目)毎年、TRR(以下に定義)と安全性について観察される。カテゴリーIIの被験者は、親研究の71日目と比較して複合応答が少なくとも1レベル低下し、かつ親研究の1日目と比較してどちらか一方または両方の臀部で複合応答が2レベルを維持しなくなった場合、再治療の対象となり、その後は観察に参加することになる。
・カテゴリーIII(非複合型応答)には、親研究で積極的にCCHを投与されたものの、カテゴリーIまたはIIに含まれる基準を満たさなかったその他のすべての被験者が含まれる。これらの被験者は、2年間は6カ月ごとに、最大5年間は1年ごとに安全性を観察され(1800日目)、研究中に再治療を受けることはできない。
・全被験者のスクリーニング、180日目、および確認のための来院(陥凹部や注射部位のマーキングはなし
・カテゴリーIおよび/または対象となるカテゴリーIIの被験者の治療受診日(1日目、22日目、43日目)における陥凹部および注射部位のマーキング前とマーキング後(注射前)
・71日目の来院(治療終了/早期終了)、観察評価来院(360日目、540日目、720日目、1080日目、1440日目、1800日目/研究終了(以下、「EOS」))、確認来院(陥凹部や注射部位の痕跡がないこと)
セルライト用CCHは、上述のように、0.92mgのコラゲナーゼクロストリジウムヒストリチウムからなる無菌の凍結乾燥粉末である。研究に参加する資格を得た被験者には、1回の治療につき臀部あたり最大0.84mgのCCHまたはプラセボが投与され(1回の治療での総投与量は1.68mg)、21日間隔の3回の治療で臀部あたり12回の皮下注射が行われた(表64)。
有効性は、CR−PCSSおよびPR−PCSS、患者が報告したセルライトの影響尺度(Patient Reported Cellulite Impact Scale(PR−CIS))、被験者グローバル美的改善尺度(Subject Global Aesthetic Improvement Scale(S−GAIS))、被験者自己評価尺度(Subject Self−Rating Scale(SSRS))、セルライト治療に対する被験者の満足度評価(Subject Satisfaction with Cellulite Treatment Assessment)を用いて評価した。
以下の分析集団を使用した。
・180日目の観察集団には、親研究からのロールオーバー被験者がすべて含まれる。
・非盲検観察集団には、非盲検研究に参加し、親研究でCCHを投与されたすべての被験者が含まれる。この集団には、カテゴリーI、II、IIIのすべての被験者が含まれる。
・再治療前のTRR集団には、治療を受けた臀部のいずれか/両方について、親研究の71日目にCR−PCSSとPR−PCSSの両方の評価で少なくとも1レベルまたは2レベルの改善が見られたすべての被験者が含まれる。この集団にはカテゴリーIおよびIIの被験者が含まれる。応答の軽減は、治療を受けた臀部のいずれか/両方について、親研究においてCR−PCSSおよびPR−PCSSの評価の両方で少なくとも1レベルおよび2レベルの改善が見られた被験者について、個別に評価される。再治療前の応答率の低下は、この集団を用いて解析される。
・非盲検再投与(OLR)集団には、この非盲検研究で再投与されたTRR集団のすべての被験者が含まれる。
・再治療後のTRR対象者には、OLR対象者のうち、非盲検治療期の71日目/治療終了日の診療所来院時にCR−PCSSおよびPR−PCSSの両評価で少なくとも1レベルまたは2レベルの複合的な改善が見られた被験者が含まれる。応答の軽減は、非盲検治療期において、治療した各臀部のCR−PCSSおよびPR−PCSS評価の両方で少なくとも1レベルおよび2レベルの複合的な改善が見られた被験者について、個別に評価される。再治療後の応答率の低下は、この集団を用いて解析する。
本調査で使用した応答の定義は以下の通りである。
・2レベルの改善:本研究の治療コース1日目(治療セッション1)の対応する評価と比較して、再治療を受けた後にPR−PCSSまたはCR−PCSSの評価でセルライトの重症度が2レベル以上改善したと定義した(すなわち、ベースラインのPR−PCSSおよび/またはCR−PCSSの評価からの変化が−2、または−3)。
・1レベルの改善:本研究の治療コース1日目(治療セッション1)の対応する評価と比較して、再治療を受けた後にPR−PCSSまたはCR−PCSSの評価でセルライトの重症度が1レベル以上改善したと定義した(すなわち、ベースラインのPR−PCSSおよび/またはCR−PCSS評価からの変化が−1、−2、または−3)。
・2レベル応答者:本研究の治療コース1日目(治療セッション1)の評価と比較して、PR−PCSSまたはCR−PCSSの評価が2レベル以上改善した被験者と定義した。
・1レベル応答者:本研究の治療コース1日目(治療セッション1)の評価と比較して、PR−PCSSまたはCR−PCSSの評価が1レベル以上改善した被験者と定義した。
・1または2レベルの複合改善は、PR−PCSSとCR−PCSSの両方を用いて評価される(例:1レベルの複合改善の場合−同じ臀部のPR−PCSSとCR−PCSSの両方で、少なくとも1レベルの応答の改善が観察される。2レベルの複合的な改善の場合−同じ臀部のPR−PCSSとCR−PCSSの両方で少なくとも2レベルの改善が観察される)。)1つまたは両方の構成要素(すなわち、PR−PCSS構成要素またはCR−PCSS構成要素)について分類が欠落する場合、その来院では複合応答者の分類が欠落する。
・2レベルの複合応答者:PR−PCSSの2レベル以上の応答者およびCR−PCSSの2レベル以上の応答者と定義した。
・1レベルの複合応答者:少なくとも1レベルのPR−PCSS応答者および少なくとも1レベルのCR−PCSS応答者である被験者と定義した。
・PR−CIS総合スコアについては、評価時点でPR−CIS総合スコアがベースラインから12以上(すなわち、各項目の平均値が2以上)低下した被験者をPR−CIS応答者と定義した。
・PR−CISの略式総合スコアについては、評価時点でPR−CISの総合スコアがベースラインから10以上(すなわち、各項目の平均値が2以上)低下した被験者をPR−CIS応答者と定義した。
・各項目のPR−CIS応答者とは、評価時点において、非盲検期の71日目のスコアからPR−CIS項目のスコアが2以上減少した被験者と定義した。
・PR−CISの項目1「セルライトが見えることに対して被験者がどの程度満足しているか」は、被験者が報告した評価を10から引くことで反転させる(つまり、複合の目的のために、「満足している」という質問のスコアを反転させ(反映させ)、他の質問と方向性を一致させる)。このように、PR−CISの質問のうち、6つの質問の数値が高ければ、よりネガティブな影響を反映していることになる。
1.セルライトの重症度
a.PR−PCSSとCR−PCSS
a.PR−PCSSおよびCR−PCSSの180日目の観察集団
表70は、親研究の71日目から本研究の180日目までの、180日目の観察集団におけるPRCISの総合スコア、略式スコア、および項目スコアの変化をまとめたものである。
親研究の71日目において、親研究でCCH治療を受けた被験者の24.7%が2レベルのSSRS応答を示したのに対し、180日目の観察集団ではプラセボ治療を受けた被験者の11.4%が2レベルのSSRS応答を示した。180日目には、親研究でCCH治療を受けた被験者の14.9%が2レベルのSSRS応答を示したのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では8.9%だった。
再治療前のTRR集団は、親研究でCCHによる治療を受け、CR−PCSSおよびPR−PCSSで1レベルまたは2レベルの複合応答を示し、本研究の非盲検相での継続に同意した被験者103名で構成される。そのうち19人がカテゴリーIIに、84人がカテゴリーIに分類された。
本研究では、親研究で少なくとも1つの臀部においてセルライトの重症度が2レベル以上複合的に改善された被験者が19名いた(カテゴリーII)。これらの被験者のうち、180日目にセルライトの重症度が2レベル合成で低下した者はいなかった。カテゴリーIIの被験者において、CR−PCSSとPR−PCSSを個別に検討したところ、本研究304で定義したように、180日目にCR−PCSSで2レベル以上の応答低下が見られた被験者が1名(5.3%)、PR−PCSSで2レベル以上の応答低下が見られた被験者が4名(21.1%)いた(表72)。
再治療前のTRR集団には、カテゴリーIIの被験者が19人いた。このうち3名(15.8%)は、再治療前の応答が1レベル低下した。再治療前のTRR集団に含まれるカテゴリーIの被験者84人のうち、10人(11.9%)が再治療前に1レベルの複合的な応答低下を示した。全体(カテゴリーIとカテゴリーIIを合わせた103人)では、13人(12.6%)の被験者が180日目に1レベルの複合的な応答の低下を示した(表73)。
TRRは、親研究の71日目/EOSから、CR−PCSSおよびPR−PCSSの複合的な応答の悪化が初めて観察された今回の研究の受診日までの日数として定義された。応答が2レベルで低下した被験者はいなかったため、応答が2レベルで低下するまでの期間を算出することはできなかった。応答性が1レベル低下するまでの期間の平均(SD)は、カテゴリーIの被験者では187.5(10.87)日、カテゴリーIIの被験者では182.7(17.47)日であった。
応答の完全消失は、CRPCSSおよびPR−PCSSの評価の両方が(親研究の)ベースラインに戻ったことと定義した。カテゴリーIIの被験者(親研究で少なくとも2レベルの複合応答が得られた被験者)では、180日目に完全に応答が消失した者はいなかった。カテゴリーIの被験者84名のうち、4名(4.8%)が完全に応答を失った(表75)。
応答の完全消失までの期間は、親研究の71日目/EOSから、今回の研究で初めて応答の完全消失が観察された日までの日数と定義した。カテゴリーIIの被験者では、応答の完全消失はなかった。カテゴリーIの完全な応答消失までの平均(SD)日数は183.0(2.83)日であった。
a.PR−PCSSとCR−PCSS
カテゴリーIとカテゴリーIIの被験者を合わせた全体では、親研究の1日目から71日目/EOSまでのPR−PCSSの変化量の平均(SD)は、左臀部で−1.3(0.64)、右臀部で−1.4(0.83)であった。また、親研究の1日目から180日目までのPR−PCSS変化量の全体平均(SD)は、再治療前のTRR集団において、左臀部で−1.0(0.80)、右臀部で−1.1(0.93)であった。
b.PR−CIS
PR−CISの総合スコア、略式スコア、項目別スコアについても同様の結果が得られ、この集団における応答の持続性が支持された。
a.治療効果の持続性−再治療前のCR−PCSSおよびPR−PCSS−TRR集団
表76は、親研究(研究302/303)の71日目から本研究の180日目までの、再治療前のTRR集団のCR−PCSSおよびPR−PCSSの変化を示したものである。
表77は、再治療前のTRR集団における、研究302/303の71日目/EOSから本研究の180日目/早期終了までのPR−CISの総合スコア、略式スコア、項目スコアの変化を示したものである。
A.180日目の観察集団
180日目観察集団は、180日目の来院(セルライト評価を含む)を完了し、データカットオフ時(2019年4月1日)に盲検化されていなかった479名の被験者で構成された。180日目の来院は、親研究の終了から約180日後、親研究における研究薬の初回投与から約251日後に実施された。
・親研究でCCH治療を受けた被験者241名の被験者では、親研究の1日目から71日目までのPR−PCSSの変化量の平均(SD)は、左右の臀部でそれぞれ−0.8(0.85)および−0.9(0.92)であり、親研究の1日目から本研究の180日目までのPR−PCSSの変化量の平均(SD)は、左右の臀部でそれぞれ−0.7(0.87)および−0.7(0.92)であった。親研究でプラセボ治療を受けた被験者では、1日目から71日目までのPR−PCSS変化量の平均(SD)は、左右の臀部でそれぞれ−0.5(0.75)および−0.5(0.79)であった。また、親研究の1日目から本研究の180日目までのPR−PCSSの変化量の平均は、左右の臀部でそれぞれ−0.3(0.71)、−0.4(0.80)であった。
・親研究でCCH治療を受けた被験者では、親研究の1日目から71日目までのCR−PCSS変化量の平均(SD)は、左臀部で−0.8(0.79)、右臀部で−0.7(0.76)であった。親研究の1日目から本研究の180日目までのCR−PCSSの変化量(SD)の平均値は、左臀部で−0.6(0.82)、右臀部で−0.6(0.83)であった。プラセボ治療を受けた被験者では、初日から71日目までのCR−PCSS変化量の平均値(SD)は、左臀部で−0.3(0.64)、右臀部で−0.3(0.70)であった。親研究の1日目から本研究の180日目までのCR−PCSSの変化の平均は、左右の臀部でそれぞれ−0.4(0.72)および−0.4(0.72)であった。
・親研究でCCH治療を受け、本研究でPR−CISの180日目の評価を完了した被験者では、親研究の1日目から71日目までのPR−CIS総合スコアの変化量の平均(SD)は−11.8(11.77)であった。同じ被験者において、親研究の初日から本研究の180日目までのPR−CIS総合スコアの変化量の平均(SD)は−10.5(11.76)であった。親研究でプラセボ治療を受けた被験者では、親研究の初日から71日目までのPR−CIS総合スコアの変化量の平均(SD)は−6.5(12.12)であった。同じ被験者において、親研究の1日目から本研究の180日目までのPR−CIS総合スコアの変化の平均(SD)は−5.4(11.30)であった。PR−CISの略式スコアおよび項目別スコアでも同様の変化が見られた。
・PR−PCSSでは、親研究の71日目から本研究の180日目までの変化量の平均(SD)は、CCH治療を受けた被験者では、左右の臀部でそれぞれ0.2(0.81)および0.2(0.86)であった。プラセボ治療を受けた被験者では、PR−PCSSの平均(SD)変化量は、左右の臀部でそれぞれ0.1(0.76)および0.0(0.84)であった。
・CR−PCSSでは、親研究の71日目から本研究の180日目までの変化量の平均(SD)は、CCH治療を受けた被験者では、左右の臀部でそれぞれ0.2(0.78)および0.1(0.76)であった。プラセボ治療を受けた被験者では、CR−PCSSの平均(SD)変化量は、左右の臀部でそれぞれ−0.1(0.74)および−0.1(0.76)であった。
・180日目の観察集団において、親研究の71日目から本研究の180日目までのPR−CISスコア合計の変化の平均(SD)は、CCH治療を受けた被験者で1.2(11.32)、プラセボ治療を受けた被験者で1.0(10.14)であった。PR−CIS略式スコアでは、親研究の71日目から本研究の180日目までの平均変化量は、CCH治療を受けた被験者で1.0(9.45)、プラセボ治療を受けた被験者で0.4(8.98)であった。また、各項目別スコアにも同様の小さな平均(SD)変化が見られた。
・親研究では、71日目にCCH治療を受けた被験者の19.1%が左臀部でS−GAIS2レベルの応答を示し、21.6%が右臀部で2レベルの応答を示したのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では6.3%(左臀部)、7.1%(右臀部)であった。本研究304日目の180日目には、CCH治療を受けた被験者の12.4%および11.6%の被験者が、左臀部および右臀部においてS−GAISの2レベルの応答を示した。プラセボ治療を受けた被験者では、180日目に2レベルのS−GAIS応答があった被験者の割合は、左右の臀部でそれぞれ3.8%であった。
・親研究では、71日目に、CCH治療を受けた被験者の70.5%が左右の臀部でS−GAIS1レベルの応答を示したのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では37.4%(左臀部)および37.0%(右臀部)であった。180日目には、CCH治療を受けた被験者の53.5%と51.0%が、左右の臀部でそれぞれS−GAISの1レベルの応答を示した。プラセボ治療を受けた被験者では、180日目にS−GAISが1レベルであった被験者の割合は、左臀部で27.8%、右臀部で28.3%であった。
・71日目において、親研究でCCH治療を受けた被験者の50.6%がセルライト治療に「満足」または「非常に満足」と応答したのに対し、180日目観察集団ではプラセボ治療を受けた被験者の22.5%が「満足」または「非常に満足」と応答した。180日目の観察集団では、親研究でCCH治療を受けた被験者の34.4%がセルライト治療に「満足」または「非常に満足」と答えたのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では16.5%であった(図27)。
・親研究では、71日目に、CCH治療を受けた被験者の24.7%がSSRS2レベルの応答を示したのに対し、180日目の観察集団では、プラセボ治療を受けた被験者の11.4%がSSRS2レベルの応答を示した。180日目において、親研究でCCH治療を受けた被験者の14.9%が2レベルのSSRS応答を示したのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では8.9%であった。
・親研究では、71日目に、CCH治療を受けた被験者の51.5%がSSRSの1レベルの応答を示したのに対し、180日目の観察集団では、プラセボ治療を受けた被験者の21.2%であった。180日目において、親研究でCCH治療を受けた被験者の36.9%がSSRS2レベルの応答を示したのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では17.3%であった。
再治療前のTRR集団は、親研究でCCH治療を受け、CR−PCSSおよびPR−PCSSで1レベルまたは2レベルの複合応答を示し、本研究の非盲検段階での継続に同意した被験者103名で構成される。これらの被験者のうち19人がカテゴリーIIに、84人がカテゴリーIに分類された。
・本研究では、親研究で少なくとも1つの臀部においてセルライトの重症度が2レベル以上複合的に改善された被験者が19名いた(カテゴリーII)。本研究では、180日目にセルライトの重症度が2レベル合成で低下した被験者はいなかった。カテゴリーIIの被験者のCR−PCSSおよびPR−PCSSを個別に検討したところ、180日目にCR−PCSSで2レベル以上の応答低下が見られた被験者が1名(5.3%)、PR−PCSSで2レベル以上の応答低下が見られた被験者が4名(21.1%)いた。また、臀部についても同様の結果が得られた。
・再治療前のTRR集団には、カテゴリーIIの被験者が19人いた。このうち3名(15.8%)は、再治療前の応答が1レベル低下した。再治療前のTRR集団に含まれるカテゴリーIの被験者84人のうち、10人(11.9%)が再治療前に1レベルの複合的な応答低下を示した。全体(カテゴリーIとカテゴリーIIを合わせた103人)では、13人(12.6%)の被験者が180日目に1レベルの複合的な応答の低下を示した。
・応答の完全消失は、CR−PCSSおよびPR−PCSSの評価の両方がベースライン(親研究)に戻ったことと定義した。カテゴリーIIの被験者(親研究で2レベル以上の複合応答を示した被験者)では、180日目に応答が完全に消失した者はいなかった。カテゴリーIの被験者84名のうち、4名(4.8%)が完全に応答を消失した。
・TRRは、親研究の71日目/EOSから、CR−PCSSおよびPR−PCSSの複合的な応答の悪化が初めて観察された今回の研究の受診日までの日数として定義された。応答が2レベルで低下した被験者はいなかったため、応答が2レベルで低下するまでの期間を算出することはできなかった。応答が1レベル低下するまでの期間の平均(SD)は、カテゴリーIの被験者では187.5(10.87)日、カテゴリーIIの被験者では182.7(17.47)日であった。
・応答の完全消失までの期間は、親研究の71日目/EOSから、今回の研究で初めて応答の完全消失が観察された日までの日数と定義した。カテゴリーIIの被験者では、応答の完全消失はなかった。カテゴリーIの完全な応答消失までの平均(SD)日数は183.0(2.83)日であった。
・カテゴリーIの被験者において、親研究の71日目から本研究の180日目までのPR−PCSSの変化量の平均(SD)は、左臀部で0.2(0.68)、右臀部で0.2(0.84)であった。CR−PCSSについては、親研究の71日目から本研究の180日目までの変化量の平均値(SD)は、左臀部で0.4(0.72)、右臀部で0.1(0.77)であった。
・カテゴリーIIの被験者において、親研究の71日目から本研究の180日目までのPR−PCSSの変化の平均(SD)は、左臀部で0.6(0.83)、右臀部で0.8(0.76)であった。CCH治療を受けた被験者における親研究の71日目から本研究の180日目までのCR−PCSSの変化の平均(SD)は、左臀部で0.6(1.02)、右臀部で0.7(0.75)であった。
・親研究の71日目から本研究の180日目までのPR−CISスコア合計の変化量の平均(SD)は0.0(12.21)であった。カテゴリーIの被験者の71日目から180日目までの変化量の平均(SD)は−0.6(11.20)であり、カテゴリーIIの被験者の71日目から180日目までの変化量の平均は2.5(16.04)であった。
・親研究の71日目から本研究の180日目までの略式PR−CISスコアの変化量の平均(SD)は0.1(9.80)であった。カテゴリーIの被験者の71日目から180日目までの変化量の平均(SD)は−0.5(9.12)であり、カテゴリーの被験者の71日目から180日目までの変化量の平均は2.8(12.32)であった。
・項目別の総合スコアでも、同様の小さな平均値(SD)の変化が見られた(「セルライトの外観に満足:0.7、気になる:−0.2、自覚:−0.2、恥ずかしい:−0.1、老いへの懸念:−0.1、体型への懸念:−0.1。)
非盲検再治療集団の有効性を評価するためには、データカットオフ時点で再治療を完了した被験者の数が不足した。
CCHの安全性プロファイルは、これまでの研究で得られた安全性の結果と一致した。CCH治療を受けた被験者(親研究)の180日目の観察期間中のAEプロファイルは、親研究でプラセボ治療を受けた被験者と非常に類似しており、データカットオフの時点でCCHの長期的な安全性に関する懸念はないことが示唆された。また、被験者のカテゴリー(I、II、III)の違いによるAEの頻度や種類の違いはほとんどなかった。免疫原性に関しては、過去の研究と同様に有意な結果は得られなかった。
データカットオフ(2019年4月1日)時点での本研究の結果は、PR−PCSS、CR−PCSS、PR−CISで測定した場合、臀部EFPに対してCCH治療を受けた被験者の治療効果の持続性が、段階3二重盲検親研究の71日目以降、180日(6カ月)以上であることを示す(図26)。本研究では、複合応答が2レベル低下した被験者はおらず、親研究で2レベルの複合応答を示した被験者でも、180日目までに応答が完全に消失した被験者はいなかった。また、親研究で2レベルの複合応答を示した被験者で、180日目までに完全に応答を消失した者はいなかった。親研究では、CCH治療を受けた被験者の長期的な安全性に関する懸念は示されなかった。データカットオフ(2019年4月1日)時点にて本研究でCCHによる再治療を受けた30名の被験者について、AEプロファイルはセルライトに対するCCHの他の臨床研究で見られたものと同様であった。
今回の実施例(研究202)は、成人女性を対象にCCHの安全性と有効性を評価した前回の研究(研究201)の段階2非盲検延長研究である。今回の実施例では、研究201で治療を受けた対象者を対象に、長期的な安全性を評価した。また、登録した被験者で、2回目の治療コースを受けた被験者を対象に、治療部位ごとにCCH0.84mgを再曝露した際の安全性、有効性、免疫原性を評価した。この研究では、CCH治療を受けたことのある被験者に対して、既治療部位への再治療(retreatment)または未治療部位への再投与(redosing)の安全性を評価した。最後に、前回の研究(研究201、二重盲検/非盲検評価)および今回の研究(研究202、非盲検)でCCHを投与された被験者を対象に、効果の持続性を評価した。前回の研究(研究201)でCCHを投与した被験者については、治療した部位を最長で約2年間評価し、長期的な効果の持続性を確認した。再曝露された被験者(再治療または再投与)に対しては、治療部位を最長で約1年間評価した。本実施例で特に明記しない限り、本研究202で用いた「日数」は、研究201の初回投与(1日目)に対するものである。研究201では、0.84mgのCCHまたはプラセボを、1人の患者につき1つの治療部位(1つの臀部または1つの大腿部)に投与した。
201研究の71日目に安全性とセルライトの評価が完了した後、被験者に二重盲検研究の非盲検延長研究(スクリーニングA)を継続するかどうかを尋ねた。本研究に参加する時点で、被験者と調査員は、被験者が研究201で投与された試験薬の同一性について盲検化された。研究201の試験薬のブラインドが解除されるまで、被験者は3カ月間隔±7日(研究201の初回投与量に対して)で観察のみの来院を受け、治療部位の安全性およびセルライトの重症度評価の両方が二重盲検法で実施された(図28)。
・被験者が報告したスコアが3または4(中等度または重度)であること(PR−PCSS)、および
・調査員が報告したスコアが3または4(中等度または重度)であること(CR−PCSS)、および
・ヘクセルCSSスコアが13以上でないこと。
・観察集団には、研究201から転出してきたすべての被験者が含まれる。盲検化を解除しても、再曝露しないことを選択した人は観察集団に残る。
・安全集団には、本研究でCCHを少なくとも1回投与されたすべての被験者が含まれる。
・効果集団には、本研究で治療対象として選択された治療部位において、CR−PCSSおよびPR−PCSSの両方でベースラインおよびベースライン後に少なくとも1回の評価が行われたすべての安全被験者が含まれる。
・全体の耐久性集団は、治療コースの1日目と71日目、1日目から180日後以降にCR−PCSSとPR−PCSSの両方の評価を受けたすべてのアクティブ応答者と定義した。アクティブ応答者とは、CCH治療を受けた被験者で、治療コースの71日目に各尺度(CR−PCSSおよびPR−PCSS)でベースラインから少なくとも1レベルの改善が見られた者をいう。
−二重盲検法による治療を受けた被験者の耐久性集団は、全体の耐久性集団の中で、二重盲検法による研究(研究201)でCCH治療を受けた治療部位について、71日目に各尺度(CR−PCSSおよびPR−PCSS)でベースラインから少なくとも1レベルの改善が見られたすべての被験者と定義した。
−非盲検被験者の耐久性集団は、全体の耐久性集団の中で、今回の非盲検研究(研究202)でCCH治療を受けた治療部位について、71日目にCR−PCSSとPR−PCSSの両方でベースラインから少なくとも1レベルの改善が見られたすべての被験者と定義した。
・観察期:スクリーニングAから今回の研究(研究202)における同一治療領域の最初の治療日までの期間、または研究202において同一治療領域で治療を受けていない場合は研究202の終了までと定義した。観察期は、サマリーが被験者レベルのみのものであり、治療された治療領域によって区別できない場合(例:処分、AE)を除き、治療された治療領域ごとに定義した。被験者レベルのサマリーでは、観察期は、スクリーニングAから研究202の最初の治療日まで、または研究202で治療を受けていない場合は研究202の終了日までと定義した。
・治療期:研究202の選択された治療領域の最初の治療日から研究202の終了までの期間と定義した。治療段階は、サマリーが被験者レベルのみのもので、治療された治療領域によって区別できない場合(すなわち、位置、AE)を除き、各治療領域内で定義した。被験者レベルのサマリーでは、治療期は、研究202の最初の治療日から研究202の終了までの期間と定義した。研究202の最初のCCH治療の1日目以降のデータはすべて含まれる。したがって、観察期のデータは治療期に含まれる。
・この集団におけるCCHの安全性プロファイルをさらに明確にするために、12ヶ月間の安全性データを収集する。
・再度の曝露(再治療/再投与)後、12ヶ月間の安全性データおよび免疫原性を評価するとともに、CCHでの治療歴のある被験者を12ヶ月間にわたってモニタリングする。
・以前にプラセボ治療を受けた被験者がCCHに暴露すること。
・CCHへの応答の持続性の評価(セルライトの重症度評価)。
・CCHによる治療を受けたことのある被験者を再治療または再投与する際の安全性および免疫原性を評価する。
・CCH−201研究でアクティブ治療を受けたことのある被験者を対象に、CCHの初回投与後12ヶ月間におけるEFPの重症度に対するCCHの応答の持続性を、PR−PCSSおよびCR−PCSSを用いて評価する。
・PR−PCSSおよびCR−PCSSを用いて、研究201でアクティブ治療を受けたことのある被験者を対象に、CCHの初回投与後12カ月以降のEFPの重症度におけるCCHの応答の持続性を評価する。
・被験者の満足度、調査員グローバル美的改善尺度(I−GAIS))、被験者グローバル美的改善尺度(S−GAIS))を含むEFPの評価において、CCHの長期的な応答を評価する。
・本研究にてCCHで治療した象限でのセルライトの重症度評価を行う。
・CCHに暴露した後の免疫原性を評価する。
本研究で選択された用量は、親研究である研究201で使用された用量と同じである。治療を受ける資格があり、治療を受けることを選択した被験者は、21日間隔で3回CCHを投与された(研究日1、22、43日目)。研究201でプラセボを投与された被験者は、本研究で対象となる治療部位に2コースの治療を受けることを選択できた。本研究(202研究)で行われた治療コースIとIIは、本研究の第1コースでCCHを最終投与した後、28日以上の間隔を置いて行われた。
観察のみのグループとCCHの再投与または再治療を選択した被験者を対象に、デジタル写真を用いて特定の時点におけるセルライトの重症度を評価した。再投与または再治療を選択した被験者のスクリーニングBでは、調査員または適格な被指名人が、スポンサー提供の標準化されたデジタルカメラを用いて各治療部位を撮影した。被験者は撮影時には立った状態で、標準化された衣服を着用して撮影した。
PR−PCSSのベースラインからの変化
・PR−PCSSの各改善レベルにおける割合。
−PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル以上改善した被験者と定義される応答者の割合(被験者評価)。
−PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義された応答者の割合(被験者評価)。
・CR−PCSSのベースラインからの変化
・CR−PCSSの各レベルの改善度における割合:
−調査員による応答者の割合は、CR−PCSS(調査員による評価)においてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善が見られた被験者と定義した。
−調査員による応答者の割合は、CR−PCSS(調査員による評価)の重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義した。
・I−GAISの各レベルにおける応答者の割合:
−71日目および360日目において、I−GAISの各レベルでの被験者の割合。
・S−GAISの各レベルにおける応答者の割合:
−71日目および360日目において、S−GAISの各レベルでの被験者の割合。
・セルライト治療に対する被験者の満足度尺度の各レベルにおける応答者の割合。
・スクリーニング来院時からのヘクセルCSS総合スコアの変化。
・CR−PCSSおよびPR−PCSSにおいて、ベースラインから少なくとも2(または1)の重症度の改善が見られた被験者と定義される複合応答者の割合。
・PR−PCSSのベースラインからの変化。
・PR−PCSSにおける各レベルの改善の割合。
−PR−PCSSの重症度がベースラインから2レベル以上改善した被験者と定義される応答者の割合。
−PR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義される応答者の割合。
・CR−PCSSのベースラインからの変化。
・CR−PCSSの各レベルの改善度における割合。
−調査員による応答者の割合は、CR−PCSS(調査員による評価)においてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善が見られた被験者と定義した。
−調査員による応答者の割合は、CR−PCSS(調査員による評価)の重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善した被験者と定義した。
・360日目のセルライト治療に対する被験者の満足度を示す尺度の各レベルにおける応答者の割合。
・研究201の71日目から360日目までのヘクセルCSS総合スコアの変化、または360日目以降の長期耐久の視察。
治療持続性の評価には、研究201で積極的な治療を受け、CR−PCSSとPR−PCSSの両方で少なくとも1レベルの改善を示した被験者の2年までの観察が含まれた。また、研究201でCCHを投与され、本研究でもCCHを投与された被験者については、研究201で治療された当初の治療部位に加え、非盲検研究で治療された治療部位(クワドラント)も本研究の720日目まで評価した。また、耐久性集団には、研究201でCCHを投与されたが、本研究では追加治療を受けないことを選択した被験者、および研究201でプラセボを投与され、本研究でCCHを投与された被験者も含まれた。
・二重盲検法による治療を受けた被験者の耐久性集団:二重盲検研究(研究201)でCCHを投与した治療部位について、71日目(研究201)に各尺度(CR−PCSSおよびPR−PCSS)でベースラインから少なくとも1レベルの改善を示し、最大2年間追跡調査を行った耐久性集団の全被験者。
・非盲検被験者の耐久性集団:研究202でCCHを投与した治療部位において、71日目(研究202)にCR−PCSSとPR−PCSSの両方でベースラインから少なくとも1レベルの改善が見られ、その後1年間追跡調査を行った耐久性集団の全被験者。
安全性の変数は以下の通り。安全性の変数には、AE、注射部位の応答/局所的な忍容性、バイタルサイン、臨床検査項目(血液学、血液化学、尿検査を含む)、および免疫原性が含まれた。
250人の被験者が研究201から転出し、今回の研究に参加し、観察集団に含まれた(表80)。観察集団は、研究201でCCHによる治療を受けた121名の被験者と、プラセボによる治療を受けた138名の被験者で構成された。観察集団に含まれる53人(20.5%)の被験者が、二重盲検法で治療を受けた被験者の耐久性集団に含まれた。これらの被験者は、研究201の71日目以前に、CR−PCSSとPR−PCSSの両方で少なくとも1レベルの改善が認められた。
1.CCH−研究201でCCHを投与された被験者のうち、CCH−研究201の治療コース1で応答した被験者で、再投与または再治療を行った被験者。
・研究201でCCHの投与を受け、治療部位のセルライト重症度スコアが研究201のベースラインスコアに戻ったか、それよりも悪化した再治療を受けた被験者。これらの被験者は、前回治療した部位をCCHで再治療することを選択できた。
・研究201でCCHを再投与された被験者
2.研究201でプラセボ治療を受けた被験者のうち、研究202で初期治療を受け、治療コースIで応答した被験者。
3.研究201でプラセボ李朝を受けた被験者で、研究202で2つの治療コースを受け、治療コース2に応答した被験者。
図28は、被験者がどのように処分されたかをまとめたものである。
(i)被験者の処分(観察期):観察期には259例の被験者が評価され、222例(85.7%)が観察期を終了した(表82).その理由は、CCHに曝露していないのに好酸球が軽度増加したAE(1例;0.4%)、追跡調査不能(13例;5%)、被験者による離脱(13例;5%)、その他(10例;3.9%)であった.その他のカテゴリーには、スクリーニング失敗、治療段階への参加を拒否した被験者、被験者登録の研究日272日目にサイトが閉鎖された被験者、または研究の受診を遵守しなかった被験者が含まれた。
1.臨床エンドポイント
治療段階および観察段階において、研究201の有効応答者を対象に、CR−PCSS/PR−PCSS複合エンドポイントの応答を評価した。セルライトの重症度に関する複合エンドポイントは、複合応答者の割合として定義した。応答とは、ベースライン(研究201)からCR−PCSSの重症度が1レベル以上改善し、PR−PCSSの重症度が1レベル以上改善した被験者と定義した。積極的な応答を示したのは、研究201でCCH治療を受けた被験者で、研究201の治療領域のベースラインからCR−PCSSとPR−PCSSの両方で少なくとも1レベルの改善が認められた。
本研究では、登録を希望したセルライトを有するすべての被験者を対象に、2年間(24カ月)にわたって予定された間隔でCCHの長期安全性を評価した。対象者は、臀部または大腿部のいずれかに治療を受け、適格性に応じて、臀部または大腿部のいずれかに2回目の治療を受けることができた。応答の持続性は、研究201でCCH治療を受けた被験者では最長2年間、研究202でCCHの初回治療を受けた被験者では最長12カ月間評価された。研究201で治療を受けた研究202の720日目に評価された被験者で得られたデータは、CR−PCSSおよびPR−PCSSの応答が最大2年間持続することを裏付けた。
本研究では、2回目の治療コースに対する耐性(CCHを再投与したときに、時間の経過とともに治療用量に応答する能力が失われること)を評価した。本研究のデータは、CCHの再投与による耐性(時間の経過とともに治療用量に応答する能力が失われること)がないことを裏付けた。163名の被験者が治療を受けた。このグループは、研究201で最初の治療コースを受けた後、治療コース1で再曝露された被験者88名と、治療コース2で再曝露された被験者75名で構成された。
CCHの安全性プロファイルは、これまでの研究で得られた安全性の結果と一致していた。研究期間中、併用薬に臨床的に意味のある変化はなかった。研究期間中、血清化学パラメータ、血液学パラメータ、尿検査結果、バイタルサインのベースラインからの平均変化量に臨床的に意味のある傾向は認められなかった。また、抗AUX−I抗体および抗AUX−II抗体を有する被験者、あるいは中和抗体を有する被験者において、臨床的に重要な知見は得られなかった。
応答の持続性(完全に消失しないこと)は、研究201の評価可能な2レベルの複合応答者で観察された。CCH治療を受けた地域で、ベースラインのCR−PCSSおよびPR−PCSSレベル以上に戻った被験者はいなかった。下記の間、持続的な応答が観察された。
・それぞれ180日目と360日目での二重盲検法で評価可能な被験者19名(100%)と16名(100%)の観察期。
・それぞれ540日目および720日目での二重盲検法による評価可能な被験者7名(100%)の長期耐久期。
・それぞれ180日目および360日目での26名(100%)および21名(100%)の評価可能な非盲検治療を受けた被験者の治療期。
・それぞれ180日目および360日目での二重盲検法で評価可能な被験者のうち50名(94.3%)、43名(95.6%)の観察期。
・それぞれ540日目および720日目での二重盲検法で評価可能な被験者22名(95.6%)、21名(91.3%)の長期持続期。
・それぞれ180日目および360日目での124名(100%)、114名(100%)の評価可能な非盲検治療対象者における治療期。
・二重盲検法による評価可能な被験者10名(47.6%)の360日目の観察期。
・それぞれ540日目および720日目での二重盲検法による評価可能な被験者3名(30%)と4名(40%)の長期持続期。
・それぞれ180日目および360日目での32名(62.7%)、26名(56.5%)の評価可能な非盲検治療を受けた被験者の治療期。
・それぞれ180日目および360日目での二重盲検法で治療を受けた被験者38名(84.4%)の観察期。
・それぞれ540日目および720日目での19名(82.6%)、16名(69.6%)の二重盲検者の長期持続期。
・それぞれ180日目および360日目での評価可能な非盲検治療を受けた109名(87.9%)、96名(84.2%)の治療期。
・二重盲検法による評価可能な被験者のうち、10名(31.3%)が180日目、14名(48.3%)が360日目の観察期。
・それぞれ540日目および720日目での二重盲検法による評価可能な被験者7名(53.8%)の長期持続期。
・それぞれ180日目および360日目での33名(66.7%)、24名(54.5%)の評価可能な非盲検治療者の治療期。
・それぞれ180日目および360日目での二重盲検法による評価可能な被験者の40名(75.5%)、35名(77.8%)の観察期。
・それぞれ180日目および360日目での二重盲検法による評価可能な被験者19名(82.6%)、20名(87.0%)の長期持続期。
・それぞれ180日目および360日目での103名(83.1%)、92名(80.7%)の評価可能な非盲検治療者の治療期。
・ヘクセルのCSS総合スコアでは、
−観察期、CCH治療を受けた被験者では、観察来院日360日目に、ヘクセルCSS総合スコアの71日目のベースラインからの変化が平均(SD)で−2.2(2.34)であったのに対し、プラセボ治療を受けた被験者では平均(SD)で−1.2(1.47)であったことを示した。
−長期持続期、ベースライン(研究201)からの変化量は、540日目で−1.0(0.83)、720日目で−2.9(1.74)であった。
−治療期では、再治療群と再投与を受けた被験者の360日目におけるベースライン(研究202)からの変化量は−2.4(2.37)であった。
・I−GAISの調査員によると、下記の期間:
−観察期、CCH治療を受けた被験者の半数以上(64.9%)のセルライトが観察され、I−GAISの調査員による評価では、非常に改善された(4.1%)、かなり改善された(23.7%)、改善された(37.1%)とされた。
−治療期、治療コース1の360日目に、被験者全体の約4分の3(73.2%)のセルライトが、改善された(81名、49.4%)、かなり改善された(32名、19.5%)、非常に改善された(7名、4.3%)と評価された。
−治療期、治療コース2の360日目に、被験者全体の半数以上(64.2%)が、「改善した」(24名、35.8%)、「かなり改善した」(16名、23.9%)、「非常に改善した」(3名、4.5%)と評価された。
−治療期、360日目に、2回目のCCH治療を受けた被験者において、再治療および再投与を受けた被験者の3分の2以上(71.8%)のセルライトが、改善された64(45.1%)、かなり改善された33(23.2%)、非常に改善された5(3.5%)と評価された。
・S−GAISでの被験者によると、下記の期間:
−観察期、CCH治療を受けた被験者の3分の2以上(69.1%)が、セルライトが改善された(46名、47.4%)、かなり改善された(18名、18.6%)、非常に改善された(3名、3.1%)と評価した。
−治療期中で、治療コース1の360日目に、被験者全体の3分の2以上(66.2%)が、セルライトが改善された(73人、44.8%)、かなり改善された(18人、11%)、非常に改善された17人(10.4%)と評価した。
−治療期中で、治療コース2の360日目に、被験者の約半数(51.5%)のセルライトが改善された(24名、35.3%)、かなり改善された(6名、8.8%)、非常に改善された(5名、7.4%)と評価した。
−治療期中で、360日目で、2回目のCCH治療を受けた被験者の半数以上(64.4%)が、セルライトが改善された(64人、44.8%)、かなり改善された(14人、9.8%)、非常に改善された16人(11.2%)と評価した。
・EFP治療に対する被験者の満足度評価で、被験者によって、下記の期間:
−観察期、360日目に、CCH投与群では41名(42.3%)、CCH治療を受けた被験者では14名(14.4%)の被験者が「治療に満足している」「非常に満足している」と応答した。
−治療段階中で、治療コース1の観察日360日目に、55名(33.7%)の被験者が治療に満足し、26名(16.0%)の被験者が非常に満足した。
−治療段階中で、治療コース2の観察日360日目に、21人(30.9%)の被験者が治療に満足し、10人(14.7%)の被験者が非常に満足した。
−治療段階中で、2回目のCCH治療を受けた被験者のうち、50人(35%)の被験者が治療に満足し、25人(17.5%)の被験者が治療に非常に満足したと応答した。
Claims (63)
- ヒト患者の両臀部におけるセルライトの重症度を低減する方法であって、前記方法は、
a.以下の特徴:
i.約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1);
ii.約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM;
iii.約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1);
iv.約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒;
v.約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1;
vi.約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量;
vii.逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度が少なくとも80%であること;
viii.約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価;
ix.約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価;
x.約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価;
xi.クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下;
xii.1cfu/mL以下のバイオバーデン;
のうち少なくとも2つを有するコラゲナーゼ組成物を提供する工程と、
b.治療有効量の前記コラゲナーゼ組成物を両臀部の陥凹部に注射する工程であって、前記セルライトの外観における改善が、ヘクセルセルライト重症度尺度(ヘクセルCSS)、ヘクセルくぼみ深さスコア、リッカート尺度、陥凹部分析、臨床医が報告したフォト数値セルライト重症度尺度(CR−PCSS)、患者が報告したフォト数値セルライト重症度尺度(PR−PCSS)、調査員グローバル美的改善尺度(I−GAIS)、被験者グローバル美的改善尺度(S−GAIS)、患者報告式セルライトインパクト尺度(PR−CIS)、PR−CIS省略形、被験者自己評価尺度(SSRS)、セルライト治療に対する被験者の満足度(SSCT)、セルライトの重症度の臨床医アセスメント(写真またはその他の画像)、Body−Q、セルライトの重症度、改善度、および/または患者の満足度を評価するために臨床医および/または患者が使用する検証済みのフォト数値またはその他の尺度、からなる群から選択される尺度または他の測定ツールによって確立されるものである、注射する工程と、
を有する、方法。 - 請求項1記載の方法において、治療される前記陥凹部は、サイズまたは相互の距離に依存しないものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、治療される前記陥凹部は、皮膚のたるみ、弛緩、または垂れがない、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記患者が複数回の治療訪問を受け、異なる陥凹部は異なる治療訪問で治療される、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記注射は1/2インチの針で行われる、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記注射は、前記注射の位置を制限するスペーサー、定規、紙などの装置に頼らない臨床医によって行われるものである、方法。
- 請求項1記載の方法において、少なくとも1回の注射は、前記陥凹部の直下に行われる、方法。
- 請求項1記載の方法において、複数回の注射が互いに2cm以内で行われる、方法。
- 請求項1記載の方法において、治療される前記陥凹部の長さが1cm未満または2cm以上である、請求項1に記載の方法。
- 請求項1記載の方法において、前記患者が治療に対して迅速な応答速度を経験する、方法。
- 請求項1記載の方法において、全員が中等度または重度のCR−PCSSベースライン評価を有する患者集団に治療を行うと、前記治療は、以下からなる群:
a.少なくとも50%の患者が、22、43、または71日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善していること;
b.少なくとも50%の患者が、22、43、または71日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも1レベル改善していること;
c.患者の少なくとも5%が、22、43、または71日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善していること;
d.患者の少なくとも5%が、22、43、または71日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら被験者が評価したPR−PCSSの重症度がベースラインから少なくとも2レベル改善していること;および
e.少なくとも5%の患者が、陥凹部サイズの減少を経験すること;
からなる群から選択される結果をもたらす、方法。 - 請求項11記載の方法において、前記陥凹部サイズのパラメータが、体積、長さ、幅、および深さからなる群から選択される、方法。
- 請求項11記載の方法において、前記陥凹部サイズの減少が、ベースラインから22、43、または71日目において少なくとも10%減少である、方法。
- 請求項1記載の方法において、注射された累積コラゲナーゼが約5.04mgである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約0.08〜7.70
ii.KM:約4.1〜410ナノモル
iii.Kcat、秒−1:約1.1〜107
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約0.3〜30.5
ii.KM、mM:約0.03〜3.1
iii.Kcat、秒−1:約93〜9,179
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項1記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約3.8
ii.KM、mM:約2.07×10−4
iii.Kcat、秒−1:約53
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約18,799
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約256,977
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約15.4
ii.KM、mM:約1.6
iii.Kcat、秒−1:約4,636
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約216
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約2,997
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項1記載の方法において、前記組成物は少なくとも3つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物は少なくとも4つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物は少なくとも5つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物は約1mg〜20mgの1つまたは複数のコラゲナーゼを有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物はCCHを有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物は約10,000ABC単位/0.58mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記組成物は約15,000ABC単位/mg〜20,000ABC単位/mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記治療有効量は約1mg〜10mgであり、前記組成物は約20,000〜約30,000f−SRC単位/mg、または、約175,000〜約300,000f−GPA単位/mgの力価を有する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項25記載の方法において、前記患者の少なくとも10%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項25記載の方法において、前記患者の少なくとも20%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項1記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が治療前のベースラインに対して改善を示し、および、時間とともに改善のさらなる増加を示す、方法。
- 請求項1記載の方法において、治療が、CR−PCSSおよび/またはPR−PCSSによって測定される以下の有効性評価項目:
a.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度がベースライン(治療前の「1日目」)から少なくとも2レベル改善していること;
b.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら患者が評価したPR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも2レベル改善していること;
c.前記CR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善があり、および、前記PR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善がある患者と定義される、22、43、71、90、180、または365日目に、2レベルの複合応答によって示された改善;
d.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善していること;
e.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら患者が評価したPR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善していること;
f.前記CR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善があり、および、前記PR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善がある患者と定義される、22、43、71、90、180、または365日目に、1レベルの複合応答によって示される改善;および
g.ベースライン時に全員のCR−PCSS評価が中等度または重度であった患者集団において、少なくとも1つの治療領域における改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記a.からf.の1つ以上であること;
のうち少なくとも1つの結果をもたらす、方法。 - 請求項1記載の方法において、前記治療が、陥凹部分析によって測定される以下の有効性評価項目:
a.深さが少なくとも5%減少する;
b.幅が少なくとも5%減少する;
c.長さが少なくとも5%減少する;
d.全体の体積が少なくとも5%減少する;
e.表面積が少なくとも5%減少する;
のうち少なくとも1つをもたらす、方法。 - ヒト患者の両臀部におけるセルライトの重症度を低減する方法であって、前記方法は、
a.以下の特徴:
i.約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1);
ii.約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM;
iii.約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1);
iv.約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒;
v.約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1;
vi.約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量;
vii.逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度が少なくとも80%であること;
viii.約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価;
ix.約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価;
x.約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価;
xi.クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下;
xii.1cfu/mL以下のバイオバーデン;
のうち少なくとも2つを有するコラゲナーゼ組成物を提供する工程と、
b.治療有効量の前記コラゲナーゼ組成物を、治療Iに従って両臀部の陥凹部に注射する工程であって、治療訪問後約3日〜20日の間にあざが有意に減少するか、または色の濃さが解消される、注射する工程と、
を有する、方法。 - 請求項31記載の方法において、注射された累積コラゲナーゼが約5.04mgである、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約0.08〜7.70
ii.KM:約4.1〜410ナノモル
iii.Kcat、秒−1:約1.1〜107
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約0.3〜30.5
ii.KM、mM:約0.03〜3.1
iii.Kcat、秒−1:約93〜9,179
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項31記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約3.8
ii.KM、mM:約2.07×10−4
iii.Kcat、秒−1:約53
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約18,799
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約256,977
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約15.4
ii.KM、mM:約1.6
iii.Kcat、秒−1:約4,636
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約216
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約2,997
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項31記載の方法において、前記組成物は少なくとも3つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物は少なくとも4つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物は少なくとも5つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物は約1mg〜20mgの1つまたは複数のコラゲナーゼを有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物はCCHを有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物は約10,000ABC単位/0.58mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記組成物は約15,000ABC単位/mg〜20,000ABC単位/mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記治療有効量は約1mg〜10mgであり、前記組成物は約20,000〜約30,000f−SRC単位/mg、または、約175,000〜約300,000f−GPA単位/mgの力価を有する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項43記載の方法において、前記患者の少なくとも10%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項43記載の方法において、前記患者の少なくとも20%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項31記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が治療前のベースラインに対して改善を示し、および、時間とともに改善のさらなる増加を示す、方法。
- ヒト患者の両臀部におけるセルライトの重症度を低減する方法であって、前記方法は、
a.以下の特徴:
i.約0.08〜7.70(SRCアッセイ)、または約0.3〜30.5(GPAアッセイ)のVmax(分−1);
ii.約4.1〜410ナノモル(SRCアッセイ)、または約0.03〜3.1mM(GPAアッセイ)のKM;
iii.約1.1〜107(SRCアッセイ)、または約93〜9,179(GPAアッセイ)のKcat(秒−1);
iv.約376〜37,222(SRCアッセイ)、または約4〜428(GPAアッセイ)の1/Kcat、マイクロ秒;
v.約5,140〜508,814(SRCアッセイ)、または約60〜5,934(GPAアッセイ)のKcat/KM、mM−1秒−1;
vi.約60kDa〜約130kDa、または約70〜約130kDa、または約80〜約120kDa、または約90〜約120kDa、または約100〜約110kDaの分子量;
vii.逆相HPLC(高圧液体クロマトグラフィー)で測定した面積比の純度が少なくとも80%であること;
viii.約5,000〜約30,000f−SRC単位/mgの力価;
ix.約175,000〜約500,00f−GPA単位/mgの力価;
x.約5,000〜約25,000ABC単位/mgの力価;
xi.クロストリパイン、ゼラチナーゼおよびロイペプチンからなる群から選択される不純物が面積比で1%以下;
xii.1cfu/mL以下のバイオバーデン;
のうち少なくとも2つを有するコラゲナーゼ組成物を提供する工程と、
b.治療有効量の前記コラゲナーゼ組成物を、治療Iに従って両臀部の陥凹部に注射する工程であって、前記セルライトの外観における改善が、CR−PCSSによって確立されるものである、注射する工程と、
を有する、方法。 - 請求項47記載の方法において、注射された累積コラゲナーゼが約5.04mgである、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約0.08〜7.70
ii.KM:約4.1〜410ナノモル
iii.Kcat、秒−1:約1.1〜107
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約376〜37,222
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約5,140〜508,814
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約0.3〜30.5
ii.KM、mM:約0.03〜3.1
iii.Kcat、秒−1:約93〜9,179
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約4〜428
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約60〜5,934
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項47記載の方法において、前記コラゲナーゼ組成物は、以下の特徴:
a.AUX−I(SRCアッセイ):
i.Vmax、分−1:約3.8
ii.KM、mM:約2.07×10−4
iii.Kcat、秒−1:約53
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約18,799
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約256,977
b.AUX−II(GPAアッセイ)
i.Vmax、分−1:約15.4
ii.KM、mM:約1.6
iii.Kcat、秒−1:約4,636
iv.1/Kcat、マイクロ秒:約216
v.kcat/KM、mM−1秒−1:約2,997
を有するAUX−IおよびAUX−IIを有する、方法。 - 請求項47記載の方法において、前記組成物は少なくとも3つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物は少なくとも4つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物は少なくとも5つの前記特徴を有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物は約1mg〜20mgの1つまたは複数のコラゲナーゼを有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物はCCHを有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物は約10,000ABC単位/0.58mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記組成物は約15,000ABC単位/mg〜20,000ABC単位/mgの力価を有し、前記治療有効量は約1mg〜20mgである、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記治療有効量は約1mg〜10mgであり、前記組成物は約20,000〜約30,000f−SRC単位/mg、または、約175,000〜約300,000f−GPA単位/mgの力価を有する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項59記載の方法において、前記患者の少なくとも10%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項59記載の方法において、前記患者の少なくとも20%が、初回投与後少なくとも71日間、治療前のベースラインに対して改善のレベルを維持する、方法。
- 請求項47記載の方法において、前記治療が患者集団に行われる場合、前記治療の結果、患者の少なくとも5%が治療前のベースラインに対して改善を示し、および、時間とともに改善のさらなる増加を示す、方法。
- 請求項47記載の方法において、治療が、CR−PCSSによって測定される以下の有効性評価項目:
a.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度がベースライン(治療前の「1日目」)から少なくとも2レベル改善していること;
b.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら患者が評価したPR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも2レベル改善していること;
c.前記CR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善があり、および、前記PR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも2レベルの重症度の改善がある患者と定義される、22、43、71、90、180、または365日目に、2レベルの複合応答によって示された改善;
d.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部の臨床医がライブで評価したCR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善していること;
e.22、43、71、90、180、または365日目に、前記臀部のデジタル画像を見ながら患者が評価したPR−PCSSの重症度が、ベースライン(1日目)から少なくとも1レベル改善していること;
f.前記CR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善があり、および、前記PR−PCSSにおいてベースラインから少なくとも1レベルの重症度の改善がある患者と定義される、22、43、71、90、180、または365日目に、1レベルの複合応答によって示される改善;および
g.ベースライン時に全員のCR−PCSSまたはPR−PCSS評価が中等度または重度であった患者集団において、少なくとも1つの治療領域における改善がプラセボと比較して統計的に有意であり、その改善が上記a.からf.の1つ以上であること;
のうち少なくとも1つの結果をもたらす、方法。
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