BR112021005064A2

BR112021005064A2 - método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano

Info

Publication number: BR112021005064A2
Application number: BR112021005064-7A
Authority: BR
Inventors: Michael McLane; Matthew W. Davis
Original assignee: Endo Global Aesthetics Limited
Priority date: 2018-09-18
Filing date: 2019-09-04
Publication date: 2021-06-08
Also published as: JP2022502478A; IL281501A; CA3112437A1; CN113015514A; MX2021003154A; AU2019341663A1; KR20210079291A; WO2020058755A1; EP3852715A1

Abstract

MÉTODO PARA REDUZIR A GRAVIDADE DA CELULITE EM AMBAS AS NÁDEGAS DE UM PACIENTE HUMANO. A presente divulgação diz respeito a um método de tratamento da celulite em uma coxa ou nádega em um indivíduo humano administrando uma quantidade eficaz de colagenase e, então, avaliando a redução da gravidade da celulite em uma ou mais escalas.

Description

MÉTODO PARA REDUZIR A GRAVIDADE DA CELULITE EM AMBAS AS NÁDEGAS DE UM PACIENTE HUMANO

[0001] Este Pedido reivindica prioridade do Pedido Provisório U.S. N.º Nº 62/733.046 depositado em 18 de setembro de 2018, Pedido Provisório U.S. Nº 62/788.916 depositado em 6 de janeiro de 2019, Pedido Provisório dos EUA Nº 62/812.036 depositado em 28 de fevereiro de 2019, Pedido Provisório dos EUA Nº 62/823.596 depositado em 25 de março de 2019, Pedido Internacional N Nº PCT/US2019/041494 depositado em 11 de julho de 2019 e Pedido Internacional N Nº PCT/US2019/41718 depositado em 12 de julho de 2019, que são incorporados a este documento por referência em sua totalidade em toda a extensão permitida por lei.

CAMPO TÉCNICO

[0002] A presente invenção se refere ao campo da avaliação e tratamento da celulite.

FUNDAMENTOS

[0003] Celulite (também conhecida como paniculopatia fibroesclerótica edematosa (EFP)), é uma condição estética que pode ser entendida como um desequilíbrio entre as características estruturais e propriedades biomecânicas (ou seja, as delicadas forças de contenção e extrusão) na junção subdérmica (Rudolph et al, "Structural Gender Dimorphism and the Biomechanics of the Gluteal Subcutaneous Tissue: Implications for the Pathophysiology of Cellulite" (Dimorfismo Estrutural de Gênero e a Biomecânica do Tecido Subcutâneo Glúteo: Implicações para a Patofisiologia da Celulite), Plast. Reconstr. Surg. 2019; 143(4): 1077-1086). Por conseguinte, os objetivos do tratamento da celulite são fortalecer a interface subdérmica e/ou liberar os septos fibrosos através de vários tipos de subcisão (Rudolph et al., supra). Os septos fibrosos foram reconhecidos como uma causa subjacente contributiva para a celulite e como um alvo de tratamento para celulite por estudos anatômicos e de análise de imagem (Hexsel et al, “Side-by-side comparison of areas with and without cellulite depressions using magnetic resonance imaging" (“Comparação lado a lado de áreas com e sem depressões de celulite usando imagens de ressonância magnética"), DermatolSurg. 2009; 35(10): 1471-1477; Hexsel et al. "Magnetic Resonance Imaging of Cellulite Depressed Lesions Successfully Treated by Subcision" (Ressonância Magnética de Lesões de Depressão de Celulite Tratadas com Sucesso por Subcisão), Dermatol Surg. 2016; 42(5): 693-696; Mirrashed F, Sharp JC, Krause V, Morgan J, Tomanek B. “Pilot study of dermal subcutaneous fat structures by MRI in individuals who differ in gender, BMI, and cellulite grading” (“Estudo piloto de estruturas de gordura subcutânea dérmica por ressonância magnética em indivíduos que diferem em gênero, IMC e graduação de celulite”), Skin Res Technol. 2004; 10(3): 161-168; Niimberger e Muller, “So-called cellulite: an invented disease” (“A chamada celulite: uma doença inventada”), J Dermatol Surg Oncol. 1978; 4(3): 221-229; Pierard et al, “Cellulite: from standing fat herniation to hypodermal stretch marks” ("Celulite: de herniação de gordura em pé a estrias hipodérmicas"), Am J Dermatopath. 2000; 22(I): 34-37; Querleux et al, “Anatomy and physiology of subcutaneous adipose tissue by in vivo magnetic resonance imaging and spectroscopy: relationships with sex and presence of cellulite” (“Anatomia e fisiologia do tecido adiposo subcutâneo por ressonância magnética in vivo e espectroscopia: relações com sexo e presença de celulite”) Skin Res Techno. 2002; 8(2): 118-124). Para tratar de maneira eficaz a celulite, uma abordagem terapêutica é necessária para lisar ou romper os septos dérmicos, que são compostos de colágeno (Figura 1) e causam ondulações na pele, que incomodam muitas mulheres.

[0004] Há terapias que têm sido utilizadas na tentativa de tratar a celulite; contudo, não há tratamentos farmacológicos aprovados. Apesar das múltiplas modalidades terapêuticas, há poucas evidências científicas de que qualquer um dos tratamentos não farmacológicos atuais seja benéfico. Na verdade, muitas das evidências são anedóticas, subjetivas ou com base apenas na autoavaliação do paciente. Alguns dos tratamentos históricos para EFP incluíram perda de peso, agentes tópicos, massagem, lipoaspiração, mesoterapia, radiofrequência, subcisão, subcisão elétrica e terapias a laser. Muitos desses tratamentos têm efeitos colaterais indesejáveis (Avram MM, “Cellulite: a review of its physiology and treatment” (“Celulite: uma revisão de sua fisiologia e tratamento”), J Cosmet Laser Ther. 2004; 6(4): 181-185; Collis et al, “Cellulite treatment: a myth or reality: a prospective randomized, controlled trial of two therapies, endermologie and aminophylline cream” (“Tratamento da celulite: um mito ou realidade: um ensaio prospectivo randomizado e controlado de duas terapias, endermologia e creme de aminofilina”), Plast Reconstr Surg. 1999; 104(4): 1110-1114; Khan MH, Victor F, Rao B, Sadick NS. “Treatment of cellulite: Part I. Pathophysiology” (“Tratamento da celulite: Parte I. Fisiopatologia”). J Am Acad Dermatol. 2010; 62(3): 361-370; Hexsel DM, Mazzuco R. “Subcision: a treatment for cellulite” ("Subcisão: um tratamento para a celulite"). Int J Dermatol. 2000; 39(7): 539-544; Boyce et al, “Clinical evaluation of a device for the treatment of cellulite: Triactive” (“Avaliação clínica de um dispositivo para o tratamento da celulite: Triactive”). Am JCosmet Surg. 2005; 22: 233-237; DiBernardo BE. “Treatment of cellulite using a 1440-nm pulsed laser with one-year follow-up” (“Tratamento da celulite usando laser pulsado de 1440 nm com acompanhamento de um ano”). Aesthet Surg J. 2011; 31(3): 328-341). Assim, muitos clínicos gerais consideram que melhorias nas condições estéticas não são facilmente obtidas. Assim, permanece uma necessidade não atendida de terapias não cirúrgicas seguras e eficazes para melhorar o resultado estético em mulheres com celulite.

SUMÁRIO

[0005] A presente divulgação satisfaz a necessidade acima e se refere a métodos de tratamento da celulite em pacientes humanos pela injeção subcutânea de uma quantidade terapeuticamente eficaz de colagenase (conforme definido na Descrição Detalhada). Tais métodos se referem à avaliação pré-tratamento da gravidade da celulite de um paciente usando várias escalas e técnicas de avaliação para estabelecer a linha de base da gravidade da celulite do paciente. Este é, então, seguido pelo tratamento da celulite por injeção subcutânea de colagenase. A dosagem e administração da colagenase podem variar, e a colagenase pode estar na forma de uma composição farmacêutica compreendendo a colagenase e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Tais excipientes podem incluir água estéril para injeção, agentes de ajuste de pH e estabilizadores. As avaliações pós-tratamento são realizadas para confirmar a eficácia do tratamento em comparação com a linha de base. Os métodos de tratamento da presente divulgação resultam em reduções significativas no aparecimento de celulite.

[0006] Conforme explicado na Descrição Detalhada, há quatro fases de tratamento, embora sejam opcionais e a ordem não pretenda ser estritamente limitante.

1. Em uma primeira fase, o médico realiza uma seleção de ondulações de celulite a serem tratadas. Em seguida, antes da injeção, uma avaliação é realizada, por exemplo, o médico e/ou paciente avalia independentemente a gravidade de pré-tratamento da celulite usando uma ou mais das seguintes escalas ou outros métodos de avaliação (conforme definido na Descrição Detalhada): o Escala de Gravidade de Celulite Hexsel (Hexsel CSS) o Pontuação de Profundidade de Depressão Hexsel o Escala Likert o Análise de Ondulação o Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Médico (CR-PCSS) o Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-PCSS)

o Escala de Melhora Estética Global do Investigador (I-GAIS) o Escala Global de Melhora Estética Global do Indivíduo (S- GAIS) o Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS) o PR-CIS Abreviado o Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS) o Satisfação do Indivíduo com Tratamento para Celulite (SSCT) o Avaliação do Médico da Gravidade da Celulite (fotografia ou outras imagens) o Body-Q o Escala de Fitzpatrick o Gravidade da Celulite da Coxa - Paciente (TCS-P); Gravidade da Celulite da Coxa - Médico (TSC-C) o Qualquer escala fotonumérica validada ou outra escala usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente (por exemplo, Escala Hexsel-Merz (Hexsel et al., “Validated Assessment Scales for Cellulite Dimples on the Bullocks and Thighs in Female Patients” ("Escalas de Avaliação Validadas para Ondulações de Celulite nas Nádegas e Coxas em Pacientes Femininos"), Dermatologic Surgery: August 2019 (Volume 45) Issue p S2-S11 e publicação de pôster na American Academy of Dermatology meeting 2019).

[0007] Adicionalmente, a avaliação do pré-tratamento por médicos e pacientes pode ser realizada analisando uma série de 1 a 15 fotografias, ilustrações, desenhos, imagens de computador, modelos 3D, imagens de ressonância magnética, termogramas, ultrassonogramas, feedback verbal do paciente ou semelhantes, cada um tendo uma classificação ou nível de gravidade de celulite diferente.

2. Em uma segunda fase do tratamento, as ondulações a serem tratadas são marcadas pelo médico com um ponto ou outra marcação (Figura 6). É normalmente colocado no nadir da ondulação, se houver um nadir. Mais fotos podem ser tiradas e outras avaliações realizadas.

3. Em uma terceira fase do tratamento, uma quantidade terapeuticamente eficaz de colagenase é injetada por via subcutânea na(s) ondulação(ões) em uma dose única ou em doses divididas em uma ou mais áreas de tratamento (conforme definido na Descrição Detalhada). As doses e técnicas de injeção variam. Por exemplo, o método pode compreender uma injeção de acordo com o seguinte procedimento: • Uma composição de colagenase (por exemplo, CCH) é injetada por via subcutânea enquanto o indivíduo está em uma posição prona usando uma seringa com uma agulha de calibre 30 de 1/2 polegada. Conforme mostrado na Figura 7 (doravante "Tratamento I"), cada local de injeção recebe uma única injeção na pele de composição de colagenase administrada em três alíquotas de 0,1 mL para as Posições A, B e C, para um volume de injeção total de 0,3 mL. A profundidade da injeção é de 1/2 polegada, correspondendo ao comprimento da agulha de tratamento desde as pontas da agulha até a base da agulha, sem pressão para baixo. Em cada local de injeção, a agulha é posicionada a 90°, perpendicular à superfície da pele, e inserida e uma alíquota de 0,1 mL da composição de colagenase é injetada (Posição A). A agulha é ligeiramente retirada (mas não removida da pele) e reposicionada a 45° da vertical e acima do eixo longo da ondulação, e uma alíquota de 0,1 mL da composição de colagenase é injetada (Posição B, na direção da cabeça). A agulha é novamente ligeiramente retirada e reposicionada aproximadamente a 45° da vertical e abaixo do eixo longo da ondulação, e uma alíquota de 0,1 mL da composição de colagenase é injetada (Posição C, na direção dos pés). Após a injeção, o indivíduo permanece prono por 5 minutos.

[0008] Em um exemplo, o Tratamento I pode ser empregado para administrar 0,84 mg da composição de colagenase em 12 injeções subcutâneas por área de tratamento durante três sessões de tratamento, cada uma ocorrendo com pelo menos 21 dias de intervalo (janela de +/- 3 dias). Por exemplo, uma dose cumulativa de 5,04 mg pode ser administrada (ou seja, 3 visitas de tratamento x 0,84 mg por área de tratamento x 2 áreas de tratamento). Outras técnicas são explicadas na Descrição Detalhada.

4. Em uma quarta fase de tratamento, as avaliações pós-injeção são realizadas usando as escalas mencionadas acima e outros métodos de avaliação (por exemplo, análise de hematomas). A eficácia de um tratamento de colagenase em particular pode ser com base em uma única classificação do médico ou classificação do paciente, ou com base em um ponto final de composto que compreende a classificação do médico e a classificação do paciente onde a melhora é mostrada nas escalas para o mesmo indivíduo, ou seja, um nível pré-especificado de melhora é demonstrado tanto nas escalas do médico quanto do paciente.

[0009] A colagenase é injetada em uma quantidade de cerca de 0,01 mg a cerca de 20 mg em uma dose única ou em doses divididas e tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão)

• Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[0010] Conforme usado neste documento, os parâmetros cinéticos relevantes podem ser medidos usando os ensaios em cubeta ou ensaios em microplaca (por exemplo, o ensaio em cubeta de SRC, o ensaio em microplaca de SRC, o ensaio em cubeta de GPA e o ensaio em microplaca de GPA) conforme descrito neste documento.

[0011] Em algumas modalidades, a colagenase presente na composição compreende colagenase I e colagenase II em uma razão de aproximadamente 1:1. Outras razões de colagenase I e colagenase II podem ser empregadas tais como 0,1-2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75- 2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1. Cada uma das colagenase I e colagenase II pode ter uma pureza por área de pelo menos 80%, ou 85%, ou 90%, ou 91%, ou 92%, ou 93%, ou 94%, ou 95%, ou 96%, ou 97% ou 98% ou 99% ou 100% conforme medido por HPLC de fase reversa.

[0012] Em outra modalidade, a composição de colagenase compreende CCH (conforme definido na Descrição Detalhada) tendo uma razão de AUX I e AUX II de aproximadamente 1:1. Outras razões de AUX I e AUX II podem ser empregadas, tais como 0,1-2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1. Cada uma das AUX I e AUX II pode ter uma pureza por área de pelo menos 80%, ou 85%, ou 90%, ou 91%, ou 92%, ou 93%, ou 94%, ou 95%, ou 96%, ou 97% ou 98% ou 99% ou 100% conforme medido por HMLC de fase reversa.

[0013] Em outros exemplos, a composição de colagenase pode ser um líquido ou é reconstituída a partir de uma forma sólida liofilizada com um diluente. A dose da mistura é medida pela quantidade de colagenase presente sem importar o diluente e pode compreender cerca de 0,1 mg a cerca de 20 mg em uma ou mais injeções. Em outra modalidade, a dose administrada é de cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg, 5,04 mg, 5,88 mg, 6,72 mg, 7,56 mg ou 8,4 mg em uma ou mais injeções. Por exemplo, cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg ou 1,68 mg são administrados em cerca de 12 injeções divididas. O volume de composição de colagenase injetada pode variar de 0,01 mL a 3 mL por injeção, ou totalizar cerca de 0,2 mL a 150 mL por visita de tratamento (conforme definido na Descrição Detalhada). Em uma modalidade específica, as doses acima são para uma composição de colagenase que compreende CCH. Em outra modalidade, as doses acima são para uma composição de colagenase tendo uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA)

• Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HPLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[0014] Em outra modalidade, cerca de 0,84 mg de CCH é injetado em cerca de 12 injeções divididas igualmente por área de tratamento (cerca de 0,07 mg x 12 injeções = cerca de 0,84 mg). Em alguns casos, tal tratamento com 0,84 mg ocorre em uma visita de tratamento ou a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4 ou 5 visitas de tratamento. Em outros casos, mais de uma área de tratamento é injetada com 0,84 mg a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4 ou 5 visitas de tratamento. Tais injeções podem ser administradas em mais do que 5 visitas de tratamento.

[0015] Adicionalmente, conforme descrito na Descrição

Detalhada, as injeções de colagenase são eficazes no tratamento da celulite. Por exemplo, melhorias significativas na aparência da celulite são demonstradas pelas Pontuações de Profundidade de Depressão Hexsel, pontuações na escala Likert e por análise de ondulações.

[0016] Os efeitos colaterais mais comuns da injeção de CCH são reações no local de injeção, incluindo: hematoma, dor, nódulo, coceira, inchaço, endurecimento, descoloração e vermelhidão. O hematoma no local de injeção geralmente diminui ao longo das sessões de tratamento.

[0017] Modalidades adicionais da presente composição, escalas, métodos e semelhantes serão aparentes a partir da seguinte descrição, desenhos, exemplos e reivindicações. Como pode ser apreciado a partir da descrição anterior e seguinte, cada uma das características descritas neste documento, e cada uma e toda combinação de duas ou mais de tais características, está incluída no escopo da presente divulgação, contanto que as características incluídas em tal combinação não sejam mutuamente inconsistentes. Além disso, qualquer característica ou combinação de características pode ser especificamente excluída de qualquer modalidade ou aspecto. Aspectos e modalidades adicionais são apresentados na seguinte descrição e reivindicações, particularmente quando considerados em conjunto com os exemplos e desenhos que acompanham.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0018] O depósito de pedido ou patente contém pelo menos um desenho executado em cor. Cópias dessa patente ou publicação de pedido de patente com desenho(s) colorido(s) serão fornecidas pelo Escritório mediante solicitação e pagamento da taxa necessária.

[0019] As características anteriores das modalidades serão mais prontamente compreendidas por referência à seguinte descrição detalhada, tomada com referência aos desenhos que acompanham, nos quais:

[0020] A Figura 1 é uma ilustração em corte transversal de pele e de tecido subdérmico retratando os septos de colágeno.

[0021] A Figura 2 é uma listagem de sequência de aminoácidos para AUX-I (Seq. ID Nº 5).

[0022] A Figura 3 é uma listagem de sequência de aminoácidos para AUX-II (Seq. Nº ID 6).

[0023] A Figura 4 ilustra a escala de gravidade da celulite Hexsel (CSS) (B) profundidade de depressões.

[0024] A Figura 5 ilustra um exemplo da Gravidade da Celulite da Coxa - Paciente (TCS-P); escala de Gravidade da Celulite da Coxa - Médico (TCS-C).

[0025] A Figura 6 ilustra um exemplo de ondulação do indivíduo e marcações no local de injeção na nádega.

[0026] A Figura 7 retrata a técnica de injeção usada no Tratamento I.

[0027] A Figura 8 é um gráfico de barras do ponto final primário e ponto final secundário chave de respondentes compostos em estudos LIBERAÇÃO-1 e LIBERAÇÃO-2, definidos como pacientes com melhora de gravidade maior ou igual a 2 níveis ou maior ou igual a 1 nível a partir da linha de base tanto na classificação CR-PCSS quanto na PR-PCSS para a nádega alvo no Dia 71.

[0028] A Figura 9 é uma série de fotografias de resposta composta com 0,84 mg de CCH no Dia 71 em comparação com a linha de base. A Figura 9A demonstra uma melhora de 2 níveis tanto em CR-PCSS quanto PR-PCSS. A Figura 9B demonstra uma melhoria de 1 nível tanto em CR-PCSS quanto PR-PCSS.

[0029] A Figura 10 é um gráfico de barras do ponto final primário e ponto final secundário chave de respondentes compostos na nádega não alvo no Dia 71 (para propósitos de análise de dados). A resposta composta foi definida como pacientes com melhora de gravidade maior ou igual a 2 níveis ou maior ou igual a 1 nível a partir da linha de base tanto nas avaliações de CR-PCSS quanto PR-PCSS no Dia 71.

[0030] A Figura 11 é um gráfico de barras da frequência de respondentes para PR-PCSS e S-GAIS no Dia 71 na população com intenção de tratar (ITT).

[0031] A Figura 12 é um gráfico de barras da melhora média a partir da linha de base na pontuação total de PR-CIS no Dia 71 na população com intenção de tratar modificada (mITT). Os valores da linha de base foram usados para mulheres que não tiveram uma avaliação PR-CIS no dia 71.

[0032] A Figura 13 ilustra o registro da imagem de pré-marcação em um registro 3-D na grade (Pré-Marcação do Dia 1). A imagem é centralizada na grade no espaço 3-D. Usando a grade como uma referência, o técnico de análise de imagens (IAT) posiciona a imagem da linha de base para que o centro aproximado da imagem seja colocado na origem da grade. A coxa/nádega está voltada para frente na direção +z, a parte superior da coxa/nádega aponta na direção +y e a parte inferior da coxa/nádega aponta na direção -y.

[0033] A Figura 14 é um mapa de cor por distância para registro de imagem.

[0034] A Figura 15 ilustra uma ondulação primária da área de interesse (1). A imagem do Dia 1 - Pós-Marcação é usada como uma referência para localizar a ondulação alvo na imagem de do Dia 1 - Pré- Marcação. O técnico então traça a fronteira da ondulação primária na imagem rastreada de pré-marcação.

[0035] A Figura 16 é uma série de fotografias transpondo a ondulação primária da área de interesse. O tracejado de ondulação na imagem rastreada e pré-marcação é transposto para as imagens de acompanhamento do Dia 22, Dia 43 e Dia 71 com base na relação de rastreamento de superfície única de cada imagem de acompanhamento com a linha de base.

[0036] A Figura 17 retrata o contorno do tecido normal e tecido machucado nos Dias 4, 8 e 15 após injeção na nádega esquerda de um indivíduo.

[0037] A Figura 18(A) retrata o contorno do tecido normal e tecido machucado nos Dias 4, 8 e 15 após a injeção na nádega esquerda e fornece medições de cor L*, a* e b* nesses tecidos.

[0038] A Figura 18(B) retrata o contorno do tecido normal e tecido machucado nos Dias 4, 8 e 15 após a injeção na nádega esquerda. A cor média e os AEs para os tecidos normal e com hematomas são calculados com base nos valores de cor L*a*b*.

[0039] As Figuras 19(A) a 19(C) retratam uma análise de ondulação exemplar. A Figura 19(A) ilustra a observação e alteração da imagem a partir da pré-marcação do Dia 1 nos parâmetros de análise de ondulação. A Figura 19(B) ilustra o comprimento máximo e largura máxima da ondulação. A Figura 19(C) ilustra a área de superfície e o volume entre a base da ondulação e a superfície interpolada.

[0040] A Figura 20 é um gráfico de linha da classificação PR- PCSS média ao longo do tempo para a nádega alvo (população mITT) do Exemplo 3. A linha inferior é o tratamento CCH em relação ao placebo (linha superior), conforme descrito nos Exemplos 2 e 3.

[0041] A Figura 21 é um gráfico de linha da classificação PR- PCSS média ao longo do tempo para a nádega não alvo (população mITT) do Exemplo 3. A linha inferior é o tratamento CCH em relação ao placebo (linha superior), conforme descrito nos Exemplos 2 e 3.

[0042] A Figura 22 é um gráfico de linha da classificação CR- PCSS média ao longo do tempo para a nádega alvo (população mITT) do Exemplo 2. A linha inferior é o tratamento CCH em relação ao placebo (linha superior), conforme descrito nos Exemplos 2 e 3.

[0043] A Figura 23 é um gráfico de linha da pontuação média de classificação CR-PCSS ao longo do tempo para a nádega não alvo

(população mITT) do Exemplo 2. A linha inferior é o tratamento CCH em relação ao placebo (linha superior), conforme descrito nos Exemplos 2 e 3.

[0044] A Figura 24 representa respondentes compostos de dois níveis das nádegas alvo e não alvo no Dia 71 (População ITT).

[0045] A Figura 25 representa o projeto do estudo do Exemplo

5.

[0046] A Figura 26 representa Pontuações do Item PR-CIS médias a partir do Dia 1 ao Dia 71 na Fase 3 (302/-303) e do Dia 71 ao Dia 180 no Exemplo 5 (Estudo 304).

[0047] A Figura 27 representa a porcentagem de respondentes de SSCTA de tratados com CCH em relação aos tratados com placebo no Dia 180 em comparação com o Dia 71 na Fase 3.

[0048] A Figura 28 representa a disposição do indivíduo durante o Estudo 202. Nota a: Até o Estudo 201 cego de drogas ser quebrado pelo patrocinador, os indivíduos foram submetidos a até 4 visitas apenas de observação em períodos de 3 meses que começaram 90 dias após o Dia 1 do estudo duplo-cego (201) (ou seja, dentro de 20 dias ± 4 dias após a conclusão do estudo duplo-cego). A Fase de Observação foi definida dentro de cada área de tratamento tratada e foi definida como o período de tempo a partir da Triagem A à primeira data de tratamento no Estudo 202 ou o final do Estudo 202 se nenhum tratamento foi recebido no Estudo 202. Nota b: A categoria Outro incluiu tanto falhas de triagem, indivíduos recusando- se a participar da Fase de Tratamento, fechamento do local no Dia de Estudo 272 de inscrição de indivíduos ou indivíduos não aderentes às visitas de estudo. Nota c: Mediante a conclusão do tratamento (Fase de Tratamento, Dia 71), o indivíduo foi acompanhado em intervalos de 3 meses pelas Avaliações de Observação até o Dia 360. Para indivíduos tratados com CCH no Estudo 201, a área de tratamento tratada foi avaliada para Durabilidade de Longo Prazo, até o Dia 720.

[0049] Figura 29: representa a classificação PR-PCSS média ao longo do tempo em uma Área Tratada com CCH no Estudo 202.

[0050] A Figura 30 representa a classificação PR-PCSS média ao longo do tempo para indivíduos reexpostos (Tratados na Nádega e na Coxa) no Estudo 202.

[0051] A Figura 31 representa a classificação PR-PCSS média ao longo do tempo para indivíduos reexpostos tratados na nádega durante o primeiro e o segundo cursos de tratamento no Estudo 202.

[0052] A Figura 32 representa a classificação CR-PCSS média ao longo do tempo em uma área tratada com CCH no Estudo 202.

[0053] A Figura 33 representa a classificação CR-PCSS média ao longo do tempo para indivíduos reexpostos (tratados na nádega e na coxa) no Estudo 202.

[0054] A Figura 34 representa a classificação CR-PCSS média ao longo do tempo para indivíduos reexpostos tratados na nádega durante o primeiro e o segundo cursos de tratamento no Estudo 202.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0055] Os vários aspectos e modalidades serão agora totalmente descritos neste documento. Esses aspectos e modalidades podem, contudo, ser incorporados em muitas formas diferentes e não devem ser interpretados como limitantes; em vez disso, essas modalidades são fornecidas de modo que a divulgação seja minuciosa e completa e transmita totalmente o escopo da presente matéria para os versados na técnica. Todas as publicações, patentes e pedidos de patentes citados neste documento, sejam supra ou infra, são incorporados por meio deste instrumento por referência em sua totalidade. A. DEFINIÇÕES

[0056] A menos que definido de outra forma, todos os termos e frases usados neste documento incluem os significados que os termos e frases alcançaram na técnica, a menos que o contrário seja claramente indicado ou claramente aparente a partir do contexto no qual o termo ou frase é usado. Embora quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos neste documento possam ser usados na prática ou teste da presente invenção, métodos e materiais em particular são agora descritos.

[0057] A menos que afirmado de outra forma, o uso de valores numéricos individuais é afirmado como aproximação, como se os valores fossem precedidos pela palavra "cerca de" ou "aproximadamente". Semelhantemente, os valores numéricos nas várias variações especificadas neste pedido, a menos que expressamente indicado de outra forma, são afirmados como aproximações, como se os valores mínimo e máximo dentro das variações afirmadas fossem precedidos tanto pela palavra "cerca de" ou "aproximadamente". Desta maneira, variações acima e abaixo das variações afirmadas podem ser usadas para atingir substancialmente os mesmos resultados que os valores dentro das variações. Conforme usado neste documento, os termos "cerca de" e "aproximadamente" quando se referem a um valor numérico devem ter seus significados simples e comuns para uma pessoa versada na técnica à qual a matéria divulgada se refere mais proximamente ou a técnica relevante para a variação ou elemento em questão. A quantidade de ampliação da fronteira numérica estrita depende de muitos fatores. Por exemplo, alguns dos fatores que podem ser considerados incluem a criticidade do elemento e/ou o efeito que uma dada quantidade de variação terá sobre o desempenho da matéria reivindicada, bem como outras considerações conhecidas pelos versados na técnica. Conforme usado neste documento, o uso de diferentes quantidades de dígitos significativos para diferentes valores numéricos não se destina a limitar como o uso das palavras "cerca de" ou "aproximadamente" servirá para ampliar um valor numérico ou variação em particular. Assim, de modo geral, “cerca de” ou “aproximadamente” amplia o valor numérico. Além disso, a divulgação de variações é pretendida como uma variação contínua incluindo todos os valores entre os valores mínimo e máximo, mais a ampliação da variação proporcionado pelo uso do termo "cerca de" ou "aproximadamente". Consequentemente, a citação de variações de valores neste documento pretende meramente servir como um método abreviado de referir-se individualmente a cada valor separado se enquadrando na variação e cada valor separado é incorporado ao relatório descritivo como se fosse individualmente citado neste documento.

[0058] A "área afetada" ou "área de tratamento", conforme usado neste documento, significa uma área de celulite em um paciente humano que deve ser tratada ou que foi tratada com colagenase (definida abaixo). Isso pode incluir um quadrante (ou seja, nádega esquerda, nádega direita, coxa póstero-lateral esquerda, coxa póstero-lateral direita). A área afetada ou a área de tratamento não se limita às nádegas ou coxas. Em vez disso, qualquer área do corpo com celulite pode ser tratada como uma área de tratamento.

[0059] Os "Eventos Adversos" ou "EA", conforme usado neste documento, significam qualquer alteração desfavorável ou não pretendida na estrutura corporal (sinais), função corporal (sintomas), resultado laboratorial (por exemplo, química, ECG, raio-X etc.) ou piora de uma condição preexistente associada temporalmente ao uso do medicamento do estudo, seja ou não considerada se referir ao medicamento do estudo.

[0060] "Body-Q", conforme usado neste documento, é um instrumento de resultado relatado pelo paciente que está comercialmente disponível sob licença do Memorial Sloan Kettering Cancer Center. É com base nas percepções do paciente sobre o contorno corporal e/ou perda de peso. Este mede 3 domínios: aparência, qualidade de vida relacionada à saúde (HRQL) e experiência do paciente em relação ao cuidado com a saúde por meio de 18 escalas de funcionamento independente. O instrumento de resultado relatado pelo paciente é descrito em BODY-Q: User's Manual (BODY-Q: Manual do Usuário), Versão 1.0, julho de 2015,

Memorial Sloan Kettering Cancer Center, McMaster University e Stefan Cano. O BODY-Q inclui uma escala para medir a celulite. Vide https://www.mskcc.org/sites/default/files/node/174457/documents/body-q- users-guide.pdf (acessado em 3 de julho de 2019). Para a celulite, há 16 itens em escala tendo opções de resposta que variam de “nem um pouco” a “extremamente incomodado” ao longo do período da semana anterior e supondo um nível de grau de leitura de Flesch-Kincaid. O paciente é questionado: “Com a sua celulite em mente, na semana passada, quanto você se incomodou com:” [16 questões seguem, onde o paciente classifica a resposta como 1 - extremamente incomodado; 2-moderadamente incomodado; 3-um pouco incomodado; 4-nem um pouco incomodado]. A pontuação varia de 16 (extremamente incomodado) a 64 (nem um pouco).

[0061] Convencionalmente, o exame clínico de hematomas compreende um exame visual das áreas machucadas e circundantes em conjunto com uma avaliação do histórico médico, cirúrgico e de medicação concomitante do indivíduo. Os resultados dessa interpretação são subjetivos e afetados por vários fatores não relacionados, incluindo geometria de visualização, iluminação ambiente, cor da pele circundante não exposta e a experiência e acuidade visual do observador. A "Análise de Hematomas", conforme usado neste documento, significa a detecção de alteração visível na cor da pele conforme avaliada a partir das imagens das áreas tratadas com colagenase em um indivíduo usando a captura de imagem objetiva e metodologias de rastreamento divulgadas na Publicação de Patente U.S. Nº 2019/0035080 aplicada uniformemente para todas as imagens do indivíduo. Esta análise objetiva tem o potencial de auxiliar ou até mesmo substituir o exame visual e clínico do hematoma pelo prestador de cuidados de saúde, fornecendo a capacidade de quantificar, diferenciar e avaliar o hematoma tanto intra-indivíduo (dentro do mesmo indivíduo em momentos diferentes) quanto níveis inter-indivíduos (entre diferentes indivíduos). Esta análise utiliza o espaço de cores L*a*b* definido pela

Commission Internationale de l'Éclairage (CIE) modelado a partir de uma teoria de oponente de cor afirmando que duas cores não podem ser vermelho e verde ao mesmo tempo ou amarelo e azul ao mesmo tempo. Conforme mostrado abaixo, L* indica claridade/escuridão, a* é a coordenada vermelho/verde e b* é a coordenada amarelo/azul. Deltas para L* (ΔL*), a* (Δa*) e b* (Δb*) podem ser positivos (+) ou negativos (-). A diferença total, Delta E (ΔE*), contudo, é sempre positiva. • ΔL* (L* amostra menos L* padrão) = diferença em claridade e escuridão (+ = mais claro, - = mais escuro); um número baixo (0-50) indica escuro e um número alto (51-100) indica claro. • Δa* (a* amostra menos a* padrão) = diferença em vermelho e verde (+ = mais vermelho, - = mais verde) • Δb* (b* amostra menos b* padrão) = diferença em amarelo e azul (+ = mais amarelo, - = mais azul)

[0062] Todos os três valores são exigidos para descrever completamente a cor de um objeto (neste caso, o hematoma capturado na imagem da área tratada do indivíduo). A metodologia objetiva para a análise de imagem da área tratada com colagenase (imagens pré e pós- tratamento em momentos especificados pelo protocolo) com saídas de dados em valores L*a*b* permitem quantificação rápida, fácil, precisa, repetível e imparcial da cor da pele e qualquer alteração nela. Esta metodologia descarta a variabilidade inerente associada à estimativa visual subjetiva convencional das imagens. Um ΔE é calculado da seguinte forma: ΔE (Diferença de cor entre Machucado em relação ao Normal) = SQRT [(L*B-L*N) 2 + (A*B-A*N) 2 + (B*B- B*N) 2], onde L*B = Tecido Machucado L* L*N = Tecido Normal L* A*B = Tecido Machucado A* A*N = Tecido Normal A* B*B = Tecido Machucado B*

B*N = Tecido Normal B* A Figura 18(B) ilustra uma análise do hematoma de uma área de tratamento.

[0063] "CCH", conforme usado neste documento, significa o AUX-I (Seq. ID Nº 5 (Figura 2)) e AUX-II (Seq. Nº ID 6 (Figura 3)) mistura de colagenases em uma razão aproximada de 1:1 obtida pela fermentação de Clostridium histolyticum (também conhecido como Hathewaya histolytica). A CCH está disponível comercialmente como um pó liofilizado sob a marca registrada XIAFLEX®, que compreende a mistura de AUX-I e AUX-II com excipientes em particular, embora a CCH possa ser usada com outros excipientes adequados.

[0064] "Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Médico (CR-PCSS)", conforme usado neste documento, são as escalas fotonuméricas descritas no Pedido de Patente de PCT, PCT/US2018/020551 (publicado como WO2018/160905 em 7 de setembro de 2018) usadas por clínicos gerais/médicos e projetadas para avaliar a gravidade da celulite em 5 níveis.

[0065] Exceto caso fornecido de outra forma neste documento, "colagenase" significa qualquer um dos seguintes: (a) colagenase (incluindo mutantes) tendo atividade conforme definido por EC 3.4.24.3 (https://www.brenda-enzymes.org/enzyme.php?ecno=3.4.24.3 (acessado em 3 de julho de 2019); (b) colagenase produzida por fermentação de Closstridium histolyticum (também conhecido como Hathewaya histolytica); (c) CCH (conforme definido acima); (d) colagenase tendo pelo menos 50% de alinhamento de sequência com AUX-I conforme determinado por BLAST; (e) colagenase tendo pelo menos 50% de alinhamento de sequência com AUX-II conforme determinado por BLAST; (f) colagenase produzida por fermentação de outros organismos fonte (ou seja, diferente de Clostridium histolyticum), por exemplo, colagenase de mamífero, crustáceo, fúngica, bacteriana ou microbiana; (g) colagenase obtida por técnicas recombinantes; (h) colagenase com uma massa molecular de cerca de 65 kDa a cerca de 130 kDa; (i) colagenase designada como classe I ou classe II (também referida como colagenase I (ou 1), colagenase II (ou 2), colagenase Tipo I, colagenase Tipo 2); (j) misturas de colagenases I e II; (k) colagenase da cepa JCM 1403 (ATCC 19401) ou derivados da mesma; (l) colagenase da cepa ATCC 21000 ou derivados da mesma; (m) colagenase de ATCC 69334 ou derivados da mesma; (n) colagenase de C. perfringens; (o) colagenase de Vibrio alginolyticus; (p) colagenase de Streptomyces; (q) colagenase de Pseudomonas; (r) colagenase de Achromobacter iophagus; (s) colagenase descrita por Worthington Biochemical Corp. (www.worthington-biochem.com; "Product Highlights" ("Destaques do produto")); (t) colagenase descrita por Sigma-Aldrich (www.sigma-aldrich.com); (u) colagenase tendo uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA); (v) colagenase descrita por Nordmark Arzneimittel GmbH & Co. KG; (w) colagenase da cepa 004; ou (x) equivalentes ou misturas de qualquer um dos anteriores. Exemplos não limitativos de colagenases que podem ser usadas na divulgação neste documento são descritos na Patente U.S. Nº

7.811.560; 9.757.435; 9.744.138; e WO2012/125948.

[0066] A "análise de ondulação", conforme usado neste documento, significa uma análise de uma ou mais ondulações selecionadas em que parâmetros, tais como volume, comprimento, largura e área de superfície da ondulação são medidos. As medições podem ser realizadas por vários métodos conhecidos, tal como aqueles descritos em Eckhouse et al. WO 2018/116304 e WO 2018/116305 e da Cherry Imaging (www.cherryimaging.com) e Canfield Scientific, Inc. Ver também Salameh et al., “Novel Stereoscopic Optical System for Objectively Measuring Above- Surface Scar Volume — First-Time Quantification of Responses to Various Treatment Modalities” ("Novo Sistema Óptico Estereoscópico para Medir Objetivamente Volume de Cicatriz Acima da Superfície - Primeira Quantificação de Respostas a Várias Modalidades de Tratamento"), Dermatol. Surg. 00: 1-7 (2017); e Patente U.S. Nº 9.996.923. Tais medições de volume, comprimento, largura e área de superfície podem ser calculadas usando imagens digitais em escala de cinza 3-D (com característica de rotação dos eixos X e Y) e imagens digitais 3-D texturizadas e iluminadas (com característica de rotação X e Y), com um programa de computador que analisa tais imagens. Como um exemplo, para uma área de tratamento de nádega, podem ser tiradas imagens da nádega esquerda tratada e/ou nádega direita tratada para cada paciente antes e após o tratamento. Para uma área de tratamento da coxa, as imagens podem ser tiradas de cada uma das áreas tratadas da coxa a 0 graus, 45 graus e 90 graus antes e após o tratamento. Para uma área de tratamento da coxa, as imagens tiradas usando o método de Canfield Scientific podem ser tiradas de cada uma das áreas tratadas da coxa a 0 graus, 45 graus e 90 graus antes e após o tratamento.

[0067] A "durabilidade", conforme usado neste documento, significa o período de tempo no qual há uma persistência de um efeito do tratamento. Este período de tempo pode variar de cerca de 3 meses a cerca de 20 anos, ou cerca de 1 a 19 anos, ou cerca de 2 a 18 anos, ou cerca de 3 a 17 anos, ou cerca de 4 a 16 anos, ou cerca de 5 a 15 anos, ou cerca de 6 a 14 anos, ou cerca de 7 a 13 anos, ou cerca de 8 a 12 anos, ou cerca de 9 a 11 anos. O período pode ser de cerca de 6 meses, cerca de 1 ano, cerca de 2 anos, cerca de 3 anos, cerca de 4 anos, cerca de 5 anos, cerca de 10 anos, cerca de 15 anos ou cerca de 20 anos.

[0068] "Visita de Rescisão Antecipada", conforme usado neste documento, significa que para qualquer indivíduo que rescinde o estudo, sua visita final é considerada a Visita de Rescisão Antecipada e as avaliações que seriam normalmente feitas no Dia 71 para um indivíduo que concluiu o estudo seriam realizadas na Visita de Rescisão Antecipada.

[0069] A "escala de Fitzpatrick", conforme usado neste documento, significa que uma escala é usada para avaliar o tipo de pele de um indivíduo, conforme mostrado na Tabela 1. Tabela 1. Escala de Fitzpatrick Pele branca pálida, olhos azuis/castanhos, I Sempre queima, não bronzeia cabelos loiros/ruivos II Pele clara, olhos azuis Queima facilmente, bronzeia mal III Pele branca mais escura Bronzeado após queimadura inicial IV Pele morena clara Queima minimamente, bronzeia facilmente V Pele morena Raramente queima, bronzeia bastante VI Pele morena escura ou pele negra facilmente Nunca queima, sempre bronzeia bastante

[0070] "Escala de Gravidade da Celulite Hexsel" ou "Hexsel CSS" ou "Escala de Gravidade da Celulite (CSS)", conforme usado neste documento, significa a seguinte escala fotonumérica que avalia 5 características morfológicas chave da celulite (Tabela 2): Tabela 2. Escala de Gravidade da Celulite Hexsel A Número de depressões evidentes 0=sem depressões 1=pequena quantidade: 1-4 depressões são visíveis 2=Quantidade moderada: 5-9 depressões 3=grande quantidade: 10 ou mais depressões B Profundidade das depressões 0=sem depressões 1=depressões superficiais 2=depressões de profundidade média 3=depressões profundas

C Aparência morfológica das 0=sem áreas elevadas alterações da superfície da pele 1=aparência de casca de laranja 2=aparência de queijo cottage 3=aparência de colchão D Grau de frouxidão, flacidez ou 0=ausência de frouxidão, flacidez ou caimento da pele caimento da pele 1=aparência enrugada leve 2=aparência enrugada moderada 3=aparência enrugada grave E Escala de classificação por Estágio 0=Sem ondulações quando o indivíduo está Ntimberger e Müllera de pé e deitado. O teste de aperto revela “dobras e sulcos”, mas não há aparência semelhante a colchão. Estágio 1=Sem ondulações enquanto o indivíduo está em pé ou deitado, mas o teste de aperto revela a aparência semelhante a colchão. Estágio 2=Ondulação aparece espontaneamente quando em pé e não deitado. Estágio 3=Ondulação é espontaneamente positiva em pé e deitado.

[0071] A soma dos pontos resulta na seguinte classificação. Pontos Classificação da Celulite 1-5 Leve 6-10 Moderada 11-15 Grave Hexsel et al., J. Eur. Acad., Dermatol. Venereol. 2009; 23 (5): 523-

528. a. Niimberger e Muller, J. Dermatol. Surg. Oncol. 1978; 4 (3): 221-229. Os indivíduos foram avaliados na posição em pé com os músculos glúteos relaxados. Contudo, se o indivíduo não tivesse depressões evidentes, era solicitado que contraísse seus músculos glúteos ou era aplicado o teste de aperto (apertando a pele entre o polegar e o indicador) a fim de diferenciar as pontuações/notas de zero ou 1.

[0072] "Pontuação de Profundidade de Depressão Hexsel", conforme usado neste documento, significa uma avaliação de apenas (B) profundidade das depressões da Hexsel CSS (Figura 4): 0=sem depressões

1=depressões superficiais 2=depressões de profundidade média 3=depressões profundas

[0073] "Imagens", conforme usado neste documento, significa fotografias, ilustrações, desenhos, modelos, modelos 3-D, imagens geradas por computador, imagens de ressonância magnética e semelhantes.

[0074] "Pontuação da Escala Likert", conforme usado neste documento, significa a pontuação identificada por um avaliador cego independente (ou um paciente) da alteração na área tratada (nádega ou coxa) em cada visita pós-tratamento, comparando as fotografias (cor 2-D, cor 3-D e escala de cinza 3-D) da celulite do Dia 1 pré-tratamento (Linha de Base) com fotografias para a visita pós-tratamento. A pontuação é capturada na seguinte Escala Likert de 5 pontos: -1 0 1 2 3 Muito mais Pior Nenhuma alteração Melhorada Muito melhorada melhorada Melhora acentuada Melhora óbvia na A aparência da área na aparência da Resultado A aparência da aparência da área tratada é área tratada de cosmético ideal a área tratada é tratada antes do essencialmente a antes do partir do tratamento pior do que antes tratamento, mas mesma de antes do tratamento, mas das ondulações do tratamento tratamento tratamento não completamente tratadas adicional é indicado ideal

[0075] O termo "coxa não alvo" ou "nádega não alvo", conforme usado neste documento, significa a coxa ou nádega que não é selecionada para avaliar o(s) ponto(s) final(is) de eficácia primário(s). Essas áreas não alvo ainda podem receber tratamento e ser usadas para avaliar os pontos finais de eficácia secundários.

[0076] "Opcional" ou "opcionalmente" significa que o elemento, componente ou circunstância subsequentemente descrito pode ou não ocorrer, para que a descrição inclua instâncias onde o elemento,

componente ou circunstância ocorre e instâncias onde não ocorre.

[0077] A "Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS)", conforme usado neste documento, significa uma avaliação do impacto visual e emocional da celulite (feliz com a aparência da celulite, incomodado, constrangido, envergonhado, parecendo mais velho ou parecendo acima do peso ou fora de forma) usando uma pesquisa de 6 questões, com cada questão classificada em uma escala de classificação numérica de 0 (nem um pouco) a 10 (extremamente). Mais especificamente, a PR-CIS é um questionário estático de 6 itens que avalia o impacto visual e emocional da celulite (feliz com a aparência da celulite, incomodado, constrangido, envergonhado, parecendo mais velho ou parecendo acima do peso ou fora de forma); cada item é respondido pelo indivíduo em uma escala de classificação numérica (ou intervalo) de 11 níveis de 0 (nem um pouco) a 10 (extremamente) enquanto visualiza imagens digitais de suas nádegas ou coxas. Esta avaliação pode ser de todas as coxas e/ou nádegas juntas, em vez de cada área individual separadamente. Uma pontuação total PR-CIS pode ser derivada de 6 questões individuais: Questão 1 Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, quão feliz você está com a aparência de sua celulite? Questão 2 Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão incomodado(a) você está com a aparência de sua celulite? Questão 3 Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão constrangido(a) você se sente sobre a aparência de sua celulite? Questão 4 Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão envergonhado(a) você se sente sobre a aparência de sua celulite? Questão 5 Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão mais velho(a) você parece por causa de sua celulite? Questão 6 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão mais acima do peso ou fora de forma você parece por causa de sua celulite?

[0078] A "Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (Abreviada)" (PR-CIS Abreviada), conforme usado neste documento, significa uma avaliação do impacto visual e emocional da celulite (feliz com a aparência da celulite, incomodado, constrangido, envergonhado, ou parecendo acima do peso ou fora de forma) usando uma pesquisa de 5 questões, com cada questão classificada em uma escala de classificação numérica de 0 (nem um pouco) a 10 (extremamente). Mais especificamente, a PR-CIS Abreviada é um questionário estatístico de 5 itens que avalia o impacto visual e emocional da celulite (feliz com a aparência da celulite, incomodado, constrangido, envergonhado, ou parecendo acima do peso ou fora de forma); cada item é respondido pelo indivíduo em uma escala de classificação numérica (ou intervalo) de 11 níveis de 0 (nem um pouco) a 10 (extremamente) enquanto visualiza imagens digitais de suas nádegas ou coxas. Esta avaliação pode ser de todas as coxas e/ou nádegas juntas, em vez de cada área individual separadamente. Em um exemplo não limitativo, uma pontuação total da PR-CIS Abreviada pode ser derivada a partir de 5 questões individuais: Questão 1 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, quão feliz você está com a aparência de sua celulite? Questão 2 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão incomodado(a) você está com a aparência de sua celulite? Questão 3 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão constrangido(a) você se sente sobre a aparência de sua celulite? Questão 4 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão envergonhado(a) você se sente sobre a aparência de sua celulite? Questão 5 — Pensando sobre as áreas selecionadas para o tratamento, o quão mais acima do peso ou fora de forma você parece por causa de sua celulite?

[0079] Uma pontuação total da PR-CIS Abreviada pode ser derivada de outros conjuntos de 5 questões da PR-CIS completa.

[0080] "Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-PCSS)", conforme usado neste documento, são as escalas fotonuméricas descritas no Pedido de Patente de PCT, PCT/US2018/020551 (publicado como WO2018/160905 em 7 de setembro de 2018) usadas por pacientes e projetadas para avaliar a gravidade da celulite em 5 níveis.

[0081] "Fotonumérico", conforme usado neste documento, significa usar uma série de fotografias, ilustrações, desenhos, modelos, modelos 3-D, imagens geradas por computador, imagens de ressonância magnética, imagens e semelhantes, cada um atribuído a um nível diferente de gravidade da celulite em uma escala.

[0082] "Visita sequencial", conforme usado neste documento, significa duas ou mais visitas ao médico ou vezes em que as alterações da celulite são avaliadas por uma escala. O tempo entre as visitas pode ser de cerca de duas semanas, três semanas, cerca de um mês, cerca de dois meses, cerca de três meses, cerca de quatro meses, cerca de cinco meses, cerca de seis meses, cerca de um ano, cerca de dezoito meses, cerca de dois anos, cerca de três anos, cerca de 4 anos ou cerca de cinco anos ou mais.

[0083] "Eventos Adversos Sérios", conforme usado neste documento, significa um evento adverso que resulta em morte, com risco de vida imediato, resulta ou prolonga uma hospitalização de paciente internado, resulta em incapacidade permanente ou substancial, é uma anomalia congênita/defeito de nascença ou é considerado um evento médico importante.

[0084] "Estatisticamente significativo", conforme usado neste documento, significa dados estatísticos tendo um valor "P" geralmente inferior a 0,05. No contexto da presente divulgação, os ensaios clínicos são geralmente projetados para testar a superioridade de uma intervenção (por exemplo, neste caso, um tratamento) em comparação com um controle. Dado que os ensaios clínicos envolvem pessoas, cada uma das quais fisiologicamente diferente umas das outras, variações nos resultados ocorrem naturalmente. As estatísticas são, portanto, usadas para determinar se as diferenças observadas são causadas pelo acaso ou pela própria intervenção. As medidas de significância estatística quantificam a probabilidade de o resultado de um estudo ser devido ao acaso. O valor “P”, frequentemente usado para medir a significância estatística, é a probabilidade de que os resultados do estudo sejam devidos ao acaso em vez de a um efeito real do tratamento. Geralmente, o limiar convencional para o valor “P” ser considerado estatisticamente significativo é 0,05 ou 5%, embora possa alterar dependendo do projeto do estudo e dos resultados. Se o valor “P” for menor que 0,05, isso significa que a possibilidade de os resultados do estudo serem devidos ao acaso é menor que 5%. Se o valor “P” for maior que 0,05 (5%), qualquer diferença entre o grupo tratado e o grupo controle não é estatisticamente significativa - significando que a diferença provavelmente não pode ser atribuída ao tratamento, mas, ao invés, pode ser devida ao acaso.

[0085] Os termos "indivíduo" ou "paciente" são usados indistintamente neste documento e se referem a um humano ou outro mamífero.

[0086] "Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S- GAIS)" e "Escala de Melhora Estética Global do Investigador (I-GAIS)", conforme usado neste documento, significa as seguintes escalas para avaliar a gravidade e/ou melhora da celulite.

O indivíduo recebe a seguinte questão introdutória: "Como você classificaria a aparência da sua celulite tratada após o tratamento?" A classificação varia de -3 (Muito pior) a +3 (Muito mais melhorada) dependendo da resposta do indivíduo, conforme mostrado na Tabela 3. Tabela 3. Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S-GAIS) e Escala de Melhora Estética Global do Investigador (I-GAIS) Opção de Classificação Resposta Descrição (S-GAIS) Descrição (I-GAIS) +3 Muito mais Minha celulite tratada parece Resultado cosmético ideal a melhorada muito melhor. partir do tratamento das ondulações tratadas

+2 Muito melhorada Melhora acentuada na Minha celulite tratada parece aparência da área tratada muito melhor, mas tratamento de antes do tratamento, adicional melhoraria mas não completamente ligeiramente o resultado. ideal

+1 Melhorada Minha celulite tratada parece melhor, mas tratamento Melhora óbvia na aparência adicional é necessário. da área tratada antes do tratamento, mas tratamento adicional é indicado

0 Nenhuma Minha celulite tratada parece A aparência da área tratada alteração essencialmente a mesma que é essencialmente a mesma era originalmente. de antes do tratamento

-1 Pior Minha celulite tratada parece A aparência da área tratada pior do que originalmente. é pior do que antes do tratamento

-2 Bem pior Minha celulite tratada parece Piora acentuada na bem pior do que era aparência a partir da originalmente. condição inicial -3 Muito pior Minha celulite tratada parece Piora óbvia na aparência a muito pior do que era partir da condição inicial originalmente.

[0087] "Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite" (SSCT), conforme usado neste documento, significa uma classificação de satisfação do indivíduo que varia de -2 a +2. Como um exemplo, a Tabela 4 abaixo fornece tal avaliação para o tratamento da celulite na nádega. Os pacientes são questionados: “Hoje, quão satisfeito(a) você está com os resultados do tratamento da celulite que recebeu na área ou áreas específica(s) de suas nádegas que foram tratadas?” Então, eles(as) escolhem uma resposta/classificação conforme mostrado na Tabela 4. Tabela 4. Avaliação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite - Nádegas Classificação Descrição Estou muito satisfeito(a) com o tratamento da celulite nas +2 minhas nádegas. Estou satisfeito(a) com o tratamento da celulite nas minhas +1 nádegas. Não estou insatisfeito(a) nem satisfeito(a) com o tratamento 0 da celulite nas minhas nádegas. Estou insatisfeito(a) com o tratamento da celulite nas -1 minhas nádegas. Estou muito insatisfeito(a) com o tratamento da celulite nas -2 minhas nádegas.

[0088] A Tabela 5 fornece tal avaliação para o tratamento da celulite nas coxas. Os pacientes são questionados: “Hoje, quão satisfeito(a) você está com os resultados do tratamento da celulite que recebeu na área ou áreas específica(s) de suas coxas que foram tratadas?” Então, eles(as)

escolhem uma resposta/classificação conforme mostrado na Tabela 5. Tabela 5. Avaliação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite - Coxas Classificação Descrição Estou muito satisfeito(a) com o tratamento da celulite nas +2 minhas coxas. Estou satisfeito(a) com o tratamento da celulite nas minhas +1 coxas. Não estou insatisfeito(a) nem satisfeito(a) com o tratamento 0 da celulite nas minhas coxas. Estou insatisfeito(a) com o tratamento da celulite nas minhas -1 coxas. Estou muito insatisfeito(a) com o tratamento da celulite nas -2 minhas coxas.

[0089] A "Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS)", conforme usado neste documento, é uma escala usada por um indivíduo para avaliar sua satisfação com a aparência em associação à celulite usando números inteiros em uma escala de 7 níveis que varia de 0 (extremamente insatisfeito) a 6 (extremamente satisfeito), conforme mostrado na Tabela 6. Tabela 6. Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS) Classificação Opção de Resposta 6 Extremamente satisfeito(a) 5 Satisfeito(a) 4 Ligeiramente satisfeito(a) 3 Nem satisfeito(a) nem insatisfeito(a) 2 Ligeiramente insatisfeito(a) 1 Insatisfeito(a) 0 Extremamente insatisfeito(a)

[0090] O termo "coxa não alvo" ou "nádega não alvo", conforme usado neste documento, significa a coxa ou nádega que não é selecionada para avaliar o(s) ponto(s) final(is) de eficácia primário(s).

[0091] O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", conforme usado neste documento, se refere à quantidade de colagenase necessária para reduzir a gravidade da celulite em um paciente ou em uma população de pacientes estatisticamente significativa. A quantidade de composição de colagenase empregada será a quantidade necessária para entregar uma quantidade de colagenase necessária para atingir o resultado desejado. Na prática, isso irá variar dependendo da colagenase sendo injetada, da técnica de injeção e da atividade enzimática na área de tratamento.

[0092] O termo "curso de tratamento", conforme usado neste documento, compreende três sessões de tratamento (ou seja, cada visita ao médico para receber tratamento).

[0093] O termo "evento adverso emergente do tratamento" ou "TEAE", conforme usado neste documento, é qualquer condição que não estava presente antes do tratamento com a medicação do estudo, mas apareceu em seguida ao tratamento, estava presente no início do tratamento, mas piorou durante o tratamento, ou estava presente no início do tratamento mas solucionou e reapareceu enquanto o indivíduo estava em tratamento (não obstante a intensidade do AE quando o tratamento foi iniciado).

[0094] O termo "Gravidade da Celulite na Coxa - Paciente" ("TCS-P") e "Gravidade da Celulite na Coxa - Médico" ("TCS-C"), conforme usado neste documento, significa a escala fotonumérica mostrada na Figura 5 (ou uma escala substancialmente semelhante) usada por pacientes (TCS-P) ou médicos (TCS-C) para avaliar a gravidade da celulite na coxa, melhora e/ou satisfação do paciente e auxiliar na avaliação da eficácia da colagenase. O uso da escala relatado pelo paciente é referido como TCS-P; o uso da escala relatado pelo médico é referido como TCS-C.

[0095] O termo "visita de tratamento" ou "tratamento" ou "sessão de tratamento", conforme usado neste documento, significa uma ou mais injeções ou tratamentos para a(s) área(s) afetada(s) com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente ativo útil no tratamento da celulite em uma única visita ao consultório.

[0096] Os termos "validado", "validade" ou "validação", conforme usados neste documento, significam um processo pelo qual uma escala em particular é demonstrada como sendo precisa e confiável, incluindo a repetição de avaliações visuais para garantir que o mesmo resultado possa ser obtido de maneira consistente. A validação examina adicionalmente a precisão, exatidão e sensibilidade da escala para confirmar se as medições feitas por ela são confiáveis, reproduzíveis e robustas. B. INTRODUÇÃO

[0097] A presente divulgação se refere a métodos de tratamento da celulite, compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma ou mais colagenases a um indivíduo tendo a aparência de celulite, por meio do uso de certas técnicas de injeção descritas abaixo.

[0098] Geralmente, há quatro fases de tratamento: (1) O médico e o paciente realizam avaliações de pré-tratamento para determinar uma linha de base de pré-tratamento e o médico seleciona ondulações a serem tratadas; (2) o médico marca as ondulações a serem tratadas no nadir, se um nadir estiver presente; (3) o médico trata o paciente com colagenase; e (4) o médico e o paciente realizam avaliações pós-tratamento. Essas fases são detalhadas abaixo. As fases e as etapas dentro delas são opcionais e a ordem das etapas não pretendem ser limitantes, pois a ordem pode variar, mas ainda assim atingir resultados comparáveis. C. FASE 1 - AVALIAÇÕES DE PRÉ-TRATAMENTO

[0099] Em uma primeira fase dos métodos de tratamento da celulite descritos neste documento, o médico realiza uma seleção de ondulações de celulite a serem tratadas com base nos seguintes critérios: • As ondulações devem ser bem definidas e evidentes naturalmente quando o paciente está em pé em uma postura relaxada (posição em pé com os músculos glúteos relaxados), conforme confirmado por fotografias • As ondulações escolhidas devem ser aquelas que o médico acredita serem mais prováveis de melhorar a aparência estética de cada nádega, coxa ou outra área afetada inteira. • As fotos das áreas afetadas são tiradas antes do tratamento, quando o paciente está de pé em uma postura relaxada • Antes da injeção, uma avaliação é realizada, ou seja, o médico e/ou paciente avalia as fotografias independentemente e pontua o resultado usando uma ou mais das seguintes escalas ou métodos de avaliação: o Escala de Gravidade de Celulite Hexsel (Hexsel CSS) o Pontuação de Profundidade de Depressão Hexsel o Escala Likert o Análise de Ondulação o Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Médico (CR-PCSS) o Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-PCSS) o Escala de Melhora Estética Global do Investigador (I-GAIS) o Escala Global de Melhora Estética Global do Indivíduo (S- GAIS) o Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS) o Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS) o Satisfação do Indivíduo com Tratamento para Celulite (SSCT) o Gravidade da Celulite da Coxa - Paciente (TCS-P); Gravidade da Celulite da Coxa - Médico (TSC-C) o Body-Q o Escala de Fitzpatrick o Qualquer escala fotonumérica validada ou outra escala usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente (por exemplo, escala de Hexsel-Merz)

D. FASE 2 - MARCAÇÃO DAS ONDULAÇÕES A SEREM

TRATADAS

[00100] Em uma segunda fase dos tratamentos descritos neste documento, as ondulações a serem tratadas podem ser marcadas com ponto(s) pelo médico. Mais fotos podem ser tiradas. Vide, por exemplo, as Figuras 6 e 15. E. FASE 3 - INJEÇÕES DE COLAGENASE

[00101] Em uma terceira fase do tratamento, o médico trata o paciente com injeções de colagenase.

1. Tipos de Colagenases

[00102] As colagenases úteis na presente divulgação incluem qualquer uma das colagenases conforme definido acima. A título de fundamentações adicionais, as metaloproteinases de matriz (MMPs) podem ser compostas por colagenases que se enquadram na definição apresentada neste documento. Por exemplo, MMP-1 compreende colagenase 1; MMP-8 compreende colagenase 2/colagenase de neutrófilos; MMP-13 compreende colagenase 3; e MMP-18 compreende colagenases

4. Adicionalmente, as catepsinas podem ser classificadas como colagenases.

2. Cinética Enzimática de Colagenase

[00103] As colagenases úteis na presente divulgação também podem ser caracterizadas por sua cinética enzimática. Aqui, os valores cinéticos aproximados de uma ou mais colagenases eficazes para tratar a celulite incluem o seguinte: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA)

• 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) Vmax = taxa máxima KM = [Substrato] a 50% da V máx Kcat = moléculas de substrato clivadas por segundo 1/Kcat = Os microssegundos exigidos para clivar uma molécula de substrato.

[00104] Esses valores podem ser determinados experimentalmente usando os ensaios de microplaca descritos abaixo, mas com diferentes substratos e tempos. Outros ensaios e parâmetros podem ser empregados.

[00105] Esses valores refletem uma expressão quantitativa de comportamento enzimático com base na Equação de Michaelis-Menten:

[00106] Em que Vo é a taxa de reação (velocidade) a uma concentração de substrato [S], Vmax é a taxa máxima que pode ser observada e KM é a constante de Michaelis, que se correlaciona com a concentração de substrato que rende 50% de Vmax.

[00107] Em que k1, k-1 e k2 são constantes de taxa para as seguintes etapas:

[00108] Em que E é a enzima, S é o substrato, ES é o complexo enzima-substrato e P é o produto.

[00109] A constante catalítica Kcat se refere ao número de rotatividade, ou seja, quão rápido o complexo ES prossegue para E+P. Isso reflete o número de ciclos catalíticos que cada local ativo sofre por unidade de tempo.

[00110] Em certas modalidades, AUX-I e AUX-II têm as seguintes características: • AUX I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • AUX II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934 Suposições:

[00111] Kcat = Vmax/[AUX] = (nmoles de Substrato/nG AUX*min- 1 )/nG AUX

[00112] A eficiência catalítica (Kcat/KM) geralmente representa a capacidade geral da enzima de converter substrato em produto e reflete eventos tanto de ligação quanto catalíticos. Em outra modalidade, AUX-I e AUX-II compreendem as seguintes características.

AUX-I AUX-II (ensaio (ensaio SRC)* GPA)+ -1 Vmax, min 3,8 15,4 KM, mM 2,07X10-1 1,5 Kcat, seg-1 53 4.636 1/Kcat, 18.799 216 microssegundos Kcat/KM, mM-1 seg- 256.977 2.997 1 • Vmax = taxa máxima • KM = [Substrato] a 50% de Vmax • Kcat = moléculas de substrato clivadas por segundo • 1/Kcat = O tempo exigido para clivar uma molécula de substrato • Kcat/KM é frequentemente usado para representar a eficiência catalítica da enzima * Por ensaio de microplaca de SRC + Por ensaio de microplaca de GPA

3. Potência (Atividade Específica) de Colagenase(s)

[00113] Ensaios foram desenvolvidos e usados para determinar a atividade específica (potência) da colagenase. Tais ensaios são descritos nas subseções de a. a c. e caracterizam a colagenase por sua capacidade de converter substrato em produto dentro de um dado período de tempo com uma concentração de enzima predeterminada. Em certas modalidades não limitativas, esses ensaios são usados para determinar a potência de cada um dentre AUX-I e AUX-II e do produto da droga CCH combinada (razão de 1:1 de AUX-I e AUX-II). Os ensaios SRC (descritos abaixo) usam colágeno como substrato para a reação. Os ensaios SRC usam colágeno solúvel de rato (cauda) (SRC) como substrato e são usados para medir a atividade das colagenases do Tipo I, com as colagenases do Tipo II contribuindo com aproximadamente 20% da atividade observada de uma mistura de colagenase. O ensaio SRC é fluorométrico e utiliza fluorescamina para detectar os peptídeos produzidos pela digestão Tipo I de SRC. A reação é executada em pH 7,2 em tampão de ácido 4-(2- hidroxietil)-1-piperazinoetanossulfônico (HEPES) contendo íon cálcio divalente 15 mM por 2,5 h a 25 °C.

[00114] O ensaio de colágeno de tendão bovino (BTC) (descrito abaixo) é com base nos procedimentos de Mandl et al., Arch. Biochem. Biophys. 74: 465-475 (1958), conforme modificado por Keller and Mandl, Arch. Biochem. Biophys. 101: 81-88 (1963). Vide a/w Rosen, Arch. Biochem. Biophys. 67: 10-15 (1957). O ensaio BTC usa colágeno insolúvel de tendão bovino como substrato e mede tanto a atividade de Tipo I quanto de Tipo II (tal como colagenases AUX-I e II). O ensaio BTC é colorimétrico e utiliza ninidrina para detectar os peptídeos produzidos pela degradação de BTC Tipo I e Tipo II. Essa reação também é executada em pH 7,2, mas por 22 h a 37 °C em tampão tris(hidroximetil)aminometano (TRIS) contendo íon de cálcio divalente 10 mM.

[00115] O terceiro tipo de ensaio de colagenase, os ensaios GPA (descritos abaixo), utilizam um hexapeptídeo solúvel derivatizado (carbobenzoxi-GPGGPA) como substrato. O ensaio GPA é usado para medir principalmente a atividade do Tipo II, com o Tipo I contribuindo com aproximadamente 10% da atividade observada. A colagenase do Tipo II cliva o hexapeptídeo em dois tripeptídeos, um dos quais (GPA) tem um terminal amino livre que reage com a fluorescamina para fornecer um produto fluorescente. O ensaio GPA é executado em pH 7,2 em tampão HEPES contendo íon cálcio divalente 100 mM por 10 min a 25 °C.

[00116] Tantos os ensaios SRC quanto BTC degradam um substrato natural (colágeno), que se aproxima mais do que a injeção de colagenase foi projetada para fazer terapeuticamente. Os ensaios GPA têm a vantagem de utilizar um hexapeptídeo de pequeno peso molecular bem definido como substrato e dois tripeptídeos bem definidos são produzidos.

Os ensaios GPA produzem um sinal fluorescente e são bastante sensíveis. Finalmente, o ensaio GPA é passível de análise cinética de Michaelis- Menten porque usa um único substrato e condições de reação (10 minutos de incubação) que se aproximam das velocidades iniciais da enzima. O ensaio SRC é bem adequado para enzimas degradantes de colágeno com domínios de ligação ao colágeno, enquanto o ensaio GPA é bem adequado para enzimas degradantes de colágeno sem domínios de ligação ao colágeno, que são frequentemente referidas como gelatinases. a. MÉTODOS DE ENSAIO DE UNIDADE GPA E UNIDADES DE

ATIVIDADE ESPECÍFICA i. Potência de Colagenase conforme Medido pelo Ensaio (Cubeta) GPA

[00117] O ensaio GPA é usado principalmente para medir a potência de uma colagenase de classe II. A primeira etapa do ensaio envolve uma reação enzimática envolvendo a digestão do substrato carbobenzoxi-glicil-L-prolil-glicil-glicil-prolil-L-alanina (zGPGGPA) por uma amostra de colagenase em dois peptídeos: carbobenzoxi-glicil-L-prolil- glicina (zGPG) e glicil-prolil-L-alanina (GPA). A segunda etapa envolve a medição subsequente do GPA liberado com o derivado fluorogênico, fluorescamina. O ensaio segue a metodologia abaixo, mas um versado na técnica apreciará que certas modificações (por exemplo, concentrações e tempos de diluição) podem ser feitas, mas ainda realizar o propósito do ensaio.

[00118] A metodologia geral é a seguinte. Padrões de leucina são preparados. Uma amostra de colagenase é obtida e as soluções são preparadas para serem usadas na primeira etapa para a clivagem enzimática de zGPGGPA (doravante "substrato") pela colagenase. Após essa etapa, as amostras tratadas com colagenase (contendo o GPA liberado) e os padrões de leucina são tratados em temperatura ambiente por um período de tempo com fluorescamina, a fim de indicar de maneira fluorescente os grupos amino livres das moléculas de GPA e leucina geradas, respectivamente. A emissão de fluorescência de cada solução a 480 nm é medida em seguida à excitação a 392 nm. As inclinações resultantes das curvas de amostra de leucina e colagenase são então usadas para calcular as unidades de potência da seguinte forma: Potência (unidades de f-GPA/mg) = (MAmostra/MLeucina) x (DF/T) Onde: MAmostra = Inclinação da curva de potência da amostra de colagenase MLeucina = Inclinação da curva padrão de leucina DF = Fator de Diluição T = Tempo de reação

[00119] Detalhes adicionais e não limitativos acerca da metodologia de ensaio GPA são apresentados abaixo. Tampões e Reagentes

1. Tampão de f-Appel, pH 7,2 (HEPES 55 mM, acetato de cálcio 100 mM)

2. Solução Estoque de Trabalho de Leucina 1 mM

3. Borato 200 mM, pH 9,0

4. Solução de Fluorescamina 0,5 mM em Acetona

5. 2 mg/mL de substrato zGPGGPA em tampão de f-Appel Preparação da Solução

[00120] As soluções são preparadas da seguinte forma: Tampão de f-Appel: Dissolva 13,0 g de HEPES e 17,6 g de acetato de cálcio em aproximadamente 800 mL de água. Ajuste o pH para 7,2 com hidróxido de sódio e QS para 1L com água. Armazene a 2 a 8 graus C.

[00121] Solução Estoque de Leucina 10 mM: Dissolva 65,5 mg de leucina em 50 mL de água. A leucina deve ser pesada diretamente em um béquer de vidro de 100 mL (ou equivalente) sobre a balança. Pesar aproximadamente 65 mg (peso-alvo) de leucina no béquer. Com base no peso da leucina pesada, calcule a quantidade de água a adicionar ao béquer usando a equação abaixo. Adicione o volume calculado de água ao béquer e misture completamente para garantir que a leucina está totalmente dissolvida. Dispense em alíquotas de 1 mL. Armazene a uma temperatura menor ou igual a 20 graus C. V2(mL) = C2(mg) x V1 (50 mL) C1 (65,5 mg) Onde: C2 = massa de leucina pesada (mg) V1 = 50 (mL de água) C1 = 65,5 (mg de leucina) V2 = volume de água necessário para produzir uma solução estoque de 10 mM (mL)

[00122] Solução Estoque de Leucina 1 mM: Descongele um frasco de Solução Estoque de Leucina 10 mM e dilua para 1 mM combinando 150 μL com 1350 μL de água. Misture bem antes de usar.

[00123] 0,5 N HC1: Dilua HC1 a 0,5 N com água e misture bem. Armazene em temperatura ambiente. Alternativamente, pode ser usado HCl 0,5 N comercialmente disponível.

[00124] Borato 200 nM, pH 9,0: Dissolva 2,4 g de ácido bórico em aproximadamente 150 mL de água. Ajuste o pH para 9,0 usando hidróxido de sódio. QS a 200 mL com água e misture bem. Armazene a 2 a 8 graus C.

[00125] Solução de Fluorescamina 0,5 mM: Misture 15 mg de fluorescamina com 100 mL de acetona e agite para dissolver. Armazene em 2 a 8 graus C, protegido da luz.

[00126] Solução de Substrato (2 mg/mL zGPGGPA): Prepare o substrato a 2 mg/mL com tampão de f-Appel. Dissolva em um agitador/rotador mecânico, permitindo tempo suficiente para a dissolução completa (cerca de 15 minutos). Curva Padrão de Leucina

[00127] A curva padrão de leucina é preparada de acordo com a Tabela 7. Tabela 7. Preparação da curva padrão de leucina. Padrão L1 L2 L3 L4 L5 L6 Cone de Leucina 0 70 140 210 280 350 (μM) Água (μL) 500 430 360 290 220 150 N HCl 0.5 (μL) 500 500 500 500 500 500 Leucina 1 mM (μL) 0 70 140 210 280 350 “L1” significa amostra padrão de Leucina 1. 100 µL de cada Padrão de Leucina são então transferidos para tubos separados para detecção de fluorescamina. Preparação de Amostra de Colagenase

[00128] A amostra de colagenase é diluída para 0,01 mg/mL com Tampão de f-Appel em dois estágios e agitada gentilmente em vórtex para misturar. A seguir está um exemplo de esquema de diluição:

1. 100 μL x 1,0 mg/mL 1000 μL = 0,1 mg/mL

2. 100 μL x 0,1 mg/mL 1000 μL = 0,01 mg/mL Preparações em Branco

[00129] Os brancos são preparados combinando 45 µL da preparação diluída com 500 µL de ácido clorídrico 0,5 N para inativar a enzima. Adicione 455 µL de solução de substrato zGPGGPA e agite em vórtex para misturar completamente. Transfira 100 µL de cada branco para tubos separados para detecção de impurezas que podem reagir com fluorescamina. Curvas de Potência

[00130] Um conjunto de curvas de potência é preparado para cada amostra de colagenase da seguinte forma: Tubos Solução de Substrato 2 Tampão de f-Appel (μL) mg/mL

1-2 1 45 3-4 1 30 5-6 1 15

[00131] Aqueça os tubos contendo substrato e tampão em banho-maria a 25 graus C por um mínimo de 15 minutos. Etiquete um segundo conjunto de tubos e adicione 50 µL de ácido clorídrico 0,5 N a cada um. Adicione as preparações de amostra de colagenase diluída (0,01 mg/mL) aos tubos de acordo com a Tabela 8 para uma incubação de 10 minutos, misture e retorne ao banho-maria a 25 graus C. Inicie o período de incubação mediante a adição da primeira preparação ao substrato pré- aquecido. Tabela 8. Preparação de Amostra Preparação Tubos Amostra (μL) Curva de Potência 1-2 55 Curva de Potência 3-4 70 Curva de Potência 5-6 85

[00132] Remova as preparações do banho-maria com 1-2 minutos restando na incubação de 10 minutos e agite em vórtex gentilmente para misturar. Dez minutos após a adição da primeira preparação ao substrato, transfira 50 µL de cada tubo para os tubos contendo 50 µL de HCl 0,5 N. As preparações devem ser adicionadas diretamente ao ácido para extinguir a digestão. Agite em vórtex cada tubo para misturar bem após extinguir todas as preparações. Detecção

[00133] Adicione 400 µl de Tampão de Borato 200 mM e 500 µl de Solução de Fluorescamina 0,5 mM a todos os tubos de detecção contendo 100 µl de cada preparação (brancos, curvas de potência da amostra de colagenase e padrões de leucina). Agite completamente em vórtex para misturar. Deixe os tubos incubarem em temperatura ambiente por no mínimo 10 minutos. Configuração do Fluorômetro

[00134] Configure o fluorômetro com os seguintes parâmetros do instrumento e leia a fluorescência de cada preparação com 1 hora de derivatização. Parâmetro Configuração Comprimento de Onda de Excitação 392 nm Comprimento de Onda de Emissão 480 nm Integração 5,0 seg.

Fendas (Ex e Em) 5,0 nm (passagem de banda) Comprimento de Via 3 mm Cálculos

[00135] Delineie a concentração de cada padrão de leucina (eixo X) contra a resposta de fluorescência a 480 nm (eixo Y). Determine a inclinação (m) e o coeficiente de determinação (R2). Determine a fluorescência média de cada preparação da curva de potência. Prepare amostras de colagenase e curvas de potência de leucina delineando a concentração de cada preparação (eixo X) contra a resposta fluorescente média em 480 nm (eixo Y). Determine a inclinação (m) e o coeficiente de determinação (R2) para as curvas lineares resultantes. Determine a Potência da Amostra de Colagenase Potência (unidades de f-GPA/mg) = (MAmostra/MLeucina) x (DF/T)

[00136] Onde: MAmostra = Inclinação da curva de potência da amostra de colagenase MLeucina = Inclinação da curva padrão de leucina DF = Fator de Diluição (1100 μL/50 μL = 22) T = Tempo de reação (10 minutos)

ii. Ensaio de Microplaca de GPA para Determinação da Atividade de Colagenase de Classe II em uma Amostra de Colagenase

[00137] Este método é semelhante ao ensaio GPA acima, exceto que é realizado em uma microplaca. Semelhante ao ensaio acima, o ensaio de microplaca mede a atividade proteolítica de amostras de colagenase na clivagem enzimática do substrato carbenzoxi-glicil-L-prolil-glicil-glicil-L- propil-L-alanina (zGPGGPA) (doravante, "substrato"). O ensaio segue a metodologia abaixo, mas um versado na técnica apreciará que certas modificações (por exemplo, concentrações e tempos de diluição) podem ser feitas, mas ainda realizar o propósito do ensaio. Reagentes

1. Substrato de peptídeo (zGPGGPA) (Bachem M1260 ou equivalente)

2. Tripeptídeo GPA (Bachem H3615 ou equivalente)

3. Fluorescamina (Acros 191675000 ou equivalente)

4. Água Purificada (sistema Milli-Q-Plus 18,2 MΩ ou equivalente)

5. Tampão HEPES 1 M (Gibco 15630-080 ou equivalente)

6. Surfact-Amps 20™ (solução Tween a 10%) (Pierce Cat. #28320 ou equivalente)

7. Acetato de Cálcio 1 M (Ca(C2H3O2)2) (Emerald Biosciences Cat.#EBS-100-CAAC ou equivalente)

8. Ácido bórico (Sigma B7660 ou equivalente)

9. NaOH 2,5 N (J.T Baker 5666-02 ou equivalente)

10. Ácido Clorídrico 0,5 N (VWR 101223-134 ou equivalente)

11. Acetona (Sigma 270725 ou equivalente) Preparação de Soluções (i) Preparação de tampão de ensaio (HEPES 50 mM pH 7,1/0,05% Tween 20/5 mM (Ca(C2H3O2)2): Uma quantidade de 50 mL de HEPES 1 M é pipetada em 800 mL de água DI. 5 mL 1 M (Ca(C2H3O2)2) e 5 mL Surfact-Amps (10% Tween 20) são adicionados. O pH é verificado e ajustado para 7,1 ± 0,05, se necessário.

Uma quantidade suficiente de água é adicionada para ajustar o volume para 1 L e a solução é filtrada por meio de um filtro de 0,22 mícron.

Este tampão de ensaio pode ser armazenado em temperatura ambiente por até 3 meses. (ii) Preparação de NaOH 0,1 N: Uma quantidade de 2 mL de NaOH 2,5 N é adicionada a 48 mL de água DI.

Esta solução pode ser armazenada em temperatura ambiente por até 3 meses. (iii) Preparação de 4 mg (mL de solução estoque de tripeptídeo GPA: Uma quantidade de 400 mg (± 1 mg) de tripeptídeo GPA é dissolvida em 10 mL de NaOH 0,1 N e agitada em vórtex até estar totalmente dissolvida.

Uma quantidade suficiente de tampão de ensaio é adicionada para fazer o volume de 100 mL e a solução é dispensada em alíquotas de 0,5 mL e armazenada a -70 °C.

O estoque de tripeptídeo GPA de 4 mg/mL pode ser armazenado a -70 °C por até um ano. (iv) Preparação de 4 mg/mL (6,8 mM) de substrato zGPGGPA de peptídeo: Uma quantidade de 400 mg (+ 1 mg) do substrato zGPGGPA de peptídeo é dissolvida em 10 mL 0. Em NaOH, agitar em vórtex até estar totalmente dissolvido.

Uma quantidade suficiente de tampão de ensaio é adicionada para fazer o volume de 100 mL.

Esta solução pode ser armazenada a 4° C por até 3 meses. (v) Preparação de Ácido Bórico 120 mM pH 9,0: Uma quantidade de 7,4 g (± 0,5 g) do ácido bórico é dissolvida em 800 mL de água DI.

A solução é titulada com NaOH para pH 9,0 uma quantidade suficiente de água DI é adicionada para ajustar o volume para 1 litro.

Esta solução pode ser armazenada em temperatura ambiente por até 3 meses. (vi) Preparação de Fluorescamina 1 mM em Acetona: Uma quantidade de 28 ± 2 mg de Fluorescamina é dissolvida em 100 mL de acetona.

Esta solução precisava ser preparada recentemente e protegida da luz e da umidade.

Preparação do Padrão de Tripeptídeo GPA e Diluição em Série

[00138] Um padrão de tripeptídeo GPA 0,08 mg/mL (329 μM) é preparado fazendo uma diluição de 50 vezes do estoque de tripeptídeo GPA de 4 mg/mL em tampão de ensaio (por exemplo, 20 μL de tripeptídeo GPA de 4 mg/mL em 980 μL de tampão de ensaio). Na placa de ensaio, fileira A, 200 μL de padrão de tripeptídeo GPA 329 μM são pipetados para A1 e A7. Uma quantidade de 100 μL de tampão de ensaio é pipetada em A2 a A6 e A8 a A12.

[00139] Para a diluição em série do padrão de tripeptídeo GPA, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A1 para A2, misturada, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A2 para A3 e repetida até A5. Uma quantidade de 100 μL é retirada da cuba A5 para que seu volume final seja de 100 μL. A cuba A6 contém apenas tampão.

[00140] Para a segunda diluição em série do padrão de tripeptídeo GPA, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A7 para A8, misturada, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A8 para A9 e repetida até a cuba A11. Uma quantidade de 100 μL é retirada da cuba A1 para que seu volume final seja de 100 μL. A cuba A12 contém apenas tampão. Preparação de Amostras de Colagenase

[00141] Para amostras de colagenase (por exemplo, um produto da droga colagenase liofilizada), a amostra é deixada chegar à temperatura ambiente por pelo menos 10 minutos e reconstituída para formar uma solução estoque de 500 ng/mL. Diferentes concentrações podem ser usadas. Uma amostra de colagenase teste (T1 A) é preparada a partir da solução estoque diluindo com tampão de ensaio. O procedimento é repetido para preparar amostras de teste triplicadas (T1A, T1B, T1C). Discussão

[00142] Neste método, 50 μL de concentrações crescentes das amostras de teste de colagenase são misturados com 50 μL de substrato em excesso (concentração final de 2,0 mg/mL) em uma placa de 96 cubas.

Uma quantidade de 50 μL de tampão de ensaio é adicionada às fileiras C a G em uma placa de reação de polipropileno de 96 cubas com fundo em U. 150 μL de amostras de colagenase são pipetados na fileira B. Então, uma diluição em série de 1^1,5 é realizada usando uma pipeta multicanal, transferindo 100 μL de amostra de colagenase a partir da fileira B para a fileira C, misturando e repetindo o processo até a fileira G ser alcançada. Uma quantidade de 100 μL é removida e descartada da fileira G. A Tabela 9 contém as concentrações finais de colagenase após a adição de 50 μL de substrato à fileira B até a fileira H.

[00143] O Branco é preparado na fileira H pipetando 50 μL de tampão de ensaio para a fileira H. Esta fileira não contém enzima. Concentrações exemplares são mostradas na Tabela 9. Tabela 9. Concentrações Alvo de Ensaio Após Adição de Substrato Colagenase Fileira Diluição (ng/ml) A N/A N/A B Estoque 250 C 1/1.5 167 D 1/2.3 111 E 1/3.4 74 F 1/5.1 49 G 1/7.6 33 H-Branco N/A 0 Reação de Colagenase

[00144] O substrato zGPGGPA é clivado por colagenases de classe II em zGPG e GPA durante um tempo de incubação de 15 minutos em temperatura ambiente. A incubadora e a sonda de temperatura são ligadas (temperatura 22 ± 1 °C antes da adição de substrato às placas). Para as colunas 1 a 12 nas fileiras B a H, 50 μL de substrato de zGPGGPA de 4 mg/mL (6,8 mM) são adicionados coluna por coluna e, então, misturados. O tempo de início da reação começa após o substrato ser adicionado à primeira coluna. A placa é coberta e colocada na incubadora a 22 ± 1 °C por um tempo total de reação de 15 ± 1 minutos.

[00145] Após a incubação, a reação é extinta pela adição de ácido clorídrico e a quantidade de peptídeo GPA liberado é quantificada após a reação do terminal amino livre do peptídeo com o reagente fluorogênico, fluorescamina. Para extinguir a reação, 100 μL de 0,5 N HCl são adicionados a cada cuba da fileira A à fileira H, adicionados coluna por coluna e, então, misturados. O tempo de reação termina após o HCl ser adicionado à primeira coluna. Detecção

[00146] Uma quantidade de 195 μL de Borato 120 mM, pH 9,0 é adicionada a cada cuba de uma placa de leitura preta de polipropileno Microplate Greiner. 30 μL da mistura de reação extinta são transferidos da placa de reação para as cubas correspondentes da placa de leitura e bem misturados. Então, 75 μL de Fluorescamina 1 mM são adicionados a cada cuba da placa de leitura (usando uma bandeja de polipropileno para dispensar Fluorescamina/acetona) e misturados imediatamente após cada adição. A placa é lida dentro de 15 minutos após a adição de Fluorescamina com um leitor de placa de fluorescência Molecular Devices M2 usando as seguintes configurações: 380 nm de Excitação, 473 nm de Emissão, corte a 455 n, 6 leituras/cuba, meio PMT.

[00147] A concentração de GPA (µM) em relação a 473 nm de emissão e a concentração de colagenase (ng/mL) em relação a 473 nm de emissão em são delineados. Para cada delineamento, uma regressão linear é ajustada sem parâmetros fixos. Para amostras de teste de colagenase, os dados do ponto zero são excluídos do ajuste linear e todo o conjunto de dados triplicado para cada amostra é usado para gerar o delineamento. As inclinações para o padrão de tripeptídeo GPA e as amostras de colagenase são determinados. Determinação de Potência

[00148] A atividade específica da amostra de colagenase pode ser calculada da seguinte forma: Unidades de Ensaio de Microplaca de GPA = ((Inclinação de Amostra de Colagenase)/(Inclinação de Tripeptídeo GPA x tempo de incubação)) x

106.

[00149] A atividade específica da amostra de teste de colagenase é determinada a partir da inclinação do padrão de tripeptídeo GPA e calculada pelo programa de ajuste de curva. Usando o método de microplaca, diferentes concentrações de substrato e diferentes tempos podem ser usados para calcular a cinética enzimática de acordo com Michaelis-Menton. iii. Potência de Colagenase Medida pelos Ensaios GPA

[00150] As colagenases úteis na presente divulgação podem ter uma potência de cerca de 100.000 a cerca de 300.000 unidades de GPA/mg, ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg. Em outras modalidades, a potência pode ser cerca de 70.000 a cerca de

400.000 unidades de GPA/mg, ou cerca de 100.000 a cerca de 375.000 unidades de GPA/mg, ou cerca de 125.000 a cerca de 350.000 unidades de GPA/mg, ou cerca de 150.000 a cerca de 325.000 unidades de GPA/mg, ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades GPA/mg, ou cerca de

200.000 a cerca de 275.000 unidades GPA/mg. Alternativamente, a potência pode ser de cerca de 70.000 a cerca de 400.000 unidades de f- GPA/mg, ou cerca de 100.000 a cerca de 375.000 unidades de f-GPA/mg, ou cerca de 125.000 a cerca de 350.000 unidades de f-GPA/mg, ou cerca de 150.000 a cerca de 325.000 unidades de f-GPA/mg, ou cerca de

175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg, ou cerca de 230.000 a cerca de 430.000 unidades de f-GPA/mg, ou cerca de 200.000 a cerca de

275.000 unidades de f-GPA/mg. As colagenases também podem ter uma potência de cerca de 30.100 a 87.100, ou cerca de 43.000 a 67.000 Unidades de Ensaio de Microplaca de GPA. Os ensaios GPA acima podem ser empregados para analisar a atividade específica de qualquer colagenase. b. MÉTODOS DE ENSAIO DE UNIDADE DE SRC E UNIDADES

DE ATIVIDADE ESPECÍFICAS i. Potência de Colagenase conforme Medido pelo Ensaio (Cubeta) SRC

[00151] O ensaio SRC é usado principalmente para medir a potência de uma colagenase de classe I. A metodologia geral é a seguinte. Padrões de leucina e soluções de amostra de colagenase são preparados. A primeira etapa do ensaio envolve uma reação enzimática envolvendo a digestão do colágeno solúvel de tendão da cauda de rato (SRC) pela colagenase. A segunda etapa envolve a medição subsequente de fragmentos de peptídeos/aminoácidos liberados com o derivado fluorogênico de fluorescamina. O ensaio segue a metodologia abaixo, mas um versado na técnica apreciará que certas modificações (por exemplo, concentrações e tempos de diluição) podem ser feitas, mas ainda realizar o propósito do ensaio.

[00152] Tais amostras padrão de colagenase e leucina são tratadas com reagentes a fim de indicar o GPA gerado com fluorescamina. Os padrões de leucina e amostras de colagenase são deixados incubar em temperatura ambiente por 10 minutos antes de determinar a fluorescência de cada solução em comprimentos de onda de excitação e emissão de 392 e 480 nm, respectivamente. As inclinações resultantes das curvas de amostra de leucina e colagenase são então usadas para calcular as unidades de potência da seguinte forma: Potência (unidades de f-SRC/mg) = (MAmostra/MLeucina) x DF/T) x CF Onde: MAmostra = Inclinação da curva de potência da amostra de colagenase MLeucina = Inclinação da curva padrão de leucina DF = Fator de Diluição (1500 μL/100 mL = 15)

T = Tempo de reação (2,5 h x 60 min/1 h = 150 min) CF = Fator de conversão (1000 μg/1 mg = 1000)

[00153] Detalhes adicionais e não limitativos acerca da metodologia de ensaio SRC são apresentados abaixo. Tampões e Reagentes

1. Tampão de Ensaio F-TC, pH 7,2 (22g HEPES [ácido 4-(2- Hidroxietil)-l-perazinoetanossulfônico], 4,4 g de acetato de cálcio)

2. Tampão de Enzima F, pH 7,2

3. Borato 200 mM, pH 9,0

4. Solução Estoque de Leucina 10 mM

5. Solução Estoque de Trabalho de Leucina 1 mM

6. Solução de Fluorescamina 1 mM em Acetona

7. 2 mg/mL de Colágeno de Cauda de Rato em ácido acético 0,02N Preparação da Solução

[00154] As soluções são preparadas da seguinte forma: Tampão de Ensaio F-TC: Dissolva 22 g de HEPES e 4,4 g de acetato de cálcio em aproximadamente 900 mL de água. Ajuste o pH para 7,2 com hidróxido de sódio e QS para 1L com água. Armazene a 2 a 8 °C.

[00155] Tampão de Enzima F: Dilua o Tampão de Ensaio F-TC combinando 4 mL com 16 mL de água. Armazene a 2 a 8 °C.

[00156] Solução Estoque de Leucina 10 mM: Dissolva 65,5 mg de leucina em 50 mL de água. A leucina deve ser pesada diretamente em um béquer de vidro de 100 mL (ou equivalente) sobre a balança. Pesar aproximadamente 65 mg (peso-alvo) de leucina no béquer. Com base no peso da leucina pesada, calcule a quantidade de água a adicionar ao béquer usando a equação abaixo. Adicione o volume calculado de água ao béquer e misture completamente para garantir que a leucina está totalmente dissolvida. Dispense em alíquotas de 1mL. Armazene a uma temperatura menor ou igual a -20 °C.

V2(mL) = C2(mg) x V1 (50 mL) C1 (65,5 mg) Onde: C2 = massa de leucina pesada (mg) V1 = 50 (mL de água) C1 = 65,5 (mg de leucina) V2 = volume de água necessário para produzir uma solução estoque de 10 mM (mL)

[00157] Solução Estoque de Trabalho de Leucina 1 mM: Descongele um frasco de Solução Estoque de Leucina 10 mM e dilua para 1 mM combinando 150 μL com 1350 μL de água. Misture bem antes de usar.

[00158] 0,5 N HC1: Dilua HC1 a 0,5 N com água e misture bem. Armazene em temperatura ambiente. Alternativamente, pode ser usado HCl 0,5 N comercialmente disponível.

[00159] Ácido Acético 0,02 N: Combine 1 mL de Ácido Acetico 1 N com os 49 mL de água e misture bem. Armazene em temperatura ambiente.

[00160] Borato 200 nM, pH 9,0: Dissolva 2,4 g de ácido bórico em aproximadamente 150 mL de água. Ajuste o pH para 9,0 usando hidróxido de sódio. QS a 200 mL com água e misture bem. Armazene a 2 a 8 °C.

[00161] Solução de Fluorescamina 0,5 mM: Dissolva 15 mg de fluorescamina com 50 mL de acetona e agite para dissolver. Armazene a 2 a 8 °C, protegido da luz.

[00162] Solução de Substrato (2 mg/mL de Colágeno de Cauda de Rato): Dilua o colágeno de cauda de rato de meia para 2 mg/mL com ácido acético 0,02 N. Armazene a 2 a 8 °C. Curva Padrão de Leucina

[00163] A curva padrão de leucina é preparada de acordo com a Tabela 10.

Tabela 10. Preparação da curva padrão de leucina. Reagente L1 L2 L3 L4 L5 L6 Cone de 0 70 140 210 280 350 Leucina. (pM) Água (μL) 1000 930 860 790 720 650 Leucina 1 mM 0 70 140 210 280 350 (μL)

[00164] 100 µL de cada Padrão de Leucina são então transferidos para tubos de centrífugas separados para detecção de fluorescamina. Amostra de Colagenase e Preparação de Brancos

[00165] A amostra é diluída para 0,01 mg/mL com Tampão de Enzima F em dois estágios, agitada gentilmente em vórtex para misturar. A seguir está um exemplo de esquema de diluição:

1. 100 μL x 1,0 mg/mL → 1000 μL = 0,1 mg/mL.

2. 100 μL x 0,1 mg/mL → 1000 μL = 0,01 mg/mL

[00166] Mantenha as amostras diluídas em temperatura ambiente até o uso.

[00167] Os Brancos são preparados de acordo com a Tabela 11, primeiro combinando a amostra e ácido clorídrico 0,5 N para inativar a enzima antes da adição de tampões e substratos.

[00168] Amostras de colagenase nos tubos etiquetados de acordo com a Tabela 11. Os tubos 1, 2, 4 e 6 são preparados a partir de uma preparação e os tubos 3, 5 e 7 a partir da preparação duplicada. Tabela 11. Preparações de Amostras de Branco e Colagenase Tampão Tampão RTC 0,5 N HCl de F- Amostra Preparação Tubo(s) de F-TC 2mg/mL (μM) Enzima (μL) (μL) (μt) (μL) Branco 1 750 137,5 375 187,5 50,0

Curva de 2-3 - 167,5 375 187,5 20,0 4-5 - 152,5 375 187,5 35,0 Potência 6-7 - 137,5 375 187,5 50,0

[00169] Os tubos são tampados e agitados gentilmente em vórtex para misturar. As preparações de curva de potência são incubadas em banho-maria a 25 °C ± 3 °C por 2,5 horas. No final da incubação, os tubos de curva de potência são removidos do banho-maria. 750 μL de 0,5 N HCl são adicionados a cada preparação e agitados em vórtex para misturar completamente. As preparações podem ser armazenadas a 2 a 8 °C por até 22 horas antes da detecção. Configuração de Detecção/Fluorômetro

[00170] Os padrões de leucina são preparados conforme descrito acima.

[00171] Configure o espectrômetro de luminescência com os seguintes parâmetros do instrumento e leia a fluorescência de cada preparação com 1 hora de derivatização. Parâmetro Configuração Comprimento de Onda de Excitação 392 nm Comprimento de Onda de Emissão 480 nm Integração 5,0 seg.

Fendas (Ex e Em) 5,0 nm (passagem de banda) Comprimento de Via 3 mm Cálculos

[00172] Delineie a concentração de cada padrão de leucina (eixo X) contra a resposta de fluorescência a 480 nm (eixo Y). Determine a inclinação (m) e o coeficiente de determinação (R2). Não force até zero. Determine a fluorescência média de cada preparação duplicada. Calcule a fluorescência líquida de cada preparação de amostra de colagenase. F(net) = Amostra de Colagenase Média (EM480) – Branco (EM480)

[00173] Delineie a quantidade da amostra de colagenase em cada preparação (eixo X) contra a fluorescência líquida (eixo Y). Determine as inclinações (m) e o coeficiente de determinação (R2). Não force até zero. Determine a Potência da Amostra de Colagenase Potência (unidades de f-GPA/mg) = (MAmostra /MLeucina) x (DF/T) x CF Onde: MAmostra = Inclinação da curva de potência da amostra de colagenase MLeucina = Inclinação da curva padrão de leucina DF = Fator de Diluição (1500 μL/100 mL = 15) T = Tempo de reação (2,5 h x 60 min/1 h = 150 min) CF = Fator de conversão (1000 μg/1 mg = 1000)

[00174] O ensaio SRC acima pode ser empregado para analisar a atividade específica de qualquer colagenase. ii. Ensaio de Microplaca de GPA para Determinação da Atividade de Colagenase de Classe I em uma Amostra de Colagenase

[00175] Este método é semelhante ao ensaio SRC acima, exceto que é realizado em uma microplaca. Semelhante ao ensaio SRC acima, o ensaio de microplaca mede a atividade de colagenase em direção ao substrato solúvel de cauda de rato (SRC) (doravante, "substrato"). O ensaio segue a metodologia abaixo, mas um versado na técnica apreciará que certas modificações ainda podem ser feitas e ainda realizar o propósito do ensaio. Reagentes

1. Substrato Solúvel de Colágeno de Rato (BD Biosciences 354236)

2. Tripeptídeo GPA (Bachem H3615 ou equivalente)

3. Fluorescamina (Acros 191675000 ou equivalente)

4. Água Purificada (sistema Miliporo, Milli-Q-Plus 18,2 MΩ ou equivalente)

5. Tampão HEPES 1 M (Gibco 15630-080 ou equivalente)

6. Acetato de Cálcio 1 M (Ca(2H3O2)2) (Emerald Biosciences EBS- 100-CAAC ou equivalente)

7. Surfact-Amps 20™ (solução Tween a 10%) (Pierce Cat. #28320 ou equivalente)

8. Ácido acético 1,0 N (Sigma 318590 ou equivalente)

9. Ácido Clorídrico 0,5 N (VWR 101223-134 ou equivalente)

10. Ácido bórico (Sigma B7660 ou equivalente)

11. Hidróxido de sódio 2,5 N (J.T Baker 5666-02 ou equivalente)

12. Acetona (Sigma 270725 ou equivalente) Preparação de Soluções (i) Preparação de tampão de ensaio (HEPES 50 mM pH 7,1/0,05% Tween 20/5 mM (Ca(C2H3O2)2): Uma quantidade de 50 mL de HEPES 1 M é pipetada em 800 mL de água DI. 5 mL 1 M (Ca(C2H3O2)2) e 5 mL Surfact-Amps (10% Tween 20) são adicionados. O pH é verificado e ajustado para 7,1 ± 0,1, se necessário. Uma quantidade suficiente de água é adicionada para ajustar o volume para 1 L e a solução é filtrada por meio de um filtro de 0,22 mícron. Este tampão de ensaio pode ser armazenado em temperatura ambiente por até 3 meses. (ii) Preparação de NaOH 0,1 N: Uma quantidade de 2 mL de NaOH 2,5 N é adicionada a 48 mL de água DI. Esta solução pode ser armazenada em temperatura ambiente por até 3 meses. (iii) Preparação de 4 mg/mL de estoque de tripeptídeo GPA: Uma quantidade de 400 mg (± 1 mg) de tripeptídeo GPA é dissolvida em 10 mL de NaOH 0,1 N e agitada em vórtex até estar totalmente dissolvida. Uma quantidade suficiente de tampão de ensaio é adicionada para fazer o volume de 100 mL e a solução é dispensada em alíquotas de 0,5 mL e armazenada a -70 °C. O estoque de tripeptídeo GPA de 4 mg/mL pode ser armazenado a -70 °C por até um ano. (iv) Preparação de ácido acético 0,02 N: Uma quantidade de 1 mL de ácido acético 1,0 N é adicionada a 40 mL de água purificada. Uma quantidade suficiente de água purificada é adicionada para ajustar o volume a 50 mL. Esta solução pode ser armazenada em temperatura ambiente por até 1 ano. (v) Preparação de solução estoque de substrato SRC de 2 mg/mL: Uma quantidade de 23,3 mL de ácido acético 0,02 N é adicionada diretamente ao frasco no qual o substrato é provido (provido em um exemplo não limitativo como 100 mg SRC a 3,75 mg/mL). Outras concentrações do substrato SRC podem ser usadas. O cálculo está abaixo: 100 mg ÷ 3,75mg/mL = 26,7 mL; Volume total (mL) = (3,75mg/mL x 26,7mL)/2mg/mL; Volume total (50,0mL) -26,7 mL = 23,3 mL

[00176] As soluções são completamente misturadas por inversão e podem ser armazenadas a 2 a 8 °C por até 3 meses. (vi) Preparação de 0,6 mg/mL de solução de trabalho de substrato SRC: Uma quantidade de 4,2 mL de tampão de ensaio é adicionada a um tubo cônico de 15 mL. Então, 1,8 mL de 2 mg/mL de solução estoque de substrato SRC é adicionado e a solução é misturada por inversão. Esta solução deve ser preparada imediatamente antes da adição à placa. (vii) Preparação de Ácido Bórico 120 mM pH 9,0: Uma quantidade de 7,4 g (± 0,5 g) do ácido bórico é dissolvida em 800 mL de água DI. A solução é titulada com NaOH para pH 9,0 e uma quantidade suficiente de água DI é adicionada para ajustar o volume para 1 L. Esta solução pode ser armazenada em temperatura ambiente por até 3 meses. (viii) Preparação de Fluorescamina 1 mM em Acetona: Uma quantidade de 28 ± 2 mg de Fluorescamina é dissolvida em 100 mL de acetona. Esta solução precisava ser preparada recentemente e protegida da luz e da umidade. Preparação do Padrão de Tripeptídeo GPA e Diluição em Série

[00177] Um padrão de tripeptídeo GPA 0,08 mg/mL (329 μM) é preparado fazendo uma diluição de 50 vezes do estoque de tripeptídeo

GPA de 4 mg/mL em tampão de ensaio (por exemplo, 20 μL de GPA 4 mg/mL em 980 μL de tampão de ensaio). Na placa de ensaio, fileira A, 200 μL de padrão de tripeptídeo GPA 329 μM são pipetados para A1 e A7. Uma quantidade de 100 μL de tampão de ensaio é pipetada em A2 a A6 e A8 a A12.

[00178] Para a diluição em série do padrão de tripeptídeo GPA, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A1 para A2, misturada, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A2 para A3 e repetida até A5. Uma quantidade de 100 μL é retirada da cuba A5 para que seu volume final seja de 100 μL. A cuba A6 contém apenas tampão.

[00179] Para a segunda diluição em série do padrão de tripeptídeo GPA, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A7 para A8, misturada, uma quantidade de 100 μL é transferida a partir de A8 para A9 e repetida até A11. Uma quantidade de 100 μL é retirada da cuba A1 para que seu volume final seja de 100 μL. A cuba A12 contém apenas tampão. Preparação de Amostras de Teste de Colagenase

[00180] Para amostras de colagenase (por exemplo, um produto da droga colagenase liofilizada), a amostra é deixada chegar à temperatura ambiente por pelo menos 10 minutos e reconstituída para formar uma solução estoque de 3,0 μg/mL. Diferentes concentrações podem ser usadas. Uma amostra de colagenase teste (T1A) é preparada a partir da solução estoque por diluição com tampão de ensaio. O procedimento é repetido para preparar amostras de teste triplicadas (T1A, T1B, T1C). Discussão

[00181] Neste método, 50 μL de concentrações crescentes das amostras de teste de colagenase são misturadas com 50 μL de substrato em excesso (concentração final de 2,0 mg/mL) em uma placa de 96 cubas. Uma quantidade de 50 μL de tampão de ensaio é adicionada às fileiras C a G em uma placa de reação de polipropileno de 96 cubas com fundo em U.

150 μL de amostras de colagenase são pipetados na fileira B. Então, uma diluição em série de 1/1,5 é realizada usando uma pipeta multicanal, transferindo 100 μL de amostra de colagenase a partir da fileira B para a fileira C, misturando e repetindo o processo até a fileira G ser alcançada. Uma quantidade de 100 μL é removida e descartada a partir da fileira G. O Branco é preparado na fileira H pipetando 50 μL de tampão de ensaio para a fileira H. Esta fileira não contém enzima. A Tabela 12 contém as concentrações finais de colagenase após a adição de 50 μL de substrato à fileira B até a fileira H. Tabela 12. Concentrações Alvo de Ensaio Após Adição de Substrato Colagenase Fileira Diluição (ng/ml) A N/A N/A B Estoque 1500 C 1/1,5 100 D 1/2,3 667 E 1/3,4 444 F 1/5,1 296 G 1/7,6 198 H-Branco N/A 0 Reação de Colagenase

[00182] A incubadora e a sonda de temperatura são ligadas (temperatura 22 ± 1 °C antes da adição de substrato às placas). Uma quantidade de 50 μL de substrato SRC de 0,6 mg.mL SRC é adicionada a cada cuba a partir da fileira B até a fileira H, adicionada coluna a coluna, então misturada. O tempo de início da reação começa após o substrato ser adicionado à primeira coluna. A placa é coberta e colocada na incubadora a 22 ± 1 °C por um tempo total de reação de 45 ± 5 minutos. Para extinguir a reação, 100 μL de 0,5 N HCl são adicionados a cada cuba da placa de diluição, coluna a coluna e misturados. O tempo de reação termina após o HCl ser adicionado à primeira coluna. Detecção

[00183] Uma quantidade de 195 μL de Borato 120 mM, pH 9,0 é adicionada a cada cuba de uma placa de leitura preta de polipropileno Microplate Greiner. 30 μL da mistura de reação extinta são transferidos a partir da placa de reação para as cubas correspondentes da placa de leitura e bem misturados. Então, 75 μL de Fluorescamina 1 mM são adicionados a cada cuba da placa de leitura (usando uma bandeja de polipropileno para dispensar Fluorescamina/acetona) e misturados imediatamente após cada adição. A placa é lida dentro de 15 minutos após a adição de Fluorescamina com um leitor de placa de fluorescência Molecular Devices M2 usando as seguintes configurações: 380 nm de Excitação, 473 nm de Emissão, corte a 455 n, 6 leituras/cuba, meio PMT.

[00184] A concentração de GPA (µM) em relação a 473 nm de emissão e a concentração de colagenase (ng/mL) em relação a 473 nm de emissão em são delineados. Para cada delineamento, uma regressão linear é ajustada sem parâmetros fixos. Para amostras de teste de colagenase, os dados do ponto zero são excluídos do ajuste linear e todo o conjunto de dados triplicado para cada amostra é usado para gerar o delineamento. As inclinações para o padrão de tripeptídeo GPA e as amostras de colagenase são determinados. Atividade Específica e Determinação de Potência Relativa

[00185] A atividade específica da amostra de colagenase pode ser calculada da seguinte forma: Unidades de Ensaio de Microplaca de SRC = ((Inclinação de Amostra de Colagenase) / (Inclinação de Tripeptídeo GPA x tempo de incubação)) x 106

[00186] A atividade específica da amostra de teste de colagenase é determinada a partir da inclinação do padrão de tripeptídeo GPA e calculada pelo programa de ajuste de curva. Usando o método de microplaca, diferentes concentrações de substrato e diferentes tempos podem ser usados para calcular a cinética enzimática de acordo com Michaelis-Menton. iii. Potência de Colagenase conforme Medido por Ensaios GPA

[00187] As colagenases úteis na presente divulgação podem ter uma potência de cerca de 500 a cerca de 15.000 unidades de SRC/mg. Em certas modalidades, a potência é de cerca de 500 a cerca de 12.500 unidades de SRC/mg, ou cerca de 700 a cerca de 10.000 unidades de SRC/mg, ou cerca de 1.000 a cerca de 7.500 unidades de SRC/mg, ou

1.500 a cerca de 6.000 unidades de SRC/mg, ou cerca de 2.500 a cerca de

5.000 unidades de SRC/mg. Alternativamente, a potência pode ser de cerca de 5.000 a cerca de 35.000 unidades de f-SRC/mg, ou cerca de 10.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg, ou cerca de 13.000 a cerca de

23.000 unidades de f-SRC/mg, ou cerca de 15.000 a cerca de 25.000 unidades de f-SRC/mg. As colagenases também podem ter uma potência de cerca de 980 a 3.510, ou cerca de 1.400 a 2.700 Unidades de Ensaio de Microplaca de SRC. c. POTÊNCIA DE COLAGENASE EM ENSAIO DE UNIDADE DE

BTC

[00188] O Ensaio de Colágeno do Tendão Bovino para Colagenase é com base no procedimento de Mandl et al. (1958), modificado por Keller e Mandl (1963). Uma vez que o colágeno do tendão bovino é um substrato insolúvel, é importante que ele seja finamente dividido. A tripsina é executada como um controle, a fim de compensar a presença de colágeno desnaturado ou outras impurezas proteicas. O ensaio é executado na presença de íons de cálcio, que são exigidos para a atividade de colagenase. O número de peptídeos solubilizados é determinado reagindo o grupo amino terminal N dos peptídeos com ninidrina e medindo de maneira colorimétrica a quantidade de adjunto formado (Rosen 1957).

[00189] O propósito deste procedimento é testar a atividade específica da enzima de colagenase usando um substrato de colágeno. Reagentes e Soluções

1. Substrato de Colágeno (colágeno)

2. Água Deionizada (água)

3. Tampão de Ensaio Tris

4. Solução Estoque de Tripsina

5. 0,5 M HCl

6. Solução de Ensaio Padrão de Leucina (leucina 1 mM)

7. Tampão Rosen

8. Ninidrina 3%

9. Isopropanol 50% Incubação

[00190] Configure e etiquete os tubos de reação da seguinte forma: três tubos para os controles de tripsina, seis tubos para a Solução de Referência e seis tubos para cada amostra em teste. Etiquete e destampe cada tubo. Pese 10 ± 1 mg de colágeno na ordem da Tabela 13 e coloque o colágeno pesado em cada tubo de reação. Tabela 13. Ordem de Pesagem e Números do Tubo de Reação Ordem de Pesagem N° do Tubo de Reação 1 1 2 4 3 6 4 8 5 10 6 12 7 14 8 16 9 18 10 20

[00191] Para as amostras em teste, a quantidade de enzima deve conter uma atividade entre 1,6 e 5,7 nmol leu eq/min por tubo de reação (ACT). As amostras não dissolvidas devem ser dissolvidas primeiro no tampão de ensaio Tris antes de serem usadas no ensaio. A concentração (antes de adicionar aos tubos de reação) não deve ser menos que 0,0065 mg/mL.

[00192] Configure os tubos de reação de acordo com a Tabela 14 para ter um padrão de matriz. A tabela a seguir supõe 2 amostras em teste. Se mais ou menos amostras forem executadas, ajuste o número de tubos de reação, mas mantenha o padrão. Onde os volumes são constantes, eles estão listados na Tabela 14. Tabela 14. O Padrão de Matriz N° do S1 S3 S4 Tubo de Tampão de Solução Amostras* 1 Amostras*2 Tripsina Reação Tris Padrão 1 1960 μL 40 μL 2 1960 μL 40 μL 3 1960 μL 40 μL

4 1940 μL 60 μL 5 1940 μL 60 μL 6 1920 μL 80 μL 7 1920 μL 80 μL 8 1900 μL 100 μL 9 1900 μL 100 μL 10 1970 μL 30 μL 11 1970 μL 30 μL 12 1960 μL 40 μL 13 1960 μL 40 μL 14 1950 μL 50 μL 15 1950 μL 50 μL 16 1970 μL 30 μL 17 1970 μL 30 μL 18 1960 μL 40 μL 19 1960 μL 40 μL 20 1950 μL 50 μL 21 1950 μL 50 μL *O número máximo sugerido de amostras é 3.

[00193] Tampe os tubos de reação. Misture o conteúdo gentilmente, mas completamente. Coloque os tubos de reação em um banho-maria de 37 °C. Incube por 22 ± 0,5 horas. Registre o tempo real de incubação iniciado em 37 °C, o número do banho-maria usado, o número de lote do Lipídio de colágeno e o fator de correção de colágeno para o lote usado e os números de lote de todas as soluções usadas. Extinção e Filtragem

[00194] Etiquete um tubo de filtrado para corresponder a cada tubo de reação incubado. Coloque um funil contendo e papel de filtro dobrado em cada tubo de filtrado etiquetado. No final do período de incubação, remova os tubos de reação do banho-maria. Registre o tempo real em que a incubação terminou.

[00195] Destampe os tubos de reação e descarte as tampas. Extinga a reação dispensando 2 mL de 0,5 M HCl em cada tubo de reação. Misture completamente o conteúdo dos tubos. Filtre o conteúdo de cada tubo de reação no tubo de filtragem apropriado.

[00196] As duas etapas anteriores precisam ser concluídas o mais rápido possível, porque o colágeno não digerido pode ser dissolvido pelo HCl em pouco tempo. O filtrado pode ser armazenado refrigerado em tubos de filtrado cobertos por até 95,5 horas antes do desenvolvimento de cor. Registre a refrigeração e tempo armazenado. Desenvolvimento de Cor

[00197] Configure e etiquete os tubos de ebulição da seguinte forma: seis tubos para a água e os controles de leucina (Etapa 1) e dois tubos para cada tudo de filtrado (Etapa 1). Coloque as seguintes quantidades de água e solução de ensaio padrão de leucina nos seis tubos de controle de leucina. N° do Tubo 1 2 3 4 5 6 Água (μL) 1000 900 850: 800 750 700 Leu (μL) 0 100 150 200 250 300 Leu (nmol) 0 100 150 200' 250 300

[00198] Pipete 0,8 mL de água em cada tubo de ebulição (Etapa 2). Pipete 0,2 mL de filtrado de cada amostra nos tubos de ebulição devidamente etiquetados. Dispense 0,5 mL de tampão Rosen em cada tubo de ebulição. Sob uma capela de contenção, dispense 0,5 mL de 3% de ninidrina em cada tubo de ebulição. Misture completamente o conteúdo de cada tubo em um misturador de vórtex. Coloque os tubos de ebulição em um banho-maria fervente em uma capela de exaustão. Ferva por 15 ± 1 minutos. No final do período de ebulição, remova os tubos de ebulição do banho-maria. Sob uma capela de contenção, dispense 5,0 mL de Isopropanol a 50% em cada tubo de ebulição e misture completamente o conteúdo. Deixe que os tubos de ebulição alcancem a temperatura ambiente (pelo menos 10 minutos) antes de ler as absorvências.

Leitura de Absorvências

[00199] Leia as absorvências dos tubos enquanto trabalha sob uma capela de contenção. Ligue o espectrofotômetro e deixe-o aquecer. Configure o comprimento de onda do espectrofotômetro para 570 nm. Zere o espectrofotômetro contra Isopropanol a 50%. Leia as absorvências (A570) da água, leucina, controles de tripsina e as amostras em teste. Registre a hora em que a primeira amostra é lida, em horas. Registre as leituras como 1000 X A570 e registre o tempo em que a última amostra é lida, em horas. Todas as leituras devem ser feitas dentro de um intervalo de 1 hora. Princípios de Cálculo

[00200] Calcule, em minutos, o tempo total de leitura e o tempo total de incubação. O tempo total de leitura deve ser menos que 60 minutos e o tempo total de incubação deve ser entre 1290 e 1350 minutos. Usando o método linear dos mínimos quadrados, calcule a inclinação "b" e o coeficiente de correlação "r" para padrões de leucinas (x = nmol leucina em relação a y = leitura A570). A unidade para o valor "b" é A570/nmol leucina. Registre o valor "b" para duas casas decimais, o valor b para leucina deve ser entre 2,88 e 3,33. Calcule a leitura média dos controles de tripsina (T). A leitura média para os controles de tripsina (T) deve ser de 221 a 338. Registre essa média como o número inteiro mais próximo (Etapa A). Calcule a média de leitura A570 de amostra duplicada para cada tubo de reação. Registre esse número como o número inteiro mais próximo. Subtraia a tripsina média (Etapa A) da leitura A570 de amostra média para obter a leitura de amostra líquida.

[00201] Calcule a atividade (ACT) por tubo, em nmol leu eq/min, da seguinte forma: ACT (nmol leu eq/min) = (Leitura de amostra líquida)(20) (b) (Tempo em minutos) onde 20 é o fator de diluição para a quantidade de mistura de reação desenvolvida e "b" é a inclinação da curva padrão de leucina. Registre esse número com um ponto decimal. A atividade por tubo das amostras em teste deve ser de 1,6 a 5,7 nmol leu eq/min.

[00202] Calcule a atividade em unidades de BTC, da seguinte forma: Unidades de BTC = atividade em nmol leu eq/min x fator de correção de colágeno.

[00203] Calcule a atividade em unidades de BTC/mL da amostra, da seguinte forma: Unidade de BTC/mL = Atividade em unidades de BTC Volume de amostra usado em mL

[00204] Calcule a atividade específica da amostra em unidades de BTC/mm da seguinte forma: Unidade de BTC/mg = Atividade em unidade de BTC/mL Concentração de Proteína em mg/mL

[00205] A conversão de unidades de BTC para unidades de ABC é: Unidades de ABC = unidades de BTC x 1,09 i. Unidades de BTC e Unidades de ABC

[00206] Várias composições de colagenase podem ser empregadas em que a colagenase tem uma atividade específica de cerca de 5.000 unidades de BTC/mg a cerca de 25.000 unidades de BTC/mg, ou cerca de 10.000 unidades de BTC/mg a cerca de 25.000 unidades de BTC/mg, ou cerca de 15.000 unidades de BTC/mg, ou cerca de 17.500 unidades de BTC/mg, ou cerca de 20.000 unidades de BTC/mg, ou cerca de 22.500 unidades de BTC/mg, ou cerca de 9.175 unidades de BTC/0,58 mg, ou 15.817 unidades de BTC/mg em que "mg" se refere à quantidade de colagenase(s) presente em uma composição (distinta de excipientes e outros constituintes).

[00207] Adicionalmente, várias composições de colagenase podem ser empregadas em que a colagenase tem uma atividade específica de cerca de 5.000 unidades de ABC/mg a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg, ou cerca de 10.000 unidades de ABC/mg a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg, ou cerca de 15.000 unidades de ABC/mg, ou cerca de 17.500 unidades de ABC/mg, ou cerca de 20.000 unidades de ABC/mg, ou cerca de 22.500 unidades de ABC/mg, ou cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg, ou 17.241 unidades de ABC/mg em que "mg" se refere à quantidade de colagenase(s) presente em uma composição (distinta de excipientes e outros constituintes). d. OUTROS ENSAIOS

[00208] Métodos de ensaio utilizando colágeno etiquetado foram relatados por Gisslow et al., Anal. Biochem., 68: 70-78 (1975); Robertson et al., Clinica Chimica Acta, 42:43-45 (1972); Sakamoto et al., A New Method for the Assay of Tissue Collagenase (Um Novo Método para o Ensaio de Colagenase de Tecido) (36297) (1972). Um outro ensaio é o Worthington Biochemical Corp. Assay (http://www.worthington- biochem.com/CLS/assay.html) (acessado em 3 de julho de 2019).

4. Doses de Colagenase

[00209] Quanto às doses de colagenase empregadas neste documento, a presente divulgação prevê quantidades terapeuticamente eficazes de colagenase suficientes para ligar e lisar os septos mediante injeção subcutânea para resultar em uma diminuição do aparecimento de celulite em comparação com a linha de base pré-tratamento.

[00210] Em uma modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,01 mg a cerca de 20 mg em uma dose única ou dividida. Em uma modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,05 mg a cerca de 15 mg em uma dose única ou dividida. Em outra modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,10 mg a cerca de 10 mg em uma dose única ou dividida. Em outra modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,15 mg a cerca de 5 mg em uma dose única ou dividida.

Em outra modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,20 mg a cerca de 3 mg em uma dose única ou dividida.

Em outra modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,25 mg a cerca de 2 mg em uma dose única ou dividida.

Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ser injetada em uma quantidade de cerca de 0,05 mg, cerca de 0,10 mg, cerca de 0,15 mg, cerca de 0,20 mg, cerca de 0,25 mg, cerca de 0,30 mg, cerca de 0,35 mg, cerca de 0,40 mg, cerca de 0,45 mg, cerca de 0,50 mg, cerca de 0,55 mg, cerca de 0,60 mg, cerca de 0,65 mg, cerca de 0,70 mg, cerca de 0,75 mg, cerca de 0,80 mg, cerca de 0,85 mg, cerca de 0,90 mg, cerca de 0,95 mg, cerca de 1,00 mg, 1,05 mg, cerca de 1,10 mg, cerca de 1,15 mg, cerca de 1,20 mg, cerca de 1,25 mg, cerca de 1,30 mg, cerca de 1,35 mg, cerca de 1,40 mg, cerca de 1,45 mg, cerca de 1,50 mg, cerca de 1,55 mg, cerca de 1,60 mg, cerca de 1,65 mg, cerca de 1,70 mg, cerca de 1,75 mg, cerca de 1,80 mg, cerca de 1,85 mg, cerca de 1,90 mg, cerca de 1,95 mg, cerca de 2,00 mg, 2,05 mg, cerca de 2,10 mg, cerca de 2,15 mg, cerca de 2,20 mg, cerca de 2,25 mg, cerca de 2,30 mg, cerca de 2,35 mg, cerca de 2,40 mg, cerca de 2,45 mg, cerca de 2,50 mg, cerca de 2,55 mg, cerca de 2,60 mg, cerca de 2,65 mg, cerca de 2,70 mg, cerca de 2,75 mg, cerca de 2,80 mg, cerca de 2,85 mg, cerca de 2,90 mg, cerca de 2,95 mg, cerca de 3,00 mg, 3,05 mg, cerca de 3,10 mg, cerca de 3,15 mg, cerca de 3,20 mg, cerca de 3,25 mg, cerca de 3,30 mg, cerca de 3,35 mg, cerca de 3,40 mg, cerca de 3,45 mg, cerca de 3,50 mg, cerca de 3,55 mg, cerca de 3,60 mg, cerca de 3,65 mg, cerca de 3,70 mg, cerca de 3,75 mg, cerca de 3,80 mg, cerca de 3,85 mg, cerca de 3,90 mg, cerca de 3,95 mg, cerca de 4,00 mg, 4,05 mg, cerca de 4,10 mg, cerca de 4,15 mg, cerca de 4,20 mg, cerca de 4,25 mg, cerca de 4,30 mg, cerca de 4,35 mg, cerca de 4,40 mg, cerca de 4,45 mg, cerca de 4,50 mg, cerca de 4,55 mg, cerca de 4,60 mg, cerca de 4,65 mg, cerca de 4,70 mg, cerca de 4,75 mg, cerca de 4,80 mg, cerca de 4,85 mg, cerca de 4,90 mg, cerca de 4,95 mg, cerca de 5,00 mg, 5,05 mg, cerca de

5,10 mg, cerca de 5,15 mg, cerca de 5,20 mg, cerca de 5,25 mg, cerca de 5,30 mg, cerca de 5,35 mg, cerca de 5,40 mg, cerca de 5,45 mg, cerca de 5,50 mg, cerca de 5,55 mg, cerca de 5,60 mg, cerca de 5,65 mg, cerca de 5,70 mg, cerca de 5,75 mg, cerca de 5,80 mg, cerca de 5,85 mg, cerca de 5,90 mg, cerca de 5,95 mg, ou cerca de 6,00 mg.

[00211] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 2,6 min-1 a 5,2 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 3,0 min-1 a 5,0 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 3,4 min-1 a 4,8 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 3,5 min-1 a 4,5 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 2,0 min-1, cerca de 2,1 min-1, cerca de 2,2 min-1, cerca de 2,3 min-1, cerca de 2,4 min-1, cerca de 2,5 min-1, cerca de 2,6 min-1, cerca de 2,7 min-1, cerca de 2,8 min-1, cerca de 2,9 min-1, cerca de 3,0 min- 1 , cerca de 3,1 min-1 cerca de 3,2 min-1, cerca de 3,3 min-1, cerca de 3,4 min-1, cerca de 3,5 min-1, cerca de 3,6 min-1, cerca de 3,7 min-1, cerca de 3,8 min-1, cerca de 3,9 min-1, cerca de 4,0 min-1, cerca de 4,1 min-1, cerca de 4,2 min-1, cerca de 4,3 min-1, cerca de 4,4 min-1, cerca de 4,5 min-1, cerca de 4,6 min-1, cerca de 4,7 min-1, cerca de 4,8 min-1, cerca de 4,9 min- 1 , cerca de 5,0 min-1, cerca de 5,1 min-1, cerca de 5,2 min-1, cerca de 5,3 min-1, cerca de 5,4 min-1, cerca de 5,5 min-1, cerca de 5,6 min-1, cerca de 5,7 min-1, cerca de 5,8 min-1, cerca de 5,9 min-1, ou cerca de 6,0 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 0,7 min-1 a 7,6 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC, ou cerca de 1 a 6, ou cerca de 2 a 5, ou cerca de 3 a 4 min-1, conforme medido usando o ensaio SRC.

[00212] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 135 min-1 a 268 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA.

Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 150 min-1 a 250 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 175 min-1 a 225 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 130 min-1, cerca de 135 min-1, cerca de 140 min-1, cerca de 145 min-1, cerca de 150 min-1, cerca de 155 min-1, cerca de 160 min-1, cerca de 165 min-1, cerca de 170 min-1, cerca de 175 min-1, cerca de 180 min-1, cerca de 185 min-1, cerca de 190 min-1, cerca de 195 min-1, cerca de 200 min-1, cerca de 205 min-1, cerca de 210 min-1, cerca de 215 min-1, cerca de 220 min-1, cerca de 225 min-1, cerca de 230 min-1, cerca de 235 min-1, cerca de 240 min-1, cerca de 245 min-1, cerca de 250 min-1, cerca de 255 min-1, cerca de 260 min-1, cerca de 265 min-1, cerca de 270 min-1, cerca de 275 min-1, ou cerca de 280 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Vmax de cerca de 4 min-1 a 400 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA, ou cerca de 0,3 a 30,5, ou cerca de 10 a 375, ou cerca de 20 a 350, ou cerca de 50 a 300, ou cerca de 100 a 275 min-1, conforme medido usando o ensaio GPA.

[00213] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 75mM a 147 mM, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 80 mM a 140 mM, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 85 mM a 130 mM, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 90 mM a 120 mM, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 70 mM, cerca de 72 mM, cerca de 75 mM, cerca de 77 mM, cerca de 80 mM, cerca de 82 mM, cerca de 85 mM, cerca de 87 mM, cerca de 90 mM, cerca de 92 mM, cerca de 95 mM, cerca de 97 mM, cerca de 100 mM, cerca de 102 mM, cerca de 105 mM, cerca de 107 mM, cerca de 110 mM,

cerca de 112 mM, cerca de 115 mM, cerca de 117 mM, cerca de 120 mM, cerca de 122 mM, cerca de 125 mM, cerca de 127 mM, cerca de 130 mM, cerca de 132 mM, cerca de 135 mM, cerca de 137 mM, cerca de 140 mM, cerca de 142 mM, cerca de 145 mM, cerca de 147 mM, cerca de 150 mM, cerca de 152 mM, cerca de 155 mM, ou cerca de 157 mM, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 4,4 mM a 437 mM, conforme medido usando o ensaio SRC, ou cerca de 5 a 400, ou cerca de 20 a 375, ou cerca de 50 a 325, ou cerca de 100 a 275, ou cerca de 150 a 250 mM, ou cerca de 4,1 a 410 nanoMolar conforme medido usando o ensaio SRC.

[00214] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 0,03 mM a 3,1 mM, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 1,00 mM a 1,60 mM, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 1,10 mM a 1,50 mM, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 1,15 mM a 1,40 mM, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 0,80 mM, cerca de 0,82 mM, cerca de 0,85 mM, cerca de 0,87 mM, cerca de 0,90 mM, cerca de 0,92 mM, cerca de 0,95 mM, cerca de 0,97 mM, cerca de 1,00 mM, cerca de 1,02 mM, cerca de 1,05 mM, cerca de 1,07 mM, cerca de 1,10 mM, cerca de 1,12 mM, cerca de 1,15 mM, cerca de 1,17 mM, cerca de 1,20 mM, cerca de 1,22 mM, cerca de 1,25 mM, cerca de 1,27 mM, cerca de 1,30 mM, cerca de 1,32 mM, cerca de 1,35 mM, cerca de 1,37 mM, cerca de 1,40 mM, cerca de 1,42 mM, cerca de 1,45 mM, cerca de 1,47 mM, cerca de 1,50 mM, cerca de 1,52 mM, cerca de 1,55 mM, cerca de 1,57 mM, cerca de 1,60 mM, cerca de 1,62 mM, cerca de 1,65 mM, ou cerca de 1,67 mM, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Km de cerca de 0,027 mM a 2,7 mM, conforme medido usando o ensaio GPA, ou cerca de 0,1 a 2, ou cerca de 0,5 a 1,5, ou cerca de 1 a 1,35 mM, conforme medido usando o ensaio GPA.

[00215] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 36 seg-1 a 671 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 50 seg-1 a 600 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 60 seg-1 a 500 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 70 seg-1 a 400 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 100 seg-1 a 350 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 30 seg-1, cerca de 40 seg-1, cerca de 50 seg-1, cerca de 60 seg-1, cerca de 70 seg-1, cerca de 80 seg-1, cerca de 90 seg-1, cerca de 100 seg-1, cerca de 110 seg-1, cerca de 120 seg-1, cerca de 130 seg-1, cerca de 140 seg-1, cerca de 150 seg-1, cerca de 160 seg-1, cerca de 170 seg-1, cerca de 180 seg-1, cerca de 190 seg-1, cerca de 200 seg-1, cerca de 210 seg-1, cerca de 220 seg-1, cerca de 230 seg-1, cerca de 240 seg-1, cerca de 250 seg-1, cerca de 260 seg-1, cerca de 270 seg-1, cerca de 280 seg-1, cerca de 229 seg-1, cerca de 300 seg-1, cerca de 310 seg-1, cerca de 320 seg-1, cerca de 330 seg-1, cerca de 340 seg-1, cerca de 350 seg-1, cerca de 360 seg-1, cerca de 370 seg-1, cerca de 380 seg-1, cerca de 390 seg-1, cerca de 400 seg-1, cerca de 410 seg-1, cerca de 420 seg-1, cerca de 430 seg-1, cerca de 440 seg-1, cerca de 450 seg-1, cerca de 460 seg-1, cerca de 470 seg-1, cerca de 480 seg-1, cerca de 490 seg-1, cerca de 500 seg-1, cerca de 510 seg-1, cerca de 520 seg-1, cerca de 530 seg-1, cerca de 540 seg-1, cerca de 550 seg-1, cerca de 560 seg-1, cerca de 570 seg-1, cerca de 580 seg-1, cerca de 590 seg-1, cerca de 600 seg-1, cerca de 610 seg-1, cerca de 620 seg-1, cerca de 630 seg-1, cerca de 640 seg-1, cerca de 650 seg-1, cerca de 660 seg-1, cerca de 670 seg-1, cerca de 680 seg-1, cerca de 690 seg-1, cerca de 700 seg-1, cerca de 710 seg-1, cerca de 720 seg-1, cerca de 730 seg-1, cerca de 740 seg-1, cerca de 750 seg-1 ou cerca de 760 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 1 seg-1 a 100 seg- 1, conforme medido usando o ensaio SRC, ou cerca de 10 a 100, ou cerca de 20 a 80, ou cerca de 30 a 70, ou cerca de 40 a 60 seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC.

[00216] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 90 a 10.000, ou cerca de 41.000 seg-1 a cerca de 81.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 45.000 seg-1 a cerca de 85.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 50.000 seg-1 a cerca de 70.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 55.000 seg-1 a cerca de 65.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 35.000 seg-1, cerca de 37.500 seg-1, cerca de 40.000 seg-1, cerca de 42.500 seg-1, cerca de 45.000 seg-1, cerca de 47.500 seg-1, cerca de 50.000 seg-1, cerca de 52.500 seg-1, cerca de 55.000 seg-1, cerca de 57.500 seg-1, cerca de 60.000 seg-1, cerca de

62.500 seg-1, cerca de 65.000 seg-1, cerca de 67.500 seg-1, cerca de 70.000 seg-1, cerca de 72.500 seg-1, cerca de 75.000 seg-1, cerca de 77.500 seg-1, cerca de 80.000 seg-1, cerca de 82.500 seg-1, ou cerca de 85.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat de cerca de 1215 seg-1 a cerca de 120.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA, ou cerca de 2.000 a

100.000, ou cerca de 10.000 a 90.000, ou cerca de 20.000 a 80.000, ou cerca de 30.000 a 70.000, ou cerca de 40.000 a 60.000 seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA.

[00217] Em uma modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 376 a 38.000 μseg, ou cerca de 14.000 μseg a cerca de 28.000 μseg, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 16.000 μseg a cerca de 26.000 μseg, conforme medido usando o ensaio SRC. Em uma modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 18.000 μseg a cerca de 24.000 μseg, conforme medido usando o ensaio SRC. Em uma modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 20.000 μseg a cerca de 22.000 μseg, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 12.500 μseg, cerca de 12.750 μseg, cerca de 13.000 μseg, cerca de 13.250 μseg, cerca de 13.500 μseg, cerca de 13.750 μseg, cerca de 14.000 μseg, cerca de 14.250 μseg, cerca de 14.500 μseg, cerca de 14.750 μseg, cerca de 15.000 μseg, cerca de

15.250 μseg, cerca de 15.500 μseg, cerca de 15.750 μseg, cerca de 16.000 μseg, cerca de 16.250 μseg, cerca de 16.500 μseg, cerca de 16.750 μseg, cerca de 17.000 μseg, cerca de 17.225 μseg, cerca de 17.500 μseg, cerca de 17.750 μseg, cerca de 18.000 μseg, cerca de 18.250 μseg, cerca de

18.500 μseg, cerca de 18.750 μseg, cerca de 19.000 μseg, cerca de 19.250 μseg, cerca de 19.500 μseg, cerca de 19.750 μseg, cerca de 20.000 μseg, cerca de 20.250 μseg, cerca de 20.500 μseg, cerca de 20.750 μseg, cerca de 21.250 μseg, cerca de 21.500 μseg, cerca de 21.750 μseg, cerca de

22.000 μseg, cerca de 22.250 μseg, cerca de 22.500 μseg, cerca de 22.750 μseg, cerca de 23.000 μseg, cerca de 23.250 μseg, cerca de 23.500 μseg, cerca de 23.750 μseg, cerca de 24.000 μseg, cerca de 24.250 μseg, cerca de 24.500 μseg, cerca de 24.750 μseg, cerca de 25.000 μseg, cerca de

25.250 μseg, cerca de 25.500 μseg, cerca de 25.750 μseg, cerca de

26.000, cerca de 26.250 μseg, cerca de 26.500 μseg, cerca de 26.750 μseg, cerca de 27.000 μseg, cerca de 27.250 μseg, cerca de 27.500 μseg, cerca de 27.750 μseg, cerca de 28.000 μseg, cerca de 28.250 μseg, cerca de 28.500 μseg, cerca de 28.750 μseg, cerca de 29.000 μseg, ou cerca de

29.250 μseg, conforme medido pelo ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 370 μseg a cerca de 36.700 μseg,

conforme medido usando o ensaio SRC, ou cerca de 750 a 30.000, ou cerca de 2.500 a 25.000, ou cerca de 5.000 a 20.000, ou cerca de 10.000 a

18.000, ou cerca de 15.000 μseg, conforme medido usando o ensaio SRC.

[00218] Em uma modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 5 μseg a cerca de 530 μseg, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 15 μseg a cerca de 23 μseg, conforme medido no ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 16 μseg a cerca de 21 μseg, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 10,0 μseg, cerca de 10,2 μseg, cerca de 10,4 μseg, cerca de 10,6 μseg, cerca de 10,8 μseg, cerca de 11,0 μseg, cerca de 11,2 μseg, cerca de 11,4 μseg, cerca de 11,6 μseg, cerca de 11,8 μseg, cerca de 12,0 μseg, cerca de 12,2 μseg, cerca de 12,4 μseg, cerca de 12,6 μseg, cerca de 12,8 μseg, cerca de 13,0 μseg, cerca de 13,2 μseg, cerca de 13,4 μseg, cerca de 13,6 μseg, cerca de 13,8 μseg, cerca de 14,0 μseg, cerca de 14,2 μseg, cerca de 14,4 μseg, cerca de 14,6 μseg, cerca de 14,8 μseg, cerca de 15,0 μseg, cerca de 15,2 μseg, cerca de 15,4 μseg, cerca de 15,6 μseg, cerca de 15,8 μseg, cerca de 16,0 μseg, cerca de 16,2 μseg, cerca de 16,4 μseg, cerca de 16,6 μseg, cerca de 16,8 μseg, cerca de 17,0 μseg, cerca de 17,2 μseg, cerca de 17,4 μseg, cerca de 17,6 μseg, cerca de 17,8 μseg, cerca de 18,0 μseg, cerca de 18,2 μseg, cerca de 18,4 μseg, cerca de 18,6 μseg, cerca de 18,8 μseg, cerca de 19,0 μseg, cerca de 19,2 μseg, cerca de 19,4 μseg, cerca de 19,6 μseg, cerca de 19,8 μseg, cerca de 20,0 μseg, cerca de 20,2 μseg, cerca de 20,4 μseg, cerca de 20,6 μseg, cerca de 20,8 μseg, cerca de 21,0 μseg, cerca de 21,2 μseg, cerca de 21,4 μseg, cerca de 21,6 μseg, cerca de 21,8 μseg, cerca de 22,0 μseg, cerca de 22,2 μseg, cerca de 22,4 μseg, cerca de 22,6 μseg, cerca de 22,8 μseg, cerca de 23,0 μseg, cerca de 23,2 μseg, cerca de 23,4 μseg, cerca de 23,6 μseg, cerca de 23,8 μseg, cerca de 24,0 μseg, cerca de 24,2 μseg, cerca de 24,4 μseg, cerca de 24,6 μseg, cerca de 24,8 μseg, cerca de 25,0 μseg, cerca de 25,2 μseg, cerca de 25,4 μseg, cerca de 25,6 μseg, cerca de 25,8 μseg, cerca de 26,0 μseg, cerca de 26,2 μseg, cerca de 26,4 μseg, cerca de 26,8 μseg, cerca de 27,0 μseg, cerca de 27,2 μseg, ou cerca de 27,4 μseg, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter 1/Kcat de cerca de 0,3 μseg a cerca de 32 μseg, conforme medido usando o ensaio GPA, ou cerca de 1 a 30, ou cerca de 5 a 25, ou cerca de 10 a 20, ou cerca de 15 μseg, conforme medido usando o ensaio GPA.

[00219] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 5.140 mM-1seg-1 a cerca de 508.814 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um KcatKm de cerca de 0,50 mM-1seg-1 a cerca de 7,75 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um KcatKm de cerca de 0,75 mM-1seg-1 a cerca de 7,00 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 1,00 mM-1seg-1 a cerca de 6,00 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 0,10 mM-1seg-1, cerca de 0,20 mM-1seg-1, cerca de 0,30 mM-1seg-1, cerca de 0,40 mM-1seg-1, cerca de 0,50 mM-1seg-1, cerca de 0,60 mM-1seg-1, cerca de 0,70 mM-1seg-1, cerca de 0,80 mM-1seg-1, cerca de 0,90 mM-1seg-1, cerca de 1,00 mM-1seg-1, cerca de 1,10 mM-1seg-1, cerca de 1,20 mM-1seg-1, cerca de 1,30 mM-1seg-1, cerca de 1,40 mM-1seg-1, cerca de 1,50 mM-1seg-1, cerca de 1,60 mM-1seg-1, cerca de 1,70 mM-1seg-1, cerca de 1,80 mM-1seg-1, cerca de 1,90 mM-1seg-1, cerca de 2,00 mM-1seg-1, cerca de 2,10 mM-1seg-1, cerca de 2,20 mM-1seg-1, cerca de 2,30 mM-1seg-1, cerca de 2,40 mM-1seg-1, cerca de 2,50 mM-1seg-1, cerca de 2,60 mM-1seg-1, cerca de 2,70 mM-1seg-1, cerca de 2,80 mM-1seg-1, cerca de 2,90 mM-1seg-1, cerca de 3,00 mM-1seg-1, cerca de 3,10 mM-1seg-1, cerca de 3,20 mM-1seg-1, cerca de 3,30 mM-1seg-1, cerca de 3,40 mM-1seg-1, cerca de 3,50 mM-1seg-1, cerca de 3,60 mM-1seg-1, cerca de 3,70 mM-1seg-1, cerca de

3,80 mM-1seg-1, cerca de 3,90 mM-1seg-1, cerca de 4,00 mM-1seg-1, cerca de 4,10 mM-1seg-1, cerca de 4,20 mM-1seg-1, cerca de 4,30 mM-1seg-1, cerca de 4,40 mM-1seg-1, cerca de 4,50 mM-1seg-1, cerca de 4,60 mM-1seg-1, cerca de 4,70 mM-1seg-1, cerca de 4,80 mM-1seg-1, cerca de 4,90 mM-1seg-1, cerca de 5,00 mM-1seg-1, cerca de 5,10 mM-1seg-1, cerca de 5,20 mM-1seg-1, cerca de 5,30 mM-1seg-1, cerca de 5,40 mM-1seg-1, cerca de 5,50 mM-1seg-1, cerca de 5,60 mM-1seg-1, cerca de 5,70 mM-1seg-1, cerca de 5,80 mM-1seg-1, cerca de 5,90 mM-1seg-1, cerca de 6,00 mM-1seg-1, cerca de 6,10 mM-1seg-1, cerca de 6,20 mM-1seg-1, cerca de 6,30 mM-1seg-1, cerca de 6,40 mM-1seg-1, cerca de 6,50 mM-1seg-1, cerca de 6,60 mM-1seg-1, cerca de 6,70 mM-1seg-1, cerca de 6,80 mM-1seg-1, cerca de 6,90 mM-1seg-1, cerca de 7,00 mM-1seg-1, cerca de 7,10 mM-1seg-1, cerca de 7,20 mM-1seg-1, cerca de 7,30 mM-1seg-1, ou cerca de 7,40 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 0,0048 mM-1seg- 1 a cerca de 0,47 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC, ou cerca de 0,009 a cerca de 0,3, ou cerca de 0,01 a cerca de 0,25, ou cerca de 0,1 a 0,25 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio SRC.

[00220] Em uma modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 60 mM-1seg-1 a cerca de 6.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 30.000 mM-1seg-1 a cerca de 85.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 36.000 mM-1seg-1 a cerca de

77.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 40.000 mM-1seg- 1 a cerca de 70.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de

40.000 mM-1seg-1, cerca de 42.000 mM-1seg-1, cerca de 44.000 mM-1seg-1, cerca de 46.000 mM-1seg-1, cerca de 48.000 mM-1seg-1, cerca de 50.000 mM-1seg-1, cerca de 52.000 mM-1seg-1, cerca de 54.000 mM-1seg-1, cerca de

56.000 mM-1seg-1, cerca de 58.000 mM-1seg-1, cerca de 60.000 mM-1seg-1, cerca de 62.000 mM-1seg-1, cerca de 64.000 mM-1seg-1, cerca de 66.000 mM-1seg-1, cerca de 68.000 mM-1seg-1, cerca de 70.000 mM-1seg-1, cerca de

72.000 mM-1seg-1, cerca de 74.000 mM-1seg-1, cerca de 76.000 mM-1seg-1, cerca de 78.000 mM-1seg-1, cerca de 80.000 mM-1seg-1, cerca de 82.000 mM-1seg-1, cerca de 84.000 mM-1seg-1, cerca de 86.000 mM-1seg-1, cerca de

88.000 mM-1seg-1, cerca de 90.000 mM-1seg-1, cerca de 92.000 mM-1seg-1, cerca de 94.000 mM-1seg-1, ou cerca de 96.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA. Em outra modalidade, a colagenase pode ter um Kcat/Km de cerca de 900 mM-1seg-1 a cerca de 90.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA, ou cerca de 2.000 a 80.000, ou cerca de 10.000 a 70.000, ou cerca de 20.000 a 60.000, ou cerca de 30.000 a 50.000, ou cerca de 40.000 a 45.000 mM-1seg-1, conforme medido usando o ensaio GPA.

[00221] Em uma modalidade, a colagem pode ter uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa. Em outra modalidade, a colagenase pode ter uma massa molecular de cerca de 70 kDa a cerca de 130 kDa. Em outra modalidade, a colagem pode ter uma massa molecular de cerca de 80 kDa a cerca de 120 kDa. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode ter uma massa molecular de cerca de 90 kDa a cerca de 120 kDa. Em outra modalidade, a colagem pode ter uma massa molecular de cerca de 100 kDa a cerca de 110 kDa. Em ainda outra modalidade, a colagem pode ter uma massa molecular de cerca de 55 kDa, cerca de 57 kDa, cerca de 60 kDa, cerca de 62 kDa, cerca de 65 kDa, cerca de 67 kDa, cerca de 70 kDa, cerca de 72 kDa, cerca de 75 kDa, cerca de 77 kDa, cerca de 80 kDa, cerca de 82 kDa, cerca de 85 kDa, cerca de 87 kDa, cerca de 90 kDa, cerca de 92 kDa, cerca de 95 kDa, cerca de 97 kDa, cerca de 100 kDa, cerca de 102 kDa, cerca de 105 kDa, cerca de 107 kDa, cerca de 110 kDa, cerca de 112 kDa, cerca de 115 kDa, cerca de 117 kDa, cerca de 120 kDa, cerca de 122 kDa, cerca de 125 kDa, cerca de 127 kDa, cerca de 130 kDa, cerca de 132 kDa, cerca de 135 kDa, ou cerca de 137 kDa.

[00222] Em uma modalidade, a colagenase pode ter uma pureza de pelo menos 80%, conforme medido por HMLC de fase reversa. Em outra modalidade, a colagenase pode ter uma pureza de cerca de 80%, cerca de 81%, cerca de 82%, cerca de 83%, cerca de 84%, cerca de 85%, cerca de 86%, cerca de 87%, cerca de 88%, cerca de 89%, cerca de 90%, cerca de 91%, cerca de 92%, cerca de 93%, cerca de 94%, cerca de 95%, cerca de 96%, cerca de 97%, cerca de 98% ou cerca de 99%, conforme medido por HΜLC de fase reversa. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender menor ou igual a 1% em área de clostripaína. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender menor ou igual a 1% em área de gelatinase. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender menor ou igual a 1% em área de leupeptina. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender menor ou igual a 1 cfu/mL de carga biológica.

[00223] Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de

30.000 unidades de SRC/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 2.500 a cerca de 25.000 unidades SRC/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 20.000 unidades de SRC/mg. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 500, cerca de 1000, cerca de 1.500, cerca de 2.000, cerca de

2.500, cerca de 3.000, cerca de 3.500, cerca de 4.000, cerca de 4.500, cerca de 5.000, cerca de 5.500, cerca de 6.000, cerca de 6.500, cerca de

7.000, cerca de 7.500, cerca de 8.000, cerca de 8.500, cerca de 9.000, cerca de 9.500, cerca de 10.000, cerca de 10.500, cerca de 11.000, cerca de 11.500, cerca de 12.000, cerca de 12.500, cerca de 13.000, cerca de

13.500, cerca de 14.000, cerca de 14.500, cerca de 15.000, cerca de

15.500, cerca de 16.000, cerca de 16.500, cerca de 17.000, cerca de

17.500, cerca de 18.000, cerca de 18.500, cerca de 19.000, cerca de

19.500, cerca de 20.000, cerca de 20.500, cerca de 21.000, cerca de

21.500, cerca de 22.000, cerca de 22.500, cerca de 23.000, cerca de

23.500, cerca de 24.000, cerca de 24.500, cerca de 25.000, cerca de

25.500, cerca de 26.000, cerca de 26.500, cerca de 27.000, cerca de

27.500, cerca de 28.000, cerca de 28.500, cerca de 29.000, cerca de

29.500 ou cerca de 30.000 unidades de SRC/mg.

[00224] Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 5.000 a cerca de

30.000 unidades de f-SRC/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 7.500 a cerca de 25.000 unidades de f-SRC/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 10.000 a cerca de 20.000 unidades de f-SRC/mg. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 2.500, cerca de 3.500, cerca de 4.000, cerca de 4.500, cerca de

5.000, cerca de 5.500, cerca de 6.000, cerca de 6.500, cerca de 7.000, cerca de 7.500, cerca de 8.000, cerca de 8.500, cerca de 9.000, cerca de

9.500, cerca de 10.000, cerca de 10.500, cerca de 11.000, cerca de 11.500, cerca de 12.000, cerca de 12.500, cerca de 13.000, cerca de 13.500, cerca de 14.000, cerca de 14.500, cerca de 15.000, cerca de 15.500, cerca de

16.000, cerca de 16.500, cerca de 17.000, cerca de 17.500, cerca de

18.000, cerca de 18.500, cerca de 19.000, cerca de 19.500, cerca de

20.000, cerca de 20.500, cerca de 21.000, cerca de 21.500, cerca de

22.000, cerca de 22.500, cerca de 23.000, cerca de 23.500, cerca de

24.000, cerca de 24.500, cerca de 25.000, cerca de 25.500, cerca de

26.000, cerca de 26.500, cerca de 27.000, cerca de 27.500, cerca de

28.000, cerca de 28.500, cerca de 29.000, cerca de 29.500 ou cerca de

30.000 unidades de f-SRC/mg.

[00225] Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de

GPA/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 150.000 a cerca de 350.000 unidades de GPA/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 200.000 a cerca de 300.000 unidades de GPA/mg. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de

100.000, cerca de 110.000, cerca de 120.000, cerca de 130.000, cerca de

140.000, cerca de 150.000, cerca de 160.000, cerca de 170.000, cerca de

180.000, cerca de 190.000, cerca de 200.000, cerca de 210.000, cerca de

220.000, cerca de 230.000, cerca de 240.000, cerca de 250.000, cerca de

260.000, cerca de 270.000, cerca de 280.000, cerca de 290.000, cerca de

300.000, cerca de 310.000, cerca de 320.000, cerca de 330.000, cerca de

340.000, cerca de 350.000, cerca de 360.000, cerca de 370.000, cerca de

380.000, cerca de 390.000, ou cerca de 400.000 unidades de GPA/mg.

[00226] Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.000 unidades de f- GPA/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 250.000 a cerca de 450.000 unidades de f-GPA/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 300.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg. Em ainda outra modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de

175.000, cerca de 185.000, cerca de 195.000, cerca de 205.000, cerca de

215.000, cerca de 225.000, cerca de 235.000, cerca de 245.000, cerca de

255.000, cerca de 265.000, cerca de 275.000, cerca de 285.000, cerca de

295.000, cerca de 305.000, cerca de 315.000, cerca de 325.000, cerca de

335.000, cerca de 345.000, cerca de 355.000, cerca de 365.000, cerca de

375.000, cerca de 385.000, cerca de 395.000, cerca de 405.000, cerca de

415.000, cerca de 425.000, cerca de 435.000, cerca de 445.000, cerca de

455.000, cerca de 465.000, cerca de 475.000, cerca de 485.000 ou cerca de 495.000 unidades de f-GPA/mg.

[00227] Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg. Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de 7.500 a cerca de 20.000 unidades de ABC/mg. Em uma modalidade, a colagenase pode compreender uma potência de cerca de

10.000 a cerca de 17.500 unidades de ABC/mg. Em outra modalidade, a colagenase pode compreender cerca de 5.000, cerca de 5.500, cerca de

6.000, cerca de 6.500, cerca de 7.000, cerca de 7.500, cerca de 8.000, cerca de 8.500, cerca de 9.000, cerca de 9.500, cerca de 10.000, cerca de

10.500, cerca de 11.000, cerca de 11.500, cerca de 12.000, cerca de

12.500, cerca de 13.000, cerca de 13.500, cerca de 14.000, cerca de

14.500, cerca de 15.000, cerca de 15.500, cerca de 16.000, cerca de

16.500, cerca de 17.000, cerca de 17.500, cerca de 18.000, cerca de

18.500, cerca de 19.000, cerca de 19.500, cerca de 20.000, cerca de

20.500, cerca de 21.000, cerca de 21.500, cerca de 22.000, cerca de

22.500, cerca de 23.000, cerca de 23.500, cerca de 24.000, cerca de

24.500, ou cerca de 25.000 unidades de ABC/mg.

[00228] Em algumas modalidades, a colagenase presente na composição compreende colagenase I e colagenase II em uma razão de aproximadamente 1:1. Outras razões de colagenase I e colagenase II podem ser empregadas tais como 0,1-2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75- 2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1. Cada uma das colagenase I e colagenase II pode ter uma pureza por área de pelo menos 80%, ou 85%, ou 90%, ou 91%, ou 92%, ou 93%, ou 94%, ou 95%, ou 96%, ou 97% ou 98% ou 99% ou 100% conforme medido por HPLC de fase reversa.

[00229] Em outra modalidade, a composição de colagenase compreende CCH tendo uma razão AUX I e AUX II de aproximadamente 1:1. Outras razões de AUX I e AUX II podem ser empregadas, tais como 0,1-2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou

1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1. Cada uma das AUX I e AUX II pode ter uma pureza por área de pelo menos 80%, ou 85%, ou 90%, ou 91%, ou 92%, ou 93%, ou 94%, ou 95%, ou 96%, ou 97% ou 98% ou 99% ou 100% conforme medido por HMLC de fase reversa.

[00230] Em outros exemplos, a composição de colagenase pode ser um líquido ou é reconstituída a partir de uma forma sólida liofilizada com um diluente. A dose da mistura é medida pela quantidade de colagenase presente sem importar o diluente e pode compreender cerca de 0,1 mg a cerca de 20 mg em uma ou mais injeções. Em outra modalidade, a dose administrada é de cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg, 5,04 mg, 5,88 mg, 6,72 mg, 7,56 mg ou 8,4 mg em uma ou mais injeções.

[00231] Por exemplo, cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg ou 1,68 mg são administrados em cerca de 12 injeções divididas. O volume da composição de colagenase injetada pode variar de 0,01 mL a 3 mL por injeção, ou totalizar cerca de 0,2 mL a 150 mL por visita de tratamento. Em uma modalidade específica, as doses acima são para uma composição de colagenase que compreende CCH. Em outra modalidade, as doses acima são para uma composição de colagenase tendo uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA)

• Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00232] Em outra modalidade, cerca de 0,84 mg de CCH é injetado em cerca de 12 injeções divididas igualmente por área de tratamento (cerca de 0,07 mg x 12 injeções = cerca de 0,84 mg). Em alguns casos, tal tratamento com 0,84 mg ocorre a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4 ou 5 visitas de tratamento. Em outros casos, mais de uma área de tratamento é injetada com 0,84 mg em uma visita de tratamento ou a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4 ou 5 visitas de tratamento. Em outras modalidades, há mais de 5 visitas de tratamento.

[00233] Em outro aspecto, a quantidade de colagenase que pode ser injetada em uma(s) área(s) de tratamento é de cerca de 0,001 mg a 20 mg de colagenase por visita de tratamento em uma ou mais injeções, por exemplo, a dose é dividida igualmente em cerca de 3 a cerca de 100 injeções. A colagenase está na forma líquida ou é reconstituída a partir de um sólido liofilizado com um diluente. A dose de colagenase é medida pela quantidade de colagenase, sem importar o diluente e pode compreender cerca de 0,1 mg a 1 mg, ou 0,25 mg a 0,75 mg, ou 0,1 mg a 2 mg, ou 0,25 mg a 1,75 mg, ou 0,5 mg a 1 mg, 0,1 mg a 3 mg, ou 0,25 mg a 2,75 mg, ou 0,5 mg a 2,5 mg, ou 0,75 mg a 2,25 mg, ou 1 mg a 2 mg, ou 0,1 mg a 4 mg, ou 0,25 mg a 3,75 mg, ou 0,5 mg a 3,5 mg, ou 0,75 mg a 3 mg, ou 1 mg a 3 mg. Em outras modalidades, a dose é de cerca de 0,001 mg, 0,01 mg, 0,04 mg, 0,05 mg, 0,07 mg, 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg, 0,5 mg, 0,6 mg, 0,7 mg, 0,8 mg, 0,9 mg, 1 mg, 1,1 mg, 1,2 mg, 1,3 mg, 1,4 mg, 1,5 mg, 1,6 mg, 1,7 mg, 1,8 mg, 1,9 mg, 2 mg, 2,25 mg, 2,5 mg, 2,75 mg, 3 mg, 3,25 mg, 3,5 mg, 3,75 mg, 4,0 mg, 4,25 mg, 4,5 mg, 4,75 mg, 5,0 mg, 5,25 mg, 5,5 mg, 5,75 mg, 6 mg, 6,25 mg, 6,5 mg, 6,75 mg, 7 mg, 7,25 mg, 7,5 mg, 7,75 mg, 8 mg, 8,25 mg, 8,5 mg, 8,75 mg, 9 mg, 9,25 mg, 9,5 mg, 9,75 mg, 10 mg, 11 mg, 12, mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg ou 20 mg em uma ou mais injeções.

[00234] Em outra modalidade, a dose administrada é de cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg, ou 5,04 mg em uma ou mais injeções. Em outro exemplo, cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg ou 5,04 mg são administrados em cerca de 12 injeções divididas em uma área de tratamento. Em outros exemplos, a dose de colagenase é dividida em 3 ou mais injeções. O volume da composição de colagenase injetada pode variar de 0,01 mL a 3 mL por injeção, ou totalizar cerca de 1 mL a 150 mL por visita de tratamento.

[00235] Em um aspecto, as misturas AUX I e II descritas acima ("CCH") podem ser injetadas em uma quantidade de cerca de 0,01 mg a 10 mg de colagenase por visita de tratamento em uma ou mais injeções, por exemplo, a dose é dividida igualmente em cerca de 3 a cerca de 50 injeções. A colagenase pode ser um líquido ou pode ser reconstituída a partir de uma forma liofilizada com um diluente. A dose da mistura é medida pela quantidade de colagenase, sem importar o diluente e pode compreender cerca de 0,1 mg a 1 mg, ou 0,25 mg a 0,75 mg, ou 0,1 mg a 2 mg, ou 0,25 mg a 1,75 mg, ou 0,5 mg a 1 mg, 0,1 mg a 3 mg, ou 0,25 mg a 2,75 mg, ou 0,5 mg a 2,5 mg, ou 0,75 mg a 2,25 mg, ou 1 mg a 2 mg, ou 0,1 mg a 4 mg, ou 0,25 mg a 3,75 mg, ou 0,5 mg a 3,5 mg, ou 0,75 mg a 3 mg, ou 1 mg a 3 mg, ou cerca de 0,05 mg, 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg, 0,5 mg, 0,6 mg, 0,7 mg, 0,8 mg, 0,9 mg, 1 mg, 1,1 mg, 1,2 mg, 1,3 mg, 1,4 mg, 1,5 mg, 1,6 mg, 1,7 mg, 1,8 mg, 1,9 mg, 2 mg, 2,25 mg, 2,5 mg, 2,75 mg, 3 mg , 3,25 mg, 3,5 mg, 3,75 mg, 4,0 mg, 4,25 mg, 4,5 mg, 4,75 mg, 5,0 mg, 5,25 mg, 5,5 mg, 5,75 mg, 6 mg, 6,25 mg, 6,5 mg, 6,75 mg, 7 mg, 7,25 mg, 7,5 mg, 7,75 mg, 8 mg, 8,25 mg, 8,5 mg, 8,75 mg, 9 mg, 9,25 mg, 9,5 mg, 9,75 mg ou 10 mg em uma ou mais injeções. Em outra modalidade, a dose de CCH administrada é de cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, ou 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg, ou 5,04 mg em uma ou mais injeções. Por exemplo, cerca de 0,06 mg, 0,48 mg, 0,84 mg, ou 1,68 mg, 2,52 mg, 3,36 mg, 4,2 mg ou 5,04 mg são administrados em 12 injeções. O volume da composição de colagenase injetada pode variar de 0,01 mL a 3 mL por injeção, ou totalizar cerca de 1 mL a 80 mL por visita de tratamento.

[00236] As doses de colagenase também podem ser expressas em mg por injeção (novamente sem importar o diluente), como de cerca de 0,001 mg a 0,5 mg por injeção, cerca de 0,01 mg a cerca de 5 mg por injeção, ou cerca de 0,005 mg a cerca de 0,1 mg, ou cerca de 0,005 mg, 0,04 mg ou 0,07 mg por injeção.

[00237] Em certos aspectos, a presente divulgação contempla injetar cerca de 500 unidades de ABC a cerca de 50.000 unidades de ABC por visita de tratamento, ou cerca de10.000 unidades de ABC para cerca de

25.000 unidades de ABC por visita de tratamento. Em outra modalidade, a dose de colagenase por injeção é de cerca de 50 unidades de ABC a cerca de 2.500 unidades de ABC, ou cerca de 85 unidades de ABC a cerca de

2.000 unidades de ABC, ou cerca de 150 unidades de ABC a cerca de

1.750 unidades de ABC, ou cerca de 200 unidades de ABC a cerca de

1.500 unidades de ABC, ou cerca de 300 unidades de ABC a cerca de

1.250 unidades de ABC, ou cerca de 500 unidades de ABC a cerca de

1.000 unidades de ABC.

[00238] Em certas modalidades, as doses com base em várias atividades específicas são as seguintes: Atividades Doses Específicas 500 700 1000 1500 10.000 15.000 Unidades Unidades Unidades Unidades Unidades Unidades de SRC de SRC de SRC de SRC de ABC de SRC 500 1,00 mg* 1,40 mg 2,00 mg 3,00 mg 3,17 mg 30,00 mg Unidades de SRC /mg 700 0,71 mg 1,00 mg 1,43 mg 2,14 mg 2,27 mg 21,43 mg Unidades de SRC /mg 1000 0,50 mg 0,70 mg 1,00 mg 1,50 mg 1,59 mg 15,00 mg Unidades de SRC /mg 1500 0,33 mg 0,47 mg 0,67 mg 1,00 mg 1,06 mg 10,00 mg Unidades de SRC /mg

10.000 0,18 mgf 0,25 mg 0,36 mg 0,55 mg 0,58 mg 5,48 mg Unidades de ABC/ 0,58 mg

15.000 0,033 mg 0,047 mg 0,067 mg 0,100 mg 0,106 mg 1,00 mg Unidades de SRC /mg * O cálculo de miligramas de unidades de SRC e atividade específica em unidades de SRC/mg é atingido multiplicando as unidades de SRC pelo inverso da atividade específica em unidades de SRC/mg. Por exemplo, quando a dose é de 500 unidades de SRC e a atividade específica é de 500 unidades de SRC/mg, a quantidade em miligramas equivalente à dose de 500 unidades de SRC é (500 unidades de SRC) * (1/(500 unidades de SRC/mg)) = 1,00 mg. † O cálculo de miligramas de unidades de SRC e atividade específica em unidades de ABC/mg é atingido multiplicando as unidades de SRC por 6,3 unidades de ABC/unidade de SRC e, então, multiplicando pelo inverso da atividade específica em unidades de ABC/mg. Por exemplo, quando a dose é de 500 unidades de SRC e a atividade específica é 10.000 unidades de ABC/0,58 mg, a quantidade em miligramas equivalente às 500 unidades de SRC é (500 unidades de SRC) * (6,3 unidades de ABC/unidade de SRC) * (1/ (10.000 unidades de ABC/0,58 mg)) = 0,18 mg.

[00239] Em certos aspectos, a presente divulgação contempla injetar colagenase em uma quantidade de cerca de 5.000 unidades de BTC a cerca de 25.000 unidades de BTC, ou cerca de 10.000 unidades de BTC a cerca de 25.000 unidades de BTC, ou cerca de 15.000 unidades de BTC, ou cerca de 17.500 unidades de BTC, ou cerca de 20.000 unidades de BTC, ou cerca de 22.500 unidades de BTC, ou cerca de 9.175 unidades de BTC, ou cerca de 15.817 unidades de BTC.

5. Formulações

[00240] O CCH ou outra colagenase pode estar na forma de uma formulação farmacêutica compreendendo o CCH ou colagenase e excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Tais excipientes podem incluir água estéril ou cloreto de sódio/cloreto de cálcio para injeção, agentes de ajuste de pH e estabilizadores.

[00241] Um exemplo não limitativo é o XIAFLEX®, provido comercialmente pela Requerente como frascos de vidro de uso único contendo 0,9 mg de CCH como um pó liofilizado estéril para reconstituição. O diluente estéril para reconstituição também é fornecido em um frasco de vidro de uso único. Os ingredientes inativos incluem ácido clorídrico, sacarose e trometamina. O diluente contém cloreto de cálcio di-hidratado em cloreto de sódio a 0,9%. Informações de Prescrição XIAFLEX® (2018).

[00242] Em outra modalidade, CCH para celulite é um pó liofilizado estéril compreendendo 0,92 mg de CCH, sacarose, Tris, manitol e ácido clorídrico, em um frasco de 5 mL. Um diluente estéril para reconstituição pode compreender água para injeção, solução salina normal ou 0,6% de cloreto de sódio e 0,03% de cloreto de cálcio desidratado em água para injeção, preenchidos em frascos individuais de 5 mL.

[00243] A colagenase ou CCH podem ser colocados em frascos de outros tamanhos, por exemplo, 10 mL, 15 mL, 20 mL ou 30 mL. Outros agentes de ajuste de pH, açúcares, polióis e agentes estabilizadores podem ser encontrados em Rowe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients (Manual de Excipientes Farmacêuticos) (5ª Ed.).

6. Métodos de Tratamento: Técnicas de Injeção e Regimes de Dosagem

[00244] As composições de colagenase anteriores são úteis em métodos para tratar ou reduzir a gravidade da celulite em indivíduos humanos. A presente divulgação se refere a um método para reduzir a gravidade da celulite em um paciente humano, compreendendo: fornecer uma composição compreendendo pelo menos uma colagenase; e injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição em uma ou mais ondulações, em que o paciente demonstra uma redução na gravidade da celulite em comparação com um nível de gravidade da linha de base do pré-tratamento. Conforme detalhado adicionalmente abaixo, a composição pode ser administrada por várias técnicas de injeção e a eficácia medida por uma série de escalas e outras ferramentas de medição.

[00245] A administração das composições de colagenase descritas neste documento pode ser bilateral (duas coxas ou duas nádegas) ou a todos os 4 quadrantes (ambas as nádegas e ambas as coxas) em um único indivíduo durante uma visita de tratamento. Tais visitas de tratamento podem ocorrer a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4, 5 ou 6 visitas de tratamento ao longo de um período de um ano. E, mesmo quando a colagenase é injetada em todos os 4 quadrantes em altas doses cumulativas, a bioanálise para detectar as concentrações de AUX-I ou AUX-II de plasma após administração subcutânea de CCH até, e incluindo, 3,36 mg indica que não houve níveis quantificáveis de CCH em circulação sistêmico (ou seja, abaixo do nível inferior de ensaio de quantificação) indicando nenhuma absorção sistêmica e indicando adicionalmente segurança geral. Por exemplo, humanos dosados com 3,36 mg e ratos dosados com 43 vezes a dose humana equivalente (HED) mostraram que essas quantidades foram bem toleradas. Estudos da Requerente sobre a farmacocinética de terapia de colagenase são apresentados em seu Pedido Provisório U.S. Nº 62/733.046 depositado em 18 de setembro de 2018, Pedido Provisório U.S. Nº 62/788.916 depositado em 6 de janeiro de 2019, Pedido Provisório dos EUA Nº 62/812.036 depositado em 28 de fevereiro de 2019, Pedido Provisório dos EUA Nº 62/823.596 depositado em 25 de março de 2019, Pedido Internacional N Nº PCT/US2019/041494 depositado em 11 de julho de 2019 e Pedido Internacional Nº PCT/US2019/41718 depositado em 12 de julho de 2019, que são incorporados a este documento por referência.

[00246] Uma visão geral dos vários parâmetros de injeção para colagenase e técnicas relacionadas para o tratamento de pacientes é fornecida na Tabela 15. Tabela 15. Uma Visão Geral dos Vários Parâmetros de Injeção de Colagenase e Técnicas Relacionadas para Tratamento de Pacientes

Parâmetros Variações Aproximadas e Descrições

Dose total por visita de tratamento (mg) 1 mg a 20 mg de colagenase Dose total por visita de tratamento Colagenase ou CCH: 5.000 a 600.000 (unidades de f-SRC) Dose total por visita de tratamento Colagenase ou CCH: 175.000 a 10 milhões (unidades de f-GPA) Dose total por visita de tratamento Colagenase ou CCH: 5.000 a 500.000 (unidades de ABC) Dose total por visita de tratamento Colagenase ou CCH: 500 a 600.000 (unidades de SRC) Dose total por visita de tratamento Colagenase ou CCH: 100.000 a 8 milhões (unidades de GPA) Dose total por área de tratamento (mg) Colagenase ou CCH: 0,07 mg a 5 mg Dose total por área de tratamento Colagenase ou CCH: 1.250 a 150.000 (unidades de f-SRC) Dose total por área de tratamento Colagenase ou CCH: 43.750 a 2,5 milhões (unidades de f-GPA) Dose total por área de tratamento Colagenase ou CCH: 1.250 a 125.000 (unidades de ABC) Dose total por área de tratamento Colagenase ou CCH: 1.250 a 150.000 (unidades de SRC) Dose total por área de tratamento Colagenase ou CCH: 25.000 a 2 milhões (unidades de GPA) 0,0001 mg a 1 mg, ou 0,0002 mg a 0,5 mg, ou 0,00029 mg a 0,01 mg, ou 0,01 mg a 2 mg, ou Dose por injeção 0,025 mg a 1,5 mg, ou 0,05 mg a 1 mg, ou 0,07 mg a 0,25 mg Volume total de injeção por visita de 0,1 mL a 150 mL ou 0,2 mL a 7,2 mL; ou 5 mL tratamento (mL) a 50 mL, ou 20 mL a 40 mL, ou 28 mL a 36 mL Volume total de injeção por área de 0,1 mL a 36 mL tratamento (mL) Volume total de injeção por ondulação 0,01 mL a 10 mL, ou 1,2 mL, ou 1,5 mL ou 0,3 (mL) mL.

Número de alíquotas de injeção por 1 a 12 injeção

Número de injeções por ondulação 1a5

Número de alíquotas por ondulação 1 a 60

Volume de cada alíquota 0,01 mL a 36 mL 0,01 mg/mL a 1 mg/mL ou 0,04 mg/mL a Concentração de colagenase por injeção 0,9 mg/mL, ou 0,06 mg/mL a 0,75 mg/mL, ou 0,23 mg/mL ou 0,001 mg/mL a 10 mg/mL Ângulo de injeção subcutânea na 5 a 175 graus, ou 30 a 150 graus, ou 45 a 135 ondulação graus, ou 75 a 105 graus, ou 90 graus Profundidade da injeção a partir da 1/8 de polegada a 2 polegadas superfície da pele calibre 25 a 32; agulha de 1/8 de polegada a 3 Calibre e comprimento da agulha polegadas Número de injeções por visita de 3 a 175 injeções tratamento Comprimento de tempo entre as sessões 7 a 100 dias de tratamento (dias) Fator de diluição 1x, 2x, 3x, 4x, 5x, 6x, 7x, 8x, 9x ou 10x Quantidade de colagenase liofilizada no 1 mg a 50 mg frasco 0,9% NaCl/0,03% CaCl2, ou 0,6% NaCl/ Diluente 0,03% CaCl2 Osmolalidade do produto reconstituído 50 a 1.000 mOsm/kg Quantidade de colagenase no frasco 1 mg a 50 mg (produto líquido) 2 mL a 50 mL, ou 5 mL, ou 7,5 mL, ou 10 mL, Tamanho do frasco ou 15 mL, ou 20 mL, ou 30 m, ou 40 mL, ou 50 mL pH da colagenase 4a9

[00247] Em certas modalidades, cerca de 0,84 mg de CCH é injetado em cerca de 12 injeções igualmente divididas em uma área afetada, tal como um quadrante (ou seja, nádega direita ou esquerda ou coxa direita ou esquerda) (cerca de 0,07 mg x 12 injeções = cerca de 0,84 mg de CCH). Em alguns casos, tal tratamento com 0,84 mg ocorre a cada 10 a 40 dias para 2, 3, 4, 5 ou 6 tratamentos. Em outros casos, mais de uma área ou quadrante afetado é injetado com 0,84 mg a cada 10 a 40 dias por 2, 3, 4, 5 ou 6 tratamentos.

[00248] Em uma modalidade, um marcador cirúrgico é usado para circundar cada uma das ondulações selecionadas para tratamento. Em outra modalidade, os círculos na área de tratamento selecionada não se sobrepõem. Em ainda outra modalidade, os círculos na área de tratamento selecionada se sobrepõem.

[00249] Em certas modalidades, os pacientes são administrados com colagenase, conforme mostrado na Tabela 16, usando o procedimento de acordo com o Tratamento I (Figura 7). Tabela 16. Dose e Volume de colagenase Volume Volume de Número de Dose (mg) Dose por Cada de Injeção (mL) Injeções por em Cada Dose EFP Injeçãoa/Número Injeção por Cada Cada Visita de Visita de Cumulativa de Indivíduos por Cada Visita de Tratamento Tratamento Injeção Tratamento 0,84 mg por área de tratamento x 2 áreas de 3,6 mL por 5,04 mg tratamento = área de (3 visitas de 12 por área de 1,68 mg tratamento x tratamento x tratamento x 2 (12 2 áreas de 0,84 mg por 0,07 mg 0,3 mL áreas de injeções por tratamento = área de tratamento = área de 7,2 mL tratamento x 24 injeções tratamento x (24 injeções 2 áreas de 0,07 x 0,3 mL) tratamento) mg/injeção x 2 áreas de tratamento) a Cada injeção de colagenase é de 0,3 mL administrada como três alíquotas de 0,1 mL.

[00250] Nesse exemplo, o médico pode selecionar ondulações dentro de cada nádega que são bem definidas, evidentes quando o sujeito está em pé e adequadas para tratamento. O médico não está limitado em sua escolha das ondulações a serem tratadas. O tratamento compreende em 12 injeções por nádega (24 injeções no total em 2 nádegas) por visita de tratamento.

Porque o objetivo do tratamento era melhorar a aparência estética de cada nádega inteira, o médico foi instruído a selecionar ondulações que, em sua opinião, mais melhorariam a aparência estética de cada nádega inteira.

As mesmas ondulações em uma nádega ou ondulações diferentes daquelas previamente tratadas em uma nádega podem ser tratadas em cada visita de tratamento, mas as injeções são preferencialmente dentro das nádegas (12 injeções por nádega) para cada uma das 3 visitas.

Cada nádega recebe todos os 3 tratamentos, a menos que a nádega não tenha ondulações tratáveis de EFP e o médico classifica a nádega com uma pontuação 0 no CR-PCSS.

Se nenhuma injeção em uma nádega em particular (direita ou esquerda) for dada na Visita de Tratamento 2, os indivíduos ainda são avaliados para tratamento na nádega contralateral na Visita de Tratamento 2 e retornam para a Visita de Tratamento 3 e cada uma das nádegas é novamente avaliada pelo indivíduo (PR PCSS) e investigador (CR-PCSS). Se o investigador classifica uma ou ambas as nádegas maior do que 0 no CR PCSS, as injeções são dadas na Visita de Tratamento 3. Além disso, o tratamento com colagenase pode incluir um ou mais dos seguintes: • Tratar 1 ou mais quadrantes; • Tratar ondulações não obstante o tamanho; • Tratar mulheres com mais de 45 anos; • Tratar ondulações desprovidas de frouxidão, flacidez ou caimento da pele; • Tratar ondulações diferentes em visitas de tratamento diferentes; • Usar agulha de ½ polegada ou mais; • Não limitar a distância entre as ondulações injetadas; • Não depender de espaçador, régua, papel ou outro dispositivo para limitar a localização das injeções; • Certificar-se de que pelo menos uma injeção ocorra no nadir da ondulação; • Tratar ondulações com menos de cerca de 1 cm de comprimento ou mais de 2 cm de comprimento; • Usar injeções dentro de cerca de 2 cm uma da outra; • Usar injeção dentro de menos de cerca de 2 cm uma da outra; e/ou • Medir a eficácia usando uma ou mais das escalas e métodos descritos neste documento.

[00251] Em certas modalidades, quando o tratamento adere aos aspectos acima, os pacientes experimentam uma rápida taxa de resposta à terapia. Vide Figuras 20 a 23.

[00252] Adicionalmente, em certas modalidades específicas, os parâmetros para pacientes em tratamento são fornecidos nas Tabelas 17 e

18. Tabela 17. Parâmetros de Formulação Liofilizada CCH Celulite – Nádega/ Celulite – coxa/área de área de tratamento tratamento Quantidade de massa no

0.92 mg CCH 0.92 mg CCH frasco Calibre 30 x ½ Calibre 30 x 1 inch e calibre Agulha da siringa polegada 30 x ½ polegada 0,6% NaCl/ 0,03% Diluente 0,6% NaCl/ 0.03% CaCl2 CaCl2 Osmolalidade do Produto ~235 – 315 mOsm/kg ~227 mOsm Reconstituído Dose aplicada por visita 0,84 mg por área de 0,84 mg por área de de tratamento tratamento tratamento Concentração a ser 0,233 mg/mL 0,05 mg/mL injetada

Tamanho do frasco 5 mL or 10 mL 5 mL or 10 mL Tabela 18. Parâmetros de Diluição de CCH Concentração Osmolalidade Amostra pH Alvo mg/mL (mOsM/kg) CCH 1X 8,1 reconstituição 0,23 362 a 402 CCH 2X 7,8 diluição 0,12 329 a 358 Diluente A CCH 4X 7,4 (0,9% NaCl, diluição 0,06 310 a 336 0,03% CCH 8X 7,2 CaCl2) diluição 0,03 301 a 325 CCH 1X 8,0 reconstituição 0,23 267 a 300 Diluente B CCH 2X 7,8 (0,6% NaCl, diluição 0,12 235 a 256 0,03% CCH 4X 7,5 CaCl2) diluição 0,06 216 a 234 CCH 8X 7,3 diluição 0,03 208 a 223

[00253] Em uma modalidade, a osmolalidade do produto de reconstituição é de cerca de 50 a cerca de 1.000, cerca de 100 a cerca de 900, cerca de 200 a cerca de 800, cerca de 300 a cerca de 700, cerca de 400 a cerca de 600, cerca de 50, cerca de 100, cerca de 150, cerca de 200, cerca de 250, cerca de 300, cerca de 350, cerca de 400, cerca de 450, cerca de 500, cerca de 550, cerca de 600, cerca de 650, cerca de 700, cerca de 750, cerca de 800, cerca de 850, cerca de 900, cerca de 950 ou cerca de 1.000 mOsm/kg. Em ainda outra modalidade, a osmolalidade do produto de reconstituição é de cerca de 512 mOsm/kg, cerca de 275 mOsm/kg, cerca de 281 mOsm/kg, ou cerca de 227 mOsm/kg.

[00254] Além dos métodos acima, a divulgação atual fornece um método de tratamento ou redução de EFP em um indivíduo em necessidade dele, em que o método fornece pelo menos uma das seguintes vantagens em relação aos procedimentos e tratamentos comuns de EFP: a. facilidade de uso por um clínico geral; b. menor tempo de tratamento; c. eficácia interessante à luz da visão geral dos clínicos gerais de que é difícil obter melhorias nas condições estéticas; d. não haver necessidade de usar hialuronidase; e. não haver necessidade de usar calor; f. não haver necessidade de usar lasers g. nenhuma subcisão; h. não haver necessidade de anestésico (apesar de hematomas); i. não haver necessidade de vestuário compressivo; e j. nenhum vácuo ser usado.

[00255] Em outra modalidade, o método de tratamento ou redução da celulite não coloca nenhum limite na gravidade da celulite a ser tratada, por exemplo, o tratamento com colagenase é seguro e eficaz, não obstante a prevalência ou gravidade da celulite. F. FASE 4 - PONTOS FINAIS TERAPÊUTICOS E MEDIÇÕES DE

EFICÁCIA

[00256] Os tratamentos descritos neste documento são eficazes no tratamento da celulite por uma série de medidas descritas abaixo. Geralmente, conforme usado neste documento, o termo "Dia" significa o dia de estudo medido sequencialmente dia a dia a partir do primeiro dia de tratamento com colagenase em uma área de tratamento em particular a partir do primeiro tratamento em um curso de tratamento, exceto quando disposto de outra forma no Exemplo 5 abaixo, que mede os dias sequencialmente a partir do Dia 71 de estudos anteriores. Por exemplo,

conforme explicado no Exemplo 5, "Dia 180" significa 180 dias após o Dia 71 relatado nos Exemplos 2 e 3. Assim, fora do contexto do Exemplo 5, o Dia 1 é o primeiro dia de tratamento; o Dia 71 é 70 dias após o Dia 1; o Dia 180 é 179 dias após o Dia 1 (a menos que "Dia 180" seja usado como no Exemplo 5, o que significa que é 180 dias após o dia 71, ou 251 dias após o primeiro dia de tratamento).

[00257] Em certas modalidades, em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave: • Pelo menos 50% dos pacientes mostrarem melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento alvo; • Pelo menos 50% dos pacientes mostrarem melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital da área de tratamento alvo; • Pelo menos 5% dos pacientes mostrarem melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento alvo. • Pelo menos 5% dos pacientes mostrarem melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital da área de tratamento alvo. • Pelo menos 5% dos pacientes experienciam uma diminuição significativa no tamanho da ondulação (volume, comprimento, largura, profundidade), por exemplo, uma diminuição de pelo menos 5%, ou uma diminuição de pelo menos 10%, ou uma diminuição de pelo menos 20% no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base.

[00258] Esses e outros parâmetros de eficácia e referências são detalhados abaixo. Adicionalmente, conforme mostrado nos Exemplos abaixo, as injeções de colagenase melhoraram significativamente a aparência da celulite, demonstraram durabilidade e foram geralmente bem toleradas.

1. Eficácia conforme Medido por CR-PCSS e PR-PCSS

[00259] Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhoria de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 25% da pontuação total máxima ou classificação a partir da linha de base. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados neste documento resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por CR-PCSS e/ou PR-PCSS:

1. Uma melhora de pelo menos 0,1 na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS em relação à linha de base.

2. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS avaliada ao vivo pelo médico da área de tratamento.

3. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

4. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos, ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS.

5. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo clínico da área de tratamento.

6. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

7. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos, ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS.

8. Em uma população de pacientes que tinham todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a melhora é um ou mais dentre os Nº 1 a 7 acima.

9. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou

30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

10. No Dia 180, a melhora vista na classificação CR-PCSS a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de nível 2 em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de 1 nível em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

13. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, as pontuações médias de CR-PCSS e/ou PR-PCSS do indivíduo separam-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstram melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

14. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de 2 níveis conforme medido por CR-PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40%

a 50% ou mais do que 50%.

15. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de 1 nível medida por CR- PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

16. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, mais de um terço, ou metade, ou dois terços, ou três quartos dos pacientes têm respostas de pelo menos 1 nível de CR-PCSS e/ou pelo menos 1 nível de PR-PCSS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados de CR-PCSS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

17. A redução na gravidade da celulite ocorre rapidamente dentro de cerca de 7, ou 14, ou 21, ou 30, ou 35, ou 40, ou 45, ou 50 dias após a primeira visita de tratamento.

18. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a redução máxima na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS a partir da visita de linha de base (visita de triagem) é primeiro observada no Dia 90.

19. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a melhora na gravidade da celulite (ou seja, uma alteração negativa) em um dado momento antes do Dia 180 é mantida na visita do Dia 180.

20. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 90, a alteração média (SD) na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS a partir da linha de base na nádega esquerda e na coxa esquerda é de cerca de -0,8 (0,58) e cerca de -0,6 (0,62), respectivamente, e na nádega direita e coxa direita é de cerca de -0,7 (0,73) e cerca de -0,5 (0,70), respectivamente.

21. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 180, a diminuição na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS a partir da linha de base (visita de triagem) é consistente nos lados direito e esquerdo.

22. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, uma melhora de 2 níveis na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos 1 área é observada em pelo menos 10% dos indivíduos no Dia 90 e pelo menos 15% dos indivíduos no Dia 180.

22. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, uma melhora de 2 níveis na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos 1 área é observada em pelo menos 10% dos indivíduos no Dia 90 e pelo menos 15% dos indivíduos no Dia 180, e a resposta é semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito.

24. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, uma melhora de 1 nível na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos 1 área de tratamento é observada em pelo menos 60% dos indivíduos no Dia 90 e pelo menos 65% dos indivíduos no Dia 180.

25. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, uma melhora de 1 nível na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS em pelo menos 1 área de tratamento é observada em pelo menos 60% dos indivíduos no Dia 90 e pelo menos 65% dos indivíduos no Dia 180, e a resposta é semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito.

26. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, o tempo médio para a resposta mais precoce CR-PCSS e/ou PR-PCSS de 2 níveis em pelo menos 1 área de tratamento é observada em cerca de 80 dias.

27. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, o tempo médio para a resposta mais precoce CR-PCSS e/ou PR-PCSS de 1 nível em pelo menos 1 área de tratamento é de cerca de 40 dias.

28. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 50% dos pacientes são respondentes de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71.

29. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 20% dos pacientes são respondentes de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71.

30. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 35% dos pacientes são respondentes compostos de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71.

31. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 5% dos pacientes são respondentes compostos de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71.

32. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média a partir da linha de base em PR-PCSS e/ou PR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que naqueles tratado com placebo na nádega alvo (cerca de 0,9 com relação a cerca de 0,5, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 0,9 com relação a cerca de 0,5, respectivamente) no Dia 71.

33. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a proporção de respondentes de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de 1 nível foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (cerca de 62% com relação a cerca de 40%, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 65% com relação a cerca de 40%, respectivamente) no Dia 71.

34. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média a partir da linha de base em PR-PCSS e/ou PR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratado com placebo na nádega alvo (cerca de 0,7 com relação a cerca de 0,4 [0,72], respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 0,8 com relação a cerca de 0,3, respectivamente) no Dia 71.

35. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a proporção de respondentes de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de 1 nível foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (cerca de 58% com relação a cerca de 32%, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 60% com relação a cerca de 27%, respectivamente) no Dia 71.

36. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a proporção de respondentes de PR-PCSS e/ou PR-PCSS de 1 nível foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (cerca de 42% com relação a cerca de 20%, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 44% com relação a cerca de 13%, respectivamente) no Dia 71.

37. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, os tratamentos com colagenase conforme descrito neste documento resultam em respondentes maior ou igual a 2 níveis compostos em uma população de pacientes de pelo menos 5% superior ao placebo, ou pelo menos 7,5% superior ao placebo, ou pelo menos 10% superior ao placebo, ou pelo menos 12,5% superior ao placebo, ou pelo menos 15% superior ao placebo, ou pelo menos 20% superior ao placebo.

38. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, os tratamentos com colagenase conforme descrito neste documento resultam em respondentes nível 1 composto superior ou igual em uma população de pacientes de pelo menos 5% superior ao placebo, ou pelo menos 7,5% superior ao placebo, ou pelo menos 10% superior ao placebo, ou pelo menos 12,5% superior ao placebo, ou pelo menos 15% superior ao placebo, ou pelo menos 20% superior ao placebo, ou pelo menos 25% superior ao placebo, ou pelo menos 30% superior ao placebo, ou pelo menos 35% superior ao placebo, ou pelo menos 40% superior ao placebo.

39. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a redução máxima na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS a partir da visita de linha de base (visita de triagem) é primeiro observada no Dia 22, Dia 71, ou mais cedo.

40. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, na linha de base (pré- tratamento), a diminuição na classificação CR-PCSS e/ou PR-PCSS a partir da linha de base (visita de triagem) é consistente nos lados direito e esquerdo.

[00260] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00261] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima.

[00262] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00263] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima.

[00264] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00265] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00266] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 39 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00267] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00268] Em outras modalidades, em resposta aos tratamentos acima, um paciente é um respondente de CR-PCSS de nível 2 que mostra melhora na classificação CR-PCSS de pelo menos 2 níveis a partir da linha de base (alteração de -2, -3 ou -4) em um momento de avaliação. Um respondente de CR-PCSS de nível 1 é um paciente exibindo melhora na classificação CR-PCSS de pelo menos 1 nível a partir da linha de base (alteração de -1, -2, -3 ou -4) em um momento de avaliação. Um paciente é um respondente PR-PCSS de nível 2 que mostra melhora na classificação PR-PCSS de pelo menos 2 níveis a partir da linha de base (alteração de -2,

-3 ou -4) em um momento de avaliação. Um respondente de PR-PCSS de nível 1 é um paciente exibindo melhora na classificação PR-PCSS de pelo menos 1 nível a partir da linha de base (alteração de -1, -2, -3 ou -4) em um momento de avaliação. Em outros aspectos, um respondente composto de 2 níveis é um paciente que é tanto um respondente PR-PCSS de 2 níveis quanto um respondente CR-PCSS de 2 níveis em um momento de avaliação. Um respondente composto de nível 1 é um paciente que é tanto um respondente PR-PCSS de nível 1 quanto um respondente CR-PCSS de nível 1 em um momento de avaliação.

2. Eficácia conforme Medido pela Escala de Gravidade da Celulite de Hexsel (Hexsel CSS)

[00269] Na Hexsel CSS, uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhoria de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação ou classificação média de Hexsel CSS a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação Hexsel CSS média anterior. Um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 25% da pontuação total máxima ou classificação a partir da linha de base. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por Hexsel CSS:

1. Em uma população de pacientes em que todos tinham classificações de Hexsel CSS na linha de base Dia 1, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resultou em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Mudança de grave para moderado (da pontuação de 11 a 15 para 6 a 10)

• Mudança de grave para leve (da pontuação de 11 a 15 para 1 a 5) • Mudança de grave para zero (da pontuação de 11 a 15 para 0) • Mudança de moderado para leve (da pontuação de 6 a 10 para 1 a 5) • Mudança de moderado para zero (da pontuação de 6 a 10 para 0) • Mudança de leve para zero (da pontuação de 1 a 5 para 0)

2. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade na Hexsel CSS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

3. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade na Hexsel CSS conforme avaliado pelo médico enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

4. Uma alteração demonstrada por uma resposta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade na Hexsel CSS por avaliação do médico.

5. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade na Hexsel CSS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

6. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade na Hexsel CSS conforme avaliado pelo médico enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

7. Uma alteração demonstrada por uma resposta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade na Hexsel CSS por avaliação do médico.

8. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Hexsel CSS de moderada ou grave, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a alteração é uma ou mais dentre os Nº 2 a 7 acima.

9. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

10. No Dia 180, a melhora vista na classificação Hexsel CSS a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações Hexsel CSS de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de Hexsel CSS de 2 níveis em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias ou 90 dias.

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Hexsel CSS de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de Hexsel CSS de nível 1 em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

13. Em uma população de pacientes que têm todos classificações Hexsel CSS de moderada ou grave, as pontuações médias de Hexsel CSS do indivíduo se separam do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstram melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

14. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Hexsel CSS de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de 2 níveis conforme medido por Hexsel CSS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

15. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Hexsel CSS de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de 1 nível conforme medido por Hexsel CSS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

16. Em uma população de pacientes em que todos têm classificações Hexsel CSS de moderada ou grave, mais de um terço, ou metade, ou dois terços ou três quartos dos pacientes têm pelo menos uma resposta Hexsel CSS de nível 1 em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados de Hexsel CSS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

[00270] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg

• Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00271] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima.

[00272] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão)

[00273] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima.

[00274] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00275] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00276] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00277] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2,

ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

3. Eficácia conforme Medido pela Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel

[00278] Na Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel, uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação ou classificação média de Profundidade de Depressão de Hexsel a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação de Profundidade de Depressão de Hexsel média anterior. Um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 25% da pontuação total máxima ou classificação a partir da linha de base. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel:

1. Em uma população de pacientes em que todos tinham classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel na linha de base Dia 1, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resultou em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Mudança de depressões profundas (3) para profundidade média (2) • Mudança de depressões profundas (3) para depressões superficiais (1) • Mudança de depressões profundas (3) para nenhuma depressão (0)

• Mudança de profundidade média (2) para depressões superficiais (1) • Mudança de profundidade média (2) para nenhuma depressão (0) • Mudança de depressões superficiais (1) para nenhuma depressão (0)

2. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade na Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

3. Uma alteração demonstrada por uma resposta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade na Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel por avaliação do médico.

4. Uma alteração na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade na Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

5. Uma alteração demonstrada por uma resposta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade na Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel por avaliação do médico.

6. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Hexsel CSS de moderada ou grave, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a alteração é uma ou mais dentre os Nº 2 a 7 acima.

7. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

8. No Dia 180, a melhora vista na classificação da Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

9. Em uma população de pacientes em que todos têm classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões médias ou profundas, o tempo médio para a melhora mais precoce de 2 níveis da Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

10. Em uma população de pacientes em que todos têm classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões médias ou profundas, o tempo médio para a melhora mais precoce de 1 nível da Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões médias ou profundas, as Pontuações de Profundidade de Depressão de Hexsel médias do sujeito se separa do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões moderadas ou graves, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de 2 níveis conforme medido por Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

13. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de 1 nível conforme medido por Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

14. Em uma população de pacientes em que todos têm classificações de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel de depressões médias ou profundas, mais de um terço, ou metade, ou dois terços, ou três quartos dos pacientes têm pelo menos 1 nível de resposta de Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel em pelo menos uma área de tratamento no dia 71 pós-tratamento, em que os resultados da

Pontuação de Profundidade de Depressão de Hexsel são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

15. A redução na gravidade da celulite ocorre rapidamente dentro de cerca de 7, ou 14, ou 21, ou 30, ou 35, ou 40, ou 45, ou 50 dias após a primeira visita de tratamento.

16. Uma alteração na pontuação a partir da linha de base ao Dia 71 de cerca de -0,1 a cerca de -2,0 em uma ou mais áreas de tratamento.

17. Em uma população de pacientes estatisticamente significativa, a média dos mínimos quadrados (LS) é de cerca de -0,1 a cerca de -1,5 (intervalo de confiança (CI) de 95%) para uma ou mais áreas de tratamento.

[00279] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por

HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00280] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima.

[00281] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC),

ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00282] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima.

[00283] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetada em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00284] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00285] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 19 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00286] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

4. Eficácia conforme Medido pela Escala Likert para Aparência Estética

[00287] Na Escala Likert, uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação antes do tratamento ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação Likert média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação Likert ou classificação média anterior. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido pela Pontuação da Escala Likert:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resultou em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Uma Pontuação na Escala Likert de “Melhorada” (1) • Uma Pontuação na Escala Likert de “Muito Melhorada” (2) • Uma Pontuação na Escala Likert de “Muito Mais Melhorada” (3)

2. Uma melhora na aparência da área de tratamento no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir de antes do tratamento de pelo menos 2 níveis na Pontuação na Escala Likert avaliada ao vivo pelo médico da área de tratamento.

3. Uma melhora na aparência da área de tratamento no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir de antes do tratamento de pelo menos 2 níveis na Pontuação na Escala Likert conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

4. Uma melhora na aparência da área de tratamento no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir de antes do tratamento de pelo menos 1 nível na Pontuação na Escala Likert avaliada ao vivo pelo médico da área de tratamento.

5. Uma melhora na aparência da área de tratamento no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir de antes do tratamento de pelo menos 1 nível na Pontuação na Escala Likert conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

6. Em uma população de pacientes com celulite, a melhora nos Pontuações na Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em que a melhora é uma ou mais dentre os Nº 2 a 7 acima.

7. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou

30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

8. No Dia 180, a melhora vista na classificação da Pontuação da Escala Likert a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

9. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 2 níveis na Pontuação da Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

10. Em uma população de pacientes com celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 1 nível na Pontuação da Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

11. Em uma população de pacientes que têm celulite, as Pontuações da Escala Likert médias do indivíduo separam-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstram melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

12. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de dois níveis conforme medido por Pontuação da Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou maior do que 50%.

13. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de nível 1 conforme medido pela Pontuação da Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou superior a 50%.

14. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou metade, ou dois terços ou três quartos dos pacientes têm pelo menos uma resposta de nível 1 na Pontuação da Escala Likert em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados da Pontuação da Escala Likert são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

[00288] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 15 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de

130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00289] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 15 acima.

[00290] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 15 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00291] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 15 acima.

[00292] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetada em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 15 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00293] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00294] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 15 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00295] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

5. Análise de Ondulações

[00296] Em certas modalidades, o tratamento da celulite com colagenase(s) diminui os parâmetros de tamanho de ondulação da seguinte forma: • Profundidade: Em cerca de 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25% ou 20%, ou 15%, ou 10%, ou 5% ou 2,5%, ou 2%, ou 1% • Largura: Em cerca de 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, ou 20%, ou 15%, ou 10%, ou 5%, ou 2,5%, ou 2%, ou 1% • Profundidade: Em cerca de 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25% ou 20%, ou 15%, ou 10%, ou 5% ou 2,5%, ou 2%, ou 1% • Volume Geral: Em cerca de 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25%, ou 20%, ou 15%, ou 10%, ou 5%, ou 2,5%, ou 2%, ou 1% • Área de Superfície: Em cerca de 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 25% ou 20%, ou 15%, ou 10%, ou 5% ou 2,5%, ou 2%, ou 1%

[00297] Em algumas modalidades, o tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outras modalidades, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

[00298] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em uma redução em pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA)

• Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00299] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em uma redução em pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%.

[00300] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em uma redução em pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características:

• Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00301] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de

20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em uma redução de pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%.

[00302] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em uma redução em pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00303] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00304] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em uma redução em pelo menos um dos parâmetros de tamanho de ondulação em pelo menos 5%, ou pelo menos 10% ou pelo menos 20%, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00305] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

6. Eficácia conforme Medido pela Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S-GAIS) e Escala de Melhora Estética Global do Investigador (I-GAIS)

[00306] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em respostas melhoradas, conforme medido por S-GAIS e I-GAIS. Um respondente de S-GAIS de nível 2 é um indivíduo com uma classificação S- GAIS de pelo menos 2 (+2 ou +3) em um momento de avaliação. Um respondente S-GAIS de nível 1 é um indivíduo com uma classificação S-

GAIS de pelo menos 1 (+1, +2 ou +3) em um momento de avaliação. Um respondente de I-GAIS de nível 2 é um indivíduo com uma classificação I- GAIS de pelo menos 2 (+2 ou +3) em um momento de avaliação. Um respondente I-GAIS de nível 1 é um indivíduo com uma classificação I- GAIS de pelo menos 1 (+1, +2 ou +3) em um momento de avaliação. Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação média anterior.

[00307] Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por S-GAIS e/ou I-GAIS:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Pontuação S-GAIS e/ou I-GAIS de “Melhorada” (+1) • Pontuação S-GAIS e/ou I-GAIS de “Muito Melhorada” (+2) • Pontuação S-GAIS e/ou I-GAIS de “Muito Mais Melhorada” (+3)

2. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 de pelo menos 2 níveis no I-GAIS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

3. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 de pelo menos 2 níveis no S-GAIS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

4. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 definida como um indivíduo com uma melhora de pelo menos 2 níveis no I-GAIS por avaliação do médico e um melhora de pelo menos 2 níveis no S-GAIS por avaliação do paciente.

5. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 de pelo menos 1 nível no I-GAIS conforme avaliado ao vivo pelo médico da área de tratamento.

6. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 de pelo menos 1 nível no S-GAIS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

7. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 365 ou 730 definida como um indivíduo com uma melhora de pelo menos 1 nível no I-GAIS por avaliação do médico e um melhora de pelo menos 1 nível no S-GAIS por avaliação do paciente.

8. Em uma população de pacientes com celulite, a melhora em I- GAIS e/ou S-GAIS em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com placebo, em que a melhora é uma ou mais dentre os Nº 2 a 7 acima.

9. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

10. No Dia 180, a melhora vista na classificação I-GAIS e S-GAIS foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

11. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 2 níveis na I-GAIS e/ou S-GAIS em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

12. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 1 nível na I-GAIS e/ou S-GAIS em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

13. Em uma população de pacientes que têm celulite, I-GAIS e/ou S-GAIS média do indivíduo separa-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

14. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de 2 níveis conforme medido por I-GAIS e/ou S-GAIS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou maior do que 50%.

15. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta de nível 1 conforme medido por I-GAIS e/ou S-GAIS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou maior do que 50%.

16. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou metade, ou dois terços ou três quartos dos pacientes têm pelo menos respostas I-GAIS e/ou S-GAIS de nível 1 em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados do GAIS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

18. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 60% dos pacientes são respondentes de S-GAIS de nível 1 na nádega alvo no Dia

71.

19. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 20% dos pacientes são respondentes de S-GAIS de nível 2 na nádega alvo no Dia

71.

20. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a média S- GAIS foi maior em indivíduos tratados com colagenase na nádega alvo quando comparados aos indivíduos tratados com placebo (cerca de 1,0 em relação a cerca de 0,5, respectivamente). Os resultados são semelhantes para as nádegas não alvo (cerca de 1,0 em indivíduos tratados com colagenase em relação a cerca de 0,5 em indivíduos tratados com placebo).

21. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a proporção de respondentes de S-GAIS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (cerca de 70% com relação a cerca de 40%, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 70% com relação a cerca de 40%, respectivamente).

22. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a média I- GAIS foi estatisticamente significativamente maior em indivíduos tratados com colagenase na nádega alvo quando comparados aos indivíduos tratados com placebo (cerca de 1,0 em relação a cerca de 0,3, respectivamente). Os resultados são semelhantes para as nádegas não alvo (cerca de 0,6 em indivíduos tratados com colagenase em relação a cerca de 0,1 em indivíduos tratados com placebo).

23. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a proporção de respondentes de I-GAIS de nível 1 é maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (cerca de 70% em relação a cerca de 25%, respectivamente) e na nádega não alvo (cerca de 70% em relação a cerca de 25%, respectivamente).

24. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, uma série de tabulações cruzadas mostra consistência entre PR-PCSS e S-GAIS. Uma alteração de nível de 1 no PR-PCSS foi associada a alterações semelhantes no S-GAIS.

[00308] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 24 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio

SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00309] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 24 acima.

[00310] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 24 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de

0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00311] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 24 acima.

[00312] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetada em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 24 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00313] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00314] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 24 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00315] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00316] Conforme adicionalmente descrito nos Exemplos 2 e 3, os pacientes foram classificados quanto à melhora após o tratamento em comparação com a linha de base usando S-GAIS para as nádegas alvo e não alvo. Conforme mostrado na Figura 11, o tratamento com CCH foi significativamente melhor do que o placebo, conforme mostrado pelas respostas > nível 2 e > nível 1 medidas por S-GAIS.

7. Eficácia conforme Medido por PR-CIS

[00317] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em respostas melhoradas, conforme medido por PR-CIS. A pontuação total do PR-CIS é a soma dos seis itens nas escalas. A pontuação total do PR- CIS pode variar de 0 a 60, com números mais altos refletindo um impacto mais negativo da celulite. O item #1 no PR-CIS questionando o quão feliz o indivíduo está com sua aparência de celulite é revertido subtraindo a avaliação relatada do indivíduo de 10. Para a pontuação total do PR-CIS, um respondente é um indivíduo com uma redução na pontuação total do PR-CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base em um momento de avaliação. Para pontuações de impacto PR-CIS individuais, a resposta é uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 intervalos de pontuação em cada momento. Além disso, um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 20% da pontuação total máxima a partir da linha de base. Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Além disso, uma melhora é uma alteração a partir da linha de base de pelo menos 1 nível em 60.

[00318] Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por PR-CIS:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • O PR-CIS mostra melhora em pelo menos um domínio selecionado a partir do grupo consistindo em felicidade com a aparência da celulite, incômodo, constrangimento, vergonha, parecer mais velho e parecer acima do peso/fora de forma • Uma redução na pontuação total do PR-CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação

• Pontuações de impacto PR-CIS mostrando melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 intervalos de pontuação em um ou mais momentos de avaliação • Uma melhora é uma alteração a partir da linha de base de pelo menos 1 nível em 60.

2. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 12 pontos no PR-CIS para a área de tratamento.

3. Em uma população de pacientes com celulite, uma melhora estatisticamente significativa na gravidade em relação ao placebo no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré-tratamento Dia 1) de pelo menos 12 pontos no PR- CIS para a área de tratamento.

4. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

5. No Dia 180, a melhora vista na classificação PR-CIS a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

6. Em uma população de pacientes com celulite, o tempo médio para uma redução na pontuação total PR-CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação para pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

7. Em uma população de pacientes que têm celulite, a pontuação PR-CIS média do indivíduo separa-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

8. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou mais da metade, ou mais de dois terços, ou mais de três quartos dos pacientes têm uma redução na pontuação total PR-CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação em pelo menos uma área de tratamento no dia 71 pós-tratamento, em que os resultados de PR-CIS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

9. A redução na gravidade da celulite ocorre rapidamente dentro de cerca de 7, ou 14, ou 21, ou 30, ou 35, ou 40, ou 45, ou 50 dias após a primeira visita de tratamento.

10. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média a partir da linha de base da Pontuação Total PR-CIS no Dia 71 é de cerca de -10 em indivíduos tratados com colagenase em relação a cerca de -5 em indivíduos tratados com placebo.

11. Em uma população de pacientes que têm classificações de CR- PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média de PR-CIS a partir da linha de base no Dia 71 é estatisticamente significativamente favorável para indivíduos tratados com colagenase em relação a indivíduos tratados com placebo em pontuação total (cerca de -12 em relação a -6, respectivamente) e pontuação abreviada (cerca de -10 em relação a 5, respectivamente), bem como pontuações de impacto individual (felicidade com a aparência da celulite, incômodo, constrangimento, vergonha, aparência velha e preocupação com a forma corporal).

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a proporção de respondentes PR-CIS é maior em indivíduos tratados com colagenase do que naqueles tratados com placebo para pontuação total (cerca de 45% em relação a 20%, respectivamente) e para a pontuação abreviada (cerca de 50% em relação a 25%, respectivamente). Além disso, a proporção de respondentes para cada pontuação de impacto individual foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo. Essas diferenças também foram estatisticamente significativas.

[00319] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA)

[00320] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 12 acima.

[00321] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 12 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA)

• Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00322] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima.

[00323] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00324] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00325] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00326] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00327] Conforme descrito nos Exemplos 2 e 3, os pacientes foram avaliados quanto à melhora após o tratamento em comparação com a linha de base usando PR-CIS para CCH em relação ao placebo. Conforme mostrado na Figura 11, o tratamento com CCH foi significativamente melhor do que o placebo.

8. Eficácia conforme Medido por PR-CIS Abreviado

[00328] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em respostas melhoradas, conforme medido por PR-CIS Abreviado. A pontuação total do PR-CIS Abreviado será a soma dos cinco itens das escalas. A pontuação total do PR-CIS Abreviado pode variar de 0 a 50, com números mais altos refletindo um impacto mais negativo da celulite. O item #1 no PR-CIS questionando o quão feliz o indivíduo está com sua aparência de celulite será revertido subtraindo a avaliação relatada do indivíduo de 10. Para a pontuação total do PR-CIS Abreviado, um respondente é um indivíduo com uma redução na pontuação total do PR- CIS de pelo menos 10 a partir da linha de base em um momento de avaliação. Para pontuações de impacto do PR-CIS Abreviado individuais, a resposta é uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 intervalos de pontuação em cada momento. Além disso, um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 20% da pontuação total máxima a partir da linha de base. Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Além disso, uma melhora é uma alteração a partir da linha de base de pelo menos 1 nível em 50.

[00329] Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por PR-CIS Abreviado:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • O PR-CIS Abreviado mostra melhora em pelo menos um domínio selecionado a partir do grupo consistindo em felicidade com a aparência da celulite, incômodo, constrangimento, vergonha, parecer mais velho e parecer acima do peso/fora de forma • Uma redução na pontuação total do PR-CIS Abreviado de pelo menos 10 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação • Pontuações de impacto no PR-CIS Abreviado mostrando melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 intervalos de pontuação em um ou mais momentos de avaliação

• Além disso, uma melhora é uma alteração a partir da linha de base de pelo menos 1 nível em 50

2. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 12 pontos no PR-CIS Abreviado para a área de tratamento.

3. Em uma população de pacientes com celulite, uma melhora estatisticamente significativa na gravidade em relação ao placebo no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré-tratamento Dia 1) de pelo menos 10 pontos no PR- CIS Abreviado para a área de tratamento.

5. No Dia 180, a melhora vista na classificação do PR-CIS Abreviado a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

6. Em uma população de pacientes com celulite, o tempo médio para uma redução na pontuação total do PR-CIS Abreviado de pelo menos 10 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação para pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

7. Em uma população de pacientes que têm celulite, a pontuação do PR-CIS Abreviado média do indivíduo separa-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

8. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou mais da metade, ou mais de dois terços, ou mais de três quartos dos pacientes têm uma redução na pontuação total do PR-CIS Abreviado de pelo menos 10 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós- tratamento, em que os resultados de PR-CIS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

10. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média a partir da linha de base da Pontuação Total do PR-CIS Abreviado no Dia 71 é de cerca de -10 em indivíduos tratados com colagenase em relação a cerca de -5 em indivíduos tratados com placebo.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a alteração média do

PR-CIS Abreviado a partir da linha de base no Dia 71 é estatisticamente significativamente favorável para indivíduos tratados com colagenase em relação a indivíduos tratados com placebo em pontuação total (cerca de -12 em relação a -6, respectivamente) e pontuação abreviada (cerca de -10 em relação a 5, respectivamente), bem como pontuações de impacto individual (felicidade com a aparência da celulite, incômodo, constrangimento, vergonha, aparência velha e preocupação com a forma corporal).

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a proporção de respondentes do PR-CIS Abreviado é maior em indivíduos tratados com colagenase do que naqueles tratados com placebo para pontuação total (cerca de 45% em relação a 20%, respectivamente) e para a pontuação abreviada (cerca de 50% em relação a 25%, respectivamente). Além disso, a proporção de respondentes para cada pontuação de impacto individual foi maior em indivíduos tratados com colagenase do que em indivíduos tratados com placebo. Essas diferenças também foram estatisticamente significativas.

[00330] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA)

[00331] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 9 acima.

[00332] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 12 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA)

• KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00333] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima.

[00334] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00335] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00336] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 12 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00337] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

9. Eficácia conforme Medido pela Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS)

[00338] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em melhorias medidas por SSRS. Um respondente SSRS é um indivíduo que está pelo menos ligeiramente satisfeito (ligeiramente satisfeito [4], muito satisfeito [5] ou extremamente satisfeito [6]) com a aparência da celulite em uma área afetada em um momento de avaliação. Além disso, um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 17% da pontuação total máxima a partir da linha de base. Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por Classificação SSRS:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resultou em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Uma Classificação SSRS de “Ligeiramente satisfeito” • Uma Classificação SSRS de “Satisfeito” • Uma Classificação SSRS de “Extremamente satisfeito”

2. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos dias a partir da linha de base (pré-tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis na Classificação SSRS da área de tratamento.

3. Uma melhora no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível na Classificação SSRS da área de tratamento.

4. Em uma população de pacientes com celulite, a melhora nas Classificações SSRS em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo em que a melhora é um ou mais dentre os Nº 2 a 3 acima.

5. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

6. No Dia 180 após a primeira injeção, a melhora vista na Classificação SSRS a partir da linha de base foi consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

7. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 2 níveis na Classificação SSRS em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

8. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce de 1 nível na Classificação SSRS em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

9. Em uma população de pacientes que têm celulite, a Classificação SSRS média do indivíduo separa-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

10. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de dois níveis conforme medido por Classificação SSRS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou maior do que 50%.

11. Em uma população de pacientes que têm celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de nível 1 conforme medido pela Classificação SSRS em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de a partir de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou superior a 50%.

12. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou metade, ou dois terços ou três quartos dos pacientes têm pelo menos respostas na Classificação SSRS de nível 1 em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados da Classificação SSRS são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

13. A redução na gravidade da celulite ocorre rapidamente dentro de cerca de 7, ou 14, ou 21, ou 30, ou 35, ou 40, ou 45, ou 50 dias após a primeira visita de tratamento.

14. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 40% dos pacientes são respondentes de SSRS de nível 1 no Dia 71.

15. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 71, a pontuação média de SSRS é estatisticamente significativamente maior em indivíduos tratados com colagenase do que naqueles tratados com placebo.

16. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 50% dos pacientes são respondentes a SSRS de 1 nível.

[00339] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 16 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA)

[00340] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 16 acima.

[00341] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 16 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg

• Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00342] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 16 acima.

[00343] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 16 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00344] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00345] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 16 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00346] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

10. Eficácia conforme Medido pela Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite (SSCT)

[00347] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em melhorias medidas por SSCT. Um sujeito com uma resposta de “Satisfeito” ou “Muito Satisfeito” na avaliação de SSCT no Dia 71 é considerado um respondente mostrando eficácia. Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Além disso, para SSCT, uma melhoria é de pelo menos 0,1 em comparação com placebo. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por Classificação SSCT:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resultou em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • Uma Classificação SSCT de “Satisfeito” • Uma Classificação SSCT de “Muito Satisfeito”

2. Aumento na classificação SSCT (por exemplo, 1 a 2, etc.) no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos da área de tratamento.

3. Em uma população de pacientes com celulite, um aumento nas Classificações SSCT em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativo em comparação com placebo, em que a melhora é no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos na Classificação SSCT da área de tratamento.

4. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

5. No Dia 180, a melhora vista na Classificação SSCT é consistente nas áreas de tratamento direita e esquerda.

6. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para a melhora mais precoce na Classificação SSCT em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

7. Em uma população de pacientes que tem celulite, as Classificações SSCT médias do indivíduo separam-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após os tratamentos subsequentes.

8. Em uma população de pacientes com celulite, a porcentagem de indivíduos que têm uma Classificação SSCT melhorada em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou maior que 50%.

9. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou metade, ou dois terços ou três quartos dos pacientes têm pelo menos respostas na Classificação SSCT em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados da Classificação SSCT são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

10. A redução na gravidade da celulite ocorre rapidamente dentro de cerca de 7, ou 14, ou 21, ou 30, ou 35, ou 40, ou 45, ou 50 dias após a primeira visita de tratamento.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, no Dia 180, mais da metade dos pacientes está satisfeita ou muito satisfeita com o tratamento.

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, a diminuição nas classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS sustentada no Dia 180 juntamente com as pontuações na pesquisa de satisfação do indivíduo demonstra que três sessões de tratamento de 0,84 mg de CCH administrado como 12 injeções subcutâneas por tratamento são (x2 áreas de tratamento) para nádegas bilaterais ou coxas bilaterais é eficaz na redução da celulite.

13. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, pelo menos 50% dos pacientes tratados com colagenase estão satisfeitos ou muito satisfeitos com seu tratamento da celulite.

14. Em uma população de pacientes que têm todos classificações CR-PCSS e/ou PR-PCSS de moderada ou grave, há uma diferença estatisticamente significativa nas pontuações médias de satisfação do indivíduo no Dia 71 entre os grupos de tratamento com colagenase e placebo.

[00348] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 14 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA)

[00349] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 14 acima.

[00350] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 14 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina

• Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00351] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 14 acima.

[00352] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 14 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00353] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00354] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando o Tratamento I e resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 14 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00355] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

11. Eficácia conforme Medido pela Gravidade da Celulite da Coxa - Paciente (TCS-P); Gravidade da Celulite da Coxa – Médico (TCS-C)

[00356] Uma melhora para o paciente individual em qualquer visita é uma melhora de pelo menos 1 nível ou 1 classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação ou classificação anterior. Uma melhora para um grupo de pacientes em qualquer visita é uma melhora de cerca de 0,1 na pontuação média ou classificação a partir da linha de base ou qualquer pontuação média ou classificação anterior. Um respondente é qualquer paciente mostrando uma melhora de pelo menos 20% da pontuação total máxima ou classificação a partir da linha de base. Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por TCS-C e/ou TCS-P:

1. Uma melhoria de pelo menos 0,1 na classificação TCS-C e/ou TCS-P em relação à linha de base.

2. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade no TCS-C avaliada ao vivo pelo médico da coxa alvo.

3. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no TCS-P conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da área de tratamento.

4. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos, ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no TCS-C e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no TCS-P.

5. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no TCS-C avaliada ao vivo pelo médico da coxa alvo.

6. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no TCS-P conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da coxa alvo.

7. Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos, ou 5 anos definida como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no TCS-C e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no TCS-P.

8. Em uma população de pacientes que tinham todos classificações de TCS-C de moderada ou grave, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a melhora é uma ou mais dentre os Nº 1 a 7 acima.

10. No Dia 180, a melhora vista na classificação TCS-C e/ou TCS- P a partir da linha de base foi consistente nas coxas direita e esquerda.

11. Em uma população de pacientes que têm todos classificações TCS-C de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de nível 2 de TCS-C e/ou TCS-P em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

12. Em uma população de pacientes que têm todos classificações

TCS-C de moderada ou grave, o tempo médio para a melhora mais precoce de 1 nível TCS-C e/ou TCS-P em pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

13. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de TCS-C de moderada ou grave, as pontuações médias de TCS-C e/ou TCS-P do indivíduo separam-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstram melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

14. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de TCS-C de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de 2 níveis conforme medido por TCS-C e/ou TCS- P em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

15. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de TCS-C de moderada ou grave, a porcentagem de indivíduos que têm uma resposta composta de 1 nível medida por TCS-C e/ou TCS-P em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 é de cerca de 1% a 10%, 10% a 20%, 20% a 30%, 30% a 40%, 40% a 50% ou mais do que 50%.

16. Em uma população de pacientes que têm todos classificações de TCS-C de moderada ou grave, mais de um terço, ou metade, ou dois terços, ou três quartos dos pacientes têm respostas de pelo menos 1 nível de TCS-C e/ou pelo menos 1 nível de TCS-P em pelo menos uma área de tratamento no Dia 71 pós-tratamento, em que os resultados de TCS-C são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

[00357] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg

[00358] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 17 acima.

[00359] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg

• Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00360] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima.

[00361] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00362] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00363] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 17 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00364] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

12. Eficácia conforme Medido por Body-Q

[00365] Os métodos de tratamento detalhados acima resultam em respostas melhoradas conforme medido por Body-Q. Para a celulite, há 16 itens em escala tendo opções de resposta do paciente variando de “nem um pouco” a “extremamente incomodado” ao longo do período da semana anterior e supondo um nível de leitura de grau Flesch-Kincaid. A pontuação varia de 16 (extremamente incomodado) a 64 (nem um pouco). Para a pontuação total do Body-Q, um respondente é um sujeito com um aumento na pontuação total do Body-Q de pelo menos 16 a partir da linha de base em um momento de avaliação. Para pontuações de impacto individuais do Body-Q, a resposta é uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 intervalo de pontuação em cada momento. Em modalidades alternativas, os itens em escala podem ser mais ou menos do que 16, e um respondente é qualquer paciente mostrando pelo menos uma melhora de 25% da pontuação total máxima a partir da linha de base.

[00366] Em certas modalidades, os métodos de tratamento detalhados acima resultam em um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por Body-Q:

1. Em uma população de pacientes com celulite, a injeção de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um número estatisticamente significativo de tais pacientes atendendo um ou mais dos seguintes pontos finais de eficácia: • O Body-Q mostra melhorias em pelo menos um domínio selecionado a partir do grupo consistindo em: o Um aumento na pontuação total do Body-Q de pelo menos 16 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação; o para pontuações de impacto individuais do Body-Q, uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 intervalo de pontuação em cada momento; e o pelo menos uma melhora de 25% da pontuação total máxima a partir da linha de base.

• Um aumento na pontuação total do Body-Q de pelo menos 16 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação • Pontuações de impacto do Body-Q mostrando melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 intervalo de pontuação em um ou mais momentos de avaliação • Alteração média a partir da linha de base na estimativa Body-Q da celulite no Dia 90 e/ou Dia 180

2. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos dias a partir da linha de base (pré- tratamento "Dia 1") de um aumento de pelo menos 16 pontos no Body-Q para a nádega-alvo.

3. Em uma população de pacientes com celulite, uma melhora estatisticamente significativa na gravidade em relação ao placebo no Dia 22, 43, 71, 90, 180, 251, 360, 431, 720, 3 anos, 4 anos ou 5 anos a partir da linha de base (pré-tratamento Dia 1) conforme indicado por uma melhora de pelo menos 16 pontos no Body-Q para a nádega alvo.

4. O tratamento resultou em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré- tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Em certos casos, pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40%, ou 50% dos pacientes mantiveram tal nível por pelo menos 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 2 anos, ou 3 anos, ou 4 anos, ou 5 anos após a dose inicial. Em outros casos, os tratamentos resultaram em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré- tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após a dose inicial. Alguns tratamentos resultaram em pelo menos 10%, ou 20%, ou 30%, ou

40% ou 50% dos pacientes demonstrando melhora juntamente com um aumento adicional na melhora em 1 mês, ou 3 meses, ou 6 meses, ou 9 meses, ou 12 meses, ou 18 meses, ou 24 meses após o tratamento inicial, ou segundo tratamento, ou terceiro tratamento.

5. No Dia 180 após a primeira injeção, a melhora vista na classificação do Body-Q a partir da linha de base foi consistente nas nádegas direita e esquerda.

6. Em uma população de pacientes que têm celulite, o tempo médio para um aumento na pontuação total Body-Q de pelo menos 16 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação para pelo menos uma área de tratamento é de cerca de 15 dias, ou 20 dias, ou 30 dias, ou 40 dias, ou 50 dias, ou 60 dias, ou 70 dias, ou 80 dias, ou 90 dias.

7. Em uma população de pacientes que têm celulite, a pontuação Body-Q média do indivíduo separa-se do placebo 21 dias após o primeiro tratamento e demonstra melhora contínua e significativa após tratamentos subsequentes.

8. Em uma população de pacientes que têm celulite, mais de um terço, ou mais da metade, ou mais de dois terços, ou mais de três quartos dos pacientes têm um aumento na pontuação total do Body-Q de pelo menos 16 a partir da linha de base em um ou mais momentos de avaliação em pelo menos uma área de tratamento no dia 71 pós-tratamento, em que os resultados do Body-Q são independentes da idade, IMC ou cor da pele.

[00367] Em outra modalidade, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 9 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características:

• Vmax(min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00368] Em outros casos, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de

20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 9 acima.

[00369] Em outra instância, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de colagenase de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 9 acima, em que a colagenase tem uma ou mais das seguintes características: • Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA) • KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA) • Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA) • 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA) • Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA) • Uma massa molecular a partir de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa. • Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HMLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão) • Potência (ou seja, atividade específica) de cerca de 500 a cerca de 30.000 unidades de SRC/mg • Potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f- SRC/mg • Potência de cerca de 100.000 a cerca de 400.000 unidades de GPA/mg • Potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f- GPA/mg

• Potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg • Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina • Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL

[00370] Em outro exemplo, a injeção de cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de CCH de acordo com o Tratamento I resulta em um ou mais dentre os resultados Nº 1 a 9 acima.

[00371] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado em pelo menos uma área de tratamento durante pelo menos uma visita de tratamento e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 9 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00372] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

[00373] Em certas modalidades, cerca de 1 mg a cerca de 20 mg de uma razão aproximada de 1:1 de colagenase Tipo I e colagenase Tipo II é injetado empregando Tratamento I e resulta em um ou mais dos resultados Nº 1 a 9 acima, em que as colagenases I e II têm as seguintes características: • Tipo I o Ensaio: Microplaca de SRC o Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 o KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar o Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 • Tipo II o Ensaio: Microplaca de GPA o Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 o KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 o Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 o 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 o Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

[00374] Outras razões podem ser empregadas (por exemplo, 0,1- 2:1, ou 0,25-2:1, ou 0,5-2:1, ou 0,75-2:1, ou 1:0,1-2, ou 1:0,25-2, ou 1:0,5-2, ou 1:0,75-2, ou 1:0, ou 0:1). Além disso, as colagenases Tipo I e Tipo II podem ser AUX-I e AUX-II, respectivamente.

13. Avaliação do Efeito do Tratamento conforme Medido por Fotografia/Imagens 3-D

[00375] Introdução. A fotografia ou outras imagens 3-D podem ser usadas na avaliação do efeito do tratamento, em particular para as análises de ondulações e hematomas. A análise de ondulações (conforme definido acima) usando imagens 3-D pode incluir cálculos de volume,

comprimento, largura e área de ondulações. Os cálculos podem ser realizados por vários métodos conhecidos, tal como aqueles descritos em Eckhouse et al. WO 2018/116304 e WO 2018/116305, Cherry Imaging e aqueles disponíveis na Canfield Scientific, Inc. Tais medições de volume, comprimento, largura e área de superfície podem ser calculadas usando imagens digitais em escala de cinza 3-D (com característica de rotação dos eixos X e Y) e imagens digitais texturizadas e iluminadas 3-D (com característica de rotação X e Y), com um programa de computador que analisa tais imagens. Em uma modalidade, para uma área tratada da nádega, podem ser tiradas imagens da nádega esquerda tratada e/ou nádega direita tratada para cada paciente antes e após o tratamento. Em outra modalidade, para uma área tratada da coxa, as imagens podem ser tiradas de cada uma das áreas tratadas da coxa dos lados posterior, oblíquo e lateral do indivíduo em, por exemplo, 0 graus, 45 graus e 90 graus antes e após o tratamento.

[00376] Médicos e pacientes podem usar fotografias e ferramentas de imagem para averiguar a gravidade da celulite com ou sem as escalas e outras ferramentas descritas neste documento. Em uma modalidade, o médico/investigador ou designado qualificado fotografa cada área de tratamento (por exemplo, cada nádega ou cada coxa) usando uma câmera 3-D padronizada provida de uma maneira padronizada. O indivíduo comparece para cada sessão de fotografia e veste um vestuário fotográfico padronizado. O médico/investigador ou designado qualificado fotografa cada uma das 2 áreas de tratamento (por exemplo, 2 nádegas ou 2 coxas) enquanto o indivíduo está em pé em uma postura relaxada consistente e padronizada. Essas fotografias e as imagens descritas acima podem ser usadas nas análises de eficácia descritas abaixo. Detalhes adicionais não limitativos e opcionais para a metodologia são apresentados abaixo.

[00377] Análise de Imagem por Fotografia 3-D. A averiguação do efeito do tratamento é realizada por fotografia 3-D. O investigador ou designado qualificado fotografa cada área de tratamento (ambas as nádegas ou ambas as coxas) antes das injeções usando uma câmera digital padronizada de maneira padronizada, antes e após marcar ondulações e locais de injeção nos Dias de tratamento 1, 22 e 43. Um único conjunto de fotografias é tirado de cada área de tratamento na triagem e todas as outras visitas sem dosagem. As fotografias tiradas nos Dias 4, 8, 15, 22, 43 e 71 (final do estudo/ET) são revisadas por um avaliador central cego para o braço de tratamento e o dia da visita de estudo.

[00378] Os procedimentos de análise de imagem (IA) padrão usados para avaliar hematomas, volume, área de superfície e comprimento/largura máximos são discutidos abaixo. O sistema de câmera pode ser um IntelliStudio disponível na Canfield Scientific equipado com iluminação personalizada, uma câmera Vectra Ml e software Canfield Capture (v. 3.5). Os tipos de imagem, atributos, vistas e janelas de visita são definidos e inseridos diretamente em um Sistema de Monitoramento Digital (DMS). Uma configuração de estudo em DMS continha o seguinte: Tipo de Atributo Nomes dos Atributos (categoria) Tipo de Imagem 2-D, 3-D, Folhas de Contato Cartão de Identidade, Nádega Esquerda Posterior, Nádega Direita Posterior, Coxa Esquerda Lateral, Coxa Esquerda Oblíqua, Coxa Esquerda Posterior, Coxa Direita Posterior, Coxa Direita Oblíqua, Coxa Vista Direita Lateral Monitoramento em Tempo Real Monitoramento em Tempo Real

[00379] As imagens são capturadas e organizadas em DMS e disponíveis para revisão. As visitas fotográficas podem incluir: Triagem, Dia 1/Pré-Marcação, Dia 1/Pós-Marcação, Dia 4, Dia 8, Dia 15, Dia 22/Pré-

Marcação, Dia 22/Pós-Marcação, Dia 43/Pré-Marcação, Dia 43 Pós- Marcação e Dia 71/ET.

[00380] Análise de Ondulações: As imagens são revisadas para garantir que uma ondulação primária seja marcada com um “X” conforme instruído em cada quadrante. Se uma ondulação primária não estiver marcada, as seguintes etapas são tomadas:

1. A(s) imagem(ns) e o local das imagens são exportados para um PowerPoint.

2. O local é contatado e solicita ao investigador do local que marque a ondulação primária com um X na imagem dentro do PowerPoint.

3. A correspondência é salva e compartilhada com a equipe de análise de imagem (IA).

[00381] A análise de ondulações é realizada nos Dias 1 (pré- marcação), 22, 43 e 71. A observação e a alteração da imagem de pré- marcação do Dia 1 nos parâmetros de análise de ondulações, comprimento máximo, largura máxima, área de superfície e volume entre a base da ondulação e a superfície interpolada são resumidos no Dia 22, 43 e 71 por área de tratamento e tipo de injeção usando estatística descritiva (uma análise de ondulações exemplar é representada nas Figuras 19(A) - 19(C)). Além disso, o volume é analisado usando o modelo linear.

[00382] Um técnico de análise de imagem (IAT) usa a imagem de marcação do Dia I-Pós como uma referência para determinar a localização da ondulação alvo na imagem de marcação do Dia 1-Pré. Um tracejado é feito em torno da borda da concavidade da ondulação na marcação do Dia 1-Pré. O tracejado da ondulação é transposto para as imagens do Dia 22- Pré Marcação, Dia 43-Pré Marcação e do Dia 71/ET. Este tracejado é usado para medir o (i) comprimento máximo (ou seja, a maior distância em linha reta através da ondulação); (ii) largura máxima (ou seja, a maior distância em linha reta perpendicular à medida de comprimento máximo); (iii) área de superfície da ondulação; e (iv) volume entre a base da ondulação e a superfície interpolada.

[00383] Análise de Hematomas: As imagens são revisadas para garantir que uma etiqueta de referência branca esteja presente em cada imagem e fora da área do hematoma. Se a etiqueta de referência não estiver presente ou obstruindo a área machucada, uma nova sessão de fotos é solicitada, se aplicável para aquela visita. A análise de hematomas é realizada nos Dias 1 (pré-marcação), 4, 8 e 15.

[00384] Análise de Marcação do Local: As imagens são revisadas para garantir que as ondulações sejam marcadas na visita do Dia 1 Pós- Marcação. Se as ondulações não estiverem marcadas, uma nova sessão de fotos será solicitada se aplicável para aquela visita.

[00385] Fluxo de Trabalho de Análise de Imagem (IA): Todas as imagens selecionadas para análise são atribuídas a números de rastreamento aleatórios que cegam os técnicos de análise de imagem (IAT) para informações, tais como local de investigação, identificador secundário de indivíduo e/ou braço de tratamento. O procedimento de análise realizado em uma visita em particular é pré-determinado com base no nome da visita. A análise de ondulação é realizada na ondulação primária pré-identificada e incluirá medidas de volume, área de superfície e comprimento/largura máximos. A análise do hematoma incluiu medições de cor L*a*b* na área machucada percebida e uma área fora do hematoma percebido na pele não afetada. A Análise de Marcação do Local consiste no comprimento/largura máximos, além de uma medição da área de superfície do tracejado.

[00386] Registro de Imagem: Mediante recepção de uma visita do Dia 1 Pré-Marcação (Linha de Base), um IAT abre a imagem de pré- marcação no software Vectra Analysis Module (VAM) e centraliza a imagem na grade no espaço 3-D. Usando a grade como uma referência, o (IAT) posiciona a imagem da linha de base para que o centro aproximado da imagem seja colocado na origem da grade. A coxa/nádega está voltada para frente na direção +z, a parte superior da coxa/nádega aponta na direção +y e a parte inferior da coxa/nádega aponta na direção -y (Figura 13). Todos os momentos subsequentes, incluindo a imagem do Dia 1 pós- marcação, são registrados na posição da imagem da linha de base na grade usando uma função de registro algorítmica.

[00387] Um mapa cor por distância é produzido dentro do VAM que o IAT usa para revisar o registro. O mapa cor por distância representa a distância entre os dois (2) modelos de imagem com base em uma escala de cores de +5 a -5 milímetros (mm) (Figura 14). O IAT garante que a maior parte da imagem seja colorida de verde, indicando que há uma distância insignificante entre as duas imagens e que elas estão apropriadamente alinhadas. Cor Distância a partir da Linha de Base Verde distância 0 ou insignificante Ciano→Azul Distância Positiva (Até +5 mm) Amarelo → Vermelho Distância Negativa (Até -5 mm)

[00388] Processamento de Rastreamento de Superfície: Após o registro de imagem, as imagens do Dia 1 (Pré-Marcação), Dia 4, Dia 8, Dia 15, Dia 22, Dia 43 e Dia 71 recebem processamento de rastreamento de superfície. O IAT primeiro usa um script para criar um modelo de malha de alta densidade da imagem do Dia 1, Linha de Base. Uma imagem de acompanhamento por vez é aberta no software VAM junto com a Linha de Base e o modelo de malha. Os marcos de referência de rastreamento são colocados em características de pele identificáveis como referências. O script de rastreamento é executado para criar e salvar programaticamente três (3) novas imagens 3-D, uma imagem de Linha de Base rastreada, uma imagem de acompanhamento rastreada e uma imagem de Controle de Qualidade (QC) que é o formato da imagem de acompanhamento rastreada e transmite informações acerca da qualidade do rastreamento.

[00389] Um IAT de verificação de qualidade analisa a qualidade da imagem de acompanhamento rastreada e da imagem de QC para verificar um rastreamento bem-sucedido. Para visitas que recebem análise de ondulações, o IAT também sobrepõe a imagem de QC sobre a imagem de acompanhamento rastreada para garantir que não haja grandes buracos na imagem de QC na região da ondulação primária. Um buraco na malha da imagem de QC indica uma perda de informações de rastreamento na área de queda. No caso de o IAT considerar o rastreamento inaceitável devido à perda de informações dentro de uma área para análise, os marcos de referência de rastreamento são ajustados e o script de rastreamento é executado novamente. O IAT nota instâncias inevitáveis de baixa qualidade de rastreamento de superfície que resultam de brilho, sombra profunda, marcas na pele deixadas pela roupa, grandes alterações na posição do indivíduo ou grande alteração na pigmentação da pele. Furos na malha da imagem de QC são esperados em áreas com bastantes hematomas.

[00390] Delineação da Área de Interesse de Ondulação Primária (API): Depois do rastreamento de superfície bem-sucedido, um IAT abre a imagem da Linha de Base rastreada e registra a imagem de Marcação do Dia 1-Pós no VAM. Na imagem do Dia 1-Pós Marcação, o IAT traça a borda externa da marcação do local da ondulação principal. Esse tracejado é usado para medir a área de superfície da marcação do local, o maior eixo ao longo da marcação do local (Comprimento da Ondulação Máximo) e o comprimento de seu maior eixo perpendicular (Largura da Ondulação Máxima). Esse tracejado não é usado para delinear uma AOI para a análise de Ondulações ou Hematomas. Nos casos em que uma ondulação primária não é identificado pelo local, o IAT traceja a ondulação que ele/ela percebeu ser a maior.

[00391] O IAT usa a imagem do Dia 1 - Pós-Marcação é usada como uma referência para localizar a ondulação alvo na imagem do Dia 1 - Pré-Marcação. O IAT então traça a fronteira da ondulação primária na imagem pré-marcação rastreada. O tracejado é ajustado conforme necessário até que esteja logo fora da crista na qual a ondulação se tornou côncava e delineou a AOI da ondulação primária para a análise de ondulações. (Figura 15). O tracejado de ondulação na imagem pré-

marcação é transposto para as imagens de acompanhamento do Dia 22, Dia 43 e Dia 71 com base na relação de rastreamento de superfície única de cada imagem de acompanhamento com a linha de base (Figura 16). O IAT nota quaisquer instâncias de baixa qualidade de imagem afetando a AOI transposta.

[00392] Delineação da Área de Interesse (AOI) do Hematoma: O IAT cria uma AOI de “Tecido Machucado”, um único tracejado contínuo em torno do perímetro do maior hematoma perceptível na imagem do Dia 4 (Figura 17). O IAT traça o perímetro onde ele/ela pode determinar uma diferença na pigmentação da pele entre a pele machucada e a pele não afetada. A pele é considerada machucada se exibir pigmentação azul/roxa, verde ou amarela/marrom distinguível do tom de pele circundante. No caso onde nenhum hematoma pode ser distinguido na imagem do Dia 4, o indivíduo é reprovado para propósitos de análise de hematomas.

[00393] Além disso, o IAT cria um segundo tracejado, a AOI de “Tecido Normal”. A AOI de Tecido Normal é criada em uma área da pele não afetada por distorções na textura da pele causadas por linhas de compressão da roupa, vermelhidão anormal ou características da pele tais como acne ou tecido cicatricial. Quando possível e aplicável, a AOI de Tecido Normal tenta corresponder a qualquer sombra, iluminação ou brilho presente ao longo da curvatura da AOI de Tecido Machucado do Dia 1 Pré- Marcação. O tamanho e o formato da AOI de Tecido Normal variam entre os indivíduos, dependendo da quantidade de pele de aparência natural disponível. Uma vez tracejado, o IAT transpõe tanto o Tecido Machucado quanto a AOI de Tecido Normal da imagem do Dia 4 para as imagens do Dia 1-Pré-Marcação, Dia 8 e Dia 15 com base em sua relação de rastreamento de superfície com a imagem do Dia 4. No caso de uma AOI de Tecido Machucado ou AOI de Tecido Normal se estender além dos limites de outras visitas de análise de hematomas para um indivíduo em particular ou lado do indivíduo, as AOIs são ajustadas até estarem consistentes em todas as visitas.

[00394] O IAT traça manualmente a etiqueta de referência branca nas imagens do Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, Dia 8 e Dia 15 e identifica o tracejado como "Branco". Se a etiqueta de referência branca for colocada dentro da área machucada, o IAT traça a borda da etiqueta e a subtrai da AOI do machucado em cada visita afetada. No caso onde nenhuma etiqueta de referência branca está presente em uma imagem, essa imagem é reprovada para propósitos de análise de hematomas.

[00395] Verificações de Controle de Qualidade (QC): As verificações de QC são realizadas por um IAT independente do IAT que realiza a análise das imagens. Um conjunto separado de verificações de QC é executado dependendo do procedimento de análise para uma dada visita. Quaisquer ajustes feitos pelo IAT de QC ao longo das verificações de QC são anotados e o QC refeito por outro IAT antes de passar para análise. Antes de iniciar o QC, o IAT de QC revisa quaisquer notas feitas pelo IAT original acerca dos problemas de qualidade de imagem.

[00396] Medições de Análise: Após as imagens passarem pelo QC, o IAT de análise revisa as notas do IAT de QC. O IAT de análise então executa um procedimento de análise com script. Os pontos finais do procedimento e da análise diferem entre as imagens, dependendo da dada visita. Para análise de volume de ondulação, uma superfície interpolada é criada na parte superior da AOI de ondulação primária. Uma medida de volume representa o espaço entre a superfície interpolada e a base da ondulação.

[00397] A área de superfície é medida como a área de superfície total da AOI de ondulação primária ou AOI de tracejado de local no caso da imagem Dia 1-Pós-Marcação. O Comprimento de Ondulação Máximo é medido como o maior eixo ponto a ponto em toda a AOI de ondulação primária. A Largura de Ondulação Máxima é medida como a maior distância ponto a ponto perpendicular ao Eixo do Comprimento de Ondulação

Máximo.

[00398] A análise de hematomas consiste em duas medições de cor L*a*b*. Os valores de cor L*a*b* são medidos nas AOIs de Tecido Machucado e Tecido Normal (Figura 18 (A)). A tabela a seguir resume as análises que podem ser realizadas (Tabela 19). Tabela 19. Resumo da Análise de Hematomas Categoria de Análise Nome da Análise Unidades de Análise Momento de Análise Ondulação Volume cc Dia 1 Pré-Marcação, Dia 22, Dia 43 e Dia 71 Ondulação Área de Superfície mm2 Dia 1 Pré-Marcação, Dia 1 - Pós-Marcação, Dia 22, Dia 43 e Dia 71 Ondulação Comprimento da mm Dia 1 Pré-Marcação, Dia 1 Ondulação Máximo Pós-Marcação, Dia 22, Dia 43 (Linha Reta de e Dia 71 Comprimento Máximo) Ondulação Largura da Ondulação mm Máxima (Linha Reta de Dia 1 Pré-Marcação, Dia 1 Largura Perpendicular Pós-Marcação, Dia 22, Dia 43 Máxima) e Dia 71 Cor Valor de cor L* Tecido Machucado L* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (MachucadoL) Dia 8, Dia 15 Cor Tecido Machucado a* valor de cor a* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (Machucado a) Dia 8, Dia 15 Cor Tecido Machucado b* valor de cor b* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (Machucado b) Dia 8, Dia 15 Cor Tecido Normal L* Valor de cor L* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (Normal L) Dia 8, Dia 15 Cor Tecido Normal a* valor de cor a* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (Normal a) Dia 8, Dia 15

Cor Tecido Normal b* valor de cor b* Dia 1 Pré-Marcação, Dia 4, (Normal b) Dia 8, Dia 15

[00399] Aceitando dados: Uma vez que a análise da imagem for concluída, o IAT de análise aceita a imagem ou reprova a imagem para análise. As imagens podem reprovar parcialmente, por exemplo, uma visita de Pré-Marcação do Dia 1 pode reprovar na análise de hematomas por não ter nenhum hematoma visível no Dia 4, mas ainda é aceitável para análise de Ondulações. Todas as reprovações recebem uma Nota de Reprovação obrigatória detalhando porque o modelo de imagem é inaceitável para análise. A reprovação da imagem pode ser devido a fatores como baixa qualidade de imagem, baixa qualidade de rastreamento ou obstruções dentro de uma AOI. As imagens são recomendadas para reprovação pelo QC IAT e revisadas pelo IAT de análise. Se o IAT de análise concordar com a recomendação de reprovação, a imagem é reprovada.

[00400] Análise de Hematomas. Tecido machucado e tecido normal são avaliados em fotografias 3D usando duas medições de cor L*A*B* no Dia 1, 4, 8 e 15 (Figura 18 (B)). Quanto maior for a medição da intensidade da cor L*A*B*, pior será o hematoma. A alteração na percepção visual entre duas cores do tecido machucado com relação ao tecido normal para cada área de tratamento e tipo de injeção são determinados. G. DURABILIDADE DO EFEITO

[00401] Os tratamentos de colagenase descritos neste documento têm durabilidade em eficácia, conforme medido por qualquer uma das escalas ou métodos de avaliação divulgados neste documento. Tal durabilidade pode variar de cerca de 3 meses a 5 anos ou mais. Uma única injeção ou série de injeções pode manter uma melhora na celulite ou continuar a melhorar a aparência da celulite ou reduzir a gravidade da aparência da celulite por um longo período de tempo, por exemplo, cerca de 6 meses, 1 ano, 2 anos, 3 anos, 4 anos ou 5 anos ou mais.

[00402] Em uma certa modalidade, os pacientes que recebem injeções de colagenase continuam a exibir um ≥1 ponto de melhora a partir da linha de base para uma ou tanto as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 6 meses após o tratamento, ou têm um ≥1 ponto de melhora a partir da linha de base para uma ou tanto a pontuação de CR- PCSS quanto de PR-PCSS a cerca de 12 meses após o tratamento. Adicionalmente, tais pacientes têm um ≥1 ponto de melhora a partir da linha de base para uma ou tanto a pontuação de CR-PCSS quanto de PR-PCSS a cerca de 22 dias, 43 dias, 90 dias ou 180 dias após o tratamento. Por exemplo, pelo menos cerca de 10%, ou 15%, ou 20%, ou 25%, ou 30%, ou 35%, ou 40%, ou 45%, ou 50%, ou 55%, ou 60%, ou 65%, ou 70%, ou 75%, ou 80%, ou 85%, ou 90%, ou 95%, ou 100% dos pacientes demonstram tal durabilidade.

[00403] Em outro aspecto, o método de tratamento avalia a durabilidade do efeito de respondentes composto de nível 2 (pacientes que tiveram uma melhora de pelo menos nível 2 de gravidade da celulite em tanto PR-PCSS quanto CR-PCSS), resultando em um número estatisticamente significativo que demonstra durabilidade do efeito em 6 meses e 12 meses após o tratamento. Em certas modalidades, pelo menos cerca de 10%, ou 15%, ou 20%, ou 25%, ou 30%, ou 35%, ou 40%, ou 45%, ou 50%, ou 55%, ou 60%, ou 65%, ou 70%, ou 75%, ou 80%, ou 85%, ou 90%, ou 95%, ou 100% de pacientes demonstram tal durabilidade.

[00404] Exemplos não limitantes de durabilidade incluem: a. A diminuição nas classificações de CR-PCSS é mantida até o Dia 180, juntamente com as pontuações na Escala de Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite, suportam a eficácia de 3 sessões de tratamento de 0,84 mg da CCH administrada como 12 injeções subcutâneas por área de tratamento (x 2 áreas de tratamento) nas nádegas bilaterais ou nas coxas bilaterais. b. No Dia 180, a diminuição na classificação CR-PCSS a partir da linha de base (Visita de Triagem) são consistentes nos lados direito e esquerdo.

c.

Uma melhora de nível 2 na classificação CR-PCSS em pelo menos 1 área de tratamento é observada no Dia 180. A resposta é semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito. d.

Uma melhora de nível 1 na classificação CR-PCSS em pelo menos 1 área é observada no Dia 180. A resposta é semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito. e.

O tempo médio para a resposta mais precoce CR-PCSS de nível 2 em pelo menos 1 área é observado em 83 dias. f.

O tempo médio para a resposta mais precoce CR-PCSS de nível 1 é de 41 dias. g.

No Dia 180, mais da metade dos pacientes estava ou satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento. h.

O período de tempo que a pontuação de um paciente na Hexsel CSS foi classificada pela primeira vez como moderado (6-10) ou leve (1-5) e continuou a ser classificado como moderado (6-10) ou leve (15) em comparação com sua classificação de linha de base como grave (11- 15). i.

O período de tempo medido a partir da data de uma melhora medida até a data em que o paciente retorna à linha de base ou piora após ter demonstrado a melhora medida por um ou mais dos CR-PCSS, PR- PCSS, Hexsel CSS, pontuação de profundidade de depressão Hexsel, Escala Likert, análise de Ondulação, I-GAIS, S-GAIS, PR-CIS, PR-CIS abreviado, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, Body-Q, avaliação por fotografia ou outra imagem, ou qualquer outro escala fotonumérica validada ou outra escala usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente. j.

Um período de tempo medido a partir da data da melhora medida até a data em que um indivíduo tem uma perda observável de resposta ao tratamento, conforme medido por um ou mais dos CR-PCSS,

PR-PCSS, Hexsel CSS, pontuação de profundidade de depressão Hexsel, Escala Likert, análise de Ondulação, I-GAIS, S-GAIS, PR-CIS, PR-CIS Abreviado, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, Body-Q, avaliação por fotografia ou outra imagem, ou qualquer outra escala fotonumérica validada ou outra usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente. k. Um período de tempo medido a partir do momento de referência da resposta ao tratamento até quando o indivíduo tem uma alteração na resposta (incluindo uma melhora em relação à resposta inicial ao tratamento). Alteração na resposta e/ou melhora pode ser medida por um ou mais dos CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS, pontuação de profundidade de depressão Hexsel, Escala Likert, análise de Ondulação, I- GAIS, S-GAIS, PR-CIS, PR-CIS Abreviado, SSRS, SSCT, TCS-C, TCS-P, Body-Q, avaliação por fotografia ou outra imagem, ou qualquer outra escala fotonumérica validada ou outra usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente. Em algumas modalidades, o momento de referência é a linha de base (pré- dose, Dia 1) ou Dia 71 após o tratamento. l. Um período de tempo medido a partir da data da visita que um indivíduo se tornou um respondente composto de nível 2 de acordo com o CR-PCSS e PR-PCSS até a primeira data de 2 visitas sequenciais em que as classificações de avaliação retornam e são mantidas para as classificações de linha de base. m. Um período de tempo medido a partir da data da visita que um indivíduo se tornou um respondente composto de nível 1 de acordo com o CR-PCSS e PR-PCSS até a primeira data de 2 visitas sequenciais em que as classificações de avaliação retornam e são mantidas para as classificações de linha de base. H. SEGURANÇA DAS INJEÇÕES DE COLAGENASE

[00405] Os estudos realizados até o momento, alguns dos quais são detalhados nos Exemplos abaixo, estabelecem a segurança dos tratamentos descritos neste documento. Por exemplo, esses estudos confirmam a falta de exposição sistêmica de colagenase após administração subcutânea concomitante de 3,36 mg de CCH em quatro áreas de tratamento. Na verdade, não foram observadas novas preocupações no perfil de segurança da colagenase com a administração concomitante em quatro áreas de tratamento. Os eventos comumente relatados foram consistentes com o perfil de eventos adversos atualmente conhecido da colagenase.

[00406] A maioria dos indivíduos tratados com CCH experienciaram pelo menos um TEAE que era de gravidade leve a moderada. Não houve diferenças notáveis nos indivíduos que experienciaram um TEAE na região da coxa ou nádega. O tipo mais comum de TEAEs foram reações no local de injeção, especificamente hematomas no local de injeção, que não diferiram entre as regiões de tratamento (nádega ou coxa). A maioria dos TEAEs se solucionaram dentro de 21 dias. Não houve alterações clinicamente significativas nos parâmetros laboratoriais clínicos e hematológicos, resultados da análise de urina, sinais vitais ou medicamentos concomitantes. Não houve verificações clinicamente relevantes em indivíduos com anticorpos antidrogas ou anticorpos neutralizantes.

[00407] Conforme descrito neste documento e mostrado nas Figuras 16-18, análises de hematomas podem ser realizadas para medir a extensão de hematomas ao longo do tempo. Em certas modalidades, qualquer hematoma causado pelos tratamentos com colagenase pode solucionar ou diminuir significativamente a intensidade da cor em cerca de 3 dias, ou 4 dias, ou 5 dias, ou 6 dias, ou 7 dias, ou 8 dias, ou 9 dias, ou 10 dias, ou 11 dias, ou 12 dias, ou 13 dias, ou 14 dias, ou 15 dias, ou 20 dias após uma visita de tratamento. I. EXEMPLOS

[00408] Os exemplos a seguir são incluídos para demonstrar certas modalidades da presente divulgação. Aqueles versados na técnica devem, contudo, à luz da presente divulgação, apreciar que modificações podem ser feitas nas modalidades específicas que são divulgadas e ainda obter um resultado semelhante ou similar sem se afastar do espírito e do escopo da invenção. Portanto, todos as questões apresentadas devem ser interpretadas como ilustrativas e não em um sentido limitante. Por exemplo, nos estudos que empregam CCH, outras colagenases podem ser usadas em uma quantidade suficiente (quantidade terapeuticamente eficaz) para produzir a atividade e resposta comparável à CCH. Nos resultados dos ensaios clínicos descritos abaixo, deve ser entendido que cada valor numérico relatado não pretende ser estritamente limitante. O escopo da presente divulgação inclui variações em torno de cada valor que são consistentes com os fatos e Princípios das invenções descritos neste documento. Por conseguinte, cada valor pode variar para cima ou para baixo em cerca de 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100%. Em algumas instâncias e de acordo com o contexto e as circunstâncias de um valor em particular, ele pode variar para cima ou para baixo em cerca de 125%, 150%, 175%, 200%, 225%, 250%, 275% ou 300%. EXEMPLO 1 - ESTUDO CLÍNICO DE CCH PARA O TRATAMENTO DE EFP (Estudo 205)

[00409] Um estudo de Fase 2 aberto foi realizado, no qual indivíduos com níveis leves, moderados ou graves de celulite em pelo menos 2 regiões de tratamento bilateral (ou seja, nádegas bilaterais ou coxas posterolaterais bilaterais) foram administrados CCH na região de tratamento atribuída nos Dias 1, 22 e 43. Visitas de acompanhamento foram realizadas nos Dias 90 e 180 para todos os indivíduos e em um subconjunto de indivíduos, em 1, 3, 6 e 13 dias após cada sessão de tratamento. Nas visitas de acompanhamento dos Dias 90 e 180 (ou seja, 89 e 179 dias após o Dia 1, respectivamente) ocorreram para avaliar a eficácia do tratamento (subestudo fotográfico). A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias" conforme usado neste estudo 205 foram relativos à dose inicial (Dia 1) no estudo 205.

[00410] A CCH usada foi um pó liofilizado estéril compreendendo 0,9 mg de colagenase clostridio histolítico, 0,5 mg de ácido clorídrico, 18,5 mg de sacarose e 1,1 mg de trometamina em uma massa liofilizada. O diluente de CCH estéril para reconstituição era cloreto de cálcio a 0,03% di- hidratado em solução de cloreto de sódio a 0,6%, 2,0 mL por frasco.

[00411] Os indivíduos eram do sexo feminino, saudáveis, não grávidas, com 18 anos de idade ou mais, com duas áreas de tratamento bilateral (ou seja, ambas as nádegas ou ambas as coxas) na visita de triagem com uma pontuação de 2 (leve) ou mais, conforme relata a pontuação de gravidade da celulite fotonumérica (CR-PCSS) relatado pelo médico e uma pontuação da Escala de Severidade de Celulite Hexsel (CSS) não superior a 13. Os indivíduos eram excluídos se exibissem qualquer uma das seguintes condições: distúrbio de coagulação; evidência ou histórico de malignidade (exceto carcinoma basocelular), a menos que não tenha ocorrido recorrência em pelo menos 5 anos; histórico de cicatriz queloidal ou cicatrização anormal de feridas; ou doenças ou condições concomitantes que possam ter interferido na condução do estudo, confundido a interpretação dos resultados do estudo ou colocado em risco o bem-estar do indivíduo.

[00412] Foi administrado aos indivíduos uma dose máxima de 1,68 mg de CCH por sessão de tratamento. Uma dose de 0,84 mg de CCH foi administrada com 12 injeções subcutâneas por área de tratamento (ou seja, cada nádega ou cada coxa). A CCH foi administrada a cada indivíduo durante três sessões de tratamento, cada uma ocorrendo com pelo menos 21 dias de intervalo. A dose cumulativa de CCH foi de 5,04 mg (ou seja, três visitas de tratamento x 0,84 mg por área de tratamento x 2 áreas de tratamento).

[00413] Para cada Ondulação selecionada para o tratamento, os locais de injeção foram escolhidos. Cada local de injeção foi marcado com um ponto usando um marcador cirúrgico. Para ondulações redondas, o ponto foi colocado no centro da Ondulação. Para ondulações alongadas, os pontos foram espaçados aproximadamente 2 cm ao longo do eixo mais longo da Ondulação. Se uma Ondulação exigisse mais de 1 injeção, os locais de injeção dentro da Ondulação eram espaçados aproximadamente 2 cm, localizando pelo menos um local de injeção no nadir da Ondulação, se presente. O marcador cirúrgico foi então usado para circundar cada uma das ondulações selecionadas para o tratamento. Os círculos na área de tratamento selecionada não se sobrepõem. Vide, por exemplo, a Figura 6.

[00414] A CCH foi injetada por via subcutânea enquanto o indivíduo estava em uma posição prona usando uma seringa com uma agulha de ½ polegada de calibre 30. Conforme mostrado na Figura 7, cada local de injeção recebeu uma única injeção na pele de CCH administrada como três alíquotas de 0,1 mL para as Posições A, B e C, para um volume total de injeção de 0,3 mL. A profundidade da injeção é de ½ polegada, correspondendo ao comprimento da agulha de tratamento desde as pontas da agulha até a base da agulha, sem pressão para baixo. Em cada local de injeção, a agulha foi posicionada a 90°, perpendicular à superfície da pele e inserida, e uma alíquota de 0,1 mL da CCH foi injetada (Posição A). A agulha foi ligeiramente retirada (mas não removida da pele) e reposicionada a 45° da vertical em direção a cabeça e acima do eixo longo da Ondulação, e uma alíquota de 0,1 mL de CCH foi injetada (Posição B). A agulha foi novamente ligeiramente retirada e reposicionada aproximadamente a 45° da vertical na direção dos pés e abaixo do eixo longo da Ondulação, e uma alíquota de 0,1 mL de CCH foi injetada (Posição C). Após a injeção, o indivíduo permanece prono por 5 minutos.

[00415] Eficácia. A eficácia de CCH para o tratamento da celulite foi analisada pelo médico usando a classificação CR-PCSS.

A diminuição máxima na classificação CR-PCSS a partir da visita de linha de base (visita de triagem) foi observada primeiro no Dia 90. Esta melhora na gravidade da celulite (ou seja, uma alteração negativa) foi mantida na visita do Dia 180. A maioria dos indivíduos tinham pontuações de classificação CR-PCSS de leve a moderada no início do estudo.

No Dia 90, a alteração média (SD) na classificação CR- PCSS da linha de base da nádega esquerda e coxa esquerda foi -0,8 (0,58) e -0,6 (0,62), respectivamente, e na nádega direita e coxa direita foi - 0,7 (0,73) e -0,5 (0,70), respectivamente.

As pontuações de CR-PCSS por região e visita são fornecidas na Tabela 20. Tabela 20. Classificações CR-PCSS e alteração da linha de base por visita.

Classificação CR- CCH (1,68 mg) Estatística PCSS Nádega (N=62) Coxa (N=82) Lado Esquerdo Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 23 (37,1) 43 (52,4) Moderado (3) n (%) 33 (53,2) 34 (41,5) Grave (4) n (%) 6 (9,7) 5(6,1) Não realizado n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Média 2,7 2,5 SD 0,63 0,61 Dia 22 Média 2,3 2,3 SD 0,84 0,65 Alteração a partir da linha de base Média -0,4 -0,3 SD 0,70 0,53 Dia 43 Média 2,1 2,1 SD 0,70 0,70 Alteração a partir da linha de base Média -0,6 -0,5

SD 0,56 0,58 Dia 90 Média 2,0 1,9 SD 0,79 0,67 Alteração a partir da linha de base Média -0,8 -0,6 SD 0,58 0,62 Dia 180 Média 1,9 1,9 SD 0,86 0,82 Alteração a partir da linha de base Média -0,8 -0,6 SD 0,65 0,69 Lado Direito Classificação CR- Estatística CCH (1,68 mg) PCSS Nádega (N=62) Coxa (N=82) Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 22 (35,5) 38 (46,3) (1) Moderado (3) n (%) 34 (54,8) 38 (46,3) Grave (4) n (%) 6 (9,7) 6 (7,3) Não realizado n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Média 2,7 2,6 SD 0,63 0,62 Dia 22 Média 2,4 2,3 SD 0,79 0,70 Alteração a partir da linha de base Média -0,3 -0,3 SD 0,54 0,54 Dia 43 Média 2,1 2,1 SD 0,75 0,76 Alteração a partir da linha de base Média -0,6 -0,5 SD 0,56 0,62 Dia 90 Média 2,0 1,9 SD 0,76 0,77

Alteração a partir da linha de base Média -0,8 -0,7 SD 0,64 0,61 Dia 180 Média 2,0 2,1 SD 0,87 0,86 Alteração a partir da linha de base Média -0,7 -0,5 SD 0,73 0,70 SD = desvio padrão

[00416] Sessenta e nove indivíduos tiveram suas nádegas bilaterais tratadas e oitenta e nove indivíduos tiveram suas coxas bilaterais tratadas. Uma melhora de nível 2 na gravidade da celulite na pontuação de CR-PCSS da linha de base foi observada em pelo menos um tratamento em 17 (13,4%) dos indivíduos avaliáveis no Dia 90 e 20 (15,3%) dos indivíduos avaliáveis (62 indivíduos tratados nas nádegas e 82 indivíduos tratados nas coxas) no Dia 180. O tempo médio para atingir a resposta mais precoce de nível 2 em pelo menos uma área de tratamento foi de 83 dias. A proporção de respondentes de CR-PCSS de nível 2 e o tempo médio para uma resposta de CR-PCSS de nível 2 foi semelhante para indivíduos tratados no lado esquerdo e no lado direito e semelhante para as regiões tratadas de coxa e nádega. Esses resultados são fornecidos na Tabela 21. Tabela 21. Respondentes de dois níveis nas classificações CR- CPSS. 1,68 mg de CCH Respondentes Estatística Nádega de Dois níveis Coxa (N=82) Geral (N=144) (N=62) Esquerda Dia 22 Sim n (%) 3 (5,1) 1 (1,3) 4 (2,9) Não n (%) 56 (94,9) 77 (98,7) 133 (97,1) Dia 43

Sim n (%) 1 (1,7) 3 (4,1) 4 (3,0) Não n (%) 58 (98,3) 71 (95,9) 129 (97,0) Dia 90 Sim n (%) 4 (7,1) 4 (5,6) 8 (6,3) Não n (%) 52 (92,9) 67 (94,4) 119 (93,7) Dia 180 Sim n (%) 6 (10,7) 7 (9,3) 13 (9,9) Não n (%) 50 (89,3) 68 (90,7) 118 (90,1) Tempo para o respondente de nível 2 mais precoce (dias) N 7 9 16 Média 54,0 108,8 84,8 SD 33,38 72,59 63,59 Mediana 44,0 85,0 66,5 Mínimo 21 23 21 Máximo 91 191 191 Direita Dia 22 Sim n (%) 2 (3,4) 2 (2,6) 4 (2,9) Não n (%) 57 (96,6) 76 (97,4) 133 (97,1) Dia 43 Sim n (%) 1 (17) 5 (6,8) 6 (4,5) Não n (%) 58 (98,3) 69 (93,2) 127 (95,5) Dia 90

Respondentes Estatística 1,68 mg de CCH Nádega Coxa (N=82) Geral (N=144) de Dois níveis Sim n (%) (N=62) 6 (10,7) 6 (8,5) 12 (9,4) Não n (%) 50 (89,3) 65 (91,5) 115 (90,6) Dia 180 Sim n (%) 8 (14,3) 7 (9,3) 15 (11,5) Não n (%) 50 (89,3) 65 (91,5) 115 (90,6) Tempo para o respondente de nível 2 mais precoce (dias) N 11 11 22 Média 97,5 80,2 88,9 SD 59,86 57,38 57,90 Mediana 85,0 61,0 84,5 Mínimo 21 21 21 Máximo 184 191 191 Pelo menos uma de duas áreas (Esquerda e Direita) Dia 22 Sim n (%) 3 (5,1) 3 (3,8) 6 (4,4)

Não n (%) 56 (94,9) 75 (96,2) 131 (95,6) Dia 43 Sim n (%) 2 (3,4) 6 (8,1) 8 (6,0) Não n (%) 57 (96,6) 68 (91,9) 125 (94,0) Dia 90 Sim n (%) 8 (14,3) 9 (12,7) 17 (13,4) Não n (%) 48 (85,7) 62 (87,3) 110 (86,6) Dia 180 Sim n (%) 11 (19,6) 9 (12,0) 20 (15,3) Não n (%) 45 (80,4) 66 (88,0) 111 (84,7) Tempo para o respondente de nível 2 mais precoce (dias) N 13 15 28 Média 80,6 80,9 80,8 SD 53,19 57,63 54,58 Mediana 84,0 61,0 83,0 Mínimo 21 21 21 Máximo 184 191 191

[00417] Aproximadamente três quartos dos indivíduos experienciaram pelo menos uma resposta de nível 1 em pelo menos uma área de tratamento no Dia 90. Uma melhora de nível 1 na gravidade da celulite no CR-PCSS a partir da linha de base em pelo menos 1 área de tratamento foi observada em 96 (75,6%) indivíduos avaliáveis no Dia 90 e 90 (68,7%) indivíduos avaliáveis no Dia 180. O tempo médio para atingir a resposta mais precoce de nível 1 em pelo menos 1 área foi observado em 41 dias. A proporção de respondentes CR-PCSS de nível 1 para indivíduos tratados no lado esquerdo e direito foi semelhante e similar para regiões tratadas das coxas e nádegas. O tempo médio para atingir a resposta mais precoce CR-PCSS de nível 1 nos lados esquerdo e direito foi idêntico em 43 dias. Esses resultados estão resumidos na Tabela 22. Tabela 22. Respondentes de um nível nas classificações CR-CPSS 1,68 mg de CCH Respondentes Estatística Nádega de Nível um Coxa (N=82) (N=62) Geral (N=144) Esquerda Dia 22 Sim n (%) 21 (35,6) 22 (28,2) 43 (31,4)

Não n (%) 38 (64,4) 56(71,8) 94 (68,6) Dia 43 Sim n (%) 36 (61,0) 33 (44,6) 69 (51,9) Não n (%) 23 (39,0) 41 (55,4) 64 (48,1) Dia 90 Sim n (%) 38 (67,9) 42 (59,2) 80 (63,0) Não n (%) 18 (32,1) 29 (40,8) 47 (37,0) Dia 180 Sim n (%) 39 (69,6) 43 (57,3) 82 (62,6) Não n (%) 17 (30,4) 32 (42,7) 49 (37,4) Tempo para o respondente de nível 1 mais precoce (dias) N 51 58 109 Média 56,0 61,0 58,7 DS 49,22 47,83 48,32 Mediana 42,0 43,0 43,0 Mínimo 20 20 20 Máximo 205 186 205 Direita Dia 22 Sim n (%) 18 (30,5) 23 (29,5) 41 (29,9) Não n (%) 41 (69,5) 55 (70,5) 96 (70,1) Dia 43 Sim n (%) 36 (61,0) 34 (45,9) 70 (52,6) Não n (%) 23 (39,0) 40 (54,1) 63 (47,4) Dia 90 Sim n (%) 36 (64,3) 45 (63,4) 81 (63,8) Não n (%) 20 (35,7) 26 (36,6) 46 (36,2) Respondentes 1,68 mg de CCH Estatística Nádega de Nível um Coxa (N=82) Geral (N=144) (N=62) Dia 180 Sim n (%) 34 (60,7) 36 (48,0) 70 (53,4) Não n (%) 22 (39,3) 39 (52,0) 61 (46,6) Tempo para o respondente de nível 1 mais precoce (dias) N 48 58 106 Média 50,9 54,2 52,7 DS 41,78 35,37 38,25 Mediana 42,5 43,0 43,0 Mínimo 20 20 20 Máximo 205 186 205 Pelo menos uma de duas áreas (esquerda e direita)

Dia 22 Sim n (%) 24 (40,7) 31 (39,7) 55 (40,1) Não n (%) 35 (59,3) 47 (60,3) 82 (59,9) Dia 43 Sim n (%) 43 (72,9) 44 (59,5) 87 (65,4) Não n (%) 16 (27,1) 30 (40,5) 46 (34,6) Dia 90 Sim n (%) 42 (75,0) 54 (76,1) 96 (75,6) Não n (%) 14 (25,0) 17(23,9) 31 (24,4) Dia 180 Sim n (%) 40 (71,4) 50 (66,7) 90 (68,7) Não n (%) 16 (28,6) 25 (33,3) 41 (31,3) Tempo para o respondente de nível 1 mais precoce (dias) N 53 67 120 Média 46,9 50,4 48,8 DS 40,76 38,85 39,57 Mediana 41,0 42,0 41,0 Mínimo 20 20 20 Máximo 205 186 205

[00418] A eficácia de CCH para o tratamento da celulite também foi analisada pelos indivíduos usando as pontuações de satisfação do indivíduo (Escala de Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite). No Dia 180, dos 130 respondentes avaliáveis, mais da metade (56,1%) estavam ou satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento. A proporção de indivíduos tratados que estavam satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento nas nádegas foi de 71,5%. A proporção de indivíduos satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento nas coxas foi de 44,6%. Esses resultados estão resumidos na Tabela 23. Tabela 23. Satisfação do indivíduo com o tratamento de CCH avaliada no final do estudo.

Resposta do 1,68 mg de CCH Estatística Nádega Indivíduo Coxa (N=82) Geral (N=144) (N=62) Muito satisfeito (2) N (%) 16 (28,6) 9 (12,2) 25 (19,2) Satisfeito (1) N (%) 24 (42,9) 24 (32,4) 48 (36,9) Nem satisfeito ou N (%) 9 (16,1) 23 (31,1) 32 (24,6) insatisfeito (0) Insatisfeito (-1) N (%) 4 (7,1) 8 (10,8) 12 (9,2)

Muito Insatisfeito (-2) N (%) 3 (5,4) 10 (13,5) 13 (10,0) Média 0,8 0,2 0,5 SD 1,10 1,20 1,20

[00419] Outras conclusões acerca da eficácia incluem o seguinte:

[00420] 1. No Dia 180, a diminuição na classificação CR-PCSS a partir da linha de base (Visita de Triagem) foi consistente nos lados direito e esquerdo. A alteração na classificação CR-PCSS média (SD) da Linha de base da nádega e coxa esquerda (- 0,8 [0,65] e -0,6 [0,69] com relação a nádega e coxa direita (-0,7 [0,73] e -0,5 [0,70]) foi semelhante.

[00421] 2. Uma melhoria de nível 2 na classificação CR-PCSS em pelo menos 1 área foi observada em 17 (13,4%) indivíduos avaliáveis no Dia 90 e 20 (15,3%) indivíduos avaliáveis no Dia 180. A resposta foi semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito.

[00422] 3. Uma melhora de nível 1 na classificação CR-PCSS em pelo menos 1 área de tratamento foi observada em 96 (75,6%) indivíduos avaliáveis no Dia 90 e 90 (68,7%) indivíduos avaliáveis no Dia 180. A resposta foi semelhante para as regiões das nádegas e coxas e para os lados esquerdo e direito.

[00423] 4. O tempo médio para a resposta mais precoce de CR- PCSS de nível 2 em pelo menos 1 área de tratamento foi observada em 83 dias (variação: 21, 191). O tempo médio para a resposta mais precoce de CR PCSS de nível 1 em pelo menos 1 área de tratamento foi observada em 41 dias (variação: 20, 205).

[00424] 5. No Dia 180 (final do estudo/final do tratamento), mais da metade dos respondentes avaliáveis (56,1%) estavam ou satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento (satisfeitos: 48 [36,9%]) ou muito satisfeitos: (25 [19,2%]).

[00425] 6. A diminuição nas classificações de CR-PCSS sustentada no Dia 180 juntamente com as pontuações na pesquisa de satisfação do indivíduo demonstra que foi eficaz três sessões de tratamento de 0,84 mg de CCH administrado com 12 injeções subcutâneas por tratamento são (x2 áreas de tratamento) para nádegas bilaterais ou coxas bilaterais.

[00426] Segurança. A maioria dos indivíduos tratados com CCH experienciaram pelo menos um evento adverso emergente do tratamento que foi de gravidade leve a moderada. Não houve diferenças notáveis nos indivíduos que experienciaram um evento adverso emergente do tratamento na região tratada da coxa ou nádega. O tipo mais comum de eventos adversos foram reações no local de injeção, especificamente hematomas no local de injeção, que não diferiram entre as regiões de tratamento.

[00427] O estudo também inclui um subestudo fotográfico durante o qual os indivíduos voltaram à clínica para tirar fotografias em 1, 3, 6 e 13 dias após cada curso de tratamento para coincidir com as visitas de acompanhamento. As imagens fotográficas das regiões da coxa e das nádegas dos 37 indivíduos participantes do subestudo fotográfico nos 2 locais de estudo foram organizadas por local, por indivíduo, cronologicamente por visita de estudo e cumulativamente como colagens da respectiva área de tratamento (nádega esquerda, nádega direita, coxa esquerda e coxa direita). Os investigadores preencheram um Questionário projetado para capturar observações gerais da aparência de hematomas no local de injeção após a revisão das imagens e colagens de fotos. Os investigadores observaram que os hematomas no local de injeção eram graves 3 e 6 dias após a sessão de tratamento, solucionados antes da sessão seguinte de tratamento e geralmente se tornavam menos graves a cada sessão de tratamento. A descoloração que persistiu foi atribuída à coloração de hemossiderina.

[00428] A análise da reação no local de injeção relacionada com o tratamento por sessões de tratamento mostrou uma tendência de uma diminuição da incidência e duração das reações no local de injeção com as sessões de tratamento subsequentes, com a maioria se solucionando dentro de 21 dias. Durante as Sessões de Tratamento 1, 2 e 3, a proporção de indivíduos que experienciaram eventos adversos emergentes do tratamento que se solucionaram em 21 dias ou menos foi de 76,7%, 85,2% e 71%, respectivamente. EXEMPLO 2 - ESTUDO CLÍNICO DE FASE 3 DE CCH PARA O TRATAMENTO DE EFP (Estudo 302)

[00429] Um estudo de Fase 3, randomizado, duplo-cego, controlado por placebo foi realizado, no qual indivíduos com níveis moderados ou graves de celulite foram administrados com CCH em cada nádega na região de tratamento atribuída nos Dias 1, 22 e 43. A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias" conforme usado neste estudo 302 foram relativos à dose inicial (Dia 1) no estudo 302. A CCH para a composição de celulite era um pó liofilizado estéril que compreende 0,92 mg de colagenase clostrídio histolítico, sacarose, Tris, manitol e ácido clorídrico qs para pH 8,5. O diluente CCH estéril para reconstituição como 0,6% de cloreto de sódio e 0,03% de cloreto de cálcio desidratado em água. Os indivíduos foram avaliados nos Dias 1, 22, 43 e 71. Os indivíduos eram do sexo feminino, não grávidas, saudáveis, com 18 anos de idade ou mais, tendo uma pontuação de 3 ou 4 (moderada ou grave) na visita de triagem e na primeira sessão de tratamento antes do tratamento, usando tanto a pontuação fotonumérica de gravidade da celulite relatada pela paciente (PC- PCSS) e pontuação fotonumérica da gravidade da celulite relatada pelo médico (CR-PCSS).

[00430] Foi administrado aos indivíduos uma dose máxima de 1,68 mg de CCH por sessão de tratamento ou placebo. Uma dose de 0,84 mg de CCH foi administrada com 12 injeções subcutâneas por nádega. A CCH foi administrada a cada indivíduo durante três sessões de tratamento, cada uma ocorrendo aproximadamente com 21 dias de intervalo. A dose cumulativa de CCH foi de 5,04 mg (ou seja, três visitas de tratamento x 0,84 mg por área de tratamento x 2 áreas de tratamento). A CCH foi injetada da mesma maneira descrita no Exemplo 1 e ilustrada na Figura 7. Ambas as nádegas de um indivíduo receberam tratamento com CCH ou tratamento com placebo, dependendo de qual grupo de tratamento foram atribuídos de maneira randomizada.

[00431] As seguintes populações de indivíduos estavam entre as populações que foram analisadas:

[00432] A População com Intenção de Tratar (ITT) incluiu todos os indivíduos randomizados que receberam pelo menos 1 injeção da droga de estudo. Todos os resumos demográficos e de características de linha de base foram com base nesta população. Os parâmetros de eficácia primária e secundária principais foram com base nesta população.

[00433] A População com Intenção de Tratar Modificada (mITT) incluiu todos os indivíduos ITT com uma linha de base e pelo menos 1 avaliação pós-injeção tanto de CR-PCSS quanto de PR-PCSS para tanto as nádegas alvo quanto as não alvo. Todas as avaliações de eficácia secundárias e de suporte foram com base na População mITT.

[00434] O médico selecionou ondulações em cada nádega que eram bem definidas, evidentes quando o indivíduo estava em pé e adequadas para o tratamento. Como o objetivo do tratamento era melhorar a aparência estética de cada nádega inteira, o médico foi instruído a selecionar ondulações que provavelmente melhorariam a aparência estética de cada nádega inteira. A mesma Ondulação dentro de uma nádega ou ondulações diferentes com uma nádega podem ser tratadas em cada sessão de tratamento, mas a injeção deve ter sido dentro das nádegas. Cada nádega recebeu todos os três tratamentos, a menos que não tivesse ondulações de celulite tratáveis e o médico classificou a nádega com uma pontuação de 0 no CR-PCSS. Se nenhuma injeção em uma nádega em particular fosse dada nas segundas sessões de tratamento, os indivíduos ainda eram avaliados para tratamento na nádega contralateral e retornavam para a terceira sessão de tratamento, e cada uma das nádegas era novamente avaliada pelo indivíduo e pelo médico. Se o médico classificou uma ou ambas as nádegas como maiores que 0 no CR-PCSS, as injeções foram dadas durante a terceira sessão de tratamento.

[00435] Todos os indivíduos receberam todas as 12 injeções em cada nádega durante a Sessão de Tratamento 1. Na sessão de tratamento 2, 88,1% dos indivíduos no grupo tratado com CCH e 94,8% dos indivíduos tratados com placebo receberam 12 injeções em cada nádega. Na Sessão de Tratamento 3, 89,0% dos indivíduos tratados com CCH e 90,6% dos indivíduos tratados com placebo receberam 12 injeções em cada nádega. O número de ondulações tratadas e o número médio de injeções por Ondulações foram semelhantes entre os dois grupos de tratamento e entre as sessões de tratamento. A eficácia foi analisada usando os seguintes sistemas de classificação da gravidade da celulite: (i) PR-PCSS; (ii) CR- PCSS; (iii) S-GAIS; (iv) I-GAIS; (v) PR-CIS; (vi) SSRS; e (vii) Satisfação Global do Indivíduo com o Tratamento de Celulite (SSCT). O indivíduo, investigador e equipe não tinha conhecimento tanto da nádega alvo quanto ao tratamento. As avaliações foram feitas independentemente por indivíduo e investigador e eles não tinham conhecimento das pontuações uns dos outros. A variável de eficácia primária foi a proporção de respondentes compostos de nível 2 no Dia 71 definidos como indivíduos com: (1) Uma melhora na gravidade a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos nível 2 de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo investigador da nádega alvo; e (2) uma melhora na gravidade a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos nível 2 de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza a imagem digital da nádega alvo. Um indivíduo era considerado um respondente se esses critérios fossem atendidos na nádega alvo randomizada desse indivíduo.

[00436] As definições de respondentes usadas no estudo foram as seguintes.

[00437] Respondentes PR-PCSS. Um respondente de PR-PCSS de nível 2 foi definido como um indivíduo com melhora na classificação PR- PCSS de pelo menos nível 2 a partir da linha de base (alteração de -2, -3 ou -4) em um momento de avaliação. Um respondente de PR-PCSS de nível 1 foi definido como um indivíduo com melhora na classificação PR- PCSS de pelo menos nível 1 a partir da linha de base (alteração de -1, -2, - 3 ou -4) em um momento de avaliação.

[00438] Respondentes CR-PCSS. Um respondente de CR-PCSS de nível 2 foi definido como um indivíduo com melhora na classificação CR- PCSS de pelo menos nível 2 a partir da linha de base (alteração de -2, -3 ou -4) em um momento de avaliação. Um respondente de CR-PCSS de nível 1 foi definido como um indivíduo com melhora na classificação CR- PCSS de pelo menos nível 1 a partir da linha de base (alteração de -1, -2, - 3 ou -4) em um momento de avaliação.

[00439] Respondentes PR-PCSS/CR-PCSS Compostos. A classificação de respondente PR PCSS e a classificação de respondente CR PCSS para cada nádega foram usadas para calcular a classificação de respondente composta para essa nádega. Se a classificação estava faltando para 1 ou ambos os componentes (ou seja, o componente PR PCSS ou o componente CR PCSS), então a classificação de respondente composta estava faltando para aquela visita. Um respondente composto de nível 2 foi definido como um indivíduo que é tanto um respondente PR- PCSS de nível 2 quanto um respondente CR-PCSS de nível 2 em um momento de avaliação. Um respondente composto de nível 1 foi definido como um indivíduo que era tanto um respondente PR-PCSS de nível 1 quanto um respondente CR-PCSS de nível 1 em um momento de avaliação.

[00440] Respondentes S-GAIS. Um respondente S-GAIS de nível 2 foi definido como um indivíduo com uma classificação S-GAIS de pelo menos 2 (2 ou 3) em um momento de avaliação. Um respondente S-GAIS de nível 1 foi definido como um indivíduo com uma classificação S-GAIS de pelo menos 1 (1,2 ou 3) em um momento de avaliação.

[00441] Respondentes I-GAIS. Um respondente I-GAIS de nível 2 foi definido como um indivíduo com uma classificação I-GAIS de pelo menos 2 (2 ou 3) em um momento de avaliação. Um respondente I-GAIS de nível 1 foi definido como um indivíduo com uma classificação I-GAIS de pelo menos 1 (1,2 ou 3) em um momento de avaliação.

[00442] Respondentes PR-CIS. Para a pontuação total do PR- CIS, um respondente foi definido como um indivíduo com uma redução na pontuação total do PR-CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base em um momento de avaliação. Para pontuação abreviada de PR-CIS, um respondente foi definido como um indivíduo com uma redução na pontuação abreviada de PR CIS de pelo menos 10 a partir da linha de base em um momento de avaliação. Para pontuações de impacto PR-CIS individuais, a resposta foi definida como melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 intervalos de pontuação em cada momento.

[00443] Respondentes SSRS. Um respondente SSRS de nível 1 foi definido como um indivíduo que estava pelo menos ligeiramente satisfeito (ligeiramente satisfeito [4], muito satisfeito [5] ou extremamente satisfeito [6]) com a aparência da celulite em suas nádegas no Dia 71/Visita de Rescisão Antecipada.

[00444] Satisfação Global do Indivíduo com Tratamento para Celulite (SSCT). Um indivíduo com uma resposta de "Satisfeito" ou "Muito Satisfeito" na avaliação da Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite no Dia 71/Visita de Rescisão Antecipada foi considerado um respondente.

[00445] O ponto final primário foi a proporção de respondentes do composto CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 na População com intenção de tratar (ITT). Um respondente composto de nível 2 foi definido como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no PR-PCSS.

[00446] Neste estudo, uma diferença estatisticamente significativa (p = 0,006) foi vista na proporção de respondentes compostos de nível 2 no CR-PCSS/PR-PCSS em indivíduos tratados com CCH (16 [7,6%]) em comparação com indivíduos tratados com placebo (4 [1,9%]), Tabela 24 e Figura 24. Tabela 24: Respondentes Compostos de Dois Níveis para a Nádega Alvo no Dia 71 (População ITT) Droga do Estudo 0,84 mg de CCH por Nádega (Dose Total de 1,68 mg) placebo Ponto final Estatística (N=210) (N=213) valor de pa Respondente Composto de Nível dois Sim n (%) 16 (7,6) 4 (1,9) 0,006 No n (%) 194 (92,4) 209 ª O valor de p foi com base no teste CMH ajustado (98,1) para o centro de análise.

[00447] Havia 3 famílias de pontos finais que incluíam 8 pontos finais secundários principais neste estudo. As diferenças entre os indivíduos tratados com CCH e placebo favoreceram a CCH em todos os 8 pontos finais, e todas as diferenças foram estatisticamente significativas. Essas estão resumidas na Tabela 25 abaixo Tabela 25: Resumo dos Resultados para 8 Pontos Finais Secundários Principais (População ITT) Diferencia de Significância Tratamento Estatística * * * * * * * *

Frequência de Respondentes

Família Secundária Ponto final CCH placebo valor de (N=210) (N=213) pa

Petição 870210035614, de 19/04/2021, pág. 237/415 Indivíduo Respondentes PR-PCSS de nível 1 da Nádega Alvo no Dia 71, 114 1 n (%) (54,3) 77 (36,2) <.001

Indivíduo Respondentes PR-PCSS de nível 2 da Nádega Alvo no Dia 71, 51 1 n (%) (24,3) 26 (12,2) 0,001

Investigador/Indivíduo Respondentes Compostos de nível 1 da Nádega 78 1 Alvo no Dia 71, n (%) (37,1) 38 (17,8) <.001 230/408

Investigador/Indivíduo Respondentes Compostos de nível 2 da Nádega 1 Não alvo no Dia 71 com Base no CR-PCSS e PR-PCSS, n (%) 16 (7,6) 2 (0,9) <.001

102 significância de 0,05 após o ajuste de multiplicidade. 2 Indivíduo Respondentes SSRS de nível 1 no Dia 71, n (%) (48,6) 48 (22,5) <.001

Alteração a partir da linha de base (Dia 1) da Pontuação Total PR-CIS no -10,9 -5,9 2 Dia 71, Média (SD) (12,51) (11,62) <.001

Indivíduo Respondentes S-GAIS de Nível 1 de Nádega Algo no Dia 71, n 135 a. valor de p da análise individual sem ajuste de multiplicidade. 3 (%) (64,3) 82 (38,5) <.001

Indivíduo Respondentes S-GAIS de Nível 2 de Nádega Algo no Dia 71, n 49 b. * representa uma significância estatística familiar ao nível de 3 (%) (23,3) 12 (6,1) <.001

[00448] As classificações PR-PCSS foram obtidas em cada visita e as alterações a partir da linha de base foram examinadas. Uma alteração negativa a partir da linha de base indica uma melhora na gravidade da celulite. Na linha de base, todos os indivíduos tinham classificações PR- PCSS de moderada ou grave. Já no Dia 22, a alteração média (SD) da linha de base em PR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH na nádega alvo (-0,4 [0,67]) em comparação com indivíduos tratados com placebo (-0,1 [0,45]). Esta diferença foi estatisticamente significativa (p<0,001). Resultados semelhantes foram obtidos para a nádega não alvo. As melhoras observadas em indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo continuaram e permaneceram estatisticamente significativas na nádega alvo e não alvo em todas as visitas do estudo, incluindo no Dia 71. Esses resultados estão resumidos na Tabela 26.

[00449] As análises dos respondentes de nível 1 e 2 de PR- PCSS para as nádegas alvo e não alvo demonstraram diferenças estatisticamente significativas na melhora para indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo. A proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 1 no Dia 22 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (34,8% com relação a 16,8%, respectivamente) e na nádega não alvo (34,8% com relação a 18,8%, respectivamente). Essas diferenças foram estatisticamente significativas (p <0,001) e continuaram ao longo do estudo e permaneceram estatisticamente significativas em cada avaliação. Esses resultados estão resumidos na Tabela 27 e mostrados nas Figuras 22-23. Tabela 26. Classificação PR-PCSS e alteração a partir da linha de base para a nádega alvo e não alvo por visita (População mlTT) Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo

PCSS (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Classificação da Nádega alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 2(1,1) 0 (0,0) 2(1,0) Quase (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 13 (6,9) 4 (2,1) 25 5 (2,6) 25 5 (2,4) Nenhum (13,6) (12,4) (1)

Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 29 7 (3,5) 50 24 54 38 58 40 (15,5) (26,6) (12,3) (29,3) (20,1) (28,9) (19,5) Moderado n (%) 84 82 79 95 75 95 65 77 72 81 (3) (41,8) (40,0) (42,2) (47,0) (39,9) (48,7) (35,3) (40,7) (35,8) (39,5) n (%) 117 123 78 100 50 71 40 67 46 77 Grave (4) (58,2) (60,0) (41,7) (49,5) (26,6) (36,4) (21,7) (35,4) (22,9) (37,6) Não n (%) - - 14 3 13 10 17 16 - - realizado Média 3,6 3,6 3,3 3,5 2,9 3,2 2,7 3,1 2,7 3,1 SD 0,49 0,49 0,73 0,57 0,89 0,76 0,97 0,87 0,96 0,87 Alteração da nádega alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 2(1,1) 0 (0,0) 2(1,0) -3 n (%) - - 1 (0,5) 0 (0,0) 5 (2,7) 1 (0,5) 10 (5,4) 2(1,1) 10 (5,0) 2(1,0) n (%) - - 8 (4,3) 1 (0,5) 28 12 (6,2) 41 22 41 23 -2 (14,9) (22,3) (11,6) (20,4) (11,2) -1 n (%) - - 56 33 75 54 63 51 70 53 (29,9) (16,3) (39,9) (27,7) (34,2) (27,0) (34,8) (25,9) n (%) - - 113 160 72 122 67 102 77 114 0 (60,4) (79,2) (38,3) (62,6) (36,4) (54,0) (38,3) (55,6) +1 n (%) - - 9 (4,8) 8 (4,0) 8 (4,3) 5 (2,6) 3 (1,6) 10 (5,3) 3 (1,5) 11 (5,4) Não n - - 14 3 13 10 17 16 - - realizado Média - - -0,4 -0,1 -0,7 -0,4 -0,9 -0,5 -0,9 -0,5

Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) SD - - 0,67 0,45 0,86 0,72 0,93 0,88 0,92 0,87 Valor de p - - <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Classificação de Nádega Não alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 2(1,1) 1 (0,5) 2(1,0) (0) Quase n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (1,1) 0 (0,0) 12 (6,4) 4 (2,1) 20 7 (3,7) 21 7 (3,4) Nenhum (10,9) (10,4) (1) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 27 9 (4,5) 50 33 55 34 59 35 (14,4) (26,6) (16,9) (29,9) (17,9) (29,4) (17,1) Moderado n (%) 81 83 81 89 80 82 63 88 70 93 (3) (40,3) (40,5) (43,3) (44,1) (42,6) (42,1) (34,2) (46,3) (34,8) (45,4) n (%) 120 122 77 104 45 75 45 59 50 68 Grave (4) (59,7) (59,5) (41,2) (51,5) (23,9) (38,5) (24,5) (31,1) (24,9) (33,2) Não realizado n (%) 14 3 13 10 17 15 - - Média 3,6 3,6 3,2 3,5 2,8 3,2 2,7 3,0 2,7 3,1 SD 0,49 0,49 0,74 0,58 0,89 0,81 0,97 0,86 0,97 0,85 Alteração de Nádega Não alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) -3 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (1,1) 2 (1,0) 7 (3,8) 1 (0,5) 8 (4,0) 1 (0,5) -2 n (%) - - 6 (3,2) 0 (0,0) 26 12 (6,2) 32 28 33 29 (13,8) (17,4) (14,7) (16,4) (14,1)

n (%) - - 59 38 88 56 80 49 86 50 -1 (31,6) (18,8) (46,8) (28,7) (43,5) (25,8) (42,8) (24,4) n (%) - - 119 150 67 117 59 106 67 118 0 (63,6) (74,3) (35,6) (60,0) (32,1) (55,8) (33,3) (57,6) +1 n (%) 3(1,6) 14 (6,9) 4 (2,1) 7 (3,6) 5 (2,7) 5 (2,6) 6 (3,0) 6 (2,9) Não n 14 3 13 10 17 15 - realizado Média -0,4 -0,1 -0,8 -0,4 -0,9 -0,6 -0,9 -0,5 SD 0,57 0,49 0,79 0,75 0,89 0,83 0,90 0,83 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 27. Respondentes PR-PCSS de nível 1 e 2 para nádega alvo, não alvo, pelo menos 1 nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH

PCSS (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N 205) (N=201) placebo (N=205) Respondente de nível da 1 Nádega alvo 108 114 Sim n (%) 65 (34,8) 34 (16,8) (57,4) 68 (34,9) (62,0) 77 (40,7) 121 (60,2) 80 (39,0) 122 168 127 112 Não n (%) (65,2) (83,2) 80 (42,6) (65,1) 70 (38,0) (59,3) 80 (39,8) 125 (61,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 17 16 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de nível 1 da Nádega não alvo Sim n (%) 65 (34,8) 38 (18,8) 117 71 (36,4) 120 79 (41,6) 128 (63,7) 81 (39,5) Não n (%) 122 164 (62.2) 71(37,8) 124 (65.2) 64 (34,8) 111 73 (36,3) 124 (60,5) Ausente n (%) (65.2) 14 (81.2) 3 13 (63,6) 10 17 (58.4) 15 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos nível 1 da Nádega 128 131 Sim n (%) 81 (43,3) 49 (24,3) (68,1) 89 (45,6) (71,2) 91 (48,1) 139 (69,2) 96 (46,8) Não n (%) 106 153 60 (31,9) 106 53 (28,8) 98 (51,9) 62 (30,8) 109 (53,2) Ausente n (%) (56,7) 14 (75,7) 3 13 (54.4) 10 17 16 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de nível 1 de ambas as nádegas 103 Sim n (%) 49 (26,2) 23 (11,4) 97 (51,6) 50 (25,6) (56,0) 64 (33,9) 110 (54,7) 65 (31,7) 138 179 145 125 Não n (%) (73,8) (88,6) 91 (48,4) (74,4) 81 (44,0) (66,1) 91 (45,3) 140 (68,3) Ausente n (%) 14 3 13 10 17 16 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de nível 2 da Nádega alvo Sim n (%) 9 (4,8) 1 (0,5) 33 (17,6) 14 (7,2) 51 (27,7) 26 (13,8) 51 (25,4) 27(13,2) Não n (%) 178 201 155 181 133 163 150 (74,6) 178 (86,8) Ausente n (%) (95.2) 14 (99.5) 3 (82,4) 13 (92.8) 10 (72.3) 17 (86.2) 16 - -

Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH

PCSS (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) placebo (N=205) valor de p 0,009 0,002 <0,001 0,002 Respondente de nível 2 da Nádega não alvo Sim n (%) 6 (3,2) 0 (0,0) 29 (15,4) 15 (7,7) 40 (21,7) 30 (15,8) 42 (20,9) 31 (15,1) Não 181 202 159 180 144 160 n (%) 159 (79,1) 174 (84,9) (96,8) (100,0) (84,6) (92,3) (78,3) (84,2) Ausente n (%) 14 3 13 10 17 15 - - valor de p 0,012 0,015 0,115 0,151 Respondente de pelo menos nível 2 da Nádega responder Sim n (%) 13 (7,0) 1 (0,5) 41 (21,8) 20 (10,3) 57 (31,0) 39 (20,6) 59 (29,4) 40 (19,5) 174 201 147 175 127 150 Não n (%) (93,0) (99,5) (78,2) (89,7) (69,0) (79,4) 142 (70,6) 165 (80,5) Ausente n (%) 14 3 13 10 17 16 - - valor de p <0,001 0,001 0,016 0,024 Respondente de nível 2 de ambas as nádegas Sim n (%) 2 (1,1) 0 (0,0) 21 (11,2) 9 (4,6) 34 (18,5) 17 (9,0) 34 (16,9) 18 (8,8) Não 185 202 167 186 150 172 n (%) 167 (83,1) 187 (91,2) (98,9) (100,0) (88,8) (95,4) (81,5) (91,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 17 16 - - valor de p 0,164 0,018 0,007 0,019 LOCF =

[00450] As classificações de CR-PCSS por visita e alteração a partir da linha de base também foram analisadas. Consistente com as classificações PR-PCSS, essas mostram melhoras estatisticamente significativas na gravidade da celulite em pacientes tratados com CCH com relação ao placebo. No Dia 71, alteração média a partir da linha de base em CR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo. A resposta ao tratamento foi evidente já no dia 22. A proporção de respondentes de CR-PCSS de nível 1 no Dia 22 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo tanto nas nádegas alvo (33,2% com relação a 16,8%, respectivamente) quanto nas nádegas não alvo (36,4% com relação a 16,8%). Essas diferenças foram estatisticamente significativas com p <0,001. No Dia 71, a proporção de respondentes de CR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo. Os resultados estão resumidos nas Tabelas

28-29 e Figuras 22-23. Tabela 28. Classificação CR-PCSS e alteração a partir da linha de base para as nádegas alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo

PCSS (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Classificação da nádega alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 2(1-0) 0 (0,0) 2(1-0) (0) Quase n (%) 25 27 0 (0,0) 0 (0,0) 2(1,1) 2(1,0) 14 (7,4) 3 (1,5) 6 (3,1) 6 (2,9) Nenhum (13,7) (13,4) Leve (1) (2) n (%) 29 54 20 52 32 56 32 0 (0,0) 0 (0,0) 6 (3,0) (15,5) (28,7) (10,3) (28,4) (16,8) (27,9) (15,6) Moderado n (%) 122 125 108 128 79 102 66 96 73 104 (3) (60,7) (61,0) (57,8) (63,4) (42,0) (52,3) (36,1) (50,3) (36,3) (50,7) n (%) 79 80 48 66 41 70 40 55 45 61 Grave (4) (39,3) (39,0) (25,7) (32,7) (21,8) (35,9) (21,9) (28,8) (22,4) (29,8) Não n (%) - - 14 3 13 10 18 14 - - realizado Média 3,4 3,4 3,1 3,3 2,8 3,2 2,7 3,0 2,7 3,1 SD 0,49 0,49 0,67 0,57 0,87 0,69 0,97 0,82 0,97 0,81 Alteração da nádega alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 3(1-6) 3(1-6) 3(1-5) 3(1-5) n (%) 28 32 35 -2 - - 4 (2,1) 2 (1,0) 7 (3,6) 9 (4,7) 9 (4,4) (14,9) (17,5) (17,4) -1 n (%) 58 32 68 31 72 50 76 53 - - (31,0) (15,8) (36,2) (15,9) (39,3) (26,2) (37,8) (25,9) n (%) 120 154 84 143 66 119 76 129 0 - - (64,2) (76,2) (44,7) (73,3) (36,1) (62,3) (37,8) (62,9) +1 n (%) - - 5 (2,7) 14 (6,9) 8 (4,3) 14 (7,2) 10 (5,5) 10 (5,2) 11 (5,5) 11 (5,4) Não realizado N (%) - - 14 3 13 10 18 14 - - Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Média - - -0,3 -0,1 -0,6 -0,2 -0,7 -0,4 -0,7 -0,3 SD 0,56 0,51 0,79 0,59 0,87 0,72 0,87 0,71 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Classificação da nádega não alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (0) Quase n (%) 22 0 (0,0) 0 (0,0) 7 (3,7) 0 (0,0) 15 (8,0) 2 (1,0) 7 (3,7) 7 (3,4) Nenhum 21 (115) (10,9) Leve (1) (2) n (%) 26 52 21 58 27 62 27 0 (0,0) 0 (0,0) 10 (5,0) (13,9) (27,7) (10,8) (31,7) (14,1) (30,8) (13,2)

Moderado n (%) 115 126 102 122 71 110 66 96 73 105 (3) (57,2) (61,5) (54,5) (60,4) (37,8) (56,4) (36,1) (50,3) (36,3) (51,2) n (%) 86 79 52 70 50 62 38 61 44 66 Grave (4) (42,8) (38,5) (27,8) (34,7) (26,6) (31,8) (20,8) (31,9) (21,9) (32,2) Não n (%) - - 14 3 13 10 18 14 - - realizado Média 3,4 3,4 3,1 3,3 2,8 3,2 2,7 3,1 2,7 3,1 SD 0,50 0,49 0,75 0,56 0,91 0,66 0,93 0,77 0,94 0,76 Alteração da nádega não alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0)

-3 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0)

n (%) 24 38 40 -2 - - 10 (5,3) 0 (0,0) 5 (2,6) 12(6,3) 12(5,9) (12,8) (20,8) (19,9) -1 n (%) 58 34 71 37 73 41 78 42 - - (31,0) (16,8) (37,8) (19,0) (39,9) (21,5) (38,8) (20,5) n (%) 111 151 83 143 64 27 73 139 0 - - (59,4) (74,8) (44,1) (73,3) (35,0) (66,5) (36,3) (67,8) +1 n (%) - - 8 (4,3) 17 (8,4) 9 (4,8) 10 (5,1) 8 (4,4) 11 (5,8) 10 (5,0) 12 (5,9) Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) Não n - - 14 3 13 14 - - realizado 10 18

Média - - -0,4 -0,1 -0,6 -0,2 -0,8 -0,3 -0,7 -0,3

SD 0,65 0,50 0,79 0,56 0,83 0,67 0,83 0,66 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Tabela 29. Respondentes de CR-PCSS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Respondente da nádega alvo nível 1 Sim n (%) 62 (33,2) 34 (16,8) 96 (51,1) 38 (19,5) 107 (58,5) 62 (32,5) 114 (56,7) 65 (31,7) Não n (%) 125 (66,8) 168 (83,2) 92 (48,9) 157 (80,5) 76 (41,5) 29 (67,5) 87 (43,3) 140 (68,3) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo nível 1 Sim n (%) 68 (36,4) 34 (16,8) 96 (51,1) 42 (21,5) 111 (60,7) 53 (27,7) 118 (58,7) 54 (26,3) Não n (%) 119 (63,6) 168 (83,2) 92 (48,9) 153 (78,5) 72 (39,3) 138 (72,3) 83 (41,3) 151 (73,7) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega de pelo menos nível 1

Sim n (%) 89 (47,6) 51 (25,2) 114 (60,6) 54 (27,7) 125 (68,3) 75 (39,3) 133 (66,2) 78 (38,0) Não n (%) 98 (52,4) 151 (74,8) 74 (39,4) 141 (72,3) 58 (31,7) 116 (60,7) 68 (33,8) 127 (62,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N 205) (N=201) (N=205) valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 1 Sim n (%) 41 (21,9) 17 (8,4) 78 (41,5) 26 (13,3) 93 (50,8) 40 (20,9) 99 (49,3) 41 (20,0) Não n (%) 146 (78,1) 185 (91,6) 110 (58,5) 169 (86,7) 90 (49,2) 151 (79,1) 102 (50,7) 164 (80,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 4(2,1) 2(1,0) 28 (14,9) 7 (3,6) 35 (19,1) 12 (6,3) 38 (18,9) 12 (5,9) Não n (%) 183 (97,9) 200 (99,0) 160 (85,1) 188 (96,4) 148 (80,9) 179 (93,7) 163 (81,1) 193 (94,1) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p 0,311 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 10 (5,3) 0 (0,0) 25 (13,3) 5 (2,6) 38 (20,8) 12 (6,3) 40 (19,9) 12 (5,9) Não 202 n (%) 177 (94,7) 163 (86,7) 190 (97,4) 145 (79,2) 179 (93,7) 161 (80,1) 193 (94,1) (100,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 12 (6,4) 2 (1,0) 36 (19,1) 10 (5,1) 47 (25,7) 16 (8,4) 50 (24,9) 16 (7,8) Não n (%) 175 (93,6) 200 (99,0) 152 (80,9) 185 (94,9) 136 (74,3) 175 (91,6) 151 (75,1) 189 (92,2) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - - valor de p 0,003 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 2(1,1) 0 (0,0) 17 (9,0) 2 (1,0) 26 (14,2) 8 (4,2) 28 (13,9) 8 (3,9) Não 202 n (%) 185 (98,9) 171 (91,0) 193 (99,0) 157 (85,8) 183 (95,8) 173 (86,1) 197 (96,1) (100,0) Ausente n (%) 14 3 13 10 18 14 - Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) valor de p 0,119 <0,001 <0,001 <0,001

[00451] As classificações S-GAIS foram analisadas. Já no dia 22, o S-GAIS médio foi maior em indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo. Essa melhora foi estatisticamente significativa (p <0,001). A melhora ainda foi observada no Dia 71. As análises dos respondentes de nível 1 e 2 de S-GAIS para nádegas alvo e não alvo demonstram diferenças estatisticamente significativas na melhora ao longo do curso do estudo para indivíduos tratados com CCH com relação ao placebo.

Esses resultados estão resumidos nas Tabelas 30-31. Verificações semelhantes foram observadas usando as classificações I-GAIS, que estão resumidas nas Tabelas 32-33. Tabela 30. Classificações S-GAIS das nádegas alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Nádega alvo Muito 3 (1,6) 0 (0,0) 6 (3,2) 0 (0,0) 12 (6,5) 3 (1,6) 12 (6,0) 3 (1,5) mais n (%)

melhorada Muito 5 (2,7) 2 (1,0) 32 (17,0) 8 (4,1) 37 (20,1) 10 (5,3) 38 (18,9) 10 (4,9) (3) melhorada n (%) (2) Melhorada n (%) 91 (48,9) 51 (25,2) 94 (50,0) 66 (33,8) 86 (46,7) 69 (36,3) 93 (46,3) 71 (34,6) (1) Sem 79 (42,5) 140 (69,3) 44 (23,4) 109 (55,9) 38 (20,7) 100 (52,6) 43 (21,4) 113 (55,1) n (%) alteração Pior (0) (-1) n (%) 6 (3,2) 7 (3,5) 8 (4,3) 7 (3,6) 10 (5,4) 5 (2,6) 12 (6,0) 5 (2,4) Muito pior 2 (1,1) 1 (0,5) 3 (1,6) 3 (1,5) 0 (0,0) 2 (1,1) 1 (0,5) 2 (1,0) n (%) (-2) Muito 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 2 (1,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 2 (1,0) 1 (0,5) n (%) mais pior Ausente (-3) N 15 3 13 10 17 15 - - Média 0,5 (0,73) 0.2 (0,59) 0,8 (0,95) 0,3 (0,77) 1,0 (0,99) 0,5 (0,79) 0,9 (1,04) 0,4 (0,77) (SD) P=valor <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Nádega não alvo Muito mais n (%) 3 (1,6) 0 (0,0) 8 (4,3) 0 (0,0) 12 (6,5) 3 (1,6) 12 (6,0) 3 (1,5)

melhorada Muito (3) melhorada n (%) 6 (3,2) 4 (2,0) 36 (19,1) 12 (6,2) 32 (17,4) 11 (5,8) 33 (16,4) 11 (5,4) (2) Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N 205) (N=201) (N=205) Melhorada n (%) 87 (46,8) 50 (24,8) 97 (51,6) 62 (31,8) 92 (50,0) 67 (35,3) 99 (49,3) 67 (32,7) (1) Sem n (%) 81 (43,5) 139 (68,8) 38 (20,2) 108 (55,4) 41 (22,3) 102 (53,7) 47 (23,4) 116 (56,6) alteração (0)

Pior (-1) n (%) 9 (4,8) 8 (4,0) 5 (2,7) 9 (4,6) 6 (3,3) 5 (2,6) 7 (3,5) 5 (2,4) Muito pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (1,1) 2 (1,0) 0 (0,0) 2 (1,1) 0 (0,0) 3 (1,5) (-2) Muito n (%) 0 (0,0) 1 (0,5) 2 (1,1) 2 (1,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 3 (1,5) 0 (0,0) mais pior Ausente N (-3) 15 3 13 10 17 15 - - Média 0,5 (0,71) 0,2 (0,60) 0,9 (0,97) 0,3 (0,79) 1,0 (0,94) 0,5 (0,76) 0,9(1,01) 0,4 (0,76) (SD) P=valor <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Tabela 31. Respondentes de S-GAIS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 99 (53.2) 53 (26.2) 132 (70.2) 74 (37,9) 135 (73,4) 82 (43.2) 143 (71,1) 84 (41.0) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Não respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 96 (51.6) 54 (26,7) 141 (75.0) 74 (37,9) 136 (73,9) 81 (42,6) 144 (71.6) 81 (39.5) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N 205) (N=201) (N=205) valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da pelo menos 1 nádega de nível 1 Sim n (%) 108 (58.1) 64 (31.7) 146 (77.7) 84 (43.1) 144 (78,3 90 (47.4) 153 (76.1) 92 (44.9) Ausente n 15 3 13 10 )17 15 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas nível 1 Sim n (%) 87 (46.8) 43 (21,3) 127 (67.6) 64 (32.8) 127 (69.0) 73 (38.4) 134 (66,7) 73 (35.6) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 8 (4.3) 2(1-0) 38 (20.2) 8(4.1) 49 (26,6) 13 (6.8) 50 (24,9) 13 (6,3) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p 0,0.058 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 9 (4.8) 4 (2.0) 44 (23,4) 12 (6.2) 44 (23,9) 14 (7.4) 45 (22,4) 14 (6.8) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p 0.139 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 10(5.4) 4 (2.0) 46 (24,5) 13 (6,7) 52 (28,3) 17(8.9) 53 (26.4) 17 (8,3 )

Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p 0,093 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 7 (3.8) 2(1-0) 36(19,1) 7(3,6) 41 (22.3) 10(5,3) 42 (20,9) 10 (4.9) Ausente n 15 3 13 10 17 15 - - valor de p 0,092 <0,001 <0,001 <0,001

Tabela 32. Classificações I-GAIS das nádegas alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Nádega alvo Muito 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 9 (4,9) 2 (1,0) 9 (4,5) 2 (1,0) mais n (%)

melhorada Muito 13 (7,0) 2 (1,0) 32 (17,0) 5 (2,6) 38 (20,8) 10 (5,2) 40 (19,9) 10 (4,9) (3) melhorada n (%) (2) Melhorada n (%) 85 (45,5) 34 (17,0) 97 (51,6) 48 (24,6) 81 (44,3) 42 (22,0) 90 (44,8) 47 (22,9) (1) Sem 85 (45,5) 158 (79,0) 55 (29,3) 137 (70,3) 50 (27,3) 135 (70,7) 57 (28,4) 144 (70,2) n (%) alteração Pior (0) (-1) n (%) 4 (2,1) 5 (2,5) 2 (1,1) 4 (2,1) 5 (2,7) 2 (1,0) 5 (2,5) 2 (1,0) Muito pior 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) n (%) (-2) Muito 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) n (%) mais pior Ausente (-3) N 14 5 13 10 18 14 - - Média 0,6 (0,65) 0,2 (0,48) 0,9 (0,75) 0,3 (0,57) 1,0 (0,89) 0,3 (0,65) 1,0(0,87) 0,3 (0,64) (SD) P=valor <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Nádega não alvo Muito 0 (0,0) 0 (0,0) 3 (1,6) 0 (0,0) 6 (3,3) 0 (0,0) 7 (3,5) 0 (0,0) mais n (%)

melhorada Muito 13 (7,0) 1 (0,5) 29 (15,4) 5 (2,6) 41 (22,4) 15 (7,9) 43 (21,4) 15 (7,3) (3) melhorada n (%) (2) Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N 205) (N=201) (N=205) Melhorada 79 (42,2) 32 (15,9) 103 (54,8) 43 (22,1) 90 (49,2) 37 (19,4) 98 (48,8) 41 (20,0) n (%) (1) Sem n (%) 94 (50,3) 165 (82,1) 51 (27,1) 145 (74,4) 43 (23,5) 134 (70,2) 50 (24,9) 144 (70,2) alteração Pior (0) (-1) n (%) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 3 (1,6) 5 (2,6) 3 (1,5) 5 (2,4)

Muito pior 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) n (%) (-2) Muito 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) n (%) mais pior Ausente N (-3) 14 4 13 10 18 14 - - Média 0,6 (0,63) 0,1 (0,48) 0,9 (0,74) 0,3 (0,53) 1,0 (0,81) 0,3 (0,66) 1,0 (0,82) 0,3 (0,64) (SD) P=valor <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Tabela 33. Respondentes I-GAIS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 98 (52,4) 36 (18,0) 130 (69,1) 53 (27,2) 128 (69,9) 54 (28,3) 139 (69,2) 59 (28,8) Ausente n 14 5 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Não respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 92 (49,2) 33 (16,4) 135 (71,8) 48 (24,6) 137 (74,9) 52 (27,2) 148 (73,6) 56 (27,3) Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N 205) (N=201) (N=205) Ausente n 14 4 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 1 Sim n (%) 108 (57,8) 38 (19,0) 145 (77,1) 62 (31,8) 146 (79,8) 59 (30,9) 158 (78,6) 64 (31,2) Ausente n 14 5 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 1 Sim n (%) 82 (43,9) 31 (15,4) 120 (63,8) 39 (20,0) 119 (65,0) 47 (24,6) 129 (64,2) 51 (24,9) Ausente n 14 4 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 13 (7,0) 2 (1,0) 33 (17,6) 5 (2,6) 47 (25,7) 12 (6,3) 49 (24,4) 12 (5,9) Ausente n 14 5 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 13 (7,0) 1 (0,5) 32(17,0) 5 (2,6) 47 (25,7) 15 (7,9) 50 (24,9) 15 (7,3) Ausente n 14 4 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 19 (10,2) 3 (1,5) 40 (21,3) 7 (3,6) 59 (32,2) 19 (9,9) 62 (30,8) 19 (9,3) Ausente n 14 5 13 10 18 14 - -

valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 7 (3,7) 0 (0,0) 25 (13,3) 3 (1,5) 35 (19,1) 8 (4,2) 37 (18,4) 8 (3,9) Ausente n 14 4 13 10 18 14 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

[00452] Conforme mostrado na Tabela 34, a alteração PR-CIS média a partir da linha de base no Dia 71 foi estatisticamente significativamente favorável para indivíduos tratados com CCH com relação aos indivíduos tratados com placebo na pontuação total (-10,9 com relação a -5,7) e pontuação abreviada (-10,9 com relação a -5,7) bem como pontuações de impacto individual. Tabela 34. Alteração no PR-CIS a partir da linha de base (População mITT). Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-CIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Pontuação total Média (SD) 51,3 (8,83) 51,5 (9,91) 38,7 (13,24) 44,7 (13,15) 38,7 (13,10) 44,8 (13,16) Alteração Média (SD) -12,5 -12,5 a partir da - - -6,7 (12,11) -6,6 (12,09) (12,63) (12,63) linha de base valor de p - <0,001 <0,001 Pontuação abreviada Média (SD) 43,6 (7,28) 43,8 (8,14) 32,6 (10,95) 38,0 (10,94) 32,6 (10,82) 38,1 (10,94) Alteração Média (SD) -10,9 -10,9 a partir da - - -5,7 (10,23) -5,7 (10,22) (10,72) (10,71) linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #1 impacto de felicidade Média (SD) 1,1 (2,40) 0,9 (2,17) 4,6 (3,06) 2,4 (2,89) 4,5 (3,06) 2,4 (2,89)

Alteração Média (SD) a partir da - - 3,7 (3,67) 1,5 (3,46) 3,4 (3,88) 1,5 (3,45) linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #2 impacto de incômodo Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-CIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Média (SD) 8,3 (2,98) 8,4(3,02) 6,3 (2,90) 7,1 (3,24) 6,2 (2,93) 7,1 (3,24)

Alteração Média (SD) a partir da - - -2,0 (3,92) -1,2 (4,28) -2,1 (3,90) -1,2 (4,27) linha de base valor de p - 0,009 0,003 #3 impacto de constrangimento Média (SD) 8,9 (1,95) 8,8 (2,29) 7,0 (2,76) 7,8 (2,68) 7,0(2,73) 7,8 (2,68)

Alteração Média (SD) a partir da - - -1,9 (2,67) -1,0 (2,45) -1,9 (2,66) -1,0 (2,45) linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #4 impacto de vergonha

Média (SD) 8.9(1.97) 8.9(2.19) 6.9 (2.87) 7.6 (2.83) 6.9 (2.84) 7.6(2.83)

Alteração Média (SD) a partir da - - -2,0 (2,87) -1,2 (2,68) -2,0 (2,84) -1,2 (2,68) linha de base valor de p - 0,004 0,003 #5 impacto de aparência envelhecida

Média (SD) 7,7 (2,57) 7,7 (2,65) 6,1 (3,06) 6,8 (3,19) 6,1 (3,04) 6,8 (3,19)

Alteração Média (SD) a partir da - - -1,6 (3,09) -1,0 (3,11) -1,6 (3,07) -0,9 (3,10) linha de base valor de p - 0,024 0,015 #6 impacto de preocupação com a forma corporal Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-CIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Média (SD) 8,6 (2,03) 8,6 (2,05) 7,1 (2,71) 7,8 (2,58) 7,1 (2,67) 7,9 (2,58) Alteração Média (SD) a partir da - - -1,4 (2,68) -0,8 (2,56) -1,4 (2,63) -0,8 (2,55) linha de base valor de p - 0,005 0,005

[00453] Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos de tratamento na média de SSRS na linha de base. No Dia 71, a pontuação média foi maior em indivíduos tratados com CCH em comparação com aqueles tratados com placebo. Esta diferença foi estatisticamente significativa (p<0,001). Os resultados são fornecidos na Tabela 35. Tabela 35. Pontuação de autoavaliação do indivíduo (SSRS) por visita (População mITT). Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) Pontuação de Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo

SSRS (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Extremamente n (%) 0 (0,0) 1 (0,5) 13 (7,1) 4 (2,1) 13 (6,7) 4 (2,1) Satisfeito (6) Satisfeito (5) n (%) 1 (0,5) 0 (0,0) 42 (22,8) 15 (7,9) 46 (23,6) 15 (7,9) Ligeiramente n (%) 4 (2,0) 4 (2,0) 47 (25,5) 29 (15,3) 48 (24,6) 29(15,2) Satisfeito (4) Nem satisfeito ou insatisfeito n (%) 4 (2,0) 1 (0,5) 22 (12,0) 38 (20,0) 24(12,3) 38 (19,9) (3) Ligeiramente n (%) 11 (5,5) 15 (7,3) 14 (7,6) 15 (7,9) 16 (8,2) 15 (7,9) Insatisfeito (2) Insatisfeito (1) n (%) 67 (33,3) 62 (30,2) 31 (16,8) 43 (22,6) 31 (15,9) 43 (22,5) Extremamente n (%) 114 (56,7) 122 (59,5) 15 (8,2) 46 (24,2) 17 (8,7) 47 (24,6) Insatisfeito (0)

Ausente N 0 0 17 15 6 14 Média (SD) 0,6 (0,90) 0,6 (0,90) 3,3 (1,80) 2,1 (1,75) 3,3 (1,80) 2,1 (1,75) valor de p 0,617 <0,001 <0,001 Respondente SSRS de Nível um n (%) 102 (55,4) 48 (25,3) 107 (54,9) 48 (25,1) valor de p <0,001 <0,001

[00454] Com relação às pontuações do SSCT, uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH estavam satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento da celulite do que aqueles tratados com placebo (54,3% com relação a 25,8%, respectivamente, p <0,001). Houve uma diferença estatisticamente significativa (p <0,001) na média (SD) das pontuações de satisfação do indivíduo no Dia 71 entre os grupos de tratamento CCH (0,4 [1,12]) e placebo (-0,4 [1,17]). Isso é mostrado na Tabela 36 abaixo. Tabela 36: Satisfação dos indivíduos com Tratamento de Celulite no dia 71 (População mITT) Dia 71 Dia 71 (LOCF)a CCH Placebo CCH Placebo Pontuação de Satisfação Estatística (N=201) (N=205) (N=201) (N=205) Muito satisfeito (+2) n (%) 24 (13,0) 7 (3,7) 24 (12,3) 7 (3,7) Satisfeito (+1) n (%) 76 (41,3) 42 (22,1) 80 (41,0) 42 (22,0) Nem satisfeito ou insatisfeito (0) n (%) 46 (25,0) 56 (29,5) 52 (26,7) 56 (29,3) Insatisfeito (-1) n (%) 23 (12,5) 42 (22,1) 23 (11,8) 42 (22,0) Muito Insatisfeito (-2) n (%) 15 (8,2) 43 (22,6) 16 (8,2) 44 (23,0) Ausente n 17 15 6 14 Média (SD) 0,4 (1,12) -0,4 (1,17) 0,4 (1,10) -0.4 (1,17) valor de pb <0,001 <0,001 Respondente de Satisfação do Indivíduo (Pontuação ≥1) n (%) 100 (54,3) 49 (25,8) 104 (53,3) 49 (25,7) valor de pc <0,001 <0,001 a Se a avaliação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite no Dia 71 estava faltando, a última avaliação após a injeção inicial foi levada adiante para o Dia 71. b O valor de p para a Satisfação do Indivíduo com Tratamento para

Celulite foi com base no teste de soma de classificação de Wilcoxon. As porcentagens são com base no número total de indivíduos avaliados em cada grupo de tratamento. c O valor de p para o respondente de satisfação do indivíduo de nível 1 foi com base em um teste CMH ajustado para o centro de análise. As porcentagens são com base no número total de indivíduos avaliados em cada grupo de tratamento. Conclusões de Eficácia

[00455] O ponto final primário foi a proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 na População ITT. Um respondente composto de nível 2 no CR-PCSS/PR- PCSS foi definido como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no PR-PCSS.

[00456] Neste estudo, uma diferença estatisticamente significativa (p = 0,006) foi vista na proporção de respondentes compostos de nível 2 no PR-PCSS/CR-PCSS em indivíduos tratados com CCH (16 [7,6%]) em comparação com indivíduos tratados com placebo (4 [1,9%]).

[00457] A fim de confirmar o efeito da droga usando escalas ortogonais, uma série de pontos finais secundários foram avaliados. Houve diferenças estatisticamente significativas na resposta que favoreceu os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo em todos os 8 pontos finais secundários principais: • Proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (114 (54,3%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 77 [36,2%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 (51 [24,3%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 26 [12,2%] em indivíduos tratados com placebo. p = 0,001). • Proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (78 (37,1%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 38 [17,8%] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001). • Proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega não alvo no Dia 71 (16 (7,6%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 2 [0,9%] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001). • Proporção de respondentes de SSRS de nível 1 no Dia 71 (102 (48,6%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 28 [22,5%] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001). • Alteração média (SD) a partir da linha de base da Pontuação Total de PR-CIS no Dia 71 (-10,9 [12,51] em indivíduos tratados com CCH com relação a -5,9 [11,62] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001). • Proporção de respondentes S-GAIS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (135 (64,3%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 82 [38,5%] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001). • Proporção de respondentes S-GAIS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 (49 (23,3%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 13 [6,1%] em indivíduos tratados com placebo, p = <0,001).

[00458] Todas as análises de sensibilidade suportaram os resultados dos pontos finais primários e secundários principais. Houve também diferenças estatisticamente significativas entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo em todos os pontos finais de suporte no Dia 71 do estudo (e em muitos casos diferenças estatisticamente significativas foram vistas logo após um único tratamento com CCH). Nas avaliações de gravidade, uma alteração negativa a partir da linha de base indica melhora na celulite. Resultados para as nádegas alvo e não alvo são descritos abaixo: • No Dia 71, a alteração média (SD) a partir da linha de base em

PR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo na nádega alvo (0,9 [0,93] com relação a 0,5 [0,88], respectivamente; p <0,001) e a nádega não alvo (0,9 [0,90] com relação a 0,5 [0,83], respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (62,0% com relação a 40,7%, respectivamente, p <0,001)) e na nádega não alvo (65,2% com relação 41,6%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a alteração média (SD) a partir da linha de base em CR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo na nádega alvo (0,7 [0,87] com relação a 0,4 [0,72], respectivamente; p <0,001) e a nádega não alvo (0,8 [0,83] com relação a 0,3 [0,67], respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes de CR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (58,5% com relação a 32,5%, respectivamente, p <0,001)) e na nádega não alvo (60,7% com relação a 27,7%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes compostos CR- PCSS/PR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (42,9% em relação a 20,1%, respectivamente; p <0,001) e na nádega não alvo (44,5% em relação a 13,7%, respectivamente, p <0,001). • No Dia 71, a média (SD) S-GAIS foi maior em indivíduos tratados com CCH na nádega alvo em comparação com indivíduos tratados com placebo (1,0 [0,99] com relação a 0,5 [0,79], respectivamente, p <0,001). Os resultados foram semelhantes para a nádega não alvo (1,0 [0,94] em indivíduos tratados com CCH com relação 0,5 [0,76] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001).

• No Dia 71, a proporção de respondentes de S-GAIS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (73,4% com relação a 43,2%, respectivamente; p <0,001) e na nádega não alvo (73,9% com relação a 42,6%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a média (SD) I-GAIS foi estatística e significativamente (p <0,001) maior em indivíduos tratados com CCH na nádega alvo em comparação com indivíduos tratados com placebo (1,0 [0,81] com relação a 0,3 [0,66], respectivamente). Os resultados foram semelhantes para a nádega não alvo (0,6 [0,63] em indivíduos tratados com CCH com relação 0,1 [0,48] em indivíduos tratados com placebo). • No Dia 71, a proporção de respondentes de I-GAIS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (69,9% com relação a 28,3%, respectivamente; p <0,001) e na nádega não alvo (74,9 % com relação 27,2%, respectivamente; p <0,001). • A alteração média (SD) de PR-CIS a partir da linha de base no Dia 71 foi estatística e significativamente favorável para indivíduos tratados com CCH com relação aos indivíduos com tratamento de placebo na pontuação total (12,5 ([2,63] com relação a -6,7 [12,11], respectivamente, p <0,001) e pontuação abreviada (10,9 [10,72] com relação 5,7 [10,23], respectivamente, p <0,001), bem como pontuações de impacto individual (felicidade com a aparência da celulite [p 0,001], incômodo [p = 0,009], constrangimento [p <0,001], vergonha [p = 0,004], aparência envelhecida [p = 0,024], preocupação com a forma corporal [p = 0,005]). • No Dia 71, a proporção de respondentes PR-CIS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo para a pontuação total (48,4% com relação a 24,2%, respectivamente, p <0,001) e para a pontuação abreviada (52,7% com relação a 29,5 %, respectivamente; p <0,001). Além disso, a proporção de respondentes para cada pontuação de impacto individual foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo. Essas diferenças também foram estatisticamente significativas.

[00459] Os resultados de suporte adicionais incluíram: • No Dia 71, a pontuação média (SD) de SSRS foi maior em indivíduos tratados com CCH (3,3 [1,80]) do que naqueles tratados com placebo (2,1 [1,75]). Esta diferença foi estatisticamente significativa (p <0,001). Uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH responderam a SSRS de nível 1 do que aqueles tratados com placebo: 54,9% com relação 25,1%, respectivamente. Esta diferença foi estatisticamente significativa (p <0,001). • Uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH estavam satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento de sua celulite do que aqueles tratados com placebo (54,3% com relação a 25,8%, respectivamente, p <0,001). Houve uma diferença estatisticamente significativa (p <0,001) na média (SD) das pontuações de satisfação do indivíduo no Dia 71 entre os grupos de tratamento com CCH (0,4 [1,12]) e placebo (-0,4 [1,17]). • Uma série de tabulações cruzadas mostra consistência entre PR-PCSS e S-GAIS. Uma alteração de nível 1 no PR-PCSS foi associada à alterações semelhantes no S-GAIS. • As análises por local dos pontos finais primários e secundários indicaram que a resposta foi vista em vários locais e que nenhum local impactou de maneira acentuada os resultados de qualquer análise de eficácia. Conclusões

[00460] Estes resultados clínicos demonstram que a administração de CCH é eficaz para o tratamento da celulite nas nádegas da população de indivíduos. Este estudo atingiu seu ponto final primário com diferença estatisticamente significativa na proporção de respondentes do composto CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 em indivíduos tratados com CCH em comparação com indivíduos tratados com placebo quando dadas com 0,84 mg em cada nádega (1,68 mg no total) por até 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo em mulheres adultas com EFP das nádegas bilaterais. Houve diferenças estatisticamente significativas na resposta que favoreceu os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo em todos os 8 pontos finais secundários principais e todos os pontos finais de suporte. Não houve problemas de segurança significativos ou inesperados após a administração de CCH. A maioria dos AEs ocorreu no local de injeção e se solucionaram em 14 dias. Não foram observadas tendências clinicamente significativas ou preocupantes em relação aos parâmetros laboratoriais de hematologia ou química ou sinais vitais. Os resultados de imunogenicidade não revelaram quaisquer diferenças potenciais em relação aos vistos em outros estudos clínicos com esta droga. Com base nos resultados deste estudo, a CCH é um tratamento seguro e eficaz para EFP nas nádegas de mulheres adultas com uma dose de 0,84 mg por nádega (dose total de 1,68 mg) dada em 3 sessões de tratamento com pelo menos 21 dias de intervalo. EXEMPLO 3 - FASE 3 DO ESTUDO CLÍNICO DE CCH PARA O TRATAMENTO DE EFP (Estudo 303)

[00461] Um segundo estudo clínico foi realizado que foi projetado de forma idêntica, randomizado, duplo-cego e controlado por placebo como o estudo clínico descrito no Exemplo 2. A eficácia foi demonstrada e suportada por numerosas análises, incluindo a observância de uma diferença estatisticamente significativa (p=0,002) na proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo de indivíduos tratados com CCH (12 [5,6%])) em comparação com indivíduos tratados com placebo (1 [0,5%]), consistente com melhora da gravidade da celulite em pacientes tratados com CCH.

[00462] As seguintes populações de indivíduos estavam entre as populações que foram analisadas: A População com Intenção de Tratar (ITT) incluiu todos os indivíduos randomizados que receberam pelo menos 1 injeção da droga de estudo. Todos os resumos demográficos e de características de linha de base foram com base nesta população. Os parâmetros de eficácia primária e secundária principais foram com base nesta população. A População com Intenção de Tratar Modificada (mITT) incluiu todos os indivíduos da População ITT com uma linha de base e pelo menos 1 avaliação pós-injeção de tanto o CR-PCSS do investigador quanto o PR- PCSS do indivíduo tanto para as nádegas alvo quanto as não alvo. Todas as avaliações de eficácia secundárias e de suporte foram com base na População mITT.

[00463] A fim de confirmar o efeito da droga usando escalas ortogonais, uma série de pontos finais clínicos secundários foram avaliados. Houve diferenças estatisticamente significativas na resposta que favoreceu os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo, incluindo (i) a proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71; (ii) a proporção de respondentes PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71; (iii) a proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71; (iv) a proporção de respondentes SSRS de nível 1 no Dia 71; (v) a alteração média a partir da linha de base da Pontuação Total PR-CIS no Dia 71; (vi) a proporção de respondentes S-GAIS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71; e (vii) a proporção de respondentes S-GAIS de nível 2 na nádega alvo no Dia

71. A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias" conforme usado neste estudo 303 foram relativos à dose inicial (Dia 1) no estudo 303.

[00464] Semelhante ao Exemplo 2, havia 3 famílias que incluíam 8 pontos finais secundários principais neste estudo. As diferenças entre os indivíduos tratados com CCH e placebo favoreceram a CCH em 7 dos 8 pontos finais, onde as diferenças foram estatisticamente significativas. Para respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega não alvo, a proporção de respondentes foi maior nos indivíduos tratados com CCH em comparação com placebo, mas a diferença não alcançou significância estatística por meio do teste de multiplicidade com a taxa de erro de 5% tipo I da família. Contudo, este resultado com as análises de pontos finais secundários da nádega não alvo suportou fortemente uma tendência de uma diferença na resposta da nádega não alvo que favorece os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo. Esses resultados estão resumidos na Tabela 37 abaixo. Tabela 37: Resumo dos Resultados para 8 Pontos Finais Secundários Principais (População ITT) Frequência de Diferencia de Família Respondentes Tratamento Secun- Ponto final dária CCH placebo valor Significância (N=214) (N=206) de pa Estatísticab Indivíduos Respondentes de PR-PCSS de Nível 1 da 1 124 (57,9) 61 (29,6) <001 * Nádega Alvo no Dia 71, n (%) Indivíduos Respondentes de PR-PCSS de Nível 2 da 1 45 (21,0) 12 (5,8) <001 * Nádega Alvo no Dia71, n (%) Indivíduos/Investigadores Respondentes Compostos 1 89 (41,6) 23 (11,2) <001 * de Nível 1 da Nádega Alvo no Dia 71, n (%) Indivíduos/Investigadores Respondentes Compostos 1 de Nível 2 da Nádega Não alvo no Dia 71, com Base 13 (6,1) 4(1,9) 0,033 no CR-PCSS e PR-PCSS, n (%) Indivíduos Respondentes de SSRS de Nível 1 no Dia 2 90 (42,1) 31 (15,0) <001 * 71, n (%) Alteração a partir da linha de base (Dia 1) da -11,5 -6,5 2 <001 * Pontuação total de PR-CIS no Dia 71, Média (SD) (12,74) (11,74) Indivíduos Respondentes de S-GAIS de Nível 1 da 3 126 (58,9) 46 (22,3) <001 * Nádega Alvo no Dia 71, n (%) Indivíduos Respondentes de S-GAIS de Nível 2 da 3 38(17,8) 9 (4,4) <001 * Nádega Alvo no Dia 71, n (%) ª valor de p a partir da análise individual sem ajuste de multiplicidade. cb * representa uma significância estatística familiar ao nível de significância de 0,05 após o ajuste de multiplicidade.

[00465] Os dados clínicos relevantes são fornecidos nas Tabelas 38-48 abaixo e mostrados nas Figuras 20-21. Tabela 38. Classificação PR-PCSS e alteração a partir da linha de base para a nádega alvo e não alvo por visita (População mlTT). Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Classificação da nádega alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 3 (1,6) 0 (0,0) 3 (1,4) 0 (0,0) (0) Quase 19 Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 17 (9,1) 3(1,6) 2 (1,0) 19 (9,1) 2 (1,0) (10,2) (1) 45 61 26 61 32 64 32 Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 17 (8,5) (22,8) (32,8) (13,6) (32,8) (16,8) (30,6) (15,9)

Moderado 89 82 78 79 67 85 65 76 76 81 n (%) (3) (42,6) (40,8) (39,6) (39,7) (36,0) (44,5) (34,9) (39,8) (36,4) (40,3)

120 119 73 101 41 77 38 81 47 86 Grave (4) n (%) (57,4) (59,2) (37,1) (50,8) (22,0) (40,3) (20,4) (42,4) (22,5) (42,8)

Não n (%) - - 12 2 23 10 23 10 - - realizado Média 3,6 3,6 3,1 3,4 2,7 3,2 2,6 3,2 2,7 3,2 SD 0,50 0,49 0,78 0,71 0,91 0,74 0,97 0,76 0,97 0,75 Alteração da nádega alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0)

-3 n (%) - - 1 (0,5) 1 (0,5) 6(3,2) 0 (0,0) 7(3,8) 0 (0,0) 7(3,3) 0 (0,0)

36 37 38 -2 n (%) - - 9 (4,6) 5 (2,5) 13 (6,8) 12 (6,3) 12 (6,0) (19,4) (19,9) (18,2)

68 32 75 44 79 49 87 50 -1 n (%) - - (34,5) (16,1) (40,3) (23,0) (42,5) (25,7) (41,6) (24,9)

115 155 65 130 58 (31- 125 72 134 0 n (%) - - (58,4) (77,9) (34,9) (68,1) 2) (65,4) (34,4) (66,7) Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201)

+1 n (%) - - 4 (2,0) 6 (3,0) 4 (2,2) 4 (2,1) 4 (2,2) 5 (2,6) 4 (1,9) 5 (2,5) Não n (%) - - 12 2 23 10 23 10 - - realizado Média - - -0,4 -0,2 -0,9 -0,3 -0,9 -0,4 -0,9 -0,3 SD - - 0,64 0,55 0,86 0,64 0,89 0,64 0,88 0,63 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Classificação da nádega não alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) (0) Quase 21 21 Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 3 (1,5) 0 (0,0) 17 (9,1) 4 (2,1) 3 (1,6) 3 (1,5) (11,3) (10,0) (1) 38 55 24 58 32 64 34 Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 19 (9,5) (19,3) (29,6) (12,6) (31,2) (16,8) (30,6) (16,9)

Moderado 96 71 82 71 67 86 66 72 74 75 n (%) (3) (45,9) (35,3) (41,6) (35,7) (36,0) (45,0) (35,5) (37,7) (35,4) (37,3)

Grave (4) n (%) (54,1) (64,7) (37,6) (54,3) (25,3) (40,3) (21,5) (44,0) (23,4) (44,3) Não n (%) - - 12 2 23 10 23 10 - - realizado Média 3,5 3,6 3,2 3,4 2,8 3,2 2,7 3,2 2,7 3,2 SD 0,50 0,48 0,78 0,71 0,93 0,75 0,96 0,78 0,95 0,78 Alteração da nádega não alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) - - 1 (0,5) 1 (0,5) 4 (2,2) 1 (0,5) 5 (2,7) 0 (0,0) 5 (2,4) 0 (0,0) 34 38 39 -2 n (%) - - 9 (4,6) 5 (2,5) 11 (5,8) 15 (7,9) 15 (7,5) (18,3) (20,4) (18,7) 60 35 73 54 77 53 85 56 -1 n (%) - - (30,5) (17,6) (39,2) (28,3) (41,4) (27,7) (40,7) (27,9) Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR- Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo

PCSS (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) 125 153 69 123 63 118 75 125 0 n (%) - - (63,5) (76,9) (37,1) (64,4) (33,9) (61,8) (35,9) (62,2) +1 n (%) - - 2 (1,0) 5 (2,5) 6 (3,2) 2 (1,0) 3 (1,6) 5 (2,6) 5 (2,4) 5 (2,5) Não n - - 12 2 23 10 23 10 realizado Média - - -0,4 -0,2 -0,8 -0,4 -0,9 -0,4 -0,8 -0,4 SD - - 0,62 0,55 0,85 0,64 0,84 0,67 0,84 0,66 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 39. Respondentes de PR-PCSS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 78 (39,6) 38 (19,1) 117 (62,9) 57 (29,8) 124 (66,7) 61 (31,9) 133 (63,6) 62 (30,8) Não n (%) 119 (60,4) 161 (80,9) 69 (37,1) 134 (70,2) 62 (33,3) 130 (68,1) 76 (36,4) 139 (69,2) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p 0,708 0,003 <0,001 <0,001 PR-PCSS Estatística Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) Respondente da nádega não alvo de nível 1 Sim n (%) 70 (35,5) 41 (20,6) 111 (59,7) 66 (34,6) 120 (64,5) 68 (35,6) 129 (61,7) 71 (35,3) Não n (%) 127 (64,5) 158 (79,4) 75 (40,3) 125 (65,4) 66 (35,5) 123 (64,4) 80 (38,3) 130 (64,7) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201)

valor de p 0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 1 Sim n (%) 92 (46,7) 56 (28,1) 132 (71,0) 79 (41,4) 135 (72,6) 81 (42,4) 147 (70,3) 84 (41,8) Não n (%) 105 (53,3) 143 (71,9) 54 (29,0) 112 (58,6) 51 (27,4) 110(57,6) 62 (29,7) 117 (58,2) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas nível 1 Sim n (%) 56 (28,4) 23 (11,6) 96 (51,6) 44 (23,0) 109 (58,6) 48 (25,1) 115 (55,0) 49 (24,4) Não n (%) 141 (71,6) 176 (88,4) 90 (48,4) 147 (77,0) 77 (41,4) 143 (74,9) 94 (45,0) 152 (75,6) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 10 (5,1) 6 (3,0) 42 (22,6) 13 (6,8) 45 (24,2) 12(6,3) 46 (22,0) 12 (6,0) Não n (%) 187 (94,9) 193 (97,0) 144 (77,4) 178 (93,2) 141 (75,8) 179 (93,7) 163 (78,0) 189 (94,0) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p 0,313 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 10(5,1) 6 (3,0) 38 (20,4) 12 (6,3) 43 (23,1) 15 (7,9) 44 (21,1) 15 (7,5) Não n (%) 187 (94,9) 193 (97,0) 148 (79,6) 179 (93,7) 143 (76,9) 176 (92,1) 165 (78,9) 186 (92,5) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p 0,269 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 15 (7,6) 8 (4,0) 60 (32,3) 19 (9,9) 59(31,7) 20 (10,5) 61 (29,2) 20(10,0) Não n (%) 182 (92,4) 191 (96,0) 126 (67,7) 172 (90,1) 127 (68,3) 171 (89,5) 148 (70,8) 181 (90,0) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p 0,124 <0,001 <0,001 <0,001 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 5 (2,5) 4 (2,0) 20 (10,8) 6 (3,1) 29 (15,6) 7 (3,7) 29 (13,9) 7 (3,5) Não n (%) 192 (97,5) 195 (98,0) 166 (89,2) 185 (96,9) 157 (84,4) 184 (96,3) 180 (86,1) 194 (96,5) Ausente n (%) 12 2 23 10 23 10 - - valor de p 0,708 0,003 <0,001 <0,001

Tabela 40. Classificação CR-PCSS e alteração a partir da linha de base para as nádegas alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Classificação da nádega alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 1(0,5) 0 (0,0) (0) Quase n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 4 (2,0 0 (0,0) 10 (5,4) 2 (1,0) 16 (8,6) 2 (1,1) 16 (7,7) 2 (1,0) Nenhum (1)

Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 7 (3,5) 17 (8,9) (18,4) (35,5) (37,8) (15,8) (35,9) (15,4) Moderado n (%) 127 128 (3) 115 131 75 115 71 103 84 108 (60,8) (63,7) (58,7) (65,8) (40,3) (60,2) (38,4) (54,2) (40,2) (53,7) n (%) 73 Grave (4) 82 (39,2) 41 60 35 57 27 55 33 60 (36,3) (20,9) (30,2) (18,8) (29,8) (14,6) (28,9) (15,8) (29,9) Não n (%) - - 13 23 24 - - realizado 2 10 1,1 Média 3,4 3,4 3,0 3,3 2,7 3,2 2,6 3,1 2,6 3,1

SD 0,49 0,48 0,69 0;57 0,83 0,63 0,86 0,69 0,86 0,69 Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Alteração da nádega alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) - - 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) -2 n (%) - - 6(3,1) 0 (0,0) 20 3 (1,6) 31 3 (1,6) 31 3 (1,5) (10,8) (16,8) (14,8) -1 n (%) - - 71 29 91 33 89 49 96 51 (36,2) (14,6) (48,9) (17,3) (48,1) (25,8) (45,9) (25,4) n (%) 0 - - 117 160 72 148 63 130 79 138 (59,7) (80,4) (38,7) (77,5) (34,1) (68,4) (37,8) (68,7) +1 n (%) - - 2 (1,0) 9 (4,5) 3 (1,6) 7 (3,7) 1 (0,5) 8 (4,2) 2(1-0) 9(4,5) Não n - - 13 2 23 10 24 11 - - realizado Média - - -0,4 -0,1 -0,7 -0,2 -0,8 -0,2 -0,8 -0,2

SD - - 0,57 0,47 0,68 0,50 0,72 0,55 0,73 0,55 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Classificação da nádega não alvo Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (0) Quase Nenhum n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 12 (6,5) 3 (1,6) 16 (8,6) 3 (1,6) 16 (7,7) 3 (1,5) (1) 49 69 75 28 83 29 Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 10 (5,0) 13 (6,8) (25,0) (37,1) (40,5) (14,7) (39,7) (14,4)

Moderado 126 123 95 123 74 115 65 98 72 105 n (%) (3) (60,3) (61,2) (48,5) (61,8) (39,8) (60,2) (35,1) (51,6) (34,4) (52,2)

78 51 66 31 60 29 61 38 64 Grave (4) n (%) 83 (39,7) (38,8) (26,0) (33,2) (16,7) (31,4) (15,7) (32,1) (18,2) (31,8)

Não n (%) - - 13 23 24 - - realizado 2 10 11 Média 3,4 3,4 3,0 3,3 2,7 3,2 3.1 3.1 2,6 2,6

CR- Dia 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) Estatística PCSS CCH placebo CCH placebo CCH (N placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) 209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201)

SD 0,49 0,49 0,73 0,55 0,83 0,63 0,86 0,72 0,87 0,71 Alteração da nádega não alvo a partir da linha de base -4 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0)

-3 n (%) - - 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0)

24 28 29 -2 n (%) - - 4 (2,0) 0 (0,0) 4 (2,1) 5 (2,6) 5 (2,5) (12,9) (15,1) (13,9)

74 35 92 35 97 49 105 52 -1 n (%) - - (37,8) (17,6) (49,5) (18,3) (52,4) (25,8) (50,2) (25,9)

114 151 68 142 58 124 72 131 0 n (%) - - (58,2) (75,9) (36,6) (74,3) (31,4) (65,3) (34,4) (65,2)

+1 n (%) - - 4 (2,0) 13 (6,5) 2 (1,1) 10 (5,2) 2 (1,1) 12 (6,3) 3 (1,4) 13 (6,5) Não n - - 13 2 23 10 24 11 - - realizado Média - - -0,4 -0,1 -0,7 -0,2 -0,8 -0,2 -0,8 -0,2 SD - - 0,57 0,48 0,69 0,54 0,69 0,61 0,70 0,60 valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 41. Respondentes de CR-PCSS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente da nádega de nível 1 Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) CR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Sim n (%) 77 (39,3) 30 (15,1) 111 (59,7) 36 (18,8) 121 (65,4) 52 (27,4) 128 (61,2) 54 (26,9) Não n (%) 119(60,7) 169 (84,9) 75 (40,3) 155 (81,2) 64 (34,6) 138 (72,6) 81 (38,8) 147 (73,1) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 1 Sim n (%) 78 (39,8) 35 (17,6) 116 (62,4) 39 (20,4) 125 (67,6) 54 (28,4) 134 (64,1) 57 (28,4) Não n (%) 118 (60,2) 164 (82,4) 70 (37,6) 152 (79,6) 60 (32,4) 136 (71,6) 75 (35,9) 144 (71,6) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos uma nádega de nível 1 Sim n (%) 104 (53,1) 48 (24,1) 131 (70,4) 52 (27,2) 140 (75,7) 70 (36,8) 151 (72,2) 73 (36,3) Não n (%) 92 (46,9) 151 (75,9) 55 (29,6) 139 (72,8) 45 (24,3) 120 (63,2) 58 (27,8) 128 (63,7) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 1 Sim n (%) 51 (26,0) 17(8,5) 96 (51,6) 23 (12,0) 106 (57,3) 36 (18,9) 111 (53,1) 38 (18,9)

Não n (%) 145 (74,0) 182 (91,5) 90 (48,4) 168 (88,0) 79 (42,7) 154 (81,1) 98 (46,9) 163 (81,1) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 6 (3,1) 1 (0,5) 20 (10,8) 3 (1,6) 32 (17,3) 3 (1,6) 32 (15,3) 3 (1,5) Não n (%) 190 (96,9) 198 (99,5) 166 (89,2) 188 (98,4) 153 (82,7) 187 (98,4) 177 (84,7) 198 (98,5) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0,062 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 4 (2,0) 0 24 (12,9) 4 (2,1) 28 (15,1) 5 (2,6) 29 (13,9) 5 (2,5)

199 Não n (%) 192 (98,0) 162 (87,1) 187 (97,9) 157 (84,9) 185 (97,4) 180 (86,1) 196 (97,5) (100,0)

Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0,038 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 7 (3,6) 1 (0,5) 30 (16,1) 5 (2,6) 44 (23,8) 6 (3,2) 45 (21,5) 6 (3,0) No n (%) 189 (96,4) 198 (99,5) 156 (83,9) 186 (97,4) 141 (76,2) 184 (96,8) 164 (78,5) 195 (97,0) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0,033 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 3 (1,5) 0 14 (7,5) 2 (1,0) 16 (8,6) 2 (1,1) 16 (7,7) 2 (1,0)

199 Não n (%) 193 (98,5) 172 (92,5) 189 (99,0) 169 (91,4) 188 (98,9) 193 (92,3) 199 (99,0) (100,0)

Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0,080 0,001 <0,001 0,001 Tabela 42. Respondentes compostos de CR-PCSS e PR-PCSS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). CR-PCSS/ Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-PCSS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo Compostos (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 36 (18,4) 4 (2,0) 77 (41,4) 16 (8,4) 89 (48,1) 23 (12,1) 93 (44,5) 23 (11,4) Não n (%) 160 (81,6) 195 (98,0) 109 (58,6) 175 (91,6) 96 (51,9) 167 (87,9) 116 (55,5) 178 (88,6) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 1 Sim n (%) 36 (18,4) 7 (3,5) 77 (41,4) 16 (8,4) 92 (49,7) 29 (15,3) 97 (46,4) 30 (14,9) Não n (%) 160 (81,6) 192 (96,5) 109 (58,6) 175 (91,6) 93 (50,3) 161 (84,7) 112 (53,6) 171 (85,1) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos uma nádega de nível 1

Sim n (%) 52 (26,5) 10 (5,0) 97 (52,2) 23 (12,0) 108 (58,4) 36 (18,9) 115 (55,0) 37 (18,4) Não n (%) 144 (73,5) 189 (95,0) 89 (47,8) 168 (88,0) 77 (41,6) 154 (81,1) 94 (45,0) 164 (81,6) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 1 Sim n (%) 20 (10,2) 1 (0,5) 57 (30,6) 9 (4,7) 73 (39,5) 16 (8,4) 75 (35,9) 16 (8,0) Não n (%) 176 (89,8) 198 (99,5) 129 (69,4) 182 (95,3) 112 (60,5) 174 (91,6) 134 (64,1) 185 (92,0) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 1 (0,5) 0 5 (2,7) 2 (1,0) 12 (6,5) 1 (0,5) 12 (5,7) 1 (0,5)

199 Não n (%) 195 (99,5) 181 (97,3) 189 (99,0) 173 (93,5) 189 (99,5) 197 (94,3) 200 (99,5) (100,0)

Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0.330 0.245 0,001 0,003 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 1 (0,5) 0 9 (4,8) 1 (0,5) 13 (7,0) 4 (2,1) 13 (6,2) 4 (2,0)

199 Não n (%) 195 (99,5) 177 (95,2) 190 (99,5) 172 (93,0) 186 (97,9) 196 (93,8) 197 (98,0) (100,0)

Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0.292 0,009 0,021 0,032 Respondente de pelo menos uma nádega de nível 2 Sim n (%) 2 (1,0) 0 12 (6,5) 2 (1,0) 20 (10,8) 4 (2,1) 20 (9,6) 4 (2,0)

199 Não n (%) 194 (99,0) 174 (93,5) 189 (99,0) 165 (89,2) 186 (97,9) 189 (90,4) 197 (98,0) (100,0)

Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p 0.152 0,005 <0,001 0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 0 0 2 (1,1) 1 (0,5) 5 (2,7) 1 (0,5) 5 (2,4) 1 (0,5) 196 199 Não n (%) 184 (98,9) 190 (99,5) 180 (97,3) 189 (99,5) 204 (97,6) 200 (99,5) (100,0) (100,0) Ausente n (%) 13 2 23 10 24 11 - - valor de p - 0,598 0,084 0,105 Tabela 43. S-GAIS de nádega alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Nádega alvo Muito mais n (%) 5 (2,6) 1 (0,5) 4 (2,2) 0 (0,0) 10(5,4) 0 (0,0) 10 (4,8) 0 (0,0) melhorada (3)

Muito melhorada n (%) 5 (2,6) 4 (2,0) 30 (16,2) 8 (4,2) 28 (15,1) 9 (4,7) 29(13,9) 9 (4,5) (2)

Melhorada n (%) 89 (45,4) 31 (15,7) 101 (54,6) 47 (24,7) 88 (47,3) 37 (19,4) 96 (45,9) 38 (18,9) (1) Sem alteração n (%) 91 (46,4) 153 (77,7) 44 (23,8) 128 (67,4) 54 (29,0) 130 (68,1) 68 (32,5) 139 (69,2) (0) Pior (-1) n (%) 5 (2,6) 8 (4,1) 5 (2,7) 7 (3,7) 5 (2,7) 14 (7,3) 5 (2,4) 14 (7,0) Muito pior n (%) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (-2) Muito mais pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) (-3) Ausente N 13 4 24 11 23 10 - - Média 0,5 (0,73) 0,2 (0,54) 0,9 (0,82) 0,3 (0,61) 0,9 (0,92) 0,2 (0,68) 0,8 (0,90) 0,2 (0,67) (SD) valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Nádega não alvo Muito mais n (%) 3 (1,5) 2 (1,0) 6 (3,2) 0 (0,0) 10 (5,4) 1 (0,5) 10 (4,8) 1 (0,5) melhorada (3) Muito melhorada n (%) 6 (3,1) 5 (2,6) 29 (15,7) 8 (4,2) 29 (15,6) 6 (3,1) 30 (14,4) 6 (3,0) (2)

Melhorada n (%) 94 (48,0) 25 (12,8) 92 (49,7) 46 (24,2) 85 (45,7) 43 (22,5) 95 (45,5) 44 (21,9) (1) Sem alteração n (%) 86 (43,9) 151 (77,0) 49 (26,5) 129 (67,9) 54 (29,0) 130 (68,1) 66 (31,6) 138 (68,7) (2) Pior (-1) n (%) 6 (3,1) 12 (6,1) 8 (4,3) 6(3,2) 7 (3,8) 10 (5,2) 7 (3,3) 11 (5,5) Muito pior n (%) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (-2)

Muito mais pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) (-3)

Ausente N 13 5 24 11 23 10 - - Média 0,5 (0,70) 0,1 (0,62) 0,9 (0,87) 0,3 (0,62) 0,9 (0,94) 0,2 (0,67) 0,8 (0,92) 0,2 (0,66) (SD) valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 44. Respondentes de S-GAIS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) S-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 99 (50,5) 36 (18,3) 135 (73,0) 55 (28,9) 126 (67,7) 46 (24,1) 135 (64,6) 47 (23,4)

Ausente n 13 4 24 11 23 10 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 1 Sim n (%) 103 (52,6) 32 (16,3) 127 (68,6) 54 (28,4) 124 (66,7) 50 (26,2) 135 (64,6) 51 (25,4) Ausente n 13 5 24 11 23 10 - - valor de p 0,192 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 1 Sim n (%) 119 (60,7) 45 (23,0) 144 (77,8) 67 (35,3) 137 (73,7) 60 (31,4) 148 (70,8) 62 (30,8) Ausente n 13 5 24 11 23 10 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 1 Sim n (%) 83 (42,3) 23 (11,7) 118 (63,8) 42 (22,1) 113 (60,8) 36 (18,8) 122 (58,4) 36(17,9) Ausente n 13 4 24 11 23 10 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 10 (5,1) 5 (2,5) 34 (18,4) 8 (4,2) 38 (20,4) 9 (4,7) 39 (18,7) 9 (4,5) Ausente n 13 4 24 11 23 10 - - valor de p 0,192 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 9 (4,6) 7 (3,6) 35 (18,9) 8 (4,2) 39 (21,0) 7 (3,7) 40 (19,1) 7 (3,5) Ausente n 13 5 24 11 23 10 - - valor de p 0,661 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 13 (6,6) 8 (4,1) 42 (22,7) 10 (5,3) 50 (26,9) 10 (5,2) 51 (24,4) 10 (5,0) Ausente n 13 5 24 11 23 10 - - valor de p 0,305 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 6 (3,1) 4 (2,0) 27 (14,6) 6 (3,2) 27 (14,5) 6 (3,1) 28 (13,4) 6 (3,0) Ausente n 13 4 24 11 23 10 - - valor de p 0,523 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 45. Classificações I-GAIS das nádegas alvo e não alvo por visita (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Nádega alvo Muito mais n (%) melhorada (3) Muito melhorada n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 1 (0,5) 0 (0,0) 2 (1,1) 1 (0,5) 3 (1,4) 1 (0,5) (2)

Melhorada n (%) 20 (10,3) 1 (0,5) 36 (19,5) 3 (1,6) 45 (24,3) 3 (1,6) 46 (22,0) 3 (1,5) (1) Sem alteração n (%) 88 (45,1) 18 (9,2) 93 (50,3) 33 (17,4) 84 (45,4) 42 (22,1) 94 (45,0) 42 (20,9) (0) Pior (-1) n (%) 85 (43,6) 175 (89,3) 52 (28,1) 152 (80,0) 49 (26,5) 143 (75,3) 61 (29,2) 154 (76,6) Muito pior n (%) 2 (1,0) 2 (1,0) 3 (1,6) 2 (1,1) 5 (2,7) 1 (0,5) 5 (2,4) 1 (0,5) (-2) Muito mais pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (-3) Ausente N 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Média 14 5 24 11 24 11 - - (SD) P=valor 0,6 (0,68) 0,1 (0,34) 0,9 (0,74) 0,2 (0,46) Nádega não alvo Muito mais n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (1,1) 1 (0,5) 1 (0,5) 1 (0,5) 2 (1,0) 1 (0,5) melhorada (3) Muito melhorada n (%) 11 (5,6) 3 (1,5) 33 (17,8) 2 (1,1) 43 (23,2) 6 (3,2) 44 (21,1) 6 (3,0) (2)

Melhorada n (%) 96 (49,2) 25 (12,8) 99 (53,5) 31 (16,3) 86 (46,5) 34 (17,9) 98 (46,9) 34 (16,9) (1) Sem alteração n (%) 87 (44,6) 167 (85,2) 49 (26,5) 155 (81,6) 50 (27,0) 149 (78,4) 60 (28,7) 160 (79,6) (0) Pior (-1) n (%) 1 (0,5) 1 (0,5) 2 (1,1) 1 (0,5) 5 (2,7) 0 (0,0) 5 (2,4) 0 (0,0) Muito pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (-2) Muito mais pior n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (-3) Ausente N 14 5 24 11 24 11 0 0 Média 0,6 (0,60) 0,2 (0,41) 0,9 (0,72) 0,2 (0,47) 0,9 (0,79) 0,3 (0,54) 0,9 (0,79) 0,2 (0,52) (SD) P=valor <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 46. Respondentes I-GAIS de nível 1 e 2 para nádega alvo, nádega não alvo, pelo menos uma nádega e ambas as nádegas (População mITT). Dia 22 Dia 43 Dia 71 Dia 71 (LOCF) I-GAIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Respondente da nádega de nível 1 Sim n (%) 108 (55,4) 19 (9,7) 130 (70,3) 36 (18,9) 131 (70,8) 46 (24,2) 143 (68,4) 46 (22,9) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Respondente da nádega não alvo de nível 1 Sim n (%) 107 (54,9) 28 (14,3) 134 (72,4) 34 (17,9) 130 (70,3) 41 (21,6) 144 (68,9) 41 (20,4) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 1 Sim n (%) 125 (64,1) 30 (15,3) 139 (75,1) 40 (21,1) 141 (76,2) 52 (27,4) 157 (75,1) 52 (25,9) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas nível 1 Sim n (%) 90 (46,2) 17 (8,7) 125 (67,6) 30 (15,8) 120 (64,9) 35 (18,4) 130 (62,2) 35 (17,4) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega alvo de nível 2 Sim n (%) 20 (10,3) 1 (0,5) 37 (20,0) 3 (1,6) 47 (25,4) 4 (2,1) 49 (23,4) 4 (2,0) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente da nádega não alvo de nível 2 Sim n (%) 11 (5,6) 3 (1,5) 35 (18,9) 3 (1,6) 44 (23,8) 7 (3,7) 46 (22,0) 7 (3,5) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p 0,034 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de pelo menos 1 nádega de nível 2 Sim n (%) 22 (11,3) 3 (1,5) 46 (24,9) 5 (2,6) 59 (31,9) 7 (3,7) 62 (29,7) 7 (3,5) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Respondente de ambas as nádegas de nível 2 Sim n (%) 9 (4,6) 1 (0,5) 26 (14,1) 1 (0,5) 32 (17,3) 4 (2,1) 33 (15,8) 4 (2,0) Ausente n 14 5 24 11 24 11 - - valor de p 0,010 <0,001 <0,001 <0,001 Tabela 47. Alteração no PR-CIS a partir da linha de base (População mITT). Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) PR-CIS Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Pontuação total

Média (SD) 52,4 (8,00) 51,5 (9,49) 39,1 (13,39) 44,6 (12,71) 39,7 (13,34) 44,7 (12,72)

Alteração Média (SD) a - - -13,2 (12,80) -7,0 (12,05) -12,8 (12,62) -6,9 (11,97) partir da linha de base valor de p - <0,001 <0,001 Pontuação abreviada

Média (SD) 44,4 (6,68) 43,9 (8,00) 33,1 (11,33) 37,9 (10,55) 33,6 (11,27) 38,1 (10,55)

Alteração Média (SD) a - - -11,3 (10,80) -6,1 (10,25) -10,9 (10,65) -5,9 (10,19) partir da linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #1 impacto de felicidade

Média (SD) 0,8 (1,89) 0,6 (1,29) 4,1 (2,88) 2,1 (2,64) 3,9 (2,89) 2,1 (2,65) Alteração Média (SD) a - - 3,3 (3,34) 1,5 (2,68) 3,2 (3,30) 1,5 (2,67) partir da linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #2 impacto de incômodo Média (SD) 8,6 (2,52) 8,3 (2,81) 6,5 (2,85) 7,0 (3,18) 6,6 (2,84) 7,1 (3,16) Alteração Média (SD) a - - -2,0 (3,37) -1,3 (3,72) -1,9 (3,31) -1,3 (3,71) partir da linha de base valor de p - 0,052 0,063 #3 impacto de constrangimento

Média (SD) 8,8 (2,13) 8,6 (2,44) 6,9 (2,67) 7,5 (2,78) 7,0 (2,64) 7,5 (2,77) Alteração Média (SD) a - - -2,0 (2,84) -1,2 (2,83) -1,8 (2,90) -1,1 (2,82) partir da linha de base valor de p - 0,012 0,022 #4 impacto de vergonha Média (SD) 9,0 (1,64) 8,8 (2,16) 6,7 (2,82) 7,6 (2,61) 6,8 (2,79) 7,7 (2,60) Alteração Média (SD) a - - -2,3 (2,71) -1,2 (2,63) -2,2 (2,67) -1,2 (2,62) partir da linha de base valor de p - <0,001 <0,001 #5 impacto de aparência envelhecida Média (SD) 8,0 (2,23) 7,6 (2,45) 6,0 (2,86) 6,6 (3,06) 6,1 (2,86) 6,7 (3,05) Alteração Média (SD) a - - -1,9 (3,04) -1,0 (2,99) -1,8 (2,98) -0,9 (2,96) partir da linha de base valor de p - 0,009 0,009 #6 impacto de preocupação com forma corporal

Média (SD) 8,9 (1,54) 8,8 (1,69) 7,0 (2,66) 7,8 (2,38) 7,1 (2,64) 7,9 (2,37) Alteração Média (SD) a - - -1,8 (2,52) 0,9 (2,31) -1,8 (2,50) -0,9 (2,29) partir da linha de base valor de p - <0,001 <0,001

Tabela 48. Pontuação de autoavaliação do indivíduo (SSRS) por visita (População mITT). Linha de base Dia 71 Dia 71 (LOCF) Pontuação de Estatística CCH placebo CCH placebo CCH placebo

SSRS (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Extremamente n (%) 0 (0,0) 1 (0,5) 6 (3,2) 1 (0,5) 6 (3,0) 1 (0,5) Satisfeito (6) Satisfeito (5) n (%) 2 (1,0) 1 (0,5) 38 (20,4) 12 (6,3) 39 (19,7) 12 (6,2) Ligeiramente n (%) 3(1,4) 6 (3,0) 46 (24,7) 18 (9,4) 46 (23,2) 18 (9,2) Satisfeito (4) Nem satisfeito ou insatisfeito n (%) 6 (2,9) 4 (2,0) 34 (18,3) 38 (19,9) 36 (18,2) 39 (20,0) (3) Ligeiramente n (%) 26 (12,4) 15 (7,5) 17 (9,1) 34 (17,8) 19 (9,6) 34 (17,4) Insatisfeito (2) Insatisfeito (1) n (%) 61 (29,2) 79 (39,5) 30 (16,1) 42 (22,0) 34(17,2) 43 (22,1) Extremamente n (%) 111 (53,1) 94 (47,0) 15 (8,1) 46 (24,1) 18 (9,1) 48 (24,6) Insatisfeito (0) Ausente N 0 1 23 10 11 6 Média (SD) 0,7 (0,99) 0,8 (103) 3,1 (1,68) 1,9 (155) 3,0 (1,71) 1,9 (155) valor de p 0 (0,0) 1 (0,5) 6(3,2) Respondente de SSRS de nível um n (%) 90 (48,4) 31 (16,2) 91 (46,0) 31 (15,9) valor de p <0,001

[00466] Com relação à Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite, uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH estavam satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento da sua celulite do que aqueles tratados com placebo (46,8% com relação a 13,6%, respectivamente; p <0,001). Houve uma diferença estatisticamente significativa (p <0,001) na média (SD) das pontuações de satisfação do indivíduo no Dia 71 entre os grupos de tratamento CCH (0,3 [1,05]) e placebo (-0,6 [1,04]). Isso está resumido na Tabela 49 abaixo. Tabela 49: Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite no Dia 71 (População mITT)

Dia 71 Dia 71 (LOCF)a CCH placebo CCH placebo Pontuação de Satisfação Estatística (N=209) (N=201) (N=209) (N=201) Muito satisfeito (+2) n (%) 15 (8,1) 4 (2,1) 15 (7,6) 4 (2,1) Satisfeito (+1) n (%) 72 (38,7) 22 (11,5) 74 (37,4) 22 (11,3) Nem satisfeito ou insatisfeito (0) n (%) 60 (32,3) 73 (38,2) 64 (32,3) 75 (38,5) Insatisfeito (-1) n (%) 24 (12,9) 47 (24,6) 29 (14,6) 48 (24,6) Muito Insatisfeito (-2) n (%) 15 (8,1) 45 (23,6) 16 (8,1) 46 (23,6) Ausente n 23 10 11 6 Média (SD) 0,3 (1,05) -0,6 (1,04) 0,2 (1,05) -0,6 (1,04) valor de pb <0,001 <0,001 Respondentes de Pontuação do n (%) 87 (46,8) 26 (13,6) 89 (44,9) 26 (13,3) Indivíduo (Pontuação ≥ 1) valor de pc <0,001 <0,001 a Se a avaliação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite no Dia 71 estava faltando, a última avaliação após a injeção inicial foi levada adiante para o Dia 71. b O valor de p para a Satisfação do Indivíduo com Tratamento para Celulite foi com base no teste de soma de classificação de Wilcoxon. c valor de p para o respondente de satisfação de indivíduos de nível 1 foi com base em um teste CMH ajustado para o centro de análise. Conclusões de Eficácia

[00467] O ponto final primário foi a proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 na População ITT. Um respondente composto CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 foi definido como um indivíduo com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS.

[00468] Neste estudo, uma diferença estatisticamente significativa (p = 0,002) foi vista na proporção de respondentes compostos PR-PCSS/CR-PCSS de nível 2 em indivíduos tratados com CCH (12 [5,6%]) em comparação com indivíduos tratados com placebo (1 [0,5%]).

[00469] A fim de confirmar o efeito da droga usando escalas ortogonais, uma série de pontos finais secundários foram avaliados. Houve diferenças estatisticamente significativas na resposta que favoreceu os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo em 7 dos 8 pontos finais secundários principais usando a População ITT. Nas avaliações de gravidade, uma alteração negativa a partir da linha de base indica melhora na celulite. Os resultados para a nádega alvo e não alvo são descritos abaixo: • Proporção de respondentes PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (124 [57,9%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 61 [29,6%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes PR-PCSS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 (45 [21,0%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 12 [5,8%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes composto CR-PCSS/PR-PCSS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (89 [41,6%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 23 [11,2%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes SSRS de nível 1 no Dia 71 (90 [42,1%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 31 [15,0%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Alteração média (SD) a partir da linha de base da Pontuação Total PR-CIS no Dia 71 (-11,5 [12,74] em indivíduos tratados com CCH com relação a -6,5 [11,74] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes S-GAIS de nível 1 na nádega alvo no Dia 71 (126 [58,9%] em indivíduos tratados com CCH com relação a 46 [22,3%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • Proporção de respondentes S-GAIS de nível 2 na nádega alvo no Dia 71 (38 [17,8%] em indivíduos tratados com CCH com relação 9 [4,4%] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001).

[00470] Para respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 na nádega não alvo, a proporção de respondentes foi maior nos indivíduos tratados com CCH do que nos indivíduos tratados com placebo (13 [6,1%] com relação a 4 [1,9%], respectivamente, p = 0,033), mas essa diferença não alcançou significância estatística por meio do teste de multiplicidade com taxa de erro tipo I de família de 5%. Contudo, este resultado com as análises de ponto finais secundários da nádega não alvo suportam fortemente uma tendência de uma diferença na resposta da nádega não alvo que favorece os indivíduos tratados com CCH em comparação com indivíduos tratados com placebo. Todas as análises de sensibilidade suportaram os resultados para os pontos finais primário e secundário principais.

[00471] Houve também diferenças estatisticamente significativas entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo em todos os pontos finais de suporte no Dia 71 do estudo na População mITT (e em muitos casos diferenças estatisticamente significativas foram vistas logo após um único tratamento com CCH). Nas avaliações de gravidade, uma alteração negativa a partir da linha de base indica melhora na celulite. Os resultados para a nádega alvo e não alvo são descritos abaixo: • No Dia 71, a alteração média (SD) a partir da linha de base em PR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo na nádega alvo (0,9 [0,89] com relação a 0,4 [0,64], respectivamente; p <0,001) e a nádega não alvo (0,9 [0,84] com relação a 0,4 [0,67], respectivamente; <p 0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes PR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (66,7% com relação a 31,9%, respectivamente, p <0,001) e na nádega não alvo (64,5% com relação 35,6%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a alteração média (SD) a partir da linha de base em CR-PCSS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo na nádega alvo (0,8 [0,72] com relação a 0,2 [0,55], respectivamente; p <0,001) e a nádega não alvo (0,8 [0,89] com relação a

0,2 [0,61], respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes de CR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (65,4% com relação a 27,4%, respectivamente, p <0,001) e na nádega não alvo (67,6% com relação a 28,4%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes composto CR- PCSS/PR-PCSS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (48,1% com relação 12,1%, respectivamente; p <0,001) e na nádega não alvo (49,7% com relação 15,3%, respectivamente, p <0,001). • No Dia 71, a média (SD) de S-GAIS foi maior em indivíduos tratados com CCH na nádega alvo em comparação com indivíduos tratados com placebo (0,9 [0,92] com relação a 0,2 [0,68], respectivamente, p <0,001). Os resultados foram semelhantes para a nádega não alvo (0,9 [0,94] em indivíduos tratados com CCH com relação 0,2 [0,67] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes de S-GAIS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (67,7% com relação a 24,1%, respectivamente; p <0,001) e nádega não alvo (66,7% com relação a 26,2%, respectivamente; p <0,001). • No Dia 71, a média (SD) de I-GAIS foi estatística e significativamente (p <0,001) maior em indivíduos tratados com CCH na nádega alvo em comparação com indivíduos tratados com placebo (0,9 [0,81] com relação a 0,3 [0,52], respectivamente). Os resultados foram semelhantes para a nádega não alvo (0,9 [0,79] em indivíduos tratados com CCH com relação 0,3 [0,54] em indivíduos tratados com placebo, p <0,001). • No Dia 71, a proporção de respondentes de I-GAIS de nível 1 foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo na nádega alvo (70,8% com relação a 24,2%, respectivamente; p <0,001) e nádega não alvo (70,3% com relação a 21,6%, respectivamente; p <0,001). • A alteração média (SD) do PR-CIS a partir da linha de base no Dia 71 foi estatística e significativamente favorável para indivíduos tratados com CCH com relação indivíduos com tratamento com placebo na pontuação total (13,2 [12,80] com relação a -7,0 [12,05], respectivamente, p <0,001) e pontuação abreviada (12,8 [12,62] com relação a 6,1 [110,25], respectivamente, p <0,001). Todas as pontuações de impacto individual também tiveram diferenças estatisticamente significativas no Dia 71 (felicidade com a aparência de celulite [p <0,001], constrangimento [p = 0,012], vergonha [p <0,001], aparência mais velha [p = 0,009], preocupação com a forma corporal [p <0,001]) exceto para incômodo onde a tendência favoreceu os indivíduos tratados com CCH, mas não alcançou significância estatística (p = 0,052). • No Dia 71, a proporção de respondentes PR-CIS foi maior em indivíduos tratados com CCH do que naqueles tratados com placebo para pontuação total (50,0% com relação a 26,2%, respectivamente) e para a pontuação abreviada (52,2% com relação a 29,3%, respectivamente). Essas diferenças foram estatisticamente significativas com p <0,001. Além disso, a proporção de respondentes para cada pontuação de impacto individual foi maior em indivíduos tratados com CCH do que em indivíduos tratados com placebo. Essas diferenças também foram estatisticamente significativas.

[00472] Os resultados de suporte adicionais incluíram: • No Dia 71, a pontuação média (SD) de SSRS foi maior em indivíduos tratados com CCH (3,1 [1,68]) do que naqueles tratados com placebo (1,9 [1,55]). Esta diferença foi estatisticamente significativa (p <0,001). Além disso, uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH eram respondentes SSRS de nível 1 do que aqueles tratados com placebo:

48,4% com relação 16,2%, respectivamente. Esta diferença foi estatisticamente significativa (p <0,001). • Uma proporção maior de indivíduos tratados com CCH estavam satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento de sua celulite do que aqueles tratados com placebo (46,8% com relação a 13,6%, respectivamente, p <0,001). Houve uma diferença estatisticamente significativa (p <0,001) na média (SD) das pontuações de satisfação do indivíduo no Dia 71 entre os grupos de tratamento CCH (0,3 [1,05]) e placebo (0,6 [1,04]). • Uma série de tabulações cruzadas mostra consistência entre PR-PCSS e S-GAIS. Uma alteração de nível 1 no PR-PCSS foi associada a alterações semelhantes no S-GAIS. • As análises por local dos pontos finais primários e secundários indicaram que a resposta foi vista em vários locais e que nenhum local impactou de maneira acentuada os resultados de qualquer análise de eficácia. Conclusão

[00473] Este estudo alcançou seu ponto final primário com diferença estatisticamente significativa na proporção de respondentes compostos CR-PCSS/PR-PCSS de nível 2 em indivíduos tratados com CCH em comparação com indivíduos tratados com placebo quando dadas 0,84 mg em cada nádega (1,68 mg no total) por até 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo em mulheres adultas com EFP das nádegas bilaterais. Houve diferenças estatisticamente significativas na resposta que favoreceu os indivíduos tratados com CCH em relação aos indivíduos tratados com placebo em 7 dos 8 pontos finais secundários principais e todos os pontos finais de suporte.

[00474] Não houve problemas de segurança significativos ou inesperados após a administração de CCH. A maioria dos AEs ocorreu no local de injeção e se solucionaram em 14 dias. Não foram observadas tendências clinicamente significativas ou preocupantes em relação aos parâmetros laboratoriais de hematologia ou química ou sinais vitais. Os resultados de imunogenicidade não revelaram quaisquer diferenças potenciais em relação aos vistos em outros estudos clínicos com esta droga.

[00475] Com base nos resultados deste estudo, a CCH é um tratamento seguro e eficaz para EFP nas nádegas de mulheres adultas com uma dose de 0,84 mg por nádega (dose total de 1,68 mg/por sessão de tratamento) dada em 3 sessões de tratamento com pelo menos 21 dias de intervalo. EXEMPLO 4 — LIBERAÇÃO-1/LIBERAÇÃO-2

[00476] Os Exemplos 2 e 3 acima relatam os dois estudos de fase 3 projetados de maneira idêntica, controlados por placebo, multicêntricos, duplo-cegos, randomizados (LIBERAÇÃO-1 e LIBERAÇÃO- 2) de mulheres adultas com celulite de moderada a grave (classificação 3-4 no PR-PCSS e CR-PCSS) tanto nas nádegas que receberam até 3 sessões de tratamento subcutânea de 0,84 mg da CCH quanto do placebo por área de tratamento.

[00477] O estudo de Fase 3 não teve limite (critérios de inscrição) no IMC ou na escala de gravidade Hexsel. A falta de critérios de inscrição do Hexsel foi uma diferença do projeto do estudo de Fase 2. Apesar dessa diferença, o estudo atingiu o ponto final primário rigoroso e ultrapassou 15 dos 16 pontos finais secundários. A remoção do limite de Hexsel na gravidade da celulite pode ter contribuído para o recrutamento de indivíduos com IMC mais alto, o que aumentou o IMC médio nos ensaios de Fase 3. Na Fase 3, 210 de 423 pacientes eram obesos, enquanto 32 de 94 eram obesos na Fase 2b. Um efeito da droga foi visto em todos os grupos de IMC, e nenhuma das medidas de resultados centradas no paciente foi afetada pelo IMC ou outros fatores. Por conseguinte, a colagenase representa um tratamento seguro e eficaz para a celulite.

[00478] Os respondentes do ensaio de Fase 2b concluído estão atualmente sendo acompanhados em um estudo de extensão de prorrogação (rollover) que está analisando a segurança e durabilidade em 5 anos. Além disso, os indivíduos da LIBERAÇÃO-1 e LIBERAÇÃO-2 estão atualmente sendo acompanhados em um estudo de extensão de prorrogação. Outras análises dos dados revelaram os resultados a seguir.

[00479] 843 mulheres receberam ≥1 injeção (CCH com relação ao placebo: LIBERAÇÃO-1, n =210 com relação ao n = 213; LIBERAÇÃO- 2, n = 214 com relação ao n = 206). Uma porcentagem maior estatisticamente significativa de mulheres tratadas com CCH foram maiores ou iguais a respondentes compostos de nível 2 com relação ao placebo em LIBERAÇÃO-1 (cerca de 7,6% com relação a cerca de 1,9%; p= 0,006) e LIBERAÇÃO-2 (cerca de 5,6% com relação a cerca de 0,5%; p= 0,002), e maior ou igual a respondentes compostos de nível 1 em LIBERAÇÃO-1 (cerca de 37,1% com relação a cerca de 17,8%; p=<0,001) e LIBERAÇÃO- 2 (cerca de 41,6% com relação a cerca de 11,2%; p<0,001). Os resultados que mostram a eficácia medida por PR-PCSS e CR-PCSS são ilustrados nas Figuras 8 e 9.

[00480] As seguintes populações de indivíduos estavam entre as populações que foram analisadas: A População com Intenção de Tratar (ITT) incluiu todos os indivíduos randomizados que receberam pelo menos 1 injeção da droga de estudo. Todos os resumos demográficos e de características de linha de base foram com base nesta população. Os parâmetros de eficácia primária e secundária principais foram com base nesta população. A População com Intenção de Tratar Modificada (mITT) incluiu todos os indivíduos da População ITT com uma linha de base e pelo menos 1 avaliação pós-injeção de tanto o CR-PCSS do investigador quanto o PR- PCSS do indivíduo para tanto as nádegas alvo quanto as não alvo. Todas as avaliações de eficácia secundárias e de suporte foram com base na

População mITT.

[00481] Para cada um dos ensaios projetados de maneira idêntica, o tamanho da amostra foi estimado com base na suposição de que a porcentagem de respondentes compostos de nível ≥2 para a nádega alvo seria ≥12% no grupo CCH e ≤3% no grupo placebo (razão de probabilidade ≥4,4), com uma taxa de descontinuação do participante de ~10%. Com essas suposições, cada ensaio precisava de um tamanho de amostra de 420 mulheres atribuídas de maneira randomizada em uma razão de 1:1 para os 2 grupos de tratamento. Essa distribuição de mulheres foi pretendida para fornecer ≥90% de poder com um erro tipo 1 de 0,05 para detectar alterações estatisticamente significativas nos pontos finais primários e secundários principais. Todas as mulheres atribuídas de maneira randomizada ao tratamento que receberam ≥1 injeção da medicação do estudo foram incluídas nas populações ITT e de segurança. Os dados para os pontos finais de eficácia primários e secundários principais foram analisados usando o teste Cochran-Mantel-Haenszel, com ajuste para o centro de estudo. A alteração a partir da linha de base para o Dia 71 na pontuação total do PR-CIS foi avaliada por análise de covariância com o grupo de tratamento e o centro de análise como fatores após o ajuste para o valor da linha de base. Mulheres com dados de eficácia ausentes no Dia 71 foram consideradas não respondentes. Dados demográficos, segurança e imunogenicidade foram resumidos usando estatísticas descritivas. A análise estatística foi realizada usando o pacote de software estatístico SAS® Versão 9.3 ou superior (SAS Institute Inc., Cary, NC).

[00482] A alteração clinicamente significativa foi estimada usando métodos com base em fixador, com base na orientação da Administração de Drogas e Alimentos (FDA) dos EUA, (US Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration. Guidance for industry: patient-reported outcome measures: use in medical product development to support labeling claims. Publicado em dezembro de 2009. Disponível em: https://www.fda.gOv/downloads/dn.igs//giidances/ucml93282.pdf Acessado em 23 de abril de 2019). O S-GAIS serviu de fixador para o PR-PCSS. A capacidade do PR-PCSS para detectar alteração na gravidade da celulite foi analisada usando dados agrupados dos 2 estudos. Os resultados foram determinados usando PR-PCSS (variável dependente) e os dados S-GAIS (variável independente) analisados com um modelo Kruskal-Wallis 1-way ANOVA para determinar os limiares de alteração clinicamente significativos.

[00483] Consistente com estudos anteriores de CCH para o tratamento da celulite, CCH foi bem tolerado nos estudos de Fase 3 por todos os grupos de dose, com a maioria dos eventos adversos (AEs) sendo leves a moderados e principalmente limitados à área de injeção local. Os AEs mais comuns no ensaio foram hematomas no local de injeção, dor no local de injeção, descoloração do local de injeção, nódulo no local de injeção e prurido no local de injeção. Adicionalmente, houve uma taxa de descontinuação muito baixa nos grupos tratados com CCH em tanto a LIBERAÇÃO 1 quanto 2 devido a eventos adversos de aproximadamente 4,3% e 3,7%, respectivamente.

[00484] Em LIBERAÇÃO-1/LIBERAÇÃO-2, em média, mais de 7 de 10 indivíduos viram uma melhora de nível 1 na pontuação PR-PCSS após o primeiro tratamento. Esses indivíduos também experienciaram um aumento substancial (melhora estatisticamente significativa em comparação com placebo, p <0,01) nas pontuações de Felicidade no PR-CIS (ou seja, felicidade com a aparência da celulite). Em outros aspectos do ensaio clínico, mais de 50% dos indivíduos tiveram um aumento de nível 1 na pontuação PR-PCSS, e mais de 65% dos indivíduos pontuaram "Melhorada" ou "Muito melhorada" ou "Muito mais Melhorada” Usando a Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S-GAIS). Os resultados de CR-PCSS, PR-PCSS, I-GAIS, S-GAIS e/ou PR-CIS foram independentes da idade, IMC ou cor da pele. E, significativamente, dentro da subpopulação de mulheres com peso corporal/IMC normal, a melhora na aparência da celulite foi superior à da população geral do estudo. Por exemplo, cerca de 11% dos pacientes com peso normal, cerca de 8% dos pacientes com sobrepeso e cerca de 2,5% dos pacientes obesos foram respondentes compostos de nível 2 pela PR- e CR-PCSS.

[00485] A Figura 10 é um gráfico de barras do ponto final primário e ponto final secundário principais de respondentes compostos na nádega não alvo (para propósitos de análise de dados), definidos como pacientes com nível superior ou igual a 2 ou nível superior ou igual a 1 de melhora na gravidade a partir da linha de base em tanto CR-PCSS quanto PR-PCSS no Dia 71.

[00486] Porcentagens significativamente maiores de mulheres tratadas com CCH foram respondentes compostos de nível ≥2 tanto no CR- PCSS quanto no PR-PCSS para a nádega alvo no Dia 71 (ponto final de eficácia primária) em comparação com placebo em ambos os estudos (LIBERAÇÃO-1, p = .006; LIBERAÇÃO-2, p = .002; Figura 8). Além disso, uma porcentagem significativamente maior de mulheres foi respondente composto de nível ≥1 para a nádega alvo no Dia 71, em comparação com o placebo (LIBERAÇÃO-1 e -2, p<.001 para ambos; Figura 8). As porcentagens de respondentes compostos nível ≥2 e nível ≥1 na nádega não alvo no Dia 71 (Figura 10) foram semelhantes às porcentagens para a nádega alvo em ambos os estudos. As imagens fotográficas de uma resposta composta de nível 2 (Figura 9A) e nível 1 (Figura 9B) mostram melhora na topografia da pele no Dia 71, após o tratamento com CCH, em comparação com a linha de base. Além disso, ambos os estudos mostraram melhoras significativas (p < .001 para todos) a partir da linha de base ao Dia 71, para mulheres tratadas com CCH, em comparação com aquelas que receberam placebo para PR-PCSS (melhora de nível ≥1) e classificações de S-GAIS (melhoras de nível ≥1 e ≥2; Figura 11) e para pontuação total do PR-CIS (Figura 12). A capacidade de detectar alteração para o PR-PCSS demonstrou que o limiar de alteração de nível de 1 foi indicativo de alteração clinicamente significativa para as mulheres, já que esse nível de alteração foi associado a classificações de melhora no S- GAIS como uma variável fixadora externa. A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias", conforme usado nos estudos 302 e 303, foram relativos à dose inicial (Dia 1) nos estudos 302 e 303.

[00487] Ambos os estudos mostraram melhoras significativas (p<.001 para todos) a partir da linha de base ao Dia 71, para mulheres tratadas com CCH, em comparação com aquelas que receberam placebo para PR-PCSS (melhora de nível ≥1) e classificações de S-GAIS (melhoras de nível ≥1 e ≥2; Figura 11) e para pontuação total do PR-CIS (Figura 12). A capacidade de detectar alteração para o PR-PCSS demonstrou que o limiar de alteração de nível de 1 foi indicativo de alteração clinicamente significativa para as mulheres, já que esse nível de alteração foi associado a classificações de melhora no S-GAIS como uma variável fixadora externa.

[00488] As injeções de colagenase tiveram um efeito rápido. Forneceram pontuações médias de PR-PCSS, dos indivíduos separados do placebo, 21 dias após o primeiro tratamento e mostrou melhora contínua e significativa após os tratamentos subsequentes. Da mesma maneira, forneceram pontuações médias de CR-PCSS, dos indivíduos separados do placebo, 21 dias após o primeiro tratamento e mostrou melhora contínua e significativa após os tratamentos subsequentes.

[00489] Mais de 11% dos pacientes estudados na fase 3 tiveram uma resposta composta de nível 2 em pelo menos uma nádega, conforme medido pelas escalas CR-PCSS e PR-PCSS.

[00490] Tanto os pacientes quanto os clínicos gerais exibiram resposta nas escalas fotonuméricas da seguinte forma: • Mais de dois terços dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71 do primeiro tratamento

• Mais de dois terços dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71 do primeiro tratamento • Mais de três quartos dos pacientes tiveram resposta CR-PCSS de nível 1 e/ou PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71 do primeiro tratamento

[00491] Tanto os pacientes quanto os clínicos gerais testemunharam uma melhora global da seguinte forma: • Mais de três quartos dos pacientes viram melhora usando o S- GAIS em qualquer uma das nádegas no dia 71 do primeiro tratamento • Mais de três quartos dos clínicos gerais viram melhora usando o I-GAIS em qualquer uma das nádegas no dia 71 do primeiro tratamento

[00492] A resposta do paciente através de escalas fotonuméricas e outras escalas centradas no paciente foi a seguinte: • Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em ambas as nádegas no dia 71 do primeiro tratamento • Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em ambas as nádegas no dia 71 a partir do primeiro tratamento • Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em ambas as nádegas no dia 71 a partir do primeiro tratamento • Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS de nível 1: Respondentes felizes com ambas as nádegas no dia 71 a partir do primeiro tratamento • Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS de nível 1: Respondentes incomodados com ambas as nádegas no dia 71 a partir do primeiro tratamento

• Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS de nível 1: Respondentes constrangidos com ambas as nádegas no dia 71 a partir do primeiro tratamento

[00493] A Escala de Impacto da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS) mostrou melhora estatística em todos os domínios: • Infelicidade com a aparência de celulite • Incômodo • Constrangimento • Vergonha • Parecendo mais velho • Parecendo acima do peso/fora de forma

[00494] Os resultados de CR-PCSS, PR-PCSS, I-GAIS, S-GAIS e/ou PR-CIS foram independentes da idade, IMC ou cor da pele. E, significativamente, dentro da subpopulação de mulheres com peso corporal/IMC normal, a melhora na aparência da celulite foi maior do que na população geral do estudo.

[00495] Os indivíduos (em CCH) que viram uma melhora de nível 1 no PR-PCSS viram um aumento substancial (estatisticamente significativo contra placebo) nas pontuações Felizes de PR-CIS. Além disso, os Respondentes no estudo viram uma separação significativa do placebo após a primeira injeção.

[00496] Os indivíduos que receberam CCH mostraram níveis estatisticamente significativos de melhora na aparência da celulite com o tratamento, conforme medido pelo ponto final primário do ensaio (LIBERAÇÃO-1, p=0,006 e LIBERAÇÃO-2, p=0,002), que foi melhora composta na gravidade da celulite na nádega alvo de pelo menos nível 2 no Dia 71, em comparação com os indivíduos que receberam placebo (Figura 8). Além disso, LIBERAÇÃO-1 passou 8 dos 8 pontos finais secundários principais e LIBERAÇÃO-2 passou em 7 dos 8 pontos finais secundários principais. A CCH foi bem tolerada nos indivíduos tratados ativamente, com a maioria dos eventos adversos (AEs) de gravidade leve a moderada e principalmente limitada à área de injeção local.

[00497] As pontuações de Feliz do PR-CIS em indivíduos que eram respondentes de PR-PCSS de pelo menos nível 1 nas nádegas alvo ou não alvo ou ambos são apresentados na Tabela 50. Como mostrado, o tratamento com CCH foi de ação rápida para melhorar a felicidade do indivíduo com a aparência da celulite. Tabela 50: Pontuações de Feliz do PR-CIS em indivíduos que eram respondentes de PR-PCSS de pelo menos nível 1 nas nádegas alvo ou não alvo ou ambos. Pontuação Média (SD) da Linha de Pontuação de Alteração Média (SD) a partir da Braço de Tratamento, n base de PR-CIS Linha de base no Dia 71 de PR-CIS Ativo, 277 0,9 (2,10) 4,4 (3,31) placebo, 171 0,9 (2,05) 2,6 (3,59) Pontuação Feliz do PR-CIS 0=Nem um pouco, 10=Extremamente Ponto final primário para LIBERAÇÃO-1:

[00498] 7,6 por cento dos indivíduos que receberam CCH demonstraram uma melhora altamente significativa (p=0,006) nas avaliações compostas dos investigadores e dos pacientes sobre a aparência da celulite, conforme medido por uma resposta de dois níveis tanto na Escala Fotonumérica de Gravidade de Celulite Relatada pelo Médico (CR-PCSS) quanto nas pontuações da Escala Fotonumérica de Gravidade da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-PCSS), para a nádega alvo no Dia 71, em comparação com apenas 1,9 por cento dos indivíduos com placebo. Ponto final primário para LIBERAÇÃO-2:

[00499] 5,6 por cento dos indivíduos que receberam CCH demonstraram uma melhora altamente significativa (0,002) nas avaliações compostas de investigadores e pacientes sobre a aparência de celulite, conforme medido por uma resposta de dois níveis tanto nas pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS, para a nádega alvo no Dia 71, em comparação com apenas 0,5 por cento dos indivíduos com placebo.

[00500] Pontos finais secundários tanto para a LIBERAÇÃO-1 quanto a LIBERAÇÃO-2: • 37,1 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 41,6 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-2 que recebem CCH, demonstraram uma resposta de nível 1 altamente significativa nas avaliações compostas de investigadores e pacientes sobre a aparência da celulite, conforme medido por tanto as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS, para a nádega alvo no Dia 71, em comparação com apenas 17,8 por cento e 11,2 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • 24,3 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 21,0 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-2 que receberam CCH, demonstraram uma melhora estatisticamente significativa de nível 2 na avaliação dos pacientes quanto a aparência da celulite na nádega alvo no Dia 71, conforme medido pelas pontuações PR-PCSS em comparação com apenas 12,2 por cento e 5,8 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • 54,3 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 57,9 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-2, que receberam CCH, demonstraram uma melhora estatisticamente significativa de nível 1 na avaliação dos pacientes quanto a aparência da celulite na nádega alvo no Dia 71, conforme medido pelas pontuações PR-PCSS em comparação com apenas 36,2 por cento e 29,6 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • 48,6 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 42,1 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-2, que receberam CCH, demonstraram uma melhora estatisticamente significativa de nível 1 na avaliação dos pacientes quanto a aparência da celulite na nádega alvo no Dia 71, conforme medido pela SSRS (Escala de Autoavaliação do Indivíduo) em comparação com apenas 22,5 por cento e 15,0 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • 54,3 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 46,8 por cento dos sujeitos no LIBERAÇÃO-2, que receberam CCH, relataram estar "Satisfeitos" ou "Muito Satisfeitos" com seu tratamento de celulite, conforme avaliado pela Avaliação de Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite no Dia 71, em comparação com apenas 25,8 por cento e 13,6 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • 73,3 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-1 e 67,8 por cento dos indivíduos em LIBERAÇÃO-2, que receberam CCH, foram relatados como "Melhorada" ou "Muito Melhorada" ou "Muito mais Melhorada" na aparência global de sua área de celulite, conforme avaliado pela Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo na nádega alvo no Dia 71, em comparação com apenas 43,2 por cento e 24,1 por cento dos indivíduos com placebo, respectivamente. • Os indivíduos que receberam CCH demonstraram uma melhora estatisticamente significativa nas avaliações compostas dos investigadores e dos pacientes sobre a aparência da celulite, conforme medido por uma melhora de nível 2 tanto nas pontuações de CR-PCSS quanto de PR- PCSS, para a nádega não alvo em Dia 71 para o estudo de LIBERAÇÃO-1, mas falhou em mostrar significância estatística no estudo de LIBERAÇÃO-

2.

[00501] Os pacientes que receberam tratamento com colagenase tiveram uma melhora de ≥2 pontos a partir da linha de base para tanto as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 71 dias após o tratamento, ou tiveram uma melhora de ≥1 ponto a partir da linha de base tanto para pontuação de CR-PCSS quanto para PR-PCSS em cerca de 71 dias após o tratamento. Tais pacientes tiveram uma melhora ≥2 pontos a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 6 meses após o tratamento, ou tiveram uma melhora ≥1 ponto a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-

PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 6 meses após o tratamento, ou tiveram uma melhora ≥2 pontos a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 12 meses após o tratamento, ou tiveram uma melhora ≥1 ponto a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 12 meses após o tratamento. Adicionalmente, tais pacientes tiveram ≥2 pontos ou ≥1 de melhora a partir da linha de base para uma ou tanto as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS a cerca de 22 dias, 43 dias, 90 dias ou 180 dias após o tratamento.

[00502] Os pacientes exibiram uma melhora ≥3 pontos a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 6 meses após o tratamento, ou tiveram uma melhora ≥3 pontos a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 12 meses após o tratamento, ou tiveram uma melhora de ≥3 pontos a partir da linha de base tanto para as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS em cerca de 12 meses após o tratamento. Adicionalmente, tais pacientes tiveram ≥3 pontos de melhora a partir da linha de base para uma ou tanto as pontuações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS a cerca de 22 dias, 43 dias, 90 dias ou 180 dias após o tratamento. Em outro aspecto, o tratamento com colagenase exibiu durabilidade (conforme definido neste documento).

[00503] A Escala de Impacto da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS) mostrou melhora estatística em pelo menos um domínio selecionado do grupo que consiste em infelicidade com a aparência de celulite, incômodo, constrangimento, vergonha, aparência mais velha e aparência acima do peso/fora de forma. A porcentagem de respondentes (do grupo não-placebo) respondendo “Sim” na melhora composta de dois níveis no dia 71 pós-tratamento da nádega alvo da população tratada foi de cerca de 15,4%.

[00504] Conclusões adicionais incluem:

1. Mais de um terço dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega. Mais de dois terços dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas. Todos os pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas.

2. Mais de um terço dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de dois terços dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 22. Todos os pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 22.

3. Mais de um terço dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de dois terços dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 43. Todos os pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 43.

4. Mais de um terço dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de dois terços dos pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 71. Todos os pacientes viram pelo menos uma resposta PR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 71.

5. Mais de um terço dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em ambas as nádegas. Mais de dois terços dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em ambas as nádegas. Todos os clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega.

6. Mais de um terço dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de dois terços dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 22. Todos os clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22.

7. Mais de um terço dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de dois terços dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 43. Todos os clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43.

8. Mais de um terço dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de dois terços dos clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer uma das nádegas no dia 71. Todos os clínicos gerais viram pelo menos uma resposta CR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71.

9. Mais de três quartos dos pacientes têm resposta CR-PCSS de nível 1 e/ou PR-PCSS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71.

10. Mais de três quartos dos clínicos gerais viram melhora usando o I-GAIS em qualquer uma das nádegas no dia 43.

11. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em ambas as nádegas. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em ambas as nádegas.

12. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia

22.

13. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia

43.

14. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSRS de nível 1 em qualquer nádega no dia

71.

15. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega.

16. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia

22.

17. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia

43.

18. Mais de um terço dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de dois terços dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de SSCT de nível 1 em qualquer nádega no dia

71.

19. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega.

20. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Todos os pacientes eram respondentes de PR-

PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 22.

21. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais da metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 43.

22. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de S-GAIS de nível 1 em qualquer nádega no dia 71.

23. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega.

24. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 22.

25. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Felizes de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 43.

26. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Felizes de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Feliz de nível 1 em qualquer nádega no dia 71.

27. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega.

28. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Em ainda outra modalidade, mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Todos os pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 22.

29. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia

43.

30. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Incômodo de nível 1 em qualquer nádega no dia

71.

31. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega. Em outra modalidade, mais da metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega.

32. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais da metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 22. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 22.

33. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Mais de metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Em ainda outra modalidade, mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 43. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 43.

34. Mais de um quarto dos pacientes eram respondentes de PR- PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Em outra modalidade, mais da metade dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Mais de três quartos dos pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 71. Todos os pacientes eram respondentes de PR-PCSS de nível 1 e/ou respondentes de PR-CIS: Constrangimento de nível 1 em qualquer nádega no dia 71.

35. As análises baseadas em fixadores nos estudos atuais indicaram que uma alteração de ≥1 na pontuação PR-PCSS foi clinicamente significativa. Mais da metade das mulheres tratadas com CCH em ambos os estudos teve uma alteração de ≥1 na pontuação PR-PCSS (54,3% e 57,9%). Uma resposta composta de nível ≥1 tanto em PR-PCSS quanto em CR-PCSS foi observada em >35% das mulheres, e uma resposta S-GAIS de nível ≥1 foi observada em >55% das mulheres.

36. Com base na alteração a partir da linha de base nas pontuações totais do PR-CIS, as mulheres tratadas com CCH relataram um impacto visual e emocional geral inferior do pós-tratamento da celulite em comparação com as mulheres tratadas com placebo, ou seja, melhor qualidade de vida e autoestima.

37. Os AEs solucionados rapidamente, eram de intensidade leve a moderada e eram causas infrequentes de descontinuação do estudo (<5% das mulheres em qualquer estudo).

38. Os estudos atuais incluem a maior população combinada de pacientes em um estudo de celulite até o momento (N = 843) e o desenho de estudo multicêntrico, randomizado, duplo-cego e controlado por placebo de cada um.

39. Os critérios gerais de entrada no estudo, incluindo mulheres com celulite grave. Entre as mulheres com celulite grave na linha de base, >15% e >35% das mulheres tratadas com CCH avaliadas pelo CR-PCSS e PR-PCSS, respectivamente, tiveram melhora na nádega alvo no Dia 71. Conforme notado anteriormente, o ponto final primário, uma melhora composta de nível ≥2 a partir da linha de base, é considerado um critério rigoroso; esta é uma limitação, dado que esse resultado é difícil de atingir na prática médica. Apesar deste critério rigoroso, contudo, uma porcentagem significativamente maior de mulheres que receberam CCH atingiu o ponto final primário em comparação com placebo.

40. Com base em 2 estudos randomizados de fase 3, controlados por placebo, a CCH é um tratamento seguro e eficaz para mulheres com celulite moderada a grave das nádegas.

[00505] Resultados lado a lado dos Exemplos 2 e 3 (Estudos 302 e 303): Uma vez que as análises conduzidas nos Exemplos 2 e 3 foram idênticas, uma tabela lado a lado dos resultados dos pontos finais primários e secundários principais nos Exemplos 2 e 3 é apresentada na Tabela 51. Tabela 51: Resultados Lado a Lado para Pontos finais Primários e Secundários Principais nos Exemplos 2 e 3 (População ITT) Exemplo 2 (Estudo 302) Exemplo 3 (Estudo 303) Ponto final Frequência de Diferença de Frequência de Diferença de Respondentes Tratamento Respondentes Tratamento CCH placebo valor Significância CCH placebo valor Significância (N=210) (N=213) de pa Estatística (N=214) (N=206) de p8 Estatísticab Respondente Composto de Nível dois da Nádega 16 (7,6) 4 (1,9) 0,006c * 12 (5,6) 1 (0,5) 0,002c * Alvo no Dia 71, n (%)

Indivíduos Respondentes de PR-PCSS de Nível 1 114 124 77 (36,2) <0,001 * 61 (29,6) <0,001 * da Nádega Alvo no (54,3) (57,9) Dia71, n (%) Indivíduos Respondentes de PR-PCSS de Nível 2 51 (24,3) 26 (12,2) 0,001 * 45 (21,0) 12 (5,8) <0,001 * da Nádega Alvo no Dia71, n (%) Indivíduos/Investigadores Respondentes Compostos de Nível 1 da 78 (37,1) 38 (17,8) <0,001 * 89 (41,6) 23 (11,2) <0,001 * Nádega Alvo no Dia 71, n (%) Indivíduos/Investigadores Respondentes Compostos de Nível 2 da 16 (7,6) 2 (0,9) <0,001 * 13 (6,1) 4(1,9) 0,033 Nádega Não alvo no Dia 71 com base em CR- PCSS e PR-PCSS, n (%) Indivíduos Respondentes 102 de SSRS de Nível 1 no 48 (22,5) <0,001 * 90 (42,1) 31 (15,0) <0,001 * (48,6) Dia 71, n (%) Alteração Média (SD) a partir da linha de base -10,9 -5,9 -11,5 -6,5 (Dia 1) da classificação <0,001 * <0,001 * (12,51) (11,62) (12,74) (11,74) da PR-CIS Total no Dia 71 Indivíduos Respondentes de S- 135 126 GAIS de nível 1 da 82 (38,5) <0,001 * 46 (22,3) <0,001 * (64,3) (58,9) Nádega Alvo no Dia 71, n (%) Indivíduos Respondentes de S- GAIS de nível 2 da 49 (23,3) 13 (6,1) <0,001 * 38 (17,8) 9 (4,4) <0,001 * Nádega Alvo no Dia 71, n (%) a O valor de p a partir da análise individual sem ajuste de multiplicidade b O asterisco (*) representa uma significância estatística familiar ao nível de significância de 0,05 após o ajuste de multiplicidade, c O valor de p foi com base no teste CMH ajustado para o centro de análise.

[00506] Os resultados das análises agrupadas dos estudos principais de Fase 3 (Estudos -302 e -303; “Grupo 1”) e os estudos randomizados, duplo-cegos controlados por placebo (Estudos -201, - 301 e -302; “Grupo 2”), compare os resultados entre os estudos. Os resultados do

Estudo -202, -205 e - 304 suportam a persistência do efeito, e os resultados do Estudo -202 suportam a falta de tolerância (a perda da capacidade de responder à(s) dose(s) terapêutica(s) ao longo do tempo) mediante reexposição a CCH. Os resultados da análise de eficácia primária dos estudos individuais (Estudos-201, -302 e -303) e os resultados integrados nos Grupos 1 e 2 demonstraram que as reduções na gravidade da celulite foram observadas com mais frequência no grupo de tratamento com CCH em comparação com o grupo de tratamento com placebo, medido pela composição das escalas do médico (investigador) e do paciente (indivíduo).

[00507] Os resultados da comparação para os pontos finais de eficácia primária e secundária (População ITT - Grupo 1) são apresentados na Tabela 52. Tabela 52: Resultados de Comparação Múltipla para os Pontos finais de Eficácia Primária e Secundária Principal (População ITT - Grupo 1) Frequência de Diferença de Tratamento Respondentes 0,84 mg de Significância Grupo de placebo (N Valor de Ordem Ponto final CCH/Nádega Estatística em Eficácia = 419) p Brutoa (N = 424) 0,05 b Respondentes compostos de nível dois da nádega alvo no Dia 71 1 Primário 28 (6,6) 5 (1,2) <0,001 * com base na CR-PCSS e PR- PCSS, n (%) Respondentes de PR-PCSS de Secundário 2 nível um da nádega alvo no Dia 238 (56,1) 138 (32,9) <0,001 * #1 Família 71, n (%) Respondentes de PR-PCSS de Secundário 2 nível dois da nádega alvo no Dia 96 (22,6) 38 (9,1) <0,001 * #1 Família 71, n (%) Respondentes composto de nível Secundário 2 um da nádega alvo no Dia71, n 167 (39,4) 61 (14,6) <0,001 * #1 Família (%) Respondentes compostos de nível Secundário dois da nádega não alvo no Dia 71 2 29 (6,8) 6 (1,4) <0,001 * #1 Família com base na CR-PCSS e PR- PCSS, n (%) Secundário Indivíduos respondentes de SSRS 3 192 (45,3) 79 (18,9) <0,001 * #2 Família de nível 1 no Dia 71, n (%) Alteração Média (SD) a partir da Secundário linha de base (Dia 1) da 3 -11,7 (12,58) -6,2 (11,67) <0,001 * #2 Família classificação de PR-CIS total no Dia 71

Indivíduos Respondentes de S- Secundário 4 GAIS de nível 1 da Nádega Alvo 261 (61,6) 128 (30,5) <0,001 * Family #3 no Dia 71, n (%) Indivíduos Respondentes de S- Secundário 4 GAIS de nível 2 da Nádega Alvo 87 (20,5) 22 (5,3) <0,001 * Family #3 no Dia 71, n (%) a O valor de p a partir da análise individual sem ajuste de multiplicidade b * representa uma significância estatística familiar ao nível de significância de 0,05 após o ajuste de multiplicidade, Nota: As porcentagens são com base no número de N para cada coluna.

[00508] Os dados clínicos relevantes são fornecidos nas Tabelas 53-61 abaixo. Tabela 53: Respondentes Compostos do Indivíduo/Investigador para a Nádega Alvo no dia 71 (População ITT - Grupo 1) 0,84 mg de CCH/Nádega com Droga do Estudo relação ao placebo 0,84 mg de Taxa de placebo (N = Ponto finala Estatísticab CCH/Nádega (N Probabilidade valor de pc 419) = 424) (95% CI) Respondente Composto de Nível doisd 5,88 (2,25, Sim n (%) 28 (6,6) 5 (1,2) <0,001 15,38) Não n (%) 396 (93,4) 414 (98,8) Respondente Composto de Nível umc 3,84 (2,73, Sim n (%) 167 (39,4) 61 (14,6) <0,001 5,40) Não n (%) 257 (60,6) 358 (85,4) a Indivíduos sem avaliações no Dia 71 de PR-PCSS e/ou CR-PCSS da nádega alvo foram considerados não respondentes. b As porcentagens foram com base no número de N para cada coluna c Os valores de p foram com base no teste CMH ajustado para o centro de análise. d Um respondente composto de nível 2 para a nádega alvo era um indivíduo com uma redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 2 a partir da linha de base na nádega alvo tanto em PR-PCSS quanto em CR- PCSS na visita do Dia 71.

e Um respondente composto de nível 1 para a nádega alvo é um indivíduo com redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 1 a partir da linha de base na nádega alvo tanto em PR-PCSS quanto em CR- PCSS na visita do Dia 71. Tabela 54: Indivíduos Respondentes de PR-PCSS da Nádega Alvo no Dia 71 (População ITT - Grupo 1) 0,84 mg de CCH/Nádega vs Droga do Estudo placebo

0,84 mg de Taxa de placebo (N = Ponto finala Estatísticab CCH/Nádega (N Probabilidade valor de pc 419) = 424) (95% CI)

Respondente de PR-PCSS de Nível doisd

Sim n (%) 96 (22,6) 38 (9,1) 3,04 (2,01, 4,60) <0,001

Não n (%) 328 (77,4) 381 (90,9) Respondente de PR-PCSS de Nível ume

Sim n (%) 238 (56,1) 138 (32,9) 2,62(1,98, 3,47) <0,001

Não n (%) 186 (43,9) 281 (67,1) a Qualquer indivíduo sem avaliações do PR-PCSS no Dia 71 na nádega alvo foi considerado um não respondente. b As porcentagens foram com base no número de N para cada coluna. c Os valores de p foram com base no teste CMH ajustado para o centro de análise. d Um respondente PR-PCSS de nível 2 para a nádega alvo era um indivíduo com uma redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 2 a partir da linha de base na nádega alvo no PR-PCSS na visita do Dia 71. e Um respondente PR-PCSS de nível 1 para a nádega alvo é um indivíduo com uma redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 1 a partir da linha de base na nádega alvo no PR-PCSS na visita do Dia 71. Tabela 55: Classificação PR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base para a Nádega Alvo por Visita (População ITT - Grupo 1) Droga do Estudo

0,84 mg de CCH/Nádega Estatística3 placebo (N = 419) (N = 424)

Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 179 (42,2) 168 (40,1) Grave (4) n (%) 245 (57,8) 251 (59,9) Não realizado N 0 0 Média 3,6 3,6 SD 0,49 0,49 Alteração a partir da linha de base no Dia 22 b -4 n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) 2 (0,5) 1 (0,2) -2 n (%) 17 (4,4) 6(1,5) -1 n (%) 124 (32,3) 65 (16,2) 0 n (%) 228 (59,4) 315 (78,6) +1 n (%) 13 (3,4) 14(3,5) Não realizado N 40 18 Média -0,4 -0,2 SD 0,65 0,50 Alteração a partir da linha de base no Dia 43 b -4 n (%) 0 (0,0) 1 (0,3) -3 n (%) 11 (2,9) 1 (0,3) -2 n (%) 64(17,1) 25 (6,5) -1 n (%) 150 (40,1) 98 (25,4) 0 n (%) 137 (36,6) 252 (65,3) +1 n (%) 12 (3,2) 9 (2,3) Não realizado N 50 33 Média -0,8 -0,4 SD 0,86 0,68 Alteração a partir da linha de base no Dia 73 b -4 n (%) 1 (0,3) 2 (0,5) -3 n (%) 17 (4,6) 2 (0,5) -2 n (%) 78 (21,1) 34 (8,9) -1 n (%) 142 (38,4) 100 (26,3) 0 n (%) 125 (33,8) 227 (59,7) +1 n (%) 7(1,9) 15 (3,9) Não realizado N 54 39 Média -0,9 -0,4 SD 0,91 0,77 a As porcentagens foram com base no número de indivíduos avaliáveis em cada momento para cada coluna b A alteração a partir da linha de base foi o valor da visita menos a linha de base, A alteração negativa reflete uma melhora na gravidade da celulite; a alteração positiva reflete uma piora na gravidade da celulite, Nota: As classificações PR-PCSS ausentes em qualquer momento não são imputadas e, portanto, excluídas do resumo.

Tabela 56: Respondentes de SSRS de nível um no Dia 71 População ITT - (Grupo 1)

0,84 mg de CCH/Nádega com Droga do Estudo relação ao placebo

0,84 mg de Taxa de Respondentede SSRS b CCH/Nádega (N placebo (N = 419) Estatística Probabilidade Valor de pc Nível uma = 424) (95% CI)

Sim n (%) 192 (45,3) 79(18,9) 3,61 (2,64, 4,95) <0,001 Não n (%) 232 (54,7) 340 (81,1) a Um respondente SSRS de nível 1 era um indivíduo com pelo menos 'ligeiramente satisfeito' (classificação SSRS ≥4; ou seja, 'ligeiramente satisfeito' (4), 'muito satisfeito' (5) ou 'extremamente satisfeito' (6) com a aparência de sua celulite nas nádegas na visita do Dia 71. Quaisquer indivíduos sem avaliações de SSRS no Dia 71 foram considerados não respondentes b As porcentagens foram com base no número de indivíduos avaliáveis em cada momento para cada coluna. c O valor de p foi com base no teste CMH ajustado para o centro de análise.

Tabela 57: Alteração a partir da Linha de base na Classificação Total de PR-CIS 0,84 mg de CCH/Nádega com Droga do Estudo relação ao placebo

0,84 mg de Diferença Estatística CCH/Nádega (N = placebo (N = 419) Valor de pa (95% CI) 424)

Linha de base Valor N 423 415 Média (SD) 51,8 (8,45) 51,6 (9,58) Mediana 54,0 55,0 Min, Max 14, 60 10, 60 Dia 71 Valorb N 424 419 Média (SD) 40,1 (13,30) 45,4 (12,77) Mediana 41,0 48,0 Min, Max 0, 60 0, 60 Alteração a partir da N 423 415 linha de base c Média (SD) -11,7(12,58) -6,2 (11,67) Mediana -10,0 -3,0 Média LS (SE) -11,5 (0,57) -6,0 (0,58) -5,4 (-7,0, -3,9) <0,001 Min, Max -60, 27 -58,41 a O valor de p foi com base em um modelo ANCOVA com fatores de tratamento, estudo, centro de análise dentro do estudo e uma covariável do valor da linha de base. b O valor da linha de base foi inserido no Dia 71 para quaisquer indivíduos sem uma Pontuação Total de PR-CIS no Dia 71. c A alteração a partir da linha de base foi o valor da visita menos a linha de base.

Tabela 58: Respondentes S-GAIS para a Nádega Alvo no Dia 71 (População ITT - Grupo 1) 0,84 mg de CCH/Nádega vs Droga do Estudo placebo

0,84 mg de Taxa de placebo (N = Resposta S-GAIS3 Estatística b CCH/Nádega (N Probabilidade valor de pc 419) = 424) (95% CI)

Respondente de Nível um (≥+1)d

Sim n (%) 261 (61,6) 128 (30,5) 3,68 (2,75, 4,92) <0,001

Não n (%) 163 (38,4) 291 (69,5) Respondente de Nível dois (≥+2)e

Sim n (%) 87 (20,5) 22 (5,3) 4,72 (2,89, 7,72) <0,001

Não n (%) 337 (79,5) 397 (94,7) a Quaisquer indivíduos sem avaliações S-GAIS no Dia 71 foram considerados como não respondentes. b As porcentagens foram com base no número de indivíduos avaliáveis em cada momento para cada coluna. c Os valores foram com base no teste CMH ajustado para o centro de análise. d Um respondente S-GAIS de nível 1 para a nádega alvo foi definido como um indivíduo com classificação S-GAIS de pelo menos 1 (ou seja, 1, 2 ou 3) na nádega alvo. e Um respondente S-GAIS de nível 2 para a nádega alvo foi definido como um indivíduo com classificação S-GAIS de pelo menos 2 (ou seja, 2 ou 3) na nádega alvo.

Tabela 59: Respondentes de CR-PCSS da Nádega Alvo no Dia 71 (População ITT - Grupo 1)

0,84 mg de CCH/Nádega com Droga do Estudo relação ao placebo

0,84 mg de Taxa de placebo (N = Ponto final a Estatísticab CCH/Nádega (N Probabilidade valor de pc 419) = 424) (95% CI)

Respondente de CR-PCSS de Nível doisd

Sim n (%) 67(15,8) 15 (3,6) 5,12(2,87, 9,14) <0,001

Não n (%) 357 (84,2) 404 (96,4) Respondente de CR-PCSS de Nível um6

Sim n (%) 228 (53,8) 114 (27,2) 3,15 (2,35, 4,22) <0,001

Não n (%) 196 (46,2) 305 (72,8) a Quaisquer indivíduos no Dia 71 sem avaliações de CR-PCSS da nádega alvo foram considerados não respondentes. b As porcentagens foram com base no número de N para cada coluna. c Os valores de p foram com base no teste CMH ajustado para o centro de análise. d Um respondente CR-PCSS de nível 2 para a nádega alvo era um indivíduo com uma redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 2 a partir da linha de base na nádega alvo no CR-PCSS na visita do Dia 71. e Um respondente CR-PCSS de nível 1 para a nádega alvo era um indivíduo com uma redução na gravidade da celulite de pelo menos nível 1 a partir da linha de base na nádega alvo no CR-PCSS na visita do Dia 71. Tabela 60: Classificação CR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base para a Nádega Alvo por Visita (População ITT - Grupo 1) Droga do Estudo

0,84 mg de CCH/Nádega Estatísticaa placebo (N = 419) (N = 424)

Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 257 (60,6) 259 (61,8) Grave (4) n (%) 167 (39,4) 160 (38,2) Não realizado n 0 0 Média 3,4 3,4 SD 0,49 0,49 Alteração a partir da linha de base no Dia 22b -4 n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) 0 (0,0) 1 (0,2)

-2 n (%) 10 (2,6) 2 (0,5) -1 n (%) 129 (33,7) 61 (15,2) 0 n (%) 237 (61,9) 314(78,3) +1 n (%) 7 (1,8) 23 (5,7) Não realizado n 41 18 Média -0,4 -0,1 SD 0,57 0,49 Alteração a partir da linha de base no Dia 43b -4 n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) -2 n (%) 48 (12,8) 10 (2,6) -1 n (%) 159 (42,5) 64 (16,6) 0 n (%) 156 (41,7) 291 (75,4) +1 n (%) 11 (2,9) 21 (5,4) Não realizado N 50 33 Droga do Estudo

0,84 mg de CCH/Nádega Estatística3 placebo (N = 419) (N = 424)

Média -0,7 -0,2 SD 0,74 0,55 Alteração a partir da linha de base no Dia 71b -4 n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) -3 n (%) 4(1,1) 3 (0,8) -2 n (%) 63 (17,1) 12 (3,1) -1 n (%) 161 (43,8) 99 (26,0) 0 n (%) 129 (35,1) 249 (65,4) +1 n (%) 11 (3,0) 18 (4,7) Não realizado n 56 38 Média -0,8 -0,3 SD 0,80 0,64 a As porcentagens foram com base no número de indivíduos avaliáveis em cada momento para cada coluna. b A alteração a partir da linha de base foi o valor da visita menos a linha de base, A alteração negativa reflete uma melhora na gravidade da celulite; a alteração positiva reflete uma piora na gravidade da celulite.

Tabela 61: SSCTA no Dia 71 (População ITT - Grupo 1) Droga do Estudo

0,84 mg de Estatística3 placebo (N = 419) CCH/Nádega (N = 424)

Dia 71 Muito satisfeito (+2) n (%) 39 (9,9) 11 (2,8) Satisfeito (+1) n (%) 154 (39,2) 64 (16,6)

Nem satisfeito ou insatisfeito (0) n (%) 116 (29,5) 131 (33,9) Insatisfeito (-1) n (%) 52(13,2) 90 (23,3) Muito Insatisfeito (-2) n (%) 32 (8,1) 90 (23,3) Não realizado N 31 33 Média 0,3 -0,5

SD 1,08 1,11 a As porcentagens são com base no número de indivíduos avaliáveis para cada coluna. Nota: As classificações Ausente da Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite em qualquer momento não foram imputadas e, portanto, excluída no resumo.

[00509] Os resultados de 2 estudos pivotais multicêntricos, randomizados, duplo-cegos e controlados por placebo demonstraram que a CCH reduziu significativamente a gravidade da celulite, conforme avaliado pela proporção de respondentes compostos de nível 2 no Dia 71 em comparação com o placebo. Durante os estudos pivotais de Fase 3, uma separação clara do tratamento com CCH do placebo no CR-PCSS e nas classificações PR-PCSS foi observada logo 21 dias após a primeira sessão de tratamento.

[00510] As análises de subgrupo demonstraram que não houve impacto aparente de idade, raça, etnia, IMC, Tipo de Pele de Fitzpatrick, histórico familiar de celulite, gravidade da celulite da linha de base ou estado de imunogenicidade na eficácia. Para avaliar adicionalmente o efeito da CCH no grupo de idade ≥65 anos e na categoria de IMC ≥30 kg/m2, análises post-hoc suplementares foram realizadas. As análises post-hoc selecionadas foram os pontos finais secundários principais nos estudos pivotais e incluíram a resposta composta de nível 1 na nádega alvo, a resposta composta de nível 2 na nádega não alvo e análises de respondentes de PR PCSS de nível 2 e nível 1. Com base, nesta análise, a totalidade das evidências suporta uma tendência de eficácia favorecendo a CCH em comparação com o placebo em todos os subgrupos.

[00511] Diferenças estatisticamente significativas entre os grupos de tratamento com CCH e placebo também foram observadas em ambas as análises agrupadas para todos os pontos finais secundários principais. Estes incluíram: a proporção de respondentes de PR PCSS de nível 1 da nádega alvo, a proporção de respondentes de PR-PCSS de nível 2 da nádega alvo, a proporção de respondentes compostos de nível 1 da nádega alvo, a proporção de respondentes compostos de nível 2 da nádega não alvo, a proporção de respondentes SSRS de nível 1, a alteração a partir da linha de base (Dia 1) da Pontuação Total PR-CIS, os respondentes S-GAIS de nível 1 da nádega alvo e os respondentes S-GAIS de nível 2 da nádega alvo.

[00512] Esses pontos finais secundários principais incluíram escalas que avaliaram medidas de impacto relatadas pelo paciente do benefício do tratamento que são relevantes e clinicamente significativas para os indivíduos. O PR-CIS avaliou o impacto visual e emocional da celulite, o SSRS avaliou a satisfação com a aparência de sua celulite e o S- GAIS avaliou a aparência visual. No geral, a satisfação relatada pelo paciente e as medidas de impacto emocional mostraram uma melhora maior e estatisticamente significativa no grupo de tratamento com CCH em comparação com o grupo de tratamento com placebo. A redução na gravidade da celulite foi evidente logo 21 dias após a administração da primeira sessão de tratamento de 0,84 mg da CCH por área de tratamento e foi mantida durante todo o período de estudo duplo-cego de 71 dias. Os resultados do Estudo -304, até o Dia 180, demonstraram durabilidade (a persistência do efeito) no PR-PCSS e CR-PCSS por até 6 meses após a conclusão dos estudos originais. EXEMPLO 5 - ESTUDO DE LONGO PRAZO, ABERTO, FASE 3B

PARA AVALIAR A SEGURANÇA E PADRÃO TEMPORAL DE RESPOSTA DE CCH NO TRATAMENTO DE CELULITE (Estudo 304)

[00513] Este foi um estudo multicêntrico, aberto, de acompanhamento de longo prazo dos Exemplos 2 e 3 acima. O estudo avaliou indivíduos que receberam previamente CCH, 0,84 mg por nádega no tratamento concomitante (dose total de até 1,68 mg x 3 sessões de tratamento) de 2 nádegas bilaterais com EFP em mulheres adultas em um estudo duplo-cego de 71 dias, controlado por placebo (Exemplo 2 (Estudo 302) ou Exemplo 3 (Estudo 303), doravante “estudos dos originais” ou “estudo original”). Após a conclusão de um dos estudos supramencionados, os indivíduos foram (e serão) acompanhados por até 5 anos a partir do Dia 71 (ou seja, 70 dias após o primeiro tratamento) dos estudos originais, que foi de aproximadamente 28 dias após a última exposição à CCH nesses estudos.

[00514] A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias", conforme usado no estudo 304, foram relativos ao Dia 71 da dose inicial (Dia 1) em qualquer estudo 302 ou 303. As avaliações da celulite foram realizadas no Dia 180 deste estudo, que foi aproximadamente 180 dias após o Dia 71 relatado nos Exemplos 2 e 3, e aproximadamente 251 dias após o primeiro tratamento dos indivíduos com CCH. Assim, "Dia 180" para propósitos desse Exemplo 5 significa aproximadamente 180 dias após o Dia 71 dos Exemplos 2 e 3. As avaliações do Dia 180 para este Exemplo 5 foram conduzidas de forma cega, de modo que o indivíduo, o investigador e o pessoal do local não tinham conhecimento do tratamento recebido no estudo de Fase 3 até que as avaliações estivessem completas.

[00515] Os objetivos primários deste estudo foram avaliar (a) a segurança a longo prazo de CCH para celulite no tratamento de EFP em mulheres adultas; (b) a segurança de CCH quando usado para retratamento no tratamento de EFP em mulheres adultas; e (c) o perfil de imunogenicidade de longo prazo de CCH após o tratamento de EFP em mulheres adultas. O objetivo secundário deste estudo foi avaliar o tempo de redução da resposta (TRR) em mulheres adultas com EFP tratadas com CCH, por exemplo, a durabilidade do tratamento. Este estudo está atualmente em andamento. Este Exemplo representa os dados coletados até e incluindo 1º de abril de 2019. Inclui 479 indivíduos que completaram pelo menos a visita de avaliação do Dia 180 até essa data.

[00516] Dentre os 755 indivíduos (tratados com CCH e tratados com placebo) que completaram os estudos dos Exemplos 2 e 3, 617 indivíduos (tratados com CCH e tratados com placebo) entraram neste estudo de extensão aberto. Uma vez que a esses indivíduos revelou-se no Dia 180 deste estudo, apenas os indivíduos que receberam CCH ativo posteriormente permaneceram neste estudo.

[00517] O projeto do estudo é descrito na Figura 25. Após as avaliações do Dia 180 terem sido concluídas (ou seja, 180 dias após o Dia 71 dos Exemplos 2 e 3), o local estava revelado para o tratamento de estudo de cada indivíduo nos estudos originais (aproximadamente 6 meses após o Dia 71 dos estudos originais, e aproximadamente 251 dias após a primeira dose de CCH nos estudos originais), os indivíduos que receberam placebo durante esses estudos foram retirados e não continuaram no estudo. Os indivíduos que receberam CCH foram posteriormente classificados em 1 das seguintes 3 categorias: • Categoria I (respondentes compostos de nível 1) inclui indivíduos que receberam CCH nos estudos com os pais e nos quais a resposta composta máxima em uma (ou ambas) nádegas no Dia 71 no estudo com os pais foi no máximo de nível 1 melhora do composto na gravidade da celulite conforme avaliado pelo PR-PCSS e o CR-PCSS. Nos casos em que houve uma melhora em ambas as nádegas, a melhora composta de nível 1 deve ter ocorrido na mesma nádega para ser elegível (ou seja, a melhora PR-PCSS e CR-PCSS deve ter ocorrido na mesma nádega). Os indivíduos mostrando uma melhora de nível 2 em 1 escala, mas apenas uma melhora de nível 1 na outra escala também foram considerados indivíduos da Categoria I, desde que a melhora composta estivesse na mesma nádega. Os indivíduos da Categoria I são elegíveis para 1 curso de retratamento adicional (ou seja, 3 sessões de tratamento com aproximadamente 21 dias de intervalo) em até 2 nádegas neste estudo aberto. O retratamento pode começar após as avaliações no Dia 180 e após a revelação do tratamento dos indivíduos durante o estudo original.

A triagem para retratamento pode ter começado na Visita do Dia 180 se o estudo cedo da droga a partir dos estudos originais tivesse sido quebrada.

Apenas as nádegas com melhora composta de nível 1 ou menos serão retratadas em indivíduos da Categoria I.

A avaliação da eficácia aberta após o início do retratamento (Visita de Tratamento 1, Dia de Tratamento 1) será determinada até a Visita de Tratamento 4 (Dia 71 + 5 dias) deste estudo aberto, após o qual os indivíduos serão observados, dependendo de quando durante o período de 5 anos, o indivíduo recebeu retratamento, a cada 6 meses por 2 anos e então anualmente por até 5 anos (Dia 1800) após o Dia 71 dos estudos originais 302 e 303. Os indivíduos elegíveis que se qualificaram para o estado de Categoria I que escolherem não receber retratamento adicional terão visitas de observação (Visitas 2 até 7, ou seja, 12, 18, 24, 36, 48 e 60 meses). • Categoria II (respondentes compostos de nível 2) inclui indivíduos que receberam CCH nos estudos originais e que tiveram uma melhora composta na gravidade da celulite no Dia 71 dos estudos originais de pelo menos nível 2 em pelo menos 1 nádega tanto no PR-PCSS quanto no CR-PCSS (ou seja, respondente composto de nível 2). Esses indivíduos serão observados para TRR (definido abaixo) e segurança aproximadamente a cada 6 meses por 2 anos e então anualmente por até 5 anos (Dia 1800) a partir do Dia 71 dos estudos originais.

Os indivíduos da Categoria II devem ter pelo menos uma redução de resposta composta de nível 1 em comparação com o Dia 71 dos estudos originais e não mais manter uma resposta composta de nível 2 em comparação ao Dia 1 no estudo original em qualquer uma ou ambas as nádegas para serem elegíveis para retratamento após o qual eles participarão de visitas de observação. • Categoria III (respondentes não compostos) inclui todos os outros indivíduos que receberam CCH ativo nos estudos originais, mas não atenderam aos critérios para serem incluídos na Categoria I ou II. Esses indivíduos serão observados quanto à segurança a cada 6 meses por 2 anos e anualmente por até 5 anos (Dia 1800), e não são elegíveis para retratamento durante o estudo.

[00518] Os indivíduos da Categoria I e os indivíduos da Categoria II elegíveis para retratamento receberão a droga do estudo em 3 visitas de retratamento, a menos que a nádega não tenha ondulações EFP tratáveis e o investigador classifique uma nádega com uma pontuação de 0 no CR- PCSS na Visita de Tratamento 1, Visita de Tratamento 2 e/ou Visita de Tratamento 3. Durante cada visita de retratamento, a(s) nádega(s) a ser(em) tratada(s) será(ão) fotografada(s) antes e após a marcação das ondulações e locais de injeção, enquanto o indivíduo está em pé em uma postura relaxada padronizada e consistente, conforme descrito em outra parte neste documento.

[00519] A área de tratamento é definida como nádega(s) elegível(is). Um indivíduo será elegível para tratamento após o Dia 180 em qualquer uma ou ambas as nádegas (ou seja, nádega esquerda e/ou direita). Todas as avaliações de celulite serão realizadas em cada área de tratamento individual. As áreas de tratamento serão avaliadas separadamente. As ondulações selecionadas em cada nádega devem ser bem definidas, evidentes quando o indivíduo está em pé em uma postura relaxada consistente e adequadas para o tratamento. As mesmas ondulações em uma nádega ou diferentes ondulações em uma nádega podem ser retratadas nas visitas de tratamento designadas, mas as injeções devem ser todas dentro das nádegas (por exemplo, 12 injeções por nádega) em todas as visitas de tratamento.

[00520] Se nenhuma injeção em uma nádega em particular (direita/esquerda) for dada em uma visita de tratamento (por exemplo, uma visita de tratamento, por exemplo, Visita de Tratamento 2), os indivíduos ainda serão avaliados para retratamento na nádega contralateral nessa visita (Visita de Tratamento 2) se a nádega foi tratada durante a Visita de Tratamento 1. Quando o indivíduo retorna para a Visita de Tratamento 3, cada uma das nádegas será novamente avaliada pelo indivíduo (usando PR-PCSS) e Investigador (usando CR-PCSS). Se o investigador classificar a gravidade da celulite maior que 0 usando o CR-PCSS na(s) nádega(s) elegível(is), então as injeções serão dadas.

[00521] Os indivíduos da Categoria I e Categoria II que participam da fase de observação do estudo terão avaliações da celulite concluídas durante as visitas de observação nos Meses 12, 18, 24, 36, 48 e

60. Nessas visitas de observação, se as classificações indicam que a(s) nádega(s) é(são) elegível(is) para retratamento e o indivíduo não recebeu CCH anteriormente neste estudo 304 (Exemplo 5), será oferecido ao indivíduo 1 curso de retratamento para a(s) nádega(s) elegível(is).

[00522] O curso de retratamento para indivíduos elegíveis da Categoria I e Categoria II consiste em 3 sessões de retratamento separadas por 21 dias, a menos que a nádega não tenha ondulações EFP tratáveis, ou seja, o investigador classifica uma pontuação de 0 no CR- PCSS na Visita de Tratamento 1, 2 e/ou Visita de Tratamento 3. Cada sessão de retratamento consiste em 12 injeções (0,07 mg/0,3 mL por injeção) de CCH para uma dose de 0,84 mg e volume de 3,6 mL (idêntico ao curso de tratamento administrado no estudo duplo-cego), em cada nádega de qualificação, com até 2 nádegas tratadas concomitantemente. Um e apenas 1 curso de retratamento em até 2 nádegas qualificáveis concomitantemente é oferecido para indivíduos elegíveis da Categoria I e Categoria II durante este estudo de 5 anos. Após o início do retratamento (na Visita de Tratamento 1; Dia 1 de Tratamento), os indivíduos são avaliados quanto à segurança em cada dia de injeção durante o retratamento e avaliados quanto à segurança e gravidade da celulite na Visita de Tratamento 2 (Dia 22), Visita de Tratamento 3 (Dia 43) e Visita de Tratamento 4 (Dia 71). Após o retratamento, esses indivíduos serão observados, dependendo de quando durante o período de 5 anos o indivíduo recebeu retratamento, a cada 6 meses por 2 anos e, então, anualmente por até 5 anos (Dia 1800) após o Dia 71 dos estudos originais (Exemplos 2 e 3).

[00523] Para propósitos de estudo, a redução da resposta (ou seja, diminuição da resposta ou perda de resposta) é definida como uma piora composta de nível 1 da melhoria da gravidade da celulite observada no Dia 71 dos estudos originais tanto no PR-PCSS quanto no CR-PCSS. O TRR foi definido como o tempo desde a avaliação da eficácia (Dia 71 dos estudos originais) até a visita do estudo na qual uma perda de resposta composta de nível 1 tanto no PR-PCSS quanto no CR-PCSS foi observada neste estudo. A confirmação da redução da resposta e/ou perda completa da resposta é estabelecida durante uma visita de acompanhamento do estudo, aproximadamente 2 semanas após a redução composta da resposta ser detectada pela primeira vez.

[00524] As fotografias digitais não são medidas diretas de eficácia; contudo, as fotografias digitais são utilizadas na avaliação de certas medições de eficácia. Cada nádega é fotografada, por meio de uma câmera digital de maneira padronizada conforme descrito acima, nos seguintes momentos para cada uma das duas nádegas: • Triagem, Dia 180, Visita de Confirmação (sem marcações de ondulações ou locais de injeção) para todos os indivíduos • Antes e após marcar as ondulações e locais de injeção (antes das injeções) durante as Visitas de Tratamento (Dia 1, 22 e 43) para indivíduos elegíveis da Categoria I e/ou da Categoria II • Durante a visita do Dia 71 (Final do Tratamento/Rescisão Antecipada), Visitas de Avaliação de Observação (Dia 360, 540, 720, 1080, 1440 e 1800/Final do Estudo ("EOS")) e Visitas de Confirmação (sem Ondulação ou marcações no local de injeção)

[00525] Após a visita do Dia 180 e a revelação dos estudos originais duplo-cegos, a fotografia é limitada aos indivíduos da Categoria I e Categoria II.

[00526] Até 843 indivíduos que receberam a droga do estudo nos estudos originais poderiam ter participado deste estudo. Um total de 617 indivíduos completaram os estudos originais e consentiram em participar neste estudo. Destes, 130 não atenderam aos critérios de entrada, retiraram o consentimento ou perderam o acompanhamento antes da visita do Dia 180. Além disso, 4 indivíduos participaram da visita do Dia 180, mas retiraram-se do estudo antes da revelação e 4 indivíduos não haviam sido cegados no momento de limiar de dados provisório (1 de abril de 2019). Portanto, um total de 479 indivíduos completaram a visita do Dia 180 e não estavam cegos no momento de limiar de dados.

[00527] Destes 479 indivíduos, 238 receberam placebo nos estudos originais, completaram a visita do Dia 180 e, então, foram retirados de outras participações neste estudo. Portanto, 241 indivíduos que receberam CCH nos estudos originais e que completaram a visita do Dia 180 neste estudo eram elegíveis para continuar. Dentre os 241 indivíduos elegíveis, 198 haviam consentido em participar da fase de estudo aberta no momento do limiar de dados (1º de abril de 2019). Destes, 30 indivíduos eram elegíveis e optaram por receber retratamento de CCH antes do limiar de dados, Tabelas 62 e 63. Tabela 62: Resumo da participação de indivíduo neste estudo. Número de Indivíduos Número de Indivíduos Número Total de (CCH) (placebo) Indivíduos Triagem Assinada A ICF 617 Completo no Dia 180 241 238 479 Indivíduos Entraram no Estudo 198 — 198 Aberto Categoria I 84 — 84 Categoria II 19 — 19 Categoria III 95 — 95

População de Tempo para 103 -— 103 Redução da Resposta (TRR) Tabela 63: Resumo da participação da "população de tempo para redução da resposta (TRR)" neste estudo. População de Tempo para Redução Categoria I Categoria II TRR total da Resposta (TRR) n=84 N=19 n=103 27 3 30 População Aberta Retratada (OLR) Completou 3 Sessões de 13 13 Tratamento (até e incluindo o Dia 43) Fase de Retratamento Concluído 4 — 4 (Dia 71)

DOSE E MODO DE ADMINISTRAÇÃO

[00528] A CCH para celulite é um pó liofilizado estéril compreendendo 0,92 mg de colagenase clostrídio histolítico, como descrito acima. Aos indivíduos qualificados para o estudo foi dada uma dose máxima de 0,84 mg de CCH ou placebo por nádega por sessão de tratamento (dose total de 1,68 mg por sessão de tratamento), administrada como 12 injeções subcutâneas por nádega em 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo (Tabela 64). Tabela 64: Retratamento do Estudo (apenas indivíduos elegíveis da Categoria I e da Categoria II) Volume de Número de Volume de Dose por Cada Injeção por Injeções por Dose (mg) em Cada Injeção (mL) por Dose EFP Injeção a Cada Cada Visita de Visita de Tratamento Cada Visita de Cumulativa Injeção Tratamento Tratamento 0,84 mg por nádega x 3,6 mL por 5,04 mg (3 visitas 12 por nádega até 2 nádegas = 1,68 nádega x até 2 de tratamento x x até 2 mg (12 injeções por 0,07 mg de CCH 0,3 mL nádegas = até 7,2 0,84 mg por nádegas = até nádega x 0,07 mL (24 injeções x nádega x até 2 24 injeções mg/injeção x até 2 0,3 mL nádegas) nádegas) a Cada injeção da droga do estudo é de 0,3 mL administrada como três alíquotas de 0,1 mL.

[00529] A droga do estudo é injetada por via subcutânea enquanto o indivíduo está em uma posição prona usando uma seringa com uma agulha de calibre 30 de ½ polegada. Cada local de injeção receberá uma única injeção na pele da droga do estudo administrada como três alíquotas de 0,1 mL para as Posições A, B e C (para um volume total de injeção de 0,3 mL), conforme mostrado na Figura 7. A profundidade da injeção corresponde ao comprimento da agulha de tratamento (0,5 polegadas) a partir da ponta da agulha ao centro ou base da agulha sem pressão para baixo.

[00530] Durante cada visita de retratamento, 4 seringas por nádega são preparadas para dosagem. Cada seringa contém 0,9 mL da droga do estudo (ou seja, 3 injeções em cada seringa). Doze (12) injeções na pele de 0,3 mL por injeção são administradas em cada nádega elegível sendo retratada durante cada visita de tratamento. Aos indivíduos que se qualificam para o retratamento neste estudo é dada uma dose máxima de 0,84 mg de CCH por nádega por dia de tratamento, administrada em até 12 injeções subcutâneas por nádega em 3 visitas de tratamento com 21 dias de intervalo.

CRITÉRIOS PARA AVALIAÇÃO

[00531] A eficácia foi avaliada usando CR-PCSS e PR-PCSS, Escala de Impacto da Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS), Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S-GAIS), Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS) e Avaliação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite.

[00532] Os pontos finais de segurança incluíram eventos adversos (AEs), sinais vitais, exame físico, testes laboratoriais e imunogenicidade.

MÉTODOS ESTATÍSTICOS

[00533] Foram usadas as seguintes populações de análise: • População de Observação do Dia 180 inclui todos os indivíduos transferidos a partir dos estudos originais. • População de Observação de Aberta inclui todos os indivíduos que entraram no estudo aberto e receberam CCH nos estudos originais. Esta população inclui todos os indivíduos das Categorias I, II e III.

• O TRR antes da População de Retratamento inclui todos os indivíduos que tiveram pelo menos uma melhora de nível 1 ou 2 tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS no Dia 71 do estudo original para qualquer uma/ambas as nádegas tratadas. Esta população inclui indivíduos das Categorias I e II. A redução da resposta é avaliada separadamente para indivíduos que tiveram pelo menos uma melhora de nível 1 e 2 tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS durante o estudo original em cada nádega tratada. A redução da resposta antes do retratamento é analisada usando esta população. • A População de Retratamento Aberto (OLR) inclui todos os indivíduos da População TRR que são retratados neste estudo aberto. • TRR após a População de Retratamento inclui todos os indivíduos na População OLR que têm pelo menos uma melhora composta de nível 1 ou 2 tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS no Dia 71/Visita Final à Clínica de Tratamento na fase de tratamento aberto. A redução da resposta é avaliada separadamente para indivíduos que têm pelo menos uma melhora composta de nível 1 e 2 tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS durante a fase de tratamento aberta em cada nádega tratada. A redução da resposta após o retratamento é analisada usando esta população.

ANÁLISES DE EFICÁCIA

[00534] As definições de resposta usadas no estudo foram as seguintes.

[00535] A redução da resposta na Escala de Gravidade da Celulite (PR-PCSS e CR-PCSS): A redução da resposta é avaliada separadamente antes do retratamento e após o retratamento. A Tabela 65 descreve as definições para redução da resposta neste estudo. Tabela 65: Redução de Resposta Variáveis Antes do Retratamento Após o Retratamento

Piora da melhora da gravidade da celulite Piora da melhora da gravidade da celulite em PR-PCSS ou CR-PCSS neste estudo em PR-PCSS ou CR-PCSS durante a fase antes do retratamento em comparação de observação após o retratamento em Redução de Resposta com a pontuação no Dia 71/EOS no comparação com a pontuação no Dia estudo original (Estudos 302/303). Essa 71/Visita à Clínica no Final do Tratamento redução também é referida como Perda na fase de tratamento aberta, parcial de Resposta, Piora da melhora da gravidade da celulite Piora da melhoria da gravidade da celulite em pelo menos nível 2 no PR-PCSS ou em pelo menos nível 2 no PR-PCSS ou CR-PCSS durante a fase de observação CR-PCSS neste estudo antes do após o retratamento em comparação com retratamento em comparação com a Redução de nível 2 a pontuação no Dia 71/Visita à Clínica no pontuação no Dia 71/EOS no estudo Final do Tratamento na fase de tratamento original (ou seja, uma alteração a partir da aberto (ou seja, uma alteração a partir da linha de base da classificação PR-PCSS linha de base de classificação PR-PCSS e/ou CR-PCSS de 2, 3 ou 4) e/ou CR-PCSS de 2, 3 ou 4) Piora da melhora da gravidade da celulite Piora da melhoria da gravidade da celulite em pelo menos nível 1 no PR-PCSS ou em pelo menos nível 1 no PR-PCSS ou CR-PCSS durante a fase de observação CR-PCSS neste estudo após o após o retratamento em comparação com retratamento em comparação com a Redução de nível 1 a pontuação no Dia 71/Visita à Clínica no pontuação no Dia 71 / EOS no estudo dos Final do Tratamento na fase de tratamento pais (ou seja, uma alteração em relação aberto (ou seja, uma alteração a partir da ao PR-PCSS e/ou CR da linha de base - linha de base de classificação PR-PCSS Classificação PCSS de 12, 3 ou 4) e/ou CR-PCSS de 1, 2, 3 ou 4) Redução Composta foi avaliada usando tanto na classificação de respondente PR- PCSS do indivíduo quanto do respondente CR-PCSS do investigador, onde ambas as escalas tinham o mesmo nível de redução. Se a classificação estava faltando para Redução Composta 1 ou ambos os componentes (ou seja, o componente PR-PCSS ou o componente CR-PCSS), então a classificação de respondente composta estava faltando para aquela visita.

Piora da melhora da gravidade da celulite Piora da melhoria da gravidade da celulite em pelo menos nível 2 tanto em PR-PCSS em pelo menos nível 2 tanto em PR-PCSS Redução Composta de quanto em CR-PCSS em comparação quanto em CR-PCSS em comparação nível 2 com a pontuação no Dia 71/Visita à com a pontuação no Dia 71/EOS no Clínica no Final do Tratamento na fase de estudo original. tratamento aberta.

Piora da melhora da gravidade da celulite Piora da melhoria da gravidade da celulite em somente nível 1 tanto em PR-PCSS em somente nível 1 tanto em PR-PCSS Redução Composta de quanto em CR-PCSS em comparação quanto em CR-PCSS em comparação nível 1 com a pontuação no Dia 71/Visita à com a pontuação no Dia 71/EOS no Clínica no Final do Tratamento na fase de estudo original. tratamento aberta.

Piora da melhora na gravidade da celulite Piora da melhora na gravidade da celulite nas classificações PR-PCSS e CR-PCSS nas classificações PR-PCSS e CR-PCSS em comparação com a pontuação no Dia neste estudo antes do retratamento em 71/Visita à Clínica no Final do Tratamento Perda Completa de comparação com a pontuação no Dia na fase de tratamento de aberta, onde a Resposta 71/EOS no estudo original, onde a gravidade da celulite retorna aos níveis da gravidade da celulite retorna aos níveis da linha de base da fase de retratamento (ou linha de base dos estudos duplo-cegos seja, Dia 1 da fase de retratamento (ou seja, Dia 1 do estudo original) ou pior. aberto) ou pior.

[00536] Tempo para Redução de Resposta: A Tabela 66 descreve como o TRR foi calculado. Tabela 66: Tempo para Redução de Resposta

Variáveis Antes do Retratamento Após o Retratamento Número de dias a partir do momento da Número de dias a partir do momento da avaliação da melhora composta na avaliação da melhora composta na gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- PCSS no Dia 71/Visita à Clínica no Final do Tempo para Compor a PCSS no Dia 71/EOS no estudo original até Tratamento na fase de tratamento aberta Redução da Resposta a visita do estudo antes do retratamento no até a visita de estudo durante a fase de em nível 2 qual pelo menos uma piora de nível 2 de observação após o retratamento no qual resposta tanto nas classificações de PR- pelo menos uma piora de nível 2 de PCSS quanto de CR-PCSS são observadas resposta tanto nas classificações de PR- pela primeira vez. PCSS quanto de CR-PCSS é observada pela primeira vez.

Número de dias a partir do momento da Número de dias a partir do momento da avaliação da melhora composta na avaliação da melhora composta na gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- PCSS no Dia 71/Visita à Clínica no Final do Tempo para Compor a PCSS no Dia 71/EOS no estudo original até Tratamento na fase de tratamento aberta Redução da Resposta a visita do estudo antes do retratamento no até a visita de estudo durante a fase de em nível 1 qual somente uma piora de nível 1 de observação após o retratamento, no qual resposta em ambos as classificações PR- somente nível 1 de piora da resposta tanto PCSS e CR-PCSS é observada pela nas classificações de PR-PCSS quanto de primeira vez. CR-PCSS é observada pela primeira vez.

Número de dias a partir do momento da Número de dias a partir do momento da avaliação da melhora composta na avaliação da melhora composta na gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- gravidade da celulite em PR-PCSS e CR- Tempo para PCSS no Dia 71/Visita à Clínica no Final do PCSS no Dia 71/EOS no estudo original até Completar a Perda de Tratamento na fase de tratamento aberta a visita do estudo antes do retratamento, no Resposta para a visita do estudo durante a fase de qual a perda completa de resposta tanto em observação após o retratamento, no qual a PR-PCSS quanto em CR-PCSS é perda completa de resposta tanto em PR- observada. PCSS quanto em CR-PCSS é observada.

[00537] Melhora da Resposta na Escala de Gravidade da Celulite (PR-PCSS e CR-PCSS): Para os indivíduos que receberam retratamento neste estudo, a melhora da resposta na gravidade da celulite durante a fase de retratamento (ou seja, no Dia 22, 43 e 71) em comparação com o Dia 1 da fase de retratamento é avaliado como: • Melhora de nível 2: definida como melhora na gravidade da celulite em pelo menos nível 2 nas classificações PR-PCSS ou CR-PCSS após receber o retratamento em comparação com a classificação correspondente no Dia 1 do Curso de Tratamento (Sessão de Tratamento 1) deste estudo (ou seja, alteração a partir da linha de base da classificação PR-PCSS e/ou CR-PCSS de -2 ou -3). • Melhora de nível 1: definida como melhora na gravidade da celulite em pelo menos nível 1 nas classificações PR-PCSS ou CR-PCSS após receber o retratamento em comparação com a classificação correspondente no Dia 1 do Curso de Tratamento (Sessão de Tratamento

1) deste estudo (ou seja, alteração a partir da linha de base da classificação PR-PCSS e/ou CR-PCSS de -1, -2 ou -3). • Respondente de nível 2: definido como um indivíduo com uma melhora nas classificações PR-PCSS ou CR-PCSS de pelo menos nível 2 em comparação com as classificações no Dia 1 do Curso de Tratamento (Sessão de Tratamento 1) deste estudo. • Respondente de nível 1: definido como um indivíduo com uma melhora nas classificações PR-PCSS ou CR PCSS de pelo menos nível 1 em comparação com as classificações no Dia 1 do Curso de Tratamento (Sessão de Tratamento 1) deste estudo. • Melhora Composta de nível 1 ou 2 é avaliada usando tanto o PR-PCSS quanto o CR-PCSS (por exemplo, para melhora composta de nível 1 - a melhora na resposta de pelo menos nível 1 é observada tanto em PR-PCSS quanto em CR-PCSS para a mesma nádega. Para a melhora composta de nível 2 - a melhora de pelo menos nível 2 é observada tanto em PR-PCSS tanto em CR-PCSS para a mesma nádega). Se a classificação estava faltando para 1 ou ambos os componentes (ou seja, o componente PR-PCSS ou o componente CR-PCSS), então a classificação de respondente composta estava faltando para aquela visita. • Respondente Composto de nível 2: definido como um indivíduo que é, pelo menos, um respondente PR-PCSS de nível 2 e um respondente CR-PCSS de pelo menos nível 2. • Respondente Composto de nível 1: definido como um indivíduo que é, pelo menos, um respondente PR-PCSS de nível 1 e, pelo menos, um respondente CR-PCSS de nível 1.

[00538] Respondente PR-CIS: • Para a pontuação total do PR-CIS, um respondente do PR-CIS é definido como um indivíduo com uma redução na pontuação total do PR- CIS de pelo menos 12 a partir da linha de base (ou seja, média de pelo menos 2 para cada item) em um momento da avaliação.

• Para pontuação total do PR-CIS abreviado, um respondente do PR-CIS é definido como um indivíduo com uma redução na pontuação total do PR-CIS de pelo menos 10 a partir da linha de base (ou seja, média de pelo menos 2 para cada item) em um momento da avaliação. • Um respondente PR-CIS para cada item é definido como um indivíduo com uma redução na pontuação de item do PR-CIS de pelo menos 2 a partir da pontuação no Dia 71 da fase aberta em um momento da avaliação. • O item #1 no PR-CIS questionando - "o quão feliz o indivíduo está com sua aparência de celulite" é revertido subtraindo a avaliação relatada do indivíduo de 10 (ou seja, para fins de composição, a pontuação da questão “feliz” é invertida (refletida) para torná-la direcionalmente consistente com as outras questões). Desta maneira, um número mais alto em 6 das questões do PR-CIS refletirá um impacto mais negativo.

[00539] Escala Global de Melhora Estética do Indivíduo: Um respondente S-GAIS de nível 2 é definido como um indivíduo com classificação S-GAIS de pelo menos 2 (ou seja, 2 ou 3) em um momento da avaliação. Um respondente S-GAIS de nível 1 foi definido como um indivíduo com uma classificação S-GAIS de pelo menos 1 (ou seja, 1, 2 ou 3) em um momento da avaliação.

[00540] Avaliação da Satisfação do Indivíduo com o Tratamento da Celulite: Um respondente é definido como um indivíduo com uma resposta de “Satisfeito” ou “Muito satisfeito” na avaliação da satisfação do indivíduo com o tratamento da celulite durante uma avaliação.

[00541] Escala de Autoavaliação do Indivíduo: Um respondente SSRS de nível 1 é definido como um indivíduo que está pelo menos ligeiramente satisfeito (ou seja, ligeiramente satisfeito [4], muito satisfeito [5] ou extremamente satisfeito [6]) com a aparência da celulite nas nádegas durante uma avaliação. Um respondente SSRS de nível 2 é definido como um indivíduo que está pelo menos muito satisfeito (ou seja, muito satisfeito

[5] ou extremamente satisfeito [6]) com a aparência da celulite nas nádegas durante uma avaliação.

RESULTADOS DE EFICÁCIA A. Análise de Eficácia - População Observacional do Dia 180

1. Gravidade da celulite a. PR-PCSS e CR-PCSS

[00542] A Tabela 67 descreve as alterações no PR-PCSS e CR- PCSS do Dia 1 dos estudos originais ao Dia 71 dos estudos originais e ao Dia 180 deste estudo (180 dias após o Dia 71 dos estudos originais, ou aproximadamente 251 dias após a primeira dose da droga do estudo nos estudos originais) na População Observacional do Dia 180. Tabela 67: Alteração a partir do Dia 1 dos estudos originais nas Classificações de Gravidade da Celulite até a Visita do Dia 180 (População Observacional do Dia 180, conforme definido neste estudo 304) Tratamento do Estudo nos Estudos 302/303 Escala de Gravidade da Celulite CCH placebo Estatística3 Classificação de Gravidade da Celulite Nádega Nádega Nádega Direita Nádega Direita Esquerda Esquerda PR-PCSS Alteração a partir do Dia 1 no Dia 71/EOS nos Estudos N 241 241 238 238 302/303 -4 n (%) 0 1 (0,4) 1 (0,4) 1 (0,4) -3 n (%) 4 (1,7) 11 (4,6) 0 2 (0,8) -2 n (%) 50 (20,7) 42 (17,4) 25 (10,5) 25 (10,5) -1 n (%) 95 (39,4) 93 (38,6) 61 (25,6) 56 (23,5) 0 n (%) 84 (34,9) 88 (36,5) 144 (60,5) 146 (61,3) +1 n (%) 8 (3,3) 6 (2,5) 7 (2,9) 8 (3,4) +2 n (%) 0 0 0 0 +3 n (%) 0 0 0 0 Média -0,8 -0,9 -0,5 -0,5 SD 0,85 0,92 0,75 0,79 PR-PCSS Alteração a partir do Dia 1 dos Estudos 302/303 no Dia N 241 241 237 237 180/Rescisão Antecipada -4 n (%) 1 (0,4) 0 0 1 (0,4) -3 n (%) 5(2,1) 10 (4,1) 1 (0,4) 2 (0,8) -2 n (%) 30 (12,4) 34 (14,1) 15 (6,3) 22 (9,3) -1 n (%) 92 (38,2) 86 (35,7) 62 (26,2) 65 (27,4) 0 n (%) 101 (41,9) 98 (40,7) 145 (61,2) 134 (56,5) +1 n (%) 12 (5,0) 13 (5,4) 14 (5,9) 13 (5,5) +2 n (%) 0 0 0 0

+3 n (%) 0 0 0 0 Média -0,7 -0,7 -0,3 -0,4 SD 0,87 0,92 0,71 0,80 CR-PCSS Alteração a partir do Dia 1 no Dia 71/EOS nos Estudos N 241 241 238 238 302/303 -4 n (%) 0 0 0 0 -3 n (%) 2 (0,8) 1 (0,4) 0 3 (1,3) -2 n (%) 39 (16,2) 37 (15,4) 10 (4,2) 11 (4,6) -1 n (%) 110 (45,6) 103 (42,7) 65 (27,3) 55 (23,1) 0 n (%) 82 (34,0) 94 (39,0) 149 (62,6) 156 (65,5) +1 n (%) 8 (3,3) 6 (2,5) 14 (5,9) 13 (5,5) +2 n (%) 0 0 0 0 +3 n (%) 0 0 0 0 Média -0,8 -0,7 -0,3 -0,3 SD 0,79 0,76 0,64 0,70 CR-PCSS Alteração a partir do Dia 1 dos Estudos 302/303 no Dia N 241 241 236 236 180/Rescisão Antecipada -4 n (%) 0 0 0 0 -3 n (%) 1 (0,4) 1 (0,4) 0 1 (0,4) -2 n (%) 31 (12,9) 35 (14,5) 15 (6,4) 12 (5,1) -1 n (%) 89 (36,9) 88 (36,5) 80 (33,9) 76 (32,2) 0 n (%) 101 (41,9) 101 (41,9) 124 (52,5) 129 (54,7) +1 n (%) 19 (7,9) 16 (6,6) 17 (7,2) 18 (7,6) +2 n (%) 0 0 0 0 +3 n (%) 0 0 0 0 Média -0,6 -0,6 -0,4 -0,4 SD 0,83 0,83 0,72 0,72 a As porcentagens são com base no número de indivíduos (N) com cada nádega avaliada em cada visita.

[00543] Nos 241 indivíduos que foram tratados com CCH nos estudos originais e completaram as avaliações do Dia 180 da gravidade da celulite neste estudo, a alteração média (SD) do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais em PR-PCSS foi de -0,8 (0,85) para a nádega esquerda e -0,9 (0,92) para a nádega direita. Nestes mesmos indivíduos, a alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -0,7 (0,87) para a nádega esquerda e -0,7 (0,92) para a nádega direita.

[00544] A alteração média (SD) de CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -0,8 (0,79) para a nádega esquerda e - 0,7 (0,76) para a nádega direita. A alteração média (SD) em CR-PCSS do Dia 1 dos estudos originais ao Dia 180 deste estudo foi de -0,6 (0,83) para a nádega esquerda e -0,6 (0,83) para a nádega direita.

[00545] Nos 238 indivíduos tratados com placebo nos estudos originais, a alteração média (SD) de PR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 foi de -0,5 (0,75) e -0,5 (0,79) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 neste estudo no PR-PCSS foi de -0,3 (0,71) na nádega esquerda e -0,4 (0,80) na nádega direita.

[00546] Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) de CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 foi de -0,3 (0,64) e -0,3 (0,70) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média a partir do Dia 1 no estudo original para o Dia 180 neste estudo em CR-PCSS foi -0,4 (0,72) na nádega esquerda e -0,4 (0,72) na nádega direita.

[00547] As alterações médias em CR-PCSS e PR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 (no estudo original) e a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 neste estudo indicam que os indivíduos na População Observacional do Dia 180 são representativos da população dos estudos originais. A diferença entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo no Dia 180 é consistente com os resultados vistos nos estudos originais. b. PR-CIS

[00548] A Tabela 68 descreve as alterações no PR-CIS a partir do Dia 1 dos estudos originais ao Dia 71 dos estudos originais e ao Dia 180 deste estudo na População Observacional do Dia 180. Tabela 68: Alteração a partir do Dia 1 dos estudos originais em PR- CIS Total, Abreviado e Pontuações de Itens até o Dia 180/Visita de Rescisão Antecipada (Dia 180 da População Observacional, conforme definido neste estudo 304) Tratamento do Estudo nos Estudos 302/303 Visita de Pontuação PR-CISa Estatística CCH (N = 241) placebo (N = 238) Pontuação total Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -11,8 -6,5

SD 11,77 12,12 Mediana -10,0 -4,0 min -53 -49 max 27 41 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -10,5 -5,4 SD 11,76 11,30 Mediana -10,0 -3,0 min -50 -50 max 25 47 Pontuação abreviada Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -10,3 -5,7 SD 9,95 10,30 Mediana -10,0 -4,0 min -44 -43 max 19 34 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -9,3 -5,2 SD 9,88 9,90 Mediana -9,0 -3,0 min -40 -44 max 22 37 Questão 1: Impacto de felicidade Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -3,3 -1,6 SD 3,50 3,20 Mediana -3,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -2,8 -1,5 SD 3,25 3,00 Mediana -3,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 2: Impacto de incômodo Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -1,8 -1,3 SD 3,50 3,92 Mediana -2,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -1,8 -1,3 SD 3,67 3,84 Mediana -2,0 -1,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 3: Impacto de constrangimento Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -1,8 -1,0 SD 2,61 2,51 Mediana -1,0 0,0 min -10 -10 max 9 8 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -1,7 -1,1 SD 2,81 2,90 Mediana -2,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 4: Impacto de vergonha Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -2,0 -1,0 SD 2,75 2,56 Mediana -2,0 0,0 min -10 -10 max 8 9 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -1,9 -0,9 SD 2,56 2,58 Mediana -2,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 5: Impacto de Aparência mais Velha Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -1,5 -0,8 SD 2,72 2,92 Mediana -1,0 0,0 min -10 -10 max 8 10 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -1,2 -0,2 SD 2,88 2,61 Mediana -1,0 0,0 min -10 -10 max 8 10 Questão 6: Impacto de preocupação com forma corporal Alteração a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos n 239 233 Estudos 302/303 Média -1,4 -0,7 SD 2,50 2,37 Mediana -1,0 0,0 min -10 -10 max 8 9 Alteração a partir do Dia 1 nos Estudos 302/302 n 241 234 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média -1,1 -0,4 SD 2,52 2,47 Mediana 0,0 0,0 min -10 -10 max 8 7 a Uma alteração mais negativa na pontuação indica uma maior redução do impacto da celulite na vida do indivíduo.

[00549] Em indivíduos que foram tratados com CCH nos estudos originais e completaram as avaliações do Dia 180 de PR-CIS neste estudo,

a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais na Pontuação Total do PR-CIS foi de -11,8 (11,77). Nestes mesmos indivíduos, a alteração média (SD) na Pontuação Total do PR-CIS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -10,5 (11,76).

[00550] Em indivíduos tratados com placebo nos estudos originais, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais na Pontuação Total do PR-CIS foi de -6,5 (12,12). Nestes mesmos indivíduos, a alteração média (SD) na Pontuação Total do PR-CIS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -5,4 (11,30).

[00551] Para a pontuação de PR-CIS Abreviada, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -10,3 (9,95) e a alteração média (SD) na pontuação de PR-CIS Abreviada a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -9,3 (9,88) em indivíduos tratados com CCH. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -5,7 (10,30) e a alteração média (SD) na Pontuação de PR-CIS Abreviada a partir do Dia 1 nos estudos originais até o Dia 180 neste estudo foi de -5,2 (9,90).

[00552] Resultados semelhantes foram vistos ao examinar as alterações na resposta para cada item individual no PR-CIS.

[00553] As alterações médias nas pontuações de itens de PR- CIS totais, abreviadas a partir do Dia 1 ao Dia 71 (nos estudos originais) e a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo também indicam que os indivíduos na População Observacional do Dia 180 são representativos da população dos estudos originais. A diferença entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo no Dia 180 é consistente com os resultados vistos nos estudos originais.

2. Persistência do Efeito do Tratamento a. PR-PCSS e CR-PCSS da População Observacional do Dia 180

[00554] Tabela 69 descreve a alteração a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo em PR-PCSS e CR-PCSS na População de Observação do Dia 180. Tabela 69: Alteração a partir do Dia 71/EOS nos estudos originais em PR-PCSS e CR-PCSS no Dia 180/Visita de Rescisão Antecipada (Dia 180 da População Observacional, conforme definido neste estudo 304) Tratamento do Estudo nos Estudos 302/303 Escala de Gravidade da Celulite CCH placebo Classificação da Gravidade da Estatística3 Celulite Nádega Nádega Nádega Nádega Direita Esquerda Direita Esquerda PR-PCSS Alteração a partir do Dia 71/EOS nos Estudos 302/303 ao Dia N 241 241 237 237 180/Rescisão Antecipada -4 n (%) 1 (0,4) 0 0 1 (0,4) -3 n (%) 0 0 0 1 (0,4) -2 n (%) 3 (1,2) 7 (2,9) 6 (2,5) 5 (2,1) -1 n (%) 33 (13,7) 35 (14,5) 25 (10,5) 40 (16,9) 0 n (%) 130 (53,9) 127 (52,7) 152 (64,1) 139(58,6) +1 n (%) 66 (27,4) 60 (24,9) 46 (19,4) 45 (19,0) +2 n (%) 7 (2,9) 11 (4,6) 7 (3,0) 5(2,1) +3 n (%) 1 (0,4) 0 0 0 +4 n (%) 0 1 (0,4) 1 (0,4) 1 (0,4) Média 0,2 0,2 0,1 0,0 SD 0,81 0,86 0,76 0,84 CR-PCSS Alteração a partir do Dia 71/EOS nos Estudos 302/303 ao Dia N 241 241 236 236 180/Rescisão Antecipada -4 n (%) 0 0 0 0 -3 n (%) 0 0 0 0 -2 n (%) 3 (1,2) 2 (0,8) 7 (3,0) 5(2,1) -1 n (%) 33 (13,7) 40 (16,6) 50 (21,2) 53 (22,5) 0 n (%) 125 (51,9) 134 (55,6) 142 (60,2) 134(56,8) +1 n (%) 71 (29,5) 59 (24,5) 32 (13,6) 39 (16,5) +2 n (%) 8 (3,3) 4 (1,7) 5 (2,1) 4 (1,7) +3 n (%) 1 (0,4) 2 (0,8) 0 1 (0,4) +4 n (%) 0 0 0 0 Média 0,2 0,1 -0,1 -0,1 SD 0,78 0,76 0,74 0,76 a As porcentagens são com base no número de indivíduos com cada nádega avaliada em cada visita.

[00555] Para PR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,2 (0,81) na nádega esquerda e 0,2 (0,86) na nádega direita. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) no PR-PCSS foi de 0,1 (0,76) e 0,0 (0,84) na nádega esquerda e direita, respectivamente.

[00556] Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,2 (0,78) na nádega esquerda e 0,1 (0,76) na nádega direita. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) em CR-PCSS foi de -0,1 (0,74) e -0,1 (0,76) na nádega esquerda e direita, respectivamente.

[00557] As pequenas diferenças em PR-PCSS e CR-PCSS entre o Dia 71 e o Dia 180 indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 nos estudos originais em indivíduos tratados com CCH. Esses resultados também indicam que o efeito médio do tratamento foi virtualmente idêntico entre as nádegas direita e esquerda. b. PR-CIS da População Observacional do Dia 180

[00558] Tabela 70 descreve a alteração a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo em PR-CIS total, abreviado e pontuações de item na População Observacional do Dia 180. Tabela 70: Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 na Pontuação Total PR-CIS, Pontuação Abreviada e Pontuações do Item no Dia 180/Visita de Rescisão Antecipada (População Observacional do Dia 180, conforme definido neste estudo 304) Tratamento do Estudo nos Estudos 302/303 CCH placebo PR-CISa Estatística (N = 241) (N = 238) Pontuação total Dia 71/EOS – Estudo nos Estudos 302/303 n 239 236 Média 40,1 44,9 SD 12,72 13,00 Mediana 40,0 47,5 min 6 6 max 60 60 Dia 180/Rescisão Antecipada n 241 237 Média 41,3 45,9 SD 12,13 11,76 Mediana 43,0 49,0 min 8 5 max 60 60

Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 Estudos ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 1,2 1,0 SD 11,32 10,14 Mediana 1,0 0,0 min -50 -30 max 43 39 Pontuação abreviada Dia 71/-EOS - Estudos 302/303 n 239 236 Média 33,7 38,2 SD 10,63 10,76 Mediana 34,0 40,0 min 5 5 max 50 50 Dia 180/Rescisão Antecipada n 241 237 Média 34,7 38,6 SD 10,21 9,97 Mediana 35,0 40,0 min 7 5 max 50 50 Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 1,0 0,4 SD 9,45 8,98 Mediana 1,0 0,0 min -40 -30 max 33 36 Questão 1: Impacto de felicidade Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,5 0,1 SD 2,68 2,88 Mediana 0,0 0,0 min -9 -10 max 8 10 Questão 2: Impacto de incômodo Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,0 -0,0 SD 3,55 3,78 Mediana 0,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 3: Impacto de constrangimento Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,1 -0,1 SD 2,63 2,92 Mediana 0,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 4: Impacto de vergonha Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,1 0,1 SD 2,62 2,27 Mediana 0,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 Questão 5: Impacto de Aparência mais velha Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,3 0,6

SD 2,92 2,42 Mediana 0,0 0,0 min -10 -6 max 10 7 Questão 6: Impacto de preocupação com forma corporal Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 n 239 235 ao Dia 180/Rescisão Antecipada Média 0,3 0,4 SD 2,59 2,56 Mediana 0,0 0,0 min -10 -10 max 10 10 a Uma alteração mais negativa na pontuação de PR-CIS indica uma maior redução de impacto da celulite na vida do indivíduo.

[00559] Na População Observacional do Dia 180, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo na pontuação de PR-CIS Total foi de 1,2 (11,32) para os indivíduos tratados com CCH e 1,0 (10,14) para os indivíduos tratados com placebo. Para pontuação de PR-CIS Abreviada, a alteração média a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo foi 1,0 (9,45) e 0,4 (8,98) para os indivíduos tratados com CCH e placebo, respectivamente. Pequenas alterações médias (SD) semelhantes foram vistas nas pontuações dos itens individuais (Felicidade com a aparência da celulite: CCH 0,5 [2,68], placebo 0,1 [2,88]; Incômodo: CCH 0,0 [3,55], placebo 0,0 [3,78]; Constrangimento: CCH 0,1 [2,63], placebo -0,1 [2,92]; Vergonha: CCH 0,1 [2,62], placebo 0,1 [2,27]; Aparência mais velha: CCH 0,3 [2,92], placebo 0,6 [2,42]; Preocupação com a Forma Corporal: CCH 0,3 [2,59], placebo 0,4 [2,56]).

[00560] As pequenas diferenças no PR-CIS total, abreviado e pontuações de item entre o Dia 71 e o Dia 180 indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 nos estudos originais em indivíduos tratados com CCH. Além disso, a proporção de respondentes PR-CIS permaneceu consistente a partir do Dia 71 ao Dia 180. c. Escala de Autoavaliação do Indivíduo da População Observacional do Dia 180

[00561] No Dia 71 nos estudos originais, 24,7% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 11,4% dos indivíduos tratados com placebo na População Observacional do Dia 180. No Dia 180, 14,9% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 8,9% dos indivíduos tratados com placebo.

[00562] No Dia 71 nos estudos originais, 51,5% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 1 em comparação com 21,2% dos indivíduos tratados com placebo na População Observacional do Dia 180. No Dia 180, 36,9% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 17,3% dos indivíduos tratados com placebo (Tabela 71).

[00563] Estes resultados indicam que a proporção de respondentes SSRS foi reduzida ao longo do tempo para tanto os indivíduos tratados com CCH quanto os tratados com placebo. Contudo, a diferença nos respondentes SSRS, entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo, foi semelhante no Dia 180 à diferença que foi observada no Dia 71 dos estudos originais. Tabela 71: Número de Indivíduos com Respondentes da Escala de Autoavaliação do Indivíduo e Classificações Individuais até o Dia 180/Visita de Rescisão Antecipada (População Observacional do Dia 180, conforme definido neste estudo 304) Dia 71a SSRS Dia 180 SSRS CCHb placebob CCHb placebob Respondentes/Classificações de (N = 239) (N = 236) (N = 241) (N = 237) SSRS n (%)c n (%)c n (%)c n (%)c Classificações 6 (Extremamente Satisfeito) 12 (5,0) 3(1,3) 4(1,7) 2 (0,8) 5 (Satisfeito) 47 (19,7) 24 (10,2) 32 (13,3) 19 (8,0) 4 (Ligeiramente Satisfeito) 64 (26,8) 23 (9,7) 53 (22,0) 20 (8,4) 3 (Nem satisfeito ou insatisfeito) 31 (13,0) 42 (17,8) 47 (19,5) 44 (18,6) 2 (Ligeiramente Insatisfeito) 24 (10,0) 33 (14,0) 23 (9,5) 17 (7,2) 1 (Insatisfeito) 40 (16,7) 51 (21,6) 55 (22,8) 65 (27,4) 0 (Extremamente Insatisfeito) 21 (8,8) 60 (25,4) 27 (11,2) 70 (29,5) Respondente de Nível 2d 59 (24,7) 27 (11,4) 36 (14,9) 21 (8,9) Respondente de Nível 1c 123 (51,5) 50 (21,2) 89 (36,9) 41 (17,3) a Dia 71 nos estudos 302/302. b Tratamento recebido nos estudos 302/303.

c As porcentagens foram com base no número de indivíduos observados naquela visita. d Um respondente de nível 2 foi definido como indivíduo que estava Satisfeito ou Extremamente Satisfeito (5 ou 6). e Um respondente de nível 1 foi definido como indivíduo que estava Ligeiramente Satisfeito, Satisfeito ou Extremamente Satisfeito (4, 5 ou 6). B. Análise de Eficácia - TRR antes da População de Retratamento

[00564] A TRR antes da População de Retratamento consiste em 103 indivíduos que foram tratados com CCH e tiveram respostas compostas de nível 1 ou 2 em CR-PCSS e PR-PCSS nos estudos originais e que consentiram em continuar na Fase Aberta do estudo atual. Dezenove desses indivíduos foram classificados como Categoria II e 84 foram classificados como Categoria I.

1. Redução de Dois níveis na Resposta - CR-OCSS e PR-PCSS

[00565] Houve 19 indivíduos neste estudo que tiveram pelo menos uma melhora composta de nível 2 na gravidade da celulite em pelo menos 1 nádega no estudo original (Categoria II). Nenhum desses indivíduos teve uma redução composta de nível 2 na gravidade da celulite no Dia 180. Ao considerar o CR-PCSS e PR-PCSS individualmente em indivíduos da Categoria II, 1 indivíduo (5,3%) teve pelo menos uma redução de nível 2 na resposta no CR-PCSS, e 4 indivíduos (21,1%) tiveram pelo menos uma redução de nível 2 de resposta em PR-PCSS no Dia 180, conforme definido neste estudo 304 (Tabela 72). Tabela 72: Número de Indivíduos com uma Redução da Resposta na Classificação da Gravidade da Celulite em Pelo menos nível 2 Antes do Retratamento (TRR antes da População de Retratamento) Categoria II (= 19) Número de Indivíduos Não Número de Indivíduos com Retratados Antes da Visita Redução na Resposta Visita n n (%) Total de Indivíduosb Redução Composta de pelo menos 19 0 nível 2, 180/Rescisão Antecipada

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão Antecipada 19 1 (5,3) Redução de pelo menos nível 2 em PR-PCSS

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão 19 4 (21,1) Antecipada

Indivíduos Responderam Somente na Nádega Esquerda Redução Composta de pelo menos 6 0 nível 2, 180/Rescisão Antecipada

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão Antecipada 6 0 Redução de pelo menos nível 2 em PR-PCSS

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão 6 2 (33,3) Antecipada Indivíduos Responderam Somente na Nádega Direita Redução Composta de pelo menos 6 0 nível 2, 180/Rescisão Antecipada Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão 6 0 Antecipada Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS, Dia 180/Rescisão 6 2 (33,3) Antecipada Indivíduos Responderam em Ambas as Nádegas Nádega Esquerda Redução Composta de pelo menos nível 2 7 0 Dia 180/Rescisão Antecipada

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS 7 3 (42,9) Dia 180/Rescisão Antecipada

Redução de pelo menos nível 2 em PR-PCSS 7 0 Dia 180/Rescisão Antecipada Nádega Direita Redução Composta de pelo menos nível 2 Dia 180/Rescisão Antecipada 7 1 (14,3) Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS

Redução de pelo menos nível 2 em CR-PCSS 7 1 (14,3) Dia 180/Rescisão Antecipada

Redução de pelo menos nível 2 em PR-PCSS 7 1 (14,3) Dia 180/Rescisão Antecipada a As porcentagens no nível do indivíduo são com base no número de respondentes (ou seja, indivíduos que tiveram melhora composta no dia 7 DEOS no estudo original) com nádega não tratada antes da respectiva visita. b Se um indivíduo teve uma resposta de nível 2 em ambas as nádegas, então o indivíduo foi contado somente uma vez.

[00566] Resultados semelhantes foram observados ao considerar as nádegas individualmente. Nos 19 indivíduos da Categoria II descritos acima, havia 26 nádegas no total com uma melhora composta de pelo menos nível 2 na celulite nos estudos originais. Houve pelo menos uma redução composta de nível 2 na resposta em 1 (3,8%) nádega no Dia 180. Além disso, uma redução no CR-PCSS de pelo menos nível 2 foi vista em 4 (15,4%) nádegas e uma redução na resposta do PR-PCSS de pelo menos nível 2 foi vista em 5 (19,2%) nádegas no Dia 180.

2. Redução na Resposta em um nível - CR-PCSS e PR-PCSS

[00567] Havia 19 indivíduos da Categoria II no TRR antes da População de Retratamento. Destes, 3 (15,8%) tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta antes do retratamento. Entre 84 indivíduos da Categoria I na TRR antes da População de Retratamento, 10 (11,9%) tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta antes do retratamento. Em geral (Categoria I e Categoria II combinadas, 103 indivíduos), 13 (12,6%) indivíduos tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta no Dia 180 (Tabela 73).

[00568] Tabela 74 apresenta o número de nádegas com uma redução da resposta na classificação da gravidade da celulite em nível 1 antes do retratamento (TRR antes da População de Retratamento).

Tabela 73: Número de Indivíduos com uma Redução da Resposta na Classificação da Gravidade da Celulite em Pelo menos nível 1 Antes do Retratamento (TRR antes da População de Retratamento) Categoria I Categoria II Geral

Número de Número de Número de Número de Número de Número de Indivíduos Indivíduos Indivíduos Indivíduos Indivíduos Indivíduos Visitas Não Não Não com com com Retratados Retratados Retratados Redução na Redução na Redução na Antes da Antes da Antes da Resposta Resposta Resposta Visita 5 Visita Visita n (%) n (%) n (%) n n n Total de Indivíduosb Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão Antecipada 84 10 (11,9) 19 3 (15,8) 103 13 (12,6) Redução em CR-PCSS de Nível 1

Dia 180/Rescisão Antecipada 84 25 (29,8) 19 11 (57,9) 103 36 (35,0) Redução em PR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão 84 28 (33,3) 19 11 (57,9) 103 39 (37,9) Antecipada Respondeu Somente com a Nádega Esquerda

Redução Composta de Nível 1no Dia 180/Rescisão Antecipada 23 7 (30,4) 6 1 (16,7) 29 8 (27,6) Redução em CR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 23 13 (56,5) 6 4 (66,7) 29 17 (58,6) Redução em PR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão 23 12 (52,2) 6 4 (66,7) 29 16 (55,2) Antecipada Respondeu Somente com a Nádega Direita Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão Antecipada 13 1 (7,7) 6 1 (16,7) 19 2 (10,5) Redução em CR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 13 2 (15,4) 6 4 (66,7) 19 6 (31,6) Redução em PR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão 13 6 (46,2) 6 4 (66,7) 19 10 (52,6) Antecipada

Tabela 74: Número de Nádegas com uma Redução da Resposta na Classificação da Gravidade da Celulite em nível 1 Antes do Retratamento (TRR antes da População de Retratamento) Categoria I Categoria II Categoria III

Número de Número de Número de Número de Número de Número de Nádegas Nádegas Nádegas Não Nádegas Nádegas Não Nádegas Não com Retratadas com Retratadas com Retratadas Redução na Antes da Redução na Antes da Redução na Antes da Resposta Visita Resposta Visita Resposta Visita n (%)5 n n (%) n n (%) n Visitas Total de Nádegasb Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão 132 19 (14,4) 26 6 (23,1) 158 25 (15,8) Antecipada Redução em CR-PCSS de Nível 1

Dia 180/Rescisão Antecipada 132 45 (34,1) 26 15 (57,7) 158 60 (38,0) Redução em PR-PCSS de Nível 1

Dia 180/Rescisão 132 48 (36,4) 26 15 (57,7) 158 63 (39,9) Antecipada

Respondeu Somente com a Nádega Esquerda Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão 23 7 (30,4) 6 1 (16,7) 29 8 (27,6) Antecipada Redução em CR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 23 13 (56,5) 6 4 (66,7) 29 17 (58,6) Redução em PR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão 23 12 (52,2) 6 4 (66,7) 29 16 (55,2) Antecipada Respondeu Somente com a Nádega Direita Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão 13 1 (7,7) 6 1 (16,7) 19 2 (10,5) Antecipada Redução em CR-PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 13 2 (15,4) 6 4 (66,7) 19 6 (31,6) Redução em PR-PCSS de Nível 1

Dia 180/Rescisão 13 6 (46,2) 6 4 (66,7) 19 10 (52,6) Antecipada

Categoria I Categoria II Geral Número de Número de Número de Indivíduos Número de Indivíduos Número de Indivíduos Número de Não Indivíduos Não Indivíduos Não Indivíduos Retratados com Redução Retratados com Redução Retratados com Redução Antes da na Resposta Antes da na Resposta Antes da na Resposta Visita n (%) Visita n (%) Visita n (%) Visitas n n n Respondeu com ambas as Nádegas Nádega Esquerda Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão 48 5 (10,4) 7 2 (28,6) 55 7 (12,7) Antecipada Redução em CR- PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 48 16 (33,3) 7 3 (42,9) 55 19 (34,5) Redução em PR- PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 48 15 (31,3) 7 3 (42,9) 55 18 (32,7) Nádega Direita Redução Composta de Nível 1 no Dia 180/Rescisão 48 6 (12,5) 7 2 (28,6) 55 8 (14,5) Antecipada Redução em CR- PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão Antecipada 48 14 (29,2) 7 4 (57,1) 55 18 (32,7) Redução em PR- PCSS de Nível 1 Dia 180/Rescisão 48 15 (31,3) 7 4 (57,1) 55 19 (34,5) Antecipada a, As percentagens são com base no número de respondentes (indivíduos que tiveram melhora composta no Dia 71/EOS do estudo original) com nádegas não retratadas antes da respectiva visita b, Se um indivíduo teve uma resposta de nível 1 em ambas as nádegas, o indivíduo foi contado somente uma vez.

[00569] Resultados semelhantes foram observados ao considerar as nádegas individualmente. Nos 19 indivíduos da Categoria II descritos acima, havia 26 nádegas no total que tiveram uma resposta composta de pelo menos nível 2 nos estudos originais. Destes, uma redução composta de nível 1 na resposta foi vista em 6 (23,1%) nádegas. Em indivíduos da Categoria I, houve uma redução de resposta de nível 1 em 19 (14,4%) de 132 nádegas. Em geral (Categoria I e Categoria II, 158 nádegas), 15,8% das nádegas tiveram redução de resposta composta de nível 1 no Dia 180.

3. Tempo para Redução da Resposta - CR-PCSS e PR-PCSS

[00570] TRR foi definido como o número de dias a partir do Dia 71/EOS no estudo original até a visita do estudo no ensaio atual, quando uma piora composta da resposta em CR-PCSS e PR-PCSS foi observada pela primeira vez. Nenhum indivíduo teve uma redução na resposta de nível 2, portanto não foi possível calcular um tempo para uma redução na resposta de nível 2. O tempo médio (SD) para uma redução de resposta de nível 1 foi de 187,5 (10,87) dias em indivíduos da Categoria I e de 182,7 (17,47) dias nos indivíduos da Categoria II.

4. Perda Completa de Resposta - CR-PCSS e PR-PCSS

[00571] A perda completa de resposta foi definida como o retorno à linha de base (do estudo original) tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS. Nenhum indivíduo da Categoria II (indivíduos com pelo menos uma resposta composta de nível 2 no estudo original) teve uma perda completa de resposta no Dia 180. Dentre os 84 indivíduos da Categoria I, 4 (4,8%) tiveram uma perda completa de resposta (Tabela 75). Tabela 75: Número de Indivíduos com Perda Completa de Resposta Antes do Retratamento (TRR antes da População de Retratamento) Nádegas Não Retratadas Antes do Número de Indivíduos com Perda Dia 180 Completa de Resposta Categoria do Indivíduo n n (%) Categoria II 19 0 (0,0) Categoria I 84 4 (4,8) Geral 103 4 (3,9)

5. Tempo para Completar a Perda de Resposta antes do Retratamento - CR-PCSS e PR-PCSS

[00572] O tempo para completar a perda de resposta foi definido como o número de dias desde o Dia 71/EOS no estudo original até a visita do estudo no ensaio atual quando a perda completa de resposta foi observada pela primeira vez. Nenhum indivíduo na Categoria II teve uma perda completa de resposta, O tempo médio (SD) para completar a perda de resposta na Categoria I foi de 183,0 (2,83) dias.

6. Gravidade da Celulite - TRR antes da População de Retratamento a. PR-PCSS e CR-PCSS

[00573] Em geral (em indivíduos de Categoria I e Categoria II combinados), a alteração média (SD) no PR-PCSS do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos estudos originais foi de -1,3 (0,64) na nádega esquerda e -1,4 (0,83) na nádega direita. A mudança média (SD) geral no PR-PCSS do Dia 1 nos estudos originais até o Dia 180 foi de -1,0 (0,80) para a nádega esquerda e -1,1 (0,93) para a nádega direita no TRR antes da População de Retratamento.

[00574] Para os indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) no PR-PCSS do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -1,2 (0,60) e - 1,2 (0,80) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 deste estudo foi de - 1,0 (0,77) e -1,1 (0,96) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente.

[00575] Para os indivíduos da Categoria II, a alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de - 1,7 (0,65) e -2,1 (0,62) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 deste estudo foi de - 1,1 (0,94) e -1,2 (0,79) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente.

[00576] A alteração média (SD) geral (indivíduos da Categoria I e da Categoria II combinados) no CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71/EOS nos estudos originais foi de -1,2 (0,57) para a nádega esquerda e -1,1

(0,63) para a nádega direita. A alteração média geral (SD) no CR-PCSS a partir do Dia 1 nos estudos originais até o Dia 180 foi de -0,8 (0,78) para a nádega esquerda e -0,9 (0,78) para a nádega direita.

[00577] Para os indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) no CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -1,1 (0,46) e -0,9 (0,54) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média (SD) no CR-PCSS a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 deste estudo foi de - 0,7 (0,74) e -0,9 (0,78) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente.

[00578] Para os indivíduos da Categoria II, a alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de - 1,8 (0,63) e -1,8 (0,37) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 deste estudo foi de - 1,2 (0,85) e -1,2 (0,76) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente.

[00579] Esses resultados suportam uma persistência de resposta nesta população. b. PR-CIS

[00580] Resultados semelhantes foram vistos para PR-CIS total, abreviada e as pontuações de item e suportam uma persistência de resposta nesta população.

7. Persistência do Efeito do Tratamento a. Persistência do Efeito do Tratamento - CR-PCSS e PR-PCSS - TRR antes da População de Retratamento

[00581] A Tabela 76 exibe a alteração em CR-PCSS e PR-PCSS para TRR antes da População de Retratamento a partir do Dia 71 nos estudos originais (Estudos 302/303) ao Dia 180 neste estudo. Tabela 76: Alteração a partir do Dia 71/EOS nos Estudos 302/303 em PR-PCSS e CR-PCSS no Dia 180/Visita de Rescisão Antecipada (TRR antes da População de Retratamento)

Categoria I Categoria II Geral (N = 103) (N = 84) (N = 19) Nádega Nádega Nádega Nádega Nádega Nádega Escala de Gravidade da Celulite Esquerda Direita Esquerda Direita Esquerda Direita Classificação da Gravidade da Celulite Estatísticaa PR-PCSS Alteração a partir do Dia 71/EOS nos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada N 84 84 19 19 103 103 -4 n (%) 0 0 0 0 0 0 -3 n (%) 0 0 0 0 0 0 -2 n (%) 0 1 (1,2) 0 0 0 1 (1,0) -1 n (%) 12 (14,3) 17 (20,2) 1 (5,3) 0 13 (12,6) 17 0 n (%) 42 (50,0) 38 (45,2) 8 (42,1) 7 (36,8) 50 (48,5) (16,5) 45 +1 n (%) 30 (35,7) 24 (28,6) 7 (36,8) 8 (42,1) 37 (35,9) (43,7) 32 +2 n (%) 0 4 (4,8) 3 (15,8) 4 (21,1) 3 (2,9) 8(31,1) (7,8) +3 n (%) 0 0 0 0 0 0 +4 n (%) 0 0 0 0 0 0 Média 0,2 0,2 0,6 0,8 0,3 0,3 SD 0,68 0,84 0,83 0,76 0,72 0,87 CR-PCSS Alteração a partir do Dia 71/EOS nos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão N 84 84 19 19 103 103 Antecipada -4 n (%) 0 0 0 0 0 0 -3 n (%) 0 0 0 0 0 0 -2 n (%) 0 0 0 0 0 0 -1 n (%) 7 (8,3) 18 (21,4) 2 (10,5) 0 9 (8,7) 18 0 n (%) 44 (52,4) 46 (54,8) 8 (42,1) 8 (42,1) 52 (50,5) (17,5) 54 +1 n (%) 28 (33,3) 18 (21,4) 6 (31,6) 10 34 (33,0) (52,4) 28 +2 n (%) 5 (6,0) 1 (1,2) 2 (10,5) (52,6) 0 7 (6,8) 1(27,2) (1,0) +3 n (%) 0 1 (1,2) 1 (5,3) 1 (5,3) 1 (1,0o) 2(1,9) +4 n (%) 0 0 0 0 0 0 Média 0,4 0,1 0,6 0,7 0,4 0,2 SD 0,72 0,77 1,02 0,75 0,79 0,80 a As porcentagens são com base no número de indivíduos com nádegas não retratadas antes da respectiva consulta.

[00582] Em indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) de PR-PCSS a partir do Dia 71 nos estudos originais para o Dia 180 neste estudo foi de 0,2 (0,68) na nádega esquerda e 0,2 (0,84) na nádega direita. Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de 0,4 (0,72) na nádega esquerda e 0,1 (0,77) na nádega direita.

[00583] Para indivíduos da Categoria II, a alteração média (SD) de PR-PCSS a partir do Dia 71 nos estudos originais para o Dia 180 neste estudo foi de 0,6 (0,83) na nádega esquerda e 0,8 (0,76) na nádega direita.

Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,6 (1,02) na nádega esquerda e 0,7 (0,75) na nádega direita.

[00584] Na população TRR geral, a alteração média (SD) no PR- PCSS do Dia 71 nos estudos originais até o Dia 180 neste estudo foi de 0,3 (0,72) na nádega esquerda e 0,3 (0,87) na nádega direita. Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de 0,4 (0,79) na nádega esquerda e 0,2 (0,80) na nádega direita.

[00585] As pequenas diferenças nas pontuações gerais de PR- PCSS e CR-PCSS da População TRR entre o Dia 71 e o Dia 180 indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 nos estudos originais em indivíduos tratados com CCH. Esses resultados também indicam que o efeito médio do tratamento foi virtualmente idêntico entre as nádegas direita e esquerda. b. Persistência do Efeito do Tratamento - PR-CIS - TRR antes da População de Retratamento

[00586] A Tabela 77 exibe a alteração no PR-CIS total, abreviada e pontuações de item a partir do Dia 71/EOS para os Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada neste estudo no TRR antes da População de Retratamento. Tabela 77: Alteração a partir do Dia 71/Final Estudo nos Estudos 302/303, Estudos em PR-CIS Total, Abreviado e Pontuações de Itens Antes do Retratamento (TRR antes da População de Retratamento) Categoria I Categoria II Geral PR-CISa Estatística (N = 84) (N = 19) (N = 103) Pontuação total Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,6 2,5 0,0 SD 11,20 16,04 12,21 Mediana 0,0 -1,0 0,0 min -50 -21 -50 max 22 43 43 Pontuação abreviada

Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,5 2,8 0,1 SD 9,12 12,32 9,80 Mediana 0,0 2,0 0,0 min -40 -14 -40 max 18 33 33 Questão 1: Impacto de felicidade Alteração a partir do Dia 71 dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média 0,6 1,4 0,7 SD 2,31 2,39 2,34 Mediana 0,0 1,0 1,0 min -6 -4 -6 max 8 5 8 Questão 2: Impacto de incômodo Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,4 0,6 -0,2 SD 2,75 3,90 3,00 Mediana 0,0 2,0 0,0 min -10 -6 -10 max 8 8 8 Questão 3: Impacto de constrangimento Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,4 0,6 -0,2 SD 2,67 3,37 2,82 Mediana 0,0 0,0 0,0 min -10 -4 -10 max 8 8 8 Questão 4: Impacto de vergonha Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,2 0,6 -0,1 SD 2,71 3,44 2,86 Mediana 0,0 1,0 0,0 min -10 -6 -10 max 5 8 8 Questão 5: Impacto de Aparência mais velha Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 ao Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,1 -0,3 -0,1 SD 2,80 4,12 3,06 Mediana 0,0 0,0 0,0 min -10 -9 -10 max 6 10 10 Questão 6: Impacto da Preocupação com a Forma Corporal Alteração a partir do Dia 71/EOS dos Estudos 302/303 para o Dia 180/Rescisão Antecipada n 84 19 103 Média -0,0 -0,4 -0,1 SD 2,79 2,78 2,78 Mediana 0,0 -1,0 0,0 min -10 -5 -10 max 9 4 9 a Uma alteração mais negativa na pontuação indica uma maior redução de impacto da celulite na vida do indivíduo.

[00587] No TRR antes da População de Retratamento geral (Categoria I e Categoria II combinadas), a alteração média (DP) a partir do

Dia 71 dos estudos originais ao Dia 180 deste estudo na pontuação do PR- CIS Total foi de 0,0 (12,21). Para os indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 para o Dia 180 foi de -0,6 (11,20) e a alteração média a partir do Dia 71 para o Dia 180 para os indivíduos da Categoria II foi de 2,5 (16,04).

[00588] A alteração média (SD) a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo na pontuação de PR-CIS Abreviada foi de 0,1 (9,80). Para os indivíduos da Categoria I, alteração média (SD) a partir do Dia 71 para o Dia 180 foi de -0,5 (9,12) e a alteração média a partir do Dia 71 para o Dia 180 para os indivíduos da Categoria II foi de 2,8 (12,32).

[00589] Pequenas alterações médias (SD) semelhantes foram vistas nas pontuações de itens individuais gerais (Felicidade com aparência de celulite: 0,7; Incômodo: -0,2; Constrangimento: -0,2; Vergonha: -0,1; Aparência mais velha: -0,1; Preocupação com a forma corporal: -0,1).

[00590] As pequenas diferenças nas pontuações do PR-CIS da População TRR geral entre o Dia 71 e o Dia 180 suportam os resultados de PR-PCSS e CR-PCSS e indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 dos estudos originais em indivíduos tratados com CCH.

[00591] PR-CIS, S-GAIS, Satisfação dos indivíduos com Tratamento de Celulite e Respondentes SSRS - TRR antes da População de Retratamento.

[00592] No Dia 180, os indivíduos na Categoria I e Categoria II no TRR antes da População de Retratamento exibiram PR-CIS (total, abreviada e pontuações de item), S-GAIS, Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite e respostas SSRS. Uma proporção maior de indivíduos da Categoria II era respondente do que os indivíduos da Categoria I.

CONCLUSÕES DE EFICÁCIA

A. População Observacional do Dia 180

[00593] A População Observacional do Dia 180 consistia em 479 indivíduos que completaram a Visita do Dia 180 (incluindo avaliações da celulite) e não estavam cegos no momento do corte de dados (1 de abril de 2019). A visita do Dia 180 ocorreu aproximadamente 180 dias após a conclusão dos estudos originais e aproximadamente 251 dias após a primeira dose da droga do estudo nos estudos originais.

[00594] As alterações médias em CR-PCSS, PR-PCSS e PR-CIS a partir do Dia 1 ao Dia 71 (no estudo original) e a partir do Dia 1 no estudo original até o Dia 180 neste estudo indicam que os indivíduos na População Observacional do Dia 180 são representativos da população dos estudos originais. A diferença entre os indivíduos tratados com CCH e os indivíduos tratados com placebo no Dia 180 é consistente com os resultados vistos nos estudos originais. • Nos 241 indivíduos que foram tratados com CCH nos estudos originais, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais em PR-PCSS foi -0,8 (0,85) e -0,9 (0,92) na nádega esquerda e direita, respectivamente, e as alterações médias (SD) no PR-PCSS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -0,7 (0,87) e - 0,7 (0,92) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. Nos indivíduos tratados com placebo nos estudos originais, a alteração média (SD) de PR- PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 foi de -0,5 (0,75) e -0,5 (0,79) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média a partir do Dia 1 nos estudos originais até o Dia 180 neste estudo no PR-PCSS foi de - 0,3 (0,71) e -0,4 (0,80) na nádega esquerda e direita, respectivamente. • Em indivíduos que foram tratados com CCH nos estudos originais, a alteração média (SD) de CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais foi de -0,8 (0,79) e -0,7 (0,76) para as nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média (SD) em CR-PCSS a partir do Dia 1 dos estudos originais ao Dia 180 deste estudo foi de -0,6

(0,82) para a nádega esquerda e -0,6 (0,83) para a nádega direita. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) de CR-PCSS a partir do Dia 1 ao Dia 71 foi de -0,3 (0,64) e -0,3 (0,70) nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. A alteração média a partir do Dia 1 no estudo original para o Dia 180 neste estudo em CR-PCSS foi -0,4 (0,72) e - 0,4 (0,72) na nádega esquerda e direita, respectivamente. • Em indivíduos que foram tratados com CCH nos estudos originais e completaram as avaliações do Dia 180 de PR-CIS neste estudo, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais na Pontuação Total do PR-CIS foi de -11,8 (11,77). Nestes mesmos indivíduos, a alteração média (SD) na Pontuação Total do PR-CIS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -10,5 (11,76). Em indivíduos tratados com placebo nos estudos originais, a alteração média (SD) a partir do Dia 1 ao Dia 71 nos estudos originais na Pontuação Total do PR-CIS foi de -6,5 (12,12). Nestes mesmos indivíduos, a alteração média (SD) na Pontuação Total do PR-CIS a partir do Dia 1 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de -5,4 (11,30). Alterações semelhantes foram vistas no PR-CIS Abreviado e nas pontuações de itens.

[00595] As pequenas diferenças em PR-PCSS, CR-PCSS e PR- CIS entre o Dia 71 do estudo original e Dia 180 neste estudo indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 dos estudos original em indivíduos tratados com CCH. Além disso, a proporção de respondentes PR-CIS permaneceu consistente a partir do Dia 71 ao Dia

180. O resultado para PR-PCSS e CR-PCSS também indicam que o efeito médio do tratamento foi virtualmente idêntico entre as nádegas direita e esquerda. • Para PR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,2 (0,81) e 0,2 (0,86) na nádega esquerda e direita, respectivamente. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média

(SD) no PR-PCSS foi de 0,1 (0,76) e 0,0 (0,84) na nádega esquerda e direita, respectivamente. • Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,2 (0,78) e 0,1 (0,76) na nádega esquerda e direita, respectivamente. Em indivíduos tratados com placebo, a alteração média (SD) em CR-PCSS foi de -0,1 (0,74) e -0,1 (0,76) na nádega esquerda e direita, respectivamente. • Na População Observacional do Dia 180, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo na pontuação de PR-CIS Total foi de 1,2 (11,32) para os indivíduos tratados com CCH e 1,0 (10,14) para os indivíduos tratados com placebo. Para pontuação de PR-CIS Abreviada, a alteração média a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo foi 1,0 (9,45) e 0,4 (8,98) para os indivíduos tratados com CCH e placebo, respectivamente. Pequenas alterações médias (SD) semelhantes foram vistas nas pontuações de itens individuais.

[00596] A proporção de S-GAIS, Satisfação do Indivíduo com Tratamento de Celulite e respondentes SSRS no Dia 180 diminuiu tanto nos indivíduos tratados com CCH quanto nos tratados com placebo nos estudos originais. Contudo, a taxa de resposta em indivíduos tratados com CCH permaneceu mais alta do que a de indivíduos tratados com placebo no Dia 180 neste estudo. • No Dia 71 nos estudos originais, 19,1% dos indivíduos tratados com CCH eram respondentes S-GAIS de nível 2 na nádega esquerda e 21,6% eram respondentes de nível 2 na nádega direita em comparação com 6,3% (nádega esquerda) e 7,1% (nádega direita) de indivíduos tratados com placebo. No Dia 180 deste estudo 304, 12,4% e 11,6% dos indivíduos tratados com CCH eram respondentes S-GAIS de nível 2 na nádega esquerda e direita, respectivamente. Para os indivíduos tratados com placebo, a porcentagem de indivíduos que eram respondentes S-GAIS de nível 2 no Dia 180 foi de 3,8% para cada uma das nádegas direita e esquerda. • No Dia 71 nos estudos originais, 70,5% dos indivíduos tratados com CCH foram respondentes S-GAIS de nível 1 em cada uma das nádegas esquerda e direita em comparação com 37,4% (nádega esquerda) e 37,0% (nádega direita) dos indivíduos tratados com placebo.

No Dia 180, 53,5% e 51,0% dos indivíduos tratados com CCH eram respondentes S- GAIS de nível 1 nas nádegas esquerda e direita, respectivamente.

Para os indivíduos tratados com placebo, a porcentagem de indivíduos que eram respondentes S-GAIS de nível 1 no Dia 180 foi de 27,8% e 28,3% nas nádegas esquerda e direita, respectivamente. • No Dia 71, 50,6% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais estavam Satisfeitos ou Muito Satisfeitos com o tratamento da celulite em comparação com 22,5% dos indivíduos tratados com placebo na População Observacional do Dia 180. No Dia 180, 34,4% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais estavam Satisfeitos ou Muito Satisfeitos com o tratamento da celulite em comparação com 16,5% dos indivíduos tratados com placebo (Figura 27). • No Dia 71 nos estudos originais, 24,7% dos indivíduos tratados com CCH eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 11,4% dos indivíduos tratados com placebo na População Observacional do Dia 180. No Dia 180, 14,9% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 8,9% dos indivíduos tratados com placebo. • No Dia 71 nos estudos originais, 51,5% dos indivíduos tratados com CCH eram respondentes de SSRS de nível 1 em comparação com 21,2% dos indivíduos tratados com placebo na População Observacional do Dia 180. No Dia 180, 36,9% dos indivíduos tratados com CCH nos estudos originais eram respondentes de SSRS de nível 2 em comparação com 17,3% dos indivíduos tratados com placebo. B. TRR antes da População de Retratamento

[00597] A TRR antes da População de Retratamento consiste em 103 indivíduos que foram tratados com CCH e tiveram respostas compostas de nível 1 ou 2 em CR-PCSS e PR-PCSS nos estudos originais e que consentiram em continuar na Fase Aberta do estudo atual. Dezenove desses indivíduos foram classificados como Categoria II e 84 foram classificados como Categoria I.

[00598] Nenhum indivíduo na Categoria II e poucos indivíduos na Categoria I tiveram uma redução na resposta composta ou perda completa de resposta medida por PR-PCSS e CR-PCSS. O tempo para a redução da resposta e o tempo para a redução completa da resposta refletiram a duração do estudo a partir do corte de dados. O tempo para a redução da resposta e o tempo para a redução completa da resposta são fornecidos abaixo, mas dados adicionais de longo prazo são necessários para tirar conclusões desses dados sobre a duração da resposta. • Houve 19 indivíduos neste estudo que tiveram pelo menos uma melhora composta de nível 2 na gravidade da celulite em pelo menos 1 nádega no estudo original (Categoria II). Nenhum desses indivíduos teve uma redução composta de nível 2 na gravidade da celulite no Dia 180 neste estudo. Ao considerar o CR-PCSS e PR-PCSS individualmente em indivíduos da Categoria II, 1 indivíduo (5,3%) teve pelo menos uma redução de nível 2 na resposta no CR-PCSS, e 4 indivíduos (21,1%) tiveram pelo menos uma redução de nível 2 de resposta em PR-PCSS no Dia 180. Resultados semelhantes foram observados ao considerar as nádegas individualmente. • Havia 19 indivíduos da Categoria II no TRR antes da População de Retratamento. Destes, 3 (15,8%) tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta antes do retratamento. Entre 84 indivíduos da Categoria I na TRR antes da População de Retratamento, 10 (11,9%) tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta antes do retratamento. Em geral (Categoria I e Categoria II combinadas, 103 indivíduos), 13 (12,6%) indivíduos tiveram uma redução composta de nível 1 na resposta no Dia 180. • A perda completa de resposta foi definida como o retorno à linha de base (no estudo original) tanto nas classificações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS. Nenhum indivíduo da Categoria II (indivíduos com pelo menos uma resposta composta de nível 2 no estudo original) teve uma perda completa de resposta no Dia 180. Dentre os 84 indivíduos da Categoria I, 4 (4,8%) tiveram uma perda completa de resposta. • TRR foi definido como o número de dias a partir do Dia 71/EOS no estudo original até a visita do estudo no ensaio atual, quando uma piora composta da resposta em CR-PCSS e PR-PCSS foi observada pela primeira vez. Nenhum indivíduo teve uma redução na resposta de nível 2, portanto não foi possível calcular um tempo para uma redução na resposta de nível 2. O tempo médio (SD) para uma redução de resposta de nível 1 foi de 187,5 (10,87) dias em indivíduos da Categoria I e de 182,7 (17,47) dias nos indivíduos da Categoria II. • O tempo para completar a perda de resposta foi definido como o número de dias desde o Dia 71/EOS no estudo original até a visita do estudo no ensaio atual quando a perda completa de resposta foi observada pela primeira vez. Nenhum indivíduo na Categoria II teve uma perda completa de resposta. O tempo médio (SD) para completar a perda de resposta na Categoria I foi de 183,0 (2,83) dias.

[00599] As pequenas diferenças gerais em PR-PCSS, CR-PCSS e PR-CIS na TRR antes da População de Tratamento entre o Dia 71 e o Dia 180 indicam uma persistência do efeito do tratamento até 6 meses após o Dia 71 nos estudos originais em indivíduos tratados com CCH. Esses resultados também indicam que o efeito médio do tratamento foi virtualmente idêntico entre as nádegas direita e esquerda. • Em indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) de PR- PCSS a partir do Dia 71 nos estudos originais para o Dia 180 neste estudo foi de 0,2 (0,68) na nádega esquerda e 0,2 (0,84) na nádega direita. Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo foi de 0,4 (0,72) na nádega esquerda e 0,1 (0,77) na nádega direita. • Para indivíduos da Categoria II, a alteração média (SD) de PR- PCSS a partir do Dia 71 nos estudos originais para o Dia 180 neste estudo foi de 0,6 (0,83) na nádega esquerda e 0,8 (0,76) na nádega direita. Para CR-PCSS, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 nos estudos originais ao Dia 180 neste estudo em indivíduos tratados com CCH foi de 0,6 (1,02) na nádega esquerda e 0,7 (0,75) na nádega direita. • A alteração média (SD) a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo na pontuação de PR-CIS Total foi de 0,0 (12,21). Para os indivíduos da Categoria I, a alteração média (SD) a partir do Dia 71 para o Dia 180 foi de -0,6 (11,20) e a alteração média a partir do Dia 71 para o Dia 180 para os indivíduos da Categoria II foi de 2,5 (16,04). • A alteração média (SD) a partir do Dia 71 dos estudos originais para o Dia 180 deste estudo na pontuação de PR-CIS Abreviada foi de 0,1 (9,80). Para os indivíduos da Categoria I a alteração média (SD) a partir do Dia 71 para o Dia 180 foi de -0,5 (9,12) e a alteração média a partir do Dia 71 para o Dia 180 para os indivíduos da Categoria foi de 2,8 (12,32). • Pequenas alterações médias (SD) semelhantes foram vistas nas pontuações de itens individuais gerais (Felicidade com aparência de celulite: 0,7; Incômodo: -0,2; Constrangimento: -0,2; Vergonha: -0,1; Aparência mais velha: -0,1; Preocupação com a forma corporal: -0,1).

[00600] No Dia 180, a proporção de indivíduos na Categoria I e Categoria II no TRR antes da População de Retratamento que eram PR-

CIS (total, abreviada e pontuações de item), S-GAIS, Satisfação do Indivíduo com Tratamento para Celulite e respondentes SSRS foi semelhante àquele visto na População Observacional do Dia 180 e nos estudos originais. C. População OLR

[00601] Um número insuficiente de indivíduos completou o retratamento no momento do corte de dados para avaliar a eficácia na População de Retratamento Aberto.

SEGURANÇA

[00602] O perfil de segurança de CCH foi consistente com os resultados de segurança dos estudos anteriores. O perfil de AE durante o Período Observacional do Dia 180 para indivíduos tratados com CCH (nos estudos originais) é muito semelhante ao dos indivíduos tratados com placebo nos estudos originais, sugerindo que não há preocupações de segurança de longo prazo para CCH a partir do corte de dados. Houve pouca diferença na frequência ou tipo de AEs entre as diferentes categorias de indivíduos (I, II ou III). Nada significativo foi verificado em relação à imunogenicidade, o que foi consistente com estudos anteriores.

CONCLUSÃO

[00603] Os resultados deste estudo a partir do corte de dados (1 de abril de 2019) indicam uma persistência do efeito do tratamento para indivíduos tratados com CCH para EFP nas nádegas de pelo menos 180 dias (6 meses) após o Dia 71 da Fase 3 de estudos originais duplo-cego quando medidos por PR-PCSS, CR-PCSS e PR-CIS (Figura 26). Nenhum indivíduo teve uma redução de nível 2 na resposta composta neste estudo, e nenhum indivíduo que foi respondente composto de nível 2 no estudo original teve uma perda completa de resposta no Dia 180. Não houve indicação de preocupações de segurança a longo prazo para indivíduos tratados com CCH nos estudos originais. Para os 30 indivíduos que foram retratados com CCH neste estudo a partir do corte de dados (1 de abril de

2019), o perfil de AE é semelhante àquele visto em outros ensaios clínicos de CCH na celulite. EXEMPLO 6 - ESTUDO DE EXTENSÃO ABERTO DE FASE 2 DE CCH NO TRATAMENTO DE CELULITE (ESTUDO 202)

[00604] O Exemplo atual (Estudo 202) é um estudo de extensão aberto de Fase 2 de um estudo anterior (Estudo 201), que avaliou a segurança e a eficácia da CCH em mulheres adultas. No exemplo atual, a segurança de longo prazo foi avaliada em indivíduos elegíveis tratados no Estudo 201. Além disso, a segurança, eficácia e imunogenicidade mediante a reexposição a 0,84 mg de CCH por área de tratamento foram avaliadas em indivíduos que se inscreveram e que receberam seu segundo curso de tratamento. Neste estudo, foi avaliada a segurança da reexposição, ou em uma área de tratamento previamente tratada (denominado retratamento) ou em uma área de tratamento não exposta (denominada redosagem) em indivíduos que receberam CCH anteriormente. Finalmente, a persistência do efeito foi avaliada em indivíduos tratados com CCH do estudo anterior (Estudo 201, avaliações duplo-cegas/aberta) e a partir deste estudo atual (Estudo 202, aberto). Para indivíduos tratados com CCH no estudo anterior (Estudo 201), a área de tratamento tratada foi avaliada por até aproximadamente 2 anos quanto à persistência do efeito em longo prazo. Para indivíduos reexpostos (retratados ou redosados), as áreas de tratamento foram avaliadas por até aproximadamente 1 ano, A menos que especificado de outra forma neste exemplo, "Dias" conforme usado neste estudo 202 foram relativos à dose inicial (Dia 1) no estudo 201. No estudo 201, 0,84 mg de CCH ou placebo foi administrado a uma área de tratamento (1 nádega ou 1 coxa) por paciente.

[00605] Mais especificamente, o estudo atual avaliou a segurança de longo prazo da CCH em intervalos programados ao longo de 1 ano (até 2 anos) em todos os indivíduos com celulite que escolheram por se inscrever neste estudo, independentemente de sua decisão de receber tratamento (retratamento ou redosagem) neste estudo. Após a revelação dos indivíduos de tratamento recebidos no estudo anterior (Estudo 201), os indivíduos elegíveis poderiam escolher por receber o tratamento com CCH. Se o indivíduo recebeu CCH no Estudo 201 e as classificações de gravidade da celulite da área tratada tinham voltado ou eram mais altas (indicando pior gravidade da celulite) do que as classificações da linha de base do Estudo 201, o indivíduo poderia escolher ter a área tratada anteriormente retratada com CCH (denominado retratamento) em um Curso de Tratamento, Se o indivíduo recebeu CCH no Estudo 201, o indivíduo poderia escolher por tratar uma área de qualificação diferente da área tratada com CCH no Estudo 201 (denominado redosagem). Os indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 tiveram a opção de receber 2 cursos de tratamento (um curso consistiu em 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo) de CCH neste estudo. Cada curso de tratamento compreendeu 0,84 mg de CCH administrado como 12 injeções subcutâneas por área de tratamento por até 3 sessões na mesma área de tratamento de qualificação ou diferente das nádegas ou coxas. O Curso de Tratamento 2 compreendeu indivíduos que foram retratados ou redosados.

[00606] Os indivíduos do Estudo 201 que optaram por não receber nenhum tratamento (indivíduos apenas de observação, Fase de Observação) foram acompanhados para avaliações de segurança e gravidade da celulite em intervalos de 3 meses a partir do Dia 1 no estudo 201 por até 2 anos. A persistência da resposta foi avaliada por 2 anos em indivíduos que receberam CCH no Estudo 201 e mostraram pelo menos uma melhora composta no PR-PCSS/CR-PCSS de nível 1 na gravidade da celulite (Fase de Durabilidade de Longo prazo em indivíduos tratados duplo-cegos). A durabilidade da resposta foi definida como indivíduos que eram respondentes de CR-PCSS e PR-PCSS e mantiveram esta resposta (ou seja, falta de perda completa, não retornou à linha de base ou piorou) em uma área tratada com CCH. Os indivíduos que receberam tratamento neste estudo continuaram a ser observados no Dia 71 após a primeira exposição à CCH neste estudo e, então, em intervalos de 3 meses após a primeira exposição à CCH em cada área tratada neste estudo por 1 ano.

[00607] Antes do retratamento ou redosagem, avaliações independentes por indivíduos e investigadores foram realizadas em cada uma das 4 áreas de tratamento do indivíduo (ou seja, nádega esquerda, nádega direita, coxa posterolateral esquerda e coxa posterolateral direita) usando o PR-PCSS, CR-PCSS e Hexsel CSS para avaliar a gravidade da celulite na triagem. A. Projeto e Plano Geral do Estudo

[00608] Após a conclusão das avaliações de segurança e celulite no Dia 71 do Estudo 201, os indivíduos foram questionados se desejavam continuar na extensão aberta do estudo duplo-cego (Triagem A). No momento da entrada no estudo atual, os indivíduos e investigadores não tinham conhecimento da identidade da droga do estudo que o indivíduo recebeu no Estudo 201. Até que a droga do estudo cego do Estudo 201 tenha sido revelado, os indivíduos foram submetidos a visitas apenas de observação em intervalos de 3 meses ± 7 dias (em relação à dose inicial no Estudo 201), onde tanto as avaliações de segurança quanto de gravidade da celulite da área de tratamento tratada foram conduzidas em uma maneira duplo-cega (Figura 28).

[00609] Após a revelação do tratamento que eles receberam no Estudo 201, os indivíduos elegíveis poderiam escolher por receber o tratamento com CCH. Se os indivíduos optassem por não receber tratamento, eles eram colocados na População de Observação e observados por até 2 anos. Até 14 dias antes da iniciação do tratamento com CCH na consulta de tratamento aberto no Dia 1, uma avaliação de triagem (Triagem B) foi conduzida para determinar se os critérios de inclusão e exclusão especificados foram atendidos e para determinar as áreas de tratamento, se houvessem, que se qualificaram para tratamento por retratamento, redosagem ou um primeiro tratamento. Os indivíduos que receberam CCH no Estudo 201 tiveram a opção de receber um curso de tratamento na mesma ou em uma área de tratamento de qualificação diferente. Os indivíduos que receberam placebo no estudo 201 tiveram a opção de receber 2 cursos de tratamento de CCH neste estudo. Cada curso de tratamento compreendeu até 3 sessões cada, na mesma ou em diferentes áreas de tratamento de qualificação. Após pelo menos 28 dias após o final do primeiro curso de tratamento (por exemplo, a visita de triagem B do segundo curso de tratamento pode ser realizada no Dia 71 após o tratamento da primeira área de tratamento), a área de tratamento selecionada pode ser retratada ou redosada.

[00610] Os indivíduos que escolheram por não receber tratamentos de CCH adicionais (indivíduos apenas de observação) continuaram a ser acompanhados para avaliações de segurança e gravidade da celulite em intervalos de 3 meses até o mês 12 ou além. A durabilidade do tratamento foi avaliada por até 2 anos.

[00611] Durante a Triagem B, foram tiradas fotografias de cada uma das 4 áreas de tratamento do indivíduo (quadrantes) (ou seja, nádega esquerda, nádega direita, coxa posterolateral esquerda e coxa posterolateral direita). Os indivíduos receberam instruções para o uso do PR-PCSS e, subsequentemente, usaram a escala para avaliar a gravidade de sua celulite em cada uma das 4 áreas de tratamento (quadrantes), comparando imagens digitais de cada uma de suas áreas de tratamento (quadrantes) exibidas em monitores de computador padronizados com o instrumento PR-PCSS. Esta autoavaliação independente ocorreu em um ambiente privado para minimizar qualquer parcialidade em potencial do pessoal do local. O investigador então avaliou as 4 áreas de tratamento do indivíduo (quadrantes) ao vivo em tempo real usando o CR-PCSS. O investigador avaliou as 4 áreas de tratamento (quadrantes) usando a Escala de Severidade de Celulite Hexsel (CSS). Dentre os indivíduos exigiu-se ter pelo menos 1 quadrante que atendesse aos seguintes critérios para inclusão na Fase de Tratamento do estudo: • uma pontuação de 3 ou 4 (moderada ou grave), conforme relatado pelo indivíduo (PR-PCSS), e • uma pontuação de 3 ou 4 (moderada ou grave), conforme relatado pelo investigador (CR-PCSS), e • uma pontuação Hexsel CSS não superior a 13.

[00612] Os indivíduos foram agrupados para análise nas seguintes populações: • A População de Observação incluiu todos os indivíduos que transferiram a partir do Estudo 201. Após a revelação, aqueles que optam por não ser reexpostos permanecem na População de Observação. • A População de Segurança incluiu todos os indivíduos que receberam pelo menos 1 dose de CCH neste estudo. • A População de Eficácia incluiu todos os indivíduos de segurança que tiveram uma avaliação da linha de base e pelo menos uma avaliação após a linha de base tanto em CR-PCSS quanto em PR-PCSS na área de tratamento selecionada para o tratamento no estudo atual. • A População de Durabilidade Geral foi definida como todos os respondentes ativos que tiveram tanto as avaliações de CR-PCSS quanto de PR-PCSS no Dia 1 e no Dia 71 de um curso de tratamento e 180 dias ou além do Dia 1. Os respondentes ativos foram indivíduos tratados com CCH com melhora de pelo menos nível 1 no Dia 71 de um curso de tratamento em cada escala (CR-PCSS e PR-PCSS) a partir da linha de base. - A População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Duplo-cegos foi definida como todos os indivíduos na População de Durabilidade Geral que mostraram uma melhora no Dia 71 de pelo menos nível 1 em cada escala (CR-PCSS e PR-PCSS) a partir da linha de base para o tratamento área tratada com CCH no estudo duplo-cego (Estudo 201). - A População de Durabilidade para Indivíduos Aberto foi definida como todos os indivíduos na População de Durabilidade Geral que mostraram uma melhora no Dia 71 de pelo menos nível 1 tanto em CR- PCSS quanto em PR-PCSS a partir da linha de base para a área de tratamento tratada com CCH no estudo aberto atual (Estudo 202).

[00613] As 2 fases seguintes foram resumidas na análise estatística do estudo: • Fase de Observação: definida como o período de tempo desde a triagem A até a primeira data de tratamento da mesma área de tratamento no estudo atual (Estudo 202), ou o final do Estudo 202 se não houver tratamento recebido para a mesma área de tratamento no Estudo

202. A Fase de Observação foi definida dentro de cada área de tratamento tratada, a menos que o resumo fosse apenas para o nível do indivíduo e não pudesse ser diferenciado pela área de tratamento tratada (ou seja, disposição, AE). Para resumos de nível de indivíduo, a Fase de Observação foi definida como o período de tempo a partir da Triagem A à primeira data de tratamento no Estudo 202 ou o final do Estudo 202 se nenhum tratamento foi recebido no Estudo 202. • Fase de tratamento: definida como o período de tempo desde a primeira data de tratamento de uma área de tratamento selecionada no Estudo 202 até o final do Estudo 202. A Fase de Tratamento foi definida dentro de cada área de tratamento tratada, a menos que o resumo fosse apenas para o nível do indivíduo e não pudesse ser diferenciado pela área de tratamento tratada (ou seja, disposição, AEs). Para resumos de nível de indivíduo, a Fase de Tratamento foi definida como o período de tempo a partir da primeira data de tratamento no Estudo 202 até o final do Estudo

202. Todos os dados após o Dia 1 do primeiro tratamento com CCH no Estudo 202 foram incluídos. Portanto, os dados da Fase de Observação foram incluídos na Fase de Tratamento.

[00614] Um indivíduo foi excluído do tratamento no estudo (mas não das avaliações de observação) se ela usou qualquer um dos seguintes para o tratamento de EFP nas pernas ou nádegas dentro dos cronogramas identificados abaixo ou pretendia usar qualquer um dos seguintes a qualquer momento durante o curso do estudo: (a) lipoaspiração no lado do corpo selecionado para tratamento durante o período de 12 meses antes da injeção de CCH, (b) injeções (por exemplo, mesoterapia); tratamentos de dispositivos de radiofrequência; tratamento a laser; ou cirurgia (incluindo subcisão e/ou subcisão motorizada) dentro da área de tratamento selecionada durante o período de 12 meses antes da injeção de CCH,(c) Endermologie® ou tratamentos semelhantes dentro da área de tratamento selecionada durante o período de 6 meses antes da injeção de CCH, (d) terapia de massagem dentro da área de tratamento selecionada durante o período de 3 meses antes da injeção de CCH, e (e) cremes (por exemplo, Celluvera™, TriEastin™) para prevenir ou mitigar EFP dentro da área de tratamento selecionada durante o período de 2 semanas antes da injeção de CCH.

[00615] O investigador revisou suas avaliações e a avaliação do indivíduo para determinar quais áreas de tratamento (quadrantes), se houver, eram elegíveis. O quadrante elegível selecionado para receber tratamento no Estudo 202 aberto ficou a critério do indivíduo. Se o indivíduo recebeu CCH no estudo 201 e as pontuações de gravidade da celulite da área tratada voltaram ou foram maiores do que as pontuações da linha de base do Estudo 201, o indivíduo poderia escolher por ter o quadrante tratado anteriormente retratado com CCH (denominado retratamento). Se o indivíduo recebeu CCH no Estudo 201, o indivíduo poderia escolher por tratar um quadrante de qualificação diferente daquele tratado com CCH no Estudo 201 (denominado redosagem).

[00616] Para os indivíduos que receberam a droga ativa na área de tratamento atribuída no estudo duplo-cego, a área de tratamento deve ter uma pontuação de gravidade da celulite (ou maior) do que as pontuações de linha de base 201 de PR-PCSS e CR-PCSS para se qualificar para o retratamento.

[00617] Mediante a conclusão do tratamento (Fase de Tratamento, Dia 71), o indivíduo foi seguido em intervalos de 3 meses de acordo com o programa do estudo até o Dia 360. Se o indivíduo foi administrado com placebo no Estudo 201, até 2 cursos de tratamento de CCH poderiam ser administrados sobre 2 áreas de tratamento (nádegas ou coxas posterolaterais), separadamente, no Estudo 202, se elegível. Para indivíduos tratados com CCH no Estudo 201, a área de tratamento tratada foi avaliada para Durabilidade de Longo prazo, até o Dia 720.

[00618] O uso do projeto de extensão aberto permitiu o seguinte: • Coleta de dados de segurança ao longo de um período de 12 meses para auxiliar na definição adicional do perfil de segurança de CCH nesta população. • Avaliação dos dados de segurança e imunogenicidade ao longo de um período de 12 meses após a exposição repetida (retratamento/redosagem), bem como o monitoramento de indivíduos previamente tratados com CCH por um período de 12 meses. • Indivíduos previamente tratados com placebo foram expostos à CCH. • Avaliação da durabilidade da resposta à CCH (avaliações da severidade da celulite).

[00619] O objetivo primário deste estudo foi avaliar a segurança a longo prazo de 0,84 mg de CCH em intervalos programados ao longo de 1 ano (12 meses) ou mais em todos os indivíduos com EFP que escolheram por se inscrever neste ensaio aberto, independentemente de sua decisão de receber tratamento (retratamento ou redosagem) com CCH aberta ou optar por não receber tratamento.

[00620] Os objetivos secundários deste estudo foram:

• Para avaliar a segurança e imunogenicidade de retratar ou redosar um indivíduo que já havia recebido tratamento com CCH. • Para avaliar a durabilidade da resposta à CCH na gravidade do EFP ao longo de 12 meses após a dosagem inicial de CCH em indivíduos que receberam anteriormente o tratamento ativo no Estudo CCH-201 usando o PR-PCSS e o CR-PCSS. • Para avaliar a durabilidade da resposta à CCH na gravidade EFP além de 12 meses pós-inicial dosagem de CCH em indivíduos que receberam tratamento ativo anteriormente no Estudo 201 usando o PR- PCSS e o CR-PCSS. • Para avaliar a resposta de longo prazo à CCH em avaliações de EFP, incluindo a satisfação do indivíduo, a Escala de Melhora da Estética Global do Investigador (I-GAIS) e a Escala de Melhora da Estética Global do Indivíduo (S-GAIS). • Para avaliar as avaliações da gravidade da celulite em quadrantes tratados neste estudo com CCH. • Para avaliar a imunogenicidade após a exposição à CCH,

[00621] A persistência do efeito de 0,84 mg de CCH por área de tratamento foi avaliada por até 2 anos. Isso incluiu persistência do efeito para indivíduos tratados no Estudo 202 (até 1 ano) e persistência de efeito de longo prazo para indivíduos tratados com CCH no Estudo 201 que foram transferidos para o Estudo 202 e foram observados por até 2 anos.

[00622] O impacto da reexposição a 2 cursos de tratamento (cada curso de tratamento foi composto por 3 sessões de tratamento) foi avaliado em 162 indivíduos. Os indivíduos que receberam seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201 ou no estudo atual, poderiam receber, se elegíveis, um segundo curso de tratamento no estudo atual (denominado retratamento ou redosagem, dependendo se a área havia sido tratada anteriormente com CCH ou tinha sido exposta, respectivamente). Para indivíduos que receberam CCH na área de tratamento atribuída no Estudo

201, a área de tratamento deve ter uma pontuação de gravidade da celulite igual (ou maior) do que a linha de base do Estudo 201 para ser retratada.

[00623] A Tabela 78 representa uma descrição do estudo atual. Tabela 78: Descrição do estudo Idade mediana Duração (variação) Número de indivíduos por Projeto do do Estudo dos Avaliações de grupo de tratamento Dose e regime estudo (a partir do Indivíduos Eficácia Planejado/Inscrito/Concluído Dia 1) do sexo Feminino Inscritos 350/259/222 Extensão 201 Até 2 Para tratamento de 49 (19 a 71) CR-PCSS, PR- Reexposto: 163 com opção de anos não expostos: 0,84 anos PCSS, I-GAIS, Retratado: 8/8 retratamento mgx 3 sessões (como S-GAIS, SSCTA, Redosado: 155 12 injeções Hexsel CSS, subcutâneas) Dose total: 2,52 mg Para reexposição: 0,84 mgx 6 sessões (como 12 injeções subcutâneas) Dose total: 5,04 mg

[00624] Os indivíduos qualificados e escolhidos para receber o tratamento receberam uma dose máxima de 0,84 mg de CCH administrada em até 12 injeções subcutâneas por área de tratamento (vide Tabela 79). Um indivíduo foi limitado a receber um máximo de 2 cursos de tratamento de CCH no total. Se o indivíduo recebeu o primeiro curso de CCH no Estudo 201, o segundo curso de CCH foi administrado no estudo atual. Se o indivíduo foi administrado com placebo no Estudo 201, até 2 cursos de tratamento de CCH poderiam ser administrados sobre 2 áreas de tratamento (ambas as nádegas ou coxas posterolaterais), separadamente, no estudo atual, se elegível. Tabela 79: Dose e Volume de CCH por Curso de Tratamento Número Máximo Dose Máxima Volume Máximo Volume de Dose EFP Dose por Cada de Injeções por (mg) por Cada de Injeção (mL) Injeção por Cumulativa Injeçãoa Cada Sessão de Sessão de por Cada Sessão Cada Injeção Máxima Tratamento Tratamento de Tratamento 0,84 mg (12 3,6 mL (12 2,52 mg (3 sessões 0,07 mg de CCH 0,3 mL 12 injeções injeções x 0,07 injeções x 0,3 de tratamento x mg) mL) 0,84 mg) a Cada injeção de CCH foi de 0,3 mL administrada como três alíquotas de 0,1 mL.

[00625] Antes da injeção, o investigador ou pessoa designada qualificada selecionou ondulações dentro da área de tratamento escolhida que eram bem definidas, evidentes quando o indivíduo estava em pé e adequadas para o tratamento. Uma vez que a finalidade do tratamento era melhorar a aparência estética de toda a área tratada, o investigador foi instruído a selecionar ondulações que, em sua opinião, melhorariam a aparência estética de toda a área tratada. As mesmas ondulações em uma área de tratamento ou ondulações diferentes em uma área de tratamento podem ter sido tratadas em cada sessão de tratamento, mas as injeções devem ter ocorrido dentro da área de tratamento selecionada em todas as 3 sessões.

[00626] Os locais de injeção dentro de uma Ondulação foram espaçados aproximadamente 2 cm, se uma Ondulação exigiu mais de 1 injeção. Cada local de injeção foi marcado com um "ponto" usando um marcador cirúrgico. Para ondulações redondas, o “ponto” foi colocado no centro da Ondulação; para ondulações alongadas, “pontos” foram espaçados aproximadamente 2 cm ao longo do eixo mais longo da Ondulação. O investigador ou a pessoa designada qualificada então usou um marcador cirúrgico para circundar cada uma das ondulações selecionadas para o tratamento. Os círculos na área de tratamento selecionada não se sobrepõem.

[00627] Cada local de injeção recebeu uma única injeção na pele de CCH para celulite descrita acima e administrada como três alíquotas de 0,1 mL para as Posições A, B e C (para um volume total de injeção de 0,3 mL) como mostrado na Figura 7. A profundidade da injeção correspondia ao comprimento da agulha de tratamento (0,5 polegadas) a partir da ponta da agulha ao centro ou base da agulha sem pressão para baixo. Durante cada sessão de tratamento, o investigador recebeu 4 seringas. Cada seringa continha 0,9 mL de CCH (ou seja, até 3 injeções em cada seringa).

Até 12 injeções na pele de 0,3 mL por injeção foram administradas na área de tratamento selecionada durante cada sessão de tratamento. B. Dosagem e Tempo de Dosagem

[00628] A dose selecionada para este estudo é a mesma dose usada no estudo original, Estudo 201. Os indivíduos que se qualificaram e escolheram receber o tratamento foram administrados com CCH 3 vezes, com 21 dias de intervalo (Dias do Estudo 1, 22 e 43). Os indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 poderiam ter escolhido por receber 2 cursos de tratamento neste estudo para uma(s) área(s) de tratamento qualificada(s). Os Cursos de Tratamento I e II administrados neste estudo (Estudo 202) foram separados por não menos do que 28 dias após a dose final de CCH no primeiro curso deste estudo.

[00629] O estudo atual foi um estudo aberto. No momento da entrada neste estudo, os indivíduos e investigadores permaneceram cegos quanto à identidade da droga do estudo administrada no Estudo 201. Até que a droga cega do Estudo 201 tenha sido revelado pelo patrocinador, os indivíduos foram submetidos somente a visitas de observação em intervalos de 3 meses ± 7 dias (em relação à dose inicial no 201), onde tanto as avaliações de segurança quanto de gravidade da celulite da área de tratamento tratada foram conduzidas em uma maneira duplo-cega. C. Metodologia de Eficácia

[00630] A fotografia digital foi utilizada para avaliar certos parâmetros de gravidade da celulite em momentos específicos, para indivíduos no grupo somente de observação, bem como aqueles que escolheram por ser retratados ou redosados com CCH. Na visita de Triagem B para indivíduos que escolheram por receber redosagem ou retratamento, o investigador ou pessoa designada qualificada fotografou cada área de tratamento usando uma câmera digital padronizada provida pelo patrocinador. O indivíduo ficava em pé em cada sessão fotográfica e usava uma vestimenta padronizada para fotografias.

[00631] As avaliações de celulite conduzidas pelo investigador foram independentes das avaliações realizadas pelos indivíduos. Portanto, todas as avaliações de celulite dos indivíduos foram concluídas antes que as avaliações de celulite do investigador fossem conduzidas. Na Triagem B, após tanto as avaliações do indivíduo quanto do investigador foram concluídas, as avaliações do indivíduo foram comparadas às avaliações do médico para determinar a elegibilidade da área de tratamento. Se mais de 1 área de tratamento fosse elegível, o indivíduo selecionava 1 área de tratamento para o tratamento.

[00632] Os indivíduos com uma área de tratamento originalmente tratada com CCH no estudo duplo-cego e avaliados quanto à durabilidade do tratamento além do Dia 360 completaram o PR-PCSS em momentos específicos. Os indivíduos que escolheram pelo retratamento ou redosagem após a droga do estudo cego ter sido revelada no Estudo 201, passaram pela retriagem (visita de Triagem B [linha de base]) dentro de 14 dias antes da dosagem no Dia 1.

[00633] As fotografias digitais foram tiradas de todas as 4 áreas de tratamento (quadrantes) para fins de qualificação na Triagem B. Os indivíduos então realizaram o PR-PCSS para tanto as nádegas quanto as coxas. No início das visitas nos Dias 22, 43 e 71, as fotografias digitais da área de tratamento selecionada foram tiradas e o PR-PCSS para a área de tratamento selecionada foi concluído.

[00634] Os indivíduos no grupo somente de observação completaram o S-GAIS em momentos específicos usando a imagem do Dia 1 de pré-tratamento (linha de base) da área de tratamento atribuída no estudo duplo-cego para comparação. Para os indivíduos que escolheram por receber o tratamento com CCH, a avaliação S-GAIS foi conduzida em um momento específico e comparada com a imagem de Triagem B de pré- dosagem (Linha de base para indivíduos em tratamento) da área de tratamento selecionada. Os indivíduos que escolheram por receber CCH por meio de retratamento ou redosagem concluíram a avaliação da Escala de Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite. Para os indivíduos no grupo somente de observação, o CR-PCSS foi concluído em momentos específicos.

[00635] Para indivíduos que escolheram por receber CCH como retratamento ou redosagem, o investigador determinou a gravidade da celulite das 4 áreas de tratamento (quadrantes) por avaliações ao vivo usando o CR-PCSS para nádega e coxa depois que o indivíduo completou sua autoavaliação usando o PR -PCSS na visita de Triagem B (Linha de base). A área de tratamento elegível selecionada ficou a critério do indivíduo. Antes das injeções na visita de tratamento nos Dias 1, 22 e 43 e na visita no Dia 71, os investigadores avaliaram a área de tratamento selecionada por avaliações ao vivo usando o CR-PCSS. Para indivíduos originalmente tratados com CCH no estudo duplo-cego que foram avaliados quanto à durabilidade do tratamento além do Dia 360, o CR-PCSS foi concluído em momentos específicos.

[00636] O I-GAIS foi concluído para indivíduos no grupo somente de observação na visita final do estudo (mês 12 ou rescisão antecipada) usando a imagem do Dia 1 de pré-tratamento da área de tratamento atribuída do estudo duplo-cego. O I-GAIS foi concluído para indivíduos que escolheram receber tratamento com CCH no Dia 71 do curso de tratamento e na visita de 12 meses ou EOS. Para conduzir esta avaliação, o investigador determinou o grau de melhora da imagem digital de Triagem B da área de tratamento selecionada, comparando a celulite em uma avaliação ao vivo no Dia 71 e no Mês 12 ou visita EOS à imagem de pré- tratamento de Triagem B (Linha de base) da área de tratamento selecionada do indivíduo.

[00637] Para os indivíduos do grupo somente de observação, a Hexsel CSS foi conduzida em momentos específicos. Para indivíduos que escolheram retratamento, a Hexsel CSS foi conduzida em momentos específicos.

[00638] Os pontos finais compostos para a gravidade da celulite foram as proporções de respondentes compostos. Um respondente composto foi definido como um indivíduo com uma área de tratamento com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 (ou 1) níveis(l) de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 (ou 1) níveis(l) de gravidade no PR-PCSS. Esses pontos finais foram resumidos por área de tratamento tratada e em geral (nádegas e coxas) e por dia de estudo usando estatísticas descritivas apropriadas.

[00639] Outros pontos finais para áreas de tratamento (quadrantes) tratadas incluíram: Alteração a partir da linha de base para PR-PCSS. • Proporção em cada nível de melhora no PR-PCSS: - Proporção de respondentes definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no PR-PCSS (indivíduo classificado). - Proporção de respondentes definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 1 de gravidade no PR-PCSS (indivíduo classificado). • Alteração a partir da linha de base para CR-PCSS. • Proporção em cada nível de melhora no CR-PCSS: - Proporção de respondentes investigadores definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no CR-PCSS (investigador classificado). - Proporção de respondentes investigadores definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 1 de gravidade no CR-PCSS (investigador classificado). • Proporção de respondentes em cada nível do I-GAIS:

- Proporção de indivíduos em cada nível do I-GAIS no Dia 71 e Dia

360. • Proporção de respondentes em cada nível do S-GAIS: - Proporção de indivíduos em cada nível do S-GAIS no Dia 71 e Dia

360. • Proporção de respondentes em cada nível da escala de satisfação do indivíduo com o tratamento da celulite. • Alteração na pontuação total de Hexsel CSS a partir da Visita de Triagem.

[00640] Os pontos finais de observação para cada área de tratamento tratada incluíram: • Proporção de respondentes compostos definidos como indivíduos com uma melhoria na gravidade a partir da linha de base de pelo menos 2 (ou 1) no CR-PCSS e PR-PCSS. • Alteração a partir da linha de base no PR-PCSS. • Proporção de cada nível de melhora no PR-PCSS. - Proporção de respondentes definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no PR-PCSS. - Proporção de respondentes definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 1 de gravidade no PR-PCSS. • Alteração a partir da linha de base no CR-PCSS. • Proporção em cada nível de melhora no CR-PCSS: - Proporção de respondentes investigadores definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 2 de gravidade no CR-PCSS (investigador classificado). - Proporção de respondentes investigadores definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 1 de gravidade no CR-PCSS (investigador classificado).

• Proporção de respondentes em cada nível da escala de satisfação do indivíduo com o tratamento da celulite no Dia 360. • Alteração na pontuação total da Hexsel CSS a partir do Dia 71 do Estudo 201 e do Dia 360 ou visitas de durabilidade de longo prazo além do Dia 360. D. Metodologia de Durabilidade

[00641] Uma avaliação da durabilidade do tratamento incluiu observações de até 2 anos em indivíduos que receberam tratamento ativo no Estudo 201 e pontuaram uma melhora de pelo menos nível 1 tanto em CR-PCSS quanto em PR-PCSS. Para indivíduos que receberam CCH no Estudo 201 e também receberam CCH no estudo atual, a área de tratamento original tratada no Estudo 201 foi avaliada até o Dia 720 do estudo atual, além de quaisquer áreas de tratamento (quadrantes) tratadas durante o estudo aberto. A População de Durabilidade também incluiu indivíduos que receberam CCH no Estudo 201, mas optaram por não receber tratamentos adicionais neste estudo e indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 e receberam CCH no estudo atual.

[00642] Para os indivíduos avaliados quanto à durabilidade além do Dia 360, os indivíduos devem: (a) ter participado no e concluído o Estudo duplo-cego 201, (b) ter recebido CCH ativa no Estudo duplo-cego 201, (c) ter atingido uma melhora de pelo menos nível 1 tanto no CR-PCSS quanto no PR-PCSS na mesma visita no ou antes do Dia 71 no Estudo duplo-cego 201, e (d) estiveram dispostos a Aplicar protetor solar na área de tratamento tratada com CCH-201 antes de cada exposição ao sol durante a participação no estudo (ou seja, triagem por meio de EOS).

[00643] A durabilidade do efeito do tratamento foi com base nas respostas longitudinais das avaliações da celulite de CR-PCSS e PR- PCSS. O número e a porcentagem de respondentes em cada nível (ou seja, melhora de nível 1 ou 2) para CR-PCSS, PR-PCSS e suas combinações (ou seja, pontuação composta, melhora de nível 1 ou 2 para ambas pontuações) associados às áreas de tratamento tratadas (quadrantes) foram resumidos por dia de estudo.

[00644] A falha do tratamento foi definida como respondentes ativos onde o CR-PCSS e PR-PCSS voltaram ao valor da linha de base ou pioraram em uma área de tratamento tratada com CCH durante um certo período de acompanhamento. O número e a porcentagem foram resumidos por dia de estudo (ou seja, Dias 180, 360, 540 e 720).

[00645] Os respondentes eram das 2 populações a seguir: • População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Duplo- cegos: Todos os indivíduos na População de Durabilidade que mostraram uma melhora no Dia 71 (do Estudo 201) de pelo menos nível 1 em cada escala (CR-PCSS e PR-PCSS) a partir da linha de base para o tratamento área tratada com CCH em estudo duplo-cego (Estudo 201) e acompanhado por até 2 anos. • População de Durabilidade para Indivíduos Abertos: Todos os indivíduos na População de Durabilidade que mostraram uma melhora no Dia 71 (do Estudo 202) de pelo menos nível 1 tanto em CR-PCSS quanto em PR-PCSS a partir da linha de base para a área de tratamento tratada com CCH no Estudo 202 que foram então acompanhados por até 1 ano. E. Avaliações de Segurança

[00646] As variáveis de segurança incluíram: AEs, reações no local da injeção/tolerabilidade local, sinais vitais, parâmetros laboratoriais clínicos (incluindo hematologia, química do sangue e análise de urina) e imunogenicidade. F Indivíduos do Estudo

[00647] Duzentos e cinquenta e nove indivíduos transferidos do Estudo 201, participaram no estudo atual e foram incluídos na População de Observação (Tabela 80). A População de Observação compreendeu 121 indivíduos que haviam sido tratados anteriormente com CCH e 138 indivíduos que haviam sido tratados anteriormente com placebo no Estudo

201. Cinquenta e três (20,5%) indivíduos na População de Observação foram incluídos na População de Durabilidade para indivíduos tratados Duplo-cego. Esses indivíduos mostraram pelo menos uma melhora de nível 1 tanto em CR-PCSS quanto em PR-PCSS na mesma visita em ou antes da Visita do Dia 71 no Estudo 201. Tabela 80: Populações de Análise para a Fase de Observação Tratamento do Estudo no Estudo 201 0,84 mg de Estatística placebo Geral

CCH População de Observação n (%) 121 (100,0) 138 (100,0) 259 (100,0) População de Durabilidade para Indivíduos Tratados n (%) 53 (43,8) 0 (0,0) 53 (20,5) Duplo-cegos

[00648] Durante a Fase de Tratamento, 200 indivíduos receberam pelo menos 1 dose de CCH neste estudo e foram incluídos na População de Segurança (Tabela 81). Dos indivíduos incluídos na População de Segurança, 193 indivíduos tiveram linha de base e pelo menos 1 avaliação pós-linha de base tanto em CR-PCSS quanto em PR- PCSS na área de tratamento selecionada para o tratamento no estudo atual, e foram incluídos na População de Eficácia. Três indivíduos alternaram a seleção da região de tratamento de nádega para coxa e receberam tratamento na nádega, e então na coxa, nos cursos de tratamento do Estudo 202, 8 indivíduos alternaram a região de tratamento de coxa para nádega nos cursos de tratamento do Estudo 202. Esses indivíduos foram contados para ambas as regiões de tratamento.

[00649] Durante a Fase de Tratamento, os indivíduos receberam até 2 cursos de tratamento. Os indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 podem ter recebido até 2 cursos de tratamento neste estudo. Os indivíduos que receberam CCH no Estudo 201 receberam 1 curso de tratamento neste estudo.

[00650] Durante o estudo, 163 indivíduos receberam um segundo curso de tratamento neste estudo e foram incluídos na População de Segurança. Este grupo de tratamento retratado/redosado compreendia 88 indivíduos que receberam seu segundo curso de tratamento de CCH neste estudo (tendo recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201) e 75 indivíduos que receberam tanto seu primeiro quanto seu segundo curso de tratamento neste estudo.

[00651] A população de eficácia incluiu 162 indivíduos que receberam um segundo curso de tratamento neste estudo. Este grupo de tratamento retratado/redosado compreendia 87 indivíduos que receberam seu segundo curso de tratamento de CCH neste estudo, tendo recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201 e 75 indivíduos que receberam tanto o primeiro quanto o segundo curso de tratamento neste estudo.

[00652] Quarenta e dois indivíduos na População de Durabilidade entraram na Fase de Tratamento neste estudo e foram incluídos na População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Duplo-cego (Tabela 81).

[00653] A População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Abertos compreendeu 124 indivíduos. Todos os indivíduos na População de Durabilidade que mostraram uma melhora no Dia 71 de pelo menos nível 1 tanto em CR-PCSS quanto em PR-PCSS a partir da linha de base para a área de tratamento foi tratada com CCH no estudo aberto (Estudo 202). Esta população compreendeu os seguintes grupos:

1. Indivíduos que receberam CCH no Estudo 201 que responderam no Curso de Tratamento 1 no Estudo CCH-201 que foram ou redosados ou retratados. • Os indivíduos retratados que receberam CCH no estudo 201 e as pontuações de gravidade da celulite da área tratada voltaram ou eram piores do que as pontuações do que a linha de base do Estudo 201. Esses indivíduos podem escolher retratar a área tratada anteriormente com CCH • Os indivíduos redosados receberam CCH no Estudo 201

2. Indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 que foram inicialmente tratados no Estudo 202 e responderam ao Curso de Tratamento 1.

3. Indivíduos que receberam placebo no Estudo 201 que receberam 2 cursos de tratamento no Estudo 202 e responderam ao Curso de Tratamento 2. Tabela 81: Populações de Análise para a Fase de Tratamento Região de Tratamento com 0,84 mg de

CCH Estatística Nádega Coxa Geral População de Segurança N 112 99 200 População de Eficácia n (%) 111 (99,1) 93 (93,9) 193 (96,5) População de Durabilidade n (%) 93 (83,0) 65 (65,7) 152 (76,0) n (%) 26 (23,2) 16 (16,2) 42 (21,0) População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Duplo-cegos População de Durabilidade para Indivíduos Tratados Abertos n (%) 72 (64,3) 54 (54,5) 124 (62,0) G. Disposição de Indivíduos:

[00654] A Figura 28 resume como os indivíduos foram dispostos.

[00655] (i) Disposição de Indivíduos (Fase de Observação): Durante a Fase de Observação, 259 indivíduos foram avaliados com 222 (85,7%) indivíduos completando esta fase (Tabela 82). Em geral, 37 indivíduos descontinuaram pelas seguintes razões: um AE de um leve aumento de eosinófilos sem exposição a CCH (1 indivíduo; 0,4%), perda de acompanhamento (13 indivíduos; 5%), retirada por indivíduo (13 indivíduos, 5%), e outros (10 indivíduos, 3,9%). A outra categoria inclui falhas de triagem, indivíduos recusando-se a participar da Fase de Tratamento, fechamento do local no Dia de Estudo 272 de inscrição de indivíduos ou indivíduos não aderentes às visitas de estudo. Tabela 82: Disposição do Indivíduo Durante a Fase de Observação (Todos os Indivíduos) Tratamento do Estudo no Estudo-201 0,84 mg Estatística de CCH placebo Geral Participou N 121 138 259

Concluiu n (%) 106 (87,6) 116(84,1) 222 (85,7) Descontinuou n (%) 15 (12,4) 22 (15,9) 37 (14,3) Razão para Descontinuação Eventos Adversos n (%) 0 (0,0) 1 (0,7) 1 (0,4) Perda de Acompanhamento n (%) 7 (5,8) 6 (4,3) 13 (5,0) Retirada pelo Indivíduo n (%) 8 (6,6) 5 (3,6) 13 (5,0) Outro n (%) 0 (0,0) 10 (7,2) 10 (3,9)

[00656] (ii) Disposição de Indivíduos (Fase de Tratamento): Duzentos e dezesseis indivíduos foram selecionados para a Fase de Tratamento, 200 indivíduos foram inscritos e 156 (78%) indivíduos completaram a Fase de Tratamento (Tabela 83). Em geral, havia mais regiões tratadas nas nádegas do que nas coxas. Cento e quatro indivíduos foram tratados nas nádegas e 96 nas regiões das coxas.

[00657] Durante a Fase de Tratamento, 163 indivíduos foram reexpostos à CCH. O grupo de 163 indivíduos reexpostos compreendia 88 indivíduos reexpostos à CCH no Curso de Tratamento 1, tendo recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201 e 75 indivíduos reexpostos no Curso de Tratamento 2.

[00658] Durante a Fase de Tratamento, 112 indivíduos foram inicialmente tratados no Curso de Tratamento 1 e 88 indivíduos foram reexpostos no Curso de Tratamento 1 (82 indivíduos que foram redosados e somente 6 indivíduos foram retratados). Os 82 indivíduos redosados receberam CCH no Estudo 201 e escolheram por receber tratamento em uma área de tratamento de qualificação diferente daquela tratada no estudo

201. Os 6 indivíduos que foram retratados receberam CCH no Estudo 201 e as pontuações de gravidade da celulite de sua área tratada voltaram à pontuação da linha de base ou eram maiores que as pontuações da linha de base do Estudo 201. Esses indivíduos escolheram por ter a área de tratamento tratada anteriormente retratada com CCH.

[00659] Setenta e cinco indivíduos receberam tanto seu primeiro quanto seu segundo cursos de tratamento no Estudo 202. Todos os indivíduos, por definição, no Curso de Tratamento 2 foram reexpostos à

CCH. A maioria (73/75 indivíduos; 97,3%) dos indivíduos foram redosados e somente 2 indivíduos foram retratados.

[00660] Cento e cinquenta e seis indivíduos completaram o estudo. A distribuição de indivíduos que interromperam a CCH foi semelhante em indivíduos tratados nas nádegas com relação a coxa (22 [21,2%] com relação a 22 [22,9%] indivíduos). Tabela 83: Disposição do Indivíduo Durante a Fase de Tratamento (Todos os Indivíduos) Região de Tratamento com 0,84 mg de CCH Estatística Nádega Coxa Geral Curso de Tratamento I Triado N 216 Inscrito no Curso de Tratamento I N 104 96 200 Redosado n (%) 48 (46,2) 34 (35,4) 82 (41,0) Retratamento n (%) 4 (3,8) 2(2,1) 6 (3,0) Inicialmente tratado n (%) 52 (50,0) 60 (62,5) 112 (56,0) Curso de Tratamento 2 Triado N 78 Inscrito no Curso de Tratamento 2 n (%) 43 (41,3) 32 (33,3) 75 (37,5) Redosado n (%) 41 (39,4) 32 (33,3) 73 (36,5) Retratamento n (%) 2 (1,9) 0 (0,0) 2(1,0) Estado Concluído Concluído n (%) 87 (83,7) 69 (71,9) 156 (78,0) Descontinuado n (%) 22 (21,2) 22 (22,9) 44 (22,0) Razão para Descontinuação Eventos Adversos n (%) 0 (0,0) 5 (5,2) 5 (2,5) Morte n (%) 0 (0,0) 1 (1,0) 1 (0,5) Perda de Acompanhamento n (%) 9 (8,7) 3 (3,1) 12 (6,0) Retirada pelo Indivíduo n (%) 8 (7,7) 13 (13,5) 21 (10,5) Outro n (%) 5 (4,8) 0 (0,0) 5 (2,5) H. Resultados de Eficácia

1. Pontos finais clínicos

[00661] A resposta no ponto final composto CR-PCSS/PR-PCSS foi avaliada durante a Fase de Tratamento e durante a Fase de Observação em respondentes ativos a partir do Estudo 201. O ponto final composto para a gravidade da celulite foi definido como a proporção de respondentes compostos. Os respondentes foram definidos como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base (no Estudo 201) de pelo menos nível 1 de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos nível 1 de gravidade no PR-PCSS. Os respondentes ativos foram indivíduos tratados com CCH no Estudo 201 com uma melhora de pelo menos nível 1 tanto no CR-PCSS quanto no PR-PCSS a partir da linha de base para a área de tratamento no Estudo 201.

[00662] Durante a Fase de Observação do Estudo 202, os indivíduos que transferiram a partir do Estudo 201 e foram respondentes ativos na área tratada, foram observados por até 2 anos. Os indivíduos tratados durante a Fase de Tratamento do Estudo 202, e foram respondentes compostos de nível 2, foram observados por até 1 ano. A falha do tratamento foi definida como respondentes ativos que receberam CCH e cujo CR-PCSS e PR-PCSS retornaram à linha de base em uma área tratada com CCH. A durabilidade do efeito do tratamento foi calculada como o inverso da falha do tratamento. As análises foram conduzidas em indivíduos que eram respondentes compostos de nível 2 e indivíduos com pelo menos uma resposta composta de nível 1.

[00663] Os pontos finais compostos para a gravidade da celulite foram definidos como as proporções de respondentes compostos. Isto foi definido como indivíduos com uma melhora a partir da linha de base (no Estudo 201) de pelo menos 2 (ou 1) níveis(l) de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 (ou 1) níveis(l) de gravidade no PR-PCSS. Esta análise foi conduzida para indivíduos inscritos nas Fases de Observação e Tratamento. As avaliações do investigador sobre a durabilidade da resposta em respondentes compostos de nível 1 e 2 durante a Fase de Observação foram conduzidas em uma maneira duplo- cega.

[00664] As avaliações foram conduzidas por área de tratamento e por indivíduo. Deste modo, a resposta foi avaliada separadamente por área de tratamento para um indivíduo que pode ter sido tratado com CCH em diferentes áreas de tratamento durante diferentes cursos de tratamento. Os indivíduos que responderam em 1 área de tratamento foram considerados respondentes compostos de nível 1 ou nível 2, conforme aplicável, uma vez que eles podem não ter respondido igualmente ou de forma alguma em outra área de tratamento, se tratados. A durabilidade da resposta foi avaliada em indivíduos com pelo menos uma resposta composta de nível 1 ou 2 no Dia 71 do Estudo 201.

[00665] Haviam 26 indivíduos (incluindo regiões tratadas nas 19 nádegas e 7 coxas) que eram respondentes compostos de nível 2 no Dia 180 ou além. Esses indivíduos receberam 1 ou 2 cursos de tratamento durante o Estudo 202. Todos os indivíduos avaliáveis que foram observados no Estudo 202, Dias 180 (26 indivíduos; 100%) e 360 (21 indivíduos; 100%) mantiveram uma resposta de nível 2. Não houve indivíduos que eram respondentes compostos de nível 2 em cujas classificações CR-PCSS e PR-PCSS para uma área recém-tratada retornaram às suas classificações de linha de base (no Estudo 202) ou pior. Para os indivíduos tratados neste estudo, uma resposta composta de nível 2 persistiu e foi semelhante nos Dias 180 e 360, e foi semelhante nas regiões tratadas de nádegas e coxas.

[00666] Havia 124 indivíduos (incluindo regiões tratadas de 72 nádegas e 54 coxas) que eram respondentes compostos de nível 1 no Dia 180 e 114 indivíduos que mantiveram uma resposta composta de nível 1 no Dia 360 durante o Estudo 202. Não houve indivíduos avaliados como falhas de tratamento cujas classificações de CR-PCSS e PR-PCSS retornaram às suas classificações de linha de base (no Estudo 202) ou piores. A resposta composta de nível 1 persistiu e foi semelhante nos Dias 180 e 360 e foi semelhante nas regiões tratadas de nádegas e coxas.

2. Persistência de Eficácia

[00667] Este estudo avaliou a segurança de longo prazo de CCH em intervalos programados ao longo de 2 anos (24 meses) em todos os indivíduos com celulite que escolheram por se inscrever. Os indivíduos elegíveis foram tratados em 1 nádega ou 1 coxa e, dependendo da elegibilidade, poderiam ser tratados com um segundo curso de tratamento em 1 nádega ou 1 coxa. A persistência da resposta foi avaliada por até 2 anos em indivíduos que foram tratados com CCH no Estudo 201 e até 12 meses em indivíduos que receberam seu tratamento inicial de CCH no Estudo 202. Os dados disponíveis em indivíduos avaliados no Dia 720 no Estudo 202, que foram tratados no Estudo 201, suportavam a persistência da resposta de CR-PCSS e PR-PCSS por até 2 anos.

[00668] Os resultados deste estudo fornecem dados de suporte por até 2 anos sobre a segurança a longo prazo e persistência do efeito de 0,84 mg da CCH por área de tratamento * 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo. Isso incluiu a persistência do efeito para indivíduos tratados no Estudo 202 (até 1 ano) e a persistência de longo prazo do efeito de indivíduos tratados com CCH no Estudo 201 e inscritos no estudo de extensão no Estudo 202 que foram observados por até 2 anos.

[00669] Os indivíduos inscritos no estudo aberto atual (Estudo 202), experienciaram reduções de aproximadamente nível 1 (ou seja, melhora) na gravidade da celulite no CR-PCSS e no PR-PCSS a partir da linha de base. Esta magnitude de redução foi semelhante às reduções no CR-PCSS e PR-PCSS experienciadas pelos indivíduos nos estudos duplo- cegos.

[00670] (a) Persistência da resposta PR-PCSS por até um ano: A persistência na alteração a partir da linha de base no PR-PCSS foi consistente entre os grupos de indivíduos tratados com CCH no Estudo 201, tratados no Estudo 202, e reexposto no Estudo 202. Dentre os 259 indivíduos que se inscreveram no Estudo 202 do Estudo 201, a alteração média (SD) a partir da linha de base no Dia 71 no Estudo 201, foi de -1,2 (0,89) no grupo tratado com CCH (n = 121) e de -0,6 (0,74) no grupo tratado com placebo (n = 138). Após observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram a mostrar melhora na classificação PR-PCSS. A alteração média (SD) a partir da linha de base no grupo tratado com CCH foi de -0,7 (0,88), -0,7 (0,96) e -1,0 (0,91), nos Dias 180 (n = 119), 270 (n = 105), e 360 (n = 96).

[00671] Dentre os indivíduos inscritos e tratados no Estudo 202, 193 indivíduos (regiões tratadas de 103 nádegas e 90 coxas) foram avaliados quanto à eficácia durante o Curso de Tratamento 1. Os indivíduos que receberam o Curso de Tratamento 1 incluíram indivíduos inicialmente tratados com CCH e indivíduos ou retratados ou redosados. Mediante a observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram uma mostrar melhora a partir da linha de base na classificação PR-PCSS. A alteração média geral (SD) a partir da linha de base foi de -1,1 (0,85), -1,1 (0,87) e -1,0 (0,83) nos Dias 180, 270 e 360, respectivamente. A resposta foi semelhante tanto para as nádegas (n = 103) quanto para as regiões tratadas das coxas (n = 90) (Figura 29).

[00672] Neste estudo, 162 indivíduos que foram reexpostos e avaliados quanto à eficácia mediante a observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram a mostrar uma melhora a partir da linha de base no PR-PCSS nos Dias 180 (-1,0 [0,83]) e 360 (-1,0 [0,83]). A resposta foi semelhante nas regiões tratadas das nádegas e coxas após o primeiro curso de tratamento e após o segundo curso de tratamento (Figura 30 e Figura 31).

[00673] (b) Persistência da resposta de CR-PCSS por até um ano: A persistência na alteração a partir da linha de base no CR-PCSS foi consistente entre os grupos de indivíduos tratados com CCH no Estudo 201, tratados no Estudo 202 e reexpostos no Estudo 202.

[00674] Dentre os 121 indivíduos tratados com CCH que se inscreveram no Estudo 202 a partir do Estudo -201, a alteração média (SD) a partir da linha de base no Dia 71 no Estudo -201, foi de -0,8 (0,88) no grupo tratado com CCH e de -0,3 (0,6) no grupo tratado com placebo.

Mediante a observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram a mostrar melhora nas classificações CR-PCSS. A alteração média geral (SD) a partir da linha de base foi de -0,6 (0,80), -0,6 (0,76) e - 0,9 (0,86) nos Dias 180, 270 e 360, respectivamente.

[00675] Dentre os indivíduos inscritos e tratados no Estudo 202, 193 indivíduos tratados com CCH (regiões de 103 nádegas tratadas e 90 coxas tratadas) foram avaliados quanto à eficácia durante o Curso de Tratamento 1 deste estudo. Os indivíduos que receberam o Curso de Tratamento 1 incluíram indivíduos inicialmente tratados e indivíduos ou retratados ou redosados. Mediante a observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram a mostrar melhora nas classificações CR-PCSS. A alteração média geral (SD) a partir da linha de base foi de -1,0 (0,80), -1,1 (0,83) e -1,1 (0,82) nos Dias 180, 270 e 360, respectivamente (Figura 32). A resposta foi semelhante tanto para as nádegas (n = 103) quanto para as regiões tratadas das coxas (n = 90).

[00676] Dentre os 162 indivíduos que foram reexpostos no Estudo 202 e avaliados quanto à eficácia mediante a observação por até 1 ano, os indivíduos tratados com CCH continuaram a mostrar melhora no CR-PCSS nos Dias 180 e 360. A alteração média geral (SD) a partir da linha de base foi de -1,0 (0,80) no Dia 180 e -0,9 (0,77) no Dia 360. A resposta foi semelhante nas regiões tratadas das nádegas e coxas após o primeiro curso de tratamento e após o segundo curso de tratamento (Figura 33 e Figura 34).

[00677] (c) Persistência da Resposta Composta de Dois níveis por até dois anos: Sete indivíduos que eram respondentes compostos de nível 2 (regiões de 5 nádegas e 2 coxas tratadas com CCH) foram avaliados por até 720 dias. No Dia 720, nenhum dentre os 7 indivíduos teve suas classificações de CR-PCSS e PR-PCSS retornando às suas pontuações de linha de base (no Estudo 201) ou pior.

[00678] (d) Persistência da Resposta Composta de um nível por até um ano: Vinte e três indivíduos que eram respondentes compostos ≥nível 1 (regiões de 13 nádegas e de 10 coxas tratadas com CCH) foram avaliados por até 720 dias. No Dia 720, em 21 (91,3%) indivíduos, nenhum teve suas classificações CR-PCSS e PR-PCSS retornando às suas pontuações de linha de base (no Estudo 201) ou pior.

3. Efeitos de Tolerância

[00679] A tolerância (a perda da capacidade de responder à(s) dose(s) terapêutica(s) ao longo do tempo mediante a reexposição à CCH) a um segundo curso de tratamento foi avaliado neste estudo. Os dados do estudo atual suportaram a falta de tolerância (a perda da capacidade de responder à(s) dose(s) terapêutica(s) ao longo do tempo) mediante a reexposição à CCH, 163 indivíduos foram reexpostos ao tratamento. Esse grupo compreendia 88 indivíduos reexpostos no Curso de Tratamento 1, tendo recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201 e 75 indivíduos reexpostos no Curso de Tratamento 2.

[00680] Setenta e cinco indivíduos receberam tanto seu primeiro quanto seu segundo cursos de tratamento no Estudo 202. Todos os indivíduos, por definição, no Curso de Tratamento 2 foram reexpostos à CCH. A maioria (73/75 indivíduos; 97,3%) dos indivíduos foram redosados e somente 2 indivíduos foram retratados. Não há sinais sugestivos de quaisquer preocupações de segurança em indivíduos reexpostos (redosados e/ou retratados) ao tratamento com CCH.

[00681] (a) Alteração de Classificação de PR-PCSS a partir da Linha de base (retratado/redosado): Neste estudo, 162 indivíduos (que incluíram regiões tratadas nas 91 nádegas e 71 coxas) foram avaliados quanto à eficácia no PR-PCSS após seu primeiro curso de tratamento e após seu segundo curso de tratamento de CCH (1 indivíduo não foi incluído na população de eficácia devido a uma avaliação ausente) (Tabela 84).

[00682] Quando avaliada no Dia 71 e Dia 360 após o tratamento inicial, a alteração no PR-PCSS observada após o segundo curso de tratamento foi semelhante e sobreponível às alterações observadas nos mesmos momentos após o primeiro curso de tratamento.

No Dia 360, a alteração média geral (SD) na classificação PR-PCSS após o primeiro curso de tratamento foi de -1,0 (0,82) (Tabela 84) e após o segundo curso de tratamento foi de -1,0 (0,83) (Tabela 85). Diminuições semelhantes foram observadas em regiões tratadas das nádegas e coxas.

As alterações na área tratada da nádega (Figura 31) foram semelhantes às alterações para a análise combinada das regiões tratadas da coxa e da nádega (Figura 30). Indivíduos reexpostos no Estudo 202, experienciaram uma redução na gravidade da celulite no PR-PCSS de uma magnitude semelhante à resposta observada em indivíduos em estudos duplo-cegos (Estudos 201, 302 e 303) após seu primeiro e único curso de tratamento.

Tabela 84: Classificação PR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base por Visita após o Primeiro Curso de Tratamento para Indivíduos que Receberam seus Primeiro e Segundo Cursos de Tratamento de CCH (População de Eficácia) Região de Tratamento com 0,84 mg de CCH Nádega Geral Primeiro Curso de Tratamentoa Estatística Coxa (N = 71) (N = 91) (N = 162)b Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 56(61,5) 47 (66,2) 103 (63,6) Grave (4) n (%) 35 (38,5) 24 (33,8) 59 (36,4) N 91 71 162 Média (SD) 3,4 (0,49) 3,3 (0,48) 3,4 (0,48) Mediana 3,0 3,0 3,0 Min, Max 3,4 3,4 3,4 Alteração a partir da linha de base ao Tratamento no Dia 71 N 91 71 162 Média (SD) -1,2 (0,92) -1,1 (0,75) -1,2 (0,85) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,0 -3,0 -3,0 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 180 N 88 71 159 Média (SD) -0,9(1,01) -0,9 (0,77) -0,9 (0,91) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -4,1 -3,0 -4,1 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 360 N 78 69 147 Média (SD) -1,0 (0,87) -1,1 (0,77) -1,0 (0,82)

Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,0 -2,1 -3,1 a Durante o Estudo 202, o primeiro curso de tratamento foi denominado a primeira visita de tratamento.

Tabela 85: Classificação PR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base por Visita após o Segundo Curso de Tratamento para Indivíduos que Receberam seus Primeiros e Segundos Cursos de Tratamento de CCH (População de Eficácia) Região de Tratamento com 0,84 mg de CCH Nádega Geral Segundo Curso de Tratamentoa Estatística Coxa (N = 67) (N = 95) (N = 162)b Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 57 (60,0) 51 (76,1) 108 (66,7) Grave (4) n (%) 38 (40,0) 16 (23,9) 54 (33,3) N 95 67 162 Média (SD) 3,4 (0,49) 3,2 (0,43) 3,3 (0,47) Mediana 3,0 3,0 3,0 Min, Max 3,4 3,4 3,4 Alteração a partir da linha de base ao Tratamento no Dia 71 N 92 67 159 Média (SD) -1,2 (0,85) -0,9 (0,74) -1,1 (0,82) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -3,1 -3,1 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 180 N 90 65 155 Média (SD) -1,1 (0,82) -0,8 (0,80) -1,0(0,83) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -2,1 -3,1 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 360 N 81 62 143 Média (SD) -1,1 (0,82) -0,8 (0,81) -1,0(0,83) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -3,1 -3,1 a Durante o Estudo 202, o segundo curso de tratamento foi denominado a segunda visita de tratamento. b Cento e sessenta e dois indivíduos receberam um segundo curso de tratamento neste estudo e foram incluídos na População de Eficácia.

Este grupo de tratamento retratado/redosado compreendia 87 indivíduos que receberam seu segundo curso de tratamento no Estudo 202, após terem recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201, e 75 indivíduos que receberam tanto seu primeiro quanto seu segundo curso de tratamento no Estudo 202.

[00683] (b) Alteração de Regra de CR-PCSS a partir da Linha de base (retratado/redosado): Neste estudo, 162 indivíduos (incluindo regiões tratadas das 91 nádegas e 71 coxas) receberam seu primeiro e segundo curso de tratamento de CCH e foram avaliados quanto à eficácia no CR- PCSS (1 indivíduo não foi incluído na população de eficácia devido a uma avaliação ausente) (Tabela 86).

[00684] Quando avaliada no Dia 71 e Dia 360 após o tratamento inicial, a alteração no CR-PCSS observada após o segundo curso de tratamento foi semelhante e sobreponível às alterações observadas no mesmo momento após o primeiro curso de tratamento. No Dia 360, a alteração média geral (SD) na classificação CR-PCSS após o primeiro curso de tratamento foi de -1,1 (0,88) (Tabela 86) e após o segundo curso de tratamento foi de -0,9 (0,77) (Tabela 87). Diminuições semelhantes foram observadas em regiões tratadas das nádegas e coxas. As alterações na área tratada da nádega (Figura 34) foram semelhantes às alterações para a análise combinada das regiões tratadas da coxa e da nádega (Figura 33). Indivíduos reexpostos no Estudo -202, experienciaram uma redução na gravidade da celulite no CR-PCSS de uma magnitude semelhante à resposta observada em indivíduos nos estudos duplo-cegos (Estudos 201, 302 e 303) após seu primeiro e único curso de tratamento. Tabela 86: Classificação de CR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base por Visita após o Primeiro Curso de Tratamento para Indivíduos que Receberam seus Primeiro e Segundo Cursos de Tratamento de CCH (População de Eficácia) Região de Tratamento com 0,84 mg de CCH Primeiro Curso de Tratamento Nádega Estatística Coxa (N = 71) Geral (N = 162) com CCHa (N = 91) Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 59 (64,8) 53 (74,6) 112 (69,1) Grave (4) n (%) 32 (35,2) 18 (25,4) 50 (30,9) N 91 71 162

Média (SD) 3,4 (0,48) 3,3 (0,44) 3,3 (0,46) Mediana 3,0 3,0 3,0 Min, Max 3,4 3,4 3,4 Alteração a partir da linha de N 91 71 162 base ao Tratamento no Dia 71 Média (SD) -0,9 (0,90) -0,9 (0,74) -0,9 (0,83) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -2,0 -3,1 Alteração a partir da linha de base à Observação do N 89 71 160 Tratamento no Dia 180 Média (SD) -0,8 (0,82) -0,9 (0,79) -0,9 (0,81) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -3,1 -3,1 Alteração a partir da linha de base à Observação do N 80 69 149 Tratamento no Dia 360 Média (SD) -1,0 (0,80) -1,2 (0,95) -1,1 (0,88) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,0 -3,1 -3,1 a Durante o Estudo 202, o primeiro curso de tratamento foi denominado a primeira visita de tratamento.

Tabela 87: Classificação de CR-PCSS e Alteração a partir da Linha de base por Visita após o Segundo Curso de Tratamento para Indivíduos que Receberam seu Primeiro e Segundo Cursos de Tratamento de CCH (População de Eficácia) Região de Tratamento com 0,84 mg Nádega Geral Segundo Curso de Tratamento3 Estatística Coxa (N = 67) (N = 95) (N = 162)b Linha de base Nenhum (0) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Quase Nenhum (1) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Leve (2) n (%) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Moderado (3) n (%) 76 (80,0) 52 (77,6) 128 (79,0) Grave (4) n (%) 19 (20,0) 15 (22,4) 34(21,0) N 95 67 162 Média (SD) 3,2 (0,40) 3,2 (0,42) 3,2(0,41) Mediana 3,0 3,0 3,0 Min, Max 3,4 3,4 3,4 Alteração a partir da linha de base ao Tratamento no Dia 71 N 92 67 159 Média (SD) -1,1 (0,82) -0,9 (0,74) -1,0 (0,79) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -4,0 -2,0 -4,0 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 180 N 90 64 154 Média (SD) -1,1 (0,72) -1,0(0,91) -1,0 (0,80) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,0 -4,0 -4,0 Alteração a partir da linha de base à Observação do Tratamento no Dia 360

N 81 61 142 Média (SD) -1,0(0,81) -0,9 (0,72) -0,9 (0,77) Mediana -1,0 -1,0 -1,0 Min, Max -3,1 -3,0 -3,1 a Durante o Estudo 202, o segundo curso de tratamento foi denominado a segunda visita de tratamento. b Cento e sessenta e dois indivíduos receberam um segundo curso de tratamento neste estudo e foram incluídos na População de Eficácia. Este grupo de tratamento retratado/redosado compreendia 87 indivíduos que receberam seu segundo curso de tratamento no Estudo 202, após terem recebido seu primeiro curso de tratamento no Estudo 201, e 75 indivíduos que receberam tanto seu primeiro quanto seu segundo curso de tratamento no Estudo 202.

[00685] (c) Alterações na Classificação Total Hexsel CSS, I- GAIS, S-GAIS e Escala de Satisfação do Indivíduo com Tratamento de EFP em Indivíduos Retratados/Redosados. Em indivíduos reexpostos, a eficácia da CCH na redução da gravidade da celulite foi avaliada pela Hexsel CSS, a melhora da aparência estética foi avaliada pelo investigador (I-GAIS) e pelo indivíduo (S-GAIS), e pelo na Satisfação do Indivíduo com a Escala de Tratamento EFP. A eficácia após o tratamento, conforme avaliada por essas escalas, foi semelhante em indivíduos não expostos ao tratamento e após o tratamento em indivíduos reexpostos suportando uma falta de tolerância ou taquifilaxia à CCH quando retratado ou redosado. I. Avaliação de Segurança

[00686] O perfil de segurança de CCH foi consistente com os resultados de segurança dos estudos anteriores. Não houve alterações clinicamente significativas nos medicamentos concomitantes durante o estudo. Não houve tendências clinicamente significativas observadas nas alterações médias a partir da linha de base nos parâmetros de química do soro, parâmetros de hematologia, resultados de análise de urina ou sinais vitais durante o estudo. Não houve verificações clinicamente relevantes em indivíduos com anticorpos anti-AUX-I e anti-AUX-II ou em indivíduos com anticorpos neutralizantes. J. Resumo dos Resultados e Conclusões

[00687] A durabilidade de resposta (falta de perda completa) foi observada em respondentes compostos de nível 2 avaliáveis do Estudo

201. Nenhum indivíduo retornou à linha de base dos níveis CR-PCSS e PR- PCSS ou pior em uma área tratada com CCH. Uma resposta durável foi observada durante a: • Fase de Observação em 19 (100%) e 16 (100%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente. • Fase de Durabilidade de longo prazo em 7 (100%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 540 e 720. • Fase de tratamento em 26 (100%) e 21 (100%) indivíduos tratados abertos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente.

[00688] A durabilidade de resposta (falta de perda completa) foi demonstrada em respondentes compostos de nível 1 avaliável do Estudo

201. Uma resposta durável foi observada durante a: • Fase de Observação em 50 (94,3%) e 43 (95,6%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente. • Fase de Durabilidade de longo prazo em 22 (95,6%) e em 21 (91,3%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 540 e 720, respectivamente. • Fase de tratamento em 124 (100%) e 114 (100%) indivíduos tratados abertos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente.

[00689] Entre os respondentes ativos de CR-PCSS de nível 2 a partir do Estudo 201, uma resposta de nível 2 foi mantida durante a: • Fase de Observação em 10 (47,6%) indivíduos tratados duplo- cegos avaliáveis no Dia 360.

• Fase de Durabilidade de longo prazo em 3 (30%) e 4 (40%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 540 e 720, respectivamente. • Fase de Tratamento em 32 (62,7%) e 26 (56,5%) indivíduos tratados abertos avaliáveis nos Dias 180 e 360.

[00690] Entre os respondentes ativos de CR-PCSS de nível 1, uma resposta de nível 1 foi mantida durante a: • Fase de Observação em 38 (84,4%) indivíduos tratados duplo- cegos no Dia 360. • Fase de Durabilidade de longo prazo em 19 (82,6%) indivíduos tratados duplo-cegos no Dia 540 e 16 (69,6%) indivíduos tratados duplo- cegos no Dia 720. • Fase de Tratamento em 109 (87,9%) indivíduos tratados abertos avaliáveis e 96 (84,2%) indivíduos tratados abertos nos Dias 180 e

360.

[00691] Entre os respondentes ativos de PR-PCSS de nível 2 a partir do Estudo 201, uma resposta de nível 2 foi mantida durante a: • Fase de Observação em 10 (31,3%) e 14 (48,3%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente. • Fase de Durabilidade de longo prazo em 7 (53,8%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 540 e 720. • Fase de Tratamento em 33 (66,7%) e 24 (54,5%) indivíduos tratados abertos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente.

[00692] Entre os respondentes ativos de PR-PCSS de nível 1 a partir do Estudo 201, uma resposta de nível 1 foi mantida durante a: • Fase de Observação em 40 (75,5%) e 35 (77,8%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente. • Fase de Durabilidade de longo prazo em 19 (82,6%) e 20 (87,0%) indivíduos tratados duplo-cegos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente.

• Fase de Tratamento em 103 (83,1%) e 92 (80,7%) indivíduos tratados abertos avaliáveis nos Dias 180 e 360, respectivamente.

[00693] A durabilidade de resposta também foi observada em respondentes de PR-PCSS de nível 2 e nível 1 e PR-PCSS de nível 1 e nível 2 e em respondentes do Estudo 201 durante a Fase de Observação, Fase de Durabilidade de Longo prazo e Fase de Tratamento.

[00694] Uma diminuição de aproximadamente nível 1 na classificação CR-PCSS no Dia 360 foi observada durante a Fase de Observação e em indivíduos tratados duplo-cegos e abertos durante a Fase de Tratamento que receberam os Cursos de Tratamento 1 e 2. Eficácia semelhante foi observada em indivíduos redosados e retratados; na Observação do tratamento no Dia 360 após um segundo tratamento de CCH (indivíduos reexpostos com relação a não expostos ao tratamento), a alteração média (SD) na classificação CR-PCSS foi de -0,9 (0,77).

[00695] Uma diminuição de aproximadamente nível 1 na classificação PR-PCSS no Dia 360 foi observada durante a Fase de Observação e em indivíduos tratados duplo-cegos e abertos durante a Fase de Tratamento recebendo o Curso de Tratamento 1 e o Curso de Tratamento 2. Eficácia semelhante foi observada em indivíduos redosados e retratados na Observação do Dia 360, após um segundo tratamento de CCH, a alteração média (SD) de CCH (indivíduos reexpostos com relação a não expostos ao tratamento) na classificação PR-PCSS foi de -1,0 (0,83).

[00696] A eficácia de CCH na redução da gravidade da celulite foi observada durante as fases de Observação, Durabilidade de Longo prazo e Tratamento (Cursos de Tratamento 1 e 2) na Hexsel CSS, I-GAIS, S-GAIS e na Escala de Satisfação do Indivíduo com Tratamento de EFP. A magnitude da alteração nessas escalas após o tratamento com CCH foi comparável entre indivíduos retratados e redosados e indivíduos não expostos ao tratamento. • Na Pontuação Total da Hexsel CSS durante a:

- Fase de Observação, em indivíduos tratados com CCH, na Visita de Observação do Dia 360, houve uma alteração média (SD) na pontuação total Hexsel CSS de -2,2 (2,34) a partir da linha de base do Dia 71 em comparação com uma alteração média (SD) de -1,2 (1,47) em indivíduos tratados com placebo. - Fase de Durabilidade de Longo prazo, a alteração a partir da linha de base (Estudo 201) no Dia 540 foi de -1,0 (0,83) e no Dia 720 foi de -2,9 (1,74). - Fase de Tratamento, a alteração a partir da linha de base (Estudo 202) no Dia 360 em indivíduos retratados e redosados foi de -2,4 (2,37). • Por investigadores no I-GAIS durante a: - Fase de Observação, a celulite de mais da metade (64,9%) dos indivíduos tratados com CCH, foi avaliada pelos investigadores no I-GAIS como muito mais melhorada (4,1%), muito melhorada (23,7%) ou melhorada (37,1%). - Fase de tratamento, no Dia 360 para o Curso de Tratamento 1, a celulite de aproximadamente três quartos (73,2%) dos indivíduos no total, foi avaliada como melhorada (81 indivíduos; 49,4%), muito melhorada (32 indivíduos; 19,5%), ou muito mais melhorada (7 indivíduos; 4,3%). - Fase de Tratamento, no Dia 360 para o Curso de Tratamento 2, mais da metade (64,2%) dos indivíduos em geral, foi avaliada como melhorada (24 indivíduos; 35,8%), muito melhorada (16 indivíduos; 23,9%) ou muito mais melhorada (3 indivíduos; 4,5%). - Fase de Tratamento, no Dia 360, em indivíduos que receberam um segundo tratamento CCH, a celulite de mais de dois terços (71,8%) dos indivíduos tratados e redosados foi avaliada como melhorada 64 (45,1%), muito melhorada 33 (23,2%), ou muito mais melhorada 5 (3,5%). • Por indivíduos no S-GAIS durante a:

- Fase de Observação, mais de dois terços (69,1%) dos indivíduos tratados com CCH no total, avaliaram sua celulite como ou melhorada (46 indivíduos; 47,4%), muito melhorada (18 indivíduos; 18,6%) ou muito mais melhorada (3 indivíduos; 3,1%). - Durante a Fase de Tratamento, no Dia 360 para o Curso de Tratamento 1, mais de dois terços (66,2%) dos indivíduos em geral avaliaram sua celulite como ou melhorada (73 indivíduos; 44,8%), muito melhorada (18 indivíduos; 11%), ou muito mais melhorada 17 (10,4%). - Durante a Fase de Tratamento, no Dia 360, para o Curso de Tratamento 2, aproximadamente metade (51,5%) dos indivíduos avaliaram sua celulite como melhorada (24 indivíduos; 35,3%), muito melhorada (6 indivíduos; 8,8%) ou muito mais melhorada (5 indivíduos; 7,4%). - Durante a Fase de Tratamento no Dia 360, indivíduos recebendo um segundo tratamento com CCH, mais da metade (64,4%) dos indivíduos em geral avaliaram sua celulite como ou melhorada (64 indivíduos; 44,8%), muito melhorada (14 indivíduos; 9,8%), ou muito mais melhorada 16 (11,2%). • Por indivíduos da Escala de Satisfação do Indivíduo com o Tratamento de EFP, durante a: - Fase de Observação, no Dia 360, 41 (42,3%) e 14 (14,4%) indivíduos tratados com CCH responderam que estavam ou satisfeitos ou muito satisfeitos com o tratamento. - Durante a Fase de Tratamento, no Dia 360 para o Curso de Tratamento 1, Observação do Dia 360, 55 (33,7%) indivíduos estavam satisfeitos e 26 (16,0%) indivíduos estavam muito satisfeitos com o tratamento. - Durante a Fase de Tratamento, no Dia 360 para o Curso de Tratamento 2, Observação do Dia 360, 21 (30,9%) indivíduos estavam satisfeitos e 10 (14,7%) indivíduos estavam muito satisfeitos com o tratamento.

- Durante a Fase de Tratamento, em indivíduos recebendo um segundo tratamento com CCH, 50 (35%) indivíduos estavam satisfeitos e 25 (17,5%) indivíduos estavam muito satisfeitos com o tratamento.

[00697] Os dados deste estudo demonstraram a persistência do efeito de 0,84 mg da CCH por área de tratamento x 3 sessões de tratamento por até 1 ano em 193 indivíduos. A persistência do efeito também foi demonstrada em até 2 anos após o tratamento com CCH em indivíduos amostrados para a avaliação de 2 anos. Os resultados também demonstraram que a administração de CCH em doses de 0,84 mg por via subcutânea por área de tratamento por sessão de tratamento x 3 sessões de tratamento com 21 dias de intervalo, na nádega ou na coxa foi eficaz para tanto tratamentos de indivíduos não expostos quanto em indivíduos retratados e redosados. Uma redução na gravidade da celulite foi mostrada em vários instrumentos, incluindo as escalas de classificação do investigador e do indivíduo. Os resultados das avaliações de eficácia foram semelhantes para as regiões tratadas das nádegas e coxas.

[00698] Em 162 indivíduos reexpostos a um segundo curso de tratamento de 0,84 mg da CCH por área de tratamento x 3 sessões de tratamento, e avaliados quanto à eficácia, não foi observada tolerância ao tratamento (ou seja, nenhuma perda da eficácia do tratamento). Isso foi suportado pelos resultados do Estudo 202, onde a redução observada no CR-PCSS e PR-PCSS foram semelhantes para ambas respostas dos 162 indivíduos após seu segundo curso de tratamento em comparação com seu primeiro curso de tratamento, bem como para a resposta observada nos estudos pivotais de Fase 3.

[00699] Os resultados deste estudo demonstram que a persistência do efeito foi sustentada por até 1 ano, conforme evidenciado pela alteração a partir da linha de base das classificações PR-PCSS e CR- PCSS e resposta sustentada no PR-PCSS e CR-PCSS persistente por 1 ano. Os resultados do estudo também suportaram a persistência da resposta composta de nível 1 e 2 por até 2 anos.

[00700] Os indivíduos reexpostos (ou seja, retratados ou redosados) a CCH no Estudo 202, experienciaram uma redução na gravidade da celulite no CR-PCSS e no PR-PCSS após seu segundo curso de tratamento de uma magnitude semelhante à resposta observada naqueles indivíduos após seu primeiro curso de tratamento e para indivíduos nos estudos duplo-cegos (Estudos 201, 302 e 303).

[00701] A durabilidade da resposta à CCH foi demonstrada em indivíduos avaliáveis durante as Fases de Observação, Durabilidade a Longo prazo e Tratamento do estudo. Entre os respondentes compostos de nível 2 no Estudo 201, todos os indivíduos avaliáveis mantiveram a durabilidade da resposta em que nenhum retornou aos níveis da linha de base de CR-PCSS e PR-PCSS nos Dias 180 e 360. Entre os respondentes do composto de nível 1 no Estudo 201, quase todos os indivíduos mantiveram uma resposta de tratamento durável nos Dias 180 e 360. Resultados semelhantes foram observados em indivíduos tratados neste estudo; todos os indivíduos avaliáveis mantiveram uma resposta durável nos Dias 180 e 360.

[00702] A durabilidade a longo prazo das pontuações de linha de base no Estudo 201 de até 2 anos foi demonstrada em respondentes compostos avaliáveis de nível 1 e 2, em respondentes de CR-PCSS e respondentes de PR-PCSS. Os efeitos de CCH na gravidade da celulite a partir da linha de base no Estudo 201 foram mantidos até pelo menos 1 ano a partir da linha de base no Estudo 201, conforme medido pela Pontuação Total de Hexsel CSS, I-GAIS, S-GAIS e Pontuação da Satisfação do Indivíduo com Tratamento de EFP.

[00703] A eficácia de 0,84 mg da CCH por área de tratamento foi avaliada em ambos os indivíduos não expostos e reexpostos ao tratamento (retratados/redosados) neste estudo. O resultado das medições de eficácia avaliadas pelas pontuações CR-PCSS, PR-PCSS, Hexsel CSS total, I- GAIS, S-GAIS e Satisfação do Indivíduo com Tratamento de EFP foram consistentes com os resultados nas Populações de Observação e demonstraram melhora na gravidade da celulite, seja avaliada pelo investigador ou pelo indivíduo. Resultados semelhantes foram observados nos indivíduos retratados e redosados. É importante notar que dentre os indivíduos que optaram por receber uma segunda dose, poucos indivíduos foram retratados e a maioria redosada.

[00704] Os resultados gerais deste estudo multicêntrico, aberto, de Fase 2 de longo prazo de CCH fornecem evidências adicionais da segurança, tolerabilidade, eficácia e durabilidade de longo prazo de CCH no tratamento de EFP.

[00705] As modalidades descritas neste documento se destinam a ser meramente exemplificativas. Os versados na técnica entenderão que variações e modificações podem ser feitas sem se afastar do escopo da invenção abrangido pelas reivindicações abaixo.

MODALIDADES

[00706] A seguinte lista de modalidades se destina a complementar, em vez de deslocar ou substituir, as descrições anteriores. Modalidade 1. Um método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, compreendendo as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i. Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA); ii. KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA); iii. Kcat (seg-1) de cerca 1,1 a cerca de 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA);

iv. 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA); v.

Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA); vi.

Uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa; vii.

Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HPLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão); viii.

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix.

Uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.000 unidades de f-GPA/mg; x.

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg; xi.

Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina; xii.

Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase em ondulações em ambas as nádegas de acordo com o Tratamento I, em que uma melhora na aparência da celulite é estabelecida por uma escala ou outras ferramentas de medição selecionadas a partir do grupo consistindo em Escala de Gravidade da Celulite de Hexsel (Hexsel CSS), Pontuação de Profundidade de Depressão Hexsel, Escala Likert, Análise de Ondulações, Escala de Gravidade da Celulite Fotonumérica Relatada pelo Médico (CR-PCSS), Escala de Gravidade da Celulite Fotonumérica Relatada pelo Paciente (PR-PCSS), Escala de Melhora Estética Global de Investigador (I-GAIS), Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S-GAIS), Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS), PR-CIS Abreviada, Escala de Autoavaliação do

Indivíduo (SSRS), Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite (SSCT), avaliação pelo médico da gravidade da celulite (fotografia ou outra imagem), Body-Q e uma escala fotonumérica validada ou outra escala usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente.

Modalidade 2. O método da modalidade 1, em que as ondulações tratadas não são dependentes de seu tamanho ou distância umas das outras.

Modalidade 3. O método da modalidade 1, em que as ondulações tratadas são desprovidas de frouxidão, flacidez ou caimento da pele.

Modalidade 4. O método da modalidade 1, em que o paciente tem uma pluralidade de visitas de tratamento e diferentes ondulações são tratadas em diferentes visitas de tratamento.

Modalidade 5. O método da modalidade 1, em que as injeções são feitas com uma agulha de ½ polegada.

Modalidade 6. O método da modalidade 1, em que as injeções são administradas por um médico que não depende de um espaçador, régua, papel ou outro dispositivo para limitar a localização das injeções.

Modalidade 7. O método da modalidade 1, em que pelo menos uma injeção ocorre em um nadir da ondulação.

Modalidade 8. O método da modalidade 1, em que uma pluralidade de injeções ocorre dentro de 2 cm uma da outra.

Modalidade 9. O método da modalidade 1, em que as ondulações tratadas têm menos de 1 cm de comprimento ou mais de 2 cm de comprimento.

Modalidade 10. O método da modalidade 1, em que o paciente experiencia uma rápida taxa de resposta à terapia.

Modalidade 11. O método da modalidade 1, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes que têm todos classificações de linha de base CR-PCSS de moderada ou grave, o tratamento resulta em um resultado selecionado a partir do grupo consistindo em: a.

Pelo menos 50% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico das nádegas; b. pelo menos 50% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; c. pelo menos 5% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico das nádegas; d. pelo menos 5% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; e e. pelo menos 5% dos pacientes experienciam uma diminuição no tamanho das ondulações.

Modalidade 12. O método da modalidade 11, em que o parâmetro de redução do tamanho das ondulações é selecionado a partir do grupo consistindo em volume, comprimento, largura e profundidade.

Modalidade 13. O método da modalidade 11, em que a redução do tamanho de ondulações é de pelo menos uma diminuição de 10% no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base.

Modalidade 14. O método da modalidade 1, em que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

Modalidade 15. O método da modalidade 1, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii.

KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii.

Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 v.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b.

AUX-II (ensaio GPA) i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii.

KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii.

Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 v.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934 Modalidade 16. O método da modalidade 1, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1 cerca de 3,8 ii.

KM, mM: Cerca de 2,07x10-4 iii.

Kcat, seg-1: Cerca de 53 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 18.799 v. kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 256.977 b.

AUX-II (ensaio GPA): i.

Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii.

KM, mM: Cerca de 1,6 iii.

Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 2.997

Modalidade 17. O método da modalidade 1, em que a composição compreende pelo menos 3 das características.

Modalidade 18. O método da modalidade 1, em que a composição compreende pelo menos 4 das características.

Modalidade 19. O método da modalidade 1, em que a composição compreende pelo menos 5 das características.

Modalidade 20. O método da modalidade 1, em que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases.

Modalidade 21. O método da modalidade 1, em que a composição compreende CCH.

Modalidade 22. O método da modalidade 1, em que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg.

Modalidade 23. O método da modalidade 1, em que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades de ABC/mg a 20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg.

Modalidade 24. O método da modalidade 1, em que a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg.

Modalidade 25. O método da modalidade 1, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 26. O método da modalidade 25, em que pelo menos 10% de pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 27. O método da modalidade 25, em que pelo menos 20% de pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 28. O método da modalidade 1, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

Modalidade 29. O método da modalidade 1, em que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por CR-PCSS e/ou PR-PCSS: a.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (pré-tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico das nádegas; b.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; c.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS; d.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no CR- PCSS conforme avaliado ao vivo pelo médico das nádegas; e.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-

PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; f.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS; e g.

Em uma população de pacientes que tiveram todos classificações CR-PCSS de moderada ou grave na linha de base, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a melhora é uma ou mais dentre a. a f. acima.

Modalidade 30. O método da modalidade 1, em que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por análise de ondulações, em que: a. profundidade diminui em pelo menos 5%; b. largura diminui em pelo menos 5%; c. comprimento diminui em pelo menos 5%; d. volume geral diminui em pelo menos 5%; e e. área de superfície diminui em pelo menos 5%. Modalidade 31. Um método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, compreendendo as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i.

Vmax (min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA); ii.

KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA); iii.

Kcat (seg-1) de cerca 1,1 a cerca de 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA);

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix.

Uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.000 unidades de f-GPA/mg; x.

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg; xi.

Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase em ondulações em ambas as nádegas de acordo com o Tratamento I, em que o hematoma diminui significativamente ou soluciona na intensidade de cor entre cerca de 3 dias e 20 dias após uma visita de tratamento.

Modalidade 32. O método da modalidade 31, em que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

Modalidade 33. O método da modalidade 31, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii.

KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b.

AUX-II (ensaio GPA) i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii.

KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934 Modalidade 34. O método da modalidade 31, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1: Cerca de 3,8 ii.

KM, mM: Cerca de 2,07x10-4 iii.

AUX-II (ensaio GPA): i.

Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii.

KM, mM: Cerca de 1,6 iii.

Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v. kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 2.997 Modalidade 35. O método da modalidade 31, em que a composição compreende pelo menos 3 das características.

Modalidade 36. O método da modalidade 31, em que a composição compreende pelo menos 4 das características.

Modalidade 37. O método da modalidade 31, em que a composição compreende pelo menos 5 das características. Modalidade 38. O método da modalidade 31, em que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases. Modalidade 39. O método da modalidade 31, em que a composição compreende CCH. Modalidade 40. O método da modalidade 31, em que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg. Modalidade 41. O método da modalidade 31, em que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades de ABC/mg a

20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg. Modalidade 42. O método da modalidade 31, em que a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg. Modalidade 43. O método da modalidade 1, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Modalidade 44. O método da modalidade 43, em que pelo menos 10% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial. Modalidade 45. O método da modalidade 43, em que pelo menos 20% de pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 46. O método da modalidade 31, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

Modalidade 47. Um método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, compreendendo as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i.

Kcat (seg-1) de cerca 1,1 a cerca de 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA); iv. 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA); v.

Uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa: vii.

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix.

Uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.000 unidades de f-GPA/mg; x.

Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg;

xi.

Biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase em ondulações de ambas as nádegas de acordo com o Tratamento I, em que uma melhora na aparência da celulite é estabelecida por CR-PCSS.

Modalidade 48. O método da modalidade 47, em que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

Modalidade 49. O método da modalidade 47, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii.

KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b.

AUX-II (ensaio GPA) i.

Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii.

KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii.

Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934 Modalidade 50. O método da modalidade 47, em que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a.

AUX-I (ensaio SRC): i.

Vmax, min-1: Cerca de 3,8 ii.

KM, mM: Cerca de 2,07x10-4 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 53 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 18.799 v. kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 256.977 b. AUX-II (ensaio GPA): i. Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii. KM, mM: Cerca de 1,6 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v. kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 2.997 Modalidade 51. O método da modalidade 47, em que a composição compreende pelo menos 3 das características. Modalidade 52. O método da modalidade 47, em que a composição compreende pelo menos 4 das características. Modalidade 53. O método da modalidade 47, em que a composição compreende pelo menos 5 das características. Modalidade 54. O método da modalidade 47, em que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases. Modalidade 55. O método da modalidade 47, em que a composição compreende CCH. Modalidade 56. O método da modalidade 47, em que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg. Modalidade 57. O método da modalidade 47, em que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades de ABC/mg a

20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg. Modalidade 58. O método da modalidade 47, em que a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg.

Modalidade 59. O método da modalidade 47, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 60. O método da modalidade 59, em que pelo menos 10% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 61. O método da modalidade 59, em que pelo menos 20% de pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

Modalidade 62. O método da modalidade 47, em que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

Modalidade 63. O método da modalidade 47, em que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por CR-PCSS: a.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas;

c.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; f.

Em uma população de pacientes que tiveram todos classificações CR-PCSS ou PR-PCSS de moderada ou grave, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo, em que a melhora é uma ou mais dentre a. a f. acima.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i. Vmax(min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC) ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA); ii. KM de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC) ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA); iii. Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC) ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA); iv. 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC) ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA); v. Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC) ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA); vi. uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa; vii. uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medida por HPLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão); viii. uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix. uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f-GPA/mg; x. uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg; xi. menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina; xii. biocarga menor ou igual a 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase em ondulações em ambas as nádegas em conformidade, em que uma melhora na aparência da celulite é estabelecida por uma escala ou outras ferramentas de medição selecionadas a partir do grupo consistindo em Escala de Gravidade da Celulite de Hexsel (Hexsel CSS), Pontuação de Profundidade de Depressão Hexsel, Escala Likert, Análise de Ondulações, Escala de Gravidade da Celulite Fotonumérica Relatada pelo Médico (CR-PCSS), Escala de Gravidade da Celulite Fotonumérica Relatada pelo Paciente (PR-PCSS), Escala de Melhora Estética Global de Investigador (I-GAIS), Escala de Melhora Estética Global do Indivíduo (S- GAIS), Escala de Impacto de Celulite Relatada pelo Paciente (PR-CIS), PR- CIS Abreviada, Escala de Autoavaliação do Indivíduo (SSRS), Satisfação do Indivíduo com Tratamento da Celulite (SSCT), avaliação pelo médico da gravidade da celulite (fotografia ou outra imagem), Body-Q e uma escala fotonumérica validada ou outra usada por médicos e/ou pacientes para avaliar a gravidade da celulite, melhora e/ou satisfação do paciente.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as ondulações tratadas não dependem de seu tamanho ou distância umas das outras.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as ondulações tratadas são desprovidas de frouxidão da pele, flacidez ou caimento da pele.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o paciente tem uma pluralidade de visitas de tratamento e diferentes ondulações são tratadas em diferentes visitas de tratamento.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as injeções são feitas com uma agulha de ½ polegada.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as injeções são administradas por um médico que não depende de um espaçador, régua, papel ou outro dispositivo para limitar a localização das injeções.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que pelo menos uma injeção ocorre em um nadir da ondulação.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que uma pluralidade de injeções ocorre dentro de 2 cm uma da outra.

9. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as ondulações tratadas têm menos de 1 cm de comprimento ou mais de 2 cm de comprimento.

10. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o paciente experiencia uma rápida taxa de resposta à terapia.

11. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que, quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes que têm todos classificações de linha de base CR-PCSS moderadas ou graves, o tratamento resulta em um resultado selecionado a partir do grupo consistindo em: a. pelo menos 50% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas; b. pelo menos 50% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; c. pelo menos 5% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas;

d. pelo menos 5% dos pacientes mostram melhora na gravidade no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS conforme avaliado pelo indivíduo enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; e e. pelo menos 5% dos pacientes experienciam uma diminuição no tamanho das ondulações.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o parâmetro de redução do tamanho da ondulação é selecionado a partir do grupo consistindo em volume, comprimento, largura e profundidade.

13. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a redução do tamanho da ondulação é pelo menos uma diminuição de 10% no Dia 22, 43 ou 71 a partir da linha de base.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

15. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii. KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii. Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 v. Kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b. AUX-II (ensaio GPA) i. Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii. KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 v. Kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 60 a 5.934

16. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 3,8 ii. KM, mM: Cerca de 2,07x10-4 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 53 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 18.799 v. kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 256.977 b. AUX II (ensaio GPA): i. Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii. KM, mM: Cerca de 1,6 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v. kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 2.997

17. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 3 das características.

18. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 4 das características.

19. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 5 das características.

20. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases.

21. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição compreende CCH.

22. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg.

23. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades de ABC/mg a 20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 20 mg

24. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz é de cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de

30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg.

25. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

26. Método, de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que pelo menos 10% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

27. Método, de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que pelo menos 20% de pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

28. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

29. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por CR-PCSS e/ou PR-PCSS: a.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (pré-tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas; b.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; c.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS; d.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no CR- PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas; e.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; f.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS; e g.

Em uma população de pacientes que todos tiveram classificações de CR-PCSS moderadas ou graves na linha de base, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo em que a melhora é uma ou mais dentre a. a f. acima.

30. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido pela análise de ondulação, em que: a. profundidade diminui em pelo menos 5%; b. largura diminui em pelo menos 5%; c. comprimento diminui em pelo menos 5%; d. volume geral diminui em pelo menos 5%; e e. área de superfície diminui em pelo menos 5%.

31. Método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i. Vmax(min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA); ii. KM, de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA); iii. Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA); iv. 1/Kcat, microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA); v. Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA); vi. Uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa;

vii. Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medido por HPLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão); viii. Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix. Uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f-GPA/mg; x. Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg; xi. Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina; xii. Menor ou igual à biocarga de 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase nas ondulações em ambas as nádegas conforme o Tratamento I, em que o hematoma diminui significativamente ou soluciona a intensidade da cor entre cerca de 3 dias e 20 dias após uma visita de tratamento.

32. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

33. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii. KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii. Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 v. Kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b. AUX-II (ensaio GPA) i. Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii. KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 v. Kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 60 a 5.934

34. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 3,8 ii. KM, mM: Cerca de 2,07x10-4 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 53 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 18.799 v. kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 256.977 b. AUX-II (ensaio GPA): i. Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii. KM, mM: Cerca de 1,6 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v. kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 2.997

35. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 3 das características.

36. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o composto compreende pelo menos 4 das características.

37. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 5 das características.

38. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases.

39. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição compreende CCH.

40. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 20 mg.

41. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades de ABC/mg a 20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 20 mg.

42. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg.

43. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

44. Método, de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que pelo menos 10% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

45. Método, de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que pelo menos 20% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

46. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

47. Método para reduzir a gravidade da celulite em ambas as nádegas de um paciente humano, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: a. fornecer uma composição de colagenase tendo pelo menos duas das seguintes características: i. Vmax(min-1) de cerca de 0,08 a 7,70 (ensaio SRC), ou cerca de 0,3 a 30,5 (ensaio GPA); ii. KM de cerca de 4,1 a 410 nanoMolar (ensaio SRC), ou cerca de 0,03 a 3,1 mM (ensaio GPA); iii. Kcat (seg-1) de cerca de 1,1 a 107 (ensaio SRC), ou cerca de 93 a 9.179 (ensaio GPA); iv. 1/Kcat microssegundos de cerca de 376 a 37.222 (ensaio SRC), ou cerca de 4 a 428 (ensaio GPA); v. Kcat/KM, mM-1seg-1 de cerca de 5.140 a 508.814 (ensaio SRC), ou cerca de 60 a 5.934 (ensaio GPA); vi. Uma massa molecular de cerca de 60 kDa a cerca de 130 kDa, ou cerca de 70 a cerca de 130 kDa, ou cerca de 80 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 90 a cerca de 120 kDa, ou cerca de 100 a cerca de 110 kDa; vii. Uma pureza por área de pelo menos 80% conforme medida por HPLC de fase reversa (cromatografia líquida de alta pressão); viii. Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg; ix. Uma potência de cerca de 175.000 a cerca de 500.00 unidades de f-GPA/mg; x. Uma potência de cerca de 5.000 a cerca de 25.000 unidades de ABC/mg; xi. Menor ou igual a 1% por área de uma impureza selecionada a partir do grupo consistindo em clostripaína, gelatinase e leupeptina;

xii. Menor ou igual à biocarga de 1 cfu/mL; e b. injetar uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de colagenase em ondulações de ambas as nádegas de acordo com o Tratamento I, em que uma melhora na aparência da celulite é estabelecida por CR-PCSS.

48. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a dose de colagenase injetada cumulativa é de cerca de 5,04 mg.

49. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 0,08 a 7,70 ii KM: Cerca de 4,1 a 410 nanoMolar iii. Kcat, seg-1: Cerca de 1,1 a 107 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 376 a 37.222 v. Kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 5.140 a 508.814 b. AUX-II (ensaio GPA) i. Vmax, min-1: Cerca de 0,3 a 30,5 ii. KM, mM: Cerca de 0,03 a 3,1 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 93 a 9.179 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 4 a 428 v. Kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 60 a 5.934

50. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição de colagenase compreende AUX-I e AUX-II tendo as seguintes características: a. AUX-I (ensaio SRC): i. Vmax, min-1: Cerca de 3,8 ii. KM, mM: Cerca de 2.07x10-4 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 53 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 18.799 v. kcat/KM, mM-1seg-1: Cerca de 256.977 b. AUX-II (ensaio GPA): i. Vmax, min-1: Cerca de 15,4 ii KM, mM: Cerca de 1,6 iii. Kcat, seg-1: Cerca de 4.636 iv. 1/Kcat, microssegundos: Cerca de 216 v. kcat/KM, mM-1sec-1: Cerca de 2.997

51. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 3 das características.

52. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 4 das características.

53. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição compreende pelo menos 5 das características.

54. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição compreende cerca de 1 mg a 20 mg de uma ou mais colagenases.

55. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição compreende CCH.

56. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 10.000 unidades de ABC/0,58 mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 20 mg.

57. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a composição tem uma potência de cerca de 15.000 unidades ABC/mg a 20.000 unidades de ABC/mg e a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 20 mg.

58. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que a quantidade terapeuticamente eficaz é cerca de 1 mg a 10 mg e a composição tem uma potência de cerca de 20.000 a cerca de 30.000 unidades de f-SRC/mg ou cerca de 175.000 a cerca de 300.000 unidades de f-GPA/mg.

59. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes mantendo seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

60. Método, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que pelo menos 10% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

61. Método, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que pelo menos 20% dos pacientes mantêm seu nível de melhora em relação à linha de base do pré-tratamento por pelo menos 71 dias após a dose inicial.

62. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que quando o tratamento é administrado a uma população de pacientes, o tratamento resulta em pelo menos 5% dos pacientes demonstrando melhora em relação à linha de base do pré-tratamento e mostrando um aumento adicional na melhora ao longo do tempo.

63. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que o tratamento resulta em pelo menos um dos seguintes pontos finais de eficácia, conforme medido por CR-PCSS: a. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 dias a partir da linha de base (pré-tratamento "Dia 1") de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas; b. Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-

PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; c.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 2 níveis no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 2 níveis de gravidade no PR-PCSS; d.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no CR- PCSS, conforme avaliado ao vivo pelo médico, das nádegas; e.

Uma melhora na gravidade no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 a partir da linha de base (Dia 1) de pelo menos 1 nível de gravidade no PR- PCSS conforme avaliado pelo paciente enquanto visualiza uma imagem digital das nádegas; f.

Uma melhora demonstrada por uma resposta composta de 1 nível no Dia 22, 43, 71, 90, 180 ou 365 definida como um paciente com uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no CR-PCSS e uma melhora a partir da linha de base de pelo menos 1 nível de gravidade no PR-PCSS; e g.

Em uma população de pacientes que todos tiveram classificações de CR-PCSS ou PR-PCSS moderadas ou graves, a melhora em pelo menos uma área de tratamento foi estatisticamente significativa em comparação com o placebo em que a melhora é uma ou mais dentre a. a f. acima.