KR20210068429A - 점막 애주번트 - Google Patents

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KR20210068429A
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료타로 미츠마타
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Abstract

점막 면역원성이 높고 또한 안전성이 높은 점막 백신의 조제에 유용한 점막 애주번트, 및 그것을 함유하는 점막 백신 조성물을 제공한다.
TGDK 로 이루어지는 점막 애주번트.

Description

점막 애주번트
본 발명은, 항원의 점막 면역 유도를 증강시키는, 점막 애주번트에 관한 것이다.
점막 백신은, 항원을 경비 (經鼻) 등의 경점막 (經粘膜) 으로 투여함으로써 점막 국소의 면역과 전신성의 면역 응답을 모두 야기하고, 이로써 병원체에 대해 2 중의 방위선을 구축할 수 있다. 한편으로, 점막 백신으로서 실용되고 있는 것은 감염성을 갖는 생백신 혹은 점막 친화성을 갖는 특수한 독소를 항원으로 한 백신으로, 그 밖의 불활화 항원은 단독의 투여로는 충분한 면역을 유도할 수 없어, 애주번트 등의 조합이 필요해진다.
점막 백신으로 충분한 면역을 야기하기 위한 방법으로서, 종래에는 감염성을 갖는 약독화된 병원체가 사용되어 왔다. 그러나, 약독 생백신은 감염성을 갖기 때문에 부반응이 강하고, 예를 들어 경구 생폴리오 백신의 폴리오 백신 관련성 마비는 드물지만 불가피한 부반응으로, 백신주의 신경 독성 복귀에 의해 발증한다고 일컬어지고 있다. 따라서, 점막 백신에 있어서도 안전성이 높은 불활화 항원을 사용해야 하지만, 특수한 독소 등의 항원을 제외하고는, 경점막의 투여로 충분한 면역을 부여하는 것이 어렵다. 이것을 개선하기 위해서 점막 애주번트의 첨가를 생각할 수 있고, 콜레라 독소나 독소원성 대장균의 이열성독소 (LT) 가 대표적인 점막 애주번트로서 알려져 있다 (비특허문헌 1 - 2).
그러나, 과거의 임상 시험에 있어서 LT 의 경비 투여에 의해 안면 신경 마비 (벨 마비) 가 일어나, 독소 그 자체를 애주번트로서 사용하는 것은 안전성의 면에서 문제가 있다고 인식되어 있다. 또, 그 밖에도 2 본쇄 RNA (polyI : C) (특허문헌 1) 도 점막 애주번트 활성을 갖는데, 염증이나 사이토카인 혈증의 유발 때문에 아직 실용에 이르지 않았다.
최근의 일본에 있어서의 경비 투여 인플루엔자 백신의 개발에서는, 시판되는 인플루엔자 HA 백신의 항원인 스플릿 항원이 아니라, 보다 면역원성이 높은 불활화 전입자 (全粒子) 를 항원으로 하여 임상 시험이 실시되고 있다 (비특허문헌 3). 이것은 스플릿 항원에서는 경점막 투여로 충분한 면역 응답을 유도할 수 없기 때문이지만, 불활화 전입자 항원에서는 피하 투여에 있어서 특히 소아에게서 부반응의 문제 (투여 부위의 국소 반응 및 발열) 가 있어 현재는 시장에 유통되고 있지 않다. 따라서, 안전성이 높은 스플릿 항원으로 불활화 전입자 항원과 동일한 정도의 면역 유도를 달성할 것이 요망되고 있다.
테트라갈로일-D-리신 덴드리머 (Tetragalloyl-D-Lysine Dendrimer, TGDK) 는, 점막에 존재하는 항원 도입 세포인 Microfold cell (M 세포) 에 특이적으로 결합하는 분자이다 (비특허문헌 4). 따라서, TGDK 를 항원 등에 화학 결합시킴으로써, 백신 항원을 M 세포에 효율적으로 딜리버리하는 것이 가능해져, 면역 응답을 향상시킬 수 있다. 예를 들어, 특허문헌 2 에는, TGDK-CH2-CH2-NH2 가, 펩티드 결합 또는 시프 베이스 등을 개재하여, 펩티드, 단백질, 지질, 폴리에틸렌글리콜류 또는 당과 결합함으로써, 장관 면역 부활제로서 사용할 수 있는 것이 개시되어 있다. 또, 특허문헌 3 에는, Hub 항원과 TGDK 와 페투인의 공유 결합체가 HIV/AIDS 의 분자 의태 점막 백신이 될 수 있는 것이 개시되어 있다.
그러나, TGDK 분자 자체가, 점막 애주번트 활성을 갖는 것은 전혀 알려져 있지 않다.
일본 공개특허공보 2005-97267호 국제 공개 제2007/052641호 국제 공개 제2013/024859호
Xu-Amano, J., H. Kiyono, R. J. Jackson, H. F. Staats, K. Fujihashi, P. D. Burrows, C. O. Elson, S. Pillai, J. R. McGhee. 1993. Helper T cell subsets for immunoglobulin A responses : oral immunization with tetanus toxoid and cholera toxin as adjuvant selectively induces Th2 cells in mucosa associated tissues. J. Exp. Med. 1993 ; 178 (4) : 1309-20 Takahashi, I., M. Marinaro, H. Kiyono, R. J. Jackson, I. Nakagawa, K. Fujihashi, S. Hamada, J. D. Clements, K. L. Bost, J. R. McGhee. 1996. Mechanisms for mucosal immunogenicity and adjuvancy of Escherichia coli labile enterotoxin. J. Infect. Dis. 1996 ; 173 (3) : 627-35 Ainai A, Tamura S, Suzuki T, van Riet E, Ito R, Odagiri T, et al. Intranasal vaccination with an inactivated whole influenza virus vaccine induces strong antibody responses in serum and nasal mucus of healthy adults. Human vaccines & immunotherapeutics. 2013 ; 9 (9) : 1962-70. Misumi S, Masuyama M, Takamune N, et al. Targeted Delivery of Immunogen to Primate M Cells with Tetragalloyl Lysine Dendrimer Journal of Immunology, 2009 ; 182 (10) : 6061-6070
본 발명은, 점막 면역원성이 높고 또한 안전성이 높은 점막 백신의 조제에 유용한 점막 애주번트, 및 그것을 함유하는 점막 백신 조성물을 제공하는 것에 관한 것이다.
본 발명자들은, 상기 과제를 감안하여 검토한 결과, 종래, 백신 항원에 화학 결합시켜 당해 항원을 M 세포에 딜리버리하기 위해서 사용되고 있던 TGDK 가, 의외로 그 자체로 애주번트 활성을 갖고, 항원의 점막 면역 유도능을 증강시킬 수 있는 것을 알아내었다.
즉, 본 발명은 이하의 1) ∼ 10) 에 관련된 것이다.
1) TGDK 로 이루어지는 점막 애주번트.
2) TGDK 및 약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 점막 애주번트 조성물.
3) 1) 의 점막 애주번트 및 면역원을 함유하는 점막 백신 조성물.
4) 면역원이 인플루엔자 바이러스의 전입자 또는 스플릿 항원인, 3) 의 점막 백신 조성물.
5) TGDK 와 면역원을 혼합하는 것을 특징으로 하는 3) 또는 4) 의 점막 백신 조성물의 조제 방법.
6) 점막 애주번트로서 사용하기 위한 TGDK.
7) 점막 백신 요법에 사용하기 위한, TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물.
8) 점막 애주번트를 제조하기 위한 TGDK 의 사용.
9) 점막 백신을 제조하기 위한, TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물의 사용.
10) TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물을, 그것을 필요로 하는 대상에 투여하는, 점막 백신 요법.
본 발명의 점막 애주번트에 의하면, 안전한 불활화 항원을 사용한 점막 백신의 조제가 가능해진다. 예를 들어, 현재 유통되는 인플루엔자 HA 백신과 같이, 보다 안전성이 높은 스플릿 항원을 사용한 점막 백신을 제공할 수 있고, 예방약으로서 의약품 산업에 크게 공헌할 수 있다.
도 1 은, 스플릿 항원 투여군의 A/California/07/2009 주 (株) 특이적 IgG 항체가 (抗體價) 이다.
도 2 는, 스플릿 항원 투여군의 B/Texas/2/2013 주 특이적 IgG 항체가이다.
도 3 은, 불활화 전입자 항원 투여군의 A/California/07/2009 주 특이적 IgG 항체가이다.
도 4 는, 불활화 전입자 항원 투여군의 B/Texas/2/2013 주 특이적 IgG 항체가이다.
도 5 는, B/Texas/2/2013 주 특이적 IgG1 및 IgG2a 항체가의 각 군에 있어서의 기하 평균값이다.
도 6 은, A/California/07/2009 주 특이적 IgG 항체가이다.
도 7 은, B/Texas/2/2013 주 특이적 IgG 항체가이다.
본 발명에 있어서, 「TGDK」란, 테트라갈로일-D-리신 덴드리머 (Tetragalloyl-D-Lysine Dendrimer) 의 약어로, N2,N6-비스[N2,N6-비스(3,4,5-트리하이드록시벤조일)-리실]-N-(2-아미노에틸)-리신아미드를 가리킨다. TGDK 는, 점막에 존재하는 항원 도입 세포인 M 세포의 표적 분자로서 알려져 있다.
TGDK 는, 예를 들어, 갈산 (Gallic acid) 과 D-리신 (D-Lysine) 을 사용하여 테트라갈로일-D-트리리시닐 디에틸아민 (tetragalloyl-D-trilysinyl diethylamine) 고상법을 사용하여 제조할 수 있다 (상기 비특허문헌 4 참조).
후기하는 실시예에 나타내는 바와 같이, 인플루엔자 백신주 (스플릿 항원/불활화 전입자 항원) 와 TGDK 를 혼합하여 조제한 백신 조성물을 마우스에 점막 투여한 경우에 유도되는, 당해 항원에 특이적으로 결합하는 IgG 의 역가는, TGDK 비첨가군에 대해 유의하게 높아진다. 또 스플릿 항원에 TGDK 를 첨가하여 면역 유도한 경우, 불활화 전입자 항원만을 사용하여 면역 유도한 경우와 동일한 정도의 IgG 역가가 얻어진다. 그리고, IgG1 및 IgG2a 의 기하 평균 항체가 (GMT) 를 보면, 인플루엔자 바이러스에 대한 감염 방어능이 우수한 IgG2a 가 현저하게 상승한다.
즉, TGDK 에는, 면역원 (항원) 을 점막 투여하는 경우에 있어서, 항체 유도능을 높이는 점막 애주번트 활성이 있고, 따라서, TGDK 는 점막 애주번트가 되고, 또 TGDK 와 약학상 허용되는 담체를 함유하는 조성물은 점막 애주번트 조성물이 될 수 있다. 또, TGDK 는 점막 애주번트 또는 점막 애주번트 조성물을 제조하기 위해서 사용할 수 있다.
본 발명에 있어서, 「점막 애주번트」란, 면역원을 점막 투여하는 경우에 있어서, 면역원에 대한 면역 응답을 증가시키는 물질을 의미한다.
여기서, 「점막 투여」란, 점막을 경유하는 투여 형태를 말하고, 「점막」이란, 척추 동물에 있어서, 소화기, 호흡기, 비뇨생식기, 눈 등, 특히 외통성 (外通性) 의 중강 (中腔) 기관의 내벽을 말한다. 따라서, 그러한 점막 투여로는, 예를 들어, 비강 투여 (경비 투여), 구강 투여, 질 내 투여, 상기도 투여, 폐포 투여, 점안 투여 등을 들 수 있는데 그것들에 한정되지 않는다.
본 발명의 점막 애주번트 또는 점막 애주번트 조성물은, 면역원과 조합하여 점막 투여할 수 있고, 투여는 면역원의 투여와 동시여도 되고, 면역원의 투여 전 또는 후여도 된다.
본 발명의 점막 애주번트 또는 점막 애주번트 조성물의 투여량은, 투여 대상, 투여 방법, 투여 형태, 항원 물질의 종류에 따라 적절히 결정할 수 있다.
본 발명의 점막 애주번트는, 면역원과 조합하여, 점막 백신 조성물로 할 수 있다. 본 발명의 점막 백신 조성물은, 면역원과 TGDK 를 혼합함으로써 조제할 수 있고, 추가로 약학적으로 허용되는 담체를 적절히 첨가하여 적당한 제제로 할 수 있다. 본 발명의 점막 백신 조성물에 있어서, TGDK 는, 면역원 그 밖의 성분과 화학적 결합 상태에 있는 경우는 없고, 유리된 분자 상태로 존재한다.
「면역원」(항원) 으로는, 경점막 감염 병원체 (예를 들어, 바이러스 또는 병원 세균 등) 또는 당해 병원체로부터 정제된 천연의 산생물, 또는 유전자 재조합 등의 수법에 의해 인위적으로 제작된 단백질, 펩티드, 다당류, 구체적으로는, 완전 바이러스 입자인 비리온, 불완전 바이러스 입자, 비리온 구성 입자, 바이러스 비구조 단백질, 병원균 유래의 단백질 혹은 당단백질, 감염 방어 항원, 중화 반응의 에피토프 등을 들 수 있고, 감염능을 갖는 것과 감염능을 상실시킨 (불활화 항원) 것이 포함된다. 불활화 항원으로는, 예를 들어, 물리적 (예를 들어, X 선 조사, 열, 초음파), 화학적 (포르말린, 수은, 알코올, 염소) 등의 조작에 의해 불활화된 것을 들 수 있는데 그것들에 한정되지 않는다. 경점막 감염 병원체 유래의 면역원은, 안전성의 관점에서, 상기 바이러스 또는 병원균 유래의 불활화 항원인 것이 바람직하다.
바이러스로는, 예를 들어 수두 바이러스, 홍역 바이러스, 멈프스 바이러스, 폴리오 바이러스, 로타 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 아데노 바이러스, 헤르페스 바이러스, 중증 급성 호흡기 감염 증후군 (SARS) 바이러스, 인간 면역 부전 바이러스 (HIV), 인유두종 바이러스, 풍진 바이러스 등을 들 수 있고, 바람직하게는 인플루엔자 바이러스 또는 인간 면역 부전 바이러스이며, 보다 바람직하게는 인플루엔자 바이러스이다. 인플루엔자 바이러스는, 전입자 바이러스를 사용할 수도 있지만, 본 발명에 있어서는, 바이러스의 입자를 해열 (解裂) 하여, 엔벨로프 중의 지질을 제거한 스플릿 항원을 사용할 수 있다.
병원균으로는, 백일해균, 수막염균, 인플루엔자 b 형균, 폐렴구균, 결핵균, 콜레라균, 디프테리아균 등을 들 수 있다.
점막 백신 조성물의 제형으로는, 예를 들어, 액제, 현탁제, 분말제 등을 들 수 있다.
액제로는, 정제수, 완충액 등에 용해한 것 등을 들 수 있다. 현탁제로는, 메틸셀룰로오스, 하이드록시메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 카세인 등과 함께 정제수, 완충액 등에 현탁시킨 것 등을 들 수 있다. 분말제로는, 메틸셀룰로오스, 하이드록시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등 과 함께 잘 혼합한 것 등을 들 수 있다.
이들 제제에는, 통상적으로 사용되고 있는 흡수 촉진제, 계면 활성제, 보존제, 안정화제, 방습제, 보습제, 용해제 등을 필요에 따라 첨가할 수 있다.
또한, 본 발명의 점막 백신 조성물에는, 당해 백신의 면역원성 및 안전성을 저해하지 않는 한에 있어서, TGDK 이외의 애주번트를 함유할 수도 있다.
본 발명의 점막 백신 조성물에 함유되는 면역원의 양은, 항원 특이적 IgG 를 산생하기에 충분한 양이면 특별히 한정되는 것은 아니고, 병용하는 TGDK 와의 비율도 감안하여 적절히 설정할 수 있다. 예를 들어, 항원으로서 인플루엔자 바이러스의 스플릿 항원을 사용한 경우, 1 회의 투여 용량인 1 ∼ 60 ㎍ HA (HA 환산) 의 범위 내에서 함유하면 되고, 9 ∼ 15 ㎍ HA (HA 환산) 가 보다 바람직하다. 상기 농도는, HA 단백질의 농도를 일원 방사 면역 확산 시험법이나 HA 함량법 등의, WHO 나 국가의 기준으로 정해진 시험법으로 측정함으로써 얻어지는 값이다.
또, 점막 백신 조성물에 있어서의 TGDK 의 함유량은, 항체 역가를 고려하여 적절히 조정 가능하지만, 예를 들어 1 회의 투여 용량인 0.03 ∼ 30 ㎍ 의 범위 내에서 함유하면 되고, 0.03 ∼ 0.3 ㎍ 이 보다 바람직하다.
본 발명의 백신 조성물의 투여 경로는 특별히 한정되지 않고, 경구 투여여도 되고 비경구 투여 (예를 들어 비강 투여, 점안 투여) 여도 되며, 예를 들어, 비강 내 또는 구강 내에 적하, 분무 또는 스프레이함으로써 투여된다.
본 발명의 애주번트 조성물 또는 백신 조성물의 투여 대상은, 인간 및 인간을 제외한 포유 동물을 들 수 있지만, 인간이 바람직하다. 인간을 제외한 포유 동물로는, 예를 들어, 마우스, 래트, 햄스터, 모르모트, 토끼, 돼지, 소, 염소, 말, 양, 개, 고양이, 원숭이, 오랑우탄, 침팬지 등을 들 수 있다.
실시예
이하, 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들의 예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
(1) 인플루엔자 HA 백신 「생연」의 A/H1N1 아형 (A/California/07/2009 주) 및 B/Yamagata 계통 (B/Texas/2/2013 주) 의 각 원액을 스플릿 항원으로 하여, 10 ㎕ 당 각 주의 헤마글루티닌이 1 ㎍ 이 되도록 각 스플릿 항원을 혼합하고, 아울러 TGDK 를 종 (終) 농도로 0.03 ∼ 30 ㎍/10 ㎕ 가 되도록 첨가하였다. 또, 대조로서 애주번트 비첨가의 투여액 및 TGDK 는 3 분자의 리신으로 형성되는 골격의 1 급 아민에 갈산 (Gallic acid) 을 4 분자 결합한 것이기 때문에, TGDK 의 대조로서 갈산을 30 ㎍/10 ㎕ 가 되도록 첨가한 투여액도 함께 조제하였다 (표 1). 또, 스플릿 항원과 마찬가지로 A/H1N1 아형 (A/California/07/2009 주) 및 B/Yamagata 계통 (B/Texas/2/2013 주) 의 불활화 전입자 항원을 10 ㎕ 당 각 주의 헤마글루티닌이 1 ㎍ 이 되도록 혼합하고, 아울러 TGDK 가 0.03 혹은 0.3 ㎍, 갈산이 30 ㎍ 이 되도록 각 불활화 전입자 항원의 투여액을 조제하였다 (표 1).
본 실시예에서 사용한 불활화 전입자 항원의 조제는 이하에 기재하는 바와 같다. 12 일령의 발육 계란의 장뇨막강 내에 접종하고, 2 일간 배양 후에 장뇨액을 채취하였다. 채취한 장뇨액을 필터 여과로 청징화한 후, 황산바륨염에 흡착시켜, 12 ％ 시트르산나트륨 용액으로 용출하여 인플루엔자 바이러스를 회수하였다. 회수한 바이러스는, 다시 한외 여과로 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 치환하고, 버퍼 치환 후에 자당 밀도 구배 원심으로 인플루엔자 바이러스를 함유하는 획분을 회수함으로써 정제하였다. 이 정제 인플루엔자 바이러스에 종농도 0.05 ％ 가 되도록 불활화제인 베타 프로피오락톤을 첨가하고, 4 ℃, 24 시간의 반응으로 인플루엔자 바이러스의 감염성을 불활화시켰다. 이 불활화 반응 후에 한외 여과 (MWCO : 100,000) 로 버퍼를 1 w/w％ 자당 함유 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 치환하고, 이것을 불활화 전입자 백신으로 하였다.
(2) 상기와 같이 조제한 투여액 (표 1) 을, 3 주 간격으로 2 회, BALB/c 마우스 (암컷, 5 주령) 에 편비 (片鼻) 5 ㎕ (합계 10 ㎕) 투여하고 (각 군 8 마리), 2 회째 투여로부터 2 주일 후에 전체 채혈하였다. 원심 분리에 의해 혈청을 조제하고, 혈청의 A/California/07/2009 주 및 B/Texas/2/2013 주에 특이적으로 결합하는 IgG (Total IgG) 역가를 측정하였다. 또, IgG 서브 클래스인 IgG1 및 IgG2a 의 각 역가는, 스플릿 항원 및 불활화 전입자 항원의 애주번트 비첨가군 및 TGDK 0.3 ㎍ 첨가군의 혈청에 대해 B/Texas/2/2013 주에 특이적인 항체가를 측정하였다.
Figure pct00001
(3) 스플릿 항원 투여군 (A ∼ F) 및 애주번트 비첨가의 불활화 전입자 항원 투여군 (G) 의 IgG 역가는 도 1 및 2 에 나타내는 바와 같다. 스플릿 항원에 TGDK 를 투여당 0.03 ∼ 30 ㎍ 첨가함으로써 혈중의 항원 특이적인 IgG 역가는, 어느 주에 있어서도 애주번트 비첨가에 대해 높아져, 불활화 전입자 항원과 동일한 정도가 되었다. 특히, A/California/07/2009 주에 대한 IgG 역가는 TGDK 를 0.03 ∼ 0.3 ㎍ 첨가한 군, B/Texas/2/2013 주에 대한 IgG 역가는 TGDK 를 0.03 ∼ 3 ㎍ 첨가한 군에 있어서는, 애주번트 비첨가에 대해 유의하게 높은 IgG 역가를 나타내었다 (만·휘트니의 U 검정, p ＜ 0.05). 또, 스플릿 항원에 갈산을 첨가한 경우, A/California/07/2009 주에 대한 IgG 역가는 애주번트 비첨가와 동일한 정도이고, B/Texas/2/2013 주에 대한 IgG 역가는 애주번트 비첨가에 대해 유의하게 저하되었다. 폴리페놀은 항산화 작용이나 면역을 부활시키는 효과를 갖고 있다고 일컬어지고 있는데, 본 실시예에 있어서는 단분자의 갈산에 항체 유도를 높이는 애주번트 활성은 없고, 3 분자의 리신으로 형성되는 골격의 1 급 아민에 갈산을 4 분자 결합한 TGDK 의 구조가 애주번트 활성 발휘에 중요하다고 생각되었다.
다음으로, 불활화 전입자 항원 투여군 (H ∼ J) 의 결과를 도 3 및 4 에 나타내는데, 스플릿 항원과 마찬가지로, 불활화 전입자 항원에 TGDK 를 투여당 0.03 혹은 0.3 ㎍ 첨가함으로써 어느 주에 대한 IgG 역가도 향상되고, 갈산의 첨가에서는 A/California/07/2009 주에 대한 IgG 역가는 애주번트 비첨가군과 동일한 정도, B/Texas/2/2013 주에 대한 IgG 역가는 저하되는 것을 알 수 있었다. 따라서, 스플릿 항원과 동일한 결과가 불활화 전입자 항원에서도 얻어졌지만, 불활화 전입자 항원에서는 TGDK 의 첨가에 의한 IgG 역가 향상의 효과가 스플릿 항원에 비해 작다. 이것은, 불활화 전입자 항원 자체의 면역원성이 높기 때문이지만, 면역원성이 상이한 2 종류의 항원 (스플릿 항원 및 불활화 전입자 항원) 의 어느 것에 있어서도 TGDK 는 경비 투여에 있어서의 애주번트 활성을 발휘하는 것을 확인할 수 있었다.
또, 도 5 에 각 군의 IgG1 및 IgG2a 의 기하 평균 항체가 (GMT) 를 나타내는데, 스플릿 항원 및 불활화 전입자 항원의 어느 것에 있어서도 IgG2a 가 TGDK 의 첨가에 의해 현저하게 상승하고 있는 것을 알 수 있다. Th1 형의 응답에 의해 유도되는 IgG2a 는, Th2 형의 응답에 의해 유도되는 IgG1 보다 인플루엔자 바이러스에 대한 감염 방어능이 우수하기 때문에, TGDK 의 첨가에 의해 유효성이 더욱 향상될 것이 기대된다.
참고예 1
(1) 실시예 1 과 동일한 항원을 사용하여, 표 2 의 시험군에서 피하 투여에 있어서의 TGDK 의 애주번트 활성을 평가하였다. 본 평가에서는 피하 투여의 애주번트로서 실적이 있는 Alm (Thermo Fisher Scientific 사 제조, Imject Alum) 을 대조로서 추가하였다.
Figure pct00002
(2) A/California/07/2009 주에 대한 IgG 역가를 도 6, B/Texas/2/2013 주에 대한 IgG 역가를 도 7 에 나타내는데, 어느 주에 대해서도 스플릿 항원의 단독 투여에 대해 TGDK 를 첨가한 군은 동일한 정도의 IgG 역가로, 애주번트 활성은 확인되지 않았다. 한편으로, Alm 및 불활화 전입자 투여군 (WV) 에서는, 스플릿 항원의 단독 투여보다 높은 IgG 역가를 나타내었다. 또한, 피하 투여에 있어서는 갈산의 첨가군은 어느 주에 있어서도 스플릿 항원의 단독 투여군과 동일한 정도의 IgG 역가이고, 갈산 유도체의 TGDK 및 갈산의 어느 것도 피하 투여에 있어서 애주번트 활성을 가지고 있지 않았다.

Claims (10)

  1. TGDK 로 이루어지는 점막 애주번트.
  2. TGDK 및 약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 점막 애주번트 조성물.
  3. 제 1 항에 기재된 점막 애주번트 및 면역원을 함유하는 점막 백신 조성물.
  4. 제 3 항에 있어서,
    면역원이 인플루엔자 바이러스의 전입자 또는 스플릿 항원인, 점막 백신 조성물.
  5. TGDK 와 면역원을 혼합하는 것을 특징으로 하는 제 3 항 또는 제 4 항에 기재된 점막 백신 조성물의 조제 방법.
  6. 점막 애주번트로서 사용하기 위한 TGDK.
  7. 점막 백신 요법에 사용하기 위한, TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물.
  8. 점막 애주번트를 제조하기 위한 TGDK 의 사용.
  9. 점막 백신을 제조하기 위한, TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물의 사용.
  10. TGDK 및 면역원을 함유하는 조성물을, 그것을 필요로 하는 대상에 투여하는, 점막 백신 요법.
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