KR20210065897A - 강황 추출물을 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
강황 추출물을 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 강황(Curcuma longa) 추출물을 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 강황 추출물은, 중성지방, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤 및 C/EBP를 감소시키고, HDL 콜레스테롤 및 p-AMPK를 증가시켜, 지질대사의 균형을 조절하는 것을 확인하였으며, ALT 및 AST의 감소능을 확인하여, 지질대사와 관련된 장기인 간에대한 보호효과도 확인하였다. 또한, 항산화 활성인자인 SOD 및 CAT가 증가한 것을 확인하였으며, 육안 및 광학현미경으로 간에 축적되는 지방질의 감소를 확인하였기에, 본 발명의 강황 추출물은 이상지질혈증에 우수한 효과가 있다는 것을 확인하였다.
Description
본 발명은, 강황(Curcuma longa) 추출물을 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
이상지질혈증(dyslipidemia)이란 혈중에 총 콜레스테롤, LDL(Low density lipoprotein) 콜레스테롤, 중성지방이 증가된 상태이거나 HDL(High density lipoprotein) 콜레스테롤이 감소된 상태를 말한다. 대부분 비만, 당뇨병, 음주와 같은원인에 의해서 이상지질혈증이 발생할 수 있으나, 유전적 요인으로 혈액 내 특정 지질이 증가 되어 이상지질혈증을 보이는 경우도 있다.
이상지질혈증은 특별한 증세를 보이지 않는 경우가 대부분이나, 이를 조절하지 않고 장기간 방치하면 콜레스테롤이 혈관 벽에 쌓여 혈관을 좁히거나 막아 협심증, 심근경색, 뇌졸중(뇌경색)과 같은 심뇌혈관질환을 일으킬 수 있다.
이상지질혈증의 원인은 크게 두 가지로 1차성과 2차성으로 나눌 수 있다. 1차성은 지방 위주의 식생활, 운동 부족, 유전적인 요인 등에 의해 발생하는 원발성이상지질혈증을 말하며, 2차성은 갑상선기능저하증, 만성간질환, 신증후군 등의 기저 질환 또는 임신, 약물 복용 등에 의해 유발되는 이상지질혈증을 말한다. 가족성 고콜레스테롤혈증이나 가족성 고중성지방혈증 등 유전적 소인에 의한 경우 황색종, 황색판종, 간비대, 신장비대 등이 나타날 수 있지만, 대개 무증상으로 대부분 혈액검사에서 발견된다.
이상지질혈증 치료의 기본은 식이요법으로, 일반적으로 약물요법은 3개월 정도의 식이요법 후에도 증상이 계속될 때 시행한다.
이상지질혈증의 종류에 따른 약물은 콜레스테롤 합성 억제제인 스타틴계가 주류를 이루며 중성지방의 수준에 따라 피브린산계, 니코틴산을 복합 사용한다. 이들 약제 복용 시, 단기치료인 경우 2 ~ 3개월 간격으로, 장기 치료인 경우 4 ~ 6개월마다 혈중 지질을 측정해야 하며 타질환과 합병증이 있는 사람에 대해서는 세부적인 지침이 제시된다.
그러나 스타틴계 약물의 경우 복통, 변비, 두통, 간 효소수치 증가 등의 증상을 일으킬 수 있고, 피브린산계의 경우 소화기 장애 및 담석이 생기는 부작용이 있을 수 있으며 니코틴산의 경우도 홍조와 간기능장애 및 혈당조절 장애의 부작용이 나타나는 문제점이 있다. 또한, 이상지질혈증 치료제는 고혈압약과 마찬가지로 평생 꾸준히 복용해야 하는 약물로, 전문의들은 약물 복용으로 혈중 콜레스테롤 수치가 정상 수준으로 돌아왔다 해도 지속적인 관리차원에서 약물을 계속 복용해야 한다고 지적하고 있는데 혈중 콜레스테롤의 수치가 정상 수준으로 돌아 왔다고 약물 복용을 중단하면 혈중 콜레스테롤치가 다시 원상 복귀되거나 오히려 상승할 수 있기 때문이다. 따라서, 약물을 장기 투여할 때에도 상기와 같은 부작용이 없고 우수한 약효를 갖는 새로운 물질의 개발이 필요한 실정이다.
강황(Curcuma longa)은 생강목에 속하는 다년생 식물로서 인도를 중심으로 한 열대, 아열대 지역에서 주로 재배되며 줄기와 뿌리를 식용, 약용 등으로 사용된다. 강황의 뿌리줄기는 주로 한약재로 사용되며, 맵고 쓴 맛이 나는 황색의 약재로서, 통증완화와 월경불순에 효능이 있고, 인도에서는 타박상이나 연좌에 바르는 약으로 쓰며 카레 가루의 향신료로 쓰기도 한다. 따라서, 본 발명은, 천연물질인 강황을 이용하여, 효과적으로 이상지질혈증을 치료하고자 하였다.
본 발명의 목적은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증(dyslipidemia)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 약학적으로 유효한 양의 강황(Curcuma longa) 추출물을 인간을 제외한 개체에 투여하여, 지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키고, HDL콜레스테롤 증가 및 LDL 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키는 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증(dyslipidemia)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 강황(Curcuma longa) 추출물을 인간을 제외한 개체에 투여하여, 지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키고, HDL콜레스테롤 증가 및 LDL 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키는 방법을 제공한다.
본 발명의 강황 추출물은, 중성지방, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤 및 C/EBP를 감소시키고, HDL 콜레스테롤 및 p-AMPK를 증가시켜, 지질대사의 균형을 조절하는 것을 확인하였으며, ALT 및 AST의 감소능을 확인하여, 지질대사와 관련된 장기인 간에 대한 보호효과도 확인하였다. 또한, 항산화 활성인자인 SOD 및 CAT가 증가한 것을 확인하였으며, 육안 및 광학현미경으로 간에 축적되는 지방질의 감소를 확인하였기에, 본 발명의 강황 추출물은 이상지질혈증에 우수한 효과가 있다는 것을 확인함으로서, 이상지질혈증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 강황 추출물을, 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 중성지방 및 총 콜레스테롤 감소를 확인한 도이다. A는 중성지방량 B는 총 콜레스테롤을 나타낸 그래프이다. (nomal: 일반 마우스, MCD: 이상지질혈증 유도 마우스, MCD+CEL: 이상지질혈증 유도 마우스 및 강황 추출물 저농도 투여, MCD+CEH: 이상지질혈증 유도 마우스 및 강황 추출물 고농도 투여)
도 2는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 지방합성 및 축적인자의 조절을 확인한 도이다. A는 C/EBP 발현량, B는 p-AMPK의 발현량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, HDL 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤의 조절을 확인한 도이다. A는 혈중 HDL 콜레스테롤, B는 혈중 LDL 콜레스테롤량을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 간 대사인자인 ALT 및 AST의 감소를 확인한 도이다. A는 ALT 발현량, B는 AST 발현량에 대한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 항산화 관련 인자의 조절을 확인한 도이다. A는 SOD 발현량, B는 CAT발현량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 적출한 간 조직의 지방 분포를 확인한 도이다.
도 2는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 지방합성 및 축적인자의 조절을 확인한 도이다. A는 C/EBP 발현량, B는 p-AMPK의 발현량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, HDL 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤의 조절을 확인한 도이다. A는 혈중 HDL 콜레스테롤, B는 혈중 LDL 콜레스테롤량을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 간 대사인자인 ALT 및 AST의 감소를 확인한 도이다. A는 ALT 발현량, B는 AST 발현량에 대한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 항산화 관련 인자의 조절을 확인한 도이다. A는 SOD 발현량, B는 CAT발현량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 강황 추출물을 이상지질혈증이 유도된 쥐에 투여하여, 적출한 간 조직의 지방 분포를 확인한 도이다.
본 발명은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증(dyslipidemia)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서 "약제학적으로 허용가능한"이란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 활성 물질의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 특정 질환의 증상을 억제하거나 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치료"는 본 발명의 조성물의 투여로 특정 질환의 증상을 호전 또는 이롭게 변경시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 성별, 신체 상태 등을 고려하여 선택된다. 상기 약학 조성물 중 포함되는 유효성분의 농도는 대상에 따라 다양하게 선택할 수 있음은 자명하며, 바람직하게는 약학 조성물에 0.01 ~ 5,000 ㎍/ml의 농도로 포함되는 것이다. 그 농도가 0.01 ㎍/ml 미만일 경우에는 약학 활성이 나타나지 않을 수 있고, 5,000 ㎍/ml를 초과할 경우에는 인체에 독성을 나타낼 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것일 수 있다.
또한, 상기 저급 알코올은 에탄올 일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 20mg 내지 200 mg/kg/일의 농도로 개체에 투여될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 중성 지방 및 총 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키는 것일 수 있다.
또한, 상기 총 콜레스테롤은 HDL콜레스테롤 증가 및 LDL 콜레스테롤이 감소 또는 억제된 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 지방 합성 및 축적 관련인자를 조절하는 것일 수 있다.
또한, 상기 지방 합성 및 축적 관련 인자는 지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 알라닌 아미노전이요소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이요소(AST)를 감소시키는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 강황(Curcuma longa) 추출물은 슈퍼옥시드 디스무타아제(SOD, SuperoxideDimutase) 및 카탈라아제(CAT, Catalase)를 발현 및 증가시켜 항산화 활성을 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 이상지질혈증은 고지혈증(hyperlipidemia), 고콜레스테롤혈증(hypercholesterolemia) 및 고중성지방혈증(Hypertriglyceridemia)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 강황(Curcuma longa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 이상지질혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분인 강황 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨,소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 기능성 식품 조성물은 이상지질혈증의 예방 또는 치료 목적으로, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능성 식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 강황(Curcuma longa) 추출물을 인간을 제외한 개체에 투여하여, 지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키고, HDL콜레스테롤 증가 및 LDL 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키는 방법을 제공한다.
이하 본 발명을, 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다.
다만, 하기 실시예는 본 발명의 기술적 특징을 명확하게 예시하기 위한 것 일뿐, 본 발명의 보호범위를 한정하는 것은 아니다.
<실시예 1> 강황 추출물의 제조
강황은 2019년에 수확된 국내산으로, 경기도 수원 시중에서 구입하여 사용하였다. 강황의 뿌리부는 세척하여, 동결건조 후 분말화하였다. 동결건조된 시료에 70% 에탄올을 첨가하여, 상온에서 24시간 동안 3회 반복 추출하였다.
추출물은 여과하여 잔사를 제거하고, 50℃ 수온의 rotary vacuum evaporator로 감압 농축한 후 동결 건조하여 제조하였다(수율 50%).
<실시예 2>동물 실험
C57BL/6j 마우스(6주령, 70마리, ♂)는 Harlan Laboratories(Indiapolis, IN, USA)에서 분양받았다. 입고한 후, 마우스는 일반 사료(LabDiet5001 Rodent Diet, Purina mills, St. Louis, MO, USA)를 급여하면서 1주일간의 적응기간을 거쳤다. 마우스는 이상지질혈증 유도를 위해 정상식이군(nomal, n=20)과 이상지질혈증군(MCD, n=50)으로 임의 배정하였다. 정상식이군은 AIN-93G 식이(15.8% 지방, 식용유; 20.3% 단백질, 63.9% 탄수화물; D10012G,Research Diet, Inc., New Brunswick, NJ, USA)를 섭취하였으며, 이상지질혈증군은 45% 고지방식이(44.8% 지방, 식용유 및 라드; 19.0% 단백질; 36.2% 탄수화물; TD.06415, Harlan, Madison, WI, USA)을 섭취하였다. 8주간의 이상지질혈증 유도기간 종료 후, 이상지질혈증군은 총 3개 군으로 재배치하여 이상지질혈증군, 2가지 농도의 강황 추출물 투여군(저농도 투여군, MCD+CEL 및 고농도 투여군, MCD+CEH)으로 분류하였다. 정상군은 강황 추출물 투여에 따른 이상반응을 관찰하기 위해 분류하여 정상군과 강황 추출물 투여군으로 분류하였다. 강황 추출물은 0.5% methylcellulose 용액에 용해시켜 50 및 100 mg/kg b.w.으로 매일 경구투여하였다. ORL도 0.5% methylcellulose 용액에 용해시켜 30 mg/kg b.w.으로 매일 경구투여하였으며 정상군과 이상지질혈증군은 용매만을 투여하였다. 실험동물 사육실은 온도 22±2℃, 습도 40~60% 및 명암주기 12시간으로 일정하게 유지되도록 하였으며 사료와 식수는 자유롭게 섭취시켰다. 식이섭취량과 체중은 일주일에 2회씩 동일한 시간에 측정하였다.
4주간의 실험기간 종료 후, 마우스는 12시간 식이 공급을 중단하였고 CO2 overexposure에 의해 도서하였다. 혈액시료는 심장천자법에 의해 수집하였고 4℃, 3,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청은 추후 실험 전까지 -20℃에서 저장하였다. 지방조직 및 간 조직 시료는 빠르게 분리하여 iced-cold saline에 세척한 후 무게를 측정하였다.
적출된 혈액, 간조직 및 지방질은 본 발명의 강황 추출물의 지질대사, 간 기능성평가 및 항산화 효과를 평가하기 위한 실험에 사용하였다.
<실시예 3> 이상지질혈증 개선 효과 확인
3-1. 중성지방 및 총 콜레스테롤 억제
이상지질혈증은 혈중에 중성지방 및 총콜레스테롤이 증가되어 있는 상태인 바, 이에 대한 치료 효과를 확인하기 위하여 본 발명의 강황 추출물의 처리에 의한 중성지방 및 총콜레스테롤 억제 효과를 확인하였다.
대조군의 혈청 중성지방과 총콜레스테롤 농도를 100%로 하였을 때, 중성지방은 강황 추출물 투여 시 대조군에 대비하여, 저농도 투여군은 31%, 고농도 투여군은 49% 감소하였으며(도 1A), 혈중 총콜레스테롤은 대조군에 대비하여, 저농도 투여군에서 16%, 고농도 투여군에서 42%가 각각 유의적으로 감소하였다(도 1B).
3-2. 지방 합성 및 축적 조절
지방 합성과 관련된 인자로서, 지방 분화인자인 C/EBP를 상기의 실험군에서 측정하였으며, 지방 생성 인자를 억제하는, 항지방 인자인 p-AMPK(지방 대사인자)와 함께 측정함으로서, 본 발명의 강황 추출물에 대한 지방 합성 및 축적 조절을 확인하였다.
그 결과, 대조군의 C/EBP의 발현량을 100%로 기준하였을 때, C/EBP는 강황 추출물 저농도 처리군에서는 91%, 고농도 처리군에서는 73% 감소한 것을 확인하였다(도 2A). 항지방 인자인 p-AMPK를 nomal군의 발현량을 100%로 하였을 때, 강황 추출물 고농도 처리군에서 46%로 유의하게 증가하였다(도 2B).
3-3. HDL 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤 조절 확인
이상지질혈증은 혈중에 HDL 콜레스테롤의 감소 및 LDL 콜레스테롤이 증가되어 있는 상태이며, 콜레스테롤의 불균형이 초래된 상태이다. 따라서 본 발명의 강황추출물의 처리에 의한 혈중 HDL 콜레스테롤 증가 및 LDL 콜레스테롤 감소 효과를 확인하였다.
대조군의 혈청 HDL 콜레스테롤과 LDL 콜레스테롤 농도를 100%로 하였을 때, HDL 콜레스테롤은 강황 추출물 투여 시, 대조군보다 저농도 투여군은 327% 증가하였으며, 고농도 투여군에서는 263% 증가하였다(도 3A). LDL 콜레스테롤은 대조군에서 보다 저농도 투여군에서 64%, 고농도 투여군에서 85%로 각각 유의적으로 감소하였다(도 3B).
3-4. 간 기능검사
지질 대사에 주요한 기관으로 알려져 있는 간의 기능성을 평가하기 위하여, 간독소 인자인 알라닌 아미노전이요소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이요소(AST)를 측정하였다. 혈중 지질이 높고, 간에 지방이 축적될 수록 상기의 간 독소 인자의 발현량이 높아 지기 때문에, 본 발명에서는 대조군의 ALT 및 AST 수치를 100% 기준으로 강황 추출물 투여군의 ALT 및 AST 발현량을 평가하여, 간 기능 검사를 시행하였다.
그 결과, ALT는 대조군 대비, 강황 추출물 저농도 투여군에서 59%, 고농도 투여군에서 65% 감소하였으며(도 4A), AST는 저농도 투여군에서 19%, 고농도 투여군에서 60%로 각각 유의적으로 감소한 것을 확인하였다(도 4B).
3-5. 항산화 활성
강황 추출물의 항산화능을 확인하기 위해, 혈액내 항산화효소(SOD) 및 과산화수소 분해효소(CAT)를 측정하였다. 고지방식이만 섭취한 대조군에서는, 지속적인 비만의 유지로 SOD 및 CAT가 nomal군에 비해서 감소하여, SOD는 nomal군의 75% 수준이였으며, CAT는 nomal군의 35%인 것을 확인하였다(도 5A 및 도 5B).
강황 추출물을 투여한 군에서는, 저농도 투여군에서, SOD의 발현은 저농도 군에서 103%, 고농도 군에서는 105%까지 증가한 것을 확인하였으며(도 5A), CAT는 대조군대비 저농도군에서 52%, 고농도 군에서 85% 까지 증가하여 정상 수준으로 회복된 것을 확인하였다(도 5B).
3-6. 간조직 보호 효과
콜레스테롤은 대부분 간에서 생성되며 적정량의 콜레스테롤이 생성되지만, 간 조직이 파괴되면 LDL 또는 HDL 콜레스테롤의 생성 및 분해 불균형이 야기되면서 이상지질혈증의 원인이 되기도 한다. 따라서, 본 발명의 강황추출물의 처리에 의한 간 조직 보호 효과를 확인하였다.
구체적으로, 인도적으로 적출한 마우스의 간조직을 육안관찰 및 광학현미경으로 관찰한 결과, nomal군에서는 간조직이 선홍빛을 띄고 있었으며, 간조직 내 지방의 분포가 관찰되지 않았다. 대조군 마우스의 간조직은, 지방의 축적으로 인해, nomal군에 비해 옅은 분홍색을 띄었고, 간조직 내 지방질(백색)이 주로 분포하고 있었다. 강황 추출물을 투여한군에서는 저농도 투여군 및 고농도 투여군에서 모두 지방질이 감소한 것을 확인 할 수 있었으며, 조직의 색도한 대조군에서 보다 짙어진 것을 확인하였다(도 6).
따라서, 본 발명의 강황 추출물은, 중성지방, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤 및 C/EBP를 감소시키고, HDL 콜레스테롤 및 p-AMPK를 증가시켜, 지질대사의 균형을 조절하는 것을 확인하였으며, ALT 및 AST의 감소능을 확인하여, 지질대사와 관련된 장기인 간에 대한 보호효과도 확인하였다. 또한, 항산화 활성인자인 SOD 및 CAT가 증가한 것을 확인하였으며, 육안 및 광학현미경으로 간에 축적되는 지방질의 감소를 확인하였기에, 본 발명의 강황 추출물은 이상지질혈증에 우수한 효과가 있다는 것을 확인하였다.
Claims (4)
- 강황(Curcuma longa) 에탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는, 고콜레스테롤혈증(Hypercholesterolemia)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
상기 조성물은 총 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키고,
HDL 콜레스테롤을 증가시키며,
지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키고,
알라닌 아미노전이요소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이요소(AST)를 감소시키는, 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 강황(Curcuma longa) 에탄올 추출물은 20mg 내지 200 mg/kg/일의 농도로 개체에 투여되는 것을 특징으로하는 고콜레스테롤혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 강황(Curcuma longa) 에탄올 추출물은 슈퍼옥시드 디스무타아제(SOD, SuperoxideDimutase) 및 카탈라아제(CAT, Catalase)를 발현 및 증가시켜 항산화 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 고콜레스테롤혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 강황(Curcuma longa) 에탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는, 고콜레스테롤혈증(Hypercholesterolemia)의 예방 또는 개선용 식품 조성물로서,
상기 조성물은 총 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤을 감소 또는 억제시키고,
HDL 콜레스테롤을 증가시키며,
지방 분화 조절인자 C/EBP의 감소 및 항지방 인자 p-AMPK를 증가시키고,
알라닌 아미노전이요소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노전이요소(AST)를 감소시키는, 조성물.
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