KR101757385B1

KR101757385B1 - 동백나무 열매 추출물을 포함하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간 예방 및 치료용 약학 조성물

Info

Publication number: KR101757385B1
Application number: KR1020150162040A
Authority: KR
Inventors: 옥민호; 김동욱; 김현정; 박신희; 이현호; 박화식; 위안진; 유석봉; 심봉섭; 정지은; 어지현
Original assignee: 목포대학교산학협력단; 전라남도
Priority date: 2015-11-18
Filing date: 2015-11-18
Publication date: 2017-07-12
Also published as: KR20170058170A

Abstract

본 발명은 동백나무 열매의 추출물을 함유하는 약학 조성물 또는 건강기능식품에 관한 것으로, 좀 더 자세히는 동백나무 추출물을 함유하는 지질 대사 장애인 체내 이상지질혈증 개선, 지방간 및 비만 예방과 치료 효과를 기대하는 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물에 대한 것이다.

Description

동백나무 열매 추출물을 포함하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간 예방 및 치료용 약학 조성물 {Composition comprising the extract of Camellia japonica for prevention and treatment of Dyslipidemia or Obesity}

본 발명은 동백나무 열매의 추출물을 함유하는 약학 조성물 또는 건강기능식품에 관한 것으로, 좀 더 자세히는 동백나무 추출물을 함유하는 지질 대사 장애의 개선 및 이로 인한 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간 예방과 치료 효과를 기대하는 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물에 대한 것이다.

비만은 단순히 체지방의 축적이나 체중 과다의 신체 상태를 정의할 뿐만 아니라 의학적으로 다양한 합병증을 일으키는 질병의 한 소견으로 분류되며, 세계 보건기구 (WHO: World health organization) 에서는 신체 질량 지수 (BMI: Body mass index) 30 kg/m²가 넘는 경우를 비만으로 정의하고 있으나 2000년부터 대한 비만학회에서는 인종 간의 차이를 고려하여 신체질량 지수 25 kg/m²가 넘는 경우를 비만으로 규정하고 있다. 또한 현대 의학에서는 대사 증후군 및 심혈관 질환을 일으키는 주요한 인자로서, 연구 결과에 따르면 인간의 평균 수명과도 관련이 깊은 것으로 인식되고 있다. 비만은 직접적인 사망의 원인은 아니나 고혈압, 동맥경화, 뇌졸중, 심장마비 등의 순환기계 질환과 당뇨, 고지혈증과 같은 대사질환을 대표적으로 수반하며 암이나 수면무호흡증을 일으키는 인자로서 광범위하고 치명적인 합병증을 동반하는 것이 특징이다. 식량부족과 전염병이 만연하던 시절과는 달리 현대 사회에서 추구하는 미의 기준이 변화하였고, 단순히 건강의 문제만이 아닌 외향적인 아름다움을 중시함에 따라 개인적인 만족과 자신감 고취가 매우 중요한 가치를 갖게 되었다. 따라서 풍만한 신체보다는 날씬하고 날렵한 신체가 선망의 대상으로 인식되어 비만 예방 혹은 치료목적의 이른바 ‘다이어트’ 국내 시장의 규모도 무시할 수 없을 만큼 성장하였다.

알려진 비만의 원인은 매우 다양하나 크게는 유전적인 영향에서부터 식습관, 운동부족, 사회적 인식 등으로 운동과 식습관 조절을 통해 예방이 가능한 질환이지만 이를 방치하였을 경우 앞서 언급하였듯이 다양한 합병증으로 인해 사망에 이를 수 있다. 치료제로는 현재 제니칼 (Xenical, Roche, Swiss), 벨빅 (Belviq, Arena pharmaceuticals, U.S.A), 큐시미아 (Qsymia, Vivis, U.S.A)가 대표적이며 이는 보통 식욕억제제, 지방 흡수억제제, 교감신경 흥분제 등으로 분류된다. 그러나 현행 치료제들은 비만 치료 효과 이외에도 심장질환, 호흡기계 질환, 신경계 질환 등의 심각한 부작용을 수반함으로 처방에 있어 각별한 주의가 필요한 실정이다. 이에 현행 비만 치료제들의 문제점을 보완하고 새로운 비만 치료제에 대한 사회적 관심과 연구가 요구된다.

동백 나무는 (CamelliajaponicaL) 차나무과의 상록 활엽 소교 목으로써 한반도이남 지역에 대량으로 자생하며 일부지역에서는 군락을 이루기도 하나 대게는 관상 목적의 정원 식물로 재배되어 왔다. 민간의학에서는 그 꽃을 산다 (山茶)라고 하여 토혈, 장염으로 인한 하혈, 월경과다, 산후의 출혈이 멎지 않는 증세, 화상, 타박상 등에 사용해 왔다. 대한약전에는 민간생약으로 구분되어 수록되어 있고 소록도 약용식물 시험장에서 시험재배 되고 있으나 한약재 표준제조 공정지침이나, 관능검사 지침에 대해선 따로 기술되어 있지 않은 실정이다. 현재의 주요 용도는 연고의 기초제나 올리브유의 대용품으로 사용되고 있다. 또한 동백의 열매는 주로 기름을 짜내어 머리에 기름을 발라 모발을 강화하거나 겨울철 피부가 트는 것을 방지하는 용도로 이용되어 왔으나 그 이외의 용도는 잘 알려진 바가 없었다.

한편, 동백나무 열매를 검색어로 특허청 특허검색을 한 경우 총 267 (2015년 10월 현재) 건의 국내 실용특허가 검색되었고 그 대부분은 화장품의 원료나 미백제의 용도로 등록되어 있었다. 예로 대한민국 등록 특허 제10-1530960에서는 동백 열매 기름 이외의 천연 식물성 기름을 혼합하여 주름개선과 피부미백에 사용되는 화장료의 조성물로 등록되어 있으며, 제10-1359720 에서는 주름개선 및 피부재생 화장료의 조성물로 등록되어 있으나, 상기 특허들은 대부분 피부 미용과 모발 재생 및 상태 개선의 목적으로 등록된 특허이며, 이외의 동백나무 열매의 약학적 조성물이나 식품 첨가물로써의 용도는 제고된 바가 없었다.

따라서 본 발명자는 본 발명을 통해 동백나무 열매가 가진 약용 식물로써의 부가가치를 창출하고자 하였으며 나아가 산림자원 부산물의 효과적인 용도를 탐색할 수 있었다. 좀 더 자세히는 동백나무 열매 추출물을 이용한 체내 이상지질혈증과 비만의 예방과 치료약물의 식품 첨가물 및 약학적 조성물로의 이용 방안에 대해 연구하고자 고지방식이 급여를 통해 유도된 흰쥐 (Wistar rat) 고지혈, 비만 동물 모델에서의 고지혈 및 비만의 강력한 억제효과를 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

KR

10-1530960

B

KR

10-1359720

B

본 발명의 목적은 동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간 예방 및 치료목적의 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간 예방 및 개선 목적의 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 상기 체내 이상 지질혈증은 스핑고 지질증, 고콜레스테롤혈증, 고지혈증, 고중성지방혈증을 포함한다.

또한 본 발명은 동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본 발명에서 제공하는 약학 조성물은 식욕 억제 및 지질 대사 조절에 의해 체중감소 효과가 있으며, 상기 추출물은 C₁-C₆의 저급 알코올, 물 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나로 추출된다. 바람직하게는 에탄올로 추출되며, 가장 바람직하게는 에탄올과 증류수를 7:3 부피비로 혼합한 용매로 추출한 것을 특징으로 한다.

본 발명에서 상기 추출물은 동백나무 열매에 에탄올과 증류수를 7:3 부피비로 혼합한 에탄올 수용액을 이용하여 4 시간 동안 가열하여 추출하는 단계 이후 감압 농축하는 단계를 포함하는 제조방법으로 추출된다. 상기 감압 농축하는 단계 이후에 동결건조하여 수용성 성분을 제거하고 분말 형태의 추출물을 수득하는 단계를 포함한다.

본 발명은 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도된 비만 및 고지혈 흰쥐 (Wistar rat) 동물 모델에 30일간 경구 투여하여 식이 섭취 감소, 체중 감소, 혈액 내 지질과 혈관 내막 지질침착 억제 및 지방간에 있어 우수한 억제 효과를 확인하였다. 이에 동백나무 열매 추출물은 체내 이상지질혈증, 비만 또는 지방간에 있어 예방 및 치료목적의 약학적 조성물과 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 동백나무 열매 추출물의 고지방식이로 유도된 고지혈, 비만 흰쥐 동물 모델에서의 혈중 중성지방의 감소효과를 나타낸다.
도 2는 동백나무 열매 추출물의 고지방식이로 유도된 고지혈, 비만 흰쥐 동물 모델에서의 혈중 콜레스테롤의 감소 효과를 나타낸다.
도 3 은 동백나무 열매 추출물이 고지방식이로 유도된 고지혈, 비만 흰쥐 동물 모델에서의 혈중 지질 과산화의 억제효과를 나타낸다.
도 4는 동백나무 열매 추출물의 고지방식이로 유도 된 고지혈, 비만 흰쥐 동물 모델의 복부 대동맥 내막의 지질침착 억제효과를 나타낸다.
도 5 은 동백나무 열매 추출물의 고지방식이로 유도 된 고지혈, 비만 흰쥐 동물 모델에서의 혈중 고밀도 지방단백의 증가효과를 나타낸다.

이하, 본 발명의 바람직한 구현예에 대하여 상세히 설명한다. 또한, 하기의 설명에서는 구체적인 구성요소 등과 같은 많은 특정 사항들이 도시되어 있는데, 이는 본 발명의 보다 전반적인 이해를 돕기 위해서 제공된 것일 뿐 이러한 특정 사항들 없이도 본 발명이 실시될 수 있음은 이 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명하다 할 것이다. 그리고, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.

본 발명에 있어서, 동백나무 열매 추출물은 물 또는 유기 용매를 사용하여 추출할 수 있는데, 추출한 액은 액체 형태로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 상기 유기용매는 반드시 이로 제한되는 것은 아니지만, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매이며, 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 부탄올, 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합용매이고, 추출물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 추출물의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다. 상기 유기용매로 추출 방법이 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등이 있다.

상기 정제물은 추출물 또는 분획물로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로, 면, 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 한외여과법, 냉동여과법, 원심분리법 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 크로마토그래피)에 의한 분리 과정을 추가로 포함할 수 있다.

상기 농축 및/또는 건조 방법은, 이로써 제한되는 것은 아니나, 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등의 방법을 포함한다. 경우에 따라, 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.

상기, 동백나무 열매는 동백나무 (Camellia japonica L.)의 씨앗을 포함한 과실을 건조하여 이용하며 흰동백나무 (Camellia japonica for.albipetala H.D.Chang), 긴잎동백나무 (Camellia japonica for.longifolia Uyeki), 색동백나무 (Camellia japonica for.variegata Uyeki), 애기동백나무(Camellia sasanqua Thunb.)와 같은 동속 식물의 경우를 선택하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 단 동종 식물인 차나무 (Camellia sinensis L.)의 경우는 제외 한다.

상기 체내 이상지질혈증은 혈중 중성지방, 콜레스테롤, 저밀도지단백, 고밀도지방단백의 대사 이상증후군으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나 이상 일수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 비만은 대한비만학회에서 제시한 비만기준인 체지방지수 25 kg/m²이상임을 의미하며 이로 인해 수반된 동맥경화, 제 2형당뇨, 심근경색을 포함한 각종 대사증후군 및 심혈관질환을 의미하며, 이에 한정되지 않는다.

상기 동백나무 열매는 식이 섭취량을 줄임으로서 체중이 감소되는 것이 바람직하며 특히, 간의 질량이 감소하였으며 이에 한정되지 않는다.

상기 동백나무 열매 추출물은 지방간을 개선시키는 것이 바람직하며, 간내 콜레스테롤 및 중성지방의 축적을 억제에 의한 것임이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

아울러 상기 동백나무 열매 추출물은 혈중 콜레스테롤과 중성지방을 줄임으로써 스핑고 지질증, 고콜레스테롤혈증, 고지혈증, 고중성지방혈증을 포함하는 체내 이상지질혈증을 개선시키는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

또한 상기 동백나무 열매 추출물은 혈액에 지질 과산화를 억제하여 콜레스테롤의 중성지방과 콜레스테롤의 에스테르화를 억제하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

상기 동백나무 열매 추출물은 혈관 내막에 지질 침착을 개선하는 것이 바람직하며 이에 한정하지 않는다.

상기 동백나무 열매 추출물은 고밀도 지단백의 혈액 및 간 내의 분포를 높임으로써 지방세포와 신체내 주요 조직 및 혈류에 잔류하는 지질 (저밀도 지단백, 콜레스테롤)의 축적을 개선하는 것이 바람직하며 이에 한정하지 않는다.

또한, 동백나무 열매 추출물의 제조는 하기의 단계들을 포함하는 것이 적절하나 이에 한정하지 않는다:

1) 동백나무 열매의 과실을 바람이 잘 드는 그늘에서 건조하는 단계;

2) 단계 1)의 열매를 믹서기나 그라인더를 이용하여 분쇄하는 단계;

3) 단계 2)의 분쇄물을 유기용매에 열탕 추출하는 단계;

4) 단계 3)의 추출물을 여과 후 농축하는 단계;

5) 단계 4)의 농축물을 건조하는 단계;

본 발명의 동백나무 열매 추출물을 제조함에 있어서, 동백나무 열매의 과실을 바람이 잘 드는 그늘에서 건조하는 것이 바람직하며 열풍 건조기 및 여타의 건조기를 사용하는 것도 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한 단계 3)의 열탕 추출은 kg당 3리터의 수용액을 가하여 4시간 동안 2번씩 반복 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한 단계 4)의 감압 농축은 감압 농축기나 회전 증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한 단계 5)의 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

본 발명의 구체적인 실시 예에서 동백나무 열매 추출물의 비만 예방 및 치료효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model) 에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 매일 식이 섭취량과 체중을 기록하였고, 식이 섭취량과 체중 증가를 비교 분석한 결과 고지방 식이 양성대조군 대비 동백나무 열매 추출물 800 mg/kg 에서 일일 식이 섭취량이 8.08±0.24 g 감소하여 식이섭취 억제 효과가 가장 컸으며, 이로 인한 체중 감소 효과는 고지방식이 양성대조군 대비 동백나무 열매 추출물 800 mg/kg 에서 27±9.5 g 의 체중감소 효과를 보이며 가장 강력한 체중 감소 효과를 보였다 (표 1참조).

동백나무 열매 추출물의 지질관련 체내 이상지질혈증 예방 및 치료효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model) 에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 30일 후 실험동물을 희생시킨 뒤 혈액 화학검사를 수행한 결과 동백나무 열매 추출물은 800 mg/kg의 농도에서 혈액 내 콜레스테롤과 중성지방을 고지방식이 양성대조군 대비 각각 2.3배, 2.4배 줄임으로서 혈액 내 지질 분포를 억제 하였다(도1, 도2 및 표 2참조).

동백나무 열매 추출물의 지방간 예방 및 치료효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model) 에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 30일 후 실험 동물을 희생시킨 뒤 조직화학 검사를 수행한 결과 동백나무 열매 추출물은 800 mg/kg의 농도에서 간내 콜레스테롤과 중성지방 축적을 고지방식이 양성대조군 대비 약 2배 가량 줄임으로서 간 조직내 지질 분포를 억제하였다(표 3참조).

또한 동백나무 열매 추출물의 혈액 내 지질의 과산화 효과를 검정하기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model)에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 30일 후 실험 동물을 희생시킨 뒤 혈액을 체취하여 원심분리하고 황산구리로 혈액 내 지질의 과산화를 유도한 결과, 동백나무 열매 추출물 농도 800 mg/kg를 경구투여한 그룹에서의 과산화된 지질의 부산물인 TBARS (Thiobarbituric reactive oxygen substances)의 양이 가장 적게 나타났으며 이는 정상 식이를 먹인 정상군과 통계학적인 차이가 없었다. 따라서 위와 같이 동백 열매 추출물의 혈액 내 지질 과산화효과를 확인 할 수 있었다(도 3참조).

동백나무 열매 추출물의 혈관 내막의 지질침착 억제 효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도 된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model) 에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 30일 후 실험 동물을 희생 시킨 뒤 복부 대동맥을 적출하여 절개한 후 펼치고 내막에 침착된 지질을 선택적으로 염색한 결과 동백나무 열매 추출물 800 mg/kg 에서 내막에 침착 된 지질이 줄어든 것을 확인 할 수 있었다(도 4참조).

동백나무 열매 추출물의 지질관련 체내 이상지질혈증 예방 및 치료효과를 알아보기 위하여, 본 발명의 동백나무 열매 추출물을 고지방식이로 유도 된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물모델 (High fat diet induced obesity & hyperlipidemia animal model) 에 30일에 걸쳐 매일 아침 경구 투여하였으며 30일 후 실험 동물을 희생시킨 뒤 혈액 및 조직 화학검사를 수행한 결과 동백나무 열매 추출물은 400 mg/kg 와 800 mg/kg의 농도에서 혈액과 간 조직 내에 분포한 고밀도 지단백이 고지방식이 양성대조군 대비 각각 6배, 8배 증가하는 결과가 확인 되었다(표 2,3 및 도 5참조).

따라서 본 발명은 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델에서의 식이섭취 억제, 체중 감소이외의 혈액과 간 조직 내의 유해한 지질분포를 억제하고 반대로 유익한 지단백의 분포를 증가시켰으며, 이와 더불어 혈액 내 지질의 과산화를 방지하고 혈관 내막의 지질 침착을 효과적으로 억제하여 비만과 고지혈을 포함한 체내 이상지질혈증의 예방 및 치료에 유용한 약학적 조성물과 건강기능 식품에 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구투여 할 수 있으나 경구 투여가 바람직하다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 이멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니먼트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글라이콜, 폴리에틸렌 글라이콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용 될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween)-61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용 될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함 될 수 있다.

상기 조성물은 투여를 위해서 동백나무 열매 에탄올 추출물을 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형 등으로 제제화 할 수 있다.

본 발명의 건강기능식품은 식품학적으로 허용된 담체와 혼합하여 식품 조성물로서 제공될 수 있다. 상기 추출물은 전체조성물에 대해 0.01 내지 99.9% 중량비로 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다.

본 발명의 동백나무 열매 추출물을 식품 또는 음료 첨가물로 사용할 경우, 상기 동백나무 열매 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 동백나무 열매 추출물의 혼합양은 그 사용목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치) 에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿류, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및, 비타민 복합제 등이 있다. 음료수로 제형화 할 경우에 동백나무 열매 에탄올 추출물 이외에 첨가되는 액체 성분으로는 한정되지 않으나, 통상의 음료처럼 다양한 향미제 또는 각종 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유 할 수 있다.

다른 양태로서, 본 발명의 동백나무 열매 추출물은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제 또는 음료일 수 있다.

본 발명의 비만 및 체내 이상지질혈증을 예방 및 치료하기 위한 약학적 조성물 및 건강기능식품은 이와 동일 또는 유사한 효능을 갖는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.

이하, 본 발명을 구체적인 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 추출 방법

본 발명의 동백나무 열매 추출물 제조를 위해 전라남도 나주 산림자원 연구소에서 동백 열매를 제공하였다.

본 발명의 동백나무 열매 추출물을 효과적으로 제조하기 위해 동백나무 열매를 건조하여 그 중 1 kg을 취하여 믹서기에 분쇄하였으며 균일하게 포말된 동백나무 열매를 70% 에탄올/증류수 수용액 3리터를 첨가 한 후 soxlet을 이용하여 2번 반복 열탕추출 하였다. 여과된 추출물을 감압 농축기로 농축하고 대부분의 에탄올 성분과 증류수를 날려 보낸 뒤 동결건조기를 이용하여 일주일 동안 동결 건조 시켰으며, 건조 된 동백나무 열매 에탄올 추출물을 막자와 막자사발로 빻아 고운 입자상태의 추출물을 획득하였다. 수득율을 계산한 결과 9.32%로 확인되었다.

< 실험예 1> 식이 섭취 억제와 체중감소 효과

상기의 실시예 1에서 제조된 동백나무 열매 추출물의 식이섭취 억제와 체중감소 효과를 알아보기 위하여 고지방 식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델을 선정하여 실험을 실시하였다(Journal of ethnopharmacology. 69(1), 21-25 (2000)).

6 주령 된 Wistar rat 을 정상식이군 (Normal)과 양성대조군 (Control), 동백나무 열매 추출물 (CJF) 100 mg/kg, 400 mg/kg, 800 mg/kg를 투여 그룹의 총 5개 그룹(그룹 당 2케이지: 총 8마리)로 나누어 1주일간 적응 순화시킨 후 비만을 유도하기 위해 고지방 식이를 30일간 공급하여 비만을 유도하였고, 동시에 동백나무 열매 추출물을 매일 한 번씩 (아침 9시)에 병행 투여하였다. 경구 투여 전 모든 개체의 체중과 케이지별 식이 섭취량을 기록하였다. 그 결과 표 1에서 확인할 수 있듯이, 시료투여 30일 후에 측정한 사료 섭취량과 체중감소율은 농도 의존적으로 양성 대조군 대비 통계적으로 유의하게 감소한 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 2> 혈액 내 지질 (중성지방 및 콜레스테롤) 감소 효과

상기 실험예 1의 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델을 대상으로 30일간의 동백나무 열매 추출물의 경구 투여가 종료된 후 희생시켰다. 심장에서 환류 고정전 흰쥐의 혈액을 채취 하였고 혈액 화학적 검사 기법을 통해 아산제약에서 주문한 콜레스테롤, 중성지방 키트를 사용하여 키트에 명시 된 방법을 통해 혈핵 화학적 검정을 실시하였다. 그 결과 동백나무 열매 에탄올 추출물은 800 mg/kg의 농도에서 혈액 내 콜레스테롤과 중성지방을 고지방식이 양성대조군 대비 각각 2.3배, 2.4배 줄임으로서 혈액 내 지질 분포를 억제 하였다.

< 실험예 3> 조직 내 지질 (중성지방 및 콜레스테롤) 감소 효과

상기 실험예 1의 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델을 대상으로 30일간의 동백나무 열매 추출물의 경구 투여가 종료된 후 희생시켰다. 복부를 절개하여 혈액을 체취한 후 심장을 통해 증류수 세척액으로 2번 세척한 후 환류 고정하였다. 그 후 검체에서 간 조직 200 mg 를 취하여 키트에 명시 된 실험방법을 따라 조직 화학적 검정을 실시하였다. 그 결과 동백나무 열매 추출물은 800 mg/kg의 농도에서 간 내 콜레스테롤과 중성지방 축적을 고지방식이 양성대조군 대비 약 2배가량 줄임으로서 간 조직내 지질 분포를 억제하였다.

< 실험예 4> 혈청지질 과산화 억제 효과

상기 실험예 1의 고지방식이로 유도된 고지혈 및 비만 흰쥐 실험동물 모델을 대상으로 30일간의 동백나무 열매 추출물의 경구 투여가 종료된 후 희생시켰다. 검체의 심장에서 채취한 혈액을 원심 분리한 후 300 μl 의 혈청을 취하여 50 μl의 10 mM 황산구리 수용액, 600 μl의 생리 식염수를 함께 37℃ 의 항온기에 4시간 동안 방치하였다. 그 후 300 μl를 취하여 0.67% 의 thiobarbituric acid 1 ml 과 0.05N HCl 3 ml 과 혼합하여 끓는 물에 30분 동안 중탕 가열하였다. 가열한 용액을 5분 동안 얼음에 방치하여 반응을 종료시킨 후 4 ml의 혼합 된 유기용매를 첨가하고 원심분리한 후 그 상층액을 취하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과 동백나무 열매 추출물 농도 800 mg/kg 를 경구투여한 그룹에서의 과산화된 지질의 부산물인 TBARS (Thiobarbituric reactive oxygen substances) 이 가장 낮게 나타났으며 이는 정상식이를 먹인 정상군과 통계학적인 차이가 없었다. 위와 같은 결과로 미루어 동백 열매 에탄올 추출물의 혈액 내 지질 과산화효과를 확인 할 수 있었다.

< 실험예 5> 혈관 내막의 지질침착 억제 효과

상기 실험예 1의 고지방식이로 유도 된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델을 대상으로 30일간의 동백나무 열매 추출물의 경구 투여가 종료된 후 희생시켰다. 심장을 통해 생리 식염수를 주입하여 분포된 혈관을 2회 세척한 후 복부 대동맥을 채취하였다. 채취된 복부 대동맥을 일정한 크기로 잘라 직사각형 모양으로 펼친 후 패트리디쉬에 고정하고 10 ml의 10 % 포르말린 수용액으로 24 시간 동안 고정하였다. 생리식염수로 24 시간 동안 세척된 조직을 propylene glycol로 잔류한 수분을 제거하였다. 그 후 oil-red-o 염색시약으로 조직을 염색하고 propylene glycol 로 24시간에 걸쳐 세척하였다. 그 후 조직의 사진을 촬영하였다. 실험 결과 정상식이군과 달리 고지방식이 양성 대조군의 동맥 내막에서는 붉은색의 침착 된 지질이 다량 확인되었으나, 동백 열매 에탄올 추출물을 경구 투여한 시험군에서 농도 의존적으로 침착된 지질이 감소되는 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 6> 혈액 내 고밀도지단백의 증가 효과

상기 실험예 1의 고지방식이로 유도 된 고지혈 및 비만 흰쥐 동물 모델을 대상으로 30일간의 동백나무 열매 추출물의 경구 투여가 종료된 후 희생시켰다. 복부를 절개하여 혈액을 체취한 후 혈액 화학적 검사 기법을 통해 아산제약에서 주문한 고밀도지단백 키트를 사용하여 키트에 명시 된 방법을 통해 혈핵화학적 검정을 실시하였다. 그 결과 동백나무 열매 추출물 400 mg/kg 와 800 mg/kg의 농도에서 혈액과 간조직 내에 분포한 고밀도 지단백이 고지방식이 양성대조군 대비 각각 6배, 8배 증가하는 결과가 확인 되었다.

제제예 1: 산제의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 25 mg

유당 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

제제예 2: 정제의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 15 mg

옥수수 전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

제제예 3: 캅셀제의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 15 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg

락토오스 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

제제예 4: 주사제의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 15 mg

만니톨 180 mg

주사용 멸균 증류수 2794 mg

Na₂HPO₄12H₂O 26 mg

통상의 주사제 제조방법에 따라 1 앰플 (2 ml)당 상기의 성분 함량으로 제조하였다.

제제예 5: 액제의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 20 mg

이성화당 20 g

만니톨 10 g

정제수 적당량

통상의 액제 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고, 레몬향을 적당량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 후 정제수를 가하여 전체를 100 mml로 조절하고 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.

제제예 6: 건강음료의 제조

동백나무 열매 추출물 분말 30 mg

비타민 C 15 g

비타민 E(분말) 100 g

젖산철 19.75 g

산화아연 3.5 g

니코틴산아미드 3.5 g

비타민 A 0.2 g

비타민 B1 0.25 g

비타민 B2 0.3 g

물 적당량

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열 후, 만들어진 용액을 여과하고 멸균된 2 L의 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하여 본 발명에 따른 건강음료 조성물 제조에 사용하였다. 상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층이나 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims

동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 고지혈증의 예방 또는 치료용 약학 조성물
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제 1항에 있어서, 상기 추출물은 C₁-C₆의 저급 알코올, 물 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나로 추출된 것을 특징으로 하는 약학 조성물
제 4항에 있어서, 상기 추출물은 에탄올로 추출된 것을 특징으로 하는 약학 조성물
제 4항에 있어서,
상기 추출물은 에탄올과 증류수를 7:3 부피비로 혼합한 용매로 추출한 것을 특징으로 하는 약학 조성물
제 4항에 있어서,
상기 추출물은 열수 수출물인 것을 특징으로 하는 약학 조성물
제 1항에 있어서,
상기 추출물은 동백나무 열매에 에탄올과 증류수를 7:3 부피비로 혼합한 에탄올 수용액을 이용하여 4 시간 동안 가열하여 추출하는 단계 이후 감압 농축하는 단계를 포함하는 제조방법으로 추출된 것을 특징으로 하는 약학 조성물
제 8항에 있어서,
상기 감압 농축하는 단계 이후에 동결건조하여 수용성 성분을 제거하고 분말 형태의 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 제조방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 약학 조성물
삭제
동백나무 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 고지혈증의 예방 또는 개선용 건강기능식품