KR20210056714A - Cosmetic Composition Containing extract of Pleurotus citrinopileatus and Broussonetia kazinoki branch for anti-aging - Google Patents

Cosmetic Composition Containing extract of Pleurotus citrinopileatus and Broussonetia kazinoki branch for anti-aging Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a composition having anti-aging activity comprising a mixed extract of Pleurotus cornucopiae extracts and Broussonetia kazinoki branch extracts. The mixed extract of Pleurotus cornucopiae extracts and Broussonetia kazinoki branch extracts of the present invention has no cytotoxicity and has an excellent cellular aging inhibitory effect, thereby being easily used in cosmetics, pharmaceuticals, and the like.

Description

노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화용 조성물{Cosmetic Composition Containing extract of Pleurotus citrinopileatus and Broussonetia kazinoki branch for anti-aging}A composition for anti-aging containing a mixed extract of Pleurotus citrinopileatus and Broussonetia kazinoki branch for anti-aging} as an active ingredient.

본 발명은 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 포함하는 항노화 활성을 갖는 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition having anti-aging activity comprising a mixed extract of a yellow oyster mushroom extract and a Japanese oak branch extract.

노화(aging)는 누구라도 피할 수 없는 생리현상으로, 인간의 신체구조와 기능은 시간의 흐름에 따라 피할 수 없는 변화가 나타나게 되는데 이를 노화현상이라고 할 수 있다. 자연 피부노화 현상은 햇빛에 노출되지 않은 피부에서 관찰되는 피부노화 현상으로 내인성 피부노화(intrinsic skin aging, chronological skin aging)라고도 부른다. 내인성 노화는 피부에 존재하는 세포 내 에서 세포의 대사과정 중에 생성되는 reactive oxygen species(ROS)등에 의해서 발생하고, 외인성 노화(extrinsic aging)는 ultraviolet(UV), 공해와 같은 외부 요인에 의해 발생한다. Aging is a physiological phenomenon that cannot be avoided by anyone, and inevitable changes in the structure and function of the human body appear over time, which can be referred to as an aging phenomenon. Natural skin aging is a skin aging phenomenon observed in skin that has not been exposed to sunlight, and is also called intrinsic skin aging (chronological skin aging). Endogenous aging is caused by reactive oxygen species (ROS), which are generated during cellular metabolism in cells present in the skin, and extrinsic aging is caused by external factors such as ultraviolet (UV) and pollution.

피부는 크게 표피, 진피, 피하지방층으로 구성되어 있다. 특히 진피는 표피와 피하지방층 사이에 있는 결합 조직으로 피부에 유연성, 탄력성 및 장력을 제공하며 표피를 구조적으로 지지한다. 진피층의 섬유아세포(fibroblast)는 진피층의 섬유상 단백질인 콜라겐(collagen)과 엘라스틴(elastin)의 발현을 담당하고 있는데, 나이가 증가함에 따라 진피층에 존재하는 섬유아세포의 작용과 그 수가 감소하여 콜라겐과 엘라스틴 등의 구조 단백질의 합성이 감소하고, 피부 세포 내 수분이 손실되며, 각질층의 구조가 변화된다.The skin is largely composed of the epidermis, the dermis, and the subcutaneous fat layer. In particular, the dermis is a connective tissue between the epidermis and the subcutaneous fat layer, providing flexibility, elasticity and tension to the skin, and structurally supporting the epidermis. Fibroblasts in the dermal layer are responsible for the expression of collagen and elastin, which are fibrous proteins in the dermal layer. Synthesis of structural proteins such as the back decreases, moisture in skin cells is lost, and the structure of the stratum corneum is changed.

자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부 기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있다.The biosynthesis of substrate materials is reduced by reduction of cellular activity and micro-inflammation due to naturally occurring endogenous aging, and by external factors such as an increase in stress caused by various harmful environments and an increase in reactive oxygen species caused by sunlight. Decomposition and degeneration accelerate, destroying the skin matrix and thinning, leading to various symptoms of skin aging. Therefore, many studies have been conducted on active ingredients that can prevent and improve such aging phenomena.

한편, 노랑느타리버섯의 북한명은 노란버섯이며 여름부터 가을에 걸쳐 활엽수의 쓰러진 나무 또는 그루터기 등에 무리를 지어 자란다. 자실체는 한 그루에서 집단으로 발생하며 전체가 지름 15㎝, 높이 10㎝에 이른다. 버섯갓은 지름 2~9㎝로 처음에 호빵 모양이다가 나중에 깔때기 모양으로 변한다. 갓 표면은 축축하고 밋밋하며 노란색 또는 연한 노란색으로 가운데 또는 가장자리에 흰색 섬유처럼 생긴 솜털 모양의 비늘조각이 붙어 있다. 살은 흰색이며 밀가루 냄새가 난다. 주름살은 내린주름살로 처음에 흰색이다가 노란색으로 변한다. On the other hand, the North Korean name for yellow oyster mushroom is yellow mushroom, and it grows in groups on fallen trees or stumps of broad-leaved trees from summer to autumn. Fruiting bodies occur collectively in one tree, and the whole is 15cm in diameter and 10cm in height. Mushroom caps are 2~9cm in diameter, initially shaped like a bun, and later changed into a funnel shape. The surface of the lampshade is damp and flat, yellow or light yellow, with fluffy scales like white fibers attached to the center or edge. The flesh is white and smells of flour. Wrinkles are wrinkles that are first white and then turn yellow.

닥나무는 저상(楮桑)이라고도 하며 아시아가 원산지이고 산기슭의 양지쪽이나 밭둑에서 자란다. 높이는 3m에 달하고 작은 가지에 짧은 털이 있으나 곧 없어진다. 나무껍질은 회갈색이다. 잎은 어긋나고 길이가 5∼20cm이며 달걀 모양 또는 긴 달걀 모양이고 끝 부분이 길고 뾰족하며 밑 부분은 둥글다. 잎 가장자리는 톱니가 있고 2∼3개로 깊게 패어 들어갔다. 앞면은 거칠고 뒷면에는 짧은 털이 있으나 곧 없어진다. 잎자루는 1∼2cm이고 꼬부라진 털이 있으나 점차 없어진다. 꽃은 암수한그루이고 봄에 잎과 같이 핀다. 수꽃이삭은 길이 1.5cm의 타원 모양이고 어린 가지 밑 부분에 달린다. 수꽃의 화피 조각과 수술은 각각 4개이다. 암꽃이삭은 둥글고 가지 윗부분의 잎겨드랑이에 달린다. 암꽃의 화피는 통 모양이고 끝이 2∼4개로 갈라진다. 씨방에 실 같은 암술대가 있다. 열매는 핵과이고 둥글며 6~7월에 붉은빛으로 익는다. 한방에서 열매를 양기 부족·수종의 치료제로 쓴다. 어린잎은 식용한다. The oak tree is also called the bottom, and it is native to Asia, and grows in the sunny side of the foot of the mountain or on the bank of the field. The height reaches 3m and there are short hairs on the small branches, but they disappear soon. The bark is grayish brown. Leaves are alternate, 5-20cm long, egg-shaped or long egg-shaped, long and pointed at the end, and rounded at the bottom. The edge of the leaf has serrations, and it is deeply dug into 2-3 pieces. The front side is rough and there are short hairs on the back side, but they disappear soon. The petiole is 1~2cm long and there are curly hairs, but it gradually disappears. The flowers are male and female and bloom like leaves in spring. Male spikes are 1.5cm long oval-shaped and hang on the bottom of young branches. Each male flower has 4 pieces of pericarp and 4 stamens. The female ear is round and hangs on the leaf axil of the upper part of the branch. The female flower's inflorescence is tubular and the ends are split into 2-4 pieces. There is a style of style in the ovary. Fruit is drupe, round, and ripens red in June-July. In oriental medicine, the fruit is used as a cure for lack of yang and several species. Young leaves are edible.

본 발명자들은 독성이 없으면서 부작용이 적은 천연물 소재의 항노화 조성물을 개발하고자 연구한 결과 상기 노랑느타리버섯, 닥나무가지 혼합 추출물이 항노화 효과를 가짐을 확인하여 본원발명을 완성하였다. As a result of researching to develop an anti-aging composition of a natural material with no toxicity and less side effects, the present inventors completed the present invention by confirming that the mixed extract of yellow oyster mushroom and black oak branch has an anti-aging effect.

본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위하여, 노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. In order to solve the above problems, the present invention aims to provide a composition for preventing or improving skin aging comprising a mixed extract of an extract of Pleurotus citrinopileatus and a branch extract of Broussonetia kazinoki as an active ingredient. do.

상기 목적을 달성하기 위하여, To achieve the above object,

본 발명은 노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for preventing or improving skin aging, comprising a mixed extract of yellow oyster mushroom ( Pleurotus citrinopileatus ) and a mixed extract of Broussonetia kazinoki as an active ingredient.

또한, 본 발명은 노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강식품조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a health food composition for preventing or improving skin aging, comprising a mixed extract of a yellow oyster mushroom (Pleurotus citrinopileatus ) extract and a branch extract of Broussonetia kazinoki as an active ingredient.

본 발명의 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물은 항노화 효과가 우수하므로 화장료, 의약품 등에 용이하게 이용될 수 있다. The mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the oak branch extract of the present invention has excellent anti-aging effects, so it can be easily used in cosmetics, medicines, and the like.

도 1은 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 피부섬유세포(HDF)에서의 세포 독성 평가 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 혼합 비율별 피부섬유세포(HDF)에서의 세포 독성 평가 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 피부섬유세포(HDF)에 대한 세포노화 저해 효과를 나타낸 도이다.
도 4는 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 혼합 비율별 피부섬유세포(HDF)에 대한 세포노화 저해 효과를 나타낸 도이다.
1 is a diagram showing the results of cytotoxicity evaluation in skin fibrous cells (HDF) of a mixed extract of a yellow oyster mushroom extract and a Japanese oak branch extract.
Figure 2 is a diagram showing the results of cytotoxicity evaluation in skin fibrous cells (HDF) by mixing ratio of a mixed extract of a yellow oyster mushroom extract and a mulberry branch extract.
3 is a diagram showing the effect of inhibiting cell aging on skin fibrous cells (HDF) of a mixed extract of a yellow oyster mushroom extract and a mulberry branch extract.
4 is a diagram showing the effect of inhibiting cell aging on skin fibrous cells (HDF) by mixing ratio of a mixed extract of a yellow oyster mushroom extract and a Japanese oak branch extract.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다. Hereinafter, the present invention will be described in detail as an embodiment of the present invention with reference to the accompanying drawings. However, the following embodiments are presented as examples of the present invention, and if it is determined that a detailed description of a technique or configuration well known to those skilled in the art may unnecessarily obscure the subject matter of the present invention, the detailed description may be omitted. However, the present invention is not limited thereby. The present invention is capable of various modifications and applications within the scope of equality interpreted from the description of the claims to be described later and therefrom.

또한, 본 발명에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.In addition, terms used in the present invention are terms used to properly express preferred embodiments of the present invention, which may vary depending on the intention of users or operators, or customs in the field to which the present invention belongs. Therefore, definitions of these terms should be made based on the contents throughout the present specification. Throughout the specification, when a part "includes" a certain component, it means that other components may be further included rather than excluding other components unless specifically stated to the contrary.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. All technical terms used in the present invention, unless otherwise defined, are used in the same meaning as those of ordinary skill in the art generally understand in the related field of the present invention. In addition, although preferred methods or samples are described in the present specification, those similar or equivalent are included in the scope of the present invention.

본 발명은 노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for preventing or improving skin aging, comprising as an active ingredient a mixed extract of a yellow oyster mushroom ( Pleurotus citrinopileatus ) extract and a mulberry ( Broussonetia kazinoki) eggplant extract.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물은 피부섬유세포에 대한 세포노화 저해 효과를 가진다. In one embodiment of the present invention, the mixed extract of the oyster mushroom extract and the black oak branch extract has an effect of inhibiting cell aging on skin fibrous cells.

본 발명에서 사용되는 용어 “조성물(composition)”은 본 발명의 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물에 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들을 혼합한 혼합물을 의미한다.The term “composition” used in the present invention refers to a mixture obtained by mixing other chemical components such as a diluent or carrier with the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the Japanese oak branch extract of the present invention.

본 발명에서 사용되는 용어 “담체(vehicle)”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직 내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이며, 이에 제한되지는 않는다.The term "vehicle" as used herein is defined as a compound that facilitates the addition of the compound into cells or tissues. For example, dimethyl sulfoxide (DMSO) is a commonly used carrier that facilitates the introduction of many organic compounds into cells or tissues of an organism, but is not limited thereto.

본 발명에서 사용되는 용어 “희석제(diluent)”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상적으로 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 이는 인간 용액의 염상태를 모방하고 있기 때문이다. 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.The term "diluent" as used herein is defined as a compound that is diluted in water to dissolve the compound as well as stabilize the biologically active form of the target compound. Salts dissolved in buffer solutions are used as diluents in the art. A commonly used buffer solution is phosphate buffered saline, because it mimics the salt state of human solutions. Because buffer salts can control the pH of a solution at low concentrations, buffer diluents rarely alter the biological activity of a compound.

본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물 및 이의 혼합 추출물을 적절한 추출용매로 추출하고 용매를 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물 및 이의 혼합 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.The term "extract" used in the present invention refers to a formulation obtained by extracting a yellow oyster mushroom extract, a mulberry branch extract, and a mixed extract thereof with an appropriate extraction solvent and evaporating the solvent, but is not limited thereto, It may be an extract obtained by an extraction treatment, a dilution or concentrate of the extract, a dried product obtained by drying the extract, and a crude product or purified product thereof. The yellow oyster mushroom extract, Japanese oak branch extract, and a mixed extract thereof may be prepared using a general extraction method, separation and purification method known in the art. As the extraction method, although not limited thereto, a method such as hot water extraction, hot water extraction, cold needle extraction, reflux cooling extraction, or ultrasonic extraction may be used.

본 발명의 일실시예에 있어서, 노랑느타리버섯 및 닥나무 가지를 혼합한 후 이 혼합물을 추출하거나 노랑느타리버섯 및 닥나무 가지를 각각 추출한 후 이 추출물을 혼합하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 노랑느타리버섯 및 닥나무 가지를 각각 추출한 후 이 추출물을 혼합한 혼합 추출물 일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the mixture may be extracted after mixing yellow oyster mushrooms and mulberry branches, or the extracts may be mixed and used after extracting each of yellow oyster mushrooms and mulberry branches, and preferably, yellow oyster mushrooms and It may be a mixed extract obtained by mixing the extracts after extracting each of the mulberry branches.

본 발명의 일실시예에 있어서, 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물은 물, 메탄올, 알코올, 유기용매 및 이들의 혼합물로 구성되는 군에서 선택되는 용매로 추출되고, 바람직하게는 물이나, 노랑느타리버섯 및 닥나무 가지를 효과적으로 추출하기 위한 목적을 위해서라면 이에 제한되지 않는다.In one embodiment of the present invention, the yellow oyster mushroom extract and the black oyster branch extract are extracted with a solvent selected from the group consisting of water, methanol, alcohol, organic solvents, and mixtures thereof, and preferably water or yellow oyster mushroom. It is not limited thereto if it is for the purpose of effectively extracting mushrooms and oak branches.

각각의 생약 또는 생약 추출물은 1~7 : 7~1의 중량비로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물을 3 : 5의 중량비로 사용하는 것 일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. Each herbal or herbal extract may be used in a weight ratio of 1 to 7: 7 to 1, preferably using a weight ratio of yellow oyster mushroom extract and black oak branch extract in a weight ratio of 3: 5, but is not limited thereto. Does not.

본 발명의 화장료 조성물의 제형으로는 특별히 한정되는 것은 아니지만 피부외용제의 제형인 것이 바람직하며, 상기 피부 외용제 제형의 하나의 바람직한 형태는 유연화장수, 영양화장수, 에센스, 마사지크림, 영양크림, 팩, 클렌저, 젤 또는 피부 점착타입 화장료의 제형을 갖는 화장료 조성물을 들 수 있고, 다른 바람직한 형태로는 로션, 연고, 겔, 크림, 패치 또는 분무제와 같은 경피 투여형의 제형을 들 수 있다. 또한, 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.The formulation of the cosmetic composition of the present invention is not particularly limited, but a formulation for external application for skin is preferred, and one preferred form of the formulation for external application for skin is a softening lotion, nutritional lotion, essence, massage cream, nutritional cream, pack, cleanser , A cosmetic composition having a formulation of a gel or a skin adhesive type cosmetic, and other preferred forms include a transdermal dosage form such as a lotion, ointment, gel, cream, patch or spray. In addition, in the composition for external application of each formulation, components other than the essential components described above may be appropriately selected and blended by a person skilled in the art without difficulty according to the formulation or purpose of use of other external preparations.

본 발명의 화장료 조성물은 바람직하게는 화장품학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액 마이크로 에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 바이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있으며, 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention preferably contains a cosmetically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, e.g. solutions, gels, solid or paste anhydrous products, emulsions obtained by dispersing the oil phase in an aqueous phase, suspension microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) and/or bis. It may be provided in the form of a warm-form vesicle dispersant, or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or conceal stick. In addition, it may be prepared in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. In addition, the cosmetic composition of the present invention may be prepared in the form of an adjuvant that can be applied topically or systemically used in the field of dermatology by containing a dermatologically acceptable medium or base, and these compositions are conventional in the field. It can be manufactured according to the method.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, or zinc oxide may be used as a carrier component. I can.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder may be used as a carrier component. In particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane / May contain propellants such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solvating agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 ,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, an ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylenesorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, and the like may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산에스테르 등이 이용될 수 있다. When the formulation of the present invention is a surfactant containing cleansing, as a carrier component, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linoline derivatives, or ethoxylated glycerol fatty acid esters may be used.

본 발명의 제형은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습체, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.The formulation of the present invention may further contain excipients including fluorescent substances, fungicides, hydrophobic substances, moisturizers, fragrances, fragrance carriers, proteins, solubilizers, sugar derivatives, sunscreen agents, vitamins, plant extracts, etc. .

또한, 본 발명은 노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강식품조성물 또는 건강기능식품 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a health food composition or a health functional food composition for preventing or improving skin aging, comprising a mixed extract of a yellow oyster mushroom (Pleurotus citrinopileatus ) extract and a branch extract of Broussonetia kazinoki as an active ingredient.

본 발명의 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 건강기능식품 및 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 노랑느타리버섯, 닥나무 가지 혼합 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 모두 포함한다.When using the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and Japanese oak branch extract of the present invention as a health functional food and a health food composition, there is no particular limitation on the type of food. Examples of foods to which the mixed extract of yellow oyster mushroom and mulberry branch of the present invention can be added include drinks, meat, sausage, bread, biscuits, rice cakes, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, ice cream Dairy products, including dairy products, various soups, beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes, dairy products and dairy products, etc., and include all health functional foods and health food compositions in the usual sense.

본 발명에 따른 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 및 건강식품 조성물 중의 상기 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The health functional food and health food composition containing the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the mulberry branch extract according to the present invention can be added to food as it is or can be used with other foods or food ingredients, and can be used appropriately according to a conventional method. I can. The mixed amount of the mixed extract of the oyster mushroom extract and the blackberry branch extract may be appropriately determined according to the purpose of use (for prevention or improvement). In general, the amount of the composition in the health functional food and health food composition may be added in an amount of 0.1 to 90 parts by weight of the total food weight. However, in the case of long-term intake for the purpose of maintaining health or for the purpose of health control, the amount may be less than the above range, and there is no problem in terms of safety. It can also be used in more than one amount.

본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물 100당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.The health functional food and health food composition of the present invention is not particularly limited in other ingredients, except for containing a mixed extract of the present invention yellow oyster mushroom extract and blackberry branch extract as an essential ingredient in the indicated ratio, and various flavors such as ordinary beverages. Agents or natural carbohydrates, etc. may be contained as additional components. Examples of the above-described natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, and the like; And polysaccharides, for example, common sugars such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those described above, natural flavoring agents (taumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 of the health functional food and health food composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. In addition to the above, the health functional food and health food composition containing the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the mulberry branch extract of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic flavoring agents and natural flavoring agents, Colorants and thickeners (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonates used in carbonated beverages, etc. It may contain. In addition, the health functional food and health food composition of the present invention may contain flesh for the manufacture of natural fruit juice and fruit juice beverage and vegetable beverage. These components may be used independently or in combination.

이하 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 기술적 사상의 내용과 범위를 쉽게 설명하기 위한 예시일 뿐, 이에 의해 본 발명의 기술적 범위가 한정되거나 변경되는 것은 아니다. 또한 이러한 예시에 기초하여 본 발명의 기술적 사상의 범위 안에서 다양한 변형과 변경이 가능함은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through the following examples. However, the following examples are only examples for easily explaining the content and scope of the technical idea of the present invention, and thereby the technical scope of the present invention is not limited or changed. In addition, based on these examples, it may be easily determined by those skilled in the art that various modifications and changes are possible within the scope of the technical idea of the present invention.

실험예 1: 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물 제조Experimental Example 1: Preparation of mixed extract of yellow oyster mushroom extract and Japanese oak branch extract

노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus, 품종 장다리)은 농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과에서 제공 받아 사용하였다. 구체적으로 노랑느타리버섯을 동결건조 한 후 분쇄하여 상온에서 10배의 증류수로 24시간 침지하여 추출 하였다. 추출 후 여과하고 동결건조 하였다. 상기 건조된 노랑느타리버섯 20g을 추출하여 추출물 12.77g을 수득하였다.Yellow oyster mushroom ( Pleurotus citrinopileatus , cultivar long legs) was provided and used by the National Institute of Horticultural Science and Technology, Rural Development Administration. Specifically, yellow oyster mushrooms were freeze-dried, pulverized, and extracted by immersion in 10 times distilled water at room temperature for 24 hours. After extraction, it was filtered and lyophilized. 20 g of the dried yellow oyster mushroom was extracted to obtain 12.77 g of an extract.

닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지의 추출물은 농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부 추출물 은행에서 제공 받아 사용하였다. 구체적으로 닥나무 가지 물 추출물은 하기와 같은 제조과정을 거쳐 수득하였다. 지리산 쌍곡에서 닥나무의 가지를 채취하여 58℃에서 3일간 건조하였다. 상기 건조된 닥나무 가지 66.19g을 잘게 분쇄한 후 상온에서 10배의 증류수에 24시간 침지하여 추출하였다. 추출액을 여과 후 동결건조하여 추출물 5.51 g을 수득하였다. The extract of the branch of Broussonetia kazinoki was provided by the National Institute of Horticultural Science and Technology, Ginseng Specialty Department, and was used by the Rural Development Administration. Specifically, the water extract of mulberry branch was obtained through the following manufacturing process. The branches of oak trees were collected from the hyperbolic in Mt. Jirisan and dried at 58°C for 3 days. 66.19 g of the dried oak branches were finely pulverized and extracted by immersing in 10 times distilled water at room temperature for 24 hours. The extract was filtered and lyophilized to obtain 5.51 g of the extract.

상기 수득한 노랑느타리버섯 추출물 및 닥나무 가지 추출물은 50 mg/ml 농도로 증류수에 녹여 저장용액을 제조 하였으며, 각각의 추출물 저장용액을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다. The obtained yellow oyster mushroom extract and blackberry branch extract were dissolved in distilled water at a concentration of 50 mg/ml to prepare a stock solution, and a mixed extract was prepared by mixing each extract stock solution.

실험예 2: 피부섬유세포 HDF 세포주 배양 Experimental Example 2:   Skin fibrous cell HDF cell line culture

피부섬유세포(Human dermal fibroblast, HDF) 세포는 항생제(페니실라민 100 unit/ml, 스트렙토마이신 100 g/ml)가 포함된 섬유 모세포 성장배지(fibroblast growth medium)에서 온도 37℃, 5% CO2 가습공기 조건으로 배양 하였다. 이후 세포의 밀도가 80 ~ 90 %에 도달했을 때 트립신 처리 하여 계대배양 하였다.Human dermal fibroblast (HDF) cells are prepared in a fibroblast growth medium containing antibiotics (penicillamine 100 unit/ml, streptomycin 100 g/ml) at 37°C, 5% CO 2 Incubated under humidified air conditions. After that, when the cell density reached 80 ~ 90%, it was subcultured by trypsin treatment.

실험예 3: 독소루비신(doxorubicin) 처리에 의한 세포 노화 유도 Experimental Example 3: Induction of cell senescence by treatment with doxorubicin

피부섬유세포를 직경 100mm 세포배양접시에 1.5 x 105 세포수로 계대 하였다. 37℃, 5 % CO2가 유지되는 배양기에서 3일 동안 배양 하였다. 세포 배지를 제거하고 세척 한 다음 0.5 μM 독소루비신을 4시간 동안 처리 하여 세포 노화를 유도하였다. 독소루비신으로 세포노화가 유도된 피부섬유세포는 실험예 1의 추출물과 함께 4 일 동안 배양 한 후 세포 노화를 측정 하였다. Skin fibrous cells were passaged in a cell culture dish with a diameter of 100 mm at a number of 1.5 x 10 5 cells. Incubated for 3 days in an incubator maintained at 37°C and 5% CO 2. The cell medium was removed, washed, and then treated with 0.5 μM doxorubicin for 4 hours to induce cell senescence. The skin fibrous cells induced cell aging with doxorubicin were cultured for 4 days with the extract of Experimental Example 1, and then cell senescence was measured.

실시예 1: 세포 독성 평가Example 1: Cytotoxicity evaluation

노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 세포 독성은 MTT 분석법을 이용하여 평가하였다. The cytotoxicity of the mixed extract of oyster mushroom extract and Japanese oak branch extract was evaluated using the MTT assay.

구체적으로 상기 실험예 2 및 3에 의해 배양 및 세포 노화를 유도한 피부섬유세포를 상기 실험예 1의 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 3일간 처리하였다. 이후 상기 피부섬유세포에 0.1 % MTT 용액을 2 시간 동안 처리 하고, 배지 제거 후 MTT에 의해 세포 내에 생성 된 포마잔 결정(formazan crystal)을 DMSO(Dimethyl sulfoxide) 100 μL로 용해하였다. 이후 마이크로 플레이트 리더(microplate reader)를 사용하여 550 nm에서의 용액의 흡광도를 측정 하였다. Specifically, the skin fibrous cells inducing culture and cell aging according to Experimental Examples 2 and 3 were treated with the mixed extract of the oyster mushroom extract and the blackberry branch extract of Experimental Example 1 for 3 days. Thereafter, the skin fibrous cells were treated with a 0.1% MTT solution for 2 hours, and after removal of the medium, formazan crystals produced in the cells by MTT were dissolved in 100 μL of DMSO (dimethyl sulfoxide). Thereafter, the absorbance of the solution at 550 nm was measured using a microplate reader.

그 결과 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 노랑느타리버섯 단독 처리군, 닥나무 가지 단독 처리군 및 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물 처리군에서 모두 독소루비신 처리군(Doxo) 보다 세포 생존율이 높은 것으로 확인되었다. As a result, as shown in Figs. 1 and 2, cell viability in all of the group treated with yellow oyster mushroom alone, treated group with mulberry branches alone, and treated group with mixed extracts of yellow oyster mushroom extract and mulberry branch extract were all more than doxorubicin-treated group (Doxo). It was found to be high.

따라서 본 발명의 노랑느타리 단독 추출물, 닥나무 가지 단독 추출물 및 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물은 세포 독성을 가지지 않는 것으로 확인되었다. Therefore, it was confirmed that the extract of the present invention alone had no cytotoxicity.

실시예 2: 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 세포노화 저해 효과 측정Example 2: Measurement of cell aging inhibitory effect of mixed extract of oyster mushroom extract and Japanese oak branch extract

노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 세포노화 저해 효과를 측정하기 위하여, 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 상기 실험예 3과 같이 세포노화를 유도한 피부섬유세포에 3일간 처리하여 SA-β-Gal법으로 세포노화를 측정하였다.In order to measure the cell aging inhibitory effect of the mixed extract of yellow oyster mushroom extract and blackberry branch extract, a mixed extract of yellow oyster mushroom extract and blackberry branch extract was applied to skin fibrous cells inducing cell aging as in Experimental Example 3 for 3 days. After treatment, cell aging was measured by the SA-β-Gal method.

보다 구체적으로, 독소루비신을 4시간 처리한 피부섬유세포에 추출물을 농도별, 비율별로 처리하고, 양성 대조군으로 N-아세틸시스테인(N-acetylcysteine) 20 μM을 처리 한 후 3일 동안 37℃, 5% 이산화탄소 배양기에서 배양 하였다. 이후 배지를 제거하고 3.7% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)로 세포를 1분간 고정한 후, 고정액을 제거 하였다. SA-β-gal 염색 용액(40 mM citric acid/phosphate [pH 5.8], 5 mM potassium ferrocyanide, 5 mM potassium ferricyanide, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl2 , X-gal 1 mg/ml)을 처리 한 후 알루미늄 호일로 차광 하고 37℃에서 18시간 동안 반응시켰다. 이후 인산완충용액 (PBS)로 2번 세척한 후, 광학현미경으로 파란색으로 염색된 세포를 관찰 하였다. More specifically, the extract was treated by concentration and ratio to the skin fibrous cells treated with doxorubicin for 4 hours, and treated with 20 μM of N-acetylcysteine as a positive control, followed by treatment at 37° C., 5% for 3 days. Incubated in a carbon dioxide incubator. Thereafter, the medium was removed and the cells were fixed with 3.7% paraformaldehyde for 1 minute, and then the fixative was removed. After treatment with SA-β-gal staining solution (40 mM citric acid/phosphate [pH 5.8], 5 mM potassium ferrocyanide, 5 mM potassium ferricyanide, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl 2 , X-gal 1 mg/ml) Light-shielded with aluminum foil and reacted at 37°C for 18 hours. After washing twice with a phosphate buffer solution (PBS), cells stained in blue were observed with an optical microscope.

SA-β-gal 염색으로 측정한 세포노화 지수는 사람 섬유아 세포 중에서 세포질에 파란색으로 염색된 세포 수를 측정하여 백분율 (%)로 표시하였다. The cell aging index measured by SA-β-gal staining was expressed as a percentage (%) by measuring the number of cells stained blue in the cytoplasm among human fibroblasts.

그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 혼합비가 1:1인 경우 세포노화 저해 효과가 우수한 것으로 나타났으며, 특히 노랑느타리버섯 추출물 200 μg/mL 단독 처리(Y200), 닥나무 가지 추출물 200 μg/mL 단독 처리(P200)군에 비하여 노랑느타리버섯 추출물 200 μg/mL와 닥나무 가지 추출물 200 μg/mL의 혼합물(Y200 P200)을 처리 하였을 때 세포노화 저해 효과가 우수한 것으로 나타났다. As a result, as shown in Figure 3, when the mixing ratio of the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the mulberry branch extract was 1:1, it was found that the cell aging inhibitory effect was excellent, and in particular, 200 μg/mL of the yellow oyster mushroom extract was treated alone. (Y200), compared with 200 μg/mL of black oak branch extract alone (P200), when treated with a mixture of 200 μg/mL of yellow oyster mushroom extract and 200 μg/mL of black oak branch extract (Y200 P200), the effect of inhibiting cell aging was increased. It turned out to be excellent.

실시예 3: 노랑느타리버섯, 닥나무 가지 혼합 추출물의 혼합 비율별 피부세포에 대한 세포노화 저해 효과 측정Example 3: Measurement of cell aging inhibitory effect on skin cells by mixing ratio of mixed extract of yellow oyster mushroom and Japanese oak branch

노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물의 혼합비율별 세포노화 저해 효과를 측정하기 위하여, 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물을 혼합 비율을 달리하여 상기 실험예 3과 같이 세포노화를 유도한 피부섬유세포에 3일간 처리하여 SA-β-Gal법으로 세포노화를 측정하였다.In order to measure the cell aging inhibitory effect according to the mixing ratio of the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the blackberry branch extract, the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the blackberry branch extract was mixed with different mixing ratios to reduce cell aging as in Experimental Example 3 above. The induced skin fibrous cells were treated for 3 days and cell aging was measured by the SA-β-Gal method.

보다 구체적으로, 독소루비신을 4시간 처리한 피부섬유세포에 추출물을 농도별, 비율별로 처리하고, 양성 대조군으로 N-아세틸시스테인(N-acetylcysteine) 20 μM을 처리 하였다. 이후 3일 동안 37℃, 5% 이산화탄소 배양기에서 배양 하였다. 이후 배지를 제거하고 3.7% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)로 세포를 1분간 고정한 후, 고정액을 제거 하였다. SA-β-gal 염색 용액(40 mM citric acid/phosphate [pH 5.8], 5 mM potassium ferrocyanide, 5 mM potassium ferricyanide, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl2 , X-gal 1 mg/ml)을 처리 한 후 알루미늄 호일로 차광 하고 37℃에서 18시간 동안 반응시켰다. 이후 인산완충용액 (PBS)로 2번 세척한 후, 광학현미경으로 파란색으로 염색된 세포를 관찰 하였다. More specifically, the extract was treated by concentration and ratio on the skin fibrous cells treated with doxorubicin for 4 hours, and 20 μM of N-acetylcysteine was treated as a positive control. After that, it was incubated in an incubator at 37° C. and 5% carbon dioxide for 3 days. Thereafter, the medium was removed and the cells were fixed with 3.7% paraformaldehyde for 1 minute, and then the fixative was removed. After treatment with SA-β-gal staining solution (40 mM citric acid/phosphate [pH 5.8], 5 mM potassium ferrocyanide, 5 mM potassium ferricyanide, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl 2 , X-gal 1 mg/ml) Light-shielded with aluminum foil and reacted at 37°C for 18 hours. After washing twice with a phosphate buffer solution (PBS), cells stained in blue were observed with an optical microscope.

SA-β-gal 염색으로 측정한 세포노화 지수는 사람 섬유아 세포 중에서 세포질에 파란색으로 염색된 세포 수를 측정하여 백분율 (%)로 표시하였다. The cell aging index measured by SA-β-gal staining was expressed as a percentage (%) by measuring the number of cells stained blue in the cytoplasm among human fibroblasts.

그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 노랑느타리버섯 추출물 75 μg/mL와 닥나무 가지 추출물 125 μg/mL의 혼합 추출물(Y75 P125)을 처리한 경우 세포 노화 저해효과가 우수하여 노랑느타리버섯과 닥나무 가지 혼합 추출물의 혼합비가 3 : 5인 경우 세포 노화 저해 효과가 뛰어난 것으로 나타났으며 상기 혼합비 외에 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합비가 1:3, 3:5, 5:3, 3:1 및 7:1 인 처리군에서도 우수한 세포 노화 저해효과를 나타내어, 본 발명의 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합 추출물은 각각의 단독 추출물보다 뛰어난 세포 노화 저해효과가 있음을 확인하였다. As a result, as shown in Figure 4, when treated with a mixed extract (Y75 P125) of 75 μg/mL of yellow oyster mushroom extract and 125 μg/mL of blackberry branch extract (Y75 P125), the effect of inhibiting cell aging was excellent, and thus the mixture of yellow oyster mushroom and mulberry branch When the mixing ratio of the extract is 3: 5, it was found that the cell aging inhibitory effect was excellent, and in addition to the mixing ratio, the mixing ratio of yellow oyster mushroom extract and blackberry branch extract was 1:3, 3:5, 5:3, 3:1 and 7 : It was confirmed that the mixed extract of the yellow oyster mushroom extract and the Japanese oak branch extract of the present invention had superior cellular senescence inhibitory effect than each of the single extracts.

Claims (5)

노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for preventing or improving skin aging, comprising a mixed extract of yellow oyster mushroom ( Pleurotus citrinopileatus ) extract and oak tree (Broussonetia kazinoki) eggplant extract. 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출된 것을 특징으로 하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The extract is a cosmetic composition for preventing or improving skin aging, characterized in that the extract is extracted with any one solvent selected from the group consisting of water, C 1 to C 4 lower alcohol or a mixed solvent thereof.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 세포 노화 저해 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The composition is a cosmetic composition for preventing or improving skin aging, characterized in that it has a cell aging inhibitory effect.
제1항에 있어서,
상기 노랑느타리버섯 추출물과 닥나무 가지 추출물의 혼합비는 1:3, 3:5, 5:3, 3:1, 7:1 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
A cosmetic composition for preventing or improving skin aging, characterized in that the mixing ratio of the yellow oyster mushroom extract and oak branch extract is any one of 1:3, 3:5, 5:3, 3:1, and 7:1.
노랑느타리버섯(Pleurotus citrinopileatus) 추출물 및 닥나무(Broussonetia kazinoki) 가지 추출물의 혼합 추출물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강식품조성물.


Yellow oyster mushroom ( Pleurotus citrinopileatus ) extract and black oak (Broussonetia kazinoki) a health food composition for preventing or improving skin aging, including a mixed extract of eggplant extract.


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