KR20210022553A - 페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법 - Google Patents

페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20210022553A
KR20210022553A KR1020207034488A KR20207034488A KR20210022553A KR 20210022553 A KR20210022553 A KR 20210022553A KR 1020207034488 A KR1020207034488 A KR 1020207034488A KR 20207034488 A KR20207034488 A KR 20207034488A KR 20210022553 A KR20210022553 A KR 20210022553A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
aryl
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
triazolopyrimidinone
Prior art date
Application number
KR1020207034488A
Other languages
English (en)
Inventor
티모시 더블유 코르손
승용 서
비트 이
카마크쉬 시쉬틀라
Original Assignee
인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션
가천대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션, 가천대학교 산학협력단 filed Critical 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션
Publication of KR20210022553A publication Critical patent/KR20210022553A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/409—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having four such rings, e.g. porphine derivatives, bilirubin, biliverdine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4706—4-Aminoquinolines; 8-Aminoquinolines, e.g. chloroquine, primaquine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/49—Cinchonan derivatives, e.g. quinine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/179—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/14—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/11—Antisense
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/31—Combination therapy
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)

Abstract

본 발명은 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 유도체로 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 트리아 졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 페로 킬라타아제 억제제로 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법
발명의 분야
본 발명은 페로켈라타아제(ferrochelatase) 억제제 또는 이의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 트리아졸로피리미디논인 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다.
정부 지원의 성명
본 발명은 국립 보건원(National Institutes of Health)이 수여하는 TR001106 및 EY025641 하에 정부의 지원을 받아 이루어졌다. 정부는 발명에 대한 특정 권리를 갖는다.
본 발명은 일반적으로 페로켈라타아제 억제제 및 항혈관신생 요법 및 다른 요법에서 억제제를 사용하는 방법에 관한 것이다. 특히, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 혈관신생 매개 질환 및 장애(예컨대, 암), 및 신생혈관 질환, 예컨대 신생혈관 안 질환을 치료하기 위한 페로켈라타아제 억제제로서 작용할 수 있다. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 또한 말라리아를 치료하기 위해 사용될 수 있다.
헴(heme) 합성 효소 페로켈라타아제(FECH; EC 4.99.1.1)는 1981년에 처음 정제된 이후 상당한 관심을 모으고 있다. 이것은 미토콘드리아에서 발견되며, 헴 생합성의 마지막 단계에서, 프로토포르피린 IX(PPIX)의 포르피린 고리 중심에 제1 철 이온을 삽입하는 역할을 한다. FECH 유전자에서 부분적인 기능 상실 돌연변이는 PPIX의 광독성 축적을 특징으로 하는 혈액 장애인 적혈구 생성 프로토포르피린증을 야기한다. 따라서, 감소된 FECH 활성 상태를 잠재적으로 치료하기 위해 페로켈라타아제의 소분자 활성화제를 발견하기 위한 노력이 있어왔다.
그러나 최근 FECH의 억제는 또한 여러 징후에 대한 잠재력이 있는 치료 수단으로 부상하고 있다. 두 가지 FECH 억제제가 전임상 연구에서 널리 사용된다. N-메틸프로토포르피린(NMPP)은 전이 상태 유사체이며 상당히 강력한 FECH 억제제이다. 오랫동안 승인된 항진균 약물 그리세오풀빈은 흥미롭게도 사이토크롬 P450의 헴 기를 알킬화하여 생체 내에서 NMPP를 형성하고, 따라서 세포 및 온전한 유기체에서 새로운 FECH 억제제로 사용할 수 있다. FECH는 또한 키나아제 억제제 암 약물의 일반적인 비표적 단백질 분자이지만, 물론 이러한 약제는 다른 주요 생물학적 표적을 가지고 있다. 유용한 특이적인 FECH 억제제에 대한 필요성은 단백질을 질환에 연루시키는 작업이 증가하여 강조되어 왔다.
예를 들어, FECH는 안과 신생혈관증식의 매개체로 확인되었다. 신생혈관증식은 이것으로 제한되는 것은 아니지만 미숙아 망막병증, 습성 노화 관련 황반 변성(AMD), 및 증식성 당뇨병성 망막병증(proliferative diabetic retinopathy)을 포함하는 다수의 주요 맹검 안 질환의 중요한 병리학적 결정 인자이다. FECH는 맥락막 신생혈관증식을 겪는 인간과 쥐의 눈 모두에서(습성 AMD에서 알 수 있는 바와 같이) 상향 조절된다. 더욱이, FECH의 녹다운 또는 돌연변이는 시험관 내 및 생체 내 혈관신생을 차단한다. 시험관 내에서, NMPP 및 그리세오풀빈 둘 모두는 세포 사멸을 야기함이 없이 내피세포 성장을 선택적으로 차단하며, 생체 내에서, 경구 또는 유리체 내(눈으로) 그리세오풀빈은 맥락막 신생혈관증식을 감소시킨다. FECH는 또한 미숙아 망막병증 및 증식성 당뇨병성 망막병증과 같은 질환에서 보이는 망막 혈관신생의 모델인 산소 유발성 망막병증을 겪는 마우스 눈에서 상향 조절되며 유리체 내 그리세오풀빈은 이 모델에서 효과적인 요법이다. 내피 산화질소 신타아제와 같은 프로혈관형성 신호전달 단백질의 기능에 필요한 헴 보조 인자의 고갈은 FECH 억제의 항혈관형성 효과에 대한 중요한 메커니즘인 것으로 보인다. FECH 표적화 약제의 개발은 예를 들어 모든 환자에게 효과적이지 않으며 부작용과 관련된 신생혈관증식을 수반하는 질환을 치료하기 위해 현재 사용되는 항혈관 내피 성장 인자 약제를 보완하거나 대체할 수 있다.
놀랍게도 FECH는 또한 말라리아에도 역할을 한다. 이러한 모기 매개 기생충 질환에 대한 새로운 치료가 절실히 필요하며, 숙주 단백질은 흥미로운 표적이다. 병원성 플라스모디움 (Plasmodium) 종은 이들 자신의 FECH 유전자를 가지고 있지만, 그것은 필수적이지 않으며; 따라서 기생충은 숙주 적혈구 FECH에 의존하는 것처럼 보인다. 따라서 Fech 돌연변이 마우스는 플라스모디움 감염에 대한 저항력이 있으며 적혈구 생성 프로토포르피린증 환자의 적혈구는 플라스모디움 성장을 불량하게 지원한다. 또한 NMPP는 유사한 효과를 갖는 그리세오풀빈과 함께 시험관 내 기생충 성장을 차단한다. 그리세오풀빈으로 치료받은 환자의 혈액은 또한 플라스모디움 성장 감소를 나타낸다. 따라서 FECH를 차단하는 새로운 방식은 말라리아 치료에서 유용할 수 있다.
마지막으로, FECH 억제는 암 치료에서 유용성을 발견할 수 있다. 광역학 요법(PDT: photodynamic therapy) 및 광역학 진단(PDD: photodynamic diagnosis)의 한 가지 모드는 FECH 억제의 이점일 수 있다. 헴 생합성 경로의 첫 번째 화합물인 5-아미노레불린 산을 환자에게 투여하면, 특히 교모세포종과 같은 이미 낮은 FECH 활성을 갖는 특정 암 유형에서 광독성 PPIX의 축적을 초래한다. FECH가 PPIX를 헴으로 전환한다는 점을 감안할 때, FECH의 차단은 이 공정을 강화하여 PDT/PDD 효과를 증강 시킬 수 있다. 이것은 다중 시스템에서 나타났다. FECH 녹다운이 있는 신경교종, 유방 암종, 및 요로상피 암종 세포는 증강된 5-아미노레불린산 매개 PDT를 나타내며, 결장암 세포는 증가된 PPIX를 나타내었다. 그리세오풀빈은 골육종 및 구강 편평 세포 암종 세포주에서 ALA-PDT를 증강시켰다. 요로상피 암종 세포 및 동물 모델에서 철 킬레이터제 데페록사민을 사용하여 FECH 기능을 간접적으로 차단하여(그의 기질 중 하나를 제거함으로써) 증강된 PDT를 유도하였다. 유사한 효과를 전립선암 모델, 조직구 림프종 및 위암에서 볼 수 있었다. 그리고 마우스 피부 종양에서, (독성) Pb2 +(PPIX의 정상, Fe2 + 금속화로 방해함)를 사용한 FECH 차단은 PPIX 축적 및 광독성을 증강시켰다.
FECH 억제제의 이러한 모든 매력적인 잠재적 유용성과 다른 억제제의 한계 및 FECH 억제의 간접적인 방법을 고려할 때, 추가적인 소분자 FECH 억제제가 필요하다.
본 발명은 일반적으로 다양한 질환 및 장애를 치료하기 위한 FECH 억제제 및 그의 용도에 관한 것이다. 특히, FECH 억제를 위한 고 처리량 스크린을 사용하여, 본 발명은 일련의 트리아졸로피리미디논 히트를 확인하였다. 이러한 히트 화합물(hit compound)의 새로운 유도체가 그 후 합성되었다. 이들 중 일부는 FECH 억제 어세이에서 NMPP만큼 성능을 발휘하며, 약물 유사 성질을 가지고 있다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다:
Figure pct00001
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 2의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00002
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 3의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00003
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4a의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00004
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4b의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00005
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4c의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00006
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4d의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00007
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4e의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00008
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4f의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00009
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4g의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00010
또 다른 실시양태에서, 혈관신생 매개 질환이 있는 환자를 치료하기 위한 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 방법은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다:
Figure pct00011
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5 이고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되며;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
또 다른 실시양태에서, 말라리아 환자를 치료하기 위한 방법이 제공된다. 방법은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다:
Figure pct00012
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다. 다른 실시양태에서, 질환은 말라리아이고, 그 방법은 클로로퀸(아라렌(Aralen)), 퀴닌 설페이트(쿠알라퀸(Qualaquin)), 아르테미시닌, 히드록시클로로퀸(플라케닐(Plaquenil), 메플로퀸, 아토바쿠온과 프로구아닐의 조합(말라론(Malarone)), 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함한다.
하기의 번호가 매겨진 조항에 기재된 다양한 실시양태는 이 "요약" 섹션 및 "예시적인 실시양태의 상세한 설명" 또는 "실시예"라는 제목의 본 특허 출원의 섹션 또는 본 출원에 첨부한 "청구범위"에서 기재된 임의의 실시양태에 적용 가능하다.
1. 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00013
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
2. R1이 C6-C10 아릴이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환된 것인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
3. R1이 4-tert-부틸페닐인 조항 1 또는 조항 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
4. R2가 C1-C6 알킬NR6R7이며, R3이 H인 전술한 임의의 조항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
5. R1이 C1-C6 알킬NR4R5인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
6. R2가 n-프로필 또는 이소-프로필이며, R3이 H인 조항 1 또는 조항 5의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
7. R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하는 것인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
8. R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5원 카르보시클릭 고리를 형성하는 조항 1 또는 조항 7의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
9. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
10. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00017
,
Figure pct00018
Figure pct00019
11. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 혈관신생 매개 질환(angiogenesis-mediated disease)이 있는 환자의 치료 방법.
12. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 조항 11의 방법:
Figure pct00020
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5 이고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되며;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, ­OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
13. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 1000 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 조항 11 또는 조항 12 중 어느 한 항의 방법.
14. 혈관신생 매개 질환은 암, 신생혈관증식을 수반하는 질환, 미숙아 망막병증, 습성 노화 관련 황반 변성(wet age-related macular degeneration), 고혈압성 망막병증, 망막 중심 정맥 폐쇄(central retinal vein occlusion), 망막 분지 정맥 폐쇄(branch retinal vein occlusion), 신생혈관 녹내장, 망막모세포종, 당뇨병성 황반 부종, 및 증식성 당뇨병성 망막병증으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조항 11 내지 조항 13 중 어느 한 항의 방법.
15. N-메틸프로토포르피린(NMPP) 또는 이의 유사체, 그리세오풀빈 또는 이의 유사체, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 안티센스 RNA, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 RNA 침묵 또는 RNA 간섭(RNAi)을 위한 제제, 페로켈라타아제(FECH) DNA의 CRISPR/Cas9 매개 또는 징크 핑거 뉴클레아제 매개 유전자 절제를 위한 제제, 항 VEGF 요법을 위한 제제, 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 조항 11 내지 조항 14 중 어느 한 항의 방법.
16. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 500 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 조항 11 내지 조항 15 중 어느 한 항의 방법.
17. 질환이 암이고, 암은 신경교종, 유방암, 방광암, 결장암, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된 것인 조항 14의 방법.
18. 광역학 요법(PDT)으로 환자를 치료하는 것을 더 포함하는 조항 17의 방법.
19. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안과 질환을 치료하기 위해 사용되며, 눈에 직접 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 16 중 어느 한 항의 방법.
20. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 주사로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
21. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 점안액 형태로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
22. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안연고 형태로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
23. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 비경구 투여로 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 18 중 어느 한 항의 방법.
24. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 경구로 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 18 중 어느 한 항의 방법.
25. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 약학적 조성물로 투여되고, 여기서 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함하는 것인 조항 11 내지 조항 24 중 어느 한 항의 방법.
26. 환자에게 항 VEGF제를 투여하는 단계를 더 포함하는 조항 11 내지 조항 25 중 어느 한 항의 방법.
27. 항 VEGF제는 라니비주맙, 베바시주맙, 애플리버셉트(aflibercept), 아비시파르 페골(abicipar pegol), 브롤루시주맙, 파리시맙, 보롤라닙(vorolanib), 임의의 이들 VEGF제에 대한 바이오시밀러, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조항 26의 방법.
28. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 단일 주사 또는 다중 주사를 사용하여 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 20 중 어느 한 항의 방법.
29. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 말라리아 환자의 치료 방법.
30. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 조항 29의 방법:
Figure pct00021
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5이며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하며;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
31. 질환이 말라리아이고, 방법은 클로로퀸(아라렌(Aralen)), 퀴닌 설페이트(쿠알라퀸(Qualaquin)), 아르테미시닌, 히드록시클로로퀸(플라케닐(Plaquenil)), 메플로퀸, 아토바쿠온과 프로구아닐의 조합(말라론(Malarone)), 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 것인 조항 29 또는 조항 30의 방법.
특허 또는 출원 파일에는 컬러로 실행된 도면을 적어도 하나 포함한다. 컬러 도면(들)이 있는 이 특허 또는 특허 출원 간행물의 사본은 요청 및 필요한 비용 지불시 관청에서 제공될 것이다.
하기의 상세한 설명을 고려할 때 본 발명은 더 잘 이해 될 것이고, 상기 설명된 것 이외의 특징, 양상 및 장점은 명백해질 것이다. 이러한 상세한 설명은 하기 도면을 참조하며, 여기서:
도 1은 실시예 1에서 수행된 바의 FECH 억제제 스크린의 최적화를 나타낸다. 10 μM NMPP(청색 사각형) 또는 비히클(적색 원)을 사용한 Z'의 결정은 FECH 활성 어세이에 대한 신호-잡음 비를 나타낸다; 표시된 각각의 처리에 대한 평균(실선) 주변의 3 SD(점선). 이 실험에서 Z'는 0.73이었다(n = 192 웰/처리).
도2는 고 처리량의 FECH 스크린에 대한 작업흐름을 나타낸다. 각 단계를 통과하는 화합물의 수(시작하는 수의 %)가 표시된다.
도 3은 10μM에서 테스트된 664개 화합물의 2차 스크린 결과를 나타낸다. 히트는 DMSO 대조(평균 ± SD, 녹색 영역)에 비해 FECH 활성을 > 50 %(적색 영역) 억제하는 것으로 선택되었다. 이 스크린에서 93개의 화합물이 히트로 선택되었다.
도 4는 FECH의 억제에 대한 용량-반응을 나타낸다. 재조합 FECH에 대한 IC50 (μM)은 양성 대조 화합물 NMPP, 스크리닝 히트 D351-0310 및 신규 화합물 4e에 대해 표시되었다.
도 5는 HREC에서 프로토포르피린 IX(PPIX)의 축적을 나타낸다. FECH 억제는 그의 기질 PPIX의 축적을 초래하여야 한다. NMPP, 공지의 FECH 억제제와 두 가지 농도의 화합물 4e 둘 모두로 처리하면 HREC에서 PPIX 축적을 초래하여 이들 화합물이 세포에서 FECH를 억제함을 나타낸다. DMSO 대조에 대해 ***, p<0.001, 던넷 사후 테스트(Dunnett's post hoc test)를 사용한 ANOVA. 평균±SD, n=3.
도 6A 및 6B는 트리아졸로피리미디논이 용량 의존적으로 HREC의 관 형성을 차단함을 나타낸다. 도 6A는 HREC 관 형성에서 대표적인 스크리닝 히트 화합물의 효과를 나타낸다. 도 5B는 HREC 관 형성에서 FECH에 대해 활성인 새롭게 합성된 화합물의 효과를 나타낸다. DMSO 대조에 대해 *, p<0.05; **, p<0.01; ***, p<0.001, 던넷 사후 테스트를 사용한 ANOVA. 평균±SEM, n=6.
도 7A-D는 신규 트리아졸로피리미디논이 용량 의존적으로 HREC의 관 형성을 차단한다는 것을 나타낸다. 대표적인 이미지와 함께, HREC 관 형성에서 FECH에 대해 활성인 새롭게 합성된 화합물의 효과를 나타낸다. DMSO 대조에 대해 *, p<0.05; **, p<0.01; ***, p<0.001, 던넷 사후 테스트를 사용한 ANOVA. 평균±SEM, n=6. 스케일 바 = 500 μm.
예시적인 실시양태의 상세한 설명
본 발명은 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 사용한 환자의 치료 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 페로켈라타아제 억제제를 사용한 환자의 치료 방법에 관한 것이다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명은 하기 화학식의 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다:
Figure pct00022
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
일부 실시양태에서, R1은 C6-C10 아릴이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환된다. 일부 실시양태에서, R1은 4-tert-부틸페닐이다. 일부 실시양태에서, R2는 C1-C6 알킬NR6R7이고, R3은 H이다. 일부 실시양태에서, R1은 C1-C6 알킬NR4R5이다. 일부 실시양태에서, R2는 n-프로필 또는 이소-프로필이고, R3은 H이다. 일부 실시양태에서, R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성한다. 일부 실시양태에서, R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5원 카르보시클릭 고리를 형성한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 2의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00023
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 3의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00024
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4a의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00025
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4b의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00026
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4c의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00027
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4d의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00028
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4e의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00029
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4f의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00030
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기 화합물 4g의 페로켈라타아제 억제제에 관한 것이다:
Figure pct00031
여전히 다른 실시양태에서, 본 발명은 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다:
Figure pct00032
,
Figure pct00033
Figure pct00034
또 다른 실시양태에서, 혈관신생 매개 질환이 있는 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 그 방법은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
여전히 다른 실시양태에서, 말라리아 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 그 방법은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
하기의 번호가 매겨진 조항에 기재된 다양한 실시양태는 이 "요약" 섹션 및 "예시적인 실시양태의 상세한 설명" 또는 "실시예"라는 제목의 본 특허 출원의 섹션 또는 본 출원에 첨부한 "청구범위"에서 기재된 임의의 실시양태에 적용 가능하다.
1. 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00035
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
2. R1이 C6-C10 아릴이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환된 것인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
3. R1이 4-tert-부틸페닐인 조항 1 또는 조항 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
4. R2가 C1-C6 알킬NR6R7이며, R3이 H인 전술한 임의의 조항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
5. R1이 C1-C6 알킬NR4R5인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
6. R2가 n-프로필 또는 이소-프로필이며, R3이 H인 조항 1 또는 조항 5의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
7. R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하는 것인 조항 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
8. R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5원 카르보시클릭 고리를 형성하는 것인 조항 1 또는 조항 7의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
9. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00036
Figure pct00037
10. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
Figure pct00038
,
Figure pct00039
Figure pct00040
11. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 혈관신생 매개 질환이 있는 환자의 치료 방법.
12. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 조항 11의 방법:
Figure pct00041
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5 이고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되며;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, ­OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
13. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 1000 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 조항 11 또는 조항 12 중 어느 한 항의 방법.
14. 혈관신생 매개 질환이 암, 신생혈관증식을 수반하는 질환, 미숙아 망막병증, 습성 노화 관련 황반 변성, 고혈압성 망막병증, 망막 중심 정맥 폐쇄, 망막 분지 정맥 폐쇄, 신생혈관 녹내장, 망막모세포종, 당뇨병성 황반 부종, 및 증식성 당뇨병성 망막병증으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조항 11 내지 조항 13 중 어느 한 항의 방법.
15. N-메틸프로토포르피린(NMPP) 또는 이의 유사체, 그리세오풀빈 또는 이의 유사체, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 안티센스 RNA, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 RNA 침묵 또는 RNA 간섭(RNAi)을 위한 제제, 페로켈라타아제(FECH) DNA의 CRISPR/Cas9 매개 또는 징크 핑거 뉴클레아제 매개 유전자 절제를 위한 제제, 항 VEGF 요법을 위한 제제, 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 조항 11 내지 조항 14 중 어느 한 항의 방법.
16. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 500 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 조항 11 내지 조항 15 중 어느 한 항의 방법.
17. 질환이 암이고, 암은 신경교종, 유방암, 방광암, 결장암, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조항 14의 방법.
18. 광역학 요법(PDT)으로 환자를 치료하는 것을 더 포함하는 조항 17의 방법.
19. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안과 질환을 치료하기 위해 사용되며, 눈에 직접 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 16 중 어느 한 항의 방법.
20. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 주사로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
21. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 점안액 형태로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
22. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안연고 형태로 투여되는 것인 조항 19의 방법.
23. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 비경구 투여로 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 18 중 어느 한 항의 방법.
24. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 경구로 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 18 중 어느 한 항의 방법.
25. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 약학적 조성물로 투여되고, 여기서 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함하는 것인 조항 11 내지 조항 24 중 어느 한 항의 방법.
26. 환자에게 항 VEGF제를 투여하는 단계를 더 포함하는 조항 11 내지 조항 25 중 어느 한 항의 방법.
27. 항 VEGF제는 라니비주맙, 베바시주맙, 애플리버셉트, 아비시파르 페골, 브롤루시주맙, 파리시맙, 보롤라닙, 임의의 이들 VEGF제에 대한 바이오시밀러, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조항 26의 방법.
28. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 단일 주사 또는 다중 주사를 사용하여 투여되는 것인 조항 11 내지 조항 20 중 어느 한 항의 방법.
29. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 말라리아 환자의 치료 방법.
30. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 조항 29의 방법:
Figure pct00042
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5이며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하며;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, ­OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
31. 질환이 말라리아이고, 방법은 클로로퀸(아라렌), 퀴닌 설페이트(쿠알라퀸), 아르테미시닌, 히드록시클로로퀸(플라케닐), 메플로퀸, 아토바쿠온과 프로구아닐의 조합(말라론), 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 것인 조항 29 또는 조항 30의 방법.
본 발명은 일반적으로 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 억제제를 사용하는 항혈관형성 요법으로서 또는 는 말라리아를 위한 요법으로서 페로켈라타아제를 억제하는 방법에 관한 것이다. 특히, 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 페로켈라타아제를 억제할 수 있음이 현재 밝혀졌다.
일부 실시양태에서, 페로켈라타아제를 억제하기 위해 본원에서 제공된 방법 과 관련하여 사용하기에 적합한 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체는 하기 화학식을 갖는 것을 포함한다:
Figure pct00043
식 중,
R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5 이고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되며;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, ­OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
일부 실시양태에서, 페로켈라타아제를 억제하기 위해 본원에서 제공된 방법과 관련하여 적합한 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체는 하기 일반식 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 갖는 것을 포함한다:
Figure pct00044
식 중,
R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
각각의 R4는 H이며;
R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
일부 실시양태에서, 페로켈라타아제를 억제하기 위한 본원에서 제공된 방법과 관련하여 사용하기에 적합한 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체는 하기 일반식을 갖는 것을 포함한다:
Figure pct00045
식 중,
R1, R2 및 R3은 알킬, 치환된 알킬, 알콕시, 치환된 알콕시, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 아릴 카르보닐옥시, 치환된 아릴 카르보닐옥시, 할로겐, 아미노, 니트로, 히드로카르빌, 및 치환된 히드로카르빌로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된다.
본원에서 기재된 방법과 관련하여 사용하기에 특히 적합한 트리아졸로피리미디논 및 유도체는 예를 들어 실시예에서 표 1 및 2에 기재된 것을 포함한다. 또한, 본원에서 기재된 방법과 관련하여 사용하기에 특히 적합한 트리아졸로피리미디논 및 유도체는 하기를 포함한다:
Figure pct00046
Figure pct00047
Figure pct00048
Figure pct00049
일부 실시양태에서, 페로켈라타아제 억제를 위한 적합한 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체는 하기를 포함한다:
Figure pct00050
Figure pct00051
한 실시양태에서, 본 발명은 페로켈라타아제를 억제하기 위한 상기 트리아졸로피리미디논, 및 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 단독 또는 조성물의 용도에 관한 것이다. 특히 현재 이것은 페로켈라타아제를 차단하여 혈관신생을 억제하는 것으로 나타났다. 페로켈라타아제의 억제는 눈의 신생혈관증식을 차단하여, 신생혈관 안 질환 예컨대 미숙아 망막병증(ROP), 증식성 당뇨병성 망막병증(PDR), 고혈압성 망막병증, 망막 중심 정맥 폐쇄, 망막 분지 정맥 폐쇄, 신생혈관 녹내장, 망막모세포종, 당뇨병성 황반 부종, 병리학적 근시, 폐쇄성 혈관염, 폴립모양 맥락막 혈관병증(polypoidal choroidal vasculopathy), 포도막염 황반 부종, 각막 신생혈관증식, 망막 신생혈관증식, 눈 히스토플라스마증(ocular histoplasmosis), 및 습성 노화 관련 황반 변성(AMD)을 치료할 뿐만 아니라 암을 치료하는 것임을 보여주었다. 또 다른 양상에서, 페로켈라타아제의 억제는 말라리아 치료에 대한 가능성을 보여 주었다.
페로켈라타아제(FECH)는 헴 생합성의 마지막 단계를 담당하는 핵 코딩된 미토콘드리아 내막 관련 효소이다. FECH는 프로토포르피린 IX(PPIX)의 중심에 제1 철 이온(Fe2+)의 삽입을 촉매화 하여 헴 형성을 완료한다. Fe2 +는 채널 ABCB10에 의해 안정화된 내막 철 수송체 미토페린에 의해 공급되는 한편, PPIX는 PPIX를 전달하기 위해 FECH와 복합체를 형성할 가능성이 있는 프로토포르피리노겐 옥시다아제로 끝나는 포르피린 합성 효소의 캐스케이드에 의해 생성된다. FECH 합성된 헴은 그 후 질산 옥시다아제 신타아제(NOS: nitric oxidase synthase), 미토콘드리아 복합체 IV, 헴옥시게나아제 1(HO-1) 등과 같은 혈관신생에 중요한 단백질을 포함하는, 세포 내의 헤모단백질에 의해 보조 인자로 이용된다.
한 실시양태에서, 혈관신생 매개 질환이 있는 환자의 치료 방법이 제공된다. 그 방법은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
본원에서 기재된 바의, "환자"는 인간일 수 있거나, 또는 수의학 적용의 경우, 환자는 실험실 동물, 농업 동물, 가축 또는 야생 동물일 수 있다. 다양한 양상에서, 환자는 실험실 동물 예컨대 설치류(예컨대, 마우스, 쥐, 햄스터 등), 토끼, 원숭이, 침팬지, 가축 예컨대 개, 고양이, 또는 토끼, 농업 동물 예컨대 소, 말, 돼지, 양, 염소, 또는 사육하는 야생 동물 예컨대 곰, 판다, 사자, 호랑이, 표범, 코끼리, 얼룩말, 기린, 고릴라, 돌고래 또는 고래일 수 있다.
트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 더하여 투여될 수 있는 예시적인 페로켈라타아제 억제제는 N-메틸프로토포르피린(NMPP), 또는 이의 유사체, 및 FDA 승인된 항진균 약물 그리세오풀빈, 또는 이의 유사체, 및 이들의 조합을 포함한다. 그리세오풀빈 유사체의 예는 문헌[De Matteis, et al., Labelling in vivo and chirality of griseofulvin-derived N-alkylated protoporphyrins, Biochem J., vol. 280(Pt 3), pp. 813-816 (1991)]에 기재되어 있으며, 본원에서 참조로 통합된다. NMPP의 유사체의 예는 문헌[McCluskey, et al., Differential inhibition of hepatic ferrochelatase by regioisomers of N-butyl-, N-pentyl-, N-hexyl-, and N-isobutylprotoporphyrin IX, Molecular Pharmacology, vol. 34, pp. 80-86 (1988)]에 기재되어 있으며, 본원에서 참조로 통합된다. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염에 더하여 투여될 수 있는 다른 예시적인 페로켈라타아제 억제제는 이것으로 제한되는 것은 아니지만, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 안티센스 RNA, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 RNA 침묵 또는 RNA 간섭(RNAi)을 위한 제제, 페로켈라타아제(FECH) DNA의 CRISPR/Cas9 매개 유전자 절제를 위한 제제, 페로켈라타아제(FECH) DNA의 징크 핑거 뉴클레아제 매개 유전자 절제를 위한 제제, 및 이들의 조합, 또는 이 단락에서 기재된 소 분자 억제제를 위한 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.
한 실시양태에서, 환자에게 투여되는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 양은 치료되는 질환, 환자의 연령 및 체중, 질환의 중증도, 투여 경로 및 조직 분포에 따라 매우 유의하게 의존할 수 있다. 한 양상에서, 환자에게 투여되는 양은 신체 표면적 또는 질량을 근거로 할 수 있다. 적합한 투여량은 예를 들어 의사, 수의사, 과학자 및 기타 의료 및 연구 전문가와 같은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
다양한 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 적합한 투여량은 약 0.01 μM 내지 약 10 μM, 약 0.01 μM 내지 약 20 μM, 약 0.01 μM 내지 약 30 μM, 약 0.01 μM 내지 약 40 μM, 약 0.01 μM 내지 약 50 μM, 약 0.01 μM 내지 약 60 μM, 약 0.01 μM 내지 약 70 μM, 약 0.01 μM 내지 약 80 μM, 약 0.01 μM 내지 약 90 μM, 약 0.01 μM 내지 약 100 μM, 약 0.01 μM 내지 약 150 μM, 약 0.01 μM 내지 약 200 μM, 약 0.01 μM 내지 약 300 μM, 약 0.01 μM 내지 약 400 μM, 약 0.01 μM 내지 약 500 μM, 약 0.01 μM 내지 약 1000 μM, 약 0.5 μM 내지 약 10 μM, 약 0.5 μM 내지 약 20 μM, 약 0.5 μM 내지 약 30 μM, 약 0.5 μM 내지 약 40 μM, 약 0.5 μM 내지 약 50 μM, 약 0.5 μM 내지 약 60 μM, 약 0.5 μM 내지 약 70 μM, 약 0.5 μM 내지 약 80 μM, 약 0.5 μM 내지 약 90 μM, 약 0.5 μM 내지 약 100 μM, 약 0.5 μM 내지 약 150 μM, 약 0.5 μM 내지 약 200 μM, 약 0.5 μM 내지 약 300 μM, 약 0.5 μM 내지 약 400 μM, 약 0.5 μM 내지 약 500 μM, 약 0.5 μM 내지 약 1000 μM, 약 0.75 μM 내지 약 5 μM, 약 0.75 μM 내지 약 4 μM, 약 0.75 μM 내지 약 3 μM, 약 0.75 μM 내지 약 2 μM, 약 0.75 μM 내지 약 1.5 μM, 약 0.75 μM 내지 약 1.25 μM, 약 0.25 μM 내지 약 500 μM, 약 0.25 μM 내지 약 400 μM, 약 0.25 μM 내지 약 300 μM, 약 0.25 μM 내지 약 200 μM, 약 0.25 μM 내지 약 100 μM, 약 0.25 μM 내지 약 75 μM, 약 0.25 μM 내지 약 50 μM, 약 0.25 μM 내지 약 25 μM, 약 25 μM 내지 약 250 μM, 약 25 μM 내지 약 200 μM, 약 25 μM 내지 약 150 μM, 약 25 μM 내지 약 150 μM, 약 25 μM 내지 약 50 μM, 약 50 μM 내지 약 100 μM, 약 50 μM 내지 약 200 μM, 약 50 μM 내지 약 300 μM, 약 50 μM 내지 약 400 μM, 약 50 μM 내지 약 500 μM, 또는 약 50 μM 내지 약 1000 μM의 최종 유리체 내 농도를 달성할 수 있다.
다양한 실시양태에서, 비경구 투여를 위해 환자에게 투여될 양은 예를 들어, 약 0.05 mg 내지 약 1000 mg, 약 0.05 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 400 mg, 약 0.05 mg 내지 약 300 mg, 약 0.05 mg 내지 약 200 mg 약 0.05 mg 내지 약 100 mg, 약 0.05 mg 내지 약 50 mg, 약 0.05 mg 내지 약 30 mg, 0.05 mg 내지 약 25.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 20.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 15.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 10.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 9.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 8.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 7.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 6.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 5.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 4.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 3.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 2.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 1.0 mg, 약 0.05 mg 내지 약 0.5 mg, 약 0.05 mg 내지 약 0.4 mg, 약 0.05 mg 내지 약 0.3 mg, 약 0.05 mg 내지 약 0.2 mg, 약 0.05 mg 내지 약 0.1 mg, 약 .01 mg 내지 약 2 mg, 약 0.3 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 20 mg, 또는 약 0.8 내지 약 3 mg의 범위일 수 있다. 당업자는 용량이 상기 제공된 다양한 범위 내에서 변할 수 있고 의사의 재량에 따라 달라질 수 있음을 용이하게 인식할 것이다.
한 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체는 "약학적으로 허용 가능한 염"의 형태일 수 있다. 본원에서 사용된 바의 용어 "약학적으로 허용 가능한 염"은 반대 이온이 의약에 사용될 수 있는 염을 의미한다. 다양한 실시양태에서, 이러한 염은 이것으로 제한되는 것은 아니지만 1) 염산, 브롬화수소산, 질산, 인산, 황산, 및 과염소산 등과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, (D) 또는 (L) 말산, 말레산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산, 타르타르산, 시트르산, 숙신산 또는 말론산 등과 같은 유기산과 모 화합물의 유리 염기를 반응시켜 수득될 수 있는 산 부가염; 또는 2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속이온, 예컨대 알칼리 금속이온, 알칼리 토류 이온 또는 알루미늄 이온으로 대체되거나; 또는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트리메타민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기로 배위될 때 형성되는 염을 포함한다. 약학적으로 허용 가능한 염은 당업자에게 공지되어 있으며, 임의의 이러한 약학적으로 허용 가능한 염은 본원에서 기재된 실시양태와 관련하여 고려된다.
다양한 실시양태에서, 적합한 산 부가염은 무독성 염을 형성하는 산으로부터 형성된다. 예시적인 예는 아세테이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 비카르보네이트/카르보네이트, 비설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 히벤제이트, 히드로클로라이드/클로라이드, 히드로브로마이드/브로마이드, 히드로요오다이드/요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-나프실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 사카레이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 토실레이트 및 트리플루오로아세테이트 염을 포함한다.
다양한 실시양태에서, 적합한 염기 염은 무독성 염을 형성하는 염기로부터 형성된다. 예시적인 예는 아르기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올아민, 글리신, 리신, 마그네슘, 메글루민, 올라민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민 및 아연 염을 포함한다. 산 및 염기의 헤미염, 예를 들어 헤미설페이트 및 헤미칼슘 염도 또한 형성될 수 있다.
한 예시적인 양상에서, 본원에 기재된 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 하나 이상의 키랄 중심을 함유할 수 있거나, 또는 그렇지 않으면 다중 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 한 양상에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 기하 이성질체로서 존재할 수 있다. 따라서, 다양한 실시양태는 순수한 기하 이성질체 또는 기하 이성질체의 혼합물을 포함할 수 있다.
일부 양상에서, 본원에서 기재된 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 수화된 형태를 포함하는 용매화된 형태뿐만 아니라 비용매화된 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화된 형태는 비용매화된 형태와 동등하며 본 발명의 범위 내에 포함된다.
한 실시양태에서, 본원에 기재된 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법을 사용하여 환자에게 투여될 수 있다. 본원에서 기재된 바의, 용어 "투여하는" 또는 "투여되는"은 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 도입하는 모든 수단 이것으로 제한되는 것은 아니지만, 경구, 정맥 내, 근육 내, 피하, 유리체 내, 안 내(intraocular), 국소 등을 포함한다. 한 양상에서, 본원에서 기재된 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 통상의 비독성 약학적으로 허용 가능한 담체, 애주번트, 및 비히클을 함유하는 단위 제형 및/또는 제제로 투여될 수 있다.
다양한 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 예를 들어 단일 또는 다중 투여에 의해 눈에 직접 투여될 수 있다. 다른 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 주사, 점안액 형태, 안 연고 형태, 비경구 투여로 투여될 수 있거나, 또는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 예를 들어 정제, 캡슐, 과립, 분말 또는 시럽을 사용하여, 또는 임의의 다른 적합한 투여 수단에 의해 경구로 투여될 수 있다.
한 양상에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 비경구 투여에 의해 혈류로 직접 투여될 수 있다. 다양한 실시양태에서, 이러한 비경구 투여를 위한 적합한 경로는 정맥 내, 동맥 내, 복강 내, 근육 내, 및 피하 전달을 포함한다. 한 실시양태에서, 비경구 투여를 위한 수단은 니들(마이크로니들 포함) 주사기, 니들이 없는 주사기 및 주입 기술을 포함한다.
한 예시적인 실시양태에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약학적 조성물로 투여되고 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함한다. 한 예시적인 양상에서, 약학적 조성물은 담체, 희석제, 용매, 캡슐화 물질, 결합제, 붕해제, 윤활제, 가용화제, 현탁 보조제, 에멀션화제, 코팅제, 또는 부형제, 예컨대 염, 탄수화물 및 완충제(바람직하게는 3 내지 9의 pH에서)를 함유할 수 있는 수용액일 수 있으나, 이들은 또한 적합한 비히클 예컨대 멸균, 발열원이 없는 물 또는 멸균 식염수와 함께 사용되는 멸균 비수용액 또는 건조된 형태로 제제화될 수 있다. 다른 실시양태에서, 액체 제제는 비경구 투여에 적합하게 될 수 있다. 비경구 제제용 멸균 동결 건조 분말을 생산하는 동결건조에 의한 멸균 조건 하의 제조는 당업자에게 공지된 표준 약학적 기술을 사용하여 용이하게 달성될 수 있다. 한 실시양태에서, 비경구 제제의 제조에 사용되는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용해도는 용해도 증강제의 혼입과 같은 적절한 제제화 기술을 사용하여 증가시킬 수도 있다.
임의의 상기 기재된 용량 실시양태에서, 단일 용량(예컨대, 단일 주사) 또는 다중 용량의 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여할 수 있다. 다양한 양상에서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여를 위한 임의의 적합한 요법이 사용될 수 있다. 본원에 기재된 방법에 따라, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 예를 들어 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 매일, 격일, 주 1회, 주 2회, 주 3회, 월 1회 2, 3, 4, 5 또는 6개월 마다 1회와 같은 매일 또는 매주 투여하는 요법 또는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여를 위해 당업자에의해 적합한 요법으로 간주될 수 있는 임의의 다른 적합한 요법을 사용하여 환자에게 투여될 수도 있다. 또 다른 양상에서, 이 단락에서 기재된 실시양태의 임의의 조합이 사용될 수 있다.
한 양상에서, 본원에 기재된 방법에서, 방법은 항 VEGF제를 투여하는 것을 더 포함할 수 있다. 다양한 실시양태에서, 항 VEGF제는 예를 들어, 항 VEGF 생물제제 예컨대 라니비주맙, 베바시주맙, 또는 애플리버셉트, 아비시파르 페골, 브롤루시주맙, 파리시맙, 보롤라닙, 임의의 이들 VEGF제에 대한 바이오시밀러, 및 이들의 조합을 포함할 수 있다. 또 다른 양상에서, 항 VEGF제는 예를 들어 생물제제 예컨대 VEGF 발현을 표적으로 하는 안티센스 RNA, VEGF 발현을 표적으로 하는 RNA 침묵 또는 RNA 간섭(RNAi)을 위한 제제, VEGF 발현을 표적으로 하는 리보자임; FOVISTA™ 및 혈소판 유래 성장 인자(PDGF)를 표적으로 하는 다른 약제; 스쿠알라민((1S, 2S, 5S, 7R, 9R, 10R, 11S, 14R, 15R)-N-{3-[(4-아미노 부틸)아미노]프로필}-9-히드록시-2,15-디메틸-14-[(2R,5R)-6-메틸-5-(설포옥시)헵탄-2-일]테트라사이클로[8.7.0.0{2,7}.0{11,15}]헵타데칸-5-아미늄); X-82(Tyrogenix, 매사추세츠주 니담 하이츠 소재); PAN-90806(PanOptica, 뉴저지주 버나드스빌 소재); TNP470(Sigma-Aldrich, 미주리주 세인트 루이스 소재) 및 푸마길린(2E,4E,6E,8E)-10-{[(3R,4S,5S,6R)-5-메톡시-4-[(2R)-2-메틸-3-(3-메틸부-트-2-에닐)옥시란-2-일]-1-옥사스피로[2.5]옥탄-6-일]옥시}-10-옥소데카-2,4,6,8-테트라엔산); 단백질 키나아제 C 억제제; VEGF 수용체 키나아제의 억제제; 색소 상피 유래 인자(PEDF: pigment epithelium derived factor); 엔도스타틴; 안지오스타틴; 아네코르테이브 아세테이트; 트리암시놀론((11. 베타, 16. 알파)-9-플루오로-11,16,17,21-테트라히드록시프레그나-1,4-디엔-3,20-디온); 베르테포르핀(3-[(23S,24R)-14-에테닐-5-(3-메톡시-3-옥소프로필)-22,23-비스(메톡시카르보닐)-4,10,15,24-테트라메틸-25,26,27,28-테트라아자헥사시클로[16.6.1.1.sup.3,6-.1.sup.8,11.1.sup.13,16.0.sup.19,24]옥타코사-1,3,5,7,9, 11(27),12,14,16,18(-25),19,21-도데카엔-9-일]프로판산), 포르피머나트륨(포토프린), 5-아미노레불린산, 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.
한 실시양태에서, 항 VEGF제는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 조합하여 투여된다. 한 예시적인 양상에서, 항 VEGF제는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 전에 환자에게 투여될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 항 VEGF제는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 동시에, 그러나 상이한 제제로, 또는 동일한 제제로 환자에게 투여될 수 있다. 여전히 다른 실시양태에서, 항 VEGF제는 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 후에 환자에게 투여될 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 질환은 말라리아이며, 방법은 클로로퀸(아라렌), 퀴닌 설페이트(쿠알라퀸), 아르테미시닌, 히드록시클로로퀸(플라케닐), 메플로퀸, 아토바쿠온과 프로구아닐의 조합(말라론), 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함할 수 있다.
여전히 다른 실시양태에서, 질환은 암이며, 암은 신경교종, 유방암, 방광암, 결장암, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된다. 이 실시양태에서, 방법은 환자를 광역학 요법(PDT), 베르테포르핀, 5-ALA, 등과 같은 약제로 치료하거나, 또는 광역학 진단(PDD)으로 환자를 진단하는 것을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 다양한 실시양태는 하기에 나타낸 실시예로부터 보다 완전히 이해 될 것이다. 실시예는 본 발명의 전체 범위를 예시하지 않지만, 본원에 기재된 본 발명의 다양한 추가의 예시적인 양상을 제공하는 것이며 어떠한 방식으로도 제한하려는 의도는 아니다.
실시예
이들 실시예에서, 다양한 트리아졸로피리미디논을 제조하고 FECH를 억제하는 이들의 능력에 대해 분석하였다.
물질 및 방법
하기에 기재된 합성을 위한 일반적인 방법 및 물질: 모든 출발 물질 및 시약은 상업적 공급업자로부터 입수하였으며 추가의 정제 없이 사용하였다. 공기 및 습기에 민감한 반응은 아르곤 분위기하에서 수행하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피는 표시된 용매와 함께 실리카겔 60(230-400 메쉬, Merck)을 사용하여 수행하였다. 박층 크로마토그래피는 0.25 mm 실리카겔 플레이트(Merck)를 사용하여 수행하였다. 1H 및 13C NMR 스펙트럼은 클로로포름-d 또는 디메틸설폭시드-d6 또는 메탄올-d4 중의 용액으로 Bruker 600MHz 분광계에서 기록하였다. 1H NMR 데이터는 화학적 이동, 다중도(s, 단일선; d, 이중선; t, 삼중선; m, 다중선 및/또는 다중 공명), 양성자 수 및 결합 상수(J)(Hz) 순으로 보고되었다. 고분해능 질량 스펙트럼(HRMS)은 JEOL JMS-700(FAB 및 EI) 및 Agilent 6530 Q-TOF LC/MS/MS 시스템(ESI)에서 기록되었다.
도식 1.
Figure pct00052
Figure pct00053
3-(4-( tert -부틸)페닐)-1H-1,2,4- 트리아졸 -5- 아민(1). CH2Cl2(5 ml) 중의 4-tert-부틸벤조산(600 mg, 3.36 mmol)의 용액에 SOCl2(2 mL)를 교반하면서 첨가하고 얼음 조에 넣었다. 2시간 동안 60℃에서 교반한 후, 혼합물을 RT로 냉각시켰다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 혼합물에 톨루엔(2 mL) 및 아미노구아니딘 비카르보네이트(460 mg, 3.36 mmol)를 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 혼합물을 RT로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 그 후 침전물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:10)로 정제하여 화합물(1)(90mg, 12 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.70(d, 2H, J = 9 Hz), 7.24(d, 2H, J = 8.4 Hz), 1.17 (s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, CDCl3) δ 159.6, 157.4, 153.0, 126.2, 126.0 125.7, 34.7, 31.2.
Figure pct00054
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5- 메틸 - [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온 (2). 3-(4-(tert-부틸)페닐)-1H-1,2,4-트리아졸-5-아민(1)(1.45 g, 6.73 mmol) 및 에틸 3-옥소부타노에이트(5.1 mL, 40.4 mmol)의 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물에 톨루엔(13 mL) 및 p-톨루엔설폰산(134 mg, 036 mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 혼합물을 RT로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 그 후 침전물을 톨루엔으로 세척 및 건조하여 화합물(2)(916 mg, 48%)를 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.25(bs, 1H), 8.07(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.55 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.85(s, 1H), 2.34(s, 3H), 1.32(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 161.2, 156.2, 153.4, 151.7, 151.5, 127.9, 126.9, 126.1, 98.9, 35.0, 31.4, 19.0.
Figure pct00055
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-( 클로로메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(3). 아세트산(6mL) 중의 3-(4-(tert-부틸)페닐)-1H-1,2,4-트리아졸-5-아민(1)(1.17g, 5.14 mmol)의 용액에 에틸 4-클로로-3-옥소부타노에이트(2.21mL, 15.4 mmol)를 첨가하였다. 24시간 동안 80℃에서 교반한 후, 혼합물은 RT로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 그 후 침전물을 아세토니트릴로 세척 및 건조하여 생성물(3)(690 mg, 43%)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.79(bs, 1H), 8.06 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.58(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.2(s, 1H), 4.69(s, 2H), 1.32(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 158.5, 156.2, 153.8, 151.9, 149.4, 127.2, 126.9, 126.2, 100.4, 41.8, 35.1, 31.4.
Figure pct00056
5-(( 벤질(메틸)아미노 ) 메틸 )-2-(4-( tert -부틸)페닐)- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(4a). DMA(1mL) 중의 클로로메틸 화합물 (3)(55 mg, 0.17 mmol), N-벤질메틸아민(27 uL, 0.17 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 20 mg, 0.51 mmol)의 반응 혼합물을 250℃에서 60분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4a)(27.9 mg, 40 %)를 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 8.09(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.45(d, 2H, J = 7.8 Hz), 7.39(t, 2H, J = 7.8 Hz), 7.31(t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.0(s, 1H), 3.74(s, 2H), 3.64(s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.33(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 160.8, 156.5, 153.5, 153.3, 152.6, 137.0, 129.2, 128.3, 128.0, 127.5, 126.4, 125.6, 97.3, 60.6, 58.0, 41.4, 34.5, 31.0.
Figure pct00057
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(((1-페닐-1H- 피라졸 -5-일)아미노) 메틸 )- [1,2,4]트 리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(4b). DMA(1 mL) 중의 클로로메틸 화합물(3)(50 mg, 0.158 mmol), 5-아미노-1-페닐피라졸(30 mg, 0.19 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 250℃에서 60분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4b)(7.6 mg, 11 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 8.05(d, 2H, J = 9 Hz), 7.68(d, 2H, J = 7.2 Hz), 7.57-7.53(m, 4H), 7.40(t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.36(d, 1H, J = 1.8 Hz), 6.26 (t, 1H, J = 6 Hz), 6.06(s, 1H), 5.58(d, 1H, J = 1.8 Hz), 4.26(d, 2H, J = 6 Hz), 1.33(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 156.3, 153.6, 151.8, 147.7, 140.4, 139.4, 129.8, 127.2, 126.9, 129.2, 124.0, 97.6, 88.7, 35.1, 31.4.(-3)
Figure pct00058
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(( 펜에틸아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(4c). DMA(1 mL) 중의 클로로메틸 화합물(3)(50 mg, 0.158 mmol), 펜에틸아민(23 uL, 0.19 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 250℃에서 100분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4c)(8.1mg, 13 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 8.05(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.57(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.32-7.19(m, 5H), 5.79(d, 1H, J = 40.8 Hz), 4.50(d, 2H, J = 5.4 Hz), 3.62(t, 1H, J = 7.2 Hz), 3.52(t, 1H, J = 7.2 Hz), 2.90(t, 1H, J = 7.2 Hz), 2.80(t, 1H, J = 7.2 Hz), 1.33(d, 9H, J = 1.2 Hz); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 171.2, 156.3, 153.6, 151.9, 139.0, 129.4, 129.1, 128.9, 128.8, 126.9, 126.6, 126.2, 96.7, 60.2, 50.8, 35.1, 34.5, 31.4.
Figure pct00059
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(( 피라진 -2- 일아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5 -a]피리미딘-7(4H)-온(4d). DMA(1 mL) 중의 클로로메틸 화합물(3)(50 mg, 0.158 mmol), 2-아미노피라진(22.5mg, 0.237 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 250℃에서 50분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4d)(6.4 mg, 11 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, CD3OD) δ 8.15(d, 2H, J = 9 Hz), 8.09(d, 1H, J = 1.8 Hz), 8.03(q, 1H, J = 1.8 Hz), 7.79(d, 1H, J = 3 Hz), 7.57(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.03(s, 1H), 4.62(s, 2H), 1.39(s, 9H).
Figure pct00060
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-((퀴놀린-2- 일아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(4e). DMF(1 mL) 중의 2-아미노퀴놀린(34 mg, 0.237 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 투명한 용액에 클로로메틸 화합물(3)(50 mg, 0.158 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물 150℃에서 30분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4e)(6.1 mg, 10 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, CD3OD) δ 8.02(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.94(d, 1H, J = 9 Hz), 7.62(d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.60(d, 1H, J = 7.8 Hz), 7.49(t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.42(d, 2H, J = 9 Hz), 7.21(t, 1H, J = 7.2 Hz), 6.88(d, 1H, J = 9 Hz), 5.93(s, 1H), 4.60(s, 2H), 1.26(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 170.0, 156.6, 156.5, 153.5, 152.1, 147.5, 137.4, 129.8, 128.1, 127.9, 126.9, 126.1, 126.1, 123.7, 122.4, 113.5, 96.5, 41.9, 35.1, 31.4.
Figure pct00061
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(( 시클로펜틸아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(4f). DMF(1 mL) 중의 시클로펜틸아민(24 uL, 0.237 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 19 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 생성물에 클로로메틸 화합물(3)(50 mg, 0.158 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 10분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4f)(32.6 mg, 10 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 8.06(d, 2H, J = 9 Hz), 7.50(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.66(s, 1H), 4.02(s, 2H), 3.53(m, 1H), 2.00(m, 2H), 1.72(m, 4H), 1.55(m, 2H), 1.32(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 160.5, 159.0, 157.8, 155.0, 151.7, 129.7, 126.2, 125.2, 94.4, 58.2, 49.2, 34.5, 31.1, 29.1, 23.6.
Figure pct00062
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(( 디에틸아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피 리미딘-7(4H)-온(4g). DMF(1 mL) 중의 디에틸아민(13 uL, 0.12 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 10 mg, 0.237 mmol)의 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 생성된 투명한 용액에 클로로메틸 화합물(3)(25 mg, 0.079 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 10분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:20:0.1)로 정제하여 생성물(4g)(6.4 mg, 23 %)을 수득하였다. 1H-NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.03(d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.44(d, 2H, J = 9 Hz), 5.86(s, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.19(m, 4H), 1.28(m, 15H); 13C-NMR(150 MHz, CD3OD,) δ 161.8, 159.6, 158.3, 157.6, 153.1, 128.1, 126.5, 125.2, 95.6, 55.6, 48.2, 34.3, 30.3, 8.0.
Figure pct00063
2-(4-( tert -부틸)페닐)-5-(((3- 클로로페닐 )아미노) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(4h). DMF(1 mL) 중의 3-클로로아닐린(13 uL, 0.12 mmol) 및 수소화나트륨(오일 중 60%, 20 mg, 0.47 mmol)의 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 생성된 투명한 용액에 클로로메틸 화합물(3)(25 mg, 0.079 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 2분 동안 마이크로웨이브에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2/NH4OH = 1:30:0.1)로 정제하여 생성물(4h)(8.4 mg, 26 %)을 수득하였다. 1H-NMR(600 MHz, CD3OD) δ 8.15(d, 2H, J = 9 Hz), 7.54(d, 2H, J = 9 Hz), 7.08(t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.66(t, 1H, J = 2.4 Hz), 6.61(m, 1H), 6.57(m, 1H), 6.06(s, 1H), 4.32(s, 2H), 1.38(s, 9H); 13C-NMR(150 MHz, CD3OD) δ 162.0, 161.3, 159.3, 156.2, 153.1, 149.5, 134.5, 129.9, 127.9, 126.7, 125.1, 116.4, 112.0, 110.7, 94.4, 46.7, 34.3, 30.3.
도식 2
Figure pct00064
Figure pct00065
에틸 o- 톨릴글리시네이트(7a) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에, o-톨루이딘(214 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상을 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸 o-톨릴글리시네이트(7a)(386 mg, 정량적)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.14(td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 7.09(d, 1H, J =7.2 Hz), 6.73(td, 1H, J = 7.8 및 0.6 Hz), 6.52(d, 1H, J = 7.8 Hz), 4.28(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.95(s, 2H), 2.23(s, 3H), 1.33(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.2, 144.9, 130.3, 127.1, 122.7, 118.0, 110.1, 61.4, 46.0, 17.4, 14.2.
Figure pct00066
에틸 m- 톨릴글리시네이트 ( 7b) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 m-톨루이딘(214 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)를 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸 m-톨릴글리시네이트(7b)(364mg, 94%)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.11 (td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 6.26(t, 1H, J = 7.8 Hz), 6.49(s, 2H), 4.26(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.91 (t, 2H, J = 1.8 Hz), 2.29 (s, 3H), 1.31 (t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.1, 146.8, 139.2, 129.2, 119.5, 114.1, 110.4, 61.3, 46.1, 21.6, 14.2
Figure pct00067
에틸 p- 톨릴글리시네이트 ( 7c) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에, p-톨루이딘(214 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸 p-톨릴글리시네이트(7c)(331mg, 86%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.01(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.57(d, 2H, J = 8.4 Hz), 4.25(q, 2H, J = 6.6 Hz), 3.88(s, 2H), 2.24(s, 3H), 1.30(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.2, 144.6, 129.8, 127.7, 113.4, 61.3, 46.4, 20.4, 14.2.
Figure pct00068
에틸(2-클로로페닐)글리시네이트(7d) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에, 2-클로로아닐린(328 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(2-클로로페닐)글리시네이트(7d)(96 mg, 23%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.22(dd, 1H, J = 8.4 및 1.8 Hz), 7.09(td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 6.64(t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.50(t, 1H, J = 7.2 Hz), 4.21(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.89(s, 3H), 1.25(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.5, 142.8, 129.3, 127.8, 119.8, 118.3, 111.5, 61.5, 46.7, 14.2.
Figure pct00069
에틸(3-클로로페닐)글리시네이트(7e) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 3-클로로아닐린(328 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:10)로 정제하여 에틸(3-클로로페닐)글리시네이트(7e)(274mg, 64%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.04(t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.67(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.54(d, 1H, J = 1.8 Hz), 6.46(dd, 1H, J = 8.4 및 2.4 Hz), 4.20(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.81(s, 2H), 1.25(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.5, 147.8, 135.1, 130.3, 118.4, 113.0, 111.7, 64.6, 45.7, 14.2.
Figure pct00070
에틸(4-클로로페닐)글리시네이트(7f) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-클로로아닐린(255 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(4-클로로페닐)글리시네이트(7f)(322mg, 76%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.09(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.52(m, 2H), 4.19(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.81(s, 2H), 1.24(t, 3H, J =7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.6, 145.2, 129.9, 129.2, 114.6, 61.5, 46.2, 14.2.
Figure pct00071
에틸[1,1'-비페닐]-2- 일글리시네이트(7g) 에틸 2-브로모아세테이트(220 uL, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 2-아미노비페닐(340 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:10)로 정제하여 에틸[1,1'-비페닐]-2-일글리시네이트(7g)(100mg, 19%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.50(d, 4H, J = 4.2 Hz), 7.41(m, 1H), 7.29 (td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 7.18(dd, 1H, J = 7.2 및 1.2 Hz), 6.87(td, 1H, J = 7.2 및 0.6 Hz), 6.63(d, 1H, J = 7.8 Hz), 4.24(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.92(s, 2H), 1.31 (t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.0, 143.9, 139.1, 130.4, 129.3, 129.0, 128.7, 128.2, 127.4, 117.9, 110.5, 61.3, 45.9, 14.2.
Figure pct00072
에틸(4-(tert-부틸)페닐)글리시네이트(7h) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-tert-부틸아닐린(315 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:10)로 정제하여 에틸(4-(tert-부틸)페닐)글리시네이트(7h)(306mg, 65%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.26(d, 2H, J = 9 Hz), 6.64(m, 2H), 4.29(q, 2H, J = 6.6 Hz), 3.92(s, 2H), 1.33(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.30(s, 9H); 13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ 171.2, 144.3, 141.4, 126.1, 113.1, 61.3, 46.3, 33.9, 31.5, 14.2.
Figure pct00073
에틸(3-클로로-4-플루오로페닐)글리시네이트(7i) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 3-클로로-4-플루오로 아닐린(291 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(3-클로로-4-플루오로페닐)글리시네이트(7i)(119 mg, 26%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 6.90(t, 1H, J = 9 Hz), 6.53(dd, 1H, J = 6 및 3 Hz), 6.38-6.35(m, 1H), 4.19(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.77 (s, 2H), 1.24(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.7, 152.2, 150.6, 144.0, 121.2, 116.9, 114.0, 112.3, 61.5, 46.1, 14.2.
Figure pct00074
에틸(4-에틸페닐)글리시네이트(7j) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-에틸아닐린(249 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:10)로 정제하여 에틸(4-에틸페닐)글리시네이트(7j)(245 mg, 59%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.07(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.62(dd, 2H, J = 6.6 및 2.4 Hz), 4.28 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.92(s, 2H), 2.59(q, 2H, J = 7.8 Hz), 1.33(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.22(t, 3H, J = 7.8 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.2, 144.7, 134.4, 128.7, 113.4, 61.3, 46.4, 27.9, 15.9, 14.2.
Figure pct00075
에틸(3,4-디플루오로페닐)글리시네이트(7k) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에, 3,4-디플루오로아닐린(258 mg, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:7)로 정제하여 에틸(3,4-디플루오로페닐)글리시네이트(7k)(125 mg, 29%)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 6.90(q, 1H, J = 9 Hz), 6.31(dd, 1H, J = 6.6 Hz), 6.19(d, 1H, J = 9 Hz), 4.24(bs, 1H), 4.18(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.74(s, 2H), 1.22(td, 3H, J = 7.2 및 1.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.7, 151.7, 150.0, 144.2, 144.1, 142.7, 117.5, 108.1, 101.7, 61.5, 46.0, 14.1.
Figure pct00076
에틸(4-(펜틸옥시)페닐)글리시네이트(7l) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-(펜틸옥시)아닐린(370 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(4-(펜틸옥시)페닐)글리시네이트(7l)(171 mg, 32%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 6.72(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.54(d, 2H, J = 8.4 Hz), 4.18(q, 2H, J = 6.6 Hz), 3.82(d, 2H, J = 6.6 Hz), 3.80(s, 2H), 1.68(dd, 2H, J = 8.4 및 7.2 Hz), 1.36-1.29(m, 4H), 1.23(t, 3H), 0.86(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.3, 147.8, 140.8, 123.7, 115.8, 68.7, 61.3, 47.1, 29.1, 28.2, 22.5, 14.2, 14.0.
Figure pct00077
에틸(4-플루오로페닐)글리시네이트(7m) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-플루오로아닐린(190 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(4-플루오로페닐)글리시네이트(7m)(193 mg, 49%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 6.85(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.49(dd, 2H, J = 9 및 4.2 Hz), 4.19(q, 2H, J = 7.2 Hz), 3.79(s, 2H), 1.24(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 171.1, 157.0, 155.5, 143.4, 115.9, 113.9, 61.4, 46.5, 14.2.
Figure pct00078
에틸(4-(트리플루오로메톡시)페닐)글리시네이트(7n) 에틸 2-브로모아세테이트(322 mg, 2 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 4-(트리플루오로메톡시)아닐린(268 uL, 2 mmol) 및 K2CO3(830 mg, 6mmol)을 첨가하였다. 24시간 동안 환류한 후, 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 유기 상은 물 및 염수로 세척, MgSO4 상에서 건조, 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트/n-헥산 = 1:5)로 정제하여 에틸(4-(tert-부틸)페닐)글리시네이트(7n) (134 mg, 25%)를 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.08(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.58(d, 2H, J = 9 Hz), 4.44(bs, 1H), 4.29(q, 2H, J = 6.6 Hz), 3.89(s, 2H), 1.33(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 170.9, 145.9, 141.0, 122.4, 121.5, 119.9, 113.2, 61.5, 45.8, 14.1.
Figure pct00079
2,3- 디아미노 -6- 프로필피리미딘 -4(3H)-온(6a) 나트륨(340 mg, 14.7 mmol) 및 에탄올(10 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2-아미노구아니딘(1.62 g, 14.7 mmol)을 첨가하고 반응물을 90℃에서 30분 동안 가열하고 냉각 후 NaCl을 여과하였다. 그 후, 에틸 3-옥소헥사노에이트(2.34 mL, 14.7 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시켜 2,3-디아미노-6-프로필피리미딘-4(3H)-온(6a)(515 mg, 21 %)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 7.07(bs, 2H), 5.53(s, 1H), 5.35(m, 2H), 2.23(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.57(m, 2H), 0.88-0.85(m, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 166.8, 161.8, 156.0, 98.6, 39.3, 21.4, 14.0.
Figure pct00080
2,3- 디아미노 -3,5,6,7- 테트라히드로 -4H- 시클로펜타[d]피리미딘 -4-온(6b) 나트륨(340 mg, 14.7 mmol) 및 에탄올(10 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2-아미노구아니딘(1.62 g, 14.7 mmol)을 첨가하고 반응물을 90℃에서 30분 동안 가열하며 냉각 후 NaCl을 여과하였다. 그 후, 에틸 2-시클로펜탄-1-카르복실레이트(2.12 mL, 14.7 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시켜 2,3-디아미노-3,5,6,7-테트라히드로-4H-시클로펜타[d]피리미딘-4-온(6b)(250mg, 10%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 6.92(bs, 2H), 5.30(s, 2H), 2.56(q, 4H, J = 9 Hz), 1.92(m, 2H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 167.1, 158.6, 155.3, 108.3, 33.8, 26.6, 20.7.
Figure pct00081
2,3- 디아미노 -6- 이소프로필피리미딘 -4(3H)-온(6c) 나트륨(340 mg, 14.7 mmol) 및 에탄올(10 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2-아미노구아니딘(1.62 g, 14.7 mmol)을 첨가하고 반응물을 90℃에서 30분 동안 가열하며 냉각 후 NaCl을 여과하였다. 그 후, 에틸 4-메틸-3-옥소펜타노에이트(2.37 mL, 14.7 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시켜 2,3-디아미노-6-이소프로필피리미딘-4(3H)-온(6c)(469 mg, 19%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 7.02(bs, 2H), 5.53(s, 1H), 5.32(s, 2H), 2.50(m, 1H), 1.10(s, 3H), 1.09(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 170.8, 160.9, 155.0, 95.2, 34.4, 20.7.
Figure pct00082
2,3- 디아미노 -6- 메틸피리미딘 -4(3H)-온(6d) 나트륨(340 mg, 14.7 mmol) 및 에탄올(10 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2-아미노구아니딘(1.62 g, 14.7 mmol)을 첨가하고 반응물을 90℃에서 30분 동안 가열하며 냉각 후 NaCl을 여과하였다. 그 후, 에틸 3-옥소부타노에이트(1.35 mL, 14.7 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시켜 2,3-디아미노-6-메틸-피리미딘-4(3H)-온(6d)(335 mg, 16%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 7.03(bs, 2H), 5.52(s, 1H), 5.30(s, 2H), 1.99(s, 3H); 13C NMR (150 MHz, DMSO-d6) δ 162.4, 160.5, 154.8, 98.0, 22.9.
Figure pct00083
5-프로필-2-((o- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5a) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(2-메틸아닐리노)아세테이트(7a)(23 mg, 118.9 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-프로필-2-((o-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5a)(8.7 mg, 25%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.09(bs, 1H), 6.97(m, 2H), 6.61(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.52(t, 1H, J = 7.2 Hz), 5.81(s, 1H), 4.42(s, 2H), 2.55(t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.13(s, 3H), 1.68(m, 2H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.6, 156.3, 155.1, 151.4, 146.4, 130.2, 127.1, 122.2, 116.6, 110.0, 98.2, 41.6, 40.5, 21.6, 18.1, 13.7.
Figure pct00084
5-프로필-2-((m- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5b) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(3-메틸아닐리노)아세테이트(7b)(23 mg, 118.9 umol)을 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-프로필-2-((m-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5b)(5.7 mg, 16%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.06(bs, 1H), 6.94(t, 1H, J = 7.8 Hz), 6.48(s, 1H), 6.46(d, 2H, J = 7.8 Hz), 6.36(d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.08(t, 1H, J = 6.6 Hz), 5.79(s, 1H), 4.32(d, 2H, J = 60 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.8 Hz), 2.16(s, 3H), 1.68(m, 2H), 0.91(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 173.3, 156.4, 148.8, 138.2, 130.2, 129.1, 122.1, 117.5, 113.5, 110.0, 98.0, 41.4, 40.5, 21.8, 21.7, 13.7.
Figure pct00085
5-프로필-2-((p- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5c) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(4-메틸아닐리노)아세테이트(7c)(23 mg, 118.9 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-프로필-2-((p-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5c)(9.7 mg, 28%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.05(bs, 1H), 6.87(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.57(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.97(t, 1H, J = 6 Hz), 5.79(s, 1H), 4.30(d, 2H, J = 6 Hz), 2.54 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.12(s, 3H), 1.67(m, 2H), 0.91(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 168.9, 156.3, 151.4, 149.5, 146.5, 129.7, 124.9, 112.9, 98.1, 41.6, 40.5, 21.6, 20.5, 13.7.
Figure pct00086
2-(((2- 클로로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미 딘-7(4H)-온(5d) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(2-클로로페닐)글리시네이트(7d)(25 mg, 118.9 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((2-클로로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5d)(14.7 mg, 39%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.11(bs, 1H), 7.27(dd, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 7.11(t, 1H, J = 8.4 Hz), 6.79(dd, 1H, J = 7.8 및 0.6 Hz), 6.61(td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 5.96(t, 1H, J = 6 Hz), 5.81(s, 1H), 4.50(d, 2H, J = 6 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.67(m, 2H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR (150 MHz, DMSO-d6) δ 162.8, 156.3, 155.3, 151.6, 144.2, 129.4, 128.4, 118.3, 117.4, 112.1, 98.2, 41.2, 34.6, 21.6, 13.7.
Figure pct00087
2-(((3- 클로로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미 딘-7(4H)-온(5e) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(3-클로로페닐)글리시네이트(7e)(25 mg, 118.9 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((3-클로로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5e)(12.3 mg, 33%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.07(bs, 1H), 7.07(td, 1H, J = 7.8 및 1.8 Hz), 6.70(s, 1H), 6.62(m, 2H), 6.54(d, 1H, J = 7.8 Hz), 5.81(d, 1H, J = 1.8 Hz), 4.37(d, 2H, J = 6.6 Hz), 2.55(t, 2H, J = 7.8 Hz), 1.68(m, 2H), 0.92 (td, 3H, J = 7.8 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 172.8, 162.9, 156.3, 151.5, 150.4, 134.0, 130.7, 115.9, 111.9, 111.5, 98.2, 41.1, 34.6, 21.6, 13.7.
Figure pct00088
2-(((4- 클로로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미 딘-7(4H)-온(5f) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-클로로페닐)글리시네이트(7f)(25 mg, 118.9 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((4-클로로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5f)(18.5 mg, 49%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.05(bs, 1H), 7.08(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.68(d, 2H, J = 9 Hz), 6.47(t, 1H, J = 6 Hz), 5.80(s, 1H), 4.35(d, 2H, J = 6 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.67-1.63(m, 2H), 0.91(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 172.4, 162.6, 155.8, 151.1, 147.3, 128.5, 119.3, 113.7, 97.7, 40.8, 34.1, 21.2, 13.2.
Figure pct00089
2-(([1,1'-비페닐]-2- 일아미노 ) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피 리미딘-7(4H)-온(5g) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸[1,1'-비페닐]-2-일글리시네이트 (7g)(45 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(([1,1'-비페닐]-2-일아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5g)(18.9 mg, 30%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 12.41(bs, 1H), 7.09(d, 5H, J = 4.2 Hz), 7.05-7.03(m, 1H), 6.95(dd, 1H, J = 7.2 및 1.2 Hz), 6.71(td, 1H, J = 7.8 및 1.2 Hz), 6.66(d, 1H, J = 7.8 Hz), 5.65(s, 1H), 4.55(bs, 1H), 4.31 (s, 2H), 2.32(t, 2H, J = 7.8 Hz), 1.44(m, 2H), 0.77(t, 3H, J = 7.8 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 162.6, 156.3, 155.0, 150.6, 143.8, 138.8, 130.4, 128.8, 128.8, 128.6, 127.8, 127.1, 118.2, 110.8, 98.7, 42.0, 34.8, 20.9, 13.5.
Figure pct00090
2-(((4-( tert -부틸)페닐)아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피 리미딘-7(4H)-온(5h) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-(tert-부틸)페닐)글리시네이트 (7h)(42 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((4-(tert-부틸)페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5h)(31.2 mg, 52%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, CDCl3) δ 7.15(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.52 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.77(s, 1H), 4.47(s, 2H), 2.54(t, 2H, J = 7.8 Hz), 1.63 (m, 2H), 1.24(s, 9H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, CDCl3) δ 163.0, 156.5, 155.3, 150.8, 144.7, 141.1, 126.0, 112.6, 98.7, 42.3, 34.8, 33.9, 31.5, 21.1, 13.4.
Figure pct00091
2-(((3- 클로로 -4- 플루오로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5i) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(3-클로로-4-플루오로페닐)글리시네이트(7i)(42 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후 실리카겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((3-클로로-4-플루오로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7 (4H)-온(5i)(10.1 mg, 17 %)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.03 (bs, 1H), 7.04(t, 1H, J = 9 Hz), 6.73(dd, 1H, J = 6.6 및 3 Hz), 6.57(m, 1H), 6.40(t, 1H, J = 6 Hz), 5.72(s, 1H), 4.27(d, 2H, J = 6 Hz), 2.47(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.61(m, 1H), 0.85(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 162.8, 156.4, 155.7, 151.8, 150.4, 148.9, 146.5, 119.7, 117.2, 113.0, 112.5, 98.0, 41.5, 34.8, 21.7, 13.7.
Figure pct00092
2-(((4- 에틸페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5j) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-에틸페닐)글리시네이트(7j)(37 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((4-에틸페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5j)(26 mg, 47%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.06(bs, 1H), 6.90 d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.60(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.99(s, 1H), 5.80(s, 1H), 4.32(d, 2H, J = 3.6 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.44(q, 2H, J = 7.8 Hz), 1.68(m, 2H), 1.10(t, 3H, J = 7.8 Hz), 0.92(t, 3H, J = 7.8 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.5, 156.3, 155.3, 151.5, 146.7, 131.7, 128.5, 112.9, 98.1, 41.6, 34.6, 27.8, 21.6, 16.6, 13.7.
Figure pct00093
2-(((3,4- 디플루오로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5k) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(3,4-디플루오로페닐)글리시네이트(7k)(38 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((3,4-디플루오로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5k) (16.1 mg, 28%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.08(bs, 1H), 7.12 (q, 1H, J = 3 Hz), 6.67(m, 1H), 6.49(t, 1H, J = 6.6 Hz), 6.45(d, 1H, J = 9 Hz), 5.81(s, 1H), 4.34(d, 2H, J = 6 Hz), 2.55(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.67(m, 2H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 162.4, 155.8, 154.8, 151.0, 150.7, 149.0, 146.1, 142.0, 140.5, 117.3, 107.9, 100.4, 97.7, 41.0, 34.1, 21.1, 13.2.
Figure pct00094
2-(((4-( 펜틸옥시 )페닐)아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5l) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-(펜틸옥시)페닐)글리시네이트 (7l)(47 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((4-(펜틸옥시)페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5l)(4.5 mg, 7%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.06(bs, 1H), 6.69(d, 2H, J = 9 Hz), 6.61(d, 2H, J = 9 Hz), 5.79(s, 1H), 5.75(bs, 1H), 4.28(d, 2H, J = 6 Hz), 3.81(t, 2H, J = 6.6 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.67-1.61(m, 2H), 1.37-1.30(m, 4H), 0.92(t, 3H, J = 7.8 Hz), 0.89(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR (150 MHz, DMSO-d6) δ 163.5, 156.4, 150.7, 143.0, 115.8, 113.8, 98.0, 68.3, 42.1, 34.7, 29.1, 28.2, 22.4, 21.7, 14.4, 13.7.
Figure pct00095
2-(((4- 플루오로페닐 )아미노) 메틸 )-5-프로필- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5m) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-플루오로페닐)글리시네이트(7m) (35 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-(((4-플루오로페닐)아미노)메틸)-5-프로필-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5m)(16 mg, 30%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.08(bs, 1H), 6.92(t, 2H, J = 9 Hz), 6.67(dd, 2H, J = 9 및 4.8 Hz), 6.17(t, 1H, J = 6 Hz), 5.80(s, 1H), 4.33(d, 2H, J = 6 Hz), 2.54(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.68-1.62(m, 2H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.2, 156.3, 155.7, 155.4, 154.1, 151.5, 145.5, 115.5, 113.5, 98.1, 41.8, 34.6, 21.6, 13.7.
Figure pct00096
5-프로필-2-(((4-( 트리플루오로메톡시 )페닐)아미노) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5n) 나트륨(13 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-프로필-피리미딘-4-온(6a)(30 mg, 178 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸(4-(트리플루오로메톡시)페닐)글리시네이트(7n)(47 mg, 178 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/ CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-프로필-2-(((4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5n)(19 mg, 29%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d 6) δ 13.08(bs, 1H), 7.06(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.71(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.56 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 5.81(s, 1H), 4.37(d, 2H, J = 6.6 Hz), 2.55(t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.67(m, 2H), 0.92(t, 3H, J = 7.2 Hz); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.1, 156.3, 155.2, 151.5, 148.1, 139.1, 122.4, 121.7, 120.0, 113.1, 98.2, 41.3, 34.5, 21.6, 13.7
Figure pct00097
2-((o- 톨릴아미노 ) 메틸 )-4,5,6,7- 테트라히드로 -8H- 시클로펜타[d][1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리미딘-8-온(5o) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-3,5,6,7-테트라히드로-4H-시클로펜타[d]피리미딘-4-온(6b)(20 mg, 120 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(2-메틸아닐리노)아세테이트(7a)(28 mg, 144 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-((o-톨릴아미노)메틸)-4,5,6,7-테트라히드로-8H-시클로펜타[d][1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-8-온(5o)(6.7 mg, 19%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.31(bs, 1H), 6.97(m, 2H), 6.59(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.52(t, 1H, J = 7.2 Hz), 5.50(t, 1H, J = 6 Hz), 4.41(d, 2H, J = 6 Hz), 2.91 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.69(t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.13(s, 3H), 2.11-2.06(m, 2H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 173.2, 154.9, 151.9, 146.5, 130.2, 127.1, 122.2, 116.5, 110.0, 109.6, 41.7, 40.5, 31.9, 27.3, 22.2, 18.1.
Figure pct00098
2-((m- 톨릴아미노 ) 메틸 )-4,5,6,7- 테트라히드로 -8H- 시클로펜타[d][1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리미딘-8-온(5p) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-3,5,6,7-테트라히드로-4H-시클로펜타[d]피리미딘-4-온(6b)(20 mg, 120 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(3-메틸아닐리노)아세테이트(7b)(28 mg, 144 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-((m-톨릴아미노)메틸)-4,5,6,7-테트라히드로-8H-시클로펜타[d][1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-8-온(5p)(15.7 mg, 45%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.22, (bs, 1H), 6.87(t, 1H, J = 7.8 Hz), 6.41(s, 1H), 6.39 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.29(d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.00(bs, 1H), 4.24 (d, 2H, J = 4.2 Hz), 2.84(t, H, J = 7.8 Hz), 2.61(t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.09 (s, 3H), 2.03-1.98(m, 2H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.1, 155.4, 154.8, 151.7, 148.8, 138.2, 129.1, 117.5, 113.5, 110.4, 110.0, 41.5, 31.8, 27.2, 22.2, 21.8.
Figure pct00099
2-((p- 톨릴아미노 ) 메틸 )-4,5,6,7- 테트라히드로 -8H- 시클로펜타[d][1,2,4]트리 아졸로[1,5-a]피리미딘-8-온(5q) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-3,5,6,7-테트라히드로-4H-시클로펜타[d]피리미딘-4-온(6b)(20 mg, 120 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(4-메틸아닐리노)아세테이트(7c)(28 mg, 144 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 2-[(4-메틸아닐리노)메틸]-5-프로필-4H-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7-온(5q)(9 mg, 25%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ13.29 (bs, 1H), 6.87(d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.58(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.95(s, 1H), 4.30 (d, 2H, J = 5.4 Hz), 2.92(t, 2H, J = 7.8 Hz), 2.69(t, 2H, J = 7.2 Hz), 2.13 (s, 3H), 2.11-2.06(m, 2H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 173.3, 163.1, 154.8, 151.8, 146.5, 129.7, 124.9, 112.9, 110.3, 41.7, 31.8, 27.2, 22.2, 20.5.
Figure pct00100
5-이소프로필-2-((o- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5r) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-이소프로필피리미딘-4(3H)-온(6c)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(2-메틸아닐리노)아세테이트 (7a)(28 mg, 142.6 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-이소프로필-2-((o-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5r)(24.3 mg, 69%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.06(BS, 1H), 6.98(m, 2H), 6.6 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.52(t, 1H, J = 7.8 Hz), 5.81(s, 1H), 5.51(t, 1H, J = 5.4 Hz), 4.43(d, 2H, J = 5.4 Hz), 2.87-2.82(m, 1H), 2.13(s, 3H), 1.24(s, 3H), 1.23(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 173.2, 163.4, 156.6, 151.5, 146.4, 130.2, 127.1, 122.2, 116.5, 110.0, 95.7, 41.5, 32.2, 21.3, 18.1.
Figure pct00101
5-이소프로필-2-((m- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5s) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-이소프로필피리미딘-4(3H)-온(6c)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(3-메틸아닐리노)아세테이트 (7b)(28 mg, 142.6 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-이소프로필-2-((m-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5s)(13.4 mg, 38%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.03(bs, 1H), 6.95(t, 1H, J = 7.8 Hz), 6.48(s, 1H), 6.47(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.37(d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.09 (bs, 1H), 5.80(s, 1H), 4.34(d, 2H, J = 3.6 Hz), 2.88(m, 1H), 2.16(s, 3H), 1.24(s, 3H), 1.23(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 172.7, 156.1, 151.0, 148.3, 137.8, 137.7, 128.7, 117.0, 113.0, 109.5, 95.2, 40.8, 31.7, 21.3, 20.9.
Figure pct00102
5-이소프로필-2-((p- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온(5t) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-이소프로필피리미딘-4(3H)-온(6c)(20 mg, 118.9 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(4-메틸아닐리노)아세테이트 (7c)(28 mg, 142.6 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-이소프로필-2-((p-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5t)(11 mg, 32%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ; 12.96(bs, 1H), 6.87(d, 2H, J = 7.8 Hz), 6.58(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.97(bs, 1H), 5.80(s, 1H), 4.32(s, 2H), 2.87-2.83(m, 1H), 2.13(s, 3H), 1.24(s, 3H), 1.23(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 173.3, 156.6, 151.5, 146.5, 146.4, 129.7, 129.2, 112.9, 95.7, 41.6, 32.2, 21.4, 20.5.
Figure pct00103
5- 메틸 -2-((o- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온 (5u) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-메틸피리미딘-4(3H)-온(6d)(20 mg, 140 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(2-메틸아닐리노)아세테이트(7a)(33 mg, 168 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-메틸-2-((o-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5u)(11.1 mg, 30%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.12(bs, 1H), 6.97(m, 2H), 6.60(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.52(t, 1H, J = 7.8 Hz), 5.79(s, 1H), 5.49(t, 1H, J = 6 Hz), 4.41(d, 2H, J = 6 Hz), 2.29(s, 3H), 2.13(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 172.8, 162.9, 155.7, 150.9, 146.0, 129.7, 126.7, 121.8, 116.1, 109.6, 98.2, 41.1, 18.6, 17.6.
Figure pct00104
5- 메틸 -2-((m- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온 (5v) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-메틸피리미딘-4(3H)-온(6d)(20 mg, 140 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(3-메틸아닐리노)아세테이트(7b)(33 mg, 168 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-메틸-2-((m-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5v)(4.8 mg, 13%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.10(bs, 1H), 6.95(t, 1H, J = 7.8 Hz), 6.48(s, 1H), 6.47(d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.37(d, 1H, J = 7.2 Hz), 6.09(t, 1H, J = 6 Hz), 5.80 (s, 1H), 4.33(d, 2H, J = 6 Hz), 2.30(s, 3H), 2.16(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.3, 156.2, 151.7, 151.4, 148.8, 138.2, 129.1, 117.5, 113.5, 110.0, 98.7, 41.4, 21.8, 19.1.
Figure pct00105
5- 메틸 -2-((p- 톨릴아미노 ) 메틸 )- [1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘 -7(4H)-온 (5w) 나트륨(6 mg) 및 에탄올(1 mL)로부터 제조된 NaOEt의 용액에 2,3-디아미노-6-메틸피리미딘-4(3H)-온(6d)(20 mg, 168 umol)을 첨가하고 반응물을 80℃에서 30분 동안 가열하였다. 그 후, 에틸 2-(4-메틸아닐리노)아세테이트(7c)(33 mg, 168 umol)를 반응 혼합물에 첨가하고 15시간 동안 환류 가열한 후 RT에서 밤새 교반하였다. 수득된 침전물을 여과하고 진공하에 건조시킨 후, 실리카겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/CH2Cl2 = 1:30)로 정제하여 5-메틸-2-((p-톨릴아미노)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리미딘-7(4H)-온(5w)(5.2 mg, 14%)을 수득하였다. 1H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 13.08 (bs, 1H), 6.87(d, 2H, J = 7.8 Hz), 6.58(d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.98(s, 1H), 5.79 (s, 1H), 4.31(d, 2H), 2.29(s, 3H), 2.13(s, 3H); 13C NMR(150 MHz, DMSO-d6) δ 163.4, 156.2, 151.7, 151.3, 146.5, 129.7, 124.9, 112.9, 98.7, 41.6, 20.5, 19.1
생물학적 시약 및 화학 물질
인간 FECH 발현 플라스미드 pHDTF20을 데릴리 랩(Dailey Lab)(University of Georgia)의 E. coli 세포에서 얻었다. 세포를 암피실린과 함께 써클그로우(Circlegrow) 배지(MP Biomedicals, LLC # 3000-122)에서 20시간 동안 성장시켰다. 세포를 수확하고 트리스-MOPS 완충액에서 용해시키며 HisPur 코발트 수지 (Thermo Fisher # 89965)를 사용하여 고정화된 금속 친화성 크로마토그래피로 정제하였다.
활성 어세이 완충액은 0.05 % 옥틸글루코시드 세제가 있는 100mM 트리스-HCl pH 8.0이었다. 어세이 시약에는 100μM NiCl(Sigma # 339350), 0.75μM FECH 효소 및 수산화 암모늄(Santa Cruz # sc-214535)에서 제조된 100μM 메소포르피린(Sigma # 258806)이 포함되어 있다. FECH 활성은 10 μM NMPP(Santa Cruz # sc-263846)로 완전히 억제될 수 있으며, 이것은 스크린에서 양성 대조로 사용되었다.
스크리닝 최적화
동적 어세이(kinetic assay)는 384 웰 포맷에 대하여 최적화되었다. 384 웰 어세이의 경우, 각각의 웰에는 40μL 완충액, 5μL 메소포르피린 용액, 5μL NiCl 및 FECH 용액이 있는 50μL 반응액이 함유되어 있었다. FECH 활성을 모니터링하고, 기울기는 반응의 처음 20분에 걸쳐 일관되게 선형이었다. 이 시점을 화학 스크린에 사용하였다. 이 어세이는 다중 복제 어세이에서 Z'> 0.5를 제공하였으며, 양성 대조는 NMPP에 의해 억제된 FECH 활성이었고 음성 대조는 FECH 활성 + DMSO 비히클 단독이었다.
소분자 스크린
초기 스크리닝은 ChemDiv 10K와 화합물의 ChemBridge 50K 라이브러리의 일부 (10,000개 화합물)를 사용하여 인디아나 대학교 의학부 CGCF(Indiana University School of Medicine Chemical Genomics Core Facility)에서 수행되었다. 화합물은 DMSO 중의 화합물이 있는 모 플레이트로부터 10μM의 최종 어세이 농도를 위해 물 중의 25μL 용액 20μL로서 어세이 플레이트로 희석시켰다. NMPP(2 μL)를 양성 대조를 위해 화합물 없이 방치된 어세이 플레이트 상의 웰의 두 컬럼에 첨가하였다. 억제되지 않은 FECH 활성을 어세이 하기 위해 두 컬럼을 또한 화합물 없이 방치하였다.
어세이 완충액, NiCl 및 FECH 효소(15 μL)의 혼합물을 멀티플로(MulitFlo) 디스펜서를 사용하여 어세이 플레이트의 모든 웰에 첨가하였다. 반응을 시작하기 위해, 어세이 완충액 중의 333 μM 메소포르피린 용액 15μL를 플레이트에 첨가하였고, 플레이트는 스핀 다운시켰으며 OD = 550nm에서의 흡광도를 즉시 판독하여 시간 0에서 판독을 설정하였다. 플레이트는 다시 t = 20분에서 OD = 550 nm에서의 흡광도에 대해 판독하였고 활성을 20분 반응에 걸쳐 흡광도의 변화로 표시하였다.
IC50 결정
ChemDiv에서 재주문하거나 상기 기재된 바와 같이 합성된 화합물을 DMSO 중에서 10mM로 만들고 100 pM 내지 100μM의 최종 농도(1 % 최종 DMSO 농도)에서 FECH 효소 어세이에서 테스트하였다. 화합물에 대한 IC50 값은 GraphPad Prism 소프트웨어를 사용하여 결정하였다.
세포 기반 GI50 결정
인간 망막 미세혈관 내피세포(HREC)를 EGM-2 배지(Lonza)에서 배양하였다. EGM-2 배지 중의 세포(2500/웰)를 투명한 저부 TC 처리된 플레이트와 함께 96 웰 블랙의 중앙에 있는 48 웰에서 플레이팅 하여 밤새 부착되도록 하였다. 세포는 DMSO 대조(1 % 최종 DMSO 농도)와 함께 최종 어세이 농도가 100μM, 30μM, 10μM, 3μM, 1μM, 100nM 및 10nM이 되도록 화합물로 처리하였다. 알라머블루(alamarBlue)를 첨가하기 전에 세포를 44시간 동안 증식시켰다. 알라머블루 시약은 성장하는 세포의 존재시에 환원되는 형광/비색 산화환원 시약이다. 어세이는 560 nm의 여기 및 590 nm의 방출에서 형광을 판독하여 완료되었다. GI50 값은 GraphPad Prism 소프트웨어를 사용하여 결정하였다.
PPIX 축적 어세이
페로켈라타아제가 화합물로 처리 후 HREC에서 억제되는지 확인하기 위해, FECH 기질 PPIX의 축적을 형광 측정법으로 어세이하였다. HREC는 부착 인자로 코팅된 6cm 접시에서 처리시 80% 컨플루언시를 위해 플레이팅 되었다. 이어서 세포를 37℃에서 2시간 동안 DMSO(1 % DMSO 최종 농도) 중의 화합물로 처리하였다. 헴 합성 경로의 첫 번째 전용 전구체인 5-아미노레불린산을 1mM에서 세포에 첨가하고 37℃에서 추가로 2시간 동안 배양하였다. 세포를 PBS로 세척하고 순간 동결시켰다. 세포를 200 μL RIPA 완충액에서 용해시키고 14,000 g에서 15분 동안 4℃에서 원심 분리하여 청정화하였다. 청정화된 용해물(20 μL)을 384 웰 플레이트의 웰에 3 중으로 첨가하였다. 메탄올에서 제조된 동일한 부피의 2M HClO4를 각각의 웰에 첨가하고 406 nm 여기 및 610 nm 방출에서 Biotek Synergy H1 플레이트 판독기에서 형광을 즉시 판독하여 PPIX를 검출하였다. 총 PPIX 축적은 DMSO에서 준비하고 RIPA 완충액 및 2M HClO4(1:1 비)에서 희석하며 동일한 플레이트에서 판독한 PPIX 표준과 형광 출력을 비교하여 결정하였다. 청정화된 용해물 중의 단백질은 표준 Bradford 어세이로 정량화하였으며 PPIX 축적량은 단백질 mg 당으로 표현된다.
관 형성 어세이
마트리겔 기반 관 형성(Matrigel-based tube formation) 어세이를 수행하였다. 간단히 말해서, 50 μL 마트리겔을 96 웰 블랙의 투명한 저부 플레이트에서 37℃에서 20분 동안 고형화시켰다. HREC는 100 μL EGM-2 중의 15,000 세포/웰로 고형 마트리겔에 첨가하고 DMSO에 적절한 농도의 화합물 1 μL/웰로 투여하였다. 관 형성은 명시야 현미경으로 2시간마다 관찰하였으며, 관 형성 8시간 후에 이미지를 촬영하였다. 이미지J에 대한 혈관신생 분석기 플러그인을 사용하여 처리당 6개의 이미지를 분석하고 처리된 세포에 대한 HREC 총 세관 길이를 DMSO 대조에 대하여 정규화하였다. 통계 분석은 ANOVA에 이어 대조(DMSO)에 대한 처리를 비교하기 위해 사용되는 던넷 사후 테스트와 함께 GraphPad Prism을 사용하여 완료되었다.
결과
고 처리량 스크린은 FECH 억제제를 식별한다.
FECH 효소 활성을 모니터링 하기 위한 동적 어세이는 공개된 프로토콜 (Burden et a., Biochim Biophys Acta 1435, 191-197(1999))에서 적합하게 되었다. 재조합 인간 FECH 활성은 경시적으로 550 nm에서 Ni2 + 메소포르피린 IX 반응 생성물의 증가를 모니터링하여 확립되었다(도 1).
초기 스크린에서 20,000개의 화합물이 분석되었다(도 2). 각각의 플레이트에는 음성(비억제된 FECH 활성) 및 양성(NMPP) 대조가 모두 있고, 플레이트 간 변동성이 상당히 있었기 때문에, 히트는 각각의 플레이트에 대해 음성 대조의 평균 활성(100 % 활성)에서 > 3 표준 편차의 감소로 설정되었다. 이 메트릭을 사용하여, 초기 스크린에서 테스트된 화합물 중 664개(3.3 %)가 히트에 지정되었다. 이러한 모든 화합물은 2차 스크리닝을 위해 선택되었다.
이러한 히트를 사용한 2차 스크리닝이 실행되어 어세이가 초기 스크린과 동일하게 설정되었다. 그러나 이러한 2차 스크린에서의 히트에 대한 분석은 초기 스크린과는 상이하였다. 히트는 이들의 FECH 활성의 퍼센트 억제(2차 스크린에 사용된 2개의 플레이트에서 음성 대조의 활성의 평균)에 의해 2차 스크린에서 정의되었다(도 3). 이러한 2차 스크린에서 FECH 활성을 50% 이상 억제한 93개의 화합물(0.5 %)에 대해 추가의 조사를 수행하였다. 범 어세이 간섭 화합물(pan-assay interference compound) 평가 후 2개를 제거하였다. 흥미롭게도, 2차 스크린에서 91개의 잔류하는 '히트' 화합물(초기 스크린의 0.5 %)에는 62개의 트리아졸로피리미디논이 포함되어있었다. 19개의 트리아졸로피리미디논(표 1)을 포함하는 22개의 화합물이 용량 반응 테스트를 위해 재주문되었다.
Figure pct00106
Figure pct00107
용량 반응 어세이는 FECH에 대한 활성 및 세포에서의 활성을 확인한다.
테스트된 화합물 중 10개는 낮은 마이크로몰 범위에서, 9개는 중간 내지 높은 나노몰 범위에서 IC50 값을 가졌으며(표 1; 도 4), 이는 NMPP(본 어세이에서 IC50 = 450 nM)에 필적하는 상당히 강력한 FECH 억제를 나타내는 것이다.
이들 히트의 잠재적인 질환 치료 관련성을 평가하기 위해, 혈관신생에 대한 이들 화합물의 효과를 분석하였다. NMPP 또는 그리세오풀빈을 사용한 FECH 녹다운 및 억제는 인간 망막 내피 세포(HREC) 증식을 감소시키기 때문에, 이것은 스크리닝 히트의 생체 활성에 대한 초기 평가로서 사용되었다. HREC 증식은 마이크로 몰 범위에서만 억제되었으며(표 1), 이는 강력한 세포 활성 FECH 억제제를 찾기 위해 추가의 SAR이 필요함을 시사한다.
합성 화합물은 FECH를 억제하였다.
FECH의 트리아졸로피리미디논 억제의 SAR을 탐구하기 위해, 일련의 화합물을 상기에서 기재된 바와 같이 합성하였다. 4-tert-부틸 벤조산으로부터 일련의 4-tert-부틸페닐트리아졸로피리미디논, 2, 3, 4a-4h(도식 1)를 위한 출발점이었던 아미노트리아졸 1을 합성하였다. 왼쪽과 오른쪽에서 개질된 추가의 유사체를 이후 합성하였다(5a~5w)(도식 2). FECH 활성 어세이에서와 같이 동일한 스크리닝 방법을 사용하여, 화합물 1, 2, 3, 4a~4h, 및 5a~5w를 FECH 억제에 대해 테스트하였다(표 2). 첫 번째 시리즈(4a ~ 4h)에서 두 화합물은 강력한 FECH 억제제이었으며, 한 화합물(4e)는 대조 화합물 NMPP보다 성능이 우수하고(도 2), HREC 증식에 대한 효과를 갖는다(표 2). 두 번째 시리즈(5a~5w)에서 실질적으로 더 활성인 화합물이 있었고, 화합물 5a, 5c, 5d, 및 5h는 재조합 FECH에 대한 활성과 HREC에 대한 항증식 효과의 양호한 균형을 나타내었다(표 2).
Figure pct00108
Figure pct00109
Figure pct00110
Figure pct00111
Figure pct00112
신규 화합물이 세포에서 FECH 활성을 억제할 수 있는지를 평가하기 위해, 화합물 4e로 처리된 HREC에서 FECH 기질 PPIX의 축적을 평가하였다. 헴 전구체 5-ALA로 처리하여 헴 합성 경로를 통해 플럭스를 증강시킨 후, 화합물 4e 및 양성 대조 화합물 NMPP 둘 모두가 PPIX의 축적을 유도하는 것이 관찰되었다(도 5). 이러한 발견은 4e가 세포의 맥락에서 FECH 억제제로 작용함을 나타낸다.
혈관신생 어세이
표준 화학 억제제인 NMPP에 의한 FECH의 억제는 또한 증식을 넘어 HREC의 혈관형성 성질을 억제한다. 화합물 스크인에서 FECH 억제제로 확인된 소 분자가 유사한 효과를 갖는지 확인하기 위해, 마트리겔 기반 관 형성 어세이에서 두 화합물을 테스트하였다. 두 화합물 모두는 관 형성을 효과적으로 차단하였다(도 6A). 더욱이, 양호한 FECH 억제 활성 및 HREC 증식에 대한 효과를 갖는 몇몇 새롭게 합성된 트리아졸로피리미디논, 4e, 4h, 5a, 5c, 5d, 및 5h는 또한 HREC의 관 형성을 차단하였다(도 6B 및 도 7). 이러한 발견은 향후 탐구될 생체 내 항혈관형성 활성을 시사한다.
논의
효소 FECH는 여러 질환에서 치료적 표적화에 대하여 상당히 유망하며 양호한 표적화된 억제제가 부족하다. 고 처리량 스크린은 FECH 억제제를 찾기 위해 사용되었다. 스크리닝 히트 중에서 트리아졸로피리미디논의 현저한 과잉 표현이 있었으며, 이는 이러한 스캐폴드가 FECH 억제제의 기초로서 유망할 수 있으며 억제를 최적화하기 위한 SAR 연구의 여지가 있음을 시사한다. 몇몇 트리아졸로피리미디논은 일부 경우에 FECH 억제 및 항혈관형성 활성을 나타내었다. 이들 화합물은 신생혈관 질환 또는 말라리아에 대한 새로운 요법의 기초를 형성할 수 있거나, 다양한 암의 PDT 또는 PDD를 위해 5-아미노레불린산과 조합될 수 있다.

Claims (31)

  1. 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00113

    식 중,
    R1은 C6-C10 아릴 또는 C1-C6 알킬NR4R5이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환되고;
    각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, 또는 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, R1이 C1-C6 알킬NR4R5일 때, R2는 C3-C6 알킬이고, R3은 H이며, 여기서 C1-C6 알킬 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
    R4는 H이며;
    R5는 비페닐, 4-tert-부틸페닐, 3-클로로-4-플루오로-페닐, 3-플루오로-4-플루오로-페닐, 4-(O-C1-C6 알콕시)페닐, 4-(OCF3)페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 또는 4-메틸페닐이며, 단 R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성할 때, R5는 4-메틸페닐이며;
    각각의 R6 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, 또는 C2-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환된다.
  2. 제1항에 있어서, R1이 C6-C10 아릴이고, 여기서 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 C1-C6 알킬로 임의로 치환된 것인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, R1이 4-tert-부틸페닐인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항에 있어서, R2가 C1-C6 알킬NR6R7이며, R3이 H인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  5. 제1항에 있어서, R1이 C1-C6 알킬NR4R5인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  6. 제1항에 있어서, R2가 n-프로필 또는 이소-프로필이며, R3이 H인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  7. 제1항에 있어서, R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하는 것인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  8. 제1항에 있어서, R2 및 R3이 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5원 카르보시클릭 고리를 형성하는 것인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  9. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00114

    Figure pct00115

    Figure pct00116
  10. 하기로 구성된 군으로부터 선택된 페로켈라타아제 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00117
    ,
    Figure pct00118

    Figure pct00119
  11. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 혈관신생 매개 질환이 있는 환자의 치료 방법.
  12. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 방법:
    Figure pct00120

    식 중,
    R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5 이고, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되며;
    각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하고;
    각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
    R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
  13. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 1000 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 방법.
  14. 제11항에 있어서, 혈관신생 매개 질환은 암, 신생혈관증식을 수반하는 질환, 미숙아 망막병증, 습성 노화 관련 황반 변성, 고혈압성 망막병증, 망막 중심 정맥 폐쇄, 망막 분지 정맥 폐쇄, 신생혈관 녹내장, 망막모세포종, 당뇨병성 황반 부종, 및 증식성 당뇨병성 망막병증으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  15. 제11항에 있어서, N-메틸프로토포르피린(NMPP) 또는 이의 유사체, 그리세오풀빈 또는 이의 유사체, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 안티센스 RNA, 페로켈라타아제 RNA를 표적으로 하는 RNA 침묵 또는 RNA 간섭(RNAi)을 위한 제제, 페로켈라타아제(FECH) DNA의 CRISPR/Cas9 매개 또는 징크 핑거 뉴클레아제 매개 유전자 절제를 위한 제제, 항 VEGF 요법을 위한 제제, 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
  16. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하여 약 0.01 μM 내지 약 500 μM의 유리체 내 농도를 달성하는 것을 포함하는 방법.
  17. 제14항에 있어서, 질환이 암이고, 암은 신경교종, 유방암, 방광암, 결장암, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  18. 제17항에 있어서, 광역학 요법(PDT)으로 환자를 치료하는 것을 더 포함하는 방법.
  19. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안과 질환을 치료하기 위해 사용되며, 눈에 직접 투여되는 것인 방법.
  20. 제19항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 주사로 투여되는 것인 방법.
  21. 제19항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 점안액 형태로 투여되는 것인 방법.
  22. 제19항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 안연고 형태로 투여되는 것인 방법.
  23. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 비경구 투여로 투여되는 것인 방법.
  24. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 경구로 투여되는 것인 방법.
  25. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 약학적 조성물로 투여되고, 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함하는 것인 방법.
  26. 제11항에 있어서, 환자에게 항 VEGF제를 투여하는 단계를 더 포함하는 방법.
  27. 제26항에 있어서, 항 VEGF제는 라니비주맙, 베바시주맙, 애플리버셉트(aflibercept), 아비시파르 페골(abicipar pegol), 브롤루시주맙, 파리시맙, 보롤라닙(vorolanib), 임의의 이들 VEGF제에 대한 바이오시밀러, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  28. 제11항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 단일 주사 또는 다중 주사를 사용하여 투여되는 것인 방법.
  29. 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 말라리아 환자의 치료 방법.
  30. 제29항에 있어서, 트리아졸로피리미디논, 또는 이의 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 하기 화학식의 화합물을 포함하는 것인 방법:
    Figure pct00121

    식 중,
    R1은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬NR4R5이며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
    각각의 R2 및 R3은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, C1-C6 알킬- C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬NR6R7로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 단 R2 및 R3 중 적어도 하나는 H가 아니고, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되거나; 또는 R2 및 R3은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 5-7원 카르보시클릭 고리를 형성하며;
    각각의 R4, R5, R6, 또는 R7은 H, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 및 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C6 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로아릴, C6-C10 비시클릭 헤테로아릴, C6-C10 아릴, 또는 C1-C6 알킬- C6-C10 아릴 중의 각각의 수소 원자는 독립적으로 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도, -CO2R8, C1-C6 알킬, -OC1-C6 알킬, -OCF3, -CF3 또는 C6-C10 아릴로 임의로 치환되고;
    R8은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
  31. 제29항에 있어서, 질환이 말라리아이고, 방법은 클로로퀸(아라렌(Aralen)), 퀴닌 설페이트(쿠알라퀸(Qualaquin)), 아르테미시닌, 히드록시클로로퀸(플라케닐(Plaquenil)), 메플로퀸, 아토바쿠온과 프로구아닐의 조합(말라론(Malarone)), 및 이들의 조합 중 하나 이상을 투여하는 것을 더 포함하는 것인 방법.
KR1020207034488A 2018-04-30 2019-04-30 페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법 KR20210022553A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862664601P 2018-04-30 2018-04-30
US62/664,601 2018-04-30
PCT/US2019/029909 WO2019213076A1 (en) 2018-04-30 2019-04-30 Ferrochelatase inhibitors and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210022553A true KR20210022553A (ko) 2021-03-03

Family

ID=68386737

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207034488A KR20210022553A (ko) 2018-04-30 2019-04-30 페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20210121465A1 (ko)
EP (1) EP3787630A4 (ko)
KR (1) KR20210022553A (ko)
WO (1) WO2019213076A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021262916A1 (en) * 2020-06-26 2021-12-30 Purdue Research Foundation Pharmaceutical formulations of griseofulvin for long-term ocular delivery

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4305279A1 (de) * 1993-02-20 1994-08-25 Merck Patent Gmbh Triazolopyrimidine
WO2010056630A1 (en) * 2008-11-12 2010-05-20 Schering Corporation Triazolopyrimidinones and methods of use thereof
US8815875B2 (en) * 2008-11-12 2014-08-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of fatty acid binding protein (FABP)
EP2485735B1 (en) * 2009-10-08 2015-07-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of fatty acid binding protein (fabp)
EP2508607A1 (en) * 2011-04-07 2012-10-10 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH Medicament for liver regeneration and for treatment of liver failure
KR101739003B1 (ko) * 2014-07-11 2017-05-23 에스티팜 주식회사 신규한 트리아졸로피리미디논 또는 트리아졸로피리디논 유도체, 및 이들의 용도
US10752901B2 (en) * 2015-02-03 2020-08-25 Indiana University Research And Technology Corporation Inhibition of ferrochelatase as an antiangiogenic therapy
WO2018071282A1 (en) * 2016-10-12 2018-04-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Kdm5 inhibitors
US11008325B2 (en) * 2016-11-14 2021-05-18 Virginia Commonwealth University Inhibitors of cancer invasion, attachment, and/or metastasis
CN106749271B (zh) * 2016-12-07 2019-04-05 青岛科技大学 一类[1,2,4]-三氮唑并[1,5-a]嘧啶酮类杂环化合物、其制备方法及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP3787630A1 (en) 2021-03-10
WO2019213076A1 (en) 2019-11-07
EP3787630A4 (en) 2022-01-26
US20210121465A1 (en) 2021-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Joharapurkar et al. Prolyl hydroxylase inhibitors: a breakthrough in the therapy of anemia associated with chronic diseases
TWI694076B (zh) 三唑并嘧啶化合物及其用途
Broekgaarden et al. Inhibition of hypoxia-inducible factor 1 with acriflavine sensitizes hypoxic tumor cells to photodynamic therapy with zinc phthalocyanine-encapsulating cationic liposomes
US9295676B2 (en) Mutation mimicking compounds that bind to the kinase domain of EGFR
JP7102012B2 (ja) Ｒａｌ ＧＴＰアーゼを標的とする抗癌化合物及びそれを使用する方法
CA2819175A1 (en) 5,6-dihydro-imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamine derivatives useful as inhibitors of beta-secretase (bace)
CN104302295A (zh) 用tor 激酶抑制剂治疗癌症
EA028035B1 (ru) Производные пиразолопирролидин-4-она и их применение при лечении заболевания
CN104519885A (zh) 用tor激酶抑制剂治疗癌症
JP6849618B2 (ja) 中性エンドペプチダーゼの阻害剤（ＮＥＰ阻害剤）および／またはアンジオテンシンＩＩ拮抗薬と組み合わせた可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）の刺激薬および／または活性化薬ならびにその使用
TW202031253A (zh) 治療黑色素瘤的藥物組合
JP2023504230A (ja) Ｐｒｍｔ５阻害剤の組合せ医薬
JP2014505722A (ja) 神経変性疾患の処置において使用するための治療剤の組み合わせ
WO2016109470A1 (en) Small molecule stimulators of steroid receptor coactivator proteins and their use in the treatment of cancer
CN107260743A (zh) 氮杂色胺酮衍生物作为ido1和/或tdo抑制剂的用途
JP2019501225A (ja) Ｂ細胞リンパ腫２（ｂｃｌ−２）及び関連タンパク質の阻害
US20200038514A1 (en) Folate conjugate for use in targeting tumor associated macrophages
CN103502219A (zh) 作为治疗剂的新型小分子
KR20210005182A (ko) 암 치료를 위한 조합
EP2931280B1 (en) Methods and compositions for inhibiting cnksr1
AU2014205481A1 (en) Therapeutic indications of kinase inhibitors
Sishtla et al. Small-molecule inhibitors of ferrochelatase are antiangiogenic agents
KR20210022553A (ko) 페로켈라타아제 억제제 및 사용 방법
CA3073228A1 (en) Azole analogues and methods of use thereof
WO2017114260A1 (zh) 色胺酮及其衍生物在制备hIDO2抑制剂中的用途