KR20200123410A

KR20200123410A - 동물 사료 원료

Info

Publication number: KR20200123410A
Application number: KR1020207021423A
Authority: KR
Inventors: 팀 고센스; 이메르셀 필립 프로리몽 마그달레나 반; 르네 콰켈; 피에르 클레망 앙투안 모케; 로네케 온루스트
Original assignee: 뉴트리-에이디 인터내셔널, 나암로저 펜노트스하프
Priority date: 2017-12-22
Filing date: 2018-12-20
Publication date: 2020-10-29
Also published as: EP3727023A1; US11533934B2; MX2020006541A; AU2018390914A1; JP7268030B2; WO2019122112A1; BR112020012501A2; BE1025137B1; AU2018390914B2; RU2020120060A; CA3084721A1; JP2021506327A; ZA202003372B; CN111867387B; US20210186057A1; BR112020012501A8; CN111867387A

Abstract

본 발명은 축산동물 사료 분야, 구체적으로는 가축에서 병원성 감염의 예방 및/또는 치료, 및/또는 가축 생산에서의 효율성 증가에 효과적인 사료 원료에 관한 것이다. 축산동물에 다당류 부티릴 에스테르를 장내 투여하면 하부 장관에서 부티레이트 농도가 증가하는 것으로 밝혀졌다. 이는 무엇보다도, 다른 부티레이트 제제 또는 제품과 비교하여, 하부 장관 및 분변에서 병원체의 존재 감소 및 우수한 성장 성능 결과를 가져온다. 따라서, 본 발명은 신규한 다당류 부티릴 에스테르, 상기 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는, 사료 첨가제 및/또는 사료와 같은 조성물, 및 사료 첨가제로서 상기 다당류 부티릴 에스테르의 용도, 예를 들어, 가축의 병원성 감염의 예방 및 치료, 및/또는 가축 생산에서의 효율성 증대 용도를 제공한다.

Description

동물 사료 원료

본 발명은 축산동물 사료 분야, 구체적으로는 가축에서 병원성 감염의 예방 및/또는 치료 및/또는 가축 생산(livestock production)에서의 효율성 증가에 효과적인 사료 원료에 관한 것이다.

전세계적으로 축산물에 대한 수요가 증가함에 따라 가축 생산의 효율성을 높이는 새로운 전략이 요구된다. 영양소 이용의 최적화는 이러한 전략에 필수적인 요소이다. 소비자와 정부는 식품 안전, 환경 영향 감소, 동물 복지 개선 및 신중한 항균제 사용에 초점을 두어 가축 생산에 대한 추가 요구를 발생시킨다.

가축 생산에서 주의해야 할 한 가지 영역은 살모넬라 및 기타 병원성 박테리아와 같은 병원균의 근절이다. 살모넬라는 주로 가금류 고기나 오염된 난의 소비에 의한, 인간에서의 식품 매개 감염의 가장 중요한 원인 중 하나이다. 농업 부문은 예방접종, 집중적인 위생 조치 및/또는 항생제, 프로바이오틱스, 산성화제 또는 단쇄 및 중쇄 지방산 및 이들의 염의 투여와 같은 다양한 수단들에 의해 살모넬라 감염의 수를 감소시키려고 시도한다.

최근, 그람-음성 박테리아에 대한 휘발성 단쇄 지방산의 정균 효과가 주목받고 있다. 휘발성 단쇄 지방산의 기(group)는 장내 세균총에 크게 영향을 미치지 않으면서 병원성 미생물을 제거할 수 있는, 생분해성 약한 유기산으로 구성된다. 휘발성 단쇄 지방산은 에스케리키아 콜라이 용혈 균주의 성장을 50% 억제할 수 있는 것으로 나타났다. 동물에서 병원체의 감소를 달성하기 위해 다수의 단쇄 지방산 조성물이 사료 첨가제로 사용하기 위해 개발되었다.

EP1354520은 지질 구조(왁스)를 포함하는 매트릭스에 n-부티르산을 포함하는 마이크로캡슐인, 사료 첨가제와, 분무-냉각에 의한 그의 제조방법을 개시한다. EP1354520에 따르면, 부티르산의 마이크로캡슐화는 특히, 사료 첨가제로서의 취급에 어려움을 야기하는, 부티르산의 휘발성 및 악취와 관련된 문제를 극복하는데 유용하다. 또한 EP1354520는 상기 제제가 위 분해(gastric degradation)에 대해 안정하다고 제시한다.

F. Van Immerseel 등 (2005 Poultry Science 84:1851-1856)은 가금류의 사료 첨가제로 사용시 부티르산과 지방 매트릭스에 매립된 부티르산의 효과를 비교했다. 그들은 지방 매트릭스에 매립된 부티르산을 투여한 군에서, 맹장에서 살모넬라의 집락화(colonization)와 살모넬라의 분변 배출(fecal shedding)이 유의적으로 낮았다고 보고하였다.

WO2007/124949는 사료 첨가제로서 3-하이드록시부티르산 및 폴리-3-하이드록시부티르산 화합물의 용도를 개시한다.

BE1023491은 미결정질 왁스를 포함하는 왁스 매트릭스 중에 부티르산을 포함하는 사료 첨가제, 및 용융 압출에 의한 그의 제조방법을 개시한다.

본 발명의 목적은 가축에서 병원성 감염을 예방 또는 치료에 있어서 개선된 효과를 가지며 및/또는 가축 생산의 효율성을 증가시키는 동물 사료 첨가제를 제공하는 것이다.

발명의 요지

본 발명자들은 놀랍게도 이러한 목적이 다당류 및 부티르산의 특정 에스테르를 사용하여 충족될 수 있음을 발견 하였다.

본 발명의 다당류 부티릴 에스테르를 축산동물에 장내 투여하면 하부 장관에서 부티레이트 농도가 증가하는 것으로 밝혀졌다. 본 발명자들은, 이것이 생체내(in vivo) 시험 동안 관찰된, 하부 장관 및 분변에서의 병원성 존재에 대한 다당류 부티릴 에스테르의 효과와 관련이 있다고 추정한다. 또한 놀랍게도, 다당류 부티릴 에스테르의 투여는 다른 부티레이트 제제 또는 제품과 비교하여 우수한 성장 성능 결과를 초래한다는 것이 밝혀졌다. 본 발명에 따른 다당류 부티릴 에스테르는, 후기사료(finisher) 기간 동안 부작용 없이, 급여기간 동안 평균 일일증체량 (average daily weight gain, ADG) 및 평균 일일음식섭취량 (average daily food intake, ADFI)의 개선과 함께 사료 요구율(feed conversion ratio, FCR) 및 사망률(mortality)의 감소라는 매우 바람직한 조합을 제공한다.

부티르산은 장 융모의 성장을 자극 및/또는 위장관 미생물의 발달을 변형시키는 것으로 추정된다. 부티르산은 저용량으로 살모넬라 침입에 관여하는 유전자의 발현을 하향 조절할 수 있다고 여겨진다. 본 발명의 다당류 부티릴 조성물의 사용시 본 발명자들이 예상하는 다른 유리한 효과는 소장에서의 장 내용물의 유지의 개선, 메티오닌의 소화/흡수의 개선, 및/또는 하부 위장관에서의 보다 다양한 미생물 집단을 포함할 수 있다.

부티르산 농도 증가의 원인은 프리바이오틱 효과 (예를 들어, 부티르산 생성 박테리아에 대한 프리바이오틱 효과이나, 이에 제한되지 않음), 다당류 부티릴 에스테르의 분해로 인한 부티르산의 직접 방출, 부티르산 농도 증가를 초래하는 그밖의 다른 메커니즘, 또는 이들의 조합일 수 있다. 임의의 이론에 구속되지 않으면서, 본 발명자들은 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르에 대해 관찰된 효과가, 상부 위장관에 비해 하부 위장관에서 다당류를 발효할 수 있는 미생물의 존재 증가와도 관련이 있을 것으로 본다.

따라서, 본 발명은 신규한 다당류 부티릴 에스테르, 상기 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료 첨가제 및/또는 사료과 같은 조성물, 및 사료 첨가제로서 다당류 부티릴 에스테르의 용도, 예를 들어 가축의 병원성 감염의 예방 또는 치료 및/또는 가축 생산의 효율성 증대를 제공한다.

본 발명의 이들 및 다른 양태는 다음의 상세한 설명 및 첨부된 실시예에 기초하여 명백해질 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 제1 양태는 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료등급(feed grade) 조성물에 관한 것이다.

부티르산은 분자식 CH₃-CH₂-CH₂-COOH를 갖는 휘발성 단쇄 지방 모노카르복실산이다. 본원에 사용된 용어 "부티르산"과 "부티레이트"는 상호 교환적으로 사용되며, 각각 양성자화된 (산, 부티르산) 및 탈양성자화된 (공액 염기, 부티레이트) 형태를 나타내는 것으로 해석되어야 한다. 당업자는 약산인 부티르산이 수성 매질에 용해될 때 보통 양성자화 및 탈양성자화된 형태 모두로 존재하며, 각 형태의 농도는 매질의 pH에 따른다는 것을 이해할 것이다. 산 형태는 장의 벽 및 미생물의 세포막에 의해 흡수 될 수있다.

본원에 사용된 용어 "다당류 부티릴 에스테르"는, 일반적으로 언급되는 바와 같이, 다당류 분자를 중심 부분으로 포함하는 화합물을 지칭하며, 이 다당류 분자는 부티르산의 카르복실산 모이어티 및 다당류 분자의 히드록실기 간의 에스테르 결합의 형성을 통해 복수의 부티르산 분자로 유도체화/치환된다.

본원에 사용된 용어 "다당류"는 단당류 반복 단위 및/또는 유도체화된 단당류 반복 단위, 전형적으로 사이클릭 펜토스, 특히 C₅ 알도오스 또는 케토오스, 또는 사이클릭 헥소오스, 특히 C₆ 알도오스 또는 케토오스를 포함하는 백본을 포함하는 중합체를 말한다. C₅-C₆ 알도오스의 비제한적인 예는 알로오스, 알트로오스, 글루코스, 만노오스, 굴로오스, 이도오스, 갈락토오스, 탈로오스, 리보오스, 아라비노오스, 자일로오스, 릭소오스를 포함한다. C₅-C₆ 케토오스의 비제한적 예는 리불로오스, 자일룰로스, 프룩토오스, 소르보오스 및 타가토오스를 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "단당류 유도체"는 화학적으로 또는 효소적으로 변형된 단당류 단위를 말한다.

다당류는 호모다당류(homopolysaccharide) 또는 헤테로다당류(heteropolysaccharide), 바람직하게는 호모다당류일 수 있다.

다당류는 변형되거나 비변형될 수 있다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르가 제공되며, 여기서 다당류는 전분, 변성 전분, 아밀로펙틴, 변성 아밀로펙틴, 아밀로오스, 변성 아밀로오스, 키토산, 키틴, 구아 검, 변성 구아 검, 로커스트 콩 검, 타라 검, 곤약 검, 곤약 가루, 페뉴그릭 검(fenugreek gum), 메스키트 검(mesquite gum), 알로에 만난, 개질된 셀룰로오스, 산화된 다당류, 황산 다당류, 양이온성 다당류, 아라비아 검, 카라야 검, 잔탄, 카파, 이오타 또는 람다 카라기난, 한천 -한천, 알지네이트, 칼로스, 라미나린, 크리솔라미나린, 자일란, 만난, 갈락토만난, 헤미셀룰로오스, 펙틴, 아라비노자일란, 잔탄 검, 니게란(nigeran), 아이소리케난(isolichenan), 라미나란, 리케난, 글리코겐, 풀루란, 덱스트란, 푸스툴란(pustulan), 이눌린, 잔디 레반(grass levan), 카라기난, 갈락토카롤로스, 로디메난(rhodymenan), 후코이단, 아가로오스, 포르피란, 알긴산, 케라토설페이트, 콘드로이틴, 콘드로이틴 설페이트, 헤파린 및 셀룰로오스로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 헤미셀룰로오스, 전분 및 셀룰로오스로 이우러진 군으로부터 선택되며, 가장 바람직하게 다당류는 셀룰로오스이다.

본 발명의 바람직한 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르가 제공되며, 상기 다당류는 수불용성 다당류로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 목적상, 다당류 부티릴 에스테르는 천연 또는 유전자 변형 유기체 등에 의한 생합성을 통해, 화학적으로, 효소적으로, 발효적으로 형성 될 수 있다. 전형적으로, 본 발명에 따르면, 다당류 부티릴 에스테르는 산-촉매화된 에스테르화 반응과 같은 다당류의 에스테르화 반응에 의해 생성된다.

다당류의 (무수) 단당류 단위상의 치환기의 양은 중량%에 의해 또는 고리에 부착된 치환기의 평균 수에 의해 표시될 수 있으며, 이는 다당류 화학자에게 "치환도(degree of substitution)"(D.S.)로 알려진 개념이다. C₆ 단당류의 경우, 각 단위에서 3 개의 이용 가능한 위치가 모두 치환되면, D.S.는 3으로 표시되고; 각 고리에서 평균 2개가 치환되면, D.S.는 2로 표시되는 등이다. 유사하게, 다당류 상의 치환기의 양은 치환된 이용가능한 위치의 백분율로 표현될 수 있다.

본 발명의 일 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 단당류 단위(D.S.) 당 평균 부티릴기의 개수가 0.1 내지 4의 범위 내이다. 예를 들어, 상기 구체예에 따르면, D.S.는 0.25 이상, 0.5 이상, 0.75 이상, 1.0 이상, 1.25 이상, 1.5 이상, 1.75 이상, 2.0 이상, 2.25 이상 또는 2.5 이상일 수 있고/있거나 3.75 미만, 3.5 미만, 3.25 미만, 또는 3 미만일 수있다. 예시적인 구현예에서, 상기 D.S.는 0.5-3.5의 범위 내, 1.0-3.25의 범위 내, 1.5-3의 범위 내, 또는 2.0-2.95의 범위 내이다.

본 발명의 특히 바람직한 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 단당류 단위 (D.S.) 당 평균 부티릴기의 개수가 0.1 내지 4, 바람직하게는 1 내지 3.5, 바람직하게는 1.75 내지 3.25, 바람직하게는 2.25 내지 3, 바람직하게는 2.5 내지 2.95 내인 셀룰로오스 부티릴 에스테르이다.

다른 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 다당류 부티릴 에스테르의 5 중량% 이상, 바람직하게는 10 중량% 이상, 15 중량% 이상, 20 중량% 이상, 25 중량% 이상, 30 중량% 이상, 35 중량% 이상, 40 중량% 이상, 45 중량% 이상, 50 중량% 이상 또는 55 중량% 이상의 부티릴 함량을 가진다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 다당류 부티릴 에스테르의 5-80 중량%, 바람직하게는 25-70 중량%, 40-60 중량% 또는 50-56 중량%의 부티릴 함량을 특징으로 하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르이다.

다른 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는, 치환된, 이용가능한 다당류 하이드록실 기의 비율이 5 % 이상, 바람직하게는 10 % 이상, 15 % 이상, 20 % 이상, 25 % 이상, 25 % 이상, 30 % 이상, 35 % 이상, 40 % 이상, 45 % 이상, 50 % 이상 또는 55 % 이상으로 표시되는 부티릴 함량을 가진다. 다른 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는, 치환된, 이용가능한 다당류 하이드록실 기의 비율이 100 % 이하, 예를 들어 99 % 미만, 98 % 미만, 97 % 미만, 95 % 미만, 90 % 미만, 85 % 미만, 80 % 미만 또는 75 % 미만으로 표시되는 치환도를 초래하는 부티릴 함량을 가진다.

본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는, 치환된, 이용가능한 다당류 하이드록실 기의 비율이 5-80 %, 바람직하게는 25-70 %, 40-60 % 또는 50-56 % 범위 내로 표시되는 부티릴 함량을 특징으로 하는 셀룰로스 부티릴 에스테르이다.

다른 바람직한 구체예에서, 본 발명에 따른 다당류 부티릴 에스테르는 아세틸 에스테르기를 추가로 포함한다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 부티릴 및 아세틸기를 적어도 1/1, 바람직하게는 적어도 1.5/1, 적어도 2/1, 적어도 2.5/1, 적어도 3/1, 적어도 3.5/1, 적어도 4/1, 적어도 5/1, 적어도 6/1, 적어도 7/1, 적어도 8/1, 적어도 9/1 또는 적어도 10/1의 몰비(molar ratio)로 포함한다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 부티릴 및 아세틸기를 100/1 미만, 바람직하게는 75/1 미만, 50/1 미만, 40/1 미만, 30/1 미만, 25/1미만, 20/1 미만 또는 15/1 미만의 몰비로 포함한다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 아세틸기를 포함하고, 다당류 부티릴 에스테르의 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 한다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 아세틸기를 포함하고, 다당류 부티릴 에스테르의 10 중량% 이하, 바람직하게는 8 중량% 이하, 바람직하게는 5 중량% 이하의 아세틸 함량을 특징으로 한다.

본 발명에 따르면, 다당류 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 부티릴 에스테르이며, 셀룰로오스 부티릴 에스테르의 0.1-60 중량%, 바람직하게는 0.5-45 중량%, 바람직하게는 1-30 중량%, 바람직하게는 2-15 중량%, 바람직하게는 3-10 중량%, 바람직하게는 4-6 중량%의 아세틸 함량을 특징으로 한다.

본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 수 평균 몰 질량 (M_n)이 2,000-1,000,000 g/mol의 범위 내, 바람직하게는 5,000-500,000 g/mol, 7,000-250,000 g/mol, 10,000-100,000 g/mol, 12,000-50,000 g/mol, 13,000-25,000 g/mol 또는 15,000-17,000 g/mol의 범위 내일 수 있다. 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 수 평균 몰 질량 (M_n)이 2,000 g/mol 이상, 바람직하게는 4,000 g/mol 이상, 바람직하게는 8,000 g/mol 이상, 바람직하게는 12,000 g/mol 이상임을 특징으로 할 수 있다. 또한, 본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 수 평균 몰 질량 (M_n)이 1,000,000 g/mol 미만, 바람직하게는 500,000 g/mol 미만, 바람직하게는 250,000 g/mol 미만, 바람직하게는 100,000 g/mol 미만, 바람직하게는 70,000 g/mol 미만, 바람직하게는 65,000 g/mol 미만, 바람직하게는 30,000 g/mol 미만, 바람직하게는 25,000 g/mol 미만, 바람직하게는 17,000 g/mol 미만임을 특징으로 할 수 있다. 수 평균 몰 질량 (M_n)은 삼투, 정적 광산란, 침강 평형, 겔 투과 크로마토그래피, 점도계, 침강 속도, 동적 광산란, 말단기 분석 등과 같은 당업자에게 공지된 적합한 방법에 의해 결정될 수 있다. 수 평균 몰 질량 (M_n)을 결정하는 바람직한 방법은 겔 투과 크로마토그래피이다.

본 발명에 따르면, 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 조성물은 사료등급 조성물이다. 본원에 사용된 용어 "사료등급(feed grade)"은 동물, 특히 가축에 의한 소비에 적합한 것을 의미한다. 일 구체예에서, 이는 조성물이 동물 식품으로의 의도된 용도에 안전하고 기능적이며 적합한 것으로 결정되었음을 의미한다. 예를 들어, 그것은 적절하게 취급 및 표시되고, 및/또는 관련된 관할구역에서 동물 식품으로의 조성물의 사용을 통제하는 적절한 규정을 준수한다.

본 발명의 구체예에서, 사료등급 조성물은 사료 첨가제, 사료등급 제제화 보조제 또는 부형제, 및 영양 성분으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추가적인 성분을 포함한다.

이러한 추가적인 성분의 선택 및 (상대적인) 양은 사료등급 조성물의 정확한 형태 및 목적에 의존하는 것으로 이해될 것이다. 사료등급 조성물이 사료 첨가제 또는 사료 원료인 구체예가 예상된다. 사료등급 조성물이 사료 예비-혼합물(pre-mix) 또는 즉시 사용 가능한 사료 또는 여물인 구체예가 또한 예상된다. 달리 지시되지 않는 한, 용어 "사료 첨가제(feed additive)" 및 "사료 원료 (feed material)"는 일반적으로 다당류 부티릴 에스테르를 고농도로 함유하는 조성물을 지칭하는 것으로 상호호환적으로 사용되며, 이러한 조성물은 사료 또는 여물과 혼합되어 적절한 양/용량의 다당류 부티릴 에스테르를 제공하도록 설계되고 의도된다. 본 명세서에서 이들 용어는 동물 사료 규정의 맥락에서 사용되는 법적 정의로서 관할 구역 및/또는 시간에 따라 변할 수 있는 법적 정의를 지칭하지는 않는 것으로 이해되어야 한다. 전자에도 불구하고, 본 발명의 사료등급 조성물은 엄격한 법적 (즉, 규제) 의미에서 사료 첨가제 또는 사료 원료로서 제한된 형태로 제공될 수 있다고 이해될 것이다.

본 발명의 구체예에서, 사료등급 조성물은 하나 이상의 다른 사료등급 원료와 관련된 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료 원료이다. 본 발명의 구체예에서, 0.1-80 중량%, 바람직하게는 0.5-60 중량%, 1-50 중량%, 2-40 중량%, 3-30 중량%, 4-20 중량%, 5-15 중량%의 다당류 부티릴 에스테르 및 하나 이상의 다른 사료등급 원료를 포함하는 사료 원료가 제공된다.

본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 바와 같은 사료 원료가 제공되며, 여기서 상기 하나 이상의 다른 사료등급 원료는 기술적인 첨가제(technological additive), 감각 첨가제(sensory additive), 영양 첨가제(nutritional additive), 축산 첨가제(zootechnical additive), 항콕시듐제(coccidiostat) 및 항히스토모나스제(histomonostat)의 군으로부터 선택된다.

본 발명의 다당류 부티릴 에스테르와 적절히 조합될 수 있는 기술적인 첨가제의 예는 보존제, 항산화제, 유화제, 안정화제, 증점제, 겔화제, 결합제, 방사성핵종 오염 제어 물질, 고화방지제, 산도 조절제, 사일리지 첨가제 (silage additive)및 변성제를 포함한다.

본 발명의 다당류 부티릴 에스테르와 적절히 조합될 수 있는 감각 첨가제의 예는 착색제 및 향미제 화합물을 포함한다. 착색제는 광범위하게 해석되어야 하며 사료에 색을 첨가하거나 복원시키는 물질, 동물에게 공급될 때 동물 유래 식품에 색을 첨가하는 물질 및/또는 관상용 어류 또는 조류의 색에 유리하게 영향을 미치는 물질을 나타낼 수 있다.

본 발명의 다당류 부티릴 에스테르와 적절히 조합될 수 있는 영양 첨가제의 예는 비타민, 프로-비타민 및 유사한 효과를 갖는 화학적으로 잘 정의된 물질; 미량 원소의 화합물; 아미노산, 이의 염 및 유사체; 우레아 및 그 유도체를 포함한다.

본 발명의 다당류 부티릴 에스테르와 적절히 조합될 수있는 축산 첨가제의 예는 소화성 증강제(digestibility enhancer), 미생물총(gut flora) 안정화제 및 환경에 유리하게 영향을 미치는 물질을 포함한다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 상기 사료 원료에 포함된 하나 이상의 다른 사료등급 원료는 결합제, 고화 방지제, 안정화제, 담체 및/또는 보존제이다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 적어도 하나의 다른 사료등급 원료는 효모 생성물, 점토, 지방산의 염, 일리카(ilica), 세피올라이트, 벤토나이트, 클리노프틸로라이트, 구아 검, 잔탄 검, 포름산, 포름산 나트륨, 포름산 칼슘, 아세트산, 아세트산 칼슘, 프로피온산 나트륨, 프로피온산 칼슘, 젖산, 젖산 칼슘, 식물성 오일 유래의 토코페롤-풍부 추출물, 및 밀기울의 군으로부터 선택된다. 본원에 사용된 효모 생성물은 광범위하게 해석되어야 하며, 효모 및 이의 유도체 생성물, 예컨대 사카로마이세스 세레비지애 (Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 칼스베르겐시스 (Saccharomyces carlsbergensis), 클루이베로마이세스 프라질리스 (Kluyveromyces fragilis), 토룰라스포라 델브루에키 (Torulaspora delbrueckii) 등으로부터 수득한 불활성화된 건조 효모, 효모 세포벽, 자가분해물 또는 뉴클레오티드를 나타낼 수 있다. 본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 전술한 사료 원료는, 조성물의 총 중량을 기준으로, 50중량% 이하, 바람직하게는 40 중량% 이하, 30 중량% 이하, 25 중량% 이하, 20 중량% 이하, 18 중량% 이하, 15 중량% 이하, 10 중량% 이하, 또는 5 중량% 이하의 다당류 부티릴 에스테르를 포함하여 제공된다.

본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 바와 같은 사료 원료는 하나 이상의 다른 사료등급 원료, 예를 들어 전술한 바와 같이 정의된 사료등급 원료를 조성물의 총 중량을 기준으로 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 3 중량% 이상, 5 중량% 이상, 10 중량% 이상, 20 중량% 이상, 30 중량% 이상 40 중량% 이상, 또는 50 중량% 이상의 (조합) 양으로 포함하여 제공된다.

본 발명의 구체예에서, 사료등급 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르 및 하나 이상의 동물 사료 성분을 포함하는 가축 사료이며 사료로도 지칭된다. 당업자에게 이해되는 바와 같이, 본원에 사용된 용어 "사료 성분(feed ingredient)"은 동물의 정상적인 성장 및 발달에 필요한 공통 영양소를 제공하는 사료 구성요소들을 지칭하며, 주요 영양소는 아미노산, 탄수화물, 지질, 비타민과 미네랄이다. 일반적으로 사료 성분은 크게 단백질 공급원, 에너지 공급원, 지방 공급원 및 미네랄 공급원으로 분류된다.

따라서, 본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 가축 사료가 제공되며, 여기서 하나 이상의 사료 성분은 단백질 공급원, 에너지 공급원, 지방 공급원 및 미네랄 공급원의 군으로부터 선택된다. 단백질 공급원의 적합한 예는 대두박, 채종박(rapeseed meal), 팜핵박(Palm kernel meal), 해바라기 박, 완두콩, 콩, 루핀, 어분, 가금류분 및 혈장을 포함한다. 에너지 공급원의 적합한 예는 옥수수, 밀, 보리 및 쌀을 포함한다. 지방 공급원의 적합한 예는 어유, 탈로우(tallow), 옥수수유, 대두유, 미강유, 팜유 및 카놀라유를 포함한다. 미네랄 공급원의 적합한 예는 칼슘, 마그네슘, 인, 칼륨, 나트륨, 구리, 셀레늄, 아연, 철, 망간, 요오드, 코발트를 포함한다.

본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 가축 사료는 조성물의 총 중량을 기준으로 0.0001 중량% 이상, 바람직하게는 0.001 중량% 이상, 0.005 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.025 중량% 이상, 0.05 중량% 이상 또는 0.1 중량% 이상의 양의 다당류 부티릴 에스테르를 포함하여 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 가축 사료는 조성물의 총 중량을 기준으로 10 중량% 이하, 바람직하게는 5 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1 중량% 이하, 0.5 중량% 이하 또는 0.1 중량%.이하의 다당류 부티릴 에스테르를 포함하여 제공된다.

본 발명의 구체예에서, 사료등급 조성물은 조성물의 5 중량% 미만, 바람직하게는 2 중량% 미만, 바람직하게는 1 중량% 미만, 바람직하게는 0.5 중량% 미만, 바람직하게는 0.1 중량% 미만, 바람직하게는 0.05 중량% 미만, 바람직하게는 0.01 중량% 미만의 유리산 함량을 가진다. 유리산 함량은 당업자에게 공지된 적합한 방법에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 구체예에서, 사료등급 조성물은 조성물의 5 중량% 미만, 바람직하게는 2 중량% 미만, 바람직하게는 1 중량% 미만, 바람직하게는 0.5 중량% 미만, 바람직하게는 0.1 중량% 미만, 바람직하게는 0.05 중량% 미만, 바람직하게는 0.01 중량% 미만의 수분 함량을 가진다. 수분 함량은 Karl-Fischer 적정과 같은 당업자에게 알려진 적절한 방법에 의해 결정될 수 있다.

본원의 상기 기재된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료등급 조성물은 분말, 압축, 과립화 또는 펠릿화 형태로 제공될 수 있다. 바람직한 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 사료등급 조성물 전체에 균질하게 분포된다.

바람직한 구체예에서, 사료등급 조성물은 압축, 과립화 또는 펠릿화된 형태로 제공되고, 다당류 부티릴 에스테르는 사료등급 조성물을 구성하는 일차 입자(primary particle)에 전체에 걸쳐 분포된다.

매우 바람직한 구체예에서, 사료등급 조성물은 압축, 과립화 또는 펠릿화 형태로 제공되며, 사료등급 조성물을 구성하는 일차 입자는 구별 가능한 층 또는 상을 포함하지 않는다. 매우 바람직한 구체예에서, 사료등급 조성물은 압축, 과립화 또는 펠릿화 형태로 제공되며, 여기서 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료등급 조성물을 구성하는 일차 입자는, 코팅의 총 중량을 기준으로 70 중량% 초과, 50 중량% 초과, 또는 20 중량% 초과의 양의 부티릴 에스테르로 이루어진 또는 이를 포함하는 코팅을 포함하지 않는다.

본 발명의 제2 양태는 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 투여함으로써 동물을 치료하는 방법에 관한 것이다. 전형적으로, 전술한 바에 기초하여 이해되는 바와 같이, 이러한 방법은 동물의 생리학적 상태에 영향을 줄 목적으로, 특히 동물의 장 건강, 상태 및/또는 성능을 개선할 목적으로, 바람직하게는 동물의 사료와 혼합하여, 다당류 부티릴 에스테르를 동물에 장내, 특히 경구 투여하는 단계와 관련된다. 따라서 본 발명의 방법은 예방 또는 치료 효과를 가질 수있다. 본 발명의 방법은 또한 순수한 경제적 목적을 가질 수있다.

본 발명에 따르면, 동물은 바람직하게는 조류 종, 수생 종 및 포유동물 종을 포함하는 가축 동물이다. 조류 종의 예는 칠면조, 오리 및 닭과 같은 가금류 종을 포함한다. 수생 종의 예에는 연어, 송어, 틸라피아, 메기 및 잉어와 같은 어류 종과, 쉬림프 및 프론을 포함한 갑각류 종을 포함한다. 포유동물 종의 예는 양, 염소 및 소와 같은 반추동물 종과, 말, 돼지 및 스와인와 같은 비-반추동물 종을 포함한다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 동물은 후장 발효를 갖는 단위 동물(monogastric animal)로 구성된 군에서 선택된다. 다른 바람직한 구체예에서, 동물은 닭, 돼지, 말, 송아지, 염소, 양, 토끼, 개, 고양이 및 물고기로 이루어진 군에서 선택된다. 보다 바람직한 구체예에서, 동물은 닭, 돼지, 말 송아지, 염소 양 및 토끼로 이루어진 군에서 선택된다. 보다 바람직하게는 닭, 돼지, 말 및 송아지로 이루어진 군, 보다 바람직하게는 닭 및 돼지로 이루어진 군으로부터 선택되며, 가장 바람직하게는 닭이다.

본 발명의 구체예에서, 치료 대상 동물은 이유기(weaning period)에 있는 동물, 전기사료(starter) 기간에 있는 동물, 중기사료(grower) 기간에 있는 동물, 또는 후기사료(finisher) 기간에 있는 동물 일 수 있다. 바람직한 구체예에서, 동물은 전기사료(starter) 기간에 있는 동물이다.

본 발명의 구체예에서, 치료 방법은 동물에게 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료 또는 여물, 전형적으로 본원에 정의된 바와 같은 사료 또는 여물을 급여하는 것을 포함한다. 최적의 치료 요법은 본원의 교시를 토대로 하여 처리된 종 및/또는 목표로 하는 효과에 따라 달라질 수 있다. 적절한 치료 요법을 결정하는 것은 당업자의 능력 내에 있을 것이다. 본 발명의 구체예에서, 치료는 24 시간 동안 동물에 의해 소비된 동물 사료의 총 중량을 기준으로 0.0001 중량% 이상, 바람직하게는 0.001 중량% 이상, 0.005 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.025 중량% 이상, 0.05 중량% 이상 또는 0.1 중량% 이상의 다당류 부티릴 에스테르의 장관(enteral) 투여, 예를 들어 경구 투여를 포함할 것이다. 본 발명의 구체예에서, 24 시간 동안 동물에 의해 소비된 동물 사료의 총 중량을 기준으로 10 중량% 이하, 바람직하게는 5 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1 중량% 이하, 0.5 중량% 이하 또는 0.1 중량% 이하의 다당류 부티릴 에스테르의 장관 투여, 예를 들어 경구 투여를 포함하는, 본원에 정의된 치료가 제공된다.

본 발명의 구체예에서, 다당류 부티릴 에스테르는 일주일에 1 회 이상, 바람직하게는 3 일에 1 회 이상, 보다 바람직하게는 2 일에 1 회 이상, 가장 바람직하게는 1 일 1 회 이러한 용량으로 투여된다.

본 발명의 방법은, 전술한 이유에 기초하여 명백한 바와 같이, 다양한 이유로 수행될 수 있고, 특히 동물의 건강을 개선 및/또는 유지, 및/또는 동물의 성능을 개선시키기 위해 수행될 수 있다.

따라서, 본 발명의 일 구체예에서, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공되며, 상기 방법은 비-치료적이다. 따라서, 처치 대상 동물이 건강 상태가 양호하거나 정상인 동물인, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 상기 방법은 사료 요구율(feed conversion ratio)의 감소, 체중(life weight)의 증가, 및/또는 평균 일일증체량(average daily gain)의 증가를 목표로 한다.

본 발명의 구체예에서, 상기 방법은 주어진 시간에, 예를 들어 도축 또는 35 일(day 35)에, 바람직하게는 35 일에 1 % 초과, 바람직하게는 2 % 초과, 바람직하게는 4 % 초과, 바람직하게는 6 % 초과의 체중을 증가시키는 것을 목표로 할 수 있다. 바람직한 구체예에서, 본 방법은 주어진 시간에 체중을 1-12 %, 바람직하게는 2-6 % 증가시키는 것을 목표로 한다. 주어진 시간에 체중의 증가는 통상의 실험, 예를 들어 대조군을 사용한 생체내(in vivo) 실험과 같은 통상적인 실험을 통해 당업자가 결정할 수 있다.

본 발명의 구체예에서, 상기 방법은 주어진 기간 동안, 예를 들어 급여 기간(supplementation period) 또는 일생 동안, 바람직하게는 급여 기간 동안 계산된 사료 요구율을 1 % 초과, 바람직하게는 2 % 초과, 바람직하게는 4 % 초과, 바람직하게는 6 % 초과 감소시키는 것을 목표로 할 수 있다. 바람직한 구체예에서, 상기 방법은 주어진 기간 동안 계산된 사료 요구율을 1-12 %, 바람직하게는 2-6 % 감소시키는 것을 목표로 한다. 주어진 기간 동안 계산된 사료 요구율의 감소는 통상적인 실험, 예를 들어 대조군을 사용한 생체내 실험을 통해 당업자에 의해 결정될 수있다.

본 발명의 구체예에서, 상기 방법은 주어진 기간 동안, 예를 들어 급여 기간 또는 일생 동안, 바람직하게는 급여 기간 동안 계산된 평균 일일증체량을 1 % 초과, 바람직하게는 2 % 초과, 바람직하게는 4 % 초과, 바람직하게는 6 % 초과 증가시키는 것을 목표로 할 수 있다. 바람직한 구체예에서, 상기 방법은 주어진 기간 동안 계산된 평균 일일증체량을 1-12 %, 바람직하게는 2-6 % 증가시키는 것을 목표로 한다. 주어진 기간 동안 계산된 평균 일일증체량의 증가는 통상적인 실험, 예를 들어 대조군을 사용한 생체내 실험을 통해 당업자에 의해 결정될 수있다.

본 발명의 구체예에서, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공되며, 상기 방법은 동물의 건강을 개선 또는 유지하기 위한 목적으로 수행된다.

따라서, 본 발명의 구체예로서, 처치 대상 동물이 병태 또는 병리를 앓고 있거나 앓을 위험이 있는 동물인, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 또한, 본 발명의 구체예에서, 동물에서 병태 또는 병리의 치료 및/또는 예방적 처치를 위한, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다.

보다 구체적으로, 본 발명의 구체예에서, 처치 대상 동물이 병원체 감염, 바람직하게는 장 병원체 감염, 보다 바람직하게는 맹장 및/또는 결장 병원체 감염를 앓고 있거나 앓을 위험이 있는 동물 인, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 병원체 감염, 바람직하게는 장 병원체 감염, 보다 바람직하게는 맹장의(caecal) 및/또는 결장의(colonic) 병원체 감염을 치료 및/또는 예방하기 위한, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명에 따르면, 상기 병원체는 아이메리아(eimeria), 바이러스 및 진균으로부터 선택될 수 있고, 더욱 바람직하게는 상기 병원체는 박테리아, 가장 바람직하게는 클로스트리디움 아세토부틸리쿰(Clostridium acetobutylicum), 에스케리키아 콜라이 (Escherichia coli), 스트렙토코커스 크레모리스 (Streptococcus cremoris), 락토코커스 락티스 (Lactococcus lactis), 락토코커스 크레모리스 (Lactococcus cremoris), 클로스트리디움 퍼프린젠스 (Clostridium perfringens), 캄필로박터 제주니 (Campylobacter jejuni), 캄필로박터 콜라이 (Campylobacter coli), 로소니아 인트라셀룰라리스 (Lawsonia intracellullaris), 브라키스피라 하이오디센테리에 (Brachyspira hyodysenteriae), 엔테로코커스·세코룸 Enterococcus caecorum), 스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis), 살모넬라 엔테리티디스 (Salmonella enteritidis) 및 이들의 조합, 바람직하게는 클로스트리디움 퍼프린젠스 (Clostridium perfringens), 캄필로박터 제주니 (Campylobacter jejuni), 캄필로박터 콜라이 (Campylobacter coli), 로소니아 인트라셀룰라리스 (Lawsonia intracellullaris), 브라키스피라 하이오디센테리에 (Brachyspira hyodysenteriae), 엔테로코커스·세코룸 Enterococcus caecorum), 스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis), 살모넬라 엔테리티디스 (Salmonella enteritidis) 및 이들의 조합으로부터 선택된다.

일 구체예에서, 처치 대상 동물이 장내 세균총(intestinal flora)에서의 장해(disturbance), 특히 맹장 및/또는 결장 세균총에서의 장해를 겪거나 겪을 위험이 있는 동물인, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 동물의 장내 세균총을 개선 및/또는 동물에서 건강한 장내 세균총을 유지하기 위해, 특히 맹장의 및/또는 결장의 세균총을 개선 및/또는 건강한 맹장의 및/또는 결장의 세균총을 유지하기 위하여, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 일 구체예에서, 위장관, 바람직하게는 하부 위장관, 바람직하게는 맹장(caeca) 또는 결장(colon)에서 락토바실러스 또는 비피도박테리움 속의 박테리아의 미생물 수를 증가키는 결과를 초래 및/또는 목표로 하는, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 위장관, 바람직하게는 하부 위장관, 바람직하게는 맹장 또는 결장에서 장내세균과 (Enterobacteriaceae family)의 박테리아의 미생물 수에 비하여 락토바실러스 또는 비피도박테리움 속의 박테리아의 미생물 수의 비율을 증가시키는 결과를 초래 및/또는 목표로 하는, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 위장관, 바람직하게는 하부 위장관, 바람직하게는 맹장 또는 결장에서 살모넬라 속의 박테리아의 미생물 수에 비하여 락토바실러스 또는 비피도박테리움 속의 박테리아의 미생물 수의 비율을 증가시키는 결과를 초래 및/또는 목표로 하는, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공된다. 본 발명의 구체예에서, 위장관, 바람직하게는 하부 위장관, 바람직하게는 맹장(caeca) 또는 결장에서 살모넬라 속의 박테리아의 미생물 수에 비하여 락토바실러스 또는 비피도박테리움 속의 박테리아의 미생물 수의 비율을 증가시키는 것을 포함하여 장내 세균총을 개선시키는 결과를 초래 및/또는 목표로 하는, 본원에 정의된 바와 같은 방법이 제공되며, 상기 비율은 각 속을 대표하는 박테리아 1종의 미생물 수를 결정하고 그 대표적인 박테리아의 미생물 수를 사용하여 비율을 계산함으로써 추정한다. 이러한 구체예에 따르면, 미생물 수 또는 미생물 수의 비율을 감소 또는 증가시키는 것은 광범위하게 해석되어야하며, 예를 들어 다음 중 하나 이상을 의미하는 것으로 이해 될 수 있다:

● 당업자에게 공지된 적합한 방법을 사용하여 결정된, 처치를 시작한지 1-10 일, 바람직하게는 1-5 일, 바람직하게는 3일 후에 측정하고 처치되지 않은 동물의 군과 비교한, 콜로니 형성 단위 (CFU)의 수의 감소 또는 증가,

● 당업자에게 공지된 적합한 방법을 사용하여 결정된, 처치 전과, 처치를 시작한지 1-10 일, 바람직하게는 1-5 일, 바람직하게는 3일 후에 동일한 동물에서 측정한, 콜로니 형성 단위 (CFU)의 수의 감소 또는 증가, 또는

● 본 발명에 따른 다당류 부티릴 에스테르에 의한 사료 급여 효과를 결정하기 위한, 당업자에게 공지된 임의의 다른 방법.

본 발명의 추가의 양태는, 본원의 상기 정의된 바와 같은 치료 방법에 사용하기 위한, 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르 및/또는 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 함유하는 사료등급 조성물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 양태는, 본원의 상기 정의된 바와 같은 치료 방법에 사용되는 조성물의 제조에 있어서의, 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르 및/또는 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 함유하는 사료등급 조성물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 양태는, 본원의 상기 정의된 바와 같은 치료 방법에 사용하기 위한, 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르 및/또는 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 함유하는 사료등급 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 양태는, 동물 사료 구성요소 또는 성분로서의, 본원에 정의된 바와 같은 다당류 부티릴 에스테르의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 추가의 양태는 본원에 기재된 동물 사료 조성물의 제조 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 다음을 포함한다:

● 제 1 동물 사료 성분을 제공하는 단계,

● 다당류 부티레이트 에스테르를 제공하는 단계, 및

● 제1 동물 사료 성분을 다당류 부티레이트 에스테르와 균질한 블렌드로 혼합하는 단계.

일 실시예에서, 상기 방법은 다음을 포함한다:

● 제 1 동물 사료 성분을 제공하는 단계,

● 다당류 부티레이트 에스테르를 제공하는 단계,

● 제1 동물 사료 성분을 다당류 부티레이트 에스테르와 균질한 블렌드로 혼합하는 단계, 및

● 균질한 블렌드를 펠릿화하는 단계.

따라서, 본 발명은 위에서 논의된 특정 구체예를 참조하여 설명되었다. 이들 구체예는 당업자에게 공지된 다양한 변형 및 대안적인 형태에 영향을 받기 쉽다는 것이 인식될 것이다. 전술한 내용에 더하여, 본 명세서에 설명된 구조 및 기술들에 대하여 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않는 많은 변형들이 이루어질 수있다. 따라서, 특정 구체예들이 설명되었지만, 이들은 단지 예시일 뿐이며 본 발명의 범위를 제한하지 않는다. 또한, 본 문서 및 그 청구범위를 보다 적절히 이해하기 위해, "포함하다"라는 동사와 그 동사활용은 그 단어 뒤의 대상을 포함하지만 특정하게 언급된 대상들을 제외하는 것이 아닌, 비-제한적인 의미로 사용되는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 부정 관사 "a" 또는 "an"에 의한 요소에 대한 언급은 문맥상 하나의 요소만이 존재할 것을 명백히 요구하지 않는 한, 하나 이상의 요소가 존재할 가능성을 배제하지 않는다. 부정 관사 "a" 또는 "an"은 일반적으로 "적어도 하나"를 의미한다. 하기 실시예는 단지 예시의 목적으로 제공되며, 본 발명의 범위를 어떠한 방식으로도 제한하려는 것은 아니다.

도 1: 실시예 1에서 측정한 부티레이트 농도 - 회장 접종물(Ileum inoculum).
도 2: 실시예 1에서 측정한 부티레이트 농도 - 결장 접종물(Colon inoculum).
도 3: 실시예 1에서 측정한 부티레이트 농도 - 맹장 접종물(Caecum inoculum).
도 4: 실시예 2에서 측정한 부티레이트 농도 - 결장(Colon).

실시예

실시예 1 : 시험관내( in vitro ) 발효 분석

동물의 위장관(GIT)에서 부티레이트 농도를 증가시키는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 본 발명에 따른 제품, 양성 대조군 및 음성 대조군과 함께, 육계(broiler chicken)의 GIT 박테리아를 접종하는 시험관내 발효 분석을 수행하였다

배지(medium)

1 리터 배지는 0.6 g KCL, 0.6 g NaCl, 0.2 g CaCl2·2H₂O, 0.5 g MgSO₄·7H₂O, 1.5 g Pipes buffer, 0.54 g NH₄Cl, 1.0 g 트립티카제(trypticase), 1ml 레자주린 용액 (증류수 200ml 당 0.2g 레자 주린), 10ml '미량 미네랄 용액(Trace Mineral Solution)', 12ml 비타민/인산 용액(Vitamin/phosphate solution), 10ml 해민 용액(Haemin Solution) (0.1g 해민/1L 증류수), 4mg/ml NaHCO₃ 및 1mg/ml 시스테인 HCl으로 구성된다.

● 미량 미네랄 용액

0.025 g CuCl·2H₂O, 0.020 g FeSO₄·7H₂O, 0.025 ZnCl₂, 0.025 g CuCl₂·H₂O, 0.050 g CoCl₂·6H₂O, 0.050 g SeO₂, 0.250 g NiCl₂·6H₂O, 0.250 g Na₂MoO₄·2H₂O, 0.0314 g NaVO₃, 0.250 H₃BO₃/1 L 0.02 M HCl 용해

● 비타민/인산 용액

54.7 g KH₂PO₄를 함유하는 증류수 1L 당 0.0204g 비오틴, 0.0205g 엽산, 0.1640g 칼슘 D-판토테네이트, 0.1640g 니코틴아미드, 0.1640 리보플라빈, 0.1640g 티아민 HCl, 0.1640g 피리독신 HCl, 0.0204g 파라-아미노 벤조산, 0.0205 시아노코발라민 (비타민 B12).

접종물

4 주령 육계인 Ross 408의 GIT의 회장, 결장 및 맹장의 장 샘플을 수집하였다. 접종물은 모든 세그먼트에 대해 동일한 방식으로 준비하였다. 샘플의 절제 직후, 샘플을 37 ℃의 온도로 혐기성 조건하에 두었다(anaerobic chamber, Ruskinn Technology, Bridgend, UK). 모든 세그먼트의 중량을 측정하고, 예열된 (37 ℃) 혐기성의 멸균 인산염 완충 식염수로 1 : 9의 비율로 희석하였다. 균질화 후, 테스트 제품들을 첨가하고 희석된 물질을 전술한 배지에 1:10의 비율로 접종하였다.

테스트 원료

아래 표에 나타낸 바와 같이, 세 가지 다른 물질들이 GIT에서 부티레이트 농도를 증가시키는 능력을 테스트하였다. 모든 시험은 0.5 % w/v 최종 농도에서 수행하였다.

본 발명에 따른 대표적인 다당류 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 아세테이트 부티레이트이다. 양성 대조군으로는 부티레이트 생성 박테리아에 대한 프리바이오틱 효과가 공지된 자일로-올리고당을 포함하였다. 부티레이트 농도에 대한 셀룰로오스 백본의 효과를 평가하기 위해, 셀룰로오스로 구성된 음성 대조군도 테스트하였다.

테스트	제품	공급자	제품사양
1	셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 (Cellulose acetate butyrate, CAB)	Acros Organics®	50-54% 부티릴 함량<4% 아세틸 함량
2	자일로-올리고당(Xylo-oligosaccharides, XOS)	Longlive®	35% XOS
3	셀룰로오스	Sigma-Aldrich ®

부티레이트 농도 측정

HPLC-UV에 의한 부티레이트 농도의 분석을 위해 접종 후 0h, 4h 6h 및 24h 시점에 유체 샘플을 수집하였다. 추출 프로토콜 및 장비는 문헌 [De Baere et al. (Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 80 (2013) 107- 115] 에 기술된 바와 같이 사용하였다.

결과

도 1은 회장 접종물에 대해 측정된 부티레이트 농도를 나타낸다.

도 2는 결장 접종물에 대해 측정된 부티레이트 농도를 나타낸다.

도 3은 맹장 접종물에 대해 측정된 부티레이트 농도를 나타낸다.

결과는 CAB가 음성 대조군에 대해 측정된 부티레이트 농도보다 유의하게 부티레이트 농도를 증가시킬 수 있음을 분명히 보여준다.

실시예 2 : 가금류 결장에서 부티레이트 농도의 생체내(in vivo) 측정

동물의 하부 위장관(GIT)에서 부티레이트 농도를 증가시키는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 생체내 실험을 수행 하였다. 본 발명에 따른 제품을 가금 사료에 첨가하고, 결장에서의 부티레이트 농도를 결정하고, 이를 다른 지연 방출 제제 또는 제품에서 얻은 결과와 비교하였다.

동물

이 사료 시험에는 Ross 308 육계를 사용하였다. 1일된 병아리는 상업적 부화장에서 얻어 격리된 상태로 유지하였다. 모든 처리군은 바닥에 깔짚이 깔려있는 분리된 케이지의 같은 방에 수용하였다. 60 마리의 닭을 각각 7 마리 또는 8 마리의 닭이 포함된 8개 그룹(블랑코 그룹 포함)으로 나누었다.

테스트 사료 조성물

하기 표에 나타낸 테스트 제품을 사료 kg 당 3g의 나트륨 부티레이트 농도로 시판 메쉬 육계 사료(Versele-Laga, Belgium)와 혼합하여 7개의 서로 다른 테스트 사료 조성물을 제조하였다. 그 후 태스트 사료를 펠릿화하여 (증기 없이) 선택적 사료 섭취를 방지하였다. 펠릿화 기술, 펠릿 크기 및 시판 육계 사료는 모든 테스트 제품에 대하여 동일하였다.

테스트	제품	공급자	제품사양
1	대조군 - 첨가없음	NA	NA
2	Adimix 30 Coated®	Nutri-Ad®	팜 지방(palm fat) 으로 코팅된 30% 나트륨 부티레이트
3	다당류 부티릴 에스테르:셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 (CAB)	Acros Organics®	50-54% 부티릴 함량 <4% 아세틸 함량
4	폴리하이드록시부티레이트 (Ralstonia)	Metabolix®	100% 하이드록시부티레이트
5	10% 전분 함유 왁스 매트릭스(Wax matrix with 10% starch)	직접 제조	Lunacera M® 결정질 매트릭스 내 30% 나트륨 부티레이트 및 전분
6	트리부티린	직접 제조	실리카 상의 60% 트리부티린 (Proviron) (Caldic, Belgium)
7	비보호된 부티레이트(나트륨 부티레이트)	Nutri-Ad®	100% 나트륨 부티레이트

실험 구성

19일, 20일 및 21일령(days of age) 동안, 평균 일일 사료 섭취량을 펜으로 측정하였다. 22일령의 수컷 및 암컷 닭을 전술한 테스트 사료 조성물 중 하나에 무작위로 할당하고, 22-27일 기간 동안 제한적인 사료 식이 (이전에 측정된 평균 섭취량의 95 %)를 하였다.

28 일령에 조류들을 희생시키고 결장을 수집하였다.

부티레이트 농도 측정

각 닭 결장의 장 함량 1g을 칭량하고 1mL 증류수로 희석하였다. 희석 후, 샘플을 균질화하고 20 분 동안 13.000rpm에서 원심 분리하고 HPLC-UV 분석을 위해 추출할 때까지 -20 ℃에서 저장 하였다. 추출 프로토콜 및 장비는 문헌 [De Baere et al. (Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 80 (2013) 107- 115)] 에 기술된 바와 같이 사용하였다. 테스트4번인, 폴리하이드록시부티레이트의 경우, 하이드록시부티레이트 농도를 측정하고 도 4에 나타내었다.

결과

결과는 처리 그룹당, 부티레이트 농도 밀리몰(mM)/ 장 함량(g)으로서 플롯하여 도 4에 나타내었다. 장 함량이 충분하지 않거나 추출에 실패한 경우 해당 측정에 대한 데이터는 포함하지 않았다.

결과는 CAB가 대조군 또는 다른 지연 방출 제제 또는 제품에 대해 측정된 부티레이트 농도보다 유의하게 결장내 부티레이트 농도를 증가시킬 수 있음을 분명히 보여준다.

실시예 3 : 맹장 (caeca)에서 감염 후 살모넬라 존재의 생체내 측정

살모넬라 엔테리티디스 (Salmonella Enteritidis)에 의해 감염된 동물의 장의 살모넬라 집락형성(colonization)를 감소시키는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 생체내 실험을 수행하였다. 본 발명에 따른 제품을 가금 사료에 첨가하고, 맹장에의 살모넬라 엔테리티디스의 존재를 측정하고, 이를 다른 지연 방출형 부티레이트 제제 또는 제품에서 얻은 결과와 비교하였다.

동물

이 시험에는 Ross 308 육계를 사용하였다. 1일된 병아리는 상업적 부화장에서 얻었다. 모든 처리군은 바닥에 깔짚이 깔려있는 분리된 케이지에 동일한 조건으로 수용하였다. 160 마리의 닭을 각각 20 마리의 닭이 포함된 8 개 그룹(대조군 포함)으로 나누었다. 4개의 테스트 사료 조성물을 두번씩 테스트하였다. 모든 병아리는 물과 사료에 자유롭게 접근할 수 있었다.

테스트 사료 조성물

하기 표에 나타낸 테스트 제품을 사료 kg 당 3g의 나트륨 부티레이트 농도로 시판 메쉬 육계 사료(Versele-Laga, Belgium)와 혼합하여 4개의 서로 다른 테스트 사료 조성물을 제조하였다. 그 후 태스트 사료를 펠릿화하여 (증기 없이) 선택적 사료 섭취를 방지하였다. 펠릿화 기술, 펠릿 크기 및 시판 육계 사료는 모든 테스트 제품에 대하여 동일하였다. 펠릿화 기술, 펠릿 크기 및 시판 육계 사료는 모든 테스트 제품에 대하여 동일하였다.

테스트	제품	공급자	제품사양
1	대조군 - 첨가없음	NA	NA
2	Adimix 30 Coated®	Nutri-Ad®	팜 지방(palm fat) 으로 코팅된 30% 나트륨 부티레이트
3	10% 전분 함유 왁스 매트릭스	직접 제조	Lunacera M® 결정질 매트릭스 내 30% 나트륨 부티레이트 및 전분
4	다당류 부티릴 에스테르:셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 (CAB)	Acros Organics®	50-54% 부티릴 함량 <4% 아세틸 함량

살모넬라 균주

가금류 농장에서 분리된 잘 특성화된 스트렙토마이신-내성 균주인, 살모넬라 엔테리티디스 균주 SE147 (Methner et al., 1995)을 본 실험에 사용하였다. Luria-Bertoni 배지 (LB, Sigma, St. Louis, MO)에서 6 시간 동안 균주를 성장시킨 후, 100 ㎍/mL의 스트렙토마이신(Sigma, St. Louis, MO)을 함유하는 자일로스 라이신 데옥시콜레이트 한천(XLD, Oxoid, Basingstoke, UK) 상에 박테리아 현탁액의 10배 희석액을 플레이팅함으로써 밀리그램 당 cfu의 수를 측정 하였다. 플레이트 계수 동안 박테리아 현탁액을 4 ℃에서 저장하고 PBS에 희석하여 원하는 감염 용량을 수득 하였다.

실험 구성

부화 후 17 일째에 모든 병아리에게 조류 당 10⁵ cfu의 살모넬라 엔테리티디스를 경구 접종 하였다. 감염 후 4 일째에 모든 조류를 안락사시키고 맹장(caecum) 샘플을 세균학적 분석을 위해 채취하였다. 이 실험은 겐트대학교 수의학부 윤리위원회의 승인을 받았다.

세균학적 분석

맹장 샘플을 vol의 완충된 펩톤 수 (BPW, Oxoid, Basingstoke, UK)에서 균질화하고, PBS에서 10 배 희석액을 제조하였다. 각 희석액에 대해, 100 ㎍/mL 스트렙토마이신을 함유하는 XLD 플레이트에 6 × 20 μL를 접종하였다. 37 ℃에서 밤새 인큐베이션한 후, 조직 그램 당 cfu의 수를 측정하였다. 직접 플레이팅 후 음성인 샘플을 완충된 펩톤 수 (BPW, Oxoid, Basingstoke, UK)에서 37 ℃에서 밤새 사전 농축 한 후, 이 현탁액 1mL를 brilliant green 테트라티오네이트 브로스 9mL에 첨가하여 모든 샘플을 농축시켰다 (Oxoid, Basingstoke, UK). 적정 후 살모넬라 음성이지만 농축 후 양성인 샘플은 1 × 10¹ cfu/g의 조직을 함유하는 것으로 가정하였다. 농축 후에도 여전히 음성 인 샘플은 0 cfu/g의 조직을 갖는 것으로 가정하였다.

결과

하기 표에 나타낸 바와 같이, CAB와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료의 투여는 다른 지연 방출 제제 또는 제품과 비교하여 맹장에서의 살모넬라 집락형성에 대해 유의적으로 개선된 결과를 제공한다.

*살모넬라* 존재	대조군	2	3	4
음성	0	0	0	0
농축후 양성	6	14	13	27
10² < x < 10³ cfu/g	12	8	7	4
10³ < x < 10⁴ cfu/g	6	14	5	8
> 10⁴ cfu/g	15	4	15	1

실시예 4 : 총배설강 면봉채취에서 감염 후 살모넬라 존재의 생체내 측정

살모넬라 엔테리티디스에 의해 감염된 동물의 살모넬라 분변 배출(fecal shedding)을 감소시키는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 생체내 실험을 수행하였다. 본 발명에 따른 제품을 가금 사료에 첨가하고, 총배설강 면봉채취에서 살모넬라 엔테리티디스의 존재를 측정하고, 이를 다른 지연 방출형 부티레이트 제제 또는 제품에서 얻은 결과와 비교하였다.

동물

이 시험에는 Ross 308 육계를 사용하였다. 1일된 병아리는 상업적 부화장에서 얻었다. 모든 처리군은 바닥에 깔짚이 깔려있는 분리된 케이지에 동일한 조건으로 수용하였다. 80 마리의 닭을 각각 20 마리의 닭이 포함된 4 개 그룹(대조군 포함)으로 나누었다. 하기에 열거된 4개의 테스트 사료 조성물을 두번씩 테스트하였다. 모든 병아리는 물과 사료에 자유롭게 접근할 수 있었다.

테스트 사료 조성물

살모넬라 균주

실험 구성

부화 후 17 일째에 모든 병아리에게 조류 당 10⁵ cfu의 살모넬라 엔테리티디스를 경구 접종 하였다. 감염 후 -1, 1 및 3 일에 세균학적 분석을 위해 총배설강 면봉채취를 하였다. 이 실험은 겐트대학교 수의학부 윤리위원회의 승인을 받았다.

세균학적 분석

총배설강 면봉을 100 ㎍/mL의 스트렙토마이신을 함유하는 XLD 플레이트 상에 플레이 팅하고 37 ℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 직접 플레이팅 후 음성인 샘플을 완충된 펩톤 수 (BPW, Oxoid, Basingstoke, UK)에서 37 ℃에서 밤새 사전 농축 한 후, 이 현탁액 1mL를 brilliant green 테트라티오네이트 브로스 9mL에 첨가하여 모든 샘플을 농축시켰다 (Oxoid, Basingstoke, UK). 이 현탁액을 다시 37 ℃에서 밤새 인큐베이션한 후, 100 ㎍/mL의 스트렙토마이신을 함유하는 XLD 상에 플레이팅하였다. 37 ℃에서 밤새 인큐베이션한 후, 총배설강 면봉 당 cfu의 수를 측정 하였다. 정 후 살모넬라 음성이지만 농축 후 양성인 샘플은 살모넬라 존재에 대해 양성으로 표시하였다. 농축 후에도 여전히 음성 인 샘플은 살모넬라 존재에 대해 음성으로 표시하였다.

결과

하기 표에 나타낸 바와 같이, CAB와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 포함하는 사료의 투여는 다른 지연 방출 제제 또는 제품과 비교하여 살모넬라의 분변 배출 에 대해 유의적으로 개선된 결과를 제공한다.

감염 후 일 (Days past infection)	살모넬라 존재	대조군	2	3	4
-1	음성	20	20	20	20
-1	양성	0	0	0	0
1	음성	5	14	17	16
1	양성	15	6	3	4
3	음성	5	14	13	17
3	양성	15	6	7	3

실시예 5: 생장 성능의 생체내 측정

차선적 농법 하에서 성장 성능에 영향을 미치는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 생체내 실험을 수행하였다. 본 발명에 따른 제품을 챌린징하는 채종박(rapeseed meal, RSM) 식이에 첨가하여, 성장 성능에 미치는 영향을 결정하고, 이를 다른 지연 방출형 부티레이트 제제 또는 제품에서 얻은 결과와 비교하였다.

실험 설계

실험은 완전한 무작위 블록 설계로 설계하였다. 처리 그룹은 3개의 지연 방출형 부티레이트 제제 또는 제품과, 2 개의 급여 수준 (급여상태기준(as fed basis)으로 0.25 또는 1g 부티레이트/kg 사료)을 갖는, 3 x 2 요인모형 플러스 대조군으로서 할당하였다. 각 처리 그룹을 6 회 반복하여 총 6 개의 블록을 생성하였다. 식이는 아래 표에 나타난 바와 같은 RSM-옥수수-밀 전기사료(starter), 중기사료(grower) 및 후기사료(finisher) 식이를 토대로 하였다. 실험용 전기사료(starter) 및 중기사료(grower) 식이는 기본 레시피로부터 유래하되 대두유 대신에 사료 첨가제를 첨가하였다.

	제품	공급자	제품사양
1	대조군 - 첨가없음	NA	NA
2	Adimix 30 Coated®	Nutri-Ad®	팜 지방(palm fat) 으로 코팅된 30% 나트륨 부티레이트
3	왁스 매트릭스	직접 제조	Lunacera M® 결정질 매트릭스 내 30% 나트륨 부티레이트 및 전분
4	다당류 부티릴 에스테르:셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 (CAB)	Acros Organics®	50-54% 부티릴 함량 <4% 아세틸 함량

표 8: 전기사료(starter)의 조성

표 9: 중기사료(grower)의 조성

표 10: 후기사료(finisher)의 조성

식이 kg 당 제공된 프리믹스: 비타민 A, 12.000 IU; 비타민 D3, 2.500 IU; 비타민 E, 50 mg; 비타민 B2, 7.5 mg; 비타민 B6, 3.5 mg; 비타민 B1, 2.0 mg; 비타민 K3, 1.5 mg; 비타민 B12, 20 μg; 콜린 클로라이드, 460 mg; 항산화제 (oxytrap PXN), 125 mg; 나이아신, 35 mg; 판토텐산, 12 mg; 비오틴, 0.2 mg; 엽산, 1 mg; Mn, 85 mg; Fe, 80 mg; Zn 60mg; Cu, 12 mg; I, 0.8mg; Se, 0.15 mg.

전기사료(starter) 식이는 d 0에서 d 21까지 공급되었고, 중기사료(grower) 식이는 d 22에서 d 35까지 공급되었고, 후기사료(finisher) 식이는 d 36에서 d 42에 도축될 때까지 공급되었다. 식이는 육계의 요구사항을 충족시키거나 초과하도록 제조하였고 Research Diet Services (Wijk bij Duurstede, 네덜란드)에서 생산하였다.

조류 및 실험절차

이 실험은 바헤닝언 대학교의 연구 농장인 Carus에서 수행하였다. 총 357의 수컷 일일령 육계(초기 BW 47g; Ross 308, Aviagen Group, 뉴브리지, 영국)를 상업적 부화장 (Morren Breeders B.V., Lunteren, Netherlands)에서 구입하였다. 도착하자마자, 조류를 개별적으로 무게를 재고 무게 카테고리로 분류하였다(스몰 < μ - 0.68 x σ; μ - 0.68 x σ < 미듐 < μ + 0.68 x σ; 라지 > μ + 0.68 x σ). 각 카테고리의 새들은 두 개의 기후-제어된 방의 42층 펜 중 하나에 무작위로 할당하였다. 각 펜에는 8 ~ 9 마리의 새가 들어 있었고, 치수는 1.85 x 1m (L x W)이며 횃대가 풍부하였다. 대팻밥을 침구 재료로 사용하였다. 주위 온도를 d 3까지 32 ℃에서 유지한 후 d 23에 22 ℃로 점차 감소시켰다. 23L : 1D 광주기를 d 3까지 적용한 후 16L : 8D로 변경하였다. 새들은 사료와 물에 자유롭게 접근할 수 있었다. 펜 사료 섭취량과 펜 체중을 d 21, 35 및 42에 기록하였다. 사망률을 매일 모니터링하고 죽은 새의 체중을 기록하였다.

결과

아래 표는 사료 요구율 (FCR), 평균 일일증체량 (ADG) 및 평균 일일사료섭취량 (ADFI) 및 사망률을 나타낸다. ADG 및 ADFI를 사용하여 펜 수준에서 FCR을 계산하였다. 결과는 또한 각각의 대조군에 대한 변화의 백분율로서 재계산하였다.

아래 표는이 실험에서 얻은 사망률, 평균 일일증체량 (ADG), 평균 일일음식섭취량 (ADFI) 및 사료 요구율 (FCR) 결과를 나타낸다. 데이터는 CAB와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 함유한 사료 보충물이 다른 지연 방출 부티레이트 제제 또는 제품에 비해 우수한 성장 성능 결과를 제공함을 보여준다. 본 발명에 따른 다당류 부티릴 에스테르는 후기사료(finisher) 기간 동안 부작용을 나타내지 않으면서 급여 기간 동안 FCR 및 사망률의 감소와 ADG 및 ADFI의 개선이라는 매우 바람직한 조합을 제공한다.

결과는 또한 전기사료(starter) 및 중기사료(grower) 단계에서, 다당류 부티릴 에스테르 (4-L vs. 4-H)의 포함을 증가시키면 (왁스 조성물 3-L vs. 3-H 에 대해서 관찰된 효과와는 대조적으로) 성능이 향상됨을 보여준다.

표 11: 식이요법이 전기사료(starter), 중기사료(grower) 및 후기사료(finisher) 기간 동안 성능 파라미터들에 미치는 영향

표 12: 급여 기간 및 총 실험 기간 동안 식이요법이 성능 파라미터에 미치는 영향.

표 13: 급여기간 (0-35 d) 동안 각각의 대조군에 대한 변화의 백분율로서 재계산된 성능 파라미터에 대한 식이요법의 효과

실시예 6 : 사료 요구율의 생체내 결정

차선적 농법 하에서 사료 요구율에 영향을 미치는 본 발명의 다당류 부티릴 에스테르의 능력을 평가하기 위해, 생체내 실험을 수행하였다. 본 발명에 따른 제품을 챌린징하는 채종박(rapeseed meal, RSM) 식이에 첨가하여, 사료 요구율에 대한 영향을 결정하고, 통계적으로 분석하고 다른 지연 방출 (하이드록시)부티레이트 제제 또는 제품에서 얻은 결과와 비교하였다.

실험 설계

실험은 완전한 무작위 블록 설계로 설계하였다. 처리 그룹은 10 조류/펜 x 8 복제(replicate) x 4 처리군 : 대조군 및 3 개의 지연 방출 부티레이트 제제 또는 제품 (1 g (하이드록시) 부티레이트/kg 사료)로 할당하였다. 식이는 아래 표에 나타난 바와 같은 RSM-옥수수-밀 전기사료(starter) 및 중기사료(grower) 식이를 토대로 하였다. 실험용 전기사료(starter) 및 중기사료(grower) 식이는 기본 레시피로부터 유래하되 대두유 대신에 사료 첨가제를 첨가하였다.

	제품	공급자	제품사양
1	대조군 - 첨가없음	NA	NA
2	Adimix 30 Coated®	Nutri-Ad®	팜 지방(palm fat) 으로 코팅된 30% 나트륨 부티레이트
3	폴리하이드록시부티레이트(PHB)	Nutri-Ad®	0.10% 부티레이트 바이오매스
4	다당류 부티릴 에스테르:셀룰로오스 아세테이트 부티레이트 (CAB)	Fisher-Scientific, Waltham, USA	50-54% 부티릴 함량 <4% 아세틸 함량

표 15: 전기사료(starter)의 조성

표 16: 중기사료(grower)의 조성

식이 kg 당 제공된 프리믹스 : 비타민 A, 12.000 IU; 비타민 D3, 2.500 IU; 비타민 E, 50 mg; 비타민 B2, 7.5 mg; 비타민 B6, 3.5 mg; 비타민 B1, 2.0 mg; 비타민 K3, 1.5 mg; 비타민 B12, 20 μg; 콜린 클로라이드, 460 mg; 항산화제 (oxytrap PXN), 125 mg; 니아신, 35 mg; 판토텐산, 12 mg; 비오틴, 0.2 mg; 엽산, 1 mg; Mn, 85 mg; Fe, 80 mg; Zn 60mg; Cu, 12 mg; I, 0.8mg; Se, 0.15 mg.

전기사료(starter) 식이는 d 0에서 d 21까지 공급하였고, 중기사료(grower) 식이는 d 22에서 d 35까지 공급하였다. 식이는 육계의 요구사항을 충족시키거나 초과하도록 제조하였고 Research Diet Services (Wijk bij Duurstede, 네덜란드)에서 생산하였다.

조류 및 실험 절차

실험은 ILVO-DIER의 실험 가금류 하우스12 에서 수행하였다(Burg, Merelbeke, BE). 총 320 의 수컷 일일령 육계 (Ross 308, Aviagen Group, 뉴브리지, 영국) 를 상업적 부화장 (Belgabroed NV, Merksplas, BE)에서 구입하였다. 도착하자마자, 새들을 기후-제어된 단일 방의 32층 펜 중 하나에 무작위로 할당하였다. 각 펜에는 10 마리의 새가 들어 있었고 치수는 2.1 x 1m이었다. 주위 온도를 d 7까지 29-30 ℃에서 유지한 후 주당 2 ℃만큼 낮추었다. 23L : 1D 광주기를 d 7까지 적용한 후 16L : 8D로 변경하였다. 새들은 사료와 물에 자유롭게 접근 할 수 있었다. 개인 및 펜 체중, 펜 사료 섭취량은 매주 기록하였다.

통계 분석

성능 파라미터는 다음 모델을 사용하여 SAS의 PROC GLM (버전 9.3, SAS Institute Inc., Cary, NC)을 사용하여 분석하였다.

상기 식에서, Y_ijk는 j 번째 주 (j = 1-5) 동안의 사료 i 번째 식이(i = CTR, FCB, PHB, CAB)의 k 번째 복제 (k = 1 내지 8)의 관찰된 반응이고, D_i는 i 번째 고정 식이 효과(fixed diet effect)이고, B_k는 k 번째 고정 블록 효과(fixed block effect)이고, W_j는 측정 기간의 j 번째 임의 효과(random effect)이고, AD_ij는 식이와 측정 기간 사이의 교호작용 효과(interaction effect)이고, ε_ijk는 j 번째 측정 기간에서 i 번째 식이의 k 번째 복제 사료의 잔차항(residual error term)이다. 유의한 식이 효과가 검출되었을 때, Tukey post-hoc 테스트를 사용하여 평균을 분리하였다. 식이와 측정 기간 사이에 유의한 상호 작용이 검출되었을 때, Tukey post-hoc 테스트를 사용하여 평균을 분리하였고, 작용항(interaction term)을 간단한 효과 시험으로 주당 분할하였다.

결과

0-35 일 급여기간에 걸친 사료 요구율 (FCR)에 대한 식이 부티레이트 급여의 효과를 하기 표에 나타내었다.

데이터는 CAB와 같은 다당류 부티릴 에스테르를 사용한 사료 급여가 다른 지연 방출 부티레이트 제제 또는 제품과 비교하여 우수한 사료 요구율 결과를 제공함을 보여준다. CAB에 의한 사료 요구율의 개선은 통계적으로 유의했다.

표 17: 식이 부티레이트 급여가 전체 0-35 일 기간 동안 성장 성능에 미치는 영향

Claims

아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르를 포함하는 사료등급(feed grade) 조성물로서, 상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
단당류 단위당 부티릴기의 평균 개수가 0.1-4, 바람직하게는 1-3.5, 바람직하게는 1.75-3.25, 바람직하게는 2.25-3, 바람직하게는 2.5-2.95의 범위 내인, 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 부티릴 에스테르의 총 중량에 대하여 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상, 바람직하게는 4 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 하는, 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
0.1-80 중량%, 바람직하게는 0.5-60 중량%, 바람직하게는 1-50 중량%, 바람직하게는 2-40 중량%, 바람직하게는 3-30 중량%, 바람직하게는 4-20 중량%, 바람직하게는 5-15 중량%의 셀룰로오스 부티릴 에스테르 및 하나 이상의 다른 사료등급 원료를 포함하는 사료 원료인, 조성물.
제4항에 있어서,
상기 다른 원료가 기술적인 첨가제(technological additive), 감각 첨가제(sensory additive), 영양 첨가제(nutritional additive), 축산 첨가제(zootechnical additive), 항콕시듐제(coccidiostat) 및 항히스토모나스제(histomonostat)의 군으로부터 선택되는, 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
0.0001-10 중량%의 셀룰로오스 부티릴 에스테르, 바람직하게는 0.001-5 중량%, 바람직하게는 0.005-1 중량%, 바람직하게는 0.0075-0.5 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 0.1 중량%의 셀룰로오스 부티릴 에스테르 및 하나 이상의 동물 사료 성분을 포함하는 동물 사료 조성물인, 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
분말 형태인 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
압축, 과립화 또는 펠릿화 형태인 조성물.
제8항에 있어서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르가 조성물을 구성하는 일차 입자(primary particle) 전체에 균질하게 분포된, 조성물.
예방 또는 치료적 처치 방법에 사용하기 위한, 아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르로서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 셀룰로오스 부티릴 에스테르.
병원체 감염, 바람직하게는 박테리아, 아이메리아(eimeria), 바이러스 및 진균 중 하나 이상, 바람직하게는 박테리아, 바람직하게는 클로스트리디움 아세토부틸리쿰(Clostridium acetobutylicum), 에스케리키아 콜라이 (Escherichia coli), 스트렙토코커스 크레모리스 (Streptococcus cremoris), 락토코커스 락티스 (Lactococcus lactis), 락토코커스 크레모리스 (Lactococcus cremoris), 클로스트리디움 퍼프린젠스 (Clostridium perfringens), 캄필로박터 제주니 (Campylobacter jejuni), 캄필로박터 콜라이 (Campylobacter coli), 로소니아 인트라셀룰라리스 (Lawsonia intracellullaris), 브라키스피라 하이오디센테리에 (Brachyspira hyodysenteriae), 엔테로코커스·세코룸 Enterococcus caecorum), 스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis) 및 살모넬라 엔테리티디스 (Salmonella enteritidis) 중 하나 이상에 의한 병원체 감염의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르로서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 셀룰로오스 부티릴 에스테르.
장내 세균총의 개선에 사용하기 위한, 아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르로서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 셀룰로오스 부티릴 에스테르.
제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
단당류 단위당 부티릴기의 평균 개수가 0.1-4, 바람직하게는 1-3.5, 바람직하게는 1.75-3.25, 바람직하게는 2.25-3, 바람직하게는 2.5-2.95의 범위 내인, 조성물.
제10항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
다당류 부티릴 에스테르는 다당류의 부티릴 에스테르의 총 중량에 대하여 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상, 바람직하게는 4 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 하는, 조성물.
아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르를 투여하는 단계를 포함하는,
- 사료 요구율(feed conversion ratio) 감소,
- 체중(life weight) 증가, 또는
- 평균 일일증체량(average daily gain) 증가
를 위한 비-치료적 방법으로서,
상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 비-치료적 방법.
제15항에 있어서,
단당류 단위당 부티릴기의 평균 개수가 0.1-4, 바람직하게는 1-3.5, 바람직하게는 1.75-3.25, 바람직하게는 2.25-3, 바람직하게는 2.5-2.95의 범위 내인, 비-치료적 방법.
제15항 또는 제16항에 있어서,
다당류 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 부티릴 에스테르의 총 중량에 대하여 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상, 바람직하게는 4 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 하는, 비-치료적 방법.
제10항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
처치 대상 동물이 가금 종인, 조성물.
제15항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
처치 대상 동물이 가금 종인, 비-치료적 방법.
아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르로서, 상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 셀룰로오스 부티릴 에스테르, 또는
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 조성물의,
동물 사료로의 용도.
제20항에 있어서,
단당류 단위당 부티릴기의 평균 개수가 0.1-4, 바람직하게는 1-3.5, 바람직하게는 1.75-3.25, 바람직하게는 2.25-3, 바람직하게는 2.5-2.95의 범위 내인, 용도.
제20항 또는 제21항에 있어서,
다당류 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 부티릴 에스테르의 총 중량에 대하여 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상, 바람직하게는 4 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 하는, 용도.
동물 사료 조성물을 제조하는 방법으로서, 상기 방법은:
- 제1 동물 사료 성분을 제공하는 단계;
- 아세틸 에스테르기를 추가로 포함하는 셀룰로오스 부티릴 에스테르로서, 상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르는 2000-1000000 g/mol, 바람직하게는 5000-500000 g/mol, 바람직하게는 7000-250000 g/mol, 바람직하게는 10000-100000 g/mol, 바람직하게는 12000-50000 g/mol, 바람직하게는 13000-25000 g/mol, 가장 바람직하게는 15000-17000 g/mol의 수 평균 몰 질량을 특징으로 하는, 셀룰로오스 부티릴 에스테르를 제공하는 단계, 및
- 상기 제1 동물 사료 성분을 상기 셀룰로오스 부티릴 에스테르와 균질한 블렌드로 혼합하는 단계를 포함하는, 방법.
제23항에 있어서,
단당류 단위당 부티릴기의 평균 개수가 0.1-4, 바람직하게는 1-3.5, 바람직하게는 1.75-3.25, 바람직하게는 2.25-3, 바람직하게는 2.5-2.95의 범위 내인, 방법.
제23항 또는 제24항에 있어서,
셀룰로오스 부티릴 에스테르는 셀룰로오스 부티릴 에스테르의 총 중량에 대하여 1 중량% 이상, 바람직하게는 2 중량% 이상, 바람직하게는 3 중량% 이상, 바람직하게는 4 중량% 이상의 아세틸 함량을 특징으로 하는, 방법.