KR20200093611A - 안구 섬유증의 치료를 위한 miR29 모방체 - Google Patents
안구 섬유증의 치료를 위한 miR29 모방체 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20200093611A KR20200093611A KR1020207018475A KR20207018475A KR20200093611A KR 20200093611 A KR20200093611 A KR 20200093611A KR 1020207018475 A KR1020207018475 A KR 1020207018475A KR 20207018475 A KR20207018475 A KR 20207018475A KR 20200093611 A KR20200093611 A KR 20200093611A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- mir
- strand
- modified
- base
- sequence
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
- C12N2310/141—MicroRNAs, miRNAs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
안구 섬유증과 관련된 안구 질환 또는 장애 및 안구 섬유증 상태를 치료하는 데 사용하기 위한 miR-29의 이중 가닥, 화학적으로 변형된 올리고뉴클레오타이드 모방체가 본 발명에 제공된다.
Description
본 발명은 안구 섬유증 상태의 치료를 위한 이중 가닥 RNA miR-29 모방체 화합물(모방체)에 관한 것이다.
마이크로RNA(miRNA)는 작고 알려진 서열을 포함한다는 점에서 치료 중재 단계로서 여러 이점을 가진다. 단일 miRNA가 생물학적 경로 내에서 여러 표적 mRNA를 조절할 수 있기 때문에, miRNA의 변조는 전체 유전자 네트워크에 영향을 미치고 복잡한 질환 표현형을 변형시킬 수 있다(van Rooij & Olson, 2012).
눈의 항상성은 정상적인 혈관 구조 및 세포외 매트릭스의 존재에 의존한다. 이러한 항상성이, 예를 들어 감염, 염증 또는 대사 질환에 의해 방해되면, 시각 기능이 손상된다. 이러한 상태의 최종 결과는 종종 섬유증이다. 섬유증에 의해 야기된 눈에서 고도로 정렬된 조직 구조의 붕괴는 시각적 축의 기계적 파괴 및/또는 생물학적 오작동으로 이어질 수 있다(Friedlander M., Journal of Clinical Investigation. 2007;117(3):576-586).
안구 섬유증 상태를 효과적으로 치료할 수 있는 개입에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 존재한다. 이러한 요구를 해결하는 방법 및 조성물이 본 발명에 제공된다.
안구 섬유증 상태의 치료를 위한 이중 가닥 RNA miR-29 모방체 화합물(모방체)이 본 발명에 제공된다.
제 1 양태에서, 본 발명은 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 대상의 안구 섬유증의 치료 방법을 제공하며, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가진다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증, 또는 섬유주대의 섬유증을 포함한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 안구 질환 또는 장애로부터 발생된다.
제 2 양태에서, 본 발명은 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하여, 대상에서 안구 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가진다. 일부 실시태양에서, 안구 질환 또는 장애는 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
일부 실시태양에서, 안구 질환 또는 장애는 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하는 그룹으로부터 선택된 안구 섬유증을 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 이온삼투법, 결막하 주사, 익상편내 주사, 섬유주 수포의 부위에서의 주사, 건하 주사, 유리체내 주사, 전방내 또는 국소를 통해 투여된다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 증식성 유리체망막병증을 포함한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 섬유증을 포함한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 항-VEGF 치료와 관련된 망막 섬유증을 포함한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 각막 혼탁 또는 각막 흉터 형성을 포함한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 각막 화상으로부터 발생한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 익상편으로부터 발생한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 푹스 내피 각막 이영양증(FECD)으로부터 발생한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 녹내장으로부터 발생한다.
일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 섬유주 수포를 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 각막에 국소적으로 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 매일 1회, 매일 2회, 매일 3회, 또는 매일 4회 각막에 국소적으로 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 1주, 2주, 3주, 4주 또는 28일 동안 주기적으로 국소적으로 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 매주 1회 유리체내 주사를 통해 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 1개월 동안 주기적으로 유리체내 주사를 통해 투여된다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물이 표 2에 제시되어 있다.
일부 실시태양에서, COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A3, COL5A2, COL11A1, FN1, MMP2, CTGF, TGFB2 및/또는 TGFB3의 발현이 감소된다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 또는 31-34로부터 선택된 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 1, 8-10, 13-17 또는 28-30에서 선택된 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥을 포함하고, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 및 31-34로부터 선택된 서열을 포함하고, 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥은 제 1 가닥과 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하며, 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가진다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며, 여기서 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1, 8-10, 13-17 및 28-30으로부터 선택된 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1의 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 15의 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 성숙한 miR-29a 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물이 표 1에 제시되어 있다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 6, 7 또는 27의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 3-5 또는 11로부터 선택된 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 성숙한 miR-29c 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물이 표 3에 제시되어 있다.
일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 25, 26 또는 35의 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 22-24 또는 12로부터 선택된 서열을 포함한다.
일부 실시태양에서, 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물은 약학적 조성물에 포함된다.
일부 실시태양에서, 대상은 인간이다.
일부 실시태양에서, 대상은 당뇨병을 앓고 있다.
일부 실시태양에서, 대상체는 당뇨병성 망막병증을 앓고 있다.
일부 실시태양에서, 대상은 연령 관련 황반 변성(AMD)을 앓고 있다.
일부 실시태양에서, 대상은 습식 연령 관련 황반 변성(습식 AMD)을 앓고 있다.
일부 실시태양에서, 대상은 항-VEGF 치료제를 투여 받는다.
본 발명의 내용 중에 포함되어 있다.
도 1a는 NaOH의 투여에 의해 생성된 각막 화상을 나타낸다. 도 1b는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 눈으로 흡수되는 것을 나타낸다. 도 1c는 DAPI 핵 염색을 나타낸다.
도 2a 및 2b는 눈에서 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 생체 분포 및 약동학(PK)을 눈에 나타낸다.
도 3a, 도 3b, 도 3c 및 도 3d는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 시점에 걸쳐 각막 화상 후 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다.
도 4a 및 도 4b는 각막 손상 후 4일 및 14일 사이에 채취된 각막의 조직병리학에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 5a 및 도 5b는 각막 손상 후 α-평활근 액틴(α-SMA)의 발현에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 6a 및 도 6b는 각막 흉터 및 혼탁에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 7a, 도 7b, 도 7c 및 도 7d는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 눈으로의 흡수를 나타낸다.
도 8a 및 도 8b는 눈에서 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 생체 분포 및 약동학(PK)을 나타낸다.
도 9a는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 증식성 유리체망막병증(PVR)에서 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다. 도 9b는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 당뇨병성 망막병증에서 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다.
도 10a, 도 10b 및 도 10c는 유도된 다능성 유래 망막 색소상피(iPS-RPE) 및 1차 인간 망막 색소상피(hRPE) 세포에서 시험관내 표적 유전자 발현에 대한 예시적인 miR-29b 모방체의 효과를 나타낸다.
도 2a 및 2b는 눈에서 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 생체 분포 및 약동학(PK)을 눈에 나타낸다.
도 3a, 도 3b, 도 3c 및 도 3d는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 시점에 걸쳐 각막 화상 후 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다.
도 4a 및 도 4b는 각막 손상 후 4일 및 14일 사이에 채취된 각막의 조직병리학에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 5a 및 도 5b는 각막 손상 후 α-평활근 액틴(α-SMA)의 발현에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 6a 및 도 6b는 각막 흉터 및 혼탁에 대한 miR-29b 모방체 투여의 효과를 나타낸다.
도 7a, 도 7b, 도 7c 및 도 7d는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 눈으로의 흡수를 나타낸다.
도 8a 및 도 8b는 눈에서 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체의 생체 분포 및 약동학(PK)을 나타낸다.
도 9a는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 증식성 유리체망막병증(PVR)에서 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다. 도 9b는 본 발명의 예시적인 miR-29b 모방체가 당뇨병성 망막병증에서 생체내 표적 유전자 발현을 감소시킨다는 것을 나타낸다.
도 10a, 도 10b 및 도 10c는 유도된 다능성 유래 망막 색소상피(iPS-RPE) 및 1차 인간 망막 색소상피(hRPE) 세포에서 시험관내 표적 유전자 발현에 대한 예시적인 miR-29b 모방체의 효과를 나타낸다.
안구 섬유증 상태, 예를 들어 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증, 또는 섬유주대의 섬유증의 치료를 위한 이중 가닥 RNA miR-29 모방체 화합물(모방체)이 본 발명에 제공된다.
마이크로RNA 모방체 화합물
본 발명에 따른 마이크로RNA 모방체 화합물은 제 1 가닥 및 제 2 가닥을 포함하며, 제 1 가닥은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 실질적으로 제 1 가닥에 상보적이고 적어도 하나의 변형 뉴클레오티드를 갖는다. 본 발명 전체에서, "마이크로RNA 모방체 화합물"이라는 용어는 "promiR-29", "miR-29 효현제", "마이크로RNA 효현제", "마이크로RNA 모방체", "miRNA 모방체" 또는 "miR-29 모방체"라는 용어와 상호 교환하여 사용될 수 있고; "제 1 가닥"이라는 용어는 "안티센스 가닥" 또는 "가이드 가닥"이라는 용어와 상호 교환하여 사용될 수 있고; "제 2 가닥"이라는 용어는 "센스 가닥" 또는 "패신저 가닥"이라는 용어와 상호 교환하여 사용될 수 있다.
일부 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체 화합물의 제 1 가닥은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c의 서열을 포함하는 약 23 내지 약 26개 뉴클레오티드를 포함하고 제 2 가닥은 제 1 가닥에 부분적으로, 실질적으로 또는 완전히 상보적인 서열을 포함하는 약 22 내지 약 23개 뉴클레오티드를 포함한다. 다양한 실시태양에서, 제 1 가닥은 약 23, 24, 25 또는 26개 뉴클레오티드를 포함할 수 있고 제 2 가닥은 약 22 또는 23개 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
마이크로RNA 모방체 화합물의 제 1 및 제 2 가닥을 형성하는 뉴클레오티드는 리보뉴클레오티드, 데옥시리보뉴클레오티드, 변형 뉴클레오티드 및 이들의 조합을 포함할 수 있다. 특정 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체 화합물의 제 1 가닥 및 제 2 가닥은 리보뉴클레오티드 및/또는 변형 리보뉴클레오티드를 포함한다. "변형 뉴클레오티드"라는 용어는 핵염기 및/또는 당 모이어티가 비 변형 뉴클레오티드에 대한 변형된 뉴클레오티드를 의미한다.
특정 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체 화합물은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열의 전부 또는 일부와 동일한 서열을 갖는 제 1 가닥 또는 안티센스 가닥 및 서열이 제 1 가닥의 서열에 대해 약 70% 내지 약 100% 상보적인 제 2 가닥 또는 센스 가닥을 갖는다. 일부 실시태양에서, miRNA 모방체 화합물의 제 1 가닥은 성숙한 자연 발생 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열의 전체 서열에 대해 그 사이의 모든 정수를 포함하여 적어도 약 75, 80, 85, 90, 95 또는 100% 동일하다. 특정 실시태양에서, 제 1 가닥은 생쥐, 인간 또는 쥐 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열과 같은 성숙한 자연 발생 miRNA의 서열과 약 또는 적어도 약 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100% 동일하다. 선택적으로, 제 1 가닥은 당 업계에 주지된 서열 정렬 알고리즘 및 방법과 비교하여 성숙한 자연 발생 miRNA와 공통으로 20, 21, 22 또는 23개 뉴클레오티드 위치를 포함할 수 있다.
제 1 가닥의 서열은 제 1 가닥이 자연 발생 뉴클레오티드 대신에 변형 뉴클레오티드를 포함하는 경우에도 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c의 서열과 동일하다고 간주된다고 이해된다. 예를 들어, 성숙한 자연 발생 miRNA 서열이 특정 위치에서 시티딘 뉴클레오티드를 포함하는 경우, 모방체 화합물의 제 1 가닥은 상응하는 위치에, 2'-플루오로-시티딘과 같은 변형 시티딘 뉴클레오티드를 포함할 수 있고, 또는 성숙한 자연 발생 miRNA 서열이 특정 위치에서 우리딘 뉴클레오티드를 포함하는 경우, 모방체 화합물의 제 1 가닥의 miRNA 영역은 상응하는 위치에 2'- 플루오로-우리딘, 2'-O-메틸-우리딘, 5-플루오로우라실, 또는 4-티오우라실과 같은 변형 우리딘 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 따라서, 변형 뉴클레오티드가 성숙 자연 발생 miRNA 서열에 존재하는 뉴클레오티드와 동일한 염기쌍 형성 능력을 갖는 한, 제 1 가닥의 서열은 성숙한 자연 발생 miRNA 서열과 동일하다고 간주된다. 일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 5'-말단 잔기의 변형을 포함할 수 있다. 예를 들어, 제 1 가닥은 5'-말단 모노포스페이트를 가질 수 있다. 일부 다른 실시태양에서, 제 1 가닥은 5'-말단 모노포스페이트를 함유하지 않는다.
일부 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체의 제 2 가닥은 제 1 가닥의 서열에 부분적으로 상보적이다. 예를 들어, 제 2 가닥의 서열은 제 1 가닥의 서열에 그 사이의 모든 값을 포함하여 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상보적이다. 일부 다른 실시태양에서, 제 2 가닥은 제 1 가닥의 서열에 실질적으로 상보적이다. 예를 들어, 제 2 가닥은 제 1 가닥의 서열에 그 사이의 모든 값을 포함하여 적어도 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 상보적이다. 또 다른 일부 실시태양에서, 제 2 가닥의 서열은 제 1 가닥에 완전히 상보적일 수 있다. 특정 실시태양에서, 제 2 가닥의 상보적인 영역의 약 19, 20, 21, 22 또는 23개 뉴클레오티드는 제 1 가닥에 상보적일 수 있다.
제 2 가닥의 서열은 제 2 가닥이 자연 발생 뉴클레오티드 대신에 변형 뉴클레오티드를 포함하는 경우에도 제 1 가닥에 상보적인 것으로 간주된다. 예를 들어, 제 1 가닥 서열이 특정 위치에 구아노신 뉴클레오티드를 포함하는 경우, 제 2 가닥은 상응하는 위치에 2'-O-메틸-시티딘과 같은 변형 시티딘 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
일부 실시태양에서, 제 2 가닥은 제 1 가닥에 대해 약 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 개의 미스매치를 포함한다. 즉, 제 1 가닥과 제 2 가닥 사이의 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개까지의 뉴클레오티드는 상보적이 아닐 수 있다. 일부 실시태양에서, 미스매치는 연속적이지 않고 제 2 가닥 전체에 분포된다. 다른 실시태양에서, 미스매치는 연속적이고 돌출부를 생성할 수 있다. 한 실시태양에서, 제 2 가닥은 제 1 가닥에 대해 3개의 미스매치를 함유한다. 특정 실시태양에서, miR-29a 모방체 또는 miR-29c 모방체의 제 2 가닥은 제 1 가닥에 대해 (제 2 가닥의) 3' 말단으로부터 위치 4, 13 및/또는 16에 미스매치를 함유한다. 일부 실시태양에서, miR-29b 모방체의 제 2 가닥은 제 1 가닥에 대해 (제 2 가닥의) 3' 말단으로부터 위치 4, 13 및/또는 16에 미스매치를 함유한다. 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체의 제 2 가닥은 제 1 가닥에 대해 (제 2 가닥의) 3' 말단으로부터 위치 4, 9, 10, 11, 13 및/또는 16에 미스매치를 함유한다.
일부 실시태양에서, 모방체 화합물의 제 1 및/또는 제 2 가닥은 가닥의 5' 또는 3' 말단에 오버행을 포함할 수 있다. 특정 실시태양에서, 제 1 가닥은 3' 오버행, 즉 제 2 가닥에 대해 이중 가닥 영역을 넘어 연장되는 단일 가닥 영역을 포함한다. 제 1 가닥의 3' 오버행은 약 1개 뉴클레오티드 내지 약 4개 뉴클레오티드의 범위일 수 있다. 특정 실시태양에서, 제 1 가닥의 3' 오버행은 1 또는 2개의 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 일부 실시태양에서, 제 1 가닥에서 3' 오버행을 포함하는 뉴클레오티드는 포스포로티오에이트 결합에 의해 연결된다. 제 1 가닥에 3' 오버행을 포함하는 뉴클레오티드는 리보뉴클레오티드, 데옥시리보뉴클레오티드, 변형 뉴클레오티드 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 특정 실시태양에서, 제 1 가닥에서 3' 오버행은 2개의 리보뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시태양에서, 제 1 가닥의 3' 오버행은 포스포로티오에이트 결합을 통해 연결된 2개의 우리딘 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시태양에서, 제 1 가닥은 오버행을 함유하지 않을 수 있다.
일부 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체의 제 2/센스 가닥의 뉴클레오티드는 포스포다이에스터 결합에 의해 연결되고 제 1/안티센스 가닥의 뉴클레오티드는 포스포로티오에이트 결합을 통해 서로 연결되는 3' 말단에서 마지막 3개 뉴클레오티드를 제외하고 포스포다이에스터 결합에 의해 연결된다.
다양한 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체는 변형 뉴클레오티드를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시태양에서, 모방체의 제 1 가닥은 하나 이상의 2'-플루오로 뉴클레오티드를 포함한다. 다른 실시태양에서, 제 1 가닥은 어떠한 변형 뉴클레오티드를 포함하지 않을 수 있다. 일부 실시태양에서, 제 2 가닥은 하나 이상의 2'-O-메틸 변형 뉴클레오티드를 포함한다.
다양한 실시태양에서, 본 발명에 따른 miR-29 모방체는 아래 표에 열거된 제 1 및 제 2 가닥을 포함한다. 변형의 정의는 표 4에 제공되어 있다. 이런 miR-29 모방체는 국제 공개 공보 WO/2016/040373에 이미 기술되었고; 따라서, 본 출원은 본 발명에 전체로 2016년 3월 17일자로 공개된 몽고메리 등의 국제 공개 공보 WO/2016/040373을 참조로 포함한다.
| 변형 서열 | SEQ ID NO. |
| 제 2 /센스/ 패신저 가닥 | |
| 5'-mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rG.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA.rU.rU- 3' | 3 |
| 5'-mU.mA.rA.mC.mC.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rG.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA-3' | 4 |
| 5'-mU.mA.rA.mC.mC.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rG.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.chol6-3' | 5 |
| 5'-mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rG.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rAs.rUs.rUs.chol6-3' | 11 |
| 5'- mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rG.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA-3' | 37 |
| 제 1 / 안티센스 /가이드 가닥 | |
| 5'-p.rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rC.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rG.rG.rU.rU.rA.rU.rU-3' | 6 |
| 5'-p.fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fC.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rG.rG.fU.fU.rAs.rUs.rU-3' | 7 |
| 5'-fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fC.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rG.rG.fU.fU.rAs.rUs.rU- 3' | 27 |
| 5'- rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rC.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rG.rG.rU.rU.rA.rU.rU-3' | 38 |
| 변형 서열 | SEQ ID NO. |
| 제 2 /센스/ 패신저 가닥 | |
| 5'-mA.mA.rC.rA.rC.rU.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA.rU.rU- 3' | 8 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.rA.mU.mU.mU.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.rG.mC.mU.rA.chol6-3' | 9 |
| 5'-mA.mA.rC.rA.rC.rU.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rAs.rUs.rUs.chol6-3' | 10 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rG.rG.rG.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA-3' | 13 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rG.rG.rG.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.chol6-3' | 14 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.chol6-3' | 1 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.dT.dT.chol6-3' | 15 |
| 5'-C6Chol.dT.dT.mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA-3' | 16 |
| 5'-mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.chol9-3' | 17 |
| 5'- rA.mA.rC.mA.rC.mU.rG.mA.rU.mU.rU.mC.rA.mA.rA.mU.rG.mG.rU.mG.rC.mU.rA.chol6-3' | 28 |
| 5'- rA.mA.rC.mA.rC.mU.rG.mA.rU.mU.rU.mC.rA.mA.rA.mU.rG.mG.rU.mG.rC.mU.rAs.rUs.rU.chol6-3' | 29 |
| 5'- mA.mA.mC.rA.mC.mU.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.cholTEG- 3' | 30 |
| 5'- mA.mA.rC.rA.rC.rU.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA-3' | 39 |
| 제 1 / 안티센스 /가이드 가닥 | |
| 5'-p.rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rU.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rA.rG.rU.rG.rU.rU.rU.rU- 3' | 18 |
| 5'-p.fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fU.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rA.rG.fU.rG.fU.fUs.rUs.rU-3' | 2 |
| 5'-fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fU.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rA.rG.fU.rG.fU.fUs.rUs.rU-3' | 19 |
| 5'-p.fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fC.fC.fC.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rA.rG.fU.rG.fU.fUs.rUs.rU-3' | 20 |
| 5'-rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rU.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rA.rG.rU.rG.rU.rU.rU.rU-3' | 21 |
| 5'- mU.rA.mG.rC.mA.rC.mC.rA.mU.rU.mU.rG.mA.rA.mA.rU.mC.rA.mG.rU.mG.rU.mU- 3' | 31 |
| 5' mU.rA.mG.rC.mA.rC.mC.rA.mU.rU.mU.rG.mA.rA.mA.rU.mC.rA.mG.rU.mG.rU.mUs.rUs.rU- 3' | 32 |
| 5'- mU.rA.rG.mC.rA.mC.mC.rA.mU.mU.mU.rG.rA.rA.rA.mU.mC.rA.rG.mU.rG.mU.mUs.rUs.rU- 3' | 33 |
| 5'- fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fU.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rA.rG.fU.rG.fU.fU- 3' | 34 |
| 5'- rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rU.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rA.rG.rU.rG.rU.rU.rU.rU-3' | 40 |
| 변형 서열 | SEQ ID NO. |
| 제 2 /센스/ 패신저 가닥 | |
| 5'-mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA.rU.rU-3' | 22 |
| 5'-mU.mA.rA.mC.mC.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA-3' | 23 |
| 5'-mU.mA.rA.mC.mC.rG.mU.mU.mU.rA.mC.rA.rA.rA.mU.rG.rG.mU.mC.mC.mU.rA.chol6-3' | 24 |
| 5'-mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rAs.rUs.rUs.chol6-3' | 12 |
| 5'- mU.mA.rA.rC.rC.rG.rA.rU.rU.rU.rC.rA.rA.rA.rU.rG.rG.rU.rG.rC.rU.rA-3' | 41 |
| 제 1 / 안티센스 /가이드 가닥 | |
| 5'-p.rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rU.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rG.rG.rU.rU.rA.rU.rU-3' | 25 |
| 5'-p.fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fU.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rG.rG.fU.fU.rAs.rUs.rU-3' | 26 |
| 5'-fU.rA.rG.fC.rA.fC.fC.rA.fU.fU.fU.rG.rA.rA.rA.fU.fC.rG.rG.fU.fU.rAs.rUs.rU- 3' | 35 |
| 5'- rU.rA.rG.rC.rA.rC.rC.rA.rU.rU.rU.rG.rA.rA.rA.rU.rC.rG.rG.rU.rU.rA.rU.rU-3' | 42 |
| 뉴클레오티드 단위 또는 변형 | 약어 | 뉴클레오티드 단위 또는 변형 | 약어 |
| 리보 A | rA | 리보 A P=S | rAs |
| 리보 G | rG | 리보 G P=S | rGs |
| 리보 C | rC | 리보 C P=S | rCs |
| 리보 U | rU | 리보 U P=S | rUs |
| O-메틸 A | mA | O-메틸 A P=S | mAs |
| O-메틸 G | mG | O-메틸 G P=S | mGs |
| O-메틸 C | mC | O-메틸 C P=S | mCs |
| O-메틸 U | mU | O-메틸 U P=S | mUs |
| 플루오로 C | fC | 플루오로 C P=S | fCs |
| 플루오로 U | fU | 플루오로 U P=S | fUs |
| 데옥시 A | dA | 데옥시 A P=S | dAs |
| 데옥시 G | dG | 데옥시 G P=S | dGs |
| 데옥시 C | dC | 데옥시 C P=S | dCs |
| 데옥시 T | dT | 데옥시 T P=S | dTs |
| 모노포스페이트 | p | ||
| 6개 탄소 링커를 가진 콜레스테롤 접합체 | Chol6/C6 chol | ||
| 9개 탄소 링커를 가진 콜레스테롤 접합체 | Chol9 |
특정 실시태양에서, miR-29a 모방체는 SEQ ID NO: 27을 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 5를 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 다른 실시태양에서, miR-29a 모방체는 SEQ ID NO: 7을 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 5를 포함하는 제 2 가닥을 포함한다.
일부 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 19를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 1을 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 일부 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 2를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 1을 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 또 일부 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 19를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 15를 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 또 일부 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 33을 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 1을 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 또 일부 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 34를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 1을 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 또 일부 다른 실시태양에서, miR-29b 모방체는 SEQ ID NO: 19를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 30을 포함하는 제 2 가닥을 포함한다.
특정 실시태양에서, miR-29c 모방체는 SEQ ID NO: 35를 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 24를 포함하는 제 2 가닥을 포함한다. 다른 실시태양에서, miR-29c 모방체는 SEQ ID NO: 26을 포함하는 제 1 가닥 및 SEQ ID NO: 24를 포함하는 제 2 가닥을 포함한다.
특정 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 다음을 포함한다:
(a) 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥, 여기서, 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 갖는다.
특정 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 다음을 포함한다:
(c) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 및 31-34로부터 선택된 서열을 포함한다; 및
(d) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥, 여기서, 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 갖는다.
특정 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 다음을 포함한다:
(a) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개 리보뉴클레오티드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥, 여기서, 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1, 8-10, 13-17 및 28-30으로부터 선택된 서열을 포함한다.
본 발명의 마이크로RNA 모방체 화합물에 사용될 수 있는 변형 뉴클레오티드는 염기 변형 또는 치환을 갖는 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. RNA의 천연 또는 비변형 염기는 푸린 염기 아데닌(A)과 구아닌(G), 피리미딘 염기 시토신(C)과 우라실(U)(DNA에는 티민(T)을 가진다)이다. 대조적으로, 헤테로사이클릭 염기 모이어티로 또한 불리는 변형 염기는 5-메틸시토신(5-me-C), 5-하이드록시메틸 시토신, 잔틴, 하이포잔틴, 2-아미노아데닌, 아데닌과 구아닌의 6-메틸 및 다른 알킬 유도체, 아데닌과 구아닌의 2-프로필 및 다른 알킬 유도체, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실 및 시토신, 5-프로파인일 우라실 및 시토신 및 피리미딘 염기의 다른 알카인일 유도체, 6-아조 우라실, 시토신 및 티민, 5-우라실 (수도우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-하이드록실 및 다른 8-치환 아데닌 및 구아닌, 5-할로(5-브로모, 5-트라이플루오로메틸 및 다른 5-치환 우라실 및 시토신 포함), 7-메틸구아닌 및 7-메틸아데닌, 2-F-아데닌, 2- 아미노-아데닌, 8-아자구아닌 및 8-아자아데닌, 7-데아자구아닌 및 7-데아자아데닌 및 3-데아자구아닌 및 3-데아자아데닌과 같은 다른 합성 및 자연 핵염기를 포함한다.
일부 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체 화합물은 변형 당 모이어티를 갖는 뉴클레오티드를 가질 수 있다. 대표적인 변형 당은 카보사이클릭 또는 비사이클릭 당, 2', 3' 또는 4' 위치 중 하나 이상에 치환기를 갖는 당 및 당의 하나 이상의 수소 원자 대신 치환기를 갖는 당을 포함한다. 특정 실시태양에서, 당은 2' 위치에 치환기를 가짐으로써 변형된다. 추가의 실시태양에서, 당은 3' 위치에 치환기를 가짐으로써 변형된다. 다른 실시태양에서, 당은 4 '위치에 치환기를 가짐으로써 변형된다. 당은 당해 위치 중 하나 이상에서 변형을 가질 수 있거나 또는 RNA 분자가 하나의 위치에서 당 변형을 갖는 하나 이상의 뉴클레오티드 및 다른 위치에서 당 변형을 갖는 하나 이상의 뉴클레오티드를 가질 수 있다는 것도 또한 고려된다.
miRNA 모방체 화합물에서 고려되는 당 변형은 OH; F; O-, S- 또는 N-알킬; O-, S- 또는 N-알켄일; O-, S- 또는 N-알카인일; 또는 O-알킬-O-알킬로부터 선택된 치환기를 포함하나 이에 제한되지 않으며, 알킬, 알켄일 및 알카인일은 치환 또는 비치환 C1 내지 C10 알킬 또는 C2 내지 C10 알켄일 및 알카인일일 수 있다.
일부 실시태양에서, miRNA 모방체 화합물은 C1 내지 C10 저급 알킬, 치환 저급 알킬, 알켄일, 알카인일, 알카릴, 아랄킬, O-알카릴 또는 O-아랄킬, SH, SCH3, Cl, Br, CN, OCN, CF3, OCF3, SOCH3, SO2CH3, ONO2, NO2, N3, NH2, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알카릴, 아미노알킬아미노 또는 유사한 치환기로부터 선택된 당 치환기를 가진다. 일부 실시태양에서, 변형은 2'-메톡시에톡시(2'-O-(2-메톡시에틸) 또는 2'-MOE로도 공지된 (2'-O-CH2CH2OCH3), 즉 알콕시알콕시기를 포함한다. 또 다른 변형은 2'-다이메틸아미노옥시에톡시, 즉, 2'-DMAOE로 알려진 O(CH2)2ON(CH3)2 그룹 및 2'-다이메틸아미노에톡시에톡시(당업계에서 2'-O-다이메틸-아미노-에톡시-에틸 또는 2'-DMAEOE로 공지됨), 즉, 2'-O-CH2-O-CH2-N(CH3)2를 포함한다.
2' 위치(2'-) 상의 당 치환기는 아라비노(위) 또는 리보(아래) 위치에 있을 수 있다. 하나의 2'-아라비노 변형은 2'-F이다. 다른 유사한 변형이 당 모이어티 상의 다른 위치, 특히 3' 말단 뉴클레오시드 또는 2'-5' 연결 올리고뉴클레오티드에서 당의 3' 위치 및 5' 말단 뉴클레오티드의 5' 위치에서 이루어질 수 있다.
특정 실시태양에서, 당 변형은 2'-O-알킬 (예를 들어, 2'-O-메틸, 2'-O-메톡시에틸), 2'-할로(예를 들어, 2'-플루오로, 2'-클로로, 2'-브로모) 및 4' 티오 변형이다. 예를 들어, 일부 실시태양에서, miR-29a, miR-29b, 또는 miR-29c 모방체 화합물의 제 1 가닥은 하나 이상의 2' 플루오로 뉴클레오티드를 포함한다. 다른 실시태양에서, 모방체 화합물의 제 1 가닥은 변형 뉴클레오티드를 갖지 않는다. 또 다른 실시태양에서, miR-29a, miR-29b, 또는 miR-29c 모방체 화합물의 제 2 가닥은 하나 이상의 2'-O-메틸 변형 뉴클레오티드를 포함한다.
본 발명의 마이크로RNA 모방체 화합물의 제 1 및 제 2 가닥은 또한 하나 이상의 포스포로티오에이트, 모르폴리노 또는 포스포노카르복실레이트 결합과 같은 주쇄 변형을 포함할 수 있다(예를 들어, 전문이 참조로 본 발명에 포함된 미국특허 제6,693,187호 및 제7,067,641호 참조). 예를 들어, 일부 실시태양에서, 제 1 가닥에 3' 오버행을 포함하는 뉴클레오티드는 포스포로티오에이트 결합에 의해 연결된다.
일부 실시태양에서, 마이크로RNA 모방체 화합물은 스테로이드(콜레스테롤), 비타민, 지방산, 탄수화물 또는 글리코시드, 펩타이드, 또는 생체 내 전달과 안정성을 촉진하는 다른 소분자 리간드와 같은 담체 분자에 접합된다. 바람직하게는, 담체 분자는 링커 또는 스페이서 그룹을 통해 3 '또는 5' 말단에서 마이크로RNA 모방체 화합물의 제 2 가닥에 부착된다. 다양한 실시태양에서, 담체 분자는 콜레스테롤, 콜레스테롤 유도체, 콜산 또는 콜산 유도체이다. 전문이 참조로 본 발명에 포함된 미국특허 제7,202,227호에 개시된 담체 분자의 사용이 또한 고려된다. 특정 실시태양에서, 담체 분자는 콜레스테롤이며 적어도 6개의 탄소 링커를 통해 제 2 가닥의 3' 또는 5' 말단에 부착된다. 일부 실시태양에서, 담체 분자는 6개 또는 9개의 탄소 링커를 통해 제 2 가닥의 3' 말단에 부착된다. 일부 실시태양에서, 링커는 절단 가능한 링커이다. 다양한 실시태양에서, 링커는 실질적으로 선형인 탄화수소 모이어티를 포함한다. 탄화수소 모이어티는 약 3 내지 약 15개의 탄소 원자를 포함 할 수 있고 에터 또는 티오에터 결합과 같은 비교적 비극성 기를 통해 콜레스테롤에 접합될 수 있다. 특정 실시태양에서, 탄화수소 링커/스페이서는 선택적으로 치환된 C2 내지 C15 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬(예를 들어, 알킬렌 또는 알켄일렌)을 포함한다. 전문이 본 발명에 참고로 포함된 미국특허 출원 제2012/0128761호에 기술된 다양한 링커/스페이서기가 본 발명에 사용될 수 있다.
사용 방법
다양한 실시태양에서, 본 발명은 본 발명에 기술된 치료적 유효량의 miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c 모방체의 적어도 하나를 대상에게 투여하는 단계를 포함하여, 필요한 대상에서 안구 섬유증 상태를 치료, 개선 또는 예방하는 방법을 제공한다. 특정 비 안구 섬유증 상태를 치료하는 데 있어서 miR-29 효현제의 사용은 미국 특허 제8,440,636호에 기술되어 있으며, 이는 본 발명에 그 전문이 참조로 포함된다.
본 발명의 miR-29 모방체를 사용하여 치료될 수 있는 안구 섬유증 상태는 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증, 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 증식성 유리체망막병증을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 섬유증을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 항-VEGF 치료와 관련된 망막 섬유증을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은, 예를 들어 광굴절성 각막 절제술(PRK) 또는 외상 후 각막 혼탁 또는 각막 흉터를 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 PRK로부터 발생한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 외상으로부터 발생한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 감염으로부터 발생한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염 또는 아메바 감염으로부터 발생한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 각막 이식으로부터 발생한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 각막 화상을 포함한다. 일부 실시태양에서, 각막 화상은 열 각막 화상을 포함한다. 일부 실시태양에서, 각막 화상은 화학적 각막 화상을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 익상편을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 녹내장을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 수포 부전(수술적으로 형성된 수포의 부위에서 섬유증을 예방하면 수술적으로 형성된 수포가 폐쇄를 밀봉하는 것을 방지한다)을 유도하여 녹내장의 재발을 유도할 수 있는 수술적으로 형성된 수포의 섬유증(본 발명에서 섬유주 수포로 불림)이다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 푹스 내피 각막 이영양증(FECD)을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안구 섬유증은 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)을 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 대상의 안구 질환 또는 장애의 치료 방법을 제공하며, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며, 안구 질환 또는 장애는 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 실시태양에서, 안구 질환 또는 장애는 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하는 그룹으로부터 선택된 안구 섬유증을 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체의 투여는 대상의 세포에서 하나 이상의 세포외 기질 유전자의 발현 또는 활성을 감소시킨다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체의 투여는 개체의 세포에서 하나 이상의 콜라겐 합성 유전자의 발현 또는 활성을 감소시킨다. 또 다른 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 피부 발달, 각막 발달, 표피 발달, 외배엽 발달, 근섬유아세포 활성화 및 세포 항상성에 관여하는 하나 이상의 유전자의 발현 또는 활성을 상향 조절한다. 다양한 유전자의 발현 또는 활성이 본 발명의 miR-29 모방체에 의해 조절되는 대상의 세포는 섬유아세포, 각막세포, 표피세포, 상피세포 및 내피세포를 포함한다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A3, COL5A2, COL11A1, FN1, MMP2, CTGF, TGFB2, 및/또는 TGFB3의 발현을 감소시킨다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 섬유증과 관련된 염증 반응을 하향 조절한다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 섬유증 환자에서 IL-12, IL-4, GCSF 및 TNF-α와 같은 전 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 또한 섬유성 조직 또는 기관에서 호중구, 림프구, 단핵구 및 대식세포와 같은 면역 이펙터 세포의 침윤을 감소시킨다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 상피에서 중간 엽으로의 전이를 감소시키거나 억제한다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체의 투여는 근섬유아세포 분화를 감소시키거나 억제한다.
특정 실시태양에서, 본 발명은 세포를 본 발명의 miR-29 모방체와 접촉시키는 단계를 포함하여 안구 세포에서 세포외 기질 유전자를 조절하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 안구 세포를 본 발명의 miR-29 모방체와 접촉시키는 단계를 포함하여 안구 세포에서 콜라겐 합성 유전자를 조절하는 방법을 제공한다. 치료 또는 접촉시, miR-29 모방체는 세포외 기질 유전자 또는 콜라겐 합성 유전자의 발현 또는 활성을 감소시킨다.
본 발명에 사용된 용어 "대상" 또는 "환자"는 인간 및 다른 영장류(예를 들어, 침팬지 및 다른 유인원 및 원숭이 종), 농장 동물(예를 들어, 소, 양, 돼지, 염소 및 말), 가정용 포유류 (예를 들어, 개 및 고양이), 실험용 동물(예를 들어, 생쥐, 쥐 및 기니피그 등의 설치류) 및 조류(예를 들어, 닭, 칠면조 및 다른 가금류, 오리, 오리, 거위 등과 같은 가정용, 야생용 및 경기용 조류)를 포함하나 이에 제한되지 않는 임의의 척추동물을 의미한다. 일부 실시태양에서, 대상은 포유동물이다. 다른 실시태양에서, 대상은 인간이다.
일부 실시태양에서, 대상은 당뇨병을 앓고 있다. 일부 실시태양에서, 대상은 당뇨병성 망막병증을 앓고 있다. 일부 실시태양에서, 대상은 연령 관련 황반 변성(AMD)을 앓고 있다. 일부 실시태양에서, 대상은 습식 연령 관련 황반 변성(습식 AMD)을 앓고 있다. 일부 실시태양에서, 대상은 망막 섬유증을 일으키는 항-VEGF 치료제로 당뇨병성 망막병증에 대해 치료 받는다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 miR-29 모방체를 대상에게 투여하는 단계를 포함하여 이를 필요로 하는 대상에서 당뇨병성 망막병증 및/또는 당뇨병성 망막병증에 사용된 치료와 관련된 망막 섬유증의 치료 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 대상에 항-VEGF 치료제를 동시에, 순차적으로 또는 간헐적으로 투여하면서 대상에게 본 발명의 miR-29 모방체를 투여하는 단계를 포함하여, 이를 필요로 하는 대상에서 당뇨병성 망막병증을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 및 항 -VEGF 치료제는 유리체내 주사에 의해 공동 투여된다. 항-VEGF 치료에 의한 당뇨병성 망막병증의 치료는 항-VEGF 치료제의 반복 주사를 요구할 수 있다. 항-VEGF 치료제와 본 발명의 miR-29 모방체의 공동-투여는 항-VEGF 치료제의 단일 또는 반복 주사로 인한 눈의 손상(안구 섬유증 포함하나 이에 제한되지 않음)을 억제, 감소 또는 예방할 수 있다 . 일부 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체는 다른 안구 치료제와 공동 투여된다. 안구 치료제와 본 발명의 miR-29 모방체의 공동-투여는 안구 치료제의 단일 또는 반복 주사로 인한 안구 손상(안구 섬유증을 포함하나 이에 제한되지 않음)의 손상을 억제, 감소 또는 예방할 수 있다. 본 발명의 예시적인 항-VEGF 치료제는 항-VEGF 항혈청, 가용성 VEGF 수용체, 항-VEGF 앱타머, VEGFR1-중화 항혈청, 항-VEGF 다클론 항체, 항-VEGF 단클론 항체 및 항-VEGF 이중 특이적 또는 다중 특이적 항체를 제한 없이 포함한다. 추가의 예시적인 항-VEGF 치료제는 플루오로우라실 및 류코보린과 조합될 수 있는 베바시주맙(아바스틴); 라니비주맙(루센티스), 아플리버셉트, 지브-아플리버셉트 또는 브로루시주맙을 제한 없이 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 항체, 소분자 약물, 생물학적 약물, 압타머 또는 바이러스(예를 들어, 바이러스 벡터)에 의한 눈 치료에 이차적인 안구 섬유증의 치료, 예방, 감소 또는 축소 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 눈 수술 전, 동안 또는 후에 miR-29 모방체를 투여하는 단계를 포함하여 눈 수술을 수행하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 눈 수술은 레이저 눈 수술(예를 들어, LASIK)을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안과 수술은 근시, 원시 및 난시 교정을 위한 굴절 수술을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안과 수술은 광굴절 각막절제술(PRK)을 포함한다. 일부 실시태양에서, 안과 수술은 망막 박리 회복을 포함한다. 본 발명의 miR-29 모방체의 투여는 고차 수차, 안구 건조증, 후광, 확산성 층상 각막염, 각막 흉터, 상피 내성, 맥락막 혈관신생, 포도막염 및 비문증을 포함하나 이에 제한되지 않는 안과 수술의 부작용을 감소시킨다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 1, 2, 5, 10 또는 24시간의 눈 손상과 함께 miR-29 모방체를 투여하는 것을 포함하는 눈 부상의 치료 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 눈 손상은 외상성 또는 우발적 눈 손상이다.
본 발명은 miR-29 효현제(예를 들어, 약물 또는 miR-29 모방체)에 의한 안구 섬유증 치료 효과를 평가하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시태양에서, 치료 효과를 평가하는 방법은 miR-29 모방체로 치료하기 전에 대상의 안구 세포에서 하나 이상의 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계로서, 하나 이상의 유전자는 miR-29에 의해 조절되는 유전자 세트로부터 선택된다; miR-29 모방체로 처리한 후 대상의 세포/섬유화 조직에서 동일한 하나 이상의 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 치료 전후의 발현 수준에 기초하여 치료가 효과적, 덜 효과적 또는 비효과적인 것을 측정하는 단계를 포함한다. 다른 실시태양에서, 치료 전후의 유전자의 발현에서 적어도 1배, 1.5배, 2배, 2.5배, 3배, 3.5배 또는 4배의 차이는 치료가 효과적이라는 것을 나타낸다.
약학적 조성물
또한, 본 발명은 치료적 유효량의 본 발명에 따른 miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c의 하나 이상의 마이크로RNA 모방체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29a 모방체 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하며, 모방체 화합물의 제 1 가닥은 성숙한 miR-29a 서열을 포함하고 제 2 가닥은 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이다. 다른 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29b 모방체 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하며, 모방체 화합물의 제 1 가닥은 성숙한 miR-29b 서열을 포함하고 제 2 가닥은 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이다. 또 다른 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29c 모방체 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하며, 모방체 화합물의 제 1 가닥은 성숙한 miR-29c 서열을 포함하고 제 2 가닥은 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 본 발명의 적어도 2개의 마이크로RNA 모방체 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함한다. 예를 들어, 약학적 조성물은 miR-29a 및 miR-29b 모방체; miR-29a 및 miR-29c 모방체; 또는 miR-29b 및 miR-29c 모방체의 조합을 포함한다. 선택적으로, 조성물은 동일한 마이크로RNA의 2개의 모방체를 포함할 수 있다. 또 다른 일부 다른 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 치료적 유효량의 본 발명의 3개의 마이크로RNA 모방체 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 예를 들어, 약학적 조성물은 miR-29a, miR-29b 및 miR-29c 모방체의 조합을 포함할 수 있다.
약학적 조성물이 본 발명에 따른 적어도 2개의 마이크로RNA 모방체 화합물을 포함하는 일부 실시태양에서, 제 1 및 제 2 모방체 화합물 또는 제 1, 제 2 및 제 3 모방체 화합물은 등몰 농도로 존재한다. 약 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:2:1, 1:3:1, 1:4:1, 1:2:3, 1:2:4와 같은 다른 혼합비는 miR-29a, miR-29b 및 miR-29c 모방체 화합물 중 적어도 2개를 포함하는 약학적 조성물을 제조하기 위해 고려된다.
활성 화합물 및 본 발명의 조성물은 전형적인 약학 제제를 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 이들 조성물의 투여는 표적 조직이 그 경로를 통해 이용 가능한 한 임의의 통상적인 경로를 통해 이루어질 수 있다.
본 발명의 다른 실시태양에서, 본 발명에 기술된 바와 같은 miR-29 모방체를 포함하는 조성물은 콘택트 렌즈, 스펀지 또는 다른 물질과 같은 의료 장치용 코팅으로서 제제화될 수 있다.
살균 주사 용액은 적절한 양의 활성 화합물을 용매에 원하는 임의의 다른 성분(예를 들어, 상기에서 열거한 것)과 함께 혼합함으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 다양한 살균 활성 성분들을 기본적인 분산매와 원하는 다른 성분들, 예를 들어 앞에서 열거한 것들을 포함하는 살균 비히클에 혼합함으로써 제조된다.
본 발명의 조성물은 일반적으로 중성 또는 염 형태로 제제화될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어, 무기산(예를 들어, 염산 또는 인산) 또는 유기산(예를 들어, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 만델산 등)으로부터 유도된 산 부가 염(단백질의 유리 아미노기로 형성됨)을 포함한다. 단백질의 유리 카복실기로 형성된 염은 무기 염기(예를 들어, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 수산화 제 2 철) 또는 유기 염기(예를 들어, 아이소프로필아민, 트라이메틸아민, 히스티딘, 프로카인 등)로부터 유도될 수 있다.
제제 시에, 용액들은 바람직하게는 투약 제제에 적합한 방식 및 치료에 효과적인 양으로 투여된다. 제제는 주사 가능한 용액, 국소적 용액, 약물 용출 장치 또는 다른 코팅된 혈관 장치 등과 같은 다양한 제형으로 쉽게 투여될 수 있다. 특정 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 이온삼투법, 결막하 주사, 익상편내 주사, 섬유주 수포의 부위에서의 주사, 건하 주사, 유리체내 주사, 전방내 또는 국소를 통한 투여를 위해 제제화된다.
거대분자 복합체, 나노캡슐, 마이크로스피어, 비드와 같은 콜로이드 분산 시스템 및 수중유 에멀젼, 미셀, 혼합 미셀, 리포좀 및 엑소좀을 포함하는 지질계 시스템은 miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c 모방체 화합물의 전달 비히클로 사용될 수 있다. 일부 실시태양에서, 본 발명의 miR-29 모방체는 리포좀 입자로 제제화될 수 있다.
조직을 표적화하기 위한 본 발명의 핵산을 전달하기에 적합한 상업적으로 구입가능한 지방 에멀전은 Intralipid®, Liposyn®, Liposyn®II, Liposyn®III, Nutrilipid, 및 다른 유사한 지질 에멀전을 포함한다. 생체 내 전달 비히클로 사용하기 위한 바람직한 콜로이드 시스템은 리포솜(즉, 인공 막소포)이다. 이러한 시스템의 제조 및 사용은 당업계에 주지되어 있다. 예시적인 제제는 또한 전문이 본 발명에 참조로서 포함되는 US 5,981,505; US 6,217,900; US 6,383,512; US 5,783,565; US 7,202,227; US 6,379,965; US 6,127,170; US 5,837,533; US 6,747,014; 및 WO03/093449에서 개시된다.
특정 실시태양에서, 전달에 사용되는 리포솜은 미국특허 출원 공개공보 제 20110076322호에 상세히 기술된 SMARTICLES®(Marina Biotech, Inc.)와 같은 친양쪽성 리포좀이다. SMARTICLES®의 표면 전하는 완전히 가역적이라서 이를 핵산 전달에 특히 적합하게 만든다. SMARTICLES®는 주사를 통해 전달되고, 안정적으로 유지되며, 핵산을 전달하기 위해 유리 세포 및 교차 세포막을 응집시킬 수 있다.
일부 실시태양에서, 본 발명의 마이크로RNA 모방체 화합물 또는 약학적 조성물은 안구 전달용으로 제제화되고 분말, 수용액 또는 안구 형태일 수 있다. 고체 제제는 락토오스 또는 덱스트란과 같은 부형제를 함유할 수 있다. 액체 제제는 에어로졸, 점적제 또는 계량 스프레이 형태로 사용하기 위한 수성 또는 유성 용액일 수 있다.
일부 실시태양에서, 제제는 리포좀 제제, 나노 현탁액 제제 또는 마이크로 현탁액 제제이다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29a 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 0.9%(w/v) 염화나트륨, 5mM 인산염 완충액, 10mM 인산염 완충액, 25mM 인산염 완충액, 50mM 인산염 완충액, 85mM 인산염 완충액 및 100mM 인산염 완충액으로부터 선택된다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29a 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 10mM 인산염 완충제 및 85mM 인산염 완충제로부터 선택된다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29b 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 0.9%(w/v) 염화나트륨, 5mM 인산염 완충액, 10mM 인산염 완충액, 25mM 인산염 완충액, 50mM 인산염 완충액, 85mM 인산염 완충액 및 100mM 인산염 완충액으로부터 선택된다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29a 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 10mM 인산염 완충제 및 85mM 인산염 완충제로부터 선택된다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29c 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 0.9%(w/v) 염화나트륨, 5mM 인산염 완충액, 10mM 인산염 완충액, 25mM 인산염 완충액, 50mM 인산염 완충액, 85mM 인산염 완충액 및 100mM 인산염 완충액으로부터 선택된다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 치료적 유효량의 miR-29a 모방체 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하며, 약학적으로 허용 가능한 담체는 주사 용수(WFI), 10mM 인산염 완충제 및 85mM 인산염 완충제로부터 선택된다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 0.2 mg/mL 내지 200 mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 0.2 mg/mL 내지 10 mg/mL, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL, 50 mg/mL 내지 90 mg/mL, 또는 90 mg/mL 내지 120 mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 0.2 mg/mL 내지 1 mg/mL, 1 mg/mL 내지 5 mg/mL, 5 mg/mL 내지 10 mg/mL, 10 mg/mL 내지 20 mg/mL, 20 mg/mL 내지 30 mg/mL, 30 mg/mL 내지 40 mg/mL, 40 mg/mL 내지 50 mg/mL, 50 mg/mL 내지 60 mg/mL, 60 mg/mL 내지 70 mg/mL, 70 mg/mL 내지 90 mg/mL, 또는 90 mg/mL 내지 120 mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 적어도 약 0.3 mg/mL, 적어도 약 0.5 mg/mL, 적어도 약 1 mg/mL, 적어도 약 2 mg/mL, 적어도 약 3 mg/mL, 적어도 약 4 mg/mL, 적어도 약 5 mg/mL, 적어도 약 7 mg/mL, 적어도 약 10 mg/mL, 적어도 약 20 mg/mL, 적어도 약 30 mg/mL, 적어도 약 40 mg/mL, 또는 적어도 약 50 mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 약 100 mg/mL, 약 70 mg/mL, 약 35 mg/mL, 약 7 mg/mL, 약 3.5 mg/mL, 약 0.7 mg/mL 또는 0.35 mg/mL의 miR-209 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 약 70 mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 약 35mg/mL의 miR-29 모방체를 포함한다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 4 내지 9의 pH를 갖는다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 약 4, 약 4.5, 약 5, 약 5.5, 약 6, 약 6.5, 약 7, 약 7.5, 약 8, 약 8.5 또는 약 9의 pH를 갖는다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 병용 치료제로 제제화된다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 본 발명의 miR-29 모방체 및 베바시주맙(아바스틴); 라니비주맙(루센티스), 아플리버셉트, 지브-아플리버셉트 또는 브로루시주맙의 하나 이상을 제한 없이 포함하는 하나 이상의 항-VEGF 치료제를 포함한다. 일부 실시태양에서, 병용 치료제는 안과용 제제이다. 일부 실시태양에서, 병용 치료제는 유리체 내 주사용으로 제제화된다. 일부 실시태양에서, 병용 치료제는 플루오로우라실 및 류코보린의 하나 또는 둘 다를 추가로 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 본 발명의 miR-29 모방체 및 하나 이상의 항-VEGF 소분자 약물, 예를 들어 PF-00337210을 포함한다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 본 발명의 miR-29 모방체 및 하나 이상의 암 치료제를 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 본 발명의 miR-29 모방체 및 제제화된 리툭시맙을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 안내 림프종의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 약학적 조성물을 제공한다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 항생제를 포함한다. 항생제는 항-VEGF 치료제 및 안내염 또는 눈의 다른 감염성 질환의 예방을 위한 본 발명의 miR-29 모방체와의 3개 약물 조합으로서 제공될 수 있다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 miR-29 모방체 및 항생제, 항진균제, 항균제 또는 항바이러스제 중 하나 이상을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
일부 실시태양에서, 본 발명의 약학적 조성물은 본 발명의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 miR-29 모방체를 포함한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 본 발명의 하나 이상의 miR-29 모방체 및 본 발명에 개시된 것 이외의 miR-29 모방체를 포함하나 이에 제한되지 않는 하나 이상의 다른 마이크로RNA 또는 마이크로RNA 모방체를 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 치료제를 눈에 주사하기 전, 동안 또는 후에 규칙적으로 투여되는 당뇨병성 망막병증, AMD 또는 습식 AMD의 치료를 받는 대상에 사용하기 위한 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 miR-29 모방체 또는 본 발명의 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물은 선택적으로 점안제로서, 선택적으로 사용 지침서를 동반한 의료 사무실 또는 가정용 키트로 공급될 수 있다.
당업자는 전달 비히클을 안정시키고 표적 안구 세포에 의한 흡수를 허용하기 위해 적절한 염 및 완충액을 사용하기를 원할 수 있다. 본 발명의 수성 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체(carrier) 또는 수성 매질(aqueous medium)에 용해 또는 분산된 miR-29 모방체(예를 들어, 리포솜 또는 다른 복합체)을 포함하는 유효량의 전달 비히클을 포함한다. "약학적으로 허용가능한" 또는 "약리학적으로 허용가능한"이란 문구는 동물 또는 사람에게 투여되었을 때, 해로운, 알레르기, 또는 다른 뜻밖의(untoward) 반응들을 일으키지 않는 분자 독립체(molecular entities) 및 조성물을 나타낸다. 본 발명에 사용된 "약학적으로 허용가능한 담체"는 용매, 버퍼, 용액, 분산매, 코팅, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 및 인간에 투여하기 적합한 약과 같은 약의 제제화에 사용이 허용되는 다른 물질을 포함한다. 약학적 활성 물질들을 위한 이와 같은 매질 및 제제의 사용은 당업계에 주지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 본 발명의 활성 성분과 양립 불가능한 것을 제외하고는, 치료 조성물에서의 이의 사용이 고려된다. 보충적인 활성 성분들은 이들이 조성물의 폴리뉴클레오티드를 불활성화하지 않는 경우 또한 조성물에 혼합될 수 있다.
투여 및 투여량
본 발명에 제공된 바와 같이, 하나 이상의 miR-29 모방체 화합물이 안구 섬유증의 치료를 위해 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 대상의 눈/안구 세포에 직접 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 말초 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 이온삼투법, 결막하 주사, 익상편내 주사, 섬유주 수포의 부위에서의 주사, 건하 주사, 유리체내 주사, 전방내 또는 국소를 통해 투여된다.
일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 점적제, 연고 또는 현탁액을 포함한다. 일부 실시태양에서, 본 발명은 국소 투여, 눈과 약물-용출 콘택트 렌즈의 접촉, 결막하 주사, 수포내 주사, 전방내 주사, 전방내 저장소(예를 들어, 규소 또는 다른 물질의 약물-매립된 "씨드"), 유리체내 주입, 유리체내 저장소(예를 들어, 실리콘 또는 다른 물질의 약물-매립된 "씨드"), 및 이온삼투법으로부터 선택된 투여 경로를 포함하여, miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 방법을 제공한다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 국소 투여 또는 눈과 약물-용출 콘택트 렌즈의 접촉을 포함하여, miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하여, 각막 섬유증을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 점적제이다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 국소 투여 또는 결막하 주사를 포함하여 miR-29 모방체를 포함하는 miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하여, 익상편을 치료 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 점적제이다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 수포내 주사, 결막하 주사, 또는 국소 투여를 포함하여 miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하여, 섬유주절제술 수포를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 약학적 조성물은 점적제이다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 결막하 주사, 전방내 주사 또는 전방내 저장소를 포함하여 miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하여, 녹내장을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 전방내 저장소는 규소 또는 다른 약학적으로 허용 가능한 물질의 약물-매립된 "씨드"를 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명은 유리체내 주사, 유리체내 저장소 또는 이온 삼투를 포함하여 miR-29 모방체 또는 miR-29 모방체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하여 망막 섬유증을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시태양에서, 유리체내 저장소는 규소 또는 다른 약학적으로 허용 가능한 물질의 약물-매립된 씨드를 포함한다.
일부 실시태양에서, 본 발명의 하나 이상의 마이크로RNA 모방체 화합물은 동시에 그러나 별개의 조성물에 투여될 수 있고, 동시에 모방체 화합물이 짧은 시간 내에, 예를 들어 서로의 약 5, 10, 20 또는 30분 내에 투여되는 것을 참조한다. 일부 다른 실시태양에서, miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c 모방체 화합물은 상이한 시간에 별개의 조성물에 투여될 수 있다.
본 발명은 또한 추가의 치료제가 miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c 모방체 화합물과 함께 투여될 수 있는 실시태양을 포함한다. 일부 실시태양에서, 추가의 치료제는 제 2 항-섬유화제이다. 추가의 치료제는 동시에 그러나 별도의 제형으로 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 다른 실시태양에서, 추가의 치료제는 miR-29a, miR-29b 및/또는 miR-29c 모방체 화합물의 투여 전후 다른 시간에 투여될 수 있다. 임상 응용이 고려되는 경우, 약학적 조성물은 의도된 응용에 적합한 형태로 제조될 것이다. 일반적으로, 이는 발열 물질뿐만 아니라 인간 또는 동물에게 해를 줄 수 있는 다른 불순물이 본질적으로 없는 조성물의 제조를 수반할 것이다.
일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로 투여된다. 일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로, 예를 들어 점적 제제로 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로, 예를 들어 매일 2회 또는 예를 들어 매일 4회 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로, 예를 들어 매일 4회 투여된다.
일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 1주일 동안 주기적으로 국소적으로 투여된다. 일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 4주 동안 주기적으로 국소적으로 투여된다. 일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 국소적으로 매일 2회 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 4주 동안 매일 2회 국소적으로 투여된다. 일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 28일 동안 국소적으로 투여된다. 일부 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 최대 28일 동안 매일 2회 국소적으로 투여된다. 본 발명 전체에서, 매일 1회, 매일 2회 등의 용어는 한쪽 또는 양쪽 투여 빈도를 지칭하며, 즉 "매일 2회"는 한 눈에 매일 2회 또는 두 눈에 매일 2회를 의미하며 하루에 1회 두 분에 투여를 의미하지 않는 것으로 이해될 것이다. 일반적으로, 본 발명의 조성물은 두 눈의 치료가 요구될 때 양쪽으로 투여되고, 한 눈의 치료가 요구될 때 - 예를 들어, 좌안에서만 눈 부상을 치료하기 위해 한쪽으로 투여되며, 본 발명의 조성물은 왼쪽 또는 오른쪽에만 투여된다.
일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 투여된다.
일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 매주 1회 유리체내 주사를 통해 투여된다.
일부 예시적인 실시태양에서, miR-29 모방체 화합물은 유리체내 주사를 통해 1개월 동안 주기적으로 투여된다.
본 발명은 바이러스 유전자 전달에 의해 miR-29 모방체를 투여하기 위한 벡터, 약학적 조성물 및 방법을 추가로 제공한다. 일부 실시태양에서, 바이러스 벡터는 렌티바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터 또는 아데노-관련 바이러스(AAV) 벡터를 포함한다. AAV 벡터를 통한 인체에 miR-29 모방체의 전달은, 예를 들어, Heller et al. JCI Insight . 2017 May 4; 2(9): e93309, 및 국제 특허 공개공보 No. WO2017181011A1에 기술되며, 이의 각각은 전문이 참조로 본 발명에 포함된다. AAV 벡터는, 예를 들어, Lebherz et al. J Gene Med. 2008 Apr; 10(4): 375-382에 기술된 바와 같이 개선된 안구 유전자 전달을 위한 혈청형의 사용에 의해 눈에서의 사용에 적합하게 될 수 있다.
본 발명은 본 발명에 기술된 치료적 mir-29 모방체 및 조성물을 포함하는 키트를 추가로 제공한다. 본 발명은 또한 본 발명에 기술된 치료 조성물 또는 키트 중 어느 하나를 포함하는 제조 물품을 제공한다. 제조 물품의 예는 바이알(예를 들어, 밀봉된 바이알)을 포함한다.
나열된 실시태양
실시태양 1. 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 대상의 안구 섬유증의 치료 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며,
여기서, 안구 섬유증은 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증, 또는 섬유주대의 섬유증을 포함한다.
실시태양 2. 제 1 실시태양의 방법, 여기서 안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 안구 질환 또는 장애로부터 발생된다.
실시태양 3. 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하여, 대상에서 안구 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개의 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며,
여기서 안구 질환 또는 장애는 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
실시태양 4. 실시태양 3의 방법, 여기서 안구 질환 또는 장애는 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하는 그룹으로부터 선택된 안구 섬유증을 포함한다.
실시태양 5. 실시태양 1 내지 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 이온삼투법, 결막하 주사, 익상편내 주사, 섬유주 수포의 부위에서의 주사, 건하 주사, 유리체내 주사, 전방내 또는 국소를 통해 투여된다.
실시태양 6. 실시태양 1, 2 또는 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 증식성 유리체망막병증을 포함한다.
실시태양 7. 실시태양 1, 2 또는 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 섬유증을 포함한다.
실시태양 8. 실시태양 7의 방법, 여기서 안구 섬유증은 항-VEGF 치료와 관련된 망막 섬유증을 포함한다.
실시태양 9. 실시태양 1, 2 또는 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 각막 혼탁 또는 각막 흉터 형성을 포함한다.
실시태양 10. 실시태양 1 내지 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 각막 화상으로부터 발생한다.
실시태양 11. 실시태양 1 내지 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 익상편으로부터 발생한다.
실시태양 12. 실시태양 1 내지 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 푹스 내피 각막 이영양증(FECD)으로부터 발생한다.
실시태양 13. 실시태양 1 내지 4 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 녹내장으로부터 발생한다.
실시태양 14. 실시태양 1 내지 13 중 어느 하나의 방법, 여기서 안구 섬유증은 섬유주 수포를 포함한다.
실시태양 15. 실시태양 1 내지 14 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로 투여된다.
실시태양 16. 실시태양 15의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 각막에 국소적으로 투여된다.
실시태양 17. 실시태양 15 또는 16의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 매일 1회, 매일 2회, 매일 3회, 또는 매일 4회 각막에 국소적으로 투여된다.
실시태양 18. 실시태양 15 또는 16의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 최대 1주, 2주, 3주, 4주 또는 28일 동안 주기적으로 국소적으로 투여된다.
실시태양 19. 실시태양 1 내지 14 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 투여된다.
실시태양 20. 실시태양 1 내지 14 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 매주 1회 유리체내 주사를 통해 투여된다.
실시태양 21. 실시태양 1 내지 14 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은 1개월 동안 주기적으로 유리체내 주사를 통해 투여된다.
실시태양 22. 실시태양 1 내지 21 중 어느 하나의 방법, 여기서 COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A3, COL5A2, COL11A1, FN1, MMP2, CTGF, TGFB2 및/또는 TGFB3의 발현이 감소된다.
실시태양 23. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물이 표 2에 제시되어 있다.
실시태양 24. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 또는 31-34로부터 선택된 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 1, 8-10, 13-17 또는 28-30에서 선택된 서열을 포함한다.
실시태양 25. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥을 포함하고, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 및 31-34로부터 선택된 서열을 포함한다; 및
(b) 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥은 제 1 가닥과 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가진다.
실시태양 26. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 약 22개 내지 약 25개의 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1, 8-10, 13-17 및 28-30으로부터 선택된 서열을 포함한다.
실시태양 27. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1의 서열을 포함한다.
실시태양 28. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 15의 서열을 포함한다.
실시태양 29. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 성숙한 miR-29a 서열을 포함한다.
실시태양 30. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물이 표 1에 제시되어 있다.
실시태양 31. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 6, 7 또는 27의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 3-5 또는 11로부터 선택된 서열을 포함한다.
실시태양 32. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 성숙한 miR-29c 서열을 포함한다.
실시태양 33. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 miR-29 모방체 화합물이 표 3에 제시되어 있다.
실시태양 34. 실시태양 1 내지 22 중 어느 하나의 방법, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 25, 26 또는 35의 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 22-24 또는 12로부터 선택된 서열을 포함한다.
실시태양 35. 실시태양 1 내지 34 중 어느 하나의 방법, 여기서 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물은 약학적 조성물에 포함된다.
실시태양 36. 실시태양 1 내지 34 중 어느 하나의 방법, 여기서 대상은 인간이다.
실시태양 37. 실시태양 36의 방법, 여기서 대상은 당뇨병을 앓고 있다.
실시태양 38. 실시태양 36 또는 37의 방법, 여기서 대상은 당뇨병성 망막병증을 앓고 있다.
실시태양 39. 실시태양 36 또는 37의 방법, 여기서 대상은 연령 관련 황반 변성(AMD)을 앓고 있다.
실시태양 40. 실시태양 39의 방법, 여기서 대상은 습식 연령 관련 황반 변성(습식 AMD)을 앓고 있다.
실시태양 41. 실시태양 1 내지 40 중 어느 하나의 방법, 여기서 대상은 항-VEGF 치료제를 투여 받는다.
본 발명은 제한하는 것으로 해석되어서는 안 되는 다음의 추가적인 실시예에 의해 추가로 예시된다. 당업자는, 본 발명의 관점에서, 본 발명에 개시되며 본 발명의 취지 및 범위를 벗어나지 않고 여전히 동등하거나 유사한 결과를 얻는 특정 실시태양에 많은 변화가 이루어질 수 있음을 이해해야 한다.
본 발명의 전체에서 언급된 모든 특허 및 비 특허 문헌은 모든 목적을 위해 그 전문이 본 발명에 참조로 포함된다.
실시예
실시예 1: 각막 알칼리 화상 후 miR-29b 모방체의 주입
알칼리 화상은 각막 손상을 나타낸다. 특히 바이러스 감염, 박테리아 감염, 진균 감염, 신경영양 각막염, 무균 각막염, 각막 외상 및 수술에 의해 유도된 상피 파괴를 나타낸다. 알칼리 화상은 화상 후 7-14일에 세포외 기질 분자 발현의 상향 조절 및 화상 후 10-14일에 전체적으로 및 조직학적으로 뚜렷한 각막 혼탁 및 상처를 갖는 신뢰할 수 있는 시간 경과를 갖는 것으로 알려져 있다.
방법
알칼리 화상: 8-10주령 수컷 스프라그 다울리 래트를 아이소플루란으로 마취시키고 0.5% 프로파라카인 하이드로클로라이드 안과 용액을 국소 마취를 위해 도포하였다. 동물 당 하나의 각막에 0.5 또는 1N NaOH를 10초 동안 도포하고 식염수 세척하여 알칼리 화상을 입혔다. 그 후 항생제 연고를 매일 2회 도포하여 감염을 예방하였다. 알칼리 화상은 화상 발생 시점의 플루오레세인 염색 및/또는 화상 생성 6시간 후 조직학(헤마톡실린 및 에오신 염색)에 의해 동물의 서브세트에서 확인되었다.
miR-29b 모방체 국소 투여: 식염수 또는 이중 가닥 miR-29b 모방체(SEQ ID NO: 1/SEQ ID NO: 19)를 점적 제제(멸균 식염수에서 방울 당 10uL, 1 또는 70mg/mL miR-29b 모방체)로 래트의 각막에 국소적으로 투여하였다. 방울을 1일 동안 매일 4회 또는 1일 내지 28일 동안 매일 2회 도포하였다. 플루오레세인 아이소티오시아네이트(FITC)-표지된 올리고의 흡수/분포를 공초점 현미경을 통해 평가하였다.
miR-29 표적 발현: 트라이졸(Life Technologies)을 사용하여 7, 10 또는 14일 동안 식염수 또는 miR-29b 모방체 치료제로 치료된 알칼리 화상 래트 각막으로부터 총 RNA를 추출하였다. miR-29 표적 및 miR-29b 모방체 약동학적 바이오마커(COL1A1, COL1A2, COL5A2, COL11A1, MMP2, TGFB2 및/또는 FN1)의 발현은 7, 10 및 14일에 qRT-PCR(Life Technologies의 시약)을 통해 평가하였다. 약동학은 시간이 지남에 따라 전체 조직 균질액으로부터의 정량적 RT-PCR에 의해 평가하였다.
조직 병리학: 4, 7, 10 또는 14일 동안 식염수 또는 miR-29b 모방체로 치료된 알칼리 화상 각막을 포르말린 고정 및 파라핀 매립시켰다. 각막 상피 및 기질의 두께는 (Aperio ImageScope 소프트웨어를 사용하여) 헤마톡실린 및 에오신 염색된 섹션으로부터 캡처된 20x 이미지를 사용하여 평가하였고, 알파-평활근 액틴(α-SMA) 양성 근섬유아세포는 항-α-SMA 항체로 염색된 슬라이드 및 헤마톡실린 대조염색을 갖는 비색 기질로부터 정량화하였다(ImageJ 소프트웨어에서 분석 수행).
임상 평가: 10, 14, 21 또는 28일 동안 식염수 또는 miR-29b 모방체로 치료된 알칼리 화상 각막을 1-5 척도를 사용하여 각막 혼탁 또는 각막 흉터에 대해 임상적으로 평가하였고 1은 보통의 명확한 각막을 나타내었고 5는 심한 흉터 및/또는 혼탁을 갖는 각막을 나타내었다(1 = 부재, 2 = 최소, 3 = 약한, 4 = 보통, 5 = 심한).
이들 방법은 여러 연구에 걸쳐 반복되었다.
결과
1N NaOH의 투여에 의해 래트 당 하나의 눈에서 알칼리 화상이 발생되었다(도 1a). 국소적으로 도포된 FITC-miR-29b 모방체(1 mg/mL)를 알칼리 화상 래트 각막의 모든 층에 흡수시키고, 각막 기질 및 각막 내피를 가장 강하게 염색하였다(도 1b). 동일한 관점의 DAPI 핵 염색이 또한 도시된다(도 1c).
식염수 또는 miR-29b 모방체(70 mg/mL)를 각막 알칼리 화상의 생성 후 1 내지 28일 동안 국소(방울) 도포를 통해 래트에 매일 2회 투여하였다. 마지막 방울 도포 6시간 후에 눈을 채취하고 qRT-PCR에 의해 miR-29b를 정량화하였다. 내인성 miR-29b 수준은 화상 후 크게 변하지 않았다. 반대로, miR-29b 모방체 치료된 눈은 miR-29b 모방체 치료 후 miR-29b 수준의 실질적인 증가를 나타내며, 화상 생성 직후 가장 큰 흡수가 관찰되었고(내인성보다 1717배), 각막 상피의 재설정 후 적은 흡수가 관찰되었다(7일에 내인성보다 14배)(도 2a). 별도의 연구에서, 추가의 시점이 평가되었고(도 2b), 유사한 결과로 평가되었다(miR-29b 수준이 10일에 내인성 보다 11배, 28일에 내인성보다 1.7배 검출되었다).
7일째에 miR-29b 모방체 치료한 다수의 miR-29b 표적 유전자에 대해 발현 감소(p = 0.0831)가 관찰되었다(도 3a). 별도의 연구에서, 추가 시점 및 유전자가 평가되었다(도 3b-3d). 3개의 패널은 각각 7, 10 및 14일 시점의 데이터를 각각 보여준다.
손상 후 4일과 14일 사이에 채취된 각막의 조직병리학은 miR-29b 모방체가 식염수 치료된 대조군 화상 눈과 비교하여 상피 두께를 증가시키고 기질 두께를 감소시켰음을 보여주었다(도 4a-4b). 각 패널의 해시선은 정상적인 비 화상 래트 각막의 두께를 나타낸다.
알파-평활근 액틴(α-SMA)에 대한 면역조직화학 분석은 14일에 수행되었고, β-SMA 염색의 감소는 식염수 치료된 화상 눈과 비교하여 miR-29b 모방체로 치료된 화상 눈과 비교하여 관찰되었다(도 5a). 데이터는 도 5b에 그래프로 나타내어진다.
두 개별 연구에서 각막 흉터 및 혼탁을 임상적으로 평가하였고, miR-29b 모방체에 의한 치료는 두 연구 모두의 식염수 치료와 비교하여 알칼리 화상 눈에서 각막 흉터 및 혼탁의 정도를 상당히 감소시키는 것으로 밝혀졌다(도 6a 및 도 6b).
실시예 2: miR-29b 모방체의 생체분포
방법
래트 유리체내 투여: 래트를 아이소플루란 및 프로파라카인으로 마취시키고 식염수 또는 miR-29b 모방체를 유리체에 주사하였다(멸균 식염수에서 5uL, 2.5 또는 70mg/mL miR-29b 모방체). 유리체내 주사는 눈 당 1회 수행하였다.
miR-29 표적 및 miR-29b 모방체 약동학적 바이오마커(COL1A1, COL1A2, COL5A2, COL11A1, MMP2, TGFB2)의 발현은 qRT-PCR을 통해 평가하였다(Life Technologies의 시약). 약동학은 시간이 지남에 따라 전체 조직 균질액으로부터의 정량적 RT-PCR에 의해 평가하였다.
결과
FITC-miR-29b 모방체(2.5 mg/mL)를 유리체내 주사 후 RPE 층을 포함하는 랫트 망막의 모든 층에 주입하였다(도 7a 및 도 7c). 동일한 섹션의 DAPI 핵 염색이도 7b 및 도 7d에 도시되어 있다.
식염수 또는 miR-29b 모방체(70 mg/mL)를 손상되지 않은 래트 눈에 유리체내 주사하였다. 주사 적용 후 1 내지 7일 사이에 각각의 눈으로부터 망막 및 RPE/흉골/맥락막을 해부하고, qRT-PCR에 의해 miR-29b를 정량화하였다. miR-29b는 miR-29b 모방체 치료된 눈에서 매우 높은 수준으로 검출되었고(망막에서 내인성보다 13753 배, RPE/흉골/맥락막에서 내인성보다 8595배), 7일 시점까지 지속성을 갖는다(망막에서 내인성보다 1727배, RPE/흉골/맥락막에서 내인성보다 1343배)(도 8a 및 도 8b).
실시예 3 : 증식성 유리체망막병증(PVR)에 miR-29b 모방체의 주입
염색된 뉴질랜드 토끼는 결막 섬유 모세포의 유리체내 주사 후 섬유성 반응을 갖는 것으로 공지되어 있으며, 일차 망막 박리를 생성할 필요 없이 인간 증식 성 유리체망막병증을 반복한다.
방법
수컷 및 암컷 염색된 뉴질랜드 토끼(1.64-2.25kg)를 케타민/자일라진으로 마취시키고, 국소 마취를 위해 0.5% 프로파라카인 하이드로클로라이드 안과 용액을 도포하였다. 균형잡힌 염 용액(BSS)에 현탁된 100μL의 대략 5 x 10^5 토끼 결막 섬유아세포를 동물 당 하나의 눈에 유리체 속에 1회 주사하였다.
토끼를 케타민/자일라진으로 마취시키고 프로파라카인 및 BSS 또는 miR-29b 모방체를 유리체에 주사하였다(BSS에서 100 uL, 10 mg/mL miR-29b 모방체). 유리 체내 주사는 1개월 동안 주 1회 수행하였다. 공초점 현미경을 통해 FITC 표지 올리고의 흡수/분포를 평가하였다.
miR-29 표적 발현: 트라이졸(Life Technologies)을 사용하여 BSS 또는 miR-29b 모방체(10 mg/mL)로 치료된 토끼 망막으로부터 총 RNA를 추출하였다. miR-29 표적 및 miR-29b 모방체 약동학적 바이오마커(COL1A1, COL1A2, MMP2, TGFB2)의 발현은 qRT-PCR(Life Technologies의 시약)을 통해 평가하였다. 약동학은 시간이 지남에 따라 전체 조직 균질액으로부터의 정량적 RT-PCR에 의해 평가되었다.
결과
miR-29b 모방체(10 mg/mL) 또는 BSS를 토끼 결막 섬유아세포(RCF)의 동종 이식을 받은 토끼 눈에 증식성 유리체망막병증을 나타내는 유리체내 주사를 통해 매주 투여하였다. RCF 주사 1개월 후 및 마지막 주사 1주일 후에 채취된 망막으로부터 총 RNA를 단리하고, miR-29b 표적 유전자의 발현을 qRT-PCR에 의해 정량화하였다. miR-29b 모방체는 다수의 miR-29b 표적 유전자의 발현을 상당히 억제하였다(p <0.05)(도 9a).
실시예 4 : 당뇨병성 망막병증에 miR-29b 모방체의 도입
스트렙토조토신-치료된 래트는 연장된 고혈당증을 갖는 제어되지 않은 제 1 형 당뇨병을 나타내고, 약 10주의 당뇨병 후 망막에 섬유성 변화를 갖는 것으로 나타났다. 비인간 영장류와 같은 큰 동물의 사용 없이 당뇨병성 망막병증의 분자 및 조직학적 변화를 반복한다.
방법
당뇨병성 망막병증: IP 주사를 통해 65 mg/kg 스트렙토조토신을 투여함으로써 수컷 스프라그다울리 래트(251-315g)에서 당뇨병을 유도하였다. 주사 후 72시간에, 래트는 공복 혈당 수준이 >300 mg/dL인 경우 당뇨병으로 확인되었다. 래트에게 마실 0.9% 식염수, 피하액 및 동물 건강을 유지하는 데 필요한 장기 작용 인슐린을 포함하는 영양 지원을 제공하면서 혈당 수준을 350-650 mg/dL 범위로 유지하였다.당뇨병 래트를 총 11주 동안 유지시켰다.
랫트 유리체내 투여: 랫트를 아이소플루란으로 마취시키고 프로파라카인 및 식염수 또는 miR-29b 모방체를 유리체에 주사하였다(살균 식염수에서 5uL, 2.5 또는 70mg/mL miR-29b 모방체). 유리체내 주사를 3주 동안 매주 1회 눈마다 수행하였다.
miR-29 표적 발현: 트라이졸(Life Technologies)을 사용하여 BSS 또는 miR-29b 모방체(70 mg/mL)로 치료된 래트 망막으로부터 총 RNA를 추출 하였다. miR-29 표적 및 miR-29b 모방체 약동학적 바이오마커(COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A3, CTGF, MMP2, TGFB2)의 발현은 qRT-PCR(Life Technologies의 시약)을 통해 평가하였다. 약동학은 시간이 지남에 따라 전체 조직 균질액으로부터의 정량적 RT-PCR에 의해 평가하였다.
결과
miR-29b 모방체(70 mg/mL) 또는 식염수는 당뇨병성 망막병증의 모델인 고혈당증이 지속된 래트로부터 눈으로 유리체내 주사를 통해 매주 투여되었다. 당뇨병의 유도 후 11주 및 마지막 주사 후 1주에 채취된 망막으로부터 총 RNA를 단리하고, miR-29b 표적 유전자의 발현을 qRT-PCR에 의해 정량화하였다. miR-29b 모방체는 이 모델에서 다수의 miR-29b 표적 유전자의 발현을 상당히 억제하였다(p <0.001)(도 9b).
실시예 5 : 인간 망막 색소 상피(RPE) 세포에서 miR-29b 모방체의 형질감염
방법
시험관내 평가: 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 망막 색소 상피 세포(iPS-RPE, Cellular Dynamics) 및 1차 인간 RPE 세포(hRPE, Lonza)를 제조사의 지시에 따라 성장시켰다. RPE 세포를 재조합 인간 TGF-β1(TGF-β1, Peprotech)로 치료하고/하거나 Dharmafect 1 형질감염 시약을 사용하여 miR-29b 모방체로 능동적으로 형질감염시켰다. RNeasy 키트(Qiagen) 또는 트라이졸(Life Technologies)을 사용하여 TGF-1β 치료 또는 형질감염 후 48 시간에 총 RNA를 단리하고, miR-29 표적 유전자(COL1A1, COL1A2, COL3A1, FN1)의 발현은 qRT-PCR(Life Technologies의 시약)를 통해 평가하였다.
결과
TGF-β1(0.5-5 ng/mL)을 첨가하고 miR-29b 모방체(0.5-25 nM)를 iPS-RPE 세포(도 10a 및 도 10b) 또는 hRPE 세포(도 10c)에 능동적으로 형질감염시켰다. 치료 후 48시간에 전체 RNA를 추출하고, qR-PCR에 의해 miR-29b 표적 유전자의 발현을 정량화하였다. 두 세포주에서, TGF-β1 치료는 다수의 miR-29b 표적 유전자의 발현을 유의하게 상향 조절하였다. 또한, miR-29b 모방체는 TGF-β1 치료의 존재 및 부재에서 다수의 miR-29b 표적 유전자의 발현을 억제하였다.
SEQUENCE LISTING
<110> MiRagen Therapeutics, Inc.
<120> miR-29 Mimics for the Treatment of Ocular Fibrosis
<130> MIRG-059/02WO 308934-2760
<140> PCT/US2018/063458
<141> 2018-11-30
<150> US 62/593,198
<151> 2017-11-30
<150> US 62/694,936
<151> 2018-07-06
<160> 42
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 1
aacacuguuu acaaaugguc cua 23
<210> 2
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 2
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 3
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 3
uaaccgauuu cagauggugc uauu 24
<210> 4
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl uridine
<400> 4
uaaccguuua cagauggucc ua 22
<210> 5
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 5
uaaccguuua cagauggucc ua 22
<210> 6
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<400> 6
uagcaccauc ugaaaucggu uauu 24
<210> 7
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 7
uagcaccauc ugaaaucggu uauu 24
<210> 8
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 8
aacacugauu ucaaauggug cuauu 25
<210> 9
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 9
aacacugauu ucaaauggug cua 23
<210> 10
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 10
aacacugauu ucaaauggug cuauu 25
<210> 11
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 11
uaaccgauuu cagauggugc uauu 24
<210> 12
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 12
uaaccgauuu caaauggugc uauu 24
<210> 13
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<400> 13
aacacuguuu acgggugguc cua 23
<210> 14
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 14
aacacuguuu acgggugguc cua 23
<210> 15
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (13)..(13)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (14)..(14)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 15
aacacuguuu acaaaugguc cuatt 25
<210> 16
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (13)..(13)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (14)..(14)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> ribonucleotide adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> ribonucleotide guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (24)..(24)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (25)..(25)
<223> ribonucleotide adenosine
<400> 16
ttaacacugu uuacaaaugg uccua 25
<210> 17
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 9 carbon
linker
<400> 17
aacacuguuu acaaaugguc cua 23
<210> 18
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<400> 18
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 19
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 19
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 20
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 20
uagcaccacc cgaaaucagu guuuu 25
<210> 21
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<400> 21
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 22
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 22
uaaccgauuu caaauggugc uauu 24
<210> 23
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl uridine
<400> 23
uaaccguuua caaauggucc ua 22
<210> 24
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 24
uaaccguuua caaauggucc ua 22
<210> 25
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<400> 25
uagcaccauu ugaaaucggu uauu 24
<210> 26
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1)
<223> modified with a monophosphate moiety
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 26
uagcaccauu ugaaaucggu uauu 24
<210> 27
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 27
uagcaccauc ugaaaucggu uauu 24
<210> 28
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (14)..(14)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 28
aacacugauu ucaaauggug cua 23
<210> 29
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (14)..(14)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (18)..(18)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a 6 carbon
linker
<400> 29
aacacugauu ucaaauggug cuauu 25
<210> 30
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (8)..(8)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (12)..(12)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> modified with a cholesterol conjugate with a tetraethylene
glycol moiety
<400> 30
aacacuguuu acaaaugguc cua 23
<210> 31
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (13)..(13)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> O-methyl uridine
<400> 31
uagcaccauu ugaaaucagu guu 23
<210> 32
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (3)..(3)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (5)..(5)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (13)..(13)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (15)..(15)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (19)..(19)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> O-methyl guanosine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 32
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 33
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> O-methyl cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(25)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 33
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 34
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (22)..(22)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (23)..(23)
<223> fluoro uridine
<400> 34
uagcaccauu ugaaaucagu guu 23
<210> 35
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic first-antisense-guide strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (4)..(4)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (6)..(6)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (7)..(7)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (9)..(9)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (10)..(10)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (11)..(11)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (16)..(16)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (17)..(17)
<223> fluoro cytidine
<220>
<221> modified_base
<222> (20)..(20)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (21)..(21)
<223> fluoro uridine
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(24)
<223> joined through phosphorothioate bonds
<400> 35
uagcaccauu ugaaaucggu uauu 24
<210> 36
<400> 36
000
<210> 37
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 37
uaaccgauuu cagauggugc ua 22
<210> 38
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29a mimic first-antisense-guide strand
<400> 38
uagcaccauc ugaaaucggu uauu 24
<210> 39
<211> 23
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl adenosine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 39
aacacugauu ucaaauggug cua 23
<210> 40
<211> 25
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29b mimic first-antisense-guide strand
<400> 40
uagcaccauu ugaaaucagu guuuu 25
<210> 41
<211> 22
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic second-sense-passenger strand
<220>
<221> modified_base
<222> (1)..(1)
<223> O-methyl uridine
<220>
<221> modified_base
<222> (2)..(2)
<223> O-methyl adenosine
<400> 41
uaaccgauuu caaauggugc ua 22
<210> 42
<211> 24
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> miR-29c mimic first-antisense-guide strand
<400> 42
uagcaccauu ugaaaucggu uauu 24
Claims (41)
- 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 대상의 안구 섬유증의 치료 방법으로서, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개의 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며,
여기서, 안구 섬유증은 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증, 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항에 있어서,
안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 안구 질환 또는 장애로부터 발생되는 것인 방법. - 대상에게 치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물을 투여하는 단계를 포함하여, 대상에서 안구 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 여기서 miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29a, miR-29b 또는 miR-29c 서열을 포함하는 23개 내지 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 22개 내지 23개의 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며,
여기서 안구 질환 또는 장애는 당뇨병성 망막병증, 박테리아 감염, 바이러스 감염, 진균 감염, 아메바 감염, 안구 외상, 화학적 각막 화상, 열 각막 화상, 익상편, 녹내장, 외과적 외상, 푹스 내피 각막 이영양증(FECD) 및 전방 증식성 유리체망막병증(전방 PVR)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것인 방법. - 제 3 항에 있어서,
안구 질환 또는 장애는 망막 섬유증, 각막 섬유증, 결막 섬유증 또는 섬유주대의 섬유증을 포함하는 그룹으로부터 선택된 안구 섬유증을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 이온삼투법, 결막하 주사, 익상편내 주사, 섬유주 수포의 부위에서의 주사, 건하 주사, 유리체내 주사, 전방내 또는 국소를 통해 투여되는 것인 방법. - 제 1 항, 제 2 항 및 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 증식성 유리체망막병증을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항, 제 2 항 및 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 섬유증을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항, 제 2 항 및 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 항-VEGF 치료와 관련된 망막 섬유증을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항, 제 2 항 및 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 각막 혼탁 또는 각막 흉터 형성을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 각막 화상으로부터 발생하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 익상편으로부터 발생하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 푹스 내피 각막 이영양증(FECD)으로부터 발생하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 녹내장으로부터 발생하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
안구 섬유증은 섬유주 수포를 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 각막에 국소적으로 투여되는 것인 방법. - 제 15 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 각막에 국소적으로 투여되는 것인 방법. - 제 15 항 또는 제 16 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 매일 1회, 매일 2회, 매일 3회, 또는 매일 4회 각막에 국소적으로 투여되는 것인 방법. - 제 15 항 또는 제 16 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 최대 1주, 2주, 3주, 4주 또는 28일 동안 주기적으로 국소적으로 투여되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 점적 제제로 투여되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 매주 1회 유리체내 주사를 통해 투여되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은 1개월 동안 주기적으로 유리체내 주사를 통해 투여되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
COL1A1, COL1A2, COL3A1, COL4A3, COL5A2, COL11A1, FN1, MMP2, CTGF, TGFB2 및/또는 TGFB3의 발현이 감소되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물이 표 2에 제시되어 있는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 또는 31-34로부터 선택된 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 1, 8-10, 13-17 또는 28-30에서 선택된 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥을 포함하고, 여기서 제 1 가닥은 SEQ ID NO: 2, 18-21 및 31-34로부터 선택된 서열을 포함한다; 및
(b) 약 22개 내지 약 25개 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥은 제 1 가닥과 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가진 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물은
(a) 성숙한 miR-29b 서열을 포함하는 약 23개 내지 약 26개의 리보뉴클레오타이드의 제 1 가닥; 및
(b) 제 1 가닥에 실질적으로 상보적이고 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 갖는 서열을 포함하는 약 22개 내지 약 25개의 리보뉴클레오타이드의 제 2 가닥을 포함하며, 여기서 제 1 가닥은 제 2 가닥에 비해 3' 뉴클레오타이드 오버행을 가지며, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1, 8-10, 13-17 및 28-30으로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 1의 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 SEQ ID NO: 19의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 15의 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 성숙한 miR-29a 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물이 표 1에 제시되어 있는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 SEQ ID NO: 6, 7 또는 27의 서열을 포함하고 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 3-5 또는 11로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 성숙한 miR-29c 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
miR-29 모방체 화합물이 표 3에 제시되어 있는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
제 1 가닥은 SEQ ID NO: 25, 26 또는 35의 서열을 포함하고, 제 2 가닥은 SEQ ID NO: 22-24 또는 12로부터 선택된 서열을 포함하는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
치료적 유효량의 miR-29 모방체 화합물은 약학적 조성물에 포함되는 것인 방법. - 제 1 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,
대상은 인간인 방법. - 제 36 항에 있어서,
대상은 당뇨병을 앓고 있는 것인 방법. - 제 36 항 또는 제 37 항에 있어서,
대상은 당뇨병성 망막병증을 앓고 있는 것인 방법. - 제 36 항 또는 제 37 항에 있어서,
대상은 연령 관련 황반 변성(AMD)을 앓고 있는 것인 방법. - 제 39 항에 있어서,
대상은 습식 연령 관련 황반 변성(습식 AMD)을 앓고 있는 것인 방법. - 제 38 항에 있어서,
대상은 항-VEGF 치료제를 투여 받는 것인 방법.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762593198P | 2017-11-30 | 2017-11-30 | |
| US62/593,198 | 2017-11-30 | ||
| US201862694936P | 2018-07-06 | 2018-07-06 | |
| US62/694,936 | 2018-07-06 | ||
| PCT/US2018/063458 WO2019109026A1 (en) | 2017-11-30 | 2018-11-30 | miR29 MIMICS FOR THE TREATMENT OF OCULAR FIBROSIS |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20200093611A true KR20200093611A (ko) | 2020-08-05 |
Family
ID=66664254
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020207018475A KR20200093611A (ko) | 2017-11-30 | 2018-11-30 | 안구 섬유증의 치료를 위한 miR29 모방체 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20200376019A1 (ko) |
| EP (1) | EP3717647A4 (ko) |
| JP (1) | JP2021505544A (ko) |
| KR (1) | KR20200093611A (ko) |
| CN (1) | CN111433362A (ko) |
| AU (1) | AU2018375822A1 (ko) |
| CA (1) | CA3083279A1 (ko) |
| MX (1) | MX2020005603A (ko) |
| WO (1) | WO2019109026A1 (ko) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021173712A1 (en) * | 2020-02-24 | 2021-09-02 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Molecular biomarkers and targets for fuchs' endothelial corneal dystrophy and glaucoma |
| CN114517198B (zh) * | 2022-03-09 | 2023-06-16 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种半滑舌鳎miRNA及其在调控tgfb2基因表达中的应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105030808B (zh) * | 2007-07-31 | 2018-12-14 | 得克萨斯系统大学董事会 | 调控纤维化的微小rna家族及其用途 |
| EP3214174B1 (en) * | 2010-03-04 | 2019-10-16 | InteRNA Technologies B.V. | A mirna molecule defined by its source and its diagnostic and therapeutic uses in diseases or conditions associated with emt |
| WO2012078558A2 (en) * | 2010-12-06 | 2012-06-14 | Rush University Medical Center | microRNAs AS NEW THERAPEUTIC TARGETS FOR THE PREVENTION AND/OR TREATMENT OF RETINOPATHY |
| JP6837963B2 (ja) * | 2014-09-08 | 2021-03-03 | ミラゲン セラピューティクス， インコーポレイテッド | Ｍｉｒ−２９模倣物およびその使用 |
| US20180099004A1 (en) * | 2015-04-17 | 2018-04-12 | The University Of Tokyo | Therapeutic agent for eye disease |
| CN106390123B (zh) * | 2016-09-18 | 2019-02-19 | 中国人民解放军第二军医大学 | miR-29及其抑制剂在制备抗器官移植排斥药物中的应用 |
-
2018
- 2018-11-30 US US16/768,514 patent/US20200376019A1/en not_active Abandoned
- 2018-11-30 JP JP2020529327A patent/JP2021505544A/ja active Pending
- 2018-11-30 WO PCT/US2018/063458 patent/WO2019109026A1/en unknown
- 2018-11-30 CA CA3083279A patent/CA3083279A1/en not_active Abandoned
- 2018-11-30 KR KR1020207018475A patent/KR20200093611A/ko unknown
- 2018-11-30 CN CN201880077550.XA patent/CN111433362A/zh active Pending
- 2018-11-30 AU AU2018375822A patent/AU2018375822A1/en not_active Abandoned
- 2018-11-30 EP EP18884439.3A patent/EP3717647A4/en not_active Withdrawn
- 2018-11-30 MX MX2020005603A patent/MX2020005603A/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3083279A1 (en) | 2019-06-06 |
| MX2020005603A (es) | 2020-09-25 |
| AU2018375822A1 (en) | 2020-06-04 |
| WO2019109026A1 (en) | 2019-06-06 |
| CN111433362A (zh) | 2020-07-17 |
| EP3717647A1 (en) | 2020-10-07 |
| EP3717647A4 (en) | 2021-10-06 |
| JP2021505544A (ja) | 2021-02-18 |
| US20200376019A1 (en) | 2020-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10308943B2 (en) | Compositions with improved intravitreal half-life and uses thereof | |
| CN114010788A (zh) | 通道调节剂 | |
| CN103200945A (zh) | 眼部症候中的rna干扰 | |
| RU2718984C2 (ru) | Одноцепочечная молекула нуклеиновой кислоты, ингибирующая экспрессию гена проренина или гена рецептора проренина, и ее применение | |
| US20230295629A1 (en) | Anti-c9orf72 oligonucleotides and related methods | |
| CA3176418A1 (en) | Rnai agents for inhibiting expression of pnpla3, pharmaceutical compositions thereof, and methods of use | |
| KR20200093611A (ko) | 안구 섬유증의 치료를 위한 miR29 모방체 | |
| JP2010511692A (ja) | イオントフォレシスを通じての核酸の強化された網膜送達 | |
| US20130028889A1 (en) | Dosing regimens for treating and preventing ocular disorders using c-raf antisense | |
| WO2019143831A1 (en) | Compositions and methods for increasing expression of scn2a | |
| ES2877411T3 (es) | Composición antisentido de microARN-328 y uso terapéutico | |
| US8729042B2 (en) | Treating ocular diseases using peroxisome proliferator—activated receptor delta antagonists | |
| KR20210088446A (ko) | 세포 투과성 핵산 복합체를 유효성분으로 함유하는 황반변성의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| CN108721315B (zh) | 小分子核酸miR-21在治疗青光眼中的应用 | |
| ES2750125T3 (es) | ARNip y su uso en métodos y composiciones para el tratamiento y/o la prevención de afecciones oculares | |
| EP1827602B1 (en) | Modulating retinal pigmented epithelium permeaion by inhibiting vegfr-1 | |
| EP4088742A2 (en) | Composition for preventing or treating macular degeneration, containing cell permeable nucleic acid complex as active ingredient | |
| KR20220048954A (ko) | Acta2 억제제를 유효성분으로 포함하는 망막 또는 맥락막 질환 치료용 조성물 | |
| AU721060B2 (en) | Hyaluronic acid as DNA carrier for gene therapy and VEGF antisense DNA to treat abnormal retinal vascularization |