KR20200085375A - 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 - Google Patents
락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20200085375A KR20200085375A KR1020207019514A KR20207019514A KR20200085375A KR 20200085375 A KR20200085375 A KR 20200085375A KR 1020207019514 A KR1020207019514 A KR 1020207019514A KR 20207019514 A KR20207019514 A KR 20207019514A KR 20200085375 A KR20200085375 A KR 20200085375A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- beta
- casein
- milk
- weight
- composition
- Prior art date
Links
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 title claims abstract description 164
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 title claims abstract description 164
- 235000021247 β-casein Nutrition 0.000 title claims abstract description 153
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 title claims abstract description 46
- 201000010538 Lactose Intolerance Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 43
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 40
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 27
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 68
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 68
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 67
- 108010020546 beta-casomorphin 7 Proteins 0.000 claims description 51
- RKYJTDSQXOMDAD-JKXTZXEVSA-N (2s,3s)-2-[[(2s)-1-[2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylpentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H]1N(C(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CC=2C=CC(O)=CC=2)CCC1 RKYJTDSQXOMDAD-JKXTZXEVSA-N 0.000 claims description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 24
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 18
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 13
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000008995 epigenetic change Effects 0.000 claims description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 7
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 7
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 6
- -1 OOKBR Proteins 0.000 claims description 6
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 6
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 claims description 4
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 claims description 4
- 208000019790 abdominal distention Diseases 0.000 claims description 4
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 claims description 4
- 230000008693 nausea Effects 0.000 claims description 4
- 235000020200 pasteurised milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 claims description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 3
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 claims description 3
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 3
- 102100026349 Beta-1,4-galactosyltransferase 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100026348 Beta-1,4-galactosyltransferase 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100036291 Galactose-1-phosphate uridylyltransferase Human genes 0.000 claims description 2
- 102100028447 Galanin receptor type 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100036584 Galanin receptor type 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100024632 Galectin-12 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100035965 Gastrokine-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 101000766145 Homo sapiens Beta-1,4-galactosyltransferase 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000766130 Homo sapiens Beta-1,4-galactosyltransferase 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001021379 Homo sapiens Galactose-1-phosphate uridylyltransferase Proteins 0.000 claims description 2
- 101001061554 Homo sapiens Galanin receptor type 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001072780 Homo sapiens Galanin receptor type 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001051083 Homo sapiens Galectin-12 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001075218 Homo sapiens Gastrokine-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001024872 Homo sapiens N-acetylgalactosamine kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100037774 N-acetylgalactosamine kinase Human genes 0.000 claims description 2
- 235000020186 condensed milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 claims description 2
- 235000020603 homogenised milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 108010003133 Aldo-Keto Reductase Family 1 Member C2 Proteins 0.000 claims 1
- 102100026446 Aldo-keto reductase family 1 member C1 Human genes 0.000 claims 1
- 102100024089 Aldo-keto reductase family 1 member C2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100033770 Alpha-amylase 1C Human genes 0.000 claims 1
- 102100030003 Calpain-9 Human genes 0.000 claims 1
- 102100038782 Carbohydrate sulfotransferase 1 Human genes 0.000 claims 1
- 102100032215 Cathepsin E Human genes 0.000 claims 1
- 102100039501 Chymotrypsinogen B Human genes 0.000 claims 1
- 102100039514 Chymotrypsinogen B2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100030875 Gastricsin Human genes 0.000 claims 1
- 102000017679 HTR3A Human genes 0.000 claims 1
- 101000761343 Homo sapiens 5-hydroxytryptamine receptor 3A Proteins 0.000 claims 1
- 101000718028 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000779869 Homo sapiens Alpha-amylase 1C Proteins 0.000 claims 1
- 101000793680 Homo sapiens Calpain-9 Proteins 0.000 claims 1
- 101000883008 Homo sapiens Carbohydrate sulfotransferase 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000869031 Homo sapiens Cathepsin E Proteins 0.000 claims 1
- 101000889273 Homo sapiens Chymotrypsinogen B Proteins 0.000 claims 1
- 101000889299 Homo sapiens Chymotrypsinogen B2 Proteins 0.000 claims 1
- 101000991618 Homo sapiens Meprin A subunit beta Proteins 0.000 claims 1
- 101001132878 Homo sapiens Motilin receptor Proteins 0.000 claims 1
- 101000986765 Homo sapiens Oxytocin receptor Proteins 0.000 claims 1
- 101000631701 Homo sapiens Secretin receptor Proteins 0.000 claims 1
- 101000585365 Homo sapiens Sulfotransferase 2A1 Proteins 0.000 claims 1
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 claims 1
- 102100030876 Meprin A subunit beta Human genes 0.000 claims 1
- 102100033818 Motilin receptor Human genes 0.000 claims 1
- 102100028139 Oxytocin receptor Human genes 0.000 claims 1
- 102000046014 Peptide Transporter 1 Human genes 0.000 claims 1
- 102100029909 Peptide YY Human genes 0.000 claims 1
- 108010088847 Peptide YY Proteins 0.000 claims 1
- 101150104557 Ppargc1a gene Proteins 0.000 claims 1
- 102100028427 Pro-neuropeptide Y Human genes 0.000 claims 1
- 101710191567 Probable endopolygalacturonase C Proteins 0.000 claims 1
- 108091006594 SLC15A1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100028927 Secretin receptor Human genes 0.000 claims 1
- 102100029867 Sulfotransferase 2A1 Human genes 0.000 claims 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 claims 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 abstract description 47
- 239000008101 lactose Substances 0.000 abstract description 47
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 abstract description 13
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 45
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 42
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 description 26
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 26
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 22
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 22
- 102100040402 Phlorizin hydrolase Human genes 0.000 description 21
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 description 21
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 18
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 13
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 9
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 9
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 description 8
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 7
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 7
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N S-adenosyl-L-methioninate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H](N)C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N 0.000 description 7
- 229960001570 ademetionine Drugs 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 235000020940 control diet Nutrition 0.000 description 7
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 7
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 6
- 230000007661 gastrointestinal function Effects 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000007067 DNA methylation Effects 0.000 description 5
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 102000003840 Opioid Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108090000137 Opioid Receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 4
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 3
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 3
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 235000016046 other dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical group CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 101001122476 Homo sapiens Mu-type opioid receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102100028647 Mu-type opioid receptor Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 229910010413 TiO 2 Inorganic materials 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- AFYNADDZULBEJA-UHFFFAOYSA-N bicinchoninic acid Chemical compound C1=CC=CC2=NC(C=3C=C(C4=CC=CC=C4N=3)C(=O)O)=CC(C(O)=O)=C21 AFYNADDZULBEJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 235000021045 dietary change Nutrition 0.000 description 2
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 2
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 2
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 235000006486 human diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037041 intracellular level Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 102000051367 mu Opioid Receptors Human genes 0.000 description 2
- 239000002623 mu opiate receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000003843 mucus production Effects 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960004127 naloxone Drugs 0.000 description 2
- UZHSEJADLWPNLE-GRGSLBFTSA-N naloxone Chemical compound O=C([C@@H]1O2)CC[C@@]3(O)[C@H]4CC5=CC=C(O)C2=C5[C@@]13CCN4CC=C UZHSEJADLWPNLE-GRGSLBFTSA-N 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 2
- 235000020245 plant milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 108020001612 μ-opioid receptors Proteins 0.000 description 2
- CENQCEJVMTZQSP-IDNNGIEASA-N (2s,3r)-2-[[(2s)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-hydro Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)C(C)(C)S)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 CENQCEJVMTZQSP-IDNNGIEASA-N 0.000 description 1
- OFMQLVRLOGHAJI-FGHAYEPSSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-n-[(2s,3r)-1-amino-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-10-[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-3,3-dimethyl-6,9,12,15,18 Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C(SSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 OFMQLVRLOGHAJI-FGHAYEPSSA-N 0.000 description 1
- 229940015297 1-octanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- VLEIUWBSEKKKFX-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O VLEIUWBSEKKKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 52906-92-0 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 1
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001982 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 102100025841 Cholecystokinin Human genes 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000008836 DNA modification Effects 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 101150112472 LCT gene Proteins 0.000 description 1
- 101150082766 MPO gene Proteins 0.000 description 1
- 101800002372 Motilin Proteins 0.000 description 1
- 102000002419 Motilin Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 1
- 229940123257 Opioid receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- ZYFVNVRFVHJEIU-UHFFFAOYSA-N PicoGreen Chemical compound CN(C)CCCN(CCCN(C)C)C1=CC(=CC2=[N+](C3=CC=CC=C3S2)C)C2=CC=CC=C2N1C1=CC=CC=C1 ZYFVNVRFVHJEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100244562 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) oprD gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N SYBR Green I Chemical compound CN(C)CCCN(CCC)C1=CC(C=C2N(C3=CC=CC=C3S2)C)=C2C=CC=CC2=[N+]1C1=CC=CC=C1 CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 240000001085 Trapa natans Species 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 235000020194 almond milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940107137 cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 231100000762 chronic effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 235000020197 coconut milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 108700023159 delta Opioid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000048124 delta Opioid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000000857 delta opiate receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000018823 dietary intake Nutrition 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000002828 effect on organs or tissue Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007160 gastrointestinal dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229940045883 glutathione disulfide Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000036433 growing body Effects 0.000 description 1
- 235000020196 hemp milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000003050 macronutrient Effects 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- WUOSYUHCXLQPQJ-UHFFFAOYSA-N n-(3-chlorophenyl)-n-methylacetamide Chemical compound CC(=O)N(C)C1=CC=CC(Cl)=C1 WUOSYUHCXLQPQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000020262 oat milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 229940127240 opiate Drugs 0.000 description 1
- 239000003401 opiate antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000003068 pathway analysis Methods 0.000 description 1
- 235000020265 peanut milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001012 protector Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010408 sweeping Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
- A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/40—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for carnivorous animals, e.g. cats or dogs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/19—Dairy proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Birds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Confectionery (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
본 발명은 베타-카세인을 함유하는 조성물의 동물에 의한 소비를 포함하거나, 상기 조성물을 소비를 위해 동물에 제공하는, 동물에서의 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키는 것에 관한 것으로, 베타-카세인은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다. 효과를 급성(조성물에 대한 노출후) 및 진행성(락토스에 대한 이후의 노출) 둘 모두이다.
Description
기술 분야
본 발명은 락토스 불내증(lactose intolerance)의 증상을 감소시키거나 예방하기 위한 밀크 단백질 베타-카세인 A2의 용도에 관한 것이다. 상세하게는, 본 발명은 밀크 및 밀크 유래 식품에 관한 것이다. 본 출원인은 높은 수준의 단백질 베타-카세인 A2를 함유하는 밀크 및 유제품의 소비 및 베타-카세인 A1을 함유하는 밀크 및 유제품의 회피가 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는데 이로운 것을 발견하였다. 특히, 이로운 효과는 즉시적(급성)이며, 락토스에 대한 이후의 노출시 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키는 진행성(베타-카세인 A1에 대한 노출 후) 소인을 추가로 유도한다.
발명의 배경
락토스 불내증은 일반적으로 손상된 락토스를 소화하는 능력을 나타낸다. 락토스는 갈락토스 및 글루코스 단당류를 포함하는 이당류 탄수화물이다. 락토스는 밀크 및 밀크-유래 낙농 제품에서 발견된다. 인간 밀크는 약 9% 락토스를 포함하는 반면, 가공되지 않은 우유는 약 4.7%의 락토스를 포함한다. 염소, 버팔로 및 양으로부터의 밀크는 또한 4.5-5.0% 범위의 락토스를 함유한다. 락토스의 소화는 락타제 효소에 의한 락토스의 갈락토스 및 글루코스로의 가수분해(또는 분리)이다.
락토스 불내성인 사람은 이들의 소화계에서 충분한 수준의 락타제가 결핍되어 있다. 락토스는 소장벽을 통해 혈류로 흡수될 수 없고, 따라서 락타제에 의해 분해되지 않는 경우, 온전하게 결장으로 통과한다. 결장에서의 락토스의 박테리아 발효는 대량의 가스를 발생시킨다. 추가로, 흡수되지 않은 탄수화물 및 발효 생성물은 결장의 삼투압을 상승시키고, 이는 장으로의 물의 증가된 유동을 야기시킨다. 따라서, 락토스 불내증은 복부 팽창 및 경련, 고창(flatulence), 설사, 구역, 소리나는 위(rumbling stomach), 또는 심지어 구토를 포함하는 다양한 증상을 야기시킬 수 있다. 이들 증상은 일반적으로 락토스의 소비 약 30분 내지 2시간 후에 발생한다.
조기 유아 포유동물은 락타제를 생성시키나, 이러한 생성은 일반적으로 이유(weaning) 후에 중지된다. 그러나, 일부 인간 집단은 락타제 생성이 성인기까지 지속되는 락타제 지속성(lactase persistence)이 발달하였다. 다양한 집단에서의 락타제 지속성의 단계는 낙농 제품이 식품원으로서 이용가능한 문화를 선호하는 집단의 자연 선택의 결과인 것으로 생각된다.
락토스 불내증은 용인될 수 있는 락토스의 양이 사람마다 다양하다는 점에서 절대적이지 않다. 일반적으로, 락토스 불내성인 사람은 시행착오에 의해 얼마나 많은 락토스를 이들이 용인할 수 있는지 결정되어야 한다. 이는 보통 식이 락토스의 수준을 조절하거나, 식이 락토스를 전부 회피함으로써 수행된다. 일부 경우에서, 효소적 락타제 보충이 이용될 수 있다. 식물-기반 밀크 또는 밀크 유도체, 예를 들어, 두유, 현미유, 아몬드 밀크, 코코넛 밀크, 오트 밀크(oat milk), 헴프 밀크(hemp milk) 및 땅콩 밀크가 사용될 수 있는데, 이는 이들이 본질적으로 락토스를 비함유하기 때문이다. 또한, 이용가능한 많은 락토스 비함유 또는 락토스 감소된 식품이 존재한다. 상기 식품의 이용가능성에도 불구하고, 식이에서의 밀크 또는 낙농 제품의 회피는 종종 어렵다.
밀크(및 다른 낙농 제품)의 소비와 락토스 불내증의 증상 사이의 연관성은 널리 공지되어 있다. 그러나, 락토스 불내증에 특이적인 의학적 진단의 부재하에서, 많은 사람은 자신이 락토스 불내성인 것으로 잘못 생각하는데, 이는 이들이 경험한 증상과 밀크 또는 다른 낙농 제품의 소비를 연관시키기 때문이다. 상기 증상은 사실 달리 무시할 만하거나 눈에 띄지 않을 효과를 악화시키는 다른 밀크 성분으로 인한 것일 수 있다. 단백질은 상기 증상을 야기시키거나 악화시킬 수 있는 성분의 한 예이다.
전세계 집단에서 소비되는 밀크, 주로 우유는 인간 식이에서 단백질의 주요 공급원이다. 우유는 통상적으로 리터 당 약 30 그램의 단백질을 포함한다. 카세인은 단백질의 가장 큰 구성요소를 차지하고(80%), 베타-카세인은 카세인의 약 37%를 차지한다. 지난 20년간, 많은 건강 장애는 카세인 단백질, 특히 베타-카세인과 관련이 있다는 증거의 실체가 점점 커져 왔다.
베타-카세인은 베타-카세인 A1 및 베타-카세인 A2로 분류될 수 있다. 이러한 2개의 단백질은 대부분의 인간 집단에서 소비되는 밀크 중의 우세한 베타-카세인이다. 베타-카세인 A1은 단일 아미노산이 베타-카세인 A2와 상이하다. 히스티딘 아미노산이 베타-카세인 A1의 209개 아미노산 서열의 위치 67에 위치하는 반면, 베타-카세인 A2의 동일한 위치에는 프롤린이 위치한다. 그러나, 이러한 단일 아미노산 차이는 장에서 베타-카세인들의 효소적 소화에 매우 중요하다. 위치 67에서의 히스티딘의 존재는 베타-카소모르핀-7(BCM-7)로 공지된, 7개의 아미노산을 포함하는 단백질 단편이 효소적 소화시에 생성되는 것을 허용한다. 따라서, BCM-7은 베타-카세인 A1의 소화 생성물이다. 베타-카세인 A2의 경우에, 위치 67은 그 위치에서 아미노산 결합의 절단을 방해하는 프롤린이 차지하고 있다. 따라서, BCM-7은 베타-카세인 A2의 소화 생성물이 아니다.
베타-카세인 B 및 베타-카세인 C와 같은 다른 베타-카세인 변이체도 위치 67에 히스티딘을 갖고, A3, D 및 E와 같은 다른 변이체는 위치 67에 프롤린을 갖는다. 그러나, 이러한 변이체들은 유럽 원산지의 젖소로부터의 우유에서, 매우 낮은 수준으로만 발견되거나, 전혀 발견되지 않는다. 따라서, 본 발명의 상황에서, 용어 베타-카세인 A1은 위치 67에 히스티딘을 갖는 임의의 베타-카세인을 나타내고, 용어 베타-카세인 A2는 위치 67에 프롤린을 갖는 임의의 베타-카세인을 나타낸다.
BCM-7은 아편유사제 펩티드이고, 신체 전체에 걸쳐 아편유사제 수용체를 강력하게 활성화시킬 수 있다. BCM-7은 위장 벽을 건너 순환으로 진입하는 능력을 지녀서 아편유사제 수용체를 통해 전신 및 세포 활성에 영향을 미칠 수 있다. 본 출원인 등은 밀크 및 유제품 중의 베타-카세인 A1의 소비와 타입 I 당뇨병(WO 1996/014577), 관상동맥 심질환(WO 1996/036239) 및 신경 질환(WO 2002/019832)을 포함하는 특정한 건강 질환의 발병률 사이의 연관성을 이전에 확인하였다.
또한 BCM-7이 소화 기능에 영향을 줄 수 있다는 의견이 있었다. 아편유사제 수용체는 위장 운동, 점액 생산 및 호르몬 생산을 조절하는 것을 포함하여, 위장 기능 조절에서 역할을 담당하는 것으로 보고되었다(예를 들어, 문헌[Mihatsch, W.A, et al., Biol . Neonate, 2005, 87(3):160-3]). 밀크에서 발견된 카세인은 장 운동을 억제하는 것과 관련되어, 변비를 발생시킬 수 있는 것으로 여겨지고(Gunn T.R. and Stunzer D., NZ Med . J., 1986, 99(813):843-6), 카소모르핀 및 합성 카소모르핀 유도체에 대한 연구는 BCM-7이 이러한 아편유사제 수용체 매개 효과에 기여함을 나타낸다(Charlin V. et al., Rev. Med. Chil., 1992, 120(6):666-9). 그러나, 카소모르핀 및 장에서의 통과 시간 사이의 연관성에 대한 일부 시험관내 증거가 존재하지만, 그 효과로부터 반드시 인간에서의 생체내 효과를 추정할 수 있는 것은 아님이 명백하다. 예를 들어, 적어도 한 연구는 베타-카세인 A1 또는 베타-카세인 A2 소비와 변비 사이의 관계를 입증하는데 실패하였다(Crowley, E.T., Nutrients, 2013, 5, 253-266). 또한, BCM-7은 mu-오피에이트 수용체 매개 경로를 통해 점액의 생산을 자극하고(Zoghbi, S., Am. J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol., 2006, 290(6):G1105-13), 면역계와 관련된 세포인 점막 고유층(lamina propia) 림프구의 증식을 조절하는 것으로 나타났다(Elitsur, Y. and Luk, G.D., Clin. Exp . Immunol., 1991, 85(3):493-7). 더욱 최근에, 베타-카세인 A1은 위장관 내의 조직의 염증을 야기시키는 것으로 보고되었다(Ul Haq, M.R., et al., Eur . J. Nutr., 2013; Barnett, M.P.G., et al., Int . J. Food Sci . Nutr., 2014). 베타-카세인 A1 유래 BCM-7에 의해 유도된 염증은 병에 걸린 조직의 후생유전학적 DNA 변형 및 이후의 유전자 발현에 대한 하류 효과를 갖는 것이 입증되었다(Trivedi, M.S., et al., J. Nut. Bio., 2014).
상기 보고는 카세인 및 카소모르핀(BCM-7 포함)과 위장 기능 사이의 연관성을 나타낸다. 이러한 보고는 일반적으로 유단백질 또는 카세인을 이용한 연구 또는 BCM-7 자체를 이용한 연구에 기반한다. 그러나, 지금까지, 베타-카세인 A1의 소비를 위장 기능 및 상세하게는 락토스 불내증의 증상과 직접 연관시킨 보고는 없었다. 또한, 베타-카세인 A2가 높은 밀크(및 거꾸로 베타-카세인 A1은 낮음)를 마신 후 위장 기능에서의 개선으로 언급되는 공지되지 않거나 확인되지 않은 상태를 갖는 소비자로부터의 입증되지 않은 보고(온라인 및 매체)가 있었으나, 이것은 비과학적인 보고이며 이들은 기능에서의 어떤 개선의 원인에 관해 비특이적이다. 또한, 그러한 밀크의 소비시에 어떤 개선 효과도 없는 많은 입증되지 않은 보고도 있다. 이러한 보고는 이들이 변비로부터 설사까지, 운동의 연속 소화 효과 및 변의 굳기에 걸친 보고를 포함한다는 점에서 상충된다. 상세하게는 잠재적으로 결과에 영향을 줄 수 있는 변수의 수가 매우 많은 식품 및 생리학적 기능의 경우에, 입증되지 않은 보고를 신뢰하여 결론을 내릴 수 없다.
본 출원인은 이제 베타-카세인 A1의 소비와 락토스 불내증의 증상 사이의 직집적인 연관성에 대한 확실한 과학적 증거를 발견하였다. 장 건강에 영향을 미칠 수 있고, 밀크 및 유제품이 매우 다양한 단백질 성분 및 다른 성분을 함유하는 인간 식이에서의 많은 요인을 고려해 볼 때, 본 출원인의 베타-카세인 A1 소비와 락토스 불내증의 증상 사이의 명백한 직접적 관련의 발견은 놀라운 일이다. 중요하게는, 본 출원인은 베타-카세인 A1의 소비에 대한 급성 및 요망되지 않은 반응뿐만 아니라 베타-카세인 A1의 소비 및 결과로서 발생하는 BCM-7의 생성에서의 진행성(베타-카세인 A1 또는 BCM-7에 대한 노출 후) 반응이 동물에서 유전적 변화를 유도할 수 있고, 이는 낮은 수준의 락타제 및 결과로서 락토스에 대한 이후의 노출시의 락토스 불내증의 증상을 야기시킬 가능성의 증가를 초래할 수 있다는 증거를 발견하였다.
따라서, 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하기 위한 방법을 제공하거나, 적어도 현존하는 방법에 유용한 대안을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.
발명의 개요
본 발명의 첫번째 양태에서, 동물에서 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키기 위한 조성물의 용도가 제공되며, 조성물은 베타-카세인을 함유하고, 베타-카세인은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다.
본 발명의 두번째 양태에서, 동물에서 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키기 위한 조성물이 제공되며, 조성물은 베타-카세인을 함유하고, 베타-카세인은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 동물에서 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키기 위한 조성물의 제조에서 밀크의 용도가 제공되며, 밀크는 베타-카세인을 함유하고, 베타-카세인은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다.
또 다른 양태에서, 동물에서 락토스 불내증이 증상을 예방하거나 감소시키기 위한 조성물의 제조에서 베타-카세인 A2의 용도가 제공되며, 조성물은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다. 베타-카세인 A2는 바람직하게는 밀크의 성분이다. 밀크는 바람직하게는 우유이다.
본 발명의 추가 양태에서, 베타-카세인을 함유하는 조성물의 동물에 의한 소비를 포함하거나, 상기 조성물을 소비를 위해 동물에게 제공하는, 동물에서 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키는 방법이 제공되며, 베타-카세인은 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함한다.
베타-카세인 A2의 양은 75 중량% 내지 100 중량%의 베타-카세인, 예를 들어, 적어도 90 중량% 또는 심지어 100 중량%의 베타-카세인의 범위의 임의의 양일 수 있다.
본 발명의 특정 구체예에서, 조성물은 밀크 또는 유제품이다. 밀크는 분유 또는 액상유일 수 있다. 유제품은 크림, 요구르트, 쿼크(quark), 치즈, 버터, 아이스크림, 또는 임의의 다른 유제품일 수 있다.
락토스 불내증의 증상은 복부 팽창 및 경련, 고창, 설사, 구역, 소리나는 위(rumbling stomach), 및 구토일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
동물에 의한 조성물의 소비에 대한 반응은 급성 반응일 수 있고, 또한 동물에서 락토스에 대한 이후의 노출시 락토스 불내증의 증상을 예방하거나 감소시키는 소인을 유도할 수 있다.
본 발명의 대부분의 구체예에서, 동물은 인간이다. 그러나, 다른 구체예에서, 동물은 개, 고양이, 또는 사료에 밀크가 보충되는 임의의 다른 애완 동물일 수 있다.
도면의 간단한 설명
도 1은 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 위장 통과 시간을 제시한다.
도 2는 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 십이지장 락타제 활성을 제시한다.
도 3은 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 결장 골수세포형과산화효소 활성을 제시한다.
도 4는 뉴런 세포 및 GI 상피 세포에서의 시스테인의 모르핀 및 BCM-7 농도 의존성 흡수를 제시한다.
도 5는 뉴런 세포 및 GI 상피 세포에서의 시스테인의 시간-의존성 흡수를 제시한다.
도 6은 시스테인 흡수에 대한 BCM-7 및 모르핀의 효과를 매개하는데 있어서의 μ-아편유사제 수용체의 관련성을 제시한다.
도 7은 시간 경과에 따른 시스테인 수준, GSH/GSSG 및 SAM/SAH에 대한 BCM-7 및 모르핀의 효과를 제시한다.
도 8 및 9는 락토스 대사 및 락토스 합성과 관련된 유전자에서의 CpG 메틸화에 대한 BCM-7의 영향을 제시한다.
도 10은 10 및 20주 동안 베타-카세인 A1 또는 베타-카세인 A2 식이를 먹인 NOD 마우스의 소장에서의 락타제를 인코딩하는 LCT 유전자의 수준을 제시한다.
도 1은 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 위장 통과 시간을 제시한다.
도 2는 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 십이지장 락타제 활성을 제시한다.
도 3은 실시예 1의 식이를 먹인 래트에서의 결장 골수세포형과산화효소 활성을 제시한다.
도 4는 뉴런 세포 및 GI 상피 세포에서의 시스테인의 모르핀 및 BCM-7 농도 의존성 흡수를 제시한다.
도 5는 뉴런 세포 및 GI 상피 세포에서의 시스테인의 시간-의존성 흡수를 제시한다.
도 6은 시스테인 흡수에 대한 BCM-7 및 모르핀의 효과를 매개하는데 있어서의 μ-아편유사제 수용체의 관련성을 제시한다.
도 7은 시간 경과에 따른 시스테인 수준, GSH/GSSG 및 SAM/SAH에 대한 BCM-7 및 모르핀의 효과를 제시한다.
도 8 및 9는 락토스 대사 및 락토스 합성과 관련된 유전자에서의 CpG 메틸화에 대한 BCM-7의 영향을 제시한다.
도 10은 10 및 20주 동안 베타-카세인 A1 또는 베타-카세인 A2 식이를 먹인 NOD 마우스의 소장에서의 락타제를 인코딩하는 LCT 유전자의 수준을 제시한다.
상세한 설명
본 발명은 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하기 위한 단백질 베타-카세인을 함유하는 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다. 중요하게는, 베타-카세인은 베타-카세인의 A2 변이체이거나, 조성물에 존재하는 전체 베타-카세인 변이체의 적어도 75 중량%를 차지한다. 조성물에서의 A2 변이체의 우세의 중요성은 출원인이 A1 변이체와 인간에서의 락토스 불내증의 증상 사이의 직접적인 연관성이 존재한다는 것을 밝혀낸 사실에 기인한다. 본 출원인은 또한 십이지장에서 높은 수준의 A2 변이체를 함유하는 밀크 단백질의 존재가 락타제 활성을 유리하게 자극한다는 것을 밝혀내었다. 따라서, A1 변이체의 소비가 회피되고, A2 변이체가 대신 소비되는 경우 장 건강에서의 개선이 예상될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "락토스 불내증의 증상"은 복부 팽창 및 경련, 고창, 설사, 구역, 소리나는 위(rumbling stomach), 및 구토를 포함하는 다양한 증상 중 어느 하나 이상을 의미하는 것으로 의도되며, 상기 증상은 급성, 일시적 또는 만성일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "급성"은 달리 나타내지 않는 한, 베타-카세인 A1의 소비로부터 장으로부터의 베타-카세인 A1 또는 BCM-7의 배출의 기간(통상적으로, 소비 후 8-20시간)을 의미하는 것으로 의도된다.
대부분의 인간 집단의 식이에서 베타-카세인의 일차적인 공급원은, 유일한 것은 아니지만, 밀크 또는 밀크에서 유래된 제품이고, 소비되는 대부분의 밀크는 베타-카세인의 A1 및 A2 변이체의 혼합물만을 함유하므로, 높은 함량의 A2 변이체를 지닌 밀크(또는 그러한 밀크에서 제조된 제품)의 소비는 반드시 A1 변이체의 소비가 낮음을 의미할 것이다. 이후, 베타-카세인의 유일한 식이 공급원이 A2 변이체를 함유하고 다른 변이체를 함유하지 않는 경우, A1 변이체의 식이 섭취는 제거되고, 따라서 베타-카세인 A1 소비로부터 발생하는 락토스 불내증의 해로운 증상이 또한 제거될 것으로 예상될 수 있다.
따라서, 본 출원의 발명은 식이에서의 베타-카세인 A1의 감소 또는 제거, 및 베타-카세인 A2의 촉진을 기초로 하며, 이는 베타-카세인 함유 식품 조성물, 특히 밀크 및 유제품에서의 베타-카세인이 주로 베타-카세인 A2이거나 심지어 오로지 베타-카세인 A2인 것을 보장함으로써 달성된다.
이상적으로는, 조성물 내의 베타-카세인은 100% 베타-카세인 A2이다. 따라서, 베타-카세인 A1의 완전한 제거는 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 전부 제거함으로써 관련된 건강 이점을 최대화시킨다. 그러나, 증상은 베타-카세인이 주로 베타-카세인 A2이고, 예를 들어, 80 중량%, 90 중량%, 95 중량%, 98 중량% 및 99 중량%를 포함하나 이에 제한되지는 않는 75 중량% 내지 100 중량% 사이의 임의의 양의 베타-카세인 A2인 임의의 조성물에서 감소될 수 있다.
본 발명의 조성물은 통상적으로 밀크이지만, 크림, 요구르트, 쿼크, 치즈, 버터, 또는 아이스크림과 같은 임의의 밀크-유래 제품일 수도 있다. 조성물은 또한 밀크로부터 수득된 베타-카세인을 함유하는 밀크가 아닌 제품일 수 있다. 조성물은 베타-카세인 자체일 수 있거나, 베타-카세인으로부터 제조될 수 있으며, 베타-카세인은 분말 또는 과립과 같은 고체 형태 또는 고체 케이크의 형태일 수 있다.
밀크는 인간, 염소, 돼지 및 버팔로를 포함하는 임의의 포유동물로부터 수득될 수 있고, 본 발명의 바람직한 구체예에서 밀크는 우유이다.
밀크는 신선한 밀크, 분유, 분말에서 재구성된 액상유, 탈지유, 균질화 밀크, 연유, 무가당 밀크, 저온살균 밀크 또는 비-저온살균 밀크의 형태, 또는 임의의 다른 형태의 밀크일 수 있다.
본 발명의 조성물은 주로 인간에 의한 소비에 이용가능하지만, 건강상의 이점은 고양이, 개 및 다른 애완 동물과 같은 일부 다른 동물에도 적절함이 인지되어야 한다.
본 발명에 대한 지지는 실시예에 기재된 실험에서 발견된다.
실시예 1은 실시예 2 내지 4의 래트 연구를 위한 급식 방법을 설명한다. 식이는 표 1에 제시되어 있다. A1 밀크 식이는 식이 내의 베타-카세인 모두가 베타-카세인 A1인 제형을 기초로 한다. A2 밀크 식이는 식이 내의 베타-카세인 모두가 베타-카세인 A2인 제형을 기초로 한다. 대조군 식이는 단백질 함유물이 달걀 흰자인 제형을 기초로 한다.
실시예 2에는 실시예 1의 다양한 식이를 먹인 래트에서의 위장 통과 시간(GITT)에 대한 연구가 기재되어 있다. 추적자로서 사용되는 티타늄 디옥사이드(TiO2)는 급식 12시간 후에 동물에 경구 투여되었다. TiO2의 회수는 도 1에 시간(시)에 비한 회수 %로 제시된다. A1 식이를 먹인 래트는 A2 식이를 먹인 래트에 비해 지연된 통과를 나타내었고, 둘 모두의 그룹은 대조군 식이를 먹인 래트에 비해 지연을 나타내었다. 이는 BCM-7의 방출로 인해 베타-카세인 A2보다 높은 전체 아편유사제 활성을 갖는 베타-카세인 A1과 일치한다. 락토스 불내증의 증상은 장에서의 락토스의 박테리아 발효와 연관된다. 발효 동안의 박테리아 수는 GITT와 함께 지수적으로 증가한다. 따라서, 운동성이 2배 감소되는 경우, 발효 속도에서의 4배 증가 및 이에 따라 락토스 불내증 증상의 소견이 존재할 것이다. 따라서, 실시예 2는 베타-카세인 A2를 함유하는 식이에 비해 베타-카세인 A1을 함유하는 식이가 GITT에서의 지연에 기여하고, 락토스 불내증의 증상을 발생시킬 가능성이 더 높다는 증거이다.
실시예 3은 급성 급식 후(12시간 후)의 십이지장에서의 락타제 활성이 100% A2 식이를 먹인 래트에 대해 만성 급식(60시간 후)에 비해 크게 상승되나, 100% A1 식이는 그렇지 않은 것을 제시한다. 이는 식이에서 건강한 위장 기능 및 락토스의 소화를 촉진하거나, 밀크 및 낙농 제품이 소비되는 경우에 경험하는 락토스 불내증의 증상을 경감시키거나 배제시키기 위해 베타-카세인 A2, 및 베타-카세인 A2를 함유하는 밀크 또는 유제품이 이용될 수 있음을 의미한다. 베타-카세인 A2를 함유하는 식이가 락타제의 분비 또는 활성을 자극하나, 베타-카세인 A1을 함유하는 식이는 그렇지 않은 것으로 생각된다. 이는 베타-카세인 A1 및 베타-카세인 A2의 소화 생성물이 소장으로 진입하는 밀크 단백질의 볼루스에 의한 효소 분비의 자극 후에 조직 염증 및 기능에 효과를 갖는 다양한 효과로 인한 가능성이 높다.
실시예 4는 래트의 결장에서의 골수세포형과산화효소(MPO) 활성에 대한 베타-카세인 A1 및 베타-카세인 A2 식이의 효과에 관한 것이다. MPO 활성은 염증에 대한 마커이다(Krawisz, et al., Gastroenterology, 1984, 87(6):1344-1350 및 Dommels, Y.E.M., et al., Genes Nutr ., 2007, 2(2):209-223). 결장 MPO 활성이 베타-카세인 A2를 먹인 래트에 비해 베타-카세인 A1을 먹인 래트에서 증가된 것으로 밝혀졌고, 이는 차례로 염증 반응의 지표인 베타-카세인 A1을 먹인 래트에서의 호중구 세포의 증가된 수준을 나타내었다. 상기 효과는 날록산(공지된 아편유사제 수용체 길항제)으로 처리된 래트에서 관찰되지 않았으며, 이는 상기 효과가 BCM-7과 mu-아편제 수용체의 상호작용을 통해 매개되는 것을 입증한다. 결장의 염증은 락토스 불내증의 증상에 대한 증가된 감수성 또는 민감성을 야기시킨다.
실시예 5는 BCM-7이 농도-의존성 방식으로 시스테인의 흡수를 억제할 수 있음을 나타낸다. 모르핀은 BCM-7보다 더 큰 효능을 나타내었고, IC50 값은 뉴런 세포에서 0.16 및 1.31 nM(각각) 및 GI 상피 세포에서 6.38 및 15.95 nM(각각)이다(도 4). 시스테인 흡수의 억제가 30분 후에 완전히 발생되었고, 모르핀 또는 BCM-7 노출 48시간까지 지속되었다(도 5). 이는 BCM-7에 대한 단일 노출 후의 시스테인 흡수에 대한 장기간 만성 효과를 나타낸다. 델타 아편유사제 수용체가 아닌 선택적 μ-길항제의 존재하에서의 차단은 이들 효과가 μ-아편유사제 수용체 매개된 것임을 나타내었다.
음식-유래 펩티드는 세포에서 S-아데노실메티오닌(SAM)의 수준을 조절할 수 있는 글루타티온의 수준을 포함하는 산화환원 대사를 변경시키는 것으로 보고되어 있다. SAM은 DNA 메틸화 변화를 매개하기 위한 보편적 메틸 공여체이다. 이들 변화는 후생유전학적 조절 기억의 일부이며, 항상성을 유지시키기 위해 유전자 발현의 수준을 조절할 수 있다. 중요하게는, 이들 변화는 고도로 안정적일 수 있고, 유전자 발현/억제를 간섭하고 이에 의해 유전자 수준을 영구적으로 변경시킬 잠재성을 갖는다. 따라서, 글루타티온의 수준은 유전자가 중요한 역할을 하는 경로, 예를 들어, 락토스 합성 및 대사 경로에 영향을 미칠 수 있다. 그러므로, 산화환원 기반 신호전달 경로를 통한 BCM-7에 의해 유도된 후생유전학적 변화는 락토스 합성 및 대사를 담당하는 조절 유전자에 영향을 미칠 수 있고, 이에 따라 신체에서의 락토스 수준에 영향을 미칠 수 있다. 신체는 특정한 전체 수준의 락토스를 흡수하거나, 대사시키거나, 청소시키거나, 저장하도록 순응된다. BCM-7의 영향하에서 수준이 변경되는 경우, 락토스 수준을 조절하는 신체의 능력은 포화될 수 있고, 이에 의해 하류 병태생리학적 준임상 또는 임상 효과를 유도할 수 있다.
실시예 6은 BCM-7 및 모르핀이 시스테인 및 글루타티온(GSH) 수준 둘 모두에서 시간-의존적 감소를 야기시키는 것을 제시한다. 뉴런 세포에서의 시스테인의 세포내 수준 및 세포의 산화환원 상태(GSH 대 이의 산화된 형태 글루타티온 디설파이드(GSSG)의 비에 의해 반영됨)가 또한 감소되었으며(도 6), 이는 산화 스트레스 조건의 가능성을 나타낸다. 추가로, 메틸화 능력(SAM/SAH 비에 의해 나타남)이 또한 다양한 시점에서 BCM-7 처리에 의해 영향을 받았다(도 7). 그러므로, BCM-7은 주요 세포내 항산화제 수준, 특히 GSH 수준에서의 감소를 유도한다. 감소된 GSH 수준은 SAM 수준을 조절함으로써 산화-스트레스 신호전달 경로를 통해 염색질 변형을 유도하는 것으로 공지되어 있다.
실시예 7은 BCM-7에 의해 유도된 DNA 메틸화 수준을 조사한다. 도 8은 BCM-7에 의해 영향을 받는 염증 반응을 매개하는 것을 담당하는 유전자 중 하나인 MPO에서의 DNA 메틸화 변화를 제시한다. 산화환원 상태에서의 변화는 염증 유전자의 후생유전학적 상태에서 장기간 변화를 야기시키는 것으로 밝혀졌다. 이는 락토스 불내증에 대한 장기간 만성 변화 및 염증 반응에 잠재적으로 기여하는 분자 손상의 기억과 동등하다. 따라서, BCM-7은 베타-카세인 A1 급식 연구로부터 명백한 바와 같이 MPO 활성을 변경시킬뿐만 아니라, MPO 유전자의 후생유전학적 상태를 변경시키며, 따라서 락토스 합성 및 대사에 대한 진행성이고 장기간의 영향을 미친다. 변경된 락토스 수준의 하류 효과는 위 기능이상 및 소화 문제를 포함할 수 있다. 도 9에 나타낸 바와 같이, BCM-7은 락토스 대사 및 분해와 관련된 락타제와 같은 효소의 후생유전학적 상태를 변경시킨다. 이는 누적된 락토스 수준을 초래할 수 있고, 사람에 따라 용인될 수 있거나 용인될 수 없는 락토스의 조절된 농도를 초래할 수 있다. 용인될 수 없는 경우, 소화 기능에서의 변화 및 장 염증이 예상될 수 있다.
BCM-7은 또한 표 4에 제시된 바와 같이 소화 기능과 관련된 효소에 영향을 미친다. B4GALT2, LGALS12 및 B4GALT1은 갈락토스 대사와 관련된 효소를 코딩하는 유전자이다. 갈락토스는 락토스의 합성에서 중요한 중간체이다. 유사하게, GKN1, GALK2, GALR2, GALT, 및 GALR1은 갈락토스의 수준을 조절하는 것과 관련되고, 이에 따라 락토스의 수준을 간접적으로 조절하는 효소를 코딩한다. 이들 효소의 활성에서의 변화는 락토스의 수준에서 변화를 간접적으로 초래할 수 있다. BCM-7은 이들 유전자의 후생유전학적 상태를 조절함으로써 이들 효소의 효소 활성을 변경시킨다. 이는 산화환원 상태의 기계적 조절에 의해 매개된다. 이들 변화는 궁극적으로 급성 단계에서 락토스 수준을 왜곡시킬 뿐만 아니라, 심지어 다음 세대까지 이어질 수 있는 후생유전학적 변화로 인해 장기간 효과를 가질 수 있다.
BCM-7은 락토스 합성 및 대사에서 변화를 매개할 뿐만 아니라, 소화 과정 및 장 기능과 관련된 효소의 활성 및 수준을 조절할 수도 있다. 콜레시스토키닌, 모틸린, 세크레타제, 및 옥시토신과 같은 효소에 대한 유전자가 BCM-7에 의해 영향을 받는 변경된 후생유전학적 상태를 갖는 것으로 밝혀졌다. 이는 개인의 위장 기능 및 소화 능력에 직접 영향을 미칠 수 있다. 따라서, BCM-7은 변경된 장 운동성, 소화 이상, 고창 및 설사의 증상에 기여하며, 상기 증상 모두는 락토스 불내증의 증상이다.
락타제 효소 수준에 대한 후생유전학적 변화의 하류 효과는 qPCR에서 mRNA 수준에 대한 연구에서 추가로 입증되었다(실시예 8). NOD 마우스는 이유(weaning) 후 베타-카세인 A1 또는 베타-카세인 A2 풍부 식이가 공급되었다. 안락사 후, 장 샘플이 절제되고 수거되었다. RNA는 이들 샘플로부터 분리되었고, PCR은 소장에서의 락타제 효소 수준에 특이적인 프라이머를 이용하여 수행되었다. 도 10에 나타낸 바와 같이, 락타제 효소의 mRNA 수준은 동일 기간에 걸쳐 베타-카세인 A1 식이를 먹인 마우스의 소장에서의 락타제 mRNA의 수준에 비해 10 및 20주 동안 베타-카세인 A2 식이를 먹인 마우스의 소장에서 더 높았다. 높은 수준의 락타제 효소를 갖는 경우, 베타-카세인 A2를 먹인 마우스는 소화계로부터 락토스를 청소시킬 것이며, 오직 특정 수준의 락토스가 이용 가능하게 될 것이다. 따라서, 락토스 불내증과 관련된 증상이 회피된다. 대조적으로, 소장에서 낮은 수준의 락타제 mRNA를 갖는 경우, 베타-카세인 A1 식이를 먹인 마우스는 높은 수준의 락토스가 생성되는 것을 가능케 할 수 있고, 따라서 락토스 불내증의 증상을 야기시킬 수 있다.
이들 연구는 베타-카세인 A1 소비와 락토스 불내증의 증상 사이의 연관성의 첫번째의 명백한 과학적 증거를 제시하며, 추가로 베타-카세인 A2 소비(베타-카세인 A1 소비에 비함)가 락토스에 대한 이후의 노출시의 락토스 불내증의 증상의 예방 또는 감소에 이로운 소인을 유도하는 것을 제시한다. 이전에, BCM-7(베타-카세인 A1 자체가 아님)과 관련한 결론에 이르지 못하고 상충적인 증례서술적 보고 및 연구가 당업자 사이에서 혼란을 야기시켰고, 많은 사람이 상기 연관성이 존재하지 않는다고 믿었다. 본 출원인의 발견을 통해, 자신이 락토스 불내성인 것으로 생각하는 많은 사람들이 겪었던 문제에 대해 대안적인 잠재적 해법, 즉, 식이에서의 베타-카세인 A1의 회피가 제공된다. 이는 주로 베타-카세인 A2인 베타-카세인 함유물을 갖는 밀크를 수득하고, 상기 밀크로부터 유래된 제품을 생성시키고, 상기 밀크 및 제품을 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 목적에 이용가능하게 만듦으로써 달성될 수 있다.
우유는 베타-카세인 A1 및 베타-카세인 A2의 상대 비율에 대해 시험될 수 있다. 대안적으로, 소는 베타-카세인 A1 또는 베타-카세인 A2 또는 둘 모두의 조합을 함유하는 우유를 생산하는 이의 능력에 대해 유전학적으로 시험될 수 있다. 이들 기술은 널리 공지되어 있다.
본 발명은 락토스 불내증의 증상 회피에 대해 현존하는 방법에 비해 명백한 장점을 갖는다. 대부분의 현존하는 방법은 식이 변화에 의존하며, 이중 많은 방법은 종종 제한적이거나 실제 성공을 거두지 못하였다. 본 발명은 비교적 다루기 쉬운 해법, 즉, 베타-카세인 A1을 함유하는 밀크 또는 유제품의 회피 및 식이 내의 밀크 및 유제품이 주로 베타-카세인 A2, 바람직하게는 100% 베타-카세인 A2인 베타-카세인을 함유하는 것의 보장을 제공한다. 본 발명은 대규모의 식이 변화, 예를 들어, 낙농 제품 또는 다른 일반적인 식품의 회피에 대한 어떠한 필요성도 피한다.
본 명세서에서 종래 문서에 대한 임의의 언급은 그러한 종래 기술이 널리 알려져 있거나 당 분야에서 평범한 일반적인 지식의 부분을 형성함을 인정하는 것으로 간주되어선 안 된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "포함하다", "포함하는" 및 유사한 용어는 배타적 또는 철저한 의미로 해석되어선 안 된다. 다시 말해, 이들은 "비제한적으로 포함하는" 것을 의미하기 위한 것이다.
본 발명은 하기 실시예를 참조하여 추가로 기재된다. 청구된 발명은 어떤 방식으로든 이러한 실시예에 의해 제한되지 않음이 인지될 것이다.
실시예
실시예 1: 급식 방법
72마리의 이유된(4주령) 수컷 Wistar 래트를 이용하였다. 대조군 식이에 대한 7일의 순응 기간 후에, 다음 3개의 식이 중 하나를 12 또는 60시간 동안 래트에 공급하였다: 100% A1 식이, 100% A2 식이, 대조군 식이 (처리 당 n=6). 식이의 단백질 구성요소는 탈지유(A1 및 A2 식이의 경우) 및 달걀 흰자(비-유단백질 대조군 식이의 경우)로부터 유래되었고, 에너지 및 다량영양소 조성에 대해 균형을 맞추었다(표 1 참조). 상기 기간이 끝나기 15분 전에, 래트는 복강내 주입을 통해 날록손 또는 염수(대조군)를 수용하였고, 그 후, 소화 가능하지 않은 추적자, 티타늄 디옥사이드를 경구로 강제 급식시켰다. 대변 및 소변 샘플을 다음 24시간 동안 7개 시점에 수집하고, 이들을 분석될 때까지 -20℃(대변) 또는 -80℃(소변)에서 저장하였다.
표 1: 식이의 조성
실시예 2: 위장 통과 시간
위장 통과 시간(GITT)을 실시예 1에 따라 급식된 래트에서 측정하였다. 100% A1 식이, 100% A2 식이, 또는 대조군 식이를 먹인지 12시간 후의 동물에 경구 투여되는 티타늄 디옥사이드(TiO2)를 추적자로 이용하였다. 결과는 표 2 및 도 1에 제시되어 있다. 회수 데이터는 시간(시)에 비한 TiO2 회수 %로 표현된다. A1 식이를 먹인 래트는 A2 식이를 먹인 래트에 비해 지연된 통과를 나타내었고, 둘 모두의 그룹은 대조군 식이를 먹인 래트에 비해 지연을 나타내었다.
표 2: GI 통과 시간
실시예 3: 락타제 활성
동결된 분말화된 십이지장 조직 샘플을 얼음-냉각된 탈이온수(1:5 wt/vol)에서 균질화시킨 후, 4에서 30분 동안 2,200g에서 원심분리시켰다. 상층액을 수거하고, 탈이온수로 추가로 희석(1:25)시켰다. 샘플을 락토스와 함께 인큐베이션하고, 유리된 글루코스를 글루코스-산화효소 키트(Sigma)를 이용하여 결정하고, 마이크로플레이트 판독기로 측정하였다. 표 3 및 도 2는 래트의 급성(12시간) 및 만성(60시간) 급식 그룹 둘 모두에 대한 십이지장 락타제에 대한 결과를 제시한다. 십이지장 락타제 활성은 만성 급식 A2 그룹 및 급성 및 만성 급식 A1 그룹 둘 모두에 비해 급성 급식 A2 그룹에서 상승되었다.
표 3: 급성 및 만성 급식 그룹에 대한 락타제 활성
실시예 4: MPO 활성
실시예 1에 따라 급식된 래트로부터의 결장 조직을 확립된 방법을 기초로 하여 골수세포형과산화효소(MPO) 활성에 대해 정량하였다(Grisham, M.B., et al., Methods Enzymol ., 1990, 186:729-742). 결장 조직(50 mg)을 균질화시키고, 원심분리를 통해 분배시키고, 초음파 프로브에 의해 파열시키고, 동결-해동 사이클에 적용시켰다. 내인성 MPO는 562 nm에서 비색 측정된 3,3',5,5'-테트라메틸-벤지딘 기질의 H2O2-의존성 산화를 촉매한다. 활성을 동일 균질화물에 대한 비신코닌산(bicinchoninic acid)(BCA)(Smith, P.K., et al., Anal. Biochem ., 1985, 150(1):76-85) 단백질 결정에 의해 표준화시켰다. 결과는 도 3에 제시된다. A1 급식된 동물에 비해, A2 동물은 급성 급식 후에 유의하게 낮은 수준의 MPO 활성을 나타내었다. 이는 지속적이었고, 만성 급식으로 추가로 증가되었으며, 날록손의 경구 투여에 의해 완전히 가역적이었다.
실시예 5: 시스테인의 흡수에 대한 BCM-7의 효과
방사선표지된 [35S]-시스테인 흡수 검정을 Caco-2-GI 상피 세포 및 뉴런 세포에서, 베타-카세인 A1으로부터 방출된 BCM-7의 존재하에 수행하고, 비처리된 대조군 뿐만 아니라 모르핀(원형 아편유사제 수용체 효능제)에 대해 비교하였다. 세포의 전처리는 앞서 기재된 대로 30분, 4, 24 및 48시간 동안 상이한 시점에 수행되었다(Trivedi M., et al.; Mol . Pharm., 2014). SH-SY5Y 인간 뉴런 세포 및 Caco-2 장 상피 세포를 6웰 플레이트에 플레이팅하고, 약물로 전처리하고, 흡수를 측정하기 전에 다양한 시간 동안 인큐베이션시켰다. 배지를 흡입시키고, 세포를 600 μL의 HBSS로 37℃에서 세척하였다. 비-방사성 HBSS를 흡입시키고, [35S]-시스테인(1 μCi/1 mL), 10 μM 표지되지 않은 시스테인 및 100 μM DTT를 함유하는 600 μL의 37℃ HBSS로 대체하고, 세포를 5분 동안 인큐베이션시켰다. [35S]-시스테인/HBSS 혼합물을 흡입시키고, 얼음 냉각된 HBSS를 이용한 2회 세척에 의해 처리를 종료하였다. 그 후, 세포를 600 μL의 dH2O로 용해시키고, 긁어 내어, 1.5 mL의 미세원심분리 튜브에 수집하고, 10초 동안 음파처리하였다. 100 μL의 각 샘플을 단백질 검정을 위해 분취시켰다. 200 μL의 각 샘플(3중으로)을 4 mL의 섬광 유체를 지닌 섬광 바이알로 분취시키고, 볼텍싱하고, 방사성(단백질 함량에 대해 표준화됨)에 대해 계수하였다. 추가로, 모르핀 및 BCM-7의 시스테인 흡수 효과 또한 선택적인 μ-길항제인 D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr(CTAP), 및 델타 길항제 날트린돌(NTI)의 존재하에서 특성 규명되었다. 결과를 도 4, 5 및 6에 도시한다. 이러한 도면에서 사용된 기호 *는 비처리된 대조군에 비해 통계적으로 유의한 차이를 나타내고(p<0.05), 기호 #은 비처리된 대조군에 비해 통계적으로 유의한 차이를 나타낸다(p<0.005).
실시예 6: GSH 및 SAM 수준에 대한 BCM-7의 효과
본 실시예에서는 실시예 5에서 관찰된 대로 시스테인 흡수에서의 감소가 GSH 변화로 해석될 수 있고 항산화 수준에 영향을 미칠 수 있는지를 조사하였다. GSH의 세포내 수준은 상이한 시점(30분, 4시간, 및 24시간)에 BCM-7 뿐만 아니라 모르핀을 이용하여 HPLC 및 전기화학적 구배 검출 방법을 이용하여 측정되었다(Hodgson et al., J. Alzh . Dis. 2013, Trivedi M., et al., Mol . Pharm. 2014). SH-SY5Y 뉴런 세포를 α-MEM에서 컨플루언스까지 성장시켰다. 배지를 흡입시키고, 세포를 1 mL의 얼음 냉각된 HBSS로 2회 세척하였다. HBSS를 흡입시키고, 0.6 mL의 얼음 냉각된 dH2O를 세포에 첨가하였다. 세포를 플라스크/디시에서 긁어 내어 dH2O에 현탁시켰다. 세포 현탁액을 15초 동안 얼음에서 음파처리하고, 100 μL의 현탁액을 이용하여 단백질 함량을 측정하였다. 남아 있는 용해물을 미세원심분리 튜브에 첨가하고, 같은 부피의 0.4 N 과염소산을 첨가한 다음, 얼음 위에서 5분 동안 인큐베이션시켰다. 샘플을 5,000 × g에서 원심분리하고, 상층액을 새로운 미세원심분리 튜브로 옮겼다. 100 μL의 각각의 샘플을 원뿔형 미세-오토샘플러 바이알에 첨가하고, 오토샘플러 냉각 트레이에서 4℃로 유지시켰다. 10 μL의 이러한 샘플 각각을 HPLC 시스템에 주입하였다.
산화환원 및 메틸화 경로 대사산물의 분리를 Agilent Eclipse XDB-C8 분석 컬럼(3 × 150 mm; 3.5 μm) 및 Agilent Eclipse XDB-C8 (4.6 × 12.5 mm; 5 μm) 가드 컬럼을 이용하여 수행하였다. 2개의 이동상을 이용하였다. 이동상 A: 인산에 의해 pH 2.65로 조정된 0% 아세토니트릴, 25 mM 소듐 포스페이트, 1.4 mM 1-옥탄설폰산. 이동상 B: 50% 아세토니트릴. 유량은 초기에 0.6mL/분으로 설정되었고, 단계식 구배가 이용되었다: 0-9분 0% B, 9-19분 50% B, 19-30분 50% B. 그 후, 컬럼을 다음 진행 이전에 5% B로 12분 동안 평형화시켰다. 온도는 27℃로 유지되었다. 사용된 전기화학 검출기는 BDD Analytical 세포 Model 5040을 구비한 ESA CoulArray였고, 작동 전위는 1500 mV로 설정되었다. 표준 교정 곡선 및 ESA-공급된 HPLC 소프트웨어를 이용하여 대사산물의 피크 면적으로부터 샘플 농도를 결정하였다. 샘플 농도를 단백질 함량에 대해 표준화하였다. 일부 경우에, 샘플은 필요에 따라 이동상에서 희석되거나, 티올 수준이 표준 곡선의 범위 내에 있음을 확실히 하기 위해 최대 50 μl의 샘플을 주입시켰다. 결과를 도 7에 도시한다.
실시예 7: DNA 메틸화 수준에 대한 BCM-7의 효과
BCM-7에 의해 유도된 전체적 DNA 메틸화 수준은 앞서 기재된 대로 메틸-CpG 결합 도메인(MBD) 단백질-풍부화된 유전체 서열화(MBD-seq)를 이용하여 조사된 반면(Trivedi M., et al., Mol . Pharm. 2014), mRNA 번역 마이크로어레이 데이터는 비처리된 대조군 SH-SY5Y 세포 및 1μM BCM-7로 4시간 동안 처리된 세포로부터, Agilent V3 마이크로어레이 칩을 이용하여 수득되었다.
유전체 DNA를 세포주에 적절한 프로토콜을 이용하여 Easy DNA 키트 (Invitrogen K1800-01)에 의해 샘플로부터 추출하였다. 다음 설정을 이용하여 Covaris S2 상에서 단편화를 수행하였다: 동작 비율 10%, 강도 5, 200초 동안 버스트 당 200회 사이클. 평균 길이가 200 bp인 단편이 수득되었다. 파워 모드는 주파수 스위핑, 온도 6-8℃, 수위 12였다. 최대 5 μg을 AFA 증강제를 갖는 미세튜브에서 130 μl의 Tris- EDTA에 부하시켰다. DNA가 덜 투입된 샘플의 경우(500 ng 아래), DNA를 TrisEDTA에서 1:5로 희석하였다. 5-3 μg으로 투입된 DNA를 DNA 1000 칩을 이용하여 Agilent 2100에서 분석하였다. 3 μg 미만으로 투입된 DNA를 회전 증발기에서 25 μl로 농축시키고, 단편 분포를 고 민감도 DNA 칩 상에서 조사하였다. 메틸화된 DNA를 MethylCap 키트(Diagenode, Belgium)를 이용하여 포획하였다. 수율은 전형적으로 총 포획된 DNA의 0.5 내지 8 ng였다. 이후, Illumina Genome Analyzer II를 이용하여 단편을 서열 분석하였다. 단편화되고 포획된 DNA의 농도를 480/520nm에서 Fluostar Optima 플레이트 판독기 상에서 Quant-iT PicoGreen dsDNA 검정 키트(Invitrogen P7589)에 의해 결정하였다.
DNA 라이브러리를 제조하기 위해, DNA 샘플 Prep Master Mix 세트 1(NEB E6040)을 Multiplexing Sample Preparation Oligo 키트(96개 샘플, Illumina PE-400-1001)와 함께 이용하였다. 전체 단편화된 DNA를 활용하였고, Multiplexing Sample Preparation Oligo 키트에 제공된 멀티플렉싱 서열화 어댑터를 이용하여, NEB 프로토콜에 따랐다. 라이브러리의 크기 선택을 2% 아가로스 겔(Low Range Ultra Agarose Biorad 161-3107) 상에서 수행하였다. 1Kb Plus 래더(Invitrogen 10787-018)를 이용하였고, 겔을 120 V에서 2시간 동안 진행시켰다. 300 bps +/- 50bps의 단편을 잘라내어, Qiagen Gel Extraction Kit 컬럼(Qiagen 28704) 상에 용리시키고, 23 μl의 EB에서 용리시켰다.
일루미나 라이브러리 증폭 인덱스 프로토콜을 다음과 같이 변경하여 이용하였다: 22 μl의 DNA를 이용하여 21회 사이클 진행을 수행하였다. 샘플을 Qiaquick PCR 정제 컬럼(Qiagen 28101) 상에서 정제시키고, 50 μl의 EB에서 용리시키고, 1:5 희석하고, 회전 증발기에서 10 μl로 농축시켰다. 1 μl를 Agilent 2100 HS DNA 칩에 적용하고, 농도를 Agilent 2100 상에서 도말표본 분석에 의해 측정하였다. 샘플을 10 nM로 희석시켰다. NaOH로 변성시킨 후, 샘플을 16 pM으로 희석시켰다. 페어드-엔드(Paired-End) 유세포를 Cluster Station User 가이드에 따라 제조하였다. 페어드 엔드 진행 동안 2 x 51 사이클에 의해, 서열분석을 HiSeq user 가이드(Multiplexed PE Run을 수행함)에 따라 수행하였다.
전체 유전체 DNA MBD-seq는 오류발견율(false discovery rate)(FDR) <0.1 및 ANOVA 후 사후 스튜던츠 t-검정(post-hoc student's t-test)(p<0.05)에 의해 규정된 바에 따라 차별적으로 메틸화된 전사물(DMT)을 나타내었다. 전사물은 유전자 및 차별적으로 메틸화/전사된 비-코딩 RNA 둘 모두를 포함하였다. 특정한 생물학적 또는 기능적으로 관련된 경로에서 BCM-7에 의해 유도된 후생유전학적 변화뿐만 아니라 전사 변화를 인제뉴이티 경로 분석(Ingenuity Pathway Analysis)(IPA) 도구를 이용하여 평가하고, 가장 높은 영향을 나타내는 경로를 확인하였다. 결과는 표 4에 제시된다. 락토스 대사 및 락토스 합성을 담당하는 유전자의 후생유전학적 상태에서의 변화가 또한 도 8 및 9에 제시된 바와 같이 BCM7 하에서 변경되는 것으로 보고되어 있다.
표 4: BCM-7의 영향하에서 차별적으로 메틸화된 전사물의 목록
실시예 8: 소장에서의 락타제 수준에 대한 BCM-7의 효과
NOD 마우스(수컷 및 암컷)를 이유로부터 베타-카세인 A1 또는 A2 밀크 단백질이 풍부한 식이를 개시시켰다. 이들 식이는 적절한 조성 및 영양을 보장하도록 Specialty Feeds Pty. Ltd.(Australia)사에 의해 제조되었다. 각각의 성별 및 식이로부터의 마우스의 코호트(n=10)를 10주 또는 20주에서 안락사시켰다. 해부시, 조직 샘플을 수거하고, RNAlater™ 중에 -80℃에서 저장하였다. 40마리의 NOD 마우스로 본 연구를 수행하였다: 그룹 당 10마리(수컷/암컷: A1/A2).
RNA 전사의 분석을 위한 세포 배양물로부터의 RNA를 Ambion(Austin, TX)사의 RNAqueous®-4PCR 키트를 이용하여 분리시켰다. 상기 절차는 제조업체의 프로토콜에 의해 기재된 것과 동일하였다. 분리된 RNA에 DNase를 처리하여 RNA을 정제한 후, ND-1000 NanoDrop 분광광도계를 이용하여 RNA 정량하였다. Roche(Indianapolis, IN)사로부터의 퍼스트-스트랜드 cDNA 합성(first-strand cDNA synthesis)을 이용하여 이전에 기재된 바와 같이 cDNA를 합성하였다. RNA(1 mg), dNTP 믹스(1 mM), 무작위 헥사머 프라이머(60 mM)와 함께 충분한 분자생물학 등급의 H20를 첨가하여, 13 ml의 최종 샘플 부피를 달성하였다. 각각의 샘플을 5분 동안 65℃에서 변성시킨 후, 얼음 상에 두었다. 트랜스크립터(Transcriptor) RT(20 단위/ml)(Roche), 프로텍터(Protector) RNase 억제제(40 U/ml)(Roche), 5 트랜스크립터 역전사효소 반응 완충액(Roche), 및 분자생물학 등급의 H20를 첨가하고, 최종 부피를 20 ml로 조정하였다. 이후, 10분 동안 25℃ 및 30분 동안 55℃에서 PTC 써모사이클러(Thermocycler)(MJ Research, St. Bruno, QC, Canada)에서 인큐베이션하였다. 마지막으로, 역전사효소 효소를 5분 동안 85℃에서의 인큐베이션에 의해 억제하였다.
qRT-PCR 검정을 Roche(Trivedi et al., Mol. Pharmcol., 2014)사로부터의 LightCycler 480 qRT-PCR 기계를 이용하여 삼중 샘플에서 수행하였다. qRT-PCR을 5 ml의 cDNA 주형, 10 mM 센스 및 안티센스 프라이머, Roche사로부터의 10 ml SYBR Green I Master, 뿐만 아니라 20 ml의 최종 부피의 dH20를 이용하여 수행하였다. 상기 목적에 사용된 프라이머는 정방향 5'-GGAGTGTCACCCACAGACAG-3' 및 역방향 5'-GAACACAAGCTACACGGGGA-3'이었다. 샘플을 하기 프로토콜로 처리하였다: 95℃에서 5분 동안의 인큐베이션, 및 이후 10초 동안 95℃, 20초 동안 60℃, 및 30초 동안 72℃의 45 사이클 후, 5초 동안 95℃, 65℃에서 1분, 및 융해 곡선에 대해 97℃의 1회 사이클, 후 90초 동안 40℃에서의 냉각. 플레이트 상에서 주형이 없는 대조군(NTC)를 수행하였고, 해리 곡선을 생성시켜 비특이적 생성물을 결정하였고, 이를 임의의 비-특이적 증폭을 피하기 위해 표준화시켰다. 데이터를 Roche 정량 방법 D(DCt)를 이용하여 분석하고, 베타-액틴 수준에 대해 표준화시켰다. 결과는 도 10에 제시된다.
비록 본 발명이 실시예에 의해 기재되었으나, 청구항에 정의된 본 발명의 범위를 벗어나지 않으며 변경 및 변형이 이루어질 수 있음이 인지되어야 한다. 더욱이, 공지된 등가물이 특정 기능에 존재하는 경우, 그러한 등가물은 본 명세서에서 구체적으로 언급된 바와 같이 포함된다.
Claims (18)
- 동물에서 소화 과정 및 장 기능에 관여하는 효소의 활성 및 수준을 조절하는 역할을 담당하는 하나 이상의 유전자에 대한 후생유전학적 변화를 예방 또는 최소화하는 방법으로서, 상기 방법은 동물이 조성물을 소비하는 것을 포함하거나 조성물을 소비를 위해 동물에게 제공하는 것을 포함하고, 상기 조성물은 베타-카세인을 포함하고 상기 베타-카세인은 베타-카세인 아미노산 서열의 위치 67에 프롤린을 가지는 베타-카세인 변이체를 적어도 75 중량%로 포함하는 것인 방법.
- 제1항에 있어서, 베타-카세인이 적어도 75 중량%의 베타-카세인 A2를 포함하는 방법.
- 제1항에 있어서, 베타-카세인이 동물의 장에서 효소적 소화에 의해 베타-카소모르핀-7을 생산할 수 있는 베타-카세인 변이체를 75 중량% 미만으로 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 유전자에 대한 후생유전학적 변화의 예방 또는 최소화는 락토스 불내증(lactose intolerance)의 증상을 발생시키는(developing) 위험을 줄이는 것인 방법
- 제4항에 있어서, 상기 증상은 복부 팽창, 복부 경련, 고창(flatulence), 설사, 구역, 소리나는 위(rumbling stomach), 및 구토 중 하나 이상을 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하나 이상의 유전자는 AKR1C1, AKR1C2, OOKBR, HTR3A, MLNR, SLC15A1, CTRB2, CTRB1, MEP1B, SULT2A1, OELA3A, AMY1C, CTSE, OOKAR, CAPN9, LCT, B4GALT2, LGALS12, B4GALT1, PGC, SCTR, OXTR, V1PR1, SST, PPARGC1A, GKN1, GALK2, GALR2, GALT, GALR1, CHST1, NPY, 및 PYY를 포함하는 군으로부터 선택되는 방법.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 베타-카세인이 적어도 90 중량%의 베타-카세인 A2를 포함하는 방법.
- 제7항에 있어서, 베타-카세인이 적어도 99 중량%의 베타-카세인 A2를 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 베타-카세인이 75 중량% 미만의 베타-카세인 A1을 포함하는 방법.
- 제9항에 있어서, 베타-카세인이 10 중량% 미만의 베타-카세인 A1을 포함하는 방법.
- 제10항에 있어서, 베타-카세인이 1 중량% 미만의 베타-카세인 A1을 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 밀크 또는 유제품인 방법.
- 제12항에 있어서, 밀크 또는 유제품은 베타-카세인 A2A2 유전자형을 갖는 것으로 알려진 젖소로부터 얻는 것인 방법.
- 제12항 또는 제13항에 있어서, 밀크가 생우유, 분유, 분말에서 재구성된 액상유, 탈지유, 균질화 밀크, 연유, 무가당 밀크, 저온살균 밀크, 또는 비-저온살균 밀크인 방법.
- 제12항 또는 제13항에 있어서, 유제품이 크림, 요구르트, 쿼크(quark), 치즈, 버터, 또는 아이스크림인 방법.
- 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 동물이 인간, 개, 또는 고양이인 방법.
- 동물에서 소화 과정 및 장 기능에 관여하는 효소의 활성 및 수준을 조절하는 역할을 담당하는 하나 이상의 유전자에 대한 후생유전학적 변화를 예방 또는 최소화하는 조성물로서, 상기 조성물은 베타-카세인을 포함하고, 상기 베타-카세인은 베타-카세인 아미노산 서열의 위치 67에 프롤린을 가지는 베타-카세인 변이체를 적어도 75 중량%로 포함하는 것인 조성물.
- 동물에서 소화 과정 및 장 기능에 관여하는 효소의 활성 및 수준을 조절하는 역할을 담당하는 하나 이상의 유전자에 대한 후생유전학적 변화를 예방 또는 최소화하는 조성물의 제조에 있어서 밀크의 용도로서, 상기 밀크는 베타-카세인을 포함하고, 상기 베타-카세인은 베타-카세인 아미노산 서열의 위치 67에 프롤린을 가지는 베타-카세인 변이체를 적어도 75 중량%로 포함하는 것인 용도.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201361845480P | 2013-07-12 | 2013-07-12 | |
| US61/845,480 | 2013-07-12 | ||
| PCT/NZ2014/000141 WO2015005804A1 (en) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | Beta-casein a2 and reducing or preventing symptoms of lactose intolerance |
| KR1020167003267A KR102367941B1 (ko) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020167003267A Division KR102367941B1 (ko) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20200085375A true KR20200085375A (ko) | 2020-07-14 |
| KR102291660B1 KR102291660B1 (ko) | 2021-08-19 |
Family
ID=52280344
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020167003267A KR102367941B1 (ko) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 |
| KR1020207019514A KR102291660B1 (ko) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020167003267A KR102367941B1 (ko) | 2013-07-12 | 2014-07-10 | 락토스 불내증의 증상을 감소시키거나 예방하는 베타-카세인 a2 |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US20160136238A1 (ko) |
| EP (2) | EP3542805A1 (ko) |
| JP (2) | JP6436592B2 (ko) |
| KR (2) | KR102367941B1 (ko) |
| CN (3) | CN110800803A (ko) |
| AU (2) | AU2014287862B2 (ko) |
| BR (1) | BR112016000612B8 (ko) |
| CA (2) | CA3214545A1 (ko) |
| CL (1) | CL2016000064A1 (ko) |
| DK (1) | DK3019180T3 (ko) |
| ES (1) | ES2743194T3 (ko) |
| HK (1) | HK1223846A1 (ko) |
| IL (2) | IL243366B (ko) |
| MX (2) | MX368912B (ko) |
| MY (2) | MY190309A (ko) |
| NZ (2) | NZ754642A (ko) |
| PH (2) | PH12016500032B1 (ko) |
| RU (1) | RU2671562C2 (ko) |
| SG (2) | SG10201710237PA (ko) |
| WO (1) | WO2015005804A1 (ko) |
| ZA (1) | ZA201600007B (ko) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2751945C9 (ru) * | 2015-05-22 | 2021-12-21 | Зе А2 Милк Компани Лимитед | Бета-казеин а2 и антиоксидантная способность |
| WO2017003300A1 (en) * | 2015-06-29 | 2017-01-05 | The A2 Milk Company Limited | A2 beta-casein and viscosity of milk products |
| KR102471621B1 (ko) * | 2016-03-30 | 2022-11-25 | 디 에이2 밀크 컴퍼니 리미티드 | 베타-카세인 및 인지 기능 |
| BR112019006336B1 (pt) * | 2016-09-30 | 2021-09-21 | The A2 Milk Company Limited | Beta-caseínas e a microbiota intestinal |
| NL2019906B1 (en) * | 2017-11-14 | 2019-05-20 | Ausnutria Hyproca B V | Composition comprising a2 b-casein and a vegetable fat mixture |
| CN112205476A (zh) * | 2019-07-11 | 2021-01-12 | 北京三元食品股份有限公司 | β-酪蛋白A2、其组合物在促进双歧杆菌属增殖中的应用 |
| WO2021003741A1 (zh) * | 2019-07-11 | 2021-01-14 | 北京三元食品股份有限公司 | β-酪蛋白A2、其组合物在促进双歧杆菌属增殖中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001000047A1 (en) * | 1999-06-29 | 2001-01-04 | The New Zealand Milk Institute Limited | Prophylactic dietary supplement based on milk |
| WO2004030690A1 (en) * | 2002-10-04 | 2004-04-15 | A2 Corporation Limited | THERAPEUTIC USES OF β-CASEIN A2 AND DIETARY SUPPLEMENT CONTAINING β-CASEIN A2 |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE442585T1 (de) | 1994-11-04 | 2009-09-15 | A2 Corp Ltd | Selektionsverfahren für nicht-diabetogene milch oder milchprodukte sowie hierdurch erfasste milch oder milchprodukte |
| WO1996036239A1 (en) | 1995-05-16 | 1996-11-21 | Corran Norman Stuart Mclachlan | Food product and process |
| US7094949B2 (en) * | 1995-05-16 | 2006-08-22 | A2 Corporation Limited | Breeding and milking cows for milk free of β-casein A1 |
| US7029702B2 (en) * | 1998-07-07 | 2006-04-18 | Ritter Natural Sciences Llc | Method for increasing lactose tolerance in mammals exhibiting lactose intolerance |
| WO2002019832A1 (en) | 2000-09-08 | 2002-03-14 | New Zealand Dairy Board | MILK CONTAINING β-CASEIN WITH PROLINE AT POSITION 67 DOES NOT AGGRAVATE NEUROLOGICAL DISORDERS |
| WO2005027953A2 (en) * | 2003-09-23 | 2005-03-31 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of proline specific endoproteases to hydrolyse peptides and proteins |
| CN1899054A (zh) * | 2006-07-17 | 2007-01-24 | 颜贻谦 | 去糖牛奶的制作方法 |
| JP2012522505A (ja) * | 2009-04-03 | 2012-09-27 | ネステク ソシエテ アノニム | ミルク様飲料 |
| GB2481169B (en) * | 2009-04-15 | 2013-08-21 | Bopa Ireland Ltd | A reduced lactose milk product and a process for the preparation thereof |
| DE102010009582A1 (de) * | 2010-02-05 | 2011-08-11 | Vitacare GmbH & Co. KG, 60318 | Mittel zur Anwendung bei Lactasemangel und Lactoseintoleranz |
| CN103315063A (zh) * | 2012-03-19 | 2013-09-25 | 基斯有限公司 | 可预防疾病的婴儿配方奶粉 |
| US20170086481A1 (en) * | 2014-06-03 | 2017-03-30 | Abbott Laboratories | Nutritional compositions comprising a lipophilic active ingredient |
-
2014
- 2014-07-10 SG SG10201710237PA patent/SG10201710237PA/en unknown
- 2014-07-10 CA CA3214545A patent/CA3214545A1/en active Pending
- 2014-07-10 WO PCT/NZ2014/000141 patent/WO2015005804A1/en active Application Filing
- 2014-07-10 DK DK14823628.4T patent/DK3019180T3/da active
- 2014-07-10 EP EP19169651.7A patent/EP3542805A1/en active Pending
- 2014-07-10 CN CN201911100359.5A patent/CN110800803A/zh active Pending
- 2014-07-10 AU AU2014287862A patent/AU2014287862B2/en active Active
- 2014-07-10 CA CA2917492A patent/CA2917492C/en active Active
- 2014-07-10 US US14/904,178 patent/US20160136238A1/en not_active Abandoned
- 2014-07-10 SG SG11201510707YA patent/SG11201510707YA/en unknown
- 2014-07-10 KR KR1020167003267A patent/KR102367941B1/ko active IP Right Grant
- 2014-07-10 JP JP2016525322A patent/JP6436592B2/ja active Active
- 2014-07-10 NZ NZ754642A patent/NZ754642A/en unknown
- 2014-07-10 EP EP14823628.4A patent/EP3019180B1/en not_active Revoked
- 2014-07-10 ES ES14823628T patent/ES2743194T3/es active Active
- 2014-07-10 MY MYPI2019006591A patent/MY190309A/en unknown
- 2014-07-10 CN CN202210552915.8A patent/CN114832092A/zh active Pending
- 2014-07-10 NZ NZ715985A patent/NZ715985A/en unknown
- 2014-07-10 RU RU2015156804A patent/RU2671562C2/ru active
- 2014-07-10 BR BR112016000612A patent/BR112016000612B8/pt active IP Right Grant
- 2014-07-10 MX MX2016000308A patent/MX368912B/es active IP Right Grant
- 2014-07-10 MY MYPI2016700051A patent/MY172939A/en unknown
- 2014-07-10 CN CN201480039570.XA patent/CN105431156A/zh active Pending
- 2014-07-10 KR KR1020207019514A patent/KR102291660B1/ko active IP Right Grant
-
2015
- 2015-12-27 IL IL243366A patent/IL243366B/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-01-04 ZA ZA2016/00007A patent/ZA201600007B/en unknown
- 2016-01-05 PH PH12016500032A patent/PH12016500032B1/en unknown
- 2016-01-08 MX MX2019012446A patent/MX2019012446A/es unknown
- 2016-01-12 CL CL2016000064A patent/CL2016000064A1/es unknown
- 2016-10-25 HK HK16112270.8A patent/HK1223846A1/zh unknown
-
2018
- 2018-08-13 IL IL261143A patent/IL261143B/en active IP Right Grant
- 2018-08-17 JP JP2018153472A patent/JP6990154B2/ja active Active
-
2019
- 2019-05-27 AU AU2019203684A patent/AU2019203684B2/en active Active
- 2019-07-03 PH PH12019550112A patent/PH12019550112A1/en unknown
-
2020
- 2020-01-09 US US16/738,792 patent/US20200147173A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-12-21 US US17/557,343 patent/US20220175882A1/en active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001000047A1 (en) * | 1999-06-29 | 2001-01-04 | The New Zealand Milk Institute Limited | Prophylactic dietary supplement based on milk |
| WO2004030690A1 (en) * | 2002-10-04 | 2004-04-15 | A2 Corporation Limited | THERAPEUTIC USES OF β-CASEIN A2 AND DIETARY SUPPLEMENT CONTAINING β-CASEIN A2 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| A2 Milk debuts at Hy-Vee stores. Sioux City Journal. [online] 2017.05.13.* * |
| CRITICAL REVIEWS IN FOOD SCIENCE AND NUTRITION, Vol. 46, No. 1, pp. 93-100 (2006) * |
| MUTATION RESEARCH, Vol. 690, No. 1-2, pp. 64-70 (2010) * |
| The right milk for your child. Essentialkids. [online] 2013.03.22.* * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20220175882A1 (en) | Beta-casein a2 and reducing or preventing symptoms of lactose intolerance | |
| KR102402455B1 (ko) | 베타카세인 ａ2 및 창자의 염증 예방 | |
| RU2698794C2 (ru) | Бета-казеин а2 и уровень глюкозы в крови | |
| RU2791693C2 (ru) | Бета-казеин а2 и уменьшение или предотвращение симптомов непереносимости лактозы | |
| RU2784851C2 (ru) | Бета-казеин а2 и предотвращение воспаления кишечника | |
| RU2802806C1 (ru) | Бета-казеин a2 и уровень глюкозы в крови |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A107 | Divisional application of patent | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E90F | Notification of reason for final refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |