KR20200067413A

KR20200067413A - 육두구 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20200067413A
Application number: KR1020180154234A
Authority: KR
Inventors: 민병선; 김정아; 김희정; 조우리
Original assignee: 경북대학교 산학협력단; 대구가톨릭대학교산학협력단
Priority date: 2018-12-04
Filing date: 2018-12-04
Publication date: 2020-06-12

Abstract

본 발명은 육두구(Myristica fragranse) 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 심근경색증 유도 동물 모델에서 육두구 에틸아세테이트 분획물 투여에 의해 심장의 수축 및 이완이 촉진되는 것을 확인함으로써, 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물을 이용하여 우수한 심근경색증 예방 또는 치료용 의약품 및 건강기능식품을 개발할 수 있을 것으로 기대된다.

Description

육두구 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물{A composition comprising ethyl acetate fraction of Myristica fragrans for preventing or treating myocardial infraction}

본 발명은 육두구(Myristica fragrans)의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

사회경제적 발전과 함께 급속한 서구화로 인해 관상동맥질환이 급격히 증가하였고, 최근에는 허혈성 심장질환(ischemic heart disease)이 급증하고 있는 추세로, 선진국뿐만 아니라 한국에서도 협심증, 심근경색증 등의 허혈성 심장질환이 성인 사망률의 주요 원인이 되고 있다. 특히나, 심근경색증이 현재 미국에서는 사망원인의 1위를 차지하고 있고, 한국에서도 그 유병률이 빠른 속도로 증가하고 있다.

심근경색증(myocardial infraction)은 심장의 관상동맥이 혈전에 의해 막혀서 산소의 수요, 공급이 불균형하여 산소 부족 상태가 지속된 결과, 심근의 괴사와 같은 심근세포의 비가역적 변화가 일어나서 심근의 수축기능이 장애를 받는 질환이다. 대부분의 심근경색은 관상동맥의 죽상동맥경화로 인해서 발생하며, 플라크(plaque)의 파열(rupture), 균열(fissure), 궤양형성(ulceration) 등이 발생하면서 혈소판의 활성화 및 혈전형성(thrombogenesis) 과정이 일어나 결국은 혈전성 폐쇄(thrombotic occlusion)를 일으키게 된다. 이러한 관상동맥의 죽상동맥경화(coronary atherosclerosis) 이외의 원인들로는 좌심실 혹은 좌심방의 혈전, 종양, 판막 이상에 의한 관상동맥 색전(coronary emboli), 경구 피임약, 과응고성(hypercoagulability) 상태 등에 의한 혈전성 관상동맥질환(thrombotic coronary artery disease), 관상동맥의 혈관경련(coronary vasospasm), 선천성 관상동맥 기형(congenital coronary anomalies) 등이 있을 수 있다.

심근경색증을 세분화하여 분류하면, 급성 관상 동맥 증후군의 한 형태로 나타나는 급격한 혈전성 관상동맥 폐색에 의한 심근경색증을 필두로, 관상동맥의 경화성 병변 없이 발생하는 심근경색증, 직접적인 심근 괴사의 증거는 없지만 심근허혈의 소견이 있는 급사와 관련된 심근경색증, 술기와 관련된 심근경색증 등으로 세분화할 수 있다. 이러한 분류는 허혈성 심근 손상이 여러 상황에서 발생할 수 있고, 또한 모든 심근 괴사를 철저하게 색출하고 상황에 맞는 치료를 위한 것임을 보여주는 것이다(노영무, 2009).

심근경색증의 치료는 크게 막힌 혈관을 넓히는 관혈적 치료와 이후 약물치료로 나뉜다. 관상동맥이 100% 막혀서 응급으로 혈관 재개통이 필요한 ST 상승 심근경색증의 경우에는 빠른 시간 내에 막힌 혈관을 넓히는 시술(심혈관성형술, 스텐트 삽입술, 혈전용해술) 또는 약물이 요구된다. 반면에, 관상동맥이 완전히 막히지 않은 비 ST 상승 심근경색증의 경우에는 쇼크가 동반되는 경우와 같이 특수한 경우가 아니면 약물치료 후 안정화된 상태에서 시술할 수 있다.

심근경색증에 대한 약물 치료는 향후 협심증 또는 심근경색증이 재발하지 않도록 심근경색증으로 인한 심실의 변화를 방지하도록 하는데 초점이 맞추어져 있다. 또한, 스텐트를 삽입한 경우에는 스텐트에 혈전이 생겨서 혈관이 다시 막히는 상황을 예방하는 것도 중요한 약물 치료 목적 중의 하나이다. 심근경색증 치료를 위한 약물로는 항혈전제, 항혈소판제, 베타차단제, 안지오텐신 전환효소 억제제, 스타틴(statin), 칼슘 차단제 등이 있다.

심근경색증의 진단은 심근 괴사의 객관적 증거를 찾아내는 것으로, 병리학적 조사, 생체표지자(biomarker) 검사, 심전도 및 영상기법을 통하여 얻을 수 있다. 심근경색증이 발생하면 심장근육의 일부가 수축 기능을 상실하여 움직이지 않으며, 이 부위의 심근이 정상 부위에 비해 얇아진다. 영상기법 중 하나인 심장초음파(echocardiography, ECG)는 실시간으로 심실벽 두께의 변화, 관상동맥혈류와 관련된 국소 벽 운동 장애를 확인하고, 시간 경과에 따른 변화를 평가할 수 있어, 심근경색증의 진단이나 합병증을 진단하는데 매우 유용한 방법이다.

육두구(Myristica fragrans, Nutmeg)는 말레이시아, 인도네시아에서 자생하는 육두구나무과의 상록활엽교목의 종자를 건조시킨 것으로, 방향족 향신료 및 약재로 사용되고 있다. 육두구는 온성과 방향성이 높아 오래된 설사, 복부 팽만, 구토, 식욕감퇴 등에 쓰이며 방향성 건위제, 강장제 등으로 사용된다(Kim, S.H., et al., 2007). 이외에도 항균 및 항산화 작용이 있는 것으로 알려져 있다(Son, J.Y., et al., 2007). 육두구의 주성분으로는 정유가 2~9%를 차지하여, d-캄펜(d-camphen), β-피넨(β-pinene), 미리스티신(myristicin), 테르피넨-4-올(terphinene-4-ol), 리카린 B(licarin B), 사프롤(safrole), 메틸렌게놀(methylengenol) 등이 함유되어 있다. 이러한 성분 중 과량의 미리스티신은 정상적인 사람에 대하여 환각작용이 있으며, 사람의 대뇌에서 흥분작용을 나타내므로 육두구 복용시 주의해야 한다(Kim, S.H., et al., 2007).

이에, 본 발명인은 육두구 추출물을 이용하여 심혈관질환 치료 효과를 확인하는 과정에서 육두구의 에틸아세테이트 분획물이 심근경색증 유도 동물 모델에서 심장의 수축 또는 이완 기능 촉진에 우수한 효과를 나타내는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성할 수 있었다.

종래 선행기술로서 한국등록특허 제1338901호에는 육두구 추출물의 심근경색증과 같은 혈관 질환의 치료 효과가 기재되어 있어 본 발명과 유사하나, 육두구 에탄올 추출물로 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물과 그 구성이 차이가 있다. 또한, 한국등록특허 제1339728호에는 육두구로부터 분리한 말라바리콘 C 화합물의 심근경색증을 포함하는 혈관 질환의 치료 효과가 기재되어 있으나, 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심장의 수축 또는 이완 기능 촉진 효과는 기재되어 있지 않다.

한국등록특허 제1338901호, 육두구 추출물 또는 이로부터 분리된 리그난계 화합물을 함유하는 혈관 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 2013. 12. 03. 등록. 한국등록특허 제1339728호, 말라바리콘 시를 함유하는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 조성물, 2013. 12. 04. 등록. 한국등록특허 제1897004호, 심혈관계 약물의 유효성에 대한 심초음파 평가 방법, 2018. 09. 04. 등록.

노영무, 심근경색증의 진단, 심장과 혈관, 11(4), 13-20, 2009. 제현동, 강황 유래 Curcumin의 Rho-kinase 억제를 통한 혈관이완작용, 약학회지, 57(5), 376-381, 2013. Kim, S.H., et al. Isolation and Quantitative Determination Method Validation of myristicin from Myristica fragrans Houttuyn, Kor. J. Pharmcogn, 38(1), 19-21, 2007. Son, J.Y., et al., Functional properties of Nutmeg, Korean J. Food. Cookery Sci., 23(1), 33-40, 2007.

본 발명의 목적은 육두구(Myristica fragrans) 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명은 육두구(Myristica fragrans)를 메탄올 또는 에탄올을 용매로 하여 추출한 추출물을 증류수로 현탁한 후, 헥산, 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심장의 수축 또는 이완을 촉진하는 심근경색증 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

상기 에틸아세테이트 분획물은 상기 약학 조성물 총 중량을 기준으로 0.001~50중량%가 포함될 수 있다.

상기 약학 조성물은 경구용 투여제 또는 주사제로 제형화 된 것일 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명은 육두구(Myristica fragrans)를 메탄올 또는 에탄올을 용매로 하여 추출한 추출물을 증류수로 현탁한 후, 헥산, 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심장의 수축 또는 이완을 촉진하는 심근경색증 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.

상기 에틸아세테이트 분획물은 상기 건강기능식품 조성물 총 중량을 기준으로 0.001~50중량%가 포함될 수 있다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명은 육두구 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

상기 육두구 에틸아세테이트 분획물은 육두구를 물, C1~4의 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 용매로 추출한 추출물을 증류수로 현탁한 후, 헥산, 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.

상기 C1~4의 저급 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 등일 수 있다.

상기 용매는 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올이며, 더 바람직하게는 메탄올이다.

상기 용매는 육두구 중량의 10~100배의 중량을 가할 수 있다. 바람직하게는 10~50배이며, 더 바람직하게는 10~20배이다.

상기 '심근경색증'은 심장발작으로 잘 알려져 있으며, 허혈로 인한 심근의 괴사에 의해 나타나는 것으로, 심경경색증이 유발되면 심장 기능이 감소한다. 특히나 좌심실의 수축 기능 및 이완 기능은 심근경색증 환자의 예후와 연관되어 있다. 이에, 심장 초음파(echocardiography)를 이용한 심장 기능 평가를 통해 심근경색증 환자의 예후를 판단할 수 있다.

상기 심장 기능 평가는 심장의 수축능 또는 이완능을 평가하는 것으로, 상기 심장의 수축능은 심근의 수축으로 심실에서 혈액을 대동맥으로 박출하는 기능과 관련되어 있는 좌심실 박출 계수(ejection fraction, EF) 및 구획단축률(fractional shortening, FS)을 통해 평가할 수 있고, 상기 심장의 이완능은 모판 첨부에서의 초기 이완기 혈류속도(early peak mitral inflow velocity, E), 승모판 중격측 고리부위에서의 확장기 초기 최고 속도(early diastolic mitral annulus motion velocity, 승모판륜의 속도, E′) 및 좌심실의 충만압(E/E′)을 통해 평가할 수 있다. 그러나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 조성물은 심장의 수축 또는 이완을 촉진할 수 있다. 바람직하게는 심장의 이완을 촉진한다.

상기 조성물의 심장 수축 촉진은 좌심실 박출 계수(EF) 또는 구획단축률(FS) 증가일 수 있으며, 심장 이완 촉진은 승모판륜의 속도(E′) 증가 또는 좌심실의 충만압(E/E′) 감소일 수 있다.

상기 육두구 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 조성물은 심근경색증 예방 또는 치료용 약학 조성물일 수 있다.

상기 약학 조성물은 상기 육두구 에틸아세테이트 분획물 및 약학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함할 수 있다.

상기 육두구 에틸아세테이트 분획물은 약학 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%가 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.001~40중량%이고, 더 바람직하게는 0.001~30중량%가 포함된다.

상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토즈, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

상기 약학 조성물의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 0.1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

상기 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 점막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.

또한, 상기 육두구 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 조성물은 심근경색증 개선용 건강기능식품 조성물일 수 있다.

상기 건강기능식품 조성물은 상기 육두구 에틸아세테이트 분획물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함할 수 있다. 상기 육두구 에틸아세테이트 분획물은 건강기능식품 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%가 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.001~40중량%이고, 더 바람직하게는 0.001~30중량%가 포함된다.

상기 건강기능식품 조성물은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성식품류 등이 있다.

본 발명은 육두구(Myristica fragranse) 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심근경색증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 심근경색증 유도 동물 모델에서 육두구 에틸아세테이트 분획물 투여에 의해 심장의 수축 및 이완이 촉진되는 것을 확인하였다.

이를 통해, 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물을 이용하여 우수한 심근경색증 예방 또는 치료용 의약품 및 건강기능식품을 개발할 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 심근경색증 유발을 위한 쥐의 수술 과정 및 방법을 보여주고 있다.
도 2는 정상적인 동물 모델과 심근경색증 유발 동물 모델에서의 심장 수축능 평가 지표인 EF(A) 및 FS(B)와 심장 이완능 평가 지표인 E'(C) 및 E/E'(D)의 수치를 비교한 결과를 보여주고 있다.
도 3은 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심근경색증 치료 효과를 확인하기 위해 수행한 심장초음파 검사 결과를 보여주고 있다.
도 4는 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 처리에 따른 심근경색증 치료 효과를 심장 수축능 평가 지표인 EF(A) 및 FS(B)와 심장 이완능 평가 지표인 E'(C) 및 E/E'(D)로 수치화하여 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 5는 육두구 에탄올 추출물과 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 처리에 따른 심근경색증 치료 효과를 비교한 결과로, 심장 수축능 평가 지표인 EF(A) 및 FS(B)와 심장 이완능 평가 지표인 E'(C) 및 E/E'(D)로 수치화하여 비교한 결과를 보여주고 있다.

이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.

<실시예 1. 육두구 에틸아세테이트 분획물이 제조>

육두구 2㎏을 분쇄한 후, 100%[v/v] 메탄올 3ℓ로 3회, 환류 냉각하면서 추출한 후, 여과하여 얻은 여과액을 진공상태에서 감압 증류하여 용매를 제거하여 메탄올 추출물 96g을 획득하였다. 획득한 메탄올 추출물을 증류수 1ℓ에 현탁하고, n-헥산 2ℓ를 가하여 분획화하여 n-헥산 층을 분리하였다. 헥산 층 분리 후 남은 잔류물에 n-헥산을 가하여 헥산 층을 분리하는 것을 2회 추가로 반복하여 n-헥산 분획물을 분리하였다. n-헥산 분획물을 분리하고 남은 잔류물에 에틸아세테이트 2ℓ를 가하고 에틸아세테이트 층을 분리하고, 에틸아세테이트 층을 분리하고 남은 잔류물에 다시 에틸아세테이트 2ℓ를 가하여 에틸아세테이트 층을 분리하는 과정을 2회 반복하여 에틸아세테이트 층 6ℓ(2ℓ×3)를 확보하였다. 확보한 에틸아세테이트 층을 여과하여 얻은 여과액을 감압 농축하여 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 54g을 제조하였다.

<실시예 2. 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심근경색증 치료 효과 확인>

실시예 2-1. 심근경색증 동물 모델 제조

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심근경색증 치료 효과를 확인하기 위해 심근경색증 동물 모델을 제조하였고, 심근경색증 유발 후 심근경색증의 경과 및 치료 예후를 관측하기 위해 한국등록특허 제1897004호에 기재되어 있는 심장초음파 평가 방법을 이용하였다. 심장초음파 평가는 M-모드(M-mode), PWD(posterior wall thickness) 및 조직 도플러 영상(tissue doppler imaging, TDI)으로 심장 초음파를 촬영하여, 심장의 수축능 평가 지표인 좌심실 박출계수(ejection fraction, EF) 및 구획단축률(fractional shortening, FS)을, 심장 이완능 평가 지표인 승모판륜의 속도(E′) 및 좌심실의 충만압(E/E′)을 분석하였다. 이때, 심근경색증 유발 모델의 경우, 정상 모델과 대비하여 EF, FS 및 E′은 감소하며, E/E′은 증가한다.

8~10주령의 무게가 260~280g인 수컷 SD(sprague-dawley) 쥐를 이용해 도 1의 과정을 통해 허혈(심근경색증)을 유도하였다. 보다 자세하게는, 각 시험군의 쥐에 알팍산(alfaxan) 50㎎/㎏ 및 롬푼(rompun) 5㎎/㎏을 복강 주사하여 마취시킨 후, 좌측 흉부를 제모하고 소독하였다. 쥐의 기도에 기관을 삽관하여 인공호흡기(ventilator)로 호흡을 유지한 상태로, 3~4번째 늑간강(intercostal space)을 절개하여 개흉하고 심장을 노출시켰다. 노출된 심장의 좌전하행동맥(left anterior descending, LAD)을 30분간 결찰하여 심근경색증을 유도하고, 심전도 검사(electrocardiography)를 수행하여 심근경색증으로 인한 ST 상승(ST elevation) 패턴이 나타나는 것을 확인함으로써 심근경색증이 유발되었음을 확인하였다. 이후에 음압을 가하고 흉강을 봉합한 후, 후지를 자극하여 반사를 확인하고 발관하였다. 발관 후 2시간, 1일, 3일, 7일에 심장 초음파(echocardiography)를 수행하여 EF, FS, E′ 및 E/E′을 분석하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

도 2에서 보듯이, 정상군과 대비하여 심근경색증 유발군에서 EF, FS 및 E'가 감소하였고, E/E'가 증가한 것을 확인함으로써 심근경색증 유발되었고, 지속적으로 심근경색증이 유지되고 있음을 확인하였다. 또한, 심근경색증에 의해 심장의 수축능 및 이완능이 떨어지며, 특히나 심장의 이완능이 더 영향을 받음을 알 수 있었다.

실시예 2-2. 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심근경색증 치료 효과 확인

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물의 심근경색증 치료 효과를 확인하기 위해 상기 실시예 2-1의 심근경색증 동물 모델 및 심장 초음파 평가를 이용하였다.

심근경색증을 유도하기 전에 쥐를 하기 표 1 또는 표 2의 시험군으로 나누고, 각각의 시험군에 해당되는 시료를 매일 1회씩, 7일간 경구 투여하였다. 이때, 혈관의 이완 작용을 한다고 잘 알려진 커큐민(curcumin)(제현동, 2013)을 양성 대조군으로 이용하였다. 이후에, 상기 실시에 2-1과 동일한 과정을 통해 심근경색증을 유발하였다. 심근경색증 유발 후 1, 4, 7일차에 심장 초음파(echocardiography)를 수행하여, EF, FS, E′ 및 E/E′을 분석하였고, 그 결과를 도 3 내지 5, 하기 표 1 및 2에 나타내었다.

시험군		심근경색증 유발 후 7일차
시험군		EF(%)	FS(%)	E′(㎜/s)	E/E′
심근경색증 유발군	-	47.35±3.42	28.28±2.22	35.35±2.13	23.12±0.98
양성 대조군	커큐민 25㎎/㎏	58.18±3.97	30.31±2.60	37.75±1.22	22.18±1.35
실시예 1-50	육두구 에틸아세테이트 분획물 50㎎/㎏	57.44±2.46	33.08±1.82	34.70±2.50	22.35±2.09
실시예 1-200	육두구 에틸아세테이트 분획물 200㎎/㎏	60.50±5.00	33.76±3.29	37.56±3.57	21.55±1.68

시험군		심근경색증 유발 후 7일차
시험군		EF(%)	FS(%)	E′(㎜/s)	E/E′
심근경색증 유발군	-	47.35±4.22	28.75±2.71	34.89±2.41	22.88±1.12
대조군 1	육두구 30%에탄올 추출물 200㎎/㎏	57.22±3.34	31.42±2.24	36.84±1.17	21.74±0.48
실시예 1-200	육두구 에틸아세테이트 분획물 200㎎/㎏	60.18±6.40	33.56±4.21	39.57±1.17	20.74±1.31

도 3의 심근경색증 유발 후 7일차의 심장 초음파 결과 이미지에서 보여주듯이, 심근경색증 유발군의 결과 이미지와 비교하여 실시예 1-200의 결과 이미지가 차이가 있음을 알 수 있다.

이를 수치화한 도 4 및 상기 표 1에서 보듯이, 심근경색증 유발 후 1, 4, 7일차 모두에서 심장의 수축능 평가 지표인 EF 및 FS의 수치가 심근경색증 유발군에 비해 실시예 1-50 및 실시예 1-200 처리군에서 현저히 증가하는 것을 확인하였다. 또한 심장의 이완능 평가 지표인 E′의 경우에는 실시예 1-200 처리군에서 현저히 높은 수치를 나타내는 것을 확인하였으며, E/E′의 경우에는 심근경색증 유발군에 비해 실시예 1-50 및 실시예 1-200 처리군에서 수치가 감소하는 것을 확인하였다.

한편, 도 5 및 상기 표 2에서 보듯이, 실시예 1-200의 육두구 에틸아세테이트 분획물을 처리한 경우, 대조군 1과 같이 육두구 에탄올 추출물을 처리한 경우와 비교하였을 때, 심장의 수축능 평가 지표인 EF 및 FS의 수치가 1, 4일차에는 유사하게 나타났으나, 7일차에서는 1-200의 육두구 에틸아세테이트 분획물을 처리한 경우에 수치가 높은 것을 확인하였다. 또한, 심장의 이완능 평가 지표인 E′는 육두구 에탄올 추출물 처리군인 대조군 1에 비해 실시예 1-200 처리군이 현저히 높은 수치를 나타내고, E/E′은 실시예 1-200 처리군에서 수치가 낮게 나타나는 것을 확인하였다.

이를 통해, 본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물이 심장의 수축 또는 이완을 촉진함으로써 심근경색증을 치료할 수 있음을 알 수 있었다.

<제제예 1. 약학적 제제>

제제예 1-1. 정제의 제조

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 20g을 락토오스 175.9g, 감자전분 180g 및 콜로이드성 규산 32g과 혼합하였다. 이 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160g, 활석 50g 및 스테아린산 마그네슘 5g을 첨가해서 얻은 혼합물을 정제로 만들었다.

제제예 1-2. 주사액제의 제조

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 100㎎, 염화나트륨 0.6g 및 아스코르브산 0.1g을 증류수에 용해시켜서 100㎖를 만들었다. 이 용액을 병에 넣고 20℃에서 30분간 가열하여 멸균시켰다.

<제제예 2. 건강기능식품의 제조>

제제예 2-1. 건강기능식품의 제조

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 20g, 비타민 혼합물 적량, 비타민 A 아세테이트 70㎍, 비타민 E 1.0㎎, 비타민 B1 0.13㎎, 비타민 B2 0.15㎎, 비타민 B6 0.5㎎, 비타민 B12 0.2㎍, 비타민 C 10㎎, 비오틴 10㎍, 니코틴산아미드 1.7㎎, 엽산 50㎍, 판토텐산 칼슘 0.5㎎, 무기질 혼합물 적량, 황산제1철 1.75㎎, 산화아연 0.82㎎, 탄산 마그네슘 25.3㎎, 제1인산칼륨 15㎎, 제2인산칼슘 55㎎, 구연산칼륨 90㎎, 탄산칼슘 100㎎, 염화마그네슘 24.8㎎을 섞어 과립으로 제조하였으나, 용도에 따라 다양한 제형으로 변형시켜 제조할 수 있다. 또한, 상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하여 제조할 수 있다.

제제예 2-2. 건강기능성 음료의 제조

본 발명의 육두구 에틸아세테이트 분획물 1g, 구연산 0.1g, 프락토올리고당 100g, 정제수 900g을 섞어 통상의 음료 제조방법에 따라 교반, 가열, 여과, 살균, 냉장하여 음료를 제조하였다.

Claims

육두구(Myristica fragrans)를 메탄올 또는 에탄올을 용매로 하여 추출한 추출물을 증류수로 현탁한 후, 헥산, 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심장의 수축 또는 이완을 촉진하는 것을 특징으로 하는 심근경색증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제1항에 있어서,
상기 에틸아세테이트 분획물은 약학 조성물 총 중량을 기준으로 0.001~50중량%가 포함되는 것을 특징으로 하는 심근경색증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 약학 조성물은 경구용 투여제 또는 주사제로 제형화된 것을 특징으로 하는 심근경색증 예방 또는 치료용 약학 조성물.
육두구(Myristica fragrans)를 메탄올 또는 에탄올을 용매로 하여 추출한 추출물을 증류수로 현탁한 후, 헥산, 에틸아세테이트 순으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 심장의 수축 또는 이완을 촉진하는 것을 특징으로 하는 심근경색증 개선용 건강기능식품 조성물.
제4항에 있어서,
상기 에틸아세테이트 분획물은 건강기능식품 조성물 총 중량을 기준으로 0.001~50중량%가 포함되는 것을 특징으로 하는 심근경색증 개선용 건강기능식품 조성물.