KR20200064309A

KR20200064309A - 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물

Info

Publication number: KR20200064309A
Application number: KR1020180150304A
Authority: KR
Inventors: 김세현; 김수나; 나용주
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2018-11-29
Filing date: 2018-11-29
Publication date: 2020-06-08
Also published as: CN113164365A; WO2020111621A1; JP7441217B2; JP2022510097A; KR102644611B1

Abstract

본 발명은 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물에 관한 것으로써, 아멘토플라본(Amentoflavone) 및 백자인 추출물, 제니스테인(Genistein) 및 비오카닌 A(Biochanin A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함한다.

Description

탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물 {Composition for inhibiting hair loss or inflammation of skin}

본 발명은 PTGDS(prostaglandin D2 synthase) 활성억제 효과를 갖는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 아멘토플라본(Amentoflavone) 및; 백자인 추출물, 제니스테인(Genistein) 및 비오카닌A(Biochanin A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분 포함하여 우수한 PTGDS 활성억제 효과를 통해 탈모 또는 피부 염증을 억제하는 조성물에 관한 것이다.

일반적으로 탈모의 원인으로는 유전적 요인, 약물 복용, 노화의 진행, 방사선 치료 및 중병 후 스트레스 등을 들 수 있다. 또한 생화학적 관점이나 생리학적 관점에서 탈모 현상은 과다 활동, 두피 혈액순환의 문제 및 모발대사에 필수적인 영양소의 결핍에 의한 것으로 알려져 있다. 이와 같은 요인들이 단독 또는 복합되어 탈모증을 가속화하고 증상이 심해지게 된다. 특히, 유전적 요인 또는 후천적 요인으로 인하여 남성호르몬의 생성, 변화, 인식 및 신호전달 과정이 과도하게 작동함으로 모낭 조직이 조기 노화될 경우 탈모증이 심해질 확률이 높아진다.

탈모치료를 위해 현재까지 다양한 시도가 이루어져 왔는데, 외과적인 방법으로는 두피피판술, 탈모부위축소술 및 조직확장술에 의한 두피성형술과 자가모발 이식술 등이 있다. 상기 외과적 치료 방법은 효과면에서 우수한 점이 있으나, 환자의 경제적, 정신적 부담이 매우 커서 널리 이용되지 어렵다는 단점을 가지고 있다.

이 외 다양한 치료제가 사용되고 있는데, 대표적인 외용제인 미녹시딜(Minoxidil)은 모세혈관 확장 기능이 있어 두피에 바름으로써 탈모를 방지하지만, 가려움증, 자극 등의 부작용과 탈모치료에서 능동표적이 아직 확실하게 밝혀지지 않았다는 문제를 가지고 있다. 내복약인 피나스테라이드(finasteride)는 탈모를 유발하는 남성 호르몬인 DHT(5α-dihydrotestosterone) 생성 억제 작용을 갖고 있으며, 6개월에서 1년 정도 복용 시 발모 또는 탈모억제 효과가 나타나는 것으로 알려져 있으나, 복용을 중단하면 2개월 내에 원래 상태로 돌아가는 문제점이 있으며, 생식 능력 장애 등의 부작용이 발생할 수 있다고 알려져 있다.

따라서 부작용이 없고 인체에 무해하며 탈모 억제효과가 있는 탈모억제제의 개발이 지속적으로 요구되고 있는 실정이다.

PTGDS(Prostagladin D2 Synthase)는 프로스타글라딘(Prostaglandin) D2(PGD2)를 생성하는 효소로서, PGD2는 탈모증이 없는 남성의 두피에서 보다 탈모증을 갖는 남성의 두피에서 더 높은 수준으로 존재한다는 것이 밝혀져 탈모를 일으키는 중요한 요소로 알려져 있다(Garza et al.(2012) Sci. Transl. Med. 4, 126ra34). 또한, PTGDS는 PGD2를 통해서 염증반응을 조절하는 것으로 밝혀졌고(R. Rajakariar et al., PNAS, 2007, 104, 20979-20984) 염증반응의 매개물질로서 PTGDS의 활성을 억제하여 염증반응을 저해할 수 있다.

이에, 본 발명자들은 PTGDS의 활성을 억제함으로써 피부에서의 염증 반응을 억제함과 동시에 탈모 반응도 억제할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

대한민국 등록특허 제10-1766752호 (미녹시딜을 함유하는 약제학적 조성물) 대한민국 공개특허 제10-2015-0046332호 (중합 피나스테리드 나노입자, 이를 포함한 수성 조성물, 탈모 치료를 위한 조성물 및 이의 제조 공정 및 이 조성물의 용도)

본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여, 지속적인 사용에 따른 부작용이 적으면서 탈모 및 피부 염증을 효과적으로 억제하는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 아멘토플라본(Amentoflavone) 및 백자인 추출물, 제니스테인(Genistein) 및 비오카닌A(Biochanin A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함한다.

상기 아멘토플라본(Amentoflavone)은 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 1,000 ppm 함유될 수 있다. 아멘토플라본은 부처손, 바위손, 권백, 편백 및 은행으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것 일 수 있다.

상기 백자인 추출물은 상기 조성물 총 중량에 대하여 10 내지 10,000 ppm 함유될 수 있다.

제니스테인(Genistein)은 상기 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 1,000 ppm 함유될 수 있다. 제니스테인(Genistein)은 콩 및 이소플라본(Isoflavone) 으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것 일 수 있다.

상기 비오카닌A(Biochanin A)는 상기 조성물 총 중량에 대하여 10 내지 1,000 ppm 함유될 수 있다. 비오카닌A는 강진향, 콩, 붉은토끼풀 및 이소플라본(Isoflavone)으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것 일 수 있다.

상기 조성물은 생체 내 PTGDS(Prostagladin D2 Synthase)의 활성을 억제할 수 있다. 상기 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 화장료를 포함하고, 화장료의 제형은 용액, 크림, 로션, 샴푸, 헤어토닉, 스프레이 및 겔 중 선택될 수 있다.

상기 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 경피주사 또는 피하주사를 통해 인체에 투여될 수 있으며, 피부 외용제 또는 경구 투여제 중 선택될 수 있다.

상기 피부는 모낭 및 두피를 포함할 수 있다.

본 발명의 의해 제공되는 조성물은 아멘토플라본(Amentoflavone)에 백자인 추출물, 제니스테인(Genistein) 및 비오카닌A(Biochanin A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 함유함으로써, 탈모 또는 피부 염증을 억제하는 시너지 효과를 획득할 수 있다. 또한, 본 발명의 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 천연물질을 사용하여 장기간 사용이 가능하면서도 부작용이 없다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 PTDGS 효소의 PGD2 생성 억제효과를 ELISA 방법을 통해 나타낸 결과 그래프이다.

이하, 본 발명에 대한 이해를 돕기 위하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

본 발명에서 유효성분으로 사용하는 아멘토플라본(Amentoflavone)은 항산화 작용(Mora A. et al., Biochem. Pharmacol., 40(4), pp793-7, 1990), 림프구 증식(lymphocyte proliferation) 억제 작용(Lee SJ. et al., Life Sci., 57(6), pp551-558, 1995), 포스포리파아제(phospholipase) C-γ1 효소 활성 억제 작용(Lee HS. et al., Planta. Med., 1996, 62(4), pp293-296), 항-HIV 작용, 시클로옥시게나제(cyclooxygenase) 및 리폭시게나아제 (lipoxygenase)의 억제를 통한 항염증 작용(Kim HP. et al., Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 58(1), pp17-24, 1998), cAMP-인디에스테라제(cAMP-phosphodiesterase) 억제 작용, 바이러스에 대한 항생 작용, 항균 작용 등에 대해 연구되었다(Kim HK. et al., Arch. Pharm. Res., 21(4), pp406-410, 1998; Lin YM. et al., Planta. Med., 65(2), pp120-125, 1999; Krauze-Baranowska M. et al., Planta. Med., 65(6), pp572-573, 1999).

아멘토플라본은 부처손, 바위손, 권백, 편백 및 은행으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출될 수 있다. 부처손은 부처손과에 속하는 여러해살이풀로 5∼20cm 내외로 자라고 밑에서 파생된 근경은 매우 단단하고 짧으며, 많은 수염뿌리가 나는 특징이 있다. 바위손은 부처손과에 속하는 관다발식물이며, 바위 위에서 자라 땅속줄기가 땅속이나 선태식물 사이로 뻗으면서 끝이 곧게 자라는 것이 특징이다. 권백은 부처손과에 속하며, 바위에 붙어사는 민꽃식물로 말리면 주먹모양으로 생겨서 붙여진 이름이다. 편백은 측백나무과의 상록교목으로 잎은 도란형 또는 난형이고 양면이 모두 녹색이거나 연한 황록색이다. 은행은 은행나무과의 낙엽교목으로 잎은 부채꼴이며 중앙에서 2개로 갈라지지만 갈라지지 않는 것과 2개 이상 갈라지는 것 등이 있다.

아멘토플라본(Amentoflavone)은 하기 화학식 1로 표시된다.

화학식 1

본 발명에서 유효성분으로 사용하는 백자인(Thujae semen)은 측백나무(Thuja orientalis(occidentalis) (측백나무과)Curpressaceae)의 종자로서 난원형에서 긴 타원형이거나 또는 긴 원주형이다. 백자인은 동의보감 삼성고(三聖膏) 처방에 콧수염이나 머리털이 빠진 것을 다시 나오게 한다고 알려져 있으며 사성불로단(四聖不老丹) 및 반룡환(斑龍丸) 등 주로 몸이 허해졌거나 노화 증상이 나타났을 때 사용하는 처방에 포함되어 있다. 또한 현대과학적 측면에서는 2가지 동물모델에서 육모활성이 높게 나타나 안드로젠 변환을 조절하여 탈모증에 유용한 물질로써 사용될 수 있음이 입증된 바 있다.

본 발명에서는 예를 들어 하기와 같은 방법으로 백자인 추출물을 제조할 수 있다. 백자인을 2배 용량의 95% 에탄올로 추출하여 여과, 농축한 후 5배 용량의 물과 5배 용량의 에틸아세테이트를 넣어 진탕하여 층을 분리한다. 에틸아세테이트층의 수분을 황산마그네슘을 이용하여 제거하고 여과, 농축하여 백자인 추출물을 얻는다.

본 발명에서 유효성분으로 사용하는 제니스테인(Genistein)은 식물계의 에스트로겐 유사체로서 강력한 항산화 효과, 항염증 효과, 항암 효과와 함께 정상세포의 복제를 촉진한다. 탈모를 억제하는 성분으로 SCI급 임상논문이 게재되었으며, 최근에는 광노화를 억제하는 물질로도 임상결과가 보고되었다. 일 구현예에서는 제니스테인의 에스트로겐 유사체로서의 호르몬 효과, 세포재생효과, 광노화 억제 효과, 탈모 억제 및 육모를 촉진하는 작용을 한다. 폴리페놀의 일종인 제니스테인은 예를 들어 대두 이소플라본(isoflavone)에서 분리 추출할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

제니스테인(Genistein)은 하기 화학식 2로 표시된다.

화학식 2

본 발명에서 유효성분으로 사용하는 비오카닌 (Biochanin A)는 예를 들어 강진향, 콩, 붉은토끼풀 및 이소플라본으로 구성된 군에서 하나 이상으로부터 분리할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.

비오카닌 (Biochanin A)은 하기 화학식 3으로 표시된다.

화학식 3

본 발명의 일 실시예에서, 아멘토플라본을 단독 유효성분으로 포함하는 조성물에 비해, 추가적으로 백자인 추출물, 제니스테인 및 비오카닌A로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함하여 조합할 경우 PTGDS 활성을 억제하는 효과가 더 우수한 것으로 확인되었다.

즉, 본 발명은 효과적으로 PTGDS의 활성을 억제하여 탈모를 일으키는 요소인 PGD2의 생성을 감소시켜 탈모반응을 억제하고, 피부에서 발생되는 염증반응을 억제할 수 있는 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 약학 조성물로 사용될 수 있다.

상기 약학 조성물은 아멘토플라본과 백자인 추출물, 제니스테인 및 비오카닌A로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함하는 유효성분 이외에 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 투여제 또는 비경구 투여제 형태로 제형화 할 수 있다.

상기 경구 투여제는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 분제, 산제, 세립제, 과립제, 펠렛제 등이 있으며, 이들 제형은 유효성분 이외에 계면 활성제, 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 상기 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.

또한, 상기 비경구 투여 형태로는 경피, 피하, 정맥 및 근육 투여형 제형일 수 있으며, 예를 들어 주사제, 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제(坐劑), 패취 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 유효성분의 투여량 결정은 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 약물의 1일 투여 용량은 투여하고자 하는 대상의 진행 정도, 발병 시기, 연령, 건강상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라지지만, 성인을 기준으로 할 때 일 측면에서 상기 조성물 1 ㎍/㎏ 내지 200 ㎎/㎏, 다른 일 측면에서 50 ㎍/㎏ 내지 50 ㎎/㎏을 1일 1 내지 3회 분할하여 투여할 수 있으며, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.

상기 약학 조성물은 피부 외용제일 수 있으며, 상기 피부 외용제는 피부 외부에서 도포되는 어떠한 것이라도 포함될 수 있는 총칭으로서 다양한 제형의 의약품이 여기에 포함될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물로 사용될 수 있다. 상기 화장료 조성물에는 락토코커스 락티스 W-camellia 균주의 용출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기 화장료 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화 될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

이뿐만 아니라, 상기 화장료 조성물은 두피용 또는 모발용 조성물 등으로 사용될 수 있다. 따라서 상기 화장료 조성물은 두피 및 모발에 함께 사용하는 제형, 예를 들어 샴푸, 린스, 스칼프트리트먼트, 헤어트리트먼트, 두피 모발 겸용 트리트먼트, 탈모 방지 모발용 트리트먼트, 손상모발용 트리트먼트, 잔류(leave-in) 컨디셔너, 워시오프(wash-off) 컨디셔너 또는 헤어 에센스 등 두피 또는 모발, 두피 및 모발 겸용 제품 등으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

한편, 본 발명의 일실시예에 따른 조성물은 안정도를 유지하는 범위 내에서 색소, 방부제, 금속이온 봉쇄제, 향 등을 함유할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명하다 할 것이다.

<실시예> 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물 제조

<실시예 1 내지 3>

정제수 1000ml에 아멘토플라본(Amentoflavone)에 더하여; 백자인 추출물, 제니스틴(Genistein) 및 비오카닌A(Biochanon A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 첨가 후 교반한다. 구체적인 유효성분의 함량은 아래 표 1에 나타냈다.

<비교예 1 내지 4>

비교예 조성물은 실시예 1 내지 3에서 이용한 동일한 유효성분을 단독으로 사용하되 성분함량이 10배가 되게 제조하였다. 구체적으로는 정제수 1000 ml에 아멘토플라본(Amentoflavone), 백자인 추출물, 제니스틴(Genistein) 및 비오카닌A(Biochanon A) 중 1종을 첨가 후 교반한다. 구체적인 유효성분의 함량은 아래 표 1과 같다.

분류	정제수 1000ml 당 투여 용량 (ppm)
분류	아멘토플라본	백자인 추출물	제니스틴	비오카닌A
실시예 1	1	100	-	-
실시예 2	1	-	10	-
실시예 3	1	-	-	10
비교예 1	10	-	-	-
비교예 2	-	1000	-	-
비교예 3	-	-	100	-
비교예 4	-	-	-	100

<시험예> PTGDS 활성억제 효과(ELISA assay)

PTGDS에 효소 반응의 기질인 프로스타글라딘 H2(PGH2)를 처리하여 프로스타글라딘 D2(PGD2)를 생성되는데, 상기 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 조성물을 함께 투입하여 PGD2의 생성 감소량을 측정하여 PTGDS 활성 억제 효과를 확인하였다.

상기 PGD2의 생성량 측정은 효소-결합된 면역흡착시험(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay; ELISA) 방법에 의해서 측정하였다. 효소-결합된 면역흡착시험(ELISA)의 실시는 아래의 단계로 이루어졌다.

(a) 실시예 1 내지 3을 고체 기질의 표면에 코팅하는 단계;

(b) PTGDS와 상기 PGH2 반응시키는 단계;

(c) 상기 단계 (b)의 결과물을 효소가 결합된 이차항체와 반응시키는 단계; 및 (d) 상기 효소의 활성을 ELISA reader로 410nm에서 흡광도 측정을 통해 나타내는 단계를 포함한다.

상기 고체 기질로 적합한 것은 탄화수소 폴리머(예컨대, 폴리스틸렌 및 폴리프로필렌), 유리, 금속 또는 젤이며, 가장 바람직하게는 마이크로타이터 플레이트이다. 상기 이차항체에 결합된 효소는 발색반응, 형광반응, 발광반응 또는 적외선 반응을 촉매하는 효소를 포함하나, 이에 한정되지 않으며, 예를 들어, 알칼린 포스파타아제, β-갈락토시다아제, 호스 래디쉬 퍼옥시다아제, 루시퍼라아제 및 사이토크롬 P450을 포함한다. 상기 이차항체에 결합하는 효소로서 알칼린 포스파타아제가 이용되는 경우에는, 기질로서 브로모클로로인돌일 포스페이트(BCIP), 니트로 블루 테트라졸리움(NBT), 나프톨-ASB1-포스페이트(naphthol-AS-B1-phosphate) 및 ECF (enhanced chemifluorescence)와 같은 발색반응 기질이 이용되고, 호스 래디쉬 퍼옥시다아제가 이용되는 경우에는 클로로나프톨, 아미노에틸카바졸, 디아미노벤지딘, D-루시페린, 루시게닌(비스-N-메틸아크리디늄 니트레이트), 레소루핀 벤질 에테르, 루미놀, 암플렉스 레드 시약(10-아세틸-3,7-디하이드록시페녹사진), TMB(3,3,5,5-tetramethylbenzidine), ABTS(2,2'-Azine-di[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]) 및 o-페닐렌디아민(OPD)과 같은 기질이 이용될 수 있다.

분석 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 내지 3이 성분함량이 10배가 많은 비교예 1 내지 4에 비해서도 PGD2의 생성량이 감소된 것으로 나타났다. 따라서, 상기 결과를 통해 본 발명자들은 아멘토플라본과 백자인 추출물, 제니스테인 및 비오카닌A로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 조합한 조성물이 상기 성분 물질을 단독으로 이용했을 때에 비해서 PTGDS 활성 억제능이 우수하다는 것을 알 수 있었다.

본 발명의 일 실시예에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 이들 제형예 외에도 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 제형예에 의해 한정되는 것은 아니다.

<제형예 1> 정제

본 발명의 실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

<제형예 2> 캡슐제

본 발명의 실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

<제형예 3> 과립제

본 발명의 실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물 50mg, 무수결정 포도당 250mg 및 전분 550mg을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하였다.

<제형예 4> 드링크제

본 발명의 실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물 50mg, 포도당 10g, 구연산 0.6g 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 300ml를 가하여 각 병에 200ml씩 충진한 후 130℃에서 4~5초간 살균하여 드링크제를 제조하였다.

<제형예 5> 주사제

하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 주사제를 제조하였다.

배합 성분	함량
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	10-50 mg
주사용 멸균 증류수	적량
pH 조절제	적량

<제형예 6> 유연화장수(스킨로션)

하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	0.2
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
피이지-12 노닐페닐에테르	0.2
폴리솔베이트 80	0.4
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

<제형예 7> 영양화장수(밀크로션)

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	1.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	5.0
스쿠알란	5.0
솔비타세스퀴올레이트	1.5
유동파라핀	0.5
세테아릴 알코올	1.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

<제형예 8> 마사지 크림

하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.

배합 성분	함량(중량%)
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	2.0
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	45.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
밀납	4.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄	0.9
바세린	3.0
파라핀	1.5
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

<제형예 9> 헤어 로션의 제조

하기 표 6에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 헤어 로션을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
실시예 1 내지 3에 따라 제조된조성물	2.0
정제수	잔량
글리세린	3.0
부틸렌그리콜	3.0
유동파라핀	7.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
에델바이스 추출물	2.0
카프릴릭 카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알렌	5.0
세테아릴 그루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
폴리솔베이트	1.2
방부제	적량
향	적량
색소	적량
트리에탄올 아민	0.1

<제형예 10> 샴푸 조성물의 제조

하기 표 9에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 샴푸 조성물을 제조하였다.

성분(중량%)	함량(중량%)
폴리쿼터늄-10	0.5
소듐라우레스설페이트	20
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	0.3
향	1.0
메틸파라벤	0.1
세틸알콜	0.5
염화나트륨	0.8
정제수	To 100

<제형예 11> 헤어 트리트먼트의 제조

하기 표 10에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 헤어 트리트먼트를 제조하였다.

구분(중량%)	함량(중량%)
실시예 1 내지 3에 따라 제조된 조성물	0.5
스테아라미도프로필디메틸아민	2
글리세린	0.5
향료	0.5
방부제	0.03
세토스테아릴알코올	5
락트산	1
증류수	to 100

Claims

아멘토플라본(Amentoflavone); 및
백자인 추출물, 제니스테인(Genistein) 및 비오카닌 A(Biochanin A)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 아멘토플라본(Amentoflavone)은 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 1,000 ppm 함유되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 아멘토플라본(Amentoflavone)은 부처손, 바위손, 권백, 편백 및 은행으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 백자인 추출물은 상기 조성물 총 중량에 대하여 10 내지 10,000 ppm 함유되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 제니스테인(Genistein)은 상기 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 1,000 ppm 함유되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 제니스테인(Genistein)은 콩 및 이소플라본(Isoflavone)으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 비오카닌A(Biochanin A)는 상기 조성물 총 중량에 대하여 10 내지 1,000 ppm 함유되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 비오카닌A(Biochanin A)는 강진향, 콩, 붉은토끼풀 및 이소플라본(Isoflavone)으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 생체 내 PTGDS(Prostagladin D2 Synthase)의 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 화장료 인 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 10항에 있어서,
상기 화장료의 제형은 용액, 크림, 로션, 샴푸, 헤어토닉, 스프레이 및 겔 중 선택되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 경피주사 또는 피하주사를 통해 인체에 투여되는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물은 피부 외용제 또는 경구 투여제인 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 피부는 모낭 및 두피를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 또는 피부 염증 억제용 조성물.