KR20200048158A - Composition for antioxidant or improving skin wrinkle containing defatted Perilla frutescens extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a composition for antioxidation or skin wrinkle amelioration containing a perilla seed dreg extract. More specifically, the present invention relates to a cosmetic and food composition for antioxidation or skin wrinkle amelioration containing the perilla seed dreg extract. According to the present invention, since the perilla seed dreg extract has an effect of scavenging DPPH radicals and inhibiting the activity of collagenase and elastase, the perilla seed dreg extract has excellent antioxidant and skin wrinkle amelioration effects, and thus can be used in various fields in cosmetics and foods for delaying skin aging.

Description

들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 피부 주름 개선용 조성물{Composition for antioxidant or improving skin wrinkle containing defatted Perilla frutescens extract}Composition for antioxidant or improving skin wrinkle containing defatted Perilla frutescens extract}

본 발명은 들깨박 추출물을 포함하는 항산화 또는 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 상기 들깨박 추출물을 포함하는 항산화 또는 피부 주름 개선용 화장료 및 식품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for improving antioxidant or skin wrinkles including perilla extract, and more particularly, to a cosmetic and food composition for improving antioxidant or skin wrinkles comprising perilla extract.

피부는 크게 표피, 진피, 피하조직으로 구분된다. 진피에는 혈관, 림프시스템, 모공, 섬유아세포 등 피부의 중요한 부속 기관들이 있고 표피 두께의 15-40배에 해당되는 두꺼운 층으로 피부의 대부분을 차지한다(Peyrefitte, 2011). 진피조직에는 가교섬유인 콜라겐 (collagen)과 탄력섬유인 엘라스틴(elastin)으로 이루어져 있는 데 이들은 섬유아세포(fibroblast)에서 합성된다. 콜라겐은 긴 섬유로 몸의 지탱, 결합, 경계면을 만드는 역할을 한다. 콜라겐은 피부에 가해지는 압력이나 외부의 힘에 대해 저항하는 역할을 한다. 반면에 엘라스틴은 용수철처럼 피부의 탄력성을 유지하는 역할을 한다. 콜라겐과 엘라스틴이 그물망 구조를 형성하여 피부의 탄력성을 유지시켜 준다(Peyrefitte, 2011). Skin is largely divided into epidermis, dermis and subcutaneous tissue. In the dermis, there are important appendages of the skin such as blood vessels, lymphatic system, pores, and fibroblasts, and the thick layer, which is 15-40 times the thickness of the epidermis, occupies most of the skin (Peyrefitte, 2011). The dermis consists of collagen, a crosslinked fiber, and elastin, an elastic fiber, which are synthesized in fibroblasts. Collagen is a long fiber that serves to support, bond, and interface the body. Collagen acts to resist pressure and external forces on the skin. Elastin, on the other hand, maintains the elasticity of the skin like a spring. Collagen and elastin form a mesh structure to maintain skin elasticity (Peyrefitte, 2011).

피부가 노화됨에 따라 주름이 나타나고, 나이가 들어감에 따라 그 수나 깊이, 범위가 증가해 간다. 노화는 내인성 및 외인성 노화로 구분되는데 내인성 노화는 나이를 먹으면서 피부의 구조와 생리적 기능이 계속적인 감퇴를 일으키는 것이다. 외적 요인에 의한 노화는 장기간에 걸친 자외선의 노출 등이 원인으로 나타난다(Sung et al., 2008).Wrinkles appear as the skin ages, and the number, depth, and range increases with age. Aging is classified into endogenous and exogenous aging. Endogenous aging is a phenomenon in which the structure and physiological functions of the skin continue to decline with age. Aging caused by external factors is caused by long-term exposure to ultraviolet rays (Sung et al., 2008).

섬유아세포에서 생성되는 엘라스타제가 피부탄성섬유의 3차원적 뒤틀림에 중요한 역할을 한다고 보고되고 있으며, 엘라스타제의 활성증가는 피부의 엘라스틴과 콜라겐을 감소시켜 피부 주름 형성에 기여한다. 자외선 조사 후 엘라스타제의 활성이 증가하기 때문에, 엘라스타제의 활성 변화는 자외선에 의한 피부 탄성도의 감소 및 주름 생성의 주요원인으로 알려져있다(Oh et al., 2009).It has been reported that elastase produced in fibroblasts plays an important role in the three-dimensional distortion of skin elastic fibers. Increased elastase activity contributes to skin wrinkle formation by reducing elastin and collagen in the skin. Since the activity of elastase increases after irradiation with ultraviolet rays, the change in the activity of elastase is known to be a major cause of skin elasticity reduction and wrinkle formation due to ultraviolet rays (Oh et al., 2009).

들깨(Perilla frutescens var. japonica Hara)는 식물분류학상 꿀풀과에 속하는 1년생 초본식물로 동부 아시아지역이 원산지로 한국, 일본, 중국 동북부 등의 지역에서 재배되어온 유지작물로 비옥하지 않은 토질에서도 잘 자란다. 들깨 씨의 모양은 둥글고 크기는 2.5 mm × 2.3 mm 내외이고 종류에 따라 여러 가지 색이 있으나 흑색종이 많다(Yeo et al., 1998). 들깨종자는 유지의 함량이 매우 높아 유지식품으로서는 물론 강장효과도 있어 식품학적, 영양학적인 의의가 크다.Perilla ( Perilla frutescens var. japonica Hara) is a perennial herbaceous plant belonging to the genus Lamiaceae, which is native to eastern Asia and has been cultivated in regions such as Korea, Japan, and northeastern China. It grows well on unfertile soils. The shape of perilla seeds is round and the size is around 2.5 mm × 2.3 mm, and there are many colors depending on the type, but there are many melanoma (Yeo et al., 1998). Perilla seeds have a very high content of fats and oils, so they have a tonic effect as well as fats and oils.

들깨 지방의 중요성분은 올레인산과 리놀렌산의 글리세라이드이며, 고도 불포화지방산(PUFA)의 함량이 높아 산패에 대해 불안정하다(Mo, 1975). 종실 상태에서는 상당기간 산패 없이 저장이 가능하므로 종실자체의 공기차단 효과와 함께 특수한 항산화물질이 존재하는 것이 보고되었다 (Lee et al., 1993; Kim et al., 1981; Yoon et al., 1993; Lee, 1993-7; Hong et al., 1997).The important component of perilla fat is glyceride of oleic acid and linolenic acid, and the content of polyunsaturated fatty acid (PUFA) is high, making it unstable to rancidity (Mo, 1975). Since it can be stored without rancidity for a long period of time, it has been reported that special antioxidants exist along with the air-blocking effect of the seed itself (Lee et al., 1993; Kim et al., 1981; Yoon et al., 1993; Lee, 1993-7; Hong et al., 1997).

이에 본 발명자들은 항산화 및 항주름 활성을 가진 소재를 발굴하기 위하여 연구한 결과, 들깨박 추출물의 현저한 항산화 활성과 피부 주름 개선 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors completed the present invention by confirming the remarkable antioxidant activity and skin wrinkle improvement effect of the perilla extract as a result of research to discover materials having antioxidant and anti-wrinkle activity.

따라서 본 발명의 목적은, 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 피부 주름 개선용 화장료 및 식품 조성물을 제공하는 것이다.Therefore, an object of the present invention is to provide a cosmetic and food composition for improving antioxidant or skin wrinkles containing perilla extract as an active ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for antioxidant comprising perilla extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a food composition for antioxidant containing perilla extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for preventing or improving skin wrinkles comprising perilla extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a food composition for preventing or improving skin wrinkles containing perilla extract as an active ingredient.

본 발명에 따른 들깨박 추출물은 DPPH 라디칼 소거하는 효과와, 콜라게나제 및 엘라스타제의 활성을 저해하는 효과를 가지고 있어, 항산화 및 피부 주름 개선 효과가 우수한바, 피부 노화 억제용 화장료 및 식품 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.The perilla extract according to the present invention has the effect of scavenging DPPH radicals and inhibiting the activity of collagenase and elastase, and thus has excellent antioxidant and skin wrinkle improvement effects. It can be used in various ways.

도 1은 본 발명에 따른 들깨박 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과를 나타내는 도이다.
도 2는 본 발명에 따른 들깨박 에탄올 추출물의 세포 독성을 평가한 결과를 나타내는 도이다.
도 3은 본 발명에 따른 들깨박 에탄올 추출물의 항산화 활성을 분석한 결과를 나타내는 도이다.
도 4는 본 발명에 따른 들깨박 에탄올 추출물의 콜라게나제 저해 활성을 분석한 결과를 나타내는 도이다.
도 5는 본 발명에 따른 들깨박 에탄올 추출물의 엘라스타제 저해 활성을 분석한 결과를 나타내는 도이다.
1 is a view showing the results of measuring the total polyphenol and total flavonoid content of the perilla extract ethanol extract according to the present invention.
2 is a view showing the results of evaluating the cytotoxicity of perilla extract ethanol extract according to the present invention.
3 is a view showing the results of analyzing the antioxidant activity of perilla extract ethanol extract according to the present invention.
4 is a view showing the results of analyzing the collagenase inhibitory activity of perilla extract ethanol extract according to the present invention.
5 is a view showing the results of analyzing the elastase inhibitory activity of perilla extract ethanol extract according to the present invention.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 양태에 따르면, 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용; 또는 피부 주름 예방 또는 개선용; 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 화장료및 식품 조성물을 포함한다.According to an aspect of the present invention, antioxidant for containing perilla extract as an active ingredient; Or for preventing or improving skin wrinkles; Provided is a composition. The composition includes cosmetic and food compositions.

본 발명에 있어서, “추출물”은 적절한 용매를 이용하여 들깨박으로부터 추출한 것이며, 예를 들어 들깨박의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 또한, 상기 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.In the present invention, the "extract" is extracted from perilla extract using a suitable solvent, and includes, for example, a crude extract of perilla extract, a polar solvent soluble extract, or a non-polar solvent soluble extract. In addition, the extract is a concept including all of the extracts, fractions, their diluents, concentrates or dried products obtained at each stage of extraction, fractionation or purification.

본 발명의 조성물의 유효성분인 들깨박 추출물은 통상적인 추출 방법에 의해 얻을 수 있고 또는 시판되는 것을 구입하여 사용할 수도 있다.The perilla extract, which is an active ingredient of the composition of the present invention, can be obtained by a conventional extraction method or can be used by purchasing a commercially available one.

상기 들깨박 추출물은 당업계에 공지된 추출, 분리 및 분획하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출, 분리 및 분획하여 수득한 것을 사용할 수 있다. The perilla extract can be obtained by extraction, separation and fractionation from nature using extraction, separation and fractionation methods known in the art.

상기 들깨박 추출물을 수득하기 위한 적절한 용매로는 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 화장품학 및 식품학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하다. 예를 들어, 상기 용매로는 물, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등의 탄소수 1 내지 4의 알코올 등을 단독으로 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 바람직하게, 상기 용매로는 에탄올을 사용할 수 있다.As a suitable solvent for obtaining the perilla extract, water or an organic solvent may be used, and any organic solvent acceptable in cosmetics and food may be used. For example, as the solvent, alcohols having 1 to 4 carbon atoms, such as water, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, alone or two or more, It can be used by mixing. Preferably, ethanol may be used as the solvent.

상기 추출 온도는 상온인 것이 바람직하다. 또한 추출방법으로는 열수추출법, 침지법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 다양한 방법이 사용될 수 있으나 이에 제한되지는 않고, 바람직하게는 에탄올을 이용한 침지 추출법을 사용하는 것이다.The extraction temperature is preferably room temperature. In addition, various methods such as hot water extraction, immersion, cold immersion extraction, reflux cooling extraction, solvent extraction, water vapor distillation, ultrasonic extraction, elution, and compression may be used, but are not limited thereto, preferably ethanol. It is to use the immersion extraction method using.

상기 들깨박 추출물은 당업계에서 알려진 통상의 방법으로 상온에서 냉침, 가열 및 여과하여 액상물을 얻을 수 있으며, 또는 추가로 용매를 증발, 분무건조 또는 동결건조할 수도 있다. 또한 상기 들깨박 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수도 있다. 또한 상기 추출물 또는 분획물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획으로도 얻을 수 있다.The perilla extract can be obtained by immersing, heating and filtering at room temperature by a conventional method known in the art to obtain a liquid, or further evaporating, spray drying or freeze-drying the solvent. In addition, the perilla extract can be prepared in powder form by additional processes such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying. In addition, the extract or fraction is further purified by using various chromatography such as silica gel column chromatography, thin layer chromatography, high performance liquid chromatography, etc. You can also get

따라서 본 발명에서 사용되는 상기 들깨박 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출물, 분획물 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.Therefore, the perilla extract used in the present invention is a concept that includes all of the extracts, fractions and refinements, their dilutions, concentrates or dried products obtained at each stage of extraction, fractionation or purification.

본 발명의 일 실시예에서, 들깨박 추출물은 들깨를 착유한 후 부산물을 수거하여 건조하였으며, 상기 건조 들깨박을 에탄올 추출하여 제조된 것이다.In one embodiment of the present invention, the perilla extract was prepared by milking perilla and collecting and drying by-products, and ethanol was extracted from the dried perilla extract.

본 발명의 다른 실시예에서, 상기 조성물은 들깨박 추출물을 0.1 내지 1000 mg/ml의 농도로 포함하는 것이 바람직하며, 10 내지 1000 mg/ml의 농도로 포함하는 것이 더 바람직하며, 가장 바람직하게는 200 mg/ml의 농도로 포함할 수 있다.In another embodiment of the present invention, the composition preferably contains perilla extract at a concentration of 0.1 to 1000 mg / ml, more preferably 10 to 1000 mg / ml, and most preferably 200 mg / ml.

본 발명의 조성물은 들깨박 추출물과 함께 항산화 또는 피부 주름 개선 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 더 함유할 수 있다. The composition of the present invention may further contain one or more known active ingredients having an antioxidant or skin wrinkle improvement effect together with perilla extract.

본 발명에 있어서, “항산화”는 당업계에 알려진 산화 과정을 늦추거나 막거나 또는 예방할 수 있는 효능을 의미하는 것으로서 제한이 없다.In the present invention, "antioxidation" is not limited as meaning the efficacy to slow down, block or prevent the oxidation process known in the art.

본 발명에 있어서, “피부 주름”은 피부 노화에 의해서 피부 탄력이 떨어져 피부가 접히는 현상을 의미하며, 피부 주름의 주요 원인은 콜라제나제(collagenase) 및 엘라스타제(elastase)의 활성 증가로 인한 콜라겐 및 엘라스틴의 분해로 알려져 있다.In the present invention, “skin wrinkles” refers to a phenomenon in which skin elasticity is reduced and skin folds due to skin aging, and the main cause of skin wrinkles is due to increased activity of collagenase and elastase. It is known for the degradation of collagen and elastin.

본 발명에 있어서, “예방”은 본 발명의 조성물에 의해 어떤 현상의 원인을 제거하거나 조기 발견하여 해당 현상을 막는 모든 행위를 의미한다.In the present invention, "prevention" refers to all actions to prevent the phenomenon by eliminating or prematurely detecting the cause of a phenomenon by the composition of the present invention.

본 발명에 있어서, “개선”은 본 발명의 조성물에 의해 생체 대사, 세포 또는 기관의 기능이 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.In the present invention, "improvement" means any action in which the function of a biological metabolism, cell or organ is advantageously changed by the composition of the present invention.

본 발명에 따른 들깨박 추출물은 DPPH 라디칼 소거능이 우수하며, 콜라게나제 및 엘라스타제의 활성을 저해한다. 이는 항산화 효과뿐만 아니라, 피부 주름 예방 또는 개선 효과가 우수하다는 것을 의미하는바, 본 발명의 들깨박 추출물은 항산화용; 또는 피부 주름 예방 또는 개선용; 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.The perilla extract according to the present invention has excellent DPPH radical scavenging ability and inhibits the activity of collagenase and elastase. This means that not only the antioxidant effect, but also excellent in preventing or improving skin wrinkles, perilla extract of the present invention is for antioxidant; Or for preventing or improving skin wrinkles; It can be usefully used as a composition.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 등과 같은 통상적인 보조제 및 담체가 더 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물에는 글리세린, 부틸렌 글라이콜, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 토코페릴 아세테이트, 시트릭산, 판테놀, 스쿠알란, 소듐 시트레이트, 알란토인 등의 보조성분이 추가로 더 포함될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may further include conventional adjuvants and carriers, such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, fragrances, etc., which are commonly used in cosmetic compositions in addition to the active ingredients. For example, the cosmetic composition may further include auxiliary components such as glycerin, butylene glycol, polyoxyethylene cured castor oil, tocopheryl acetate, citric acid, panthenol, squalane, sodium citrate, allantoin, and the like. .

본 발명의 화장료 조성물은 기본적으로 피부에 도포되는 것이므로, 당업계의 화장료 조성물을 참조하여 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 마스크팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.Since the cosmetic composition of the present invention is basically applied to the skin, it can be prepared in any formulation that is conventionally prepared with reference to cosmetic compositions in the art. For example, it can be formulated as a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, etc. It is not limited to this. More specifically, it can be prepared in the form of a flexible lotion, nutrient lotion, nutrient cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, mask pack, spray or powder.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 등이 포함될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, trakant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide, etc. may be included as carrier components. have.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 등이 포함될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄, 디메틸 에테르 등의 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, as a carrier component, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, etc. may be included. In particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane / Propellants such as butane and dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로 용매, 용해화제, 유탁화제 등이 포함될 수 있고, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a carrier component may include a solvent, a solubilizing agent, an emulsifying agent, etc., specifically water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene Glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol, fatty acid ester of sorbitan, and the like.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로 물, 에탄올, 프로필렌글리콜 등의 액상 희석제; 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 등의 현탁제; 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가, 트라칸트 등이 포함될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol, and propylene glycol as carrier components; Suspension agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, and polyoxyethylene sorbitan ester; Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, trakant, and the like.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린유도체, 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide as a carrier component Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives, ethoxylated glycerol fatty acid esters, and the like.

본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품, 식품 첨가제 또는 식이보조제일 수 있다. 본 발명의 조성물이 식품 첨가제인 경우, 들깨박 추출물을 그대로 첨가하거나, 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 혼합하여 사용되는 등 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.The food composition of the present invention may be a health functional food, food additive or dietary supplement. When the composition of the present invention is a food additive, perilla extract may be added as it is, or may be suitably used according to a conventional method such as being used in combination with other food or food ingredients.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없으나, 본 발명의 들깨박 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료, 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.The type of food is not particularly limited, but examples of foods to which the perilla extract of the present invention can be added are meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice creams Dairy products, including various soups, beverages, teas, drinks, alcoholic beverages, vitamin complexes, etc., and include all healthy foods in the ordinary sense.

본 발명의 식품 조성물이 음료로 제조될 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등의 추가 성분을 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당 등의 모노사카라이드; 말토오스, 수크로오스 등의 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린 등의 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐 등의 합성 감미제 등이 사용될 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 10중량%, 바람직하게는 0.01 내지 0.1중량%로 포함된다.When the food composition of the present invention is prepared as a beverage, it may include various components such as various flavoring agents or natural carbohydrates, such as a conventional beverage. The natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose; Disaccharides such as maltose and sucrose; Natural sweeteners such as dextrin and cyclodextrin; Synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame can be used. The natural carbohydrate is contained in 0.01 to 10% by weight, preferably 0.01 to 0.1% by weight relative to the total weight of the food composition of the present invention.

본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있으며, 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기의 첨가제 비율은 크게 제한되지는 않으나, 본 발명의 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 0.1중량% 범위내로 포함되는 것이 바람직하다.The food composition of the present invention is a variety of nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonic acid Carbonation agents used in beverages, and the like, and may include, but are not limited to, natural fruit juice, fruit juice beverage, and flesh for preparing vegetable beverages. These ingredients may be used independently or in combination. The additive ratio is not particularly limited, but is preferably included in the range of 0.01 to 0.1% by weight relative to the total weight of the food composition of the present invention.

건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우, 본 발명의 식품 조성물은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 장기간 복용이 가능하다.In the case of long-term intake for health and hygiene purposes or for health control purposes, the food composition of the present invention can be taken for a long time because there is no problem in terms of safety.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for illustrating the present invention, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not to be construed as limited by these examples.

비교예Comparative example 1.  One. 들깨박Perilla 열수Hydrothermal 추출물 제조 Extract preparation

들깨박 열수 추출물 제조에 사용된 들깨박은 충북 음성 코메가 회사에서 생 들깨를 착유 후 남은 부산물을 수거하여 건조하여 사용하였다. 건조된 들깨박을 20 메쉬 이하로 분쇄하여 들깨박 분말을 제조하였다. 상기 들깨박 분말의 중량에 대하여 10 배의 증류수를 가한 후 실온에서 24 시간 동안 열수 추출하였다. 그 후 시료를 여과(Whatman No2, Maidstone, England) 및 감압농축(N-1000S-WD, Eyela Co., Tokyo, Japan)한 후 동결 건조(FDU-1100, Eyela Co., Tokyo, Japan)하여 들깨박 열수 추출물(이하, WE로 표시)을 완성하였다.The perilla extract used in the production of perilla extract was used by drying and collecting the remaining by-products after milking raw perilla from Eumseong Comega, Chungbuk. The dried perilla gourd was pulverized to 20 mesh or less to prepare perilla gourd powder. 10 times distilled water was added to the weight of the perilla powder, followed by hot water extraction at room temperature for 24 hours. Then, the sample was filtered (Whatman No2, Maidstone, England) and concentrated under reduced pressure (N-1000S-WD, Eyela Co., Tokyo, Japan), followed by freeze-drying (FDU-1100, Eyela Co., Tokyo, Japan) and perilla. Completed the hot water extract (hereinafter referred to as WE).

실시예Example 1.  One. 들깨박Perilla 에탄올 추출물 제조 Ethanol extract preparation

들깨박 에탄올 추출물 제조는 상기 비교예 1에서 제조된 들깨박 분말을 사용하였다. 건조된 들깨박을 20 메쉬 이하로 분쇄하여 들깨박 분말을 제조하였다. 70 % 에탄올을 이용하여 들깨박 분말과 용매를 1:10의 비율로 혼합하여 상온에서 72 시간 동안 추출하였다. 그 후 시료를 여과(Whatman No2, Maidstone, England) 및 감압농축(N-1000S-WD, Eyela Co., Tokyo, Japan)한 후 동결 건조(FDU-1100, Eyela Co., Tokyo, Japan)하여 들깨박 에탄올 추출물(이하, EE로 표시)을 완성하였다. The perilla extract ethanol extract was prepared using the perilla extract powder prepared in Comparative Example 1. The dried perilla gourd was pulverized to 20 mesh or less to prepare perilla gourd powder. Perilla powder and solvent were mixed at a ratio of 1:10 using 70% ethanol, and extracted at room temperature for 72 hours. Then, the sample was filtered (Whatman No2, Maidstone, England) and concentrated under reduced pressure (N-1000S-WD, Eyela Co., Tokyo, Japan), followed by freeze-drying (FDU-1100, Eyela Co., Tokyo, Japan) and perilla. A complete ethanol extract (hereinafter referred to as EE) was completed.

실시예Example 2.  2. 들깨박Perilla 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 측정 Determination of total polyphenol and total flavonoid content of ethanol extract

상기 실시예 1에서 제조된 들깨박 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량을 측정하였다.The total polyphenol and total flavonoid content of the perilla extract ethanol extract prepared in Example 1 was measured.

총 폴리페놀 함량비교를 위해 폴린-데니스법(Folin and Denis, 1912)을 응용하였다. 들깨박 에탄올 추출물을 농도별로 희석한 용액 2 mL에 2배 희석된 폴린 시약(Sigma Co., St. Louis, MO, USA) 2 mL을 첨가하여 혼합하였다. 혼합액을 3분간 방치한 다음 10% Na2CO3(Sigma Co.) 2 mL을 넣고 1시간 반응시킨 후 UV/가시분광광도계(UV/Visible spectrophotometer, UVIKON 922, Kontran Co., Milan, Italy) 700 nm에서 흡광도를 측정하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 계산하였다. 이 때 갈산(gallic acid, Sigma Co.)을 이용한 표준곡선은 갈산의 최종농도가 0, 5, 25, 50, 75 μg/mL가 되도록 한 후 상기와 같은 방법으로 700 nm에서 흡광도를 측정하여 구하였다. To compare the total polyphenol content, the Folin and Denis method (Folin and Denis, 1912) was applied. Perilla ethanol extract was mixed by adding 2 mL of a 2-fold diluted folin reagent (Sigma Co., St. Louis, MO, USA) to 2 mL of the solution diluted by concentration. The mixture was left for 3 minutes, and then 2 mL of 10% Na 2 CO 3 (Sigma Co.) was added and reacted for 1 hour, followed by UV / Visible spectrophotometer (UVIKON 922, Kontran Co., Milan, Italy) 700 The content was calculated from the standard curve prepared by measuring the absorbance at nm. In this case, the standard curve using gallic acid (Sigma Co.) was obtained by measuring the absorbance at 700 nm in the same way as the final concentration of gallic acid was 0, 5, 25, 50, 75 μg / mL. Did.

총 플라보노이드 함량은 Nieva Moreno 등(Nieva et al., 2000)의 방법을 응용하여 측정하였다. 각 시표 0.1 mL와 80 % 에탄올 0.9 mL을 혼합한 혼합물 0.5 mL에 10 % (Sigma Co.)와 1 M 질화알루미늄(potassium acetate, Sigma Co.) 0.1 mL 및 80 % 에탄올 4.3 mL을 가하여 실온에 40 분 동안 반응시킨 후 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 플라보노이드 함량은 퀘르세틴(quercetin, Sigma Co.)을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 계산하였다.The total flavonoid content was measured by applying the method of Nieva Moreno et al. (Nieva et al., 2000). To a mixture of 0.1 mL of each sample and 0.9 mL of 80% ethanol, add 0.5 mL of 10% (Sigma Co.), 1 M aluminum nitride (Sassima Co.) 0.1 mL, and 4.3 mL of 80% ethanol to 4.3 mL. After reacting for minutes, absorbance was measured at 415 nm. At this time, the total flavonoid content was calculated from a standard curve prepared using quercetin (Sigma Co.).

총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과는 도 1에 나타내었다.The results of measuring the total polyphenol and total flavonoid content are shown in FIG. 1.

도 1에 나타낸 바와 같이, 들깨박 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량은 48.32 mg/g이며, 총 플라보노이드 함량은 17.32 mg/g임을 확인하였다.1, it was confirmed that the total polyphenol content of the perilla extract ethanol extract was 48.32 mg / g, and the total flavonoid content was 17.32 mg / g.

실시예Example 3.  3. 들깨박Perilla 에탄올 추출물의 독성 평가 Toxicity evaluation of ethanol extract

독성 평가에 사용된 미세아교세포주 BV-2 세포는 미국 하버드대학교에서 분양받았다. BV-2 세포의 배양은 10 % 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS; Gibco, BRL, USA), 100 μg/mL 페니실린(Gibco, BRL, USA) 및 100 μg/mL 스트렙토마이신(Gibco, BRL, USA)을 포함하는 RPMI1640 배지(Gibco, BRL, USA)를 이용하였으며, 5 % CO2가 존재하는 37℃ 배양기에서 2 내지 3 일에 한 번씩 계대 배양하였다.The microglial cell line BV-2 cells used for toxicity evaluation were purchased from Harvard University. Cultures of BV-2 cells were cultured in 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco, BRL, USA), 100 μg / mL penicillin (Gibco, BRL, USA) and 100 μg / mL streptomycin (Gibco, BRL, USA) containing RPMI1640 medium (Gibco, BRL, USA) was used, and cultured once every 2-3 days in a 37 ° C incubator with 5% CO 2 .

LPS(Lipopolysaccharide)로 자극된 BV-2 세포에서 들깨박 에탄올 추출물이 세포 생존에 미치는 영향을 확인하기 위해 세포생존율을 MTT(3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) 분석법으로 측정하였다. 세포(1X105 cell/mL)를 96-웰 플레이트에 180 μL씩 분주하여 5 % CO2 배양기에서 12 시간 이상 배양하였다. 배양된 세포에 들깨박 에탄올 추출물을 다양한 농도(10, 25, 50, 75, 100 μg/ml)로 처리한 후 24 시간 동안 배양하였다. 배양액을 제거하고 0.5 mg/mL MTT가 함유되어 있는 배지 200 μL를 첨가하였으며, 4 시간 동안 추가 배양하여 MTT가 환원되도록 하였다. 그 후 배양액을 제거하고 DMSO(dimethylsulfoxide)를 100 μL 첨가하여 생성된 포마잔(formazone) 결정을 용해시켰으며, ELISA 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 LPS 및 시료를 처리하지 않았으며, 비교군은 상기 비교예 1에서 제조된 들깨박 열수 추출물을 처리하였다. 실험군의 세포 생존율은 대조군을 기준으로, 측정된 흡광도 값을 백분율(%)로 나타내었다. 세포 독성 평가 결과는 도 2에 나타내었다.To confirm the effect of perilla ethanol extract on cell survival in BV-2 cells stimulated with LPS (Lipopolysaccharide), the cell viability was determined by MTT (3- [4,5-Dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyl -tetrazolium bromide). Cells (1X10 5 cell / mL) were dispensed into a 96-well plate in 180 μL increments and cultured in a 5% CO 2 incubator for at least 12 hours. The cultured cells were treated with perilla ethanol extract at various concentrations (10, 25, 50, 75, 100 μg / ml) and cultured for 24 hours. The culture solution was removed, and 200 μL of a medium containing 0.5 mg / mL MTT was added, and further cultured for 4 hours to reduce MTT. Thereafter, the culture solution was removed, and 100 μL of DMSO (dimethylsulfoxide) was added to dissolve the generated formazone crystals, and absorbance was measured at 540 nm using an ELISA reader. The control group did not process the LPS and the sample, and the comparison group treated the perilla extract hot water extract prepared in Comparative Example 1. The cell viability of the experimental group was expressed as a percentage (%) of the measured absorbance value based on the control group. The cytotoxicity evaluation results are shown in FIG. 2.

도 2에 나타낸 바와 같이, 들깨박 에탄올 추출물 처리군은 세포생존율이 95 % 이상인 것을 확인하였다. 상기 결과는 들깨박 에탄올 추출물이 세포 독성이 거의 없다는 것을 의미한다.As shown in Figure 2, the perilla ethanol extract treatment group confirmed that the cell viability was 95% or more. The above results indicate that the perilla ethanol extract has little cytotoxicity.

실시예Example 4.  4. 들깨박Perilla 에탄올 추출물의 항산화 활성 분석 Analysis of antioxidant activity of ethanol extract

DPPH(α-α-Diphenyl-β-picrylhydrazyl)는 hydrazyl의 질소원자가 불안정한 상태로 쉽게 수소원자를 받아들이는 성질을 가지고 있어 항산화성 물질과 반응하여 수소원자를 받아들임으로서 자체적으로 가지고 있는 정색성을 잃는 성질을 이용하여 항산화능의 정도를 측정할 수 있다. DPPH (α-α-Diphenyl-β-picrylhydrazyl) has the property of easily accepting hydrogen atoms in an unstable nitrogen atom of hydrazyl, so it reacts with antioxidants and loses its own color by accepting hydrogen atoms. Can be used to measure the degree of antioxidant capacity.

DPPH 라디칼 소거 활성을 측정하기 위하여, 다양한 농도의 들깨박 에탄올 추출물(10, 20, 40, 80, 100, 200 μg/ml) 30 μl 및 농도가 60 μM인 DPPH 용액(DPPH을 메탄올에 용해한 것) 30 μl을 혼합하여 상온에서 2 분 동안 반응시켰다. 혼합액을 튜브에 옮긴 후 전자회전공명(electron spin resonance: ESR)을 분광광도계(JES-PX 2300, Jeol Co., Japan)로 측정하였다. 이 때 ESR 분광광도계의 측정 조건은 자기장의 경우 336.5±5 mT, 미세파동 전력(microwave power)은 5 mW, 변조주파수(modulation frequency)는 9.41 GHz였다. 변조 시료에 대한 DPPH 라디칼 저해활성은 하기의 계산식으로 계산하였다. 대조군은 메탄올을 처리한 것이며, 비교군은 상기 비교예 1에서 제조된 들깨박 열수 추출물을 처리하였다. 실험군의 DPPH 라디칼 소거 활성 분석 결과는 도 3에 나타내었다.To measure DPPH radical scavenging activity, 30 μl of various concentrations of perilla ethanol extract (10, 20, 40, 80, 100, 200 μg / ml) and DPPH solution with a concentration of 60 μM (DPPH dissolved in methanol) 30 μl was mixed and reacted at room temperature for 2 minutes. After the mixed solution was transferred to a tube, electron spin resonance (ESR) was measured with a spectrophotometer (JES-PX 2300, Jeol Co., Japan). At this time, the measurement conditions of the ESR spectrophotometer were 336.5 ± 5 mT in the case of a magnetic field, 5 mW in the microwave power and 9.41 GHz in the modulation frequency. DPPH radical inhibitory activity on the modulated sample was calculated by the following calculation formula. The control group was treated with methanol, and the comparative group was treated with perilla extract hot water extract prepared in Comparative Example 1. The results of the DPPH radical scavenging activity analysis of the experimental group are shown in FIG. 3.

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도 3에 나타낸 바와 같이, 농도가 10 μg/ml인 들깨박 에탄올 추출물은 DPPH 라디칼 소거능이 약 68 %임을 확인하였다. 또한 농도가 20 μg/ml 이상인 들깨박 에탄올 추출물은 DPPH 라디칼 소거능이 80 % 이상인 것을 확인하였다. 반면에, 비교군인 들깨박 열수 추출물은 DPPH 라디칼 소거능이 낮은 것을 확인하였다.As shown in Figure 3, the concentration of 10 μg / ml perilla extract ethanol extract was confirmed that the DPPH radical scavenging ability is about 68%. In addition, it was confirmed that the perilla ethanol extract having a concentration of 20 μg / ml or more had a DPPH radical scavenging ability of 80% or more. On the other hand, it was confirmed that the perilla perilla hot water extract had a low DPPH radical scavenging ability.

실시예Example 5.  5. 들깨박Perilla 에탄올 추출물의  Of ethanol extract 콜라게나제Collagenase (( collagenasecollagenase ) 저해 활성 분석) Inhibition activity assay

여러 요인에 의해 콜라겐의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 자외선에 의한 활성산소종의 증가와 같은 외적요인에 의해 분해가 가속화되어 피부 기질이 파괴되면서 주름이 생성된다. 콜라게나제는 피부 기질의 콜라겐을 분해하는 효소로, 이의 활성을 억제를 통해 주름이 생성되는 것을 억제할 수 있다.The biosynthesis of collagen is reduced by various factors, and decomposition is accelerated by external factors such as increased stress caused by various harmful environments and increased free radicals caused by UV rays, and wrinkles are generated as the skin matrix is destroyed. Collagenase is an enzyme that breaks down collagen in the skin matrix, and can inhibit the formation of wrinkles by inhibiting its activity.

들깨박 에탄올 추출물의 콜라게나제의 저해 활성 측정은 Kim et al.(2004)의 방법으로 측정하였다. 콜라게나제 저해 활성 분석을 위한 반응 용액은 0.1 M Tris-HCl 완충액(pH 7.5)에 4 mM CaCl2를 첨가하여 준비하였다. 상기 반응 용액 0.25 ml, 농도가 0.3 mg/ml인 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-Arg 용액 및 다양한 농도의 들깨박 에탄올 추출물(20, 40, 80, 100 mg/ml) 0.1 ml을 혼합하였다. 상기 혼합액에 콜라게나제(0.2 mg/ml) 0.15 ml를 첨가하여 실온에서 20 분 동안 방치하였다. 그 후 6 % 시트르산 0.5 ml을 넣어 반응을 정지시킨 후 에틸아세테이트 1.5 ml을 첨가한 후, 320 nm에서 상등액의 흡광도를 측정하였다. 대조군은 추출물을 처리하지 않았으며, 비교군은 상기 비교예 1에서 제조된 들깨박 열수 추출물을 처리하였다. 콜라게나제 저해 활성은 실험군과 대조군의 흡광도 감소율로 나타내었다. 콜라게나제 저해 활성 분석 결과는 도 4에 나타내었다.Measurement of the inhibitory activity of collagenase in perilla extract ethanol extract was measured by the method of Kim et al. (2004). The reaction solution for the analysis of collagenase inhibitory activity was prepared by adding 4 mM CaCl 2 to 0.1 M Tris-HCl buffer (pH 7.5). 0.25 ml of the reaction solution, 0.1 ml of 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-Arg solution having a concentration of 0.3 mg / ml and ethanol extract of perilla extract (20, 40, 80, 100 mg / ml) of various concentrations Mixed. 0.15 ml of collagenase (0.2 mg / ml) was added to the mixture and left at room temperature for 20 minutes. Thereafter, 0.5 ml of 6% citric acid was added to stop the reaction, and 1.5 ml of ethyl acetate was added, and the absorbance of the supernatant was measured at 320 nm. The control group did not process the extract, and the comparison group treated the perilla extract hot water extract prepared in Comparative Example 1. The collagenase inhibitory activity was expressed as a decrease in absorbance between the experimental group and the control group. The results of the analysis of collagenase inhibitory activity are shown in FIG. 4.

도 4에 나타낸 바와 같이, 농도가 20 mg/ml인 들깨박 에탄올 추출물은 콜라게나제 저해 활성이 4.1 %였으며, 추출물의 농도가 증가할수록 콜라게나제 저해 활성이 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 들깨박 에탄올 추출물의 농도가 80 및 100 mg/ml인 실험군의 콜라게나제 저해 활성은 각각 26.7 및 31.2 %임을 확인하였다. 반면에, 비교군인 들깨박 열수 추출물은 콜라게나제 저해 활성이 매우 낮은 것을 알 수 있다. 상기 결과로부터, 들깨박 에탄올 추출물은 콜라게나제 저해 활성이 우수하며, 콜라게나제 저해를 통해 주름 생성을 억제할 수 있음을 의미한다.As shown in Figure 4, the concentration of 20 mg / ml perilla extract ethanol extract had a collagenase inhibitory activity was 4.1%, it was confirmed that the collagenase inhibitory activity increases as the concentration of the extract increases. In particular, it was confirmed that the collagenase inhibitory activity of the experimental group having the concentration of perilla extract ethanol extract of 80 and 100 mg / ml was 26.7 and 31.2%, respectively. On the other hand, it can be seen that the comparative group perilla extract hot water extract has very low collagenase inhibitory activity. From the above results, the perilla ethanol extract has excellent collagenase inhibitory activity, and means that it is possible to suppress wrinkle formation through collagenase inhibition.

실시예Example 6.  6. 들깨박Perilla 에탄올 추출물의  Of ethanol extract 엘라스타제Elastase (( elastaseelastase ) 저해 활성 분석) Inhibition activity assay

엘라스타제는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 효소로, 다른 기질인 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해효소이다. 피부의 진피 조직 속에는 콜라겐과 피부의 탄력성에 관련된 엘라스틴이 그물망 구조를 형성하고 있다. 주름 생성의 주 원인인 엘라스타제의 작용을 통해 엘라스틴이 분해되며, 이로 인하여 진피 조직 내 그물망 구조가 끊어짐으로써 주름이 생성된다. 엘라스타제를 저해하는 것은 피부 주름을 개선하는 작용을 나타내며, 우르솔산(ursolic acid) 등이 엘라스타제 저해제로 보고되어 있다(Tsuji et al., 2001).Elastase is an enzyme that breaks down elastin, a protein, and is a non-specific hydrolase that can break down another substrate, collagen. In the dermal tissue of the skin, collagen and elastin related to the elasticity of the skin form a mesh structure. Elastin is decomposed through the action of elastase, which is the main cause of wrinkle formation, and thereby, wrinkles are generated by breaking the network structure in the dermal tissue. Inhibiting elastase has the effect of improving skin wrinkles, and ursolic acid has been reported as an elastase inhibitor (Tsuji et al ., 2001).

들깨박 에탄올 추출물의 엘라스타제 저해 활성은 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide를 기질로 사용하여 37 ℃에서 30 분 동안 P-nitroanilide의 생성량을 측정하여 분석하였다(Cannell et al.,(1998)). 구체적으로, 다양한 농도(20, 40, 80, 100 mg/ml)의 들깨박 에탄올 추출물을 0.1 ml 씩 시험관에 취하고, 농도가 50 mM인 Tris-HCl 완충액(pH 8.6)에 용해시킨 엘라스타제 용액(Type I: 돼지 췌장 유래, 0.6 units/ml) 0.05 ml을 가하여 반응 용액을 준비하였다. 상기 반응 용액에 50 mM Tris-HCl 완충액(pH 8.6)에 녹인 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide(1 mg/ml) 0.1 ml를 첨가한 후 30 분 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 410 nm에서 반응 용액의 흡광도를 마이크로플레이트 리더를 이용하여 측정하였다. 대조군은 추출물을 처리하지 않았으며, 비교군은 상기 비교예 1에서 제조된 들깨박 열수 추출물을 처리하였다. 엘라스타제의 저해 활성은 실험군과 대조군의 흡광도 감소율로 나타내었다. 상기 엘라스타제 저해 활성 분석 결과는 도 5에 나타내었다.Elastase inhibitory activity of perilla extract ethanol extract was analyzed by measuring the production of P-nitroanilide for 30 minutes at 37 ° C using N-succinyl- (L-Ala) 3-p-nitroanilide as a substrate (Cannell et al. ., (1998)). Specifically, 0.1% of perilla ethanol extracts of various concentrations (20, 40, 80, 100 mg / ml) were taken into test tubes, and the elastase solution dissolved in Tris-HCl buffer (pH 8.6) having a concentration of 50 mM. (Type I: derived from porcine pancreas, 0.6 units / ml) 0.05 ml was added to prepare a reaction solution. 0.1 ml of N-succinyl- (L-Ala) 3-p-nitroanilide (1 mg / ml) dissolved in 50 mM Tris-HCl buffer (pH 8.6) was added to the reaction solution, followed by reaction for 30 minutes. After the reaction was completed, the absorbance of the reaction solution was measured at 410 nm using a microplate reader. The control group did not process the extract, and the comparison group treated the perilla extract hot water extract prepared in Comparative Example 1. The inhibitory activity of elastase was expressed as the decrease in absorbance between the experimental group and the control group. The results of the analysis of the elastase inhibitory activity are shown in FIG. 5.

도 5에 나타낸 바와 같이, 농도가 20 mg/ml인 들깨박 에탄올 추출물은 엘리스타제 저해 활성이 3.8 %였으며, 추출물의 농도가 증가할수록 엘라스타제 저해 활성이 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 들깨박 에탄올 추출물의 농도가 100 mg/ml인 실험군의 엘라스타제 저해 활성은 35.7 %임을 확인하였다. 반면에, 비교군인 들깨박 열수 추출물은 엘라스타제 저해 활성이 매우 낮은 것을 알 수 있다. 상기 결과는 들깨박 에탄올 추출물이 엘라스타제 저해 활성이 우수하며, 엘라스타제 저해를 통해 주름 생성을 억제할 수 있음을 의미한다.As shown in FIG. 5, the concentration of 20 mg / ml perilla extract ethanol extract had an elastase inhibitory activity of 3.8%, and it was confirmed that the elastase inhibitory activity increased as the concentration of the extract increased. In particular, it was confirmed that the elastase inhibitory activity of the experimental group in which the concentration of perilla extract ethanol was 100 mg / ml was 35.7%. On the other hand, it can be seen that the perilla perilla hot water extract has a very low elastase inhibitory activity. The above results indicate that the perilla ethanol extract has excellent elastase inhibitory activity and can suppress wrinkle formation through elastase inhibition.

종합적으로 본 발명자들은 들깨박 에탄올 추출물이 DHHP 라디칼 소거능, 콜라게나제 및 엘라스타제의 저해 활성이 우수하다는 것을 확인하였다. 이는 들깨박 에탄올 추출물이 세포에 대한 독성이 없을 뿐만 아니라 현저한 항산화 및 항주름 활성이 있음을 의미하는바, 본 발명의 들깨박 에탄올 추출물은 피부 개선, 항산화 및 주름 개선 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.Overall, the present inventors confirmed that the perilla ethanol extract has excellent DHHP radical scavenging activity, inhibitory activity of collagenase and elastase. This means that the perilla extract ethanol extract is not only toxic to cells, but also has significant antioxidant and anti-wrinkle activity. The perilla extract ethanol extract of the present invention can be used in various fields in skin improvement, antioxidant and wrinkle improvement. .

이하, 제제예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 제제예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 제제예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through formulation examples. The formulation examples are only for illustrating the present invention, and the scope of the present invention is not to be construed as being limited by the formulation examples.

제제예Formulation example 1. 유연화장수(스킨로션)의 제조 1. Manufacture of flexible cosmetic (skin lotion)

들깨박 에탄올 추출물 0.5%Perilla ethanol extract 0.5%

베타-1,3-글루칸 1.0%Beta-1,3-glucan 1.0%

부틸렌글리콜 2.0%Butylene glycol 2.0%

프로필렌글리콜 2.0%Propylene glycol 2.0%

카르복시비닐폴리머 0.1%Carboxyvinyl polymer 0.1%

피이지-12 노닐페닐에테르 0.2%PG-12 nonylphenyl ether 0.2%

폴리솔베이트 80 0.4%Polysorbate 80 0.4%

에탄올 10.0%Ethanol 10.0%

트리에탄올아민 0.1%Triethanolamine 0.1%

방부제, 색소, 향료 적량Preservatives, pigments, flavors

정제수 to 100%Purified water to 100%

제제예Formulation example 2. 영양화장수( 2. Nutritional makeup ( 밀크로션Milk lotion )의 제조)

들깨박 에탄올 추출물 0.5 %Perilla ethanol extract 0.5%

베타-1,3-글루칸 1.0 %Beta-1,3-glucan 1.0%

밀납 4.0 %Wax 4.0%

폴리솔베이트 60 1.5 %Polysorbate 60 1.5%

솔비탄세스퀴올레이트 1.5 %Sorbitan sesquioleate 1.5%

유동파라핀 0.5 %Liquid paraffin 0.5%

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %Caprylic / Capric Triglyceride 5.0%

글리세린 3.0 %Glycerin 3.0%

부틸렌글리콜 3.0 %Butylene glycol 3.0%

프로필렌글리콜 3.0 %Propylene glycol 3.0%

카르복시비닐 폴리머 0.1 %Carboxyvinyl polymer 0.1%

트리에탄올아민 0.2 %Triethanolamine 0.2%

방부제, 색소, 향료 적량Preservatives, pigments, flavors

정제수 to 100 %Purified water to 100%

실시예Example 3. 영양크림의 제조 3. Preparation of nutrition cream

들깨박 에탄올 추출물 1.0 %Perilla ethanol extract 1.0%

베타-1,3-글루칸 5.0 %Beta-1,3-glucan 5.0%

밀날 10.0 %Mill blade 10.0%

폴리솔베이트 60 1.5 %Polysorbate 60 1.5%

피이지 60 경화피마자유 2.0 %Easy Easy 60 Castor Oil 2.0%

솔비탄세스퀴올레이트 0.5 % Solbitan sesquioleate 0.5%

유동파라핀 10.0 %Liquid paraffin 10.0%

스쿠알란 5.0 %Squalane 5.0%

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %Caprylic / Capric Triglyceride 5.0%

글리세린 5.0 %Glycerin 5.0%

부틸렌글리콜 3.0 %Butylene glycol 3.0%

프로필렌글리콜 3.0 %Propylene glycol 3.0%

트리에탄올아민 0.2 %Triethanolamine 0.2%

방부제, 색소, 향료 적량Preservatives, pigments, flavors

정제수 to 100%Purified water to 100%

이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다. As described above, since a specific part of the present invention has been described in detail, it is obvious to those skilled in the art that this specific technique is only a preferred embodiment, and the scope of the present invention is not limited thereby. something to do. Therefore, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (7)

들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for antioxidant, comprising perilla extract as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 들깨박 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매로 추출된 것인, 항산화용 화장료 조성물.
According to claim 1,
The perilla extract is extracted with one or more solvents selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 4 carbons and mixed solvents thereof, and antioxidant cosmetic composition.
제2항에 있어서,
상기 들깨박 추출물은 에탄올을 용매로 추출된 것인, 항산화용 화장료 조성물.
According to claim 2,
The perilla extract was extracted with ethanol as a solvent, antioxidant cosmetic composition.
제1항에 있어서,
상기 들깨박 추출물은 농도가 0.1 내지 1000 mg/ml인, 항산화용 화장료 조성물.
According to claim 1,
The perilla extract has a concentration of 0.1 to 1000 mg / ml, cosmetic composition for antioxidant.
들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용 식품 조성물.
A food composition for antioxidant, comprising perilla extract as an active ingredient.
들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
Cosmetic composition for preventing or improving skin wrinkles, including perilla extract as an active ingredient.
들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 주름 예방 또는 개선용 식품 조성물.Food composition for preventing or improving skin wrinkles, including perilla extract as an active ingredient.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220020070A (en) * 2020-08-11 2022-02-18 진바이오셀 주식회사 Composition for preventing skin aging comprising perilla seed oil ethanol extract
KR20220020462A (en) * 2020-08-11 2022-02-21 진바이오셀 주식회사 Composition for preventing skin aging comprising perilla seed oil ethanol extract, Anemone Rivularis or Cyperi Rhizoma
CN116999484A (en) * 2023-10-07 2023-11-07 云南英格生物技术有限公司 Application of perilla seed oil meal extract in preparation of 5 alpha-reductase inhibitor

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20060013016A (en) * 2004-08-05 2006-02-09 한국식품연구원 Composition comprising defatted perilla extracted for prevention and attenuation of cognitive impairment
KR20170053407A (en) * 2015-11-06 2017-05-16 부산대학교 산학협력단 Composition containing alpha linoleic acid isolated from perilla seed oil
JP2018035118A (en) * 2016-09-02 2018-03-08 国立大学法人岐阜大学 Collagen production promoting action of defatted perilla frutescens extract

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20060013016A (en) * 2004-08-05 2006-02-09 한국식품연구원 Composition comprising defatted perilla extracted for prevention and attenuation of cognitive impairment
KR20170053407A (en) * 2015-11-06 2017-05-16 부산대학교 산학협력단 Composition containing alpha linoleic acid isolated from perilla seed oil
JP2018035118A (en) * 2016-09-02 2018-03-08 国立大学法人岐阜大学 Collagen production promoting action of defatted perilla frutescens extract

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Korean Journal of Food Science and Technology, 25(2), 160-164 (1993.04.30), 1 copy. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220020070A (en) * 2020-08-11 2022-02-18 진바이오셀 주식회사 Composition for preventing skin aging comprising perilla seed oil ethanol extract
KR20220020462A (en) * 2020-08-11 2022-02-21 진바이오셀 주식회사 Composition for preventing skin aging comprising perilla seed oil ethanol extract, Anemone Rivularis or Cyperi Rhizoma
CN116999484A (en) * 2023-10-07 2023-11-07 云南英格生物技术有限公司 Application of perilla seed oil meal extract in preparation of 5 alpha-reductase inhibitor

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