KR20200014769A - 항체 가변 도메인 및 항체 구조물 - Google Patents

Abstract

본 명세서는 특히 암의 치료를 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 조성물은 특히 암 세포의 표적화 및 사멸에 유용한, 예를 들어 항체 가변 도메인 또는 항체 구조물을 포함한다. 비-암 세포 대비 암 세포에 차등적으로 결합하는 그들 능력에 기인하여, 본 명세서에 제공된 조성물은 예를 들어 치료 및 진단 목적을 위해 사용될 수 있다.

Description

항체 가변 도메인 및 항체 구조물

관련 출원의 교차 참조

본 출원은 2017년 5월 4일 출원된 미국 가출원 제62/501,649호의 이득을 청구하고, 이의 전문을 모든 목적을 위해 참조로 본 명세서에 편입시킨다.

ASCII 파일로서 제출된 "서열 목록", 표 또는 컴퓨터

프로그램 목록 부록에 대한 참조

10,446 바이트, 기계 포맷 IBM-PC, MS 윈도우 운영 체계에서 2018년 5월 4일 생성된, 파일 048440-660001WO_ST25.TXT로 작성된 서열 목록은 참조로 본 명세서에 편입된다.

새로운 암 면역요법은 그들의 유망한 효력 덕분에 빠르게 클리닉으로 진입하고 있다. 단일클론 항체 및 항체-기반 면역요법제는 그들의 높은 특이성 및 증명된 항종양 효과에 기인하여 특히 매력적인 플랫폼이다. 현재 개발 중인 면역요법제는 다양한 표적에 대해 디자인되었지만, 이들 종양-연관 표적은 종종 암 및 건강한 세포 둘 모두에 의해 발현된다. 결과적으로, 이들 면역요법제는 필연적으로 종양을 제거시키는 과정에서 건강한 세포를 격감시킨다. 따라서, 건강한 세포에게 해를 입히지 않으면서 암 세포를 구별할 수 있고 선택적으로 사멸시킬 수 있는 면역요법제에 대한 요구가 당분야에 존재한다. 본 명세서는 특히 항체 구조물 및 당분야에서 이들 및 다른 문제들을 해결하는데서 이를 사용하는 방법을 제공한다.

일 측면에서 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 항체 가변 도메인이 제공된다.

다른 측면에서 제1 항체 펩티드를 포함하는 항체 구조물이 제공되고, 제1 항체 펩티드는 (i) 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 제1 항체 가변 도메인; 및 (ii) 제1 항체 가변 도메인에 결합되는 제1 항체 도메인을 포함한다.

일 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 항체 가변 도메인을 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

다른 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 제1 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

다른 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 제2 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

다른 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 제1 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

다른 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 제2 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

일 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 항체 가변 도메인의 치료적 유효량 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

다른 측면에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 항체 구조물의 치료적 유효량 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

일 측면에서 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하기 위한 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체 가변 도메인의 치료적 유효량을 투여하여, 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

다른 측면은 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하기 위한 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체 구조물의 치료적 유효량을 투여하여, 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

도 1a-1c. 외투 세포 림프종-특이적 항체 파지 클론의 동정 및 특징규명. 인간 항체 파지 라이브러리는 정상 인간 B 세포에 결합된 파지를 배제시키기 위해 여과시켰다. 그 다음으로 여과된 라이브러리를 사용하여 인간 외투 세포 림프종 세포주 Jeko-1을 스크리닝하였다. JeKo-1 세포에 결합된 파지는 후속 라운드의 바이오패닝을 위해 용리, 적정, 및 증폭하였다. 바이오패닝 농축 결과는 4회의 바이오패닝 라운드 각각에 대해 파지 "산출량/투입량 비율" (×10^-8) (도 1a) 또는 "파지의 수/10⁶ 세포" (도 1b)로 표시하였다. 경쇄(VL)의 가변 결합 도메인을 함유하는 주로 농축된 파지 (4-4)가 동정되었다. 도 1c: 염색된 상이한 림프종 세포주: 외투 세포 림프종 (MCL) 세포주 - JeKo-1, Mino, MAVER-1, 및 NCEB-1; 비-MCL 세포주 - HBL-1 (미만성 거대 B-세포 림프종, DLBCL), RL (소포성 림프종, FL), Raji (버킷 림프종, BL), 및 BJAB (BL) 기반의 4-4 파지 결합 특이성을 나타내는 FACS 히스토그램. 연속으로 적정된 4-4 파지 클론은 FITC 접합된 항-M13 파지 항체에 의해 검출되었고 비염색 세포는 음성 대조군으로서 사용되었다.
도 2a-2b. 항체 변이체(항체 구조물)를 생산하였고 시험하였다. 도 2a: 연구 전반에서 조작 및 실행된 4종의 재조합 4-4 인간 항체 변이체(항체 구조물)의 개략적인 다이아그램. 단일특이적 VL은 동정된 4-4 VL 서열을 의미한다. 중쇄 및 경쇄 불변 Fc 영역(CH2 및 CH3)은 각각의 쥐과 및 인간 IgG1을 기반으로 하였다. 2가 VL 쥐과 Fc 융합 항체 구조물은 "LCmFc-Ab"라고 하였다. 2가 VL 인간 Fc 융합 항체 구조물은 "LC-Ab"라고 하였다. 4가, 링커-연결된 바이-VL 인간 Fc 융합 항체 구조물은 "(LC)₂-Ab"라고 하였다. 4가, VL-치환된 Fv 인간 IgG 항체 구조물은 "LCFv-Ab"라고 하였다. 도 2b: 단백질 A 친화성 정제된 재조합 4-4 항체 변이체(항체 구조물)의 SDS 겔 이미지.
도 3a-3c. 4-4 인간 항체 구조물에 의한 MCL-특이적 결합의 특징규명. FACS 히스토그램은 APC 접합된 항-마우스 IgG 2차 항체에 의해 검출된, 다양한 세포 및 다양한 농도에서 4-4 LCmFc-Ab의 결합을 나타낸다. 비염색 세포 및 2차 항체 단독은 음성 대조군으로서 사용되었다. 도 3a: JeKo-1 세포 상에서 연속으로 적정된 LCmFc-Ab. 도 3b: MCL 세포주 (JeKo-1, Mino, MAVER-1, NCEB-1, 및 REC-1); 및 비-MCL 세포주 [HBL-1 (DLBCL), RL (FL), Raji (BL), BJAB (BL), 및 Jurkat (T-세포 림프종)]에 대한 200 ng LCmFc-Ab /10⁶ 세포. 도 3c: JeKo-1 (MCL) 및 PBMC 정제된 정상 인간 B 및 T 림프구, 및 게이팅된 골수 세포에 대한 10 ng LCmFc-Ab /10⁶ 세포.
도 4a-4b. 4-4 VL 결합 특이성은 점 돌연변이에 의해 확증하였다. 도 4a: 상보성 결정 영역(CDR) 3의 4-4 VL 아미노산 서열. 부모 4-4 VL (위)은 CDR3 (W91A 및 D92S) 상의 카밧 번호매김된 경쇄 아미노산 잔기 91 및 92에 2개 점 돌연변이를 겪어서 4-4 VL 돌연변이체 (아래)가 되었다. 도 4b: JeKo-1 세포 상의4-4 돌연변이체 LCmFc-Ab와 비교된 4-4 LCmFc-Ab 결합을 나타내는 FACS 히스토그램. 0.1 μg의 항체/10⁶ 세포를 사용하였고 결합은 FITC 접합된 항-마우스 Fc 2차 항체로 검출하였다. 비염색 세포 및 2차 항체 단독은 음성 대조군으로서 사용되었다.
도 5. MCL에 특이적으로 결합하는 4-4 LC-Ab 구조물. MCL 및 비-MCL B-세포 NHL 및 백혈병에 대한 Alexa Fluor 647 접합된 4-4 LC-Ab의 결합을 나타내는 FACS 히스토그램. 비-MCL 세포주는 RL, 소포성 림프종; Raji 및 Ramos, 버킷 림프종; SU-DHL-6 및 CLI-LY3, 미만성 거대 B-세포 림프종; MEC1, 만성 림프구성 백혈병; RS4;11, 급성 림프아구성 백혈병을 포함한다. 비염색 세포 및 Alexa Fluor 647 접합된 이소타입 항체는 대조군으로서 사용되었다.
도 6a-6c. 4-4 LC-Ab 구조물은 MCL에 대해 특이적인 세포독성을 입증하였다. 크로뮴-51 (⁵¹Cr) 방출 어세이의 결과. 비용해율(specific lysis)은 4-4 LC-Ab의 첨가 존재 또는 부재에서 20:1의 E:T 비율로 이펙터 (E) NK 세포에 의한 표적 (T) 세포 용해율을 측정하였다. 백분율은 세제에 의한 완전 세포 용해율을 반영하고 방출된 자발적 ⁵¹Cr에 대해 보정되었다. 대조군은 NK 세포 단독 및 4-4 LC-Ab 단독을 포함하였다. (도 6a) 비-MCL 세포주 RL 및 Raji와 비교된 외투 세포 림프종 (MCL) 세포주 JeKo-1 및 Mino의 비용해율; (도 6b) 4명의 MCL 원발성 환자 샘플의 비용해율. 도 6c: 다양한 농도에 대해 도 2a 및 2b에 도시된 인간 항체 변이체를 사용한 비용해율.
도 7a-7b. 4-4 LC-Ab 구조물은 정상 인간 B 세포에 대한 시험관내 세포독성의 부재를 입증하였다. 도 7a: 크로뮴-51 (⁵¹Cr) 방출 어세이의 결과. 비용해율은 20:1의 E:T 비율로 이펙터 (E) NK 세포에 의한 표적 (T) 세포 용해율을 측정하였다. 정상 B 세포의 비용해율은 4-4 LC Ab 구조물의 첨가로 입증되었다. 리툭시맙, 항체 단독, 또는 NK 세포 단독이 대조군으로서 사용되었다. 도 7b: 인간 PBMC는 연속 희석된 4-4 LC-Ab 구조물과 24시간 동안 인큐베이션되었다. 리툭시맙 및 미관련 항체는 대조군으로서 사용되었다. 항-CD20-APC로 염색된 PBMC로부터의 인간 B 세포의 FACS 그래프.
도 8a-8b. 4-4 LC-Ab 구조물은 인간화된 마우스에서 B-세포 격감을 야기시키지 않았다. 도 8a: 200 ㎍/마우스의 단일 작용제 항체 처리 (4-4 LC-Ab)의 IV 주사를 통해 투여된 인간화된 마우스로부터의 항-CD20-APC 게이팅된 인간 B 세포의 FACS 그래프. 혈액은 항체 처리의 -1일, 1일 및 3일에 안구뒤 출혈을 통해 채혈되었다. FACS 그래프는 처리군 당 n=4 마우스를 대표한다. 대조군은 리툭시맙 또는 미관련 대조군 항체가 투여되었다. 도 8b: Ab 대조군과 비교된 각 처리군에서 CD45 게이팅된 인간 백혈구 중 CD20+ B 세포의 평균 백분율 및 표준 편차를 나타내는 선 그래프.
도 9a-9j. MCL-특이적 항체 구조물의 생물학적 기능의 생체내 특징규명. 도 9a: MCL 모델에서 4-4 항체 구조물 처리의 처리 일정. NSG 마우스는 최소 치사량의 종양 세포로 IV 접종되었고 n=5의 군으로 임의추출되었다. 각 마우스는 10 x 10⁶ NK 세포 및 5 x 10⁴ IU IL2와 600 μL 항체의 IV 주사가 투여되었다. 대조군 마우스는 PBS 또는 NK 세포 단독이 투여되었다. 처리는 3일, 8일, 13일, 및 18일에 수행되었다. 종양 세포는 적색 루시퍼라제를 발현하도록 조작하여 생물발광 이미지화를 사용해 종양 성장을 모니터링할 수 있었다. 도 9b-9d: 항체 구조물 처리 후 MCL 종양 이식 마우스에서 종양의 생물발광 이미지. 도 9e-9j: 90일 동안 추적된 4-4 항체 구조물로 처리된 종양 이식 마우스에 대한 무종양 (도 9e, 9g, 9i) 및 전체 (도 9f, 9h, 9j) 생존율 그래프. **P <0.001. 도 9b 및 9e: 실험군은 Z-138 이브루티닙-내성 MCL 모델에서 처리 당 300 μg 내지 600 μg의 4-4 LC-Ab 투약 효과를 비교하였다. 종양 접종 후 13일, 17일, 20일, 28일, 41일 및 90일에 찍은 이미지가 도시되어 있다. 도 9c 및 9f: 실험군은 Z-138 이브루티닙-내성 MCL 모델에서 4-4 LCFv-Ab 구조물에 대해 4-4 LC-Ab의 300 μg 항체 처리를 비교하였다. 종양 접종 후 14일, 24일, 34일, 50일, 70일 및 80일의 이미지가 도시되어 있다. 도 9d 및 9g: 실험군은 JeKo-1-CD20-KO 리툭시맙-내성 MCL 모델에서 4-4 LCFv-Ab 구조물에 대해 4-4 LC-Ab 구조물의 300 μg 항체 처리를 비교하였다. 종양 접종 후 15일, 26일, 38일, 50일, 70일 및 90일의 이미지가 도시되어 있다. 추가의 리툭시맙 음성 대조군을 첨가하였다.
도 10. 도 2a에 도시된 항체 구조물을 코딩하는 발현 벡터.

본 발명의 다양한 실시형태 및 측면이 본 명세서에 도시되고 기술되어 있지만, 이러한 실시형태 및 측면은 오직 예로서 제공된다는 것은 당업자에게 자명할 것이다. 수많은 변형, 변화 및 치환이 본 발명을 벗어나지 않고 당업자에게 일어날 수 있다. 본 명세서에 기술된 본 발명의 실시형태의 다양한 대안이 본 발명을 실시하는데 적용될 수 있다는 것을 이해해야 한다.

본 명세서에서 사용되는 섹션의 표제는 오직 조직적 목적을 위한 것이고 기술된 주제를 한정하는 것으로 해석하지 않는다. 제한없이 특허, 특허 출원, 소논문, 도서, 안내서 및 논문을 포함하여 출원에 인용된 모든 문서, 또는 문서의 일부는 임의의 목적을 위해 그들 전문이 참조로 명백하게 본 명세서에 편입된다.

본 명세서에서 사용되는 약어는 화학 및 생물학 분야 내에서 그들의 통상적 의미를 갖는다. 본 명세서에 기재된 화학 구조 및 화학식은 화학 분야에 공지된 화학 원자가의 표준 규칙에 따라 제작된다.

달리 정의하지 않으면, 본 명세서에서 사용되는 기술 및 과학 용어는 당업자가 통상적으로 이해하는 바와 동일한 의미를 갖는다. 예를 들어, 문헌 [Singleton et al., DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY 2nd ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 1994)]; [Sambrook et al., MOLECULAR CLONING, A LABORATORY MANUAL, Cold Springs Harbor Press (Cold Springs Harbor, NY 1989)]을 참조한다. 본 명세서에 기술된 것과 유사하거나 또는 균등한 임의의 방법, 장치 및 재료가 본 발명의 실시에서 사용될 수 있다. 다음의 정의들은 본 명세서에서 빈번하게 사용되는 일정 용어들의 이해를 용이하게 하기 위해 제공되며 본 개시 내용의 범주를 한정하는 것을 의미하지 않는다.

치환체 기가 좌측에서 우측으로 기재된 그들의 통상적인 화학식으로 명시되는 경우에, 그들은 우측에서 좌측으로 구조를 기재한 화학적으로 동일한 치환체를 동일하게 포괄하며, 예를 들어, -CH₂O-는 -OCH₂- 와 동등하다.

그 자체로 또는 다른 치환체의 일부분으로서 용어 "알킬"은 달리 명시하지 않으면 완전 포화, 단불포화 또는 다불포화될 수 있고, 표시된 탄소 원자 개수를 갖는 2가 및 다가 라디칼 (즉, C₁-C₁₀ 은 1 내지 10개 탄소를 의미함)을 포함할 수 있는, 선형 (즉, 비분지형) 또는 분지형 비환형 탄소 사슬 (또는 탄소), 또는 이의 조합을 의미한다. 포화된 탄화수소 라디칼의 예는 제한없이, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, sec-부틸, (시클로헥실)메틸, 이의 동족체 및 이성질체, 예를 들어, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸 등과 같은 기를 포함한다. 불포화 알킬 기는 하나 이상의 이중 결합 또는 삼중 결합을 가지는 것이다. 불포화 알킬 기의 예는 제한없이, 비닐, 2-프로페닐, 크로틸, 2-이소펜테닐, 2-(부타디에닐), 2,4-펜타디에닐, 3-(1,4-펜타디에닐), 에티닐, 1-프로피닐 및 3-프로피닐, 3-부티닐, 및 고급 동족체 및 이성질체를 포함한다. 알콕시는 산소 링커 (-O-)를 통해서 분자의 나머지에 부착된 알킬이다. 알킬 모이어티는 알케닐 모이어티일 수 있다. 알킬 모이어티는 알키닐 모이어티일 수 있다. 알킬 모이어티는 완전 포화될 수 있다.

그 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서 용어 "알킬렌"은 달리 명시하지 않으면 제한없이 -CH₂CH₂CH₂CH₂- 로 예시되는, 알킬로부터 유도된 2가 라디칼을 의미한다. 전형적으로, 알킬 (또는 알킬렌) 기는 1 내지 24개 탄소 원자를 가질 것이고, 본 발명에서는 10개 또는 그 이하의 탄소 원자를 갖는 기가 바람직하다. "저급 알킬" 또는 "저급 알킬렌"은 일반적으로 8개 또는 그 이하의 탄소 원자를 가지는, 보다 짧은 사슬 알킬 또는 알킬렌 기이다. 그 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서 용어 "알케닐렌"은 달리 명시하지 않으면 알켄으로부터 유도된 2가 라디칼을 의미한다.

그 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 용어 "헤테로알킬"은 달리 명시하지 않으면 적어도 하나의 탄소 원자 및 적어도 하나의 헤테로원자 (예를 들어, O, N, P, Si 또는 S)를 포함하는, 안정한 비환형 직쇄 또는 분지쇄, 또는 이의 조합을 의미하고, 여기서 질소 및 황 원자는 경우에 따라 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 경우에 따라 4차화될 수 있다. 헤테로원자(들) O, N, P, S, 및 Si는 헤테로알킬 기의 임의의 내부 위치에 또는 알킬 기가 분자의 나머지에 부착된 위치에 위치될 수 있다. 예에는 제한없이 -CH₂-CH₂-O-CH₃, -CH₂-CH₂-NH-CH₃, -CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃, -CH₂-S-CH₂-CH₃, -CH₂-CH₂, -S(O)-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃, -CH=CH-O-CH₃, -Si(CH₃)₃, -CH₂-CH=N-OCH₃, -CH=CH-N(CH₃)-CH₃, -O-CH₃, -O-CH-₂-CH₃, 및 -CN 을 포함한다. 최대 2개 또는 3개의 헤테로원자는 연속될 수 있으며, 예컨대, 예를 들어, -CH₂-NH-OCH₃ 및 -CH₂-O-Si(CH₃)₃ 일 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 하나의 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 2개의, 경우에 따라 상이한 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 3개의, 경우에 따라 상이한 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 4개의, 경우에 따라 상이한 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 5개의, 경우에 따라 상이한 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로알킬 모이어티는 최대 8개의, 경우에 따라 상이한 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다.

유사하게, 그 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서 용어 "헤테로알킬렌"은 달리 명시하지 않으면, 제한없이, -CH₂-CH₂-S-CH₂-CH₂- 및 -CH₂-S-CH₂-CH₂-NH-CH₂- 로 예시되는 바와 같은, 헤테로알킬로부터 유도되는 2가 라디칼을 의미한다. 헤테로알킬렌 기의 경우에, 헤테로원자는 또한 사슬 말단 중 하나 또는 둘 모두를 점유할 수 있다 (예를 들어, 알킬렌옥시, 알킬렌디옥시, 알킬렌아미노, 알킬렌디아미노 등). 여전히 추가로, 알킬렌 및 헤테로알킬렌 연결기의 경우에, 연결기의 배향은 연결기의 식이 기재된 방향을 의미하는 것이 아니다. 예를 들어, 식 -C(O)₂R'- 은 -C(O)₂R'- 및 -R'C(O)₂- 둘 모두를 나타낸다. 상기 기술된 바와 같이, 본 명세서에서 사용되는 헤테로알킬 기는 헤테로원자를 통해서 분자의 나머지에 부착되는 기, 예컨대 -C(O)R', -C(O)NR', -NR'R", -OR', -SR', 및/또는 -SO₂R'를 포함한다. 특별한 헤테로알킬 기, 예컨대 -NR'R" 등의 설명 이후에, "헤테로알킬"이 언급되는 경우에, 용어 헤테로알킬 및 -NR'R"은 중복되지 않거나 또는 상호 배타적이지 않다는 것을 이해할 것이다. 대신에, 특별한 헤테로알킬 기는 명확함을 첨가하기 위해 언급된다. 따라서, 용어 "헤테로알킬"은 특별한 헤테로알킬 기, 예컨대 -NR'R" 등을 배제하는 것으로서 본 명세서에서 해석되어서는 안된다.

그들 자체로 또는 다른 용어와 조합하여 용어 "시클로알킬" 및 "헤테로시클로알킬"은 달리 명시하지 않으면 각각 "알킬" 및 "헤테로알킬"의 비방향족 환형 형태를 의미하고, 여기서 고리 또는 고리들을 구성하는 탄소는 수소 이외 원자와의 결합에 참여하는 모든 탄소 원자가에 기인하여 반드시 수소와 결합할 필요는 없다. 추가적으로, 헤테로시클로알킬 경우에, 헤테로원자는 복소환이 분자의 나머지에 부착되는 위치를 점유할 수 있다. 시클로알킬의 예는 제한없이, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 1-시클로헥세닐, 3-시클로헥세닐, 시클로헵틸, 3-히드록시-시클로부트-3-에닐-1,2, 디온, 1H-1,2,4-트리아졸릴-5(4H)-온, 4H-1,2,4-트리아졸릴 등을 포함한다. 헤테로시클로알킬의 예는 제한없이, 1-(1,2,5,6-테트라히드로피리딜), 1-피페리디닐, 2-피페리디닐, 3-피페리디닐, 4-몰폴리닐, 3-몰폴리닐, 테트라히드로퓨란-2-일, 테트라히드로퓨란-3-일, 테트라히드로티엔-2-일, 테트라히드로티엔-3-일, 1-피페라지닐, 2-피페라지닐 등을 포함한다. 단독으로 또는 다른 치환체의 일부로서 "시클로알킬렌" 및 "헤테로시클로알킬렌"은 각각 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 유도되는 2가 라디칼을 의미한다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 하나의 고리 헤테로원자 (예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 2개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 3개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 4개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 5개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다. 헤테로시클로알킬 모이어티는 최대 8개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, S, Si, 또는 P)를 포함할 수 있다.

그들 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 달리 명시하지 않으면, 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드 원자를 의미한다. 추가적으로, 용어 예컨대 "할로알킬"은 모노할로알킬 및 폴리할로알킬을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 용어 "할로(C₁-C₄)알킬"은 제한없이, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 4-클로로부틸, 3-브로모프로필 등을 포함한다.

용어 "아실"은 달리 명시하지 않으면 -C(O)R을 의미하고, 여기서 R은 치환 또는 미치환 알킬, 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 헤테로알킬, 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬, 치환 또는 미치환 아릴, 또는 치환 또는 미치환 헤테로아릴이다.

용어 "아릴"은 달리 명시하지 않으면, 함께 융합되거나 (즉, 융합 고리 아릴) 또는 공유적으로 연결된, 단일 고리 또는 다수 고리 (바람직하게 1 내지 3개 고리)일 수 있는, 다불포화, 방향족, 탄화수소 치환체를 의미한다. 융합 고리 아릴은 함께 융합된 다수 고리를 의미하고, 여기서 융합 고리 중 적어도 하나는 아릴 고리이다. 용어 "헤테로아릴"은 적어도 하나의 헤테로원자 예컨대 N, O, 또는 S를 함유하는 아릴 기 (또는 고리)를 의미하고, 여기서 질소 및 황 원자는 경우에 따라 산화되고, 질소 원자(들)는 경우에 따라 4차화된다. 따라서, 용어 "헤테로아릴"은 융합 고리 헤테로아릴 기(즉, 융합 고리 중 적어도 하나가 헤테로방향족 고리인 함께 융합된 다수 고리)를 포함한다. 5,6-융합 고리 헤테로아릴렌은 함께 융합된 2개 고리를 의미하고, 여기서 하나의 고리는 5원 구성원을 가지고 나머지 고리는 6원 구성원을 가지며, 적어도 하나의 고리는 헤테로아릴 고리이다. 유사하게, 6,6-융합 고리 헤테로아릴렌은 함께 융합된 2개 고리를 의미하고, 여기서 하나의 고리는 6원 구성원을 가지고 나머지 고리는 6원 구성원을 가지며, 적어도 하나의 고리는 헤테로아릴 고리이다. 그리고 6,5-융합 고리 헤테로아릴렌은 함께 융합된 2개 고리를 의미하고, 여기서 하나의 고리는 6원 구성원을 가지고 나머지 고리는 5원 구성원을 가지며, 적어도 하나의 고리는 헤테로아릴 고리이다. 헤테로아릴 기는 탄소 또는 헤테로원자를 통해서 분자의 나머지에 부착될 수 있다. 아릴 및 헤테로아릴 기의 비제한적인 예는 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 4-비페닐, 1-피롤릴, 2-피롤릴, 3-피롤릴, 3-피라졸릴, 2-이미다졸릴, 4-이미다졸릴, 피라지닐, 2-옥사졸릴, 4-옥사졸릴, 2-페닐-4-옥사졸릴, 5-옥사졸릴, 3-이소옥사졸릴, 4-이소옥사졸릴, 5-이소옥사졸릴, 2-티아졸릴, 4-티아졸릴, 5-티아졸릴, 2-퓨릴, 3-퓨릴, 2-티에닐, 3-티에닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딜, 4-피리미딜, 5-벤조티아졸릴, 푸리닐, 2-벤즈이미다졸릴, 5-인돌릴, 1-이소퀴놀릴, 5-이소퀴놀릴, 2-퀴녹살리닐, 5-퀴녹살리닐, 3-퀴놀릴, 및 6-퀴놀릴을 포함한다. 상기 언급된 아릴 및 헤테로아릴 고리계의 각각에 대한 치환체는 하기 기술된 허용가능한 치환체의 군으로부터 선택된다. 단독으로 또는 다른 치환체의 일부로서 "아릴렌" 및 "헤테로아릴렌"은 각각 아릴 및 헤테로아릴로부터 유도되는 2가 라디칼을 의미한다. 아릴 및 헤테로아릴 기의 비제한적인 예는 피리디닐, 피리미디닐, 티오페닐, 티에닐, 퓨라닐, 인돌릴, 벤즈옥사디아졸릴, 벤조디옥솔릴, 벤조디옥사닐, 티아나프타닐, 피롤로피리디닐, 인다졸릴, 퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 피리도피라지닐, 퀴나졸리노닐, 벤조이소옥사졸릴, 이미다조피리디닐, 벤조퓨라닐, 벤조티에닐, 벤조티오페닐, 페닐, 나프틸, 비페닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 티아졸릴, 퓨릴티에닐, 피리딜, 피리미딜, 벤조티아졸릴, 푸리닐, 벤즈이미다졸릴, 이소퀴놀릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 피롤릴, 디아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 벤조티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 피라졸로피리미디닐, 피롤로피리미디닐, 벤조트리아졸릴, 벤즈옥사졸릴, 또는 퀴놀릴을 포함한다. 상기 예는 치환될 수 있거나 또는 미치환될 수 있고 상기 각각의 헤테로아릴 예의 2가 라디칼은 헤테로아릴렌의 비제한적인 예이다. 헤테로아릴 모이어티는 하나의 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, 또는 S)를 포함할 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 2개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, 또는 S)를 포함할 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 3개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, 또는 S)를 포함할 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 4개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, 또는 S)를 포함할 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 5개의, 경우에 따라 상이한 고리 헤테로원자(예를 들어, O, N, 또는 S)를 포함할 수 있다. 아릴 모이어티는 단일 고리를 가질 수 있다. 아릴 모이어티는 2개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 아릴 모이어티는 3개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 아릴 모이어티는 4개의 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 하나의 고리를 가질 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 2개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 3개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 4개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다. 헤테로아릴 모이어티는 5개의, 경우에 따라 상이한 고리를 가질 수 있다.

융합 고리 헤테로시클로알킬-아릴은 헤테로시클로알킬에 융합된 아릴이다. 융합 고리 헤테로시클로알킬-헤테로아릴은 헤테로시클로알킬에 융합된 헤테로아릴이다. 융합 고리 헤테로시클로알킬-시클로알킬은 시클로알킬에 융합된 헤테로시클로알킬이다. 융합 고리 헤테로시클로알킬-헤테로시클로알킬은 다른 헤테로시클로알킬에 융합된 헤테로시클로알킬이다. 융합 고리 헤테로시클로알킬-아릴, 융합 고리 헤테로시클로알킬-헤테로아릴, 융합 고리 헤테로시클로알킬-시클로알킬, 또는 융합 고리 헤테로시클로알킬-헤테로시클로알킬은 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 각각 독립적으로 미치환되거나 또는 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "옥소"는 탄소 원자에 이중 결합된 산소를 의미한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "알킬술포닐"은 식 -S(O₂)-R'을 가지는 모이어티를 의미하고, 여기서 R'은 상기 정의된 바와 같은 치환 또는 미치환 알킬 기이다. R'은 명시된 개수의 탄소를 가질 수 있다 (예를 들어, "C₁-C₄ 알킬술포닐").

상기의 용어 각각 (예를 들어, "알킬", "헤테로알킬", "시클로알킬", "헤테로시클로알킬", "아릴" 및 "헤테로아릴")은 표시된 라디칼의 치환 및 미치환 형태 둘 모두를 포함한다. 각 유형의 라디칼에 바람직한 치환체는 하기에 제공된다.

알킬 및 헤테로알킬 라디칼에 대한 치환체(알킬렌, 알케닐, 헤테로알킬렌, 헤테로알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 시클로알케닐, 및 헤테로시클로알케닐로서 종종 언급된 기들 포함)는 0 내지 (2m'+1) [여기서, m'은 이러한 라디칼에서 탄소 원자의 총 개수임] 범위의 개수의, 제한없이, -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -할로겐, -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO₂R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)₂R', -NR-C(NR'R")=NR"', -S(O)R', -S(O)₂R', -S(O)₂N(R)('R"-NRSO₂R'), -CN, 및 -NO₂ 로부터 선택되는 하나 이상의 다양한 기일 수 있다. R', R", R"', 및 R""은 각각 바람직하게 독립적으로 수소, 치환 또는 미치환 헤테로알킬, 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬, 치환 또는 미치환 아릴(예를 들어, 1-3개 할로겐으로 치환된 아릴), 치환 또는 미치환 알킬, 알콕시, 또는 티오알콕시 기, 또는 아릴알킬 기를 의미한다. 본 발명의 화합물이 하나 초과의 R 기를 포함하는 경우에, 예를 들어, 각각의 R 기는 하나 초과의 이들 기가 존재할 때 각각의 R', R", R"', 및 R"" 기에서 처럼 독립적으로 선택된다. R' 및 R"이 동일한 질소 원자에 부착될 때, 그들은 질소 원자와 조합하여 4원, 5원, 6원, 또는 7원 고리를 형성할 수 있다. 예를 들어, -NR'R"은 제한없이, 1-피롤리디닐 및 4-몰폴리닐을 포함한다. 치환체의 상기 설명으로부터, 당업자는 수소 이외의 기에 결합된 탄소 원자를 포함하는 기, 예컨대 할로알킬 (예를 들어, -CF₃ 및 -CH₂CF₃) 및 아실 (예를 들어, -C(O)CH₃, -C(O)CF₃, -C(O)CH₂OCH₃ 등)을 포함하는 것을 의미한다는 것을 이해할 것이다.

알킬 라디칼에 대해 기술된 치환체와 유사하게, 아릴 및 헤테로아릴 기를 위한 치환체는 다양하고, 0 내지 방향족 고리계 상의 개방 원자의 총 개수 범위의 개수로, 예를 들어 -OR', -NR'R", -SR', -할로겐, -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO₂R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', NR"C(O)₂R', NRC(NR'R")=NR"', S(O)R', -S(O)₂R', -S(O)₂N(R')(R", -NRSO₂R'), -CN, -NO₂, -R', -N₃, -CH(Ph)₂, 플루오로(C₁-C₄)알콕시, 및 플루오로(C₁-C₄)알킬로부터 선택되고, 여기서 R', R", R"', 및 R""은 바람직하게 독립적으로 수소, 치환 또는 미치환 알킬, 치환 또는 미치환 헤테로알킬, 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬, 치환 또는 미치환 아릴, 및 치환 또는 미치환 헤테로아릴로부터 선택된다. 본 발명의 화합물이 하나를 초과하는 R 기를 포함할 때, 예를 들어, R 기의 각각은 하나 초과의 이들 기가 존재할 때 각각의 R', R", R"', 및 R"" 기에서 처럼 독립적으로 선택된다.

모이어티가 R 치환체로 치환될 때, 그 기는 "R-치환된"이라고 할 수 있다. 모이어티가 R-치환된 경우에, 모이어티는 적어도 하나의 R 치환체로 치환되고 각각의 R 치환체는 경우에 따라 상이하다. 예를 들어, 본 명세서에서 모이어티가 R^1A-치환되거나 또는 미치환된 알킬인 경우에, 다수의 R^1A 치환체는 알킬 모이어티에 부착될 수 있고, 여기서 각각의 R^1A 치환체는 경우에 따라 상이하다. R-치환된 모이어티가 다수의 R 치환체로 치환된 경우에, 각각의 R-치환체는 프라임 기호 (') 예컨대 R', R" 등을 사용하여 구별할 수 있으며, 예를 들어, 모이어티가 R^3A-치환되거나 또는 미치환된 알킬인 경우에, 모이어티는 다수의 R^3A 치환체로 치환되고, 다수의 R^3A 치환체는 R^3A', R^3A", R^3A"' 등으로 구별될 수 있다. 일부 실시형태에서, 다수의 R 치환체는 3이다.

2개 이상의 치환체가 경우에 따라 연결되어 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성할 수 있다. 이러한 소위 고리-형성 치환체는 전형적으로, 반드시 그런것은 아니지만, 환형 염기 구조에 부착되어 존재한다. 일 실시형태에서, 고리-형성 치환체는 베이스 구조의 인접한 구성원에 부착된다. 예를 들어, 환형 염기 구조의 인접한 구성원에 부착된 2개의 고리-형성 치환체는 융합 고리 구조를 생성시킨다. 다른 실시형태에서, 고리-형성 치환체는 베이스 구조의 단일 구성원에 부착된다. 예를 들어, 환형 염기 구조의 단일 구성원에 부착된 2개의 고리-형성 치환체는 스피로환형 구조를 생성시킨다. 또 다른 실시형태에서, 고리-형성 치환체는 베이스 구조의 비인접 구성원에 부착된다.

아릴 또는 헤테로아릴 고리의 인접한 원자 상의 2개 치환체는 경우에 따라 식 -T-C(O)-(CRR')_q-U-의 고리를 형성할 수 있고, 여기서 T 및 U는 독립적으로 -NR-, -O-, -CRR'-, 또는 단일 고리이고, q는 0 내지 3의 정수이다. 대안적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 고리의 인접한 원자 상의 2개 치환체는 경우에 따라 식 -A-(CH₂)_r-B-의 치환체로 치환될 수 있고, 여기서 A 및 B는 독립적으로 -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O) -, -S(O)₂-, -S(O)₂NR'-, 또는 단일 결합이고, r은 1 내지 4의 정수이다. 이렇게 형성된 새로운 고리의 단일 결합 중 하나는 경우에 따라 이중 결합으로 치환될 수 있다. 대안적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 고리의 인접한 원자 상의 2개 치환체는 경우에 따라 식 -(CRR')_s-X'- (C"R"R"')_d-의 치환체로 치환될 수 있고, 여기서 변수 s 및 d는 독립적으로 0 내지 3의 정수이고, X'은 -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, 또는 -S(O)₂NR'- 이다. 치환체 R, R', R", 및 R"'은 바람직하게 독립적으로 수소, 치환 또는 미치환 알킬, 치환 또는 미치환 헤테로알킬, 치환 또는 미치환 시클로알킬, 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬, 치환 또는 미치환 아릴, 및 치환 또는 미치환 헤테로아릴로부터 선택된다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "헤테로원자" 또는 "고리 헤테로원자"는 산소(O), 질소(N), 황(S), 인(P), 및 규소(Si)를 포함하는 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용되는 "치환체 기"는 다음의 모이어티로부터 선택되는 기를 의미한다:

(A) 옥소, 할로겐, -CF₃, -CN, -OH, -NH₂, -COOH, -CONH₂, -NO₂, -SH, -SO₂Cl, -SO₃H, -SO₄H, -SO₂NH₂, -NHNH₂, -ONH₂, -NHC=(O)NHNH₂, -NHC=(O) NH₂, -NHSO₂H, -NHC= (O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF₃, -OCHF₂, 미치환 알킬, 미치환 헤테로알킬, 미치환 시클로알킬, 미치환 헤테로시클로알킬, 미치환 아릴, 미치환 헤테로아릴, 및

(B) 하기 (i), 및 (ii)로부터 선택되는 적어도 하나의 치환체로 치환된, 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴:

(i) 옥소, 할로겐, -CF₃, -CN, -OH, -NH₂, -COOH, -CONH₂, -NO₂, -SH, -SO₂Cl, -SO₃H, -SO₄H, -SO₂NH₂, -NHNH₂, -ONH₂, -NHC=(O)NHNH₂, -NHC=(O) NH₂, -NHSO₂H, -NHC= (O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF₃, -OCHF₂, 미치환 알킬, 미치환 헤테로알킬, 미치환 시클로알킬, 미치환 헤테로시클로알킬, 미치환 아릴, 미치환 헤테로아릴, 및

(ii) 하기 (a) 및 (b)로부터 선택되는 적어도 하나의 치환체로 치환된, 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴:

(a) 옥소, 할로겐, -CF₃, -CN, -OH, -NH₂, -COOH, -CONH₂, -NO₂, -SH, -SO₂Cl, -SO₃H, -SO₄H, -SO₂NH₂, -NHNH₂, -ONH₂, -NHC=(O)NHNH₂, -NHC=(O) NH₂, -NHSO₂H, -NHC= (O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF₃, -OCHF₂, 미치환 알킬, 미치환 헤테로알킬, 미치환 시클로알킬, 미치환 헤테로시클로알킬, 미치환 아릴, 미치환 헤테로아릴, 및

(b) 옥소, 할로겐, -CF₃, -CN, -OH, -NH₂, -COOH, -CONH₂, -NO₂, -SH, -SO₂Cl, -SO₃H, -SO₄H, -SO₂NH₂, -NHNH₂, -ONH₂, -NHC=(O)NHNH₂, -NHC=(O) NH₂, -NHSO₂H, -NHC= (O)H, -NHC(O)-OH, -NHOH, -OCF₃, -OCHF₂, 미치환 알킬, 미치환 헤테로알킬, 미치환 시클로알킬, 미치환 헤테로시클로알킬, 미치환 아릴, 미치환 헤테로아릴로부터 선택되는 적어도 하나의 치환체로 치환된, 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴.

본 명세서에서 제공되는 "화학 링커"는 공유 링커, 비-공유 링커, 펩티드 링커(펩티드 모이어티 포함 링커), 절단성 펩티드 링커, 치환 또는 미치환 알킬렌, 치환 또는 미치환 헤테로알킬렌, 치환 또는 미치환 시클로알킬렌, 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬렌, 치환 또는 미치환 아릴렌 또는 치환 또는 미치환 헤테로아릴렌 또는 이의 임의 조합이다. 따라서, 본 명세서에서 제공되는 화학 링커는 다수의 화학 모이어티를 포함할 수 있고, 여기서 다수의 화학 모이어티의 각각은 화학적으로 상이하다. 대안적으로, 화학 링커는 비-공유 링커일 수 있다. 비-공유 링커의 예는 제한없이 이온 결합, 수소 결합, 할로겐 결합, 반 데르 발스 상호작용 (예를 들어, 쌍극자-쌍극자, 쌍극자-유도 쌍극자, 런던 분산력), 고리 스태킹 (pi 효과) 및 소수성 상호작용을 포함한다. 실시형태에서, 화학 링커는 제한없이, 친핵성 치환 (예를 들어, 아민 및 알콜과 아실 할라이드, 활성 에스테르의 반응), 친전자성 치환 (예를 들어, 에나민 반응) 및 탄소-탄소 및 탄소-헤테로원자 다수 결합에의 첨가 (예를 들어, 마이클 반응, 딜스-알더 첨가 반응)를 포함하는 접합 화학을 사용해 형성된다.

본 명세서에서 사용되는 "크기-제한 치환체" 또는 "크기-제한 치환체 기"는 "치환체 기"에 대해 상기 기술된 모든 치환체로부터 선택된 기를 의미하고, 여기서 각각의 치환 또는 미치환 알킬은 치환 또는 미치환 C₁-C₂₀ 알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬은 치환 또는 미치환 2 내지 20원 헤테로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬은 치환 또는 미치환 C₃-C₈ 시클로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬은 치환 또는 미치환 3 내지 8원 헤테로시클로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 아릴은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴은 치환 또는 미치환 5 내지 10원 헤테로아릴이다.

본 명세서에서 사용되는 "저급 치환체" 또는 "저급 치환체 기"는 "치환체 기"에 대해 상기 기술된 모든 치환체로부터 선택된 기를 의미하고, 여기서 각각의 치환 또는 미치환 알킬은 치환 또는 미치환 C₁-C₈ 알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬은 치환 또는 미치환 2 내지 8원 헤테로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬은 치환 또는 미치환 C₃-C₇ 시클로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬은 치환 또는 미치환 3 내지 7원 헤테로시클로알킬이고, 각각의 치환 또는 미치환 아릴은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴이고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴은 치환 또는 미치환 5 내지 9원 헤테로아릴이다.

일부 실시형태에서, 본 명세서의 화합물에 기술된 각각의 치환 기는 적어도 하나의 치환체 기로 치환된다. 보다 특히, 일부 실시형태에서, 본 명세서의 화합물에 기술된 각각의 치환 알킬, 치환 헤테로알킬, 치환 시클로알킬, 치환 헤테로시클로알킬, 치환 아릴, 치환 헤테로아릴, 치환 알킬렌, 치환 헤테로알킬렌, 치환 시클로알킬렌, 치환 헤테로시클로알킬렌, 치환 아릴렌, 및/또는 치환 헤테로아릴렌은 적어도 하나의 치환체 기로 치환된다. 다른 실시형태에서, 이들 기의 적어도 하나 또는 전부는 적어도 하나의 크기-제한 치환체 기로 치환된다. 다른 실시형태에서, 이들 기의 적어도 하나 또는 전부는 적어도 하나의 저급 치환체 기로 치환된다.

본 명세서의 화합물의 다른 실시형태에서, 각각의 치환 또는 미치환 알킬은 치환 또는 미치환 C₁-C₂₀ 알킬일 수 있고, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬은 치환 또는 미치환 2 내지 20원 헤테로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬은 치환 또는 미치환 C₃-C₈ 시클로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬은 치환 또는 미치환 3 내지 8원 헤테로시클로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 아릴은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴은 치환 또는 미치환 5 내지 10원 헤테로아릴이다. 본 명세서의 화합물의 일부 실시형태에서, 각각의 치환 또는 미치환 알킬렌은 치환 또는 미치환 C₁-C₂₀ 알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬렌은 치환 또는 미치환 2 내지 20원 헤테로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬렌은 치환 또는 미치환 C₃-C₈ 시클로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬렌은 치환 또는 미치환 3 내지 8원 헤테로시클로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 아릴렌은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴렌은 치환 또는 미치환 5 내지 10원 헤테로아릴렌이다.

일부 실시형태에서, 각각의 치환 또는 미치환 알킬은 치환 또는 미치환 C₁-C₈ 알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬은 치환 또는 미치환 2 내지 8원 헤테로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬은 치환 또는 미치환 C₃-C₇ 시클로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬은 치환 또는 미치환 3 내지 7원 헤테로시클로알킬이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 아릴은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴은 치환 또는 미치환 5 내지 9원 헤테로아릴이다. 일부 실시형태에서, 각각의 치환 또는 미치환 알킬렌은 치환 또는 미치환 C₁-C₈ 알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로알킬렌은 치환 또는 미치환 2 내지 8원 헤테로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 시클로알킬렌은 치환 또는 미치환 C₃-C₇ 시클로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로시클로알킬렌은 치환 또는 미치환 3 내지 7원 헤테로시클로알킬렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 아릴렌은 치환 또는 미치환 C₆-C₁₀ 아릴렌이고/이거나, 각각의 치환 또는 미치환 헤테로아릴렌은 치환 또는 미치환 5 내지 9원 헤테로아릴렌이다. 일부 실시형태에서, 화합물은 하기 실시예 섹션, 도면 또는 표에 기재된 화학종이다.

본 명세서에서 사용되는, 용어 "접합"은 원자 또는 분자 간 회합을 의미한다. 회합은 직접적일 수 있거나 또는 간접적일 수 있다. 예를 들어, 핵산 및 단백질 간 접합은 예를 들어 공유 결합에 의해 직접적일 수 있거나, 또는 예를 들어 비공유 결합 (예를 들어, 정전기 상호작용 (예를 들어, 이온 결합, 수소 결합, 할로겐 결합), 반데르 발스 상호작용 (예를 들어, 쌍극자-쌍극자, 쌍극자-유도 쌍극자, 런던 분산력), 고리 스태킹 (pi 효과), 소수성 상호작용 등)에 의해 간접적일 수 있다. 실시형태에서, 접합은 제한없이 친핵성 치환 (예를 들어, 아민 및 알콜과 아실 할라이드, 활성 에스테르의 반응), 친전자성 치환 (예를 들어, 에나민 반응) 및 탄소-탄소 및 탄소-헤테로원자 다수 결합에의 첨가 (예를 들어, 마이클 반응, 딜스-알더 첨가 반응)를 포함한, 접합 화학을 사용해 형성된다. 이들 및 다른 유용한 반응은 예를 들어, [March, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, 1985]; [Hermanson, BIOCONJUGATE TECHNIQUES, Academic Press, San Diego, 1996]; 및 [Feeney et al., MODIFICATION OF PROTEINS]; [Advances in Chemistry Series, Vol. 198, American Chemical Society, Washington, D.C., 1982]에 기술되어 있다.

본 명세서의 접합 화학(당분야에서 공지된 "클릭 화학"을 포함)에 사용되는 유용한 반응성 모이어티 또는 기능성 기는 예를 들어, 다음을 포함한다:

(a) 제한없이, N-히드록시숙신이미드 에스테르, N-히드록시벤즈트리아졸 에스테르, 산 할라이드, 아실 이미다졸, 티오에스테르, p-니트로페닐 에스테르, 알킬, 알케닐, 알키닐 및 방향족 에스테르를 포함하는 카르복실 기 및 이의 다양한 유도체;

(b) 에스테르, 에테르, 알데히드 등으로 전환될 수 있는 히드록실 기;

(c) 할라이드가 친핵성 기 예컨대, 예를 들어, 아민, 카르복실화된 음이온, 티올 음이온, 카바니온 또는 알콕시드 이온으로 이후에 치환될 수 있고, 그리하여 할로겐 원자의 부위에 새로운 기의 공유 부착을 일으키는 것인 할로알킬 기;

(d) 딜스-알더 반응에 관여할 수 있는 친디엔체 기 예컨대, 예를 들어, 말레이미도 기;

(e) 후속 유도체화가 카르보닐 유도체 예컨대, 예를 들어, 이민, 히드라존, 세미카르바존 또는 옥심의 형성을 통해서, 또는 그리냐드 첨가 또는 알킬리튬 첨가와 같은 기전을 통해서 가능하게 하는 알데히드 또는 케톤 기;

(f) 예를 들어 술폰아미드를 형성하기 위한 아민과의 후속 반응을 위한 술포닐 할라이드 기;

(g) 아실 할라이드와 반응하거나, 또는 금속 예컨대 금에 결합하는, 디술파이드로 전환될 수 있는 티올 기;

(h) 예를 들어 아실화, 알킬화 또는 산화될 수 있는 아민 또는 술프히드릴 기;

(i) 예를 들어, 고리첨가, 아실화, 마이클 첨가 등을 겪을 수 있는 알켄;

(j) 예를 들어 아민 및 히드록실 화합물과 반응할 수 있는 에폭시드;

(k) 포스포르아미다이트 및 핵산 합성에 유용한 다른 표준 작용기;

(l) 금속 규소 산화물 결합;

(m) 예를 들어, 포스페이트 디에스테르 결합을 형성하기 위해 반응성인 기(예를 들어, 포스핀)에 결합되는 금속; 및

(n) 술폰, 예를 들어, 비닐 술폰.

접합 ("클릭") 화학을 사용하여 소형 모듈식 유닛을 연결시키는 조성물의 화학 합성은 당분야에 충분히 공지되어 있고, 예를 들어, 다음의 문헌들에 기술되어 있다: H. C. Kolb, M. G. Finn and K. B. Sharpless ((2001). "Click Chemistry: Diverse Chemical Function from a Few Good Reactions". Angewandte Chemie International Edition 40 (11): 2004-2021); R. A. Evans ((2007). "The Rise of Azide-Alkyne 1,3-Dipolar 'Click' Cycloaddition and its Application to Polymer Science and Surface Modification". Australian Journal of Chemistry 60 (6): 384-395; W.C. Guida et al. Med. Res. Rev. p 3 1996; Spiteri, Christian and Moses, John E. ((2010). "Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition: Regioselective Synthesis of 1,4,5-Trisubstituted 1,2,3-Triazoles". Angewandte Chemie International Edition 49 (1): 31-33); Hoyle, Charles E. and Bowman, Christopher N. ((2010). "Thiol-Ene Click Chemistry". Angewandte Chemie International Edition 49 (9): 1540-1573); Blackman, Melissa L. and Royzen, Maksim and Fox, Joseph M. ((2008). "Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactivity". Journal of the American Chemical Society 130 (41): 13518-13519); Devaraj, Neal K. and Weissleder, Ralph and Hilderbrand, Scott A. ((2008). "Tetrazine Based Cycloaddition: Application to Pretargeted Live Cell Labeling". Bioconjugate Chemistry 19 (12): 2297-2299); Stockmann, Henning; Neves, Andre; Stairs, Shaun; Brindle, Kevin; Leeper, Finian ((2011). "Exploring isonitrile-based click chemistry for ligation with biomolecules". Organic & Biomolecular Chemistry), 이들 전부는 모든 목적을 위해서 그들 전문을 참조로 본 명세서에 편입시킨다.

반응성 작용기는 본 명세서에 기술된 단백질 또는 핵산의 화학 안정성에 참여하지 않거나, 또는 방해하지 않도록 선택될 수 있다. 예로서, 핵산은 비닐 술폰 또는 다른 반응성 모이어티(예를 들어, 말레이미드)를 포함할 수 있다. 경우에 따라, 핵산은 식 -S-S-R을 갖는 반응성 모이어티를 포함할 수 있다. R은 예를 들어 보호기일 수 있다. 경우에 따라, R은 헥산올이다. 본 명세서에서 사용되는, 용어 헥산올은 식 C₆H₁₃OH을 갖는 화합물을 포함하고, 1-헥산올, 2-헥산올, 3-헥산올, 2-메틸-1-펜탄올, 3-메틸-1-펜탄올, 4-메틸-1-펜탄올, 2-메틸-2-펜탄올, 3-메틸-2-펜탄올, 4-메틸-2-펜탄올, 2-메틸-3-펜탄올, 3-메틸-3-펜탄올, 2,2-디메틸-1-부탄올, 2,3-디메틸-1-부탄올, 3,3-디메틸-1-부탄올, 2,3-디메틸-2-부탄올, 3,3-디메틸-2-부탄올, 및 2-에틸-1-부탄올을 포함한다. 경우에 따라, R은 1-헥산올이다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "약"은 당업자가 명시된 값과 타당하게 유사하다고 간주하는 명시된 값을 포함한 값의 범위를 의미한다. 실시형태에서, 용어 "약"은 당분야에서 일반적으로 허용되는 측정을 사용한 표준 편차 내를 의미한다. 실시형태에서, 약은 명시된 값이 +/- 10%까지 확장된 범위를 의미한다. 실시형태에서, 약은 명시된 값을 의미한다.

"핵산"은 단일 가닥 형태 또는 이중 가닥 형태의 데옥시리보뉴클레오티드 또는 리보뉴클레오티드 및 이의 중합체, 및 이의 상보체를 의미한다. 용어 "폴리뉴클레오티드"는 뉴클레오티드의 선형 서열을 의미한다. 전형적으로 용어 "뉴클레오티드"는 폴리뉴클레오티드의 단일 유닛, 즉 단량체를 의미한다. 뉴클레오티드는 리보뉴클레오티드, 데옥시리보뉴클레오티드, 또는 이의 변형된 형태일 수 있다. 본 명세서에서 고려되는 폴리뉴클레오티드의 예는 단일 및 이중 가닥 DNA, 단일 및 이중 가닥 RNA(siRNA 포함), 및 단일 및 이중 가닥 DNA 및 RNA의 혼합물을 갖는 하이브리드 분자를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 핵산은 또한 천연 발생 핵산과 동일한 기본 화학 구조를 갖는 핵산을 의미한다. 이러한 유사체는 변형된 당 및/또는 변형된 고리 치환체를 가지지만, 천연 발생 핵산과 동일한 기본 화학 구조를 보유한다. 핵산 모방체는 핵산의 일반 화학 구조와 상이한 구조를 가지지만, 천연 발생 핵산과 유사한 방식으로 기능하는 화학 화합물을 의미한다. 이러한 유사체의 예는 제한없이 포스포로티올레이트, 포스포르아미데이트, 메틸 포스포네이트, 키랄-메틸 포스포네이트, 2-O-메틸 리보뉴클레오티드, 및 펩티드-핵산(PNA)을 포함한다.

용어 "유전자"는 단백질의 생산에 관여되는 DNA의 절편을 의미하고, 이것은 코딩 영역에 선행하고 후속하는 영역(리더 및 트레일러)을 비롯하여 개별 코딩 절편 (엑손) 사이의 개재 서열 (인트론)을 포함한다. 리더, 트레일러를 비롯한 인트론은 유전자의 전사 및 번역 동안 필요한 조절 엘리먼트를 포함한다. 또한, "단백질 유전자 생성물"은 특정 유전자로부터 발현된 단백질이다.

유전자에 대해 본 명세서에서 사용하는 용어 "발현" 또는 "발현된"은 그 유전자의 전사 및/또는 번역 생성물을 의미한다. 세포에서 DNA 분자의 발현 수준은 세포 내에 존재하는 상응하는 mRNA의 양 또는 세포에 의해 생산되는 DNA에 의해 코딩된 단백질의 양을 기반으로 결정될 수 있다. 비코딩 핵산 분자(예를 들어, siRNA)의 발현 수준은 당분야에 충분히 공지된 표준 PCR 또는 노던 블롯 방법으로 검출할 수 있다. 예를 들어, [Sambrook et al., 1989 Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 18.1-18.88]를 참조한다.

형질감염된 유전자의 발현은 세포에서 일시적으로 또는 안정하게 발생될 수 있다. "일시적 발현" 동안 형질감염된 유전자는 세포 분열 동안 딸 세포에게 전달되지 않는다. 이의 발현이 형질감염된 세포에 제한되므로, 유전자의 발현은 시간 경과에 따라 소실된다. 대조적으로 형질감염된 유전자의 안정한 발현은 형질감염된 세포에 선별 장점을 부여하는 다른 유전자로 유전자가 공동-형질감염될 때 발생될 수 있다. 이러한 선별 장점은 세포에 존재하는 일정 독소에 대한 내성일 수 있다.

용어 "플라스미드" 또는 "발현 벡터"는 유전자의 발현에 필요한 조절 엘리먼트 및/또는 유전자를 코딩하는 핵산 분자를 의미한다. 플라스미드로부터 유전자의 발현은 시스 또는 트랜스로 발생될 수 있다. 유전자가 시스로 발현되면, 유전자 및 조절 엘리먼트는 동일한 플라스미드에 의해 코딩된다. 트랜스 발현은 유전자 및 조절 엘리먼트는 개별 플라스미드에 의해 코딩되는 경우를 의미한다.

용어 "아미노산"은 천연 발생 및 합성 아미노산을 비롯하여, 천연 발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 아미노산 유사체 및 아미노산 모방체를 의미한다. 천연 발생 아미노산은 유전자 코드에 의해 코딩되는 것들을 비롯하여, 이후에 변형되는 아미노산, 예를 들어 히드록시프롤린, γ-카르복시글루타메이트, 및 O-포스포세린이다. 아미노산 유사체는 천연 발생 아미노산과 동일한 기본 화학 구조를 갖는 화합물을 의미하고, 즉 수소, 카르복실 기, 아미노 기, 및 R 기에 결합된 α 탄소, 예를 들어, 호모세린, 노르류신, 메티오닌 술폭시드, 메티오닌 메틸 술포늄을 의미한다. 이러한 유사체는 변형된 R 기(예를 들어, 노르류신) 또는 변형된 펩티드 골격을 가지지만, 천연 발생 아미노산과 동일한 기본 화학 구조를 보유한다. 아미노산 모방체는 아미노산의 일반 화학 구조와 상이한 구조를 갖지만, 천연 발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 화학적 화합물을 의미한다.

아미노산은 그들의 통상적으로 알려진 3글자 기호에 의해서 또는 IUPAC-IUB 생화학 명명법 위원회가 추천하는 1글자 기호에 의해 본 명세서에서 언급될 수 있다. 유사하게, 뉴클레오티드는 그들의 통상적으로 허용되는 1글자 코드로 언급될 수 있다.

아미노산 또는 뉴클레오티드 염기 "위치"는 N-말단 (또는 5'-말단)에 대한 이의 위치를 기반으로 기준 서열 내 각 아미노산 (또는 뉴클레오티드 염기)을 순차적으로 식별하는 번호로 표시된다. 최적 정렬을 결정시 고려될 수 있는 결실, 삽입, 절두, 융합 들에 기인하여, 일반적으로 N-말단으로부터 단순하게 계측하여 결정되는 시험 서열의 아미노산 잔기 번호는 기준 서열에서 이의 상응하는 위치의 번호와 반드시 동일할 필요는 없을 것이다. 예를 들어, 변이체가 정렬된 기준 서열에 비해 결실을 가지는 경우에, 기준 서열의 위치에 상응하는 변이체에서 결실 부위에 아미노산이 존재하지 않을 것이다. 정렬된 기준 서열에 삽입이 존재하는 경우에, 그 삽입은 기준 서열 내 번호매겨진 아미노산 위치에 상응하지 않을 것이다. 절두 또는 융합의 경우에, 상응하는 서열 내 임의 아미노산에 상응하지 않는 기준 또는 정렬된 서열 중에 아미노산의 스트렛치가 존재할 수 있다.

소정 아미노산 또는 폴리뉴클레오티드 서열의 번호매김 상황에서 사용될 때 용어 "∼기준에 대해 번호매김" 또는 "∼에 상응하는"은 소정 아미노산 또는 폴리뉴클레오티드 서열을 기준 서열과 비교할 때 명시된 기준 서열의 잔기의 번호매김을 의미한다. 단백질의 아미노산 잔기는 소정 잔기 내에서와 동일한 단백질 내 필수 구조 위치를 차치할 때 소정 잔기에 "상응한다". 당업자는 상이한 번호매김 체계의 다른 단백질에서 단백질 (예를 들어, 본 명세서에 제공된 항체 구조물 또는 항원 결합 도메인) 내 특별한 위치에 상응하는 잔기의 정체 및 위치를 바로 인식하게 될 것이다. 예를 들어, 단백질 (예를 들어, 본 명세서에 제공된 항체 구조물 또는 항원 결합 도메인)과 단순 서열 정렬을 수행하여 상기 단백질의 특별한 위치에 상응하는 잔기의 정체 및 위치는 상기 단백질에 대해 정렬된 다른 단백질 서열에서 확인된다. 예를 들어, 선택된 항체 구조물 (또는 항원 결합 도메인) 중 선택된 잔기는 선택된 잔기가 카밧 위치 40의 경쇄 트레오닌과 동일한 필수적 공간 또는 다른 구조적 관련성을 점유할 때, 카밧 위치 40의 경쇄 트레오닌에 상응한다. 일부 실시형태에서, 선택된 단백질이 항체 (또는 항원 결합 도메인)의 경쇄와 최대 상동성으로 정렬될 때, 트레오닌 40과 정렬되는 정렬된 선택된 단백질 내 위치는 트레오닌 40에 상응한다고 한다. 1차 서열 정렬 대신에, 3차 구조 정렬이 또한 사용될 수 있는데, 예를 들어, 선택된 단백질의 구조가 카밧 위치 40의 경쇄 트레오닌과의 최대 상응성에 대해 정렬되고, 전체 구조가 비교되는 경우이다. 이러한 경우에, 구조 모델 중 트레오닌 40과 동일한 필수 위치를 차지하는 아미노산은 트레오닌 40 잔기에 상응한다고 한다.

"보존적으로 변형된 변이체"는 아미노산 및 핵산 서열 둘 모두에 적용된다. 특정한 핵산 서열에 대해서, 보존적으로 변형된 변이체는 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 의미하거나, 또는 핵산이 아미노산 서열을 코딩하지 않는 경우에, 실질적으로 동일한 서열을 의미한다. 유전자 코드의 축퇴성 때문에, 다수의 기능적으로 동일한 핵산 서열이 임의의 소정 아미노산 잔기를 코딩한다. 예를 들어, 코돈 GCA, GCC, GCG 및 GCU는 모두 아미노산 알라닌을 코딩한다. 따라서, 알라닌이 코돈에 의해 명시된 모든 위치에서, 그 코돈은 코딩되는 폴리펩티드를 변경시키지 않고 기술된 상응하는 임의의 코돈으로 변경될 수 있다. 이러한 핵산 변이는 보존적으로 변형된 변이의 한가지 종류인 "침묵 변이"이다. 폴리펩티드를 코딩하는 본 명세서의 모든 핵산 서열은 또한 핵산의 모든 가능한 침묵 변이를 설명한다. 당업자는 핵산의 각 코돈 (일반적으로 메티오닌의 유일한 코돈인 AUG, 및 일반적으로 트립토판의 유일한 코돈인 TGG 제외)은 기능적으로 동일한 분자를 산출하도록 변형될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 따라서, 폴리펩티드를 코딩하는 핵산의 각각의 침묵 변이는 발현 생성물에 대한 것이지만, 실제 프로브 서열에 대한 것은 아닌 각각의 기술된 서열에 내포된다.

아미노산 서열과 관련하여, 당업자는 코딩되는 서열 내 단일 아미노산 또는 적은 비율의 아미노산을 변경, 첨가 또는 결실시키는 핵산, 펩티드, 폴리펩티드, 또는 단백질 서열에 대한 개별 치환, 결실 또는 첨가가 그러한 변경이 그 결과로 화학적으로 유사한 아미노산으로 아미노산의 치환을 일으키는 경우에 "보존적으로 변형된 변이체"라는 것을 인식하게 될 것이다. 기능적으로 유사한 아미노산을 제공하는 보존적 치환 표는 당분야에서 충분히 공지되어 있다. 이러한 보존적으로 변형된 변이체는 본 발명의 다형성 변이체, 종간 동족체, 및 대립유전자에 첨가되고, 이를 배제하지 않는다.

다음의 8개 그룹은 각각 서로에 대한 보존성 치환인 아미노산을 함유한다: 1) 알라닌(A), 글리신(G); 2) 아스파르트산(D), 글루탐산(E); 3) 아스파라긴(N), 글루타민(Q); 4) 아르기닌(R), 리신(K); 5) 이소류신(I), 류신(L), 메티오닌(M), 발린(V); 6) 페닐알라닌(F), 티로신(Y), 트립토판(W); 7) 세린(S), 트레오닌(T); 및 8) 시스테인(C), 메티오닌(M) (예를 들어, [Creighton, Proteins (1984)] 참조).

용어 "폴리펩티드", "펩티드" 및 "단백질"은 아미노산 잔기의 중합체를 의미하기 위해 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되고, 여기서 중합체는 경우에 따라 아미노산으로 이루어지지 않은 모이어티에 접합될 수 있다. 용어는 하나 이상의 아미노산 잔기가 천연 발생 아미노산 중합체 및 비천연 발생 아미노산 중합체를 비롯하여, 상응하는 천연 발생 아미노산의 인공 화학 모방체인 아미노산 중합체에 적용된다. "융합 단백질"은 단일 모이어티로서 재조합적으로 발현되는 둘 이상의 개별 단백질 서열을 코딩하는 키메라 단백질을 의미한다.

용어 "펩티딜", "펩티딜 모이어티" 또는 "펩티드 모이어티"는 1가 펩티드를 의미하고 대안적으로 펩티드의 일부분 또는 폴리펩티드의 일부분으로서 언급할 수 있다.

예를 들어, 세포, 핵산, 단백질 또는 벡터에 대해 사용될 때 용어 "재조합"은 실험실 방법에 의해 변형되었거나, 또는 실험실 방법의 결과라는 것을 의미한다. 따라서, 예를 들어, 재조합 단백질은 실험실 방법으로 생산된 단백질을 포함한다. 재조합 단백질은 단백질의 천연 (비재조합) 형태에서 존재하지 않는 아미노산 잔기를 포함할 수 있거나, 또는 변형, 예를 들어 표지된 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.

핵산의 일부에 대해 사용시 용어 "이종성"은 핵산이 자연계에서 서로에 대해 동일한 관계로 존재하지 않는 둘 이상의 하위 서열을 포함한다는 것을 의미한다. 예를 들어, 전형적으로 핵산은 새로운 기능적 핵산을 만들도록 배열된 미관련 유전자로부터의 둘 이상의 서열, 예를 들어, 하나의 공급원 유래 프로모터 및 다른 공급원 유래 코딩 영역을 갖는 것이 재조합적으로 생산된다. 유사하게, 이종성 단백질은 그 단백질이 자연계에서 서로에 대해 동일한 관계로 존재하지 않는 둘 이상의 하위 서열을 포함하는 것을 의미한다 (예를 들어, 융합 단백질).

핵산 또는 단백질에 적용시 용어 "단리된"은 핵산 또는 단백질이 자연 상태에서 그것이 회합된 다른 세포 성분이 실질적으로 없다는 것을 의미한다. 예를 들어, 균질 상태일 수 있고 건조 또는 수성 용액에 존재할 수 있다. 순도 및 균질성은 전형적으로 분석 화학 기술 예컨대 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 또는 고성능 액상 크로마토그래피를 사용하여 결정된다. 조제물 중에 존재하는 우세종인 단백질은 실질적으로 정제된다.

둘 이상의 핵산 또는 폴리펩티드 서열의 경우에 용어 "동일한" 또는 "동일성" 백분율은 하기의 서열 비교 알고리즘 중 하나를 사용하거나 또는 수동 알고리즘 및 육안 검사를 통해서 측정되는 명시된 영역, 또는 비교창 상에서 최대 상응도를 위해 비교 및 정렬될 때, 동일하거나 또는 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드의 명시된 백분율 (즉, 예를 들어 본 발명의 전체 폴리펩티드 서열의 명시된 영역 또는 본 발명의 폴리펩티드의 개별 도메인에 대해 60% 동일성, 경우에 따라 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 또는 99% 동일성)을 갖는 둘 이상의 서열 또는 하위서열을 의미한다. 이러한 서열은 "실질적으로 동일한"이라고 한다. 이러한 정의는 또한 시험 서열의 보완을 의미한다. 경우에 따라, 동일성은 길이가 적어도 약 50개 뉴클레오티드인 영역, 또는 보다 바람직하게 길이가 100 내지 500개 또는 1000개 또는 그 이상의 뉴클레오티드인 영역 상에 존재한다. 본 발명은 서열번호 1, 2, 3, 4, 및 5 중 어느 하나와 실질적으로 동일한 폴리펩티드를 포함한다.

"서열 동일성 백분율"은 비교창 상에서 2개의 최적으로 정렬된 서열을 비교하여 결정되고, 여기서 비교 창에서 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열의 일부분은 2개 서열의 최적 정렬을 위해서 기준 서열 (첨가 또는 결실을 포함하지 않음)과 비교시 첨가 또는 결실(즉, 갭)을 포함할 수 있다. 백분율은 동일한 핵산 염기 또는 아미노산 잔기가 양쪽 서열에 존재하는 위치의 수를 결정하여 일치되는 위치의 개수를 산출하고, 일치되는 위치의 개수를 비교창의 전체 위치 개수로 나누고 그 결과에 100을 곱해서 서열 동일성의 백분율을 산출하여 계산된다.

서열 비교를 위해서, 전형적으로 하나의 서열은 시험 서열이 비교되는 기준 서열로서 작용된다. 서열 비교 알고리즘을 사용할 때, 시험 및 기준 서열을 컴퓨터에 입력하고, 하위 서열 좌표를 필요하면 지정하고, 서열 알고리즘 프로그램 변수를 지정한다. 디폴트 프로그램 변수를 사용할 수 있거나, 또는 대체 변수가 지정될 수 있다. 그 다음으로 서열 비교 알고리즘은 프로그램 변수를 기반으로, 기준 서열 대비 시험 서열에 대한 서열 동일성 백분율을 계산한다.

본 명세서에서 사용되는 "비교창"은 서열이 2개 서열과 최적으로 정렬된 후 동일한 개수의 인접 위치의 기준 서열과 비교될 수 있는, 예를 들어 전체 서열 또는 20 내지 600개, 약 50 내지 약 200개, 또는 약 100개 내지 약 150개 아미노산 또는 뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택되는 인접한 위치의 개수의 어느 하나의 절편에 대한 기준을 포함한다. 비교를 위한 서열의 정렬 방법은 당분야에 충분히 공지되어 있다. 비교를 위한 서열의 최적 정렬은 예를 들어, [Smith and Waterman (1970) Adv. Appl. Math. 2:482c]의 국소 상동성 알고리즘, [Needleman and Wunsch (1970) J. Mol. Biol. 48:443]의 상동성 정렬 알고리즘, [Pearson and Lipman (1988) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444]의 유사성 방법을 위한 검색, 이들 알고리즘 ([Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI]의 GAP, BESTFIT, FASTA, 및 TFASTA)의 컴퓨터 실행, 또는 수동 정렬 및 육안 검사 (예를 들어, [Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (1995 supplement)] 참조)에 의해 수행될 수 있다.

서열 동일성 및 서열 유사성의 백분율을 결정하는데 적합한 알고리즘의 예는 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘으로서, 각각 [Altschul et al. (1977) Nuc. Acids Res. 25:3389-3402], 및 [Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410]에 기술되어 있다. BLAST 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는 국립 생명공학 정보 센터 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)를 통해 공공으로 입수가능하다. 이러한 알고리즘은 데이타베이스 서열에서 동일 길이의 단어와 정렬했을 때 일부 양성-값 한계치 점수 T를 만족하거나 또는 일치하는, 문의 서열 내 길이 W의 짧은 단어를 확인하여 고득점 서열쌍 (HSP)을 먼저 확인하는 단계를 포함한다. T는 이웃하는 단어 점수 한계치로서 언급된다 (Altschul et al., 상동). 이들 초기 이웃 단어 히트는 그들을 함유하는 보다 긴 HSP를 찾기 위한 검색을 개시하기 위한 씨드로서 작용한다. 단어 히트는 누적 정렬 점수가 증가될 수 있게 멀리 각 서열을 따라 양쪽 방향으로 연장된다. 누적 점수는 뉴클레오티드 서열의 경우에, 변수 M (일치하는 잔기 쌍에 대한 보상 점수; 항상 > 0) 및 N (불일치 잔기에 대한 패널티 점수; 항상 < 0)을 사용해 계산된다. 아미노산 서열의 경우에, 채점 매트릭스가 누적 점수를 계산하는데 사용된다. 각 방향으로 단어 히트의 연장은 누적 정렬 점수가 이의 최대 획득 값으로부터 X 분량까지 떨어지거나; 누적 점수가 하나 이상의 음성-득점 잔기 정렬의 축적으로 인해 0 또는 그 이하가 되거나; 또는 양쪽 서열의 끝에 도달할 때 중지된다. BLAST 알고리즘 변수 W, T, 및 X는 정렬의 감도 및 속도를 결정한다. BLASTN 프로그램 (뉴클레오티드 서열의 경우)은 디폴트로서 11의 단어길이 (W), 10의 기대치 (E), M=5, N=-4 및 양쪽 가닥의 비교를 사용한다. 아미노산 서열의 경우, BLASTP 프로그램은 디폴트로서 3의 단어길이, 및 10의 기대치 (E), 및 50의 BLOSUM62 채점 매트릭스 (Henikoff and Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915) 정렬 (B), 10의 기대치 (E), M=5, N=-4, 및 양쪽 가닥의 비교를 사용한다.

BLAST 알고리즘은 또한 2개 서열 간 유사성의 통계 분석을 수행한다 (예를 들어, [Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5787] 참조). BLAST 알고리즘에 의해 제공되는 유사성의 한 척도는 2개 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열간 일치가 우연히 일어날 수 있는 확률 표시를 제공하는, 최소 총합 확률 (P(N))이다. 예를 들어, 핵산은 기준 핵산에 대한 시험 핵산의 비교에서 최소 총합 확률이 약 0.2 미만, 보다 바람직하게 약 0.01 미만, 및 가장 바람직하게 약 0.001 미만이면 기준 서열과 유사한 것으로 간주된다.

2개 핵산 서열 또는 폴리펩티드가 실질적으로 동일하다는 표시는 제1 핵산에 의해 코딩되는 폴리펩티드가 하기 기술된 바와 같이, 제2 핵산에 의해 코딩되는 폴리펩티드에 대해 생성된 항체와 면역학적으로 교차-반응성이라는 것이다. 따라서, 예를 들어 2개 펩티드가 오직 보존성 치환만이 상이한 경우에, 전형적으로 폴리펩티드는 제2 폴리펩티드와 실질적으로 동일하다. 2개 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 표지는 2개 분자 또는 그들 상보체가 하기 기술된 바와 같이, 엄격 조건 하에서 서로 혼성화된다는 것이다. 2개 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 또 다른 표시는 동일한 프라이머를 사용하여 서열을 증폭시킬 수 있다는 것이다.

"표지" 또는 "검출가능한 모이어티"는 분광분석, 광화학, 생화학, 면역화학, 화학, 또는 다른 물리적 수단을 통해 검출가능한 조성물이다. 예를 들어, 유용한 표지는 예를 들어 표적 펩티드와 특이적으로 반응하는 펩티드 또는 항체에 방사성표지를 도입시킴으로써, 검출할 수 있는 ³²P, 형광성 염료, 전자-밀집 시약, 효소 (예를 들어, ELISA에서 통용되는 것), 바이오틴, 딕옥시게닌, 또는 합텐 및 단백질 또는 다른 독립체를 포함한다. 표지에 항체를 접합시키기 위해 당분야에 공지된 임의의 적합한 방법이 예를 들어, [Hermanson, Bioconjugate Techniques 1996, Academic Press, Inc., San Diego]에 기술된 방법을 사용해 적용될 수 있다.

항체는 복잡한 내부 구조를 갖는 대형, 복합 분자 (∼150,000개 또는 약 1320개 아미노산의 분자량). 천연 항체 분자는 폴리펩티드 사슬의 2개의 동일한 쌍을 함유하며, 각 쌍은 하나의 경쇄 및 하나의 중쇄를 가진다. 각각의 경쇄 및 중쇄는 2개 영역: 표적 항원과의 결합에 관여하는 가변 ("V") 영역, 및 면역계의 다른 성분과 상호작용하는 불변 ("C") 영역으로 이루어진다. 경쇄 및 중쇄 가변 영역은 함께 3차원 공간으로 모여서 항원 (예를 들어, 세포 표면 상의 수용체)에 결합하는 가변 영역을 형성한다. 각각의 경쇄 또는 중쇄 가변 영역 내에는, 상보성 결정 영역 ("CDR")이라고 하는 3개의 짧은 절편 (평균 10개 아미노산 길이)이 존재한다. 항체 가변 도메인의 6개 CDR (경쇄로부터 3개 및 중쇄로부터 3개)은 함께 3차원 공간으로 폴딩되어서 표적 항원 상에 도킹된 실제 항체 결합 부위를 형성한다. CDR의 위치 및 길이는 [Kabat, E. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and Human Services, 1983, 1987]에 상세하게 정의되어 있다. CDR에 함유되지 않은 가변 영역의 일부는 CDR을 위한 환경을 형성하는 프레임워크 ("FR")라고 한다.

본 명세서에서 제공하는 "항체 변이체"는 항원에 결합할 수 있고 항체의 하나 이상의 구조적 도메인 또는 이의 단편을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. 항체 변이체의 비제한적인 예는 단일-도메인 항체 또는 나노바디, 어피바디 (단일클론 항체보다 작은 폴리펩티드 (예를 들어, 약 6kDA) 및 높은 친화성으로 항체에 결합할 수 있고 모방 단일클론 항체를 모방하는 것, 단일특이적 Fab₂, 이중특이적 Fab₂, 삼중특이적 Fab₃, 1가 IgG, scFv, 이중특이적 디아바디, 삼중특이적 트리아바디, scFv-Fc, 미니바디, IgNAR, V-NAR, hcIgG, VhH, 또는 펩티바디를 포함한다. 본 명세서에 기술된 바와 같은 "나노바디" 또는 "단일 도메인 항체"는 당분야에서 일반적으로 충분히 공지되어 있고, 단일 단량체 가변 항체 도메인으로 이루어진 항체 단편을 의미한다. 전체 항체와 유사하게, 특이적 항원에 선택적으로 결합할 수 있다. 본 명세서에 제공된 바와 같은 "펩티바디"는 항체의 Fc 도메인에 (공유 또는 비공유 링커를 통해) 부착된 펩티드 모이어티를 의미한다. 당분야에 공지된 항체 변이체의 추가의 비제한적인 예는 연골 어류 또는 낙타과에 의해 생산되는 항체를 포함한다. 낙타과 유래 항체 및 이의 가변 영역 및 그들의 제조, 단리 및 사용 방법에 관한 일반 설명은 모든 목적을 위해 그들 전문을 참조로 본 명세서에 편입시키는 참조 WO97/49805 및 WO 97/49805에서 확인할 수 있다. 유사하게, 연골 어류 유래 항체 및 이의 가변 영역 및 그들의 제조, 단리 및 사용 방법은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 본 명세서에 편입되는 WO2005/118629에서 확인할 수 있다.

용어 "항체"는 당분야에서 통상적으로 공지된 의미에 따라 사용된다. 항체는 예를 들어 온전한 면역글로불린으로서 또는 다양한 펩티다제로 분해되어 생산된 충분히 특징규명된 다수의 단편으로 존재한다. 따라서, 예를 들어, 펩신은 힌지 영역 내 디술파이드 연결 아래에서 항체를 분해하여 F(ab)'₂, 그 자체로 디술파이드 결합에 의해 V_H-C_H1 에 연결된 경쇄인 Fab의 이량체를 생성시킨다. F(ab)'₂ 는 온화한 조건 하에서 환원되어 힌지 영역 내 디술파이드 연결을 파괴하여서, F(ab)'₂ 이량체를 Fab' 단량체로 전환시킬 수 있다. Fab' 단량체는 힌지 영역의 일부분을 갖는 실질적으로 Fab이다 ([Fundamental Immunology (Paul ed., 3d ed. 1993)] 참조). 다양한 항체 단편이 온전한 항체의 분해 관점에서 정의되지만, 당업자는 이러한 단편은 재조합 DNA 방법론을 사용하여 또는 화학적으로 새롭게 합성될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 본 명세서에서 사용되는 용어 항체는 또한 전체 항체의 변형에 의해 생산된 항체 단편, 또는 재조합 DNA 방법론을 사용해 새롭게 합성된 것 (예를 들어, 단쇄 Fv) 또는 파지 디스플레이 라이브러리를 사용해 동정된 것 (예를 들어, [McCafferty et al., Nature 348:552-554 (1990)] 참조)을 포함한다.

예시적인 면역글로불린 (항체) 구조 유닛은 사량체를 포함한다. 각각의 사량체는 폴리펩티드 사슬의 2개의 동일한 쌍으로 구성되고, 각각의 쌍은 하나의 "경"쇄 (약 25 kD) 및 하나의 "중"쇄 (약 50-70 kD)를 갖는다. 각 사슬의 N-말단은 주로 항원 인식을 담당하는 약 100개 내지 110개 또는 그 이상의 아미노산의 가변 영역을 한정한다. 용어 가변 경쇄 (VL) 및 가변 중쇄 (VH)는 각각 이들 경쇄 및 중쇄를 의미한다. Fc (즉, 단편 결정화가능한 영역)는 면역글로불린의 "베이스" 또는 "꼬리부"이고 전형적으로 항체의 클래스에 따라서 2개 또는 3개 불변 도메인에 기여하는 2개 중쇄로 구성된다. 특이적 단백질에 결합함으로써, Fc 영역은 각 항체가 소정 항원에 대한 적절한 면역 반응을 생성시키는 것을 보장한다. Fc 영역은 또한 다양한 세포 수용체, 예컨대 Fc 수용체, 및 다른 면역 분자, 예컨대 보체 단백질에 결합된다.

본 명세서에서 제공하는 용어 "항원"은 본 명세서에 제공되는 항체 결합 도메인에 결합할 수 있는 분자를 의미한다. 본 명세서에서 제공하는 "항원 결합 도메인"은 항원 (에피토프)에 결합하는 항체의 영역이다. 상기 기술된 바와 같이, 항원 결합 도메인은 중쇄 및 경쇄 각각의 하나의 불변 및 하나의 가변 도메인 (각각 VL, VH, CL 및 CH1)을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항원 결합 도메인은 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항원 결합 도메인은 경쇄 가변 도메인을 포함하고 중쇄 가변 도메인 및/또는 중쇄 불변 도메인을 포함하지 않는다. 파라토프 또는 항원-결합 부위는 항원 결합 도메인의 N-말단 상에 형성된다. 항원 결합 도메인의 2개 가변 도메인은 항원의 에피토프에 결합할 수 있다.

항체는 예를 들어 온전한 면역글로불린으로서 또는 다양한 펩티다제에 의한 분해로 생성되는 다수의 충분히 특징규명된 단편으로서 존재한다. 따라서, 예를 들어, 펩신은 힌지 영역 내 디술파이드 연결 아래에서 항체를 분해하여, F(ab)'2, 그 자체가 술파이드 결합에 의해 VH-CH1에 연결된 경쇄인 Fab의 이량체를 생성시킨다. F(ab)'2는 온화한 조건 하에서 환원된 힌지 영역 내 디술파이드 연결을 파괴하여서, F(ab)'2 이량체를 Fab' 단량체로 전환시킬 수 있다. Fab' 단량체는 힌지 영역의 일부분을 갖는 실질적으로 항원 결합 부분이다 ([Fundamental Immunology (Paul ed., 3d ed. 1993)] 참조). 다양한 항체 단편이 온전한 항체의 분해 관점에서 정의되지만, 당업자는 이러한 단편이 재조합 DNA 방법론을 사용하여 또는 화학적으로 새롭게 합성될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 본 명세서에서 사용되는 용어 항체는 또한 전체 항체의 변형에 의해 생산되는 항체 단편, 또는 재조합 DNA 방법론을 사용해 새롭게 합성된 것 (예를 들어, 단쇄 Fv) 또는 파지 디스플레이 라이브러리를 사용해 동정된 것 (예를 들어, [McCafferty et al., Nature 348:552-554 (1990)] 참조)을 포함한다.

단쇄 가변 단편(scFv)은 전형적으로 10 내지 약 25개 아미노산의 짧은 링커 펩티드와 연결된, 면역글로불린의 중쇄(VH) 및 경쇄(VL)의 가변 영역의 융합 단백질이다. 링커는 일반적으로 가요성을 위해 글리신을 비롯하여, 가용성을 위해 세린 또는 트레오닌이 풍부할 수 있다. 링커는 VH의 N-말단을 VL의 C-말단과 연결시킬 수 있거나, 또는 그 반대일 수도 있다.

항체의 에피토프는 항체가 결합하는 이의 항원의 영역이다. 2개 항체는 각각 이 항원에 대한 다른 것의 결합을 경쟁적으로 억제(차단)하면 동일 또는 중복 에피토프에 결합된다. 즉, 1x, 5x, 10x, 20x 또는 100x 과량의 한 항체는 경쟁적 결합 어세이로 측정하여 다른 것의 결합을 적어도 30%까지, 그러나 바람직하게 50%, 75%, 90% 또는 심지어 99%까지 억제한다 (예를 들어, [Junghans et al., Cancer Res. 50:1495, 1990] 참조). 대안적으로, 2개 항체는 한 항체의 결합을 감소 또는 제거시키는 항원 내 실질적으로 모든 아미노산 돌연변이가 다른 것의 결합을 감소시키거나 또는 제거시키면 동일한 에피토프를 갖는다. 2개 항체는 한 항체의 결합을 감소 또는 제거시키는 일부 아미노산 돌연변이가 다른 것의 결합을 감소시키거나 또는 제거시키면 중복 에피토프를 갖는다.

본 발명의 적합한 항체의 제조를 위하고 본 발명에 따라 사용을 위해, 예를 들어, 재조합, 단일클론, 또는 다클론 항체를 위해서, 당분야에 공지된 많은 기술들이 사용될 수 있다 (예를 들어, 다음의 문헌들을 참조함: Kohler & Milstein, Nature 256:495-497 (1975); Kozbor et al., Immunology Today 4: 72 (1983); Cole et al., pp. 77-96 in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc. (1985); Coligan, Current Protocols in Immunology (1991); Harlow & Lane, Antibodies, A Laboratory Manual (1988); 및 Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice (2d ed. 1986)). 관심 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자는 세포로부터 클로닝될 수 있고, 예를 들어, 단일클론 항체를 코딩하는 유전자는 하이브리도마로부터 클로닝될 수 있고 재조합 단일클론 항체를 제조하는데 사용될 수 있다. 단일클론 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자 라이브러리는 또한 하이브리도마 또는 형질 세포로부터 만들어질 수 있다. 중쇄 및 경쇄 유전자 생성물의 임의 조합은 상이한 항원성 특이성을 갖는 항체의 거대 저장소를 생성시킨다 (예를 들어, [Kuby, Immunology (3rd ed. 1997)] 참조). 단쇄 항체 또는 재조합 항체의 제조 기술 (미국 특허 제4,946,778호, 미국 특허 제4,816,567호)은 본 발명의 폴리펩티드에 대한 항체를 제조하기 위해 개조될 수 있다. 또한, 유전자이식 마우스, 또는 다른 유기체 예컨대 다른 포유동물을 사용하여 인간화 또는 인간 항체를 발현시킬 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 제5,545,807호; 제5,545,806호; 제5,569,825호; 제5,625,126호; 제5,633,425호; 제5,661,016호, [Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992)]; [Lonberg et al., Nature 368:856-859 (1994)]; [Morrison, Nature 368:812-13 (1994)]; [Fishwild et al., Nature Biotechnology 14:845-51 (1996)]; [Neuberger, Nature Biotechnology 14:826 (1996)]; 및 [Lonberg & Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995)] 참조). 대안적으로, 파지 디스플레이 기술을 사용하여 선택된 항원에 특이적으로 결합하는 항체 및 헤테로머 Fab 단편을 동정할 수 있다 (예를 들어, [McCafferty et al., Nature 348:552-554 (1990)]; [Marks et al., Biotechnology 10:779-783 (1992)] 참조). 항체는 또한 이중특이적으로 만들어질 수 있고, 다시 말해, 2종의 상이한 항원을 인식할 수 있게 만들 수 있다 (예를 들어, WO 93/08829, [Traunecker et al., EMBO J. 10:3655-3659 (1991)]; 및 [Suresh et al., Methods in Enzymology 121:210 (1986)] 참조). 항체는 또한 헤테로접합체, 예를 들어, 2개의 공유적으로 연결된 항체, 또는 면역독소일 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 제4,676,980호, WO 91/00360; WO 92/200373; 및 EP 03089 참조).

인간 이외의 항체를 인간화 또는 영장류화시키기 위한 방법은 당분야에 충분히 공지되어 있다 (예를 들어, 미국 특허 제4,816,567호; 제5,530,101호; 제5,859,205호; 제5,585,089호; 제5,693,761호; 제5,693,762호; 제5,777,085호; 제6,180,370호; 제6,210,671호; 및 제6,329,511호; WO 87/02671; EP 특허 출원 0173494; [Jones et al. (1986) Nature 321:522]; 및 [Verhoyen et al. (1988) Science 239:1534] 참조). 인간화 항체는 예를 들어, [Winter and Milstein (1991) Nature 349:293]에 더욱 기술되어 있다. 일반적으로, 인간화 항체는 인간 이외의 공급원으로부터의 것에 도입된 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는다. 이들 인간 이외의 아미노산 잔기는 종종 전형적으로 이입 가변 도메인으로부터 선택된, 이입 잔기라고 한다. 인간화는 실질적으로 설치류 CDR들 또는 CDR 서열에 인간 항체의 상응하는 서열을 치환시킴으로서, Winter 및 동료들의 방법에 따라 수행될 수 있다 (예를 들어, 다음의 문헌들을 참조함: Morrison et al., PNAS USA, 81:6851-6855 (1984), Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Morrison and Oi, Adv. Immunol., 44:65-92 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988); 및 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992); Padlan, Molec. Immun., 28:489-498 (1991); Padlan, Molec. Immun., 31(3):169-217 (1994)). 따라서, 이러한 인간화 항체는 키메라 항체 (미국 특허 제4,816,567호), 여기서 실질적으로 온전한 인간 가변 도메인 미만이 인간 이외의 종으로부터 유래된 상응하는 서열에 의해 치환된다. 실제로, 인간화 항체는 전형적으로 일부 CDR 잔기 및 가능하게 일부 FR 잔기가 설치류 항체 내 유사한 부위 유래 잔기로 치환된 인간 항체이다. 예를 들어, 인간화 면역글로불린 프레임워크 영역을 코딩하는 제1 서열 및 바람직한 면역글로불린 상보성 결정 영역을 코딩하는 제2 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드는 합성에 의해서 또는 적절한 cDNA 및 게놈 DNA 절편을 조합하여 생산될 수 있다. 인간 불변 영역 DNA 서열은 다양한 인간 세포로부터 충분히 공지된 절차에 따라 단리될 수 있다.

"키메라 항체"는 (a) 불변 영역 또는 이의 일부분이 변경, 치환 또는 교환되어서 항원 결합 부위 (가변 영역)가 상이하거나 또는 변경된 클래스, 이펙트 기능 및/또는 종의 불변 영역, 또는 키메라 항체에 새로운 특성을 부여하는 완전히 상이한 분자, 예를 들어, 효소, 독소, 호르몬, 성장 인자, 약제 등에 연결되거나; 또는 (b) 가변 영역 또는 이의 일부분이 상이하거나 또는 변경된 항원 특이성을 갖는 가변 영역으로 변경, 치환 또는 교환된, 항체 분자이다. 본 발명에 따라 사용되고, 본 발명에 따른 바람직한 항체는 인간화 및/또는 키메라 단일클론 항체를 포함한다.

항체에 치료제를 접합시키는 기술은 충분히 공지되어 있다 (예를 들어, 다음의 문헌들을 참조함: Arnon et al., "Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery"in Controlled Drug Delivery (2^nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review" in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); and Thorpe et al., "The Preperation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev., 62:119-58 (1982)).

본 명세서에서 사용되는 용어 "항체-약제 접합체" 또는 "ADC"는 항체에 접합되거나 또는 아니면 공유적으로 결합된 치료제를 의미한다.

본 명세서에서 사용되는 "치료제" 또는 "치료 모이어티"는 대상체에게 투여될 때, 의도하는 예방적 효과 예를 들어, 손상, 질환, 병상 또는 병태의 개시 (또는 재발생)의 예방 또는 지연, 또는 손상, 질환, 병상, 또는 병태의 개시 (또는 재발생)의 가능성 감소, 또는 그들 증상 또는 의도하는 치료적 효과, 예를 들어, 손상, 질환, 병상 또는 병태의 치료 또는 경감, 또는 치료의 객관적 또는 주관적 변수를 포함한 그들 증상 예컨대 감퇴; 호전; 증상의 감소 또는 손상, 병상 또는 병태를 환자에게 보다 내성이게 만듬; 퇴행 또는 감쇠 속도의 완화; 퇴행의 최종 지점을 덜 약화되게 만듬; 또는 환자의 신체적 또는 정신적 웰빙의 개선을 가지게 되는 작용제(예를 들어, 화합물 또는 조성물)를 의미한다. 실시형태에서, 치료제는 질환 예컨대 암의 치료 또는 예방에서 유용한 조성물이다.

단백질 또는 펩티드에 대해 언급 시 어구 "항체에 특이적으로 (또는 선택적으로) 결합하다" 또는 "∼와 특이적으로 (또는 선택적으로) 면역반응하다"는 종종 단백질 및 다른 생물제의 불균질 개체군 중에, 단백질의 존재를 결정하는 결합 반응을 의미한다. 따라서, 지정된 면역어세이 조건 하에서, 명시된 항체는 배경값보다 적어도 2배, 보다 특히 배경값보다 10배 내지 100배 초과로 특정한 단백질에 결합한다. 이러한 조건 하에서 항체와의 특이적 결합은 전형적으로 특정한 단백질에 대한 이의 특이성에 대해 선택되는 항체를 요구한다. 예를 들어, 다클론 항체는 다른 단백질이 아닌, 선택적 항체와 특이적으로 면역반응하는 항체의 서브셋만을 수득하기 위해 선별될 수 있다. 이러한 선별은 다른 분자와 교차-반응하는 항체를 빼내어서 획득될 수 있다. 다양한 면역어세이 구성을 사용하여 특정한 단백질과 특이적으로 면역반응하는 항체를 선별할 수 있다. 예를 들어, 고체상 ELISA 면역어세이가 단백질과 특이적으로 면역반응하는 항체를 선별하는데 통상적으로 사용된다 (예를 들어, 특이적 면역반응성을 결정하는데 사용될 수 있는 면역어세이 구성 및 조건에 대해 [Harlow & Lane, Using Antibodies, A Laboratory Manual (1998)] 참조).

"접촉하는"은 이의 분명한 통상의 의미에 따라 사용되고 적어도 2종의 별개 종 (예를 들어, 생물분자 또는 세포를 포함하는 화학적 화합물)이 반응하거나, 상호작용하거나 또는 물리적으로 접촉하도록 충분히 가까워지게 하는 과정을 의미한다. 최종 반응 생성물은 반응 혼합물에서 생성될 수 있는 하나 이상의 첨가된 시약으로부터의 중간체로부터 또는 첨가된 시약 간 반응으로부터 직접적으로 생성될 수 있다는 것을 이해해야 한다.

용어 "접촉하는"은 2종이 반응하거나, 상호작용하거나, 또는 물리적으로 접촉 (예를 들어, 결합)할 수 있게 하는 것을 포함할 수 있고, 여기서 2종은 예를 들어, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물 및 암 단백질일 수 있다. 실시형태에서, 접촉하는은 예를 들어, 암 세포 상에 발현된 암 단백질에 항체 구조물이 결합할 수 있게 하는 것을 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 "세포"는 이의 게놈 DNA를 보존하거나 또는 복제하는데 충분한 물질대사 또는 다른 기능을 수행하는 세포를 의미한다. 세포는 예를 들어, 온전한 막의 존재, 특정 염료에 의한 염색, 자손 생성능, 또는 생식세포의 경우, 생존 자손을 생성하는 제2 생식세포와 조합하는 능력을 포함한, 당분야에 충분히 공지된 방법으로 동정할 수 있다. 세포는 원핵생물 및 진핵생물 세포를 포함할 수 있다. 원핵생물 세포는 제한없이 박테리아를 포함한다. 진핵생물 세포는 제한없이 효모 세포 및 식물 및 동물, 예를 들어 포유동물, 곤충 (예를 들어, 스포돕테라) 및 인간 세포로부터 유래된 세포를 포함한다. 세포는 그들이 자연적으로 비부착성이거나 또는 예를 들어, 트립신처리를 통해 표면에 부착되지 않도록 처리될 때 유용할 수 있다.

"생물학적 샘플" 또는 "샘플"은 대상체 또는 환자로부터 수득되거나 또는 유래되는 재료를 의미한다. 생물학적 샘플은 조직 절편 예컨대 생검 및 검시 샘플, 및 조직학적 목적으로 채취된 냉동 절편을 포함한다. 이러한 샘플은 체액 예컨대 혈액 및 혈액 분획 또는 생성물 (예를 들어, 혈청, 혈장, 혈소판, 적혈 세포 등), 타액, 조직, 배양 세포 (예를 들어, 초대 배양물, 이식편, 및 형질전환 세포 등), 대변, 소변, 활액, 관절 조직, 활액 조직, 윤활막세포, 섬유아세포-유사 윤활막세포, 마크로파지-유사 윤활막세포, 면역 세포, 조혈 세포, 섬유아세포, 마크로파지, T 세포 등을 포함한다. 생물학적 샘플은 전형적으로 진핵생물 유기체, 예컨대 포유동물 예컨대 영장류, 예를 들어, 침팬지 또는 인간; 소; 개; 고양이; 설치류, 예를 들어, 기니 피그, 래트, 마우스; 토끼; 또는 새; 파충류; 또는 어류로부터 수득된다. 일부 실시형태에서, 샘플은 인간으로부터 수득된다.

"대조군" 샘플 또는 값은 시험 샘플과 비교를 위해, 기준, 일반적으로 기지의 기준으로서 제공되는 샘플을 의미한다. 예를 들어, 시험 샘플은 예를 들어, 시험 화합물의 존재 하에서 시험 조건으로부터 채취될 수 있고, 기지 조건, 예를 들어 시험 화합물의 부재 (음성 대조군) 하에서, 또는 기지 화합물의 존재 (양성 대조군) 하에서의 샘플과 비교될 수 있다. 대조군은 또한 다수의 시험 또는 결과로부터 모아진 평균 값을 대표할 수 있다. 당업자는 임의 수의 변수의 평가를 위해 디자인될 수 있다. 예를 들어, 대조군은 약학 데이타 (예를 들어, 반감기) 또는 치료적 지표 (예를 들어, 부작용의 비교)를 기반으로 치료 이득을 비교하기 위해 고안될 수 있다. 당업자는 대조군의 소정 상황에서 가치있고 대조군 값과의 비교를 기반으로 데이타를 분석할 수 있다는 것을 이해하게 될 것이다. 대조군은 또한 데이타의 유의성을 결정하기 위해 가치있다. 예를 들어, 소정 변수에 대한 값이 대조군에서 광범위하게 변동되면, 시험 샘플 중 변동은 유의한 것으로 간주되지 않을 것이다.

"환자" 또는 "이를 필요로 하는 대상체"는 본 명세서에서 제공하는 조성물 또는 약학 조성물의 투여에 의해 치료될 수 있는 질환 또는 병태를 앓고 있거나 또는 그러한 경향이 있는 살아있는 유기체를 의미한다. 비제한적인 예는 인간, 다른 포유동물, 소과, 래트, 마우스, 개, 원숭이, 염소, 양, 소, 사슴, 및 다른 포유동물 이외의 동물을 포함한다. 일부 실시형태에서, 환자는 인간이다.

용어 "질환" 또는 "병태"는 본 명세서에서 제공하는 화합물, 약학 조성물 또는 방법으로 치료될 수 있는 환자 또는 대상체의 건강 상태 또는 존재의 상태를 의미한다. 실시형태에서, 질환은 암 (예를 들어, 폐암, 난소암, 골육종, 방광암, 자궁경부암, 간암, 신장암, 피부암 (예를 들어, 메르켈 세포 암종), 고환암, 백혈병, 림프종 (외투 세포 림프종), 두경부암, 직결장암, 전립선암, 췌장암, 흑색종, 유방암, 신경아세포종)이다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "암"은 백혈병, 림프종, 흑색종, 신경내분비 종양, 암종 및 육종을 포함하여, 포유동물에서 발견되는 모든 유형의 암, 신생물 또는 악성 종양을 의미한다. 본 명세서에 제공되는 화합물, 약학 조성물 또는 방법으로 치료될 수 있는 예시적인 암은 림프종 (예를 들어, 외투 세포 림프종, 소포성 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 변연부 림프종, 버킷 림프종), 육종, 방광암, 골암, 뇌종양, 자궁경부암, 결장암, 식도암, 위암, 두경부암, 신장암, 골수종, 갑상선암, 백혈병, 전립선암, 유방암 (예를 들어, 삼중 음성, ER 양성, ER 음성, 화학요법 내성, 허셉틴 내성, HER2 양성, 독소루비신 내성, 타목시펜 내성, 관 암종, 소엽 암종, 원발성, 전이성), 난소암, 췌장암, 간암 (예를 들어, 간세포 암종), 폐암 (예를 들어, 비소세포 폐 암종, 편평 세포 폐 암종, 선암종, 거대 세포 폐 암종, 소세포 폐 암종, 카르시노이드, 육종), 다형성 교아세포종, 신경교종, 흑색종, 전립선암, 거세-내성 전립선암, 유방암, 삼중 음성 유방암, 교아세포종, 난소암, 폐암, 편평 세포 암종 (예를 들어, 머리, 목, 또는 식도), 직결장암, 백혈병 (예를 들어, 림프아구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 모발 세포 백혈병), 급성 골수성 백혈병, 림프종, B 세포 림프종, 또는 다발성 골수종을 포함한다. 추가 예는 갑상선암, 내분비계암, 뇌암, 유방암, 자궁경부암, 결장암, 두경부암, 식도암, 간암, 신장암, 폐암, 비소세포 폐의 암, 흑색종, 중피종, 난소의 암, 육종, 위암, 자궁암, 또는 수아세포종, 호지킨병, 비호지킨 림프종, 다발성 골수종, 신경아세포종, 신경교종, 다형성 교아세포종, 난소암, 횡문근육종, 원발성 혈소판증가증, 원발성 거대글로불린혈증, 원발성 뇌 종양, 암, 악성 췌장 인슐린종, 악성 카시노이드, 비뇨 방광암, 전악성 피부 병변, 고환암, 림프종, 갑상선암, 신경아세포종, 식도암, 비뇨생식관암, 악성 고칼슘혈증, 자궁내막암, 부신피질암, 내분비 또는 외분비 췌장의 신생물, 수질 갑상선 암종, 흑색종, 직결장암, 유두상 갑상선암, 간세포 암종, 유두의 파젯병, 엽상 종양, 소엽 암종, 관 암종, 췌장 성상 세포의 암, 간 성상세포의 암, 또는 전립선암을 포함한다.

용어 "백혈병"은 혈액-형성 장기의 진행성, 악성 질환을 광범위하게 의미하고, 일반적으로 혈액 및 골수 내 백혈구 및 그들 전구체의 기형적인 증식 및 발생을 특징으로 한다. 일반적으로 백혈병은 임상적으로 (1) 질환-급성 또는 만성의 지속기간 및 특징; (2) 관여되는 세포 유형; 골수성 (골수기원), 림프성 (림프기원), 또는 단핵구성; 및 (3) 혈액-백혈성 또는 무백혈성 (아백혈성)인 비정상 세포수의 증가 또는 무증가를 기반으로 분류된다. P388 백혈병 모델이 시험관내 항-백혈성 활성의 예측자로서 광범위하게 허용된다. P388 어세이에서 양성으로 검사된 화합물이 일반적으로 치료되는 백혈병 유형과 무관하게 생체 내에서 항-백혈성 활성의 일부 수준을 나타낼 것으로 여겨진다. 따라서, 본 출원은 백혈병을 치료하는 방법, 바람직하게 급성 비림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 급성 과립구성 백혈병, 만성 과립구성 백혈병, 급성 프로골수구성 백혈병, 성인 T-세포 백혈병, 무백혈성 백혈병, 백혈구증가성 백혈병, 호염기성 백혈병, 아세포 백혈병, 소 백혈병, 만성 골수구성 백혈병, 피부 백혈병, 배아 백혈병, 호산성 백혈병, 그로스 백혈병, 모발 세포 백혈병, 조혈세포 백혈병, 혈구아세포 백혈병, 조직구 백혈병, 줄기 세포 백혈병, 급성 단핵구성 백혈병, 백혈구감소성 백혈병, 림프성 백혈병, 림프아구성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프기원 백혈병, 림프성 백혈병, 림프육종 세포 백혈병, 비만 세포 백혈병, 거핵구성 백혈병, 미세골수아구성 백혈병, 단핵구성 백혈병, 골수아구성 백혈병, 골수구성 백혈병, 골수성 과립구성 백혈병, 골수단핵구성 백혈병, 내겔리 백혈병, 형질 세포 백혈병, 다발성 골수종, 형질구성 백혈병, 프로골수구성 백혈병, 리더 세포 백혈병, 실링 백혈병, 줄기 세포 백혈병, 아백혈성 백혈병, 및 미분화 세포 백혈병을 치료하는 방법을 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "전이", "전이성" 및 "전이성 암"은 상호교환적으로 사용될 수 있고, 하나의 장기 또는 다른 비인접 장기 또는 신체 부분으로, 증식성 질환 또는 질병, 예를 들어 암의 확산을 의미한다. 암은 기원 부위, 예를 들어 유방에서 발생되고, 이 부위는 원발성 종양, 예를 들어 원발성 유방암이라고 한다. 원발성 종양 또는 기원 부위에서 일부 암 세포는 국소 영역에서 주변 정상 조직을 침투하고 침윤하는 능력 및/또는 전신을 통해 신체 내 다른 부위 및 조직으로 순환하는 림프계 또는 혈관계의 벽을 침투하는 능력을 획득한다. 원발성 종양의 암 세포로부터 형성된 속발성의 임상적으로 검출가능한 종양을 전이성 또는 속발성 종양이라고 한다. 암 세포가 전이될 때, 전이성 종양 및 이의 세포는 본래 종양의 것과 유사한 것으로 추정된다. 따라서, 폐암이 유방으로 전이되면, 유방의 그 부위에서 속발성 종양은 비정상적인 유방 세포가 아닌 비정상적인 폐 세포로 이루어진다. 유방의 속발성 종양은 전이성 폐암이라고 한다. 따라서, 전이성 암이라는 어구는 대상체가 원발성 종양을 갖고 있거나 또는 가졌고 하나 이상의 속발성 종양을 가지는 질환을 의미한다. 비전이성 암 또는 전이성이 아닌 암을 갖는 대상체라는 어구는 대상체가 하나 이상의 속발성 종양이 아닌 원발성 종양을 가지는 질환을 의미한다. 예를 들어, 전이성 폐암은 원발성 폐암을 갖거나 또는 그 이력을 갖고 제2 위치 또는 다수 위치, 예를 들어 유방에 하나 이상의 속발성 종양을 갖는 대상체의 질환을 의미한다.

질환 (예를 들어, 암 (예를 들어, 백혈병, 림프종, B 세포 림프종, 또는 다발성 골수종))과 연관된 물질 또는 물질 활성 또는 기능의 문맥에서 용어 "연관된" 또는 "∼와 연관된"은 질환 (예를 들어, 암 (예를 들어, 백혈병, 림프종, B 세포 림프종, 또는 다발성 골수종))이 (전체적으로 또는 부분적으로) 야기되거나, 또는 질환의 증상이 (전체적으로 또는 부분적으로) 물질 또는 물질 활성 또는 기능에 의해 야기되는 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용되는 "치료" 또는 "치료하는" 또는 "일시적 완화하는" 또는 "경감시키는"은 본 명세서에서 상호교환적으로 사용된다. 이들 용어는 제한없이 치료적 이득 및/또는 예방적 이득을 포함한 유리하거나 또는 바람직한 결과를 수득하기 위한 접근법을 의미한다. 치료적 이득이란 치료되는 기초 질병의 제거 또는 경감을 의미한다. 또한, 치료적 이득은 환자가 여전히 기본 질병을 앓을 수 있음에도 불구하고, 환자에서 개선이 관찰되도록 기본 질병과 연관된 하나 이상의 생리적 증상의 제거 또는 경감을 획득한다. 예방적 이득의 경우, 조성물이 특정한 질환이 발생될 위험성이 있는 환자에게, 또는 질환의 진단이 아직 일어나지 않았더라도, 질환의 하나 이상의 생리적 증상이 보고된 환자에게 투여될 수 있다. 치료는 질환의 예방 단계, 즉, 질환의 유도 전에 보호성 조성물의 투여에 의해 질환의 임상 증상이 발생되지 않게 하는 단계; 질환의 저해 단계, 즉, 질환의 유도적 사건 이후이지만 질환의 임상적 출현 또는 재출현 전에 보호성 조성물의 투여에 의해 질환의 임상 증상이 발생되지 않게 하는 단계; 질환의 억제 단계, 즉, 그들의 초기 출현 이후에 보호성 조성물의 투여에 의해 임상 증상의 발생을 중지시키는 단계; 질환의 재발생의 예방 및/또는 질환의 완화 단계, 즉, 그들의 초기 출현 이후에 보호성 조성물의 투여에 의해 임상적 증상의 퇴행을 야기시키는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 명세서의 일정한 방법은 암 (예를 들어, 폐암, 난소암, 골육종, 방광암, 자궁경부암, 간암, 신장암, 피부암 (예를 들어, 메르켈 세포 암종), 고환암, 백혈병, 림프종, 두경부암, 직결장암, 전립선암, 췌장암, 흑색종, 유방암, 신경아세포종)을 치료한다. 예를 들어 본 명세서의 일정한 방법은 암의 발생, 성장, 전이 또는 진행을 저하 또는 감소 또는 예방하여 암을 치료하거나, 또는 암의 증상을 저하시켜 암을 치료한다. 암의 증상 (예를 들어, 폐암, 난소암, 골육종, 방광암, 자궁경부암, 간암, 신장암, 피부암(예를 들어, 메르켈 세포 암종), 고환암, 백혈병, 림프종, 두경부암, 직결장암, 전립선암, 췌장암, 흑색종, 유방암, 신경아세포종)은 공지되어 있거나 또는 당업자가 결정할 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "치료", "치료하다" 또는 "치료하는"은 프로테아제의 발현을 특징으로 하는 질환 또는 병태의 증상 또는 프로테아제의 발현을 특징으로 하는 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상의 효과를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 따라서, 개시된 방법에서, 치료는 고착된 질환, 병태, 또는 질환 또는 병태의 증상의 중증도의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 또는 100% 감소를 의미할 수 있다. 예를 들어, 질환을 치료하기 위한 방법은 대조군과 비교하여 대상체에서 질환의 하나 이상의 증상의 10% 감소가 존재하면 치료로 간주된다. 따라서, 감소는 천연 또는 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 10% 내지 100% 사이의 임의 감소율일 수 있다. 치료는 질환, 병태, 또는 질환 또는 병태의 증상의 완전한 감퇴 또는 치유를 반드시 의미하는 것이 아님을 이해한다. 또한, 본 명세서에서 사용되는, 저하, 감소 또는 억제에 대한 참조는 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 이상의 변화를 포함하고 이러한 용어는 완전 제거를 포함할 수 있지만 반드시 포함하지는 않는다.

"유효량"은 명시된 목적을 수행 (예를 들어, 투여되어서, 질환을 치료하거나, 효소 활성을 감소시키거나, 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상을 감소시키는 효과의 획득)하는데 충분한 양이다. "유효량"의 예는 질환의 증상 또는 증상들의 치료, 예방 또는 감소에 기여하는데 충분한 양이고, 또한 "치료적 유효량"이라고도 할 수 있다. 증상 또는 증상들의 "감소" (및 이 어구의 문법적 등가)는 증상(들)의 중증도 또는 빈도의 저하, 또는 증상(들)의 제거를 의미한다. 약제의 "예방적 유효량"은 대상체에게 투여했을 때, 의도하는 예방적 효과, 예를 들어, 손상, 질환, 병상 또는 병태의 개시 (또는 재발생)를 예방 또는 지연, 또는 손상, 질환, 병상 또는 병태, 또는 그들 증상의 개시 (또는 재발생)의 가능성의 감소를 가지게 되는 약제의 양이다. 완전한 예방 효과 용량은 반드시 한 용량의 투여로 일어나는 것은 아니고, 일련의 용량의 투여 이후에만 일어날 수 있다. 따라서, 예방적 유효량은 하나 이상의 투여로 투여될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 "활성 저하량"은 길항제 부재에 비해 효소 또는 단백질의 활성을 저하시키는데 필요한 길항제의 양을 의미한다. 본 명세서에서 사용되는 "기능 파괴량"은 길항제의 비재에 비해 효소 또는 단백질의 기능을 파괴하는데 필요한 길항제의 양을 의미한다. 소정 클래스의 약학 제품에 대한 적절한 용량에 관한 지침은 문헌에서 확인할 수 있다. 예를 들어, 소정 변수의 경우에, 유효량은 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90%, 또는 적어도 100%의 증가 또는 저하를 나타낼 것이다. 효능은 또는 "-배" 증가 또는 저하로 표시될 수 있다. 예를 들어, 치료 유효량은 대조군에 비해 적어도 1.2-배, 1.5-배, 2-배, 5-배 또는 그 이상의 효과를 가질 수 있다. 정확한 양은 치료 목적에 따라 좌우될 것이고, 기지의 기술을 사용하여 당업자가 확인할 수 있을 것이다 (예를 들어, 다음의 문헌들을 참조함: Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Pickar, Dosage Calculations (1999); and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, 2003, Gennaro, Ed., Lippincott, Williams & Wilkins).

본 명세서에서 사용되는 용어 "투여되는"은 대상체에 대한 경구 투여, 좌제로서의 투여, 국소 접촉, 복강내, 근육내, 병변내, 척추강내 또는 피하 투여, 또는 지연-방출 장치의 이식, 예를 들어, 미니-삼투압 펌프를 의미한다. 투여는 비경구 및 경점막 (예를 들어, 구강, 설하, 구개, 잇몸, 코, 질, 직장 또는 경피)을 포함하여, 임의 경로에 의한다. 비경구 투여는 예를 들어, 정맥내, 근육내, 소동맥내, 피내, 피하, 복강내, 심실내, 및 두개내를 포함한다. 다른 전달 방식은 제한없이, 리포솜 제제, 정맥내 주입, 경피 팻치 등의 사용을 포함한다. "공동-투여하다"란, 본 명세서에 기술된 조성물이 하나 이상의 추가 요법, 예를 들어 암 요법 예컨대 화학요법, 호르몬 요법, 방사선요법, 또는 면역요법의 투여와 동일한 시간에, 그 직전에, 또는 그 직후에 투여된다는 것을 의미한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있거나 또는 환자에게 공동 투여될 수 있다. 공동투여는 개별적으로 또는 병용하여 (하나 초과의 화합물) 화합물의 동시적 또는 순차적 투여를 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 조제물은 또한 바람직한 경우에, (예를 들어, 물질대사적 분해를 감소시키기 위해) 다른 활성 물질과 병용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 도포기 스틱, 용액, 현탁액, 에멀션, 겔, 크림, 연고, 페이스트, 젤리, 페인트, 분말 및 에어로졸로서 제제화되어, 국소 경로를 통해서, 경피로 전달될 수 있다.

경구 투여에 적합한 제제는 (a) 액상 용액, 예컨대 희석제, 예컨대 물, 염수 또는 PEG 400에 현탁된 본 명세서에 제공된 항체의 유효량; (b) 각각 활성 성분의 사전결정량을 함유하는, 액체, 고체, 과립 또는 젤라틴으로서의 캡슐, 샤세 또는 정제; (c) 절절한 액체 중 현탁액; 및 (d) 적합한 에멀션으로 이루어질 수 있다. 정제 형태는 락토스, 수크로스, 만니톨, 솔비톨, 칼슘 포스페이트, 옥수수 전분, 감자 전분, 미세결정질 셀룰로스, 젤라틴, 콜로이드 이산화규소, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 및 다른 부형제, 착색제, 충전제, 결합제, 희석제, 완충제, 습윤제, 보존제, 향미제, 염료, 붕해제, 및 약학적으로 적합한 담체 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 로젠지 형태는 향미제, 예를 들어 수크로스에 활성 성분을 함유할 수 있고 뿐만 아니라 파스틸은 활성 성분을 불활성 베이스, 예컨대 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로스 및 아카시아 에멀션에 포함하고, 겔 등은 활성 성분 이외에 당분야에 공지된 담체를 함유한다.

약학 조성물은 또한 대형의, 서서히 대사되는 거대 분자 예컨대 단백질, 다당류 예컨대 키토산, 폴리락트산, 폴리글리콜산 및 공중합체 (예를 들어, 라텍스 작용화된 세파로스 (TM), 아가로스, 셀룰로스 등), 중합체 아미노산, 아미노산 공중합체, 및 지질 응집체 (예컨대 오일 액적 또는 리포솜)을 포함할 수 있다. 추가적으로, 이들 담체는 면역자극제(즉, 보강제)로서 기능할 수 있다.

직장 투여에 적합한 제제는 예를 들어 좌제 베이스로 포장된 핵산으로 이루어진, 좌제를 포함한다. 적합한 좌제 베이스는 자연 또는 합성 트리글리세리드 또는 파라핀 탄화수소를 포함한다. 또한, 예를 들어, 액상 트리글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜 및 파라핀 탄화수소를 포함하여, 베이스와 함께 선택 화합물의 조합물로 이루어진 젤라틴 직장 캡슐을 사용하는 것이 가능하다.

예컨대, 예를 들어, 관절내 (관절의 안), 정맥내, 근육내, 종양내, 피내, 복강내, 및 피하 경로에 의한 비경구 투여에 적합한 제제는 항산화제, 완충제, 정균제, 및 제제가 의도하는 수령체의 혈액과 등장성이게 하는 용질을 함유할 수 있는, 수성 및 비수성, 등장성 멸균 주사 용액, 및 현탁제, 가용화제, 증점제, 안정화제 및 보존제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 본 발명의 실시에서, 조성물은 예를 들어, 정맥내 주입에 의해, 경구로, 국소로, 복강내로, 방광내로 또는 척추강내로 투여될 수 있다. 비경구 투여, 경구 투여 및 정맥내 투여는 바람직한 투여 방법이다. 화합물의 제제는 단위-용량 또는 다수-용량 밀봉 용개, 예컨대 앰풀 및 바이알로 존재할 수 있다.

주사 용액 및 현탁액은 이전에 기술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다. 생체외 요법을 위한 핵산이 형질도입된 세포는 또한 상기 기술된 바와 같이 정맥내로 또는 비경구로 투여될 수 있다.

약학 조제물은 바람직하게 단위 제형으로 존재한다. 이러한 형태에서 조제물은 활성 성분의 적절한 분량을 함유하는 단위 용량으로 세분된다. 단위 제형은 포장된 조제물일 수 있고, 그 패키지는 개별 분량의 조제물을 함유하고, 예컨대 소포장 정제, 캡슐, 및 바이알 또는 앰풀 중 분말이다. 또한, 단위 제형은 캡슐, 정제, 샤세 또는 로젠지 그 자체일 수 있거나, 또는 적절한 개수의 임의의 이들 포장된 형태일 수 있다. 조성물은 바람직하다면 또한 다른 상용성 치료제를 함유할 수 있다.

조합된 투여는 개별 제제 또는 단일 약학 제제를 사용한 공동-투여, 및 어떠한 순서로든 연속 투여를 고려하고, 여기서 바람직하게 양쪽 (또는 모든) 활성제가 그들 생물학적 활성을 동시에 발휘하는 시간 기간이 존재한다.

본 명세서에서 제공되는 조성물의 유효 용량은 투여 수단, 표적 부위, 환자가 인간 또는 동물이건 무관하게, 환자의 생리적 상태, 투여되는 다른 약물, 및 치료가 예방적 또는 치료적인지 여부를 포함한, 많은 상이한 인자들에 따라 다양하다. 그러나, 당업자는 참조하여 암을 치료 및 예방하기 위해 승인된 조성물의 용량에 고려되는 적절하고/하거나 등가의 용량을 즉시 인식한다.

"약학적으로 허용되는 부형제" 및 "약학적으로 허용되는 담체"는 대상체에게 활성제의 투여 및 대상체에 의한 흡수를 보조하는 물질을 의미하고 환자에 대해 유이하게 부정적인 독성학적 효과를 야기시키지 않고 본 발명의 조성물에 포함될 수 있다. 약학적으로 허용되는 부형제의 비제한적인 예는 물, NaCl, 규정 염수 용액, 젖산화 링커, 규정 수크로스, 규정 포도당, 결합제, 충전제, 붕해제, 윤활제, 코팅제, 감미제, 향미제, 염 용액 (예컨대 링거액), 알콜, 오일, 젤라틴, 탄수화물 예컨대 락토스, 아밀로스 또는 전분, 지방산 에스테르, 히드록시메틸셀룰로스, 폴리비닐 피롤리딘 및 착색제 등을 포함한다. 이러한 조제물은 멸균될 수 있고, 바람직하다면, 본 발명의 화합물과 유해하게 반응하지 않는, 보조제 예컨대 윤활제, 보조제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 주는 염, 완충제, 착색제, 및/또는 방향족 물질등과 혼합될 수 있다. 당업자는 다른 약학 부형제가 본 발명에서 유용하다는 것은 인식할 것이다.

용어 "약학적으로 허용되는 염"은 당분야에 공지된 다양한 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유도된 염을 의미하고, 단지 예로서, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄, 테트라알킬암모늄 등을 포함하고, 분자가 염기 작용성을 함유할 때, 유기산 또는 무기산의 염, 예컨대 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 타르트레이트, 메실레이트, 아세테이트, 말레에이트, 옥살레이트 등을 포함한다.

용어 "조제물"은 다른 담체와 함께 또는 없이 활성 성분이, 이와 회합되는 담체에 의해 둘러싸인 캡슐을 제공하는 담체로서 캡슐화 재료를 갖는 활성 화합물의 제제를 포함하고자 한다. 유사하게, 샤세 및 로젠지가 포함된다. 정제, 분말, 캡슐, 알약, 샤세, 및 로젠지는 경구 투여에 적합한 고체 제형으로서 사용될 수 있다.

약학 조성물은 경우에 따라 단위 제형으로 존재한다. 이러한 형태에서 조제물은 활성 성분의 적절한 분량을 함유하는 단위 용량으로 세분된다. 단위 제형은 포장된 조제물일 수 있고, 패키지는 조제물의 개별 분량을 함유하고, 예컨대 소포장된 정제, 캡슐, 및 바이알 또는 앰풀 중 분말을 함유한다. 또한, 단위 제형은 캡슐, 정제, 샤세, 또는 로젠지 그 자체일 수 있거나, 또는 적절한 개수의 임의의 이들 포장된 형태일 수 있다. 단위 제형은 냉동 분산물일 수 있다.

본 발명의 조성물은 추가적으로 지속 방출성 및/또는 편안함을 제공하기 위한 성분을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 고분자량, 음이온성 점성모방체, 겔화 다당류 및 미분 약제 담체 기질을 포함한다. 이들 성분은 미국 특허 제4,911,920호; 제5,403,841호; 제5,212,162호; 및 제4,861,760호에 보다 상술되어 있다. 이들 특허의 전체 내용은 모든 목적으로 위해 그들 전문을 참조로 본 명세서에 편입시킨다. 본 발명의 조성물은 또한 체내에서 지연 방출을 위한 미세구로서 전달될 수 있다. 예를 들어, 미세구는 피하로 ([Rao, J. Biomater Sci. Polym. Ed. 7:623-645, 1995] 참조; 생분해성 주사용 겔 제제로서 (예를 들어, [Gao Pharm. Res. 12:857-863, 1995] 참조); 또는 경구 투여용 미세구로서 (예를 들어, [Eyles, J. Pharm. Pharmacol. 49:669-674, 1997] 참조) 서서히 방출되는, 미세구를 함유하는 약제-함유 미세구의 피내 주사를 통해 투여될 수 있다. 실시형태에서, 본 발명의 조성물의 제제는 세포막과 융합되거나 또는 세포내이입되는, 즉 세포내이입을 일으키는 세포의 표면 막 단백질 수용체에 결합하는, 리포솜에 부착되는 수용체 리간드를 적용하여, 리포솜의 사용을 통해 전달될 수 있다. 리포솜을 사용함으로써, 특히 리포솜 표면이 표적 세포에 특이적인 수용체 리간드를 보유하거나, 또는 아니면 특별한 장기로 우선적으로 전달되는 경우에, 본 발명의 조성물의 전달을 생체 내에서 표적 세포에 집중할 수 있다. (예를 들어, [Al-Muhammed, J. Microencapsul. 13:293-306, 1996]; [Chonn, Curr. Opin. Biotechnol. 6:698-708, 1995]; [Ostro, Am. J. Hosp. Pharm. 46:1576-1587, 1989] 참조). 본 발명의 조성물은 또한 나노입자로서 전달될 수 있다.

항체 구조물

본 명세서는 특히, 암의 치료에 유용한 조성물을 제공한다. 항체 가변 도메인 및 본 명세서에서 제공되는 이를 포함하는 항체 구조물은 건강한 세포는 무해한 채로 두고 암 세포를 표적화하여 사멸시키는데 유용하다. 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 제공된 조성물은 인간 외투 세포 림프종 (MCL)에 특이적으로 결합할 수 있고 이펙터 세포 (예를 들어, NK 세포)의 존재 하에서 MCL 세포의 표적화 용해를 야기시킬 수 있다. 놀랍게도, 본 명세서에서 제공하는 항체 가변 도메인 및 항체 구조물은 비-암 (건강한) 세포에 결합하지 않아서, 건강한 세포의 비특이적 사멸로 인한 부작용을 예방한다. 비-암 세포 대비 암 세포에 차등적으로 결합하는 그들 능력에 기인하여, 본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인 및 항체 구조물은 치료 및 진단 목적에 유용한 매우 효율적이고 유효한 작용제이다.

일 측면은 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 항체 가변 도메인을 제공한다. CDR이 열거된 순서는 N-말단에서 C-말단으로 항체 가변 도메인에서의 그들 순서에 해당된다. 따라서, N-말단에서 C-말단 방향으로, 항체 가변 도메인은 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 서열번호 5의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 서열번호 5의 서열이다.

본 명세서에서 제공되는 "항체 가변 도메인"은 항원에 결합할 수 있는 펩티드 (예를 들어, 펩티드 도메인) 또는 펩티딜 모이어티를 의미한다. 제공되는 항체 가변 도메인은 경쇄 가변(VL) 도메인 또는 중쇄 가변(VH) 도메인의 CDR 서열 및 프레임워크 영역(FR) 서열을 포함한다. 제공되는 항체 가변 도메인은 경쇄 가변(VL) 도메인 또는 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 경쇄 가변(VL) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 경쇄 가변(VL) 도메인이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 중쇄 가변(VH) 도메인이다.

본 명세서에서 제공되는 "중쇄 가변(VH) 도메인"은 항체의 중쇄의 항체 가변 도메인 또는 이의 단편이다. 유사하게, 본 명세서에서 제공되는 "경쇄 가변(VL) 도메인"은 항체의 경쇄의 항체 가변 도메인 또는 이의 단편이다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 항체 가변 경쇄의 CDR1, CDR2, CDR3 및 FR1, FR2, FR3 및 FR4 (프레임워크 영역)를 포함한다. 따라서, 항체 가변 도메인은 항체의 경쇄의 가변 도메인일 수 있다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체의 경쇄의 가변 도메인이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체의 경쇄의 가변 도메인 단편이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체의 경쇄의 가변 도메인 변이체이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 Fab의 경쇄의 가변 도메인이다. 항체 가변 도메인은 항체의 중쇄의 가변 도메인일 수 있다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체 단편의 중쇄의 가변 도메인이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체 변이체의 중쇄의 가변 도메인이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 Fab의 중쇄의 가변 도메인이다. 전술한 관점에서, 본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인은 항체의 경쇄의 가변 도메인, 이의 단편 또는 변이체, 또는 항체의 중쇄의 가변 도메인, 이의 단편 또는 변이체일 수 있거나 또는 그를 포함할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인이다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 항체 중쇄 가변 도메인이다.

본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인은 항체, 항체 변이체 또는 항체 단편의 일부분을 형성할 수 있다. 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인은 단쇄 가변 단편(scFv)의 일부를 형성할 수 있다. 실시형태에서, 이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인은 항체 구조물이 일부를 형성한다. 항체 구조물은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물일 수 있다. 따라서, 다른 측면은 제1 항체 펩티드를 포함하는 항체 구조물을 제공하고, 제1 항체 펩티드는 (i) 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 제1 항체 가변 도메인; 및 (ii) 제1 항체 가변 도메인에 결합된 제1 항체 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 구조물은 도 2a에 도시된 바와 같은 구조물이다.

본 명세서에서 제공되는 "항체 구조물(구성물)(construct)"은 항체 가변 도메인(예를 들어, 제1 항체 가변 도메인) 및 항체 도메인을 포함하는 항체 펩티드(예를 들어, 제1 항체 펩티드)를 포함하는, 재조합 폴리펩티드 또는 재조합 폴리펩티드 복합체를 의미한다. 실시형태에서, 항체 구조물은 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 변이체이다. 항체 구조물은 상기 항체 가변 도메인을 통해서 적어도 부분적으로 항원에 결합할 수 있고 1가 또는 다가 (예를 들어, 2가 또는 4가) 폴리펩티드 복합체일 수 있다. 본 명세서에 제공되는 항체 구조물은 하나 이상의 항체 펩티드 (예를 들어, 제1 항체 펩티드 또는 제2 항체 펩티드)의 일부를 형성하는 하나 이상의 항체 가변 도메인 (예를 들어, 제1, 제2, 제3 또는 제4 항체 가변 도메인)을 포함할 수 있다. 그러므로, 항체 구조물은 하나 이상 (예를 들어, 2, 3, 또는 4)의 항체 가변 도메인을 통해서 적어도 부분적으로 항원에 결합할 수 있고, 그러므로 각각 1가, 2가 또는 4가 항체 구조물이라고 한다.

본 명세서에서 제공되는 항체 구조물은 적어도 하나의 항체 펩티드를 포함한다. 본 명세서에서 제공되는 "항체 펩티드"는 하나 이상의 중쇄 불변 도메인 (예를 들어, CH1, CH2, 또는 CH3) 또는 이의 단편 또는 변이체와 본 명세서에 제공된 항체 가변 도메인의 조합을 포함하는 폴리펩티드이다. 본 명세서에 제공되는 "중쇄 불변(CH) 도메인"은 항체의 중쇄의 불변 영역의 일부 또는 이의 단편을 형성하는, 도메인 (예를 들어, 중쇄 불변 1(CH1) 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인, 중쇄 불변 3(CH3) 도메인)이다.

실시형태에서, 항체 펩티드 (예를 들어, 제1 항체 펩티드)는 항체 경쇄 가변 도메인 (예를 들어, 제1 항체 경쇄 가변 도메인), 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 (예를 들어, 제1 CH2 도메인) 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인 (예를 들어, 제1 CH3 도메인)을 포함한다. 실시형태에서, 항체 펩티드는 제1 항체 경쇄 가변 도메인, 제2 항체 경쇄 가변 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 펩티드는 항체 경쇄 가변 도메인, 중쇄 불변 1(CH1) 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인을 포함한다. 상기 실시형태의 경우에, 도메인 및 영역이 열거된 순서는 N-말단에서 C-말단으로 항체 펩티드에서 그들 순서에 해당된다. 따라서, N-말단에서 C-말단 방향으로 항체 펩티드는 항체 경쇄 가변 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인을 포함할 수 있다. 또한, N-말단에서 C-말단 방향으로, 항체 펩티드는 제1 항체 경쇄 가변 도메인, 제2 항체 경쇄 가변 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인 또는 항체 경쇄 가변 도메인, 중쇄 불변 1(CH1) 도메인, 중쇄 불변 2(CH2) 도메인 및 중쇄 불변 3(CH3) 도메인을 포함할 수 있다.

상기 기술된 바와 같이, 항체 구조물은 하나를 초과하는 항체 펩티드를 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서로 결합된 제1 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드를 포함한다. 제1 항체 펩티드는 화학 링커를 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제1 항체 펩티드는 공유 결합을 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제1 항체 펩티드는 비공유 결합을 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제1 항체 펩티드는 이량체를 형성하도록 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다.

항체 구조물은 제1 경쇄 항체 펩티드 및 제2 경쇄 항체 펩티드를 더 포함할 수 있고, 여기서 제1 경쇄 항체 펩티드 및 제1 항체 펩티드는 함께 결합되고 제2 경쇄 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드는 함께 결합된다. 본 명세서에서 제공되는 경쇄 항체 펩티드는 본 명세서에 제공되는 항체 가변 도메인 및 경쇄 불변 영역/도메인(CL)을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. 본 명세서에서 제공되는 "경쇄 불변(CL) 도메인"은 항체의 경쇄의 불변 영역 또는 이의 단편을 의미한다. 실시형태에서, 경쇄 항체 펩티드 (제1 또는 제2 경쇄 항체 펩티드)는 항체 경쇄 가변 도메인 및 경쇄 불변 도메인(CL)을 포함한다. 따라서, N-말단에서 C-말단 방향으로 경쇄 항체 펩티드는 항체 경쇄 가변 도메인 및 경쇄 불변 도메인(CL)을 포함할 수 있다. 제1 경쇄 항체 펩티드는 화학 링커(공유 또는 비공유)를 통해서 제1 항체 펩티드에 결합할 수 있고 제2 경쇄 항체 펩티드는 화학 링커(공유 또는 비공유)를 통해서 제2 항체 펩티드에 결합할 수 있다.

본 명세서에서 언급되는 "항체 도메인"은 상기 기술된 바와 같은 중쇄 불변 영역(CH)을 포함하는 폴리펩티드의 일부분이다. 항체 도메인은 하나 이상의 중쇄 불변 도메인 (예를 들어, CH1, CH2, 및 CH3)을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 도메인은 불변 중쇄 2(CH2) 도메인 및 불변 중쇄 3(CH3) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 도메인은 불변 중쇄 1(CH1) 도메인, 불변 중쇄 2(CH2) 도메인 및 불변 중쇄 3(CH3) 도메인을 포함한다. N-말단에서 C-말단 방향으로, 항체 도메인은 불변 중쇄 2(CH2) 도메인 및 불변 중쇄 3(CH3) 도메인을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 도메인은 N-말단에서 C-말단 방향으로 불변 중쇄 1(CH1) 도메인, 불변 중쇄 2(CH2) 도메인 및 불변 중쇄 3(CH3) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 도메인은 인간 항체 도메인이다. 실시형태에서, 항체 도메인은 마우스 항체 도메인이다. 실시형태에서, 항체 도메인은 불변 중쇄이다. 본 명세서에 제공되는 "불변 중쇄"는 항체의 하나 이상의 중쇄 불변 도메인을 포함하는 펩티딜 모이어티이다.

실시형태에서, 항체 구조물은 1가 항체 구조물이다. 본 명세서에서 제공되는 1가 항체 구조물은 하나의 항체 가변 도메인(예를 들어, 제1 항체 가변 도메인)을 포함하는 제1 항체 펩티드를 포함하는 항체 구조물을 의미하고, 여기서 구조물은 상기 하나의 항체 가변 도메인을 통해서 적어도 부분적으로 항원에 결합된다. 본 명세서에서 제공되는 1가 항체 구조물은 단쇄 항체(scFv)일 수 있고, 여기서 항체 가변 도메인(예를 들어, 제1 항체 가변 도메인)은 화학 링커(예를 들어, 펩티드 링커)를 통해서 가변 중쇄 도메인(예를 들어, 제1 가변 중쇄 도메인)에 결합된다. 본 명세서에 제공되는 "가변 중쇄 도메인"은 FR(프레임워크 영역) 및 CDR을 포함하고 항원에 결합할 수 있는 펩티딜 모이어티이다. 실시형태에서, 가변 중쇄 도메인은 가변 중쇄(VH)를 포함한다. 실시형태에서, 가변 중쇄 도메인은 가변 중쇄(VH)이다. 따라서, 실시형태에서, 제1 항체 도메인은 제1 가변 중쇄 도메인이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 단쇄 항체(scFv)이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 단일 도메인 항체(나노바디)이다.

본 명세서에서 제공되는 1가 항체 구조물은 제1 항체 도메인과 화학 링커를 통해 결합된 제1 항체 가변 도메인을 포함하는 제1 항체 펩티드를 포함할 수 있다. 실시형태에서, 화학 링커는 공유 링커이다. 실시형태에서, 링커는 결합이다. 실시형태에서, 제1 항체 도메인은 제1 불변 중쇄이다. 실시형태에서, 제1 불변 중쇄는 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 CH3 도메인은 제1 CH2 도메인을 통해서 제1 항체 가변 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인은 공유 링커를 통해서 상기 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된다. 추가 실시형태에서, 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인은 결합을 통해서 상기 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된다.

본 명세서에 제공되는 제1 항체 펩티드는 하나 이상의 불변 중쇄 도메인(예를 들어, CH1, CH2, CH3)을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 제1 항체 펩티드는 제1 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함한다. 실시형태에서, 제1 CH1 도메인은 제1 항체 도메인의 일부분을 형성한다. 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 제1 CH1 도메인을 통해서 제1 항체 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 화학 링커를 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 결합을 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 제1 CH1 도메인을 통해서 제1 CH2 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 CH2 도메인은 화학 링커를 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 CH2 도메인은 펩티드 링커를 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다.

일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제1 항체 도메인은 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH2 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 여기서 제1 항체 가변 도메인은 제1 CH2 도메인을 통해서 제1 CH3 도메인에 결합된다. 다른 일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제1 항체 도메인은 제1 CH2 도메인을 통해서 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH1 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 여기서 제1 항체 가변 도메인은 CH1 도메인을 통해서 CH2 도메인에 결합된다.

이의 실시형태를 포함하는 본 명세서에 제공된 항체 구조물은 2가 항체 구조물일 수 있다. 본 명세서에 제공되는 항체 구조물이 2가 구조물인 경우에 항체 구조물은 제2 항체 가변 도메인을 포함한다. 2가 항체 구조물에서 제2 항체 가변 도메인은 제1 항체 펩티드의 일부를 형성할 수 있다. 제2 항체 가변 도메인이 제1 항체 펩티드의 일부를 형성하는 경우에, 제2 항체 가변 도메인은 제1 항체 가변 도메인을 통해서 항체 도메인에 결합된다. 따라서, 실시형태에서, 제1 항체 펩티드는 제1 항체 가변 도메인을 통해서 항체 도메인에 결합된 제2 항체 가변 도메인을 포함한다. 일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 제1 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제2 항체 가변 도메인은 제2 항체 경쇄 가변 도메인이고 제1 항체 도메인은 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH2 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 여기서 제2 항체 가변 도메인은 제1 항체 가변 도메인을 통해서 제1 항체 도메인에 결합된다.

대안적으로, 제2 항체 가변 도메인은 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체 구조물은 제1 항체 펩티드에 결합된 제2 항체 펩티드를 더 포함하는 2가 항체 구조물이다. 제2 항체 펩티드는 이량체를 형성하도록 화학 링커를 통해서 제1 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 화학 링커는 공유 링커일 수 있다. 실시형태에서, 화학 링커는 디술파이드 링커이다. 실시형태에서, 제2 항체 펩티드는 제1 항체 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 항체 펩티드는 제1 CH2 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 항체 펩티드는 디술파이드 링커를 통해서 제1 항체 도메인에 결합된다.

실시형태에서, 제2 항체 펩티드 및 제1 항체 펩티드는 화학적으로 동일하다. 실시형태에서, 제2 항체 펩티드 및 제1 항체 펩티드는 화학적으로 상이하다. 따라서, 실시형태에서, 제2 항체 펩티드에 결합된 제1 항체 펩티드는 동종이량체를 형성한다. 실시형태에서, 제2 항체 펩티드에 결합된 제1 항체 펩티드는 이종이량체를 형성한다.

상기 기술된 바와 같이 제1 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드는 화학적으로 동일할 수 있다. 그러므로, 본 명세서에 제공된 제2 항체 펩티드는 제1 항체 펩티드와 동일한 화학 조성을 갖는 동일한 도메인(예를 들어, 항체 가변 도메인 및 항체 도메인)을 포함할 수 있다. 따라서, 본 명세서에 제공되는 제2 항체 펩티드는 (i) 제2 항체 가변 도메인; 및 (ii) 제2 항체 가변 도메인에 결합된 제2 항체 도메인을 포함할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 제2 항체 가변 도메인은 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함한다.

실시형태에서, 제2 항체 도메인은 제2 불변 중쇄이다. 실시형태에서, 제2 불변 중쇄는 제2 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인은 화학 링커를 통해서 제2 항체 가변 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인은 결합을 통해서 제2 항체 가변 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CH3 도메인은 제2 CH2 도메인을 통해서 제2 항체 가변 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CH3 도메인은 화학 링커를 통해서 제2 CH2 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CH3 도메인은 결합을 통해서 제2 CH2 도메인에 결합된다.

일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제2 항체 가변 도메인은 제2 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제1 항체 도메인은 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH2 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 제2 항체 도메인은 제2 CH3 도메인에 결합된 제2 CH2 도메인으로 이루어진 제2 불변 중쇄이고, 여기서 제1 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드는 함께 결합된다.

실시형태에서, 제2 항체 펩티드는 제2 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함한다. 실시형태에서, 제2 CH1 도메인은 제2 항체 도메인의 일부분을 형성한다. 실시형태에서, 제2 항체 가변 도메인은 제2 CH1 도메인을 통해서 제2 항체 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 항체 가변 도메인은 화학 링커를 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 항체 가변 도메인은 결합을 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 항체 가변 도메인은 제2 CH1 도메인을 통해서 제2 CH2 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CH2 도메인은 화학 링커를 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CH2 도메인은 펩티드 링커를 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다.

실시형태에서, 제1 CH1 도메인 및 제2 CH1 도메인은 함께 결합된다. 실시형태에서, 제1 CH1 도메인 및 제2 CH1 도메인은 화학 링커를 통해서 결합된다.

이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공되는 항체 구조물은 4가 항체 구조물일 수 있다. 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공되는 항체 구조물이 4가 항체 구조물인 경우에 항체 구조물은 본 명세서에 제공되는 4개 항체 가변 도메인(예를 들어, 제1, 제2, 제3 및 제4 항체 가변 도메인)을 포함한다. 4가 항체 구조물에서 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 펩티드의 일부분을 형성할 수 있고, 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성할 수 있다. 제3 항체 가변 도메인이 제1 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 제4 항체 가변 도메인이 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성하는 경우에, 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 가변 도메인을 통해서 제1 항체 도메인에 결합하고 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 가변 도메인을 통해서 제2 항체 도메인에 결합한다. 그러므로, 제1 항체 펩티드는 제1 항체 가변 도메인을 통해서 제1 항체 도메인에 결합된 제3 항체 가변 도메인을 포함할 수 있고, 제2 항체 펩티드는 제2 항체 가변 도메인을 통해서 제2 항체 도메인에 결합된 제4 항체 가변 도메인을 포함할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체 구조물은 제1 항체 펩티드에 결합된 제3 항체 가변 도메인 및 제2 항체 펩티드에 결합된 제4 항체 가변 도메인을 더 포함하는 4가 항체 구조물이다. 실시형태에서, 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 펩티드의 일부분을 형성하고, 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성한다. 실시형태에서, 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 가변 도메인을 통해서 제1 항체 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 가변 도메인을 통해서 제1 CH2 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 가변 도메인을 통해서 제2 항체 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 가변 도메인을 통해서 제2 CH2 도메인에 결합된다.

일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 제1 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제2 항체 가변 도메인은 제2 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제3 항체 가변 도메인은 제3 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제4 항체 가변 도메인은 제4 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제1 항체 도메인은 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH2 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 제2 항체 도메인은 제2 CH3 도메인에 결합된 제2 CH2 도메인으로 이루어진 제2 불변 중쇄이고, 여기서 제1 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드는 함께 결합된다.

대안적으로, 제3 항체 가변 도메인은 제1 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성할 수 있고 제4 항체 가변 도메인은 제2 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성할 수 있고, 여기서 제1 경쇄 항체 펩티드는 제1 항체 펩티드에 결합되고 제2 경쇄 항체 펩티드는 제2 항체 펩티드에 결합된다. 제1 경쇄 항체 펩티드는 화학 링커를 통해서 제1 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제1 경쇄 항체 펩티드는 공유 링커를 통해서 제1 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제1 경쇄 항체 펩티드는 디술파이드 링커를 통해서 제1 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제2 경쇄 항체 펩티드는 화학 링커를 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제2 경쇄 항체 펩티드는 공유 링커를 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 제2 경쇄 항체 펩티드는 디술파이드 링커를 통해서 제2 항체 펩티드에 결합될 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 펩티드에 결합된 제1 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 펩티드에 결합된 제2 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성한다.

실시형태에서, 제1 경쇄 항체 펩티드는 제3 항체 가변 도메인에 결합된 제1 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 경쇄 항체 펩티드는 제1 CL1 도메인을 통해서 제1 항체 펩티드에 결합된다. 실시형태에서, 제1 CL1 도메인은 화학 링커를 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제1 CL1 도메인은 디술파이드 링커를 통해서 제1 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제3 항체 가변 도메인은 제1 CL1 도메인을 통해서 제1 항체 펩티드에 결합된다.

실시형태에서, 제2 경쇄 항체 펩티드는 제4 항체 가변 도메인에 결합된 제2 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 경쇄 항체 펩티드는 제2 CL1 도메인을 통해서 제2 항체 펩티드에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CL1 도메인은 화학 링커를 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제2 CL1 도메인은 디술파이드 링커를 통해서 제2 CH1 도메인에 결합된다. 실시형태에서, 제4 항체 가변 도메인은 제2 CL1 도메인을 통해서 제2 항체 펩티드에 결합된다.

일 실시형태에서, 제1 항체 가변 도메인은 제1 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제2 항체 가변 도메인은 제2 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제3 항체 가변 도메인은 제3 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제4 항체 가변 도메인은 제4 항체 경쇄 가변 도메인이고, 제1 항체 도메인은 제1 CH2 도메인을 통해서 제1 CH3 도메인에 결합된 제1 CH1 도메인으로 이루어진 제1 불변 중쇄이고, 제2 항체 도메인은 제2 CH2 도메인을 통해서 제2 CH3 도메인에 결합된 제2 CH1 도메인으로 이루어진 제2 불변 중쇄이고, 여기서 제3 항체 가변 도메인은 제1 항체 경쇄 펩티드의 일부분을 형성하고 제4 항체 가변 도메인은 제2 항체 경쇄 펩티드의 일부분을 형성하고, 제1 항체 경쇄 펩티드는 제1 항체 펩티드에 결합되고 제2 항체 경쇄 펩티드는 제2 항체 펩티드에 결합된다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 항체 펩티드 및 제2 항체 펩티드는 함께 결합된다.

본 명세서에 제공된 항체 구조물은 항체의 일부분 또는 단편(예를 들어, CDR, FR, VL, VH, CH1, CH2, CH3 도메인)을 포함할 수 있는 재조합 폴리펩티드이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 항체이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 항체 변이체이다.

실시형태에서, 항체 구조물은 Fab' 단편이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 키메라 항체이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 인간화 항체이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 인간 항체이다.

본 명세서에 제공된 항체 구조물은 치료적 용도로 고려된다. 암 세포를 특이적으로 표적화하고 건강한 세포는 피하는 본 명세서에 제공된 항체 구조물의 능력은 그들을 특히 암 치료제로 유용하게 만든다. 암 세포의 용해를 전달하면서, 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 제공된 항체 구조물은 치료제를 더 포함할 수 있고/있거나 질환 예컨대 암을 치료 또는 예방하는데 유용한 추가 치료제와 함께 투여될 수 있다. 실시형태에서, 항체 구조물 또는 항체 가변 도메인은 치료제와 접합되거나 또는 아니면 공유적으로 결합된다. 실시형태에서, 항체 구조물 또는 항체 가변 도메인은 항체-약제 접합체이다.

본 명세서에 제공되는 항체 구조물는 진단에서 사용이 더 고려된다. 암 세포를 특이적으로 인식하고 건강한 세포는 피하는 본 명세성 제공된 항체 구조물의 능력은 그들을 암의 정확한 진단에 고유하게 유용하게 만든다. 그러므로, 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 제공된 항체 구조물은 암 세포의 검출을 가능하게 하는 하나 이상의 검출가능한 모이어티가 구비될 수 있다.

실시형태에서, 항체 구조물은 검출가능한 모이어티를 포함한다. 검출가능한 모이어티는 상기 기술된 바와 같은 화학 링커를 통해 항체 구조물에 결합될 수 있다. 실시형태에서, 검출가능한 모이어티는 형광성 모이어티이다.

실시형태에서, 항체 구조물은 암 단백질이다. 본 명세서에서 제공되는 "암 단백질"은 건강한 세포가 아닌 암 세포에 의해 발현되는 임의의 단백질(예를 들어, 표면 수용체, 분비 펩티드, 또는 신호전달 펩티드)을 이미한다. 실시형태에서, 암 단백질은 암 세포의 일부분을 형성한다. 실시형태에서, 암 세포는 림프계 세포이다. 실시형태에서, 암 세포는 B 세포이다. 실시형태에서, 암 세포는 외투 세포 림프종(MCL) 세포이다. 실시형태에서, 항체 구조물은 비-암 세포에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체 구조물은 표준 대조군에 비해서 비-암 세포에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체 구조물은 비-암 세포에 검출가능하게 결합하지 않는다.

일 실시형태에서, 항체 구조물은 제2 항체 펩티드에 결합된 제1 항체 펩티드를 포함하는 2가 항체 구조물이고, 여기서 제1 항체 펩티드는 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 통해서 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제1 항체 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 제2 항체 펩티드는 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 통해서 제2 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제2 항체 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 CH2 도메인은 쥐과 CH2 도메인이고, 제1 CH3 도메인은 쥐과 CH3 도메인이고, 제2 CH2 도메인은 쥐과 CH2 도메인이고, 제2 CH3 도메인은 쥐과 CH3 도메인이다.

일 실시형태에서, 항체 구조물은 제2 항체 펩티드에 결합된 제1 항체 펩티드를 포함하는 2가 항체 구조물이고, 여기서 제1 항체 펩티드는 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 통해서 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제1 항체 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 제2 항체 펩티드는 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 통해서 제2 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제2 항체 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 CH2 도메인은 인간 CH2 도메인이고, 제1 CH3 도메인은 인간 CH3 도메인이고, 제2 CH2 도메인은 인간 CH2 도메인이고, 제2 CH3 도메인은 인간 CH3 도메인이다.

핵산 조성물

이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 항체 구조물을 코딩하는 단리된 핵산이 더욱 제공된다. 용어 "코딩하는" 또는 "코딩하다"는 핵산이 단백질을 생산하는데 필요한 유전자 코드를 포함한다는 것을 명시하기 위한 이의 통상의 의미로 사용된다.

실시형태에서 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인을 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다. 일 측면에서, 제1 항체 펩티드 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 제1 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다. 일 측면에서, 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 제2 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다. 일 측면에서, 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 제1 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다. 일 측면에서, 제2 경쇄 항체 펩티드 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 제2 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.

실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 4, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8 또는 서열번호 9의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 6의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 7의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 8의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 9의 서열을 포함한다.

실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 4, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8 또는 서열번호 9의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 4의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 6의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 7의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 8의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 구조물은 서열번호 9의 서열을 포함하는 단리된 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 실시형태에서, 항체 가변 도메인은 서열번호 4에 의해 코딩된다.

일 실시형태에서 5'에서 3' 방향으로 제1 항체 경쇄 가변 도메인, 펩티드 링커, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인를 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 항체 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인은 서열번호 6을 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 서열번호 4 및 서열번호 6은 동일 핵산의 일부분을 형성한다. 일 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 4 및 서열번호 6를 포함한다.

일 실시형태에서 5'에서 3' 방향으로 제1 항체 경쇄 가변 도메인, 제2 항체 경쇄 가변 도메인, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인을 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 항체 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩되고 제2 항체 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인은 서열번호 6을 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 서열번호 4 및 서열번호 6은 동일 핵산의 일부분을 형성한다. 일 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 4 및 서열번호 6을 포함한다.

일 실시형태에서 5'에서 3' 방향으로 제1 항체 경쇄 가변 도메인, 제1 CH1 도메인, 펩티드 링커, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인을 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 항체 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 CH1 도메인, 제1 CH2 도메인 및 제1 CH3 도메인은 서열번호 8을 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 서열번호 4 및 서열번호 8은 동일한 핵산의 일부분을 형성한다. 일 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 4 및 서열번호 8을 포함한다.

일 실시형태에서 5'에서 3' 방향으로 제1 항체 경쇄 가변 도메인 및 제1 불변 경쇄(CL1)를 코딩하는 단리된 핵산을 제공한다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 항체 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 제1 불변 경쇄(CL1)는 서열번호 9를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. 추가의 일 실시형태에서, 서열번호 4 및 서열번호 9는 동일한 핵산의 일부분을 형성한다. 일 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 4 및 서열번호 9를 포함한다.

약학 조성물

실시형태에서 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인, 또는 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물의 치료적 유효량, 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 실시형태에서 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인의 치료 유효량, 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다. 실시형태에서 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물의 치료적 유효량, 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

본 명세서에서 제공되는 "치료적 유효량"은 이의 의도하는 목적을 획득하는데 유효한 양을 의미한다. 특정 용도에 유효한 실제량은 특히 치료되는 병태에 의존하게 된다. 질환을 치료하기 위한 방법에서 투여될 때, 본 명세서에 기술된 약학 조성물은 바람직한 결과, 예를 들어 질환 증상(예를 들어, 암)의 진행의 감소, 제거, 또는 완화를 획득하는데 유효한 활성 항체 구조물의 양을 함유할 것이다. 본 명세서에 제공되는 항체 구조물의 치료적 유효량의 결정은 특히 본 명세서에서 상술된 개시 내용의 관점에서, 당업자의 능력 내에서 충분하다.

허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 적용되는 용량 및 농도에서 수령체에게 무독성이고, 완충제 예컨대 전형적으로 5.0 내지 8.0의 pH, 가장 흔히 6.0 내지 7.0에서 포스페이트, 시트레이트, 또는 아세테이트; 등장성으로 만들기 위한 염 예컨대 염화나트륨, 염화칼륨 등; 항산화제, 보존제, 저분자량 폴리펩티드, 단백질, 친수성 중합체 예컨대 폴리솔베이트 80, 아미노산 예컨대 글리신, 탄수화물, 킬레이트화제, 당 및 당업자에게 공지된 다른 표준 성분(Remington's Pharmaceutical Science 16^th edition, Osol, A. Ed. 1980)을 포함한다. 항체 구조물은 전형적으로 0.1 - 100 mg/mL, 예를 들어, 1 - 10 mg/mL 또는 10 - 50 mg/mL, 예를 들어 5, 10, 20, 30, 40, 50 또는 60 mg/mL이 농도로 존재한다.

본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물을 포함하는 약학 조성물은 당분야에 공지된 다양한 방법으로 투여될 수 있다. 투여 경로 및/또는 투여 방식은 바람직한 결과에 따라 다양하다. 실시형태에서, 투여는 정맥내, 근육내, 복강내, 또는 피하이거나, 또는 표적 부위에 근접하여 투여된다. 약학적으로 허용되는 부형제는 정맥내, 근육내, 피하, 비경구, 척추 또는 상피 투여 (예를 들어, 주사 또는 주입에 의함)에 적합할 수 있다.

항체 구조물의 약학 조성물은 당분야에 충분히 공지되고 통상적으로 실시되는 방법에 따라서 제조될 수 있다. 예를 들어, [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Mack Publishing Co., 20^th ed., 2000]; 및 [Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978]를 참조한다. 약학 조성물은 바람직하게 GMP 조건 하에서 제조된다. 전형적으로, 항체 구조물의 치료적 유효 용량 또는 효과적 용량이 본 발명의 약학 조성물에 적용된다. 제공되는 항체 구조물은 당업자에게 공지된 통상의 방법에 의해 약학적으로 허용되는 제형으로 제제화될 수 있다. 용량 용법은 최적의 바람직한 반응(예를 들어, 치료 반응)을 제공하도록 조정된다. 예를 들어, 단일 볼러스가 투여될 수 있거나, 몇몇 분배 용량이 시간 경과에 따라 투여될 수 있거나 또는 용량이 치료 상황의 긴급 사태에 의해 표시되는 대로 비례적으로 감소되거나 또는 증가될 수 있다. 다른 치료제 또는 작용제와 조합하여 항체 구조물을 제제화하는 것이 유리할 수 있다. 투여의 용이함 및 용량의 균일함을 위해 단위 제형으로 비경구 조성물을 제제화하는 것이 유리할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 단위 제형은 치료하려는 대상체에 대해 일원화 용량으로서 맞춰진 물리적으로 별개의 유닛을 의미하고, 각 유닛은 필요한 약학 부형제와 함께 바람직한 치료 효과를 생성하도록 계산된 항체 구조물의 사전결정된 분량을 함유한다.

본 발명의 약학 조성물 중 활성 성분의 실제 용량 수준은 환자에게 독성없이, 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 바람직한 치료적 반응을 획득하는데 유효한 활성 성분의 양을 수득하기 위해 다양할 수 있다. 선택된 용량 수준은 적용되는 본 발명의 특정 조성물의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 적용되는 특정 항체의 배출 속도, 치료 지속기간, 적용되는 특정 조성물과 조합되어 사용되는 다른 약제, 화합물 및/또는 재료, 치료하려는 환자의 연령, 성별, 체중, 상태, 일반 건강 및 이전 병력 등의 인자를 포함한 다양한 약동학적 인자에 따라 좌우된다.

의사 또는 수의사는 바람직한 치료 효과를 달성하는데 필요한 것 미만의 수준으로 약학 조성물 중에 적용되는 본 발명의 항체 구조물의 용량에서 시작할 수 있고 점차적으로 바람직한 효과가 달성될 때까지 용량을 증가시킬 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 조성물의 유효 용량은 치료하려는 특별한 질환 또는 병태, 투여의 수단, 표적 부위, 환자가 인간 또는 동물인지 무관하게 환자의 생리적 상태, 투여되는 다른 약물, 및 치료가 예방적 또는 치료적인지 여부를 포함한, 많은 상이한 인자에 따라서 다양하다. 치료 용량은 안전성 및 효능을 최적화하기 위해 적정하는 것이 필요하다. 항체로 투여 경우, 용량은 숙주 체중 기준으로, 약 0.0001 내지 100 mg/kg 범위, 보다 일반적으로 0.01 내지 5 mg/kg 범위이다. 예를 들어 용량은 체중 kg 기준으로 1 mg/kg 또는 10 mg/kg 일 수 있거나 또는 1-10 mg/kg 범위 내일 수 있다. 예시적인 치료 용법은 매 2주 당 1회 투여 또는 월 1회 또는 3 내지 6개월 마다 1회 투여를 수반한다.

본 명세서에서 제공되는 항체 구조물은 다수 횟수로 투여될 수 있다. 단일 용량 간 간격은 주간, 월간 또는 연간일 수 있다. 간격은 환자에서 항체 구조물의 혈액 수준을 측정하여 표시되는 대로 불규칙적일 수 있다. 일부 방법에서, 용량은 1-1000　mg/mL의 혈장 항체 구조물 농도, 및 일부 방법에서 25-300　mg/mL의 혈장 항체 구조물 농도를 획득하도록 조정된다. 대안적으로 항체는 지속 방출 제제로서 투여될 수 있고, 이러한 경우에 투여가 덜 빈번하게 요구된다. 용량 및 빈도는 환자에서 항체 구조물의 반감기에 따라 다양하다. 일반적으로, 인간화 항체(예를 들어, 항체 구조물)는 키메라 항체 및 비인간 항체보다 더 긴 반감기를 보인다. 투여 용량 및 빈도는 치료가 예방적인지 또는 치료적인지 여부에 따라 다양할 수 있다. 예방적 용도에서, 비교적 저용량이 장기간 동안 비교적 덜 빈번한 간격으로 투여된다. 일부 환자는 그들 나머지 일생 동안 치료를 계속 받는다. 치료적 용도에서, 질환의 진행이 감소되거나 또는 종료될 때까지, 바람직하게 환자가 질환의 증상의 부분 또는 완전 경감을 보일 때까지 때때로 비교적 짧은 간격으로 비교적 고용량이 요구된다. 이후에, 환자는 예방적 용법으로 투여될 수 있다.

치료 방법

실시형태에서 암이 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되고, 이 방법은 대상체에게 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인, 또는 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물의 치료 유효량을 투여하여, 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

실시형태에서 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되고, 이 방법은 대상체에게 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인의 치료적 유효량을 투여하여, 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

실시형태에서 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되고, 이 방법은 대상체에게 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물의 치료적 유효량을 투여하여, 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

실시형태에서, 암은 림프종, 백혈병 또는 골수종이다. 실시형태에서, 암은 림프종이다. 실시형태에서, 암은 골수종이다.

실시형태에서, 림프종은 외투 세포 림프종, 소포성 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 변연부 림프종 또는 버킷 림프종이다. 실시형태에서, 림프종은 외투 세포 림프종이다. 실시형태에서, 림프종은 소포성 림프종이다. 실시형태에서, 림프종은 미만성 거대 B-세포 림프종이다. 실시형태에서, 림프종은 변연부 림프종이다. 실시형태에서, 림프종은 버킷 림프종이다.

실시형태에서, 백혈병은 림프아구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병 또는 모발 세포 백혈병이다. 실시형태에서, 백혈병은 림프아구성 백혈병이다. 실시형태에서, 백혈병은 만성 림프구성 백혈병이다. 실시형태에서, 백혈병은 모발 세포 백혈병이다.

실시형태에서, 방법은 대상체에게 제2 치료제를 투여하는 단계를 더 포함한다. 상기 기술된 바와 같이, 치료제는 질환 예컨대 암을 치료하거나 또는 예방하는데 유용한 조성물이다. 실시형태에서, 제2 치료제는 항-암제이다.

"항-암제" 및 "항암제"는 그들의 분명한 통상의 의미에 따라 사용되고 항신생물성 특성 또는 세포의 증식 또는 성장을 억제하는 능력을 가지는 조성물(예를 들어, 화합물, 약제, 길항제, 억제제, 조절제)을 의미한다. 일부 실시형태에서, 항-암제는 화학요법제이다. 일부 실시형태에서, 항-암제는 암의 치료 방법에서 유용성을 가지는 본 명세서에서 확인된 작용제이다. 일부 실시형태에서, 항암제는 암의 치료를 위해 FDA 또는 USA 이외 다른 국가의 유사 규제 기관에 의해 승인된 작용제이다. 항-암제의 예에는 제한없이, 다음을 포함한다: MEK (예를 들어, MEK1, MEK2, 또는 MEK1 및 MEK2) 억제제 (예를 들어, XL518, CI-1040, PD035901, 셀루메티닙/ AZD6244, GSK1120212/트라메티닙, GDC-0973, ARRY-162, ARRY-300, AZD8330, PD0325901, U0126, PD98059, TAK-733, PD318088, AS703026, BAY 869766), 알킬화제 (예를 들어, 시클로포스파미드, 이포스파미드, 클로람부실, 부설판, 멜팔란, 메클로레타민, 우라무스틴, 티오테파, 니트로소우레아, 질소 머스타드 (예를 들어, 메클로로에타민, 시클로포스파미드, 클로람부실, 메이팔란), 에틸렌이민 및 메틸멜라민 (예를 들어, 헥사메틸멜라민, 티오테파), 알킬 술포네이트 (예를 들어, 부설판), 니트로소우레아 (예를 들어, 카무스틴, 로무스틴, 세무스틴, 스트렙토조신), 트리아젠 (데카르바진)), 항-대사산물제 (예를 들어, 5-아자티오프린, 류코보린, 카페시타빈, 플루다라빈, 젬시타빈, 페메트렉세드, 랄티트렉세드, 폴산 유사체(예를 들어, 메토트렉세이트), 또는 피리미딘 유사체 (예를 들어, 플루오로우라실, 플록소우리딘, 시타라빈), 푸린 유사체 (예를 들어, 머캅토푸린, 티오구아닌, 펜토스타틴), 등), 식물 알칼로이드 (예를 들어, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 빈데신, 포도필로톡신, 파클리탁셀, 도세탁셀 등), 토포이소머라제 억제제 (예를 들어, 이리노테칸, 토포테칸, 암사크린, 에토포시드 (VP16), 에토포시드 포스페이트, 테니포시드 등), 항종양 항생제 (예를 들어, 독소루비신, 아드리아마이신, 다우노루비신, 에피루비신, 악티노마이신, 블레오마이신, 미토마이신, 미톡산트론, 플리카마이신 등), 플라티늄-기반 화합물 (예를 들어, 시스플라틴, 옥살로플라틴, 카르보플라틴), 안트라센디온 (예를 들어, 미톡산트론), 치환 우레아 (예를 들어, 히드록시우레아), 메틸 히드라진 유도체 (예를 들어, 프로카르바진), 부신피질 억제제 (예를 들어, 미토탄, 아미노글루테티미드), 에피포도필로톡신 (예를 들어, 에토포시드), 항생제 (예를 들어, 다우노루비신, 독소루비신, 블레오마이신), 효소 (예를 들어, L-아스파라기나제), 미토겐-활성화된 단백질 키나제 신호전달의 억제제 (예를 들어, U0126, PD98059, PD184352, PD0325901, ARRY-142886, SB239063, SP600125, BAY 43-9006, 워트만닌, 또는 LY294002, Syk 억제제, mTOR 억제제, 항체 (예를 들어, 리툭산), 고시폴, 게나센스, 폴리페놀 E, 클로로퓨신, 올 트랜스-레티노산 (ATRA), 브리오스타틴, 종양 괴사 인자-관련 아폽토시스-유도 리간드 (TRAIL), 5-아자-2'-데옥시시티딘, 올 트랜스 레티노산, 독소루비신, 빈크리스틴, 에토포시드, 젬시타빈, 이마티닙 (Gleevec.RTM.), 젤다나마이신, 17-N-알릴아미노-17-데메톡시젤다나마이신 (17-AAG), 플라보피리돌, LY294002, 볼테조밉, 트라스투주맙, BAY 11-7082, PKC412, PD184352, 20-에피-1, 25 디히드록시비타민 D3; 5-에티닐우라실; 아비라테론; 아클라루비신; 아실풀벤; 아데시페놀; 아도젤레신; 알데스류킨; ALL-TK 길항제; 알트레타민; 암바무스틴; 아미독스; 아미포스틴; 아미노레불린산; 암루비신; 암사크린; 아나글렐리드; 아나스트로졸; 안드로그라폴리드; 혈관생성 억제제; 길항제 D; 길항제 G; 안타렐릭스; 항-배쪽 형태발생 단백질-1; 안티안드로겐, 전립선 암종; 안티에스트로겐; 안티네오플라스톤; 안티센스 올리고뉴클레오티드; 아피디콜린 글리시네이트; 아폽토시스 유전자 조절인자; 아폽토시스 조절제; 아푸린산; 아라-CDP-DL-PTBA; 아르기닌 디아미나제; 아술라크린; 아타메스탄; 아트리무스틴; 아시나스타틴 1; 아시나스타틴 2; 아시나스타틴 3; 아자세트론; 아자톡신; 아자티로신; 바카틴 III 유도체; 발라놀; 바티마스타트; BCR/ABL 길항제; 벤조클로린; 벤조일스타우로스포린; 베타 락탐 유도체; 베타-알레틴; 베타클라마이신 B;베툴린산; bFGF 억제제; 비칼루타미드; 비산트렌; 비사지리디닐스퍼민; 비스나피드; 비스트라텐 A; 비젤레신; 브레플레이트; 브로피리민; 부도티탄; 부티오닌 술폭시민; 칼시포트리올; 칼포스틴 C; 캄프토테신 유도체; 카나리폭스 IL-2; 카페시타빈; 카르복사미드-아미노-트리아졸; 카르복시아미도트리아졸; CaRest M3; CARN 700; 연골 유래 억제제; 카르젤레신; 카세인 키나제 억제제 (ICOS); 카스타노스퍼민; 세크로핀 B; 세트로렐릭스; 클로린; 클로로퀴녹살린 술폰아미드; 시카프로스트; 시스-폴피린; 클라드리빈; 클로미펜 유사체; 클로트리마졸; 콜리스마이신 A; 콜리스마이신 B; 콤브레타스타틴 A4; 콤브레타스타틴 유사체; 코나제닌; 크램베스시딘 816; 크리스나톨; 크립토파이신 8; 크립토파이신 A 유도체; 쿠라신 A; 시클로펜탄트라퀴논; 시클로플라탐; 시페마이신; 시타라빈 옥포스페이트; 세포용해 인자; 사이토스타틴; 닥클릭시맙; 데시타빈; 디히드로디뎀닌 B; 데스로렐린; 덱사메타손; 덱시포스파미드; 덱스라족산; 덱스베라파밀; 디아지퀴온; 디뎀닌 B; 디독스; 디에틸노르스퍼민; 디히드로-5-아자시티딘; 9-디옥사마이신; 디페닐 스피로무스틴; 도코사놀; 돌라세트론; 독시플루리딘; 드롤록시펜; 드로나비놀; 두오카마이신 SA; 엡셀렌; 에코무스틴; 에델포신; 에드레콜로맙; 에플로르니틴; 엘레멘; 에미테푸어; 에피루비신; 에프리스테리드; 에스트라무스틴 유사체; 에스트론 효현제; 에스트론 길항제; 에타니다졸; 에토포시드 포스페이트; 엑제메스탄; 파드로졸; 파자라빈; 펜레티니드; 필그라스팀; 피나스테리드; 플라보피리돌; 플레젤라스틴; 플루아스테론; 플루다라빈; 플루오로다우노루니신 히드로클로라이드; 폴페니멕스; 폴메스탄; 포스트리에신; 포테무스틴; 가돌리늄 텍사피린; 갈륨 나이트레이트; 갈로시타빈; 가니렐릭스; 젤라티나제 억제제; 젬시타빈; 글루타티온 억제제; 헵술팜; 헤레굴린; 헥사메틸렌 비스아세타미드; 히페리신; 이반드론산; 이다루비신; 이독시펜; 이드라만톤; 일모포신; 일로마스타트; 이미다조아크리돈; 이미퀴모드; 면역자극제 펩티드; 인슐린-유사 성장 인자-1 수용체 억제제; 인터페론 효현제; 인터페론; 인터류킨; 이오벤구안; 아이오도독소루비신; 이포메아놀, 4-; 이로플락트; 일소글라딘; 이소벤가졸; 이소호모할리콘드린 B; 이타세트론; 자스플라키놀리드; 카할랄리드 F; 라멜라린-N 트리아세테이트; 란레오티드; 레이나마이신; 레노그라스팀; 렌티난 술페이트; 렙톨스타틴; 레트로졸; 백혈병 억제 인자; 백혈구 알파 인터페론; 류프롤리드+에스트론+프로게스테론; 류프로렐린; 레바미솔; 리아로졸; 선형 폴리아민 유사체; 친지성 이당류 펩티드; 친지성 플라티늄 화합물; 리소클리나미드 7; 로바플라틴; 롬브리신; 로메트렉솔; 로니다민; 로속산트론; 로바스타틴; 록소리빈; 룰토테칸; 루테티움 텍사피린; 리소필린; 용해성 펩티드; 마이탄신; 만노스타틴 A; 마리마스타트; 마소프로콜; 마스핀; 마트릴리신 억제제; 매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제; 메노가릴; 멜바론; 메테렐린; 메티오니나제; 메토클로프라미드; MIF 억제제; 미페프리스톤; 밀테포신; 미리모스팀; 미스매치된 이중 가닥 RNA; 미토구아존; 미톨락톨; 미토마이신 유사체; 미토나피드; 미토톡신 섬유아세포 성장 인자-사포린; 미톡산트론; 모파로텐; 몰그라모스팀; 단일클론 항체, 인간 융모막 고나도트로핀; 모노포스포릴 지질 A+미오박테리움 세포벽 sk; 모피다몰; 다제 내성 유전자 억제제; 다수 종양 억제제 1-기반 요법; 머스타드 항암제; 미카페록시드 B; 마이코박테리아 세포벽 추출물; 미리아포론; N-아세틸디날린; N-치환된 벤자미드; 나파렐린; 나그레스팁; 날록손+펜타조신; 나파빈; 나프터핀; 날토그라스팀; 네다플라틴; 네모루비신; 네리드론산; 중성 엔도펩티다제; 닐루타미드; 니사마이신; 질산 산화물 조절인자; 니트록시드 항산화제; 니트룰린; O6-벤질구아닌; 옥트레오티드; 오키세논; 올리고뉴클레오티드; 오나프리스톤; 온단세트론; 온단세트론; 오라신; 경구 사이토카인 유도제; 올마플라틴; 오사테론; 옥살리플라틴; 옥사우노마이신; 팔라우아민; 팔미토일리족신; 파미드론산; 파낙시트리올; 파노미펜; 파라박틴; 파젤립틴; 페가스파르가제; 펠데신; 펜토산 폴리술페이트 나트륨; 펜토스타틴; 펜트로졸; 퍼플루브론; 퍼포스파미드; 페릴릴 알콜; 페나지노마이신; 페닐아세테이트; 포스파타제 억제제; 피시바닐; 필로칼핀 히드로클로라이드; 피라루비신; 피리트렉심; 플라세틴 A; 플라세틴 B; 플라스미노겐 활성인자 억제제; 플라티늄 착체; 플라티늄 화합물; 플라티늄-트리아민 착체; 폴피머 나트륨; 폴피로마이신; 프레드니손; 프로필 비스-아크리돈; 프로스타글란딘 J2; 프로테아솜 억제제; 단백질 A-기반 면역 조절제; 단백질 키나제 C 억제제; 단백질 키나제 C 억제제, 미세조류; 단백질 티로신 포스파타제 억제제; 푸린 뉴클레오시드 포스포릴라제 억제제; 퍼푸린; 피라졸로아크리딘; 피리독실화 헤모글로빈 폴리옥시에틸레리에 접합체; raf 길항제; 랄티트렉세드; 라모세트론; ras 파르네실 단백질 트랜스퍼라제 억제제; ras 억제제; ras-GAP 억제제; 레텔립틴 디메틸화; 레늄 Re 186 에티드로네이트; 리족신; 리보자임; RII 레틴아미드; 로글레티미드; 로히투킨; 로물티드; 로퀴니멕스; 루비기논 B1; 루복실; 사핀골; 사인토핀; SarCNU; 살코피톨 A; 사르그라모스팀; Sdi 1 모방체; 세무스틴; 노쇠 유래 억제제 1; 센스 올리고뉴클레오티드; 신호 전달 억제제; 신호 전달 조절제; 단쇄 항원-결합 단백질; 시조퓨란; 소부족산; 나트륨 보로캅테이트; 나트륨 페닐아세테이트; 솔베롤; 소마토메딘 결합 단백질; 소넬민; 스파르포스산; 스피카마이신 D; 스피로무스틴; 스플레노펜틴; 스폰지스타틴 1; 스쿠알라민; 줄기 세포 억제제; 줄기 세포 분열 억제제; 스티피아미드; 스트로멜리신 억제제; 술피노신; 초활성 혈관작용성 장 펩티드 길항제; 수라디스타; 수라민; 스와인소닌; 합성 글리코사미노글리칸; 탈리무스틴; 타목시펜 메티오디드; 타우로무스틴; 타자로텐; 테코갈란 나트륨; 테가푸어; 텔루라피릴리움; 텔로머라제 억제제; 테모폴핀; 테모졸로미드; 테니포시드; 테트라클로로데카옥시드; 테트라조민; 탈리블라스틴; 티오코랄린; 트롬보포이어틴; 트롬보포이어틴 모방체; 티말파신; 티모포이어틴 수용체 효현제; 티모트리난; 갑상선 자극 호르몬; 틴 에틸 에티오퍼푸린; 티라파자민; 티타노센 비클로라이드; 톱센틴; 토레미펜; 분화전능 줄기 세포 인자; 번역 억제제; 트레티노인; 트리아세틸우리딘; 트리시리빈; 트리메트렉세이트; 트립토렐린; 트로피세트론; 투로스테리드; 티로신 키나제 억제제; 틸포스틴; UBC 억제제; 우베니멕스; 비뇨생식동-유래 성장 억제 인자; 우로키나제 수용체 길항제; 바프레오티드; 바리올린 B; 벡터 시스템, 적혈구 유전자 요법; 벨라레솔; 베라민; 베르딘스; 베르테폴핀; 비노렐빈; 빈살틴; 비탁신; 보로졸; 자노테론; 제니플라틴; 질라스코브; 지노스타틴 스티말라머, 아드리아마이신, 닥티노마이신, 블레오마이신, 빈블라스틴, 시스플라틴, 아시비신; 아클라루비신; 아코다졸 히드로클로라이드; 아크로닌; 아도젤레신; 알데스류킨; 알트레타민; 암보마이신; 아메탄트론 아세테이트; 아미노글루테티미드; 암사크린; 아나스트로졸; 안트라마이신; 아스파라기나제; 아스펠린; 아자시티딘; 아제테파; 아조토마이신; 바티마스타트; 벤조데파; 비칼루타미드; 비산트렌 히드로클로라이드; 비스나피드 디메실레이트; 비젤레신; 블레오마이신 술페이트; 브레퀴나르 나트륨; 브로피리민; 부설판; 칵티노마이신; 칼루스테론; 카라세미드; 카르베티머; 카르보플라틴; 카무스틴; 카루비신 히드로클로라이드; 카르젤레신; 세데핀골; 클로람부실; 시롤레마이신; 클라드리빈; 크리스나톨 메실레이트; 시클로포스파미드; 시타라빈; 다카르바진; 다우노루비신 히드로클로라이드; 데시타빈; 덱솔마플라틴; 데자구아닌; 데자구아닌 메실레이트; 디아지퀴온; 독소루비신; 독소루비신 히드로클로라이드; 드롤록시펜; 드롤록시펜 시트레이트; 드로모스타놀론 프로피오네이트; 두아조마이신; 에다트렉세이트; 에플로르니틴 히드로클로라이드; 엘사미트루신; 엔로플라틴; 엔프로메이트; 에피프로피딘; 에피루비신 히드로클로라이드; 엘불로졸; 에소루비신 히드로클로라이드; 에스트라무스틴; 에스트라무스틴 포스페이트 나트륨; 에타니다졸; 에토포시드; 에토포시드 포스페이트; 에토프린; 파드로졸 히드로클로라이드; 파자라빈; 펜레티니드; 플록수리딘; 플루다라빈 포스페이트; 플루오로우라실; 플루오로시타빈; 포스퀴돈; 포스트리에신 나트륨; 젬시타빈; 젬시타빈 히드로클로라이드; 히드록시우레아; 이다루비신 히드로클로라이드; 이포스파미드; 이이모포신; 인터류킨 I1 (재조합 인터류킨 II, 또는 rlL.sub.2 포함), 인터페론 알파-2a; 인터페론 알파-2b; 인터페론 알파-n1; 인터페론 알파-n3; 인터페론 베타-1a; 인터페론 감마-1b; 이프로플라틴; 이리노테칸 히드로클로라이드; 란레오티드 아세테이트; 레트로졸; 류프롤리드 아세테이트; 리아로졸 히드로클로라이드; 로메트렉솔 나트륨; 로무스틴; 로속산트론 히드로클로라이드; 마소프로콜; 마이탄신; 메클로레타민 히드로클로라이드; 메게스트롤 아세테이트; 멜렌게스트롤 아세테이트; 멜팔란; 메노가릴; 머캅토푸린; 메토트렉세이트; 메토트렉세이트 나트륨; 메토프린; 메투레데파; 미틴도미드; 미토카르신; 미토크로민; 미토길린; 미토말신; 미토마이신; 미토스퍼; 미토탄; 미톡산트론 히드로클로라이드; 마이코페놀산; 노코다조이에; 노갈라마이신; 올마플라틴; 옥시수란; 페가스파르가제; 펠리오마이신; 펜타무스틴; 페플로마이신 술페이트; 퍼포스파미드; 피포브로만; 피포술판; 피록산트론 히드로클로라이드; 플리카마이신; 플로메스탄; 폴피머 나트륨; 폴피로마이신; 프레드니무스틴; 프로카르바진 히드로클로라이드; 푸로마이신; 푸로마이신 히드로클로라이드; 피라조퓨린; 리보프린; 로글레티미드; 사핀골; 사핀골 히드로클로라이드; 세무스틴; 심트라젠; 스파르포세이트 나트륨; 스파르소마이신; 스피로게르마늄 히드로클로라이드; 스피로무스틴; 스피로플라틴; 스트렙토니그린; 스트렙토조신; 술로페누어; 탈리소마이신; 테코갈란 나트륨; 테가푸어; 텔록산트론 히드로클로라이드; 테모폴핀; 테니포시드; 테록시론; 테스토락톤; 티아미프린; 티오구아닌; 티오테파; 티아조퓨린; 티라파자민; 토레미펜 시트레이트; 트레스톨론 아세테이트; 트리시리빈 포스페이트; 트리메트렉세이트; 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트; 트립토렐린; 튜불로졸 히드로클로라이드; 우라실 머스타드; 우레데파; 바프레오티드; 베르테폴핀; 빈블라스틴 술페이트; 빈크리스틴 술페이트; 빈데신; 빈데신 술페이트; 비네피딘 술페이트; 빈글리시네이트 술페이트; 빈류로신 술페이트; 비노렐빈 타르트레이트; 빈로시딘 술페이트; 빈졸리딘 술페이트; 보로졸; 제니플라틴; 지노스타틴; 조루비신 히드로클로라이드, G2-M 기로 세포를 중지시키고/시키거나 마이크로튜불의 형성 또는 안정성을 조절하는 작용제 (예를 들어, 탁솔.TM (즉, 파클리탁셀), 탁소테르.TM, 탁산 골격을 포함하는 화합물, 엘불로졸 (즉, R-55104), 돌라스타틴 10 (즉, DLS-10 및 NSC-376128), 미보불린 이세티오네이트 (즉, CI-980), 빈크리스틴, NSC-639829, 디스코더몰리드 (즉, NVP-XX-A-296), ABT-751 (Abbott, 즉, E-7010), 알톨리르틴 (예를 들어, 알톨리르틴 A 및 알톨리르틴 C), 스폰지스타틴 (예를 들어, 스폰지스타틴 1, 스폰지스타틴 2, 스폰지스타틴 3, 스폰지스타틴 4, 스폰지스타틴 5, 스폰지스타틴 6, 스폰지스타틴 7, 스폰지스타틴 8, 및 스폰지스타틴 9), 세마도틴 히드로클로라이드 (즉, LU-103793 및 NSC-D-669356), 에포틸론 (예를 들어, 에포틸론 A, 에포틸론 B, 에포틸론 C (즉, 데속시에포틸론 A 또는 dEpoA), 에포틸론 D (즉, KOS-862, dEpoB, 및 데속시에포틸론 B), 에포틸론 E, 에포틸론 F, 에포틸론 B N-산화물, 에포틸론 A N-산화물, 16-아자-에포틸론 B, 21-아미노에포틸론 B (즉, BMS-310705), 21-히드록시에포틸론 D (즉, 데속시에포틸론 F 및 dEpoF), 26-플루오로에포틸론, 아우리스타틴 PE (즉, NSC-654663), 소블리도틴 (즉, TZT-1027), LS-4559-P (Pharmacia, 즉, LS-4577), LS-4578 (Pharmacia, 즉, LS-477-P), LS-4477 (Pharmacia), LS-4559 (Pharmacia), RPR-112378 (Aventis), 빈크리스틴 술페이트, DZ-3358 (Daiichi), FR-182877 (Fujisawa, 즉, WS-9885B), GS-164 (Takeda), GS-198 (Takeda), KAR-2 (Hungarian Academy of Sciences), BSF-223651 (BASF, 즉, ILX-651 및 LU-223651), SAH-49960 (Lilly/Novartis), SDZ-268970 (Lilly/Novartis), AM-97 (Armad/Kyowa Hakko), AM-132 (Armad), AM-138 (Armad/Kyowa Hakko), IDN-5005 (Indena), 크립토파이신 52 (즉, LY-355703), AC-7739 (Ajinomoto, 즉, AVE-8063A 및 CS-39.HCl), AC-7700 (Ajinomoto, 즉, AVE-8062, AVE-8062A, CS-39-L-Ser.HCl, 및 RPR-258062A), 비틸레부아미드, 투불리신 A, 카나덴솔, 센타우레이딘 (즉, NSC-106969), T-138067 (Tularik, 즉, T-67, TL-138067 및 TI-138067), COBRA-1 (Parker Hughes Institute, 즉, DDE-261 및 WHI-261), H10 (Kansas State University), H16 (Kansas State University), 온코시딘 A1 (즉, BTO-956 및 DIME), DDE-313 (Parker Hughes Institute), 피지아놀리드 B, 라우리말리드, SPA-2 (Parker Hughes Institute), SPA-1 (Parker Hughes Institute, 즉, SPIKET-P), 3-IAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, 즉, MF-569), 나르코신 (NSC-5366으로도 공지), 나스카핀, D-24851 (Asta Medica), A-105972 (Abbott), 헤미아스텔린, 3-BAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, 즉, MF-191), TMPN (Arizona State University), 바나도센 아세틸아세토네이트, T-138026 (Tularik), 만사트롤, 일나노신 (즉, NSC-698666), 3-IAABE (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine), A-204197 (Abbott), T-607 (Tuiarik, 즉, T-900607), RPR-115781 (Aventis), 엘류테로빈 (예컨대 데스메틸레류테로빈, 데사에틸레류테로빈, 이소엘류테로빈 A, 및 Z-엘류테로빈), 카리바에오시드, 카리바에올린, 할리콘드린 B, D-64131 (Asta Medica), D-68144 (Asta Medica), 디아조나미드 A, A-293620 (Abbott), NPI-2350 (Nereus), 타칼로놀리드 A, TUB-245 (Aventis), A-259754 (Abbott), 디오조스타틴, (-)-페닐라히스틴 (즉, NSCL-96F037), D-68838 (Asta Medica), D-68836 (Asta Medica), 미오세베린 B, D-43411 (Zentaris, 즉, D-81862), A-289099 (Abbott), A-318315 (Abbott), HTI-286 (즉, SPA-110, 트리플루오로아세테이트 얌) (Wyeth), D-82317 (Zentaris), D-82318 (Zentaris), SC-12983 (NCI), 레스베라스타틴 포스페이트 나트륨, BPR-OY-007 (National Health Research Institutes), 및 SSR-250411 (Sanofi)), 스테로이드 (예를 들어, 덱사메타손), 피나스테리드, 아로마타제 억제제, 고나도트로핀-방출 호르몬 효현제 (GnRH) 예컨대 고세렐린 또는 류프롤리드, 아드레노코르티코스테로이드 (예를 들어, 프레드니손), 프로게스틴 (예를 들어, 히드록시프로게스테론 카프로에이트, 메게스트롤 아세테이트, 메드록시프로게스테론 아세테이트), 에스트로겐 (예를 들어, 디에틸스틸베스트롤, 에티닐 에스트라디올), 안티에스트로겐 (예를 들어, 타목시펜), 안드로겐 (예를 들어, 테스토스테론 프로피오네이트, 플루옥시메스테론), 안티안드로겐 (예를 들어, 플루타미드), 면역자극제 (예를 들어, 바실러스 칼메트-게렝 (BCG), 레바미솔, 인터류킨-2, 알파-인터페론 등), 단일클론 항체 (예를 들어, 항-CD20, 항-HER2, 항-CD52, 항-HLA-DR, 및 항-VEGF 단일클론 항체), 면역독소 (예를 들어, 항-CD33 단일클론 항체-칼리케아미신 접합체, 항-CD22 단일클론 항체-슈도모나스 외독소 접합체 등), 방사면역요법 (예를 들어, ¹¹¹In, ⁹⁰Y, 또는 ¹³¹I 등에 접합된 항-CD20 단일클론 항체), 트립톨리드, 호모하링토닌, 닥티노마이신, 독소루비신, 에피루비신, 토포테칸, 이트라코나졸, 빈데신, 세리바스타틴, 빈크리스틴, 데옥시아데노신, 셀트랄린, 피타바스타틴, 이리노테칸, 클로파지민, 5-노닐옥시트립타민, 베무라페닙, 다브라페닙, 엘로티닙, 제피티닙, EGFR 억제제, 상피 성장 인자 수용체 (EGFR)-표적화 요법 또는 치료제 (예를 들어, 제피티닙 (Iressa™), 엘로티닙 (Tarceva ™), 세툭시맙 (Erbitux™), 라파티닙 (Tykerb™), 파니투무맙 (Vectibix™), 반데타닙 (Caprelsa™), 아파티닙/BIBW2992, CI-1033/카네르티닙, 네라티닙/HKI-272, CP-724714, TAK-285, AST-1306, ARRY334543, ARRY-380, AG-1478, 다코미티닙/PF299804, OSI-420/데스메틸 엘로티닙, AZD8931, AEE788, 펠리티닙/EKB-569, CUDC-101, WZ8040, WZ4002, WZ3146, AG-490, XL647, PD153035, BMS-599626), 소라페닙, 이마티닙, 수니티닙, 다사티닙 등.

일 측면에서, 암 세포에서 세포 용해를 유도하는 방법이 제공된다. 이 방법은 암 세포를 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 가변 도메인, 또는 이의 실시형태를 포함하여, 본 명세서에 기술된 바와 같은 항체 구조물의 유효량, 및 이펙터 세포와 접촉시켜, 암 세포에서 세포 용해를 유도시키는 단계를 포함한다. 실시형태에서, 접촉은 암 환자에서 일어난다. 실시형태에서, 접촉은 시험관 내에서 일어난다. 실시형태에서, 이펙터 세포는 자연 살해 (NK) 세포이다.

실시예

실시예 1: 외투 세포 림프종-특이적 완전 인간 항체의 개발

새로운 암 면역요법제는 그들의 유망한 효력 덕분에 클리닉으로 빠르게 진입 중이다. 단일클론 항체 및 항체-기반 면역요법제가 높은 특이성 및 검증된 항종양 효과에 기인하여 특히 매력적인 플랫폼이다. 면역요법제는 광범위한 표적에 대해 현재 개발되고 있지만, 모든 추적 종양-연관 표적은 악성 세포 및 그들의 양성 대응물에 동시에 존재한다. 결과적으로, 이들 치료제는 필연적으로 종양 제거 과정에서 건강한, 비악성 세포를 격감시킬 것이다. 양성 세포와 암성 세포를 구별하지 못하는 불능성은 항체 개발을 제한하였고 면역요법제의 성공을 감소시킨다. 따라서, 종양 세포를 특이적으로 표적화하는 치료제의 개발은 매력적이지만 힘든 개념이다.

출원인의 새로운 세포 스크리닝 기술을 사용하여, 출원인은 정상 인간 B 세포의 인식없이, 신규한 외투 세포 림프종(MCL)-특이적, 인간 항체 경쇄 결합 도메인(VL)을 성공적으로 동정하였다. 세포 스크리닝 기술은 출원인의 고유한 인간 항체 라이브러리를 신규 표적 발굴을 위해 디자인된 파지 디스플레이 기술에 도입시킨다. 라이브러리는 정상 인간 조직에 결합하는 Fv 서열을 배제시키기 위해 여과된 고다양성의 인간 항체 가변 단편(Fv)을 포함한다. 출원인은 인간 MCL 세포주 JeKo-1을 스크리닝하였고 MCL-특이적 VL을 성공적으로 동정하였다. VL은 신규한 인간 경쇄 도메인 항체 변이체: LC-Ab, (LC)2-Ab, 및 LCFv-Ab으로 조작되었다. 변이체는 모든 MCL을 B-세포 및 T-세포 비호지킨 림프종(NHL)으로부터 구별하여 VL-기반 항체의 특이성을 입증하였고, 현저하게 정상 인간 B 림프구에 결합하거나 또는 사멸시키지 않았다. 항체-매개 세포독성에 의한 MCL 제거는 시험관 내에서 입증되었고 생체 내에서 인간 MCL 이종이식 모델에서 유의하게 연장된 전체 생존률로 확증되었다. 중요하게, 인간화된 마우스에 대한 생체내 인간 B-세포 격감 실험은 우리의 MCL-특이적 항체가 정상 인간 B 세포에 대해서 세포독성을 나타내지 않는다는 것이 확증되었다.

출원인은 인간 MCL을 특이적으로 식별할 수 있고 사멸시킬 수 있는 신규한 인간 항체-기반 작용제를 성공적으로 개발하였다. 이것은 MCL에 대한 진단 및 임상 치료 지표를 갖는 종양-특이적 작용체에 관한 최초의 공지된 보고서이다.

재료 및 방법.

인간 항체 파지 디스플레이 라이브러리의 생성. 인간 B 세포는 20명의 건강한 공혈자의 버피 코트로부터 단리하였다. 항체 중쇄(VH) 및 경쇄(VL) 가변 영역을 코딩하는 cDNA는 단리된 B-세포 mRNA로부터 복제되었다. VH 및 VL cDNA는 무작위로 조합하여 항체 단쇄 가변 단편(scFv)을 형성시켰다. 각각의 scFv DNA 서열은 제조사의 지시에 따라서 M13 파지 상에 발현을 위해 재조합 파지 항체 시스템 파지미드 pCANTAB 5E (GE Healthcare Life Sciences Little Chalfont, UK)로 조작하였다. 파지 다양성은 > 200개 클론의 scFv를 서열분석하여 확증하였다.

파지 디스플레이 라이브러리 스크린: 바이오패닝. 인간 항체 scFv 파지 디스플레이 라이브러리는 4회 라운드의 바이오패닝을 수행하였다. 파지는 각 라운드 이후에 인간 항체 scFv에 대해 서열분석되었고 분석되었다. 파지 농축을 계산하였고 주요 서열(들)을 확인하였다.

각각의 바이오패닝 라운드는 다음과 같았다: 파지 라이브러리는 정상 인간 B 세포에 결합된 파지를 배제하기 위해 여과되었다. 정상 PBMC로부터 단리된 B 세포는 파지 라이브러리와 인큐베이션되었다. B 세포 결합 파지는 폐기하였고 미결합된 파지는 추가 바이오패닐을 위해 추출하였다. 추출된 파지는 CD20-표지된 악성 인간 세포주 (MCL JeKo-1, ATCC, Manassas, VA) 및 정상 인간 B 세포와 1:5 비율로 경쟁적 결합을 위해 인큐베이션되었다. 악성 세포주에 결합된 파지는 분류된 JeKo-1 세포로부터 용리하였고 서열분석 및 후속 바이오패닝을 위해 확장시켰다. 파지는 제조사의 지시에 따라서 파지 디스플레이 컴피턴트 TG1 세포 (Lucigen, Middleton, WI)에서 확장시켰다.

항체 변이체의 생성. 동정된 경쇄 가변 영역(VL)은 도 2a에 도시된 바와 같이 쥐과 또는 인간 IgG1 불변 영역과 유전자적으로 융합되었다. 발현 플라스미드는 제조사 지시에 따라서 프리스타일 293 발현 시스템 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)에 형질감염시켰다. 배양 상등액 중 재조합 항체는 제조사 지시에 따라서 HiTrap 단백질 A 친화성 크로마토그래피 컬럼 (GE Healthcare, Marlborough, MA)으로 정제하였다. 정제된 항체는 SDS 겔을 통해 확증하였다.

비공식 서열 목록

서열번호 1 (CDR L1)

SGHSTYA

서열번호 2 (CDR L2)

INSDGSH

서열번호 3 (CDR L3)

QTWDTGIRV

서열번호 4 (4-4 경쇄 가변 영역 DNA 서열)

서열번호 5 (4-4 경쇄 가변 영역 단백질 서열 [CDR은 굵은체])

서열번호 6 (무스 무스쿨러스 IgG2b 중쇄 mRNA, 클론 Mab23.1.3)

서열번호 7 (호모 사피엔스 면역글로불린 중쇄 불변 G1m 마커 mRNA, cDNA 클론 IMAGE:4851063)

서열번호 8 (호모 사피엔스 면역글로불린 중쇄 불변 G1m 마커 mRNA, cDNA 클론 IMAGE:6295732)

서열번호 9 (호모 사피엔스 면역글로불린 카파 불변 mRNA, cDNA 클론 IMAGE:5215019)

실시형태

실시형태 1. 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 항체 가변 도메인.

실시형태 2. 제1 항체 펩티드를 포함하는 항체 구조물로서, 상기 제1 항체 펩티드는 (i) 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 제1 항체 가변 도메인; 및 (ii) 상기 제1 항체 가변 도메인에 결합된 제1 항체 도메인을 포함한다.

실시형태 3. 실시형태 1의 항체 가변 도메인 또는 실시형태 2의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인이다.

실시형태 4. 실시형태 1의 항체 가변 도메인 또는 실시형태 2의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 가변 도메인은 항체 중쇄 가변 도메인이다.

실시형태 5. 실시형태 2-4 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 1가 항체 구조물이다.

실시형태 6. 실시형태 2-5 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 항체 도메인은 제1 가변 중쇄 도메인이다.

실시형태 7. 실시형태 6의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 단쇄 항체(scFv)이다.

실시형태 8. 실시형태 2의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 항체 도메인은 제1 불변 중쇄이다.

실시형태 9. 실시형태 8의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 불변 중쇄는 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함한다.

실시형태 10. 실시형태 9의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 CH3 도메인은 상기 제1 CH2 도메인을 통해서 상기 제1 항체 가변 도메인에 결합된다.

실시형태 11. 실시형태 10의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 항체 펩티드는 제1 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함한다.

실시형태 12. 실시형태 11의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 CH1 도메인은 상기 제1 항체 도메인의 일부분을 형성한다.

실시형태 13. 실시형태 11-12 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 항체 가변 도메인은 상기 제1 CH1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 도메인에 결합된다.

실시형태 14. 실시형태 11-13 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 항체 가변 도메인은 상기 제1 CH1 도메인을 통해서 상기 제1 CH2 도메인에 결합된다.

실시형태 15. 실시형태 2-14 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제2 항체 펩티드를 더 포함하는 2가 항체 구조물이다.

실시형태 16. 실시형태 15의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 펩티드는 상기 제1 항체 도메인에 결합된다.

실시형태 17. 실시형태 15의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는 상기 제1 CH2 도메인에 결합된다.

실시형태 18. 실시형태 15-17 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드 및 상기 제1 항체 펩티드는 화학적으로 동일하다.

실시형태 19. 실시형태 15-17 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드 및 상기 제1 항체 펩티드는 화학적으로 상이하다.

실시형태 20. 실시형태 15-17 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는 (i) 제2 항체 가변 도메인; 및 (ii) 상기 제2 항체 가변 도메인에 결합된 제2 항체 도메인을 포함한다.

실시형태 21. 실시형태 20의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함한다.

실시형태 22. 실시형태 20 또는 21의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 도메인은 제2 불변 중쇄이다.

실시형태 23. 실시형태 22의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 불변 중쇄는 제2 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함한다.

실시형태 24. 실시형태 23의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 CH3 도메인은 상기 제2 CH2 도메인을 통해서 상기 제2 항체 가변 도메인에 결합된다.

실시형태 25. 실시형태 24의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는 제2 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함한다.

실시형태 26. 실시형태 25의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 CH1 도메인은 상기 제2 항체 도메인의 일부분을 형성한다.

실시형태 27. 실시형태 25-26 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 상기 제2 CH1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 도메인에 결합된다.

실시형태 28. 실시형태 25-27 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 상기 제2 CH1 도메인을 통해서 상기 제2 CH2 도메인에 결합된다.

실시형태 29. 실시형태 28의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 CH1 도메인 및 상기 제2 CH1 도메인은 함께 결합된다.

실시형태 30. 실시형태 15-29의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제3 항체 가변 도메인 및 상기 제2 항체 펩티드에 결합된 제4 항체 가변 도메인을 더 포함하는 4가 항체 구조물이다.

실시형태 31. 실시형태 30의 항체 구조물에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성한다.

실시형태 32. 실시형태 30 또는 31의 항체 구조물에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제1 항체 도메인에 결합된다.

실시형태 33. 실시형태 30-32 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제1 CH2 도메인에 결합된다.

실시형태 34. 실시형태 30-33 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제2 항체 도메인에 결합된다.

실시형태 35. 실시형태 30-34 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제2 CH2 도메인에 결합된다.

실시형태 36. 실시형태 30의 항체 구조물에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제1 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 펩티드에 결합된 제2 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성한다.

실시형태 37. 실시형태 36의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 경쇄 항체 펩티드는 상기 제3 항체 가변 도메인에 결합된 제1 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 포함한다.

실시형태 38. 실시형태 37의 항체 구조물에 있어서, 상기 제1 경쇄 항체 펩티드는 상기 제1 CL1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 펩티드에 결합된다.

실시형태 39. 실시형태 37 또는 38의 항체 구조물에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 CL1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 펩티드에 결합된다.

실시형태 40. 실시형태 36-39 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 경쇄 항체 펩티드는 상기 제4 항체 가변 도메인에 결합된 제2 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 더 포함한다.

실시형태 41. 실시형태 40의 항체 구조물에 있어서, 상기 제2 경쇄 항체 펩티드는 상기 제2 CL1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 펩티드에 결합된다.

실시형태 42. 실시형태 37 또는 38의 항체 구조물에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 CL1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 펩티드에 결합된다.

실시형태 43. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 항체이다.

실시형태 44. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 항체 변이체이다.

실시형태 45. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 Fab' 단편이다.

실시형태 46. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 키메라 항체이다.

실시형태 47. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 인간화 항체이다.

실시형태 48. 실시형태 2-42 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 인간 항체이다.

실시형태 49. 실시형태 2-48 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 검출가능한 모이어티를 포함한다.

실시형태 50. 실시형태 49의 항체 구조물에 있어서, 상기 검출가능한 모이어티는 형광성 모이어티이다.

실시형태 51. 실시형태 2-50 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 항체 구조물은 암 단백질에 결합된다.

실시형태 52. 실시형태 2-51 중 어느 하나의 항체 구조물에 있어서, 상기 암 단백질은 암 세포의 일부분을 형성한다.

실시형태 53. 실시형태 52의 항체 구조물에 있어서, 상기 암 세포는 림프계 세포이다.

실시형태 54. 실시형태 52 또는 53의 항체 구조물에 있어서, 상기 암 세포는 B 세포이다.

실시형태 55. 실시형태 1의 상기 항체 가변 도메인, 실시형태 2-54 중 어느 하나의 상기 제1 항체 펩티드, 실시형태 15-54 중 어느 하나의 상기 제2 항체 펩티드, 실시형태 36-54 중 어느 하나의 상기 제1 경쇄 항체 펩티드 또는 실시형태 36-54 중 어느 하나의 상기 제2 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산.

실시형태 56. 실시형태 1의 상기 항체 가변 도메인 또는 실시형태 2-54 중 어느 하나의 상기 항체 구조물의 치료적 유효량 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물.

실시형태 57. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 대상체에게 실시형태 1의 상기 항체 가변 도메인 또는 실시형태 2-54 중 어느 하나의 상기 항체 구조물의 치료적 유효량을 투여하여, 상기 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함한다.

실시형태 58. 실시형태 57의 방법에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병 또는 골수종이다.

실시형태 59. 실시형태 58의 방법에 있어서, 상기 림프종은 외투 세포 림프종, 소포성 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 변연부 림프종 또는 버킷 림프종이다.

실시형태 60. 실시형태 58의 방법에 있어서, 상기 백혈병은 림프아구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병 또는 모발 세포 백혈병이다.

실시형태 61. 실시형태 57-60 중 어느 하나의 방법에 있어서, 상기 방법은 상기 대상체에게 제2 치료제를 투여하는 단계를 더 포함한다.

SEQUENCE LISTING <110> City of Hope The University of Texas MD Anderson Cancer Center Qin, Hong Kwak, Larry W. Wei, Guowei <120> Antibody Variable Domains and Antibody Constructs <130> 048440-660001WO <150> 62/501,649 <151> 2017-05-04 <160> 9 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 1 Ser Gly His Ser Thr Tyr Ala 1 5 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 2 Ile Asn Ser Asp Gly Ser His 1 5 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 3 Gln Thr Trp Asp Thr Gly Ile Arg Val 1 5 <210> 4 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 4 cagcctgtgc tgactcaatc gccctctgcc tctgcctccc tgggagcctc ggtcaagctc 60 acctgcactc tgagcagtgg ccacagtaca tacgccgtcg catggcatca ataccagcca 120 gagaagggcc ctcgatattt gatgaagatt aacagtgatg gcagccacat caaggcggtc 180 gggattcctg atcgattctc aggctccagc tctggggctg agcgctacct caccatctcc 240 agcctccaat ttgaggatga gggtgacttt tattgtcaga cgtgggacac tggcattcga 300 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gggatgatga taagcactat 240 aacccatccc taaagagcca gctcacaatc tccaaggatt cctccagaaa ccaggttttc 300 ctcaagatca ccagtgtgga cactgcagat actgccactt actactgtgt tcgaagatcc 360 ttttcatacg gtagtagccg ggactacttt gactactggg gccaaggcac cactctcaca 420 gtctcctcag ccaaaacaac acccccatca gtctatccac tggcccctgg gtgtggagat 480 acaactggtt cctccgtgac tctgggatgc ctggtcaagg gctacttccc tgagtcagtg 540 actgtgactt ggaactctgg atccctgtcc agcagtgtgc acaccttccc agctctcctg 600 cagtctggac tctacactat gagcagctca gtgactgtcc cctccagcac ctggccaagt 660 cagaccgtca cctgcagcgt tgctcaccca gccagcagca ccacggtgga caaaaaactt 720 gagcccagcg ggcccatttc aacaatcaac ccctgtcctc catgcaagga gtgtcacaaa 780 tgcccagctc ctaacctcga gggtggacca tccgtcttca tcttccctcc aaatatcaag 840 gatgtactca tgatctccct gacacccaag gtcacgtgtg tggtggtgga tgtgagcgag 900 gatgacccag acgtccagat cagctggttt gtgaacaacg tggaagtaca cacagctcag 960 acacaaaccc atagagagga ttacaacagt actatccggg tggtcagcac cctccccatc 1020 cagcaccagg actggatgag tggcaaggag ttcaaatgca aggtcaacaa caaagacctc 1080 ccatcaccca tcgagagaac catctcaaaa attaaagggc tagtcagagc tccacaagta 1140 tacatcttgc cgccaccagc agagcagttg tccaggaaag atgtcagtct cacttgcctg 1200 gtcgtgggct tcaaccctgg agacatcagt gtggagtgga ccagcaatgg gcatacagag 1260 gagaactaca aggacaccgc accagtcctg gactctgacg gttcttactt catatatagc 1320 aagctcaata tgaaaacaag caagtgggag aaaacagatt ccttctcatg caacgtgaga 1380 cacgagggtc tgaaaaatta ctacctgaag aagaccatct cccggtctcc gggtaaatga 1440 <210> 7 <211> 1679 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 7 cttagccctg gactccaagg cctttccact tggtgatcag cactgagcac agaggactca 60 ccatggaatt ggggctgagc tgggttttcc ttgttgctat tttagaaggt gtccagtgtg 120 aggtgcagct ggtggagtct gggggaggct tggtccagcc tggggggtcc ctgagactct 180 cctgtgtagt ctctggattc acctttagta gttattggat gagctgggtc cgccaggctc 240 cagggaaggg gctggagtgg gtggccaaca taaagcaaga tggaagtgag aaatactatg 300 tggactctgt gaagggccga ttcaccatct ccagagacaa cgccaagaac tcactgtatc 360 tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggctgtgta ttactgtgcg agagatggca 420 gcagctggta cagggactgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc accgtctcct 480 cagcctccac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag agcacctctg 540 ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg gtgacggtgt 600 catggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct 660 caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg ggcacccaga 720 cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag aaagttgagc 780 ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctggggg 840 gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc 900 ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact 960 ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca 1020 acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca 1080 aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct 1140 ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgggatg 1200 agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca 1260 tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg 1320 tgctggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt 1380 ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca 1440 cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatgagtgcg acggccggca agcccccgct 1500 ccccgggctc tcgcggtcgc acgaggatgc ttggcacgta ccccctgtac atacttcccg 1560 ggcgcccagc atggaaataa agcacccagc gctgccctgg gcccctgcga aaaaaaaaaa 1620 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 1679 <210> 8 <211> 1641 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 8 cccgccctgg gattcccagg tgttttcatt tggtgatcag cactgaacac agaagagtca 60 tgatggagtt tgggctgagc tgcgttttcc ttgttgccat ttttaaaggt gtccactgtg 120 aggtgcagct ggtggagtct gggggaggct tggtccagcc gggggggtcc ctgagactct 180 cctgtgtagc ctctgcattc accctcagta ggcatgcgat gcactgggtc cgccaggctc 240 cagggaaggg actggaatat gtttcaggta ttagtaatag tgaaaatagc acatattatg 300 cagactctgt gaagggcaga ttcaccatct ccagagacaa ctacaagaac acgctttatc 360 ttcaactggg cagcctgaga gctgaggaca aggctgtgta ttactgtgcg agagcgaggt 420 gtagaggaga cacatgcctc aacttctact acggtttgga cgtctggggc caagggacca 480 cggtcatcgt ctcctcagcc tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcaccctcct 540 ccaagagcac ctctgggggc acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg 600 aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg 660 ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca 720 gcttgggcac ccagacctac atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac accaaggtgg 780 acaagaaagt tgagcccaaa tcttgtgaca aaactcacac atgcccaccg tgcccagcac 840 ctgaactcct ggggggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca 900 tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg 960 aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc 1020 gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg 1080 actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca 1140 tcgagaaaac catctccaaa gccaaagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc 1200 ccccatcccg ggatgagctg accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct 1260 tctatcccag cgacatcgcc gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca 1320 agaccacgcc tcccgtgctg gactccgacg gctccttctt cctctacagc aagctcaccg 1380 tggacaagag caggtggcag caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc 1440 tgcacaacca ctacacgcag aagagcctct ccctgtctcc gggtaaatga gtgcgacggc 1500 cggcaagccc ccgctcccca ggctctcggg gtcgcgcgag gatgcttggc acgtaccccg 1560 tgtacatact tcccgggcgc ccagcatgga aataaagcac ccagcgctgc cctgggcccc 1620 tgcaaaaaaa aaaaaaaaaa a 1641 <210> 9 <211> 986 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 9 ggactcctca gttcaccttc tcacaatgag gctccctgct cagctcctgg ggctgctaat 60 gctctgggtc ccaggatcca gtggggatgt tgtgatgact cagtctccac tctccctgcc 120 cgtcaccctt ggacagccgg cctccatctc ctgcaggtct agtcaaagcc tcgtatacag 180 tgatggaaac acctacttga attggtttca gcagaggcca ggccaatctc caaggcgcct 240 aatttataag gtttctatcc gggactctgg ggtcccagac aaattcagcg gcagtgggtc 300 aggcactgat ttcacactga aaatcagcag ggtggaggct gaggatgttg gggtttatta 360 ctgcatgcaa ggttcacact ggcctccgat caccttcggc caagggacac gactggagat 420 taaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg ccatctgatg agcagttgaa 480 atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc tatcccagag aggccaaagt 540 acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc caggagagtg tcacagagca 600 ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg acgctgagca aagcagacta 660 cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag ggcctgagct cgcccgtcac 720 aaagagcttc aacaggggag agtgttagag ggagaagtgc ccccacctgc tcctcagttc 780 cagcctgacc ccctcccatc ctttggcctc tgaccctttt tccacagggg acctacccct 840 attgcggtcc tccagctcat ctttcacctc acccccctcc tcctccttgg ctttaattat 900 gctaatgttg gaggagaatg aataaataaa gtgaatcttt gcaaaaaaaa aaaaaaaaaa 960 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa 986

Claims (61)

1. 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 항체 가변 도메인.
2. 제1 항체 펩티드를 포함하는 항체 구조물로서, 상기 제1 항체 펩티드는
   (i) 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 제1 항체 가변 도메인; 및
   (ii) 상기 제1 항체 가변 도메인에 결합된 제1 항체 도메인
   을 포함하는 것인 항체 구조물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체 가변 도메인은 항체 경쇄 가변 도메인인 항체 가변 도메인 또는 항체 구조물.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체 가변 도메인은 항체 중쇄 가변 도메인인 항체 가변 도메인 또는 항체 구조물.
5. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 1가 항체 구조물인 항체 구조물.
6. 제2항에 있어서, 상기 제1 항체 도메인은 제1 가변 중쇄 도메인인 항체 구조물.
7. 제6항에 있어서, 상기 항체 구조물은 단쇄 항체(scFv)인 항체 구조물.
8. 제2항에 있어서, 상기 제1 항체 도메인은 제1 불변 중쇄인 항체 구조물.
9. 제8항에 있어서, 상기 제1 불변 중쇄는 제1 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제1 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함하는 것인 항체 구조물.
10. 제9항에 있어서, 상기 제1 CH3 도메인은 상기 제1 CH2 도메인을 통해서 상기 제1 항체 가변 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
11. 제10항에 있어서, 상기 제1 항체 펩티드는 제1 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함하는 것인 항체 구조물.
12. 제11항에 있어서, 상기 제1 CH1 도메인은 상기 제1 항체 도메인의 일부분을 형성하는 것인 항체 구조물.
13. 제11항에 있어서, 상기 제1 항체 가변 도메인은 상기 제1 CH1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
14. 제11항에 있어서, 상기 제1 항체 가변 도메인은 상기 제1 CH1 도메인을 통해서 상기 제1 CH2 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
15. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은, 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제2 항체 펩티드를 더 포함하는 2가 항체 구조물인 항체 구조물.
16. 제15항에 있어서, 상기 제2 펩티드는 상기 제1 항체 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
17. 제15항에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는 상기 제1 CH2 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
18. 제15항에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드 및 상기 제1 항체 펩티드는 화학적으로 동일한 것인 항체 구조물.
19. 제15항에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드 및 상기 제1 항체 펩티드는 화학적으로 상이한 것인 항체 구조물.
20. 제15항에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는
    (i) 제2 항체 가변 도메인; 및
    (ii) 상기 제2 항체 가변 도메인에 결합된 제2 항체 도메인
    을 포함하는 것인 항체 구조물.
21. 제20항에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 서열번호 1에 기재된 바와 같은 CDR 1, 서열번호 2에 기재된 바와 같은 CDR 2 및 서열번호 3에 기재된 바와 같은 CDR 3을 포함하는 것인 항체 구조물.
22. 제20항에 있어서, 상기 제2 항체 도메인은 제2 불변 중쇄인 항체 구조물.
23. 제22항에 있어서, 상기 제2 불변 중쇄는 제2 불변 중쇄 3(CH3) 도메인에 결합된 제2 불변 중쇄 2(CH2) 도메인을 포함하는 것인 항체 구조물.
24. 제23항에 있어서, 상기 제2 CH3 도메인은 상기 제2 CH2 도메인을 통해서 상기 제2 항체 가변 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
25. 제24항에 있어서, 상기 제2 항체 펩티드는 제2의 제1 불변 중쇄 1(CH1) 도메인을 더 포함하는 것인 항체 구조물.
26. 제25항에 있어서, 상기 제2 CH1 도메인은 상기 제2 항체 도메인의 일부분을 형성하는 것인 항체 구조물.
27. 제25항에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 상기 제2 CH1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
28. 제25항에 있어서, 상기 제2 항체 가변 도메인은 상기 제2 CH1 도메인을 통해서 상기 제2 CH2 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
29. 제28항에 있어서, 상기 제1 CH1 도메인 및 상기 제2 CH1 도메인은 함께 결합되는 것인 항체 구조물.
30. 제15항에 있어서, 상기 항체 구조물은, 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제3 항체 가변 도메인 및 상기 제2 항체 펩티드에 결합된 제4 항체 가변 도메인을 더 포함하는 4가 항체 구조물인 항체 구조물.
31. 제30항에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 펩티드의 일부분을 형성하는 것인 항체 구조물.
32. 제30항에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제1 항체 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
33. 제30항에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제1 CH2 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
34. 제30항에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제2 항체 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
35. 제30항에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 가변 도메인을 통해서 상기 제2 CH2 도메인에 결합되는 것인 항체 구조물.
36. 제30항에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 항체 펩티드에 결합된 제1 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성하고 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 항체 펩티드에 결합된 제2 경쇄 항체 펩티드의 일부분을 형성하는 것인 항체 구조물.
37. 제36항에 있어서, 상기 제1 경쇄 항체 펩티드는 상기 제3 항체 가변 도메인에 결합된 제1 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 포함하는 것인 항체 구조물.
38. 제37항에 있어서, 상기 제1 경쇄 항체 펩티드는 상기 제1 CL1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 펩티드에 결합되는 것인 항체 구조물.
39. 제37항에 있어서, 상기 제3 항체 가변 도메인은 상기 제1 CL1 도메인을 통해서 상기 제1 항체 펩티드에 결합되는 것인 항체 구조물.
40. 제36항에 있어서, 상기 제2 경쇄 항체 펩티드는 상기 제4 항체 가변 도메인에 결합된 제2 불변 경쇄 1(CL1) 도메인을 더 포함하는 것인 항체 구조물.
41. 제40항에 있어서, 상기 제2 경쇄 항체 펩티드는 상기 제2 CL1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 펩티드에 결합되는 것인 항체 구조물.
42. 제37항에 있어서, 상기 제4 항체 가변 도메인은 상기 제2 CL1 도메인을 통해서 상기 제2 항체 펩티드에 결합되는 것인 항체 구조물.
43. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 항체인 항체 구조물.
44. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 항체 변이체인 항체 구조물.
45. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 Fab' 단편인 항체 구조물.
46. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 키메라 항체인 항체 구조물.
47. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 인간화 항체인 항체 구조물.
48. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 인간 항체인 항체 구조물.
49. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 검출가능한 모이어티를 포함하는 것인 항체 구조물.
50. 제49항에 있어서, 상기 검출가능한 모이어티는 형광성 모이어티인 항체 구조물.
51. 제2항에 있어서, 상기 항체 구조물은 암 단백질에 결합되는 것인 항체 구조물.
52. 제2항에 있어서, 상기 암 단백질은 암 세포의 일부분을 형성하는 것인 항체 구조물.
53. 제52항에 있어서, 상기 암 세포는 림프계 세포인 항체 구조물.
54. 제52항에 있어서, 상기 암 세포는 B 세포인 항체 구조물.
55. 제1항의 상기 항체 가변 도메인, 제2항의 상기 제1 항체 펩티드, 제15항의 상기 제2 항체 펩티드, 제36항의 상기 제1 경쇄 항체 펩티드 또는 제36항의 상기 제2 경쇄 항체 펩티드를 코딩하는 단리된 핵산.
56. 제1항의 상기 항체 가변 도메인 또는 제2항의 상기 항체 구조물의 치료적 유효량 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학 조성물.
57. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 제1항의 상기 항체 가변 도메인 또는 제2항의 상기 항체 구조물의 치료적 유효량을 투여하여, 상기 대상체에서 암을 치료하는 단계를 포함하는 치료 방법.
58. 제57항에 있어서, 상기 암은 림프종, 백혈병 또는 골수종인 치료 방법.
59. 제58항에 있어서, 상기 림프종은 외투 세포 림프종, 소포성 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 변연부 림프종 또는 버킷 림프종인 치료 방법.
60. 제58항에 있어서, 상기 백혈병은 림프아구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병 또는 모발 세포 백혈병인 치료 방법.
61. 제57항에 있어서, 상기 대상체에게 제2 치료제를 투여하는 단계를 더 포함하는 치료 방법.

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