KR20220113951A - 항-ror-2 항체 및 사용 방법 - Google Patents

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KR20220113951A
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토마스 제이 킵스
조지 에프 2세 위도프
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더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
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Abstract

특히, 높은 효율 및 특이성으로 인간 타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2)에 결합하는 항체(예를 들어, 인간화된 항체, 단일클론 항체), 항체 단편(예를 들어, scFv) 및 항체 조성물(예를 들어, 키메라 항원 수용체, 이중특이성 항체)이 본 명세서에 제공된다. 본 명세서에 제공된 항체 및 항체 조성물은 신규한 경쇄 및 중쇄 도메인 CDR 및 프레임워크 영역을 포함하며 특히 암 및 기타 ROR2-관련 질환을 진단 및 치료하는데 유용하다.

Description

항-ROR-2 항체 및 사용 방법
관련 출원에 대한 상호참조
본 출원은 2019년 11월 18일자로 출원된 미국 특허 가출원 제62/936,900호의 우선권을 주장하며, 이는 그 전문이 모든 목적을 위해 본 명세서에 원용된다.
연방 지원 연구 및 개발하에 이루어진 발명에 대한 권리에 관한 진술
본 발명은 국립 보건원에서 수여한 CA236361 및 CA81534에 따른 정부 지원으로 이루어졌다. 정부는 발명에 대한 소정의 권리를 갖는다.
ASCII 텍스트 파일로 제출된 서열 목록, 표 또는 컴퓨터 프로그램
목록 부록에 대한 참조
머신 포맷 IBM-PC, MS 윈도우 운영 체제에서 2020년 11월 18일자로 생성된 122,880 바이트의 파일 48537-632001WO_ST25.TXT에 작성된 서열 목록이 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
수용체 타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2: ROR2)는 Wnt5a에 대해 발달적으로 제한된 수용체이다. 인간 ROR2는 계산된 분자량이 104.8kDa인 943개 아미노산의 단일-통과 유형 I 막 단백질이다. 이는 마우스와 인간 단백질 사이의 92% 아미노산 동일성을 가진 여러 종에 걸쳐 고도로 보존되어 있다. ROR2는 Wnt 표적 유전자의 전사를 억제하고, 표준 Wnt 리간드를 격리하여 Wnt 신호전달을 조절함으로써 여러 세포 상황에서 종양 억제인자로 작용할 수 있다. 최근에, ROR2는 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 및 전립선암을 비롯한 수많은 암의 진행과 관련이 있다. 따라서, 인간 ROR2를 특이적으로 표적화하고, 이의 기능을 저해하여 효과적인 치료제 및 진단제로서 작용하는 항체, 항체 단편, 이중특이성 항체 및 키메라 항원 수용체에 대한 필요성이 존재한다. 본 명세서에 제공된 조성물 및 방법은 이러한 요구 및 당업계의 다른 요구를 해결한다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함한다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함한다.
또 다른 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함한다.
또 다른 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함한다.
일 양태에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 방법은 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일 양태에서, ROR2 발현 암의 전이의 저해를 필요로 하는 대상체에서 ROR2 발현 암의 전이를 저해하는 방법이 제공되며, 방법은 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, ROR2 발현 세포를 검출하는 방법이 제공되며, 방법은 (i) ROR2-발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계; 및 (ii) 세포에 의해 발현된 ROR2 단백질에 대한 항체의 결합을 검출하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, 치료제를 ROR2 발현 세포에 전달하는 방법이 제공되며, 방법은 ROR2 발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계를 포함하되, 항체는 치료제에 부착된다.
또 다른 양태에서, ROR2-발현 세포의 이동을 저해하는 방법이 제공되며, 방법은 ROR2 발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계를 포함한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 3의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 5의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 7의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 10의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 12의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 9의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 11의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 14의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 16의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공되되, 항-ROR2 항체는 서열번호 13의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 15의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
또 다른 양태에서, (i) (a) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다.
일 양태에서, (i) (a) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다.
일 양태에서, (i) (a) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다.
일 양태에서, (i) (a) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다.
또 다른 양태에서, 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 키메라 항원 수용체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공된다.
또 다른 양태에서, 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2의 세포외 도메인에 결합할 수 있는 항-수용체 타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공된다.
도 1. 인간 및 마우스 ROR2의 세포외 영역의 비교. 인간(상부 서열) 및 마우스(하부 서열) ROR2의 세포외 영역의 아미노산 서열의 정렬이 도시된다. 점은 해당 위치에서의 상동성을 나타내는 반면, 차이점은 단일 문자 아미노산 코돈으로 지정된다. Ig-유사, CRD 및 크링글 도메인(kringle domain)이 표지되며, 서열 위의 라인으로 표시된다.
도 2a 내지 도 2d. (도 2a) 6E6, (도 2b) 4G9, (도 2c) 5C11 및 (도 2d) 5G3으로 지정된 4개의 마우스 항-인간 ROR2 하이브리도마 각각에 대해 도시된 가장 근접한 마우스 IGHV(상부 서열) 또는 IGKV(하부 서열) 생식세포계열 유전자에 대한 아미노산 서열 및 정렬. 각 정렬에 대해, 상부 서열은 첫 번째 프레임워크 영역의 첫 번째 코돈에서 시작하여 네 번째 프레임워크 영역의 마지막 코돈으로 끝나는 중쇄 또는 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 도시한다. 하부 서열은 가장 상동인 마우스 IGHV 또는 IGKV 생식세포계열 유전자의 중쇄 또는 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 도시한다. 프레임워크(FR) 및 상보성 결정(CDR) 영역은 서열 위에 표시되고, 두 서열 간의 차이점은 정렬된 서열 아래에 표시되며, 굵은 글씨의 단일 문자 아미노산 코돈으로 지정된다.
도 3. 다양한 양의 고정된 단백질 및 가용성 mAb의 농도에서 재조합 인간 ROR2에 대한 항-ROR2 mAb의 결합의 평가. 웰은 27nM, 9nM, 3nM 및 1nM의 재조합 인간 ROR2-세포외 도메인(ROR2-ECD)으로 밤새 코팅되고, 세척되고, 샘플 완충액(1X BBS+1% BSA)으로 37℃에서 90분 동안 차단되었다. 6E6, 4G9, 5C11 또는 5G3 mAb의 500 ng/㎖ 내지 31 ng/㎖ 범위의 연속 희석물이 웰에 첨가되고, 주위 온도에서 60분 동안 인큐베이션되고, 세척되고, HRP-접합된 염소 항-마우스 IgG로 검출되고, TMB 마이크로웰 퍼옥시데이스 기질로 발색되었다. 발색은 1M O-인산의 첨가에 의해 종료되고, SpectraMax340 마이크로플레이트 판독기에서 450nM에서 흡광도가 판독된다. 흡광도 값은 가로 좌표의 mAb 농도(ng/㎖)에 대한 세포 좌표에 플로팅된다. 더 낮은 플레이트 코팅 농도 및 더 낮은 양의 가용성 mAb에서 더 높은 흡광도 값은 5C11 및 5G3에 비해 6E6 및 4G9에 대해 상대적으로 더 높은 결합 친화도를 나타낸다.
도 4a 및 도 4b. 재조합 ROR2 단백질에 대한 6E6 및 4G9 mAb의 결합 친화도 측정. (도 4a) 분석은 KinExA 3200 기기를 사용하여 수행되었다. 증가하는 몰(M) 농도의 가용성 ROR2 경쟁자(x-축)의 존재하에 ROR2 단백질로 코팅된 입자에 결합된 항-인간 ROR2 mAb(y-축)의 비율이 6E6(상부 패널) 및 4G9(하부 패널)에 대해 나타나 있다. (도 4b) 인간 ROR2에 대한 결합에 대한 6E6(상부 패널) 및 4G9(하부 패널)의 측정된 Kd에 대한 95% 신뢰 구간의 예시.
도 5. 키메라 인간/자체(house) 재조합 ROR2 단백질에 대한 결합 평가에 의한 항-인간 ROR2 mAb의 결합 영역의 확인. 왼쪽 패널은 4개의 ROR2 mAb 각각의 결합 영역을 매핑하는데 사용된 ROR2의 세포외 부분의 키메라 작제물의 개략도를 보여준다. 각 작제물의 어두운 영역은 인간 ROR2를 나타내고, 빗금친 부분 영역은 마우스 ROR2를 나타낸다. h1-111 및 h1-160은 각각 인간 ROR2의 처음 111개 및 160개 아미노산을 지칭한다. hCRD 및 hKringle은 인간 ROR2의 시스테인이 풍부한 도메인 및 크링글 도메인을 포함한다. 각 재조합 단백질은 나일론 막으로 옮겨지고, 6E6, 4G9, 5C11, 5G3 또는 항-his 태그 mAb으로 프로빙되고, 오른쪽 패널에 나타낸 바와 같이 서양고추냉이 퍼옥시데이스와 접합된 항-마우스 IgG 항체로 검출되었다. 6E5 및 5C11 mAb는 인간 크링글 도메인을 포함하는 ROR2 재조합 단백질에 결합한다. 4G9 및 5G3 mAb는 Ig-유사 도메인을 포함하는 인간 ROR2의 처음 111개 aa 내에서 ROR2 재조합 단백질에 결합한다.
도 6. 인간 ROR2의 크링글 도메인에 대한 항-인간 ROR2 mAb의 결합에 필요한 아미노산의 확인. 6E6, 4G9 및 5C11 mAb의 결합은 크링글 도메인 내에서 인간과 마우스 ROR2 사이에 다른 하나의 아미노산이 마우스 ROR2의 상응하는 아미노산으로 대체된 재조합 인간 ROR2 단백질을 사용하여 평가되었다. 각 재조합 단백질은 나일론 막 위로 옮겨지고, 6E6, 4G9 또는 5C11 mAb로 프로빙되고, 상단 패널에 나타낸 바와 같이 서양고추냉이 퍼옥시데이스와 접합된 항-마우스 IgG 항체로 검출되었다. 인간 및 마우스 ROR2의 크링글 도메인의 단백질 서열의 정렬은 하부 패널에 나타나 있고, 상자 안의 아미노산은 각 재조합 단백질에 대해 만들어진 아미노산의 변화를 나타낸다.
도 7a 및 도 7b. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 mAb는 인간 ROR2에 특이적으로 결합한다. (도 7a) 인간 ROR에 대한 6E6 및 4G9 mAb의 결합은 유세포 분석 염색 및 ROR2를 발현하는 것으로 알려진 여러 세포주의 분석에 의해 평가되었다. 세포는 10 ㎍/㎖의 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2-Alexa647 접합된 mAb(음영 처리된 히스토그램) 또는 동량의 아이소타입 일치 대조군 mAb(열린 히스토그램)로 얼음 위에서 20분 동안 염색되고, 세척되고, 분석되었다. 히스토그램은 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 생존 가능한 세포의 상대 형광 강도(x 축)를 도시한다. (도 7b) 특이성은 모 세포주와 비교하여 CRISPR-cas9를 사용하여 ROR2 발현이 제거된 HCT116 결장직장암세포 및 HEK293 세포에 대한 결합의 부재에 의해 검증되었다.
도 8. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 mAb는 BR1936 유방암 PDX 세포에 의해 발견되는 ROR2에 결합한다. BR1936 및 BR1367(ROR2 음성) 유방암 PDX 세포는 10 ㎍/㎖의 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2-Alexa647 접합된 mAb(음영 처리된 히스토그램) 또는 동량의 아이소타입 일치 대조군 mAb(열린 히스토그램)로 염색되었다. 세포는 얼음 위에서 20분 동안 염색되고, 세척되고, 유세포 분석에 의해 분석되었다. 히스토그램은 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 생존 가능한 세포의 상대 형광 강도(x 축)를 도시한다. 6E6 및 4G9는 둘 다 BR1936 세포에 결합하지만, 인간 ROR2를 발현하지 않는 BR1367 세포에는 결합하지 않는다.
도 9. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 mAb는 건강한 공여체로부터 단리된 말초 혈액 단핵 세포(PBMC) 또는 림프구에 결합하지 않는다. PBMC는 건강한 공여체의 동의하에 얻어진 전혈로부터 피콜 밀도 원심분리에 의해 단리되었다. 세포는 5 ㎍/㎖의 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2-Alexa647 접합된 mAb(음영 처리된 히스토그램) 또는 동량의 아이소타입 일치 대조군 mAb(열린 히스토그램)로 얼음 위에서 20분 동안 염색되고, 세척되고, 유세포 분석에 의해 분석되었다. 히스토그램은 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 살아 있는 생존 가능한 단핵 세포 또는 림프구의 염색을 도시한다. K562 세포의 염색은 양성 대조군으로서 수행되었다.
도 10a 및 도 10b. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 mAb는 K562에 의해 내재화되지만 JEKO 세포에 의해서는 내재화되지 않는다. K562 및 JEKO(ROR2 음성) 세포는 10 ㎍/㎖의 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2-pHrodo 접합된 mAb로 얼음 위에서 30분 동안 염색되고, 세척되고, 4개의 분획으로 분취되었다. 하나의 플레이트는 얼음 위에 두고, 나머지 세 개의 플레이트는 37℃에서 30분, 60분 또는 120분 동안 옮겼다. 인큐베이션 후, 세포는 세척되고, 유세포 분석에 의해 분석되었다. (도 10a) 히스토그램은 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 생존 가능한 세포의 상대 형광 강도(x 축)를 도시한다. 음영 처리된 히스토그램은 37℃에서 120분 동안 인큐베이션된 염색된 세포를 도시하고, 점선 히스토그램은 4℃에서 120분 동안 인큐베이션된 염색된 세포를 도시하며, 열린 히스토그램은 37℃에서 120분 동안 인큐베이션된 염색되지 않은 세포를 도시한다. 증가된 상대 형광은 4℃에서 120분 동안 인큐베이션된 염색된 세포 또는 37℃에서 120분 동안 인큐베이션된 염색되지 않은 세포와 비교하여, ROR2를 발현하는 K562 세포, ROR2를 발현하지 않는 ROR2 음성 JEKO 세포에 대한 6E6(상부 패널) 및 4G9(하부 패널) pHrodo-접합된 mAb 모두에 대해 기록되었다. (도 10b) 시간 경과(x-축)에 따른 K562 세포에 대한 6E6 또는 4G9 pHrodo 접합된 mAb의 평균 형광(y-축) 증가의 그래픽 표현. ΔMFI는 37℃에서 인큐베이션된 pHrodo 접합된 mAb로 염색된 K562 세포의 평균 형광 강도에서 4℃에서 동일한 시간 동안 인큐베이션된 동일한 염색된 세포의 분취물의 평균 형광 강도를 뺀 값이다.
도 11a 및 도 11b. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 mAb는 MCF7-ROR 유방암 세포의 Wnt5a 유도성 침입을 저해한다. 대조군 벡터 또는 ROR2-발현 벡터로 형질감염된 MCF7 유방암 세포는 성장 인자 없이 0.5% 소 태아 혈청(FBS)이 보충된 둘베코 수정 이글 배지(DMEM)에서 밤새 배양되었다. 다음 날, 세포는 제거되고, 105개 세포가 Matrigel이 코팅되고, 성장-인자가 감소되고, 8μM 기공 크기의 침습 챔버에서 100 ng/㎖의 재조합 Wnt5a 및 25 ㎍/㎖의 마우스 IgG, 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2 mAb가 포함된 0.5% FBS DMEM 배지에 현탁되었다. 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션 후, 웰은 인산 완충 식염수(PBS)로 세척되고, 4% 파라폼알데하이드로 고정되었다. 각 인서트의 꼭대기 쪽에 있는 세포는 긁어서 제거되고, 막의 기저면으로 이동한 세포는 Diff-Quick 염색 시약으로 염색되고 Nikon 도립 현미경으로 가시화되었다. (도 11a) 히스토그램은 마우스 IgG(회색 막대), 6E6 mAb(흰색 막대) 또는 4G9(검은색 막대)로 처리되고 대조군 mIgG로 처리된 MCF7에 대해 정규화된 MCF7 세포 또는 MCF7-ROR2 세포의 3개의 챔버 각각에서 침습성 세포의 평균 수를 표시한다. 데이터는 평균 +/- SD(n=3)로 표시된다. (도 11b) 25 ㎍/㎖의 대조군 항체(왼쪽 패널) 6E6 항-ROR2 mAb(중앙 패널) 또는 4G9 항-인간 ROR2 mAb로 처리된 MCF7 세포(상부 패널) 또는 MCF7-ROR2 세포(하부 패널)로부터의 침습성 세포의 대표적인 현미경 사진.
도 12a 및 도 12b. 인간 ROR2에 대한 6E6 단일쇄 가변 단편(scFv)의 친화도 측정 및 결합 특이성. 분석은 KinExA 3200 기기를 사용하여 수행되었다. (도 12a) 증가하는 몰(M) 농도(x-축)의 가용성 ROR2 경쟁자의 존재하에 재조합 ROR2 단백질로 코팅된 입자에 결합된 6E6 항-인간 ROR2의 비율(y-축)이 나타나 있다. (도 12b) 재조합 인간 ROR2에 대한 결합에 대한 6E6 scFv의 측정된 Kd에 대한 95% 신뢰 구간의 예시. (도 12c) ROR2에 대한 6E6 scFv의 결합은 유세포 분석 염색 및 K562(ROR2 양성)와 JEKO(ROR2 음성) 세포의 분석에 의해 평가되었다. 세포는 약 1 ㎍/㎖의 6E6 항-인간 ROR2 scfv로 얼음 위에서 20분 동안 염색되고, 세척되고, 피코에리트린(PE)-접합된 항-인간 IgG1 항체로 얼음 위에서 추가로 20분 동안 염색되고, 세척되고, 유세포 분석에 의해 분석되었다. 음영 처리된 히스토그램은 항-인간 IgG1-PE 항체만으로 염색된 생존 가능한 세포와 비교하여 6E6 scfv로 염색된, 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 생존 가능한 세포의 상대 형광 강도(x 축)를 도시한다(열린 히스토그램). 6E6 scFv는 K562 세포에는 결합하지만, 인간 ROR2를 발현하지 않는 JEKO 세포에는 결합하지 않는다.
도 13. 6E6 및 4G9 항-인간 ROR2 키메라 항원 수용체(CAR)는 재조합 인간 ROR2 단백질에 특이적으로 결합한다. HEK293 세포는 6E6 또는 4G9 항-인간 ROR2 키메라 항원 수용체 작제물 또는 항-인간 ROR1 CAR 작제물로 형질감염되었다. 모든 세포는 인간 IgG1의 ROR2 세포외 도메인 및 CH2-CH3 불변 영역 도메인으로 구성된 재조합 인간 ROR2-Ig 단백질의 결합에 대한 유세포 분석에 의해 48시간 후 평가되었다. 세포는 1 ㎍/㎖의 재조합 ROR2-Ig(상부 패널) 또는 1 ㎍/㎖의 대조군 ROR1-Ig(하부 패널)로 얼음 위에서 20분 동안 염색되고, 세척되고, 피코에리트린(PE)-접합된 항-인간 IgG1 항체로 얼음 위에서 추가로 20분 동안 염색되고, 세척되고, 유세포 분석에 의해 분석되었다. 음영 처리된 히스토그램은 항-인간 IgG1-PE 항체만으로 염색된 세포와 비교하여 ROR2-Ig 또는 ROR1-Ig로 염색된, 광 산란 특성에 의해 결정된 바와 같이 생존 가능한 세포의 상대 형광 강도(x 축)를 도시한다(열린 히스토그램). 6E6 또는 4G9 CAR 작제물로 형질감염된 HEK293 세포는 ROR2-Ig(상부 패널)에 결합하지만, 인간 ROR1의 세포외 영역에 융합된 동일한 인간 IgG 도메인으로 구성된 ROR1-Ig에는 결합하지 않는다. 반대로, ROR1 CAR 형질감염된 세포는 ROR1-Ig에만 결합한다.
본 발명의 다양한 실시형태 및 양태가 보여지고 본 명세서에 기재되지만, 이러한 실시형태 및 양태는 단지 예로서 제공된다는 것이 당업자에게 명백할 것이다. 수많은 변형, 변경 및 치환이 이제 본 발명을 벗어나지 않고 당업자에게 발생할 것이다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 실시형태에 대한 다양한 대안이 본 발명을 실시하는데 이용될 수 있음을 이해하여야 한다.
본 명세서에 사용된 부문 제목은 조직적 목적만을 위한 것이며, 기재된 주제를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다. 제한 없이 특허, 특허 출원, 기사, 서적, 매뉴얼 및 논문을 포함하는 본 출원에 인용된 모든 문서 또는 문서의 일부는 임의의 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
본 명세서에 사용된 약어는 화학 및 생물학 분야 내에서 통상적인 의미를 갖는다. 본 명세서에 제시된 화학 구조 및 공식은 화학 분야에서 알려진 화학 원자가의 표준 규칙에 따라 구성된다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 기술적 및 과학적 용어는 당업자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 예를 들어, 문헌[Singleton et al., DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY 2nd ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 1994); Sambrook et al., MOLECULAR CLONING, A LABORATORY MANUAL, Cold Springs Harbor Press (Cold Springs Harbor, NY 1989)] 참조. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 등가인 임의의 방법, 장치 및 물질이 본 발명의 실시에 사용될 수 있다. 하기 정의는 본 명세서에서 자주 사용되는 소정의 용어의 이해를 돕기 위해 제공되는 것으로, 본 개시내용의 범위를 제한하려는 것이 아니다.
"핵산"은 단일-가닥, 이중-가닥 또는 다중-가닥 형태의 뉴클레오타이드(예를 들어, 데옥시리보뉴클레오타이드 또는 리보뉴클레오타이드) 및 이의 중합체 또는 이의 보체; 또는 뉴클레오사이드(예를 들어, 데옥시리보뉴클레오사이드 또는 리보뉴클레오사이드)를 지칭한다. 실시형태에서, "핵산"은 뉴클레오사이드를 포함하지 않는다. 용어 "폴리뉴클레오타이드", "올리고뉴클레오타이드", "올리고" 등은 일반적이고 관례적인 의미에서 뉴클레오타이드의 선형 서열을 지칭한다. 용어 "뉴클레오사이드"는 일반적이고 관례적인 의미에서 핵염기 및 5탄당(리보스 또는 데옥시리보스)을 포함하는 글리코실아민을 지칭한다. 뉴클레오사이드의 비제한적인 예는 사이티딘, 우리딘, 아데노신, 구아노신, 티미딘 및 이노신을 포함한다. 용어 "뉴클레오타이드"는 일반적이고 관례적인 의미에서 폴리뉴클레오타이드의 단일 단위, 즉, 단량체를 지칭한다. 뉴클레오타이드는 리보뉴클레오타이드, 데옥시리보뉴클레오타이드 또는 이들의 변형된 버전일 수 있다. 본 명세서에서 상정되는 폴리뉴클레오타이드의 예는 단일 및 이중 가닥 DNA, 단일 및 이중 가닥 RNA, 및 단일 및 이중 가닥 DNA와 RNA의 혼합물을 갖는 하이브리드 분자를 포함한다. 본 명세서에서 상정되는 핵산, 예를 들어, 폴리뉴클레오타이드의 예는 임의의 유형의 RNA, 예를 들어, mRNA, siRNA, miRNA 및 가이드 RNA, 및 임의의 유형의 DNA, 게놈 DNA, 플라스미드 DNA 및 미니서클 DNA 및 이들의 임의의 단편을 포함한다. 폴리뉴클레오타이드의 맥락에서 용어 "이중체"는 일반적이고 관례적인 의미에서 이중 가닥을 지칭한다. 핵산은 선형 또는 분지형일 수 있다. 예를 들어, 핵산은 뉴클레오타이드의 선형 사슬일 수 있거나, 또는 핵산은, 예를 들어, 핵산이 뉴클레오타이드의 하나 이상의 암(arm) 또는 가지를 포함하도록 분지될 수 있다. 선택적으로, 분지된 핵산은 반복적으로 분지되어 덴드리머 등과 같은 고차 구조를 형성한다.
예를 들어, 포스포티오에이트 백본을 갖는 핵산을 포함하는 핵산은 하나 이상의 반응성 모이어티를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 반응성 모이어티는 공유, 비-공유 또는 다른 상호작용을 통해 또 다른 분자, 예를 들어, 핵산 또는 폴리펩타이드와 반응할 수 있는 임의의 기를 포함한다. 예로서, 핵산은 공유, 비-공유 또는 다른 상호작용을 통해 단백질 또는 폴리펩타이드 상의 아미노산과 반응하는 아미노산 반응성 모이어티를 포함할 수 있다.
용어는 또한 참조 핵산과 유사한 결합 특성을 가지며 참조 뉴클레오타이드와 유사한 방식으로 대사되는 합성, 자연 발생적 및 비-자연 발생적인 공지된 뉴클레오타이드 유사체 또는 변형된 백본 잔기 또는 연결을 포함하는 핵산을 포함한다. 이러한 유사체의 예는 제한 없이, 예를 들어, 포스포라미데이트, 포스포로다이아미데이트, 포스포로티오에이트(포스페이트에서 산소를 대체하는 이중 결합된 황을 갖는 포스포티오에이트로도 알려져 있음), 포스포로다이티오에이트, 포스포노카복실산, 포스포노카복실레이트, 포스포노아세트산, 포스포노폼산, 메틸 포스포네이트, 보론 포스포네이트 또는 O-메틸포스포로아미다이트 연결을 포함하는 포스포다이에스터 유도체(문헌[Eckstein, OLIGONUCLEOTIDES AND ANALOGUES: A PRACTICAL APPROACH, Oxford University Press] 참조)뿐만 아니라 5-메틸 사이티딘 또는 슈도우리딘에서와 같은 뉴클레오타이드 염기에 대한 변형; 및 펩타이드 핵산 백본 및 연결을 포함한다. 다른 유사체 핵산은 미국 특허 제5,235,033호와 제5,034,506호 및 문헌[Chapters 6 and 7, ASC Symposium Series 580, CARBOHYDRATE MODIFICATIONS IN ANTISENSE RESEARCH, Sanghui & Cook, eds]에 기술되어 있는 바와 같은 것을 포함하는 양성 백본; 비-이온성 백본, 변형된 당 및 비-리보스 백본(예를 들어, 당업계에 공지된 바와 같은 포스포로다이아미데이트 모폴리노 올리고 또는 잠금 핵산(locked nucleic acid: LNA))이 잇는 것을 포함한다. 하나 이상의 탄소고리형 당을 포함하는 핵산은 또한 핵산의 하나의 정의 내에 포함된다. 리보스-포스페이트 백본의 변형은 다양한 이유, 예를 들어, 생리학적 환경에서 또는 바이오칩 상의 프로브로서 이러한 분자의 안정성 및 반감기를 증가시키기 위해 수행될 수 있다. 자연 발생적 핵산과 유사체의 혼합물이 제조될 수 있으며; 대안적으로, 상이한 핵산 유사체의 혼합물 및 자연 발생적 핵산과 유사체의 혼합물이 제조될 수 있다. 실시형태에서, DNA의 뉴클레오타이드간 연결은 포스포다이에스터, 포스포다이에스터 유도체 또는 이 둘의 조합이다.
핵산은 비특이적 서열을 포함할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "비특이적 서열"은 임의의 다른 핵산 서열에 상보적이거나 또는 부분적으로만 상보적이도록 설계되지 않은 일련의 잔기를 포함하는 핵산 서열을 지칭한다. 예로서, 비특이적 핵산 서열은 세포 또는 유기체와 접촉할 때 저해성 핵산으로 기능하지 않는 핵산 잔기의 서열이다.
폴리뉴클레오타이드는 전형적으로 다음 4개의 뉴클레오타이드 염기의 특정 서열로 구성된다: 아데닌(A); 사이토신(C); 구아닌(G); 및 티민(T)(폴리뉴클레오타이드가 RNA인 경우 티민(T)에 대해 우라실(U)). 따라서, 용어 "폴리뉴클레오타이드 서열"은 폴리뉴클레오타이드 분자의 알파벳 표현이며; 대안적으로, 용어는 폴리뉴클레오타이드 분자 자체에 적용될 수 있다. 이러한 알파벳 표현은 중앙 처리 장치가 있는 컴퓨터의 데이터베이스에 입력될 수 있으며, 기능 유전체학 및 상동성 검색과 같은 생물정보학 응용 프로그램에 사용될 수 있다. 폴리뉴클레오타이드는 선택적으로 하나 이상의 비-표준 뉴클레오타이드(들), 뉴클레오타이드 유사체(들) 및/또는 변형된 뉴클레오타이드를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "보체"는 상보적 뉴클레오타이드 또는 뉴클레오타이드의 서열과 염기 페어링할 수 있는 뉴클레오타이드(예를 들어, RNA 또는 DNA) 또는 뉴클레오타이드의 서열을 지칭한다.　본 명세서에 기재되고 당업계에 일반적으로 공지되어 있는 바와 같이, 아데노신의 상보적(일치하는) 뉴클레오타이드는 티미딘이고, 구아노신의 상보적(일치하는) 뉴클레오타이드는 사이토신이다.　 따라서, 보체는 제2 핵산 서열의 상응하는 상보적 뉴클레오타이드와 염기쌍을 이루는 뉴클레오타이드 서열을 포함할 수 있다.　보체의 뉴클레오타이드는 제2 핵산 서열의 뉴클레오타이드와 부분적으로 또는 완전히 일치할 수 있다. 보체의 뉴클레오타이드가 제2 핵산 서열의 각 뉴클레오타이드와 완전히 일치하는 경우, 보체는 제2 핵산 서열의 각 뉴클레오타이드와 염기쌍을 형성한다. 보체의 뉴클레오타이드가 제2 핵산 서열의 뉴클레오타이드와 부분적으로 일치하는 경우, 보체의 뉴클레오타이드 중 일부만이 제2 핵산 서열의 뉴클레오타이드와 염기쌍을 형성한다. 상보적 서열의 예는 코딩 및 비-코딩 서열을 포함하되, 비-코딩 서열은 코딩 서열에 상보적인 뉴클레오타이드를 포함하므로 코딩 서열의 보체를 형성한다.　상보적 서열의 추가의 예는 센스 및 안티센스 서열이되, 센스 서열은 안티센스 서열에 상보적인 뉴클레오타이드를 포함하므로 안티센스 서열의 보체를 형성한다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 서열의 상보성은 일부 핵산만이 염기 페어링에 따라 일치하는 부분적이거나 또는 모든 핵산이 염기 페어링에 따라 일치하는 완전성일 수 있다.　 따라서, 서로 상보적인 2개의 서열은 동일한 뉴클레오타이드의 특정 백분율(즉, 지정된 영역에 대한 약 60% 동일성, 바람직하게는 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상의 동일성)을 가질 수 있다.
용어 "아미노산"은 자연 발생적 및 합성 아미노산뿐만 아니라 자연 발생적 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 아미노산 유사체 및 아미노산 모방체를 지칭한다. 자연 발생적 아미노산은 유전 코드에 의해 암호화된 아미노산뿐만 아니라 나중에 변형되는 아미노산, 예를 들어, 하이드록시프롤린, γ-카복시글루타메이트 및 O-포스포세린이다. 아미노산 유사체는 자연 발생적 아미노산과 동일한 기본 화학 구조, 즉, 수소에 결합된 α 탄소, 카복실기, 아미노기 및 R기를 갖는 화합물, 예를 들어, 호모세린, 노르류신, 메티오닌 설폭사이드, 메티오닌 메틸 설포늄을 지칭한다. 이러한 유사체는 변형된 R기(예를 들어, 노르류신) 또는 변형된 펩타이드 백본을 갖지만, 자연 발생적 아미노산과 동일한 기본 화학 구조를 유지한다. 아미노산 모방체는 아미노산의 일반적인 화학 구조와 상이한 구조를 갖지만 자연 발생적 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 화합물을 지칭한다. 용어 "비-자연 발생적 아미노산" 및 "비천연 아미노산"은 자연에서 발견되지 않는 아미노산 유사체, 합성 아미노산 및 아미노산 모방체를 지칭한다.
아미노산은 일반적으로 알려진 세 문자 기호 또는 IUPAC-IUB 생화학 명명 위원회에 의해 권장되는 한 문자 기호로 본 명세서에서 지칭될 수 있다. 마찬가지로, 뉴클레오타이드는 일반적으로 허용되는 단일-문자 코드로 참조될 수 있다.
용어 "폴리펩타이드", "펩타이드" 및 "단백질"은 아미노산 잔기의 중합체를 지칭하기 위해 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되되, 실시형태에서, 중합체는 아미노산으로 구성되지 않는 모이어티에 접합될 수 있다. 용어는 하나 이상의 아미노산 잔기가 상응하는 자연 발생적 아미노산의 인공 화학적 모방체인 아미노산 중합체뿐만 아니라 자연 발생적 아미노산 중합체 및 비-자연 발생적 아미노산 중합체에 적용된다. "융합 단백질"은 단일 모이어티로서 재조합적으로 발현되는 2개 이상의 개별 단백질을 암호화하는 키메라 단백질을 지칭한다.
아미노산 또는 뉴클레오타이드 염기 "위치"는 N-말단(또는 5'-말단)에 대한 위치에 기초하여 참조 서열의 각 아미노산(또는 뉴클레오타이드 염기)을 순차적으로 식별하는 번호로 표시된다. 최적의 정렬을 결정할 때 고려하여야 하는 결실, 삽입, 절단, 융합 등으로 인해, 일반적으로 N-말단으로부터 단순히 계산함으로써 결정된 테스트 서열의 아미노산 잔기 번호는 참조 서열에서의 상응하는 위치의 번호와 반드시 동일하지는 않을 것이다. 예를 들어, 변이체가 정렬된 참조 서열에 비해 결실을 갖는 경우, 결실 부위에 참조 서열의 위치에 상응하는 변이체의 아미노산이 없을 것이다. 정렬된 참조 서열에 삽입이 있는 경우, 해당 삽입은 참조 서열에서 넘버링된 아미노산 위치와 일치하지 않을 것이다. 절단 또는 융합의 경우, 상응하는 서열의 임의의 아미노산과 일치하지 않는 참조 또는 정렬된 서열에 아미노산의 신장부가 있을 수 있다.
주어진 아미노산 또는 폴리뉴클레오타이드 서열의 넘버링과 관련하여 사용될 때, 용어 "~에 대하여 넘버링된" 또는 "~에 상응하는"은 주어진 아미노산 또는 폴리뉴클레오타이드 서열이 참조 서열과 비교될 때 특정 참조 서열의 잔기의 넘버링을 지칭한다. 단백질의 아미노산 잔기는 주어진 잔기와 동일한 필수 구조적 위치를 단백질 내에서 차지할 때 주어진 잔기에 "상응"한다. 당업자는 상이한 넘버링 시스템을 갖는 다른 단백질에서 단백질(예를 들어, ROR-1)의 특정 위치에 상응하는 잔기의 정체 및 위치를 즉시 인식할 것이다. 예를 들어, 단백질(예를 들어, ROR-1)과 간단한 서열 정렬을 수행함으로써, 단백질의 특정 위치에 상응하는 잔기의 정체 및 위치가 단백질에 정렬되는 다른 단백질 서열에서 확인된다. 예를 들어, 선택된 단백질의 선택된 잔기는 선택된 잔기가 138번 위치의 글루탐산과 동일한 필수 공간적 또는 다른 구조적 관계를 차지할 때 138번 위치의 글루탐산에 상응한다. 일부 실시형태에서, 선택된 단백질이 단백질과의 최대 상동성을 위해 정렬되는 경우, 글루탐산 138과 정렬되는 정렬된 선택된 단백질의 위치는 글루탐산 138에 상응하는 것이다. 1차 서열 정렬 대신에, 예를 들어, 선택된 단백질의 구조가 138번 위치에서 글루탐산과 최대 일치를 위해 정렬되고 전체 구조가 비교되는 3차원 구조적 정렬이 또한 사용될 수 있다. 이러한 경우에, 구조적 모델에서 글루탐산 138과 동일한 필수 위치를 차지하는 아미노산은 글루탐산 138 잔기에 상응하는 것이다.
"보존적으로 변형된 변이체" 아미노산 및 핵산 서열 모두에 적용된다. 특정 핵산 서열과 관련하여, "보존적으로 변형된 변이체"는 동일하거나 또는 본질적으로 동일한 아미노산 서열을 암호화하는 핵산을 지칭한다. 유전 코드의 축퇴성으로 인해, 다수의 핵산 서열이 임의의 주어진 단백질을 암호화할 것이다. 예를 들어, 코돈 GCA, GCC, GCG 및 GCU는 모두 아미노산 알라닌을 암호화한다. 따라서, 알라닌이 코돈에 의해 특정되는 모든 위치에서, 코돈은 암호화된 폴리펩타이드를 변경하지 않고 기재된 임의의 상응하는 코돈으로 변경될 수 있다. 이러한 핵산 변이는 보존적으로 변형된 변이의 한 종인 "침묵 변이"이다. 폴리펩타이드를 암호화하는 본 명세서의 모든 핵산 서열은 또한 핵산의 모든 가능한 침묵 변이를 기술한다. 당업자는 핵산의 각 코돈(메티오닌에 대한 유일한 코돈인 AUG 및 일반적으로 트립토판에 대한 유일한 코돈인 TGG 제외)이 기능적으로 동일한 분자를 생성하도록 변형될 수 있음을 인식할 것이다. 따라서, 폴리펩타이드를 암호화하는 핵산의 각각의 침묵 변이는 각각의 기재된 서열에 내재되어 있다.
아미노산 서열과 관련하여, 당업자는 단일 아미노산 또는 암호화된 서열의 아미노산의 작은 비율을 변경, 추가 또는 결실하는 핵산, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질 서열에 대한 개별적인 치환, 결실 또는 부가가 변경으로 인해 아미노산이 화학적으로 유사한 아미노산 아미노산으로 치환되는 "보존적으로 변형된 변이체"임을 인식할 것이다. 기능적으로 유사한 아미노산을 제공하는 보존적 치환 표는 당업계에 잘 알려져 있다. 이러한 보존적으로 변형된 변이체는 본 개시내용의 다형성 변이체, 종간 상동체 및 대립 형질에 추가되며 이를 배제하지 않는다.
하기 8개의 그룹은 각각 서로에 대한 보존적 치환인 아미노산을 포함한다:
1) 알라닌(A), 글리신(G);
2) 아스파르트산(D), 글루탐산(E);
3) 아스파라긴(N), 글루타민(Q);
4) 아르기닌(R), 라이신(K);
5) 아이소류신(I), 류신(L), 메티오닌(M), 발린(V);
6) 페닐알라닌(F), 타이로신(Y), 트립토판(W);
7) 세린(S), 트레오닌(T); 및
8) 시스테인(C), 메티오닌(M)
(예를 들어, 문헌[Creighton, Proteins (1984)] 참조).
2개 이상의 핵산 또는 폴리펩타이드 서열의 맥락에서 용어 "동일한" 또는 "동일성" 백분율은 동일하거나 또는 아래 기재된 기본 매개변수를 사용하여 BLAST 또는 BLAST 2.0 서열 비교 알고리즘을 사용하거나 또는 수동 정렬 및 육안 검사에 의해 측정된 것과 동일한(즉, 비교 창 또는 지정된 영역에 대해 최대 일치를 위해 비교되고 정렬될 때 지정된 영역에 대해 약 60% 동일성, 바람직하게는 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 더 높은 동일성) 지정된 백분율의 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드를 갖는 2개 이상의 서열 또는 하위서열을 지칭한다(예를 들어, NCBI 웹 사이트 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/ 등 참조). 그런 다음, 이러한 서열은 "실질적으로 동일"하다고 한다. 이 정의는 또한 테스트 서열의 보완 지칭하거나 또는 이에 적용될 서 있다. 정의는 또한 결실 및/또는 부가를 갖는 서열뿐만 아니라 치환을 갖는 서열도 포함한다. 아래 기재된 바와 같이, 선호되는 알고리즘은 갭 등을 설명할 수 있다. 바람직하게는, 동일성은 길이가 적어도 약 25개의 아미노산 또는 뉴클레오타이드인 영역에 걸쳐 또는 보다 바람직하게는 길이가 50개 내지 100개의 아미노산 또는 뉴클레오타이드인 영역에 걸쳐 존재한다.
"서열 동일성의 백분율"은 비교 창에서 2개의 최적으로 정렬된 서열을 비교함으로써 결정되되, 비교 창에서 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드 서열의 부분은 두 서열의 최적의 정렬을 위해 참조 서열(부가 또는 결실을 포함하지 않음)과 비교하여 부가 또는 결실(즉, 갭)을 포함할 수 있다. 백분율은 일치된 위치의 수를 산출하기 위해 두 서열에서 동일한 핵산 염기 또는 아미노산 잔기가 발생하는 위치의 수를 결정하고, 일치된 위치의 수를 비교 창의 총 위치의 수로 나누고, 그 결과에 100을 곱하여 서열 동일성의 백분율을 산출함으로써 계산된다.
본 명세서에서 사용되는 "비교 창"은, 예를 들어, 전장 서열 또는 20개 내지 600개, 약 50개 내지 약 200개 또는 약 100개 내지 약 150개의 아미노산 또는 뉴클레오타이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 다수의 연속 위치 중 어느 하나의 분절에 대한 참조를 포함하며, 여기서 서열은 두 서열이 최적으로 정렬된 후 동일한 수의 연속 위치의 참조 서열과 비교될 수 있다. 비교를 위한 서열의 정렬 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 비교를 위한 서열의 최적의 정렬은 예를 들어, 문헌[Smith and Waterman (1970) Adv. Appl. Math. 2:482c]의 국부 상동성 알고리즘, 문헌[Needleman and Wunsch (1970) J. Mol. Biol. 48:443]의 상동성 정렬 알고리즘, 문헌[Pearson and Lipman (1988) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444]의 유사성 방법에 대한 검색, 이러한 알고리즘의 컴퓨터 구현(위스콘신 유전학 소프트웨어 패키지(위스콘신주 매디슨 575 사이언스 드라이브 유전학 컴퓨터 그룹(GCG))의 GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA 및 TFASTA) 또는 수동 정렬 및 육안 검사(예를 들어, 문헌[Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (1995 supplement)] 참조)에 의해 수행될 수 있다.
서열 동일성 및 서열 유사성의 백분율을 결정하는데 적합한 알고리즘의 예는 각각 문헌[Altschul et al. (1977) Nuc. Acids Res. 25:3389-3402, 및 Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410]에 기술되어 있는 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘이다. BLAST 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는 국립생명공학정보센터(National Center for Biotechnology Information)(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)를 통해 공개적으로 사용 가능하다. 이러한 알고리즘은 먼저 쿼리 서열에서 길이 W의 짧은 단어를 식별하여 고득점 서열 쌍(high scoring sequence pair: HSP)을 식별하는 것을 포함하며, 이는 데이터베이스 서열에서 동일한 길이의 단어와 정렬될 때 일부 양수 역치 점수 T와 일치하거나 이를 충족한다. T는 이웃 단어 점수 역치라고 지칭된다(위의 문헌[Altschul et al.,]). 이러한 초기 이웃 단어 히트는 검색을 시작하여 이를 포함하는 더 긴 HSP를 찾기 위한 시드 역할을 한다. 누적 정렬 점수가 증가될 수 있는 한 단어 히트(hit)는 각 서열을 따라 양방향으로 확장된다. 누적 점수는 뉴클레오타이드 서열의 경우, 매개변수 M(일치하는 잔기의 쌍에 대한 보상 점수; 항상 0 초과) 및 N(일치하지 않는 잔기에 대한 패널티 점수; 항상 0 미만)을 사용하여 계산된다. 아미노산 서열의 경우, 점수 행렬은 누적 점수를 계산하는데 사용된다. 다음과 같은 경우 각 방향의 단어 히트의 연장이 중단된다: 누적 정렬 점수가 최대 달성된 값으로부터 수량 X만큼 떨어지거나; 누적 점수가 하나 이상의 음성-득점 잔기 정렬의 누적으로 인해 0 이하가 되거나; 또는 두 서열의 끝에 도달한 경우. BLAST 알고리즘 매개변수 W, T 및 X는 정렬의 민감도 및 속도를 결정한다. BLASTN 프로그램(뉴클레오타이드 서열용)은 기본값으로 단어 길이(W) 11, 기대값(E) 또는 10, M=5, N=-4 및 두 가닥의 비교를 사용한다. 아미노산 서열의 경우, BLASTP 프로그램은 기본값으로 단어 길이 3, 기대값(E) 10, BLOSUM62 득점 행렬(문헌[Henikoff and Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915] 참조) 정렬(B) 50, 기대값(E) 10, M=5, N=-4 및 두 가닥의 비교를 사용한다.
BLAST 알고리즘은 또한 두 서열 간의 유사성의 통계적 분석을 수행한다(예를 들어, 문헌[Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5787] 참조). BLAST 알고리즘에 의해 제공되는 유사성의 한 척도는 최소합 확률(P(N))이며, 이는 2개의 뉴클레오타이드 또는 아미노산 서열 간의 일치가 우연히 발생할 확률의 표시를 제공한다. 예를 들어, 테스트 핵산과 참조 핵산의 비교에서 최소합 확률이 약 0.2 미만, 보다 바람직하게는 약 0.01 미만, 가장 바람직하게는 약 0.001 미만인 경우 핵산은 참조 서열과 유사한 것으로 간주된다.
2개의 핵산 서열 또는 폴리펩타이드가 실질적으로 동일하다는 표시는 제1 핵산에 의해 암호화되는 폴리펩타이드가 아래 기재된 바와 같이 제2 핵산에 의해 암호화되는 폴리펩타이드에 대해 생성된 항체와 면역학적으로 교차 반응성이라는 것이다. 따라서, 폴리펩타이드는 전형적으로 제2 폴리펩타이드와 실질적으로 동일하며, 예를 들어, 2개의 펩타이드는 보존적 치환에 의해서만 상이하다. 2개의 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 또 다른 표시는 2개의 분자 또는 이의 보체가 아래 기재된 바와 같이 엄격한 조건하에 서로 혼성화된다는 것이다. 2개의 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 또 다른 표시는 동일한 프라이머가 서열을 증폭시키는데 사용될 수 있다는 것이다.
항체는 복잡한 내부 구조를 갖는 크고 복잡한 분자(분자량이 약 150,000 또는 약 1320인 아미노산)이다. 천연 항체 분자는 2개의 동일한 폴리펩타이드 사슬 쌍을 포함하며, 각 쌍은 하나의 경쇄 및 하나의 중쇄를 갖는다. 각각의 경쇄 및 중쇄는 차례로 다음 2개의 영역으로 구성된다: 표적 항원 결합에 관여하는 가변("V") 영역 및 면역계의 다른 구성요소와 상호작용하는 불변("C") 영역. 경쇄 및 중쇄 가변 영역(본 명세서에서 각각 경쇄 가변(VL) 도메인 및 중쇄 가변(VH) 도메인으로도 지칭됨)은 3차원 공간에서 함께 모여 항원(예를 들어, 세포 표면의 수용체)에 결합하는 가변 영역을 형성한다. 각 경쇄 또는 중쇄 가변 영역 내에는, 상보성 결정 영역("CDR")이라고 하는 3개의 짧은 분절(평균 10개의 아미노산 길이)이 있다. 항체 가변 도메인의 6개의 CDR(경쇄로부터 3개 및 중쇄로부터 3개)은 3차원 공간에서 함께 접혀 표적 항원에 도킹하는 실제 항체 결합 부위를 형성한다. CDR의 위치 및 길이는 문헌[Kabat, E. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and Human Services, 1983, 1987]에 의해 정확하게 정의되어 있다. CDR에 포함되지 않은 가변 영역의 일부는 CDR의 환경을 형성하는 프레임워크("FR")라 한다.
본 명세서에 제공된 "항체 변이체"는 항원에 결합할 수 있고 항체 또는 이의 단편의 하나 이상의 구조적 도메인(예를 들어, 경쇄 가변 도메인, 중쇄 가변 도메인)을 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다. 항체 변이체의 비제한적인 예는 단일-도메인 항체 또는 나노바디, 단일특이성 Fab2, 이중특이성 Fab2, 삼중특이성 Fab3, 1가 IgG, scFv, 이중특이성 항체, 이중특이성 다이어바디, 삼중특이성 트라이어바디, scFv-Fc, 미니바디, IgNAR, V-NAR, hcIgG, VhH 또는 펩타이바디를 포함한다. 본 명세서에 제공된 "펩타이바디"는 항체의 Fc 도메인에 부착된(공유 또는 비-공유 링커를 통해) 펩타이드 모이어티를 지칭한다. 당업계에 공지된 항체 변이체의 추가의 비제한적인 예는 연골 어류 또는 낙타과에 의해 생성된 항체를 포함한다. 낙타과로부터의 항체와 이의 가변 영역 및 이의 생산, 단리 및 사용 방법의 일반적인 설명은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용되어 있는 참고문헌 WO97/49805 및 WO 97/49805에서 찾을 수 있다. 마찬가지로, 연골 어류로부터의 항체와 이의 가변 영역 및 이의 생산, 단리 및 사용 방법은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용되어 있는 WO2005/118629에서 찾을 수 있다.
본 명세서에 제공된 용어 "CDR L1", "CDR L2" 및 "CDR L3"은 항체의 가변 경쇄(L)의 상보성 결정 영역(CDR) 1, 2 및 3을 지칭한다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 가변 경쇄는 N-말단에서 C-말단 방향으로 CDR L1, CDR L2 및 CDR L3을 포함한다. 마찬가지로, 본 명세서에 제공된 용어 "CDR H1", "CDR H2" 및 "CDR H3"은 항체의 가변 중쇄(H)의 상보성 결정 영역(CDR) 1, 2 및 3을 지칭한다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 가변 중쇄는 N-말단에서 C-말단 방향으로 CDR H1, CDR H2 및 CDR H3을 포함한다.
본 명세서에 제공된 용어 "FR L1", "FR L2", "FR L3" 및 "FR L4"는 당업계에서의 이들의 공통된 의미에 따라 사용되며, 항체의 가변 경쇄(L)의 프레임워크 영역(FR) 1, 2, 3 및 4를 지칭한다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 가변 경쇄는 N-말단에서 C-말단 방향으로 FR L1, FR L2, FR L3 및 FR L4를 포함한다. 마찬가지로, 본 명세서에 제공된 용어 "FR H1", "FR H2", "FR H3" 및 "FR H4"는 당업계에서의 이들의 공통된 의미에 따라 사용되며, 항체의 가변 중쇄(H)의 프레임워크 영역(FR) 1, 2, 3 및 4를 지칭한다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 가변 중쇄는 N-말단에서 C-말단 방향으로 FR H1, FR H2, FR H3 및 FR H4를 포함한다.
예시적인 면역글로불린(항체) 구조적 단위는 사량체를 포함한다. 각 사량체는 2개의 동일한 폴리펩타이드 사슬 쌍으로 구성되며, 각 쌍은 하나의 "경쇄"(약 25kD) 및 하나의 "중쇄"(약 50kD 내지 70kD)를 갖는다. 각 사슬의 N-말단은 항원 인식을 주로 담당하는 약 100개 내지 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 정의한다. 용어 가변 경쇄(VL), 가변 경쇄(VL) 도메인 또는 경쇄 가변 영역 및 가변 중쇄(VH), 가변 중쇄(VH) 도메인 또는 중쇄 가변 영역은 각각 이들 경쇄 및 중쇄 영역을 지칭한다. 본 명세서에서 지칭되는 바와 같은 용어 가변 경쇄(VL), 가변 경쇄(VL) 도메인 및 경쇄 가변 영역은 상호교환적으로 사용될 수 있다. 본 명세서에서 지칭되는 바와 같은 용어 가변 중쇄(VH), 가변 중쇄(VH) 도메인 및 중쇄 가변 영역은 상호교환적으로 사용될 수 있다. Fc(즉, 단편 결정화 가능 영역)는 면역글로불린의 "염기" 또는 "꼬리"이며, 전형적으로 항체의 클래스에 따라 2개 또는 3개의 불변 도메인에 기여하는 2개의 중쇄로 구성된다. 특정 단백질에 결합함으로써, Fc 영역은 각 항체가 주어진 항원에 대한 적절한 면역 반응을 생성하도록 보장한다. Fc 영역은 또한 Fc 수용체와 같은 다양한 세포 수용체 및 보체 단백질과 같은 다른 면역 분자에 결합한다.
용어 "항체"는 당업계에 일반적으로 알려진 의미에 따라 사용된다. 항체는, 예를 들어, 온전한 면역글로불린 또는 다양한 펩티데이스를 이용한 소화에 의해 생성된 다수의 잘 특성화된 단편으로 존재한다. 따라서, 예를 들어, 펩신은 이황화 결합에 의해 VH-CH1에 연결된 경쇄인 Fab의 이량체인 F(ab)'2를 생성하기 위해 힌지 영역에서 이황화 연결 아래에 있는 항체를 소화한다. F(ab)'2는 온화한 조건하에서 환원되어 힌지 영역에서 이황화 연결을 파괴함으로써 F(ab)'2 이량체를 Fab' 단량체로 전환시킬 수 있다. Fab' 단량체는 본질적으로 힌지 영역의 일부가 있는 Fab이다(문헌[Paul ed., 3d ed. 1993] 참조). 다양한 항체 단편이 온전한 항체의 소화의 관점에서 정의되지만, 당업자는 이러한 단편이 화학적으로 또는 재조합 DNA 방법론을 사용하여 새로 합성될 수 있음을 이해할 것이다. 따라서, 본 명세서에서 사용되는 용어 항체는 또한 전체 항체의 변형에 의해 생성된 항체 단편 또는 재조합 DNA 방법론을 사용하여 새로 합성된 항체 단편(예를 들어, 단일쇄 Fv) 또는 파지 디스플레이 라이브러리를 사용하여 확인된 항체 단편을 포함한다(예를 들어, 문헌[McCafferty et al., Nature 348:552-554(1990)] 참조). 본 명세서에서 언급된 용어 "항체"는 단일 도메인 항체와 같은 항체 변이체를 추가로 포함한다. 따라서, 실시형태에서, 항체는 단일 단량체 가변 항체 도메인을 포함한다. 따라서, 실시형태에서, 항체는 가변 경쇄(VL) 도메인 또는 가변 중쇄(VH) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 가변 경쇄(VL) 도메인 또는 가변 중쇄(VH) 도메인을 포함한다.
단일클론 또는 다중클론 항체의 제조를 위해, 당업계에 공지된 임의의 기법이 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Kohler & Milstein, Nature 256:495-497 (1975); Kozbor et al., Immunology Today 4:72 (1983); Cole et al., pp. 77-96 in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy (1985)] 참조). "단일클론" 항체(mAb)는 단일 클론으로부터 유래되는 항체를 지칭한다. 단일쇄 항체의 생산을 위한 기법(미국 특허 제4,946,778호)은 본 발명의 폴리펩타이드에 대한 항체를 생산하기 위해 적합화될 수 있다. 또한, 형질전환 마우스 또는 다른 포유동물과 같은 다른 유기체가 인간화된 항체를 발현하는데 사용될 수 있다. 대안적으로, 파지 디스플레이 기술은 선택된 항원에 특이적으로 결합하는 항체 및 이종체성 Fab 단편을 확인하는데 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[McCafferty et al., Nature 348:552-554 (1990); Marks et al., Biotechnology 10:779-783 (1992)] 참조).
단일-사슬 가변 단편(scFv)은 전형적으로 10개 내지 약 25개의 아미노산의 짧은 링커 펩타이드와 연결된 면역글로불린의 중쇄(VH) 및 경쇄(VL)의 가변 영역의 융합 단백질이다. 링커는 일반적으로 유연성을 위해 글리신이 풍부할 뿐만 아니라 용해성을 위해 세린 또는 트레오닌이 풍부할 수 있다. 링커는 VH의 N-말단과 VL의 C-말단을 연결하거나 또는 그 반대로 연결할 수 있다.
mAb의 에피토프는 mAb가 결합하는 항원의 영역이다. 2개의 항체는 각각이 다른 항체가 항원에 결합하는 것을 경쟁적으로 저해(차단)하는 경우 동일하거나 또는 중첩되는 에피토프에 결합한다. 즉, 한 항체의 1x, 5x, 10x, 20x 또는 100x 과량은 경쟁적 결합 검정에서 측정되는 바와 같이 적어도 30%, 그러나 바람직하게는 50%, 75%, 90% 또는 심지어 99%까지 다른 항체의 결합을 저해한다(예를 들어, 문헌[Junghans et al., Cancer Res. 50:1495, 1990] 참조). 대안적으로, 본질적으로 한 항체의 결합을 감소시키거나 또는 제거하는 항원의 모든 아미노산 돌연변이가 다른 항체의 결합을 감소시키거나 또는 제거하는 경우, 두 항체는 동일한 에피토프를 갖는다. 한 항체의 결합을 감소시키거나 또는 제거하는 일부 아미노산 돌연변이가 다른 항체의 결합을 감소시키거나 또는 제거하는 경우, 두 항체는 중첩되는 에피토프를 갖는다.
본 발명에 적합한 항체의 제조 및 본 발명에 따른 사용을 위해, 예를 들어, 재조합, 단일클론 또는 다중클론 항체를 위해, 당업계에 공지된 많은 기법이 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Kohler & Milstein, Nature 256:495-497 (1975); Kozbor et al., Immunology Today 4: 72 (1983); Cole et al., pp. 77-96 in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc. (1985); Coligan, Current Protocols in Immunology (1991); Harlow & Lane, Antibodies, A Laboratory Manual (1988); 및 Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice (2d ed. 1986)] 참조). 관심 항체의 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 유전자는 세포로부터 클로닝될 수 있고, 예를 들어, 단일클론 항체를 암호화하는 유전자는 하이브리도마로부터 클로닝되고 재조합 단일클론 항체를 생산하는데 사용될 수 있다. 단일클론 항체의 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 유전자 라이브러리가 또한 하이브리도마 또는 형질 세포로부터 제조될 수 있다. 중쇄 및 경쇄 유전자 산물의 무작위 조합은 상이한 항원 특이성을 갖는 많은 항체의 풀을 생성한다(예를 들어, 문헌[Kuby, Immunology(3rd ed. 1997)] 참조). 단일쇄 항체 또는 재조합 항체를 생산하는 기법(미국 특허 제4,946,778호, 미국 특허 제4,816,567호)은 본 발명의 폴리펩타이드에 대한 항체를 생산하도록 적합화될 수 있다. 또한, 형질전환 마우스 또는 다른 포유동물과 같은 다른 유기체가 인간화된 또는 인간 항체를 발현하는데 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제5,545,807호; 제5,545,806호; 제5,569,825호; 제5,625,126호; 제5,633,425호; 제5,661,016호, 문헌[Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992); Lonberg et al., Nature 368:856-859 (1994); Morrison, Nature 368:812-13 (1994); Fishwild et al., Nature Biotechnology 14:845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology 14:826 (1996); 및 Lonberg & Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995)] 참조). 대안적으로, 파지 디스플레이 기술이 선택된 항원에 특이적으로 결합하는 항체 및 이종체성 Fab 단편을 확인하는데 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[McCafferty et al., Nature 348:552-554 (1990); Marks et al., Biotechnology 10:779-783 (1992)] 참조). 이중특이성인 항체, 즉, 2개의 상이한 항원을 인식할 수 있는 항체가 또한 제조될 수 있다(예를 들어, WO 93/08829, 문헌[Traunecker et al., EMBO J. 10:3655-3659 (1991); 및 Suresh et al., Methods in Enzymology 121:210 (1986)] 참조). 항체는 또한 이종접합체, 예를 들어, 2개의 공유적으로 연결된 항체 또는 면역독소일 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제4,676,980호, WO 91/00360; WO 92/200373; 및 EP 03089 참조).
비-인간 항체를 인간화하거나 또는 영장류화하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있다(예를 들어, 미국 특허 제4,816,567호; 제5,530,101호; 제5,859,205호; 제5,585,089호; 제5,693,761호; 제5,693,762호; 제5,777,085호; 제6,180,370호; 제6,210,671호; 및 제6,329,511호; WO 87/02671; EP 출원 제0173494호; 문헌[Jones et al. (1986) Nature 321:522; 및 Verhoyen et al. (1988) Science 239:1534]). 인간화된 항체는, 예를 들어, 문헌[Winter and Milstein(1991) Nature 349:293]에 추가로 기술되어 있다. 일반적으로, 인간화된 항체는 비-인간 공급원으로부터 도입된 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는다. 이러한 비-인간 아미노산 잔기는 종종 전형적으로 유입 가변 도메인으로부터 취해지는 유입 잔기(import residue)로 지칭된다. 인간화는 인간 항체의 상응하는 서열을 설치류의 CDR 또는 CDR 서열로 치환함으로써 본질적으로 Winter 및 동료들의 방법에 따라 수행될 수 있다(예를 들어, 문헌[Morrison et al., PNAS USA, 81:6851-6855 (1984), Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Morrison and Oi, Adv. Immunol., 44:65-92 (1988), Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988) and Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992), Padlan, Molec. Immun., 28:489-498 (1991); Padlan, Molec. Immun., 31(3):169-217 (1994)] 참조). 따라서, 이러한 인간화된 항체는 키메라 항체이며(미국 특허 제4,816,567호), 여기서 온전한 인간 가변 도메인보다 실질적으로 더 적은 수가 비-인간 종으로부터의 상응하는 서열로 치환되었다. 실제로, 인간화된 항체는 전형적으로 일부 CDR 잔기 및 가능하게는 일부 FR 잔기가 설치류 항체의 유사한 부위로부터의 잔기로 치환된 인간 항체이다. 예를 들어, 인간화된 면역글로불린 프레임워크 영역을 코딩하는 제1 서열 및 목적하는 면역글로불린 상보성 결정 영역을 코딩하는 제2 서열 세트를 포함하는 폴리뉴클레오타이드가 합성적으로 또는 적절한 cDNA와 게놈 DNA 분절을 조합함으로써 생성될 수 있다. 인간 불변 영역 DN서열은 다양한 인간 세포로부터 잘 알려진 절차에 따라 단리될 수 있다.
"키메라 항체"는 (a) 불변 영역 또는 이의 일부가 항원 결합 부위(가변 영역)가 상이하거나 또는 변경된 클래스의 불변 영역, 효과기 기능 및/또는 키메라 항체에 새로운 특성을 부여하는 종 또는 완전히 상이한 분자, 예를 들어, 효소, 독소, 호르몬, 성장 인자, 약물 등에 연결되도록 변경, 대체 또는 교환되거나; 또는 (b) 가변 영역 또는 이의 일부가 상이하거나 또는 변경된 항원 특이성을 갖는 가변 영역으로 변경, 대체 또는 교환된 항체 분자이다. 본 발명에 따라 사용하기 위한 바람직한 항체는 인간화된 및/또는 키메라 단일클론 항체를 포함한다.
단백질 또는 펩타이드를 언급할 때, 어구 항체에 "특이적으로(또는 선택적으로) 결합"하거나 또는 항체와 "특이적으로(또는 선택적으로) 면역반응성인"은 단백질 및 기타 생물학적 제제의 이종 집단에서 단백질의 존재를 결정하는 결합 반응을 지칭한다. 따라서, 지정된 면역검정 조건하에서, 명시된 항체는 배경의 적어도 2배, 보다 전형적으로 배경의 10배 내지 100배 초과로 특정 단백질에 결합한다. 이러한 조건하에서 항체에 대한 특이적 결합은 특정 단백질에 대한 특이성을 위해 선택된 항체를 필요로 한다. 예를 들어, 다중클론 항체는 선택된 항원과 특이적으로 면역반응성이 있고 다른 단백질과는 반응하지 않는 항체의 서브세트만을 얻기 위해 선택될 수 있다. 이러한 선택은 다른 분자와 교차 반응하는 항체를 뺌으로써 달성될 수 있다. 다양한 면역검정 형식이 특정 단백질과 특이적으로 면역반응성인 항체를 선택하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 고체상 ELISA 면역검정은 단백질과 특이적으로 면역반응성인 항체를 선택하는데 일상적으로 사용된다(예를 들어, 특정 면역반응성을 결정하는데 사용될 수 있는 면역검정 형식 및 조건에 대한 설명에 대해 문헌[Harlow & Lane, Using Antibodies, A Laboratory Manual (1998)] 참조).
"리간드"는 수용체 또는 항체, 항체 변이체, 항체 영역 또는 이의 단편에 결합할 수 있는 작용제, 예를 들어, 폴리펩타이드 또는 다른 분자를 지칭한다.
치료제를 항체에 접합시키는 기법은 잘 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Arnon et al., "Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery"in Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review" in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); 및 Thorpe et al., "The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev., 62:119-58 (1982)] 참조). 본 명세서에서 사용되는 용어 "항체-약물 접합체" 또는 "ADC"는 항체에 접합되거나 또는 그렇지 않으면 공유적으로 결합된 치료제를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "ROR2 단백질" 또는 "ROR2"는 타이로신-단백질 카이네이스 막관통 수용체 ROR2, 신경영양성 타이로신 카이네이스 수용체-관련 2로도 알려져 있는 수용체 타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 ROR2 활성(예를 들어, ROR2와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 ROR2 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18에 의해 확인된 단백질과 실질적으로 동일하다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 UniProt 참조 번호 Q01974에 의해 확인되는 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 UniProt 참조 번호 A1L4F5에 의해 확인되는 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 UniProt 참조 번호 Q8C3W2에 의해 확인되는 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에 기재된 특정 단백질의 경우, 명명된 단백질은 임의의 단백질의 자연 발생적 형태, 단백질 전사 인자 활성(예를 들어, 천연 단백질과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 형태와 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 다른 실시형태에서, 단백질은 이의 NCBI 서열 참조에 의해 확인되는 단백질이다. 다른 실시형태에서, 단백질은 이의 NCBI 서열 참조, 이의 상동체 또는 기능적 단편에 의해 확인된 단백질이다.
용어 "유전자"는 단백질 생성에 관여하는 DNA의 분절을 의미하며; 이는 개별 코딩 분절(엑손) 사이의 코딩 영역 앞뒤의 영역(리더 및 트레일러)뿐만 아니라 개재 서열(인트론)을 포함한다. 리더, 트레일러뿐만 아니라 인트론은 유전자의 전사 및 번역 동안 필요한 조절 요소를 포함한다. 또한, "단백질 유전자 산물"은 특정 유전자로부터 발현되는 단백질이다.
용어 "플라스미드", "벡터" 또는 "발현 벡터"는 유전자 및/또는 유전자의 발현에 필요한 조절 요소를 암호화하는 핵산 분자를 지칭한다. 플라스미드로부터 유전자의 발현은 시스(in cis) 또는 트랜스(in trans)로 발생할 수 있다. 유전자가 시스로 발현되는 경우, 유전자 및 조절 요소는 동일한 플라스미드에 의해 암호화된다. 트랜스로 발현은 유전자 및 조절 요소가 별도의 플라스미드에 의해 암호화되는 경우를 지칭한다.
용어 "형질감염", "형질도입", "형질감염시키는" 또는 "형질도입시키는"은 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 핵산 분자 또는 단백질을 세포에 도입하는 과정으로 정의된다. 핵산은 비-바이러스 또는 바이러스-기반 방법을 사용하여 세포에 도입된다. 핵산 분자는 완전한 단백질 또는 이의 기능적 부분을 암호화하는 유전자 서열일 수 있다. 비-바이러스 형질감염 방법은 핵산 분자를 세포에 도입하기 위한 전달 시스템으로서 바이러스 DNA 또는 바이러스 입자를 사용하지 않는 임의의 적절한 형질감염 방법을 포함한다. 예시적인 비-바이러스 형질감염 방법은 칼슘 포스페이트 형질감염, 리포솜 형질감염, 뉴클레오펙션, 소노포레이션, 열 충격, 자기화 및 전기천공을 통한 형질감염을 포함한다. 일부 실시형태에서, 핵산 분자는 당업계에 잘 알려진 표준 절차에 따라 전기천공을 사용하여 세포에 도입된다. 바이러스-기반 형질감염 방법의 경우, 임의의 유용한 바이러스 벡터가 본 명세서에 기재된 방법에 사용될 수 있다. 바이러스 벡터에 대한 예는 레트로바이러스, 아데노바이러스, 렌티바이러스 및 아데노-관련 바이러스 벡터를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 핵산 분자는 당업계에 잘 알려진 표준 절차에 따라 레트로바이러스 벡터를 사용하여 세포에 도입된다. 용어 "형질감염" 또는 "형질도입"은 또한 외부 환경으로부터 세포에 단백질을 도입하는 것을 지칭한다. 전형적으로, 단백질의 형질도입 또는 형질감염은 관심 단백질에 대해 세포막을 횡단할 수 있는 펩타이드 또는 단백질의 부착에 의존한다. 예를 들어, 문헌[Ford et al. (2001) Gene Therapy 8:1-4 및 Prochiantz (2007) Nat. Methods 4:119-20] 참조.
"표지" 또는 "검출 가능한 모이어티"는 분광, 광화학적, 생화학적, 면역화학적, 화학적 또는 다른 물리적 수단에 의해 검출 가능한 조성물이다. 예를 들어, 유용한 표지는, 예를 들어, 방사성표지를 표적 펩타이드와 특이적으로 반응하는 펩타이드 또는 항체에 혼입시킴으로써 검출 가능하게 만들 수 있는 32P, 형광 염료, 전자-밀도 시약, 효소(예를 들어, ELISA에서 일반적으로 사용됨), 바이오틴, 디곡시제닌 또는 합텐 및 단백질 또는 다른 엔티티를 포함한다. 항체를 표지에 접합시키기 위해, 예를 들어, 문헌[Hermanson, Bioconjugate Techniques 1996, Academic Press, Inc., San Diego]에 기술되어 있는 방법을 사용하는 당업계에 공지된 임의의 적절한 방법이 사용될 수 있다.
표지 또는 검출 가능한 모이어티가 방사성 금속 또는 상자성 이온인 경우, 작용제는 이들 이온에 결합하기 위해 긴 꼬리에 부착된 하나 이상의 킬레이트기를 갖는 긴 꼬리를 갖는 또 다른 긴 꼬리 시약과 반응할 수 있다. 긴 꼬리는 폴리라이신, 다당류 또는 결합을 위해 금속 또는 이온이 추가될 수 있는 펜던트기를 갖는 기타 유도체화되거나 또는 유도체화 가능한 사슬과 같은 중합체일 수 있다. 본 개시내용에 따라 사용될 수 있는 킬레이트기의 예는 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA), 다이에틸렌트라이아민펜타아세트산(DTPA), DOTA, NOTA, NETA, TETA, 포르피린, 폴리아민, 크라운 에터, 비스-티오세미카바존, 폴리옥심 및 유사한 기를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 킬레이트는 일반적으로 기에 의해 PSMA 항체 또는 기능적 항체 단편에 연결되며, 이는 면역반응성의 손실을 최소화하고 응집 및/또는 내부 가교를 최소화하면서 분자에 대한 결합을 형성할 수 있다. 망가니즈, 철 및 가돌리늄과 같은 비-방사성 금속과 착물을 형성할 때, 동일한 킬레이트가 본 명세서에 기재된 항체 및 담체와 함께 사용될 때 MRI에 유용하다. NOTA, DOTA 및 TETA와 같은 거대고리형 킬레이트는 각각 다양한 금속 및 갈륨, 이트륨 및 구리의 방사성 핵종을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 방사성 금속과 함께 사용된다. RAIT의 경우 223Ra와 같은 핵종을 안정적으로 결합시키는데 관심이 있는 거대고리형 폴리에터와 같은 다른 고리형 킬레이트가 사용될 수 있다. 소정의 실시형태에서, 킬레이트 모이어티는 PET 분석에 사용하기 위한 표적화 분자에 Al-18F 복합체와 같은 PET 조영제를 부착하는데 사용될 수 있다.
"접촉"은 그저 일반적인 의미에 따라 사용되며, 적어도 2개의 별개의 종(예를 들어, 항체 및 항원)이 반응, 상호작용 또는 물리적으로 접촉하기에 충분히 근접하게 되는 과정을 지칭한다. 그러나, 생성된 반응 생성물은 첨가된 시약 간의 반응으로부터 또는 반응 혼합물에서 생성될 수 있는 하나 이상의 첨가된 시약으로부터의 중간체로부터 직접 생성될 수 있음을 이해하여야 한다.
용어 "접촉"은 2개의 종이 반응, 상호작용 또는 물리적으로 접촉하도록 하는 것을 포함할 수 있되, 2개의 종은, 예를 들어, 본 명세서에 제공된 바와 같은 약제학적 조성물 및 세포일 수 있다. 실시형태에서, 접촉은, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 약제학적 조성물이 세포와 상호작용하도록 하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 "세포"는 이의 게놈 DNA를 보존하거나 또는 복제하기에 충분한 대사 또는 다른 기능을 수행하는 세포를 지칭한다. 세포는, 예를 들어, 온전한 막의 존재, 특정 염료에 의한 염색, 자손을 생성하는 능력 또는 생식세포의 경우 생존 가능한 자손을 생성하기 위해 제2 생식세포와 결합하는 능력을 포함하는 당업계에 잘 알려진 방법에 의해 확인될 수 있다. 세포는 원핵생물 및 진핵생물 세포를 포함할 수 있다. 원핵생물 세포는 세균을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 진핵생물 세포는 효모 세포, 및 식물 및 동물, 예를 들어, 포유동물, 곤충(예를 들어, 스포돕테라) 및 인간 세포로부터 유래되는 세포를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
예를 들어, 세포, 핵산, 단백질 또는 벡터와 관련하여 사용될 때 용어 "재조합"은 세포, 핵산, 단백질 또는 벡터가 이종 핵산 또는 단백질의 도입 또는 천연 핵산 또는 단백질의 변경에 의해 변형되었거나 또는 세포가 그렇게 변형된 세포로부터 유래됨을 나타낸다. 따라서, 예를 들어, 재조합 세포는 세포의 천연(비-재조합) 형태 내에서 발견되지 않는 유전자를 발현하거나 또는 그렇지 않으면 비정상적으로 발현되거나, 과소발현되거나 또는 전혀 발현되지 않는 천연 유전자를 발현한다. 형질전환 세포 및 식물은 전형적으로 재조합 방법의 결과로서 이종 유전자 또는 코딩 서열을 발현하는 것이다.
핵산 또는 단백질에 적용될 때 용어 "단리된"은 핵산 또는 단백질이 본질적으로 자연 상태에서 회합되는 다른 세포 성분이 본질적으로 없음을 의미한다. 이는, 예를 들어, 균질 상태일 수 있으며, 건조물 또는 수용액일 수 있다. 순도 및 균질성은 전형적으로 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동 또는 고성능 액체 크로마토그래피와 같은 분석 화학 기법을 사용하여 결정된다. 제제에 존재하는 주요 종인 단백질은 실질적으로 순수하다.
핵산의 일부와 관련하여 사용될 때 용어 "이종"은 핵산이 자연에서 서로 동일한 관계로 발견되지 않는 2개 이상의 하위서열을 포함함을 나타낸다. 예를 들어, 새로운 기능적 핵산을 만들기 위해 배열된 관련되지 않은 유전자로부터의 2개 이상의 서열, 예를 들어, 하나의 공급원으로부터의 프로모터 및 또 다른 공급원으로부터의 코딩 영역을 갖는 핵산이 전형적으로 재조합적으로 생산된다. 유사하게는, 이종 단백질은 단백질이 자연에서 서로 동일한 관계로 발견되지 않는 2개 이상의 하위서열을 포함함(예를 들어, 융합 단백질)을 나타낸다.
용어 "외인성"은 주어진 세포 또는 유기체 외부에서 유래하는 분자 또는 물질(예를 들어, 화합물, 핵산 또는 단백질)을 지칭한다. 예를 들어, 본 명세서에서 언급되는 "외인성 프로모터"는 그것이 발현되는 세포 또는 유기체로부터 유래하지 않는 프로모터이다. 반대로, 용어 "내인성" 또는 "내인성 프로모터"는 주어진 세포 또는 유기체에 고유하거나 또는 그 내부에서 기원하는 분자 또는 물질을 지칭한다.
본 명세서에 정의된 바와 같이, 세포 증식(예를 들어, 암세포 증식)과 관련하여 용어 "저해", "저해하다", "저해하는" 등은 세포에 부정적인 영향을 미치거나(예를 들어, 증식 감소) 세포를 죽이는 것을 의미한다. 일부 실시형태에서, 저해는 질환 또는 질환의 증상(예를 들어, 암, 암세포 증식)의 감소를 지칭한다. 따라서, 저해는 자극을 적어도 부분적으로, 부분적으로 또는 완전히 차단하는 것, 활성화를 감소, 방지 또는 지연시키는 것 또는 신호 전달 또는 효소 활성 또는 단백질(예를 들어, ROR2 단백질)의 양을 불활성화, 탈감작화 또는 하향조절하는 것을 포함한다. 유사하게는, "저해제"는, 예를 들어, 결합, 활성(예를 들어, 수용체 활성 또는 단백질 활성)을 부분적으로 또는 완전히 차단, 감소, 방지, 지연, 불활성화, 탈감작화 또는 하향조절함으로써 수용체 또는 또 다른 단백질을 저해하는 화합물 또는 단백질이다.
본 명세서에 정의된 바와 같이, 단백질-저해제 상호작용과 관련하여 용어 "저해", "저해해다", "저해하는"등은 저해제의 부재시에 단백질의 활성 또는 기능에 비해 단백질(예를 들어, ROR2 단백질)의 활성 또는 기능에 부정적인 영향을 미침(예를 들어, 감소)을 의미한다. 실시형태에서, 저해는 저해제의 부재시에 단백질의 농도 또는 수준에 비하여 ROR2의 농도 또는 수준에 부정적인 영향을 미침(예를 들어, 감소)을 의미한다. 실시형태에서, 저해는 질환 또는 질환의 증상의 감소를 지칭한다. 실시형태에서, 저해는 ROR2 활성의 감소를 지칭한다. 따라서, 저해는 자극을 적어도 부분적으로, 부분적으로 또는 완전히 차단하는 것, 활성화를 감소, 방지 또는 지연시키는 것 또는 신호 전달 또는 효소 활성 또는 ROR2의 양을 불활성화, 탈감작화 또는 하향조절하는 것을 포함한다. 실시형태에서, 저해는 직접적인 상호작용(예를 들어, 저해제가 ROR2에 결합함)으로 인한 ROR2의 활성의 감소를 지칭한다. 실시형태에서, 저해는 간접적인 상호작용(예를 들어, 저해제가 ROR2를 활성화하는 단백질에 결합하여 표적 단백질 활성화를 방지함)으로 인한 ROR2의 활성의 감소를 지칭한다.
따라서, 용어 "저해제", "억제제" 또는 "길항제" 또는 "하향조절제"는 주어진 유전자 또는 단백질(예를 들어, ROR2 단백질)의 발현 또는 활성을 검출 가능하게 감소시킬 수 있는 물질을 상호교환적으로 지칭한다. 길항제는 길항제의 부재시에 대조군과 비교하여 ROR2 발현 또는 활성을 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상 감소시킬 수 있다. 소정의 예에서, ROR2 발현 또는 활성은 길항제의 부재시에 발현 또는 활성보다 1.5-배, 2-배, 3-배, 4-배, 5-배, 10-배 이하이다.
용어 "발현"은 전사, 전사 후 변형, 번역, 번역 후 변형 및 분비를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 폴리펩타이드의 생산에 관련된 임의의 단계를 포함한다. 발현은 단백질을 검출하기 위한 종래의 기법(예를 들어, ELISA, 웨스턴 블로팅, 유세포 분석, 면역형광, 면역조직화학 등)을 사용하여 검출될 수 있다.
"생물학적 샘플" 또는 "샘플"은 대상체 또는 환자로부터 얻어지거나 또는 이들로부터 유래되는 물질을 지칭한다. 생물학적 샘플은 생검 및 부검 샘플과 같은 조직의 절편 및 조직학적 목적으로 채취된 동결 절편을 포함한다. 이러한 샘플은 혈액 및 혈액 분획 또는 생성물(예를 들어, 혈청, 혈장, 혈소판, 적혈구 등)과 같은 체액, 가래, 조직, 배양된 세포(예를 들어, 1차 배양물, 외식편 및 형질전환된 세포), 대변, 소변, 활액, 관절 조직, 활막 조직, 활막세포, 섬유아세포-유사 활막세포, 대식세포-유사 활막세포, 면역 세포, 조혈 세포, 섬유아세포, 대식세포, T 세포 등을 포함한다. 생물학적 샘플은 전형적으로 진핵생물 유기체, 예를 들어, 침팬지 또는 인간과 같은 포유동물; 소; 개; 고양이; 설치류, 예를 들어, 기니피그, 래트, 마우스; 토끼; 또는 새; 파충류; 또는 어류로부터 얻어진다.
"대조군" 또는 "표준 대조군"은 테스트 샘플, 측정값 또는 값과 비교하기 위해 참조, 일반적으로 공지된 참조 역할을 하는 샘플, 측정값 또는 값을 지칭한다. 예를 들어, 테스트 샘플은 주어진 질환(예를 들어, 암)이 있는 것으로 의심되는 환자로부터 채취되고, 알려진 정상적인(비질환) 개체(예를 들어, 표준 대조군 대상체)와 비교될 수 있다. 표준 대조군은 또한 주어진 질환이 없는 유사한 개체(예를 들어, 표준 대조군 대상체)의 집단(즉, 표준 대조군 집단), 예를 들어, 유사한 의학적 배경, 동일한 연령, 체중 등을 가진 건강한 개체로부터 수집된 평균 측정값 또는 값을 나타낼 수 있다. 표준 대조군 값은 또한 동일한 개체, 예를 들어, 질환이 발병하기 전 환자로부터 더 일찍 얻어진 샘플로부터 얻어질 수 있다. 예를 들어, 대조군은 약리학적 데이터(예를 들어, 반감기) 또는 치료적 조치(예를 들어, 부작용의 비교)를 기반으로 치료적 이점을 비교하기 위해 고안될 수 있다. 대조군은 또한 데이터의 유의성을 결정하는 데에도 유용하다. 예를 들어, 주어진 매개변수에 대한 값이 대조군에서 광범위하게 변하는 경우, 테스트 샘플의 변이는 유의미한 것으로 간주되지 않을 것이다. 당업자는 표준 대조군이 임의의 수의 매개변수(예를 들어, RNA 수준, 단백질 수준, 특정 세포 유형, 특정 체액, 특정 조직 등)의 평가를 위해 설계될 수 있음을 인식할 것이다.
당업자는 표준 대조군이 주어진 상황에서 가장 적절한지 이해하며, 표준 대조군 값과의 비교에 기초하여 데이터를 분석할 수 있을 것이다. 표준 대조군은 데이터의 유의성(예를 들어, 통계적 유의성)을 결정하는 데에도 유용하다. 예를 들어, 주어진 매개변수에 대한 값이 표준 대조군에서 광범위하게 변하는 경우, 테스트 샘플의 변이는 유의미한 것으로 간주되지 않을 것이다.
"환자" 또는 "이를 필요로 하는 대상체"는 본 명세서에 제공된 바와 같은 조성물 또는 약제학적 조성물의 투여에 의해 치료될 수 있는 질환 또는 병태를 앓고 있거나 또는 이에 걸리기 쉬운 살아 있는 유기체를 지칭한다. 비제한적인 예는 인간, 다른 포유동물, 소, 래트, 마우스, 개, 원숭이, 염소, 양, 젖소, 사슴 및 다른 비-포유동물을 포함한다. 일부 실시형태에서, 환자는 인간이다.
용어 "질환" 또는 "병태"는 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 환자 또는 대상체의 상태 또는 건강 상태를 지칭한다. 질환은 암일 수 있다. 암은 고형 악성 종양을 지칭할 수 있다. 고형 악성 종양은 체액 또는 낭종이 없을 수 있는 악성 종양을 포함한다. 예를 들어, 고형 악성 종양은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암을 포함할 수 있다. 일부 추가의 예에서, "암"은 인간 암 및 암종, 육종, 선암종, 림프종, 고형암 및 림프암을 포함하는 백혈병, 신장암, 유방암, 폐암, 방광암, 결장암, 난소암, 전립선암, 췌장암, 위암, 뇌암, 두경부암, 피부암, 자궁암, 고환암, 신경교종, 식도암 및 간암종을 포함하는 간암, B-급성 림프아구성 림프종, 비-호지킨 림프종(예를 들어, 버킷, 소세포 및 대세포 림프종), 호지킨 림프종을 포함하는 림프종, 백혈병(급성 골수구성 백혈병(AML), ALL 및 CML 포함) 또는 다발성 골수종을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "암"은 백혈병, 암종 및 육종을 비롯한 포유동물(예를 들어, 인간)에서 발견되는 모든 유형의 암, 신생물 또는 악성 종양을 지칭한다. 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 예시적인 암은 유방암, 결장암, 신장암, 백혈병, 폐암, 흑색종, 난소암, 전립선암, 췌장암, 뇌암, 간암, 위암 또는 육종을 포함한다.
용어 "백혈병"은 광범위하게 혈액-형성 기관의 진행성, 악성 질환을 지칭하며, 일반적으로 혈액 및 골수에서 백혈구 및 이의 전구체의 왜곡된 증식 및 발달을 특징으로 한다. 백혈병은 일반적으로 (1) 질환의 기간 및 특성 - 급성 또는 만성; (2) 관련된 세포의 유형; 골수구성(골수성), 림프구성(림프성) 또는 단핵구성; 및 (3) 혈액에 비정상적인 세포 수의 증가 또는 비-증가 - 백혈병성 또는 비백혈병성(아백혈병)에 기초하여 임상적으로 분류된다. 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 예시적인 백혈병은, 예를 들어, 급성 골수구성 백혈병, 급성 비림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 급성 과립구성 백혈병, 만성 과립구성 백혈병, 급성 전골수성 백혈병, 성인 T-세포 백혈병, 비백혈병성 백혈병, 백혈구병성 백혈병, 호염기성 백혈병, 아세포 백혈병, 소 백혈병, 만성 골수구성 백혈병, 표피 백혈병, 배아 백혈병, 호산구성 백혈병, 그로스 백혈병, 모세포 백혈병, 혈아세포 백혈병, 혈구아세포 백혈병, 조직구성 백혈병, 줄기 세포 백혈병, 급성 단핵구성 백혈병, 백혈구감소성 백혈병, 림프성 백혈병(lymphatic leukemia), 림프아구성 백혈병, 림프구성 백혈병(lymphocytic leukemia), 림프성 백혈병(lymphogenous leukemia), 림프구성 백혈병(lymphoid leukemia), 림프육종 세포 백혈병, 비만 세포 백혈병, 거대핵구성 백혈병, 소골수아구성 백혈병, 단핵구성 백혈병, 골수아구성 백혈병, 골수구성 백혈병, 골수구성 과립구성 백혈병, 골수단핵구성 백혈병, 네겔리 백혈병, 형질 세포 백혈병, 다발성 골수종, 형질구성 백혈병, 전골수성 백혈병, 리이더 세포 백혈병, 실링 백혈병, 줄기 세포 백혈병, 아백혈병성 백혈병 또는 미분화 세포 백혈병을 포함한다.
용어 "육종"은 일반적으로 배아 결합 조직과 같은 물질로 구성되고, 일반적으로 원섬유성 또는 동질적 물질에 내장된 밀접하게 패키징된 세포로 구성된 종양을 지칭한다. 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 육종은 연골육종, 섬유육종, 림프육종, 흑색육종, 점액육종, 골육종, 아베메시 육종, 지방 육종(adipose sarcoma), 지방 육종(liposarcoma), 폐포 연부 육종, 법랑아세포 육종, 포도상 육종, 녹색종 육종, 융모막 암종, 배아 육종, 윌름스 종양 육종, 자궁내막 육종, 기질 육종, 유잉 육종, 근막 육종, 섬유아세포 육종, 거대세포 육종, 과립구성 육종, 호지킨 육종, 특발성 다발 색소 출혈성 육종, B 세포의 면역아세포 육종, 림프종, T-세포의 면역아세포 육종, 젠슨 육종, 카포시 육종, 쿠퍼세포 육종, 혈관 육종, 백혈육종, 악성 간엽종 육종, 뼈주위 육종, 망상구 육종, 라우스 육종, 장액낭성 육종, 활액 육종 또는 모세관확장 육종을 포함한다.
용어 "흑색종"은 피부 및 다른 기관의 멜라닌세포 시스템으로부터 발생하는 종양을 의미한다. 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 흑색종은, 예를 들어, 선단-흑색점 흑색종, 비색소성 흑색종, 양성 소아 흑색종, 클라우드맨 흑색종, S91 흑색종, 하딩-파세이 흑색종, 소아 흑색종, 악성흑색점 흑색종, 악성 흑색종, 결절성 흑색종, 조갑하 흑색종 또는 표재확산 흑색종을 포함한다.
용어 "암종" 주변 조직에 침투하여 전이를 일으키는 경향이 있는 상피 세포로 구성된 악성의 새로운 종양을 지칭한다. 본 명세서에 제공된 화합물 또는 방법으로 치료될 수 있는 예시적인 암종은, 예를 들어, 수질성 갑상선 암종, 가족성 수질성 갑상선 암종, 선포세포 암종, 세엽세포 암종, 선낭성 암종, 선양낭성 암종, 선 암종, 부신 피질의 암종, 폐포 암종, 폐포세포 암종, 기저세포 암종, 기저세포성 암종, 기저세포양 암종, 기저편평세포 암종, 기관지폐포 암종, 세기관지성 암종, 기관지성 암종, 대뇌상 암종, 담관세포 암종, 융모성 암종, 콜로이드성 암종, 면포성 암종, 자궁체부 암종, 사상형 암종, 경결형 암종, 피부 암종, 원주성 암종, 원주세포 암종, 도관 암종, 경성 암종, 배아 암종, 뇌양 암종, 상피양 암종, 궤양성 암종, 섬유 암종, 젤라틴형 암종, 젤라틴성 암종, 거대세포 암종, 거대세포핵성 암종, 샘암종, 과립막세포 암종, 모상 암종, 간세포양 암종, 간세포 암종, 허슬세포 암종, 하이알린 암종, 하이퍼네프로이드 암종, 유아성 배아 암종, 제자리 암종, 표피내 암종, 상피내 암종, 크롬페쳐 암종, 컬키츠키-세포 암종, 대세포 암종, 수정체 암종, 수정체양 암종, 지방종성 암종, 림프상피성 암종, 수양 암종, 수질 암종, 멜라닌성 암종, 연성 암종, 점액 암종, 점액분비 암종, 점액양 암종, 점막표피양 암종, 점막 암종, 점액질 암종, 점액종성 암종, 비인두성 암종, 연맥세포 암종, 골화성 암종, 유골 암종, 유두 암종, 문맥주위 암종, 전침윤성 암종, 유극세포 암종, 반액성 암종, 신장의 신세포 암종, 저장세포 암종, 육종양 암종, 쉬나이더 암종, 경성 암종, 음낭 암종, 인환세포 암종, 단순 암종, 소세포 암종, 솔레노이드 암종, 구형세포 암종, 방추세포 암종, 해면양 암종, 편평 암종, 편평세포 암종, 스트링 암종, 혈관확장성 암종, 모세혈관확장성 암종, 이행세포 암종, 결절 암종, 결절성 암종, 사마귀모양 암종 또는 융모상 암종을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "전이", "전이성" 및 "전이성 암"은 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 한 기관 또는 또 다른 비-인접 기관 또는 신체 부위로부터의 증식성 질환 또는 장애, 예를 들어, 암의 확산을 지칭한다. 암은 기원 부위, 예를 들어, 유방에서 발생하며, 이 부위는 원발성 종양, 예를 들어, 원발성 유방암으로 지칭된다. 원발성 종양 또는 기원 부위에서 일부 암세포는 국부 영역의 주변 정상 조직을 투과하고 침투하는 능력 및/또는 시스템을 통해 순환하는 림프계 또는 혈관계의 벽을 투과하여 신체의 다른 부위 및 조직으로 가는 능력을 획득한다. 원발성 종양의 암세포로부터 형성된 두 번째 임상적으로 검출 가능한 종양은 전이성 또는 2차 종양으로 지칭된다. 암세포가 전이되면, 전이성 종양 및 이의 세포는 원래의 종양과 유사한 것으로 추정된다. 따라서, 폐암이 유방으로 전이된 경우, 유방 부위의 2차 종양은 비정상 유방 세포가 아닌 비정상 폐 세포로 구성된다. 유방의 2차 종양 전이성 폐암으로 지칭된다. 따라서, 어구 전이성 암은 대상체가 원발성 종양을 갖거나 또는 갖고 있고 하나 이상의 2차 종양을 갖는 질환을 지칭한다. 어구 비-전이성 암 또는 전이성이 아닌 암이 있는 대상체는 대상체가 원발성 종양을 갖고 있지만 하나 이상의 2차 종양을 갖고 있지는 않은 질환을 지칭한다. 예를 들어, 전이성 폐암은 원발성 폐 종양이 있거나 또는 이의 병력이 있고, 제2 위치 또는 여러 위치, 예를 들어, 유방에 하나 이상의 2차 종양이 있는 대상체의 질환을 지칭한다.
질환(예를 들어, 단백질 관련 질환, ROR2 활성과 관련된 암, ROR2 관련 암, ROR2 관련 질환(예를 들어, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 감염성 질환))과 관련된 물질 또는 물질 활성 또는 기능의 맥락에서 용어 "관련된" 또는 "~와 관련된"은 질환(예를 들어, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 감염성 질환)이 물질 또는 물질 활성 또는 기능에 의해 (전체 또는 부분적으로) 유발되거나 또는 질환의 증상이 이에 의해 (전체 또는 부분적으로) 유발됨을 의미한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 질환과 관련되는 것으로 기재된 것이 원인 물질인 경우, 질환 치료의 표적이 될 수 있다. 예를 들어, ROR2 활성 또는 기능과 관련된 암 또는 ROR2 관련 질환(예를 들어, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 감염성 질환)은 증가된 ROR2 활성 또는 기능(예를 들어, 신호전달 경로 활성)이 질환(예를 들어, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 또는 감염성 질환)을 유발하는 경우의 예에서 ROR2 조절제 또는 ROR2 저해제로 치료될 수 있다. 예를 들어, ROR2 활성 또는 기능과 관련된 염증성 질환 또는 ROR2 관련 염증성 질환은 증가된 ROR2 활성 또는 기능(예를 들어, 신호전달 경로 활성)이 질환을 유발하는 경우의 예에서 ROR2 조절제 또는 ROR2 저해제로 치료될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "신호전달 경로"는 하나의 구성요소에서 하나 이상의 다른 구성요소로 변경을 전달하는 세포 및 선택적으로 세포외 구성요소(예를 들어, 단백질, 핵산, 소분자, 이온, 지질) 사이의 일련의 상호작용을 지칭하며, 이는 결국 다른 신호전달 경로 구성요소에 선택적으로 전파되는 추가적인 구성요소에 대한 변경을 전달할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "비정상"은 정상과 다름을 지칭한다. 효소 활성을 설명하는데 사용될 때, 비정상은 정상 대조군 또는 질환이 없는 정상 대조군 샘플의 평균보다 크거나 작은 활성을 지칭한다. 비정상 활성은 질환을 초래하는 활성의 양을 지칭할 수 있되, 비정상 활성을 정상 또는 비-질환-관련 양으로 복귀시키는 것은(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 방법을 사용함으로써) 질환 또는 질환의 하나 이상의 증상을 감소시킨다.
본 명세서에서 언급되는 "치료제"는 암(예를 들어, 백혈병)과 같은 질환을 치료 또는 예방하는데 유용한 조성물이다. 실시형태에서, 치료제는 항암제이다. "항암제"는 이의 평범한 통상적인 의미에 따라 사용되며, 항종양성 특성 또는 세포의 성장 또는 증식을 저해하는 능력을 갖는 조성물(예를 들어, 화합물, 약물, 길항제, 저해제, 조절제)을 지칭한다. 실시형태에서, 항암제는 화학요법제이다. 실시형태에서, 항암제는 암을 치료하는 방법에서 유용성을 갖는 본 명세서에서 확인된 작용제이다. 실시형태에서, 항암제는 FDA 또는 미국 이외의 국가의 이와 유사한 규제 기관에서 암 치료용으로 승인된 작용제이다.
본 명세서에서 사용되는 "항암제"는 암세포 또는 조직의 파괴 또는 저해를 통해 암을 치료하는데 사용되는 분자(예를 들어, 화합물, 펩타이드, 단백질, 핵산, 0103)를 지칭한다. 항암제는 소정의 암 또는 소정의 조직에 선택적일 수 있다. 실시형태에서, 본 명세서의 항암제는 후생적 저해제 및 다중-카이네이스를 포함할 수 있다. "항암제(anti-cancer agent)" 및 "항암제(anticancer agent)"는 일반적인 통상적인 의미에 따라 사용되며, 항종양성 특성 또는 세포의 성장 또는 증식을 저해하는 능력을 갖는 조성물(예를 들어, 화합물, 약물, 길항제, 저해제, 조절제)을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 항암제는 화학요법제이다. 일부 실시형태에서, 항암제는 암을 치료하는 방법에서 유용성을 갖는 본 명세서에서 확인된 작용제이다. 일부 실시형태에서, 항암제는 FDA 또는 미국 이외의 국가의 이와 유사한 규제 기관에서 암 치료용으로 승인된 작용제이다. 항암제의 예는 MEK(예를 들어, MEK1, MEK2 또는 MEK1 및 MEK2) 저해제(예를 들어, XL518, CI-1040, PD035901, 셀루메티닙/ AZD6244, GSK1120212/트라메티닙, GDC-0973, ARRY-162, ARRY-300, AZD8330, PD0325901, U0126, PD98059, TAK-733, PD318088, AS703026, BAY 869766), 알킬화제(예를 들어, 사이클로포스파마이드, 아이포스파마이드, 클로람부실, 부설판, 멜팔란, 메클로레타민, 우라무스틴, 티오테파, 나이트로소우레아, 질소 머스타드(예를 들어, 메클로에타민, 사이클로포스파마이드, 클로람부실, 멜팔란), 에틸렌이민 및 메틸멜라민(예를 들어, 헥사메틸멜라민, 티오테파), 알킬 설포네이트(예를 들어, 부설판), 나이트로소우레아(예를 들어, 카무스틴, 로무스틴, 세무스틴, 스트렙토조신), 트리아젠(데카바진)), 대사길항물질(예를 들어, 5-아자티오프린, 류코보린, 카페시타빈, 플루다라빈, 젬시타빈, 페메트렉세이드, 랄티트렉세이드, 폴산 유사체(예를 들어, 메토트렉세이트) 또는 피리미딘 유사체(예를 들어, 플루오로우라실, 플록소우리딘, 시타라빈), 퓨린 유사체(예를 들어, 머캅토퓨린, 티오구아닌, 펜토스타틴) 등), 식물 알칼로이드(예를 들어, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 빈데신, 포도필로톡신, 파클리탁셀, 도세탁셀 등), 토포아이소머레이스 저해제(예를 들어, 이리노테칸, 토포테칸, 암사크린, 에토포시드(VP16), 에토포시드 포스페이트, 테니포시드 등), 항종양 항생제(예를 들어, 독소루비신, 아드리아마이신, 다우노루비신, 에피루비신, 악티노마이신, 블레오마이신, 마이토마이신, 마이톡산트론, 플리카마이신 등), 백금-기반 화합물(예를 들어, 시스플라틴, 옥살로플라틴, 카보플라틴), 안트라센다이온(예를 들어, 미톡산트론), 치환된 우레아(예를 들어, 하이드록시우레아), 메틸 하이드라진 유도체(예를 들어, 프로카바진), 아드레노코르티칼 억제제(예를 들어, 마이토테인, 아미노글루테티마이드), 에피포도필로톡신(예를 들어, 에토포시드), 항생제(예를 들어, 다우노루비신, 독소루비신, 블레오마이신), 효소(예를 들어, L-아스파라기네이스), 마이토겐-활성화 단백질 카이네이스 신호전달의 저해제(예를 들어, U0126, PD98059, PD184352, PD0325901, ARRY-142886, SB239063, SP600125, BAY 43-9006, 워트만닌 또는 LY294002, Syk 저해제, mTOR 저해제, 항체(예를 들어, 리툭산), 고시폴, 제나센스, 폴리페놀 E, 클로로푸신, 모든 트랜스-레티노산(ATRA), 브리오스타틴, 종양 괴사 인자-관련 세포자멸사-유도 리간드(TRAIL), 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 모든 트랜스 레티노산, 독소루비신, 빈크리스틴, 에토포시드, 젬시타빈, 이마티닙(Gleevec.RTM.), 겔다나마이신, 17-N-알릴아미노-17-데메톡시겔다나마이신(17-AAG), 플라보피리돌, LY294002, 보르테조밉, 트라스투주맙, BAY 11-7082, PKC412, PD184352, 20-에피-1, 25 다이하이드록시바이타민 D3; 5-에틴일우라실; 아비라테론; 아클라루비신; 아실풀벤; 아데시페놀; 아도젤레신; 알데스류킨; ALL-TK 길항제; 알트레타민; 암바무스틴; 아미독스; 아미포스틴; 아미노레불린산; 암루비신; 암사크린; 아나그렐리드; 아나스트로졸; 안드로그라폴라이드; 혈관신생 저해제; 길항제 D; 길항제 G; 안타렐릭스; 항-등쪽 형태발생성 단백질-1; 항안드로겐, 전립선 암종; 항에스트로겐; 항네오플라스톤; 안티센스 올리고뉴클레오타이드; 아피디콜린 글리시네이트; 세포자멸사 유전자 조절제; 세포자멸사 조절제; 아퓨린산; 아라-CDP-DL-PTBA; 아르기닌 데아미네이스; 아술라크린; 아타메스테인; 아트리무스틴; 악시나스타틴 1; 악시나스타틴 2; 악시나스타틴 3; 아자세트론; 아자톡신; 아자타이로신; 바카틴 III 유도체; 발란올; 바티마스타트; BCR/ABL 길항제; 벤조클로린; 벤조일스타우로스포린; 베타 락탐 유도체; 베타-알레틴; 베타클라마이신 B; 베툴린산; bFGF 저해제; 바이칼루타마이드; 바이산트렌; 비스아지리딘일스페르민; 비스나파이드; 비스트라텐 A; 바이젤레신; 브레플레이트; 프로피리민; 뷰도티테인; 뷰티오닌 설폭시민; 칼시포트리올; 칼포스틴 C; 캄프토테신 유도체; 카나리폭스 IL-2; 카페시타빈; 카복사마이드-아미노-트라이아졸; 카복시아미도트라이아졸; CaRest M3; CARN 700; 연골 유래 저해제; 카르젤레신; 카제인 카이네이스 저해제(ICOS); 카스타노스페르민; 세크로핀 B; 세트로렐릭스; 클로린; 클로로퀴녹살린 설폰아마이드; 시카프로스트; 시스-포르피린; 클라드리빈; 클로미펜 유사체; 클로트라이마졸; 콜리스마이신 A; 콜리스마이신 B; 콤브레타스타틴 A4; 콤브레타스타틴 유사체; 코나게닌; 크람베시딘 816; 크리스나톨; 크립토피신 8; 크립토피신 유도체; 큐라신 A; 사이클로펜탄트라퀴논; 사이클로플라탐; 사이페마이신; 시타라빈 옥포스페이트; 세포용해 인자; 사이토스타틴; 다클릭시맙; 데시타빈; 데하이드로다이뎀닌 B; 데슬로렐린; 덱사메타손; 덱시포스파마이드; 덱스라족세인; 덱스베라파밀; 다이아지쿠온; 다이뎀닌 B; 다이독스; 다이에틸노르스페르민; 다이하이드로-5-아자사이티딘; 9-다이옥사마이신; 다이페닐 스피로무스틴; 도코사놀; 돌라세트론; 독시플루리딘; 드롤록시펜; 드로나비놀; 듀오카르마이신 SA; 엡셀렌; 에코무스틴; 에델포신; 에들콜로맙; 에플로르니틴; 엘레멘; 에미테푸르; 에피루비신; 에프리스테라이드; 에스트라무스틴 유사체; 에스트로겐 효능제; 에스트로겐 길항제; 에타니다졸; 에토포시드 포스페이트; 엑세메스테인; 파드로졸; 파자라빈; 펜레티나이드; 필그라스팀; 피나스테라이드; 플라보피리돌; 플레젤라스틴; 플루아스테론; 플루다라빈; 플루오로다우노루비신 하이드로클로라이드; 포르페니멕스; 포르메스테인; 포스트라이에신; 포테무스틴; 가돌리늄 텍사피린; 갈륨 나이트레이트; 갈로시타빈; 가니렐릭스; 젤라티네이스 저해제; 젬시타빈; 글루타티온 저해제; 헵설팜; 헤레굴린; 헥사메틸렌 비스아세트아마이드; 하이퍼리신; 아이반드론산; 아이다루비신; 아이독시펜; 아이드라만톤; 일모포신; 일로마스타트; 이미다조아크리돈; 이미퀴모드; 면역자극 펩타이드; 인슐린-유사 성장 인자-1 수용체 저해제; 인터페론 효능제; 인터페론; 인터류킨; 아이오벤구안; 아이오도독소루비신; 4-아이포메아놀; 아이로플락트; 이르소글라딘; 아이소벤가졸; 아이소호모할리콘드린 B; 아이타세트론; 자스플라키놀라이드; 카할라이드 F; 라멜라린-N 트라이아세테이트; 란레오타이드; 레이나마이신; 레노그라스팀; 렌티난 설페이트; 렙톨스타틴; 레트로졸; 백혈병 저해 인자; 백혈구 알파 인터페론; 류프롤라이드+에스트로겐+프로게스테론; 류프로렐린; 레바미솔; 리아로졸; 선형 폴리아민 유사체; 친유성 이당류 펩타이드; 친유성 백금 화합물; 리소클린아마이드 7; 로바플라틴; 롬브리신; 로메트렉솔; 로니다민; 로속산트론; 로바스타틴; 록소리빈; 루르토테칸; 루테튬 텍사피린; 라이소필린; 용해성 펩타이드; 마이탄신; 만노스타틴 A; 마리마스타트; 마소프로콜; 마스핀; 마트라일리신 저해제; 매트릭스 메탈로프로테이네이스 저해제; 메노가릴; 메르바론; 메테렐린; 메티오니네이스; 메토클로프라마이드; MIF 저해제; 미페프리스톤; 밀테포신; 미리모스팀; 불일치 이중 가닥 RNA; 마이토구아존; 마이토락톨; 마이토마이신 유사체; 마이토나파이드; 마이토톡신 섬유아세포 성장 인자-사포린; 미톡산트론; 모파로텐; 몰그라모스팀; 단일클론 항체, 인간 융모막 고나도트로핀; 모노포스포릴 지질 A+미오박테리움 세포벽 sk; 모피다몰; 다중 약물 저항성 유전자 저해제; 다중 종양 억제인자 1-기반 요법; 머스타드 항암제; 마이카퍼옥사이드 B; 마이코박테리아 세포벽 추출물; 마이리아포론; N-아세틸다이날린; N-치환된 벤즈아마이드; 나파렐린; 나그레스팁; 날록손+펜타조신; 나파빈; 나프테르핀; 나르토그라스팀; 네다플라틴; 네모루비신; 네리드론산; 중성 엔도펩티데이스; 닐루타마이드; 니사마이신; 산화 질소 조절제; 나이트록사이드 항산화제; 니트룰린; O6-벤질구아닌; 옥트레오타이드; 오키세논; 올리고뉴클레오타이드; 오나프리스톤; 온단세트론; 온단세트론; 오라신; 경구 사이토카인 유도제; 오르마플라틴; 오사테론; 옥살리플라틴; 옥사우노마이신; 팔라우아민; 팔미토일리족신; 파미드론산; 파낙시트라이올; 파노미펜; 파라박틴; 파젤립틴; 페가스파게이스; 펠데신; 펜토산 폴리설페이트 소듐; 펜토스타틴; 펜트로졸; 퍼플루브론; 퍼포스파마이드; 페릴릴 알코올; 페나지노마이신; 페닐아세테이트; 포스파테이스 저해제; 피시바닐; 필로카르핀 하이드로클로라이드; 피라루비신; 피리트렉심; 플라세틴 A; 플라세틴 B; 플라스미노겐 활성화인자 저해제; 백금 복합체; 백금 화합물; 백금-트라이아민 복합체; 포르피머 소듐; 포르피로마이신; 프레드니손; 프로필 비스-아크리돈; 프로스타글란딘 J2; 프로테아솜 저해제; 단백질 A-기반 면역 조절제; 단백질 카이네이스 C 저해제; 단백질 카이네이스 C 저해제, 미세조류; 단백질 타이로신 포스파테이스 저해제; 퓨린 뉴클레오사이드 포스포릴레이스 저해제; 퍼퓨린; 피라졸로아크리딘; 피리독실화된 헤모글로빈 폴리옥시에틸레리 접합체; raf 길항제; 랄티트렉세이드; 라모세트론; ras 파르네실 단백질 트랜스퍼레이스 저해제; ras 저해제; ras-GAP 저해제; 레텔립틴 탈메틸화; 레늄 Re 186 에티드로네이트; 리족신; 리보자임; RII 레틴아마이드; 로글레티마이드; 로히투킨; 로무르타이드; 로퀴니멕스; 루비지논 B1; 루복실; 사핑골; 사인토핀; SarCNU; 사르코피톨 A; 사그라모스팀; Sdi 1 모방체; 세무스틴; 노화 유도 저해제 1; 센스 올리고뉴클레오타이드; 신호 전달 저해제; 신호 전달 조절제; 단일쇄 항원-결합 단백질; 시조퓨란; 소부족세인; 소듐 보로캅테이트; 소듐 페닐아세테이트; 솔베롤; 소마토메딘 결합 단백질; 소네르민; 스파르포신산; 스피카마이신 D; 스피로무스틴; 스플레노펜틴; 스폰지스타틴 1; 스쿠알라민; 줄기 세포 저해제; 줄기-세포 분열 저해제; 스티피아마이드; 스트로멜리신 저해제; 설피노신; 초활성 혈관활성 장 펩타이드 길항제; 수라디스타; 수라민; 스웨인소닌; 합성 글리코사미노글리칸; 탈리무스틴; 타목시펜 메티오다이드; 타우로무스틴; 타자로텐; 테코갈란 소듐; 테가푸르; 텔루라피릴륨; 텔로머레이스 저해제; 테모포르핀; 테모졸로마이드; 테니포시드; 테트라클로로데카옥사이드; 테트라조민; 탈리블라스틴; 티오코랄린; 트롬보포이에틴; 트롬보포이에틴 모방체; 티말파신; 티모포이에틴 수용체 효능제; 티모트라이난; 갑상선 자극 호르몬; 주석 에틸 에티오퍼퓨린; 티라파자민; 티타노센 바이클로라이드; 톱센틴; 토레미펜; 전능성 줄기 세포 인자; 번역 저해제; 틀티노인; 트라이아세틸우리딘; 트라이시리빈; 트라이메트렉세이트; 트립토렐린; 트로피세트론; 투로스테리드; 타이로신 카이네이스 저해제; 티르포스틴; UBC 저해제; 우베니멕스; 비뇨생식동-유래 성장 저해 인자; 유로카이네이스 수용체 길항제; 바프레오타이드; 바리올린 B; 벡터 시스템, 적혈구 유전자 요법; 벨라레솔; 베라민; 베르딘; 베르테포르핀; 비노렐빈; 빈잘틴; 비탁신; 보로졸; 자노테론; 제니플라틴; 질라스코르브; 지노스타틴 스티말라머, 아드리아마이신, 닥티노마이신, 블레오마이신, 빈블라스틴, 시스플라틴, 아시비신; 아클라루비신; 아코다졸 하이드로클로라이드; 아크로닌; 아도젤레신; 알데스류킨; 알트레타민; 암보마이신; 아메탄트론 아세테이트; 아미노글루테티마이드; 암사크린; 아나스트로졸; 안트라마이신; 아스파라기네이스; 아스페를릴; 아자시티딘; 아제테파; 아조토마이신; 바티마스타트; 벤조데파; 바이칼루타마이드; 바이산트렌 하이드로클로라이드; 비스나파이드 다이메실레이트; 바이젤레신; 블레오마이신 설페이트; 브레퀴나르 소듐; 프로피리민; 부설판; 악티노마이신; 칼루스테론; 카라세마이드; 카르베티머; 카보플라틴; 카무스틴; 카루비신 하이드로클로라이드; 카르젤레신; 세데핀골; 클로람부실; 시롤레마이신; 클라드리빈; 크리스나톨 메실레이트; 사이클로포스파마이드; 시타라빈; 다카르바진; 다우노루비신 하이드로클로라이드; 데시타빈; 덱소르마플라틴; 데자구아닌; 데자구아닌 메실레이트; 다이아지쿠온; 독소루비신; 독소루비신 하이드로클로라이드; 드롤록시펜; 드롤록시펜 시트레이트; 드로모스타놀론 프로피오네이트; 두아조마이신; 에다트렉세이트; 에플로르니틴 하이드로클로라이드; 엘사미트루신; 엔로플라틴; 엔프로메이트; 에피프로피딘; 에피루비신 하이드로클로라이드; 에르불로졸; 에소루비신 하이드로클로라이드; 에스트라무스틴; 에스트라무스틴 포스페이트 소듐; 에타니다졸; 에토포시드; 에토포시드 포스페이트; 에토프린; 파드로졸 하이드로클로라이드; 파자라빈; 펜레티나이드; 플록수리딘; 플루다라빈 포스페이트; 플루오로우라실; 플루오로시타빈; 포스퀴돈; 포스트라이에신 소듐; 젬시타빈; 젬시타빈 하이드로클로라이드; 하이드록시우레아; 이다루비신 하이드로클로라이드; 아이포스파마이드; 이이모포신; 인터류킨 I1(재조합 인터류킨 II 또는 rlL.sub.2를 포함), 인터페론 알파-2a; 인터페론 알파-2b; 인터페론 알파-n1; 인터페론 알파-n3; 인터페론 베타-1a; 인터페론 감마-1b; 아이프로플라틴; 이리노테칸 하이드로클로라이드; 란레오타이드 아세테이트; 레트로졸; 류프롤라이드 아세테이트; 리아로졸 하이드로클로라이드; 로메트렉솔 소듐; 로무스틴; 로속산트론 하이드로클로라이드; 마소프로콜; 메이탄신; 메클로레타민 하이드로클로라이드; 메게스트롤 아세테이트; 멜렌게스트롤 아세테이트; 멜팔란; 메노가릴; 머캅토퓨린; 메토트렉세이트; 메토트렉세이트 소듐; 메토프린; 메투레데파; 미틴도마이드; 미토카르신; 미토크로민; 미토길린; 미토말신; 마이토마이신; 미토스페르; 마이토테인; 미톡산트론 하이드로클로라이드; 마이코페놀산; 노코다졸; 노갈라마이신; 오르마플라틴; 옥시수란; 페가스파게이스; 펠리오마이신; 펜타무스틴; 페플로마이신 설페이트; 퍼포스파마이드; 피포브로만; 피포설판; 피록산트론 하이드로클로라이드; 플리카마이신; 플로메스테인; 포르피머 소듐; 포르피로마이신; 프레드니무스틴; 프로카바진 하이드로클로라이드; 퓨로마이신; 퓨로마이신 하이드로클로라이드; 피라조퓨린; 리보프린; 로글레티마이드; 사핑골; 사핑골 하이드로클로라이드; 세무스틴; 심트라젠; 스파르포세이트 소듐; 스파르소마이신; 스피로게르마늄 하이드로클로라이드; 스피로무스틴; 스피로플라틴; 스트렙토나이그린; 스트렙토조신; 설로페누르; 탈리소마이신; 테코갈란 소듐; 테가푸르; 텔록산트론 하이드로클로라이드; 테모포르핀; 테니포시드; 테록시론; 테스토락톤; 티아미프린; 티오구아닌; 티오테파; 티아조퓨린; 티라파자민; 토레미펜 시트레이트; 트레스톨론 아세테이트; 트라이시리빈 포스페이트; 트라이메트렉세이트; 트라이메트렉세이트 글루쿠로네이트; 트립토렐린; 투불로졸 하이드로클로라이드; 우라실 머스타드; 우레데파; 바프레오타이드; 베르테포르핀; 빈블라스틴 설페이트; 빈크리스틴 설페이트; 빈데신; 빈데신 설페이트; 비네피딘 설페이트; 빈글리시네이트 설페이트; 빈레우로신 설페이트; 비노렐빈 타트레이트; 빈로시딘 설페이트; 빈졸리딘 설페이트; 보로졸; 제니플라틴; 지노스타틴; 조루비신 하이드로클로라이드, G2-M 단계에서 세포를 정지시키고/시키거나 미세소관의 형성 또는 안정성을 조절하는 작용제, (예를 들어, 탁세인 골격을 포함하는 Taxol.TM(즉, 파클리탁셀), Taxotere.TM, 화합물, 에르불로졸(즉, R-55104), 돌라스타틴 10(즉, DLS-10 및 NSC-376128), 미보불린 이세티오네이트(즉, CI-980), 빈크리스틴, NSC-639829, 디스코데르몰라이드(즉, NVP-XX-A-296), ABT-751(애보트(Abbott), 즉, E-7010), 알토르하이르틴(예를 들어, 알토르하이르틴 A 및 알토르하이르틴 C), 스폰지스타틴(예를 들어, 스폰지스타틴 1, 스폰지스타틴 2, 스폰지스타틴 3, 스폰지스타틴 4, 스폰지스타틴 5, 스폰지스타틴 6, 스폰지스타틴 7, 스폰지스타틴 8 및 스폰지스타틴 9), 세마도틴 하이드로클로라이드(즉, LU-103793 및 NSC-D-669356), 에포틸론(예를 들어, 에포틸론 A, 에포틸론 B, 에포틸론 C(즉, 데스옥시에포틸론 A 또는 dEpoA), 에포틸론 D(즉, KOS-862, dEpoB 및 데스옥시에포틸론 B), 에포틸론 E, 에포틸론 F, 에포틸론 B N-옥사이드, 에포틸론 A N-옥사이드, 16-아자-에포틸론 B, 21-아미노에포틸론 B(즉, BMS-310705), 21-하이드록시에포틸론 D(즉, 데스옥시에포틸론 F 및 dEpoF), 26-플루오로에포틸론, 아우리스타틴 PE(즉, NSC-654663), 소블리도틴(즉, TZT-1027), LS-4559-P(파머시아(Pharmacia), 즉, LS-4577), LS-4578(파머시아, 즉, LS-477-P), LS-4477(파머시아), LS-4559(파머시아), RPR-112378(아벤티스(Aventis)), 빈크리스틴 설페이트, DZ-3358(다이이치(Daiichi)), FR-182877(후지사와(Fujisawa), 즉, WS-9885B), GS-164(타케다(Takeda)), GS-198(타케다), KAR-2(헝가리 과학 대학교(Hungarian Academy of Sciences)), BSF-223651(바스프(BASF), 즉, ILX-651 및 LU-223651), SAH-49960(릴리(Lilly)/노바티스(Novartis)), SDZ-268970(릴리/노바티스), AM-97(아마드(Armad)/쿄와 하코(Kyowa Hakko)), AM-132(아마드), AM-138(아마드/쿄와 하코), IDN-5005(인데나(Indena)), 크립토피신 52(즉, LY-355703), AC-7739(아지노모토(Ajinomoto), 즉, AVE-8063A 및 CS-39.HCl), AC-7700(아지노모토, 즉, AVE-8062, AVE-8062A, CS-39-L-Ser.HCl 및 RPR-258062A), 비틸레부아마이드, 투불리신 A, 카나덴솔, 센타우레이딘(즉, NSC-106969), T-138067(툴라릭(Tularik), 즉, T-67, TL-138067 및 TI-138067), COBRA-1(파커 휴스 인스티튜트(Parker Hughes Institute), 즉, DDE-261 및 WHI-261), H10(캔자스 주립대학(Kansas State University)), H16(캔자스 주립대학), 온코시딘 A1(즉, BTO-956 및 DIME), DDE-313(파커 휴스 인스티튜트), 피지아놀라이드 B, 라울리말라이드, SPA-2(파커 휴스 인스티튜트), SPA-1(파커 휴스 인스티튜트, 즉, SPIKET-P), 3-IAABU(사이토스켈레톤(Cytoskeleton)/마운트 시나이 의과대학(Mt. Sinai School of Medicine), 즉, MF-569), 나르코신(NSC-5366으로도 알려져 있음), 나스카핀, D-24851(아스타 메디카(Asta Medica)), A-105972(애보트), 헤미아스텔린, 3-BAABU(사이토스켈레톤/마운트 시나이 의과대학, 즉, MF-191), TMPN(아리조나 주립대학(Arizona State University)), 바나도센 아세틸아세토네이트, T-138026(툴라릭), 몬사트롤, 라노신(즉, NSC-698666), 3-IAABE(사이토스켈레톤/마운트 시나이 의과대학), A-204197(애보트), T-607(튀라릭(Tuiarik), 즉, T-900607), RPR-115781(아벤티스), 엘류테로빈(예컨대, 데스메틸엘류테로빈, 데사에틸엘류테로빈, 엘소엘류테로빈 A 및 Z-엘류테로빈), 카리바에오시드, 카리바에올린, 할리콘드린 B, D-64131(아스타 메디카), D-68144(아스타 메디카), 다이아조나마이드 A, A-293620(애보트), NPI-2350(네레우스(Nereus)), 타칼로놀라이드 A, TUB-245(아벤티스), A-259754(애보트), 다이오조스타틴, (-)-페닐라히스틴(즉, NSCL-96F037), D-68838(아스타 메디카), D-68836(아스타 메디카), 미오세베린 B, D-43411(젠타리스(Zentaris), 즉, D-81862), A-289099(애보트), A-318315(애보트), HTI-286(즉, SPA-110, 트라이플루오로아세테이트 염)(와이어스(Wyeth)), D-82317(젠타리스), D-82318(젠타리스), SC-12983(NCI), 레스베라스타틴 포스페이트 소듐, BPR-OY-007(국립보건연구원(National Health Research Institutes)) 및 SSR-250411(사노피(Sanofi))), 스테로이드(예를 들어, 덱사메타손), 피나스테라이드, 아로마테이스 저해제, 고나도트로핀-방출 호르몬 효능제(GnRH), 예컨대, 고세렐린 또는 류프롤라이드, 아드레노코르티코스테로이드(예를 들어, 프레드니손), 프로게스틴(예를 들어, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 메게스트롤 아세테이트, 메드록시프로게스테론 아세테이트), 에스트로겐(예를 들어, 다이에틸스틸베스트롤, 에틴일 에스트라다이올), 항에스트로겐(예를 들어, 타목시펜), 안드로겐(예를 들어, 테스토스테론 프로피오네이트, 플루옥시메스테론), 항안드로겐(예를 들어, 플루타마이드), 면역자극제(예를 들어, 바실러스 칼메트-게렝균(BCG), 레바미솔, 인터류킨-2, 알파-인터페론 등), 단일클론 항체(예를 들어, 항-CD20, 항-HER2, 항-CD52, 항-HLA-DR 및 항-VEGF 단일클론 항체), 면역독소(예를 들어, 항-CD33 단일클론 항체-칼리키아미신 접합체, 항-CD22 단일클론 항체-슈도모나스 외독소 접합체 등), 방사면역요법(예를 들어, 111In, 90Y 또는 131I 등에 접합된 항-CD20 단일클론 항체), 트립톨라이드, 호모하링토닌, 닥티노마이신, 독소루비신, 에피루비신, 토포테칸, 이트라코나졸, 빈데신, 세리바스타틴, 빈크리스틴, 데옥시아데노신, 세르트랄린, 피타바스타틴, 이리노테칸, 클로파지민, 5-노닐옥시트립타민, 베무라페닙, 다브라페닙, 에를로티닙, 게피티닙, EGFR 저해제, 상피 성장 인자 수용체(EGFR)-표적화 요법 또는 치료제(예를 들어, 게피티닙(Iressa™), 에를로티닙(Tarceva™), 세툭시맙(Erbitux™), 라파티닙(Tykerb™), 파니투무맙(Vectibix™), 반데타닙(Caprelsa™), 아파티닙/BIBW2992, CI-1033/카네르티닙, 네라티닙/HKI-272, CP-724714, TAK-285, AST-1306, ARRY334543, ARRY-380, AG-1478, 다코미티닙/PF299804, OSI-420/데스메틸 에를로티닙, AZD8931, AEE788, 펠리티닙/EKB-569, CUDC-101, WZ8040, WZ4002, WZ3146, AG-490, XL647, PD153035, BMS-599626), 소라페닙, 이마티닙, 수니티닙, 다사티닙 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 병태, 질환 또는 장애 또는 병태, 질환 또는 장애와 관련된 증상을 "치료하는" 또는 이의 "치료"는 임상 결과를 포함하여 유익하거나 또는 목적하는 결과를 얻기 위한 접근법을 지칭한다. 유익하거나 또는 목적하는 임상 결과는 하나 이상의 증상 또는 병태의 완화 또는 개선, 병태, 장애 또는 질환의 정도의 감소, 병태, 장애 또는 질환의 상태의 안정화, 병태, 장애 또는 질환의 발병의 예방, 병태, 장애 또는 질환의 확산의 예방, 병태, 장애 또는 질환 진행의 지연 또는 둔화, 병태, 장애 또는 질환 발병의 지연 또는 둔화, 부분적이든 전체적이든 병태, 장애 또는 질환 상태 및 관해의 개선 또는 경감을 포함할 수 있지만, 이들로 제한되지 않는다. "치료하는"은 또한 치료의 부재시에 예상되는 것 이상으로 대상체의 생존을 연장하는 것을 의미할 수 있다. "치료하는"은 또한 병태, 장애 또는 질환의 진행을 저해하고 병태, 장애 또는 질환의 진행을 일시적으로 늦추는 것을 의미할 수 있지만, 일부 경우에는 병태, 장애 또는 질환의 진행을 영구적으로 정지시키는 것을 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 치료, 치료하다 또는 치료하는은 프로테이스의 발현을 특징으로 하는 하나 이상의 질환 또는 병태의 증상 또는 프로테이스의 발현을 특징으로 하는 질환 또는 병태의 증상의 효과를 감소시키는 방법을 지칭한다. 따라서, 개시된 방법에서, 치료는 확립된 질환, 병태, 또는 질환 또는 병태의 증상의 중증도의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100%의 감소를 지칭할 수 있다. 예를 들어, 질환을 치료하는 방법은 대조군과 비교하여 대상체에서 질환의 하나 이상의 증상이 10% 감소되는 경우 치료로 간주된다. 따라서, 감소는 천연 또는 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100% 또는 10%와 100% 사이의 임의의 백분율의 감소일 수 있다. 치료가 반드시 질환, 병태, 또는 질환 또는 병태의 증상의 치유 또는 완전한 제거를 지칭하는 것은 아님을 이해하여야 한다. 또한, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 줄이는, 감소시키는 또는 저해하는에 대한 언급은 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상의 변화를 포함하며, 이러한 용어는 완전한 제거를 포함하지만 반드시 완전한 제거를 포함하지는 않는다.
용어 "용량" 및 "투여량"은 본 명세서에서 상호교환적으로 사용된다. 용량은 각 투여시 개체에게 제공되는 활성 성분의 양을 지칭한다. 용량은 주어진 요법에 대한 정상 용량의 범위, 투여 빈도; 개체의 크기 및 내성; 병태의 중증도; 부작용의 위험; 및 투여 경로를 포함하여 다수의 인자에 따라 달라질 것이다. 당업자는 용량이 위의 인자에 따라 또는 치료 진행을 기반으로 변경될 수 있음을 인식할 것이다. 용어 "투여 형태"는 약품 또는 약제학적 조성물의 특정 형식을 지칭하며, 투여 경로에 의존한다. 예를 들어, 투여 형태는 분무를 위한, 예를 들어, 흡입제를 위한 액체 형태, 예를 들어, 경구 전달을 위한 정제 또는 액체 또는, 예를 들어, 주사를 위한 식염수일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 "치료학적 유효 용량 또는 양"은 투여되는 효과(예를 들어, 질환을 치료하거나 예방)를 생성하는 용량을 의미한다. 정확한 용량 및 제형은 치료의 목적에 따라 다를 것이며, 공지된 기법을 사용하여 당업자가 확인할 수 있다(예를 들어, 문헌[Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Gennaro, Editor (2003), 및 Pickar, Dosage Calculations (1999)] 참조). 예를 들어, 주어진 매개변수에 대해, 치료학적 유효량은 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 90% 또는 적어도 100%의 증가 또는 감소를 나타낼 것이다. 치료적 효능은 또한 "-배" 증가 또는 감소로 표현될 수 있다. 예를 들어, 치료학적 유효량은 표준 대조군에 비해 적어도 1.2-배, 1.5-배, 2-배, 5-배 이상의 효과를 가질 수 있다. 치료학적 유효 용량 또는 양은 질환의 하나 이상의 증상을 개선할 수 있다. 치료학적 유효 용량 또는 양은 투여되는 효과가 질환이 발병할 위험이 있는 사람을 치료하는 것인 경우 질환 또는 질환의 하나 이상의 증상의 발병을 예방하거나 또는 지연시킬 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "투여하는"은 대상체에 대한 경구 투여, 좌약으로서의 투여, 국소 접촉, 정맥내, 복강내, 근육내, 병변내, 척추강내, 비강내 또는 피하 투여, 또는 서방성 장치, 예를 들어, 미니-삼투압 펌프의 이식을 의미한다. 투여는 비경구 및 경점막(예를 들어, 협측, 설하, 구개, 치은, 비강, 질, 직장 또는 경피)을 포함하는 임의의 경로를 통해 이루어진다. 비경구 투여는, 예를 들어, 정맥내, 근육내, 세동맥내, 피내, 피하, 복강내, 뇌실내 및 두개내를 포함한다. 전달의 다른 방식은 리포솜 제형, 정맥내 주입, 경피 패치 등의 사용을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. "병용 투여"는 본 명세서에 기재된 조성물이 하나 이상의 추가적인 요법, 예를 들어 암 요법, 예컨대, 화학요법, 호르몬 요법, 방사선 요법 또는 면역요법의 투여 직전 또는 직후에 동시에 투여됨을 의미한다. 본 발명의 화합물은 환자에게 단독으로 투여될 수 있거나 또는 병용 투여될 수 있다. 병용 투여는 화합물을 개별적으로 또는 조합하여(하나 이상의 화합물) 동시 또는 순차적으로 투여하는 것을 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 제제는 또한 원할 경우 다른 활성 물질(예를 들어, 대사적 분해 감소를 위한)과 조합될 수 있다. 본 발명의 조성물은 어플리케이터 스틱, 용액, 현탁액, 에멀션, 겔, 크림, 연고, 페이스트, 젤리, 페인트, 분말 및 에어로졸로 제형화된 국소 경로에 의해 경피로 전달될 수 있다.
본 발명의 조성물은 지속 방출 및/또는 편안함을 제공하기 위한 성분을 추가적으로 포함할 수 있다. 이러한 성분은 고분자량, 음이온성 점액모방 중합체, 겔화 다당류 및 미세 분할된 약물 담체 기질을 포함한다. 이러한 성분은 미국 특허 제4,911,920호; 제5,403,841호; 제5,212,162호; 및 제4,861,760호에 더 상세히 논의되어 있다. 이들 특허의 전체 내용은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용된다. 본 발명의 조성물은 또한 체내에서 느린 방출을 위한 마이크로스피어로서 전달될 수 있다. 예를 들어, 마이크로스피어는 피하로 천천히 방출되는 약물-함유 마이크로스피어의 피내 주사를 통해(문헌[Rao, J. Biomater Sci. Polym. Ed. 7:623-645, 1995] 참조); 생분해성 및 주사용 겔 제형으로(예를 들어, 문헌[Gao Pharm. Res. 12:857-863, 1995] 참조); 또는 경구 투여를 위한 마이크로스피어로 (예를 들어, 문헌[Eyles, J. Pharm. Pharmacol. 49:669-674, 1997] 참조) 투여될 수 있다. 실시형태에서, 본 발명의 조성물의 제형은 세포막과 융합하거나 또는 세포내이입되는 리포솜의 사용에 의해, 즉, 세포의 표면 막 단백질 수용체에 결합하여 세포내이입을 유발하는 리포솜에 부착된 수용체 리간드를 사용함으로써 전달될 수 있다. 리포솜을 사용함으로써, 특히 리포솜 표면이 표적 세포에 특이적인 수용체 리간드를 운반하거나 또는 그렇지 않으면 우선적으로 특정 기관으로 지시되는 경우, 생체내에서 본 발명의 조성물을 표적 세포에 전달하는데 집중할 수 있다. (예를 들어, 문헌[Al-Muhammed, J. Microencapsul. 13:293-306, 1996; Chonn, Curr. Opin. Biotechnol. 6:698-708, 1995; Ostro, Am. J. Hosp. Pharm. 46:1576-1587, 1989] 참조). 본 발명의 조성물은 또한 나노입자로 전달될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "약제학적으로 허용 가능한"은 "생리학적으로 허용 가능한" 및 "약리학적으로 허용 가능한"과 동의어로 사용된다. 약제학적 조성물은 일반적으로 완충을 위한 작용제 및 보관을 위한 보존제를 포함할 것이며, 투여 경로에 따라 적절한 전달을 위한 완충제 및 담체를 포함할 수 있다.
"약제학적으로 허용 가능한 부형제" 및 "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 대상체에 대한 활성제의 투여 및 대상체에 의한 흡수를 돕는 물질을 지칭하며, 환자에게 현저하게 유해한 독성학적 효과를 야기하지 않으면서 본 발명의 조성물에 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제의 비제한적인 예는 물, NaCl, 생리식염수, 젖산 링거, 일반 수크로스, 일반 글루코스, 결합제, 충전제, 붕해제, 윤활제, 코팅제, 감미제, 향미제, 염 용액(예컨대, 링거 용액), 알코올, 오일, 젤라틴, 탄수화물, 예컨대, 락토스, 아밀로스 또는 전분, 지방산 에스터, 하이드록시메틸셀룰로스, 폴리바이닐 피롤리딘 및 착색제 등을 포함한다. 이러한 제제는 멸균될 수 있고, 원하는 경우, 윤활제, 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 미치는 염, 완충제, 착색제 및/또는 본 발명의 화합물과 유해하게 반응하지 않는 방향족 물질 등과 같은 보조제와 혼합될 수 있다. 당업자는 다른 약제학적 부형제도 본 발명에 유용함을 인식할 것이다.
용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 당업계에 잘 알려진 다양한 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유래되는 염을 지칭하고, 단지 예로서, 소듐, 포타슘, 칼슘, 마그네슘, 암모늄, 테트라알킬암모늄 등; 및 분자가 염기성 작용기를 포함하는 경우, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 타트레이트, 메실레이트, 아세테이트, 말레이트, 옥살레이트 등과 같은 유기 또는 무기산의 염을 포함한다.
용어 "제제"는 다른 담체의 유무에 관계없이 활성 성분이 담체에 의해 둘러싸이고 이와 회합하는 캡슐을 제공하는 담체로서 캡슐화 물질과 함께 활성 화합물의 제형을 포함하는 것으로 의도된다. 유사하게는, 카쉐(cachet) 및 로젠지가 포함된다. 정제, 분말, 캡슐, 알약, 카쉐 및 로젠지는 경구 투여에 적합한 고체 투여 형태로 사용될 수 있다.
약제학적 제제는 선택적으로 단위 투여 형태이다. 이러한 형태에서, 제제는 적절한 양의 활성 성분을 포함하는 단위 용량으로 세분화된다. 단위 투여 형태는 패키징된 제제일 수 있고, 바이알 또는 앰풀 패키징된 정제, 캡슐 및 분말과 같은 개별 양의 제제를 포함하는 패키지일 수 있다. 또한, 단위 투여 형태는 캡슐, 정제, 카쉐 또는 로젠지 그 자체일 수 있거나 또는 적절한 수의 임의의 이들의 패키징된 형태일 수 있다. 단위 투여 형태는 동결된 분산액일 수 있다.
본 명세서에 기재된 예 및 실시형태는 예시를 위한 것이며, 이에 비추어 다양한 수정 또는 변경이 당업자에게 제안될 것이고, 본 출원의 사상 및 범위와 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되는 것으로 이해된다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
항-ROR2 항체
특히, 높은 효율 및 특이성으로 인간 타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2)에 결합하는 항체(예를 들어, 인간화된 항체, 단일클론 항체), 항체 단편(예를 들어, scFv) 및 항체 조성물(예를 들어, 키메라 항원 수용체, 이중특이성 항체)이 본 명세서에 제공된다. 본 명세서에 제공된 항체 및 항체 조성물은 신규한 경쇄 및 중쇄 도메인 CDR과 프레임워크 영역을 포함하며, 인간 ROR2의 세포외 도메인에 결합하는 것으로 확인되었다. 예를 들어, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체는 높은 친화성 및 특이성으로 ROR2의 크링글 또는 Ig-유사 도메인에 결합할 수 있다. 또한, 출원인은 ROR2 세포외 도메인 내의 아미노산 잔기를 특성화하였으며, 이는 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체의 결합에 중요하다. 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 기재된 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체는 높은 효율 및 친화성으로 인간 ROR2에 결합하고 ROR2를 발현하는 세포에서 ROR2 신호전달을 저해하는데 유용하다. 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체는 암 및 기타 ROR2-관련 질환에서 진단 및 치료 목적으로 사용될 수 있다. 본 명세서에 제공된 가변 경쇄 및 가변 중쇄 도메인은 특히 항-ROR2 키메라 항원 수용체 또는 항-ROR2 이중특이성 항체의 일부를 형성할 수 있다. 또한, 이들의 내재화 특성으로 인해, 본 명세서에 제공된 항-ROR2 항체 중 일부는 치료적 모이어티에 부착되어 항체-약물 접합체(ADC)로서 사용될 수 있거나, 또는 검출 가능한 모이어티에 부착되어 진단적 목적으로 사용될 수 있다. 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체는 ROR2 발현 전이성 세포의 이동을 저해하는 능력을 가지므로, ROR2-발현 암세포가 있는 환자에서 전이의 위험을 완화시킬 수 있다.
본 명세서에 제공된 예시적인 항-ROR2 항체는 클론 명칭(예를 들어, 6E6, 4G9, 5C11 및 5G3)으로 지칭된다. 실시형태에서, 항-ROR2 항체는 항체 6E6이다. 실시형태에서, 항체 6E6은 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 실시형태에서, 항체 6E6은 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 갖되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함한다. 실시형태에서, 항-ROR2 항체는 항체 4G9이다. 실시형태에서, 항체 4G9는 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 실시형태에서, 항체 4G9는 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 갖되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함한다. 실시형태에서, 항-ROR2 항체는 항체 5C11이다. 실시형태에서, 항체 5C11은 서열번호 10의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 12의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 실시형태에서, 항체 5C11은 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 갖되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함한다. 실시형태에서, 항-ROR2 항체는 항체 5G3이다. 실시형태에서, 항체 5G3은 서열번호 14의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 16의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 실시형태에서, 항체 5G3은 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 갖되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함한다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함한다.
위에 기재된 바와 같이, 본 명세서에 제공된 "경쇄 가변(VL) 도메인"은 항체, 항체 변이체 또는 이의 단편의 경쇄의 가변 영역을 지칭한다. 마찬가지로, 본 명세서에 제공된 "중쇄 가변(VH) 도메인"은 항체, 항체 변이체 또는 이의 단편의 중쇄의 가변 영역을 지칭한다. 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인은 함께 항원(에피토프)에 결합하는 파라토프를 형성한다. 파라토프 또는 항원-결합 부위는 항체, 항체 변이체 또는 이의 단편의 N-말단에 형성된다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 항체 경쇄의 CDR L1, CDR L2, CDR L3 및 FR L1, FR L2, FR L3 및 FR L4(프레임워크 영역)를 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 항체 중쇄의 CDR H1, CDR H2, CDR H3 및 FR H1, FR H2, FR H3 및 FR H4(프레임워크 영역)를 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인 및 경쇄 불변(CL) 도메인은 항체 경쇄의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인 및 중쇄 불변(CH1) 도메인은 항체 중쇄의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인 및 하나 이상의 중쇄 불변(CH1, CH2 또는 CH3) 도메인은 항체 중쇄의 일부를 형성한다. 따라서, 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 치료적 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 치료적 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 인간 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 인간 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 인간화된 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 인간화된 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 키메라 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 키메라 항체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 항체 단편의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 항체 단편의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 항체 변이체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 항체 변이체의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 Fab의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 Fab의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 경쇄 가변(VL) 도메인은 scFv의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 중쇄 가변(VH) 도메인은 scFv의 일부를 형성한다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2의 서열이다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4의 서열이다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 49에 제시된 FR H1, 서열번호 50에 제시된 FR H2, 서열번호 51에 제시된 FR H3 및 서열번호 52에 제시된 FR H4를 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 53에 제시된 FR L1, 서열번호 54에 제시된 FR L2, 서열번호 55에 제시된 FR L3 및 서열번호 56에 제시된 FR L4를 포함한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 크링글 도메인이다. 실시형태에서, 크링글 도메인은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 또는 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 및 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 또는 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 및 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다.
실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다.
특정 에피토프(예를 들어, ROR2 단백질, ROR2의 크링글 도메인 또는 Ig-유사 도메인)에 결합하는 항체의 능력은 평형 해리 상수(KD)에 의해 설명될 수 있다. 본 명세서에서 정의된 바와 같은 평형 해리 상수(KD)는 ROR2 단백질에 대한 항체의 해리 속도(K-off) 및 결합 속도(K-on)의 비이다. 이는 다음 공식에 의해 설명된다: KD = K-off/K-on.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.9nM 내지 1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.1nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 0.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM, 0.1nM, 0.2nM, 0.3nM, 0.4nM, 0.5nM, 0.6nM, 0.7nM, 0.8nM, 0.9nM, 1nM, 1.1nM, 1.2nM, 1.3nM, 1.4nM, 1.5nM, 1.6nM, 1.7nM, 1.8nM, 1.9nM, 2nM, 2.1nM, 2.2nM, 2.3nM, 2.4nM, 2.5nM, 2.6nM, 2.7nM, 2.8nM, 2.9nM, 3nM, 3.1nM, 3.2nM, 3.3nM, 3.4nM, 3.5nM, 3.6nM, 3.7nM, 3.8nM, 3.9nM, 4nM, 4.1nM, 4.2nM, 4.3nM, 4.4nM, 4.5nM, 4.6nM, 4.7nM, 4.8nM, 4.9nM, 5nM, 5.1nM, 5.2nM, 5.3nM, 5.4nM, 5.5nM, 5.6nM, 5.7nM, 5.8nM, 5.9nM, 6nM, 6.1nM, 6.2nM, 6.3nM, 6.4nM, 6.5nM, 6.6nM, 6.7nM, 6.8nM, 6.9nM, 7nM, 7.1nM, 7.2nM, 7.3nM, 7.4nM, 7.5nM, 7.6nM, 7.7nM, 7.8nM, 7.9nM, 8nM, 8.1nM, 8.2nM, 8.3nM, 8.4nM, 8.5nM, 8.6nM, 8.7nM, 8.8nM, 8.9nM, 9nM, 9.1nM, 9.2nM, 9.3nM, 9.4nM, 9.5nM, 9.6nM, 9.7nM, 9.8nM, 9.9nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 약 0.06nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 항체 6E6이며, 0.01nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체 6E6은 0.01nM, 0.05nM, 0.1nM, 0.2nM, 0.3nM, 0.4nM, 0.5nM, 0.6nM, 0.7nM, 0.8nM, 0.9nM, 1nM, 1.5nM, 2nM, 2.5nM, 3nM, 3.5nM, 4nM, 4.5nM, 5nM, 5.5nM, 6nM, 6.5nM, 7nM, 7.5nM, 8nM, 8.5nM, 9nM, 9.5nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 항체 6E6이며, 0.06nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 항체는 진단제에 부착된다. 실시형태에서, 진단제는 검출 가능한 모이어티이다.
일 실시형태에서, 항체는 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일 실시형태에서, 항체는 (i) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2; 서열번호 27에 제시된 CDR H3; 서열번호 49에 제시된 FR H1, 서열번호 50에 제시된 FR H2, 서열번호 51에 제시된 FR H3 및 서열번호 52에 제시된 FR H4를 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (ii) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2, 서열번호 30에 제시된 CDR L3; 서열번호 53에 제시된 FR L1, 서열번호 54에 제시된 FR L2, 서열번호 55에 제시된 FR L3 및 서열번호 56에 제시된 FR L4를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 추가의 실시형태에서, 항체는 항체 6E6이다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함한다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 6의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 6의 서열이다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 8의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 8의 서열이다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 57에 제시된 FR H1, 서열번호 58에 제시된 FR H2, 서열번호 59에 제시된 FR H3 및 서열번호 60에 제시된 FR H4를 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 61에 제시된 FR L1, 서열번호 62에 제시된 FR L2, 서열번호 63에 제시된 FR L3 및 서열번호 64에 제시된 FR L4를 포함한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인이다. 실시형태에서, Ig-유사 도메인은 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다.
실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 349번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 349번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다.
실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.6nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.4nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.8nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.2nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.6nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3.4nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3.8nM 내지 nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.2nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.6nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 4.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 4.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 3.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 3.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 2.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 2.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 1.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 1.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.2nM 내지 0.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 2.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 3.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 4.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 5.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 6.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 7.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 8.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 9.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 8.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 7.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 6.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 5.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 4.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 3.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 2.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 1.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.1nM, 0.4nM, 0.8nM, 1.2nM, 1.6nM, 2nM, 2.4nM, 2.8nM, 3.2nM, 3.6nM, 4nM, 4.4nM, 4.8nM, 5.2nM, 5.6nM, 6nM, 6.4nM, 6.8nM, 7.2nM, 7.6nM, 8nM, 8.4nM, 8.8nM, 9.2nM, 9.6nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 약 1.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 항체 4G9이며, 0.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체 4G9는 0.1nM, 0.4nM, 0.8nM, 1.2nM, 1.6nM, 2nM, 2.4nM, 2.8nM, 3.2nM, 3.6nM, 4nM, 4.4nM, 4.8nM, 5.2nM, 5.6nM, 6nM, 6.4nM, 6.8nM, 7.2nM, 7.6nM, 8nM, 8.4nM, 8.8nM, 9.2nM, 9.6nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 항체 4G9이며, 1.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 항체는 진단제에 부착된다. 실시형태에서, 진단제는 검출 가능한 모이어티이다.
일 실시형태에서, 항체는 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일 실시형태에서, 항체는 (i) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2; 서열번호 33에 제시된 CDR H3; 서열번호 57에 제시된 FR H1, 서열번호 58에 제시된 FR H2, 서열번호 59에 제시된 FR H3 및 서열번호 60에 제시된 FR H4를 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (ii) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2, 서열번호 36에 제시된 CDR L3; 서열번호 61에 제시된 FR L1, 서열번호 62에 제시된 FR L2, 서열번호 63에 제시된 FR L3 및 서열번호 64에 제시된 FR L4를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 추가의 실시형태에서, 항체는 항체 4G9이다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함한다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 10의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 10의 서열이다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 12의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 12의 서열이다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 65에 제시된 FR H1, 서열번호 66에 제시된 FR H2, 서열번호 67에 제시된 FR H3 및 서열번호 68에 제시된 FR H4를 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 69에 제시된 FR L1, 서열번호 70에 제시된 FR L2, 서열번호 71에 제시된 FR L3 및 서열번호 72에 제시된 FR L4를 포함한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 크링글 도메인이다. 실시형태에서, 크링글 도메인은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 및 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 및 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다.
실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 386번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 386번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다.
실시형태에서, 항체는 10nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 20nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 30nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 40nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 50nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 60nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 70nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 80nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 90nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 100nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 110nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 120nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 130nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 140nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 10nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 130nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 120nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 110nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 100nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 90nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 80nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 70nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 60nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 50nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 40nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 30nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 5C11이며, 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 항체는 진단제에 부착된다. 실시형태에서, 진단제는 검출 가능한 모이어티이다.
일 실시형태에서, 항체는 서열번호 10의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 12의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일 실시형태에서, 항체는 (i) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2; 서열번호 39에 제시된 CDR H3; 서열번호 65에 제시된 FR H1, 서열번호 66에 제시된 FR H2, 서열번호 67에 제시된 FR H3 및 서열번호 68에 제시된 FR H4를 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (ii) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2, 서열번호 42에 제시된 CDR L3; 서열번호 69에 제시된 FR L1, 서열번호 70에 제시된 FR L2, 서열번호 71에 제시된 FR L3 및 서열번호 72에 제시된 FR L4를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 추가의 실시형태에서, 항체는 항체 5C11이다.
일 양태에서, 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체가 제공되되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함한다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 14의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 14의 서열이다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 16의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 16의 서열이다.
실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 73에 제시된 FR H1, 서열번호 74에 제시된 FR H2, 서열번호 75에 제시된 FR H3 및 서열번호 76에 제시된 FR H4를 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 77에 제시된 FR L1, 서열번호 78에 제시된 FR L2, 서열번호 79에 제시된 FR L3 및 서열번호 80에 제시된 FR L4를 포함한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인이다. 실시형태에서, Ig-유사 도메인은 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 항체는 10nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 20nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 30nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 40nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 50nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 60nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 70nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 80nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 90nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 100nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 110nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 120nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 130nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 140nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 10nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 130nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 120nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 110nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 100nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 90nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 80nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 70nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 60nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 50nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 40nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 30nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 5G3이며, 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 항체는 진단제에 부착된다. 실시형태에서, 진단제는 검출 가능한 모이어티이다.
일 실시형태에서, 항체는 서열번호 14의 중쇄 가변 도메인 및 서열번호 16의 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일 실시형태에서, 항체는 (i) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2; 서열번호 45에 제시된 CDR H3; 서열번호 73에 제시된 FR H1, 서열번호 74에 제시된 FR H2, 서열번호 75에 제시된 FR H3 및 서열번호 76에 제시된 FR H4를 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (ii) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2, 서열번호 48에 제시된 CDR L3; 서열번호 77에 제시된 FR L1, 서열번호 78에 제시된 FR L2, 서열번호 79에 제시된 FR L3 및 서열번호 80에 제시된 FR L4를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 추가의 실시형태에서, 항체는 항체 5G3이다.
이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체(예를 들어, 항체 6e6, 4G9, 5C11 또는 5G3)는 인간화된 항체일 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체는 인간화된 항체이다. 실시형태에서, 항체는 키메라 항체이다. 실시형태에서, 항체는 Fab' 단편이다. 실시형태에서, 항체는 IgG이다. 실시형태에서, 항체는 IgG이다. 본 명세서에 제공된 항-ROR2 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4일 수 있다. 실시형태에서, 항체는 IgG1이다. 실시형태에서, 항체는 IgG2이다. 실시형태에서, 항체는 IgG2a이다. 실시형태에서, 항체는 IgG3이다. 실시형태에서, 항체는 IgG4이다.
실시형태에서, 항체는 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 UniProt 참조 번호 Q9Z138로 확인된 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20 또는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다.
일 양태에서, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체(예를 들어, 항체 6e6, 4G9, 5C11 또는 5G3)에 의해 결합된 제공되는 ROR2 단백질은 세포(예를 들어, 암세포)에 의해 발현될 수 있다. 따라서, 실시형태에서, ROR2 단백질은 세포에서 발현된다. 실시형태에서, 세포는 암세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 난소암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 췌장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 자궁경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 위암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 신장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 두경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 뼈암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 피부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 전립선암 세포이다.
실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체(예를 들어, 항체 6E6, 4G9, 5C11 또는 5G3)는 ROR2-음성 세포에 결합하지 않는다. 본 명세서에 제공되는 "ROR2-음성 세포"는 표준 대조군에 비해 검출 가능한 양의 ROR2 단백질을 발현하지 않는 세포이다. 실시형태에서, ROR2-음성 세포의 발현 수준은 세포에서 단백질 발현을 검출하기 위해 당업계에 통상적으로 공지된 방법(예를 들어, 면역형광 검출, 단백질 생화학, RNA 발현 수준)을 사용하여 검출할 수 없다. 실시형태에서, ROR2-음성 세포의 발현 수준은 표준 대조군(예를 들어, 종래의 방법을 사용하여 검출 가능한 수준의 ROR2를 발현하는 세포)의 발현 수준보다 1000배, 500배, 100배, 50배, 25배, 20배, 10배, 5배 또는 1.5배 더 낮다. ROR2-음성 세포의 비제한적인 예는 건강한 대상체로부터의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함한다.
본 명세서에 제공된 항체의 임의의 가변 경쇄 도메인 또는 가변 중쇄는 scFv의 일부를 형성할 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체는 단일쇄 항체(scFv)이다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인은 scFv의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 링커는 scFv의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 82의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 리더 펩타이드는 scFv의 일부를 형성한다. 실시형태에서, 리더 펩타이드는 서열번호 81의 서열을 포함한다. 실시형태에서, scFv는 중쇄 불변 영역(CH2-CH3)을 더 포함한다. 실시형태에서, 중쇄 불변 영역은 서열번호 84의 서열을 포함한다.
실시형태에서, scFv는 서열번호 85의 서열을 포함한다. 실시형태에서, scFv는 서열번호 85의 서열이다.
실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 10nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.9nM 내지 1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 2.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 3.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 4.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 5.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 7.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 8.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.1nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.2nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.3nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.4nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.5nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.6nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.7nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.8nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 9.9nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 1.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.9nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.8nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.7nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.6nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.5nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.4nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.3nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.2nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 0.1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 0.01nM, 0.1nM, 0.2nM, 0.3nM, 0.4nM, 0.5nM, 0.6nM, 0.7nM, 0.8nM, 0.9nM, 1nM, 1.1nM, 1.2nM, 1.3nM, 1.4nM, 1.5nM, 1.6nM, 1.7nM, 1.8nM, 1.9nM, 2nM, 2.1nM, 2.2nM, 2.3nM, 2.4nM, 2.5nM, 2.6nM, 2.7nM, 2.8nM, 2.9nM, 3nM, 3.1nM, 3.2nM, 3.3nM, 3.4nM, 3.5nM, 3.6nM, 3.7nM, 3.8nM, 3.9nM, 4nM, 4.1nM, 4.2nM, 4.3nM, 4.4nM, 4.5nM, 4.6nM, 4.7nM, 4.8nM, 4.9nM, 5nM, 5.1nM, 5.2nM, 5.3nM, 5.4nM, 5.5nM, 5.6nM, 5.7nM, 5.8nM, 5.9nM, 6nM, 6.1nM, 6.2nM, 6.3nM, 6.4nM, 6.5nM, 6.6nM, 6.7nM, 6.8nM, 6.9nM, 7nM, 7.1nM, 7.2nM, 7.3nM, 7.4nM, 7.5nM, 7.6nM, 7.7nM, 7.8nM, 7.9nM, 8nM, 8.1nM, 8.2nM, 8.3nM, 8.4nM, 8.5nM, 8.6nM, 8.7nM, 8.8nM, 8.9nM, 9nM, 9.1nM, 9.2nM, 9.3nM, 9.4nM, 9.5nM, 9.6nM, 9.7nM, 9.8nM, 9.9nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, scFv는 약 0.07nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6E6 scFv이며, 0.01nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 6E6 scFv는 0.01, 0.05, 0.1nM, 0.2nM, 0.3nM, 0.4nM, 0.5nM, 0.6nM, 0.7nM, 0.8nM, 0.9nM, 1nM, 1.5nM, 2nM, 2.5nM, 3nM, 3.5nM, 4nM, 4.5nM, 5nM, 5.5nM, 6nM, 6.5nM, 7nM, 7.5nM, 8nM, 8.5nM, 9nM, 9.5nM 또는 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 6E6 scFv이며, 0.07nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
일 실시형태에서, scFv는 N-말단에서 C-말단까지 다음을 포함한다: 서열번호 81의 리더 펩타이드, 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인, 서열번호 82의 링커 도메인, 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인, 서열번호 83의 스페이서 및 서열번호 84의 불변 중쇄 도메인(CH2-CH3). 하나의 추가의 실시형태에서, scFv는 6E6 scFv이다.
실시형태에서, scFv는 서열번호 86의 서열을 포함한다. 실시형태에서, scFv는 서열번호 86의 서열이다.
실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 20nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 30nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 40nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 50nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 60nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 70nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 80nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 90nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 100nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 110nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 120nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 130nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 140nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, scFv는 0.01nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 1nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 130nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 120nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 110nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 100nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 90nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 80nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 70nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 60nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 50nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 40nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 30nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, scFv는 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, scFv는 4G9 scFv이며, 0.01nM, 1nM, 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
일 실시형태에서, scFv는 N-말단에서 C-말단까지 다음을 포함한다: 서열번호 81의 리더 펩타이드; 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인, 서열번호 82의 링커 도메인, 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인, 서열번호 83의 스페이서 및 서열번호 84의 불변 중쇄 도메인(CH2-CH3). 하나의 추가의 실시형태에서, scFv는 4G9 scFv이다.
실시형태에서, scFv는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, scFv는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, scFv는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, scFv는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 크링글 도메인이다. 실시형태에서, 크링글 도메인은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인이다. 실시형태에서, Ig-유사 도메인은 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, scFv는 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, scFv는 UniProt 참조 번호 Q9Z138로 확인된 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 scFv는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 scFv는 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 scFv는 서열번호 20 또는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 scFv는 서열번호 20의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 scFv는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다.
또 다른 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4의 서열을 포함한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 3의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 6의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 8의 서열을 포함한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 5의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 7의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 10의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 12의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 9의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 11의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 14의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 16의 서열을 포함한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 14의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 16의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
일 양태에서, 항-ROR2 항체가 제공된다. 항-ROR2 항체는 서열번호 13의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 15의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 크링글 도메인이다. 실시형태에서, 크링글 도메인은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인이다. 실시형태에서, Ig-유사 도메인은 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 및 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 및 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다.
실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 22의 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘을 포함한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함한다.
실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 인간 ROR2 단백질이다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인이다. 실시형태에서, Ig-유사 도메인은 서열번호 22의 79번 내지 147번 위치에 상응하는 잔기를 포함한다.
실시형태에서, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 항체는 진단제에 부착된다. 실시형태에서, 진단제는 검출 가능한 모이어티이다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 20nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 30nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 40nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 50nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 60nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 70nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 80nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 90nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 100nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 110nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 120nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 130nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 140nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 130nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 120nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 110nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 100nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 90nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 80nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 70nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 60nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 50nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 40nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 30nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 10nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM, 1nM, 10nM, 20nM, 30nM, 40nM, 50nM, 60nM, 70nM, 80nM, 90nM, 100nM, 110nM, 120nM, 130nM, 140nM 또는 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
본 명세서에 제공된 에피토프에 결합하는 항체는 인간화된 항체일 수 있다. 따라서, 실시형태에서, 항체는 인간화된 항체이다. 실시형태에서, 항체는 키메라 항체이다. 실시형태에서, 항체는 Fab' 단편이다. 실시형태에서, 항체는 IgG이다. 실시형태에서, 항체는 IgG이다. 본 명세서에 제공된 항-ROR2 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4일 수 있다. 실시형태에서, 항체는 IgG1이다. 실시형태에서, 항체는 IgG2이다. 실시형태에서, 항체는 IgG2a이다. 실시형태에서, 항체는 IgG3이다. 실시형태에서, 항체는 IgG4이다.
실시형태에서, 항체는 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 UniProt 참조 번호 Q9Z138로 확인된 마우스 ROR2 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20 또는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 20의 단백질에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 서열번호 24의 단백질에 결합하지 않는다.
실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 20의 386번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 349번 위치에 상응하는 위치에서 아르기닌에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 354번 위치에 상응하는 위치에서 글루탐산에 결합하지 않는다. 실시형태에서, 항체는 서열번호 24의 386번 위치에 상응하는 위치에서 발린에 결합하지 않는다.
실시형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 ROR2-음성 세포에 결합하지 않는다. 본 명세서에 제공되는 "ROR2-음성 세포"는 표준 대조군에 비해 검출 가능한 양의 ROR2 단백질을 발현하지 않는 세포이다. 실시형태에서, ROR2-음성 세포의 발현 수준은 세포에서 단백질 발현을 검출하기 위해 당업계에서 통상적으로 공지된 방법(예를 들어, 면역형광 검출, 단백질 생화학, RNA 발현 수준)을 사용하여 검출할 수 없다. 실시형태에서, ROR2-음성 세포의 발현 수준은 표준 대조군(예를 들어, 종래의 방법을 사용하여 검출 가능한 수준의 ROR2를 발현하는 세포)의 발현 수준보다 1000배, 500배, 100배, 50배, 25배, 20배, 10배, 5배 또는 1.5배 더 낮다. ROR2-음성 세포의 비제한적인 예는 건강한 대상체로부터의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 포함한다.
키메라 항원 수용체 단백질
위에 기재된 바와 같이, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 중쇄 가변(VH) 도메인 및 경쇄 가변(VL) 도메인은 각각 독립적으로 항체의 일부, 항체의 단편, 또는 키메라 항원 수용체 또는 이중특이성 항체를 형성할 수 있다. 특히, 본 명세서에 제공된 경쇄 가변(VL) 도메인 및/또는 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함하여 인간 ROR2에 효과적이고 효율적으로 결합할 수 있는 키메라 항원 수용체 및 이중특이성 항체가 본 명세서에 제공된다. 키메라 항원 수용체의 항체 영역은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 임의의 경쇄 및 중쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다. 본 명세서에 제공된 경쇄 가변(VL) 도메인 및/또는 중쇄 가변(VH) 도메인은 키메라 항원 수용체의 일부를 형성할 수 있다. 따라서, 일 양태에서, (i) (a) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다. 일 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 항체 6E6의 경쇄 가변 도메인 및 항체 6E6의 중쇄 가변 도메인을 포함한다.
또 다른 양태에서, (i) (a) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다. 일 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 항체 4G9의 경쇄 가변 도메인 및 항체 4G9의 중쇄 가변 도메인을 포함한다.
또 다른 양태에서, (i) (a) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다. 일 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 항체 5C11의 경쇄 가변 도메인 및 항체 5C11의 중쇄 가변 도메인을 포함한다.
일 양태에서, (i) (a) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체가 제공된다. 일 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 항체 5G3의 경쇄 가변 도메인 및 항체 5G3의 중쇄 가변 도메인을 포함한다.
본 명세서에 제공되는 "항체 영역"은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 재조합 단백질(예를 들어, CAR, 이중특이성 항체)의 일부를 형성하는 1가 또는 다가의 단백질 모이어티를 지칭한다. 따라서, 당업자는 항체 영역이 항원(에피토프)에 결합할 수 있는 단백질 모이어티라는 것을 즉시 인식할 것이다. 따라서, 본 명세서에 제공된 항체 영역은 항체의 도메인(예를 들어, 경쇄 가변(VL) 도메인, 중쇄 가변(VH) 도메인) 또는 항체의 단편(예를 들어, Fab)을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 영역은 단백질 접합체이다. 본 명세서에 제공되는 "단백질 접합체"는 하나 이상의 폴리펩타이드로 구성되는 작제물을 지칭하되, 폴리펩타이드는 공유적으로 또는 비-공유적으로 함께 결합된다. 실시형태에서, 단백질 접합체의 폴리펩타이드는 하나의 핵산 분자에 의해 암호화된다. 실시형태에서, 단백질 접합체의 폴리펩타이드는 상이한 핵산 분자에 의해 암호화된다. 실시형태에서, 폴리펩타이드는 링커를 통해 연결된다. 실시형태에서, 폴리펩타이드는 화학적 링커를 통해 연결된다. 실시형태에서, 항체 영역은 scFv이다. 항체 영역은 경쇄 가변(VL) 도메인 및/또는 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 항체 영역은 경쇄 가변(VL) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 영역은 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함한다.
본 명세서에 제공되는 "막관통 도메인"은 생물학적 막의 일부를 형성하는 폴리펩타이드를 지칭한다. 본 명세서에 제공된 막관통 도메인은 생물학적 막(예를 들어, 세포막)의 한쪽에서 막의 다른 쪽까지 걸쳐있을 수 있다. 실시형태에서, 막관통 도메인은 세포막의 세포내 측에서부터 세포외 측까지 걸쳐져 있다. 막관통 도메인은 비극성의 소수성 잔기를 포함할 수 있으며, 이는 생물학적 막(예를 들어, T 세포의 세포막)에서 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 단백질을 고정한다. 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 단백질을 고정할 수 있는 임의의 막관통 도메인이 상정된다. 막관통 도메인의 비제한적인 예는 CD28, CD8, CD4 또는 CD3-제타의 막관통 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 막관통 도메인은 CD4 막관통 도메인이다.
실시형태에서, 막관통 도메인은 CD28 막관통 도메인이다. 본 명세서에 제공된 용어 "CD28 막관통 도메인"은 CD28의 막관통 도메인의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD28 막관통 도메인 활성(예를 들어, CD28 막관통 도메인과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD28 막관통 도메인 폴리펩타이드와 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD28은 NCBI 서열 참조 GI:340545506으로 확인된 단백질, 이의 상동체 또는 기능적 단편이다.
실시형태에서, 막관통 도메인은 CD8 막관통 도메인이다. 본 명세서에 제공된 용어 "CD8 막관통 도메인"은 CD8의 막관통 도메인의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD8 막관통 도메인 활성(예를 들어, CD8 막관통 도메인과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD8 막관통 도메인 폴리펩타이드와 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD8은 NCBI 서열 참조 GI:225007534로 확인된 단백질, 이의 상동체 또는 기능적 단편이다.
실시형태에서, 막관통 도메인은 CD4 막관통 도메인이다. 본 명세서에 제공된 용어 "CD4 막관통 도메인"은 CD4의 막관통 도메인의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD4 막관통 도메인 활성(예를 들어, CD4 막관통 도메인과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD4 막관통 도메인 폴리펩타이드와 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD4는 NCBI 서열 참조 GI:303522473으로 확인된 단백질, 이의 상동체 또는 기능적 단편이다.
실시형태에서, 막관통 도메인은 CD3-제타(CD247로도 알려져 있음) 막관통 도메인이다. 본 명세서에 제공된 용어 "CD3-제타 막관통 도메인"은 CD3-제타의 막관통 도메인의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD3-제타 막관통 도메인 활성(예를 들어, CD3-제타 막관통 도메인과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD3-제타 막관통 도메인 폴리펩타이드와 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD3-제타는 NCBI 서열 참조 GI:166362721로 확인된 단백질, 이의 상동체 또는 기능적 단편이다.
실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 세포내 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함한다. 본 명세서에 제공되는 "세포내 T-세포 신호전달 도메인"은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체 영역에 대한 항원의 결합에 반응하여 1차 신호전달을 제공할 수 있는 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인의 신호전달은 이를 발현하는 T 세포의 활성화를 초래한다. 실시형태에서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인의 신호전달은 이를 발현하는 T 세포의 증식(세포 분열)을 초래한다. 실시형태에서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인의 신호전달은 활성화된 T 세포의 특징에 대해 당업계에 공지된 단백질(예를 들어, CTLA-4, PD-1, CD28, CD69)의 상기 T 세포에 의한 발현을 초래한다. 실시형태에서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인은 CD3 ζ 세포내 T-세포 신호전달 도메인이다.
실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 세포내 공동-자극 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함한다. 본 명세서에 제공되는 "세포내 공동-자극 신호전달 도메인"은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체 영역에 대한 항원의 결합에 반응하여 공동-자극 신호전달을 제공할 수 있는 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 공동-자극 신호전달 도메인의 신호전달은 결과 사이토카인의 생성 및 이를 발현하는 T 세포의 증식을 초래한다. 실시형태에서, 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 CD28 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, 4-1BB 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, ICOS 세포내 공동-자극 신호전달 도메인 또는 OX-40 세포내 공동-자극 신호전달 도메인이다. 실시형태에서, 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 CD28 세포내 공동-자극 신호전달 도메인이다. 실시형태에서, 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 4-1BB 세포내 공동-자극 신호전달 도메인이다. 실시형태에서, 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 ICOS 세포내 공동-자극 신호전달 도메인이다. 실시형태에서, 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 OX-40 세포내 공동-자극 신호전달 도메인이다.
실시형태에서, 항체 영역은 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 항체 영역은 스페이서 영역을 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 막관통 도메인과 항체 영역 사이에 있다. 본 명세서에 제공되는 "스페이서 영역"은 항체 영역을 막관통 도메인과 연결하는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 중쇄 불변 영역을 막관통 도메인과 연결한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 Fc 영역을 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 Fc 영역이다. 본 명세서에 제공된 조성물에 대해 상정되는 스페이서 영역의 예는 제한 없이 면역글로불린 분자 또는 이의 단편(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) 및 Fc 수용체 결합에 영향을 미치는 돌연변이를 포함하는 면역글로불린 분자 또는 이의 단편(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4)을 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 힌지 영역이다.
본 명세서에서 언급된 용어 "CTLA-4"는 CD152(분화 클러스터 152)로도 알려져 있는 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CTLA-4 활성(예를 들어, CTLA-4와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CTLA-4 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CTLA-4 단백질은 UniProt 참조 번호 P16410으로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에서 언급된 용어 "CD28"은 분화 클러스터 28 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD28 활성(예를 들어, CD28과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD28 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD28 단백질은 UniProt 참조 번호 P10747로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에서 언급된 용어 "CD69"는 분화 클러스터 69 단백질 또는 이의 변이체의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD69 활성(예를 들어, CD69와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD69 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD69 단백질은 UniProt 참조 번호 Q07108로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에서 언급된 용어 "4-1BB"는 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 9(TNFRSF9), 분화 클러스터 137(CD137)로도 알려져 있으며 림프구 활성화(ILA)에 의해 유도되는 4-1BB 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 4-1BB 활성(예를 들어, 4-1BB와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 EGFR 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, 4-1BB 단백질은 UniProt 참조 번호 Q07011로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에 제공된 키메라 항원 수용체는 본 명세서에 기재된 임의의 항-ROR2 항체 또는 이의 단편을 포함할 수 있다. 따라서, 키메라 항원 수용체는 본 명세서에 제공된 임의의 CDR, FR, 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2, 서열번호 6, 서열번호 10 또는 서열번호 14의 서열을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2, 서열번호 6, 서열번호 10 또는 서열번호 14의 서열이다. 예를 들어, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4, 서열번호 8, 서열번호 12 또는 서열번호 16의 서열을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4, 서열번호 8, 서열번호 12 또는 서열번호 16의 서열이다.
실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 중쇄 불변 도메인을 추가로 포함한다. 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 스페이서 영역을 추가로 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 막관통 도메인과 항체 영역 사이에 있다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 힌지 영역을 추가로 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 서열번호 94의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 서열번호 95의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 스페이서 영역은 서열번호 96의 서열을 포함한다.
실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 링커 도메인을 추가로 포함한다. 실시형태에서, 링커 도메인은 중쇄 가변 도메인과 경쇄 가변 도메인 사이에 있다. 실시형태에서, 링커 도메인은 서열번호 82의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 리더 펩타이드를 추가로 포함한다. 실시형태에서, 리더 펩타이드는 서열번호 93의 서열을 포함한다.
실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 100의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 100의 서열이다. 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 101의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 서열번호 101의 서열이다.
일 실시형태에서, 키메라 항원 수용체는 N-말단에서 C-말단까지 다음을 포함한다: 서열번호 93의 리더 펩타이드, 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인, 서열번호 82의 링커 도메인, 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인, 서열번호 96의 스페이서 도메인, 서열번호 97의 막관통 도메인, 서열번호 98의 세포내 공동-자극 신호전달 도메인 및 서열번호 99의 세포내 T-세포 신호전달 도메인.
일 실시형태에서, 단백질은 N-말단에서 C-말단까지 다음을 포함한다: 서열번호 93의 리더 펩타이드; 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인, 서열번호 82의 링커 도메인, 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인, 서열번호 96의 스페이서 도메인, 서열번호 97의 막관통 도메인, 서열번호 98의 세포내 공동-자극 신호전달 도메인 및 서열번호 99의 세포내 T-세포 신호전달 도메인.
이중특이성 항체
본 명세서에 제공된 경쇄 가변(VL) 도메인 및 중쇄 가변(VH) 도메인은 이중특이성 항체의 일부를 형성할 수 있다. 따라서, 제2 항체 영역은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 임의의 경쇄 및/또는 중쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다.
따라서, 또 다른 양태에서, (i) 효과기 세포 리간드에 결합할 수 있는 제1 항체 영역; 및 (ii) (a) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 제2 항체 영역을 포함하는 이중특이성 항체가 제공된다.
또 다른 양태에서, (i) 효과기 세포 리간드에 결합할 수 있는 제1 항체 영역; 및 (ii) (a) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 제2 항체 영역을 포함하는 이중특이성 항체가 제공된다.
또 다른 양태에서, (i) 효과기 세포 리간드에 결합할 수 있는 제1 항체 영역; 및 (ii) (a) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 제2 항체 영역을 포함하는 이중특이성 항체가 제공된다.
또 다른 양태에서, (i) 효과기 세포 리간드에 결합할 수 있는 제1 항체 영역; 및 (ii) (a) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 제2 항체 영역을 포함하는 이중특이성 항체가 제공된다.
본 명세서에 제공된 용어 "효과기 세포 리간드"는 면역계의 효과기 세포(예를 들어, 세포독성 T 세포, 헬퍼 T 세포, B 세포, 천연 살해 세포)에서 발현된 세포 표면 분자를 지칭한다. 효과기 세포 상에 발현된 효과기 세포 리간드에 대한 제1 항체 영역의 결합시, 효과기 세포가 활성화되며 그 기능(예를 들어, 악성, 감염된 또는 그렇지 않으면 건강하지 않은 세포의 선택적 살해 또는 근절)을 발휘할 수 있다. 실시형태에서, 효과기 세포 리간드는 CD3 단백질이다. 실시형태에서, 효과기 세포 리간드는 CD16 단백질이다. 실시형태에서, 효과기 세포 리간드는 CD32 단백질이다. 실시형태에서, 효과기 세포 리간드는 NKp46 단백질이다. 본 명세서에 제공된 제1 항체 영역은 항체, 항체 변이체, 항체의 단편 또는 항체 변이체의 단편일 수 있다.
본 명세서에서 언급된 "CD3 단백질"은 분화 클러스터 3(CD3) 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 신호 전달을 매개하며 CD3 복합체 활성(예를 들어, CD3 복합체와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 CD3 복합체를 포함하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 CD3 복합체의 자연 발생적 CD3 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다.
본 명세서에서 언급된 "CD16 단백질"은 저친화도 면역글로불린 감마 Fc 영역 수용체 III-A로도 알려져 있는 분화 클러스터 16(CD16) 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD16 활성(예를 들어, CD16과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD16 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD16 단백질은 UniProt 참조 번호 P08637로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에서 언급된 "CD32 단백질"은 저친화도 면역글로불린 감마 Fc 영역 수용체 II-A로도 알려져 있는 분화 클러스터 32(CD32) 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 CD32 활성(예를 들어, CD32와 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 CD32 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, CD32 단백질은 UniProt 참조 번호 P12318로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에서 언급된 "NKp46 단백질"은 천연 세포독성 유발 수용체 1로도 알려져 있는 NKp46 단백질의 임의의 재조합 또는 자연 발생적 형태, 또는 NKp46 활성(예를 들어, NKp46과 비교하여 적어도 50%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성 이내)을 유지하는 이의 변이체 또는 상동체를 포함한다. 일부 양태에서, 변이체 또는 상동체는 자연 발생적 NKp46 단백질과 비교하여 전체 서열 또는 서열의 일부(예를 들어, 50개, 100개, 150개 또는 200개의 연속 아미노산 부분)에 걸쳐 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 아미노산 서열 동일성을 갖는다. 실시형태에서, NKp46 단백질은 UniProt 참조 번호 O76036로 확인된 단백질 또는 이와 실질적인 동일성을 갖는 변이체 또는 상동체와 실질적으로 동일하다.
본 명세서에 제공된 이중특이성 항체는 본 명세서에 기재된 임의의 ROR2 항체 또는 이의 단편을 포함할 수 있다. 따라서, 제2 항체 영역은 본 명세서에 제공된 임의의 CDR, FR, 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 2의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 4의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 2의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 4의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
따라서, 제2 항체 영역의 중쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 49에 제시된 FR H1, 서열번호 50에 제시된 FR H2, 서열번호 51에 제시된 FR H3 및 서열번호 52에 제시된 FR H4를 포함할 수 있다. 제2 항체 영역의 경쇄 가변 도메인은 본 명세서에 제공된 임의의 CDR 또는 FR을 포함할 수 있다. 예를 들어, 경쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 53에 제시된 FR L1, 서열번호 54에 제시된 FR L2, 서열번호 55에 제시된 FR L3 및 서열번호 56에 제시된 FR L4를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 6의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 8의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 6의 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 8의 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
제2 항체 영역의 중쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 57에 제시된 FR H1, 서열번호 58에 제시된 FR H2, 서열번호 59에 제시된 FR H3 및 서열번호 60에 제시된 FR H4를 포함할 수 있다. 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체의 경쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 61에 제시된 FR L1, 서열번호 62에 제시된 FR L2, 서열번호 63에 제시된 FR L3 및 서열번호 64에 제시된 FR L4를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 10의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 12의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 10의 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 12의 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
제2 항체 영역의 중쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 65에 제시된 FR H1, 서열번호 66에 제시된 FR H2, 서열번호 67에 제시된 FR H3 및 서열번호 68에 제시된 FR H4를 포함할 수 있다. 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체의 경쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 69에 제시된 FR L1, 서열번호 70에 제시된 FR L2, 서열번호 71에 제시된 FR L3 및 서열번호 72에 제시된 FR L4를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 14의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 16의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 14의 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 서열번호 16의 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
제2 항체 영역의 중쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 73에 제시된 FR H1, 서열번호 74에 제시된 FR H2, 서열번호 75에 제시된 FR H3 및 서열번호 76에 제시된 FR H4를 포함할 수 있다. 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체의 경쇄 가변 도메인은, 예를 들어, 서열번호 77에 제시된 FR L1, 서열번호 78에 제시된 FR L2, 서열번호 79에 제시된 FR L3 및 서열번호 80에 제시된 FR L4를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 제1 항체 영역은 제1 Fab' 단편이거나 또는 제2 항체 영역은 제2 Fab' 단편이다. 실시형태에서, 제1 항체 영역은 단일쇄 가변 단편(scFv)이거나 또는 제2 항체 영역은 제2 단일쇄 가변 단편(scFv)이다.
실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.1nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 1nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 10nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 20nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 30nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 40nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 50nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 60nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 70nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 80nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 90nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 100nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 110nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 120nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 130nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 140nM 내지 150nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 140nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 130nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 120nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 110nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 100nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 90nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 80nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 70nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 60nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 50nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 40nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 30nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 20nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 10nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.01nM 내지 1nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 약 0.07nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv는 0.07nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역의 scFv은 6E6 scFv이며, 0.07nM의 KD로 ROR2 단백질에 결합한다.
제2 항체 영역은 경쇄 가변(VL) 도메인 또는 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 경쇄 가변(VL) 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 항체 영역은 중쇄 가변(VH) 도메인을 포함한다.
실시형태에서, 제2 항체 영역은 ROR2 단백질에 결합한다. 실시형태에서, ROR2 단백질은 세포에서 발현된다. 실시형태에서, 세포는 암세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 난소암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 췌장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 자궁경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 위암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 신장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 두경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 뼈암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 피부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 전립선암 세포이다.
핵산 조성물
본 명세서에 제공된 조성물은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항-ROR2 항체, CAR 및 이중특이성 항체 또는 이의 일부를 암호화하는 핵산 분자를 포함한다. 단리된 핵산에 의해 암호화된 항체, CAR 및 이중특이성 항체는 본 출원 전반에 걸쳐 상세하게 설명된다(위의 설명 및 실시예 부문 포함). 따라서, 일 양태에서, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 암호화하는 단리된 핵산이 제공된다.
실시형태에서, 단리된 핵산은 본 명세서에 제공된 가변 중쇄 도메인 또는 가변 경쇄 도메인을 암호화한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 가변 중쇄 도메인을 암호화한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 가변 경쇄 도메인을 암호화한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 1의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 3의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 5의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 7의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 9의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 11의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 13의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 15의 서열을 포함한다.
또 다른 양태에서, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 암호화하는 단리된 핵산이 제공된다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 91의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 92의 서열을 포함한다.
또 다른 양태에서, 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 키메라 항원 수용체를 암호화하는 단리된 핵산이 제공된다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 111의 서열을 포함한다. 실시형태에서, 단리된 핵산은 서열번호 112의 서열을 포함한다.
약제학적 조성물
본 명세서에 제공된 조성물은 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항-ROR2 항체, CAR 및 이중특이성 항체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 따라서, 일 양태에서, 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에서, 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 CAR 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에서, 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
치료 방법
이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 조성물(예를 들어, 항-ROR2 항체 CAR 및 이중특이성 항체)이 암(예를 들어, 유방암)과 같은 질환에 대한 효과적인 치료를 제공하는 것으로 상정된다.
따라서, 일 양태에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 방법은 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 양태에서, ROR2 발현 암의 전이의 저해를 필요로 하는 대상체에서 ROR2 발현 암의 전이를 저해하는 방법이 제공되며, 방법은 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 방법은 치료학적 유효량의 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 키메라 항원 수용체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
실시형태에서, 암은 고형 악성 종양이다. 실시형태에서, 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암이다. 실시형태에서, 암은 유방암이다. 실시형태에서, 암은 난소암이다. 실시형태에서, 암은 췌장암이다. 실시형태에서, 암은 자궁경부암이다. 실시형태에서, 암은 위암이다. 실시형태에서, 암은 신장암이다. 실시형태에서, 암은 두경부암이다. 실시형태에서, 암은 뼈암이다. 실시형태에서, 암은 피부암이다. 실시형태에서, 암은 전립선암이다.
일 양태에서, ROR2 발현 세포를 검출하는 방법이 제공되며, 방법은 (i) ROR2-발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계; 및 (ii) 세포에 의해 발현된 ROR2 단백질에 대한 항체의 결합을 검출하는 단계를 포함한다. 실시형태에서, 항체는 검출 가능한 모이어티에 부착된다.
일 양태에서, 치료제를 ROR2 발현 세포에 전달하는 방법으로서, 방법은 ROR2 발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계를 포함하되, 항체는 치료제에 부착된다. 실시형태에서, 치료제는 항암제이다. 예시적인 항암제는 제한 없이 종래에 사용되고 당업계에 공지된 임의의 항암제, 예를 들어, 칼리키아미신, 듀오카르마이신, 피롤로벤조다이아제핀(PBD), SN-38, DXd 및 항-튜불린을 포함한다. 항체 약물 접합체를 생성하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있으며, 예를 들어, 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용되어 있는 문헌[Hafeez, U. et al. Antibody-Drug Conjugates for Cancer Therapy; Molecules 2020, 25, 4764; doi:10.3390/molecules25204764.; Ponziani, S. et al. Antibody-Drug Conjugates; The New Frontier of Chemotherpy. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 5510; doi:10.3390/ijms21155510. 및; Joubert, N. et al. Antibody-Drug Conjugates: The Last Decade. Pharmaceuticals 2020, 13, 245; doi:10.3390/ph13090245]에 기술되어 있다.
본 명세서에 제공된 방법의 경우, 실시형태에서, 접촉은 시험관내에서 발생한다. 실시형태에서, ROR2-발현 세포는 대상체에 있다. 실시형태에서, 대상체는 건강한 대상체이다. 실시형태에서, 대상체는 암이 있는 대상체이다. 실시형태에서, 암은 고형 악성 종양이다. 실시형태에서, 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암이다. 실시형태에서, 암은 유방암이다. 실시형태에서, 암은 난소암이다. 실시형태에서, 암은 췌장암이다. 실시형태에서, 암은 자궁경부암이다. 실시형태에서, 암은 위암이다. 실시형태에서, 암은 신장암이다. 실시형태에서, 암은 두경부암이다. 실시형태에서, 암은 뼈암이다. 실시형태에서, 암은 피부암이다. 실시형태에서, 암은 전립선암이다.
본 명세서에 제공된 방법의 경우, 실시형태에서, ROR2 발현 세포는 암세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 난소암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 췌장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 자궁경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 위암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 신장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 두경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 뼈암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 피부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 전립선암 세포이다.
본 명세서에 제공된 방법의 경우, 실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 2nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 4nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 6nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 4nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 8nM 내지 약 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.01nM, 0.05nM, 0.1nM, 0.5nM, 1nM, 2nM, 2nM, 4nM, 5nM, 6nM, 7nM, 8nM, 9nM 또는 10nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 6nM 내지 1 0nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 8nM 내지 10nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.01nM, 0.05nM, 0.1nM, 0.5nM, 1nM, 2nM, 2nM, 4nM, 5nM, 6nM, 7nM, 8nM, 9nM 또는 10nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 2nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 4nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 6nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 4nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 6nM 내지 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 8nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 8nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 2nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 4nM 내지 약 6nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 6nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 4nM 내지 6nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 2nM 내지 약 4nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 4nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 2nM 내지 4nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1nM 내지 약 2nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 2nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1nM 내지 2nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 0.01nM 내지 약 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.05nM 내지 약 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.1nM 내지 약 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 0.5nM 내지 약 1nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 0.01nM 내지 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.05nM 내지 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.1nM 내지 1nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 0.5nM 내지 1nM의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 3.15nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 3.15nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 1.05nM의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 1.05nM의 양으로 투여된다.
이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체 또는 키메라 항원 수용체는 항체의 투여를 위해 본 명세서에 기재된 임의의 농도(예를 들어, 0.01nM 내지 10nM)로 투여될 수 있는 것으로 이해된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 20㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 30㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 40㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 50㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 60㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 70㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 80㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 90㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 100㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 110㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 120㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 130㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 140㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 150㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 160㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 170㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 180㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 190㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 200㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 210㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 220㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 230㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 240㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 250㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 260㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 270㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 280㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 290㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 300㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 310㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 320㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 330㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 340㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 350㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 360㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 370㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 380㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 390㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 400㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 410㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 420㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 430㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 440㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 450㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 460㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 470㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 480㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 490㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 20㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 30㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 40㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 50㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 60㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 70㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 80㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 90㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 100㎍ 내지 약 400㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 20㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 30㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 40㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 50㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 60㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 70㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 80㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 90㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 100㎍ 내지 약 300㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 20㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 30㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 40㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 50㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 60㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 70㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 80㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 90㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 100㎍ 내지 약 200㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 20㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 30㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 40㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 50㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 60㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 70㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 80㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다. 실시형태에서, 항체는 약 90㎍ 내지 약 100㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 약 10㎍, 20㎍, 30㎍, 40㎍, 50㎍, 60㎍, 70㎍, 80㎍, 90㎍, 100㎍, 110㎍, 120㎍, 130㎍, 140㎍, 150㎍, 160㎍, 170㎍, 180㎍, 190㎍, 200㎍, 210㎍, 220㎍, 230㎍, 240㎍, 250㎍, 260㎍, 270㎍, 280㎍, 290㎍, 300㎍, 310㎍, 320㎍, 330㎍, 340㎍, 350㎍, 360㎍, 370㎍, 380㎍, 390㎍, 400㎍, 410㎍, 420㎍, 430㎍, 440㎍, 450㎍, 460㎍, 470㎍, 480㎍, 490㎍ 또는 500㎍의 양으로 투여된다.
실시형태에서, 항체는 10㎍, 20㎍, 30㎍, 40㎍, 50㎍, 60㎍, 70㎍, 80㎍, 90㎍, 100㎍, 110㎍, 120㎍, 130㎍, 140㎍, 150㎍, 160㎍, 170㎍, 180㎍, 190㎍, 200㎍, 210㎍, 220㎍, 230㎍, 240㎍, 250㎍, 260㎍, 270㎍, 280㎍, 290㎍, 300㎍, 310㎍, 320㎍, 330㎍, 340㎍, 350㎍, 360㎍, 370㎍, 380㎍, 390㎍, 400㎍, 410㎍, 420㎍, 430㎍, 440㎍, 450㎍, 460㎍, 470㎍, 480㎍, 490㎍ 또는 500㎍의 양으로 투여된다.
이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 이중특이성 항체 또는 키메라 항원 수용체는 항체의 투여를 위해 본 명세서에 기재된 임의의 농도(예를 들어, 10㎍ 내지 500㎍)로 투여될 수 있는 것으로 이해된다.
세포 이동을 저해하는 방법
세포 이동을 저해하기 위한 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 조성물이 추가로 상정된다. 따라서, 일 양태에서, ROR2-발현 세포의 이동을 저해하는 방법이 제공되며, 방법은 ROR2 발현 세포를 이의 실시형태를 포함하여 본 명세서에 제공된 항체와 접촉시키는 단계를 포함한다. 실시형태에서, 항체는 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하되, 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함한다.
본 명세서에 제공된 방법의 경우, 실시형태에서, ROR2 발현 세포는 암세포이다. 실시형태에서, 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포이다. 실시형태에서, 암은 암은 유방암이다. 실시형태에서, 암세포는 난소암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 췌장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 자궁경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 위암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 신장암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 두경부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 뼈암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 피부암 세포이다. 실시형태에서, 암세포는 전립선암 세포이다.
본 명세서에 기재된 실시예 및 실시형태는 단지 예시를 위한 것이며, 이에 비추어 다양한 수정 또는 변경이 당업자에게 제안될 것이며, 이는 본 출원의 사상과 범위 및 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되는 것으로 이해된다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조에 의해 본 명세서에 원용된다.
실시예
실시예 1:
암세포에서의 발현으로 인해, ROR2는 진단적 및 치료적 표적으로 작용할 가능성이 있다. 보고된 바에 따르면, ROR2에 결합하며 상업적 공급원으로부터 입수 가능한 단일클론 항체가 생성되었다. 그러나, 출원인은 몇몇이 면역블롯 및/또는 유세포 분석에 의해 ROR2를 발현하는 세포와 반응한다는 것을 발견하였다. 또한, 출원인은 이들 항체 중 몇몇이 또한 CRISPR-Cas9 기술을 사용하여 ROR2가 결여된 세포와 예기치 않게 반응한다는 것을 발견하였다. 이러한 예상치 못한 결합은 많은 상업적으로 이용 가능한 항체가 ROR2에 특이적이지 않음을 보여주었다.
따라서, 출원인은 인간 ROR2의 세포외 부분을 특이적으로 표적화하는 단일클론 항체를 생성하였다. 이를 위해, 마우스를 Ig-유사, 시스테인 풍부 도메인(CRD) 및 크링글 도메인을 포함하는 ROR2 단백질의 세포외 부분(AA 1-403)의 재조합 단백질로 면역화시켰다(도 1). 뮤린과 인간 분자 사이의 높은 정도의 상동성 때문에, 출원인은 항-인간 ROR2 항체의 생성을 최대화하기 위해 완전 프로인트 보조제(Freund's Complete Adjuvant)와 같은 면역 자극제를 공동 주입하였다. 비장세포와 골수종 융합 파트너의 융합 후 생성된 하이브리도마를 ELISA 및 유세포 분석을 사용하여 항-ROR2 mAb의 발현에 대해 스크리닝하여 인간 ROR2에 특이적으로 결합하는 항체를 생산하는 클론을 확인하였다. 이들 항체를 본 개시내용에서 mAb N-LN 또는 보다 친숙한 형태인 6-E6으로 지정하였고, 이는 표 1에 열거되어 있으며, 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 서열은 도 2에 도시되어 있다.
Figure pct00001
출원인은 ELISA 검정에서 재조합 ROR2-세포외 단백질을 사용하여 각 mAb의 결합 특이성 및 상대적 친화도를 평가하였으며, 여기서 결합은 ROR2 단백질의 양을 감소시키고/제한하여 측정하고, 4개의 mAb 각각의 감소하는 농도와 조합하여 평가하였다(도 3). 더 낮은 ROR2 단백질 양과 및 더 낮은 농도의 mAb 모두에서 6E6 및 4G9에 대한 더 높은 흡광도 값은 이러한 mAb가 5C11 및 5G3에 비해 더 높은 친화도를 가짐을 나타낸다. 용액에서 변형되지 않은 분자 사이의 평형 결합 친화도 및 동역학을 측정하는 동역학 배제 검정(KinExA)에서 평형 해리 상수(Kd)를 측정하였다. 6E6 mAb는 약 0.1nM의 Kd로 표적 ROR2 세포외 서열에 결합한다. 4G9는 약 2nM의 Kd로 인간 ROR2의 세포외 도메인에 결합한다(도 4a 및 도 4b). 5C11 및 5G3 mAb의 분석은 각각이 약 40nM보다 큰 Kd를 갖는 것으로 결정되었으며, 이는 위의 ELISA 분석으로부터의 결과와 일치한다.
출원인은 인간 ROR2 단백질의 특정 도메인을 단리하는 일련의 재조합 인간/마우스 하이브리드 단백질을 개발하였다. 이러한 재조합 단백질을 사용하여 4개의 mAb 각각이 표적으로 하는 특이적 결합 도메인을 확인하였다(도 5). 6E6 및 5C11 mAb는 인간의 크링글 도메인에는 결합하지만 마우스 ROR2에는 결합하지 않는다. 4G9 및 5G3 mAb는 Ig-유사 도메인을 포함하는 인간 ROR2의 처음 111개 aa 내에서 결합한다. 4개의 mAb 중 어느 것도 마우스 ROR2에 결합하지 않는다.
출원인은 또한 크링글 도메인 내에서 결합하는 2개의 항-ROR2 mAb의 결합에 중요한 특정 아미노산을 확인하기 위해 이 절차를 개선하였다(도 6). 출원인은 크링글 도메인 내에서 인간과 마우스 ROR2 사이에 다른 아미노산 중 하나가 마우스 ROR2의 상응하는 아미노산으로 대체된 여러 재조합 인간 ROR2 단백질을 생성하였다. 6E6 및 5C11 mAb의 결합의 평가는 이들 아미노산을 뮤린 분자의 아르기닌 및 글루탐산 잔기로 각각 대체해야 하기 때문에 인간 ROR2의 크링글 도메인에 결합하기 위해서는 349번 위치에 히스티딘 잔기 및 354번 위치에 아스파르트산이 필요하며, 6E6 및 5C11 mAb는 더 이상 ROR2 단백질에 결합하지 않음을 나타낸다. 추가적으로, 메티오닌이 마우스 ROR2의 발린으로 대체되면 결합이 손실되기 때문에, 5C11은 386번 위치에 메티오닌 잔기가 필요하다.
인간 ROR2에 대한 mAb 각각의 결합은 Alexa647과 접합된 각각의 mAb를 사용하여 ROR2를 발현하는 것으로 알려진 여러 세포주의 유세포 분석 염색 및 분석에 의해 검증하였다(도 7a). CRISPR-cas9를 사용하여 ROR2 발현이 제거된 HCT116 결장직장암 세포 및 HEK293 세포에 대한 결합의 부재에 의해 특이성을 검증하였다(도 7b). 이들은 ROR2에 대해 특이적이지 않은 것으로 결정되었기 때문에, 이러한 mAb의 특이성의 검증은 지난 몇 년 동안 간행된 연구에서 널리 사용되어 왔으며, 이후 회수되어 더 이상 사용할 수 없는 많은 상업적으로 이용 가능한 항-인간 ROR2 다중클론 및 단일클론 항체와 구별된다.
추가적으로, 6E6 및 4G9 mAb를 1차 인간 세포에서 테스트하였다. 6E6 및 4G9 각각은 동량의 아이소타입 일치 Alex647-접합된 대조군 항체로 염색한 것과 비교하여 인간 유방암 PDX 세포인 BR1936에서는 ROR2를 염색하지만 BR1367에서는 염색하지 않았다(ROR 음성)(도 8). 6E6 및 4G9 모두 여러 건강한 공여자로부터 단리된 말초 혈액 단핵 세포에 대한 결합을 나타내지 않는다(도 9).
6E6 및 4G9의 초기 기능 연구는 pH 민감성 염료 pHrodo에 접합된 6E6 및 4G9 mAb의 증가된 상대 형광에 의해 평가된 바와 같이 각 mAb가 내재화되었음을 입증하였다. 포화량의 pHrodo-접합 mAb로 염색한 후, 세포를 세척하고, 37℃ 또는 4℃에서 2시간 동안 인큐베이션하고, 유세포 분석에 의해 pHrodo 및 낮은 세포내 pH와 관련된 상대 세포 형광의 변화에 대해 분석하였으며(도 10), 이는 항체가 ROR2를 발현하는 처리된 세포의 1차 엔도솜 및 리소솜 내로 내재화되었음을 나타낸다. 6E6 및 4G9 mAb 모두 염색되지 않은 세포 또는 4℃에서 인큐베이션된 세포에 비해 37℃에서 K562 세포에서 상대 형광이 증가하였으며, ROR2 발현이 결여된 JEKO 세포에 대해 두 온도 모두에서 차이를 나타내지 않았다. 출원인은 6E6이 4G9보다 더 효율적으로 내재화되었음을 발견하였다. 1차 엔도솜/리소솜으로 내재화된 항체는 약물 또는 이에 접합된 다른 분자를 표적 항원을 발현하는 세포에 전달하기 위한 효과적인 비히클로 입증되었기 때문에, 이러한 ROR2의 경우, 출원인은 이들 데이터로부터 ROR2를 발현하는 세포를 표적으로 할 수 있는 항체-약물 접합체(또는 ADC)에서 6E6이 항체로서 매우 효과적일 것이라는 결론을 내렸다.
따라서, 6E6에 의해 인식되는 에피토프를 표적으로 하는 항체는 약물/화합물이 세포 내로 내재화되고 ROR2 세포 내에서 활성화되는 방식으로 ROR2를 발현하는 세포에 약물 또는 기타 화합물을 효율적으로 전달하는데 사용될 수 있다. 이는 생체내에서 ROR2 양성 세포의 선택적 표적화를 허용한다. 또한, 이러한 항체는 ROR2-양성 암세포의 외과적 적출 동안 진단 영상 또는 형광 식별을 위해 ROR2-발현 세포를 확인할 수 있는 작용제로 ROR2-발현 세포를 표적화하는데 사용될 수 있다.
ROR2의 종양-세포 발현은 기능적 중요성을 가질 수 있다. 유방암 세포주인 MCF7을 ROR2를 암호화하는 발현 벡터로 형질감염시켜 표면 ROR2를 발현하는 MCF7-ROR2 세포를 생성하였다. MCF7-ROR2 세포는 ROR2를 발현하지 않는 모 MCF7 세포보다 Wnt5a에 반응하여 운동성과 조직 침습성이 향상되었다. 증가된 운동성 및 침습성은 ROR1을 발현하도록 형질감염된 MCF7 세포를 사용하여 관찰된 바와 같이 면역 결핍 마우스에서 전이성 종양을 형성하는 향상된 능력과 관련이 있다.1 출원인은 특정 항-ROR2 mAb 중 어느 하나가 시험관내에서 MCF7-ROR2 세포의 이동/침습성을 향상시키는 Wnt5a의 능력을 저해할 수 있는지 여부를 조사하였다. 이를 위해 출원인은 각각 세포 이동 검정 및 침입 검정을 확립하여 Matrigel을 이동하거나 침습하는 세포의 능력을 평가하였다. 도 11에 나타낸 바와 같이, Wnt5a로 처리된 MCF7-ROR2 세포는 Wnt5a-처리된 MCF7 세포보다 2-배 더 큰 이동/침습성을 가졌고; 증가된 이동 MCF7-ROR2 세포는 대조군인 비-특이적 마우스 IgG가 배양물에 첨가되었을 때 저해되지 않았다(도 11a, 회색 막대). 출원인은 MCF7-ROR2 세포의 Wnt5a-유도성 이동을 완전히 저해하기 위해 4G9(검은색 막대)가 아닌 25 ㎍/㎖의 6E6(흰색 막대)을 제공하여 이동/침습성 검정에서 더 이상 MCF7 세포에 비해 이점이 없음을 발견하였다. 이들 데이터는 6E6이 종양 세포 이동 및 침습성을 향상시키는데 있어 ROR2의 기능을 저해할 수 있음을 보여준다. 더 나아가, 이는 6E6이 ROR2-신호전달을 저해하는 방식으로 ROR2와 반응하여 향상된 전이에 기여함을 시사한다. 4G9가 아닌 6E6이 이러한 활성을 가졌다는 사실은 6E6에 의해 인식되는 에피토프가 향상된 종양 세포 침습을 유도하는 ROR2 신호전달의 저해에 중요하다는 것을 시사한다. 따라서, 6E6에 의해 인식되는 에피토프에 결합하는 항체는 ROR2의 기능을 저해할 수 있으며, ROR2를 발현하는 종양 세포가 있는 환자에서 전이의 위험을 완화시키는 활성을 가져야 한다.
출원인은 6E6 또는 4G9의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역을 인간 IgG1의 불변 영역(CH2-CH3)에 결합시켜 단일쇄 Fv(scFv)를 생성하였다. 이러한 단일쇄 작제물의 가변 영역은 두 항체의 경쇄 및 중쇄 가변 영역을 연결하는 링커 서열을 포함한다. 출원인은 6E6 또는 4G9에 대한 scFv가 ELISA에 의해 ROR2 항원에 결합하고, ROR2 표면 항원을 발현하는 세포에 특이적으로 결합할 수 있음을 발견하였다(도 12). 따라서, 6E6 또는 4G9 scFv는 표적 항원에 대한 특이성 및 결합 활성을 유지한다. 이러한 scFv는 또한 6E6 또는 4G9의 scFv를 T 세포(예를 들어, CD3)에 의해 발현되는 표면 항원을 인식하는 scFv와 같은 또 다른 scFv와 결합하는 이중특이성 항체를 생성하는데 사용될 수 있다. 이들 키메라 이중특이성 분자는 이러한 이중특이성 항체로 치료된 환자에서 ROR2-발현 세포를 죽일 목적으로 세포 면역 활성화에 사용될 수 있다.
ROR2 단백질에 높은 특이성 및 친화도로 결합하는 scFv의 능력은 ROR2 표면 항원을 발현하는 세포를 특이적으로 죽일 수 있는 세포독성 효과기 세포의 생성을 위해 T 세포 또는 NK 세포로 형질도입될 수 있는 키메라 항원 수용체(CAR)을 생성할 수 있게 한다. 출원인은 6E6 또는 4G9 scFv의 가변 영역 서열을 사용하여 CAR 작제물을 생성하였다. 출원인은 이들 작제물을 사용한 세포의 형질감염이 ROR2의 세포외 도메인에 결합하는 표면 CAR을 발현하는 세포를 생성할 수 있음을 발견하였다. 이를 입증하기 위해, 출원인은 ROR2 세포외 도메인 및 인간 IgG1의 CH2-CH3 불변 영역 도메인으로 구성된 ROR2-Ig라고 하는 재조합 단백질을 생성하였다. 출원인은 또한 ROR1의 세포외 도메인 및 인간 IgG1의 CH2-CH3 불변 영역 도메인으로 구성된 ROR1-Ig라고 하는 재조합 단백질을 생성하였다. 이를 통해 ROR2 또는 ROR1의 세포외 도메인을 갖는 가용성 단백질을 분리할 수 있다. 출원인은 6E6 또는 4G9의 scFv로부터 생성된 ROR2-CAR 작제물로 형질감염된 세포가 ROR2-Ig에는 특이적으로 결합할 수 있지만 고도로 관련된 ROR1-Ig에는 결합할 수 없다는 것을 발견하였으며, 이는 이러한 상호작용의 특이성을 입증한다(도 13). 따라서, 6E6 또는 4G9 또는 이들의 인간화된 대응물로부터 생성된 서열을 갖는 scFv를 사용하여 ROR2-발현 세포에 대해 특이적으로 세포독성인 ROR2-특이적 CAR T 세포 또는 CAR NK 세포를 생성할 수 있다.
이러한 전임상 발견에 기초하여, 출원인은 이러한 항-인간 ROR2 mAb가 인간 ROR2에 대해 높은 친화성 및 특이성을 가지며 다양한 인간 암에서 ROR2를 표적화하는데 사용될 수 있는 것으로 믿는다.
실시형태
실시형태 1. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
실시형태 2. 실시형태 1에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 3. 실시형태 1 또는 2에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 4. 실시형태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체인, 항체.
실시형태 5. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 Fab' 단편인, 항체.
실시형태 6. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 단일쇄 항체(scFv)인, 항체.
실시형태 7. 실시형태 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 키메라 항체인, 항체.
실시형태 8. 실시형태 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG인, 항체.
실시형태 9. 실시형태 1 내지 4 또는 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
실시형태 10. 실시형태 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 11. 실시형태 10에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 12. 실시형태 10 또는 11에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 13. 실시형태 12에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 14. 실시형태 12에 있어서, 상기 세포외 도메인은 크링글 도메인인, 항체.
실시형태 15. 실시형태 10 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 또는 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함하는, 항체.
실시형태 16. 실시형태 10 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 세포에서 발현되는, 항체.
실시형태 17. 실시형태 16에 있어서, 상기 세포는 암세포인, 항체.
실시형태 18. 실시형태 17에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 항체.
실시형태 19. 실시형태 10 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 0.01nM 내지 약 1nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 20. 실시형태 10 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 약 0.06nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 21. 실시형태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 치료제에 부착되는, 항체.
실시형태 22. 실시형태 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 진단제에 부착되는, 항체.
실시형태 23. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
실시형태 24. 실시형태 23에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 6의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 25. 실시형태 23 또는 24에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 8의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 26. 실시형태 23 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체인, 항체.
실시형태 27. 실시형태 23 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 Fab' 단편인, 항체.
실시형태 28. 실시형태 23 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 단일쇄 항체(scFv)인, 항체.
실시형태 29. 실시형태 23 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 키메라 항체인, 항체.
실시형태 30. 실시형태 23 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG인, 항체.
실시형태 31. 실시형태 23 내지 26 또는 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
실시형태 32. 실시형태 23 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 33. 실시형태 32에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 34. 실시형태 33에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 35. 실시형태 33에 있어서, 상기 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인인, 항체.
실시형태 36. 실시형태 32 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함하는, 항체.
실시형태 37. 실시형태 32 내지 36 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 세포에서 발현되는, 항체.
실시형태 38. 실시형태 37에 있어서, 상기 세포는 암세포인, 항체.
실시형태 39. 실시형태 38에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 항체.
실시형태 40. 실시형태 32 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 약 0.2nM 내지 약 5nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 41. 실시형태 32 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 약 1.9nM의 평형 해리 상수(KD)로 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 42. 실시형태 23 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 치료제에 접합된, 항체.
실시형태 43. 실시형태 23 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 진단제에 접합된, 항체.
실시형태 44. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
실시형태 45. 실시형태 44에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 10의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 46. 실시형태 44 또는 45에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 12의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 47. 실시형태 44 내지 46 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체인, 항체.
실시형태 48. 실시형태 44 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 Fab' 단편인, 항체.
실시형태 49. 실시형태 44 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 단일쇄 항체(scFv)인, 항체.
실시형태 50. 실시형태 44 내지 46 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 키메라 항체인, 항체.
실시형태 51. 실시형태 44 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG인, 항체.
실시형태 52. 실시형태 44 내지 47 또는 51 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG1인, 항체.
실시형태 53. 실시형태 44 내지 52 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 54. 실시형태 53에 있어서, 상기 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 55. 실시형태 54에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 56. 실시형태 54에 있어서, 상기 세포외 도메인은 크링글 도메인인, 항체.
실시형태 57. 실시형태 53 내지 56 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함하는, 항체.
실시형태 58. 실시형태 43 내지 57 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 세포에서 발현되는, 항체.
실시형태 59. 실시형태 58에 있어서, 상기 세포는 암세포인, 항체.
실시형태 60. 실시형태 59에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 항체.
실시형태 61. 실시형태 44 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 약 10nM 내지 약 150nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 62. 실시형태 44 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 치료제에 접합된, 항체.
실시형태 63. 실시형태 44 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 진단제에 접합된, 항체.
실시형태 64. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하고; 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
실시형태 65. 실시형태 64에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 14의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 66. 실시형태 64 또는 65에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 16의 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 67. 실시형태 64 내지 66 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체인, 항체.
실시형태 68. 실시형태 64 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 Fab' 단편이다.
실시형태 69. 실시형태 64 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 단일쇄 항체(scFv)인, 항체.
실시형태 70. 실시형태 64 내지 66 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 키메라 항체인, 항체.
실시형태 71. 실시형태 64 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG인, 항체.
실시형태 72. 실시형태 64 내지 66 또는 71 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 IgG1인, 항체.
실시형태 73. 실시형태 64 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 74. 실시형태 73에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 75. 실시형태 74에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
실시형태 76. 실시형태 72에 있어서, 상기 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인인, 항체.
실시형태 77. 실시형태 74 내지 76 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 세포에서 발현되는, 항체.
실시형태 78. 실시형태 77에 있어서, 상기 세포는 암세포인, 항체.
실시형태 79. 실시형태 78에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 항체.
실시형태 80. 실시형태 64 내지 79 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 약 10nM 내지 약 150nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
실시형태 81. 실시형태 64 내지 80 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 치료제에 접합된, 항체.
실시형태 82. 실시형태 64 내지 80 중 어느 하나에 있어서, 상기 항체는 진단제에 접합된, 항체.
실시형태 83. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 실시형태 1 내지 82 중 어느 하나에 따른 항체를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
실시형태 84. ROR2 발현 암의 전이의 저해를 필요로 하는 대상체에서 ROR2 발현 암의 전이를 저해하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 실시형태 1 내지 82 중 어느 하나에 따른 항체를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
실시형태 85. 실시형태 83 또는 84에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
실시형태 86. ROR2 발현 세포를 검출하는 방법으로서, (i) ROR2-발현 세포를 실시형태 1 내지 82 중 어느 하나에 따른 항체와 접촉시키는 단계; 및 (ii) 상기 세포에 의해 발현된 ROR2 단백질에 대한 상기 항체의 결합을 검출하는 단계를 포함하는, 방법.
실시형태 87. 실시형태 86에 있어서, 상기 항체는 검출 가능한 모이어티에 부착되는, 방법.
실시형태 88. 실시형태 86 또는 87에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 대상체에 있는, 방법.
실시형태 89. 실시형태 88에 있어서, 상기 대상체는 암이 있는 대상체인, 방법.
실시형태 90. 실시형태 89에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
실시형태 91. 실시형태 86 또는 87에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
실시형태 92. 치료제를 ROR2 발현 세포에 전달하는 방법으로서, ROR2 발현 세포를 실시형태 1 내지 82 중 어느 하나에 따른 항체와 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 항체는 치료제에 부착되는, 방법.
실시형태 93. 실시형태 92에 있어서, 상기 치료제는 항암제인, 방법.
실시형태 94. 실시형태 92 또는 93에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 대상체에 있는, 방법.
실시형태 95. 실시형태 94에 있어서, 상기 대상체는 암이 있는 대상체인, 방법.
실시형태 96. 실시형태 95에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
실시형태 97. 실시형태 93 또는 94에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
실시형태 98. ROR2-발현 세포의 이동을 저해하는 방법으로서, ROR2 발현 세포를 실시형태 1 내지 80 중 어느 하나에 따른 항체와 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
실시형태 99. 실시형태 98에 있어서, 상기 ROR2 발현 세포는 암이 있는 대상체에 있는, 방법.
실시형태 100. 실시형태 99에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
실시형태 101. 실시형태 98에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
실시형태 102. 실시형태 86 내지 101 중 어느 하나에 있어서, 상기 ROR2 발현 세포는 암세포인, 방법.
실시형태 103. 실시형태 102에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 방법.
실시형태 104. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 105. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 2의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 4의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 106. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 3의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 107. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 108. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 6의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 8의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 109. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 5의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 7의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 110. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 111. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 10의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 12의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 112. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 9의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 11의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 113. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 114. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 14의 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 16의 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 115. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는 서열번호 13의 핵산 서열에 의해 암호화되는 중쇄 가변 도메인; 및 서열번호 15의 핵산 서열에 의해 암호화되는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
실시형태 116. 키메라 항원 수용체로서, (i) (a) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 117. 키메라 항원 수용체로서, (i) (a) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 118. 키메라 항원 수용체로서, (i) (a) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 119. 키메라 항원 수용체로서, (i) (a) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및 (b) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인을 포함하는 항체 영역; 및 (ii) 막관통 도메인을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 120. 실시형태 116 내지 119 중 어느 하나에 있어서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 121. 실시형태 116 내지 120 중 어느 하나에 있어서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인은 CD3 ζ 세포내 T-세포 신호전달 도메인인, 키메라 항원 수용체.
실시형태 122. 실시형태 116 내지 121 중 어느 하나에 있어서, 세포내 공동-자극 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 123. 실시형태 122에 있어서, 상기 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 CD28 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, 4-1BB 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, ICOS 세포내 공동-자극 신호전달 도메인 또는 OX-40 세포내 공동-자극 신호전달 도메인인, 키메라 항원 수용체.
실시형태 124. 실시형태 116 내지 123 중 어느 하나에 있어서, 스페이서 영역을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 125. 실시형태 124에 있어서, 스페이서 영역은 힌지 영역을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 126. 실시형태 116 내지 125 중 어느 하나에 있어서, 링커 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 127. 실시형태 116 내지 126 중 어느 하나에 있어서, 중쇄 불변 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
실시형태 128. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 실시형태 116 내지 127 중 어느 하나에 따른 키메라 항원 수용체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
실시형태 129. 실시형태 126에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
<서열정보>
서열번호 1; 6E6 VH SEQ
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서열번호 2; 6E6 VH SEQ
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서열번호 114; 인간 ROR2 Ig-유사 도메인
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SEQUENCE LISTING <110> The Regents of the University of California <120> Anti-ROR-2 Antibodies and Methods of Use <130> 048537-632001WO <150> US 62/936,900 <151> 2019-11-18 <160> 114 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 360 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 1 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggagac ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt aattatggca tgtcttgggt tcgccagact 120 ccagacaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attagtagtg gtggtggtta cactcactat 180 gtagacagtg tgaaggggcg attcaccatt tccagagaca atgccaacca tatcctgtac 240 ctgcaaatga gcagtctgaa ctctgaggac acagccatgt attattgtgc aagacacccg 300 agggattttt cctatgctat ggactactgg ggtcagggaa cctcagtcac cgtctcctca 360 <210> 2 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 2 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln 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gtacaagtgc 240 aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 300 cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 360 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg 420 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 480 ggctccttct tcctctatag caagctcacc gtggacgaga gcaggtggca gcaggggaac 540 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 600 tccctgtctc cgggtaaatg a 621 <210> 91 <211> 1425 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 91 gccaccatgg gatggtcatg tatcatcctt tttctagtag caactgcaac cggtgtacat 60 tccgacattg tgatgaccca gtctcacaaa ttcatgtcca catcaatagg agacagggtc 120 agcatcacct gcaaggccag tcaggatgtg ggtcattatg tggcctggta tcaacagaaa 180 ccaggtcaat ctcctaaact actgatttac tgggcatcca cccggcacac tggagtccct 240 gatcgcttca caggtagtgg atctgggaca gatttcactc tcaccattag caatgtgcag 300 tctgaagact tggcagatta tttctgtcag caatataaca tctatccgtg gacgttcggt 360 ggaggctcca agctggcaat caaaggctcc acctctggat ccggcaagcc cggatctggc 420 gagggatcta ccaagggcga ggtgcagctg gtggagtctg ggggagactt agtgaagcct 480 ggagggtccc tgaaactctc ctgtgcagcc tctggattca ctttcagtaa ttatggcatg 540 tcttgggttc gccagactcc agacaagagg ctggagtggg tcgcaaccat tagtagtggt 600 ggtggttaca ctcactatgt agacagtgtg aaggggcgat tcaccatttc cagagacaat 660 gccaaccata tcctgtacct gcaaatgagc agtctgaact ctgaggacac agccatgtat 720 tattgtgcaa gacacccgag ggatttttcc tatgctatgg actactgggg tcagggaacc 780 tcagtcaccg tctcctcaga attcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc 840 tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc 900 aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 960 gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 1020 ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 1080 aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca 1140 tcccgggagg agatgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat 1200 cccagcgaca tcgccgtgga 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ggtgaagcag acacctgtgc atggcctgga atggattgga 600 gctattcatc caggaagtgg tggtactgcc tataatcaga agttcaaggg caaggccaca 660 ctgactgcag acaaatcctc cagcacagcc tacatggagc tcagcaggct gacatctgag 720 gactctgctg tctattactg tacaagaagg aggcctaggt tctatggtat ggactactgg 780 ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca gaattcctct tccccccaaa acccaaggac 840 accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 900 gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 960 aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 1020 caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 1080 gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 1140 accctgcccc catcccggga ggagatgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 1200 aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 1260 aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctatagcaag 1320 ctcaccgtgg acgagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 1380 gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 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Synthetic polynucleotide <400> 107 gtcgacgagt ccaaatatgg tcccccatgc ccaccatgcc cagcacctga gttcctgggg 60 ggaccatcag tcttcctgtt ccccccaaaa cccaaggaca ctctcatgat ctcccggacc 120 cctgaggtca cgtgcgtggt ggtggacgtg agccaggaag accccgaggt ccagttcaac 180 tggtacgtgg atggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagttc 240 aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaacggc 300 aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa ggcctcccgt cctccatcga gaaaaccatc 360 tccaaagcca aagggcagcc ccgagagcca caggtgtaca ccctgccccc atcccaggag 420 gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta ccccagcgac 480 atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc 540 gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaggc taaccgtgga caagagcagg 600 tggcaggagg ggaatgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac 660 acacagaaga gcctctccct gtccctaggt aaaatg 696 <210> 108 <211> 204 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 108 ttttgggtgc tggtggtggt tggtggagtc ctggcttgct atagcttgct agtaacagtg 60 gcctttatta ttttctgggt gaggagtaag aggagcaggc tcctgcacag tgactacatg 120 aacatgactc cccgccgccc cgggcccacc cgcaagcatt accagcccta tgccccacca 180 cgcgacttcg cagcctatcg ctcc 204 <210> 109 <211> 126 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 109 aaacggggca gaaagaaact cctgtatata ttcaaacaac catttatgag accagtacaa 60 actactcaag aggaagatgg ctgtagctgc cgatttccag aagaagaaga aggaggatgt 120 gaactg 126 <210> 110 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 110 agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 60 tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 120 cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 180 gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 240 cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 300 tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgctga 339 <210> 111 <211> 2157 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 111 atgggatggt catgtatcat cctttttcta gtagcaactg caaccggtgt acattccgac 60 attgtgatga cccagtctca caaattcatg tccacatcaa taggagacag ggtcagcatc 120 acctgcaagg ccagtcagga tgtgggtcat tatgtggcct ggtatcaaca gaaaccaggt 180 caatctccta aactactgat ttactgggca tccacccggc acactggagt ccctgatcgc 240 ttcacaggta gtggatctgg gacagatttc actctcacca ttagcaatgt gcagtctgaa 300 gacttggcag attatttctg tcagcaatat aacatctatc cgtggacgtt cggtggaggc 360 tccaagctgg caatcaaagg ctccacctct ggatccggca agcccggatc tggcgaggga 420 tccaccaagg gcgaggtgca gctggtggag tctgggggag acttagtgaa gcctggaggg 480 tccctgaaac tctcctgtgc agcctctgga ttcactttca gtaattatgg catgtcttgg 540 gttcgccaga ctccagacaa gaggctggag tgggtcgcaa ccattagtag tggtggtggt 600 tacactcact atgtagacag tgtgaagggg cgattcacca tttccagaga caatgccaac 660 catatcctgt acctgcaaat gagcagtctg aactctgagg acacagccat gtattattgt 720 gcaagacacc cgagggattt ttcctatgct atggactact ggggtcaggg aacctcagtc 780 accgtctcct cagtcgacga gtccaaatat ggtcccccat gcccaccatg cccagcacct 840 gagttcctgg ggggaccatc agtcttcctg ttccccccaa aacccaagga cactctcatg 900 atctcccgga cccctgaggt cacgtgcgtg gtggtggacg tgagccagga agaccccgag 960 gtccagttca actggtacgt ggatggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 1020 gaggagcagt tcaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 1080 tggctgaacg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aaggcctccc gtcctccatc 1140 gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagagc cacaggtgta caccctgccc 1200 ccatcccagg aggagatgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 1260 taccccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 1320 accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcag gctaaccgtg 1380 gacaagagca ggtggcagga ggggaatgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 1440 cacaaccact acacacagaa gagcctctcc ctgtccctag gtaaaatgtt ttgggtgctg 1500 gtggtggttg gtggagtcct ggcttgctat agcttgctag taacagtggc ctttattatt 1560 ttctgggtga ggagtaagag gagcaggggc ggacacagtg actacatgaa catgactccc 1620 cgccgccctg ggcccacccg caagcattac cagccctatg ccccaccacg cgacttcgca 1680 gcctatcgct ccaaacgggg cagaaagaaa ctcctgtata tattcaaaca accatttatg 1740 agaccagtac aaactactca agaggaagat ggctgtagct gccgatttcc agaagaagaa 1800 gaaggaggat gtgaactgag agtgaagttc agcaggagcg cagacgcccc cgcgtaccag 1860 cagggccaga accagctcta taacgagctc aatctaggac gaagagagga gtacgatgtt 1920 ttggacaaga gacgtggccg ggaccctgag atggggggaa agccgagaag gaagaaccct 1980 caggaaggcc tgtacaatga actgcagaaa gataagatgg cggaggccta cagtgagatt 2040 gggatgaaag gcgagcgccg gaggggcaag gggcacgatg gcctttacca gggtctcagt 2100 acagccacca aggacaccta cgacgccctt cacatgcagg ccctgccccc tcgctga 2157 <210> 112 <211> 2169 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polynucleotide <400> 112 atgggatggt catgtatcat cctttttcta gtagcaactg caaccggtgt acattccgat 60 attgtgatga ctcaggctgc accctctgta cctgtcactc ctggagagtc agtatccatc 120 tcctgcaggt ctagtaagag tctcctgcat agtaatggca acacttactt gtattggttc 180 ctgcagaggc caggccagtc tcctcagctc ctgatatatc ggatgtccaa ccttgcctca 240 ggagtcccag acaggttcag tggcagtggg tcaggaactg ctttcacact gagaatcagt 300 agagtggagg ctgaggatgt gggtgtttat tactgtatgc aacatctaga atatcctctc 360 acggtcggtg ctgggaccaa gctggagctg aaaggctcca cctctggatc cggcaagccc 420 ggatctggcg agggatccac caagggccag gttcaactgc aacagtctgg ggctgagctg 480 gtgaggcctg gggcttcagt gaagctgtcc tgcaaggctt tgggctacac atttactgac 540 tatgaaatgc actgggtgaa gcagacacct gtgcatggcc tggaatggat tggagctatt 600 catccaggaa gtggtggtac tgcctataat cagaagttca agggcaaggc cacactgact 660 gcagacaaat cctccagcac agcctacatg gagctcagca ggctgacatc tgaggactct 720 gctgtctatt actgtacaag aaggaggcct aggttctatg gtatggacta ctggggtcaa 780 ggaacctcag tcaccgtctc ctcagtcgac gagtccaaat atggtccccc atgcccacca 840 tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca tcagtcttcc tgttcccccc aaaacccaag 900 gacactctca tgatctcccg gacccctgag gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag 960 gaagaccccg aggtccagtt caactggtac gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag 1020 acaaagccgc gggaggagca gttcaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc 1080 ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc 1140 ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg 1200 tacaccctgc ccccatccca ggaggagatg accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg 1260 gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgcc gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag 1320 aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg gactccgacg gctccttctt cctctacagc 1380 aggctaaccg tggacaagag caggtggcag gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg 1440 catgaggctc tgcacaacca ctacacacag aagagcctct ccctgtccct aggtaaaatg 1500 ttttgggtgc tggtggtggt tggtggagtc ctggcttgct atagcttgct agtaacagtg 1560 gcctttatta ttttctgggt gaggagtaag aggagcaggg gcggacacag tgactacatg 1620 aacatgactc cccgccgccc tgggcccacc cgcaagcatt accagcccta tgccccacca 1680 cgcgacttcg cagcctatcg ctccaaacgg ggcagaaaga aactcctgta tatattcaaa 1740 caaccattta tgagaccagt acaaactact caagaggaag atggctgtag ctgccgattt 1800 ccagaagaag aagaaggagg atgtgaactg agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc 1860 cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc tataacgagc tcaatctagg acgaagagag 1920 gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga 1980 aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc 2040 tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc cggaggggca aggggcacga tggcctttac 2100 cagggtctca gtacagccac caaggacacc tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc 2160 cctcgctga 2169 <210> 113 <211> 82 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 113 His Gln Cys Tyr Asn Gly Ser Gly Met Asp Tyr Arg Gly Thr Ala Ser 1 5 10 15 Thr Thr Lys Ser Gly His Gln Cys Gln Pro Trp Ala Leu Gln His Pro 20 25 30 His Ser His His Leu Ser Ser Thr Asp Phe Pro Glu Leu Gly Gly Gly 35 40 45 His Ala Tyr Cys Arg Asn Pro Gly Gly Gln Met Glu Gly Pro Trp Cys 50 55 60 Phe Thr Gln Asn Lys Asn Val Arg Met Glu Leu Cys Asp Val Pro Ser 65 70 75 80 Cys Ser <210> 114 <211> 69 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Ala Ile Leu His Cys Lys Val Ala Gly Asn Pro Pro Pro Asn Val Arg 1 5 10 15 Trp Leu Lys Asn Asp Ala Pro Val Val Gln Glu Pro Arg Arg Ile Ile 20 25 30 Ile Arg Lys Thr Glu Tyr Gly Ser Arg Leu Arg Ile Gln Asp Leu Asp 35 40 45 Thr Thr Asp Thr Gly Tyr Tyr Gln Cys Val Ala Thr Asn Gly Met Lys 50 55 60 Thr Ile Thr Ala Thr 65

Claims (86)

  1. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(anti-tyrosine kinase-like orphan receptor 2: ROR2) 항체로서,
    상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하고; 그리고
    상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
  2. 제1항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 2의 서열을 포함하는, 항체.
  3. 제1항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 4의 서열을 포함하는, 항체.
  4. 제1항에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체, Fab' 단편, 단일쇄 항체(scFv) 또는 키메라 항체인, 항체.
  5. 제1항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
  6. 제1항에 있어서, 상기 항체는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  7. 제6항에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
  8. 제6항에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
  9. 제8항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
  10. 제8항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 크링글 도메인(Kringle domain)인, 항체.
  11. 제6항에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘 또는 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산을 포함하는, 항체.
  12. 제6항에 있어서, 상기 항체는 약 0.01nM 내지 약 1nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  13. 제6항에 있어서, 상기 항체는 약 0.06nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  14. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서,
    상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하고; 그리고
    상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
  15. 제14항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 6의 서열을 포함하는, 항체.
  16. 제14항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 8의 서열을 포함하는, 항체.
  17. 제14항에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체, Fab' 단편, 단일쇄 항체(scFv) 또는 키메라 항체인, 항체.
  18. 제14항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
  19. 제14항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  20. 제19항에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
  21. 제20항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
  22. 제20항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인인, 항체.
  23. 제19항에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함하는, 항체.
  24. 제19항에 있어서, 상기 항체는 약 0.2nM 내지 약 5nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  25. 제19항에 있어서, 상기 항체는 약 1.9nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  26. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서,
    상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하고; 그리고
    상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
  27. 제26항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 10의 서열을 포함하는, 항체.
  28. 제26항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 12의 서열을 포함하는, 항체.
  29. 제26항에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체, Fab' 단편, 단일쇄 항체(scFv) 또는 키메라 항체인, 항체.
  30. 제26항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
  31. 제26항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  32. 제31항에 있어서, 상기 항체는 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
  33. 제32항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
  34. 제32항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 크링글 도메인인, 항체.
  35. 제31항에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 서열번호 22의 349번 위치에 상응하는 위치에 히스티딘, 354번 위치에 상응하는 위치에 아스파르트산 또는 386번 위치에 상응하는 위치에 메티오닌을 포함하는, 항체.
  36. 제31항에 있어서, 상기 항체는 약 10nM 내지 약 150nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  37. 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하는 항-타이로신 카이네이스-유사 희귀 수용체 2(ROR2) 항체로서,
    상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하고; 그리고
    상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는, 항체.
  38. 제37항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 14의 서열을 포함하는, 항체.
  39. 제37항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 16의 서열을 포함하는, 항체.
  40. 제37항에 있어서, 상기 항체는 인간화된 항체, Fab' 단편, 단일쇄 항체(scFv) 또는 키메라 항체인, 항체.
  41. 제37항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG2인, 항체.
  42. 제37항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  43. 제42항에 있어서, 상기 항체는 상기 ROR2 단백질의 세포외 도메인에 결합할 수 있는, 항체.
  44. 제43항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
  45. 제41항에 있어서, 상기 세포외 도메인은 Ig-유사 도메인인, 항체.
  46. 제42항에 있어서, 상기 항체는 약 10nM 내지 약 150nM의 평형 해리 상수(KD)로 상기 ROR2 단백질에 결합할 수 있는, 항체.
  47. 제6항, 제19항, 제31항 또는 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ROR2 단백질은 세포에서 발현되는, 항체.
  48. 제47항에 있어서, 상기 세포는 암세포인, 항체.
  49. 제48항에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 항체.
  50. 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 치료제에 부착되는, 항체.
  51. 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 진단제에 부착되는, 항체.
  52. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 따른 항체를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  53. ROR2-발현 암의 전이의 저해를 필요로 하는 대상체에서 ROR2-발현 암의 전이를 저해하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 따른 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  54. 제52항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
  55. ROR2-발현 세포를 검출하는 방법으로서,
    (i) ROR2-발현 세포를 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 따른 항체와 접촉시키는 단계; 및
    (ii) 상기 세포에 의해 발현된 ROR2 단백질에 대한 상기 항체의 결합을 검출하는 단계
    를 포함하는, 방법.
  56. 제55항에 있어서, 상기 항체는 검출 가능한 모이어티에 부착되는, 방법.
  57. 제55항에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 대상체에 있는, 방법.
  58. 제57항에 있어서, 상기 대상체는 암이 있는 대상체인, 방법.
  59. 제58항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
  60. 제55항에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
  61. ROR2-발현 세포에 치료제를 전달하는 방법으로서, ROR2-발현 세포를 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 따른 항체와 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 항체는 치료제에 부착되는, 방법.
  62. 제61항에 있어서, 상기 치료제는 항암제인, 방법.
  63. 제61항에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 대상체에 있는, 방법.
  64. 제63항에 있어서, 상기 대상체는 암이 있는 대상체인, 방법.
  65. 제64항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
  66. 제62항에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
  67. ROR2-발현 세포의 이동을 저해하는 방법으로서, ROR2-발현 세포를 제1항, 제14항, 제26항 또는 제37항 중 어느 한 항에 따른 항체와 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
  68. 제67항에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 암이 있는 대상체에 있는, 방법.
  69. 제68항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
  70. 제67항에 있어서, 상기 접촉은 시험관내에서 발생하는, 방법.
  71. 제67항에 있어서, 상기 ROR2-발현 세포는 암세포인, 방법.
  72. 제71항에 있어서, 상기 암세포는 유방암 세포, 난소암 세포, 췌장암 세포, 자궁경부암 세포, 위암 세포, 신장암 세포, 두경부암 세포, 뼈암 세포, 피부암 세포 또는 전립선암 세포인, 방법.
  73. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는,
    서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및
    서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인
    을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
  74. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는,
    서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및
    서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인
    을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
  75. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는,
    서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및
    서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인
    을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
  76. 항-ROR2 항체로서, 상기 항-ROR2 항체는,
    서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 도메인; 및
    서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인
    을 포함하는 항-ROR2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 항-ROR2 항체.
  77. 키메라 항원 수용체로서,
    (i) 다음을 포함하는 항체 영역:
    (a) 서열번호 28에 제시된 CDR L1, 서열번호 29에 제시된 CDR L2 및 서열번호 30에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및
    (b) 서열번호 25에 제시된 CDR H1, 서열번호 26에 제시된 CDR H2 및 서열번호 27에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인; 및
    (ii) 막관통 도메인
    을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  78. 키메라 항원 수용체로서,
    (i) 다음을 포함하는 항체 영역:
    (a) 서열번호 34에 제시된 CDR L1, 서열번호 35에 제시된 CDR L2 및 서열번호 36에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및
    (b) 서열번호 31에 제시된 CDR H1, 서열번호 32에 제시된 CDR H2 및 서열번호 33에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인; 및
    (ii) 막관통 도메인
    을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  79. 키메라 항원 수용체로서,
    (i) 다음을 포함하는 항체 영역:
    (a) 서열번호 40에 제시된 CDR L1, 서열번호 41에 제시된 CDR L2 및 서열번호 42에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및
    (b) 서열번호 37에 제시된 CDR H1, 서열번호 38에 제시된 CDR H2 및 서열번호 39에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인; 및
    (ii) 막관통 도메인
    을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  80. 키메라 항원 수용체로서,
    (i) 다음을 포함하는 항체 영역:
    (a) 서열번호 46에 제시된 CDR L1, 서열번호 47에 제시된 CDR L2 및 서열번호 48에 제시된 CDR L3을 포함하는 경쇄 가변 도메인; 및
    (b) 서열번호 43에 제시된 CDR H1, 서열번호 44에 제시된 CDR H2 및 서열번호 45에 제시된 CDR H3을 포함하는 중쇄 가변 영역 도메인; 및
    (ii) 막관통 도메인
    을 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  81. 제77항, 제78항, 제79항 또는 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 세포내 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  82. 제81항에 있어서, 상기 세포내 T-세포 신호전달 도메인은 CD3 ζ 세포내 T-세포 신호전달 도메인인, 키메라 항원 수용체.
  83. 제81항에 있어서, 세포내 공동-자극 T-세포 신호전달 도메인을 추가로 포함하는, 키메라 항원 수용체.
  84. 제83항에 있어서, 상기 세포내 공동-자극 신호전달 도메인은 CD28 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, 4-1BB 세포내 공동-자극 신호전달 도메인, ICOS 세포내 공동-자극 신호전달 도메인 또는 OX-40 세포내 공동-자극 신호전달 도메인인, 키메라 항원 수용체.
  85. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 치료학적 유효량의 제77항, 제78항, 제79항 또는 제80항 중 어느 한 항에 따른 키메라 항원 수용체를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  86. 제85항에 있어서, 상기 암은 유방암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 위암, 신장암, 두경부암, 뼈암, 피부암 또는 전립선암인, 방법.
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