KR20200010302A - 세균 이차 감염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 il-8 억제제 - Google Patents

세균 이차 감염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 il-8 억제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염의 치료 및/또는 예방에 유용한 IL-8 억제제 화합물, 바람직하게는 이중 CXCR1/CXCR2 수용체 억제제에 관한 것이다.

Description

세균 이차 감염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 IL-8 억제제
본 발명은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 IL-8 억제제에 관한 것이다. 상기 이차 세균 감염은 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련이 있다.
폐는 무수한 나무 모양 분지 (tree-like ramification)로 구성되며 이 분지는 집중적으로 혈관화된 폐포로 끝난다. 폐의 점막 표면은 믿을 수 없을 정도로 크며 (90 m2) 매일 병원균를 포함한 많은 수의 입자와 미생물에 노출된다 [참조: Kopf, M., C. Schneider, and S.P. Nobs, The development and function of lung-resident macrophages and dendritic cells. Nat Immunol, 2015. 16(1): p. 36-44]. 따라서, 선천적 면역계를 포함한 많은 수의 물리적 및 생물학적 장벽은 폐를 가능한 감염으로부터 보호한다. 염증 촉진 사이토카인 및 케모카인은 호중구의 동원 및 염증의 발병을 촉진하는 상주 면역 세포 및 폐 상피 세포에 의해 생성되며, 이는 미생물의 전파 및 증식을 제어하는데 중요하다. 그러나, 감염에 의해 유발된 제어되지 않은 염증 반응은 증가된 폐 손상, 이환율 및 사망률을 야기할 수도 있다 [참조: Garcia, C.C., et al., The development of anti-inflammatory drugs for infectious diseases. Discov Med, 2010. 10(55): p. 479-88].
인플루엔자 A 바이러스 (IAV)는 전세계적으로 관련성이 높은 호흡기 병원균으로, 유행병 발생 동안 3백만에서 5백만명의 심각한 질병과 300,000명이 넘는 사망자를 유발한다. 이차 세균 감염은 계절 독감 및 또한 유행병 발생 동안 사망률과 이환율 증가에 크게 기여한다. 세균성 동시-감염이 인플루엔자 관련 사망의 대략 25%를 차지하는 것으로 추정된다 [참조: Gupta, R.K., R. George, and J.S. Nguyen-Van-Tam, Bacterial pneumonia and pandemic influenza planning.Emerg Infect Dis, 2008. 14(8): p. 1187-92].
이차 독감 감염과 관련된 다른 세균 중에서, 스트렙토코커스 뉴모니애 (S. pneumoniae)는 가장 흔한 원인 병원균 중 하나이며 [참조: Short, K.R., et al., Interactions between Streptococcus pneumoniae and influenza virus: a mutually beneficial relationship? Future Microbiol, 2012. 7(5): p. 609-24], 계절 독감 중 주요 사망 원인으로 간주된다 [참조: McCullers, J.A., Insights into the interaction between influenza virus and pneumococcus. Clin Microbiol Rev, 2006. 19(3): p. 571-82]. 실제로, 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae)는 어린이와 성인, 특히 이전에 독감에 걸렸던 사람들 중에서 지역사회-획득 폐렴의 주요 원인이다 [참조: Madhi, S.A., K.P. Klugman, and G. Vaccine Trialist, A role for Streptococcus pneumoniae in virus-associated pneumonia. Nat Med, 2004. 10(8): p. 811-3]. 항생제의 가용성에도 불구하고, 독감 후 폐렴구균 이차 감염의 발생률 및 치사율은 여전히 높다. 실제로, IAV 및 폐렴구균 동시감염 동안, 항생제를 사용한 치료는 세균 용해, 면역계의 과도한 자극 및 호중구의 대규모 동원, 심한 조직 손상과 사망률을 야기할 수 있는 사건을 유발한다 [참조: Karlstrom, A., et al., Toll-like receptor 2 mediates fatal immunopathology in mice during treatment of secondary pneumococcal pneumonia following influenza. J Infect Dis, 2011. 204(9): p. 1358-66].
호중구는 IAV 및 폐렴구균 감염 동안 폐로 동원되는 주요 염증성 세포이다 [참조: Jose, R., et al., Regulation of neutrophilic inflammation in lung injury induced by community-acquired pneumonia. Lancet, 2015. 385 Suppl 1: p. S52]. 미생물이 폐 상피에 도달하면 이들은 면역 및 비-면역 세포에 의해 인식되어 케모카인, 예컨대 CXCL8 (마우스의 CXCL1/CXCL2)의 분비를 야기한다 [참조: Wang, J.P., et al., Toll-like receptor-mediated activation of neutrophils by influenza A virus.Blood, 2008. 112(5): p. 2028-34]. 이들 케모카인은 수많은 세포 유형, 예컨대 단핵구, CD8+ T 세포, 천연 킬러 및 호중구에서 발현된 이의 수용체 CXCR1 및 CXCR2를 통해 작용한다. 호중구에서, CXCR1 및 CXCR2의 활성화는 화학주성, 과립 효소의 방출 및 반응성 산소 종들의 생성을 야기한다 [참조: Russo, R.C., et al., The CXCL8/IL-8 chemokine family and its receptors in inflammatory diseases.Expert Rev Clin Immunol, 2014. 10(5): p. 593-619]. 이러한 사건들은 바이러스 또는 세균 증식 및 전파를 제어하는데 매우 중요하지만, 호중구의 압도적인 활성화는 심한 폐 손상을 야기할 수 있기 때문에 숙주에게 해로울 수 있다. 이것은 고도로 활성화된 호중구의 심한 유입이 질환의 중증도와 관련이 있기 때문에 IAV와 폐렴구균 감염 둘 다에 적용된다 [참조: Ramos, I. and A. Fernandez-Sesma, Modulating the Innate Immune Response to Influenza A Virus: Potential Therapeutic Use of Anti-Inflammatory Drugs. Front Immunol, 2015. 6: p. 361; Tavares, L.P., et al., Inhibition of PDE4 During Pneumococcal Pneumonia Reduces Inflammation and Lung Injury in Mice. Am J Respir Cell Mol Biol, 2015]. 따라서, 호흡기 감염 동안 염증 반응을 제어하는 전략은 질환의 크기를 감소시킬 수 있다.
상기 언급한 바와 같이, 선행한 인플루엔자 감염은 후속 세균 (다른 병원균) 감염의 위험을 증가시킬 수 있다. 다른 유형의 중증 감염 (예를 들어, 패혈증)이 실험 시스템에서 유사한 상황을 유발할 수 있으며 인간에서 패혈증 후 관찰된 증가된 치사율에 기여할 수 있기 때문에 이러한 상황은 인플루엔자에 국한된 것이 아니다. 다른 중증 병태는 또한 중증 허혈 및 재관류 손상을 포함한 이차 감염 위험과 관련될 수 있다.
인터류킨-8 (IL-8; CXCL8)은 PMN (다형핵 호중구: Polymorphonuclear Neutrophils) 동원 (recruitment)의 주요 중재자로 간주되며 건선, 류마티스 관절염, 만성 폐쇄성 폐질환 및 이식된 기관에서의 재관류 손상을 포함하는 몇몇 병리학에 관여한다 [참조: Griffin et al, Arch Dermatol 1988, 124: 216; Fincham et al, J Immunol 1988, 140: 4294; Takematsu et al, Arch Dermatol 1993, 129: 74; Liu et al, 1997, 100:1256; Jeffery, Thorax 1998, 53: 129; Pesci et al, Eur Respir J. 1998, 12: 380; Lafer et al, Br J Pharmacol. 1991, 103: 1153; Romson et al, Circulation 1983, 67: 1016; Welbourn et al, Br J Surg. 1991, 78: 651; Sekido et al, Nature 1993, 365, 654]. IL-8의 생물학적 활성은 인간 PMN의 표면 상에 발현되는 7TM-GPCR 패밀리에 속하는, 2개의 수용체인 CXCR1 및 CXCR2와의 상호작용에 의해 매개된다. CXCR1은 선택적으로 2개의 케모카인인 CXCL6 및 IL-8에만 높은 친화성으로 결합하고, IL-8에 대해 훨씬 더 큰 친화성을 나타내지만 (참조: Wolf et al, Eur J Immunol 1998, 28: 164), 인간 CXCR2는 다수의 상이한 사이토카인과 케모카인과 결합하는 보다 난잡한 수용체이다. 따라서, CXCR2는 다수의 상이한 생물학적 분자의 활성을 매개한다.
세균 감염과 관련하여 그리고 상기 보고된 바와 같이, 본 발명자들은 호중구에서 CXCR1 및 CXCR2의 활성화는 화학주성, 과립 효소의 방출 및 세균 증식 및 전파를 제어하는데 매우 중요한 반응성 산소 종의 생성을 야기한다는 것을 관찰하였다. 상기 관점에서, IL-8 억제제를 세균 감염의 치료에 사용할 동기가 없었다. 사실, 세균에 의해 유발된 감염은 항생제로 치료된다.
본 발명자들은 놀랍게도 CXCR1/CXCR2를 차단함으로써 염증 반응의 조절은 이차 감염, 바람직하게는 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염 동안 병원균에 대한 면역 반응을 손상시키지 않으면서 질환 결과를 개선시킨다는 것을 발견하였다.
따라서, 본 발명의 제1 목적은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한, 저분자량 분자, 바람직하게는 CXCR1 억제제, 보다 바람직하게는 이중 CXCR1/CXCR2 억제제로부터 선택된 IL-8 억제제이다.
본 발명의 제2 목적은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 약제의 제조를 위한, 상기 정의된 바와 같은 상기 IL-8 억제제의 용도이다.
본 발명의 제3 목적은 상기기 정의된 바와 같은 치료학적 유효량의 상기 IL-8 억제제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 이차 세균 감염, 바람직하게는 이차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료 방법이다.
본 발명의 제4 목적은 본 발명에 따른 IL-8 억제제 및 약제학적으로 허용되는 부형제 및/또는 희석제를 포함하는, 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 약제학적 조성물이다.
바람직한 일 구현예에 따라, 상기 2차 호흡기 감염은 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련이 있다.
도 1. IAV 감염에 의해 유발된 염증 반응의 동역학. 마우스를 IAV (104 및 106 PFU)로 감염시키거나 PBS (Mock)를 주입하고, 감염 1, 3, 4, 5, 7 및 10일 후 안락사시켰다. 케모카인 CXCL1 및 CXCL2의 수준 (A 및 D), 기도 내 호중구의 수 (B 및 E) 및 폐 (C 및 F)는 감염 후에 상이한 시간에서 평가되었다. (n = 그룹당 5-6마리 마우스). 결과는 세포 수, 사이토카인의 수준 (pg/ml), 흡광도 또는 초기 중량의 백분율로 표시되며, 평균 ± SEM으로 나타낸다. Mock 마우스 또는 지시된 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.01에 대해 **이며; P < 0.001에 대해 ***이다.
도 2. CXCR1/CXCR2 길항작용은 IAV 감염 동안 염증 반응을 감소시키고 마우스를 이환율로부터 보호한다. 마우스를 104 PFU의 IAV로 감염시키고, 감염 첫 5일 동안 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg)로 또는 약물 비히클 (PBS 중 CMC 0.1%)로 처리하였다. 대조군 동물에 PBS (Mock)를 비강내로 주입하였다. 기도 또는 폐 (D)에서의 체중 감소 (A), 백혈구 수 (B) 및 호중구 (C) 및 폐에서의 바이러스 계수 (E)는 감염 5일 후에 평가되었다. (n = 그룹당 5-6마리 마우스). 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.01에 대해 **이며, P < 0.001에 대해 ***이며, 비히클 그룹 (Flu)과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 #이며, P < 0.001에 대해 ###이다.
도 3. 염증 촉진 사이토카인 및 폐 손상 수준이 DF2162 처리 후 감소된다. 마우스를 104 PFU의 IAV로 감염시키고, 감염 첫 5일 동안 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg)로 또는 약물 비히클 (PBS 중 CMC 0.1%)로 처리하였다. 대조군 동물에 PBS (Mock)로 비강내로 주입하였다. 마우스의 기도에서 TNF-α(A), CXCL1 (B) 및 IL-6 (C)의 수준을 측정하였다. 조직학적 분석을 수행하고 조직병리학적 스코어를 (D)에 나타낸다 - 최대 18점 (기도, 혈관, 실질 염증, 호중구 침윤 및 상피 손상). 결과는 평균 ± SEM으로 표시된다 (n= 그룹당 5-6마리 마우스). 　Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.01에 대해 **이며, P < 0.001에 대해 ***이며; 비히클 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 #이며, P < 0.01에 대해 ##이다.
도 4. 마우스에서 폐렴구균 뉴모니애 과정에 대한 CXCR1/CXCR2 길항작용의 효과. 마우스를 104 CFU의 에스. 뉴모니애 또는 PBS (Mock)로 비강내로 (i.n.) 감염시키고, 감염 첫 2일 동안 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg)로 또는 약물 비히클 (PBS 중 CMC 0.1%)로 처리하였다. 치사율을 위해 마우스를 10일 동안 동반하였다 (A). 감염 후 48시간 째에 마우스를 안락사시키고, BALF (C) 및 폐 (D)에서의 총 백혈구 (B) 및 호중구의 수에 접근하였다. BALF에서 세균의 수를 또한 측정하였다 (E). 그래프 F는 전체 병리학적 스코어 (최대 18점)를 나타낸다. 결과는 각 그룹에서 적어도 6마리 마우스의 중앙값(E) 또는 평균 ± SEM (모든 다른 그래프)으로 나타낸다. Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.001에 대해 ***이며, P < 0.05에 대해 #이며, 비히클 처리된 그룹과 비교할 경우, P < 0.01에 대해 ##이다.
도 5. 이차 감염된 마우스의 혈액 내 체중 감소, 호중구 동원 및 세균은 CXCR1/CXCR2 처리 후 감소된다. 마우스를 IAV (5x102 PFU, i.n.)로 감염시키고, 감염 3, 4, 5 및 6일 후에, 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg - 경구 위관영양법) 또는 약물 비히클로 처리하였다. 14일의 IAV 감염 후에, 마우스를 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) (103 CFU, i.n.)로 2차 감염시켰다. 단일 감염 또한 수행되었다. Mock 마우스에 PBS를 주입하였다 (i.n.). 　치사율 (A) 및 체중 감소 (B)가 동반되었다. 또 다른 실험에서, 동일한 처리 및 감염 조건 하의 마우스를 제2 감염 후 48시간 후에 안락사시켰다. 기도에서 총 백혈구 수 (C) 및 총 호중구 수 (D), 폐의 호중구 (E - MPO 검정) 및 BALF (F) 또는 혈액 (G)의 세균을 평가하였다. 결과는 평균 ± SEM으로 표시된다. Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.01에 대해 **이며, P < 0.001에 대해 ***이며, 비히클 그룹 과 비교할 경우, P < 0.01에 대해 ##이며, P < 0.001에 대해 ###이다 (n = 그룹당 10마리 마우스).
도 6. IAV 일차 감염 동안 CXCR1/CXCR2 길항작용은 폐렴구균 이차 감염 동안 사이토카인의 수준을 감소시켰다. 마우스를 IAV (5x102 PFU, i.n.)로 감염시키고, 감염 후 3, 4, 5 및 6일 째에, 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg - 경구 위관영양법) 또는 약물 비히클로 처리하였다. 14일의 IAV 감염 후에, 마우스를 에스. 뉴모니애 (103 CFU, i.n.)로 2차 감염시켰다. 단일 감염을 또한 수행하였다. Mock 마우스에 PBS를 주입하였다 (i.n.). 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) 감염 48시간 후에, 마우스를 안락사시키고, TNF-α (A), IL-6 (B), IL-12 (C), CXCL-1 (D) 및 IL-10 (E)의 수준을 BAL 유체에서 측정하였다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.01에 대해 **이며, P < 0.001에 대해 ***이며, 비히클 그룹 과 비교할 경우, P < 0.01에 대해 ##이며, P < 0.001에 대해 ###이다 (n = 그룹당 10마리 마우스).
도 7. DF2162 처리 후 이차 폐렴구균 감염으로 인한 증가된 폐 손상이 감소되었다. 마우스를 IAV (5x102 PFU, i.n.)로 감염시키고, 감염 후 3, 4, 5 및 6일 째에, 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg - 경구 위관영양법) 또는 약물 비히클로 처리하였다. 동물은 IAV 감염 동안에만 약물을 투여받았다. 14일의 IAV 감염 후에, 마우스를 에스. 뉴모니애 (103 CFU, i.n.)로 2차 감염시켰다. 단일 감염을 또한 수행하였다. Mock 마우스에 PBS를 주입하였다 (i.n.). 2차 감염 48시간 후에, 폐를 수집하고 처리하고, 조직학적 분석을 수행하였다. Mock, 단일 감염된 마우스 (IAV 및 에스. 뉴모니애) 및 2차 감염된 마우스 (비히클 및 DF2162-처리됨)의 대표적인 슬라이드는 A에 나타낸다 (막대는 100 x 배율로 150 nm를 나타냄). 그래프 B는 감염된 마우스의 폐 손상의 전체 스코어를 나타낸다. BAL 유체를 사용하여 감염으로 인한 단백질 노출을 측정하였다 (C). 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. Mock 그룹과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 *이며; P < 0.01에 대해 **이며, P < 0.001에 대해 ***이며, 비히클 그룹 과 비교할 경우, P < 0.05에 대해 #이며, P < 0.01에 대해 ##이다 (n = 그룹당 10마리 마우스).
도 8. IAV 감염된 마우스의 폐에서 조직병리학적 변화는 DF2162 처리 후에 감소된다. 마우스를 104 PFU의 IAV로 감염시키고, 감염 첫 5일 동안 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg)로 또는 약물 비히클 (PBS 중 CMC 0.1%)로 처리하였다. 대조군 동물에 PBS (Mock)를 비강내로 주입하였다. Mock 및 IAV-감염된 동물 (비히클 및 DF-처리된)의 폐의 대표적인 H & E 염색된 슬라이드를 100x 배율로 나타낸다.
도 9. CXCR1/CXCR2 길항제로의 처리는 에스. 뉴모니애 감염된 마우스의 폐에서 조직병리학적 변화를 예방한다. 마우스를 104 CFU의 에스. 뉴모니애 또는 PBS (Mock)로 비강내로 감염시키고, 감염 첫 2일 동안 하루에 2회 DF2162 (10 mg/kg)로 또는 약물 비히클 (PBS 중 CMC 0.1%)로 처리하였다. Mock 및 에스. 뉴모니애-감염된 동물 (비히클 및 DF-처리된)의 폐의 대표적인 H & E 염색된 슬라이드를 100x 배율로 나타낸다.
도 10. Cs-H1N1 마우스에서 덱사메타손 처리. 주위 공기 (Air), 담배 연기 (Cs), H1N1 바이러스로의 감염 (H1N1), H1N1 바이러스로 감염되고 Cs로의 노출 (Cs H1N1) 및 4일 동안 감염 48시간 후 하루에 1회 덱사메타손 (1 mg/kg p.o)으로 처리된 Cs H1N1 (Cs H1N1 덱사메타손)에 노출된, (A) 폐 조직에서의 시토카인 농도, (B) BAL 분석으로부터 얻은 총 백혈구 수 및 (C) 마우스의 폐 조직에서의 MPO 활성.
도 11. Cs-H1N1 마우스를 DF2156A, CXCR1/CXCR2 길항제로 처리한 생존 분석. 주위 공기 (Air), 담배 연기 (Cs), H1N1 바이러스로의 감염 (H1N1), H1N1 바이러스로 감염되고 Cs로의 노출 (Cs H1N1), 감염 일을 시작하는 7일 동안 하루에 1회 덱사메타손 (1 mg/kg)으로 처리된 Cs H1N1 (Cs H1N1 덱사메타손 v.o), 감염 일을 시작하는 7일 동안 하루에 1회 DF2156A (10 mg/kg p.o)로 처리된 Cs H1N1 및 감염 일을 시작하는 7일 동안 하루에 1회 3 ml의 티오트로피움 (0,3 mg/ml 에어로졸)으로 처리된 Cs H1N1에 노출된 마우스의 생존 비율.
실험 섹션에 상세히 개시되는 바와 같이, 본 발명자들은 IL-8 활성 억제제, 바람직하게는 이중 CXCR1/CXCR2 수용체 억제제로서 작용하는 본 발명의 분자가 이차 세균 감염의 치료 및/또는 예방에 치료 효능을 갖는다는 것을 발견하였다.
따라서, 본 발명의 제1 목적은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 IL-8 억제제로, 여기서, 상기 IL-8 억제제는 저분자량 분자로부터 선택된다.
바람직한 구현예에 따르면, 상기 이차 세균 감염은 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련된다.
본 출원에 따른 용어 "IL-8-억제제"는 IL-8의 생물학적 활성을 부분적으로 또는 전체적으로 억제할 수 있는 임의의 화합물을 말한다. 그러한 화합물은 IL-8의 발현 또는 활성을 감소시키거나, IL-8 수용체에 의해 활성화된 세포내 신호전달의 유발을 억제함으로써 작용할 수 있다. 상기 IL-8 억제제는 500 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 이하의 농도로 PMN에서 IL-8에 의해 유발된 주화성의 적어도 50%, 바람직하게는 적어도 60%를 억제할 수 있는 것이 바람직하다.
바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 모든 목적의 IL-8 억제제는 CXCR1 수용체에 의해 매개되거나 CXCR1 수용체와 CXCR2 수용체 둘 다에 의해 매개되는 IL-8의 활성을 억제한다.
바람직하게는, 이 구현예에 따르면, 상기 IL-8 억제제는 CXCR1 수용체의 또는 CXCR1 수용체와 CXCR2 수용체 둘 다의 알로스테릭 억제제 또는 오르토스테릭 길항제이다.
바람직하게는, 상기 IL-8 억제제는 CXCR1 수용체에 대해 선택적이거나, CXCR1 및 CXCR2 수용체에 대해 동일하게 강력하다. 보다 바람직하게는, 상기 IL-8 억제제는 CXCR1 및 CXCR2 수용체에 대해 동일하게 강력하다.
본 발명에 따른 "CXCR1에 대해 선택적"이란, IC50 값이 CXCR2에 비해 CXCR1에 대해 적어도 2, 바람직하게는 3 더 높은 로그를 나타내는 화합물을 의미한다 (참조: Bertini R. et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA (2004), 101 (32), pp. 11791-11796).
"CXCR1 및 CXCR2에 대해 동등하게 강력한"이란, CXCR1과 CXCR2에 대해 10 피코몰 (10-11M) 내지 1 마이크로몰 (10-6M) 범위의 IC50 값을 나타내는 화합물을 의미한다 (참조: Bertini R. et al., Br. J. Pharm. (2012), 165, pp. 436-454).
보다 바람직하게는, 본 발명에 따른 IL-8 억제제는 낮은 나노몰 범위, 바람직하게는 0.02 내지 5 나노몰 범위의 CXCR1 수용체에 대한 IC50 값을 갖는다.
본 발명에 따르면, 또한 상기 구현예와 함께, 상기 IL-8 억제제는 저분자량 분자로부터 선택된다.
대안적인 구현예에 따르면, 상기 IL-8 억제제는 항체, 바람직하게는 항-CXCR1/CXCR2 수용체 항체로부터 선택된다.
CXCR1 수용체에 의해 매개되거나 CXCR1 수용체와 CXCR2 수용체 둘 다에 의해 매개되는 IL-8의 활성을 억제할 수 있는 상기 정의에 따른 IL-8 억제제는 당해 기술분야에 공지되어 있다.
본 발명에 따른 바람직한 IL-8 억제제는 1,3-티아졸-2-일아미노페닐프로피온산 유도체, 2-페닐-프로피온산 유도체 및 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택되는 이중 CXCR1/CXCR2 수용체 억제제이다.
상기 화합물 중에서, 상기 1,3-티아졸-2-일아미노페닐프로피온산 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 화학식 I에서,
- R1은 수소 또는 CH3이며;
- R2는 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
- Y는 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며, 바람직하게는 S이며;
- Z는 할로겐, 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, C2-C4 알케닐, C2-C4 알키닐, C1-C4 알콕시, 하이드록실, 카복실, C1-C4 아실옥시, 페녹시, 시아노, 니트로, 아미노, C1-C4 알킬아미노, 할로 C1-C3 알킬, 할로 C1-C3 알콕시, 벤조일, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설포네이트, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설폰아미드, 선형 또는 분지형 C1-C8 알킬설포닐메틸로부터 선택되며; 바람직하게는 트리플루오로메틸이며;
- X는 OH 또는 화학식 NHR3의 잔기이며; 여기서, R3은
- 수소, 하이드록실, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C2-C6 알케닐, C1-C5 알콕시, 또는 C1-C6 페닐알킬(여기서, 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐 그룹은 COOH 잔기에 의해 치환될 수 있다);
- 화학식 SO2R4의 잔기(여기서, R4는 C1-C2 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C1-C3 할로알킬이다)로부터 선택된다.
바람직하게는, 상기 화합물에서, X는 OH이다.
상기 화합물 중에서,
R1이 CH3이며;
R2가 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
Y가 S, O 및 N로부터 선택되는 헤테로 원자이며; 바람직하게는 S이며;
Z가 할로겐, 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, C2-C4 알케닐, C2-C4 알키닐, C1-C4 알콕시, 하이드록실, 카복실, C1-C4 아실옥시, 페녹시, 시아노, 니트로, 아미노, C1-C4 알킬아미노, 할로 C1-C3 알킬, 할로 C1-C3 알콕시, 벤조일, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설포네이트, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설폰아미드, 선형 또는 분지형 C1-C8 알킬설포닐메틸로부터 선택되며; 바람직하게는 트리플루오로메틸이며;
X가 OH 또는 화학식 NHR3의 잔기이며; 여기서, R3은
- 수소, 하이드록실, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C2-C6 알케닐, C1-C5 알콕시, 또는 C1-C6 페닐알킬 (여기서, 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐 그룹은 COOH 잔기에 의해 치환될 수 있다);
- 화학식 SO2R4 의 잔기 (여기서, R4는 C1-C2 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C1-C3 할로알킬이다)로부터 선택되는, 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 특히 바람직하다.
바람직하게는, 이들 화합물에서, X는 OH이다.
상기 화합물 중에서,
R1이 수소이며;
R2가 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
Y가 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며; 바람직하게는 S이며;
Z가 할로겐, 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, C2-C4 알케닐, C2-C4 알키닐, C1-C4 알콕시, 하이드록실, 카복실, C1-C4 아실옥시, 페녹시, 시아노, 니트로, 아미노, C1-C4 알킬아미노, 할로 C1-C3 알킬, 할로 C1-C3 알콕시, 벤조일, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설포네이트, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설폰아미드, 선형 또는 분지형 C1-C8 알킬설포닐메틸로부터 선택되며; 바람직하게는 트리플루오로메틸로부터 선택되며;
X가 OH 또는 화학식 NHR3의 잔기이며; 여기서, R3은
- 수소, 하이드록실, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C2-C6 알케닐, C1-C5 알콕시, 또는 C1-C6 페닐알킬(여기서, 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐 그룹은 COOH 잔기에 의해 치환될 수 있다);
- 화학식 SO2R4의 잔기 (여기서, R4는 C1-C2 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C1-C3 할로알킬이다)로부터 선택되는, 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 특히 바람직하다.
보다 바람직하게는, X는 NH2이다.
바람직하게는, 상기 화합물에서, X은 OH이다.
상기 화합물 중에서,
R1이 수소 또는 CH3이며;
R2가 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
Y가 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며; 바람직하게는 S이며;
Z가 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, 선형 또는 분지형 C1-C4 알콕시, 할로 C1-C3 알킬 및 할로 C1-C3 알콕시로부터 선택되며; 바람직하게는 메틸, 메톡시, 트리플루오로메톡시, 트리플루오로메틸, 보다 바람직하게는 트리플루오로메틸로부터 선택되며;
X가 OH인, 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 특히 바람직하다.
상기 화합물 중에서,
R1이 CH3이며;
R2가 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
Y가 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며; 바람직하게는 S이며,
Z가 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, 선형 또는 분지형 C1-C4 알콕시, 할로 C1-C3 알킬 및 할로 C1-C3 알콕시로부터 선택되며; 바람직하게는 메틸, 메톡시, 트리플루오로메톡시, 트리플루오로메틸로부터 선택되며, 보다 바람직하게는 트리플루오로메틸인, 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 특히 바람직하다.
상기 화합물 중에서,
R1이 수소이며;
X가 OH이며;
R2가 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
Y가 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며; 바람직하게는 S이며;
Z가 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, 선형 또는 분지형 C1-C4 알콕시, 할로 C1-C3 알킬 및 할로 C1-C3 알콕시로부터 선택되며; 바람직하게는 트리플루오로메틸인, 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 특히 바람직하다.
바람직하게는, R1이 수소인 상기 화학식 I의 화합물 모두에서, 페닐프로피온산 그룹의 키랄 탄소 원자는 S 배열로 존재한다.
2-메틸-2-(4-{[4-(트리플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일]아미노}페닐)프로판산 (본원에서 DF2726Y로도 나타냄) 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 이의 나트륨 염 (본원에서 DF2726A로도 나타냄) 및 2-(4-{[4-(트리플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일]아미노}페닐)프로판산 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 (2S)-2-(4-{[4-(트리플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일] 아미노}페닐) 프로판산 (DF2755Y로도 공지되어 있음) 및 이의 나트륨 염 (DF2755A로도 공지되어 있음)으로부터 선택되는 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물이 특히 바람직하다.
화학식 I의 화합물은 WO2010/031835에 개시되어 있으며, 또한 상기 특허에는 이들의 합성 방법, IL-8 억제제로서의 이들의 활성 뿐만 아니라 IL-8 의존적 병리학, 예컨대 일과성 뇌 허혈, 수포성 유천포창, 류마티스 관절염, 특발성 섬유증, 사구체신염, 및 허혈과 재관류에 의해 유발된 손상의 치료에서 이들의 용도가 개시되어 있다.
상기 IL-8 억제제 중에서, 상기 2-페닐-프로피온산 유도체는 바람직하게는 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
[화학식 II]
Figure pct00002
상기 화학식 II에서,
R4는 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, 벤조일, 페녹시, 트리플루오로메탄설포닐옥시이며; 바람직하게는 벤조일, 이소부틸 및 트리플루오로메탄설포닐옥시로부터 선택된다.
또한, 바람직한 구현예에 따르면, R4는 페닐 환 상의 위치 3 또는 4에 존재하며, 보다 바람직하게는 3-벤조일, 4-이소부틸 또는 4-트리플루오로메탄설포닐옥시이다.
R5는 H 또는 선형 또는 분지형 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 H이며;
R6은 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬 또는 트리플루오로메틸이며, 바람직하게는, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬이며, 보다 바람직하게는 CH3이다.
상기 화합물 중에서,
R4가 C1-C6 알킬 또는 벤조일이며; 바람직하게는 위치 3 및 4에 존재하며, 보다 바람직하게는, 3-벤조일 또는 4-이소부틸이며,
R5가 H 또는 선형 또는 분지형 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 H이며,
R6이 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬 또는 트리플루오르메틸이며; 바람직하게는 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬이며, 보다 바람직하게는 CH3인, 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 바람직하다.
상기 화합물 중에서,
R4가 트리플루오로메탄설포닐옥시, 바람직하게는 4-트리플루오로메탄설포닐옥시이며,
R5가 H 또는 선형 또는 분지형 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 H이며,
R6이 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬 또는 트리플루오르메틸이며; 바람직하게는 선형 또는 분지형 C1-C16 알킬이며, 보다 바람직하게는 CH3인, 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 바람직하다.
상기 화합물 중에서 하기 화학식 III의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 또한 바람직하다:
[화학식 III]
Figure pct00003
상기 화학식 III에서,
R'는 수소이며;
R은 H 또는 화학식 SO2Ra의 잔기이며, 여기서, Ra는 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬 또는 할로 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 Ra는 CH3이다.
바람직하게는, 상기 화학식 II 또는 III의 화합물에서, 페닐프로피온산 그룹의 키랄 탄소 원자는 R 배열로 존재한다.
본 발명에 따른 특히 바람직한 화학식 II의 화합물은 R-(-)-2-(4-이소부틸페닐)프로피오닐 메탄설폰아미드 (레파릭신으로도 공지되어 있음) 및 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다. 바람직하게는, 상기 화합물은 R(-)-2-(4-이소부틸페닐)프로피오닐 메탄설폰아미드 (본원에서 DF1681B로도 나타냄)의 리신 동일 반응계 염이다.
본 발명에 따른 추가의 특히 바람직한 화학식 II 또는 III의 화합물은 2-(4-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]-N-메탄설포닐 프로피온아미드 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 이의 나트륨 염 바람직하게는 R(-)-2-(4-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]-N-메탄설포닐 프로피온아미드 (DF2156Y로도 공지되어 있음) 및 이의 나트륨 염 (라다릭신 또는 DF2156A로도 공지되어 있음)이다.
또한, 본 발명에 따른 화학식 III의 특히 바람직한 화합물은 R(-)-2-[(4'-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]프로피온아미드 (DF2162로도 공지되어 있음)이다.
화학식 II 및 III의 IL-8 억제제는 WO0024710 및 WO2005/090295에 개시되어 있으며, 또한 상기 특허에는 이들의 합성 방법, IL-8 억제제로서의 이들의 활성 뿐만 아니라 IL-8에 의해 유발된 호중구 화학주성 및 탈과립화의 억제제로서의 이들의 용도 및 IL-8 의존적 병리학, 예컨대 건선, 궤양성 대장염, 흑색종, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD), 수포성 유천포창, 류마티스 관절염, 특발성 섬유증, 사구체신염, 및 허혈과 재관류에 의해 유발된 손상의 치료에서의 이들의 용도가 개시되어 있다.
본 발명의 제2 목적은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 치료 및/또는 예방을 위한 약제 제조를 위한, 상기 정의된 바와 같은 IL-8 억제제의 용도이다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 약제는 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련된 이차 세균 감염의 치료 및/또는 예방을 위한 것이다.
본 발명의 제3 목적은 상기기 정의된 바와 같은 치료학적 유효량의 IL-8 억제제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 이차 세균 감염, 바람직하게는 이차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료 방법이다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 방법은 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련된 이차 세균 감염의 치료 및/또는 예방을 위한 것이다.
본원에서 사용된 "치료학적 유효량"은 질환의 치료 또는 예방을 달성하기에 충분한 양을 지칭한다. 유효량의 결정은 목적하는 효과의 달성에 기반한 당해 기술분야의 숙련가의 능력범위 내에 있다. 유효량은 이들로 제한되지는 않지만, 대상체의 체중 및/또는 대상체가 겪는 질환 또는 원치 않는 병태의 정도를 포함하는 요소에 좌우될 것이다.
본원에서 사용된 용어 "치료" 및 "예방"은 환자가 기저 장애에 여전히 걸릴 수 있다는 사실에도 불구하고, 각각, 치료되는 장애 또는 이의 관련 증상들 중 하나 이상의 발병시 근절/개선 또는 예방/지연을 지칭한다.
본 발명의 제4 목적은 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 폐렴구균 감염의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한, 상기 정의된 바와 같은 IL-8 억제제를 약제학적으로 허용되는 부형제 및/또는 희석제와 함께 포함하는 약제학적 조성물이다.
바람직한 구현예에 따르면, 상기 이차 세균 감염은 선행한 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련된다.
본 발명의 목적상, 본 발명에 따른 IL-8의 억제제는 경구 제형에 의해, 예컨대 정제, 캡슐제, 시럽, 바람직하게는 제어 방출 제형 형태로, 또는 비경구 투여에 의해, 바람직하게는 정맥내 또는 근육내 투여에 적합한 멸균 용액 형태로 사용하기에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 약제학적 조성물은, 예를 들어, 문헌 [참조: Remington, "The Science and Practice of Pharmacy", 21st ed. (Lippincott Williams and Wilkins)]에 개시된 바와 같은 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
평균 1일 용량은 여러 요소들, 예컨대 질환의 중증도, 병태, 연령, 성별 및 환자의 체중에 좌우된다. 용량은 일반적으로 1일당 1 내지 1500 mg의 화학식 I의 화합물을 선택적으로 다중 투여로 나누어 다양해질 것이다.
본 발명은 하기 실험 섹션에서 더 상세히 추가로 설명될 것이다.
실험 섹션
실시예 1
재료 및 방법
마우스
수컷 C57BL/6J 마우스 (8-12주령)는 미나스 제라이스 연방대학교 중앙 동물 시설 (Central Animal Facility from Universidade Federal de Minas Gerais) (CEBIO UFMG/Brazil)로부터 얻었으며, 상업적 음식물과 물에 자유롭게 접근할 수 있도록 유지되었다. 기술된 모든 절차는 지역 동물 윤리 위원회의 사전 승인을 받았다 (CETEA/UFMG 13/2010 및 381/2015).
세균 및 바이러스 균주
스트렙토코커스 뉴모니애 (Streptococcus pneumoniae) (ATCC 6303 혈청형 3)를 37℃ 및 5% CO2의 혈액 한천 플레이트에서 12시간 동안 성장시키고, 감염 스톡을 기술된 바와 같이 제조하였다 [참조: Tavares, L.P., et al., Inhibition of PDE4 During Pneumococcal Pneumonia Reduces Inflammation and Lung Injury in Mice. Am J Respir Cell Mol Biol, 2015]. 접종물은 항상 세균 현탁액의 플레이팅에 의해 확인되었다.
본원에서 IAV로 불리는 마우스 적응된 바이러스 인플루엔자 A/WSN/33 H1N1을 기술된 바와 같이 MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) 배양된 세포에서 성장시켰다 [참조: Garcia, C.C., et al., Platelet-activating factor receptor plays a role in lung injury and death caused by Influenza A in mice. PLoS Pathog, 2010. 6(11): p. e1001171]. 감염 전에, 스톡을 얼음에서 해동시키고, 멸균 인산염 완충 식염수 (PBS)에서 희석시켰다.
마우스 감염
IAV 및 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) 단일 감염의 경우, 마우스를 60 mg/kg의 케타민 및 4 mg/kg의 크실라이진으로 마취시키고 마우스에 104 PFU의 IAV 또는 104 CFU의 스트렙토코커스 뉴모니애 (Streptococcus pneumoniae)를 비강내로 주입하였다. 이차 폐렴구균 감염 모델의 경우, 마취된 마우스를 500 PFU의 IAV로 감염시키고, 14일의 바이러스 감염 후에, 마우스를 이소플루오란으로 마취시킨 다음, 103 CFU의 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae)로 감염시켰다. 대조군 마우스는 PBS (Mock 감염)를 투여받았다.
처리 프로토콜
호흡기 감염 동안 CXCR1/CXCR2 길항작용의 효과를 평가하기 위해, 마우스를 경구 위관영양법에 의해 0.1% 카복시메틸셀룰로오스 (CMC)에 희석된 CXCR1/CXCR2 비-경쟁적 알로스테릭 길항제, R(-)-2-[(4'-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]프로피온아미드 (DF2162) (100 ㎕-10 mg/kg)로 처리하였다. 비히클 처리된 동물은 100 ㎕의 0.1%의 CMC만을 투여받았다 [참조: Russo, R.C., et al., Role of the chemokine receptor CXCR2 in bleomycin-induced pulmonary inflammation and fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009. 40(4): p. 410-21]. 이 용량 및 투여 스케쥴은 다른 모델에서 호중구 유입의 유의한 억제를 유발하는 것으로 나타났으며, 분자의 긴 반감기와 일치한다 [참조: Cunha, T.M., et al., Treatment with DF 2162, a non-competitive allosteric inhibitor of CXCR1/2, diminishes neutrophil influx and inflammatory hypernociception in mice. Br J Pharmacol, 2008. 154(2): p. 460-70].
단일 IAV 감염의 경우, 감염된 마우스 (104 PFU)를 감염일로부터 5일 동안 하루에 2회 처리하였다. 염증, 바이러스 역가 및 폐 손상에 접근하기 위해 감염 5일 후에 마우스를 안락사시켰다. 체중 감소도 동반되었다.
폐렴구균 단일 감염의 경우, 감염된 마우스 (105 CFU)를 6시간의 감염 후에 이어서 12, 24 및 36시간 후에 처리하였다. 48시간의 감염 후에, 폐 손상, 세균 계수 및 염증의 평가를 위해 마우스를 안락사시켰다. 치사율 실험을 위해, 마우스를 2일 동안 하루에 2회 처리하고 10일 동안 동반하였다.
마지막으로, 이차 폐렴구균 감염 실험을 위해, 마우스를 500 PFU의 IAV로 감염시키고,3 내지 6일의 감염 (하루에 2회)으로 처리하였다. 14일 IAV 감염 후에, 마우스를 103 CFU 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae)로 감염시켰다. 치사율과 체중 감소가 동반되었다. 기도 및 혈액에서의 폐 손상, 염증 및 세균 계수의 분석을 위해 16일의 IAV 감염 후 (폐렴구균 감염 2일 후) 마우스를 안락사시켰다.
기관지폐포 세척술 (BAL) 및 조직 추출
지시된 시점에서, 마우스를 치사량의 케타민/자일라진 (각각 180 mg/kg 및 15 mg/kg)으로 안락사시키고, 세균 계수를 위해 혈액을 수집하고, 기관지폐포 세척술(BAL)을 수행하였다. 이를 위해, 마우스 기관을 노출시키고, 1.7 mm 카테터를 삽입하고, 1 ml의 PBS의 2 분취액을 기관지폐포 구획으로 3회 플러싱하여 마우스의 기도에서 백혈구와 세균을 회수하였다 [참조: Garcia, C.C., et al., Platelet-activating factor receptor plays a role in lung injury and death caused by Influenza A in mice. PLoS Pathog, 2010. 6(11): p. e1001171]. 세균 수를 위해 혈액 한천에 100 μl의 BAL 유체를 플레이팅하였다. 원심분리 후, 세포의 펠릿은 전체 및 차등 세포 계수에 사용된다. BAL 유체 상등액은 제조사 지침 (R&D Systems, USA) 및 브래드포드 검정 (Bradford assay) (Biorad)을 사용한 총 단백질 정량에 따른 ELISA에 의한 사이토카인 (IL-12p40, IL-10, TNF-α, IL-6, CXCL1 및 CXCL2) 측정에 사용되었다. 호중구 동원의 조직으로의 간접 정량 (마이엘로퍼옥시다제 검정 - MPO)을 위해 그리고 바이러스 적정을 위해 마우스의 오른쪽 폐를 수집하였다. 추가의 조직학적 검사를 위해 폐의 좌엽을 포르말린으로 고정시켰다.
폐 미엘로퍼옥시다제 검정
이전에 기술된 바와 같이, 50 mg의 폐 조직을 안티프로테아제를 함유하는 완충 용액에서 균질화시켰다 [참조: Russo, R.C., et al., Role of the chemokine receptor CXCR2 in bleomycin-induced pulmonary inflammation and fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009. 40(4): p. 410-21]. MPO 수준은 HTAB 를 함유하는 포스페이트 완충액 (pH 5.4)에 용해된, 25 μl의 균질화된 샘플의 상등액 및 25 μl의 1.6 mM 3,39-5,59-테트라메틸벤지딘 용액 (TMB; Sigma - 디메틸 설폭사이드에 용해됨) 및　0.01 mM의 H2O2를 사용하여 접근하였다 [참조: Russo, R.C., et al., Role of the chemokine receptor CXCR2 in bleomycin-induced pulmonary inflammation and fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009. 40(4): p. 410-21
바이러스 정량 - 플라크 검정
바이러스 적정을 위해, 멸균 조건에서 수집된 폐를 칭량하고, 멸균 냉 PBS에서 균질화하였다. 샘플의 연속 희석물을 MDCK 세포 단층에서 1시간 동안 항온처리하고, 이전에 기술된 바와 같이 72시간 동안 아가로오스로 덮었다 [참조: Garcia, C.C., et al., Platelet-activating factor receptor plays a role in lung injury and death caused by Influenza A in mice. PLoS Pathog, 2010. 6(11): p. e1001171]. 폐의 그램당 플라크 형성 단위의 수를 표시하였다.
조직학적 분석
폐 손상에 이어 IAV 및 폐렴구균 감염에 접근하기 위해, 폐의 고정된 좌엽을 에탄올에서 점진적으로 탈수시키고 파라핀에 포매시켰다. 광학 현미경하에 검사를 위해 4 mm 섹션을 절단하고, H&E로 염색하였다. 조직병리학적 스코어는 병리학자에 의해 실험 그룹에 대해 맹검되었고, 총 18점의 스코어에서 기도, 혈관 및 실질 염증을 또한 5점의 일반적 호중구 염증으로 평가하였다 [참조: Garcia, C.C., et al., Platelet-activating factor receptor plays a role in lung injury and death caused by Influenza A in mice. PLoS Pathog, 2010. 6(11): p. e1001171].
통계 분석
GraphPad Prism 4.0을 사용하여 통계 및 그래프를 수행하였다. 일원분산 분석 (one-way ANOVA)에 이어 Newman Keuls 사후-테스트를 사용하여 둘 이상의 그룹을 비교하였고 짝을 이루지 않은 t-테스트는 두 그룹 간의 비교를 위해 사용하였다. 생존 곡선은 로그-랭크 테스트 (Long-rank test)에 의해 분석되었으며, 체중 감소 곡선은 곡선 아래 면적의 분석을 사용하여 비교하였다. p < 0.05를 갖는 결과는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다.
결과
IAV 감염은 CXCL1 및 CXCL2의 수준을 증가시키고 마우스의 기도와 폐로의 호중구 유입을 증가시킨다
치명적인 중증 IAV 감염 후 호중구 침윤 및 케모카인 CXCL1 및 CXCL2의 수준을 조사하기 위해, 마우스를 104 (중증 접종물) 또는 106 PFU (치명적 접종물)의 바이러스에 감염시켰다. 보다 낮은 접종물의 경우 1, 4, 7 및 10일 후에, 그리고 보다 높은 접종물의 경우 1, 3 및 5일 후에 BAL 및 폐를 수집하였다. 기도에서 두 케모카인의 수준은 104 PFU의 IAV로 감염 4일 후에 최고였으며 이후 감소하였다 (도 1A). 　치명적 접종물에 의한 감염은 마우스의 기도에서 케모카인의 보다 빠르고 더 높은 생성을 초래하였다 (도 1D). CXCL1 및 CXCL2의 증가된 생성은 마우스의 기도와 폐로의 호중구의 대량 유입과 관련있으며 접종물에 의존적이었다 (도 1B-C 및 E-F).
CXCR1/CXCR2 길항작용은 IAV 감염 동안 마우스를 보호한다
치료 환경에서 인플루엔자 감염에 대한 CXCR1/2의 역할을 조사하기 위해, 마우스를 104 PFU의 IAV로 감염시킨 다음, 마우스의 폐에서 호중구 수를 효과적으로 감소시키는 용량으로 DF2162로 하루에 2회 (감염 후 0일부터 5일까지) 처리하였다 [참조: Russo, R.C., et al., Role of the chemokine receptor CXCR2 in bleomycin-induced pulmonary inflammation and fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009. 40(4): p. 410-21]. DF2162로 처리하면 체중 감소의 감소에 의해 보여지는 바와 같이 이환율을 감소시켰다 (도 2A). 약물 치료는 또한 기도로 모집된 백혈구 (도 2B), 특히 호중구 (도 2C)의 수, 및 염증 촉진 사이토카인 TNF-α 및 CXCL1의 수준 (도 3A-B)을 포함한, 염증 반응의 여러 파라미터를 감소시켰다. DF2162로 처리하면 감염된 마우스의 폐에서 MPO의 수준 (도 2D) 또는 IL-6의 수준 (도 3C)은 감소되지 않았다. 　놀랍게도, 비히클-처리된 동물과 비교하여, 처리된 마우스의 폐에서의 바이러스 부하가 감소되었다 (도 2F). 또한, DF2162로 처리하면 IAV 감염과 관련된 폐 손상을 감소시켰다 (도 3D). 조직학적 분석은 처리된 동물의 폐에서 기관지 및 혈관 염증이 감소된 폐의 더 보존된 영역을 나타내었다 (도 8).
CXCR1/CXCR2 길항작용은 에스. 뉴모니애 ( S. pneumoniae ) 감염 동안 마우스를 보호한다
호중구는 세균의 복제 및 전파를 제어하는데 중요하지만 또한 폐렴구균 폐렴 동안 폐 손상 및 사망과 관련 있는 것으로 공지되어 있다 [참조: Tavares, L.P., et al., Inhibition of PDE4 During Pneumococcal Pneumonia Reduces Inflammation and Lung Injury in Mice. Am J Respir Cell Mol Biol, 2015]. 따라서, 마우스를 감염 후 0 내지 6시간에서 2일까지 DF2162로 처리하였고 치사율과 염증 파라미터를 관찰하였다. 폐렴구균 감염의 맥락에서 DF2162 처리는 마우스를 치사율로부터 보호하였고 (도 4A), 이는 감염된 마우스의 기도로 모집된 감소된 백혈구 (도 4B), 특히 호중구 (도 4C)의 수와 관련이 있었다. 놀랍게도, 감염 처리된 마우스의 기도와 폐의 호중구의 감소 (도 4D)에도 불구하고, DF2162는 마우스의 기도에서 유사한 세균 계수에 의해 보여지는 바와 같이 감염을 제어하는 숙주의 능력을 변형시키지 않았다 (도 4E). 또한, 감염된 마우스의 폐의 조직학적 분석은, DF2162로의 처리가 감염으로 인한 폐 손상을 감소시켰음을 보여주었다 (도 4F 및 도 9).
CXCR1/CXCR2 길항작용은 IAV 감염 후 폐렴구균 감염으로부터 보호한다
스트렙토코쿠스 뉴모니애 (Streptococcus pneumoniae)에 의해 주로 유발되는 이차 세균성 폐렴은 IAV 감염 환자의 예후 악화에 대한 중요한 원인이며, 증가된 사망률 및 이환율을 야기한다 [참조: Klein, E.Y., et al., The Frequency of Influenza and Bacterial Co-infection: A Systematic Review and Meta-Analysis. Influenza Other Respir Viruses, 2016]. 2009년에 발생한 것과 같은 인플루엔자 유행병 동안, 치명적인 사례의 상당한 부분은 항생제의 사용에도 불구하고 이차 폐렴구균 감염으로 인한 것이었다 [참조: Palacios, G., et al., Streptococcus pneumoniae coinfection is correlated with the severity of H1N1 pandemic influenza. PLoS One, 2009. 4(12): p. e8540; Jain, S., et al., Hospitalized patients with 2009 H1N1 influenza in the United States, April-June 2009. N Engl J Med, 2009. 361(20): p. 1935-44; Dominguez-Cherit, G., et al., Critically Ill patients with 2009 influenza A(H1N1) in Mexico. JAMA, 2009. 302(17): p. 1880-7]. 이차 세균 감염에 의해 유발된 악화된 염증 반응은 이러한 증가된 사망률에 대한 원인들 중 하나이다.
이차 세균 감염에 대한 CXCR1/2의 역할을 조사하기 위해, 마우스를 준치사 접종물의 IAV (500 PFU)로 감염시켰고 감염 3 내지 6일 동안 DF2162 또는 비히클로 처리하였다. 14일의 IAV 감염 후에, 감염된 마우스의 폐에서는 어떠한 바이러스도 검출되지 않았다 (데이터는 나타내지 않음). 이어서, 마우스를 준치사 용량의 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) (103CFU, 2차 감염)로 2차 감염시켰다. 대조군 마우스를 IAV 또는 에스. 뉴모니애로 단일 감염시켰다. 단일 감염 둘 다는 치사율이 낮고 체중 감소가 적은 가벼운 질병을 초래하였다 (도 5A-B). 단일 IAV 감염 후 16일 째에 또는 낮은 접종물의 폐렴구균을 사용한 단일 감염 후 2일 째에, 마우스의 기도 또는 폐에서 호중구의 수가 증가하지 않았다 (도 5D-E). 또한, 기도에서는 적은 수의 세균만이 발견될 수 있었고 에스. 뉴모니애로만 감염된 마우스의 혈액에서는 세균이 발견되지 않았다 (도 5F-G). 대조적으로, IAV 감염 후 폐렴구균 감염은 마우스의 기도와 폐로의 호중구의 대규모 동원 (도 5C-E), 기도에서 세균의 과성장 (도 5F) 및 혈액으로의 이들의 전파 (도 5G)를 야기하였다. 이는 이차 감염된 마우스에서 100% 사망률을 초래하였다 (도 5A).
인플루엔자 감염 동안 DF2162의 투여는 CXCR1/2 길항 작용이 2차 감염 후 사망률을 지연시키고 (도 5A) 체중 감소를 감소시켰음을 나타내었다 (도 5B). 이것은 2차 감염 후 기도 (도 5D) 및 폐 (도 5E)로의 호중구의 감소된 동원과 관련이 있었다. 상기 보고된 바와 같이, 호중구 수의 감소에도 불구하고, 본 발명자들은 마우스의 기도에서 박테리아 계수는 변화되지 않았다는 것을 관찰하였다 (도 5F). 놀랍게도, 이차 감염된 마우스의 혈액에서 세균의 수가 감소되었다 (도 5G). 　또한, DF2162로의 처리는 2차 감염 동안 발생한 염증 촉진 사이토카인 IL-6, TNF-α, CXCL-1 및 IL-12의 수준의 증가를 방지하였다 (도 6A-D). 놀랍게도, IL-12 수준은 16일의 IAV 단일 감염 후에 더 높게 유지되었다 (도 6C). 항염증 사이토카인 IL-10의 수준은 또한 비히클 처리된 이차 감염된 마우스와 비교할 때 DF2162 처리된 마우스에서 감소되었다 (도 6E).
전체적으로, DF2162로 처리된 마우스에서 호중구의 감소된 유입 및 사이토카인 생성은 2차 감염과 관련된 심한 폐 손상 감소를 초래하였다 (도 7A-B). IAV 또는 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) 준치사 접종물로의 단일 감염은 별개의 백혈구 침윤을 특징으로 하는 경미한 기도, 혈관 및 실질 염증을 유발하였다. 대조적으로, 이차 폐렴구균 감염은 실질 구조의 유의한 손실로 기도로의 대규모 다형 및 단핵 세포 이동을 유도하였다. 일부 마우스의 폐는 일부 영역의 괴사 및 섬유성 조직을 나타냈다. DF2162로 처리하면 그러한 조직병리학적 폐 손상을 감소시켰다 (도 7C). 이러한 결과를 확인하기 위해, BAL 유체의 단백질 수준은 혈장 누출의 마커로서 사용되었고, 따라서 폐 상피 장벽의 붕괴 또는 조직 손상이 있었다 [참조: Garcia, C.C., et al., Platelet-activating factor receptor plays a role in lung injury and death caused by Influenza A in mice. PLoS Pathog, 2010. 6(11): p. e1001171]. 단백질 누출의 평가는 16일의 IAV 감염 후에 BALF의 단백질 수준의 증가가 감염된 마우스에서 여전히 관찰됨을 나타내었다. 1차가 아닌 2차 폐렴구균 감염은 현저한 단백질 누출을 야기하고, 조직학적 결과에 따라, DF 처리는 BALF에서 단백질의 수준을 감소시켰다 (도 7C).
본 발명자들은 또한 DF2162로의 처리, 감소된 호중구 동원 및 IAV와 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) 감염 둘 다와 관련된 이환율 및 사망률을 관찰하였다. 본 발명에 따른 화합물은 또한 후속 IAV 및 에스. 뉴모니애 (S. pneumoniae) 감염과 관련된 폐 손상 및 사망을 예방하였다. 염증의 감소에도 불구하고, DF2162로의 처리는 감염을 제어하는 능력을 감소시키지 않았다.
실시예 2
마우스에서 바이러스 (인플루엔자 A) 감염 및 담배 연기 노출을 조합한 폐염증 악화 모델에서 CXCR1/2 경로의 효과
만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD)은 전세계적인 중요성과 증가하는 유병률의 건강 문제로, 전 세계 사망자의 약 5%를 차지한다. 상기 질환은 일반적으로 진행성이며 폐기도에서 유해한 입자 또는 가스에 대한 높아진 만성 염증 반응과 관련된 지속적인 기류 제한을 특징으로 한다 (참조: Sethi, S. et al. Am. J. Med. 125, 1162-1170; 2012) 흡연은 주요 위험 요인이며 적절한 치료요법이 없다.
폐 조직에서 증가된 호중구 존재는, 그 중에서도 TNF-α, IL-6 및 IL-8과 같은 염증성 사이토카인의 과잉생산을 자주 동반하는 COPD 환자의 특징이다. 호중구가 의심할 여지 없이 급성 염증의 주요 이펙터이지만, 몇몇 일련의 증거는 그들이 만성 염증 병태에 기여할 수 있다는 것을 나타낸다 (참조: Kolaczkowska, E. & Kubes, Nat. Rev. Immunol. 13, 159-75; 2013). COPD의 주요 임상 증상은 만성 기관지염, 기류 제한 및 폐기종을 포함하며, 종종 COPD 환자는 이들 증상이 악화되어 이환율과 사망률을 급격히 증가시킨다 (참조: Rabe KF et al.Am. J. Respir. Crit. Care Med. 532-555; 2007; Jeffery, P. Chest Filley Lec, 251S-260S; 2000).
이러한 악화 동안, 폐 조직 내 호중구의 수는 폐 조직 재형성 (remodeling)을 향상시키는 매트릭스 메탈로프로테이나제 및 산소 반응성 종 (ROS) 수준의 상승과 병행하여 상당히 증가된다 (참조: Oostwoud, L. C. et al. Nat. Publ. Gr. 1-16, 2016). 특히, COPD의 병리학에서 염증의 중요성에도 불구하고, 글루코코르티코이드 치료는 질환 진행을 피하거나 악화를 예방하지 못한다. 따라서, COPD 환자를 위한 새롭고 안전한 효과적인 치료가 절실하게 필요하다 (참조: Barnes, P. Nat Rev Drug Discov 1, 437-446; 2002; Garnock-Jones, K. P. Drugs 75, 1645-1656; 2015).
바이러스 감염은 COPD 악화의 주요 원인 중 하나이다 (참조: Mackay, A. J. & Hurst, J. R. Immunol Allergy Clin North Am 33, 95-115; 2013). 그 이유 때문에, 본 발명자들은 COPD 악화를 모델링하기 위해 마우스에서 인플루엔자 감염 및 담배 연기 노출 (Cs)을 조합하였다. 본 발명자들은 필수적으로 암컷 C57BL/6 마우스를 Cs에 12일 동안 노출시키고, 매일 Cs 노출 (Cs-H1N1)을 시작한 후 7일 째에 1000 pfu의 H1N1 인플루엔자 바이러스로 감염시켰다. 감염 후 5일 째에 폐 조직 및 기관지폐포 세척술 (BAL)의 분석은 바이러스 감염과 Cs의 조합이 바이러스 감염 (H1N1) 또는 Cs 단독 (Cs)과 비교할 경우 폐 조직의 BAL 및 MPO 활성에서 호중구 침윤을 상승적으로 증가시켰음을 나타내었다 (도 10A-B). 또한 CS 또는 H1N1 감염 단독과 비교하여 염증 촉진 케모카인 및 사이토카인, 예컨대 KC 및 TNF-α의 수준을 유의하게 증가시켰다 (도 10C).
인플루엔자 바이러스의 LD50을 사용한 생존 검정은 Cs와 조합했을 때 마우스 사망률은 80-100%에 이른다는 것을 나타냈다 (도 11).
이 모델에서 덱사메타손 처리 (1 mg/kg p.o.)는 BAL에서 단핵 세포 침윤을 감소시켰지만 증가된 호중구 침윤 또는 증가된 사망률을 변경하지 못하였다 (도 10 및 11).
이러한 발견은 호중구가 이 모델에서 염증 악화 및 증가된 사망률의 주요 원인일 수 있음을 시사하기 때문에, 본 발명자들은 감염일에 시작해서 7일 동안 하루에 1회 10 mg/Kg p.o.로 Cs-H1N1 마우스를 CXCR1/2 길항제인 DF2156A로 처리하는 또 다른 생존 분석을 수행하였다. 본 발명에 따른 DF2156A 처리는 마우스 사망률을 상당히 지연시켰으며 (p<0.0021) 이는 또한 약간 감소되었다. 대조적으로, 덱사메타손 또는 티오트로피움 처리는 마우스의 Cs-H1N1 그룹과 유의한 차이를 나타내지 않았다.

Claims (17)

  1. 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 이차 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 IL-8 억제제로서,
    상기 IL-8 억제제는 저분자량 분자로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 이차 세균 감염은 선행하는 인플루엔자 감염, 패혈증, 중증 허혈 또는 재관류 손상과 관련된, IL-8 억제제.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 IL-8 억제제는,
    CXCR1 수용체에 의해 매개되거나 CXCR1 수용체와 CXCR2 수용체 둘 다에 의해 매개되는, 바람직하게는 CXCR1 수용체와 CXCR2 수용체 둘 다에 의해 매개되는 IL-8의 활성 억제제인, IL-8 억제제.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 1,3-티아졸-2-일아미노페닐프로피온산 유도체, 2-페닐-프로피온산 유도체 및 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  5. 제4항에 있어서, 상기 1,3-티아졸-2-일아미노페닐프로피온산 유도체는 하기 화학식 I의 화합물인, IL-8 억제제:
    화학식 I
    Figure pct00004

    상기 화학식 I에서,
    - R1은 수소 또는 CH3이며;
    - R2는 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며, 바람직하게는 수소이며;
    - Y는 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며, 바람직하게는 S이며;
    - Z는 할로겐, 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, C2-C4 알케닐, C2-C4 알키닐, C1-C4 알콕시, 하이드록실, 카복실, C1-C4 아실옥시, 페녹시, 시아노, 니트로, 아미노, C1-C4 알킬아미노, 할로 C1-C3 알킬, 할로 C1-C3 알콕시, 벤조일, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설포네이트, 선형 또는 분지형 C1-C8 알칸설폰아미드, 선형 또는 분지형 C1-C8 알킬설포닐메틸로부터 선택되며; 바람직하게는 트리플루오로메틸이며;
    - X는 OH 또는 화학식 NHR3의 잔기이며; 여기서, R3은
    - 수소, 하이드록실, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C2-C6 알케닐, C1-C5 알콕시, 또는 C1-C6 페닐알킬(여기서, 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐 그룹은 COOH 잔기에 의해 치환될 수 있다);
    - 화학식 SO2R4의 잔기(여기서, R4는 C1-C2 알킬, C3-C6 사이클로알킬, C1-C3 할로알킬이다)로부터 선택된다.
  6. 제5항에 있어서,
    R1은 수소 또는 CH3이며;
    X는 OH이며;
    R2는 수소 또는 선형 C1-C4 알킬이며,
    Y는 S, O 및 N으로부터 선택되는 헤테로 원자이며;
    Z는 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬, 선형 또는 분지형 C1-C4 알콕시, 할로 C1-C3 알킬 및 할로 C1-C3 알콕시로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  7. 제5항에 있어서, R1은 수소이며, 상기 페닐프로피온산 그룹의 키랄 탄소 원자는 S 배열로 존재하는, IL-8 억제제.
  8. 제4항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 2-메틸-2-(4-{[4-(트리플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일]아미노}페닐) 프로판산 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 이의 나트륨 염으로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  9. 제4항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 (2S)-2-(4-{[4-(트리플루오로메틸)-1,3-티아졸-2-일] 아미노}페닐) 프로판산 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 이의 나트륨 염인, IL-8 억제제.
  10. 제4항에 있어서, 상기 2-페닐-프로피온산 유도체는 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, IL-8 억제제:
    화학식 II
    Figure pct00005

    상기 화학식 II에서,
    R4는 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬, 벤조일, 페녹시, 트리플루오로메탄설포닐옥시이며; 바람직하게는 R4는 벤조일, 이소부틸 및 트리플루오로메탄설포닐옥시로부터 선택되며, 보다 바람직하게는 R4는 3-벤조일, 4-이소부틸 또는 4-트리플루오로메탄설포닐옥시이며;
    R5는 H 또는 선형 또는 분지형 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 H이며;
    R6은 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬 또는 트리플루오로메틸이며; 바람직하게는, 선형 또는 분지형 C1-C6 알킬이며, 보다 바람직하게는 CH3이다.
  11. 제4항에 있어서, 상기 2-페닐-프로피온산 유도체는 하기 화학식 III의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, IL-8 억제제:
    화학식 III
    Figure pct00006

    상기 화학식 III에서,
    R'는 수소이며;
    R은 H 또는 화학식 SO2Ra의 잔기이며, 여기서, Ra는 선형 또는 분지형 C1-C4 알킬 또는 할로 C1-C3 알킬이며, 바람직하게는 Ra는 CH3이다.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서, 상기 페닐프로피온산 그룹의 키랄 탄소 원자는 R 배열로 존재하는, IL-8 억제제.
  13. 제10항 또는 제12항에 있어서,
    상기 화합물은,
    R-(-)-2-(4-이소부틸페닐)프로피오닐 메탄설폰아미드 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 리신 동일반응계 염으로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  14. 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 R(-)-2-(4-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]-N-메탄설포닐 프로피온아미드 및 이의 약제학적으로 허용되는 염, 바람직하게는 이의 나트륨 염인, IL-8 억제제.
  15. 제11항 또는 제12항에 있어서, 상기 화합물은 R(-)-2-[(4'-트리플루오로메탄설포닐옥시)페닐]프로피온아미드인, IL-8 억제제.
  16. 이차 세균 감염, 바람직하게는 2차 호흡기 감염, 보다 바람직하게는 이차 폐렴구균 감염의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 IL-8 억제제로서,
    상기 IL-8 억제제는 항체, 바람직하게는 항-CXCR1/CXCR2 수용체 항체로부터 선택되는, IL-8 억제제.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따라 사용하기 위한 IL-8 억제제 및 약제학적으로 허용되는 부형제 및/또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021201343A1 (ko) 2020-04-02 2021-10-07 주식회사 아티큐 자동 신체 침습 장치
WO2022065582A1 (ko) 2020-09-24 2022-03-31 주식회사 아티큐 신체 자동 침습 장치 및 그 제어 방법
WO2022114613A1 (ko) 2020-11-27 2022-06-02 주식회사 에어스 메디컬 신체 자동 침습 장치

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4008325A1 (en) * 2020-12-02 2022-06-08 Dompe' Farmaceutici S.P.A. Cxcl8 inhibitors for use in the treatment of covid-19
WO2021191305A1 (en) * 2020-03-26 2021-09-30 Dompe' Farmaceutici Spa Cxcl8 inhibitors for use in the treatment of covid-19
EP3884932A1 (en) * 2020-03-26 2021-09-29 Dompe' Farmaceutici S.P.A. Cxcl8 inhibitors for use in the treatment of covid-19

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5677426A (en) * 1994-03-03 1997-10-14 Genentech, Inc. Anti-IL-8 antibody fragments
WO2000024710A1 (en) * 1998-10-23 2000-05-04 Dompe' S.P.A. N-(2-aryl-propionyl)-sulfonamides and pharmaceutical preparations containing them
WO2005090295A2 (en) * 2004-03-23 2005-09-29 Dompe' Pha.R.Ma S.P.A. 2-phenylpropionic acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR030753A1 (es) * 2000-09-25 2003-09-03 Smithkline Beecham Corp Uso de moduladores-proteina de il-8, groalfa, grobeta, grogamma, nap-2, y ena-78, para tratar infecciones viricas
EP2166006A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 Dompe' S.P.A. 2-aryl-propionic acids and derivatives and pharmaceutical compositions containing them
US20140336159A1 (en) * 2011-10-07 2014-11-13 Pulmatrix, Inc. Methods for treating and diagnosing respiratory tract infections
US9861616B2 (en) * 2013-03-14 2018-01-09 Cempra Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating respiratory diseases and formulations therefor
WO2014205127A2 (en) * 2013-06-18 2014-12-24 New York University Cellular factors involved in the cytotoxicity of staphylococcus aureus leukocidins: novel therapeutic targets
AU2015279272B2 (en) * 2014-06-23 2018-01-18 Dompe' Farmaceutici S.P.A. 2-aryl-4-hydroxy-1,3-thiazole derivatives useful as TRPM8-inhibitors in treatment of neuralgia, pain, COPD and asthma
CN105617377A (zh) * 2014-10-29 2016-06-01 中国科学院微生物研究所 一种抑制和/或预防流感病毒继发细菌感染的产品

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5677426A (en) * 1994-03-03 1997-10-14 Genentech, Inc. Anti-IL-8 antibody fragments
WO2000024710A1 (en) * 1998-10-23 2000-05-04 Dompe' S.P.A. N-(2-aryl-propionyl)-sulfonamides and pharmaceutical preparations containing them
WO2005090295A2 (en) * 2004-03-23 2005-09-29 Dompe' Pha.R.Ma S.P.A. 2-phenylpropionic acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Neuropathology and Applied Neurobiology, 42, 326-343, 2016.* *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021201343A1 (ko) 2020-04-02 2021-10-07 주식회사 아티큐 자동 신체 침습 장치
WO2022065582A1 (ko) 2020-09-24 2022-03-31 주식회사 아티큐 신체 자동 침습 장치 및 그 제어 방법
WO2022114613A1 (ko) 2020-11-27 2022-06-02 주식회사 에어스 메디컬 신체 자동 침습 장치

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