KR20190125584A - 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법 - Google Patents

곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20190125584A
KR20190125584A KR1020180049556A KR20180049556A KR20190125584A KR 20190125584 A KR20190125584 A KR 20190125584A KR 1020180049556 A KR1020180049556 A KR 1020180049556A KR 20180049556 A KR20180049556 A KR 20180049556A KR 20190125584 A KR20190125584 A KR 20190125584A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
insect pathogenic
ball
medium
pesticide preparation
porous carrier
Prior art date
Application number
KR1020180049556A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102071626B1 (ko
Inventor
구경본
이형철
Original Assignee
(주) 에코윈
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주) 에코윈 filed Critical (주) 에코윈
Priority to KR1020180049556A priority Critical patent/KR102071626B1/ko
Priority to US17/051,039 priority patent/US20210120810A1/en
Priority to CN201980029373.2A priority patent/CN112040771B/zh
Priority to PCT/KR2019/005139 priority patent/WO2019212209A1/ko
Publication of KR20190125584A publication Critical patent/KR20190125584A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102071626B1 publication Critical patent/KR102071626B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N25/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
    • A01N25/08Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests containing solids as carriers or diluents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N25/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
    • A01N25/12Powders or granules
    • A01N63/04
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/10Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
    • C12N11/12Cellulose or derivatives thereof
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/14Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

본 발명은 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 곤충 병원성 미생물을 포함하는 과립형 또는 분말형 농약제제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 과립형 농약제제는 (a) 다공성 담체; (b) 상기 다공성 담체의 기공에 침투된 배지; 및 (c) 상기 배지에서 배양된 곤충 병원성 미생물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 곤충 병원성 미생물 농약제제는 살충 활성을 갖는 곤충 병원성 미생물의 포자수가 기존 대비 다량 증가되었기 때문에 우수한 살충 효과가 있다.

Description

곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법 {Entomopathogenic Microorganism Pesticide Formulation and Preparing Method Thereof}
본 발명은 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 곤충 병원성 미생물을 포함하는 과립형 또는 분말형 농약제제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
곤충과 같은 병원균에 의해서 야기되는 식물 질병은 식물계 농업 및 산업에 서의 경제적인 비용이 크다. 수확 전 및 수확 후 둘 다에서 발생되는 손상, 식물 그 자체의 손실 또는 성장력과 생산력에서의 감소를 통한 손실이 커질 수 있다.
전통적으로 식물 병원균의 방제는 다수의 화학적 살충제를 사용하여 이루어지고 있다. 화학물질의 사용은 다수의 단점이 있다. 병원균들은 시간이 흐르면서 화학물질에 대한 내성이 생길 수 있으며, 생성된 내성을 가지므로 내성 집단을 생성한다. 실제로, 살충제에 대한 내성은 원예 산업의 실행 가능성에 대한 가장 큰 도전이다.
작물의 병해충 방제용 농약은 장기간 또는 과다사용 시 병해충의 저항성 발현과 환경오염 등의 부작용을 일으키는 것으로 알려져 있다. 이러한 문제 해결을 위해 미생물을 이용한 해충방제가 그 대안으로 제시되고 있고, 전 세계적으로 해충 방제용으로 등록된 곰팡이 살충제는 171 품목으로 나방류, 딱정벌레목, 진딧물, 가루이 등의 해충방제에 많이 사용되고 있다. 국내에는 3종의 곰팡이 살충제가 등록되어 있다. 해충방제를 위해 곤충병원성 곰팡이를 작물에 살포할 때는 일반적으로 고농도의 포자를 살포한다. 따라서 살충성 곰팡이 포자의 대량생산은 곰팡이 살충제를 개발하는데 우선적으로 해결되어야만 하는 핵심 사항이다. 곤충병원성 곰팡이 포자의 대량 배양에는 일반적으로 3가지 방법[고체 배양, 액체 배양, 액체-고체 배양의 2단계 배양법(two-phase fermentation)]이 사용되고 있다.
곤충병원성 곰팡이가 액체 배양에 의해 포자생산의 가능함에도 불구하고 액체배양에서 생산되는 포자는 친수성이어서, 기름에 쉽게 제제화되지 않는 문제점이 있다.
쌀, 보리, 옥수수, 밀기울 등의 곡물을 배지로 사용하는 고체 배양은 곰팡이의 생존능이 우수하고, 쉽게 포자를 생산할 수 있는 장점이 있으나, 배지 내의 영양성분으로 쓰이지 않는 불필요한 불용성 배지 성분이 모든 공정단계에 포함되어 생산효율을 떨어뜨리고 생산 및 유통비용을 증가시키는 문제점도 있다. 다량의 불용성 물질로부터 비롯되는 수화시 분산안정성 문제, 스프레이 노즐 통과의 문제 등이 발생한다.
한국등록특허 제1800330호는 글루코스(glucose), 효모 추출물(yeast extract), MgSO4.7H2O 및 K2HPO4를 함유하는 백강균(Beauveria bassiana)의 포자형성 향상용 액체 배지 조성물을 개시하였고, 한국등록특허 제1499692호는 곤충병원성 곰팡이를 천연제오라이트 세라믹볼 담체용 고체 배지에서 배양하는 곰팡이 포자의 생산방법을 개시하였다.
그러나, 보다 포자 생성 효율을 높이고, 쉽게 처리할 수 있는 농약 제제의 개발이 필요하다.
이에, 본 발명자들은 상기 문제점을 해결하기 위하여 노력한 결과, 기공에 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양할 경우 살충 활성을 갖는 곤충 병원성 미생물의 포자수가 증가된 과립형 농약제제를 제조할 수 있다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 다량의 곤충 병원성 미생물 포자를 포함하는 농약제제 및 이의 제조방법을 제공하는데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 다공성 담체; (b) 상기 다공성 담체의 기공에 침투된 배지; 및 (c) 상기 배지에서 배양된 곤충 병원성 미생물을 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제를 제공한다.
본 발명은 또한, (a) 곤충 병원성 미생물 배양용 배지를 다공성 담체의 기공에 침투시키는 단계; 및 (b) 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 다공성 담체는 다공성 세라믹 볼 또는 스폰지인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 다공성 세라믹 볼은 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼 및 백토 볼로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 스폰지는 발포형 고무 또는 우레탄계 수지인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 배지는 전지분유, 탈지분유, 유청, 우유, 밀가루, 전분 및 곡물가루로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 곤충 병원성 미생물은 해충에 대한 살충활성을 갖고, 포자를 형성하는 곰팡이(fungi)인 것을 특징으로 한다.
본 발명은 또한, (a) 곤충 병원성 미생물; (b) 셀룰로오스; 및 (c) 규조토 또는 제오라이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 분말형 농약제제를 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 분말형 농약제제는 곤충 병원성 미생물 15~25중량%; 셀룰로오스 20~40중량%; 규조토 또는 제오라이트 40~60중량%를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 곤충 병원성 미생물 농약제제는 살충 활성을 갖는 곤충 병원성 미생물의 포자수가 기존 대비 다량 증가되었기 때문에 우수한 살충 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 과립형 농약제제의 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 배지 함량에 따른 과립형 농약제제의 사진이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 과립형 농약제제의 포자발아율 경시변화 및 포자를 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 다공성 담체의 종류에 따른 과립형 농약제제의 사진이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 다공성 담체 및 곤충병원성 미생물의 종류에 따른 과립형 농약제제의 사진이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 분말형 농약제제의 사진이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 분말형 농약제제의 포자발아율 경시변화 및 포자를 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 분말형 농약제제의 사진이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 분말형 농약제제의 포자발아율 경시변화 및 포자를 현미경으로 관찰한 사진이다.
본 발명에서는 기공에 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양할 경우 살충 활성을 갖는 곤충 병원성 미생물의 포자수가 증가된 과립형 농약제제를 제조할 수 있다는 것을 확인하고자 하였다.
본 발명에서는, 전지 분유를 다공성 담체인 다공성 세라믹 볼과 스폰지 기공에 침투시킨 다음 곤충병원성 미생물인 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04 및 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340를 접종하고 배양하여 과립형 농약제제를 제조하였다. 그 결과 제조된 과립형 농약제제는 통상적으로 사용되는 고체 배양배지인 기장에 비하여 곤충 병원성 미생물의 포자수가 현저하게 많다는 것을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명은 일 관점에서, (a) 다공성 담체; (b) 상기 다공성 담체의 기공에 침투된 배지; 및 (c) 상기 배지에서 배양된 곤충 병원성 미생물을 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제에 관한 것이다.
상기 다공성 담체는 곤충 병원성 미생물의 배양 및 포자 형성을 용이하게 하기 위한 것으로서, 곤충 병원성 미생물용 배지를 내부에 침투할 수 있는 기공을 가지고 있는 것을 이용할 수 있다. 상기 다공성 담체로는 다공성 세라믹 볼, 스폰지 등을 예시할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 다공성 세라믹 볼은 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼, 백토 볼 등을 예시할 수 있고, 다공성 세라믹 볼의 지름은 특별히 제한되지 않으나 0.5~30㎜인 것이 바람직하다. 상기 세라믹 볼의 지름이 0.5㎜ 미만인 경우 크기가 작기 때문에 배지를 기공에 침투시키고, 곤충 병원성 미생물을 접종하는데 어려움이 있고, 30㎜를 초과할 경우에는 크기가 크기 때문에 사용시 비효율적 일 수 있다.
또한, 상기 스폰지는 상기 목적을 이룰 수 있는 것이라면 소재에 상관없이 다양하게 사용할 수 있으며, 발포형 고무, 우레탄계 수지 등을 예시할 수 있다.,
본 발명에 있어서, 상기 배지는 곤충 병원성 미생물의 배양 및 포자 형성을 위한 것으로서, 곤충 병원성 미생물의 종류에 따라 달라질 수 있으나, 전지분유, 탈지분유, 유청, 우유, 밀가루, 전분 및 곡물가루 등을 예시할 수 있고, 전지분유를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 곤충 병원성 미생물은 해충에 대한 살충활성을 갖는 것이라면 제한없이 이용할 수 있으며, 포자를 형성하는 곰팡이(fungi)를 이용하는 것이 바람직하다.
상기 과립형 농약제제는 기공에 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양하여 제조할 수 있다.
따라서, 본 발명은 다른 관점에서 (a) 곤충 병원성 미생물 배양용 배지를 다공성 담체의 기공에 침투시키는 단계; 및 (b) 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 과립형 농약제제는 다공성 담체의 기공에 배지를 침투시킨 다음, 곤충 병원성 미생물을 접종하고 배양시키기 때문에, 곤충 병원성 미생물 배양액을 표면에 스프레이로 뿌리는 것보다 더 높은 수의 포자를 형성할 수 있다.
배지가 침투된 다공성 담체에 접종하는 곤충 병원성 미생물의 수는 특별히 제한되지 않으나, 1~10×108 cfu/g 이상인 것이 바람직하다.
상기 배지가 침투된 다공성 담체에 접종된 곤충 병원성 미생물의 배양은 곤충 병원성 미생물의 종류에 따라 다를 수 있으나 25~30℃에서 4~7일간 배양하는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 최종적으로 제조된 과립형 농약제제는 1×109 cfu/g 이상의 포자를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에서는 또한, 셀룰로오스와 세라믹을 곤충 병원성 미생물과 함께 사용할 경우, 뭉침현상이 없으면서 포자 형성율이 증가된 분말형 농약제제를 제조할 수 있다는 것을 확인하고자 하였다.
본 발명에서는, 곤충병원성 미생물인 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04 및 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 및 셀룰로오스와 함께 버미큘라이트, 규조토, 제오라이트를 각각 포함하는 분말형 농약제제를 제조하였다. 그 결과 셀룰로오스와 규조토 또는 셀룰로오스와 제오라이트를 곤충 병원성 미생물과 함께 사용하여 제조된 분말형 농약제제는 통상적으로 사용되는 고체 배양배지인 기장에 비하여 곤충 병원성 미생물의 포자수가 현저하게 많다는 것을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명은 또 다른 관점에서, (a) 곤충 병원성 미생물; (b) 셀룰로오스; 및 (c) 규조토 또는 제오라이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 분말형 농약제제에 관한 것이다.
상기 곤충 병원성 미생물은 해충에 대한 살충활성을 갖는 것이라면 제한없이 이용할 수 있으며, 포자를 형성하는 곰팡이(fungi)를 이용하는 것이 바람직하다. 상기 셀룰로오스는 분말형 농약제제의 단독 소재로 사용될 수 있으나, 가격이 바싸고, 시간이 흐름에 따라 뭉쳐지는 문제점이 있다. 따라서, 세라믹과 함께 사용하는 것이 바람직한데, 상기 세라믹으로는 규조토, 제오라이트 등을 예시할 수 있다.
상기 분말형 농약제제는 곤충 병원성 미생물 15~25중량%; 셀룰로오스 20~40중량%; 규조토 또는 제오라이트 40~60중량%를 포함할 수 있다. 상기 곤충 병원성 미생물, 셀룰로오스, 규조토 또는 제오라이트의 함량이 상기 범위를 벗어날 경우에는 포자 형성이 제대로 이루어지지 않는 문제가 발생될 수 있다.
[실시예]
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 과립형 농약제제 제조
1-1: 과립형 농약 제조를 위한 최적 배지 조성 탐색
표 1과 같이 감자전분, 옥수수 전분 및 전지분유를 각각 물에 혼합한 다음 제오라이트 볼(지름: 1~2㎜) 80g에 배지(혼합액) 20㎖을 골고루 혼합하여 기공에 침투시켰다. 배지가 침투된 다공성 담체를 멸균시킨 다음, 곤충병원성 미생물인 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04(KACC93122P) 및 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 각각을 제오라이트 볼 100g당 1㎖(1~10×108cfu/㎖) 접종하고, 25℃에서 5일간 배양시켰다(도 1 참조). 이때, 대조군으로 기장을 사용하였다.
배양된 곤충 병원성 미생물 포자의 수를 Hemocytometer를 이용하여 측정하고, 그 결과를 표 2에 나타내었다.
성분 무처리 G1 G2 G3
제오라이트 100% 80% 80% 80%
감자 전분 4%
옥수수 전분 4%
전지 분유 4%
16% 16% 16%
합계(중량%) 100% 100% 100% 100%
이사리아 푸모소로세 FG340 이사리아 자바니카 Pf04
무처리 - -
G1 8×107 8×107
G2 1.6×108 8×107
G3 1.04×109 7.2×108
고체 배양체(기장) 9.6×108 1.26×109
표 2로부터, 이사리아 푸모소로세 FG340의 경우 G3>고체배양체(기장)>G2>G1순으로 포자수가 많고, 이사리아 자바니카 Pf04의 경우 고체배양체>G3>G2=G1 순으로 포자수가 많은 것을 확인하였다.
따라서, 제오라이트 볼을 이용한 과립형 고체배양 배지로 전지분유가 가장 적합하다는 것을 알 수 있었다.
배지로 전지분유를 사용할 때의 최적 비율을 확인하기 위하여, 표 3의 조성으로 전지분유 배지를 제조한 다음, 동일한 방법으로 제오라이트 볼의 기공에 침투시킨 후, 곤충병원성 미생물을 접종 및 배양시켰다(도 2 참조). 배양된 곤충 병원성 미생물 포자의 수를 Hemocytometer를 이용하여 측정하고, 그 결과를 표 4에 나타내었다.
성분 무처리 G3-1 G3-2
제오라이트 100% 80% 80%
전지 분유 2% 4%
18% 16%
합계(중량%) 100% 100% 100%
이사리아 푸모소로세 FG340 이사리아 자바니카 Pf04
무처리 - -
G3-1 1.12×109 1.2×109
G3-2 1.04×109 7.2×108
고체 배양체(기장) 9.6×108 1.26×109
표 4로부터, 이사리아 푸모소로세 FG340의 경우 전지분유 비율별 포자 성장이 비슷하였지만, 이사리아 자바니카 Pf04의 경우 전지분유의 비율이 낮은 것(2%)이 높은 것(4%)보다 포자수가 많은 것을 확인 할 수 있었다.
1-2: 과립형 농약 제조를 위한 다공성 담체 탐색
전지분유 2중량%와 물 18중량%를 혼합한 다음 다공성 담체의 기공에 배지를 침투시켰다. 배지가 기공에 침투된 다공성 담체(제오라이트 볼 0.5~2㎜, 백토 볼 3㎜, 황토 볼 5㎜, 자철광 볼 6㎜, 규조토 볼 10㎜, 백토 볼 25㎜, 스폰지(폴리우레탄, 금성스펀지) 10×10×20㎜)를 멸균시킨 다음, 곤충병원성 미생물인 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04(KACC93122P) 및 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P)를 각각을 다공성 담체 100g당 1㎖(1~10×108cfu/㎖) 접종하고, 25℃에서 5일간 배양시켰다(도 3). 배양 중 12시간 단위로 다공성 담체를 골고루 섞어주었다.
도 3에 도시된 바와 같이, 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼, 백토 볼 및 스폰지 모두 표면에 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04 균주와 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340 균주의 포자가 잘 형성되는 것을 알 수 있었다.
1-3: 과립형 농약 제조를 위한 곤충 병원성 미생물 탐색
이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04(KACC93122P)와 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P) 대신에 뷰베리아 바시아나(Beauveria bassiana)(KACC 40377) 및 메타히줌 아니소플리애(Metarhizium anisopliae)(KACC 40969)를 사용한 것을 제외하고는 1-2와 동일한 방법으로 배지를 침투한 다공성 담체에 접종하고, 배양시켰다(도 4).
도 4에 도시된 바와 같이, 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼 및 백토 볼 모두 표면에 뷰베리아 바시아나(Beauveria bassiana)와 메타히줌 아니소플리애(Metarhizium anisopliae)의 포자가 잘 형성되는 것을 알 수 있었다.
즉, 스프레이식으로 처리할 경우 담체에 배지 성분이 있는 것이 아니기 때문에 세라믹 볼에 스프레이 액을 골고루 분사하기 어렵고, 또 골고루 잘 자라게 하기가 어렵지만, 담체(세라믹 볼)에 직접 배지 성분을 침투 시키면 고르게 접종이 되지 않아도 균이 자라면서 균사나 포자에 의하여 잘 번질 수 있기 때문에 고르게 잘 성장할 수 있다.
실시예 2: 분말형 농약제제 제조
2-1: 분말형 농약 제조를 위한 최적 배지 조성 탐색
표 5와 같이 곤충 병원성 미생물 배양액을 셀룰로오스, 버미큘라이트, 규조토, 제오라이트 각각과 혼합하여 분말형 농약제제를 제조(도 5)한 다음, 54℃에서 4주동안 생균수 및 포자 발아를 관찰하고, 그 결과를 도 6에 나타내었다.
이때 곤충 병원성 미생물은 이사리아 자바니카(Isaria javanica) Pf04(KACC93122P) 및 이사리아 푸모소로세(Isaria fumosorosea) FG340(KACC93199P)를 EC 1배지(물 1L 당 전지분유 10g, 펩톤 15g, 난항분 2.5g, 이스트 1g, 염화나트륨 5g, 1인산칼륨 2.5g)에 접종하여 28℃에서 150rpm으로 5일 동안 배양한 것(1~10×108cfu/㎖)을 사용하였다.
성분 P1 P2 P3 P4
배양액 20% 20% 20% 20%
셀룰로오스 80%
버미큘라이트 80%
규조토 80%
제오라이트 80%
합계(중량%) 100% 100% 100% 100%
도 6로부터, 이사리아 푸모소로세 FG340 및 이사리아 자바니카 Pf04 모두 P1>P3=P4>P2 순으로 균 밀도가 유지되는 것을 확인 할 수 있었다. 즉, 보관시간이 경과해도 발아율이 유지되었다.
따라서, P1 제형이 가장 적합하다는 것을 알 수 있었다. 하지만 P1의 소재인 셀룰로오스의 경우 단가가 비싸고 제형이 오래되면 뭉침 현상 등이 나타날 수 있기 때문에 셀룰로오스와 표 6과 같이 다른 분말을 혼합하여 분말형 농약제제를 제조(도 7)한 다음, 54℃에서 4주동안 생균수 및 포자 발아를 관찰하고, 그 결과를 도 8에 나타내었다.
성분 P1-1 P1-2
배양액 20% 20%
셀룰로오스 30% 30%
버미큘라이트
규조토 50%
제오라이트 50%
합계(중량%) 100% 100%
도 8로부터, 셀룰로오스와 규조토 또는 셀룰로오스와 제오라이트를 사용할 경우 이사리아 푸모소로세 FG340 및 이사리아 자바니카 Pf04 모두 뭉침현상 없이 4주차에 85% 이상의 발아율을 나타내어 효과가 우수한 것을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (14)

  1. (a) 다공성 담체;
    (b) 상기 다공성 담체의 기공에 침투된 배지; 및
    (c) 상기 배지에서 배양된 곤충 병원성 미생물을 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 다공성 담체는 다공성 세라믹 볼 또는 스폰지인 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제.
  3. 제2항에 있어서, 상기 다공성 세라믹 볼은 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼 및 백토 볼로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제.
  4. 제2항에 있어서, 상기 스폰지는 발포형 고무 또는 우레탄계 수지인 것을 특징으로 과립형 농약제제.
  5. 제1항에 있어서, 상기 배지는 전지분유, 탈지분유, 유청, 우유, 밀가루, 전분 및 곡물가루로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제.
  6. 제1항에 있어서, 상기 곤충 병원성 미생물은 해충에 대한 살충활성을 갖고, 포자를 형성하는 곰팡이(fungi)인 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제.
  7. (a) 곤충 병원성 미생물 배양용 배지를 다공성 담체의 기공에 침투시키는 단계; 및
    (b) 배지가 침투된 다공성 담체에 곤충 병원성 미생물을 접종하고, 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 다공성 담체는 다공성 세라믹 볼 또는 스폰지인 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 다공성 세라믹 볼은 제오라이트 볼, 백토 볼, 황토 볼, 자철광 볼, 규조토 볼 및 백토 볼로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 스폰지는 발포형 고무 또는 우레탄계 수지인 것을 특징으로 과립형 농약제제의 제조방법.
  11. 제7항에 있어서, 상기 배지는 전지분유, 탈지분유, 유청, 우유, 밀가루, 전분 및 곡물가루로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법.
  12. 제7항에 있어서, 상기 곤충 병원성 미생물은 해충에 대한 살충활성을 갖고, 포자를 형성하는 곰팡이(fungi)인 것을 특징으로 하는 과립형 농약제제의 제조방법.
  13. (a) 곤충 병원성 미생물;
    (b) 셀룰로오스; 및
    (c) 규조토 또는 제오라이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 분말형 농약제제.
  14. 제13항에 있어서, 상기 분말형 농약제제는 곤충 병원성 미생물 15~25중량%; 셀룰로오스 20~40중량%; 규조토 또는 제오라이트 40~60중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 분말형 농약제제.
KR1020180049556A 2018-04-30 2018-04-30 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법 KR102071626B1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180049556A KR102071626B1 (ko) 2018-04-30 2018-04-30 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법
US17/051,039 US20210120810A1 (en) 2018-04-30 2019-04-29 Insect pathogenic microorganism-containing agricultural pesticide formulation and manufacturing method therefor
CN201980029373.2A CN112040771B (zh) 2018-04-30 2019-04-29 昆虫病原性微生物农药制剂及其制备方法
PCT/KR2019/005139 WO2019212209A1 (ko) 2018-04-30 2019-04-29 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180049556A KR102071626B1 (ko) 2018-04-30 2018-04-30 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200002923A Division KR102130764B1 (ko) 2020-01-09 2020-01-09 곤충 병원성 미생물 분말형 농약제제

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190125584A true KR20190125584A (ko) 2019-11-07
KR102071626B1 KR102071626B1 (ko) 2020-01-30

Family

ID=68386324

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180049556A KR102071626B1 (ko) 2018-04-30 2018-04-30 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20210120810A1 (ko)
KR (1) KR102071626B1 (ko)
CN (1) CN112040771B (ko)
WO (1) WO2019212209A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021211677A1 (en) * 2020-04-16 2021-10-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Compositions and methods to reduce insect pests

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH09505273A (ja) * 1993-08-13 1997-05-27 バイオシス コーポレイション 貯蔵安定性を改良した生物体顆粒製剤
KR20000050142A (ko) * 2000-05-18 2000-08-05 정진구 다공성 미량원소를 함유한 세라믹스에 코팅되는 항진균성미생물 농약 및 그 제조 방법
KR100882013B1 (ko) * 2008-07-11 2009-02-04 구경본 곤충병원성 선충의 배양방법 및 배양조
JP5326043B2 (ja) * 2010-04-30 2013-10-30 アリスタライフサイエンス株式会社 病原性微生物を含む害虫の防除剤、及びそれを用いる害虫の防除法
KR101499692B1 (ko) * 2013-06-28 2015-03-10 안동대학교 산학협력단 천연제오라이트 세라믹볼을 이용한 곤충병원성 곰팡이의 포자 생산방법 및 그 분리방법

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9818778D0 (en) * 1998-08-28 1998-10-21 Crosfield Joseph & Sons Particulate carrier for biocide formulations
US7422737B1 (en) * 2002-09-05 2008-09-09 Yissam Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Porous freeze-dried hydrocolloid beads containing viable microorganisms for biological control
CA2620592A1 (en) * 2005-09-08 2007-03-15 Cornell Research Foundation, Inc. Formulations of viable microorganisms and their methods of production and use
AU2009304001B2 (en) * 2008-10-14 2016-03-17 Biotelliga Holdings Limited Entomopathogenic fungi and uses thereof
CN102870816B (zh) * 2012-10-29 2015-08-05 黄永 活菌生物农药微胶囊剂的制备
CA2961359A1 (en) * 2014-09-15 2016-03-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Stable fungal blastospores and methods for their production, stabilization and use
CN107635589B (zh) * 2015-03-06 2020-07-17 约翰·保罗·威尔逊 本质上抗微生物剂多孔基质复合物和制造其的方法
CN105410077A (zh) * 2015-11-04 2016-03-23 雷春生 一种动物骨料载体天然抑菌剂的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH09505273A (ja) * 1993-08-13 1997-05-27 バイオシス コーポレイション 貯蔵安定性を改良した生物体顆粒製剤
KR20000050142A (ko) * 2000-05-18 2000-08-05 정진구 다공성 미량원소를 함유한 세라믹스에 코팅되는 항진균성미생물 농약 및 그 제조 방법
KR100882013B1 (ko) * 2008-07-11 2009-02-04 구경본 곤충병원성 선충의 배양방법 및 배양조
JP5326043B2 (ja) * 2010-04-30 2013-10-30 アリスタライフサイエンス株式会社 病原性微生物を含む害虫の防除剤、及びそれを用いる害虫の防除法
KR101499692B1 (ko) * 2013-06-28 2015-03-10 안동대학교 산학협력단 천연제오라이트 세라믹볼을 이용한 곤충병원성 곰팡이의 포자 생산방법 및 그 분리방법

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021211677A1 (en) * 2020-04-16 2021-10-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Compositions and methods to reduce insect pests

Also Published As

Publication number Publication date
US20210120810A1 (en) 2021-04-29
CN112040771B (zh) 2022-06-17
KR102071626B1 (ko) 2020-01-30
CN112040771A (zh) 2020-12-04
WO2019212209A1 (ko) 2019-11-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0494592B1 (en) A process and method for production and use of pathogenic fungal preparation for insect control
Pham et al. Optimization of solid-state fermentation for improved conidia production of Beauveria bassiana as a mycoinsecticide
KR0145740B1 (ko) 고정화 미생물 농약과 그의 제조방법
US20080107689A1 (en) Stable Microbial Inoculants and Methods for Production of Them
CN101502271B (zh) 一种防治害虫的真菌颗粒剂的制造方法
Rivas-Franco et al. Production of microsclerotia from entomopathogenic fungi and use in maize seed coating as delivery for biocontrol against Fusarium graminearum
KR102251508B1 (ko) 우수한 살충 효과 및 포자생성능을 갖는 신규 보베리아 바시아나 knu-101 균주 및 이의 용도
Jackson et al. Production, delivery systems, and survival in soil of four fungi with disease biocontrol potential
JP4792685B2 (ja) 広宿主範囲を持つ昆虫病原性糸状菌
KR102071626B1 (ko) 곤충 병원성 미생물 농약제제 및 이의 제조방법
KR101896932B1 (ko) 신규 미생물 보베리아 바시아나 fg317 또는 이를 함유하는 담배거세미나방 유충 방제용 미생물제제
CN108739804A (zh) 球孢白僵菌可湿性粉剂的制备方法
CN109749940B (zh) 一种真菌菌剂的制备方法及其产品和应用
KR102105252B1 (ko) 닭진드기 방제효과를 갖는 보베리아 바시아나 jef-410 균주, 이를 이용한 닭진드기 방제용 조성물 및 닭 진드기 방제방법
KR102130764B1 (ko) 곤충 병원성 미생물 분말형 농약제제
KR101800330B1 (ko) 곤충병원성 곰팡이균의 포자형성 향상을 위한 액체배지 조성물 및 배양방법
KR101996530B1 (ko) 신규한 바실러스 아밀로리퀴에파션스 nbc241 균주 및 상기 균주를 유효성분으로 포함하는 곤충에 병을 일으키는 병원균 방제용 조성물
JP5779746B2 (ja) 糸状菌を含有する顆粒およびその調製方法
JP2007153873A (ja) 土壌病害防除剤
KR101425046B1 (ko) 패실로마이세스 속 곰팡이의 대량 생산 방법
CN113774007A (zh) 一种重组绿僵菌孢子粉的制备方法
Roswanjaya et al. Conidia Production of Beauveria Bassiana in Solid Substrate Fermentation Using a Biphasic System
KR100458765B1 (ko) 파리목 해충에 대해 방제효과를 가지는 바실러스슈린지에스 균주 및 이를 이용한 미생물 살충제의 제조방법
CN116333895B (zh) 不用灭菌的杀虫真菌专用培养基、杀虫真菌生产方法和真菌制剂及应用
KR20150003062A (ko) 천연제오라이트 세라믹볼을 이용한 곤충병원성 곰팡이의 포자 생산방법 및 그 분리방법

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
N231 Notification of change of applicant
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant