KR20190112330A - 치료용 덴드리머 - Google Patents

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이언 그랜트
에드워드 존 헤네시
존 폴 시크리스트
데이비드 오웬
브라이언 켈리
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Abstract

화학식 I의 덴드리머 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다. 화학식 I의 덴드리머를 포함하는 약학 조성물 및 암 치료용으로 이를 이용하는 방법이 또한 개시되어 있다.

Description

치료용 덴드리머
본 발명은 치료용 덴드리머에 관한 것이다.
Bcl-2 및 Bcl-XL은 BCL-2 단백질 패밀리의 중요한 항-세포자멸성 멤버이고 세포 생존의 주요 조절자이다(문헌[Chipuk JE et al., The BCL-2 family reunion, Mol.Cell 2010 Feb 12; 37(3): 299~310]). 이들 중요한 생존 인자의 유전자 전좌, 증폭 및/또는 단백질 과발현은 다수의 암 유형에서 관측되었으며, 암의 발생 및 진행에 광범위하게 연관되어 있다(문헌[Yip et al., Bcl-2 family proteins and cancer, Oncogene 2008 27, 6398~6406]; 및 문헌[Beroukhim R. et al., The landscape of somatic copy-number alteration across human cancers, Nature 2010 Feb 18; 463 (7283): 899~905]). 다수의 악성 종양에서, BCL-2 및/또는 BCL-XL은 또한 약제 내성 및 재발을 매개하는 것으로 나타나 있으며, 좋지 않은 예후와 강하게 연관되어 있다(문헌[Robertson LE et al. Bcl-2 expression in chronic lymphocytic leukemia and its correlation with the induction of apoptosis and clinical outcome, Leukemia 1996 Mar; 10(3): 456~459]; 및 문헌{Ilievska Poposka B. et al., Bcl-2 as a prognostic factor for survival in small-cell lung cancer, Makedonska Akademija na Naukite i Umetnostite Oddelenie Za Bioloshki i Meditsinski Nauki Prilozi 2008 Dec; 29(2): 281~293]).
항-세포자멸성 BCL2 패밀리 단백질은 BIM, PUMA, BAK 및 BAX와 같은 전세포자멸성 단백질에 결합하고 이들의 세포사멸 유도 활성을 중화시킴으로써 암 세포의 생존을 용이하게 한다(문헌[Chipuk JE et al., infra; and Yip et al, infra]). 따라서 BCL-2 및 BCL-XL만을 치료학적으로 표적화하거나, 세포 독성 화학 요법제, 프로테아좀 억제제 또는 키나아제 억제제와 같이 단백질의 BCL-2 패밀리 주축에 영향을 미치는 기타 요법을 병용하여 치료학적으로 표적화하는 것이 암을 치료할 수 있고 다수의 인간 암에서 약제 내성을 극복할 수 있는 매력적인 전략이다(문헌[Delbridge, ARD et al., The BCL-2 protein family, BH3-mimetics and cancer therapy, Cell Death & Differentiation 2015 22, 1071~1080]).
세포 성능(cell potency)의 달성뿐 아니라 후보 화합물을 적절히 허용 가능한 약품으로 개발하기 위해, 화합물은 다수의 부가적인 물성을 갖고 나타내야 한다. 이들 물성으로는 적절한 투여 형태로 제형화하기 위한 적절한 물리 화학적 물성(예를 들어, 용해성, 안정성, 제조 가능성), 적절한 생명 약학 물성(예를 들어, 투과성, 용해성, 흡수, 생물학적 이용 가능성, 생물학적 조건 하의 안정성, 약동학적 및 약역학적 거동) 및 허용 가능한 치료 지수를 제공하기 위한 적절한 안전성 프로파일을 들 수 있다. 이 같은 물성의 일부 또는 전체를 나타내는 화합물, 예를 들어 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL의 억제제를 확인하는데 어려움이 있다.
Bcl-2 및/또는 Bcl-XL의 특정 N-아실설폰아미드계 억제제 및 이를 제조하는 방법은 미국 특허 제9,018,381호에 개시되어 있다. 세포에서 Bcl-2에 결합하여 Bcl-2 기능을 억제하는 화합물의 활성 및 특이성은 시험관 내 결합 및 세포 검정에 의하여 미국 특허 제9,018,381호에 또한 개시되어 있다. 그러나, 예를 들어, 낮은 용해성 및 표적 관련 부작용으로 인해 이들 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL의 N-아실설폰아미드계 억제제를 전달하는 것은 어려운 것으로 증명되었다. 따라서 본 출원인은 접합되지 않은 Bcl 억제제가 직면하는 전달 문제를 극복할 수 있는, 특정 Bcl 억제제에 연결된 덴드리머를 개발하였다.
본원에는 Bcl 억제제에 공유 부착(예를 들어, 접합 또는 연결)된 덴드리머가 개시되어 있다. 접합된 덴드리머는 접합되지 않은 Bcl 억제제와 비교하여 높은 용해성을 나타내며, 임상전 데이터에 따르면 Bcl 억제제와 접합된 덴드리머는 생체 내에서 내약성을 개선시키는 잠재력을 가지며, 이는 치료 지수를 개선시킬 수 있고 부작용을 줄일 수 있는 것으로 제안되어 있다. 덴드리머는 특정의 방출 속도(예를 들어, Bcl 억제제가 덴드리머로부터 개열되는 속도)를 갖는 것으로 설계된다.
일부 실시형태에서, 화학식 I의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서,
코어는
Figure pct00002
이고;
*는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
b는 2이고;
BU는 구성 단위이고;
BUx는 x 세대의 구성 단위이며, 이때 화학식 I의 덴드리머의 x 세대 내의 구성 단위의 총 개수는 2(x)와 같고, 화학식 I의 덴드리머 내의 BU의 총 개수는 (2x-1)b와 같고; BU는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00003
#은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
+는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00004
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
Figure pct00005
는 BUx의 아민 모이어티에 대한 부착점임);
단 (c + d)는 (2x)b 이하이고, d는 1 이상이고;
단 (c + d)가 (2x)b 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 [(2x)b] - (c + d)임).
일부 실시형태에서, 화학식 II의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 II]
Figure pct00006
(상기 식에서,
b는 2이고;
코어는
Figure pct00007
이고;
*는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
BU는 구성 단위이고, BU의 개수는 62와 같으며; 이때 BU는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00008
#은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00009
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
Figure pct00010
는 BU5의 아민 모이어티에 대한 공유 부착을 나타냄);
단 (c + d)는 64 이하이고, d는 1 이상이고;
단 (c + d)가 64 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)임).
일부 실시형태에서, 화학식 III의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다.
[화학식 III]
Figure pct00011
(상기 식에서,
코어는
Figure pct00012
이고;
D는
Figure pct00013
이고;
AP는 다른 구성 단위에 대한 부착점이고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00014
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-임);
단 (c + d)가 64 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)이고; d는 1 이상임).
일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 IV]
Figure pct00015
(상기 식에서,
Y는 PEG1800-2400 또는 H이고; Q는 H 또는 L-AA이며, 이때 L-AA는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00016
A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 V]
Figure pct00017
(상기 식에서, Y는 PEG1800-2400 또는 H이고; Q는 H 또는 L-AA이며, 이때 L-AA는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00018
A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물이 개시되어 있다.
일부 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
일부 실시형태에서, 암을 치료하는데 사용하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다.
일부 실시형태에서, 암을 치료하기 위한 약물을 제조하는데 사용하는데 있어서 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도가 개시되어 있다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 암을 치료하기 위한 약학 조성물이 개시되어 있다.
도 1은 3세대 덴드리머를 나타낸 도면이다.
도 2는 화합물 A의 B 형태에 대한 XRPD 회절도이다.
도 3a는 실시예 2에 나타나 있는 화합물 A를 제형화하기 위한 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 SCID 마우스에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 상응하는 비히클; 즉 비히클 1(V1, 30% HP-β-CD, pH 4), 비히클 2(V2, 10.6% 캡티솔, pH 9) 및 비히클 3(V3, 0.5% 트윈, pH 9)과 비교하여 HP-β-CD(V1), 캡티솔(Captisol)(V2) 및 트윈(V3) 각각으로 제형화된 화합물 A에 대한 효능 평가가 나타나 있다.
도 3b는 화합물 A를 크레모포어(Cremophor)로 제형화하기 위한 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 SCID 마우스에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 상응하는 비히클; 즉 비히클 4(V4, 5%(w/v) 크레모포어 EL, pH 4)와 비교하여 크레모포어(V4)로 제형화된 화합물 A에 대한 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 2를 참고한다.
도 4는 상응하는 비히클; 즉 비히클 1(V1, 30% HP-β-CD, pH 4), 비히클 2(V2, 10.6% 캡티솔, pH 9) 및 비히클 3(V3, 0.5% 트윈, pH 9)과 비교하여 HP-β-CD(V1), 캡티솔(V2) 및 트윈(V3) 각각에서 제형화된 화합물 A의 단일 투여 이후 6시간 및 24시간에서의 세포사멸(세포자멸(apoptosis))을 나타낸다. 개열된 카스파아제 3(CC3) 반응은 세포사멸의 척도로서 사용되었으며, 셀 시그널링 패스스캔 ELISA 키트(Cell Signaling Pathscan ELISA Kit)를 이용하여 측정하였다. 실시예 2를 참고한다.
도 5는 HP-β-CD(V1), 캡티솔(V2) 및 트윈(V3) 각각에서 제형화된 화합물 A에 대한 단일 투여 종양 노출을 나타낸다. 단일 투여 후 6시간 및 24시간 후에 종양 내의 화합물 A의 농도는 LC-MS/MS를 이용하여 측정하였다. 실시예 2를 참고한다.
도 6은 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 Rag2-/- 래트에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 종양이 대략 4,500 ㎣ 내지 6,000 ㎣까지 성장하면 래트를 비히클 1(30% HP-β-CD, pH 4) 또는 화합물 A 5 ㎎/㎏ 주입군(30분 동안 1회 정맥 내 주입)으로 무작위 분류하였다. 상응하는 비히클(V1)과 비교하여 30% HP-β-CD(V1)로 제형화된 화합물 A의 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 2를 참고한다.
도 7은 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 Rag2-/- 래트에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 종양이 대략 4,500 ㎣ 내지 6,000 ㎣까지 성장하면 래트를 비히클 1(30% HP-β-CD, pH 4) 또는 화합물 A 5 ㎎/㎏, 화합물 A 3 ㎎/㎏ 및 화합물 A 1 ㎎/㎏ 주입군(30분 동안 1회 정맥 내 주입)으로 무작위 분류하였다. 상응하는 비히클(V1)과 비교하여 5 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏ 및 1 ㎎/㎏의 30% HP-β-CD(V1)로 제형화된 화합물 A의 투여 반응 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 2를 참고한다.
도 8은 pH 값 범위에 걸쳐 실시예 6 및 실시예 9의 초기 방출 속도를 비교한 것이다. 실시예 13을 참고한다.
도 9는 본 발명의 다양한 거대분자에 대하여 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 SCID 마우스에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 비히클(인산염 완충 식염수), 화합물 A(30% HP-β-CD로 제형화됨(pH 4)), PBS 중의 실시예 6(10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함), PBS 중의 실시예 9(10 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)에 대한 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 18을 참고한다.
도 10은 비히클(인산염 완충 식염수) 또는 PBS 중의 실시예 6(10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)의 단일 투여 이후 다양한 시점에서의 세포사멸(세포자멸)을 나타낸다. 개열된 카스파아제 3(CC3) 반응은 세포사멸의 척도로서 사용되었으며, 셀 시그널링 패스스캔 ELISA 키트를 이용하여 측정하였다. 실시예 18을 참고한다.
도 11은 개시된 다양한 덴드리머에 대하여 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 SCID 마우스에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 비히클(인산염 완충 식염수(PBS)), 비히클 1 중의 화합물 A 제형(30% HP-β-CD), PBS 중의 실시예 6(20 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함) 및 PBS 중의 실시예 9(20 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)의 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 18을 참고한다.
도 12는 비히클(인산염 완충 식염수), 비히클 1 중의 화합물 A(5 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏)의 제형(30% HP-β-CD) 및 PBS 중의 실시예 9의 덴드리머(10 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)의 단일 투여 이후의 다양한 시점에서의 세포사멸(세포자멸)을 나타낸다. 개열된 폴리 ADP 리보오스 폴리머라아제(PARP) 반응은 세포사멸의 척도로서 사용되었다. 실시예 18을 참고한다.
도 13은 RS4;11 이종이식 마우스 모델에서 화합물 A가 10 ㎎/㎏ 당량으로 투약된 실시예 5, 실시예 7 및 실시예 8에 대한 데이터를 나타낸다. 데이터에 따르면 화합물 A가 10 ㎎/㎏ 당량으로 투약된 실시예 7은 종양 퇴화를 유도하는 반면, 화합물 A가 10 ㎎/㎏ 당량으로 투약된 실시예 5 및 실시예 8은 그만큼 유의한 항종양 활성을 보이지 않는 것으로 증명된다. 실시예 18을 참고한다.
도 14는 실시예 6 및 비히클에 대하여 인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4:11)를 이용하여 Rag2-/- 래트에서의 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델을 나타낸다. 비히클(인산염 완충 식염수(PBS)) 및 PBS 중의 실시예 6(10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)에 대한 효능 평가가 나타나 있다. 실시예 18을 참고한다.
도 15는 비히클(인산염 완충 식염수(PBS)), PBS 중의 실시예 6(50 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함), PBS 중의 실시예 9(50 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함), 리툭시맙(rituximab; 10 ㎎/㎏), 리툭시맙(10 ㎎/㎏)과 실시예 6(10 ㎎/㎏, 30 ㎎/㎏ 및 50 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)의 조합 및 리툭시맙(10 ㎎/㎏)과 실시예 9(10 ㎎/㎏, 30 ㎎/㎏ 및 50 ㎎/㎏의 화합물 A와 동일함)의 조합에 대하여 SCID 마우스에서의 SuDHL-4 이종이식 모델을 나타낸다. 실시예 18을 참고한다.
도 16은 화학식 IV의 덴드리머를 나타낸다.
도 17은 화학식 V의 덴드리머를 나타낸다.
도 18은 mTOR 억제제인 AZD2014와 함께 실시예 9에 의해 나타나는 인간 소세포 폐암 종양 모델에서의 생체 내 항종양 활성을 나타낸다.
도 19는 아칼라브루티닙(acalabrutinib)과 함께 실시예 9에 의해 나타나는 인간 DLBCL 종양 모델에서의 생체 내 항종양 활성을 나타낸다.
일 실시형태에서, 2가의 벤즈하이드릴헥산아미드-리신 코어, 리신 구성 단위를 포함하는 덴드리머가 개시되어 있으며, 이때 표면 작용기는 Bcl 억제제 및 PEG로 치환되어 있다.
일 실시형태에서, 화학식 I의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 I]
Figure pct00019
(상기 식에서,
코어는
Figure pct00020
이고;
*는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
b는 2이고;
BU는 구성 단위이고;
BUx는 x 세대의 구성 단위이며, 이때 화학식 I의 덴드리머의 x 세대 내의 구성 단위의 총 개수는 2(x)와 같고, 화학식 I의 덴드리머 내의 BU의 총 개수는 (2x-1)b와 같고; BU는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00021
#은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
+는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00022
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
Figure pct00023
는 BUx의 아민 모이어티에 대한 부착점임);
단 (c + d)는 (2x)b 이하이고, d는 1 이상이고;
단 (c + d)가 (2x)b 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 [(2x)b] - (c + d)임).
단지 예시를 위해, 도 1은 코어, 구성 단위(BU)의 3개의 세대 및 24개의 표면 작용기를 포함하는 3세대 덴드리머를 나타낸 것이다.
덴드리머의 코어는 덴드리머가 구축되는 중심 단위를 나타내는 것으로 인지될 것이다. 이와 관련하여, 코어는 구성 단위의 제1 및 후속적인 세대가 '분기 성장'하는 중심 단위를 나타낸다. 일 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것의 코어는 하기와 같다:
Figure pct00024
(상기 식에서, *는 덴드리머의 구성 단위에 대한 공유 부착을 나타냄). 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것의 코어는 하기와 같다:
Figure pct00025
(상기 식에서, *는 덴드리머의 구성 단위에 대한 공유 부착을 나타냄).
"구성 단위" 또는 "BU"란 용어는 적어도 3개의 작용기, 즉 코어 또는 구성 단위의 이전 세대(또는 층) 내의 구성 단위에 부착을 위한 하나의 작용기 및 구성 단위의 다음 세대(또는 층) 내의 구성 단위에 부착을 위한 2개 이상의 작용기를 갖는 분자를 포함한다. 구성 단위는 코어 또는 구성 단위의 이전 층에 부가함으로써 덴드리머 층을 구축하기 위해 사용된다. 일부 실시형태에서, 구성 단위는 3개의 작용기를 갖는다.
"세대"란 용어는 덴드론(dendron) 또는 덴드리머를 구성하는 구성 단위 층의 개수를 포함한다. 예를 들어, 하나의 세대로 구성된 덴드리머는 코어에 부착된 하나의 구성 단위 층, 예를 들어, 코어-[[구성 단위]b(여기서, b는 코어에 부착된 덴드론의 개수이며 코어의 원자가임)를 가질 것이다. 2개의 세대로 구성된 덴드리머는 코어에 부착된 각 덴드론 내에 2개의 구성 단위 층을 갖는다. 예를 들어, 구성 단위가 하나의 2가의 분기점을 갖는 경우, 덴드리머는 코어[[구성 단위][구성 단위]2]b일 수 있고, 3개의 세대로 구성된 덴드리머는 코어에 부착된 각 덴드론 내에 3개의 구성 단위 층, 예를 들어 코어-[[구성 단위][구성 단위]2[구성 단위]4]b를 갖고, 5개의 세대로 구성된 덴드리머는 코어에 부착된 각 덴드론 내에 5개의 구성 단위 층, 예를 들어 코어-[[구성 단위][구성 단위]2[구성 단위]4[구성 단위]8[구성 단위]16]b를 갖고, 6개의 세대로 구성된 덴드리머는 코어에 부착된 각 덴드론 내에 6개의 구성 단위 층, 예를 들어 코어-[[구성 단위][구성 단위]2[구성 단위]4[구성 단위]8[구성 단위]16[구성 단위]32]b를 갖는다. 구성 단위의 마지막 세대(최외각 세대)는 덴드리머의 표면 작용화를 제공하며, 약동학적 변형기(PM) 및/또는 링커 및 활성제(L-AA)와 결합 가능한 개수의 표면 작용기를 제공한다.
"표면 작용기"란 용어는 구성 단위의 최종 세대에서 발견되는 미반응 작용기를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 표면 작용기의 개수는 (2x)b와 같으며, 여기서 x는 덴드리머 내의 세대의 개수이며, b는 덴드론의 개수이다. 일부 실시형태에서, 표면 작용기는 1차 아미노 작용기이다.
3개의 작용기(예를 들어, 하나의 분기점)를 갖는 구성 단위로 구성된 덴드리머 내의 구성 단위의 총 개수는 (2x-1)b와 같으며, 여기서 x는 세대 번호와 같고, b는 덴드론의 개수와 같다. 예를 들어, 2개의 덴드론이 부착된 코어(b = 2)를 갖는 덴드리머에서, 각 구성 단위는 하나의 분기점을 갖고 5개의 세대가 존재하는 경우, 62개의 구성 단위가 존재할 것이며, 최외각 세대는 64개의 표면 작용기를 갖는 16개의 구성 단위를 가질 것이다. 일부 실시형태에서, 표면 작용기는 아미노 모이어티, 예를 들어 1차 또는 2차 아민이다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2가의 코어, 62개의 구성 단위 및 64개의 1차 아미노 작용기를 갖는 5세대 덴드리머이다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 구성 단위는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00026
(상기 식에서, #은 코어의 아민 모이어티 또는 구성 단위의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 구성 단위의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 약동학적 변형기, 활성제에 부착된 링커 또는 수소에 대한 공유 부착을 나타냄). 일부 실시형태에서, 덴드리머는 64개의 1차 아미노 작용기를 갖는 62개의 구성 단위를 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 구성 단위는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00027
(상기 식에서, #은 코어의 아민 모이어티 또는 구성 단위의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 구성 단위의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 약동학적 변형기, 활성제에 부착된 링커 또는 수소에 대한 공유 부착을 나타냄).
"약동학적 변형기" 또는 "PM"이란 용어는 덴드리머의 약동학적 프로파일 또는 덴드리머가 전달하는 활성제의 약동학적 프로파일을 변경 또는 조정할 수 있는 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, PM은 덴드리머 또는 활성제의 분포, 대사 및/또는 배출을 조정할 수 있다. 일부 실시형태에서, PM은 화학적 분해 경로(예를 들어, 가수분해) 또는 효소적 분해 경로에 의해 활성제가 덴드리머로부터 방출되는 속도를 감속 또는 증가시킴으로써 활성제의 방출 속도에 영향을 미칠 수 있다. 일부 실시형태에서, PM은 약학적으로 허용 가능한 담체에서의 용해성을 증가 또는 감소시킴으로써 덴드리머의 용해성 프로파일을 변경할 수 있다. 일부 실시형태에서, PM은 덴드리머가 특정 조직(예를 들어, 종양)에 활성제를 전달하도록 도울 수 있다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내에서, PM은 폴리에틸렌글리콜(PEG)이다. 일부 실시형태에서, 폴리에틸렌글리콜(PEG)은 약 220 Da와 약 5,500 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 500 Da와 약 5,000 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 1,000 Da와 2,500 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 1,500 Da와 약 2,400 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 900 Da와 약 1,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 1,800 Da와 약 2,400 Da 사이의 평균 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG는 약 2,150의 평균 분자량을 갖는다. 당업자라면 "PEG900-1200"이란 용어가 약 900 Da와 약 1,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 PEG를 포함하고, "PEG1800-2400"이란 용어가 약 1,800 Da와 약 2,400 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 PEG를 포함한다는 것을 쉽게 이해할 수 있다.
일부 실시형태에서, PEG는 약 1.00과 약 2.00 사이, 약 1.00과 1.50 사이의 다분산 지수(PDI), 예를 들어 약 1.00과 약 1.25 사이, 약 1.00과 약 1.10 사이 또는 약 1.00과 약 1.10 사이의 PDI를 갖는다. 일부 실시형태에서, PEG의 PDI는 약 1.05이다. "다분산 지수"란 용어는 소정의 중합체 샘플에서 분자 질량의 분포에 대한 척도를 지칭한다. PDI는 수평균 분자량(Mn)으로 나눈 중량 평균 분자량(Mw)과 같으며, 중합체의 배치 중의 개개의 분자 질량의 분포를 나타낸다. PDI는 1 이상의 값을 갖지만, 중합체가 균일한 사슬 길이 및 평균 분자량에 근접할수록 PD1는 1에 더 가까울 것이다.
일부 실시형태에서, 덴드리머는 (2x)b개 미만의 PEG 기를 가지며, 이때 x는 덴드리머의 세대의 개수이고, b는 덴드론의 개수이다. 일부 실시형태에서, 표면 작용기는 모두 PEG 기에 공유 부착되어 있다. 일부 실시형태에서, x가 5인 경우 덴드리머는 약 25개와 약 60개 사이의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개 이하의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개의 PEG 기를 갖는다. 예를 들어, 덴드리머의 구성 단위가 하나의 2가 분기점을 갖는 경우, 2세대 덴드리머는 4개 이하의 PEG 기를 가질 수 있고, 3세대 덴드리머는 8개 이하의 PEG 기를 가질 수 있고, 4세대 덴드리머는 16개 이하의 PEG 기를 가질 수 있으며, 5세대 덴드리머는 32개 이하의 PEG 기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개 미만의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 64개 사이의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 40개 사이의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 32개 이상의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 32개 사이의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 28개와 약 32개 사이의 PEG 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 29개의 PEG 기, 30개의 PEG 기, 31개의 PEG 기 또는 32개의 PEG 기를 갖는다.
개시된 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 활성제에 공유 부착된 링커(L-AA)를 포함하며, 이때 링커(L)는 링커의 일 말단 상의 구성 단위의 최종 세대 상의 표면 작용기 및 링커의 다른 말단 상의 활성제(AA)에 공유 부착되어 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 링커는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00028
(상기 식에서,
Figure pct00029
는 구성 단위의 최종 세대 상의 아미노 작용기에 공유 부착되어 있고,
Figure pct00030
는 활성제(AA)에 대한 공유 부착점이고, A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-임). 일부 실시형태에서, A는 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, A는 -O-이다. 일부 실시형태에서, A는 -S-이다. 일부 실시형태에서, A는 -N(CH3)이다.
일부 실시형태에서, AA는 Bcl 억제제이다. 일부 실시형태에서, AA는 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL 억제제이다. 일부 실시형태에서, AA는 미국 특허 제9,018,381호에 개시되어 있는 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL 억제제이다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 AA는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00031
(상기 식에서,
Figure pct00032
는 링커에 대한 공유 부착점임). 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 AA는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00033
일부 실시형태에서, I, II, III, IV 또는 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 L-AA의 구조는 하기와 같다:
Figure pct00034
(상기 식에서,
Figure pct00035
는 구성 단위의 최종 세대 상의 아미노 작용기에 공유 부착되어 있고, A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-임). 일부 실시형태에서, A는 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, A는 -O-이다. 일부 실시형태에서, A는 -S-이다. 일부 실시형태에서, A는 -N(CH3)이다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것 내의 L-AA의 구조는 하기와 같다:
Figure pct00036
(상기 식에서,
Figure pct00037
는 구성 단위의 최종 세대 상의 아미노 작용기에 공유 부착되어 있고, A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-임). 일부 실시형태에서, A는 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, A는 -O-이다. 일부 실시형태에서, A는 -S-이다. 일부 실시형태에서, A는 -N(CH3)이다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V 중 임의의 하나의 덴드리머는 (2x)b개 미만의 L-AA 기를 가지며, 이때 x는 덴드리머의 세대의 개수이고, b는 덴드론의 개수이다. 일부 실시형태에서, 표면 작용기는 모두 L-AA 기에 공유 부착되어 있다. 일부 실시형태에서, x가 5인 경우, 덴드리머는 약 25개와 약 64개 사이의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개 이하의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개의 L-AA 기를 갖는다. 예를 들어, 덴드리머의 구성 단위가 하나의 이작용성 분기점을 갖는 경우, 2세대 덴드리머는 4개 이하의 L-AA 기를 가질 수 있고, 3세대 덴드리머는 8개 이하의 L-AA 기를 가질 수 있고, 4세대 덴드리머는 16개 이하의 L-AA 기를 가질 수 있고, 5세대 덴드리머는 32개 이하의 L-AA 기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 2x개 미만의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 64개 사이의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 40개 사이의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 32개 이하의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 25개와 약 32개 사이의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 28개와 약 32개 사이의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 29개의 L-AA 기, 30개의 L-AA 기, 31개의 L-AA 기 또는 32개의 L-AA 기를 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것에서 L-AA 기와 PEG 기의 합은 64개 이하와 같을 수 있다. 일부 실시형태에서, L-AA 기와 PEG 기의 합은 64개 미만일 수 있으며, 단 덴드리머는 적어도 하나의 L-AA 기를 갖는다. 일부 실시형태에서, L-AA 기와 PEG 기의 합은 약 50개와 약 64개 사이일 수 있다. L-AA 기와 PEG 기의 합이 64개 미만일 경우, 구성 단위의 최종 세대의 미반응 표면 기능 단위는 1차 아미노기로 남아 있으며, 단 덴드리머는 적어도 하나의 L-AA 기를 갖는다. 예를 들어, 구성 단위의 최종 세대 상의 1차 아미노기의 개수는 64에서 L-AA 기와 PEG 기의 합을 뺀 것과 같으며(예를 들어, 64 - (L-AA + PEG)), 단 덴드리머는 적어도 하나의 L-AA 기를 갖는다. 예를 들어, L-AA 기와 PEG 기의 합이 50이면 14개의 표면 작용기는 1차 아미노 모이어티로 남을 것이고, L-AA 기와 PEG 기의 합이 51이면 표면 작용기 중 13개는 1차 아미노 모이어티로 남을 것이고, L-AA 기와 PEG 기의 합이 52이면 표면 작용기 중 12개는 1차 아미노 모이어티로 남을 것이고, L-AA 기와 PEG 기의 합이 53이면 표면 작용기 중 11개는 1차 아미노 모이어티로 남을 것이다. 일부 실시형태에서, 덴드리머 상의 1차 아미노 모이어티의 개수는 약 0개와 약 14개 사이이다. 일부 실시형태에서, PEG 기의 개수와 L-AA 기의 개수의 합이 (2x)b개(여기서, x는 덴드리머의 세대의 개수이고, b는 덴드론의 개수임) 미만이면 나머지 표면 작용기는 64에서 PEG기와 L-AA 기의 합을 뺀 것과 같으며, 단 덴드리머는 적어도 하나의 L-AA 기를 갖는다.
일부 실시형태에서, W는 (PM)c 또는 (H)e이고; Z는 (L-AA)d 또는 (H)e이며; 단 (c + d)는 (2x)b개 이하이고, 단 d는 1 이상이며; 이때 x는 세대의 개수이고, b는 덴드론의 개수이고; 단 (c + d)가 (2x)b개 미만이면, 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 [2(x + 1)] - (c + d)이다. 예를 들어, b가 2이고 x가 5인 경우, (c + d)는 64 이하이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 64이고; 즉 (PM)c와 (L-AA)d의 합은 64와 같다. 일부 실시형태에서, b가 2이고 x가 5인 경우, (c + d)는 64 미만이고; 즉 (PM)c와 (L-AA)d의 합은 64 미만이며, 단 d는 1 이상이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 50과 64 사이의 정수이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 58과 64 사이의 정수이다.
일부 실시형태에서, (c + d)는 (2x)b이며, 이 경우 (H)e는 존재하지 않고, e는 0이다. 예를 들어, b가 2이고 x가 5이고 (PM)c와 (L-AA)d의 합이 64와 같으면, 덴드리머 내의 구성 단위의 5세대 상에 비치환된 표면 작용기가 존재하지 않으며, 따라서 e는 0이다. 그러나 (c + d)는 (2x)b 미만인 경우, (H)e는 (2x)b - (c + d)와 같다. 예를 들어, b가 2이고, x가 5이고, (PM)c와 (L-AA)d의 합이 64 미만이면, 구성 블록의 5세대 상의 비치환된 표면 작용기의 개수는 64에서 (PM)c와 (L-AA)d의 합을 뺀 것과 같다. 이 경우, e는 64에서 (PM)c와 (L-AA)d의 합을 뺀 것과 같다. 일부 실시형태에서, (c + d)의 합이 50과 64 사이의 정수인 경우, e는 0과 14 사이의 정수이다. 일부 실시형태에서, (c + d)가 58과 64 사이의 정수인 경우, e는 0과 6 사이의 정수이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 58이고, e는 6이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 59이고, e는 5이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 60이고, e는 4이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 61이고, e는 3이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 62이고, e는 2이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 63이고, e는 1이다. 일부 실시형태에서, (c + d)는 60이고, e는 0이다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머 중 임의의 것은 약 90 kDa 내지 약 120 kDa의 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 100 kDa 및 115 kDa의 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 100 kDa 내지 약 110 kDa의 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머는 약 100 kDa 내지 약 105 kDa의 분자량을 갖는다. 일부 실시형태에서, 덴드리머의 분자량은 약 100 kDa, 약 101 kDa, 약 102 kDa, 약 103 kDa, 약 104 kDa, 약 105 kDa, 약 106 kDa, 약 107 kDa, 약 108 kDa, 약 109 kDa 또는 약 110 kDa이다.
일부 실시형태에서, BU가
Figure pct00038
또는
Figure pct00039
인 경우, PEG는 BU의 ε-위치에서 아미노 작용기에 공유 부착되어 있고, L-AA는 BU의 α-위치에서 아미노 작용기에 공유 부착되어 있다.
일부 실시형태에서, 화학식 II의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 II]
Figure pct00040
(상기 식에서,
b는 2이고;
코어는
Figure pct00041
이고;
*는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
BU는 구성 단위이고, BU의 개수는 62와 같으며; 이때 BU는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00042
#은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되어 있는 링커이며; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00043
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
Figure pct00044
는 BU5의 아민 모이어티에 대한 공유 부착을 나타냄);
단 (c + d)는 64 이하이고, d는 1 이상이고;
단 (c + d)가 64 미만인 경우, 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)임).
화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG900-1200이고, A는 -O-이다. 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -O-이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -N(CH3)이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -S-이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -CH2-이다.
화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 25와 32 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 29와 32 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 29이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 30이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 31이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 32이다.
화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 25와 32 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 29와 32 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 29이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 30이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 31이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 32이다.
화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0과 14 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0과 6 사이의 정수이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 1이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 2이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 3이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 4이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 5이다. 화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 6이다.
화학식 II의 덴드리머의 일부 실시형태에서, L-AA는 하기와 같다:
Figure pct00045
일부 실시형태에서, 화학식 III의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 III]
Figure pct00046
(상기 식에서,
코어는
Figure pct00047
이고;
D는
Figure pct00048
이고;
AP는 다른 구성 단위에 대한 부착점이고;
W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이며; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
Figure pct00049
(상기 식에서,
A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-임);
단 (c + d)가 64 미만인 경우, 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)이고; d는 1 이상임).
일부 실시형태에서, D는
Figure pct00050
이다.
화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG900-1200이고, A는 -O-이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -O-이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -N(CH3)이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -S-이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, (PM)c는 PEG1800-2400이고, A는 -CH2-이다.
화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 25와 32 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 29와 32 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 29이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 30이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 31이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, c는 32이다.
화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 25와 32 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 29와 32 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 29이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 30이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 31이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, d는 32이다.
화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0과 14 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0과 6 사이의 정수이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 0이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 1이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 2이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 3이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 4이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 5이다. 화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, e는 6이다.
화학식 III의 덴드리머의 일부 실시형태에서, 화학식 III의 덴드리머의 L-AA는 하기와 같다:
Figure pct00051
일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 IV]
Figure pct00052
(상기 식에서, Y는 PEG1800-2400 또는 H이고; Q는 H 또는 L-AA이며, 이때 L-AA는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00053
A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우, 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
화학식 IV의 덴드리머의 일부 실시형태에서, A는 -N(CH3)이다. 화학식 IV의 덴드리머의 일부 실시형태에서, A는 -S-이다.
일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 25개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 29개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 29개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 30개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 31개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 32개의 PEG1800-2400을 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 25개와 32개 사이의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 29개와 32개 사이의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 29개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 30개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 31개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 32개의 L-AA를 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 14개 사이의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 6개 사이의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 하나의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 2개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 3개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 4개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 5개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 IV의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 6개의 수소를 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다:
[화학식 V]
Figure pct00054
(상기 식에서, Y는 PEG1800-2400 또는 H이고; Q는 H 또는 L-AA이며, 이때 L-AA는 하기 구조를 갖고:
Figure pct00055
A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우, 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
화학식 V의 덴드리머의 일부 실시형태에서, A는 -N(CH3)이다. 화학식 V의 덴드리머의 일부 실시형태에서, A는 -S-이다.
일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 25개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 29개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 29개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 30개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 31개의 PEG1800-2400을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 32개의 PEG1800-2400을 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 25개와 32개 사이의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 29개와 32개 사이의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 29개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 30개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 31개의 L-AA를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 32개의 L-AA를 갖는다.
일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 14개 사이의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 6개 사이의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 하나의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 2개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 3개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 4개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 5개의 수소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 화학식 V의 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 6개의 수소를 갖는다.
일부 실시형태에서, 하기 구조를 갖는 화합물이 또한 개시되어 있다:
Figure pct00056
"약학적으로 허용 가능한 염"이란 표현은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머의 생물학적 효과 및 물성을 보유하고, 전형적으로 생물학적으로 바람직하거나 그렇지 않는 경우에 바람직하지 않은 산 부가염 또는 염기 염을 포함한다. 많은 경우, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 염기성 기 및/또는 카르복실기 또는 이와 유사한 기의 존재로 인해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 산 부가염은 무기산 및 유기산을 이용하여 형성될 수 있으며, 예를 들어 아세테이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브롬화물/하이드로브롬화물, 바이카보네이트/카보네이트, 바이설페이트/설페이트, 캠퍼설포네이트, 염화물/염산염, 클로르테오필로네이트(chlortheophyllonate), 시트레이트, 에탄디설포네이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 히푸레이트, 하이드로요오드화물/요오드화물, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴설페이트, 말레이트, 말리에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프토에이트, 납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올리에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 팔모에이트, 포스페이트/인산수소/인산 2수소, 폴리갈락투로네이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 서브살리실레이트(subsalicylate), 설페이트/황산수소염, 타르트레이트, 토실레이트 및 트리플루오로아세테이트 염일 수 있다. 염이 유래할 수 있는 무기산으로는, 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 들 수 있다. 염이 유래할 수 있는 유기산으로는, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 톨루엔설폰산, 트리플루오로아세트산, 설포살리실산 등을 들 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 염기 부가염은 무기염 및 유기염을 이용하여 형성될 수있다. 염이 유래할 수 있는 무기염으로는, 예를 들어 암모니아 및 암모늄 및 주기율표의 I족 내지 XII족의 금속의 염을 들 수 있다. 특정 실시형태에서, 염은 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연 및 구리에서 유래하며; 특히 적절한 염으로는 암모늄, 칼슘, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염을 들 수 있다. 염이 유래할 수 있는 유기염으로는, 예를 들어 1차, 2차 및 3차 아민, 치환된 아민(자연적으로 발생하는 치환된 아민을 포함함), 환형 아민, 염기성 이온 교환 수지 등을 들 수 있다. 특정 유기 아민으로는 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민을 들 수 있다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머의 약학적으로 허용 가능한 염은 통상적인 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이 같은 염은 이들 화합물의 유리 산 형태를 화학 양론적 양의 적당한 염(예를 들어, 수산화나트륨, 수산화칼슘, 수산화마그네슘 또는 수산화칼륨, 카보네이트, 바이카보네이트 등))과 반응시키거나, 이들 화합물의 유리 염기 형태를 화학 양론적 양의 적당한 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 이 같은 반응은 전형적으로 물 또는 유기 용매 중에서 수행되거나, 이들 둘의 혼합물 중에서 수행된다. 일반적으로, 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올, 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질의 사용은, 실시 가능한 경우에 바람직하다. 부가적인 적당한 염의 목록은, 예를 들어 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences," 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985)]; 문헌[Berge et al., "J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1~19]; 및 문헌["Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)]에서 찾아볼 수 있다.
본원에 주어진 임의의 화학식은 또한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머에 대한 표지되지 않은 형태뿐만 아니라 동위원소 표지된 형태를 나타낼 수 있다. 동위원소 표지된 화합물은, 하나 이상의 원자가 원소는 동일하지만 질량수가 다른 원자에 의해 교체된다는 것을 제외하고, 본원에 주어진 화학식으로 나타나 있는 구조를 갖는다. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머 및 이들의 염 내에 혼입될 수 있는 동위원소의 예로는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소, 예를 들어 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 35S 및 125I를 들 수 있다. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 3H, 11C, 14C, 35S 및 36Cl과 같은 방사능 동위원소가 존재하는 다양한 동위원소 표지된 화합물을 포함할 수 있다. 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III 및 화학식 IV의 동위원소 표지된 덴드리머는 일반적으로 당업자에게 공지된 통상적인 기법, 또는 앞서 사용된 표지되지 않은 시약 대신에 적당한 동위원소 표지된 시약을 이용하여 첨부된 실시예에 개시된 바와 유사한 과정에 의해 제조될 수 있다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 다양한 이성질체 형태를 가질 수 있다. "광학 이성질체" 또는 "입체 이성질체"란 표현은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 소정의 덴드리머에 대해 존재할 수 있는 다양한 입체 이성질체 배열들 중 임의의 것을 지칭한다. 특히, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 키랄성을 가지며, 거울상 이성질체 초과량이 약 0% e.e와 98% e.e 미만 사이인 거울상 이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 화합물이 순수한 거울상 이성질체인 경우, 각각의 키랄 중심에서의 입체 화학은 R 또는 S에 의해 특정될 수 있다. 이 같은 지명은 또한 하나의 거울상 이성질체가 풍부한 혼합물용으로 사용될 수 있다. 절대 배열이 알려져 있지 않은 분해된 화합물은 나트륨 D 선의 파장에서 평면 편광을 회전시키는 방향(우선성 또는 좌선성)에 따라 (+) 또는 (-)로 표기된다. 본 개시내용은 라세미 혼합물, 광학적으로 순수한 형태 및 중간체 혼합물을 포함하는 가능한 이성질체 모두를 포함한다는 것을 의미한다. 광학적으로 활성형인 (R)- 및 (S)-이성질체는 키랄 신톤(chiral synthon), 키랄 시약 또는 키랄 촉매를 사용하여 제조될 수 있거나, 키랄 HPLC과 같은 당해 기술분야에 잘 알려진 통상적인 기법을 이용하여 분해될 수 있다.
약학 조성물
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물이 개시되어 있다.
"약학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제"란 표현은, 당업자에 의해 확인된 바와 같이, 건전한 의학적 판단 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과의 접촉에 사용하는데 적절한 화합물, 재료, 조성물 및/또는 투여 형태를 포함한다.
개시된 조성물은 경구용으로 적절한 형태(예를 들어, 정제, 로젠지, 경질 또는 연질 캡슐, 수성 또는 유성 현탁액, 유화액, 분산성 분말 또는 과립, 시럽 또는 엘릭서로서의 형태), 국소용으로 적절한 형태(예를 들어, 크림, 연고, 겔 또는 수성 또는 유성 용액 또는 현탁액으로서의 형태), 흡입에 의한 투여용으로 적절한 형태(예를 들어, 미분된 분말 또는 액체 에어로졸로서의 형태), 취입에 의한 투여용으로 적절한 형태(예를 들어, 미분된 분말로서의 형태) 또는 비경구 투여용으로 적절한 형태(예를 들어, 정맥 내, 피하, 근육 내 또는 근육 내 투약을 위한 멸균된 수성 또는 유성 용액 또는 직장 투약을 위한 좌제로서의 형태)일 수 있다.
개시된 조성물은 당해 기술분야에 잘 알려진 통상적인 약학적 부형제를 이용하여 통상적인 절차에 의해 수득될 수 있다. 따라서 경구용으로 사용하기 위한 조성물은, 예를 들어 하나 이상의 착색제, 감미제, 향미제 및/또는 보존제를 함유할 수 있다.
정제 제형에 적절한 약학적으로 허용 가능한 부형제는, 예를 들어 락토오스, 탄산나트륨, 인산칼슘 또는 탄산칼슘과 같은 불활성 희석제; 옥수수 전분 또는 알긴산과 같은 과립제 및 붕해제; 전분과 같은 결합제; 스테아린산마그네슘, 스테아르산 또는 활석과 같은 윤활제; 에틸 또는 프로필 p-하이드록시벤조에이트와 같은 보존제; 및 아스코르브산과 같은 항산화제를 포함할 수 있다. 정제 제형은 코팅되지 않거나 코팅되어 이들의 분해 및 위장관 내의 유효 성분의 후속적인 흡수를 변경할 수 있거나, 당해 기술분야에 잘 알려진 통상적인 코팅제 및 절차를 이용하여 이들의 안정성 및/또는 외형을 개선시킬 수 있다.
경구용 조성물은 유효 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합되는 경질 젤라틴 캡슐의 형태일 수 있거나, 유효 성분이 물 또는 오일(예를 들어, 땅콩 오일, 액체 파라핀, 또는 올리브 오일)과 혼합되는 연질 젤라틴 캡슐로서 존재할 수 있다.
수성 현탁액은 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스, 알긴산나트륨, 폴리비닐-피롤리돈, 트라가칸트 고무 및 아카시아 고무와 같은 하나 이상의 현탁제; 레시틴 또는 지방산과 알킬렌옥사이드의 축합 산물(예를 들어, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 또는 장쇄 지방족 알코올과 에틸렌옥사이드의 축합 산물, 예를 들어 헵타데카에틸렌옥시세탄올, 또는 폴리옥시에틸렌 소르비톨 모노올리에이트와 같은, 헥시톨 및 지방산에서 유래하는 부분 에스테르와 에틸렌옥사이드의 축합 산물, 또는 장쇄 지방족 알코올과 에틸렌옥사이드의 축합 산물, 예를 들어 헵타데카에틸렌옥시세탄올, 또는 폴리옥시에틸렌 소르비톨 모노올리에이트와 같은, 헥시톨 및 지방산에서 유래하는 부분 에스테르와 에틸렌옥사이드의 축합 산물, 또는 헥시톨 무수물 및 지방산에서 유래하는 부분 에스테르와 에틸렌옥사이드의 축합 산물, 예를 들어 폴리에틸렌 소르비탄 모노올리에이트와 같은 분산제 또는 습윤제와 함께 유효 성분을 미세 분말 형태 또는 나노 또는 마이크로 크기의 입자 형태로 함유할 수 있다. 또한 수성 현탁액은 에틸 또는 프로필 p-하이드록시벤조에이트와 같은 하나 이상의 보존제; 아스코르브산과 같은 항산화제; 착색제; 향미제; 및/또는 수크로오스, 사카린 또는 아스파탐과 같은 감미제를 함유할 수 있다.
유성 현탁액은 낙화생 오일, 올리브 오일, 참기름 또는 코코넛 오일과 같은 식물성 오일 또는 액체 파라핀과 같은 미네랄 오일 중에 유효 성분을 현탁함으로써 제형화될 수 있다. 유성 현탁액은 또한 밀랍, 경질 파라핀 또는 세틸알코올과 같은 증점제를 함유할 수 있다. 감미제 및 향미제를 첨가하여 맛이 좋은 경구용 제제를 제공할 수 있다. 이들 조성물은 아스코르브산과 같은 항산화제를 첨가함으로써 보존될 수 있다.
물을 첨가함으로써 수성 현탁액의 제조에 적절한 분산성 분말 및 과립은 분산제 또는 습윤제, 현탁제 및 하나 이상의 보존제와 함께 유효 성분을 함유할 수 있다. 적절한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제로는 이미 상술한 것들이 예시된다. 감미제, 향미제 및 착색제와 같은 부가적인 부형제가 또한 존재할 수 있다.
또한 약학 조성물은 수중유 유화액의 형태일 수 있다. 유성상은 올리브 오일 또는 낙화생 오일과 같은 식물성 오일 또는 미네랄 오일(예를 들어, 액체 파라핀) 또는 임의의 이들의 혼합물일 수 있다. 적절한 유화제는, 예를 들어 아카시아 고무 또는 트라가칸트 고무와 같은 자연적으로 발생하는 고무, 대두와 같은 자연적으로 발생하는 포스파티드, 레시틴, 지방산 및 헥시톨 무수물에서 유래하는 에스테르 또는 부분 에스테르(예를 들어, 소르비탄 모노올리에이트), 및 에틸렌옥사이드와 상기 부분 에스테르의 축합 산물(예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올리에이트)일 수 있다. 유화액은 또한 감미제, 향미제 및 보존제를 함유할 수 있다.
시럽 및 엘릭서는 글리세롤, 프로필렌글리콜, 소르비톨, 아스파탐 또는 수크로오스와 같은 감미제를 이용하여 제형화될 수 있고, 완화제(demulcent), 보존제, 향미제 및/또는 착색제를 함유할 수도 있다.
약학 조성물은 또한 하나 이상의 수성 또는 비수성이고 비독성인 경구용으로 허용 가능한 완충 시스템, 희석제, 가용화제, 공용매 또는 담체, 예를 들어 에탄올, 솔루톨(Solutol) HS15, PEG400, 트윈 80, 벤질 알코올, NN-디메틸아세트아미드, 프로필렌글리콜, 크레모포어, HP-β-CD, SBE-β-1865 사이클로덱스트린 중의 멸균된 주사액의 형태일 수 있다. 멸균된 주사 제제는 또한 멸균된 주사용 수성 또는 유성 현탁액 또는 비수성 희석제, 담체 또는 공용매 중의 현탁액일 수 있으며, 이는 적당한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제 중 하나 이상을 이용하여 공지된 절차에 따라 제형화될 수 있다.
약학 조성물은 정맥 볼루스(iv bolus)/주입 주사용 용액, 완충 시스템에 의한 재건용 멸균된 덴드리머, 또는 기타 부형제가 존재하거나 존재하지 않은 완충 시스템에 의한 재건용 동결 건조 시스템(덴드리머 단독 또는 부형제 포함)일 수 있다. 동결 건조(냉동 건조)된 물질은 비수성 용매(예를 들어, t-부탄올 또는 아세트산) 또는 수성 용매에서 제조될 수 있다. 투여 형태는 또한 후속적인 주입을 위한 추가적인 희석용 농축물일 수 있다.
흡입에 의한 투여용 조성물은 미분된 고체 또는 액체 액적을 함유하는 에어로졸로서 유효 성분을 분산시키기 위해 준비된 통상적인 가압 에어로졸의 형태일 수 있다. 휘발성 플루오르화 탄화수소 또는 탄화수소와 같은 통상적인 에어로졸 추진제가 사용될 수 있으며, 에어로졸 장치는 통상 계측된 양의 유효 성분을 분산시키기 위해 배열된다.
단일 투여 형태를 생성하기 위해 하나 이상의 부형제와 조합될 수 있는 유효 성분의 양은 처리된 숙주 및 특정 투여 경로에 따라 필연적으로 달라질 것이다. 투여 경로 및 복용 방법에 대한 추가적인 정보를 위해 독자는 문헌[Chapter 25.3 in Volume 5 of Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990]을 참고한다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 치료적 필요에 따라 1일 1회, 2회, 3회 또는 24시간 이내에 수회 투여될 수 있다. 당업자라면 개체에 따라 각각의 개별 투여량을 쉽게 결정할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 하나의 투여 형태로 투여된다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 및 화학식 V의 덴드리머는 다중 투여 형태로 투여된다.
사용 방법
하나의 양태에서, 암의 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하기 위한 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 개체에게 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
하나의 양태에서, 암을 치료하는데 사용하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다.
하나의 양태에서, 암을 치료하기 위한 약물을 제조하는데 있어서 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도가 개시되어 있다.
하나의 양태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 암을 치료하는데 사용하기 위한 약학 조성물이 개시되어 있다.
"암"이란 용어는 혈액성 악성 종양(예를 들어, 림프종, 백혈병) 및 고형 악성 종양을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. "암"이란 용어는, 예를 들어 T-세포 백혈병, T-세포 림프종, 급성 림프모구성 림프종(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소형 림프구성 림프종(SLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 단핵구성 백혈병(AML), 다발성 골수종, 외투 세포 림프종, 미만성 대형 B-세포 림프종(DLBCL), 버키트 림프종(Burkitt's lymphoma), 비호지킨 림프종(Non-Hodgkin's lymphoma), 소포성 림프종 및 고형 종양, 예를 들어 비소세포 폐암(NSCLC, 예를 들어, EGF 돌연변이형 NSCLC, KRAS 돌연변이형 NSCLC), 소세포 폐암(SCLC), 유방암, 신경아세포종, 난소암, 전립선암, 흑색종(예를 들어, BRAF 돌연변이형 흑색종, KRAS 돌연변이형 흑색종), 췌장암, 자궁암, 내장암 및 대장암(예를 들어, KRAS 돌연변이형 대장암, BRAF 돌연변이형 대장암)을 포함한다.
하나의 양태에서, 암의 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하기 위한 방법이 개시되어 있으며, 상기 방법은 개체에게 유효량의 제2 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
하나의 양태에서, 유효량의 제2 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 암을 치료하는데 사용하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다.
하나의 양태에서, 유효량의 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 암을 치료하기 위한 약물을 제조하는데 있어서 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도가 개시되어 있다.
하나의 양태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, 유효량의 제2 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 암을 치료하는데 사용하기 위한 약학 조성물이 개시되어 있다.
"~와 함께"란 표현은 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 순차적으로, 별도로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 제2 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 동일한 제형, 예를 들어 고정 투여 제형으로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 제2 항암제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 개별 제형으로 투여될 수 있으며, 실질적으로 동시에, 순차적으로 또는 별도로 투여된다.
"항암제"란 표현은 방사선, 알킬화제, 혈관신생 억제제, 항체, 항체-약제 접합체, 대사 길항 물질, 항유사분열제(antimitotics), 증식 억제제(antiproliferatives), 항바이러스 물질, 오로라 키나아제 억제제, 기타 세포사멸 활성제(예를 들어, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Bfl-1 또는 Mcl 억제제의 기타 억제제), 사멸 수용체 경로의 활성제(예를 들어, FAS 또는 TRAIL 작용제), Bcr-Abl 키나아제 억제제, BET(브로모도메인(bromodomain)) 억제제, BiTE(이중 특이성 T-세포 관여(Bi-Specific T-cell Engager)) 항체, 생물학적 반응 조절제, 사이클린-의존형 키나아제 억제제, 세포주기 억제제, 사이클로옥시게나아제-2 억제제, DVD(이중 가변 도메인 항체), 백혈병 바이러스성 종양 유전자 동족체(ErbB2) 수용체 억제제, 성장 인자 억제제, EGFR 억제제, 열충격 단백질(HSP) 억제제, 히스톤 디아세틸라아제(HDAC) 억제제, 호르몬 요법, 면역물질, 세포자멸 단백질 억제제(IAP)의 억제제, 삽입성 항생제, 키나아제 억제제, 키네신 억제제, Jak2 억제제, 포유동물 라파마이신 표적(mTOR) 억제제, AKT 억제제, 마이크로RNA, 미토겐-활성화 세포 외 신호-조절 키나아제(MEK) 억제제, BRAF 억제제, 다가 결합 단백질, 비스테로이드성 소염제(NSAID), 폴리 ADP(아데노신 디포스페이트)-리보오스 폴리머라아제(PARP) 억제제, 백금 화학 요법제, 폴로-유사 키나아제(Plk) 억제제, 포스포이노시티드-3 키나아제 억제제, 프로테오솜 억제제, 푸린 유사체, 피리미딘 유사체, 수용체 타이로신 키나아제 억제제, 에티노이드/델토이드 식물 알칼로이드, 소형 억제성 리보핵산(siRNA), 항-CD20 화합물, 토포이소머라아제 억제제 및 유비퀴틴 리가아제 억제제를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
알킬화제로는 알트레타민(altretamine), AMD-473, AP-5280, 아파지쿠온(apaziquone), 벤다무스틴(bendamustine), 브로스탈리신(brostallicin), 부설판(busulfan), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 카르보쿠온(carboquone), 카르무스틴(carmustine; BCNU), 클로람부실(chlorambucil), 클로리타진®(CLORETAZINE®; 라로무스틴(laromustine), VNP 40101M), 사이클로포스파미드, 데카르바진(decarbazine), 에스트라무스틴(estramustine), 포테무스틴(fotemustine), 글루포스파미드(glufosfamide), 이포스파미드(ifosfamide), KW-2170, 로무스틴(lomustine; CCNU), 마포스파미드(mafosfamide), 멜팔란(melphalan), 미토브로니톨(mitobronitol), 미토락톨(mitolactol), 니무스틴(nimustine), 나이트로젠 머스터드 N-옥사이드(nitrogen mustard N-oxide), 니트로소우레아, 옥살리플라틴(oxaliplatin), 라니무스틴(ranimustine), 테모졸로마이드(temozolomide), 티오테파(thiotepa), 트린다®(TREANDA®; 벤다무스틴), 트레오설판(treosulfan), 로포스파미드(rofosfamide) 등을 들 수 있다.
혈관신생 억제제로는 내피세포 특이적 수용체, (Tie-2) 억제제, 상피세포 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제, 인슐린 성장 인자-2 수용체(IGFR-2) 억제제, 기질 메탈로프로테이나아제-2(MMP-2) 억제제, 기질 메탈로프로테이나아제-9(MMP-9) 억제제, 혈소판 유래 성장 인자 수용체(PDGFR) 억제제, 트롬보스폰딘(thrombospondin) 유사체, 혈관 내피세포 성장 인자 수용체 타이로신 키나아제(VEGFR) 억제제, ALK 억제제 등을 들 수 있다.
대사 길항 물질로는 암림타®(ALIMTA®: 페메트렉시드이나트륨(pemetrexed disodium), LY231514, MTA), 5-아자시티딘, 젤로다®(XELODA®; 카페시타빈(capecitabine)), 카르모푸르(carmofur), 류스타트®(LEUSTAT®; 클라드리빈(cladribine)), 클로파라빈(clofarabine), 시타라빈(cytarabine), 시타라빈 옥포스페이트(cytarabine ocfosfate), 시토신 아라비노사이드, 데시타빈(decitabine), 데페록사민(deferoxamine), 독시플루리딘(doxifluridine), 에플로르니틴(eflornithine), EICAR(5-에티닐-1-β-D-리보푸라노실이미다졸-4-카르복사미드), 에노시타빈(enocitabine), 에트닐시트딘(ethnylcytidine), 플루다라빈(fludarabine), 5-플루오로우라실(단독 또는 류코보린(leucovorin)과 병용), 젬자®(GEMZAR®; 젬시타빈(gemcitabine)), 하이드록시우레아, 알케란®(ALKERAN®; 멜팔란), 메르캅토푸린, 6-메르캅토푸린 리보시드, 메토트렉세이트, 마이코페놀산, 넬라라빈(nelarabine), 노랄트렉시드(nolatrexed), 옥포스페이트, 펠리트렉솔(pelitrexol), 펜토스타틴(pentostatin), 페멕스트레드(pemextred), 랄티트렉시드(raltitrexed), 리바비린(Ribavirin), 트리아핀(triapine), 트리메트렉세이트(trimetrexate), S-1, 티아조푸린(tiazofurin), 테가푸르(tegafur), TS-1, 비다라빈(vidarabine), UFT 등을 들 수 있다.
Bcl-2 단백질 억제제로는 ABT-199, AT-101((-)고시폴(gossypol)), 제나센스®(GENASENSE®; G3139 또는 오블리메르센(oblimersen; Bcl-2-표적화 안티센스 올리고뉴클레오티드)), IPI-194, IPI-565, ABT-737, ABT-263, GX-070(오바토클락스(obatoclax)), AMG-176, S63645 등을 들 수 있다.
항-CD20 화합물로는 리툭시맙 및 오비누투주맙(obinutuzumab)을 들 수 있다.
Btk 억제제로는 이브루티닙(ibrutinib) 및 아칼라브루티닙을 들 수 있다.
브로모도메인 억제제로는 I-BET 762, OTX-015, CPI-203, LY294002 등을 들 수 있다.
CDK 억제제로는 BMI-1040, BMS-032, BMS-387, CVT-2584, 플라보피리돌(flavopiridol), GPC-286199, MCS-5A, PD0332991, PHA-690509, 셀리시클립(seliciclib; CYC-202, R-로스코비틴(R-roscovitine)), ZK-304709, AZD4573 등을 들 수 있다.
EGFR 억제제로는 EGFR 항체, ABX-EGF, 항-EGFR 면역리포좀, EGF-백신, EMD-7200, 에르비툭스®(ERBITUX®; 세툭시맙(cetuximab)), HR3, IgA 항체, 이레사®(IRESSA®; 제피티닙(gefitinib)), 타르세바®(TARCEVA®; 엘로티닙(erlotinib) 또는 OSI-774), TP-38, EGFR 융합 단백질, 타이커브®(TYKERB®; 라파티닙(lapatinib)), 타그리소(TAGRISSO; AZD9291, 오시메르티닙(osimertinib)) 등을 들 수 있다.
ALK 억제제로는 크로조티닙(crizotinib), 세리티닙(ceritinib) 등을 들 수 있다.
ErbB2 수용체 억제제로는 CP-724-714, CI-1033(카네르티닙(canertinib)), 헤르셉틴®(HERCEPTIN®; 트라스투주맙(trastuzumab)), 타이커브®(라파티닙), 옴니타그®(OMNITARG®; 2C4, 페투주맙(petuzumab)), TAK-165, GW-572016(이오나파르닙(ionafarnib)), GW-282974, EKB-569, PI-166, dHER2(HER2 백신), APC-8024(HER-2 백신), 항-HER/2neu 이중 특이성 항체, B7.her2IgG3, AS HER2 이작용성 이중 특이성 항체, mAB AR-209, mAB 2B-1 등을 들 수 있다.
항체-약제 접합체로는 항-CD22-MC-MMAF, 항-CD22-MC-MMAE, 항-CD22-MCC-DM1, CR-011-vcMMAE, PSMA-ADC(예를 들어, MEDI3726), MEDI-547, SGN-19Am SGN-35, SGN-75 등을 들 수 있다.
키네신 억제제로는 AZD4877, ARRY-520과 같은 Eg5 억제제; GSK923295A와 같은 CENPE 억제제 등을 들 수 있다.
MEK 억제제로는 트라메티닙(trametinib; GSK1120212), 비니메티닙(binimetinib; MEK162), 셀루메티닙(selumetinib; AZD6244), 코비메티닙(cobimetinib; XL518), ARRY-142886, ARRY-438162, PD-325901, PD-98059 등을 들 수 있다.
BRAF 억제제로는 소라페닙(sorafenib), 베무라페닙(vemurafenib), 다브라페닙(dabrafenib), GDC-0879, LGX818 등을 들 수 있다.
백금 화학 요법제로는 시스플라틴, 엘록사틴®(ELOXATIN®; 옥살리플라틴), 에프타플라틴(eptaplatin), 로바플라틴(lobaplatin), 네다플라틴(nedaplatin), 파라플라틴®(PARAPLATIN®; 카르보플라틴), 사트라플라틴(satraplatin), 피코플라틴(picoplatin) 등을 들 수 있다.
VEGFR 억제제로는 아바스틴(AVASTIN; 베바시주맙(bevacizumab)), ABT-869, AEE-788, 안지오자임TM(ANGIOZYMETM; 혈관신생을 억제하는 리보자임(리보자임 파마수티컬즈(Ribozyme Pharmaceuticals; 콜로라도주 볼더 소재) 및 키론(Chiron; 캘리포니아주 에머리빌 소재), 악시티닙(axitinib; AG-13736), AZD-2171, CP-547,632, IM-862, MACUGEN(페갑타밉(pegaptamib)), 넥사바®(NEXAVAR®; 소라페닙, BAY43-9006), 파조파닙(pazopanib; GW-786034), 바탈라닙(vatalanib; PTK-787, ZK-222584), 수텐트®(SUTENT®; 수니티닙(sunitinib), SU-11248), VEGF 트랩, 자크티마TM(ZACTIMATM; 반데타닙(vandetanib), ZD-6474), GA101, 오파투무맙(ofatumumab), ABT-806(mAb-806), ErbB3 특이성 항체, BSG2 특이성 항체, DLL4 특이성 항체(예를 들어, MEDI0629) 및 C-met 특이성 항체 등을 들 수 있다.
WEE1 억제제로는 AZD1775 등을 들 수 있다.
항종양 항생제로는 삽입성 항생제인 아클라루비신(aclarubicin), 악티노마이신 D, 암루비신(amrubicin), 아나마이신(annamycin), 아드리아마이신(adriamycin), 블레녹산®(BLENOXANE®; 블레노마이신(bleomycin)), 다우노루비신(daunorubicin), 캘릭스®(CAELYX®) 또는 마이오세트®(MYOCET®)(리포좀 독소루비신), 엘사미트루신(elsamitrucin), 에피르부신(epirbucin), 글라루부이신(glarbuicin), 자베도스®(ZAVEDOS®; 이다루비신(idarubicin)), 미토마이신 C, 네모루비신(nemorubicin), 네오카르지노스타틴(neocarzinostatin), 페플로마이신(peplomycin), 피라루비신(pirarubicin), 레베카마이신(rebeccamycin), 스티말라머(stimalamer), 스트렙토조신(streptozocin), 발스타®(VALSTAR®; 발루비신(valrubicin)), 지노스타틴(zinostatin) 등을 들 수 있다.
CHK 키나아제와 같은 DNA 회복 기작의 억제제; DNA-의존형 단백질 키나아제 억제제; 폴리 (ADP-리보오스) 폴리머라아제의 억제제(PARP 억제제)(ABT-888(벨리파립(veliparib)), 올라파립(olaparib), KU-59436, AZD-2281, AG-014699, BSI-201, BGP-15, INO-1001, ONO-2231 등을 포함함); 및 타네스피마이신(tanespimycin) 및 레타스피마이신(retaspimycin)과 같은 Hsp90 억제제.
프로테아좀 억제제로는 벨카데®(VELCADE®; 보르테조밉(bortezomib)), 카리프롤리스(KYPROLIS; 카르필조밉(carfilzomib)), 닌라노(NINLARO; 익사조밉(ixazomib)), MG132, NPI-0052, PR-171 등을 들 수 있다.
면역물질의 예로는 인터페론 및 기타 면역 증강제를 들 수 있다. 인터페론으로는 인터페론 알파, 인터페론 알파-2a, 인터페론 알파-2b, 인터페론 베타, 인터페론 감마-1a, 악티뮨®(ACTIMMUNE®; 인터페론 감마-1b) 또는 인터페론 감마-n1, 이들의 조합 등을 들 수 있다. 기타 약제로는 알파페론®(ALFAFERONE®; IFN-α), BAM-002(산화 글루타티온), 베로뮨®(BEROMUN®; 타소네르민(tasonermin)), 벡사®(BEXXAR®; 토시투모맙(tositumomab)), 캄파스®(CAMPATH®; 알렘투주맙(alemtuzumab)), 데카르바진, 데니류킨(denileukin), 에프라투주맙(epratuzumab), 그라노사이트®(GRANOCYTE®; 레노그라스팀(lenograstim)), 렌티난(lentinan), 백혈구 알파 인터페론, 이미퀴모드(imiquimod), MDX-010(항-CTLA-4), 흑색종 백신, 미투모맙(mitumomab), 몰그라모스팀(molgramostim), 마일로타르그TM(MYLOTARGTM; 젬투주맙 오조가미신(gemtuzumab ozogamicin)), 뉴포겐®(NEUPOGEN®; 필그라스팀(filgrastim)), OncoVAC-CL, 오바렉스®(OVAREX®; 오레고보맙(oregovomab)), 펨투모맙(pemtumomab; Y-muHMFG1), 프로벤지®(PROVENGE®; 시풀류셀-T(sipuleucel-T)), 사르가라모스팀(sargaramostim), 시조필란(sizofilan), 테셀류킨(teceleukin), 테라시스®(THERACYS®; 칼메트-구에린 간균(Bacillus Calmette-Guerin)), 우베니멕스(ubenimex), 비룰리진®(VIRULIZIN®; 면역 요법제, 로러스 파마슈티칼스(Lorus Pharmaceuticals)), Z-100(마루야마의 특이적 물질(SSM)), WF-10(테트라클로로데카옥사이드(TCDO)), 프로류킨®(PROLEUKIN®; 알데스류킨(aldesleukin)), 자닥신®(ZADAXIN®; 티말파신(thymalfasin)), 제나팍스®(ZENAPAX®; 다클리주맙(daclizumab)), 제발린®(ZEVALIN®; 90Y-이브리투모맙 티욱세탄(90Y-Ibritumomab tiuxetan)) 등을 들 수 있다.
피리미딘 유사체로는 시타라빈(ara C 또는 아라비노사이드 C), 시토신 아라비노사이드, 독시플루리딘, 플루다라®(FLUDARA®; 플루다라빈), 5-FU(5-플루오로우라실), 플록스우리딘(floxuridine), 잼자®(젬시타빈), 토무덱스(TOMUDEX; 라티트렉스드(ratitrexed)), 트록사틸TM(TROXATYLTM; 트리아세틸우리딘 트록사시타빈(triacetyluridine troxacitabine)) 등을 들 수 있다.
항유사분열제로는 바타불린(batabulin), 에포틸론 D(epothilone D; KOS-862), N-(2-((4-하이드록시페닐)아미노)피리딘-3-일)-4-메톡시벤젠설폰아미드, 익사베필론(ixabepilone; BMS 247550), 파클리탁셀(paclitaxel), 탁소티어®(TAXOTERE®; 도세탁셀(docetaxel)), PNU100940(109881), 파투필론(patupilone), XRP-9881(라로탁셀(larotaxel)), 빈프루닌(vinflunine), ZK-EPO(합성 에포틸론) 등을 들 수 있다.
게다가, I, II, III 및 IV의 덴드리머는 아브락산TM(ABRAXANETM; ABI-007), ABT-100(파네실 트랜스퍼라아제 억제제), 아드벡신®(ADVEXIN®; Ad5CMV-p53 백신), 알토코®(ALTOCOR®) 또는 메바코®(MEVACOR®)(로바스타틴(lovastatin)), 암프릴겐®(AMPLIGEN®; 폴리 I:폴리 C12U, 합성 RNA), 압토신®(APTOSYN®; 엑시술린드(exisulind)), 아레디아®(AREDIA®; 파미드론산(pamidronic acid)), 아르글라빈(arglabin), L-아스파라기나아제, 아타메스탄(atamestane; 1-메틸-3,17-디온-안드로스타-1,4-디엔), 아바게®(AVAGE®; 타자로텐(tazarotene)), AVE-8062(콤브레아스타틴(combreastatin) 유도체) BEC2(미투모맙), 카켁틴(cachectin) 또는 카켁신(종양 괴사 인자), 칸박신(canvaxin; 백신), 세아박®(CEAVAC®; 암 백신), 셀류크®(CELEUK®; 셀모류킨(celmoleukin)), 세플렌(CEPLENE; 히스타민 이염산염), 세르바릭스®(CERVARIX®; 인간 유두종바이러스 백신), CHOP®(C: 사이톡산®(CYTOXAN®; 사이클로포스파미드); H: 아드리아마이신®(하이드록시독소루비신); O: 빈크리스틴(온코빈®(ONCOVIN®)); P: 프레드니손), 사이팻TM(CYPATTM; 시프로테론 아세테이트(cyproterone acetate)), 콤브레스타틴 A4P(combrestatin A4P), DAB(389)EGF(인간 상피세포 성장 인자에 His-Ala 링커를 통해 융합된 디프테리아 독소의 촉매 및 전위 도메인) 또는 트란스MID-107RTM(디프테리아 독소), 다카르바진(dacarbazine), 닥티노마이신(dactinomycin), 5,6-디메틸크산테논-4-아세트산(DMXAA), 에닐우라실(eniluracil), 에비존TM(EVIZONTM; 스쿠알라민 락테이트(squalamine lactate)), 디메리신®(DIMERICINE®; T4N5 리포솜 로션), 디스코더몰리드(discodermolide), DX-8951f(엑사테칸 메실레이트(exatecan mesylate)), 엔자스타우린(enzastaurin), EPO906(에피틸론 B(epithilone B)), 가다실®(GARDASIL®; 4가 인간 유두종바이러스(6형, 11형, 16형, 18형) 재조합 백신), 가스트리뮨®(GASTRIMMUNE®), 제나센스®, GMK(강글리오시드 접합 백신), GVAX®(전립선암 백신), 할로푸지논(halofuginone), 히스테렐린(histerelin), 하이드록시카르바미드, 이반드론산(ibandronic acid), IGN-101, IL-13-PE38, IL-13-PE38QQR(신트레데킨 베수도톡스(cintredekin besudotox)), IL-13-슈도모나스 외독소, 인터페론-α, 인터페론-γ, 주노반TM(JUNOVANTM) 또는 메팩트TM(MEPACTTM)(미파무르티드(mifamurtide)), 로나파르닙(lonafarnib), 5,10-메틸렌테트라하이드로폴레이트, 밀테포신(miltefosine; 헥사데실포스포콜린), 네오바스탯®(NEOVASTAT®; AE-941), 뉴트렉신®(NEUTREXIN®; 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트), 니펜트®(NIPENT®; 펜토스타틴), 온코나제®(ONCONASE®; 리보뉴클레아제 효소), 온코파지®(ONCOPHAGE®; 흑색종 백신 치료제), 온코백스®(ONCOVAX®; IL-2 백신), 오라테신TM(ORATHECINTM; 루비테칸(rubitecan)), 오시뎀®(OSIDEM®; 항체 기반 세포 약제), 오바렉스®(OVAREX®) MAb(쥐 단클론성 항체), 파클리탁셀, 판디멕스TM(PANDIMEXTM; 20(S)프로토판악사디올(aPPD) 및 20(S)프로토판악사트리올(aPPT)를 포함하는, 인삼 기원의 아글리콘 사포닌), 파니트무맙(panitumumab), 판백크®(PANVAC®-VF(실험용 암 백신), 페가스파가아제(pegaspargase), PEG 인터페론 A, 페녹소디올, 프로카바진(procarbazine), 레비마스타트(rebimastat), 레모밥®(REMOVAB®; 카투막소맙(catumaxomab)), 레브리미드®(REVLIMID®; 레날리도미드(lenalidomide)), RSR13(에파프록시랄(efaproxiral)), 소마툴린®(SOMATULINE® LA(란레오티드(lanreotide)), 소리아탄®(SORIATANE®; 아시트레틴(acitretin)), 스타우로스포린(staurosporine; 스트렙토마이세스 스타우로스포레스(Streptomyces staurospores)), 탈라보스타트(talabostat; PT100), 타르그레틴®(TARGRETIN®; 벡사로텐(bexarotene)), 탁소프렉신®(TAXOPREXIN®; DHA-파클리탁셀), 텔사이타®(TELCYTA®; 칸포스파미드(canfosfamide), TLK286), 테밀리펜(temilifene), 테모다르®(TEMODAR®; 테모졸로마이드), 테스밀리펜(tesmilifene), 탈리도미드(thalidomide), 테라토프®(THERATOPE®; STn-KLH), 티미타크(thymitaq; 2-아미노-3,4-디하이드로-6-메틸-4-옥소-5-(4-피리딜티오)퀴나졸린 이염산염), 티엔페라드TM(TNFERADETM; 아데노벡터: 종양 괴사 인자-α에 대한 유전자를 함유하는 DNA 담체), 트라클리어®(TRACLEER®) 또는 자베스카®(ZAVESCA®)(보센탄(bosentan)), 트레티노인(tretinoin; 레틴-A), 테트란드린(tetrandrine), 트리세녹스®(TRISENOX®; 3산화 비소), 비룰리진®(VIRULIZIN®), 우크라인(ukrain; 큰 애기똥풀 식물 유래의 알칼로이드 유도체), 비탁신(vitaxin; 항-알파-v-베타3 항체), 크사이트린®(XCYTRIN®; 모텍사핀 가돌리니움(motexafin gadolinium)), 신레이TM(XINLAYTM; 아트라센탄(atrasentan)), 지오탁스TM(XYOTAXTM; 파클리탁셀 폴리글루멕스(paclitaxel poliglumex)), 욘델리스®(YONDELIS®; 트라벡테딘(trabectedin)), ZD-6126, 지네카드®(ZINECARD®; 덱스라족산(dexrazoxane)), 조메타®(ZOMETA®; 졸렌드론산(zolendronic acid)), 조루비신(zorubicin) 등과 같은 기타 화학 요법제와 조합될 수 있다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 폐암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, EGFR T790M+ NSCLC를 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, PTEN NSCLC를 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 폐암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 EGFR T790M+ NSCLC를 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 PTEN NSCLC를 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 폐암을 치료하기 위한 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 EGFR T790M+ NSCLC를 치료하기 위한 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 PTEN NSCLC를 치료하기 위한 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 오시메르티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 림프종을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 비호지킨 림프종을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, DLBCL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 활성화된 B-세포 DLBCL(ABC-DLBCL)를 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, BTK-민감성 및 BTK-불감성 DLBCL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, OCI-LY10 DLBCL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, MCL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 백혈병을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, CLL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, AML을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 아칼라브루티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 비호지킨 림프종을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 DLBCL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 활성화된 B-세포 DLBCL(ABC-DLBCL)을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 BTK-민감성 및 BTK-불감성 DLBCL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 OCI-LY10 DLBCL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 MCL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 백혈병을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 CLL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 AML을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 아칼라브루티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 DLBCL을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 활성화된 B-세포 DLBCL(ABC-DLBCL)을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 BTK-민감성 및 BTK-불감성 DLBCL을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 OCI-LY10 DLBCL을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 MCL을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 백혈병을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 CLL을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 AML을 치료하기 위한 아칼라브루티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 아칼라브루티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 림프종을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 비호지킨 림프종을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 I, II, III, IV 또는 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, DLBCL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 활성화된 생식 중심 B-세포 DLBCL(GCB-DLBCL)을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 백혈병을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, CLL을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, AML을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 리툭시맙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 림프종을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 비호지킨 림프종을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 DLBCL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 생식 세포 B-세포 DLBCL(GCB-DLBCL)을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 백혈병을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 CLL을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 AML을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 리툭시맙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 림프종을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 비호지킨을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 DLBCL을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 생식 세포 B-세포 DLBCL(GBC-DLBCL)을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 백혈병을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 CLL을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 AML을 치료하기 위한 리툭시맙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 리툭시맙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머를 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 제피티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 고형 종양을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 제피티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, NSCLC을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 제피티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, EGFR 돌연변이 양성 NSCLC을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 제피티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 종양이 엑손 19 결실 또는 엑손 21(L858R) 치환 돌연변이를 갖는 EGFR 돌연변이 양성 비소세포 폐암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 제피티닙 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 제피티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 제피티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 EGFR 돌연변이 양성 NSCLC을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 제피티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 종양이 엑손 19 결실 또는 엑손 21(L858R) 치환 돌연변이를 갖는 EGFR 돌연변이 양성 비소세포 폐암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 제피티닙을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 제피티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 제피티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 제피티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 제피티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 NSCLC을 치료하기 위한 제피티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 제피티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 EGFR 돌연변이 양성 NSCLC를 치료하기 위한 제피티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 제피티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 s를 치료하기 위한 제피티닙이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 제피티닙 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 고형 종양을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 난소암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, BRCA-돌연변이형 난소암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 상피성 난소암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 나팔관암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 원발성 복막암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 난소암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 BRCA-돌연변이형 난소암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 상피성 난소암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 나팔관암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 원발성 복막암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 난소암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 BRCA-돌연변이형 난소암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 상피성 난소암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 나팔관암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 원발성 복막암을 치료하기 위한 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 올라파립 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 소세포 폐암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 소세포 폐암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) mTOR 억제제 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 소세포 폐암을 치료하기 위한 mTOR 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) mTOR 억제제 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 것을 포함한다. 임의의 상술한 실시형태에서, mTOR 억제제는 AZD2014이다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 비스투세르팁(vistusertib) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 소세포 폐암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 소세포 폐암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 소세포 폐암을 치료하기 위한 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 비스투세르팁 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸(topotecan), 페메트렉시드(pemetrexed), 파클리탁셀, 에토포시드(etoposide) 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 고형 종양을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, NSCLC를 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, SCLC 암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 유방암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 난소암을 치료하는 방법이 개시되어 있으며, 이때 상기 방법은 이를 필요로 하는 개체에게 유효량의 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)과 함께 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 NSCLC를 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 SCLC를 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 유방암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 난소암을 치료하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 ii) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 암을 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 고형 종양을 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 NSCLC를 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 SCLC를 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 유방암을 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시형태에서, 개체에서 난소암을 치료하기 위한 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴)이 개시되어 있으며, 이때 상기 치료는 상기 개체에게 i) 화학 요법(예를 들어, 토포테칸, 페메트렉시드, 파클리탁셀, 에토포시드 및/또는 카르보플라틴) 및 ii) 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여하는 단계를 포함한다.
하나의 양태에서, Bcl-2 및/또는 Bcl-XL의 억제를 필요로 하는 개체에서 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제하기 위한 방법이 개시되어 있으며, 상기 방법은 개체에게 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
하나의 양태에서, Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제하는데 사용하기 위한 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다.
하나의 양태에서, Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제하기 위한 약물의 제조에 있어서 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도가 개시되어 있다.
하나의 양태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는, Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제하는데 사용하기 위한 약학 조성물이 개시되어 있다.
"Bcl-2"란 용어는 B-세포 림프종 2를 지칭하고, "Bcl-XL"이란 용어는 BCL-2 단백질 패밀리의 항-세포자멸성 멤버인 특대 B-세포 림프종을 지칭한다.
"유효량"이란 표현은 개체에서의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL 또는 암과 관련된 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제; 암 증상의 개선; 또는 암 진행의 감속 또는 지연을 유발할 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 제2 항암제의 양을 포함한다. 일부 실시형태에서, "유효량"이란 표현은, 개체에 투여되는 경우에 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제하거나 암을 적어도 부분적으로 완화, 억제 및/또는 개선시키는데 효과적이고/이거나 개체에서 종양의 성장 또는 암세포의 증식을 감소 또는 억제하는데 효과적인 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 제2 항암제의 양을 포함한다.
일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 1 ㎎/㎏과 약 500 ㎎/㎏ 사이일 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 10 ㎎/㎏과 약 300 ㎎/㎏ 사이일 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 10 ㎎/㎏과 약 100 ㎎/㎏ 사이일 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 10 ㎎/㎏과 약 60 ㎎/㎏ 사이일 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 10 ㎎/㎏과 약 30 ㎎/㎏ 사이일 수 있다. 일부 실시형태에서, I, II, III, IV 또는 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 20 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏일 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량은 약 10 ㎎/㎏, 약 30 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏, 약 60 ㎎/㎏, 약 70 ㎎/㎏, 약 80 ㎎/㎏, 약 90 ㎎/㎏, 약 100 ㎎/㎏, 약 300 ㎎/㎏ 또는 약 145 ㎎/㎏일 수 있다.
화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 덴드리머의 표면 작용기로부터 활성제를 방출하도록 설계될 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 유효량의 화합물 A를 방출한다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 1 ㎎/㎏과 약 150 ㎎/㎏ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 1 ㎎/㎏과 약 90 ㎎/㎏ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 1 ㎎/㎏과 약 25 ㎎/㎏ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 1 ㎎/㎏과 약 15 ㎎/㎏ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 1 ㎎과 약 10 ㎎ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 5 ㎎/㎏과 약 30 ㎎/㎏ 사이의 화합물 A를 방출할 수 있다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III, 화학식 IV 또는 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 약 3 ㎎/㎏, 약 4 ㎎/㎏, 약 5 ㎎/㎏, 약 6 ㎎/㎏, 약 7 ㎎/㎏, 약 8 ㎎/㎏, 약 9 ㎎/㎏, 약 10 ㎎/㎏, 약 11 ㎎/㎏, 약 12 ㎎/㎏, 약 13 ㎎/㎏, 약 14 ㎎/㎏, 약 15 ㎎/㎏, 약 16 ㎎/㎏, 약 17 ㎎/㎏, 약 18 ㎎/㎏, 약 19 ㎎/㎏, 약 20 ㎎/㎏, 약 21 ㎎/㎏, 약 22 ㎎/㎏, 약 23 ㎎/㎏, 약 24 ㎎/㎏, 약 25 ㎎/㎏, 약 26 ㎎/㎏, 약 27 ㎎/㎏, 약 28 ㎎/㎏, 약 29 ㎎/㎏, 약 87 ㎎/㎏ 또는 약 145 ㎎/㎏의 화합물 A을 방출할 수 있다.
일부 실시형태에서, 화합물 A는 약 1시간과 약 360시간 사이의 방출 반감기(예를 들어, 화합물 A의 절반이 덴드리머로부터 방출되는데 걸리는 시간)를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물 A는 약 2시간과 약 72시간 사이의 방출 반감기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물 A는 약 5시간과 약 36시간 사이의 방출 반감기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물 A는 약 12시간과 약 30시간 사이의 방출 반감기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 화합물 A는 약 16시간과 약 30시간 사이의 방출 반감기를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 방출 반감기는 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 측정된다. 일부 실시형태에서, 방출 반감기는 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 측정된다. 당업자라면 실시예 11, 실시예 12 및 실시예 14에 개시된 프로토콜을 따라서 시험관 내에서 화합물 A의 방출 속도를 측정할 수 있다.
일부 실시형태에서, 시험관 내 방출 반감기는, 실시예 11에 기술되어 있는 바와 같이, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 측정된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6시간 후에 약 20%와 약 80% 사이의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6.5시간 후에 약 80%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6.5시간 후에 약 50%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6.5시간 후에 약 6%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6.5시간 후에 약 4%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서 약 6시간 후에 약 24%의 화합물 A가 방출된다.
일부 실시형태에서, 시험관 내 방출 반감기는, 실시예 12에 기술되어 있는 바와 같이, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 측정된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 약 7일 후에 약 3%와 약 80% 사이의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 약 7일 후에 약 63%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 약 7일 후에 약 30%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 약 7일 후에 약 3.6%의 화합물 A가 방출된다. 일부 실시형태에서, 37 ℃에서 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서 약 7일 후에 약 81%의 화합물 A가 방출된다.
일부 실시형태에서, 덴드리머의 용해성은 실시예 15 및 실시예 16에 개시된 프로토콜에 따라서 측정될 수 있다. 일부 실시형태에서, 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서의 덴드리머의 용해성은 약 120 ㎎/㎖와 160 ㎎/㎖ 사이이다. 일부 실시형태에서, 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서의 덴드리머의 용해성은 약 125 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서의 덴드리머의 용해성은 약 153 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서의 덴드리머의 용해성은 약 142 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 10% DMA를 갖는 PBS 완충제 중의 pH 7.4에서의 덴드리머의 용해성은 약 158 ㎎/㎖이다.
일부 실시형태에서, 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성은 약 120 ㎎/㎖와 166 ㎎/㎖ 사이이다. 일부 실시형태에서, 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성은 약 162 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성은 약 141 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성은 약 157 ㎎/㎖이다. 일부 실시형태에서, 0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성은 약 121 ㎎/㎖이다.
일부 실시형태에서, McIlvane 완충제(pH 4) 중의 덴드리머의 용해성은 약 0.189 g/g이다. 일부 실시형태에서, McIlvane 완충제(pH 5) 중의 덴드리머의 용해성은 약 0.224 g/g이다.
"개체"란 용어는 온혈 포유동물, 예를 들어 영장류, 개, 고양이, 토끼, 래트 및 마우스를 포함한다. 일부 실시형태에서, 개체는 영장류, 예를 들어 인간이다. 일부 실시형태에서, 개체는 암 또는 면역 질환을 앓고 있다. 일부 실시형태에서, 개체는 치료를 필요로 한다(예를 들어, 개체는 치료로부터 생물학적 또는 의학적으로 도움을 받을 수 있음). 일부 실시형태에서, 개체는 암을 앓고 있다. 일부 실시형태에서, 개체는 EGFR-M 양성 암(예를 들어, 비소세포 폐암)을 앓고 있다. 일부 실시형태에서, EGFR-M 양성 암은 주로 T790M 양성 돌연변이를 갖는다. 일부 실시형태에서, EGFR-M 양성 암은 주로 T790M 음성 돌연변이를 갖는다. 일부 실시형태에서, 개체는 혈액성(예를 들어, 림프종, 백혈병) 또는 고형 악성 종양, 예를 들어 급성 림프모구성 림프종(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소형 림프구성 림프종(SLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 단핵구성 백혈병(AMoL), 다발성 골수종, 외투 세포 림프종, 미만성 대형 B-세포 림프종(DLBCL), 버키트 림프종, 비호지킨 림프종, 소포성 림프종 및 고형 종양, 예를 들어, 비소세포 폐암(NSCLC), 소세포 폐암(SCLC), 유방암, 신경아세포종, 전립선암, 흑색종, 췌장암, 자궁암, 내장암 및 대장암을 앓고 있다
"억제하기", "억제" 또는 "억제하는"이란 표현은 생물학적 활성 또는 과정의 기준선 활성의 감소를 포함한다. 일부 실시형태에서, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III 또는 화학식 IV의 덴드리머는 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL을 억제한다.
"치료하기", "치료하는" 및 "치료"란 표현은 개체에서의 Bcl-2 및/또는 Bcl-XL 또는 암과 관련된 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 개체에서의 암의 하나 이상의 증상의 개선, 또는 개체에서의 암의 진행의 감속 또는 지연을 포함한다. 또한 "치료하기", "치료하는" 및 "치료"란 표현은 개체에서의 종양의 성장 또는 암세포의 증식의 감소 또는 억제를 포함한다.
실시예
본 개시내용의 양태는 본 개시내용의 특정 화합물 및 중간체의 제조 및 본 개시내용의 화합물을 이용하는 방법을 상세하게 설명하는 하기 비제한적인 실시예를 참고하여 추가로 한정될 수 있다. 본 개시내용의 범주에서 벗어나지 않는 한, 재료 및 방법 둘 모두에 대한 다양한 변경이 실시될 수 있다는 것이 당업자에게 자명할 것이다.
달리 언급하지 않는 한:
(i) 모든 합성은 달리 언급하지 않는 한 주위 온도, 즉 17 ℃ 내지 25 ℃의 온도에서 질소와 같은 불활성 기체의 분위기 하에 수행되었고;
(ii) 증발은 뷰키(Buchi) 또는 하이돌프(Heidolph) 장비를 이용하여 감압 하에 회전 증발에 의해 수행되었고;
(iii) 동결 건조는 랩콘코 프리존 6 플러스(Labconco FreeZone 6 Plus) 냉동 건조 시스템을 이용하여 수행되었고;
(iv) 크기 배제 크로마토그래피 정제는 세파덱스 LH-20 비드로 채워진 칼럼을 이용하여 실시되었고;
(v) 분취 크로마토그래피는 워터스 엑스브리지(Waters XBridge) BEH C18(5 μM, 30 ㎜ x 150 ㎜) 칼럼을 이용하여 UV-개시 수집 기능이 있는 길슨 프렙(Gilson Prep) GX-271 시스템 상에서 실시되었고;
(vi) 한외여과 정제는 막 카세트에 연결된 콜-파머(Cole-Parmer) 기어 펌프 구동 시스템(메르크 밀리포어 펠리콘(Merck Millipore Pellicon) 3, 0.11 m2, 10 kDa)을 이용하여 실시되었고;
(vii) 분석용 크로마토그래피는 PDA 검출 기능이 있는 워터스 얼라이언스(Waters Alliance) 2695 분리 모듈 상에서 실시되었고;
(viii) 수율이 존재하는 경우에 이는 반드시 수득 가능한 최대치가 아니고;
(ix) 일반적으로, 덴드리머의 최종 산물의 구조는 NMR 분광법에 의해 확인되었으며; 1H 및 19F NMR 화학적 이동값(chemical shift value)은 델타 스케일로 측정되었고[양자 자기 공명 스펙트럼은 브루커 아반스(Bruker Avance) 300(300 MHz) 장비를 이용하여 측정되었음]; 측정은, 달리 명시하지 않는 한, 주위 온도에서 실시되었고; 1H NMR에서는 내부 표준으로서 용매 잔류 피크를 이용하고, 하기 약어가 사용된다: s: 단일선(singlet); d: 이중선(doublet); t: 삼중선(triplet); m: 다중선(multiplet); dd: 이중선들 중의 이중선; ddd: 이중선 중의 이중선 중의 이중선; dt: 삼중선 중의 이중선; br s: 넓은 단일선;
(x) 일반적으로, 덴드리머 최종 산물은 또한 워터스 엑스브리지 C8(3.5 ㎛, 3 x 100 ㎜) 또는 페노메넥스 에리스(Phenomenex Aeris) C8(3.6 ㎛, 2.1 x 100 ㎜) 칼럼에 연결된, PDA 검출 기능이 있는 워터스 얼라이언스 2695 분리 모듈을 이용하여 HPLC에 의해 특성 분석하였고;
(xi) 중간체 순도는 액체 크로마토그래피(LC-MS) 이후 질량 분광법에 의해 평가되었으며; 1.50분(출발 조건으로 되돌아가서 평형 등이 되는 총 실행 시간: 1.70분) 동안에 97% A + 3% B 내지 3% A + 97% B의 용매 시스템(여기서, A는 수중의 0.1% 포름산 또는 0.05% 트리플루오로아세트산(산성 작업용) 또는 수중의 0.1% 수산화암모늄(염기성 작업용)이고 B는 아세토니트릴임)을 이용하여 1 ㎖/분의 유속으로 워터스 SQ 질량 분광계(칼럼 온도: 40 ℃, UV: 220~300 ㎚ 또는 190~400 ㎚, 질량 분석: 양성/음성 스위칭에 의한 ESI)가 구비된 워터스 UPLC를 이용하여 평가되었다. 산성 분석을 위해 사용된 칼럼은 워터스 애퀴티(Waters Acquity) HSS T3(1.8 ㎛, 2.1 x 50 ㎜)이고, 염기성 분석을 위해 사용된 칼럼은 워터스 애퀴티 BEH C18(1.7 ㎛, 2.1 x 50 ㎜)이었다. 대안적으로, UPLC는 1.5분(출발 조건으로 되돌아가서 평형이 되는 총 실행 시간: 2분) 동안에 2% 내지 98% B의 용매 구배(여기서, A는 수중의 0.1% 포름산이고 B는 아세토니트릴 중의 0.1% 포름산이거나(산성 작업용), A는 수중의 0.1% 수산화암모늄이고 B는 아세토니트릴임(염기성 작업용))을 이용하여 1 ㎖/분의 유속으로 워터스 SQ 질량 분광계(칼럼 온도: 30 ℃, UV: 210~400 ㎚, 질량 분석: 양성/음성 스위칭에 의한 ESI)가 구비된 워터스 UPLC를 사용하여 실시되었다. 산성 분석을 위해 사용된 칼럼은 워터스 애퀴티 HSS T3(1.8 ㎛, 2.1 x 30 ㎜)이고, 염기성 분석을 위해 사용된 칼럼은 워터스 애퀴티 BEH C18(1.7 ㎛, 2.1 x 30 ㎜)이었으며; 보고된 분자 이온은 달리 명시하지 않는 한 [M+H]+에 상응하고; 다중 동위원소 패턴을 갖는 분자(Br, Cl 등)에 대해 보고된 값은 달리 명시하지 않는 한 최고 강도로 수득되는 것이다.
(xii) 하기 약어가 사용되고 있다:
ACN 아세토니트릴
BHA 벤즈하이드릴아민
BOC tert-부틸옥시카르보닐
CoA 분석 증명서
DGA 디글리콜산
DIPEA 디이소프로필에틸아민
DMF 디메틸포름아미드
DMSO 디메틸설폭시드
FBA 4-플루오로벤조산
Glu 글루타르산
HP-β-CD 하이드록시프로필-베타-사이클로덱스트린
MeOH 메탄올
MIDA 메틸이미노디아세트산
MSA 메탄설폰산
MTBE 메틸 tert-부틸 에테르
MW 분자량
NMM N-메틸모르폴린
PBS 인산염 완충 식염수
PEG 폴리에틸렌글리콜
PTFE 폴리테트라플루오로에틸렌
PyBOP 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트
QS/qs 충분한 양(요구되는 양)
SBE-β-CD 설포부틸 에테르 베타-사이클로덱스트린(캡티솔®)
TDA 티오디글리콜산
TFA 트리플루오로아세트산
WFI 주사용수
실시예에서 사용되는 바와 같이, "BHALys"란 용어는 리신에 연결되어 있는 2,6-디아미노-N-벤즈하이드릴헥산아미드를 지칭한다. BHA는 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00057
(상기 식에서, *는 리신 구성 블록에 대한 공유 부착을 나타냄). "Lys"란 용어는 덴드리머의 구성 단위를 지칭하고, 하기 구조를 갖는다:
Figure pct00058
(상기 식에서, #은 BHALys의 아민 모이어티 또는 Lys 구성 단위의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 Lys 구성 단위의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 활성제에 부착된 링커 또는 PEG에 대한 공유 부착을 나타냄).
편의상, 실시예의 덴드리머 내의 구성 단위의 표면 세대만이 덴드리머의 명칭에 포함된다. 게다가, 명칭 내의 ‡란 부호는 PEG에 대한 접합에 이용 가능한 ε-아미노기의 이론적 개수를 지칭하고, 명칭 내의 †란 부호는 활성제에 부착된 링커에 대한 접합에 이용 가능한 덴드리머 상의 α-아미노기의 이론적 개수를 지칭한다. 한 예로서, "BHALys[Lys]32†[α-TDA-화합물 A]32[ε-PEG2100,2200]32‡"이란 명칭은 BHALys 코어, 표면층(제5 층) 내의 Lys 구성 단위, 티오디아세트산 링커를 갖는 Lys 표면 구성 단위의 α-아미노기에 접합된 대략 32개의 화합물 A, Lys 표면 구성 단위의 ε-아미노기에 접합된 2,100과 2,200 사이의 평균 분자량을 갖는 대략 32 PEG 기를 갖는 5세대 덴드리머를 지칭한다.
실시예 1: 4-(4-((R)-(4'-클로로비페닐-2-일)(하이드록시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(4-((R)-4-((2-하이드록시에틸)(메틸)아미노)-1-(페닐티오)부탄-2-일아미노)-3-(트리플루오로메틸설포닐)페닐설포닐)벤즈아미드(화합물 A)의 물리 화학적 물성
[화합물 A]
Figure pct00059
화합물 A의 합성은 미국 특허 제9,018,381호에 나타나 있다.
화합물 A(형태 B)의 제조
DMSO(450 ㎖) 및 에탄올(2250 ㎖) 중의 조 화합물 A(900 g)의 현탁액을 용액이 얻어질 때까지 50 ℃에서 교반하였다. 용액을 인라인 필터를 통과시키고, 60 ℃까지 가열하였다. 용액에 에탄올 반용매(2,700 ㎖)를 35분 동안 첨가하였다. 일단 첨가가 완료되면, 용액을 50 ℃까지 냉각시키고, 화합물 A의 형태 B(18 g)로 접종하고, 50 ℃에서 18시간 동안 진탕하였다. 이어서, 배치를 선형 램프(linear ramp) 상에서 17.5시간 동안 20 ℃까지 냉각시키고, 추가의 4.5시간 동안 20 ℃로 유지하였다. 얻어진 고체를 여과에 의해 수집하고, 에탄올(1,350 ㎖ 및 1,350 ㎖)로 2회 나눠 세척하였다. 얻어진 고체를 오븐(40 ℃, 5 mbar)에서 건조하여 화합물 A의 형태 B(764 g, 81.49%의 수율)를 얻었다. 화합물 A의 형태 B에 대한 XRPD 회절도는 도 2에 제공되어 있다.
용해성
화합물 A는 표 1에 나타나 있는 데이터로 예시된 바와 같이 매우 낮은 수용성을 갖는다. 용해성은 pH 4~9의 생리 pH 범위 전반에서 낮다. 형태 B는 현재까지 발견된 화합물 A의 가장 안정된 결정 형태이고, 이러한 형태는 빈약한 습윤 및 용해 특징을 갖는다. 용해 속도론(dissolution kinetics)이 개선된 염을 찾을 목적으로 염 스크리닝(salt screening)을 착수하였지만, 결정성 염 형태는 확인되지 않았다.
물 및 프로필렌글리콜 중에서 화합물 A(형태 B)의 용해성을 측정하였다. 원료 의약품이 실온에서 24시간 동안 평형화하도록 하는 진탕 플라스크 방법을 이용하여 용해성을 측정하였으며, 이때 바이알에서의 일부 침전은 과량의 원료 의약품의 존재를 나타낸다. 초원심 분리기를 이용하여 30분 동안 40,000 rpm으로 용액을 원심 분리하였으며, 상층액을 새로운 원심 분리관으로 옮기고, 추가의 30분 동안 40,000 rpm으로 원심 분리하였다. 이어서, UV-HPLC 방법을 이용하여 프로필렌글리콜 상층액을 평가하였다. 물 상층액은 검정 이전에 3번째 초원심 분리하였다. 그 결과는 표 1에 기재되어 있다.
[표 1]
Figure pct00060
로그 D
옥탄올/물 진탕 플라스크 원리를 이용하여 화합물 A의 친유성(로그 D)을 측정하였다. 사용된 수용액은 pH가 7.4로 조절된 10 mM 인산나트륨 완충제이다. 옥탄올은 유기 분리층으로서 사용되었다. 상기 방법에서는 -2 내지 5.0 범위의 로그 D가 입증되었다. 화합물 A에 대해 측정된 로그 D 값은 3.5 초과이며, 이는 고도로 친유성인 분자임을 나타낸다.
Caco-2 투과성
Caco-2 세포주는 인간 결장 선암종에서 유래한다. 통상적인 세포 배양 조건 하에서의 접종, 분화 및 치밀한 세포 단층(다공성 폴리카보네이트 막 상)의 형성은 Caco-2 세포가 창자(흡수) 장세포의 것과 닮도록 한다. Caco-2 세포는 인간 다중 약제 내성 1(hMDR1), 인간 다중 약제 내성 연관 단백질 2(hMRP2) 및 인간 유방암 내성 단백질(hBCRP)을 포함하는 광범위한 유출 수송체를 발현한다. Caco-2 세포는 새로운 화학물의 투과성 및 유출을 평가하기 위해 96-웰 포맷에서 사용된다. 데이터는 통상의 LC-MS/MS를 통해 생성되지만, 어떠한 값도 보고된 바 없다. 화합물 A의 용해성의 제한으로 인해 회복이 낮을 가능성이 있다.
혈장 단백질 결합:
평형 투석 RED 장치 방법(문헌[Waters NJ et al., Validation of a Rapid Equilibrium Dialysis Approach for the Measurement of Plasma Protein Binding, Journal of Pharmaceutical Sciences; 2008; Volume 97; Issue 10; Pages 4586~4595, 2008])을 이용하여 수컷 CD-1 마우스, 수컷 한-위스터(Han Wistar) 래트, 암컷 뉴질랜드 흰토끼, 수컷 비글견 및 남성 인간에서 수득된 혼주 냉동 혈장에서 화합물 A(DMSO 저장 용액으로서 제조되고 0.1, 1, 10 및 100 μmol/ℓ의 공칭 배양 농도에서 혈장 내로 스파이킹(spiking)됨)의 단백질 결합을 3회 평가하였다. 37 ℃에서 30시간의 평형 시간 동안 배양을 실시하였다. HPLC-MS/MS에 의해 샘플 분석을 실시하고, 하기 생분석 방법을 이용하여 [13C, 2H7] 화합물 A 내부 표준물질을 사용하였다:
LC-MS/MS 장치
UHPLC: 시마츠(Shimadzu) CC-30A
MS/MS 장비: API 4000(에이비사이엑스(AB Sciex), 미국).
LC-MS/MS 조건
1. 크로마토그래피 조건
칼럼: 페노메넥스 키네텍스(Phenomenex Kinetex) 1.7 μ C18(2.1 ㎜ x 30 ㎜)
이동상: 아세토니트릴 중의 0.1% 포름산(B) 및 물 중의 0.1% 포름산(A)
[표 2]
Figure pct00061
질량 조건
이온 공급원: 터보 분무액(Turbo spray)
이온화 방식: ESI
주사 유형: MRM
기타 매개변수
[표 3]
Figure pct00062
마우스, 토끼 및 인간에서 결합하지 않은 화합물 A의 비율(%)은 100 μmol/ℓ의 화합물 A의 농도에서 각각 0.00235%, 0.00153% 및 0.00196%인 것으로 밝혀져 있다. 래트 및 개 혈장 내의 결합하지 않은 화합물 A의 비율(%)은 100 μmol/ℓ의 화합물 A의 농도에서 0.001% 미만이면서도 검출 가능한 수준의 화합물 A가 완충제 구성성분 내에서 관찰되었지만, 이들은 정량화할 수 없었다(1 nmol/ℓ 미만). 0.1 μmol/ℓ, 1 μmol/ℓ 및 10 μmol/ℓ의 화합물 A의 농도에서 결합하지 않은 화합물 A의 비율(%)은 완충제 구성성분 내의 농도가 정량화할 수 없기(1 nmol/ℓ 미만) 때문에 어떠한 종에서도 측정할 수 없었다. 이러한 데이터에 따르면 화합물 A가 마우스, 래트, 토끼, 개 및 인간 혈장 단백질에 대한 결합이 매우 높다는 것을 보여준다.
실시예 2: 화합물 A 제형의 제조
제조된 제형의 조성은 표 4(10 ㎖의 규모) 및 표 5(보다 큰 규모: 500 ㎖ 및 1,200 ㎖의 규모)에 나타나 있다. 도시된 농도는 각각의 제형에서의 화합물 A의 농도이다.
[표 4]
Figure pct00063
30% w/v HP-β-CD 제형(실시예 3에서 "비히클 1"로서 사용됨)에 대한 제조 방법
30% w/v HP-β-CD 비히클을 제조하였다. 3 g의 HP-β-CD(로퀘트 클렙토스(Roquette Kleptose), 비경구용 등급)의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣고, 8 ㎖의 WFI를 첨가하고, 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 일단 용해되면, WFI를 사용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들었다.
적당량의 화합물 A의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣었다. 이어서, 8 ㎖의 30% w/v HP-β-CD 비히클을 첨가하고, 제형을 교반하였다. pH가 약 2까지 감소할 때까지 1 M MSA를 적가하였다. 이어서, 화합물이 완전히 용해될 때까지 제형을 교반하였다. pH를 측정하고, 1 M MSA 또는 NaOH를 사용하여 적가함으로써 pH 4로 조절하였다. 이어서, 제형을 교반하여 투명한 용액(헤이즈(haze) 가능성이 있음)이 수득되었다는 것을 확인하였다. 이어서, 30% w/v HP-β-CD 비히클을 이용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들고, 이를 교반하였다. 최종 pH를 측정하고 기록하였으며, 투여 이전에 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다. 기타 제형 강도는 적당량의 30% w/v HP-β-CD 비히클로 30% w/v HP-β-CD 중의 화합물 A를 희석함으로써 준비하였다.
10.6% w/v 캡티솔 제형(실시예 3에서 "비히클 2"로서 사용됨)에 대한 제조 방법
20% w/v 캡티솔 비히클을 제조하였다. 2 g의 캡티솔(연구용 등급, 리간드)의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣고, 8 ㎖의 WFI를 첨가하고, 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 일단 용해되면, WFI를 사용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들었다. 7.5% w/v 캡티솔 비히클은 WFI를 사용하여 20% w/v 캡티솔 비히클을 3.75 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 제조하였다. 10.0% w/v 캡티솔 비히클은 WFI를 사용하여 20% w/v 캡티솔 비히클을 5 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 제조하였다.
20% w/v 캡티솔 중의 4 ㎎/㎖의 화합물 A의 저장 용액(pH 9)을 제조하였다. 0.04 g의 화합물 A의 무게를 측정하여 용량 플라스크에 넣었다. 이어서, 8 ㎖의 20% w/v 캡티솔 비히클을 첨가하고, 제형을 교반하였다. 적절한 부피의 1 M 메글루민을 첨가하였다. 이어서, 화합물이 완전히 용해될 때까지 제형을 교반하였다. 이어서, pH를 측정하고, 1 M HCl를 사용하여 적가함으로써 pH 9로 조절하였다. 이어서, 20% w/v 캡티솔 비히클을 이용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들고, 이를 교반하였다. 최종 pH를 측정하고 기록하였으며, 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다.
10.6% w/v 캡티솔 제형 중의 1 ㎎/㎖의 화합물 A(실시예 3에서 사용된 바와 같음)는 7.5% w/v 캡티솔 비히클을 이용하여 20% w/v 캡티솔 중의 4 ㎎/㎖의 화합물 A의 저장 용액을 희석함으로써 제조하였다.
0.5% w/v 트윈 80 제형(실시예 3에서 "비히클 3"으로서 사용됨)에 대한 제조 방법
5% w/v 트윈 80 비히클을 제조하였다. 0.5 g의 트윈 80(초정제됨; 피셔 사이언티픽(Fischer Scientific))의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣었으며, 8 ㎖의 WFI를 첨가하고, 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 일단 용해되면, WFI를 사용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들었다. 0.5% w/v 트윈 80 비히클은 식염수를 사용하여 5% w/v 트윈 비히클을 1 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 제조하였다.
5% w/v 트윈 80 중의 10 ㎎/㎖의 화합물 A의 저장 용액(pH 9)을 제조하였다. 0.1 g의 화합물 A의 무게를 측정하여 용량 플라스크에 넣었다. 이어서, 8 ㎖의 5% w/v 트윈 80 비히클을 첨가하고, 제형을 교반하였다. 적절한 부피의 1 M 메글루민을 첨가하였다. 이어서, 화합물이 완전히 용해될 때까지 제형을 교반하였다. 이어서, pH를 측정하고, 1 M HCl을 사용하여 적가함으로써 pH 9로 조절하였다. 이어서, 5% w/v 트윈 80 비히클을 이용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들고, 이를 교반하였다. 최종 pH를 측정하고 기록하였으며, 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다.
0.5% w/v 트윈 제형 중의 1 ㎎/㎖의 화합물 A는 식염수를 사용하여 5% w/v 트윈 중의 10 ㎎/㎖의 화합물 A의 저장 용액을 1 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 제조하였다. 0.5% w/v 트윈 중의 0.4 ㎎/㎖의 화합물 A의 제조는 0.5% w/v 트윈 80 비히클을 사용하여 0.5% w/v 트윈 제형 중의 1 ㎎/㎖의 화합물 A를 4 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 이루어졌다.
5% w/v 크레모포어 EL 제형(실시예 3에서 "비히클 4"로서 사용됨)에 대한 제조 방법
20% w/v 크레모포어 비히클을 제조하였다. 2 g의 크레모포어 EL(콜리포어(Kolliphor) EL®, 바스프(BASF))(점성 액체)의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣었다. 이어서, 5 ㎖의 WFI를 첨가하고 초음파 처리하거나, 교반하여 용해하였다. 일단 용해되면, WFI를 사용하여 부피를 상기 부피가 되게 만들었다.
0.02 g의 화합물 A의 무게를 측정하여 10 ㎖ 용량 플라스크에 넣었다. 0.5 ㎖의 에탄올, 1.5 ㎖의 PEG 400(피셔 사이언티픽) 및 0.024 ㎖의 1 M MSA를 첨가하였다. 이어서, 약제가 완전히 용해될 때까지 제형을 교반하였다. pH를 측정하고, 필요하면 진한 1 M NaOH 또는 1 M MSA를 사용하여 pH 4.0로 조절하였다. 2.5 ㎖의 20% w/v 크레모포어 비히클을 첨가한 후, WFI를 사용하여 부피를 10 ㎖가 되게 만들어 투명한 용액을 제조하였다. 투여 이전에 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다.
10.2% w/v 캡티솔 제형에 대한 제조 방법
10.2% w/v 캡티솔 중의 0.4 ㎎/㎖의 화합물 A의 제조는 10.0% w/v 캡티솔 비히클을 사용하여 10.6% w/v 캡티솔 제형 중의 1 ㎎/㎖의 화합물 A(제조 방법은 이전 단락 참조)를 4 ㎖에서 10 ㎖이 될 때까지 희석함으로써 이루어졌다.
[표 5]
Figure pct00064
28% w/v HP-β-CD 제형에 대한 제조 방법
제조는 무균실에서 수행되었으며, 깨끗하고 멸균된 장비를 사용하였다. 28% w/v HP-β-CD 비히클을 제조하였다. 145.60 g의 HP-β-CD의 무게를 측정하여 2 ℓ 비이커에 넣었으며, 412.88 g의 WFI를 첨가하고, HP-β-CD가 완전히 용해될 때까지 교반하였다.
279.2 g의 28% w/v HP-β-CD를 1 ℓ 비이커에 첨가하였다. 그 후, 5.689 g의 1 M 메글루민을 교반하면서 첨가한 후, 2.50 g의 화합물 A를 교반하면서 첨가하였다. 현탁액을 30분 동안 균질화하였다. 이어서, 균질기 헤드를 28% w/v HP-β-CD 로 세척하였으며, 세척액을 1 ℓ 비이커에 첨가하여 최종 표적 부피의 약 95%를 달성하였다. 현탁액을 빛으로부터 보호하고, 하룻밤 동안 교반하였으며, 그 결과 황색의 약간 흐릿한 용액이 얻어졌다. 1 M 메글루민을 이용하여 흐릿한 용액의 pH를 9.5로 조절하고, 28% w/v HP-β-CD 비히클을 이용하여 표적 부피가 되게 만들었으며, 이를 30분 동안 교반하였다. 최종 pH를 측정하고 기록하였으며, 깨끗하고 멸균된 바이알(마개로 막아 크림핑(crimping)됨)에 충전하기 전에 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다.
14% w/v 캡티솔 제형에 대한 제조 방법
제조는 무균실에서 수행되었으며, 깨끗하고 멸균된 장비를 사용하였다. 먼저, 화합물 A의 용해에 도움이 되도록 진한 42% w/v 캡티솔 비히클을 제조하였다. (제조 이후, WFI로 제형을 희석하여 14% w/v 캡티솔의 최종 제형을 제조하였다.) 579.86 g의 WFI의 무게를 측정하여 3 ℓ 비이커에 넣고, 352.94 g의 캡티솔을 교반하면서 첨가한 후, 캡티솔이 완전히 용해될 때까지 혼합물을 대형 볼텍스(vortex)에 의해 교반하였다.
233.2 g의 42% w/v 캡티솔을 600 ㎖ 비이커에 첨가하였다. 그 후, 1.365 g의 1 M 메글루민을 교반하면서 첨가한 후, 0.60 g의 화합물 A를 교반하면서 첨가하였다. 현탁액을 30분 동안 균질화하였으며, 그 결과 황색의 약간 흐릿한 용액이 얻어졌다. 42% w/v 캡티솔로 균질기 헤드를 세척하였다. 균질화된 용액 및 세척액을 2 ℓ 비이커로 옮기고, 42% w/v 캡티솔을 이용하여 총 부피가 400 ㎖가 되게 만들었다. 용액을 빛으로부터 보호하고, 하룻밤 동안 교반하였다. 740 g의 WFI를 사용하여 약간 흐릿한 용액을 최종 표적 부피의 약 95%가 될 때까지 희석하였으며, 이를 30분 동안 교반하였다. 1 M 메글루민을 이용하여 용액의 pH를 9.5로 조절하고, WFI를 이용하여 표적 부피가 되게 만들었으며, 이를 30분 동안 교반하였다. 최종 pH를 측정하고 기록하였으며, 깨끗하고 멸균된 바이알(마개로 막아 크림핑됨)에 충전하기 전에 0.22 μM 필터를 통해 제형을 여과하였다.
캡티솔 및 HP-β-CD 제형의 안정성
0.5 ㎎/㎖의 화합물 A/14% w/v 캡티솔 제형 및 5.0 ㎎/㎖의 화합물 A/28% w/v HP-β-CD 제형의 물리적 안정성을 평가하였다. 육안으로 간신히 보이는 매우 소량의 침전물이 주위 온도에서 저장 24시간 이내에 각 제형에서 형성되었다. 캡티솔 기반 제형에 있어서, 제형 시스템이 불안정하게 되면(예를 들어, 여과되면) 침전물이 빠르게 형성하지만, 6개월 동안 5 ℃ 및 25 ℃에서 제형을 저장하는 경우에 계속해서 빠른 속도로 성장하지 않는다는 것이 알려져 있다.
화학적 안정성 데이터에 따르면 캡티솔 기반 제형은 임상 연구를 위한 허용 가능한 보관 수명(6개월 초과)을 제공하기 위해 5 ℃에 저장되거나 냉동되어야 하는 것을 보여준다.
수성 비히클 중의 화합물 A의 낮은 용해성으로 인해, 높은 pH 및 높은 주입 부피 이외에도 많은 야의 캡티솔 또는 HP-β-CD가 임상적 안전성 연구를 수행하기 위해 요구되는 투여량의 화합물 A를 용해하기 위해 요구될 수 있다.
실시예 3: 화합물 A 제형에 대한 이종이식 효능 연구
이종이식 효능에 사용된 제형은 상기 실시예 2의 절차에 따라 제조하였다.
마우스의 RS4;11 급성 림프모구성 백혈병(ALL) 이종이식 모델에서의 화합물 A에 대한 효능 평가
인간 급성 림프모구성 백혈병 세포(RS4;11)를 사용하여 다양한 제형 중의 화합물 A의 활성을 시험하였다(도 3a). 피하 경로를 통해 RS4;11 세포를 5 x 106개의 세포/마우스로 암컷 CB-17/ICr-Prkdcscid/IcrIcoCrl SCID 마우스(찰스 리버 래버러토리스(Charles River Laboratories))의 우측 옆구리 내로 주사하였다. 종양이 300 ㎣ 내지 400 ㎣의 표적 크기에 도달하면, 마우스를 비히클 대조군; 비히클 1(30% HP-β-CD, pH 4), 비히클 2(10.6% 캡티솔, pH 9), 비히클 3(0.5% 트윈, pH 9) 또는 화합물 A 처리군(비히클 1, 비히클 2 또는 비히클 3에 2 ㎎/㎏ 및 5 ㎎/㎏로 제형화됨)으로 무작위 분류하였다. 또한, 별도의 실험에서, 크레모포어 제형인 비히클 4 중의 화합물 A의 활성을 조사하였다(도 3b). 모든 제형은 1회용 정맥 볼루스로서 투여하였다. 효능을 평가하기 위해, 종양 부피를 1주 2회 측정하고, 하기와 같이 계산하였다: 종양 부피 = (A x B2)/2(여기서, A 및 B는 각각 투약 후 최대 4주의 기간 동안의 종양의 길이 및 너비(단위: ㎜)임).
단일 투여 약역학적(PD) 반응을 평가하기 위해(도 4), 적절한 시점에 마우스를 선별하고, 종양을 제거하였으며, 절반의 종양을 가공하고, 셀 시그널링 패스스캔 ELISA 키트를 사용하여 세포자멸 유도 마커로서 개열된 카스파아제 3 반응(CC3)에 대해 분석하였다. 단일 투여 종양 노출(PK)을 평가하기 위해(도 5), 나머지 절반의 종양을 가공하고, 약제 농도를 측정하였다.
캡티솔 및 HP-β-CD 제형은 33일 동안 통계학적으로 동등한 효능을 나타냈다. 반면, 트윈 80 제형은 효능을 나타내지 않거나 최소 효능을 나타냈다(도 3a). 캡티솔 및 HP-β-CD 제형 둘 모두는 6시간 및 24시간에 유사한 종양 노출을 나타냈다(도 5). 그러나 HP-β-CD 제형은 캡티솔 제형과 효능 및 노출이 동등한 것처럼 보일지라도 개열된 카스파아제 3 반응 수준으로 측정할 때 캡티솔 제형보다 많은 세포 사멸을 야기하였다(도 4). 트윈 80 제형은 보다 낮은 종양 노출을 나타냈으며, 개열된 카스파아제 3의 유도에 대한 어떠한 증거도 없었다. 요약하면, 화합물 A의 효능은 사이클로덱스트린(HP-β-CD 또는 캡티솔)의 존재에 의존한다. 기타 비히클(예를 들어, 트윈 또는 크레모포어)에 의해서도 효능 감소가 관찰되었다.
래트의 RS4;11 급성 림프모구성 백혈병 이종이식 모델에서의 상이한 주입 시간 길이에서의 화합물 A(HP-β-CD)에 대한 효능 평가
(세이지(SAGE))로부터 구매한 Rag2-/- 래트에 RS4;1(10 x 106개의 세포/래트)을 접종하였다. 종양이 대략 4,500 ㎣ 내지 6,000 ㎣까지 성장했을 때 래트를 비히클 대조군(30% HP-β-CD) 또는 30분 동안 1회 정맥 내 주입군으로서 전달된 비히클 1 중의 화합물 A 5 ㎎/㎏ 처리군(도 6) 및 비히클 대조군(30% HP-B-CD) 또는 5시간 동안 1회 정맥 내 주입군(도 7)으로서 전달된 비히클 1 중의 화합물 A 5 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏ 및 1 ㎎/㎏ 처리군으로 무작위 분류하였다. 종양 크기를 1주 2회 측정하고, 하기와 같이 계산하였다: 종양 부피 = (A x B2)/2(여기서, A 및 B는 각각 종양의 길이 및 너비(단위: ㎜)임).
그 결과는 도 6 및 도 7에 나타나 있다. 5 ㎎/㎏으로 30분간 주입 시에 화합물 A는 비히클과 비교하여 1회 처리 이후 약 9일 동안 종양의 성장을 억제하였다. 주입을 5시간까지 늘렸을 때 유사한 효능이 관찰되었다. 요약하면, 주입 시간을 늘려도 이러한 제형 중의 화합물 A의 활성에는 영향을 미치지 않았다.
실시예 4: BHALys[Lys] 32 [α-NH 2 TFA] 32 [ε-PEG~2000] 32‡ 의 제조 및 특성분석
주석: 32‡는 PEG~2000에 의한 치환에 이용 가능한 ε-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 PEG~2000 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다('BHALys[Lys]32[α-NH2-TFA]32[ε-PEG~2000]32‡의 특성분석'이란 표제의 본 실시예의 하기 단락 참조).
BHALys[Lys] 32 [α-NH 2 TFA] 32 [ε-PEG~2000] 32‡ 의 제조
BHALys[Boc] 2
고체 α,ε-(t-Boc)2-(L)-리신 p-니트로페놀 에스테르(2.787 ㎏, 5.96 mol)를 15분에 걸쳐 무수 아세토니트릴(4.0 ℓ), DMF(1.0 ℓ) 및 트리에틸아민(1.09 ㎏) 중의 아미노디페닐메탄(벤즈하이드릴아민)의 용액(0.99 ㎏, 5.4 mol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 하룻밤 동안 진탕하였다. 이어서, 반응 혼합물을 35 ℃까지 가온하고, 수성 수산화나트륨(0.5 N, 10 ℓ)을 30분 동안 천천히 첨가하였다. 혼합물을 추가의 30분 동안 교반한 후, 여과하였다. 고체 케이크를 물로 세척하고, 일정한 중량(2.76 ㎏, 5.4 mol)이 될 때까지 건조하였다(수율: 100%). 1H NMR (CD3OD) δ 7.3 (m, 10H, Ph Calc 10H); 6.2 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.08 (m, α-CH, 1H), 3.18 (br, ε-CH2) 및 2.99 (m, ε-CH2 2H); 1.7-1.2 (br, β,γ,δ-CH2) 및 1.43 (s, tBu) β,γ,δ-CH2에 대한 합계 및 tBu 25H Calc 24H. MS (ESI +ve) 실측치 534.2 [M+Na]+ C29H41N3O5Na에 대한 산정치 [M+Na]+ 534.7.
BHALys[HCl] 2
메탄올(1.5 ℓ) 중의 진한 HCl(1.5 ℓ)의 용액을 과도한 거품 발생을 최소화하는 속도로 메탄올(1.5 ℓ) 중의 BHALys[Boc]2(780.5 g, 1.52 mol)의 교반 현탁액에 3회 나눠 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가의 30분 동안 교반한 후, 35 ℃에서 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 물(3.4 ℓ)에 용해하고, 35 ℃에서 진공 하에 2회 농축한 후, 진공 하에 하룻밤 동안 저장하였다. 이어서, 아세토니트릴(3.4 ℓ)을 첨가하고, 잔류물을 35 ℃에서 진공 하에 다시 농축하여 백색 고체(586 g, 1.52 mol)로서 BHALys[HCl]2를 얻었다(수율: 100%). 1H NMR (D2O) δ 7.23 (br m, 10H, Ph Calc 10H); 5.99 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 3.92 (t, J = 6.5 Hz, α-CH, 1H, Calc 1H); 2.71 (t, J = 7.8 Hz, ε-CH2, 2H, Calc 2H); 1.78 (m, β,γ,δ-CH2, 2H), 1.47 (m, β,γ,δ-CH2, 2H), 및 1.17 (m, β,γ,δ-CH2, 2H, 총 6H Calc 6H). MS (ESI +ve) 실측치 312 [M+H]+ C19H26N3O에 대한 산정치 [M+H]+ 312.
BHALys[Lys] 2 [Boc] 4
무수 DMF(3.8 ℓ) 중의 BHALys[HCl]2(586 g, 1.52 mmol)의 현탁액에 트리에틸아민(1.08 ㎏)을 천천히 첨가하여 반응 온도를 30 ℃ 미만으로 유지하였다. 고체 α,ε-(t-Boc)2-(L)-리신 p-니트로페놀 에스테르(1.49 ㎏)를 3회 나눠 천천히 첨가하고, 첨가와 첨가 사이에 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 하룻밤 동안 교반하도록 하였다. 수산화나트륨(0.5 M, 17 ℓ)의 수용액을 충분히 교반된 혼합물에 천천히 첨가하였으며, 고체 침전물이 자유롭게 움직일 때까지 교반을 유지하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하였으며, 고체 케이크를 물(2 x 4 ℓ)로 충분히 세척한 후, 아세톤/물(1:4, 2 x 4 ℓ)로 충분히 세척하였다. 고체를 물로 슬러리화한 후, 여과하고, 진공 하에 하룻밤 동안 건조하여 BHALys[Lys]2[Boc]4(1.51 ㎏)를 100%의 수율로 얻었다. 1H NMR (CD3OD) δ 7.3 (m, 10H, Ph Calc 10H); 6.2 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.21 (m, α-CH), 4.02 (m, α-CH) 및 3.93 (m, α-CH, 총 3H, Calc 3H); 3.15 (m, ε-CH2) 및 3.00 (m, ε-CH2 총 6H, Calc 6H); 1.7-1.3 (br, β,γ,δ-CH2) 및 1.43 (s, tBu) β,γ,δ-CH2에 대한 합계 및 tBu 57H, Calc 54H. MS (ESI +ve) 실측치 868.6 [M-Boc]+; 990.7 [M+Na]+ C51H81N7O11Na에 대한 산정치 [M+Na]+ 991.1.
BHALys[Lys] 2 [HCl] 4
BHALys[Lys]2[Boc]4(1.41 ㎏, 1.46 mol)를 35 ℃에서 진탕하면서 메탄올(1.7 ℓ)에 현탁하였다. 염산(1.7 ℓ)을 메탄올(1.7 ℓ)과 혼합하였으며, 얻어진 용액을 4회 나눠 덴드리머 현탁액에 첨가하고, 30분 동안 교반하도록 방치하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 물(3.5 ℓ)로 2회 연속 스트리핑한 후, 아세토니트릴(4 ℓ)로 2회 연속 스트리핑하여 BHALys[Lys]2[HCl]4(1.05 ㎏, 1.46 mmol)를 102%의 수율로 얻었다. 1H NMR (D2O) δ 7.4 (br m, 10H, Ph Calc 10H); 6.14 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.47 (t, J = 7.5 Hz, α-CH, 1H), 4.04 (t, J = 6.5 Hz, α-CH, 1H), 3.91 (t, J = 6.8 Hz, α-CH, 1H, 총 3H, Calc 3H); 3.21 (t, J = 7.4 Hz, ε-CH2, 2H), 3.01 (t, J = 7.8 Hz, ε-CH2, 2H) 및 2.74 (t, J = 7.8 Hz, ε-CH2, 2H, 총 6H, Calc 6H); 1.88 (m, β,γ,δ-CH2), 1.71 (m, β,γ,δ-CH2), 1.57 (m, β,γ,δ-CH2) 및 1.35 (m, β,γ,δ-CH2, 총 19H, Calc 18H).
BHALys[Lys] 4 [Boc] 8
BHALys[Lys]2[HCl]4(1.05 ㎏, 1.47 mol)를 DMF(5.6 ℓ) 및 트리에틸아민(2.19 ℓ)에 용해하였다. α,ε-(t-Boc)2-(L)-리신 p-니트로페놀 에스테르(2.35 ㎏, 5.03 mol)을 3회 나눠 첨가하고, 반응물을 25 ℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. NaOH(0.5M, 22 ℓ) 용액을 첨가하였으며, 얻어진 혼합물을 여과하고, 물(42 ℓ)로 세척한 후, 풍건하였다. 고체를 45 ℃에서 진공 하에 건조하여 BHALys[Lys]4[Boc]8(2.09 ㎏, 1.11 mol)을 76%의 수율로 얻었다. 1H NMR (CD3OD) δ 7.3 (m, 10H, Ph Calc 10H); 6.2 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.43 (m, α-CH), 4.34 (m, α-CH), 4.25 (m, α-CH) 및 3.98 (br, α-CH, 총 7H, Calc 7H); 3.15 (br, ε-CH2) 및 3.02 (br, ε-CH2 총 14H, Calc 14H); 1.9-1.2 (br, β,γ,δ-CH2) 및 1.44 (br s, tBu) β,γ,δ-CH2에 대한 합계 및 tBu 122H, Calc 144H.
BHALys[Lys] 4 [TFA] 8
0 ℃에서 DCM(18 ㎖) 중의 BHALys[Lys]4[Boc]8(4 g, 2.13 mmol)의 교반 현탁액에 TFA(13 ㎖)를 첨가하였다. 고체를 용해하였으며, 용액을 아르곤 분위기 하에 하룻밤 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였으며, 잔류 TFA를 디에틸에테르(100 ㎖)로 마쇄함으로써 제거하였다. 생성물을 물에 다시 용해한 후, 냉동 건조하여 회백색 고체(4.27 g, 2.14 mmol)로서 BHALys[Lys]4[TFA]8을 101%의 수율로 얻었다. 1H NMR (D2O) δ 7.21 (br m, 10H, Ph Calc 10H); 5.91 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.17 (t, J = 7.4 Hz, α-CH, 1H), 4.09 (t, J = 7.1 Hz, α-CH, 1H), 4.02 (t, J = 7.2 Hz, α-CH, 1H, 3.84 (t, J = 6.5 Hz, α-CH, 2H), 3.73 (t, J = 6.7 Hz, α-CH, 1H), 3.67 (t, J = 6.7 Hz, α-CH, 1H, 총 7H, Calc 7H); 3.0 (m, ε-CH2), 2.93 (m, ε-CH2) 및 2.79 (b, ε-CH2, 총 15H, Calc 14H); 1.7 (br, β,γ,δ-CH2), 1.5 (br, β,γ,δ-CH2), 1.57 (m, β,γ,δ-CH2) 및 1.25 (br, β,γ,δ-CH2 총 45H, Calc 42H). MS (ESI +ve) 실측치 541.4 [M+2H]2+; C55H99N15O7에 대한 산정치 [M+2H]2+ 541.2.
BHALys[Lys] 8 [Boc] 16
DMF(25 ㎖)중의 α,ε-(t-Boc)2-(L)-리신 p-니트로페놀 에스테르(1.89 g, 4.05 mmol)의 용액을 DMF(25 ㎖) 중의 BHALys [Lys]4[NH2TFA]8(644 ㎎, 0.32 mmol)과 트리에틸아민(0.72 ㎖, 5.2 mmol)의 용액에 첨가하였으며, 반응물을 아르곤 분위기 하에 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. 반응 혼합물을 얼음/물(500 ㎖)에 부은 후, 여과하였으며, 수집된 고체를 진공 하에 하룻밤 동안 건조하였다. 건조된 고체를 아세토니트릴로 깨끗하게 세척하여 회백색 고체(0.82 g, 0.22 mmol)로서 BHALys[Lys]8[Boc]16을 68%의 수율로 얻었다. 1H NMR (CD3OD) δ 7.3 (m, 10H, Ph Calc 10H); 6.2 (br s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.48 (br, α-CH), 4.30 (br, α-CH) 및 4.05 (br, α-CH, 총 16H Calc 15H); 3.18 (br, ε-CH2) 및 3.02 (m, ε-CH2 총 31H, Calc 30H); 1.9-1.4 (br, β,γ,δ-CH2) 및 1.47 (br s, tBu) β,γ,δ-CH2에 대한 합계 및 tBu 240H, Calc 234H. MS (ESI+ve) 실측치 3509 [M+H-(Boc)2]+ C173H306N31O43에 대한 산정치 [M+H-(Boc)2]+ 3508.5; 3408 [M+H-(Boc)3]+ C168H298N31O41에 대한 산정치 [M+H-(Boc)3]+ 3408.4.
BHALys[Lys] 8 [TFA] 16
DCM(25 ㎖) 중의 BHALys[Lys]8Boc]16(800 ㎎, 0.22 mmol)의 교반 현탁액에 TFA/DCM(1:1, 19 ㎖)의 용액을 천천히 첨가하였다. 고체를 용해하였으며, 용액을 아르곤 분위기 하에 하룻밤 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였으며, 잔류물을 반복적으로 냉동 건조함으로써 잔류 TFA를 제거하여 회백색 리오필레이트(lyophylate; 848 ㎎, 0.22 mmol)로서 BHALys[Lys]8[TFA]16을 100%의 수율로 얻었다. 1H NMR (D2O) δ 7.3 (br m, 10H, Ph Calc 10H); 6.08 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.3 (m, α-CH), 4.18 (m, α-CH), 4.0 (m, α-CH) 및 3.89 (m, α-CH, 총 16H, Calc 15H); 3.18 (br, ε-CH2) 및 2.94 (m, ε-CH2 총 32H, Calc 30H); 1.9 (m, β,γ,δ-CH2), 1.68 (m, β,γ,δ-CH2) 및 1.4 (m, β,γ,δ-CH2 총 99H, Calc 90H). MS (ESI +ve) 실측치 2106 [M+H]+ C103H194N31O15에 대한 산정치 [M+H]+ 2106.9.
BHALys[Lys] 16 [Boc] 32
DMF(25 ㎖) 중의 BHALys [Lys]8[TFA]16(644 ㎎, 0.32 mmol)과 트리에틸아민(0.72 ㎖, 5.2 mmol)의 용액에 DMF(25 ㎖) 중의 α,ε-(t-Boc)2-(L)-리신 p-니트로페놀 에스테르(1.89 g, 4.05 mmol)의 용액을 첨가하였으며, 반응물을 아르곤 분위기 하에 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. 반응물을 얼음/물(500 ㎖)에 부은 후, 여과하였으며, 수집된 고체를 진공 하에 하룻밤 동안 건조하였다. 건조된 고체를 아세토니트릴로 깨끗하게 세척하여 회백색 고체(0.82 g, 0.22 mmol)로서 BHALys[Lys]16[Boc]32를 68%의 수율로 얻었다.
1H NMR (CD3OD) δ 7.28 (m, 9H, Ph Calc 10H); 6.2 (br s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.53 (br, α-CH), 4.32 (br, α-CH) 및 4.05 (br, α-CH, 총 35H, Calc 31H); 3.18 (br, ε-CH2) 및 3.04 (m, ε-CH2 총 67H, Calc 62H); 1.9-1.5 (br, β,γ,δ-CH2) 및 1.47 (br s, tBu) β,γ,δ-CH2에 대한 합계 및 tBu 474H Calc, 474H. MS (ESI+ve) 실측치 6963 [M+H-(Boc)4]+ C339H610N63O87에 대한 산정치 [M+H-(Boc)4]+ 6960.9; 6862 [M+H-(Boc)5]+ C334H604N63O85에 대한 산정치 [M+H-(Boc)5]+ 6860.8.
BHALys[Lys] 16 [TFA] 32
DCM(25 ㎖) 중의 BHALys[Lys]16[Boc]32(800 ㎎, 0.11 mmol)의 교반 현탁액에 TFA/DCM(1:1, 19 ㎖)의 용액을 천천히 첨가하였다. 고체를 용해하였으며, 용액을 아르곤 분위기 하에 하룻밤 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였으며, 잔류물을 반복적으로 냉동 건조함으로써 잔류 TFA를 제거하여 회백색 리오필레이트(847 ㎎, 0.11mmol)로서 BHALys[Lys]16[TFA]32를 100%의 수율로 얻었다. 1H NMR (D2O) δ 7.3 (br m, 11H, Ph Calc 10H); 6.06 (s, 1H, CH-Ph2 Calc 1H); 4.3 (m, α-CH), 4.19 (m, α-CH), 4.0 (m, α-CH) 및 3.88 (m, α-CH, 총 35H, Calc 31H); 3.15 (br, ε-CH2) 및 2.98 (m, ε-CH2 총 69H, Calc 62H); 1.88 (m, β,γ,δ-CH2), 1.7 (m, β,γ,δ-CH2) 및 1.42 (m, β,γ,δ-CH2 총 215H, Calc 186H). MS (ESI+ve) 실측치 4158 [M+H]+ C199H386N63O31에 대한 산정치 [M+H]+ 4157.6.
HO-Lys(α-BOC)(ε-PEG 2100 )
DMF(20 ㎖) 중의 NHS-PEG2100(2.29 g, 1.05 mmol)과 N-α-t-BOC-L-리신(0.26 g, 1.05 mmol)의 빙냉 혼합물에 DIPEA(0.37 ㎖, 2.10 mmol)를 첨가하였다. 교반 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 가온하도록 한 후, 진공 속에서 용매를 제거하기 전에 임의의 나머지 고체를 여과하였다(0.45 ㎛ 폴아크로디스크(PALL acrodisc)). 잔류물을 ACN/H2O(1:3, 54 ㎖)에 용해하고, PREP HPLC(워터스 엑스브리지 C18, 5 ㎛, 19 x 150 ㎜, 25% 내지 32% ACN(5분 내지 15분), 32% 내지 60% ACN(15분 내지 20분), 완충제 부재, 8 ㎖/분, RT = 17분)에 의해 정제하여, 1.41 g(56%)의 HO-Lys(BOC)(PEG2100)를 수득하였다. 1H NMR (CD3OD) δ 3.96-4.09 (m, 1H), 3.34-3.87 (m, 188H); 3.32 (s, 3H), 3.15 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.40 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.28-1.88 (m, 6H), 1.41 (s, 9H).
BHALys[Lys] 32 [α-BOC] 32 [ε-PEG 2100 ] 32‡
DMF(20 ㎖) 중의 BHALys[Lys]16[TFA]32(0.19 g, 24 μmol)의 교반 혼합물에 DIPEA(0.86 ㎖, 4.86 mmol)를 첨가하였다. 이어서, DMF(20 ㎖) 중의 PyBOP(0.62 g, 1.20 mmol)와 Lys(BOC)(PEG2100)(2.94 g, 1.20 mmol)의 교반 혼합물에 이러한 혼합물을 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 교반하도록 방치한 후, 물(200 ㎖)로 희석하였다. 수성 혼합물에 센트라메이트 여과(centramate filtration; 5 k 막, 20 ℓ의 물)를 적용하였다. 여과물을 냉동 건조하여, 1.27 g(73%)의 목적하는 덴드리머를 수득하였다. HPLC (C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 5% ACN (0분 내지 1분), 5~80% ACN/H2O) (1분 내지 7분), 80% ACN(7분 내지 12분), 80~5% ACN(12분 내지 13분), 5% ACN(13분 내지 15분), 214 ㎚, 0.1% TFA) Rf(분) = 8.52. 1H-nmr (300 MHz, D2O) δ (ppm): 1.10-2.10 (m, Lys CH2 (β, χ, δ) 및 BOC, 666H), 3.02-3.36 (m, Lys CH2 (ε), 110H), 3.40 (s, PEG-OMe, 98H), 3.40-4.20 (m, PEG-OCH2, 5750H + Lys CH 표면, 32H), 4.20-4.50 (m, Lys, CH 내부 32H), 7.20-7.54 (m, BHA, 8H). 1H NMR에는 대략 29개의 PEG가 나타나 있다.
BHALys[Lys] 32 [α-TFA] 32 [ε-PEG 2100 ] 32‡
1.27 g(17.4 μmol)의 BHALys[Lys]32[α-BOC]32[ε-PEG2100]32를 실온에서 하룻밤 동안 TFA/DCM(1:1, 20 ㎖) 내에서 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 물(30 ㎖)에 용해하였다. 이어서, 혼합물을 농축하였다. 냉동 건조 이전에 이러한 과정을 2회 더 반복하여, 점성의 무색 오일로서 1.35 g(106%)의 목적하는 생성물을 수득하였다. HPLC (C8 엑스브리시, 3 x 100 ㎜, 구배: 5% ACN(0분 내지 1분), 5~80% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 80% ACN(7분 내지 12분), 80~5% ACN(12분 내지 13분), 5% ACN(13분 내지 15분), 214 ㎚, 0.1% TFA) Rf(분) = 8.51. 1H-nmr (300 MHz, D2O) δ (ppm): 1.22-2.08 (Lys CH2 ((β, χ, δ), 378H), 3.00-3.26 (Lys CH2 (ε), 129H), 3.40 (PEG-OMe, 96H), 3.45-4.18 (PEG-OCH2, 5610H + Lys CH 표면, 32H), 4.20-4.46 (Lys, CH 내부, 33H), 7.24-7.48 (8H, BHA). 1H NMR에는 대략 29개의 PEG가 나타나 있다.
BHALys[Lys] 32 [α-NH 2 TFA] 32 [ε-PEG ~2000 ] 32‡ 의 특성분석
표 6에는 하기 실시예 5 내지 실시예 9에서는 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32#의 다양한 배치가 사용되며, 이들은 약간 상이한 PEG 길이를 갖는 것으로 나타나 있다. 또한 덴드리머 상의 PEG 사슬의 실제 개수는 양자 NMR로 계산하였다.
[표 6]
Figure pct00065
BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32‡의 다양한 배치에 대한 양자 NMR은 표 7에 나타나 있다:
[표 7]
Figure pct00066
실시예 5: BHALys[Lys] 32 [α-Glu-화합물 A] 32† [ε-PEG 2200 ] 32‡ 의 제조
주석: 32†는 Glu-화합물 A에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 α-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 Glu-화합물 A 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 10 참조). 32‡는 PEG2200에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 ε-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 PEG2200 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 4의 배치 1 참조).
Glu-화합물 A의 제조
Figure pct00067
실온에서 DCM(10 ㎖) 중의 화합물 A(200 ㎎, 0.21 mmol)의 자기 교반 현탁액에 글루타르산 무수물(29 ㎎, 0.25 mmol), DMAP(26 ㎎, 0.21 mmol) 및 DIPEA(93 ㎕, 0.53 mmol)를 첨가하였다. 현탁액을 신속하게 용해하였으며, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. HPLC에 의해 반응이 80% 초과하여 완료되었다고 판단될 때까지 부가적인 글루타르산 무수물을 이후 24시간 동안 첨가하였다. 이어서, 휘발성 물질을 진공 속에서 제거하였으며, 잔류물을 분취 HPLC(BEH 300 워터스 엑스브리지 C18, 5 μM, 30 x 150 ㎜, 60~80% ACN/물(5분 내지 40분), 0.1% TFA, RT = 22분)로 정제하여 백색 고체로서 117 ㎎(52%)의 생성물을 수득하였다. LCMS (C18, 구배: 50~60% ACN/H2O (1분 내지 10분), 60% ACN(10분 내지 11분), 60~50% ACN(11분 내지 13분), 50% ACN(13분 내지 15분), 0.1% 포름산, 0.4 ㎖/분, Rf(분) = 6.30. ESI (+ve) 관측치 [M + H]+ = 1059. C50H54ClF3N4O10S3에 대한 산정치 = 1058.26 Da. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.65-1.40 (m, 4H), 1.70-2.30 (m, 6H), 2.34 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.65 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.91 (s, 3H), 3.14-3.29 (m, 2H), 3.33-3.38 (m, 3H), 3.38-3.52 (m, 3H), 3.71 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.34-4.48 (m, 3H), 6.80-6.96 (m, 3H), 7.01 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.09-7.24 (m, 4H), 7.26-7.46 (m, 8H), 7.61 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.07 (dd, J = 9.3, 2.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 3.0 Hz, 1H).
BHALys[Lys] 32 [α-Glu-화합물 A] 31 [ε-PEG 2200 ] 29 의 제조
Figure pct00068
실온에서 DMF(1 ㎖) 중의 화합물 A-Glu(67 ㎎, 63 μmol)와 PyBOP(33 ㎎, 63.3 μmol)의 자기 교반 혼합물에 또한 DMF(2 ㎖) 중의 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2200]29(99 ㎎, 1.32 μmol, 실시예 4의 배치 1)와 NMM(23 ㎕, 0.21 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 실온에서 16시간 후, 휘발성 물질을 제거하였으며, 잔류물을 크기 배제 크로마토그래피(세파덱스, LH20, MeOH)에 의해 정제하였다. HPLC로 판단할 때, 적절한 분획을 모으고, 농축하였다. 이어서, 잔류물을 물에 용해하고, 여과하고(0.22 ㎛), 냉동 건조하여, 연분홍 고체로서 101 ㎎(73%)의 목적하는 물질을 수득하였다. HPLC(C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 10.18. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.65-2.08 (m, 585H), 2.10-2.50 (m, 144H), 2.50-2.80 (m, 71H), 2.82-3.02 (m, 80H), 3.04-3.27 (m, 137H), 3.35 (s, 108H), 3.40-4.06 (m, 5824H), 4.08-4.62 (m, 181H), 6.54-8.40 (m, 632H).
실시예 6: BHALys[Lys] 32 [α-TDA-화합물 A] 32† [ε-PEG 2100, 2200 ] 32‡ 의 제조
주석: 32†는 TDA-화합물 A에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 α-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 TDA-화합물 A 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 10 참조). 32‡는 PEG2100, 2200에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 ε-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 PEG2100, 2200 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 4의 배치 2 및 배치 3 참조).
TDA-화합물 A의 제조
Figure pct00069
실온에서 DCM(5 ㎖) 중의 화합물 A(70 ㎎, 74.1 μmol)의 자기 교반 현탁액에 티오디글리콜산 무수물(TDA, 10 ㎎, 74.1 μmol) 및 DIPEA(33 ㎕, 185 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 신속하게 용해하였으며, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. HPLC에 의해 반응이 80% 초과하여 완료되었다고 판단될 때까지 부가적인 티오디글리콜산 무수물을 이후 24시간 동안 첨가하였다. 이어서, 휘발성 물질을 진공 속에서 제거하였으며, 잔류물을 분취 HPLC(BEH 300 워터스 엑스브리지 C18, 5 μM, 30 x 150 ㎜, 60~80% ACN/물(5분 내지 40분), 0.1% TFA, RT = 22분)로 정제하여 백색 고체로서 63 ㎎(70%)의 생성물을 수득하였다. LCMS (C18, 구배: 50~60% ACN/H2O(1분 내지 10분), 60% ACN(10분 내지 11분), 60~50% ACN(11분 내지 13분), 50% ACN(13분 내지 15분), 0.1% 포름산, 0.4 ㎖/분, Rf(분) = 7.33. ESI (+ve) 관측치 [M + H]+ = 1077. C49H52ClF3N4O10S4에 대한 산정치 = 1076.22 Da. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.87-1.04 (m, 1H), 1.08-1.36 (m, 3H), 1.71-1.90 (m, 1H), 1.96-2.40 (m, 3H), 2.64 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.77 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 3.18-3.30 (m, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.40 (s, 2H), 3.46-3.55 (m, 2H), 3.73 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.02-4.15 (m, 1H), 4.40-4.48 (m, 3H), 6.86 (d, J = 9.3 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.08-7.46 (m, 13H), 7.61 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.08 (dd, J = 9.3, 2.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H).
대안적인 제조 방법
N2 분위기 하에 내부 온도 탐침 및 균압 적하 깔때기가 구비된 3구 반응 용기에 화합물 A(25.50 g, 2.70 x 10-2 mol) 및 TDA(4.81 g, 3.64 x 10-2 mol, 1.35당량)를 넣었다. DCM(255 ㎖, 10용량)을 도입하였으며, 그 결과 얻어진 현탁액을 -10 ℃까지 냉각하였다. DCM 중의 0.29 M TEA(100 ㎖, 3.77 x 10-2 mol, 1.4당량)를 온도를 -10 ℃로 유지하면서 40분에 걸쳐 도입하였다. 매시간 반응에 대한 공정 내 제어(IPC)를 실시하였다. HPLC에 의해 화합물 A의 면적이 10% 미만인 경우에 반응은 완료된 것으로 간주하였다(전형적으로 첨가가 끝난 후 4.5시간). 반응 혼합물을 DCM(1.66 ℓ, 65용량)으로 희석하고, 인산염 완충 식염수(PBS) 수용액(1.02 ℓ, 40용량)으로 3회 세척하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4(100 g, 5% w/v) 상에서 건조하여, 하룻밤 동안 진공 속에서의 농축(0.2 bar, 25 ℃) 이후에 연노랑 고체를 수득하였다(전형적으로, 24.5 g, 85%의 수율, HPLC에 의한 수율: 86.83%).
BHALys[Lys] 32 [α-TDA-화합물 A] 32† [ε-PEG 2100, 2200 ] 32‡ 의 제조
소규모 제조 방법
Figure pct00070
실온에서 DMF(1 ㎖) 중의 화합물 A-TDA(62 ㎎, 58 μmol)와 PyBOP(30 ㎎, 58 μmol)의 자기 교반 혼합물에 또한 DMF(2 ㎖) 중의 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2200]29(97 ㎎, 1.28 μmol, 실시예 4의 배치 2)과 NMM(27 ㎕, 0.24 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 실온에서 16시간 후, 휘발성 물질을 제거하였으며, 잔류물을 크기 배제 크로마토그래피(세파덱스, LH20, MeOH)에 의해 정제하였다. HPLC로 판단할 때, 적절한 분획을 모으고, 농축하였다. 이어서, 잔류물을 물에 용해하고, 여과하고(0.22 ㎛), 동결 건조하여, 연분홍 고체로서 98 ㎎(72%)의 목적하는 물질을 수득하였다. HPLC(C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 10.24. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.62-2.33 (m, 589H), 2.37-2.69 (m, 87H), 2.69-2.92 (m, 98H), 2.94-3.27 (m, 202H), 3.35 (s, 113H), 3.37-4.10 (m, 5781H), 4.10-4.70 (m, 154H), 6.50-8.45 (m, 661H).
대안적인 (대규모) 제조 방법
Figure pct00071
N2 분위기 하에 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2100]29(30.6 g, 3.82 x 10-4 mol, 실시예 4의 배치 3) 및 화합물 A-TDA(19.01 g, 1.53 x 10-2 mol, 40당량)에 DMF(495 ㎖, 16.5용량)를 첨가하였다. NMM(8.06 ㎖, 7.33 x 10-2 mol, 192당량)을 도입하였으며, 용해에 도움이 되도록 반응물을 30 ℃까지 가온하였다(대략 10분). 이어서, 혼합물을 다시 20 ℃까지 냉각시켰으며, PyBOP(9.20 g, 1.68 x 10-2 mol, 44당량)을 동일하게 나눠 2회 도입하였다. 공정 내 제어 모니터링에 따르면 2시간 후에 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 ACN(495 ㎖, 16.5용량)으로 희석하고, 소결 깔때기를 통해 여과하였으며, 여기에 정용부피(constant diavolume; 600 ㎖, ACN)가 10으로 일정한 한외여과(메르크 밀리포어 펠리콘 3, 2 x 0.11 m2 카세트)를 적용하여, 18 PSI의 막간 압력(TMP) 및 48 ℓ/㎡/시간(LMH)을 유지하였다. 감압 하의 농축(45 ℃, 0.2 bar; 30분 동안) 및 주위 온도에서의 추가의 16시간 동안의 건조를 통해 진한 황색 시럽으로서 45.7 g의 정제된 생성물(배치 A)을 얻었다. 이러한 공정을 반복하여 또 다른 46.8 g의 물질(배치 B)을 생성하였다.
2개의 배치(배치 A 및 배치 B)를 THF(4.7용량)에 개별적으로 용해하고, 용해가 완료될 때(10분)까지 35 ℃ 내지 40 ℃까지 가온하였다. 내부 온도계, 균압 적하 깔때기 및 자석 교반기가 구비된 별도의 3구 둥근 바닥 용기에 MTBE(1.8 ℓ, 19.5용량)를 첨가하였다. 이어서, 용매를 외부 빙수조의 도움으로 0 ℃까지 냉각시켰다. 모은 배치 A 및 배치 B의 THF 용액이 주위 온도에 도달했을 때 적하 깔때기에 THF 용액을 넣었으며, 온도를 0 ℃로 유지하면서 MTBE의 교반 용액에 상기 THF 용액을 적가 방식으로 도입하였다. 혼탁함이 최초로 관측되면, 반응물에 고체 BHALys[Lys]32[α-TDA-화합물 A]27[ε-PEG2200]29(0.95 g, 투입 배치 A 및 배치 B 대비 1% w/w)를 접종하였으며, 첨가를 재개하여 30분을 지속하였다. N2 하에 부흐너(Buchner) 진공 필터(160 ㎜의 직경)로 전달하기 전(15분 동안 지속함)에 결정화에 의해 60분 동안 숙성하도록 하였다. 필터 케이크를 5용량의 MTBE(세척 당 300 ㎖)로 세척하고, (N2 하에) 인출하여 건조하였으며, 이를 총 30분 동안 지속하였다. 필터 케이크를 진공 오븐으로 옮겼으며, 여기서 일정한 질량이 구현될 때(24시간)까지 40 ℃에서 0.2 bar로 건조하여, 자유롭게 유동하는 백색 분말을 74.8 g(105%의 수율) 수득하였다. HPLC(C8 페노메넥스 에리스, 2.1 x 100 ㎜, 구배: 5% ACN(0분 내지 1분), 5~45% ACN/H2O)(1분 내지 2분), 45~60% ACN(2분 내지 8분), 60% ACN(8분 내지 10분), 60~90% ACN(10분 내지 10.1분), 90% ACN(10.1분 내지 12분), 90~5% ACN(12분 내지 15분), 5% ACN(15분 내지 20분), 272 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 14.92. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.40-2.30 (m, 589H), 2.31-2.79 (m, 154H), 2.81-3.29 (m, 263H), 3.35 (s, 116H), 3.36-4.10 (m, 5924H), 4.13-4.62 (m, 151H), 6.28-8.52 (m, 622H). 19F-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: -106.9 ppm (3.81 ㎎, FBA, 100이 되도록 설정된 합계), -79.0 ppm (21.4 ㎎ 덴드리머, 62.80). 이는 5.36 ㎎의 화합물 A(또는 25.1%의 적재량)을 제공한다.
실시예 7: BHALys[Lys] 32 [α-DGA-화합물 A] 32† [ε-PEG 2200 ] 32‡ 의 제조
주석: 32†는 DGA-화합물 A에 의한 치환에 이용 가능한 α-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 DGA-화합물 A 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 10 참조). 32‡는 PEG2200에 의한 치환에 이용 가능한 ε-아미노기의 이론적 최대 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 PEG2200 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 4의 배치 4 참조).
DGA-화합물 A의 제조
Figure pct00072
실온에서 DCM(5 ㎖) 중의 화합물 A(77 ㎎, 81.5 μmol)의 자기 교반 현탁액에 디글리콜산 무수물(9.6 ㎎, 81.5 μmol) 및 DIPEA(36 ㎕, 200 μmol)를 첨가하였다. 신속하게 용해하였으며, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. HPLC에 의해 반응이 80% 초과하여 완료되었다고 판단될 때까지 부가적인 디글리콜산 무수물을 이후 24시간 동안 첨가하였다. 이어서, 휘발성 물질을 진공 속에서 제거하였으며, 잔류물을 분취 HPLC(BEH 300 워터스 엑스브리지 C18, 5 μM, 30 x 150 ㎜, 60~80% ACN/물(5분 내지 40분), 0.1% TFA, RT = 22분)에 의해 정제하여 백색 고체로서 76 ㎎(87%)의 생성물을 수득하였다. LCMS (C18, 구배: 50~60% ACN/H2O(1분 내지 10분), 60% ACN(10분 내지 11분), 60~50% ACN(11분 내지 13분), 50% ACN(13분 내지 15분), 0.1% 포름산, 0.4 ㎖/분, Rf(분) = 5.93. ESI (+ve) 관측치 [M + H]+ = 1061. C49H52ClF3N4O11S3에 대한 산정치 = 1060.24 Da. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.86-1.04 (m, 1H), 1.08-1.32 (m, 2H), 1.70-1.90 (m, 1H), 1.97-2.08 (m, 1H), 2.08-2.20 (m, 1H), 2.22-2.38 (m, 1H), 2.65 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.77 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.92 (s, 3H), 3.15-3.29 (m, 2H), 3.36-3.42 (m, 2H), 3.46-3.54 (m, 2H), 3.73 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.99-4.15 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 4.42 (j, J = 8.1 Hz, 1H), 4.45-4.54 (m, 2H), 6.86 (d, J = 9.3 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.10-7.26 (m, 4H), 7.26-7.47 (m, 7H), 7.59 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.08 (dd, J = 9.0, 2.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H).
BHALys[Lys] 32 [α-DGA-화합물 A] 32† [ε-PEG 2200 ] 32‡ 의 제조
Figure pct00073
실온에서 DMF(1 ㎖) 중의 화합물 A-DGA(76 ㎎, 72 μmol)와 PyBOP(37 ㎎, 72 μmol)의 자기 교반 혼합물에 또한 DMF(2 ㎖) 중의 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2200]29(112 ㎎, 1.49 μmol, 실시예 4의 배치 4)와 NMM(31 ㎕, 0.29 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 실온에서 16시간 후, 휘발성 물질을 제거하였으며, 잔류물을 크기 배제 크로마토그래피(세파덱스, LH20, MeOH)에 의해 정제하였다. HPLC로 판단할 때, 적절한 분획을 모으고, 농축하였다. 이어서, 잔류물을 물에 용해하고, 여과하고(0.22 ㎛), 냉동 건조하여, 연분홍 고체로서 137 ㎎(88%)의 목적하는 물질을 수득하였다. HPLC(C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 10.23. 1H-NMR (300 M Hz, CD3OD) δ (ppm): 0.58-2.26 (m, 834H), 2.28-2.72 (m, 154H), 2.74-3.28 (m, 245H), 3.35 (s, 101H), 3.37-4.02 (m, 5824H), 4.04-4.68 (m, 272H), 6.46-8.54 (m, 652H).
실시예 8: BHALys[Lys] 32 [α-Glu-화합물 A] 32† [ε-PEG 1100 ] 32‡ 의 제조
주석: 32†는 Glu-화합물 A에 의한 치환에 이용 가능한 α-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. 32‡는 PEG1100에 의한 치환에 이용 가능한 ε-아미노기의 이론적 최대 개수에 관한 것이다.
BHALys[Lys] 32 [α-Glu-화합물 A] 32† [ε-PEG 1100 ] 32‡ 의 제조
Figure pct00074
실온에서 DMF(1 ㎖) 중의 화합물 A-Glu(57 ㎎, 54 μmol)와 PyBOP(28 ㎎, 54 μmol)의 자기 교반 혼합물에 또한 DMF(2 ㎖) 중의 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG1100]32#(57 ㎎, 1.20 μmol)과 NMM(25 ㎕, 0.23 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 실온에서 16시간 후, 휘발성 물질을 제거하였으며, 잔류물을 크기 배제 크로마토그래피(세파덱스, LH20, ACN)에 의해 정제하였다. HPLC로 판단할 때, 적절한 분획을 모으고, 농축하였다. 이어서, 잔류물을 물에 용해하고, 여과하고(0.22 ㎛), 동결 건조하여, 연분홍 고체로서 72 ㎎(78%)의 목적하는 물질을 수득하였다. HPLC(C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 10.40. 1H-NMR (300 M Hz, CD3OD) δ (ppm): 0.60-2.08 (m, 632H), 2.10-2.35 (m, 127H), 2.36-2.53 (m, 114H), 2.54-2.78 (m, 117H), 2.82-3.27 (m, 254H), 3.34 (s, 102H), 3.37-3.89 (m, 3226H), 3.90-4.58 (m, 185H), 6.36-8.52 (m, 654H).
실시예 9: BHALys[Lys] 32 [α-MIDA-화합물 A] 32† [ε-PEG 2100 ] 32‡ 의 제조
주석: 32†는 MIDA-화합물 A에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 α-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 MIDA-화합물 A 기의 실제 평균 개수는 19F NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 10 참조). 32‡는 PEG2100에 의한 치환에 이용 가능한 덴드리머 상의 ε-아미노기의 이론적 개수에 관한 것이다. BHALys[Lys]32에 부착된 PEG2100 기의 실제 평균 개수는 1H NMR에 의해 실험적으로 측정되었다(실시예 4의 배치 5 및 배치 6 참조).
MIDA-화합물 A의 제조
Figure pct00075
실온에서 DCM(5 ㎖) 중의 화합물 A(200 ㎎, 0.21 mmol)의 자기 교반 현탁액에 DIPEA(24 ㎕, 0.14 mmol), NMM(72 ㎕, 0.66 mmol) 및 4-메틸모르폴린-2,6-디온(33 ㎎, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 신속하게 용해하였으며, 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하도록 방치하였다. HPLC에 의해 반응이 80% 초과하여 완료되었다고 판단될 때까지 부가적인 4-메틸모르폴린-2,6-디온을 이후 24시간 동안 첨가하였다. 이어서, 휘발성 물질을 진공 속에서 제거하였으며, 잔류물을 분취 HPLC(BEH 300 워터스 엑스브리지 C18, 5 μM, 30 x 150 ㎜, 50~70% ACN/물(5분 내지 40분), 0.1% TFA, RT = 23분)로 정제하여 백색 고체로서 190 ㎎(84%)의 생성물을 수득하였다. LCMS (C18, 구배: 50~60% ACN/H2O(1분 내지 10분), 60% ACN(10분 내지 11분), 60~50% ACN(11분 내지 13분), 50% ACN(13분 내지 15분), 0.1% 포름산, 0.4 ㎖/분, Rf(분) = 2.55. ESI (+ve) 관측치 [M + H]+ = 1074. C50H55ClF3N5O10S3에 대한 산정치 = 1073.28 Da. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.86-1.07 (m, 1H), 1.08-1.37 (m, 2H), 1.72-1.88 (m, 1H), 1.96-2.09 (m, 1H), 2.10-2.24 (m, 1H), 2.24-2.38 (m, 1H), 2.66 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.92 (s, 3H), 3.00 (s, 3H), 3.14-3.28 (m, 2H), 3.33-3.43 (m, 2H), 3.47-3.57 (m, 2H), 3.72 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.03-4.15 (m, 1H), 4.06 (s, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.43 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.54-4.64 (m, 2H), 6.88 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.09-7.25 (m, 4H), 7.26-7.47 (m, 8H), 7.61 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.07 (dd, J = 9.3, 2.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H).
대안적인 제조 방법
N2 분위기 하에 내부 온도 탐침 및 균압 적하 깔때기가 구비된 3구 반응 용기에 화합물 A(28.00 g, 2.96 x 10-2 mol) 및 4-메틸모르폴린-2,6-디온(7.24 g, 5.33 x 10-2 mol, 1.80당량)을 넣었다. DCM(250 ㎖, 9용량)을 도입하였으며, 그 결과 얻어진 현탁액을 0 ℃까지 냉각하였다. DCM(50 ㎖, 1.8용량) 중의 TEA(6.25 ㎖, 4.44 x 10-2 mol, 1.5당량)를 온도를 0 ℃로 유지하면서 10분에 걸쳐 적가하였다. 매시간 반응에 대한 공정 내 제어를 실시하였다. 화합물 A의 피크 면적이 10% 미만인 경우에 반응은 완료된 것으로 간주하였다(전형적으로 첨가가 끝난 후 4.5시간). 반응 혼합물을 DCM(1.40 ℓ, 50용량)으로 희석하고, 1.6 M Na2CO3 수용액(1.60 ℓ, 50용량)으로 2회 세척하였다. 유기층을 MgSO4(90 g, 5% w/v) 상에서 건조하고, 소결 유리 깔때기를 통해 여과하고, DCM(100 ㎖, 5용량)으로 세척하여, 진공 속에서의 농축(0.2 bar, 30 ℃) 이후에 회백색 고체를 수득하였다(33.07 g, 95%의 수율, HPLC에 의한 수율: 90.6%).
BHALys[Lys] 32 [α-MIDA-화합물 A]] 32† [ε-PEG 2100 ] 32‡ 의 제조
소규모 제조 방법
Figure pct00076
실온에서 DMF(10 ㎖) 중의 화합물 A-MIDA(730 ㎎, 0.68 mmol)와 PyBOP(353 ㎎, 0.68 mmol)의 자기 교반 혼합물에 또한 DMF(10 ㎖) 중의 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2100]31(934 ㎎, 12.1 μmol, 실시예 4의 배치 5)과 NMM(255 ㎕, 2.32 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 실온에서 16시간 후, 휘발성 물질을 제거하였으며, 잔류물을 크기 배제 크로마토그래피(세파덱스, LH20, ACN)에 의해 정제하였다. HPLC로 판단할 때, 적절한 분획을 모으고, 농축하였다. 이어서, 잔류물을 물에 용해하고, 여과하고(0.22 ㎛), 냉동 건조하여, 연분홍 고체로서 1.19 g(92%)의 목적하는 물질을 수득하였다. HPLC(C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 10.80. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.45-1.92 (m, 565H), 2.08-2.78 (m, 228H), 2.79-3.00 (m, 96H), 3.01-3.28 (m, 180H), 3.35 (s, 180H), 3.46-4.20 (m, 6164H), 4.20-4.68 (m, 139H), 6.40-8.52 (m, 680H).
대안적인 (대규모) 제조 방법
N2 분위기 하에 BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2100]29(13.49 g, 1.72 x 10-4 mol, 실시예 4의 배치 6) 및 화합물 A-MIDA(8.50 g, 6.87 x 10-3 mol, 40.2당량)에 DMF(225 ㎖, 16.5용량)를 첨가하였다. NMM(3.60 ㎖, 3.30 x 10-2 mol, 192당량)을 도입하였으며, 용해에 도움이 되도록 반응 혼합물을 30 ℃ 내지 35 ℃까지 가온하였다(대략 5분). 이어서, 혼합물을 다시 20 ℃까지 냉각시켰으며, PyBOP(4.13 g, 7.56 x 10-3 mol, 44당량)을 동일하게 나눠 2회 도입하였다. 공정 내 제어 모니터링에 따르면 2시간 후에 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 ACN(225 ㎖, 16.5용량)으로 희석하고, 소결 깔때기를 통해 여과하였으며, 여기에 정용부피(200 ㎖, ACN)가 16(일정함)인 한외여과(메르크 밀리포어 펠리콘 3, 0.11 m2 카세트, 10 kDa)를 적용하여, 25 PSI의 막간 압력(TMP) 및 44 ℓ/㎡/시간(LMH)을 유지하였다. 감압 하의 농축(40 ℃, 0.2 bar; 60분 동안) 및 주위 온도에서의 추가의 16시간 동안의 건조를 통해 밝은 오렌지색 시럽으로서 23.5 g의 정제된 생성물을 얻었다. 시럽을 35 ℃ 내지 40 ℃에서 THF(235 ㎖, 10용량)에 용해하고(10분), 47 ㎜의 0.45 ㎛ PTFE 막(메르크-밀리포어 옴니포어(Merck-Millippore Omnipore))을 통해 여과하였다. 여액을 이의 초기 부피의 절반까지 농축하였으며(100 ㎖, 4.3용량), 주위 온도로 되돌아갔을 때 이를 균압 적하 깔때기에 넣었다.
내부 온도 탐침이 구비된 3구 RBF에 MTBE(400 ㎖, 19.5용량)를 넣었으며, 이를 N2 분위기 하에 내부 빙수조의 도움으로 0 ℃까지 냉각시켰다. 0 ℃에 도달했을 때, 덴드리머의 첨가를 개시하였으며, 15분 동안 지속하였으며(최대 내부 온도: 5 ℃), 반면에 교반을 (0 ℃ 내지 5 ℃에서) 45분 동안 계속하여 침전물이 숙성하도록 하였다. 그 결과로 얻어진 혼합물을 N2 하에 부흐너 진공 필터(160 ㎜의 직경) 로 전달하여 15분 이내에 제1 습식 케이크를 얻었다. 필터 케이크를 5용량의 MTBE(세척 당 100 ㎖)로 2회 세척하고, (N2 하에) 인출하여 건조하였으며, 이를 총 15분 동안 지속하였다. 필터 케이크를 진공 오븐으로 옮겼으며, 여기서 일정한 질량이 구현될 때(48시간)까지 (25 ℃에서 0.2 bar로) 건조하여, 자유롭게 유동하는 백색 분말을 18.98 g(102%의 수율) 수득하였다. HPLC(C8 페노메넥스 에리스, 2.1 x 100 ㎜, 구배: 5% ACN(0분 내지 1분), 5~45% ACN/H2O)(1분 내지 2분), 45~60% ACN(2분 내지 8분), 60% ACN(8분 내지 10분), 60~90% ACN(10분 내지 10.1분), 90% ACN(10.1분 내지 12분), 90~5% ACN(12분 내지 15분), 5% ACN(15분 내지 20분), 272 ㎚, 10 mM 포름산암모늄) Rf(분) = 14.94. 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ (ppm): 0.31-2.84 (m, 953H), 2.86-3.27 (m, 211H), 3.35 (s, 109H), 3.37-4.23 (m, 5734H), 4.24-4.64 (m, 95H), 6.26-8.41 (m, 632H). 19F-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: -107.1 ppm (3.64 ㎎, FBA, 100이 되도록 설정된 합계), -79.1 ppm (31.2 ㎎ 덴드리머, 108.82). 이는 8.91 ㎎의 화합물 A(또는 28.6%의 적재량)을 제공한다.
실시예 10: 덴드리머의 화합물 A 약제 적재량
상기 실시예 5 내지 실시예 9에서 제조된 덴드리머 중의 화합물 A의 약제 적재량은 NMR에 의해 측정하였다.
1 H NMR에 의한 화합물 A 적재량(%): 화합물 A의 적재량은 덴드리머 스캐폴드를 대표하는 PEG 영역(3.4~4.2 ppm)과 비교하여 화합물 A를 대표하는 방향족 영역(6.5~8.5 ppm)의 적분을 통해 추정되었다. 하기 표에 나타나 있는 실시예 5에서, 덴드리머에서 유래한 잔류 BHA에 더하여 32개의 화합물 A 기에 대한 양자의 이론적 개수는 650H이다. 631H만이 관찰되었으며, 이는 32개의 부위 중의 97% 또는 31개만을 화합물 A 분자가 차지하고 있다는 것을 보여준다. 이어서, 화합물 A의 양(%)은 MW(화합물 A)에 31을 곱한 후, 이를 구조체의 총 MW로 나눔으로써 계산하였다. 즉 화합물 A의 적재량 = (945 x 31)/104,500 = 0.28(또는 28%).
19 F NMR에 의한 화합물 A 적재량(%): 화합물 A의 적재량은 내부 표준물질(4-플루오로벤조산, FBA)을 이용하여 집합체에 대한 19F NMR을 수행함으로써 계산하였다. 실험은, 전형적으로 덴드리머 및 FBA의 알려진 질량을 정확하게 측정하여 1회용 바이알에 넣음으로써 수행하였다. 이어서, 이를 DMSO에 용해하고, 초음파 처리한 후(2분), NMR(100 스캔, 30초의 지연 시간)로 분석할 수 있다. 이어서, FBA 및 덴드리머의 피크를 통합할 수 있으며, 화합물 A의 양(%)은 몰비(FBA(1F)에 대한 화합물(3F)의 3:1 몰비)를 이용하여 계산할 수 있다.
[표 8]
Figure pct00077
실시예 11: 덴드리머에 대한 시험관 내 방출 연구(PBS 10% DMA 중의 pH 7.4)
프로토콜:
1. PBS 완충제를 제조한다 - PBS는 200 ㎖의 탈이온수에 하나의 PBS 정제(시그마(Sigma), P4417)를 용해하여, 37 ℃에서 pH 7.4로 0.01 M 포스페이트 완충제, 0.0027 M 염화칼륨 및 0.137 M 염화나트륨을 제공함으로써 제조한다.
2. 9 ㎖의 PBS 완충제를 1 ㎖의 DMA로 희석함으로써 9:1(v/v) PBS/DMA 혼합물을 제조한다.
3. 2 ㎖ HPLC 바이알 내에서 PBS/DMA 혼합물 중의 덴드리머 용액을 1 ㎎/㎖로 조성한다.
4. 2시간의 간격으로 HPLC에 의해 실온에서 화합물 A의 방출을 모니터링한다.
HPLC 방법 (C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O) (1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 243 ㎚, 10 mM 포름산암모늄).
[표 9a]
Figure pct00078
[표 9b]
Figure pct00079
실시예 12: 덴드리머에 대한 시험관 내 방출 연구(0.1 M 시트르산 중의 pH 4.5)
프로토콜:
1. 0.1 M 시트르산 용액(탈이온수로 400 ㎖이 되도록 희석된 7.68 g의 시트르산)을 제조하고, pH를 4.5로 조절한다.
2. 2 ㎖ HPLC 바이알 내에서 시트르산 용액 중의 덴드리머 용액을 1 ㎎/㎖로 조성한다.
3. 다양한 시간 간격으로 HPLC에 의해 실온에서 화합물 A의 방출을 모니터링한다.
HPLC 방법 (C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 214 ㎚, 10 mM 포름산암모늄).
[표 10a]
Figure pct00080
[표 10b]
Figure pct00081
실시예 13: 실시예 6 및 실시예 9의 화합물 A의 전달 비히클 내로의 초기 방출의 pH 의존성
pH 2.1, pH 3, pH 4, pH 5, pH 6, pH 7 및 pH 8에서 거대분자로부터의 화합물 A의 가수분해 속도를 결정하기 위해 HPLC-UV 방법을 사용하였다.
McIlvane 완충제(pH 2.2)는 0.14 g의 인산이나트륨 12수화물 및 2.06 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 3)는 1.47 g의 인산이나트륨 12수화물 및 1.67 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 4)는 2.76 g의 인산이나트륨 12수화물 및 1.29 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 5)는 3.69 g의 인산이나트륨 12수화물 및 1.02 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 6)는 4.52 g의 인산이나트륨 12수화물 및 0.77 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 7)는 5.90 g의 인산이나트륨 12수화물 및 0.37 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 8)는 6.97 g의 인산이나트륨 12수화물 및 0.06 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
1 ㎎ 내지 2 ㎎의 덴드리머의 무게를 정확히 측정하여 바이알에 넣었으며, 1 ㎖의 완충제를 첨가하였다. 샘플을 최대 130시간 동안 37 ℃에서 자석으로 교반하였다. 샘플을 HPLC-UV에 의해 주기적으로 분석하였다. 화합물 A의 유리 농도는 농도가 알려져 있는 표준물질의 HPLC-UV 반응과 샘플 내의 화합물 A의 HPLC-UV 반응을 비교함으로써 측정하였다.
[표 11]
Figure pct00082
각 pH에서의 속도 상수는 최소 제곱 피팅법(least-squares fitting method)을 이용하여 시간이 지남에 따라 관측된 용액 농도로부터 계산하였다. 관측된 속도 상수는 도 8에 요약되어 있다. 데이터에 따르면 실시예 9는 시험된 pH 범위 전반에 걸쳐 실시예 6보다 낮은 초기 방출 변화를 나타내는 것으로 나타났다.
실시예 14: 래트 및 마우스 혈장 중의 덴드리머로부터 화합물 A의 시험관 내 방출
프로토콜: 0.5 ㎖의 마우스(또는 래트) 혈장(원심분리 및 여과됨)에 0.1 ㎖의 덴드리머 용액(식염수 중의 대략 2 ㎎/㎖의 화합물 A 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 볼텍싱(30초)한 후, 37 ℃에서 배양하였다. 다양한 시점에 분취액(0.1 ㎖)을 취하여 ACN(0.2 ㎖, 5% 포름산)에 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 볼텍싱(30초)한 후, 원심 분리(10분, 4 ℃)하고, 여과하고, HPLC((C8 엑스브리지, 3 x 100 ㎜, 구배: 42~50% ACN/H2O)(1분 내지 7분), 50~80% ACN(7분 내지 8분), 80% ACN(8분 내지 11분), 80~42% ACN(11분 내지 12분), 42% ACN(12분 내지 15분), 243 ㎚, 10 mM 포름산암모늄, RT(화합물 A) = 6.7분)에 의해 분석하였다. 마우스 혈장 실험에 있어서, 화합물 A의 양을 화합물 A 표준물질에 대해 정량화하였으며, 접합체 상에 적재된 물질과 방출된 물질을 비교함으로써 방출량(%)을 계산하였다. 래트 혈장 실험에 있어서, 22.5시간에 DGA PEG2200(실시예 7)로부터의 방출을 표준으로서 사용하였으며, 이를 100%으로 설정하였다. 그 결과는 표 12a 및 표 12b에 요약되어 있다.
[표 12a]
Figure pct00083
[표 12b]
Figure pct00084
실시예 15: pH 7.4 및 pH 4.5에서의 덴드리머의 용해성
프로토콜:
1. 10 ㎎의 덴드리머의 무게를 정확하게 측정하여 바이알에 넣는다.
2. 바이알에 완충제의 분취액을 조심스럽게 첨가하여 용해한다. 주석: 분취액의 첨가와 다음 분취액의 첨가 사이에 수분 동안 혼합물을 완만하게 교반하였다. 또한 용해에 도움이 되도록 초음파 처리를 이용하였다.
[표 13]
Figure pct00085
실시예 16: pH 4 및 pH 5에서의 덴드리머의 용해성
수성 완충제에서의 덴드리머의 용해성을 측정하기 위해 육안법을 사용하였다. 데이터에는 단일 실험이 나타나 있다.
McIlvane 완충제(pH 5)는 3.69 g의 인산이나트륨 12수화물 및 1.02 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
McIlvane 완충제(pH 4)는 2.76 g의 인산이나트륨 12수화물 및 1.29 g의 시트르산 일수화물에 50 ㎖의 탈이온수를 첨가함으로써 제조하였다. 탈이온수를 이용하여 용액을 총 부피가 100 ㎖가 되도록 만들었으며, pH를 확인하였다.
1 ㎖의 완충제를 유리 바이알에 첨가하고, 자석 교반기를 첨가하였다. 덴드리머를 교반하면서 바이알에 수회 나눠 첨가하였다. 실시예 6 및 실시예 9의 덴드리머 둘 모두는 약 250 ㎎의 첨가 이후에 완전한 용해가 이루어졌으며, 그 이후 용액은 점성이 너무 높아 적절히 교반되지 않았다. 용해성은 용액 1 g 당 용질의 그램으로서 나타나 있으며, 완충액의 밀도는 1 g/㎖이라고 추정한다.
[표 14]
Figure pct00086
실시예 17: 덴드리머 제형
1. 래트 텔레메트리 연구(rat telemetry study)용 제형
적당량의 동결 건조된 덴드리머를 함유하는 바이알을 선택하였다. 이어서, 대략 0.5 ㎖ 내지 1 ㎖의 인산염 완충 식염수(PBS)를 각각의 바이알에 첨가하였으며, 덴드리머가 용해될 때까지 바이알을 볼텍싱하였다. 각각의 바이알의 내용물을 모으고, 하나의 바이알로 옮겼으며, 나머지 PBS로 세정하여 부피를 맞추었다. 실시예 8은 제외하고, 제형을 실온에서 제조하였다. 비히클에 실시예 8을 분산시키는데 도움이 되도록 실시예 8을 함유하는 제형을 40 ℃로 설정된 수조에서 완만하게 가온하였다. 모든 제형을 즉시, 적어도 제조 30분 이내에 투약하였다. PBS 제형에 대한 요약은 표 15a에 나타나 있다. 요약은
[표 15a]
Figure pct00087
시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제(pH 4)를 제조하였다. 완충제 100 ㎖ 당 1.29 g의 시트르산 일수화물 및 2.76 g의 인산나트륨 이염기성 12수화물의 무게를 측정하여 실린더에 넣었으며, 95 ㎖의 주사용수를 첨가하였다. 비히클을 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 이어서, pH를 측정하였으며, 필요한 경우 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 4로 조절하였다. 주사용수를 이용하여 비히클을 부피에 맞게 만들었다.
적당량의 동결 건조된 덴드리머를 함유하는 바이알을 선택하였다. 이어서, 0.5 ㎖ 내지 1 ㎖의 시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제(pH 4)를 각각의 바이알에 첨가하였으며, 거대분자가 용해될 때까지 필요하면 바이알을 볼텍싱하면서 혼합하였다. 각각의 바이알의 내용물을 모으고, 1회용 바이알로 옮겼으며, 이를 나머지 PBS로 세정하여 부피를 맞추었다. 이들을 즉시, 적어도 제조 30분 이내에 투약하였다.
[표 15b]
Figure pct00088
2. 침전 (용해성) 연구용 제형
시트레이트-포스페이트 완충제의 제조: 하기 방법을 사용하여 시트레이트/포스페이트 완충제를 제조하였다. 적당량의 시트르산 및 인산나트륨 이염기성 12수화물의 무게를 측정하여 100 ㎖ 용량 플라스크에 넣었으며, 95 ㎖의 주사용수를 첨가한 후, 교반(또는 초음파 처리)하였다. 얻어진 용액의 pH는 표적 pH(즉, 4 또는 5)로 조절하였으며, 주사용수를 이용하여 완충제를 부피(즉, 100 ㎖)에 맞게 만들었다.
[표 15c]
Figure pct00089
비히클의 제조: 1% w/v 콜리포어 HS-15(폴리에틸렌글리콜 (15)-하이드록시스테아레이트)의 존재 또는 부재 하에 5% w/v 글루코오스에 의한 1:10 희석을 수행함으로써 희석된 완충 비히클을 제조하기 위해 표 15c에 나타나 있는 시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제를 사용하였다.
시판 중인 5% w/v 글루코오스 용액을 표적 부피의 대략 90%가 되게 첨가하였다. 콜리포어를 함유하는 희석된 완충 비히클에 있어서, 1% w/v와 같은 양의 콜리포어 HS-15를 첨가하였으며, 비히클을 교반하여 콜리포어 HS-15를 용해하였다. 그 후, (필요한 경우) 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH를 표적 pH로 조절하였다. 이어서, 5% w/v 글루코오스를 이용하여 완충제를 부피에 맞게 만들었으며, 이를 기공 크기가 0.22 ㎛인 PVDF 시린지 필터를 이용하여 여과하였다.
제형의 제조: 실시예 6 및 실시예 9를 함유하는 제형(콜리포어 HS-15의 존재 또는 부재)은 희석된 완충 비히클에서 5 ㎖의 규모로 하기 표 15d에 나타나 있는 농도로 2회(n = 2) 제조하였다.
[표 15d]
Figure pct00090
제형을 제조하기 위해, 적당량의 덴드리머의 무게를 측정하여 자석 교반기가 구비된 적절한 용기에 넣었다. 자석 교반기를 가동하면서 희석된 완충 비히클(5% w/v 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4 또는 pH 5))를 첨가하여 표적 부피의 95%를 구현하였다. 투명한 용액이 형성될 때까지, 과도한 거품 생성을 피하면서, 용해에 도움이 되도록 제형을 연속으로 교반하였으며, pH를 조절하였다. 그 후, 희석된 완충 비히클을 이용하여 제형을 부피(5 ㎖)에 맞게 만들었으며, 최종 pH를 기록하였다.
침전 속도론에 대한 평가: 제형을 실온에 저장하고, 빛으로부터 보호하였으며, 관측 가능한 입자성 물질의 존재를 배제하기 위해 0시간, 3시간, 6시간, 24시간, 48시간, 72시간 및 96시간의 시점에 사이데나더(Seidenader) 및 라이트박스(light box)를 이용하여 샘플을 육안으로 평가하였다. 표 15e에는 육안 평가 관찰에 대한 요약이 제공되어 있다.
[표 15e]
Figure pct00091
화합물 A의 매우 낮은 수용성을 고려할 때, 훨씬 더 짧은 시간에 걸친 관찰된 침전이 예상되었다.
3. 독성학 연구용 제형
실시예 6에 대한 독성학 연구용 제형: 5% 글루코오스로 1:10로 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15(폴리에틸렌글리콜 (15)-하이드록시스테아레이트)를 함유하는 시트레이트-포스페이트 완충제(pH 4)에서 실시예 6을 최대 121 ㎎/㎖의 실시예 6의 농도(최대 30 ㎎/㎖의 화합물 A 농도)로 제형화하였다.
시트레이트-포스페이트 완충제의 제조: 적당량의 시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제(pH 4)를 상기 표 14에 나타나 있는 바와 같이 제조하였다.
비히클의 제조: 이전 단락에 나타나 있는 바와 같이, 1% w/v 콜리포어 HS-15의 존재 하에 5% w/v 글루코오스에 의한 1:10 희석을 수행함으로써 (표 15c에 따른) 시트레이트-포스페이트 완충제(pH 4)를 사용하여 희석된 완충 비히클을 제조하였다.
제형의 제조: 5% 글루코오스로 1:10로 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4)를 사용하여 이전 단락에 나타나 있는 바와 같은 실시예 6의 제형을 제조하였다.
실시예 6의 제형은 실온에서 제조하고, 제조 60분 이내에 투약하였다. 4 ㎎/㎖와 25 ㎎/㎖ 사이의 실시예 6(1 ㎎/㎖ 내지 6.2 ㎎/㎖의 화합물 A와 같음)을 함유하는 제형을 제조하였다. 부피는 15 ㎖ 내지 47 ㎖의 범위였다. 입자의 존재를 배제하기 위해, 제형을 육안으로 평가하였다.
실시예 9의 거대분자에 대한 독성학 연구용 제형: 5% 글루코오스로 1:10로 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15(폴리에틸렌글리콜 (15)-하이드록시스테아레이트)를 함유하는 시트레이트-포스페이트 완충제(pH 5)에서 실시예 9를 3.1 ㎎/㎖ 내지 105 ㎎/㎖의 실시예 9의 농도(0.9 ㎎/㎖ 내지 30 ㎎/㎖의 화합물 A 농도와 같음)로 제형화하였다.
시트레이트-포스페이트 완충제의 제조: 이전 단락에 나타나 있는 바와 같이, 100 ㎖의 시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제(pH 5)를 제조하였다.
비히클의 제조: 이전 단락에 나타나 있는 바와 같이, 1% w/v 콜리포어 HS-15의 존재 하에 5% w/v 글루코오스에 의한 1:10 희석을 수행함으로써 (실시예 16b에 따른) 시트레이트-포스페이트(McIlvaine) 완충제(pH 5)를 사용하여 희석된 완충 비히클을 제조하였다.
제형의 제조: 5% 글루코오스로 1:10로 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5)를 사용하여 이전 단락에 나타나 있는 바와 같이 실시예 9의 제형을 제조하였다. 입자의 존재를 배제하기 위해, 제형을 육안으로 평가하였다.
실시예 9의 제형은 실온에서 제조하고, 제조 75분 이내에 투약하였다. 12.5 ㎎/㎖와 100 ㎎/㎖ 사이의 실시예 9(3.6 ㎎/㎖ 내지 28.6 ㎎/㎖의 화합물 A 농도와 같음)을 함유하는 제형을 제조하였다. 부피는 6 ㎖ 내지 18 ㎖의 범위였다.
실시예 18: 래트 및 마우스 효능 연구
효능 연구에 사용된 제형을 하기와 같이 제조하였다:
RS4;11 효능 연구에서의 투약용 실시예 6 및 실시예 9의 거대분자 PBS 제형의 제조 : 적당량의 실시예 6 또는 실시예 9의 무게를 측정하여 용량 플라스크에 넣었다. 10 ㎖의 둘베코(Dulbecco) 인산염 완충 식염수(PBS)를 첨가한 후, 화합물이 완전히 용해될 때까지 제형을 교반하였다. 또한 실시예 17a에서의 래트 텔레메트리 연구용 제형의 제조를 참고한다.
SuDHL-4 효능 연구에서의 투약용 실시예 6의 제형 : 5% 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4)에서 실시예 6의 거대분자를 최대 121 ㎎/㎖의 실시예 6의 농도(최대 30 ㎎/㎖의 화합물 A 농도와 같음)로 제형화할 수 있다.
100 ㎖의 McIlvane 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4)를 제조하였다. 1.29 g의 시트르산 일수화물 및 2.76 g의 인산나트륨 이염기성 12수화물의 무게를 측정하여 바이알에 넣엇으며, 95 ㎖의 주사용수를 첨가하였다. 비히클을 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 이어서, pH를 측정하였으며, 필요한 경우 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 4로 조절하였다. 주사용수를 이용하여 비히클을 부피(100 ㎖)에 맞게 만들었다.
이러한 McIlvane 완충제를 이용하여 희석된 완충 비히클(5% 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4))을 제조하였다. 요구되는 양의 McIlvane 시트레이트/포스페이트 완충제(제조될 총 표적 부피의 10%와 같음)를 적절한 용기에 첨가하였다. 시판 중인 5% 글루코오스 용액을 표적 부피의 대략 90%가 되게 첨가하였다. 1% w/v의 상당의 콜리포어 HS-15를 첨가하였으며, 비히클을 교반하여 콜리포어 HS-15를 용해하였다. pH를 측정하고, (필요한 경우) 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 4.0 ± 0.05로 조절하였다. 이어서, 5% w/v 글루코오스를 이용하여 비히클을 부피에 맞게 만들었다. 필요한 경우, 기공 크기가 0.22 ㎛인 시린지 필터를 이용하여 이를 여과 살균하였다.
보다 많은 양의 투여를 위한 실시예 6의 제형(10 ㎎/㎖의 화합물 A 또는 39 ㎎/㎖의 실시예 6 당량)을 제조하기 위해, 390 ㎎의 실시예 6(100 ㎎의 화합물 A와 같음)을 자석 교반기가 구비된 적절한 용기 내로 옮겼다. 자석 교반기를 가동하면서 희석된 완충 비히클(5% w/v 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4))를 표적 부피의 95%(9.5 ㎖)가 되도록 첨가하였다. 투명한 용액이 형성될 때까지, 과도한 거품의 발생을 피하면서, 용해에 도움이 되도록 제형의 교반을 계속하였다. 이어서, 희석된 완충 비히클을 이용하여 제형을 부피(5 ㎖)에 맞게 만들었으며, pH를 점검하였다. 입자의 존재를 배제하기 위해 제형을 육안으로 평가하였다. 보다 높은 농도로부터 2 ㎎/㎖ 및 6 ㎎/㎖를 제조하였다.
실시예 6의 제형을 실온에서 제조하고, 제조 5분 이내에 투약하였다. 이들의 제조는 앞서 실시예 17(독성학 연구용 제형)에서 개시된 바와 같았다.
SuDHL-4 효능 연구를 위한 실시예 9의 거대분자용 제형 : 5% w/v 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5)에서 실시예 9를 최대 105 ㎎/㎖의 실시예 9의 농도(최대 30 ㎎/㎖의 화합물 A 농도와 같음)로 제형화하였다.
100 ㎖의 McIlvane 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5)를 제조하였다. 1.02 g의 시트르산 일수화물 및 3.69 g의 인산나트륨 이염기성 12수화물의 무게를 측정하여 바이알에 넣었으며, 95 ㎖의 주사용수를 첨가하였다. 비히클을 교반(또는 초음파 처리)하여 용해하였다. 이어서, pH를 측정하였으며, 필요한 경우 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 5로 조절하였다. 주사용수를 이용하여 비히클을 부피(100 ㎖)에 맞게 만들었다.
이러한 McIlvane 완충제를 이용하여 희석된 완충 비히클(5% 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5))을 제조하였다. 요구되는 양의 McIlvane 시트레이트/포스페이트 완충제(제조될 총 표적 부피의 10%와 같음)를 적절한 용기에 첨가하였다. 시판 중인 5% 글루코오스 용액을 표적 부피의 대략 90%가 되게 첨가하였다. 1% w/v의 상당의 콜리포어 HS-15를 첨가하였으며, 비히클을 교반하여 콜리포어 HS-15를 용해하였다. pH를 측정하고, (필요한 경우) 0.1 M HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 5.0 ± 0.05로 조절하였다. 이어서, 5% w/v 글루코오스를 이용하여 비히클을 부피에 맞게 만들었다. 필요한 경우, 기공 크기가 0.22 ㎛인 시린지 필터를 이용하여 이를 여과 살균하였다.
보다 많은 양의 투여를 위한 실시예 9의 제형(10 ㎎/㎖의 화합물 A 또는 37 ㎎/㎖의 실시예 9 당량)을 제조하기 위해, 370 ㎎의 실시예 9(100 ㎎의 화합물 A와 같음)을 자석 교반기가 구비된 적절한 용기 내로 옮겼다. 자석 교반기를 가동하면서 희석된 완충 비히클(5% w/v 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS-15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 4))를 표적 부피의 95%(9.5 ㎖)가 되도록 첨가하였다. 투명한 용액이 형성될 때까지, 과도한 거품의 발생을 피하면서, 용해에 도움이 되도록 교반을 계속하였다. 이어서, 희석된 완충 비히클을 이용하여 제형을 부피(5 ㎖)에 맞게 만들었으며, pH를 점검하였다. 입자의 존재를 배제하기 위해 제형을 육안으로 평가하였다. 보다 높은 농도로부터 2 ㎎/㎖ 및 6 ㎎/㎖를 제조하였다.
실시예 9의 제형을 실온에서 제조하고, 제조 5분 이내에 투약하였다.
RS4;11 이종이식 모델에서의 실시예 6 및 실시예 9의 효능 : 100 ㎕의 총 부피에 존재하는 5 x 106개의 RS4;11 세포를 마우스 우측 옆구리에 피하 접종하였다. 종양의 부피가 대략 350 ㎣에 도달하면, 종양-보유 마우스를 무작위 분류하여 그룹 당 4마리가 되도록 하고, 대조군 비히클(PBS) 또는 처리제로 처리하였다. 도 9는 다양한 방출 속도에 의해 덴드리머가 다양한 효능을 나타낸다는 것을 보여준다. 화합물 A 당량이 30 ㎎/㎏인 실시예 6 및 화합물 A 당량이 10 ㎎/㎏인 실시예 9를 1회 정맥 내 투여하면 화합물 A인 HP-β-CD(10 ㎎/㎏)를 1회 정맥 내 투여할 때와 비교하여 유사하거나 약간 양호한 활성을 나타냈다(퇴화 90% 대비 각각 100% 및 98%).
[표 16]
Figure pct00092
RS4;11 종양의 부피가 대략 400 ㎣ 내지 600 ㎣에 도달하면, 3마리로 이루어진 종양-보유 마우스 그룹을 10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 비히클(PBS) 또는 실시예 6로 정맥 내 1회 투여하여 처리하였다. 종양을 투여 후 다양한 시점에 수집하고, 분석을 위해 가공하였다. 그 결과에 따르면 링커는 개열된 카스파아제 3에 의해 나타나는 바와 같이 유사한 세포자멸성 반응을 유도하며, 반응은 투여 후 16시간 내지 28시간에 절정에 이르는 것으로 나타나 있다(도 10). 화합물 A 당량이 30 ㎎/㎏인 실시예 6(117 ㎎/㎏의 실시예 6)은 가장 높은 CC3 반응을 유도하였다.
도 11은 20 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약된 실시예 9 및 실시예 6(각각 74 ㎎/㎏ 및 78 ㎎/㎏의 덴드리머)은 매주 10 ㎎/㎏로 투약된 HP-β-CD 제형(실시예 2 참조) 중의 화합물 A보다 효능이 약간 더 높다는 것을 보여준다.
또한, 세포사멸(세포자멸)은 개열된 PARP를 사용하여 측정하였다(도 12). HP-β-CD 제형(실시예 2 참조) 중의 화합물 A는 처리 직후(1시간 및 3시간) 개열된 PARP를 유도하는 반면, 실시예 9는 단일 투여 20시간 후에 최대 세포사멸을 유도하였다.
마우스의 RS4;11 이종이식 모델에서의 실시예 5, 실시예 7 및 실시예 8의 효능 : 실시예 5, 실시예 7 및 실시예 8을 PBS에서 제형화하고, RS4;11 이종이식 마우스 모델에서 10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약하였다. 도 13에서는 10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약된 실시예 7은 종양의 퇴화를 유도하는 반면, 10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약된 실시예 5 및 실시예 8은 그만큼 유의한 항종양 활성을 보이지 않는 것으로 증명된다.
Rag2-/- 래트의 RS4;11 이종이식 모델에서의 실시예 6의 효능 : 도 14는 30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약된 실시예 6(117 ㎎/㎏의 거대분자)은 RS4;11 종양의 퇴화를 유발한다는 것을 보여준다. 10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 실시예 6(39 ㎎/㎏의 실시예 6)을 1회 투여하면 종양의 성장이 억제되었다(정체).
실시예 6 및 실시예 9는 SCID 마우스의 SuDHL-4 이종이식 모델에서 리툭시맙에 의한 종양 성장의 억제를 향상시킨다 : 종양 성장을 억제하는 리툭시맙의 활성을 향상시키기 위한 실시예 6 및 실시예 9의 능력을 시험하기 위해 SuDHL-4 이종이식 모델을 이용하였다. 종양이 대략 175 ㎣ 내지 250 ㎣까지 성장하면, 마우스를 하기 그룹으로 무작위 분류하였다:
(1) 비히클 대조군;
(2) 실시예 6 처리군(50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량의 195 ㎎/㎏의 실시예 6; 5주 동안 매주 1회 정맥 내 주사);
(3) 실시예 9 처리군(50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량의 185 ㎎/㎏의 실시예 9; 5주 동안 매주 1회 정맥 내 주사);
(4) 리툭시맙 그룹(10 ㎎/㎏; 5주 동안 매주 1회 복강 내 주사);
(5) 실시예 6(10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 39 ㎎/㎏의 실시예 6) + 리툭시맙;
(6) 실시예 6(30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 117 ㎎/㎏의 실시예 6) + 리툭시맙;
(7) 실시예 6(50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 195 ㎎/㎏의 실시예 6) + 리툭시맙.
(8) 실시예 9(10 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 37 ㎎/㎏의 실시예 9) + 리툭시맙;
(9) 실시예 9(30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 111 ㎎/㎏의 실시예 9) + 리툭시맙;
(10) 실시예 9(50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량, 185 ㎎/㎏의 실시예 9) + 리툭시맙;
종양의 크기는 매주 2회 측정하였으며, 다음과 같이 계산하였다: 종양의 부피 = (A x B2)/2(여기서, A 및 B는 각각 종양의 길이 및 너비(단위: ㎜)임).
그 결과는 도 15에 나타나 있다. 화합물 A 당량이 50 ㎎/㎏인 실시예 6 및 실시예 9(각각 195 ㎎/㎏ 및 185 ㎎/㎏의 덴드리머)는 비히클 대조군과 비교할 때 종양의 성장을 유의하게 억제하였으며, 실시예 6의 거대분자는 화합물 A 당량이 50 ㎎/㎏인 실시예 9(185 ㎎/㎏의 실시예 9)의 거대분자보다 단일 요법으로서 효능이 약간 더 높았다. 표 17에는 억제율(%) 및 퇴화율(%)로서 계산된 종양 성장 억제(TIC) 및 종양 성장 지연(T-C) 값이 요약되어 있다. 상기 계산은 각 그룹의 RTV의 기하 평균에 기초하여 이루어진다.
특정한 날에, 각각의 처리군에 대해 하기 식으로 억제값을 계산한다: 억제율(%) = (CG-TG) * 100/(CG-1)(여기서, "CG"는 대조군의 rtv의 기하 평균을 의미하고, "TG"는 처리군의 상대적 종양 부피(rtv)의 기하 평균을 의미함). "CG"를 계산할 때 처리군에 상응하는 대조군을 이용해야 한다. 억제율이 100%를 초과하면, 하기 식으로 퇴화율을 계산하는 것이 필요하다: 퇴화율 = 1 - TG
TIC 값은 50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량(195 ㎎/㎏의 실시예 6)의 경우에 63.5%이고, 50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량(185 ㎎/㎏의 실시예 9)의 경우에 40.44%이며, 10 ㎎/㎏의 리툭시맙의 경우에 75.27%이었다. 따라서, 50 ㎎/㎏의 화합물 A 당량으로 투약된 실시예 6 및 실시예 9는 이러한 모델에서 활성이 매우 높다. 보다 유의하게는, 화합물 A 당량이 10 ㎎/㎏, 30 ㎎/㎏ 및 50 ㎎/㎏인 실시예 6 및 실시예 9를 리툭시맙(10 ㎎/㎏)과 조합하면 종양의 퇴화가 야기되었다. 또한, 종양의 완전한 퇴화는 이러한 복합 처리 시에 대부분의 동물에서 야기되는 반면, 단일 약제 처리 시에는 어디서도 관찰되지 않았다.
[표 17]
Figure pct00093
실시예 19: 래트에서의 심혈관 텔레메트리 연구
동맥 혈압, 심박동수, QA 간격 및 심전도에 미치는 화합물 A 및 실시예 5, 실시예 6, 실시예 8 및 실시예 9의 효과를 평가하기 위해, 수컷 한-위스터 래트에 데이타 사이언스 인터내셔날(Data Sciences International) 설치류 텔레메트리 송신기를 마취 하에 수술을 통해 이식하였다. 텔레메트리 송신기를 복근 내에 넣었으며, 동맥 혈압 카테터를 복부 대동맥 내에 넣었다. ECG 전극을 검상돌기(xiphoid process)의 배측면에 대해 봉합하고, 전종격(anterior mediastinum)에서 봉합하였다.
텔레메트리 송신기의 이식 이후, 꼬리 정맥을 통한 30분간의 1회 정맥 내 주입량의 화합물 A 또는 실시예 5, 실시예 6 또는 실시예 8을 개별 래트 그룹(화합물 A에 대해 그룹 당 8마리의 수컷 및 각각의 덴드리머에 대해 그룹 당 3마리의 수컷)에 투여하였다. 실시예 9는 꼬리 정맥을 통한 1회 정맥 내 볼루스 주사로서 개별 래트 그룹(그룹 당 3마리 수컷)에 투여하였다. 화합물 A를 0 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏의 투여 수준으로 투여하였다. 실시예 6을 0 ㎎/㎏, 35 ㎎/㎏, 70 ㎎/㎏ 및 105 ㎎/㎏(10 ㎎/㎏, 20 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)의 투여 수준으로 투여하고, 실시예 5 및 실시예 8을 0 ㎎/㎏, 35 ㎎/㎏ 및 105 ㎎/㎏(10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)으로 투여하였으며, 실시예 9를 0 ㎎/㎏, 37 ㎎/㎏ 및 112 ㎎/㎏(10 ㎎/㎏ 및 30 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)으로 투여하였다.
투여 전에 적어도 1시간 동안, 그리고 투여 후에 최대 72시간 동안 홈 케이지(home cage) 아래에 있는 수신기를 통해 심혈관 매개변수를 연속으로 기록하였다. 혈액 샘플을 취하여 화합물 A 및 모든 덴드리머의 혈장 노출 수준을 측정하였으며, 여기서 임상 병리학 및 표적 장기 조직병리학을 위한 제한된 조직을 거대분자 구조체만이 투약된 동물로부터 채취하였다.
화합물 A의 주입은 내약성이 없으며, 총 3마리의 래트가 주입을 시작한지 5시간 이내에 사망한 것으로 밝혀졌다. 덴드리머가 투약된 모든 동물은 예정 종료일까지 생존하였다. 화합물 A의 투여 이후, 수축기 혈압 및 평균 동맥 혈압에서의 이상성 감소(biphasic decrease)는 주입을 시작한지 1.5시간과 16시간 사이에 확인되었으며, 여기에는 주입을 시작한지 2시간과 10시간 사이에 심박동수의 증가가 동반되었다. QRS 진폭의 감소는 또한 주입을 시작한지 1시간 이후로부터 확인되었으며, 이는 기록 기간이 끝날 때에도 여전히 존재하였다. 실시예 6에 대해 심혈관 변화는 120 ㎎/㎏로 투약된 동물에서 투여 후 2시간과 8시간 사이에서 QRS 진폭의 일시적인 감소에 국한되었으며, 이는 투여 후 22시간이 되는 시점까지 완전히 회복되었다. 실시예 6 및 기타 모든 덴드리머는 각각 80 ㎎/㎏ 및 120 ㎎/㎏까지는 어떠한 심혈관 변화도 나타내지 않았다.
혈장 트랜스아미나제는 실시예 6가 80 ㎎/㎏ 이상으로 제공된 동물에서 증가하였다. 실시예 5, 실시예 8 및 실시예 9를 최대 120 ㎎/㎏로 투약한 래트에서는 어떠한 트랜스아미나제 변화도 나타나지 않았다. 모든 덴드리머는 혈소판 감소(thrombocytopenia)를 나타냈으며, 이는 원발성 약리상태와 일치하였다.
실시예 6가 80 ㎎/㎏ 이상일 때의 조직학적 소견으로는 최소 골격근 퇴화/괴사를 들 수 있으며, 심장에서의 소견(최소한의 내피세포 세포자멸) 및 간에서의 소견(최소한의 간세포의 세포자멸)이 120 ㎎/㎏로 투약된 동물에서 관측되었다. 실시예 9는 40 ㎎/㎏ 이상일 때 골격근에서의 조직학적 소견(최소한의 골격근 퇴화)을 나타냈으며, 120 ㎎/㎏일 때만 최소한의 간세포의 세포자멸이 관찰되었다. 실시예 5는 최대 120 ㎎/㎏까지도 어떠한 치료 관련 조직 병리상태를 나타내지 않았으며, 실시예 8에 대한 조직학적 소견은 120 ㎎/㎏일 때만 최소한의 간세포 괴사에 제한되었다.
결론적으로, 이들 데이터에 따르면 화합물 A와 비교할 때 실시예 5, 실시예 6, 실시예 8 및 실시예 9의 심혈관 및 간 조직학적 프로파일이 개선되는 것으로 나타난다.
[표 18]
Figure pct00094
실시예 20: 래트 및 개에서의 최대 내약성 용량 독성 연구
실시예 6을 이용한 최대 내약성 용량(MTD) 연구를 래트 및 개에서 수행하였다. 실시예 6을 125 ㎎/㎏, 200 ㎎/㎏, 225 ㎎/㎏ 및 250 ㎎/㎏(31 ㎎/㎏, 50 ㎎/㎏, 56 ㎎/㎏ 및 62 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)의 투여 수준으로 정맥 내 볼루스에 의해 개별 한-위스터 수컷 또는 암컷 래트 그룹(그룹 당 최대 4마리)에 투여하였다. 래트에서의 실시예 6의 MTD는 225 ㎎/㎏(56 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)이었으며, 이는 화합물 A 단독과 비교하여 5배 개선된 것이다.
정맥 내 볼루스에 의해 한 마리의 수컷 및 한 마리의 암컷 비글견에 실시예 6을 매주 투여량을 4 ㎎/㎏, 8 ㎎/㎏, 12 ㎎/㎏, 20 ㎎/㎏, 30 ㎎/㎏ 및 45 ㎎/㎏(1 ㎎/㎏, 2 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏, 5 ㎎/㎏, 7.5 ㎎/㎏ 및 11 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)으로 증가하면서 투약하였다. 개에서의 실시예 6의 MTD는 45 ㎎/㎏(11 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)이었으며, 이는 화합물 A 단독과 비교하여 11배 개선된 것이다.
실시예 9를 이용한 최대 내약성 용량 연구를 래트에서 수행하였다. 정맥 내 볼루스에 의해 실시예 9를 125 ㎎/㎏, 250 ㎎/㎏, 500 ㎎/㎏, 1000 ㎎/㎏ 및 1,500 ㎎/㎏(9 ㎎/㎏, 72 ㎎/㎏, 145 ㎎/㎏, 290 ㎎/㎏ 및 435 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)의 투여 수준으로 개별 한-위스터 수컷 래트 그룹(그룹 당 3마리)에 투여하였다. 래트에서의 실시예 9의 MTD는 1000 ㎎/㎏(290 ㎎/㎏의 화합물 A 당량)이며, 이는 화합물 A 단독과 비교하여 29배 개선된 것이다.
결론적으로, 이들 데이터에 따르면 화합물 A 단독과 비교할 때 실시예 6 및 실시예 9의 최대 내약성 용량이 개선되는 것으로 나타난다.
실시예 21: 인간 소세포 폐암 종양 모델에서의 단일 약제 및 조합에 의한 생체 내 항종양 활성
실시예 9 및 AZD2014(하기에 나타나 있는 mTOR 억제제인 비스투세르팁)로는 NCI-H1048 종양-보유 마우스에서 단일 약제 및 조합에 의한 항종양 활성을 유도하였다(도 18). 실시예 9를 103 ㎎/㎏(30 ㎎/㎏의 화합물 A와 같음)으로 매주(qw) 정맥내 투여하면 76% TGI의 유의한 항종양 활성이 야기되었다(p < 0.05). mTOR 억제제인 AZD2014를 15 ㎎/㎏으로 매일(qd) 투여하면 84% TGI의 유의한 항종양 활성이 야기되었다(p < 0.05). AZD2014와 실시예 9의 조합은 91%의 종양 퇴화를 초래하였다(단일 약제 활성 대비 p < 0.05).
4.5% w/v 글루코오스를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5.0)에서 실시예 9를 제형화하였으며 5 ㎖/㎏의 부피로 정맥 내(iv) 투약하였다. AZD2014를 0.5% 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스/0.1% 트윈 80에서 제형화하고, 10 ㎖/㎏의 부피로 경구 투약하였다. 5 x 106개의 NCI-H1048 종양 세포를 C.B.-17 SCID 암컷 마우스의 우측 옆구리에 0.1 ㎖의 부피(50% 마트리겔 함유)로 피하 주사하였다. 종양 부피(캘리퍼로 측정함)는 하기 식으로 계산하였다: 길이(㎜) x 너비(㎜)2 x 0.52. 효능 연구를 위해, 종양 부피에 기초하여 마우스를 무작위 분류하였으며, 대조군과 처리군 사이에서 종양 부피의 차이를 비교함으로써 성장 억제를 평가하였다. 평균 종양 부피가 대략 124 ㎣에 도달했을 때 투약을 시작하였다.
Figure pct00095
실시예 22: 인간 DLBCL 모델에서의 단일 약제 및 조합에 의한 생체 내 항종양 활성
5 x 106개의 OCI-Ly10 종양 세포를 C.B.-17 SCID 암컷 마우스의 우측 옆구리에 0.1 ㎖의 부피(50% 마트리겔 함유)로 피하 주사하였다. 실시예 9를 5% 글루코오스로 1:10 희석하고 1% w/v 콜리포어 HS15를 함유하는 시트레이트/포스페이트 완충제(pH 5.0)에서 제형화하고, 5 ㎖/㎏의 부피 및 103 ㎎/㎏(30 ㎎/㎏의 API)의 투여량으로 매주 정맥 내(iv) 투여로서 투약하였다. 아칼라브루티닙을 0.5% 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스/0.2% 트윈 80에서 제형화하고, 10 ㎖/㎏의 부피 및 12.5 ㎎/㎏의 투여량으로 경구(po) 투여로서 1일 2회(bid) 투약하였다. 연구 기간 동안 종양 부피(캘리퍼로 측정함), 동물 체중 및 종양 상태를 매주 2회 기록하였다. 종양의 부피는 하기 식으로 계산하였다: 길이(㎜) x 너비(㎜)2 x 0.52. 효능 연구를 위해, 대조군과 처리군 사이에서 종양 부피의 차이를 비교함으로써 치료를 시작할 때부터 성장 억제를 평가하였다. 평균 종양 크기가 대략 166 ㎣에 도달했을 때 투약을 시작하였다.
도 19에 도시된 바와 같이, 아칼라브루티닙과 실시예 9를 조합하면 OCI-Ly10 DLBCL 이종이식 모델에서의 유의한 생체 내 항종양 활성이 야기되었다. 1일 2회 경구 투여된 12.5 ㎎/㎏의 아칼라브루티닙과 함께 103 ㎎/㎏의 실시예 9(30 ㎎/㎏의 화합물 A)를 매주 정맥 내 투여하면 치료 시작 후 10일째 날에 8마리의 종양-보유 마우스 중 8마리에서 완전한 퇴화가 야기되었다. 완전한 퇴화는 치료가 끝난 이후에도 유지되었다(3주간의 치료와 35일간의 추적 조사(follow-up)). 이에 반해, 실시예 9 또는 아칼라브루티닙의 단일 약제는 상대적으로 적절한 단일 약제 활성을 나타냈으며, 각각 대략 64% 및 58%의 종양 성장 억제(TGI)에 도달하였다.
Figure pct00096

Claims (67)

  1. 화학식 I의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00097

    (상기 식에서,
    코어는
    Figure pct00098
    이고;
    *는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
    b는 2이고;
    BU는 구성 단위이고;
    BUx는 x 세대의 구성 단위이며, 이때 화학식 I의 덴드리머의 x 세대 내의 구성 단위의 총 개수는 2(x)와 같고, 화학식 I의 덴드리머 내의 BU의 총 개수는 (2x-1)b와 같고; BU는 하기 구조를 갖고:
    Figure pct00099

    #은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
    +는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
    W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
    Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
    PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
    L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00100

    (상기 식에서,
    A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
    Figure pct00101
    는 BUx의 아민 모이어티에 대한 부착점임);
    단 (c + d)는 (2x)b 이하이고, d는 1 이상이고;
    단 (c + d)가 (2x)b 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 [(2x)b] - (c + d)임).
  2. 제1항에 있어서, b는 2이고, x는 5인 것인 덴드리머.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, PM은 PEG900-1200인 것인 덴드리머.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  5. 제2항에 있어서, PM은 PEG1800-2400인 것인 덴드리머.
  6. 제5항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  7. 제5항에 있어서, A는 -(CH2)-인 것인 덴드리머.
  8. 제5항에 있어서, A는 -S-인 것인 덴드리머.
  9. 제5항에 있어서, A는 -N(CH3)인 것인 덴드리머.
  10. 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,000 Da과 약 2,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  11. 제10항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,150 Da의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  12. 화학식 II의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 II]
    Figure pct00102

    (상기 식에서,
    b는 2이고;
    코어는
    Figure pct00103
    이고;
    *는 (BU1)의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고;
    BU는 구성 단위이고, BU의 개수는 62와 같으며; 이때 BU는 하기 구조를 갖고:
    Figure pct00104

    #은 코어의 아민 모이어티 또는 BU의 아미노 모이어티에 대한 공유 부착을 나타내고, +는 BU의 카르보닐 모이어티에 대한 공유 부착 또는 W 또는 Z에 대한 공유 부착을 나타내고;
    W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
    Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
    PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
    L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이고; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00105

    (상기 식에서,
    A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
    Figure pct00106
    는 BU5의 아민 모이어티에 대한 공유 부착을 나타냄);
    단 (c + d)는 64 이하이고, d는 1 이상이고;
    단 (c + d)가 64 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)임).
  13. 제12항에 있어서, PM은 PEG900-1200인 것인 덴드리머.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  15. 제12항에 있어서, PM은 PEG1800-2400인 것인 덴드리머.
  16. 제15항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  17. 제15항에 있어서, A는 -(CH2)-인 것인 덴드리머.
  18. 제15항에 있어서, A는 -S-인 것인 덴드리머.
  19. 제15항에 있어서, A는 -N(CH3)인 것인 덴드리머.
  20. 제15항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,000 Da과 약 2,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  21. 제20항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,150 Da의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  22. 화학식 III의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 III]
    Figure pct00107

    (상기 식에서,
    코어는
    Figure pct00108
    이고;
    D는
    Figure pct00109
    이고;
    AP는 다른 구성 단위에 대한 부착점이고;
    W는 독립적으로 (PM)c 또는 (H)e이고;
    Z는 독립적으로 (L-AA)d 또는 (H)e이고;
    PM은 PEG900-1200 또는 PEG1800-2400이고;
    L-AA는 활성제에 공유 부착되는 링커이며; 이때 L-AA는 하기 화학식을 갖고:
    Figure pct00110

    상기 식에서,
    A는 -N(CH3), -O-, -S- 또는 -CH2-이고;
    단 (c + d)가 64 미만인 경우 임의의 나머지 W 및 Z 기는 (H)e이며, 이때 e는 64 - (c + d)이고; d는 1 이상임).
  23. 제22항에 있어서, PM은 PEG900-1200인 것인 덴드리머.
  24. 제23항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  25. 제22항에 있어서, PM은 PEG1800-2400인 것인 덴드리머.
  26. 제25항에 있어서, A는 -O-인 것인 덴드리머.
  27. 제25항에 있어서, A는 -(CH2)-인 것인 덴드리머.
  28. 제25항에 있어서, A는 -S-인 것인 덴드리머.
  29. 제25항에 있어서, A는 -N(CH3)인 것인 덴드리머.
  30. 제25항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,000 Da과 약 2,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  31. 제30항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,150 Da의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, c는 25와 약 32 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  33. 제32항에 있어서, c는 29와 32 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  34. 제33항에 있어서, c는 29 또는 30인 것인 덴드리머.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, d는 25와 32 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  36. 제35항에 있어서, d는 29와 32 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  37. 제36항에 있어서, d는 32인 것인 덴드리머.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, (c + d)는 50과 64 사이의 정수와 같은 것인 덴드리머.
  39. 제38항에 있어서, (c + d)는 58과 64 사이의 정수와 같은 것인 덴드리머.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, e는 0과 14 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  41. 제40항에 있어서, e는 0과 6 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  42. 제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, L-AA는
    Figure pct00111
    인 것인 덴드리머.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, BU는
    Figure pct00112
    인 것인 덴드리머.
  44. 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 코어는
    Figure pct00113
    인 것인 덴드리머.
  45. 화학식 IV의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 IV]
    Figure pct00114

    (상기 식에서, Y는 PEG1800-2400 또는 H이고;
    Q는 H 또는 L-AA이며, 여기서 L-AA는 하기 구조를 갖고:
    Figure pct00115

    A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
  46. 화학식 V의 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 V]
    Figure pct00116

    (상기 식에서,
    Y는 PEG1800-2400 또는 H이고;
    Q는 H 또는 L-AA이며, 이때 L-AA는 하기 구조를 갖고:
    Figure pct00117

    A는 -S- 또는 -N(CH3)이며, 단 PEG1800-2400과 L-AA의 합이 64 미만인 경우 나머지 Q 및 Y 모이어티는 H이며, 단 적어도 하나의 Q는 L-AA임).
  47. 제45항 또는 제46항에 있어서, A는 -S-인 것인 덴드리머.
  48. 제45항 또는 제46항에 있어서, A는 -N(CH3)인 것인 덴드리머.
  49. 제45항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG1800-2400과 L-AA의 합은 50과 64 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  50. 제49항에 있어서, 상기 PEG1800-2400과 L-AA의 합은 58과 64 사이의 정수인 것인 덴드리머.
  51. 제45항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 덴드리머는 25개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는 것인 덴드리머.
  52. 제51항에 있어서, 상기 덴드리머는 29개와 32개 사이의 PEG1800-2400을 갖는 것인 덴드리머.
  53. 제45항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 덴드리머는 25개와 32개 사이의 L-AA를 갖는 것인 덴드리머.
  54. 제53항에 있어서, 상기 덴드리머는 29개와 32개 사이의 L-AA를 갖는 것인 덴드리머.
  55. 제45항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 14개 사이의 수소를 갖는 것인 덴드리머.
  56. 제55항에 있어서, 상기 덴드리머는 Q 및/또는 Y 위치에 0개와 6개 사이의 수소를 갖는 것인 덴드리머.
  57. 제45항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG는 약 2,000 Da과 약 2,200 Da 사이의 평균 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  58. 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PEG는 약 1.00과 1.10 사이의 PDI를 갖는 것인 덴드리머.
  59. 제58항에 있어서, 상기 PEG는 약 1.05의 PDI를 갖는 것인 덴드리머.
  60. 제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 덴드리머는 약 90 kDa과 120 kDa 사이의 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  61. 제60항에 있어서, 상기 덴드리머는 약 103 kDa과 107 kDa 사이의 분자량을 갖는 것인 덴드리머.
  62. 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, AA는 화합물 A인 것인 덴드리머:
    [화합물 A]
    Figure pct00118
  63. 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 따른 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 약학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물.
  64. 암을 치료하는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 개체에게 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 따른 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료하는 방법.
  65. 암을 치료하는데 사용하기 위한 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 따른 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  66. 암을 치료하기 위한 약물을 제조하는데 사용하는데 있어서 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 따른 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
  67. 암을 치료하기 위한 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 따른 덴드리머 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학 조성물.
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