KR20190070946A - 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 - Google Patents

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KR20190070946A
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acid
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일레인 퍼거슨
데이비드 윌리엄 토마스
아르네 데센
필립 라이
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알지파마 에이에스
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Abstract

본 발명은 직접적인 공유결합 또는 공유 분자 링커를 통해 적어도 하나의 알기네이트 올리고머에 공유적으로 연결된 바시트라신-부류 항생제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 거울상이성질체 또는 활성 대사물을 포함하는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 제공한다. 또한 상기 콘주게이트의 제조방법, 상기 콘주게이트를 포함하는 약제학적 조성물 및 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험이 있는 대상체에서 박테리아 감염의 치료 또는 예방을 위한 방법에서의 이들의 용도가 제공된다.

Description

바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트
본 발명은 유리한 특성을 갖는 바시트라신-부류 항생제의 신규한 개질 형태를 제공한다. 특별히, 바시트라신-부류 항생제를 알기네이트 올리고머와의 콘주게이트로 제공함으로써, 전형적으로 비콘주게이트된 형태에서는 그램-양성 박테리아에 제한되는 항생제의 활성의 스펙트럼이 그램-음성 박테리아를 포함하도록 놀랍게도 넓어질 수 있다. 따라서 본 발명은 박테리아 감염의 치료 또는 예방에 있어서 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 사용하는 의료적 사용 및 방법을 제공하는 것에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 본 발명의 콘주게이트를 제조하는 방법을 제공한다.
공지된 바시트라신-부류 항생제의 치료학적 사용은, 이러한 항생제가 그램 음성 박테리아에 대해서는, 있다 해도, 단지 매우 제한된 효능을 갖기 때문에, 현재 그램 양성 박테리아로의 감염의 치료에 제한된다. 실험적으로 관찰될 수 있는 그램 음성 박테리아에 대한 임의의 효과가 전형적으로 너무 작아서, 치료 효과를 발휘하는데 필요한 양이 허용될 수 없는 부작용을 야기할 수 있다. 본 발명에 이르러 알기네이트 올리고머를 바시트라신-부류 항생제에 공유적으로 콘주게이팅하는 것이 그램 음성 박테리아를 포함하도록 박테리아 종에 대한 치료학적으로 유용한 활성의 스펙트럼을 넓히는 것으로 관찰되었다. 즉 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 그램 음성 및 그램 양성 박테리아 둘 다에 대해 치료학적으로 유용한 항균 효능을 갖는 신규한 화학적 독립체의 부류이다. 따라서 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 동물 대상체에서 감염의 치료 또는 예방을 위한 개선된 치료제를 나타낸다. 바시트라신-부류 항생제는 박테리아 세포 벽의 합성을 억제하는 환형 폴리펩타이드 항생제의 잘 알려지고 잘 특성화된 부류이다(Ming, L-J., et al., 2002, Journal of Inorganic Chemistry, Vol 91(1):46-58, 이것은 전문이 본원에 참고로 편입된다). 바시트라신은 초기에 바실러스 서브틸리스 및 바실러스 리케니포르미스의 배양물로부터 단리되었으며 그 이래로 이 단리물은 구조적으로 유사한 도데카펩타이드 동류물의 복합 혼합물인 것으로 밝혀졌다. 이러한 단리물 중에서 가장 보편적인 동류물은 지금까지 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2 ,D3, E, F, G, H1, H2, H3, I1, I2, I3, 및 X로 칭해진다. 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3 및 E가 가장 큰 항생제 효능을 갖는 것을 간주되며 천연 바시트라신 제제는 전형적으로 바시트라신 A 및 바시트라신 B로 주로 이루어진다.
바시트라신-부류 항생제는 일반적으로 측쇄 환형 도데카펩타이드, 더 구체적으로 펩타펩타이드 쇄를 갖는 헵타환형 헵타이드로 기재될 수 있으며, 이것은 주로 박테리아 세포 벽 합성의 억제 덕분인 것으로 믿어지는 항생제 효능을 입증한다. 더 구체적으로, 바시트라신-부류 항생제는 운데카프레닐 피로포스페이트와 결합하여 펩티도글리칸 합성 동안 이러한 당 담체의 재순환을 방지하고, 이것이 박테리아 세포 벽 합성을 억제하는 것으로 믿어진다. 그램 양성 종은 90% 정도로 많은 펩티도글리칸을 함유하는 세포 벽을 가질 수 있는 반면 그램 음성 종은 10% 정도로 적게 가질 수 있다. 이것이 그램 음성 및 그램 양성 종에 대한 바시트라신의 분명한 선택적 항균 효과를 설명하는 것으로 믿어진다. 항균 활성은 이가 금속 양이온, 예를 들어 Zn2 +, Mg2 +, Mn2 +, 및 Co2 +와의 착화에 따라 좌우된다. 이와 같이, 각종 금속 킬레이트화 그룹을 지니는 유도체가 제안된 바 있다(WO 97/47313).
기능적으로, 부류는 그램 양성 박테리아, 특히 스타필로코커스, 스트렙토코커스 , 바실러스 , 미크로코커스 및 클로스트리듐을 포함하는 그램-양성 바실러스 및 코커스에 대해 매우 효과적이다. 이와 달리, 그램 음성 박테리아에 대한 효능은 매우 제한되며 통상적으로 치료학적 효과를 위해 필요한 양이 전형적으로 허용되지 않는 부작용과 관련되는 정도로 제한된다. 그러나 전신 사용은 독성 문제(즉 바시트라신-부류 항생제가 투여되는 대상체 또는 "숙주"에 독성, 즉 "숙주 독성"), 특히 신독성과 관련된다. 따라서, GI 감염을 치료하기 위한 국소화된 국소 사용 및 경구 사용 (바시트라신은 GI 관으로부터 잘 흡수되지 않는다)은 덜 문제가 된다.
신규한 항생제 및 또한 기존 항생제를 보다 유연하게 사용할 수 있는 방법에 대해 계속해서 요구되고 있다.
알기네이트 올리고머는 문헌에 길게 기재되어 있다. 간단히, 알기네이트는 (1-4) 연결된 β-D-만누론산(M) 및/또는 그것의 C-5 에피머 α-L-굴루론산(G)의 선형 폴리머이다. 알기네이트의 일차 구조는 크게 변할 수 있다. 교대 M 및 G 잔기의 블럭 및 단일 M 또는 G 잔기가 이들 블럭 구조 사이 공간에서 발견될 수 있기 때문에 M 및 G 잔기는 인접 M 또는 G 잔기의 단일중합체 블럭으로서 조직될 수 있다. 알기네이트 분자는 이들 구조 중의 일부 또는 전부를 포함할 수 있으며 이러한 구조는 폴리머 전반에 걸쳐 균일하게 분포되지 않을 수 있다. 극단적으로, 굴루론산의 단일중합체 (폴리굴루로네이트) 또는 만누론산의 단일중합체 (폴리만누로네이트)가 존재한다. 알기네이트 올리고머는 전형적으로 천연 공급원으로부터 큰 고분자량 폴리머 (예를 들어 300,000 내지 500,000 달톤 범위의 평균 분자량)로서 단리된 알기네이트 폴리머로부터 수득될 수 있다. 이러한 큰 알기네이트 폴리머는, 예를 들어 화학적 또는 효소적 가수분해에 의해 분해되거나, 또는 파손되어 더 낮은 분자량의 알기네이트 구조를 생성할 수 있다.
실시예에서 나타낸 바와 같이, 본 발명에 이르러 알기네이트 올리고머에의 바시트라신-부류 항생제의 공유 콘주게이션이 그램-음성 박테리아에 대해 항균 효능을 갖는 신규한 화학적 독립체를 생성하는 것으로 밝혀졌다.
따라서, 제1 양태에서 본 발명은 직접적인 공유결합 또는 공유 분자 링커를 통해 적어도 하나의 알기네이트 올리고머에 공유적으로 연결된 바시트라신-부류 항생제를 포함하는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 제공한다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 또한, 화학식 I로 기재될 수 있다:
[화학식 I]
B-(L-A)n
위의 화학식 I에서,
B-는 바시트라신-부류 항생제이고, L is 직접적인 공유결합 또는 공유 분자 링커이고, -A는 알기네이트 올리고머이고 n은 1 10, e.g. 1 내지 9, 1 내지 8, 1 내지 7, 1 내지 6, 1 내지 5, 1 내지 4, 1 내지 3, 또는 2 또는 1의 정수이다.
본 발명에 따르면 바시트라신-부류 항생제는 항균 효능을 입증하는 환형 도데카펩타이드로서 광범위하게 정의되며 여기서 상기 펩타이드는 펩타펩타이드 측쇄를 갖는 헵타환형 펩타이드로 이루어진다. 자연 발생 바시트라신 또는 완전 및 반-합성 형태를 포함한, 항균 효능을 보유하는 이의 기능적으로 동등한 유도체가 본원에서 구체적으로 고려된다. 따라서, 예를 들어, 특히, 문헌[Ming, L-J., et al., supra, and Economou, NJ,. et al, 2013, Vol 110, 14207-14212]에 기재된 바와 같이 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2 ,D3, E, F, G, H1, H2, H3, I1, I2, I3, 및 X가 용어 바시트라신-부류 항생제에 포함된다. 기능적으로 동등한 유도체는 특히 제WO 97/47313호, 제WO 2011/051073호 및 제WO 2011/051071호에 기재되어 있다.
예로써 바시트라신-부류 항생제는 화학식 II로 나타내어질 수 잇다:
[화학식 II]
Figure pct00001
위의 화학식 II에서,
Leu는 류신이고; Glu는 글루탐산이고; Lys는 라이신이고; Orn는 오르니틴이고; Phe는 페닐알라닌이고; His는 히스티딘이고; Asp는 아스파르트산이고; Asn는 아스파라긴이고;
Y는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고;
Z는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고;
X는 W[1]-Cys[2] 또는 V[1]-Thz[2]이고; 여기서
W는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고 Cys는 시스테인이고;
V는 H2N-C(R)H-이고
여기서, R은 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신의 α 측쇄이고;
Thz는 V에 2' 커플링되고 Leu[3]의 α-탄소에 4' 커플링된 티아졸린 환(
Figure pct00002
)이다.
화학식 II에서 Lys[6]의 ε-아민은 펩타이드 결합에 의해 Asn[12]의 α-카복실 그룹에 커플링된다.
본 발명에 따르면 바시트라신-부류 항생제에 대한 언급은 화학식 II의 항균 유도체, 즉, 바시트라신 A1 및/또는 A2의 항균 효능을 보유하는 (예를 들어 효능의 적어도 70%, 80%, 90% 또는 95%를 갖는) 기능적으로 동등한 유도체로 확대되며, 여기서 아미노산 Leu[3], Glu[4], Orn[7], Phe[9], His[10] 또는 Asp[ 11 중의 하나 이상은 천연 또는 비-유전자적으로 인코딩된 아미노산, e.g. 류신, 트레오닌, 산, 페닐알라닌, 아르기닌, 히스티딘, 라이신, 아스파라긴, 세린, 시스테인, 호모라이신, 오르니틴, 디아미노부티르산 (예를 들어 α,γ-디아미노부티르산), 디아미노피멜산, 디아미노프로피온산, 호모아르기닌, 트리메틸리신, 트리메틸오르니틴, 4-아미노피페리딘-4-카복실산, 4-아미노-1-카밤이미도일피페리딘-4-카복실산 및 4-구아니디노페닐알라닌으로부터 선택될 수 있는 또 다른 아미노산 잔기로 대체된다.
본 발명에 따르면 바시트라신-부류 항생제에 대한 언급은 화학식 II의 항균 등가물, 즉, 바시트라신 A1 및/또는 A2의 항균 효능을 보유하는 (예를 들어 효능의 적어도 70%, 80%, 90% 또는 95%를 갖는) 기능적으로 등기물로 확대되며, 여기서 Thz는 불소, 염소 또는 브롬, 또는 직쇄 또는 측쇄 지방족 불포화 또는 포화 C1-C4 알킬 또는 알콕시 그룹, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, 부틸, 이소-부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌, 하이드록시, 메톡시, 에틸옥시, 프로필옥시, 이소-프로필옥시, 부틸옥시 그룹, 이소-부틸옥시, 2급-부틸옥시, 3급-부틸옥시 또는 이의 할로겐 치환된 버전으로 치환된다.
바람직하게는 치환하는 아미노산은 양이온성 측쇄를 갖는 아미노산, 즉 종양 세포의 세포내 pH에서, 예를 들어 대략 pH 7.4에서 순 양전하를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산이다. 유전자적으로 코딩된 아미노산 중에서 이것은 라이신 및 아르기닌을 포함하지만 그것의 측쇄 상에 그와 같은 순 양전하를 지니는 임의의 비-유전자적으로 코딩된 또는 변형된 아미노산, 예를 들어 구아니디노 그룹 또는 아민 그룹 또는 또 다른 양이온성 모이어티를 갖는 측쇄를 지닌 아미노산, 예를 들어 측쇄의 임의의 수소가, 양성자화 수소를 제외하고는, 할로겐 원자, 예를 들어 불소, 염소 또는 브롬, 또는 선형, 분지형 지방족 불포화된 또는 포화된 C1-C4 알킬 또는 알콕시 그룹, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, 부틸, 이소-부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, 에틸렌, 프로필렌, 부틸렌, 하이드록시, 메톡시, 에틸옥시, 프로필옥시, 이소-프로필옥시, 부틸옥시 그룹, 이소-부틸옥시, 2급-부틸옥시, 3급-부틸옥시 또는 이의 할로겐 치환된 버전으로 치환된 라이신, 및 아르기닌의 유도체가 사용될 수 있다. 양이온성 측쇄를 갖는 적합한 비-유전자적으로 코딩된 아미노산은 호모라이신, 오르니틴, 디아미노부티르산, 디아미노피멜산, 디아미노프로피온산 및 호모아르기닌 뿐만 아니라 트리메틸리신 및 트리메틸오르니틴, 4-아미노피페리딘-4-카복실산, 4-아미노-1-카밤이미도일피페리딘-4-카복실산 및 4-구아니디노페닐알라닌을 포함한다.
아미노산은 아민 그룹, 카복실산 그룹 및 이들 두 개의 그룹을 분리하는 적어도 1개의 탄소를 함유하는 분자이다. 다른 그룹이 분리하는 탄소(들)에 부착도리 수 있다. 이들 그룹을 "측쇄"로 칭할 수 있지만 가장 간단하게는 측쇄는 수소 (글리신)일 수 있다. 단일 분리 탄소를 갖는 아미노산을 "α-아미노산"이라고 칭하며 일반식 H2NCR1R2COOH를 갖고, 여기서 R1 및 R2는 치환체 그룹이고, 즉 측쇄이다. 분리 탄소는 α-탄소로서 공지된다. 아미노 및 카복실산 그룹이 하나 이상의 단일 탄소 원자에 의해 분리된 다른 유형의 아미노산이 존재하며; 예를 들어, β-아미노산에서는 아미노기가 두 개의 탄소 원자에 의해 카복실산 그룹으로부터 분리된 탄소 원자, γ-아미노산에서는 세 개의 탄소 원자가 아미노 및 카복실산 그룹을 분리한다. 바람직하게는 본 발명에서 사용하기 위한 바시트라신-부류 항생제의 아미노산은 α, β 또는 γ-아미노산, 더 바람직하게는 α 또는 β-아미노산 및 가장 바람직하게는 α-아미노산일 것이다.
글리신을 제외한 아미노산은 두 개 또는 그 초과의 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 특히 글리신 이외의 아미노산의 α-탄소는 키랄 중심이며 그래서 각각의 아미노산의 두개의 거울상이성질체 형태를 야기한다. 이들 형태를 종종 D 및 L 형태, 예를 들어 D-알라닌 및 L-알라닌이라고 칭한다. 추가의 키랄 중심을 갖는 아미노산은 네 개 또는 그 초과의 가능한 입체이성질체로 존재할 것이며, 예를 들어 트레오닌은 두 개의 키랄 중심을 가지며 그래서 네 개의 입체이성질체 형태 중의 하나로 존재할 수 있다. 아미노산의 임의의 입체이성질체 형태가 본 발명에서 사용하기 위한 바시트라신-부류 항생제 분자로 존재할 수 있다. 본 발명을 기술할 목적으로, 용어 "비-유전자적으로 인코딩된"이 아미노산에 적용되는 경우, 이것은 자연에서 L 형태로 발생하는 아미노산의 D 형태를 포함하지 않는다.
바람직한 구현예에서 바시트라신-부류 항생제는 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3, E, F, G, H1, H2, H3, I1, I2, I3, 및 X로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3 및 E로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 바시트라신 A (A1 및/또는 A2) 및 바시트라신 B (B1 및/또는 B2)로부터 선택된다. 이들 바시트라신은 화학식 III으로 나타내어질 수 있다:
[화학식 III]
Figure pct00003
위의 화학식 III에서,
Figure pct00004
Figure pct00005
본 발명에 따르면 바람직한 바시트라신-부류 항생제는 상기 바로 위에 언급된 바시트라신의 기능적으로 동등한 유도체, 즉 문제의 바시트라신의 항균 효능을 보유하는 (예를 들어 효능의 적어도 70%, 80%, 90% 또는 95%를 갖는) 기능적 등기물이다.특정 구현예에서 바시트라신-부류 항생제는 이가 금속 양이온, 예를 들어 Zn2+, Mg2 +, Mn2 +, 및 Co2 +와 착화될 수 있다.
특정 구현예에서 바시트라신-부류 항생제에서 하나 이상의 유리 아민 그룹은 변형에 의해, 예를 들어 설포메틸화에 의해 마스킹될 수 있다.
전술한 바와 같이, 알기네이트는 전형적으로 훨씬 높지만 적어도 35,000 달톤의 평균 분자량, 즉 대략 175 내지 대략 190개 단량체 잔기의 폴리머로서 전형적으로 발생할 수 있다. 본 발명에 따르는 알기네이트 올리고머는, 다른 한편으로, 2 내지 100개 단량체 잔기, 더욱 전형적으로 3, 4, 5 또는 6 내지 100개를 함유할 것이며, 2, 3, 4, 5 또는 6 내지 75, 2, 3, 4, 5 또는 6 내지 50, 2, 3, 4, 5 또는 6 내지 40, 2, 3, 4, 5 또는 6 내지 35 또는 2, 3, 4, 5 또는 6 내지 30개 잔기를 함유할 수 있다. 따라서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 알기네이트 올리고머는 전형적으로 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 20,000 달톤, 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 15,000 달톤, 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 10,000 달톤, 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 8000 달톤, 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 7000 달톤, 또는 350, 550, 700, 900 또는 1000 내지 6,000 달톤의 평균 분자량을 가질 것이다.
대안적으로, 알기네이트 올리고머는 2 내지 100, 바람직하게는 2 내지 75, 바람직하게는 2 내지 50, 더 바람직하게는 2 내지 40, 2 내지 35, 2 내지 30, 2 내지 28, 2 내지 25, 2 내지 22, 2 내지 20, 2 내지 18, 2 내지 17, 2 내지 15 또는 2 내지 12의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
다른 대표적인 범위 (잔기의 수에 대해, DP 또는 DPn이든)는 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 11 중의 어느 하나 내지 50, 45, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13 또는 12 중의 어느 하나를 포함한다.
다른 대표적인 범위 (잔기의 수에 대해, DP 또는 DPn이든)는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15 중의 어느 하나 내지 50, 45, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17 또는 16 중의 어느 하나를 포함한다.
다른 대표적인 범위 (잔기의 수에 대해, DP 또는 DPn이든)는 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18 중의 어느 하나 내지 50, 45, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20 또는 19 중의 어느 하나를 포함한다.
일부 구현예에서 더 큰 크기의 콘주게이트를 생성하도록 더 큰 알기네이트 올리고머를 선택하는 것이 유리할 수 있다. 더 큰 콘주게이트는 대상체 내의 이들 부위의 혈관 투과도가 전형적으로 비-감염된 부위의 맥관구조에서보다 더 크기 때문에 바시트라신-부류 항생제를 선택적으로 감염의 부위 및 위치에 전달하는 것을 도울 수 있다. 결과적으로 더 큰 콘주게이트는 혈류로부터 비-감염된 부위로 덜 들어갈 것 같지만, 더욱 침투성인 감염된 부위에 들어갈 수 있다. 그와 같은 더 큰 올리고머에 대한 대표적인 크기 범위는 예를 들어 20 내지 100개 잔기 (또는 20 내지 100의 DP 또는 DPn) 또는 20, 21, 22, 23, 24 또는 25 중의 어느 하나, 100, 90, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35 또는 30개 잔기 중의 어느 하나 (또는 이들 범위 중의 임의의 하나의 DP 또는 DPn) 또는 30, 31, 32, 33, 34 또는 35 중의 어느 하나, 100, 90, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45 또는 40개 잔기 중의 어느 하나 (또는 이들 범위 중의 임의의 하나의 DP 또는 DPn)일 수 있다. 대안적으로, 이들 결과는 또한 콘주게이트 중의 알기네이트 올리고머, 심지어 더 작은 크기의 것들의 수를 증가시킴으로써 달성될 수 있다.
알기네이트 올리고머는, 전술한 바와 같이, 굴루로네이트 또는 굴루론산 (G) 및/또는 만누로네이트 또는 만누론산 (M) 잔기 또는 단위를 함유(또는 포함)할 것이다. 본 발명에 따르는 알기네이트 올리고머는 바람직하게는 단독으로, 또는 실질적으로 단독으로 (즉 본질적으로 이루어진) 우로네이트/우론산 잔기, 더 상세하게는 단독으로 또는 실질적으로 단독으로 G 및/또는 M 잔기로 이루어질 것이다. 대안적으로 표현하여, 본 발명에서 사용하기 위한 알기네이트 올리고머에서, 단량체 잔기의 적어도 80%, 더 상세하게는 적어도 85, 90, 95 또는 99%는 우로네이트/우론산 잔기, 또는, 더 상세하게는 G 및/또는 M 잔기일 수 있다. 환언하면, 바람직하게는 알기네이트 올리고머는 다른 잔기 또는 단위 (예를 들어 다른 당류 잔기, 또는 더 상세하게는 다른 우론산/우로네이트 잔기)를 포함하지 않을 것이다.
알기네이트 올리고머는 바람직하게는 선형 올리고머이다.
더 상세하게는, 본 발명에 따라 사용하기 위해 제안된 알기네이트 올리고머는 적어도 70% G 잔기를 함유할 것이다(즉 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 적어도 70%는 G 잔기일 것이다). 따라서 특정 구현예는 70 내지 100% G (굴루로네이트) 잔기를 갖는(예를 들어 함유하는) 알기네이트 올리고머를 포함한다.
바람직하게는 단량체 잔기의 적어도 75% 또는 80%, 더 상세하게는 적어도 85% 또는 90%, 더욱 더 상세하게는 적어도 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 또는 99%는 굴루로네이트이다. 일 구현예에서 알기네이트 올리고머는 올리고굴루로네이트(즉 G의 단독올리고머, 또는 100% G)일 수 있다.
추가의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 상기에 기재된 알기네이트는 G 잔기 중의 다수가 소위 G-블럭에 있는 일차 구조를 갖는다. 바람직하게는 G 잔기의 적어도 50%, 더 바람직하게는 적어도 70 또는 75%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90, 92 또는 95%는 G-블럭에 있다. G 블럭은 적어도 2종의 G 잔기, 바람직하게는 적어도 3 인접 G 잔기, 더 바람직하게는 적어도 4 또는 5 인접 G 잔기, 가장 바람직하게는 적어도 7 인접 G 잔기의 인접 서열이다.
특히, G 잔기의 적어도 90%는 또 다른 G 잔기에 1-4 연결된다. 더 상세하게는 알기네이트의 G 잔기의 적어도 95%, 더 바람직하게는 적어도 98%, 및 가장 바람직하게는 적어도 99%가 또 다른 G 잔기에 1-4 연결된다. 더 구체적으로 올리고머 중의 단량체 잔기의 적어도 70%는 또 다른 G-잔기에 1-4 연결된 G 잔기이거나, 또는 더 바람직하게는 올리고머의 단량체 잔기의 적어도 75%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99%는 또 다른 G 잔기에 1-4 연결된 G 잔기이다. 두 개의 G 잔기의 이러한 1-4 연결은 대안적으로 인접한 굴루론산 단위에 결합된 굴루론산 단위로서 표현될 수 있다.
본 발명에서 사용하기 위한 알기네이트 올리고머를 숙련가는 통상적으로 "높은 G" 또는 "G-블럭" 올리고머, 즉 높은 함량의 G 잔기 또는 G-블럭(예를 들어 단량체 잔기의 적어도 70%가 G이고, 바람직하게는 G-블럭에 배열됨)을 갖는 올리고머라고 한다.
본 발명에서 사용하기 위한 알기네이트 올리고머는 바람직하게는 3- 내지 35-mer, 더 바람직하게는 3- 내지 28-mer, 특히 4- 내지 25-mer, 예를 들어 5- 내지 20-mer, 특히 6- 내지 22-mer, 특히 8- 내지 20-mer, 특히 10- 내지 15-mer이며, 예를 들어 350 내지 6400 달톤 또는 350 내지 6000 달톤, 바람직하게는 550 내지 5500 달톤, 바람직하게는 750 내지 5000 달톤, 및 특히 750 내지 4500 달톤 또는 2000 내지 3000 달톤 또는 900 내지 3500 달톤 범위의 분자량을 갖는다. 다른 대표적인 알기네이트 올리고머는, 상기에서 언급된 바와 같이, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13 내지 50, 45, 40, 35, 28, 25, 22 또는 20개 잔기를 갖는 올리고머를 포함한다.
이것은 단일 화합물일 수 있거나 이것은 예를 들어 다양한 중합도의 화합물의 혼합물일 수 있다. 전술한 바와 같이, 알기네이트 올리고머 중의 단량체성 잔기는 동일 또는 상이할 수 있으며 모두 전기적으로 충전된 그룹을 가질 필요는 없지만 다수(예를 들어 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 80% 더 바람직하게는 적어도 90%)가 그러한 것이 바람직하다. 바람직하게는, 충전된 그룹의 실질적인 다수, 예를 들어 적어도 80%, 더 바람직하게는 적어도 90%는 동일한 극성을 갖는다. 알기네이트 올리고머에서, 하이드록실 그룹 대 충전된 그룹의 비는 바람직하게는 적어도 2:1, 더욱 특히 적어도 3:1이다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 3-28, 4-25, 6-22, 8-20 또는 10-15, 또는 5-18 또는 7-15 또는 8-12, 특히 10의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 3-24, 4-23, 5-22, 6-21, 7-20, 8-19, 9-18, 10-17, 11-16, 12-15 또는 13-14 (예를 들어 13 또는 14)의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 4-25, 5-24, 6-23, 7-22, 8-21, 9-20, 10-19, 11-18, 12-17, 13-16, 14-15 (예를 들어 14 또는 15)의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 5-26, 6-25, 7-24, 8-23, 9-22, 10-21, 11-20, 12-19, 13-18, 14-17 또는 15-16 (예를 들어 15 또는 16)의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 4-50, 4-40, 4-35, 4-30, 4-28, 4-26, 4-22, 4-20, 4-18, 4-16 또는 4-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 5-50, 5-40, 5-25, 5-22, 5-20, 5-18, 5-23, 5-20, 5-18, 5-16 또는 5-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 6-50, 6-40, 6-35, 6-30, 6-28, 6-26, 6-24, 6-20, 6-19, 6-18, 6-16 또는 6-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 8-50, 8-40, 8-35, 8-30, 8-28, 8-25, 8-22, 8-20, 8-18, 8-16 또는 8-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 9-50, 9-40, 9-35, 9-30, 9-28, 9-25, 9-22, 9-20, 9-18, 9-16 또는 9-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 10-50, 10-40, 10-35, 10-30, 10-28, 10-25, 10-22, 10-20, 10-18, 10-16 또는 10-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 11-50, 11-40, 11-35, 11-30, 11-28, 11-25, 11-22, 11-20, 11-18, 11-16 또는 11-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 12-50, 12-40, 12-35, 12-30, 12-28, 12-25, 12-22, 12-20, 12-18, 12-16 또는 12-14의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 13-50, 13-40, 13-35, 13-30, 13-28, 13-25, 13-22, 13-20, 13-18, 13-16 또는 13-14 (예를 들어 13 또는 14)의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 14-50, 14-40, 14-35, 14-30, 14-28, 14-25, 14-22, 14-20, 14-18, 또는 14-16의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 15-50, 15-40, 15-35, 15-30, 15-28, 15-25, 15-22, 15-20, 또는 15-18의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 18-50, 18-40, 18-35, 18-30, 18-28, 18-25, 18-22 또는 18-20의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 20-100, 20-90, 20-80, 20-75, 20-70, 20-65, 20-60 , 20-55, 20-50, 20-45, 20-40, 20-35, 20-30 또는 20-25의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머는 30-100, 30-90, 30-80, 30-75, 30-70, 30-65, 30-60, 30-55, 30-50, 30-45, 30-40 또는 30-35의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 가질 수 있다.
바람직하게는 본 발명의 알기네이트 올리고머는 본원에 개시된 범위를 넘어선 중합도를 갖는 알기네이트 올리고머를 실질적으로 함유하지 않으며, 바람직하게는 본질적으로 함유하지 않는다. 이것은 본 발명의 알기네이트 올리고머의 분자량 분포, 예를 들어 관련된 범위를 넘어선 DP를 갖는 본 발명에 따라 사용되는 알기네이트 올리고머의 각각의 몰의 백분율의 관점에서 표현될 수 있다. 분자량 분포는 불과 10몰%, 바람직하게는 불과 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 또는 1몰%가 DPn에 대한 관련된 상한보다 3, 2 또는 1 더 높은 DP를 갖도록 하는 것이 바람직하다. 마찬가지로 불과 10몰%, 바람직하게는 불과 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 또는 1몰%가 DPn에 대한 관련된 하한보다 3, 2 또는 1 더 작은 숫자 아래의 DP를 갖는 것이 바람직하다.
적합한 알기네이트 올리고머는 제WO2007/039754호, 제WO2007/039760호, 제WO 2008/125828호, 및 제WO2009/068841호에 기재되어 있으며, 그것의 개시내용은 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된다.
대표적인 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 30 범위의 DPn, 적어도 0.80의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.20의 만누로네이트 분획 (FM), 및 불과 25의 적어도 95 mol%의 DP를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 7 내지 15 (바람직하게는 8 내지 12) 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.85 (바람직하게는 적어도 0.90)의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.15 (바람직하게는 불과 0.10)의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 17 미만 (바람직하게는 14 미만)의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 18 (특히 7 내지 15) 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.80 (바람직하게는 적어도 0.85, 특히 적어도 0.92)의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.20 (바람직하게는 불과 0.15, 특히 불과 0.08)의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 20 미만 (바람직하게는 17 미만)의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 18 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.92의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.08의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 20 미만의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 18 (바람직하게는 7 내지 15, 더 바람직하게는 8 내지 12, 특히 약 10) 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.80 (바람직하게는 적어도 0.85, 더 바람직하게는 적어도 0.90, 특히 적어도 0.92, 가장 특히 적어도 0.95)의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.20 (바람직하게는 불과 0.15, 더 바람직하게는 불과 0.10, 특히 불과 0.08, 가장 특히 불과 0.05)의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 20 미만 (바람직하게는 17 미만, 더 바람직하게는 14 미만)의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 7 내지 15 (바람직하게는 8 내지 12) 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.92 (바람직하게는 적어도 0.95)의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.08 (바람직하게는 불과 0.05)의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 17 미만 (바람직하게는 14 미만)의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 18 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.80의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.20의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 20 미만의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 7 내지 15 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.85의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.15의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 17 미만의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 7 내지 15 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.92의 굴루로네이트 분획 (FG), 불과 0.08의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖고, 적어도 95몰%가 17 미만의 중합도를 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 20 범위의 수 평균 중합도, 적어도 0.85의 굴루로네이트 분획 (FG) 및 불과 0.15의 만누로네이트 분획 (FM)을 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 5 내지 20 범위의 수 평균 중합도, 0.9-0.95의 굴루로네이트 분획 (FG) 및 0.05-0.1의 만누로네이트 분획 (FM)을 가지며, 이것은 90-95% G 잔기 및 2600 Da의 평균 분자량을 갖는 알기네이트 올리고머로서 표현될 수 있다. 추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 약 13 (예를 들어 12, 13 또는 14)의 수 평균 중합도, 적어도 약 0.80, 0.85, 0.87, 0.88, 0.90 또는 0.93 (예를 들어 0.92, 0.93 또는 0.94)의 굴루로네이트 분획 (FG) 및 불과 약 0.20, 0.15, 0.13, 0.12, 0.10, 또는 0.07 (예를 들어 0.08, 0.07 또는 0.06)의 상응하는 만누로네이트 분획 (FM)을 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 약 21 (예를 들어 20, 21 또는 22)의 수 평균 중합도, 적어도 약 0.80 (예를 들어 0.85, 0.87, 0.88, 0.90, 0.92, 0.94 또는 0.95)의 굴루로네이트 분획 (FG) 및 불과 약 0.20 (예를 들어 0.15, 0.13, 0.12, 0.10, 0.08, 0.06, 0.05)의 상응하는 만누로네이트 분획 (FM)을 갖는다.
추가의 적합한 알기네이트 올리고머는 약 6 (예를 들어 5, 6 또는 7)의 수 평균 중합도, 적어도 약 0.80 (예를 들어 0.85, 0.87, 0.88, 0.90, 0.92, 0.94 또는 0.95)의 굴루로네이트 분획 (FG) 및 불과 약 0.20 (예를 들어 0.15, 0.13, 0.12, 0.10, 0.08, 0.06, 0.05)의 상응하는 만누로네이트 분획 (FM)을 갖는다.
따라서 본 발명에 따라 선호되는 특정 부류의 알기네이트 올리고머는 소위 "높은 G" 또는 "G-블럭" 올리고머 즉 높은 함량의 G 잔기 또는 G-블럭을 갖는 올리고머(예를 들어 단량체 잔기의 적어도 70%가 G이고, 바람직하게는 G-블럭으로 배열됨)로서 정의된 알기네이트 올리고머임을 알 수 있을 것이다. 그러나, 아래에 추가로 기재된 바와 같이 특히 "높은 M" 또는 "M-블럭" 올리고머 또는 MG-블럭 올리고머를 포함한 다른 유형의 알기네이트 올리고머가 또한 사용될 수 있다. 따라서, 이것은 단일 단량체 유형의 비율이 높은 알기네이트 올리고머이며, 이러한 유형의 상기 단량체는 특히 바람직한 올리고머, 예를 들어 올리고머 중의 단량체 잔기의 적어도 70%가 또 다른 G-잔기에 1-4 연결된 G 잔기이거나, 또는 더 바람직하게는 올리고머의 단량체 잔기의 적어도 75%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99%가 또 다른 G 잔기에 1-4 연결된 G 잔기인 올리고머를 나타내는, 그 단량체 유형의 인접 서열에서 우세하게 존재한다. 두 개의 G 잔기의 이러한 1-4 연결은 대안적으로 인접한 굴루론산 단위에 결합된 굴루론산 단위로서 표현될 수 있다.
추가 구현예에서 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 적어도, 또는 더 상세하게는 50% 이상은 M 잔기 (즉 만누로네이트 또는 만누론산)일 수 있다. 환언하면 알기네이트 올리고머는 적어도 또는 대안적으로 50% 이상의 만누로네이트 (또는 만누론산) 잔기를 함유할 것이다. 따라서 특정 구현예는 50 내지 70% M (만누로네이트) 잔기 또는 예를 들어 70 내지 100% M (만누로네이트) 잔기를 갖는 (예를 들어 함유하는) 알기네이트 올리고머를 포함한다. 추가의 특정 구현예는 또한 71 내지 85% M 잔기 또는 85 내지 100% M 잔기를 함유하는 올리고머를 포함한다. 따라서, 본 발명의 이러한 구현예에 따라 사용하기 위한 대표적인 알기네이트 올리고머는 70% 이상의 M 잔기를 함유할 것이다 (즉 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 70% 이상은 M 잔기일 것이다).
다른 구현예에서 단량체 잔기의 적어도 50% 또는 60%, 더 상세하게는 적어도 70% 또는 75%, 더욱더 상세하게는 적어도 80, 85, 90, 95 또는 99%는 만누로네이트이다. 일 구현예에서 알기네이트 올리고머는 올리고만누로네이트(즉 M의 단독올리고머, 또는 100% M)일 수 있다.
추가 구현예에서, 상기에 기재된 본 발명의 알기네이트는 M 잔기의 다수가 소위 M-블럭에 있는 일차 구조를 갖는다. 이 구현예에서 바람직하게는 M 잔기의 적어도 50%, 더 바람직하게는 적어도 70 또는 75%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90 또는 95%는 M-블럭에 있다. M 블럭은 적어도 2개의 M 잔기, 바람직하게는 적어도 3개의 인접 M 잔기, 더 바람직하게는 적어도 4 또는 5개의 인접 M 잔기, 가장 바람직하게는 적어도 7개의 인접 M 잔기의 인접 서열이다.
특히, M 잔기의 적어도 90%는 또 다른 M 잔기에 1-4 연결된다. 더 상세하게는 알기네이트의 M 잔기의 적어도 95%, 더 바람직하게는 적어도 98%, 및 가장 바람직하게는 적어도 99%는 또 다른 M 잔기에 1-4 연결된다.
다른 바람직한 올리고머는 올리고머 중의 단량체 잔기의 적어도 70%가 또 다른 M-잔기에 1-4 연결된 M 잔기이거나, 또는 더 바람직하게는 올리고머의 단량체 잔기의 적어도 75%, 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99%가 또 다른 M 잔기에 1-4 연결된 M 잔기인 알기네이트 올리고머이다. 두 개의 M 잔기의 이러한 1-4 연결은 대안적으로 인접한 만누론산 단위에 결합된 만누론산 단위로서 표현될 수 있다.
또 추가의 구현예에서, 본 발명의 알기네이트 올리고머는 교대 M 및 G 잔기의 서열을 포함한다. 적어도 세 개, 바람직하게는 적어도 네 개의 교대 M 및 G 잔기의 서열이 MG 블럭을 나타낸다. 바람직하게는 본 발명의 알기네이트 올리고머는 MG 블럭을 포함한다. 더 구체적으로 표현하여, MG 블럭은 G 및 M 잔기로 이루어진 적어도 세 개의 인접 잔기의 서열이며 여기서 인접 서열 중의 각각의 비-말단 (내부) G 잔기는 M 잔기에 1-4 및 4-1 연결되고 인접 서열 중의 각각의 비-말단 (내부) M 잔기는 G 잔기에 1-4 및 4-1 연결된다. 바람직하게는 MG 블럭은 적어도 5 또는 6개 인접 잔기, 더 바람직하게는 적어도 7 또는 8개 인접 잔기이다.
추가 구현예에서 알기네이트 올리고머 중의 소수의 우로네이트 (즉 만누로네이트 또는 굴루로네이트)는 MG 블럭에서 우세하게 발견된다. 이 구현예에서 바람직하게는 MG 블럭 알기네이트 올리고머 중의 소수 우로네이트 단량체의 적어도 50%, 더 바람직하게는 적어도 70 또는 75% 및 가장 바람직하게는 적어도 80, 85, 90 또는 95%가 MG 블럭에 존재한다. 또 다른 구현예에서 알기네이트 올리고머는 올리고머 중의 G 및 M 잔기의 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 99%, 예를 들어 100%가 MG 블럭에 배열되도록 배열된다.
가장 광범위하게는, 본 발명은 올리고머의 단량체 잔기의 적어도 1%이지만 100% 미만이 G 잔기 (즉 굴루로네이트 또는 굴루론산)인 구현예로 확대되며, 더 상세하게는, 아래에 추가로 정의된 바와 같이, 단량체 잔기의 적어도 30%는 G 잔기이다. 따라서, 가장 광범위하게는, MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머는 적어도 1%이지만 100% 미만의 굴루로네이트 (또는 굴루론산) 잔기를 함유할 수 있지만, 일반적으로 MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머는 적어도 30% (또는 적어도 35, 40 또는 45% 또는 50% G) 100% 미만의 G를 함유할 것이다. 따라서 특정 구현예는 1 내지 30% G (굴루로네이트) 잔기, 30 내지 70% G (굴루로네이트) 잔기 또는 70 내지 99% G (굴루로네이트) 잔기를 갖는 (예를 들어 함유하는) MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머를 포함한다. 따라서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 대표적인 MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머는 30% 이상, 70% 미만의 G 잔기를 함유할 수 있다 (즉 MG 블럭 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 30% 이상, 70% 미만은 G 잔기일 것이다).
바람직하게는 MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 30% 이상, 더 상세하게는 35% 또는 40% 이상, 더욱더 상세하게는 45, 50, 55, 60 또는 65% 이상이지만, 각 경우에 70% 미만은 굴루로네이트이다. 대안적으로, MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머의 단량체 잔기의 70% 미만, 더 바람직하게는 65% 또는 60% 미만, 더욱 더 바람직하게는 55, 50, 45, 40 또는 35% 미만이지만, 각 경우에 30% 이상은 굴루로네이트이다. 이들 값의 임의의 조합에 의해 형성된 임의의 범위가 선택될 수 있다. 따라서 예를 들어 MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머는 예를 들어 35% 내지 65%, 40% 내지 60% 또는 45% 내지 55% G 잔기를 가질 수 있다.
또 다른 구현예에서 MG 블럭 함유 알기네이트 올리고머는 대략 동등량의 G 및 M 잔기 (예를 들어 65% G/35% M 내지 35% G/65% M, 예를 들어 60% G/40% M 내지 40% G/60% M; 55% G/45% M 내지 45% G/55% M; 53% G/47% M 내지 47% G/53% M; 51% G/49% M 내지 49% G/51% M; 예를 들어 약 50% G 및 약 50% M의 비)를 가질 수 있으며 이들 잔기는 교대 MG 패턴에서 우세하게, 바람직하게는 전적으로 또는 가능한 한 완전히 배열된다 (예를 들어 M 및 G 잔기의 적어도 50% 또는 적어도 60, 70, 80, 85, 90 또는 95% 또는 100%는 교대 MG 서열에 있다).
특정 구현예에서 본 발명에서 사용되는 올리고머의 말단 우론산 잔기는 이중 결합, 특히 C4 및 C5 원자 사이에 위치한 이중 결합을 갖지 않는다. 그와 같은 올리고머는 포화된 말단 우론산 잔기를 갖는 것으로 기재될 수 있다. 숙련가는 과도한 부하 없이 포화된 말단 우론산 잔기를 갖는 올리고머를 제조할 수 있을 것이다. 이것은 이러한 올리고머를 산출하는 생산 기술의 사용을 통해, 또는 불포화된 말단 우론산 잔기를 갖는 올리고머를 산출하는 공정에 의해 생산된 올리고머를 전환(포화)시킴으로써 이루어질 수 있다.
알기네이트 올리고머는 전형적으로 전하를 지닐 것이며 그래서 알기네이트 올리고머에 대한 반대 이온은 임의의 생리적으로 내성있는 이온, 특히 충전된 약물 서브스턴스에 통상적으로 사용되는 것들, 예를 들어 나트륨, 칼륨, 암모늄, 염화물, 메실레이트, 메글루민 등일 수 있다. 알기네이트 겔화를 촉진시키는 이온, 예를 들어 2족 금속 이온이 또한 사용될 수 있다.
알기네이트 올리고머는 적절한 수의 굴루로네이트 및 만누로네이트 잔기의 중합으로부터 생성된 합성 물질일 수 있지만, 본 발명에서 사용되는 알기네이트 올리고머는 편리하게 천연 공급원 예컨대 상기에서 언급된 것들, 즉 천연 알기네이트 원료 물질로부터 수득되거나, 생산되거나 유래된다.
본 발명에 따라 사용 가능한 알기네이트 올리고머를 생산하기 위한 다당류에서 올리고당으로의 절단은 종래의 다당류 용리 기술 예컨대 효소적 소화 및 산성 가수분해를 사용하여 수행될 수 있다. 하나의 선호되는 구현예에서 산성 가수분해가 본 발명의 알기네이트 올리고머를 제조하는데 사용된다. 다른 구현예에서 효소적 소화는 올리고머에서 말단 우론산을 포화시키기 위해 추가의 처리 단계(들)과 사용된다.
그후 올리고머는 이온 교환 수지를 사용하여 크로마토그래피적으로 또는 분별화된 침전 또는 가용화 또는 여과에 의해 다당류 분해 생성물로부터 분리될 수 있다. 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된 제US 6,121,441호 및 제WO 2008/125828호는 본 발명에서 사용되는 알기네이트 올리고머를 제조하는데 적합한 공정을 기재한다. 추가의 정보 및 논의는 아래에 발견될 수 있다: 예를 들어 문헌["Handbooks of Hydrocolloids", Ed. Phillips and Williams, CRC, Boca Raton, Florida, USA, 2000], 이의 내용은 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된다.
알기네이트 올리고머는 또한, 충전된 그룹 (예컨대 카복실화된 또는 카복시메틸화된 글리칸)을 부가하기 위한 변형을 비제한적으로 포함하여 화학적으로 변형될 수 있고 알기네이트 올리고머는 (예를 들어 퍼아이오데이트 산화에 의해) 가요성을 변화시키도록 변형될 수 있다.
본 발명에 따라 사용하기에 적합한 알기네이트 올리고머 (예를 들어 올리고굴루론산)는 편리하게는 비제한적으로 라미나리아 하이퍼보라 및 레소니아 니그레센스로부터의 알긴산의 산성 가수분해, 중성 pH에서의 용해, pH를 3.4로 감소시켜 알기네이트 올리고머를 침전시키기 위한 무기산의 첨가 (올리고굴루론산), 약산으로의 세척, 중성 pH에서의 재현탁 및 냉동 건조에 의해 생산될 수 있다.
본 발명의 알기네이트 올리고머의 생산을 위한 알기네이트는 또한 적합한 박테리아 공급원 예를 들어 슈도모나스 에어루기노사 또는 아조토박터 비넬란디이로부터 직접적으로 수득될 수 있다.
G 잔기의 다수가 단일 잔기로서라기 보다는 G-블럭에 배열되는 일차 구조를 갖는 알기네이트 올리고머가 요구되는 구현예에서, 조류 공급원이 이들 유기체에서 생산된 알기네이트가 이들 구조를 갖는 경향이 있다는 사실을 때문에 가장 적합한 것으로 기대된다. 박테리아 공급원이 상이한 구조의 알기네이트 올리고머를 수득하기에 더욱 적합할 수 있다.
슈도모나스 플루오레스센스 및 아조토박터 비넬란디이에서 알기네이트 생합성에 관여하는 분자 장치가 클로닝되고 특성화되었으며 (WO 94/09124; Ertesvag, H., et al, Metabolic Engineering, 1999, Vol 1, 262-269; WO 2004/011628; Gimmestad, M., et al (상동); Remminghorst and Rehm, Biotechnology Letters, 2006, Vol 28, 1701-1712; Gimmestad, M. et al, Journal of Bacteriology, 2006, Vol 188(15), 5551-5560) 맞추어진 일차 구조의 알기네이트는 이들 시스템을 조작함으로써 쉽게 수득될 수 있다.
알기네이트 (예를 들어 조류 원료 물질)의 G 함량은, 예를 들어 A. 비넬란디이로부터의 만누로난 C-5 에피머라제 또는 다른 에피머라제 효소로의 에피머화에 의해 증가될 수 있다. 따라서, 예를 들어 시험관내 에피머화는 슈도모나스 또는 아조토박터로부터의 단리된 에피머라제, 예를 들어 슈도모나스 플루오레스센스 또는 아조토박터 비넬란디이로부터의 AlgG 또는 아조토박터 비넬란디이로부터의 AlgE 효소 (AlgE1 내지 AlgE7)로 수행될 수 있다. 알기네이트를 생산하는 능력을 갖는 다른 유기체, 특히 조류로부터의 에피머라제의 사용이 또한 구체적으로 고려된다. 아조토박터 비넬란디이 AlgE 에피머라제로의 낮은 G 알기네이트의 시험관내 에피머화가 문헌[Ertesvag et al (상동) and Strugala et al (Gums and Stabilisers for the Food Industry, 2004, 12, The Royal Society of Chemistry, 84 - 94]에 상세히 기재되어 있다.
G-블럭 함유 알기네이트 또는 알기네이트 올리고머를 수득하기 위해, AlgE4와는 다른 1개 이상의 아조토박터 비넬란디이 AlgE 에피머라제로의 에피머화가 바람직한데, 그 이유는 이들 효소가 G 블럭 구조를 생산할 수 있기 때문이다. 다른 한편으로 AlgE4 에피머라제는 이 효소가 G 블럭을 생산하기 보다는 M 잔기에 연결된 단일 G 잔기를 생산하도록 개별 M 잔기를 우선적으로 에피머화하는 것으로 보인다고 밝혀졌기 때문에 M/G 서열의 교대 스트레치 또는 단일 G 잔기를 함유하는 일차 구조를 갖는 알기네이트 또는 알기네이트 올리고머를 생성하는데 사용될 수 있다. 특정 일차 구조는 이들 효소의 상이한 조합을 사용함으로써 수득될 수 있다.
다른 유기체로부터의 이들 효소 또는 동족체의 돌연변이된 버전이 또한 사용시 구체적으로 고려된다. 제WO 94/09124호는 예를 들어 에피머라제의 상이한 도메인 또는 모듈을 인코딩하는 DNA 서열이 셔플링되거나 결실되고 재조합된 에피머라제 서열에 의해 인코딩된 재조합 또는 변형된 만누로난 C-5 에피머라제 효소 (AlgE 효소)를 기재한다. 대안적으로, AlgG 또는 AlgE 유전자의 부위 지향된 또는 랜덤 돌연변이유발에 의해 수득되는 자연 발생 에피머라제 효소, (AlgG 또는 AlgE)의 돌연변이체가 사용될 수 있다.
상이한 접근법은 이러한 돌연변이체가 후속적인 알기네이트 올리고머 생산을 위해 요구된 구조의 알기네이트, 또는 심지어 요구된 구조 및 크기 (또는 분자량)의 알기네이트 올리고머를 생산하도록 하는 방식으로 그것의 에피머라제 유전자의 일부 또는 전부가 돌연변이된 슈도모나스 및 아조토박터 유기체를 생성하는 것이다. 돌연변이된 AlgG 유전자를 갖는 수많은 슈도모나스 플루오레스센스 유기체의 생성은 제WO 2004/011628호 및 문헌[Gimmestad, M., et al, 2003 (상동)]에 상세히 기재되어 있다. 돌연변이된 AlgE 유전자를 갖는 수많은 아조토박터 비넬란디이 유기체의 생성은 문헌[Gimmestad, M., et al, 2006 (상동)]에 개시되어 있다.
추가의 접근법은 아조토박터 또는 슈도모나스 유기체로부터의 내인성 에피머라제 유전자를 결실 또는 불활성화시킨 다음 돌연변이될 수 있거나 그렇지 않을 수 있고 (즉 야생형이거나 변형될 수 있고) 발현이, 예를 들어 유도성 또는 다른 "통제가능 프로모터"의 사용에 의해 제어될 수 있는 1개 이상의 외인성 에피머라제 유전자를 도입하는 것이다. 유전자의 적절한 조합을 선택함으로써, 사전결정된 일차 구조의 알기네이트가 생산될 수 있다.
또 추가의 접근법은 슈도모나스 및/또는 아조토박터의 알기네이트 생합성 기계장치의 일부 또는 전부를 비-알기네이트 생산 유기체 (예를 들어 이. 콜리)에 도입하고 이들 유전자 변형된 유기체로부터 알기네이트의 생산을 유도하는 것이다.
이들 배양물-기반 시스템이 사용되는 경우, 알기네이트 또는 알기네이트 올리고머 생성물의 일차 구조는 배양 조건에 의해 영향을 받을 수 있다. 특정 유기체에 의해 생산된 알기네이트의 일차 구조를 조작하기 위해 배양 파라미터 예컨대 온도, 삼투압, 영양소 수준/공급원 및 대기 파라미터를 조절하는 것은 숙련가의 능력내에 있다.
"G 잔기/G" 및 "M 잔기/M" 또는 굴루론산 또는 만누론산, 또는 굴루로네이트 또는 만누로네이트에 대한 언급은 굴루론산/굴루로네이트 및 만누론산/만누로네이트 (구체적으로 α-L-굴루론산/굴루로네이트 및 β-D-만누론산/만누로네이트)에 대한 언급과 교환 가능하게 판독되어야 하며, 추가로, 1개 이상의 이용가능한 측쇄 또는 그룹이 박테리아 종에 대한 박테리아의 치료학적으로 유용한 활성의 스펙트럼을 그램 음성 박테리아를 포함하도록 넓히는 능력을 초래하지 않으면서 변형된 이의 유도체를 포함하며, 이것은 비변형된 올리고머의 경우보다 실질적으로 더 낮다. 보통의 당류 변형 그룹은 아세틸, 설페이트, 아미노, 데옥시, 알코올, 알데하이드, 케톤, 에스테르 및 안하이드로 그룹을 포함한다. 알기네이트 올리고머는 또한, 충전된 그룹 (예컨대 카복실화된 또는 카복시메틸화된 글리칸)을 부가하고, (예를 들어 퍼아이오데이트 산화에 의해) 가요성을 부가하기 위해 화학적으로 변형될 수 있다. 숙련가는 올리고당의 단당류 서브유닛에 대해 이루어질 수 있는 여전히 추가의 화학적 변형을 알고 있을 것이며 이들은 본 발명에서 사용되는 알기네이트 올리고머에 적용될 수 있다.
알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간의 직접적인 공유결합은 알기네이트 올리고머의 원자와 바시트라신-부류 항생제의 원자에 의해 형성된 공유결합이다. 결합에 기여하는 원자는 함께 또는 독립적으로 be 탄소, 산소, 황, 질소 및/또는 인일 수 있다. 결합은 단일, 이중 또는 삼중일 수 있다. 특정 구현예에서 결합은 유기 작용기 중의 일부이다. 숙련가는 알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간에 링커로서 작용할 수 있는 적합한 유기 작용기를 위해 이용가능한 옵션에 전적으로 익숙할 것이다. 이의 비-제한적인 예는 에스테르, 카보네이트 에스테르, 오르토에스테르, 케톤, 케탈, 헤미케탈, 케텐, 에테르, 아세탈, 헤미아세탈, 퍼옥시, 메틸렌디옥시, 카바메이트, 아미드, 아민, 아민 옥사이드, 하이드록삼산, 이민, 이미드, 이미데이트, 아자이드, 아조, 옥심, 카보디이미드, 카바존, 하이드로존, 설파이드, 디설파이드, 설피닐, 설포닐, 카보노티오일, 티오아미드, 티오에스테르, 티오에테르, 티오케톤, 티오케탈, 설포네이트 에스테르, 디티오카바메이트, 세미카바존, 포스핀 또는 포스포디에스테르 작용기를 포함할 수 있다. 실시예에 나타낸 바와 같이, 아미드 및 에스테르 결합의 형성이 편리하고 유리할 수 있다.
공유 분자 링커는 알기네이트 올리고머 및 바시트라신-부류 항생제와 공유적으로 결합할 수 있는 공유결합된 원자로부터 형성된 구조를 갖는 임의의 분자, 전형적으로 유기 분자, 또는 이의 일부일 수 있다. 콘주게이트 내에는 분자 링커를 통한 알기네이트 올리고머에서 바시트라신-부류 항생제로의 공유결합된 원자의 연속적 시리즈가 있을 것이다. 바람직한 구현예에서 상기 시리즈에서 공유결합 중 적어도 하나는 상기에 정의된 바와 같다. 그러나 분자 링커는 바시트라신-부류 항생제와 알기네이트 올리고머 간의 공유결합에 기여하지 않는 분자의 일부에 비-공유, 예를 들어 이온 결합을 추가로 포함할 수 있다.
공유 분자 링커는 선형, 원형 또는 분지형일 수 있다. 특정 구현예에서 분자 링커는 1500 달톤 이하, 예를 들어 1250, 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200 또는 100 달톤 이하의 분자량을 가질 것이다.
특정 구현예에서 알기네이트 올리고머와 공유 분자 링커 간의 적어도 하나의 직접적인 공유결합은 상기에 정의된 바와 같다. 특정 구현예에서 바시트라신-부류 항생제와 공유 분자 링커 간의 적어도 하나의 직접적인 공유결합은 상기에 정의된 바와 같다. 각각의 결합은 동일 또는 상이할 수 있다. 공유 링커 분자는 바람직하게는 분자 링커를 통한 알기네이트 올리고머에서 바시트라신-부류 항생제로의 공유결합된 원자의 연속적 시리즈에 기여하는 그 분자의 일부에 상기에서 정의된 바와 같이 적어도 하나의 공유결합을 포함할 수 있다.
공유 분자 링커는, 예를 들어 15개 이하의 아미노산 잔기, 예를 들어 12, 10, 8, 6, 5, 4, 3 또는 2개 이하의 아미노산 잔기의 아미노산 또는 펩타이드일 수 있거나 포함할 수 있다. 아미노산 및 펩타이드는 상기 기재된 아미노산 중의 어느 것을 포함할 수 있다. 사용될 수 있는 펩타이드 링커의 특정 예는 비제한적으로 Gly 및/또는 Ser 잔기의 펩타이드 (예를 들어 (Gly)2-8, (Ser)2-8, (GGGGS)1-3); (EAAAK)1-3; A(EAAAK)1- 3A; Leu-Glu; (Xaa-Pro)1-6 (예를 들어 (Glu-Pro)1-6, (Lys-Pro)1-6, (Ala-Pro)1-6; VSQTSKLTR↓AETVFPDV (인자 XIa/인자 VIIa 감수성 절단); PLG↓LWA (매트릭스 메탈로프로테아제-1 감수성 절단); RVL↓AEA (HIV-1 프로테아제 감수성 절단; EDVVCC↓SMSY (NS3 프로테아제 감수성 절단; GGIEGR↓GS (인자 Xa 감수성 절단); TRHRQPR↓GWE (퓨린 감수성 절단); AGNRVRR↓SVG (퓨린 감수성 절단); GFLG↓ (카텝신 B 감수성 절단)를 포함한다.
공유 분자 링커는 굴루로네이트 또는 만누로네이트 이외의 단당류 또는 올리고당 또는 이로부터 형성된 폴리머, 예를 들어 12개 이하의 아미노산 잔기, 예를 들어 10, 8, 6, 5, 4, 3 또는 2개 이하의 아미노산 잔기의 당류일 수 있거나 포함할 수 있다. 따라서 공유 분자 링커는 단당류, 이당류 또는 삼당류 또는 이의 당 유도체 예컨대 알돈산 및 우론산, 데옥시 또는 아미노 당, 황산화된 당, 및 당 알코올일 수 있다. 단당류, 또는 이당류 또는 삼당류의 단당류 잔기 중의 1개 이상은 파이라노스 또는 푸라노스 형태 및/또는 적절한 경우 L- 또는 D-형태의 트리오스, 테트로스, 펜토스, 헥소스, 헵토스, 옥토스, 노노스 또는 데코스 및/또는 이의 당 유도체일 수 있다. 펜토스 또는 헥소스 당류/잔기, 예를 들어 만노스 (예를 들어 D-만노스), 갈락토스 (예를 들어 D- 갈락토스), 글루코스 (예를 들어 D-글루코스), 푸룩토스, 푸코스 (예를 들어 L-푸코스), N-아세틸-글루코사민, N-아세틸갈락토사민, 람노오스, 갈락토사민, 글루코사민 (예를 들어 D-글루코사민), 갈락투론산, 글루쿠론산, N-아세틸뉴라민산, 메틸 D-만노피라노시드 (만노시드), α-메틸-글루코사이드, 갈락토시드, 리보오스, 자일로스, 아라비노오스, 사카레이트, 만니톨, 소르비톨, 이노시톨, 글리세롤 및 이들 단량체의 유도체가 바람직하다. 이당류는 아카르비오신, 알로락토스, 셀로비오스, 키토비오스, 갈락토스-알파-1,3-갈락토스, 덴티오비오스, 아이소말트, 이소말토스, 아이소말툴로스, 코지비오스, 락티톨, 락토바이온산, 락토스, 락툴로스, 라미나리비오스, 말티톨, 말토스, 만노바이오스, 멜리바이오스, 멜리비울로스, 네오헤스페리도스, 니게로스, 로비노스, 루티노스, 삼부비오스, 소포로스, 수크랄페이트, 수크랄로스, 수크로스, 수크로스 아세테이트 이소부티레이트, 수크로스 옥타아세테이트, 트레할로스, 트루라노스, 크실로비오스 또는 이들 이당류의 유도체에 의해 예시될 수 있다.
공유 분자 링커는 뉴클레오타이드 또는 올리고뉴클레오타이드, 즉 핵산, 예를 들어 리보뉴클레오타이드 또는 데옥시리보뉴클레오타이드일 수 있거나 포함할 수 있다.
링커는 또한, 직쇄, 분지형 또는 환형, 치환된 또는 비치환된, 알킬, 알케닐 또는 알키닐 그룹 (전형적으로 C2-8) 또는 이의 유도체 예컨대 아미노헥산산 또는 상업적으로 입수가능한 다양한 PEG (폴리에틸렌 글리콜) 링커 중의 하나일 수 있거나 포함할 수 있다.
적합한 공유 링커 분자의 추가의 예는 비제한적으로 아세틸, 석시닐, 아코니틸 (시스 또는 트랜스), 글루타릴, 메틸석시닐, 트리멜리틸 시스테아민, 페니실아민, N-(2-머캅토프로피오닐)글리신, 2-머캅토프로피온산, 호모시스테인, 3-머캅토프로피온산 및 탈아미노-페니실아민 그룹을 포함한다.
특정 구현예에서 공유 링커 분자는 상기 기재된 복수의 분자 및/또는 그룹일 수 있다.
특정 구현예에서 직접적인 공유결합 또는 공유 링커 분자 (더 구체적으로 링커 분자 내의 공유결합, 링커 분자와 알기네이트 올리고머 간의 공유결합 및/또는 링커 분자와 바시트라신-부류 항생제 간의 공유결합)은 대상체 내의 표적 부위 또는 위치를 대표하는, 또는 유익하게는 이에 본질적으로 독특한 조건, 예를 들어 박테리아 감염, 기도 (특히 폐를 포함한 하부 기도, 더 상세하게는 낭포성 섬유증을 갖는 환자의 폐) 또는 상처 (특히 만성 상처)를 대표하는 조건하에서 용해될 수 있는 그것의 능력에 대해 선택된다. 이런 식으로 바시트라신-부류 항생제의 전달이 표적 부위에 대해 더욱 선택적으로 이루어질 수 있다.
특정 구현예에서 정상의 생리적 pH (pH 7.2)보다 낮은 pH, 즉 산성 pH, 예를 들어 약 3 내지 약 7, 6.5, 6, 5.5, 5, 4.5, 4, 또는 3.5의 pH에 민감한 (불안정한, 분해하는, 용해되는) 공유결합, 상기 공유결합을 함유하는 작용기 또는 링커 분자는 선택될 수 있다. 염증, 특히 감염에 의해 야기된 염증의 부위 또는 위치는 전형적으로 이러한 범위의 pH를 갖는다. 에스테르, 시스-아코니틸, 디설파이드 및 하이드로존을 포함한 작용기가 더 낮은 pH에 감수성이며, 즉 산 불안정성으로 기재될 수 있다.
특정 구현예에서 반응성 산소 종에 민감한 공유결합, 작용기 또는 링커 분자가 선택될 수 있다. 염증, 특히 감염에 의해 야기된 염증의 부위 또는 위치는 전형적으로 높은 수준의 반응성 산소 종을 갖는다. 티오케탈 및 티오에테르를 포함한 작용기가 반응성 산소 종에 감수성일 수 있다.
추가의 특정 구현예에서 표적 부위에서만 생산 또는 분비되거나 표적 부위에서 과생산 또는 과분비되는 효소에 의해 용해되는 공유결합, 작용기 또는 링커 분자가 선택될 수 있다. 이것은 효소 예컨대 글리코시다아제, 뉴클레아제 및 펩티다아제, 특히 감염 박테리아에 의해 분비되는 것들 및 숙주의 염증 세포에 의해 분비되는 것들, 예를 들어 리소자임, 알기네이트 분해효소, DNaseI, 제한 엔도뉴클레아제, 중성구 엘라스타제, 카텝신, 포스포리파제 및 β-락타마제를 포함할 수 있다. 그러나 알기네이트 올리고머 또는 바시트라신-부류 항생제를 분해할 수 있는 효소에 의해 용해되지 않는 공유결합, 작용기 또는 링커 분자를 선택하는 것이 유리할 수 있으며 이와 같이 바시트라신-부류 항생제로부터의 알기네이트 올리고머의 분리는 알기네이트 올리고머 또는 바시트라신-부류 항생제의 열화와는 별도로 일어날 것이다.
다른 구현예에서 직접적인 공유결합 또는 공유 링커 분자는 대상체 내의 표적 부위 또는 위치, 예를 들어 투여 후 이들 위치 및 부위로 가는 도중에 콘주게이트가 직면할 수 있는 및/또는 콘주게이트가 그것의 신체 분포 동안 직면할 수 있는 상기 기재된 위치 또는 위치들 또는 부위들을 대표하는, 또는 유익하게는 이에 본질적으로 독특한 조건하에서 그것의 안정성을 위해 선택될 수 있다. 아미드 결합, 티오에테르 결합 또는 Gly-Gly 펩타이드 링커가, 예를 들어, 여기서 적합할 수 있다.
바람직한 구현예에서 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 알기네이트 상의 카복실기 및 바시트라신 분자 상의 아민 그룹으로부터 형성된 아미드 결합을 통해 바시트라신-부류 항생제에 공유결합된 적어도 하나의 알기네이트 올리고머로 이루어진다. 바람직하게는 바시트라신-부류 항생제는 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3 및 E로부터 선택되고, 보다 바람직하게는, 바시트라신 A (A1 및/또는 A2) 및 바시트라신 B (B1 및/또는 B2)로부터 선택된다. 알기네이트 올리고머는 바람직하게는 2 내지 100개의 단량체 잔기를 함유할 것이다. 알기네이트 올리고머는 또한 적어도 70% G 잔기를 가질 수 있다.
바람직한 구현예에서 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 알기네이트 상의 카복실기 및 바시트라신 분자 상의 하이드록실기로부터 형성된 에스테르 결합을 통해 바시트라신-부류 항생제에 공유결합된 적어도 하나의 알기네이트 올리고머로 이루어진다. 바람직하게는 바시트라신-부류 항생제는 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3 및 E로부터 선택되고, 보다 바람직하게는, 바시트라신 A (A1 및/또는 A2) 및 바시트라신 B (B1 및/또는 B2)로부터 선택된다. 알기네이트 올리고머는 바람직하게는 2 내지 100개의 단량체 잔기를 함유할 것이다. 알기네이트 올리고머는 또한 적어도 70% G 잔기를 가질 수 있다.
1개 초과의 알기네이트 올리고머가 바시트라신-부류 항생제에 공유결합되어 있는 다가 배열이 고려된다. 알기네이트 올리고머는 동일 또는 상이할 수 있고 동일한 유형의 공유결합 또는 공유 분자 링커를 통해 바시트라신-부류 항생제에 연결될 수 있다. 다른 배열에서 알기네이트 올리고머는 본원에 기재된 방식으로 복수의 바시트라신 분자에 공유결합될 수 있다. 바시트라신 분자는 동일 또는 상이할 수 있고 다른 알기네이트 올리고머에 공유결합되거나 되지 않을 수 있다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트에 대한 언급은 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물, 이의 부분입체이성질체, 호변이성질체, 거울상이성질체, 및 활성 대사물로 확대된다. 적합한 염은 무기 산 예컨대 염산, 황산, 인산, 질산, 카본산, 붕산, 설팜산, 및 브롬화수소산으로부터의 산 부가 염, 또는 약제학적으로 허용가능한 유기 산 예컨대 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 타르타르산, 말레산, 하이드록시말레산, 푸메르산, 시트르산, 락트산, 뮤신산, 글루콘산, 벤조산, 석신산, 옥살산, 페닐아세트산, 메탄설폰산, 톨루엔설폰산, 벤젠설폰산, 살리실산, 설판닐산, 아스파르트산, 글루탐산, 에데트산. 스테아르산, 팔미트산, 올레산, 라우르산, 판토텐산, 탄닌산, 아스코르브산, 펜디조산, 4-4'-메틸렌비스-3-하이드록시-2-나프토산, o-(p-하이드록시벤조일)벤조산, 4-4'-디하이드록시트리페닐메탄-2-카복실산 및 발레르산의 염을 포함한다. 염기성 염은, 비제한적으로, 약제학적으로 허용가능한 양이온, 예컨대 나트륨, 칼륨, 리튬, 칼슘, 마그네슘, 암모늄 및 알킬암모늄으로 형성된 것들을 포함한다.
추가 양태에서 본 발명은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은
(ia) 알기네이트 올리고머 및 바시트라신-부류 항생제를 제공하고 이들 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하는 단계; 또는
(ib) 알기네이트 올리고머, 바시트라신-부류 항생제 및 공유 분자 링커를 제공하고 알기네이트 올리고머와 링커 분자 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하고 바시트라신-부류 항생제와 링커 분자 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하는 단계; 또는
(ic) 알기네이트 올리고머 및 바시트라신-부류 항생제를 제공하고(여기서 하나 또는 둘 모두는 이에 공유결합된 공유 분자 링커 분자를 지닌다) 링커 분자 중 적어도 하나를 통해 알기네이트 올리고머를 바시트라신-부류 항생제에 공유적으로 연결시키는 단계; 및 선택적으로
(ii) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함한다.
특정 구현예에서 본 발명은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은
(i) 이용가능한 카복실기를 갖는 알기네이트 올리고머의 수용액을 제공하는단계;
(ii) 상기 알기네이트 용액을 알기네이트 올리고머 중의 적어도 하나의 카복실기를 활성화시키기에 충분한 양 및 조건하에서 1-에틸-3-[3-디메틸아미노프로필]카보디이미드 하이드로클로라이드 (EDC)와 접촉시키는 단계;
(iii) 선택적으로 상기 카복실 활성화된 알기네이트 올리고머를 아민-반응성 설포-NHS 에스테르를 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 설포 N-하이드록시석신이미드 (설포-NHS)와 접촉시키는 단계;
(iv) 상기 단계 (ii)의 카복실 활성화된 알기네이트 올리고머 또는 단계 (iii)의 아민-반응성 설포-NHS 에스테르를 알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간에 아미드 결합을 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 이용가능한 일차 아민 그룹을 갖는 바시트라신-부류 항생제와 접촉시키는 단계; 및
(v) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함한다.
특정 구현예에서 본 발명은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은
(i) 이용가능한 카복실기를 갖는 알기네이트 올리고머의 용액, 바람직한 유기 (예를 들어 DMF 및/또는 DMSO) 용액을 제공하는 단계;
(ii) 상기 알기네이트 용액을 O-아실이소우레아 중간체를 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 디사이클로헥실카보디이미드 (DCC)와 접촉시키는 단계;
(iii) 상기 O-아실이소우레아 중간체를 알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간에 에스테르 결합을 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 이용가능한 하이드록실 그룹을 갖는 바시트라신-부류 항생제 및 4-N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP)과 접촉시키는 단계; 및
(iv) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함하며;
여기서 단계 (ii) 및 (iii)은 동시에 수행될 수 있다.
상기에서 언급되고 실시예에 나타낸 바와 같이, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 그램 음성 및 그램 양성 박테리아 두 다에 대해 치료학적으로 유용한 항균 효능, 즉, 비-접합된 바시트라신-부류 항생제보다 넓은 치료학적으로 유용한 활성의 스펙트럼을 갖는 신규한 화학적 독립체의 부류이다. 이것은 (그램 음성 감염을 포함한) 박테리아 감염의 효?거인 치료를 가능하게 한다.
따라서, 추가 양태에서 본 발명은 본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 적합한 부형제, 담체 또는 희석제가 기재되어 있으며 구체적인 약제학적 조성물이 아래에 상세되어 있다.
본 발명은 추가로 박테리아 감염, 특히 그램 음성 박테리아 감염의 격퇴에 있어서의 본 명세서에서 기재된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 이를 포함하는 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 용어 "격퇴하다(combat)"는 본 명세서에서 사용된 바와 같이 요법 및 예방 (즉 박테리아 감염의 치료 또는 예방) 둘 다를 포함한다.
따라서 이 양태에서 본 발명은 요법에서 사용하기 위한, 특히 박테리아 감염, 바람직하게는 그램 음성 박테리아 감염의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 이를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
구체적으로, 추가 양태에서 본 발명은 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험에 있는 대상체에서 박테리아 감염, 바람직하게는 그램 음성 박테리아 감염을 치료 또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 대상체에게 유효량의 본 명세서에서 정의된 바와 같은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 투여함을 포함한다.
본 발명은 추가로 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험에 있는 대상체에서 박테리아 감염, 바람직하게는 그램 음성 박테리아 감염을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한, 본 명세서에서 정의된 바와 같은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 제공한다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 "효과적인", 더 상세하게는 "약제학적으로 효과적인" 양은 상기 표적 박테리아 감염, 예를 들어 그램 음성 박테리아 감염의 측정가능한 치료 또는 예방을 제공하는 콘주게이트의 양이다.
상기에 기재된 구현예에서 달성하고자 하는 일차 생리적 결과는 감염의 부위 (특히 감염된 부위 또는 위치에 존재하고, 전신 감염을 또한 포함한 신체의 감염의 다중 부위 또는 위치를 포함할 수 있는 박테리아) 및/또는 감염이 일어날 수 있는 (또는 일어날 위험이 있는) 부위 (예를 들어 표면)와 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 접촉이다.
대안적으로 표현하여 본 발명은 추가로 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험에 있는 대상체에서 박테리아 감염, 바람직하게는 그램 음성 박테리아 감염의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 약제를 제조하기 위한 본 명세서에서 정의된 바와 같은 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 용도를 제공한다.
용어 "박테리아 감염" (또는 "에 의해 감염된" 또는 "로 감염된" 및 기타 동종의 것)은 상기 대상체가 문제의 박테리아를 포함하거나, 함유하거나, 지닐 수 있음, 즉 박테리아가 단순히 대상체 안에 또는 상에 존재할 수 있음을 나타내기 위해 본원에서 광범위하게 사용되며, 이것은 대상체의 신체 안 또는 상의 임의의 부위 또는 위치를 포함할 수 있다. 상기 대상체의 감염이 임상 질환으로서 발현(즉 감염이 대상체에서 임상 증상을 초래)될 필요는 없지만, 이것도 물론 포함된다. 감염된 것으로 의심되거나 감염의 위험이 있는 대상체는 박테리아 또는 감염된 대상체에 노출된 대상체, 또는 감염의 임상 징후 또는 증상을 나타내는 대상체 (의심되는 감염의 경우에), 또는 일반적이든 (예를 들어 대상체의 임상 상태로 인해) 또는 특별하든 문제의 박테리아에의 감염에 민감한 대상체일 수 있다.
또한 본 발명의 특정 양태에 따르면 대상체를 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 위험이 있는 대상체로서 확인하는 선행 단계, 또는 대상체를 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 위험이 있는 대상체로서 진단하는 단계가 있을 수 있다. 특히, 박테리아 감염은 바시트라신-부류 항생제로의 통상의 임상 실시에서 치료가능하지 않거나, 적어도 치료하기 어려운 것으로 공지된 유형일 수 있다. 일 구현예에서 박테리아는 바시트라신-부류 항생제에 비반응성인 (즉 감수성인) 박테리아로 확인되거나 의심된다. 특정 구현예에서 바시트라신-부류 항생제에 대한 그 감염 (또는 더 상세하게는 감염 내의 박테리아)의 감수성/내성이 결정될 수 있다.
대안적으로 또는 상기에 기재된 선행 단계에 더하여, 본 발명에 따르면 대상체의 박테리아 감염의 임상 지표를 평가하고 바람직하게는 그 안의 임의의 변화를 결정하기 위해 상기 치료 전에, 또는 초기에 이루어진 상응하는 평가와 비교하는 후속 단계가 있을 수 있다.
쉽게 관측가능한 생리적 지표에 기반한 박테리아 감염의 진단 및 모니터링은 임상의에게는 전적으로 일상적이다. 분자 생물학적 및 미생물학적 방법이 또한, 진단을 더욱 확인하고 원인균에 대한 더 많은 정보, 예를 들어 분류학적 정보, 발병력의 가능한 징후 및 항생제에 대한 그것의 감수성을 제공하기 위해 사용될 수 있다.
본 발명은 단일 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 또는 상이한 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 혼합물 (다중/복수; 둘 또는 그 초과)의 사용을 포함한다. 이러한 혼합물은 상이한 바시트라신-부류 항생제 및 동일한 알기네이트 올리고머를 지니는 콘주게이트를 포함할 수 있다. 이러한 혼합물은 동일한 바시트라신-부류 항생제 및 상이한 알기네이트 올리고머를 지니는 콘주게이트를 포함할 수 있다. 이러한 혼합물은 상이한 바시트라신-부류 항생제 및 상이한 알기네이트 올리고머를 지니는 콘주게이트를 포함할 수 있다.
본 발명에 따라 표적화된 박테리아 감염은 박테리아의 임의의 속 또는 종으로부터의 박테리아를 포함할 수 있다. 박테리아의 속 또는 종의 예는, 비제한적으로, 아비오트로피아 , 아크로모박터, 악시다미노코쿠스 , 악시도보락스 , 아시네토박터 , 악티노바실러스 , 악티노배큘럼 , 악티노마두라 , 악티노마이세스 , 에어로코쿠스 , 에어로모나스, 아피피아 , 아그로박테리움, 알칼리게네스, 알로이오코쿠스 , 알테로모나스 , 아미콜라타 , 아미콜라톱시스 , 아나에로보스피릴룸 , 아나에로랍두스 , 아라크니아 , 아르카노박테리움 , 아르코박터 , 아스로박터 , 아토포비움 , 아우레오박테리움 , 박테로이데스 , 발네아트릭스 , 바르토넬라 , 버지엘라 , 비피도박테리움 , 바일로필라 브란하멜라 , 보렐리아 , 보데텔라, 브라키스피라 , 브레비바실러스 , 브레비박테리움 , 브레분디모나스 , 브루셀라, 버크홀데리아 , 부티아욱셀라 , 부티리비브리오 , 칼리마토박테리움, 캄필로박터 , 카프노사이토파가 , 카디오박테리움 , 카토넬라 , 세데세아 , 셀룰로모나스 , 센티페다 , 클라미디아, 클라마이도필라 , 크로모박테리움 , 키세오박테리움, 크라이세오모나스 , 사이트로박터 , 클로스트리듐, 콜린셀라 , 코마모나스 , 코라이네박테리움 , 콕시엘라, 크립토박테리움 , 델프티아 , 데르마박터 , 더마토필루스 , 데설포모나스 , 데설포비브리오 , 디알리스터 , 디켈로박터 , 돌로시코쿠스 , 돌로시그라눌룸 , 에드워드시엘라 , 에게르텔라 , 에를리치아 , 에이케넬라 , 엠페도박터 , 엔테로박터, 엔테로코쿠스 , 어위니아 , 에리시펠로트릭스, 에스케리치아 , 유박테륨, 어윙젤라 , 엑시구오박테리움 , 파클라미아 , 필리팍토르 , 플라비모나스 , 플라보박테리움, 프란시셀라 , 푸소박테리움 , 가드네넬라 , 글로비카텔라 , 제멜라 , 고르도나, 헤모필루스 , 하프니아 , 헬리코박터, 헬로코쿠스 , 홀데마니아 , 이그나비그라눔 , 존소넬라 , 킨겔라 , 클렙시엘라 , 코쿠리아 , 코세렐라 , 쿠르티아 , 키토코쿠스 , 락토바실러스 , 락토코쿠스 , 라우트로피아 , 레클러시아 , 레지오넬라, 레미노렐라 , 렙토스피라, 렙토트리치아 , 류코노스톡, 리스테리아 , 리스토넬라 , 메가스파에라 , 메틸로박테리움 , 마이크로박테리움 , 마이크로코쿠스 , 미츠오켈라 , 모빌룬쿠스 , 모엘레렐라, 모락셀라, 모르가넬라 , 마이코박테리움, 마이코플라스마, 마이로이데스 , 나이세리아 , 노카르디아 , 노르카르디옵시스 , 오크로박트룸 , 오에스코비아 , 올레젤라 , 오리엔티아 , 파에니바실러스 , 판토에아 , 파라클라미디아 , 파스튜렐라, 페디오코쿠스 , 펩토코쿠스 , 펩토스트렙토코쿠스 , 포토박테리움 , 포토하드더스 , 플레시오모나스 , 포르피리모나스 , 프레보텔라 , 프로피오니박테리움 , 프로테우스, 프로비덴시아 , 슈도모나스, 슈도노카르디아 , 슈도라미박터 , 사이크로박터 , 라넬라 , 랄스토니아 , 로도코쿠스 , 리케차 로칼리마이아 로세오모나스 , 로티아 , 루미노코쿠스 , 살모넬라, 셀레노모나스 , 세르풀리나 , 세라티아, 쉐웨넬라 , 시겔라 , 심카니아 , 슬랙키아 , 스핑고박테리움 , 스핑고모나스 , 나선균, 스타필로코쿠스 , 스테노트로포모나스 , 스토마토코쿠스 , 스트렙토바실러스 , 스트렙토코쿠스 , 스트렙토마이세스 , 숙시니비브리오 , 숫테렐라 , 수토넬라 , 타투멜라 , 티시에렐라 , 트라불시엘라 , 트레포네마, 트로페리마 , 싸카무렐라 , 투리셀라 , 우레아플라즈마 , 바고코쿠스 , 베일로넬라 , 비브리오, 위크셀라 , 울리넬라 , 크산토모나스 , 크세노랍두스 , 예르시니아 , 및 요케넬라; 예를 들어 스타필로코쿠스 아우레스 , 스타필로코쿠스 에피더미디스 , 스타필로코쿠스 에퀴 , 스트렙토코쿠스 파이오제네스 , 스트렙토코쿠스 아갈락티아에 , 리스테리아 모노사이토게네스 , 리스테리아 이바노비이 , 바실러스 안트라시스 , B. 서브틸리스, 노카르디아 아스테로이데스 , 악티노마이세스 이스라엘이, 프로피오니박테리움 아크네스, 클로스트리듐 테타니 , 클로스트리듐 페르프린겐스 , 클로스트리듐 보툴리눔, 및 엔테로코쿠스 종을 포함한 그램-양성 박테리아, 슈도모나스 에어루기노사 , 비브리오 콜레라에, 악티노바실러스 플레우로뉴모니아에 , 파스튜렐라 하에몰리티카 , 파스튜렐라 멀토시다 , 레지오넬라 뉴모필라 , 살모넬타이피 , 브루셀라 아보르투스, 콕시엘라 부르네티 , 에스케리치아 콜라이 , 니세리아 메닌기티디스 , 니세리아 고노리아 , 헤모필루스 인플루엔자, 헤모필루스 두크레이, 예르시니아 페스티스 , 예르시니아 엔테롤리티카 , 에스케리치아 히라에 , 버크홀데리아 세파시아 , 버크홀데리아 말레이, 버크홀데리아 슈포말레이 , 프란시셀라 툴라렌시스 , 박테로이데스 프라길리스 , 푸소바스테륨 뉴클레아툼 , 카우드리아 루미난티움 , 모락셀라 카타르할리스, 클렙시엘라 뉴모니아에 , 프로테우스 미라빌리스, 엔테로박터 클로아케 , 세라티아 마르세스센스 , 헬리코박터 파일로리 , 살모넬라 엔테리티디스 , 살모넬타이피 및 아시네토박터 바우마니 , 아시네토박터 이요피 , 프로비덴시아 스투아르티이 , 프로비덴시아 레트게리 , 프로비덴시아 알칼리파엔시스 및 클렙시엘라 옥시토카를 포함한 그램-음성 박테리아, 및 클라미디아 트라코마티스 , 클라미디아 프시타치 및 마이코박테리아 예컨대 M. 투베르쿨로시스 , M. 보비스 , M. 타이피뮤리움 , M. 보비스 균주 BCG, BCG 하위균주 , M. 아비움 , M. 인트라셀룰라레 , M. 아프리카늄 , M. 칸사시 , M. 마리넘 , M. 울세란스 , M. 아비움 아종 파라투베르쿨로시스를 포함한 그램 비-반응성 박테리아를 포함한다.
바람직하게는 본 발명에 따라 표적화된 박테리아 감염은 하기 속으로부터 선택된 박테리아를 포함한다: 아크로모박터, 아시네토박터 , 악티노바실러스 , 에어로모나스 , 아그로박테리움, 알칼리게네스, 알테로모나스, 박테로이데스 , 바르토넬라 , 보렐리아 , 보데텔라, 브루셀라, 버크홀데리아 , 캄필로박터 , 카디오박테리움 , 클라미디아, 클라마이도필라 , 크로모박테리움 , 키세오박테리움 , 크라이세오모나스 , 사이트로박터, 클로스트리듐, 코마모나스 , 코라이네박테리움 , 콕시엘라, 크립토박테리움 , 에드워드시엘라 , 에이케넬라 , 엔테로박터, 엔테로코쿠스 , 어위니아 , 킨겔라 , 클렙시엘라, 락토바실러스 , 락토코쿠스 , 레지오넬라, 렙토스피라, 렙토트리치아 , 류코노스톡, 리스테리아 , 리스토넬라 , 모빌룬쿠스, 모락셀라 , 모르가넬라 , 마이코박테리움, 마이코플라스마, 나이세리아 , 노카르디아 , 노르카르디옵시스 , 판토에아 , 파라클라미디아 , 파스튜렐라, 펩토코쿠스 , 펩토스트렙토코쿠스 , 프레보텔라 , 프로피오니박테리움, 프로테우스, 프로비덴시아 , 슈도모나스, 랄스토니아 , 리케차, 살모넬라, 쉐웨넬라 , 시겔라 , 스핑고박테리움 , 스핑고모나스 , 스타필로코쿠스 , 스테노트로포모나스 , 스트렙토바실러스 , 스트렙토코쿠스 , 스트렙토마이세스 , 트레포넴 및 예르시니아 .
따라서, 본 발명은 그램 양성 또는 그램 음성 박테리아, 또는 사실상 그램-불확정 박테리아에 대해 사용될 수 있지만, 그램-음성 박테리아, 예를 들어 상기 특정된 것들에 대한 사용이 바람직하다. 이들은 아크로모박터, 악시다미노코쿠스 , 악시도보락스, 아시네토박터 , 악티노바실러스 , 에어로모나스 , 아피피아 , 아그로박테리움, 알칼리게네스, 알테로모나스 , 아나에로보스피릴룸 , 아나에로랍두스 , 아르코박터 , 박테로이데스 , 발네아트릭스 , 바르토넬라 , 버지엘라 , 바일로필라 , 브란하멜라 , 보렐리아 , 보데텔라, 브라키스피라 , 브레비바실러스 , 브레분디모나스 , 브루셀라, 버크홀데리아 , 부티아욱셀라 , 칼리마토박테리움 , 캄필로박터 , 카프노사이토파가 , 카디오박테리움 , 카토넬라 , 세데세아 , 센티페다 , 클라미디아, 클라마이도필라 , 크로모박테리움 , 키세오박테리움 , 크라이세오모나스 , 사이트로박터 , 코마모나스 , 콕시엘라, 델프티아 , 데설포모나스 , 데설포비브리오 , 디알리스터 , 디켈로박터 , 에드워드시엘라, 에를리치아 , 에이케넬라 , 엠페도박터 , 엔테로박터, 어위니아 , 에스케리치아 , 어윙젤라 , 플라비모나스 , 플라보박테리움 , 프란시셀라 , 푸소박테리움 , 가드네넬라, 헤모필루스 , 하프니아 , 헬리코박터, 존소넬라 , 킨겔라 , 클렙시엘라 , 코세렐라, 라우트로피아 , 레클러시아 , 레지오넬라, 레미노렐라 , 렙토스피라, 렙토트리치아 , 리스토넬라 , 메가스파에라 , 메틸로박테리움 , 미츠오켈라 , 모엘레렐라 , 모락셀라, 모르가넬라 , 마이코플라스마, 마이로이데스 , 나이세리아 , 오크로박트룸 , 올레젤라, 오리엔티아 , 판토에아 , 파라클라미디아 , 파스튜렐라, 포토박테리움 , 포토하드더스 , 플레시오모나스 , 포르피리모나스 , 프레보텔라 , 프로테우스, 프로비덴시아 , 슈도모나스, 사이크로박터 , 라넬라 , 랄스토니아 , 리케차, 로칼리마이아 , 로세오모나스 , 살모넬라, 셀레노모나스 , 세르풀리나 , 세라티아, 쉐웨넬라 , 시겔라 , 심카니아, 스핑고박테리움 , 스핑고모나스 , 나선균, 스테노트로포모나스 , 스트렙토바실러스 , 숙시니비브리오 , 숫테렐라 , 수토넬라 , 타투멜라 , 티시에렐라 , 트라불시엘라 , 트레포네마, 우레아플라즈마 , 베일로넬라 , 비브리오, 위크셀라 , 울리넬라 , 크산토모나스, 크세노랍두스 , 예르시니아 , 및 요케넬라 ; 예를 들어 슈도모나스 에어루기노사 , 비브리오 콜레라에, 악티노바실러스 플레우로뉴모니아에 , 파스튜렐라 하에몰리티카, 파스튜렐라 멀토시다 , 레지오넬라 뉴모필라 , 살모넬라 타이피 , 브루셀라 아보르투스 , 콕시엘라 부르네티 , 에스케리치아 콜라이 , 니세리아 메닌기티디스 , 니세리아 고노리아 , 헤모필루스 인플루엔자, 헤모필루스 두크레이, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 엔테롤리티카 , 에스케리치아 히라에 , 버크홀데리아 세파시아 , 버크홀데리아 말레이, 버크홀데리아 슈포말레이 , 프란시셀라 툴라렌시스 , 박테로이데스 프라길리스 , 푸소바스테륨 뉴클레아툼 , 카우드리아 루미난티움 , 모락셀라 카타르할리스, 클렙시엘라 뉴모니아에 , 프로테우스 미라빌리스, 엔테로박터 클로아케 , 세라티아 마르세스센스 , 헬리코박터 파일로리 , 살모넬라 엔테리티디스 , 살모넬라 타이피 및 아시네토박터 바우마니 , 아시네토박터 이요피 , 프로비덴시아 스투아르티이 , 프로비덴시아 레트게리 , 프로비덴시아 알칼리파엔시스 및 클렙시엘라 옥시토카 속 또는 종으로부터의 박테리아를 포함할 것이다.
바람직하게는 본 발명에 따라 표적화된 그램 음성 박테리아는 다음의 속으로부터 선택된다: 아크로모박터, 아시네토박터 , 악티노바실러스 , 에어로모나스 , 아그로박테리움, 알칼리게네스, 알테로모나스 , 박테로이데스 , 바르토넬라 , 보렐리아 , 보데텔라, 브루셀라, 버크홀데리아 , 캄필로박터 , 카디오박테리움 , 클라미디아, 클라마이도필라 , 크로모박테리움 , 키세오박테리움 , 크라이세오모나스 , 사이트로박터 , 코마모나스, 콕시엘라, 에드워드시엘라 , 에이케넬라 , 엔테로박터, 어위니아 , 킨겔라 , 클렙시엘라, 레지오넬라 , 렙토스피라, 렙토트리치아 , 리스테리아 , 모락셀라, 모르가넬라, 마이코플라스마, 나이세리아 , 판토에아 , 파라클라미디아 , 파스튜렐라, 프레보텔라, 프로테우스, 프로비덴시아 , 슈도모나스, 랄스토니아 , 리케차, 살모넬라, 쉐웨넬라 , 시겔라 , 스핑고박테리움 , 스핑고모나스 , 스테노트로포모나스 , 스트렙토바실러스 , 트레포넴 및 예르시니아 .
그램-음성 박테리아 내에서 엔테로박테리아세아에 및 그램-음성 박테리아 비-발효 박테리아가 특히 주지된다.
엔테로박테리아세아에는, 비제한적으로, 알리쉐와넬라 , 알테로코커스 , 아쿠아모나스 , 아라니콜라, 아조티비르가, 브렌네리아, 부드비시아 , 부티아욱셀라 , 세데세아, 사이트로박터 , 크로노박터 , 딕케야 , 에드워드시엘라 , 엔테로박터, 어위니아 , 에스케리치아 , 어윙젤라 , 그리몬텔라 , 하프니아 , 클렙시엘라 , 클루이베라 , 레클러시아, 레미노렐라 , 모엘레렐라 , 모르가넬라 , 오베숨박테리움 , 판토에아 , 펙토박테리움 , 플로모박터 , 포토하드더스 , 플레시오모나스 , 프라기아 , 프로테우스, 프로비덴시아, 라넬라 , 라오울텔라 , 살모넬라, 삼소니아 , 세라티아, 시겔라 , 소달리스 , 타투멜라 , 트라불시엘라 , 위글스워티아 , 크세노랍두스 , 예르시니아 , 요케넬라 속으로부터의 박테리아를 포함한다. 엔테로박테리아세아에의 바람직한 속은 에스케리치아 , 클렙시엘라 , 살모넬라, 시겔라 , 예르시니아 및 프로비덴시아를 포함한다.
비-발효 그램-음성 박테리아는, 비제한적으로, 슈도모나스, 아시네토박터 , 스테노트로포모나스 및 버크홀데리아 , 아크로모박터, 알갈리게네스 , 보데텔라, 브레분디모나스 , 코마모나스 , 엘리자베스킹지아 (예전에 크라이세오박테리움), 메틸로박테리움 , 모락셀라, 오크로박트룸 , 올레젤라 , 사이크로박터 , 랄스토니아 , 로세오모나스 , 쉐와넬라 , 스핑고박테리움 , 예를 들어 슈도모나스 에어루기노사 , 아시네토박터 바우마니 , 스테노트로포모나스 말토필리아 , 및 버크홀데리아 spp . 속으로부터의 박테리아를 포함한다.
바람직하게는 박테리아는 슈도모나스, 아시네토박터 , 스테노트로포모나스 , 버크홀데리아, 에스케리치아 , 클렙시엘라, 프로비덴시아 , 예를 들어 슈도모나스 에어루기노사 , 아시네토박터 바우마니 , 스테노트로포모나스 말토필리아 , 버크홀데리아 spp , E. 콜리 , 클렙시엘라 뉴모니아에 및 버크홀데리아 세파시아 , 버크홀데리아 말레이, 버크홀데리아 슈포말레이 , 아시네토박터 이요피 , 프로비덴시아 스투아르티이 , 프로비덴시아 레트게리 , 프로비덴시아 알칼리파엔시스 , 클렙시엘라 옥시토카 , 슈도모나스 안구일리셉티카 , 슈도모나스 오리지하비탄스 , 슈도모나스 플레코글로시시다 및 슈도모나스 루테올라 속으로부터 선택될 수 있다. 보다 바람직하게는 박테리아는 슈도모나스, 아시네토박터 , 에스케리치아 및 클렙시엘라, 예를 들어 슈도모나스 에어루기노사 , 아시네토박터 바우마니 , E. 콜리 및 클렙시엘라 뉴모니아에 속으로부터 선택될 수 있다.
특정 양태에서, 감염은 병원 감염, 예를 들어 낭포성 섬유증, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 울혈성 폐쇄성 기도 질환 / 울혈성 폐쇄성 기도 폐렴 (COAD/COAP), 폐렴, 폐공기증, 기관지염 또는 부비강염으로 고통받고 있는 환자에서 환자의 기도의 감염; 상처, 특히 (화상을 포함한) 만성 상처에서의 감염, 이식가능 또는 보철 의료 기기와 관련된 디바이스 관련된 감염 예를 들어 인조판 심내막염 또는 라인 또는 카테터 또는 인공 관절 또는 조직 대체물 또는 기관내 또는 기관절재술 튜브의 감염이다. 통상적으로 이러한 감염을 유발하는 박테리아의 유형의 예는 슈도모나스 에어루기노사, 아시네토박터 바우마니 , 스테노트로포모나스 말토필리아 , 버크홀데리아 spp (예를 들어 B. 세파시아 ), E. 콜리 , 클렙시엘라 뉴모니아에 , 스타필로코쿠스 아우레스, 메티실린 저항성 스타필로코쿠스 아우레스 (MRSA), 클로스트리듐 디피실레, 마이코박테리움 투베르쿨로시스 , 엔테로코쿠스 및 반코마이신-저항성 엔테로코쿠스 및 프로비덴시아 스투아르티이를 포함한다. 본 발명에 따라 중요한 다른 감염은 바르토넬라 (예를 들어 바르토넬라 헨셀라 ), 마이코박테리아 (예를 들어 마이코박테리움 아비움 복합체 (MAC), M. 칸사시, M. 마리넘 , M. 울세란스 , M. 크세노피 ), 헤모필루스 인플루엔자 유형 b (Hib) 또는 레지오넬라 (예를 들어 레지오넬라 뉴모필라 ; 재향군인병), 나병 (M. 레프라에), 인간 과립구성 아나플라즈마증 (아나플라즈마 파고사이토필럼 ), 브루셀라증 (브루셀라 멜리텐시스 ), 수막염균 질환 (나이세리아 메닝자이티데스) 및 탄저병 ( 바실러스 안트라시스 )에 의한 감염을 포함한다.
박테리아는 다중약물 내성일 수 있으며, 예를 들어 박테리아는 적어도 3개, 또는 적어도 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 항생제 부류, 예를 들어 아미노글리코시드 (예를 들어 아미카신, 겐타마이신, 카나마이신, 카프레오마이신, 네오마이신, 네틸마이신, 스트렙토마이신, 토브라마이신); β-락탐 (예를 들어 카베세펨 (예를 들어 로라카르베프); 제1 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세파드록실, 세파졸린, 세팔렉신); 제2 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세파클로르, 세파만돌, 세팔렉신, 세폭시틴, 세프프로질, 세푸록심); 제3 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세픽심, 세프디니르, 세프디토렌, 세포페라존, 세포탁심, 세프포독심, 세프타지딤, 세프티부텐, 세프티족심, 세프트리악손); 제4 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세페핌); 모노박탐 (예를 들어 아즈트레오남)); 매크롤라이드 (예를 들어 아지트로마이신, 클라리트로마이신, 디리트로마이신, 에리트로마이신, 트롤레안도마이신); 모노박탐 (예를 들어 아즈트레오남); 페니실린 (예를 들어 아목시실린, 암피실린, 카르베니실린, 클록사실린, 디클록사실린, 나프실린, 옥사실린, 페니실린 G, 페니실린 V, 피페라실린, 티카실린); 폴리펩타이드 항생제 (예를 들어 바시트라신, 콜리스틴 및 폴리믹신 B, 그러나 특정 구현예에서 바시트라신 아님); 퀴놀론 (예를 들어 시프로플록사신, 에녹사신, 가티플록사신, 레보플록사신, 로메플록사신, 목시플록사신, 노르플록사신, 오플록사신, 트로바플록사신); 설폰아미드 (예를 들어 마페나이드, 설파세트아미드, 설파메티졸, 설파살라진, 설피속사졸, 트리메토프림- 설파메톡사졸); 테트라사이클린 (예를 들어 데메클로사이클린, 독시사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 테트라사이클린); 글라이실사이클린 (예를 들어 티제사이클린); 케바페넴 (예를 들어 이미페넴, 메로페넴, 에르타페넴, 도리페넴, 파니페넴/베타미프론, 비아페넴, PZ-601); 및 클로르암페니콜; 클린다마이신, 에탐부톨; 포스포마이신; 이소니아지드; 리네졸라이드; 메트로니다졸; 니트로푸란토인; 피라진아미드; 퀴누프리스틴/탈포프리스틴; 스펙티노마이신; 포스포마이신 및 반코마이신을 포함한 다른 항생제로부터의 항생제에 대해 저항성이다.
항생제에 대한 감수성, 즉 민감성, (및 반대로 저항 및 내성)은 임의의 편리한 방식으로, 예를 들어 희석 감수성 시험 및/또는 디스크 확산 시험으로 측정될 수 있다. 바람직하게는 항생제에 대한 세균 균주의 감수성은 그 미생물에 대한 그 항생제의 최소 억제성 농도 (MIC)(Jorgensen et al., Manual of Clinical Microbiology, 7th ed. Washington, D.C: American Society for Microbiology, 1999; 1526-43), 즉 그 세균 균주의 성장을 완전히 억제하는 항생제의 농도의 관점에서 표현된다.
숙련가는 저항을 구성하기에 충분한 내성/감수성의 차이의 정도는 시험하의 항생제 및 세균 균주 및 사용되는 시험에 따라 달라질 것임을 인정할 것이다. 많은 규제 기관, 예를 들어 유럽 항생제 감수성 검사 위원회(EUCAST)가 단리물을 시험하의 항미생물제에 대해 민감한지, 중간인지, 또는 저항성인지 정하기 위한 감수성 시험의 결과의 해석에 사용되는 차별적인 항미생물 농도인 특이적 항미생물제 및 미생물에 대한 소위 "중단점"을 설정한다. 숙련가는 본 발명에 의해 치료되는 박테리아 감염이 이들 정의하에서 문제의 항생제에 대해 저항성인지 아닌지를 확인하기 위해 이러한 정보를 이용할 수 있다.
특정 구현예에서 표적 감염은 생물막에서 박테리아일 것이다. 그러나, 다른 구현예에서 박테리움은 생물막에 있지 않을 것이다.(예를 들어 플랭크론적으로 성장할 것이다). 달리, 박테리움은 생물막 성장 방식이거나 그렇지 않거나; 또는 비-생물막 성장 방식이거나 그렇지 않을 것이다.
"생물막"이란 이 콜로니의 미생물이 (예를 들어 그것의 "비-생물막" 또는 자유-부유 또는 플랑크톤 대응물과 비교하여) 성장률 및 유전자 전사와 관련하여 변경된 표현형을 나타냄을 특징으로 하여 기층 또는 계면에 또는 서로에 대해서 (일부 운동성 세포가 또한 존재할 수 있음) 부착되고 세포외 폴리머 (더 구체적으로 이들이 생산한 세포외 폴리머)의 매트릭스에 포매된 고착 세포의 우세를 특징으로 하는 미생물의 공동체를 의미한다. "생물막에서"란 본 발명의 방법에 의해 표적화된 박테리움이 생물막의 폴리머 매트릭스 내에 (전부 또는 일부), 상에 또는 이와 관련하여 있음을 의미한다. 상이하게 볼 때, "생물막에 있지 않는" 박테리아는 단리되어 있는, 예를 들어 플랑크톤인 유기체, 또는 복수의 유기체의 집합체 내에 있는 경우, 응집이 조직화되지 않고/않거나 생물막의 특징인 매트릭스가 없는 유기체이다. 각 경우에, 개별 박테리아는 그것의 생물막 내재 대응물에서 관측되는 변경된 표현형을 나타내지 않는다.
특정 구현예에서 박테리아 감염은 아시네토박터 속으로부터의 박테리아를 함유하지 않는다. 특정 구현예에서 본 발명에 따라 치료 또는 예방하고자 하는 박테리아 감염은 다중약물 내성인 박테리아를 함유하지 않는다.
특정 구현예에서 본 발명은 호흡기 감염 또는 이와 관련된 병태(예를 들어 낭포성 섬유증, 폐렴, COPD, COAD, COAP, 기관지염, 부비강염, (화상을 포함한) 만성 상처에서의 감염, 이식가능 또는 보철 의료 기기와 관련된 디바이스 관련 감염, 균혈증, 패혈증, 패혈성 쇼크, 또는 패혈증)의 치료 또는 예방을 제공할 수 있다.
하나의 바람직한 구현예에서 박테리아 감염은 특히 CF, COPD/COAD, 또는 천식을 포함한, 근본적인 호흡 장애 또는 병태로 고통받고 있는 대상체에서의 호흡기 감염이다.
"치료"는 본 발명에 따라 대상체에서 박테리아 감염/의료 병태의 치료와 관련하여 사용되는 경우 임의의 치료적 효과, 즉 감염과 관련한 또는 병태에 대한 임의의 유익한 효과를 포함하기 위해 본원에서 광범위하게 사용된다. 따라서, 감염의 박멸 또는 제거, 또는 상기 대상체 또는 감염의 치유, 뿐만 아니라 대상체의 감염 또는 병태의 개선이 포함된다. 따라서 예를 들어, 감염 또는 병태의 임의의 증상 또는 징후에 있어서, 또는 감염/병태의 임의의 임상적으로 허용된 지표에 있어서의 개선 (예를 들어 상처 크기의 감소 또는 치유 시간의 가속)이 포함된다. 따라서 치료는, 예를 들어 기존의 또는 진단된 감염/병태의 치유적 및 일시적 처방 요법 둘 다, 즉 반동적 치료를 포함한다.
"예방"은 본 명세서에서 사용된 바와 같이 임의의 예방적 또는 방지적 효과를 지칭한다. 따라서 이것은, 예를 들어 예방적 치료 전의 감염/병태 또는 증상 또는 조짐에 비해 감염/병태 또는 감염/병태의 개시, 또는 이의 1개 이상의 증상 또는 징후를 지연, 제한, 감소 또는 예방함을 포함한다. 따라서 예방은 감염/병태, 또는 이의 증상 또는 조짐의 발생 또는 발달의 절대적인 예방, 및 감염/병태 또는 이의 증상 또는 조짐의 개시 또는 발달의 임의의 지연, 또는 감염/병태 또는 이의 증상 또는 조짐의 발달 또는 진행의 감소 또는 제한 둘 다를 명백하게 포함한다.
상기 대상체는 임의의 인간 또는 비-인간 동물 대상체일 수 있지만, 더 상세하게는 인간 또는 비-인간 척추동물, 예를 들어 비-인간 포유동물, 새, 양서류, 어류 또는 파충류일 수 있다. 바람직한 구현예에서 상기 대상체는 포유동물 대상체이다. 동물은 가축 또는 사육 동물, 또는 실험실 동물 또는 동물원 또는 동물 보호 구역의 동물을 포함한 상업적 가치의 동물일 수 있다. 따라서 대표적인 동물은 개, 고양이, 토끼, 마우스, 기니아 피그, 햄스터, 말, 돼지, 양, 염소 및 소를 포함한다. 따라서 본 발명의 수의적 용도가 포함된다. 상기 대상체를 환자로 간주할 수 있다. 바람직하게는 상기 대상체는 인간이다. 일부 구현예에서 상기 대상체는 반추동물 포유동물이 아니다.
용어 "대상체에서"는 대상체 내부 또는 대상체 상의 부위 또는 위치, 예를 들어 외부 체표면을 포함하기 위해 본원에서 광범위하게 사용되며, 특히 의료 기기 예를 들어 이식된 또는 "내재하는" 의료 기기의 감염을 포함할 수 있다. 용어 "환자에서"는 이와 일관되게 해석되어야 한다.
따라서 감염의 위치는 구강 (예를 들어 치아, 잇몸, 잇몸 틈, 치주 포켓), 생식관 (예를 들어 자궁경부, 자궁, 나팔관), 복막, 중이, 전립선, 요로, 혈관 내막, 눈, 즉 안구 조직 (예를 들어 결막, 각막 조직, 누관, 눈물샘, 눈꺼풀) 기도, 폐 조직 (예를 들어 기관지 및 폐포), 심장판막, 위장관, 피부, 두피, 손톱 및 상처, 특히 국소 또는 내부 상처일 수 있는 만성 상처 및 외과적 상처의 내측의 표면일 수 있다. 다른 표면은 기관, 특히 이식받은 것들, 예를 들어, 심장, 폐, 신장, 간, 심장판막, 췌장, 장, 각막 조직, 동맥 및 정맥 이식물 및 피부의 외측을 포함한다.
따라서 감염은 또한 체액 (예를 들어 혈액, 혈장, 혈청, 뇌척수액, GI 관 내용물, 정액, 가래 및 다른 폐 분비) 및 조직 (예를 들어 부신, 간, 신장, 췌장, 뇌하수체, 갑상선, 면역, 난소, 고환, 전립선, 자궁내막, 안구, 유선, 지방질, 상피성, 내피, 신경, 근육, 폐, 표피, 골성)에 존재할 수 있다.
감염은 추가로 임의의 "내재하는" 의료 또는 외과적 설비 또는 디바이스 상에서 발견될 수 있다. 이것은 카테터 (예를 들어 중심 정맥 및 요로 카테터), 보철 디바이스 예를 들어, 심장판막, 인공 관절, 의치, 치과 크라운, 치과용 캡 및 연조직 이식물 (예를 들어 유방, 엉덩이 및 입술 이식물)을 포함한 임의의 종류의 라인을 포함할 수 있다. 임의의 종류의 이식가능 의료 기기가 포함된다 (예를 들어 스텐트, 자궁내 디바이스, 심장박동기, 삽관 튜브 (예를 들어 기관내 또는 기관절개술 튜브), 보철 또는 보철 디바이스, 라인 또는 카테터). "내재하는" 의료 기기는 임의의 일부가 신체 내에 함유되어 있는 디바이스를 포함할 수 있으며, 즉 디바이스가 전체적으로 또는 부분적으로 내재될 수 있다.
감염은 급성, 또는 대안적으로 만성일 수 있으며, 예를 들어 감염은 적어도 5일 또는 적어도 10일, 특히 적어도 20일, 더 상세하게는 적어도 30일, 가장 특히 적어도 40일간 지속된다.
박테리아 감염은 임의의 대상체에서 발생할 수 있지만 일부 대상체가 다른 대상체보다 감염에 더 민감할 것이다. 박테리아 감염에 민감한 대상체는, 비제한적으로, 상피성 및/또는 내피 장벽이 약화되거나 손상된 대상체, 미생물 감염에 대한 분비-기반 방어가 폐지, 파괴, 약화 또는 손상된 대상체, 및 면역저하, 면역결핍 또는 면역억제된 대상체 (즉 면역계의 임의의 일부가 정상적으로 작동하지 않거나, 정상이하로 작동하고, 환언하면 질환 또는 임상 개재 또는 다른 치료로 인해서든, 또는 어떤 식으로든 면역 반응, 또는 면역 활성의 임의의 일부가 감소되거나 손상된 대상체)를 포함한다.
박테리아 감염에 민감한 대상체의 대표적인 예는, 비제한적으로, 미리 확립된 감염 (예를 들어 박테리아, 바이러스, 진균 또는 기생충 예컨대 원생동물)을 갖는 대상체, 특히 HIV를 갖는 대상체, 균혈증, 패혈증을 갖는 대상체 및 패혈성 쇼크를 갖는 대상체; 면역결핍을 갖는 대상체, 예를 들어 화학요법 및/또는 방사선요법을 준비하거나 받고 있거나 이로부터 회복한 대상체, 장기 (예를 들어 골수, 간, 폐, 심장, 심장판막, 신장, 등) 이식 대상체 (자가이식, 동종이식편 및 이종이식 환자 포함); AIDS를 갖는 대상체; 건강관리 기관, 예를 들어 병원에 상주하는 대상체, 특히 집중 관리 또는 중요 관리(즉 환자에의 생명 유지 또는 장기 유지 시스템의 제공과 관련된 유닛) 중인 대상체; 호흡 벤틸레이터를 받는 대상체; 트라우마로 고통받고 있는 대상체; 화상을 갖는 대상체, 급성 및/또는 만성 상처를 갖는 대상체; 신생아 대상체; 노인 대상체; 암 (임의의 신생물성 병태; 악성 또는 비-악성을 포함하는 것으로 본원에서 광범위하게 정의됨)을 갖는 대상체, 특히 면역계의 암 (예를 들어 백혈병, 림프종 및 다른 혈액학적 암)을 갖는 대상체; 자가면역 병태 예컨대 류마티스성 관절염, 진성 당뇨병 유형 I, 크론병으로 고통받고 있는 대상체, 특히 이들 질환에 대한 면역억제 치료를 받고 있는 대상체; 감소되거나 폐지된 상피성 또는 내피 분비 (예를 들어 점액, 눈물, 타액) 및/또는 분비 청소능을 갖는 대상체 (예를 들어 점막 조직에서 저조하게 기능하는 섬모를 갖는 대상체 및/또는 고점성 점액을 갖는 환자 (예를 들어 흡연자 및 COPD, COAD, COAP, 기관지염, 낭포성 섬유증, 폐공기증, 폐암, 천식, 폐렴 또는 부비강염을 갖는 대상체)) 및 의료 기기가 구비된 대상체를 포함한다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 유효량을 상기 표적 감염의 박테리아에 및/또는 본 발명을 지니는 부위 또는 감염의 위험이 있는 부위에 전달하기 위해 임의의 편리한 형태로 또는 임의의 편리한 수단에 의해, 예를 들어 국소, 장관 (예를 들어 경구, 볼, 설하, 직장), 비경구 (예를 들어 정맥내, 척수내, 근육내, 피하) 경로에 의해, 또는 흡입에 의해 (비강 흡입 포함) 상기 대상체에 투여될 수 있다. 투여는 전신 분포 또는 국소화된 분포를 달성할 수 있으며, 이것은 전달이 상기 표적 감염의 박테리아에 및/또는 감염을 지니는 부위 또는 감염의 위험이 있는 부위에 영향을 받지만, 본질적으로 환자의 다른 위치에서는 영향을 받지 않음을 의미한다. 숙련가는 감염을 지니는 임의의 특정 표적 감염 및/또는 부위 또는 감염의 위험이 있는 부위에 맞는 적절한 투여 수단을 선택할 수 있을 것이다. 특히 국소 투여에 의해 달성되는 국소화된 투여가 바람직할 수 있다.
숙련가는 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 당해 분야에서 공지되고 문헌에 널리 기재된 임의의 종래의 방법에 따라 이들 투여 경로 및 신체 분포를 위해 적합한 약제학적 조성물로 제형화할 수 있을 것이다.
더 구체적으로, 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는, 선택적으로 다른 활성제와 함께, 1개 이상의 종래의 담체, 희석제 및/또는 부형제를 편입하여, 종래의 생약 제제 예컨대 정제, 알약, 과립 (예를 들어 유리 형태로 또는 캡슐에 봉입됨), 분말 (예를 들어 건조 흡입성 분말을 포함한 흡입성 분말), 로젠지, 샤세트, 카셰, 엘릭시르, 현탁액, 에멀션, 용액, 시럽, 에어로졸 (고체로서 또는 액체 배지에), 스프레이 (예를 들어 비강 스프레이), 분무기에서 사용하기 위한 조성물, 연고, 크림, 고약, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌약, 페서리, 멸균 주사가능 용액, 멸균 포장된 분말, 및 기타 동종의 것을 제조할 수 있다. 장용 코팅된 고체 또는 액체 조성물, 예를 들어 장의 코팅 정제 및 장용 코팅된 과립 (이것은 장용 코팅된 캡슐로 또는 비-장용 코팅된 캡슐로 제공될 수 있으며 즉 여기서 코팅은 장용피일 수 있거나 그렇지 않을 수 있다); 멸균 흡입성 및 멸균 주사가능 조성물이 특히 주지된다.
적합한 담체, 부형제, 및 희석제의 예는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아검, 인산칼슘, 불활성 알기네이트 폴리머, 트라가칸쓰, 젤라틴, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물 시럽, 물, 물/에탄올, 물/ 글리콜, 물/폴리에틸렌, 고장성 염 물, 글리콜, 프로필렌 글리콜, 메틸 셀룰로스, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필 하이드록시벤조에이트, 탈크, 스테아르산마그네슘, 광유 또는 지방 물질 예컨대 경질 지방 또는 적합한 이들의 혼합물이다. 중요한 부형제 및 희석제는 만니톨 및 고장성 염 물 (염수)이다.
조성물은 윤활제, 습윤제, 유화제, 현탁화제, 보존제, 감미제, 향료 제제, 및 기타 동종의 것을 추가로 포함할 수 있다.
국소 투여를 위해 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 크림, 연고, 겔, 고약, 경피 패치 및 기타 동종의 것으로 편입될 수 있다. 적합한 것으로 고려되는 추가의 국소 시스템은 원위치 약물 전달 시스템, 예를 들어 겔이며 여기서 고체, 반-고체, 비정질 또는 액체 결정성 겔 매트릭스는 원위치에 형성되고 알기네이트 올리고머 (이것은 본 명세서에서 정의된 바와 같은 임의의 알기네이트 올리고머일 수 있다)를 포함할 수 있다. 이러한 매트릭스는 매트릭스로부터의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 방출을 제어하도록 편리하게 설계될 수 있으며, 예를 들어 방출은 선택된 기간에 걸쳐 지연 및/또는 지속될 수 있다. 이러한 시스템은 생물학적 조직 또는 유체, 예를 들어 점막 표면과 접촉시에만 겔을 형성할 수 있다. 전형적으로 겔은 생체접착 및/또는 점막부착형이다. 예비-겔 조성물을 보유할 수 있거나 보유하도록 적응될 수 있는 임의의 신체 부위로의 전달은 그와 같은 전달 기술에 의해 표적화될 수 있다. 이러한 시스템은 제WO 2005/023176호에 기재되어 있으며, 이것은 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된다.
비경구로 투여가능한 형태, 예를 들어 정맥내 전달에 적합한 용액은 멸균성이고 생리적으로 허용될 수 없는 제제를 함유하지 않아야 하고, 투여시 자극 또는 다른 역효과를 최소화하기 위해 낮은 삼투압을 가져야 하며 따라서 용액은 바람직하게는 등장성 또는 약간 고장성, 예를 들어 고장성 염 물 (염수)이어야 한다. 적합한 비히클은 비경구 용액을 투여하기 위해 관례상 사용되는 수성 비히클 예컨대 주사용 멸균수, 염화나트륨 주사, 링거 주사, 덱스트로스 주사, 덱스트로스 및 염화나트륨 주사, 락테이트화된 링거 주사 및 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th ed., Easton: Mack Publishing Co., pp. 1405-1412 and 1461-1487 (1975) and The National Formulary XIV, 14th ed. Washington: American Pharmaceutical Association (1975)]에 기재된 바와 같은 다른 용액을 포함하며, 상기 문헌은 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된다. 용액은 보존제, 항미생물제, 완충액 및 비경구 용액에 종래에 사용되는 산화방지제, 부형제 및 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트와 양립가능하고 생성물의 제조, 저장 또는 사용을 방해하지 않는 다른 첨가제를 함유할 수 있다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 단순 멸균 용액 또는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 포함하는 단순 멸균 액체 조성물이 수술 과정 동안 사용하기 위해 및 예를 들어 분무기에 의해 폐로 전달하기 위해, 또는 예를 들어 비강 스프레이 디바이스에 의해 부비동으로 전달하기 위해 특히 편리할 수 있다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 고체 또는 액체 제형은 위 및/또는 상부 Gi 관의 다른 일부에서의 분해는 방지하지만 하부 GI 관, 예를 들어 소장에서의 분해는 허용하는 장용피로 제공될 수 있다. 이러한 코팅물은 일상적으로 지방산, 왁스, 셸락, 플라스틱, 및 식물 섬유를 포함한 폴리머로부터 제조된다. 이의 특정 예는 비제한적으로 메틸 아크릴레이트-메타크릴산 공중합체, 메틸 메타크릴레이트-메타크릴산 공중합체, 셀룰로스 아세테이트 석시네이트, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 석시네이트 (하이프로멜로스 아세테이트 석시네이트), 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트 (PVAP), 셀룰로스 아세테이트 트리멜리테이트, 및 나트륨 알기네이트 폴리머를 포함한다. 장의 코팅 정제 및 장용 코팅된 과립 (이것은 장용 코팅된 캡슐로 또는 비-장용 코팅된 캡슐로 제공될 수 있다)이 특히 주지된다. 장용 코팅된 과립은 제WO 1989008448호 및 문헌[Al-Khedairy, E.B.H, 2006, Iraqi J.Pharm.Sci., Vol.15 (1) 49]의 교시에 따라 제조될 수 있으며, 이들의 내용은 본 명세서에 참고로 편입되지만, 숙련가는 사용될 수 있는 추가의 대안적인 기술을 인지할 것이다.
본 발명의 조성물 중의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 상대적 함량은 요구된 투약량 및 뒤따르는 투약량 섭생에 따라 변할 수 있지만 치료하고자 하는 상기 대상체의 신체적 크기, 대상체의 특정 질병의 성질, 및 상기 표적 치료 부위의 위치 및 정체와 같은 변수를 고려하여 상기 표적 치료 부위, 즉 상기 표적 감염의 박테리아 및/또는 감염을 지닌 부위, 또는 감염의 위험이 있는 부위에서 유효량을 달성하기에 충분할 것이다. 숙련가는 투여 또는 적용의 횟수를 최소화하기 위해 다중 투약 섭생이 뒤따르거나 증가된다면 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 양은 감소될 수 있음을 알 것이다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 피부 또는 자궁경부 또는 하등 암컷 생식 시스템의 다른 일부에 투여하는데 사용될 수 있는 대표적인 국소 제형, 예를 들어 크림, 연고 또는 고약은 1 내지 25%, 1 내지 20%, 1 내지 15%, 1 내지 10%, 1 내지 9%, 1 내지 8%, 1 내지 7%, 1 내지 6%, 5 내지 25%, 5 내지 20%, 5 내지 15%, 5 내지 10%, 5 내지 9%, 5 내지 8%, 5 내지 7%, 5 내지 6%, 8 내지 25%, 8 내지 20%, 8 내지 15%, 8 내지 10%, 9 내지 25%, 9 내지 20%, 또는 9 내지 15% w/v의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제, 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다. 암컷 생식 시스템에의 국소 제형의 적용을 위해 설계된 전달 장치가 공지되어 있으며 편하다면 상기 언급된 제형을 전달하는데 이용될 수 있다.
페서리가 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 암컷 생식관의 하부 일부에 투여하는데 사용될 수 있다. 대표적인 제형은 1 내지 25%, 1 내지 20%, 예를 들어 1 내지 15%, 1 내지 10%, 1 내지 9%, 1 내지 8%, 1 내지 7%, 1 내지 6%, 5 내지 25%, 5 내지 20%, 5 내지 15%, 5 내지 10%, 5 내지 9%, 5 내지 8%, 5 내지 7%, 5 내지 6%, 8 내지 25%, 8 내지 20%, 8 내지 15%, 8 내지 10%, 9 내지 25%, 9 내지 20%, 또는 9 내지 15% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 고체 부형제를 포함한 약제학적으로 허용가능한 부형제, 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다. 직장 좌약이 유사하게 제형화될 수 있다.
코 또는 부비동으로의 투여를 위해 멸균 수성 및/또는 오일 기재 액체 제형 (예를 들어 에멀션)이 사용될 수 있고; 예를 들어 추진제-비함유 또는 추진제-보조된 비강 스프레이 디바이스에 의해 투여된다. 대표적인 제형은 1 내지 25%, 1 내지 20%, 예를 들어 1 내지 15%, 1 내지 10%, 1 내지 9%, 1 내지 8%, 1 내지 7% 또는 1 내지 6%, 5 내지 25%, 5 내지 20%, 5 내지 15%, 5 내지 10%, 5 내지 9%, 5 내지 8%, 5 내지 7%, 5 내지 6%, 8 내지 25%, 8 내지 20%, 8 내지 15%, 8 내지 10%, 9 내지 25%, 9 내지 20%, 또는 9 내지 15% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있으며, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제, 예를 들어 물, 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 상부 기도에 투여하기 위해 사용되는 대표적인 흡입성 용액은 전형적으로 멸균성일 것이며 6 내지 25%, 예를 들어 6 내지 20%, 6 내지 15%, 6 내지 10%, 8 내지 25%, 8 내지 20%, 8 내지 15 %, 9 내지 25%, 9 내지 20%, 9 내지 15%, 10 내지 15%, 10 내지 20%, 10 내지 25%, 15 내지 20% 또는 15 내지 25% w/v의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제, 예를 들어 물, 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 하부 기도에 투여하기 위해 사용되는 대표적인 흡입성 분말은 최대 90%, 예를 들어 최대 85%, 80%, 75% 또는 70%, 예를 들어 50 내지 90%, 55 내지 90%, 60 내지 90%, 65 내지 90%, 70 내지 90%, 75 내지 90%, 80 내지 90%, 85 내지 90%, 50 내지 85%, 55 내지 85%, 60 내지 85%, 65 내지 85%, 70 내지 85%, 75 내지 85%, 80 내지 85%, 50 내지 80%, 55 내지 80%, 60 내지 80%, 65 내지 80%, 70 내지 80%, 75 내지 80%, 50 내지 70%, 55 내지 70%, 60 내지 70%, 또는 65 내지 70% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제 및/또는, 동일한 조성물에서 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다.
다른 구현예에서 서방출, 지연 방출 또는 지속 방출 제형이 예를 들어 코 또는 부비동으로의 전달을 위해 사용될 수 있다. 대표적인 제형은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유하는 분말 또는 상기 분말의 현탁액일 수 있고, 상기 분말은 최대 90%, 예를 들어 최대 85%, 80%, 75% 또는 70%, 예를 들어 50 내지 90%, 55 내지 90%, 60 내지 90%, 65 내지 90%, 70 내지 90%, 75 내지 90%, 80 내지 90%, 85 내지 90%, 50 내지 85%, 55 내지 85%, 60 내지 85%, 65 내지 85%, 70 내지 85%, 75 내지 85%, 80 내지 85%, 50 내지 80%, 55 내지 80%, 60 내지 80%, 65 내지 80%, 70 내지 80%, 75 내지 80%, 50 내지 70%, 55 내지 70%, 60 내지 70%, 또는 65 내지 70% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유하고, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성된다. 분말은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 방출을 제어하는 코팅을 포함할 수 있다.
본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 하부 GI 관에 투여하는데 사용되는 대표적인 정제는 최대 99%, 최대 95%, 90%, 85% 또는 80%, 예를 들어 50 내지 95%, 55 내지 95%, 60 내지 95%, 65 내지 95%, 70 내지 95%, 75 내지 95%, 80 내지 95%, 85 내지 95%, 90 내지 95%, 50 내지 90%, 50 내지 90%, 55 내지 90%, 60 내지 90%, 65 내지 90%, 70 내지 90%, 75 내지 90%, 80 내지 90%, 85 내지 90%, 50 내지 90%, 55 내지 85%, 60 내지 80% 또는, 65 내지 75% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 약제학적으로 허용가능한 부형제 및/또는 사용된다면 다른 활성제로 구성된다. 정제는 다중-층상 정제일 수 있다.
장의 코팅 정제가 또한, 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 하부 GI 관에 투여하는데 효과적일 수 있다. 대표적인 장의 코팅 정제는 최대 95%, 예를 들어 최대 90%, 85% 또는 80%, 예를 들어 55 내지 90%, 60 내지 90%, 65 내지 90%, 70 내지 90%, 75 내지 90%, 80 내지 90%, 85 내지 90%, 55 내지 85%, 60 내지 85%, 65 내지 85%, 70 내지 85%, 75 내지 85%, 80 내지 85%, 50 내지 80%, 55 내지 80%, 60 내지 80%, 65 내지 80%, 70 내지 80%, 또는 75 내지 80% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 장용피 (예를 들어 지방산, 왁스, 셸락, 플라스틱, 및 식물 섬유를 포함한 폴리머)를 포함한 약제학적으로 허용가능한 부형제, 및/또는 사용된다면 다른 활성제로 구성된다. 정제는 예를 들어 상기에 기재된 바와 같이 다중-층상 정제일 수 있다.
장용 코팅된 과립이 또한, 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 하부 GI 관에 투여하는데 효과적일 수 있다. 이러한 과립은 자체로 장용피가 제공되거나 제공되지 않을 수 있는 캡슐로 제공될 수 있다. 대표적인 장용 코팅된 과립은 최대 95%, 예를 들어 최대 90%, 85% 또는 80%, 예를 들어 55 내지 90%, 60 내지 90%, 65 내지 90%, 70 내지 90%, 75 내지 90%, 80 내지 90%, 85 내지 90%, 55 내지 85%, 60 내지 85%, 65 내지 85%, 70 내지 85%, 75 내지 85%, 80 내지 85%, 50 내지 80%, 55 내지 80%, 60 내지 80%, 65 내지 80%, 70 내지 80%, 또는 75 내지 80% w/v 또는 w/w의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있고, 나머지는 장용피 (예를 들어 지방산, 왁스, 셸락, 플라스틱, 및 식물 섬유를 포함하는 폴리머)를 포함한 약제학적으로 허용가능한 부형제, 및/또는 사용된다면 다른 활성제로 구성된다.
주사에 의한 (예를 들어 정맥내, 척수내, 근육내 또는 피하 주사에 의한) 본 발명의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 전달을 위해 대표적인 수용액은 멸균성일 것이며 6 내지 25%, 예를 들어 6 내지 20%, 6 내지 15%, 6 내지 10%, 8 내지 25%, 8 내지 20%, 8 내지 15%, 9 내지 25%, 9 내지 20%, 9 내지 15%, 10 내지 15%, 10 내지 20%, 10 내지 25%, 15 내지 20%, 또는 15 내지 25% w/v의 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 함유할 수 있으며, 나머지는 물 및 약제학적으로 허용가능한 부형제 및/또는, 사용된다면, 다른 활성제로 구성될 수 있다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 0.1g 내지 10g, 예를 들어 0.5g 내지 5g, 0.8g 내지 3g, 1g 내지 2g, 예를 들어 약 2g의 1일 용량으로 사용될 수 있으며, 이것은 1일당 1회 이상 (예를 들어 매일 한 번 더) 및 1개 이상의 투약 형태 또는 투여 사건 (예를 들어 두 개의 정제 매일 한 번 더)으로 투여될 수 있다.
본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 다른 항-미생물 (예를 들어 항균, 항생제, 항진균 및 항바이러스) 제제, 면역자극성 제제, 코르티코스테로이드, 비-스테로이드 항-염증성 약물 (NSAIDs), 기관지확장제, 점액 점도-환원제 (즉 점액의 점도를 감소시키는 제제, 이 용어들은 용어 "점질다당분해 제제"와 상호교환적으로 사용된다) 또는 CFTR 조절제 (로도 공지된다 "CFTR 개질제")를 포함할 수 있는 1개 이상의 추가의 치료적 활성제와 공동으로 또는 조합하여 사용될 수 있다.
추가의 제제, 예를 들어 항생제는 알기네이트 올리고머에 또는 임의의 다른 접합 모이어티에 비접합될 수 있다.
바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 추가의 치료적 활성제는, 예를 들어, 단일 약제학적 제형 또는 조성물로 함께, 또는 별도로 (즉 별도, 순차 또는 동시 투여)로 투여될 수 있다. 따라서, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 추가의 치료적 활성제는, 예를 들어 약제학적 키트에서 또는 조합된 ("조합") 생성물로서 조합될 수 있다.
따라서 본 발명의 추가 양태는 대상체에서 박테리아 감염, 바람직하게는 그램 음성 박테리아 감염을 치료 또는 예방하는데 있어서 별도, 순차 또는 동시 사용하기 위한 조합된 제제로서 본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 추가의 치료적 활성제 (예를 들어 상기에 기재된 것들)와 함께 포함하는 생성물 (예를 들어 약제학적 조합물 또는 키트)을 제공한다.
보다 일반적으로 본 발명의 이러한 양태는 또한 본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트를 추가의 치료적 활성제 (예를 들어 상기에 기재된 것들)와 함께 포함하는 키트를 제공한다.
본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 항생제, 항진균, CFTR 조절제 및/또는 점액 점도 감소제를 포함하는 조합물이 특히 바람직하다. 이러한 의약품 및 약제학적 조성물이 바람직하게는 본 발명의 의료 방법에서 사용하기에 적합하다.
추가의 치료적 활성제는 편리하게는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 전에, 동시에 또는 후에 적용될 수 있다. 편리하게는 추가의 치료적 활성제는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트와 실질적으로 동일한 시간에 또는 나중에 적용된다. 다른 구현예에서 추가의 치료적 활성제는 편리하게 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 전에 적용되거나 투여될 수 있다. 추가의 치료적 활성제는 또한 사용된 제제에 대해 적절한 시점에서 반복적으로 제공 (예를 들어 투여 또는 전달)될 수 있다. 숙련가는 적합한 투약 요법을 조언할 수 있다. 장기간 치료시 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 또한 반복적으로 사용될 수 있다. 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트는 추가의 치료적 활성제만큼 빈번하게, 또는 그 초과 또는 덜 빈번하게 적용될 수 있다. 요구되는 빈도는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트가 투여되는 환자 내의 또는 상의 부위 또는 위치 및 또한 치료를 받는 특정 환자에 의해 표시된 임상 조건의 전체적인 특성에 따라 좌우될 수 있다.
따라서 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 추가의 치료적 활성제는 함께 또는 별도로, 즉 동일한 또는 상이한 제형 또는 약제학적 조성물로 제형화될 수 있으며, 동일 또는 상이한 경로에 의한 투여를 위해 제공될 수 있다. 본 발명의 의료 방법에서 사용하기 위한 그러한 의약품 및 약제학적 조성물을 제조하기 위한 본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 사용이 또한 고려된다.
본 명세서에서 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트와 공동으로 또는 조합하여 사용될 수 있는 대표적인 항생제는, 비제한적으로, 아미노글리코시드 (예를 들어 아미카신, 겐타마이신, 카나마이신, 네오마이신, 네틸마이신, 스트렙토마이신, 토브라마이신); β-락탐 (예를 들어 카베세펨 (예를 들어 로라카르베프); 제1 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세파드록실, 세파졸린, 세팔렉신); 제2 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세파클로르, 세파만돌, 세팔렉신, 세폭시틴, 세프프로질, 세푸록심); 제3 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세픽심, 세프디니르, 세프디토렌, 세포페라존, 세포탁심, 세프포독심, 세프타지딤, 세프티부텐, 세프티족심, 세프트리악손); 제4 세대 세팔로스포린 (예를 들어 세페핌); 모노박탐 (예를 들어 아즈트레오남); 매크롤라이드 (예를 들어 아지트로마이신, 클라리트로마이신, 디리트로마이신, 에리트로마이신, 트롤레안도마이신); 모노박탐 (예를 들어 아즈트레오남); 페니실린 (예를 들어 아목시실린, 암피실린, 카르베니실린, 클록사실린, 디클록사실린, 나프실린, 옥사실린, 페니실린 G, 페니실린 V, 피페라실린, 티카실린); 폴리펩타이드 항생제 (예를 들어 콜리스틴, 폴리믹신 B이지만, 특정 구현예에서 바시트라신은 아님); 퀴놀론 (예를 들어 시프로플록사신, 에녹사신, 가티플록사신, 레보플록사신, 로메플록사신, 목시플록사신, 노르플록사신, 오플록사신, 트로바플록사신); 설폰아미드 (예를 들어 마페나이드, 설파세트아미드, 설파메티졸, 설파살라진, 설피속사졸, 트리메토프림- 설파메톡사졸); 테트라사이클린 (예를 들어 데메클로사이클린, 독시사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 테트라사이클린); 글라이실사이클린 (예를 들어 티제사이클린); 케바페넴 (예를 들어 이미페넴, 메로페넴, 에르타페넴, 도리페넴, 파니페넴/베타미프론, 비아페넴, PZ-601)을 포함하고; 다른 항생제는 클로르암페니콜; 클린다마이신, 에탐부톨; 포스포마이신; 이소니아지드; 리네졸라이드; 메트로니다졸; 니트로푸란토인; 피라진아미드; 퀴누프리스틴/탈포프리스틴; 리팜핀; 스펙티노마이신; 및 반코마이신을 포함한다.
대표적인 항진균제는, 비제한적으로 폴리엔 (예를 들어 나타마이신, 리모시딘, 필리핀, 나이스타틴, 암포테리신 B, 칸디신; 이미다졸 (예를 들어 미코나졸, 케토코나졸, 클로트리마졸, 에코나졸, 바이포나졸, 부토코나졸, 펜티코나졸, 이소코나졸, 옥시코나졸, 세르타코나졸, 설코나졸, 티오코나졸); 트리아졸 (예를 들어 플루코나졸, 이트라코나졸, 이사부코나졸, 라부코나졸, 포사코나졸, 보리코나졸,테르코나졸); 알릴아민 (예를 들어 테르비나핀, 아모롤핀, 나프티핀, 부테나핀); 및 에치노칸딘 (예를 들어 아니둘라펀진, 카스포펀진, 마이카펀진)을 포함한다.
대표적인 항바이러스제는, 비제한적으로 아바카비르, 아사이클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암프레나비르, 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 보세프레비르, 사이도포비르, 콤바이비르, 다루나비르, 델라비르딘, 디다노신, 도코사놀, 에독수딘, 에파비렌즈, 엠트리시타빈, 엔푸비르타이드, 엔테카비르, 팜사이클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르네트, 포스포네트, 강시클로비르, 이바시타빈 , 이뮤노비르, 이독수리딘, 이미퀴모드, 인디나비르, 이노신, 인터페론 유형 III, 인터페론 유형 II, 인터페론 유형 I, 라미부딘, 로피나비르, 로비라이드, 마라비록, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 오셀타미비르, 펜시클로비르, 페라미비르, 플레코나릴, 포도필로톡신, 랄테그라비르, 리바비린, 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르 , 스타부딘, 테노포비르, 테노포비르 디소프록실, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르, 발강시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르, 및 지도부딘을 포함한다.
대표적인 면역자극성 제제는, 비제한적으로, 사이토카인 예를 들어 TNF, IL-1, IL-6, IL-8 및 면역자극성 알기네이트, 예컨대 면역자극성 특성을 갖는 임의의 알기네이트를 포함하여 예를 들어 전문이 본원에 참고로 명백하게 편입된 제US 5,169,840호, 제WO91/11205호 및 제WO03/045402호에 기재된 바와 같은 높은 M-함량 알기네이트를 포함한다.
적합한 코르티코스테로이드의 대표적인 예는 비제한적으로 프레드니손, 플루니솔라이드, 트리암시놀론, 플루티카손, 부데소니드, 모메타손, 베클로메타손, 암시노나이드, 부데소니드, 데소나이드, 플루오시노나이드, 플루오시놀론, 할시노나이드, 하이드로코르티손, 코르티손, 틱소코르톨, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 프레드니손, 베타메타손, 덱사메타손, 플루오코르톨론, 아클로메타손, 프레드니카르베이트, 클로베타손, 클로베타솔, 및 플루프레드니덴을 포함한다.
대표적인 NSAID는, 비제한적으로, 살리실레이트 (예를 들어 아스피린 (아세틸살리실 산), 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 디플루니살, 살살레이트, 프로피온산 유도체 (예를 들어 이부프로펜, 덱시부프로펜, 덱스케토프로펜, 페노프로펜, 플루르바이프로펜, 케토프로펜, 록소프로펜, 나프록센, 옥사프로진), 아세트산 유도체 (예를 들어 아세클로페낙, 디클로페낙, 에토돌락., 인도메타신, 케토록락, 나부메톤, 톨메틴, 설린닥), 에놀산 유도체 (예를 들어 드록시캄, 이속시캄, 로르녹시캄, 멜록시캄, 피록시캄, 테녹시캄), 안트라닐산 유도체 (예를 들어 플루페남산, 메클로페남산, 메페남산, 톨페남산) 및 선택적 COX-2 억제제 (콕십; 예를 들어 셀레콕십, 에토리콕십, 루미라콕십, 파레콕십, 로페콕십, 발데콕십)를 포함한다. 프로피온산 유도체 (예를 들어 이부프로펜, 덱시부프로펜, 덱스케토프로펜, 페노프로펜, 플루르바이프로펜, 케토프로펜, 록소프로펜, 나프록센, 옥사프로진)가 바람직하고, 이부프로펜이 가장 바람직하다.
적합한 기관지확장제의 대표적인 예는 비제한적으로 β2 효능제 (예를 들어 단기 작용 β2 효능제 (예를 들어 피르부테롤, 에피네프린, 살부타몰, 레보살부타몰, 클렌부테롤, 테르부탈린, 프로카테롤, 메타프로테레놀, 페노테롤, 비톨테롤 메실레이트, 리토드린, 이소프레날린); 지속성 β2 효능제 (예를 들어 살메테롤, 포르모테롤, 밤부테롤, 클렌부테롤); 및 초-지속성 β2 효능제 (예를 들어 인다카테롤)), 항콜린제 (예를 들어 이프라트로피움, 옥시트로피움, 티오트로피움) 및 테오필린을 포함한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어들 "점질다당분해 제제" 및 "점액 점도 감소제"는 점액의 고유 점도를 감소시키는 제제 및 아래 놓인 상피에의 점액의 부착을 감소시키는 제제, 특히 점액의 성분 내에 또는 간에 분자 상호작용을 직접적으로 또는 간접적으로 교란시키는 제제, 점액의 수화에 영향을 주는 제제 및 점막 상피의 이온성 미세환경 (특히 2가 양이온, 예를 들어 칼슘의 수준)을 조절하는 제제를 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 점액 점도 감소제의 대표적인 예는, 비제한적으로, 핵산 절단 효소 (예를 들어 DNase 예컨대 DNase I 또는 도르나제 알파), 고장성 염수, 겔솔린, 티올 환원제, 아세틸시스테인, 미충전된 저분자량 다당류 (예를 들어 덱스트란, 만니톨), 아르기닌 (또는 다른 산화질소 전구체 또는 합성 자극인자), 퓨린성 수용체의 P2Y2 하위유형의 효능제 (예를 들어 데누포솔) 또는 음이온성 폴리아미노산 (예를 들어 폴리 ASP 또는 폴리 GLU)을 포함한다. 암브록솔, 브롬헥신, 카보시스테인, 도미오돌, 에프라지논, 에르도스테인, 레토스테인, 메스나, 넬테넥신, 소브레롤, 스테프로닌, 티오프로닌이 특히 주지되는 점질다당분해제이다. DNase I 및 고장성 염수가 바람직하다.
CFTR 조절제는 CFTR 기능이상을 적어도 부분적으로 감소시키는 소분자이다. 현재의 CFTR 조절제는 세 개의 주요 그룹으로 나뉜다: CFTR 강화제, CFTR 교정제 및 초과번역 제제 (Derichs, N., Eur. Respir. Rev., 2013, 22(127), 58-65; Petit, R.S. and Fellner, C., Pharmacy and Therapeutics, 2014, 39(7), 500-511; 이들의 내용은 본 명세서에 참고로 편입된다). CFTR 강화제는 상피 세포 표면 상에 존재하는 CFTR 이온 통로의 활성을 증가시키는 CFTR 조절제이다. CFTR 교정제는 상피 세포 표면에서 전달되거나 유지된 CFTR 단백질의 양을 증가시키는 CFTR 조절제이다. 초과번역 제제 ("미성숙한 정지 코돈 억제제" (PSC 억제제) 또는 "미성숙한 종료 코돈 억제제" (PTC 억제제)로도 공지되며, 이들 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용된다)는 세포의 번역 기전이 CFTR mRNA에서 임의의 미성숙한 종료 코돈을 피하게 함으로써 생산된 실질적으로 전장 및 기능적 CFTR의 양을 증가시키는 CFTR 조절제이다.
적합한 CFTR 강화제의 대표적인 예는, 비제한적으로, 이바카프토 (VX-770; N-(2,4-디-3급-부틸-5-하이드록시페닐)-1,4-디하이드로-4-옥소퀴놀린-3-카복사미드) 및 VRT-532 (Vertex PharmaceuticalsTM의 4-메틸-2-(5-페닐-1H-피라졸-3-일)-페놀))를 포함한다.
적합한 CFTR 교정제의 대표적인 예는, 비제한적으로, 원형 루마카프터 (VX-809) 및 Vertex PharmaceuticalsTM의 VX-661 및 N6022 (3-[1-(4-카바모일-2-메틸페닐)-5-(4-이미다졸-1-일페닐)파이롤-2-일]프로판산)를 포함한다.
적합한 초과번역 제제의 대표적인 예는, 비제한적으로, PTC Therapeutics의 아탈루렌 (PTC124) 및 겐타마이신을 포함한다.
본 발명은 하기 비-제한적인 실시예와 관련하여 추가로 기재될 것이다:
실시예
실시예 1 - 바시트라신- 알기네이트 올리고머 콘주게이트의 제조
산성 가수분해에 의한 알기네이트 올리고머의 제조
>60% 굴루로네이트 단량체 (PRONOVA UP MVG)를 함유하는 나트륨 알기네이트를 dH2O (10 mg/mL)에 용해시키고, 용액을 0.01 M HCl로 조정한 다음 80℃에서 최대 24 h 동안 수조에 배치하였다. 가수분해를 종료하기 위해, 산 가수분해물을 냉각시키고 10 M NaOH의 첨가에 의해 pH를 pH 7로 증가시켰다. 용액을 동결건조시키고 최소 dH2O에 재현탁시켰다.
허용가능한 수 평균 중합도 뿐만 아니라 분자량 분포를 갖는 산-가수분해된 G-단편 (AHGs)을 수득하기 위해, 용액을 투석에 의해 한 번 여과하여 LMW 올리고머 및 염을 제거하였다. 전형적으로, 원하는 분자량을 갖는 AHGs를 생산하기 위해 하기 반응 시간 및 투석 막 컷-오프가 사용되었다:
Figure pct00006
최종 생성물을 동결건조시키고 FT-IR 및 겔 투과 크로마토그래피 (GPC)로 특성화하였다. GPC 시스템은 직렬식의 두 개의 TSK G5000PWXL 및 G3000PWXL 칼럼 (Polymer Laboratories, UK), 이동상 PBS (pH 7.4) 및 1 mL/min의 유량으로 이루어진다. 분자량 및 다분산도는 풀루란 표준에 대하여 계산된다. 알기네이트 표준은 상업적으로 입수가능하지 않으며, 이것은 풀루란의 사용을 필요로 한다. GPC가 유체역학적 용적에 따라 분리하며, 이것은 다양한 거대분자 구조에 따라 다르기 때문에 이들 보정 표준은 알기네이트에 대해 정확한 분자량을 제공하지 못한다. 알기네이트는 풀루란보다 더 팽창되어, 풀루란으로의 GPC에 의해 알기네이트의 분자량의 6배 과대평가를 초래한다. 결과적으로, 풀루란 MW 표준의 상이한 거대분자 구조에 맞게 계수 인자 (6으로 나눔)을 풀루란 보정으로부터 계산된 겉보기 분자량에 적용하였다(Andersen T., et al., 2012, Alginates as biomaterials in tissue engineering. Carbohydrate Chemistry: Chemical and Biological Approaches, Vol. 37, 232-233).
GPC를 위한 샘플은 PBS (3 mg/mL)에서 제조하였으며 용출물을 시차 굴절계 (Optilab t-Rex (Wyatt, UK))를 사용하여 모니터링하였다. Polymer Laboratories (UK)로부터의 PL 직경 기기 소프트웨어, 버전 7.0.4을 데이터 분석에 사용하였다.
2,500-26,000 g/mol (다분산도 2.5-3.5)의 분자량을 갖는 산-가수분해된 G-단편 (AHGs)을 생성하였다. 이들 연구에서 사용된 AHGs의 전형적인 특성은 아래 표에 요약되어 있다.
Figure pct00007
콘주게이션을 위한 OligoG CF-5/20은 이전에 기재된 바와 같이 생산하였다 (Khan et al. 2012, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 56(10), 5134-5141). OligoG는 적어도 85%G 잔기를 갖는 5-20mer 알기네이트 올리고머이다.
에스테르 콘주게이션 ('E')
간단히, 바시트라신에의 2,500 g/mol AHG 콘주게이션을 위해, 알기네이트 올리고머 (200 mg, 0.08 mmol)를 10 mL 둥근바닥 플라스크에서 교반하에 무수 DMF (4 mL) (또는 배치 3 및 그 후에 대해 무수 DMSO)을 용해시켰다. 이에 DCC (16.5 mg, 0.08 mmol), DMAP (1.6 mg, 0.01 mmol) 및 바시트라신 (37.5 mg, 0.03 mmol, Sigma)을 첨가하고, 반응을 교반하에 실온에서 밤새 진행되도록 하였다. 반응을 멈추기 위해, 혼합물을 과잉의 클로로포름 (20 mL까지)에 부은 다음, 수득한 침전물을 여과로 수집하고, 증류수 (dH2O, 2 mL)에서 재-용해시키고 FPLC (아래 참고)로 정제하였다.
아미드 콘주게이션 ('A')
간단히, 바시트라신에의 2,500 g/mol AHG 콘주게이션을 위해, 알기네이트 올리고머 (200 mg, 0.08 mmol)를 10 mL 둥근바닥 플라스크에서 교반하에 dH2O (2 mL)에 용해시켰다. 이에 EDC (19.9 mg, 0.1 mmol) 및 설포-NHS (22.6 mg, 0.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 15 min 동안 교반되도록 두었다. 후속으로, 바시트라신 (37.5 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반되도록 두고, FPLC (아래 참고)에 의해 정제할 때까지 -20℃에서 저장하였다.
FPLC에 의한 콘주게이트의 정제
콘주게이트는 UV 검출기를 갖는 미리 충전된 HiLoad Superdex 75 16/600 PG 칼럼을 사용한 빠른 단백질 액체 크로마토그래피 (FPLC) (AKTA FPLC; Amersham Pharmacia Biotech, UK) 및 Unicorn 4.0 소프트웨어 (Amersham Pharmacia Biotech, UK)를 사용한 데이터 분석에 의해 반응 혼합물로부터 정제하였다. 반응 혼합물의 샘플 (2 mL)을 이동상으로서 0.5 mL/min의 PBS (pH 7.4)를 사용하여 2 μL 루프에 주사하였다. 분획 (5 mL)을 수집하고, 탈이온화된 물 (8회 물 교체)로 투석하고, 콘주게이트를 함유하는 분획을 모으기 전에 단백질 함량 (BCA 검정)에 대해 분석하였다. 최종 콘주게이트를 동결건조시키고 -20℃에 저장하였다.
실시예 2 - 알기네이트 올리고머-바시트라신 콘주게이트의 특성화
순도, 분자량 및 약물 함량
알기네이트 올리고머-바시트라신 콘주게이트를 FPLC 및 GPC로 특성화하여 순도 및 추정 분자량을 평가하고, 콘주게이트의 총 약물 함량을 유리 약물을 보정물로서 사용하여 BCA 검정에 의해 결정하였다.
정제를 위해 상기 기재된 FPLC 시스템을 미리 충전된 Superdex 75 10/300 GL 칼럼을 갖는 최종 콘주게이트 특성화를 위해 다시 사용하였다. 샘플 (200 μL)을 PBS (pH 7.4)에 용해시키고 0.5 mL/min로 100 mL 루프에 주사하였다. 최종 콘주게이트 특성화를 위해 다시 사용된 바와 같은 상기 기재된 GPC 시스템 및 동일한 계수 인자를 적용하였다.
결과
이들 알기네이트 올리고머를 사용하여, ~40%의 전형적인 반응 수율, (풀루란 분자량 표준에 비해) 19,500-83,250 g/mol의 분자량을 갖고; 1-7% w/w 약물 부하 (3-5개 올리고모: 1개 바시트라신 분자에 등가임)를 함유하는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 라이브러리를 제조하였다.
Figure pct00008
실시예 3 - 항미생물 활성
박테리아 단리물 및 균주:
감수성 시험에 사용된 균주는 배양물 수집 균주 및 임상적 단리물 둘 다를 포함하며 아래에 인용되어 있다. 그것의 공지된 관련된 유전자형 및 기원이 상기 Khan 등에 의해 기재된 바 있다.
Figure pct00009
항미생물 활성의 결정
MIC는 표준 지침 (CLSI 2012)에 따라 액체배지 미량희석 방법을 사용하여 단리물 V2, V3, V5, V19, E68 및 E75에 대해 결정하였다. 테스트 유기체를 Mueller Hinton 양이온 조정된 (MH) 액체배지 (100 μL, 1-5 x 104 CFU/mL)에 현탁시키고 연속 2-배 희석의 테스트 화합물 중에서 96-웰 미세적정 플레이트에서 인큐베이션하였다. MIC는 16-20시간 후 가시적인 성장을 생산하지 않는 테스트 화합물의 최저 농도로서 정의되었다. 달리 언급되지 않는 한, 결과는 3회 실험의 중앙 값을 보인다.
결과
알기네이트 분획, 또는 OligoG 중의 어느 것도 임의의 항미생물 활성을 나타내지 않는 반면, 비접합된 바시트라신은 스타필로코쿠스 아우레우스(그램 양성)에 높은 항미생물 활성을 나타내었지만 시험된 그램 음성 종(슈도모나스 에어루기노사 , 클렙시엘라 뉴모니아 , 에스케리치아 콜리 및 아시네토박터 바우마니)에 대해서는 그렇지 않았다. 다른 한편으로 알기네이트 올리고머 접합된 바시트라신은 그램 음성 균주(특히 E. 콜리 균주) 및 그램 양성 균주 둘 다에 대해 우수한 항미생물 활성(보다 낮은 MIC 값)을 보인다.
항미생물 활성은 저분자량 알기네이트 올리고머 (OligoG를 포함)를 함유하는 콘주게이트에 대해 가장 컸다.
Figure pct00010
Figure pct00011

Claims (28)

  1. 직접적인 공유결합 또는 공유 분자 링커를 통해 적어도 하나의 알기네이트 올리고머에 공유적으로 연결된 바시트라신-부류 항생제를 포함하는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 부분입체이성질체, 호변이성질체, 거울상이성질체 또는 활성 대사물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 바시트라신-부류 항생제가 바시트라신 A1, A2, B1, B2, B3, C, D1, D2, D3 및 E 및 이의 기능적으로 동등한 유도체로부터 선택되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서, 상기 바시트라신-부류 항생제가 화학식 II로 표시되는 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트:
    화학식 II
    Figure pct00012

    위의 화학식 II에서,
    Leu는 류신이고; Glu는 글루탐산이고; Lys는 라이신이고; Orn는 오르니틴이고; Phe는 페닐알라닌이고; His는 히스티딘이고; Asp는 아스파르트산이고; Asn는 아스파라긴이고;
    Y는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고;
    Z는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고;
    X는 W[1]-Cys[2] 또는 V[1]-Thz[2]이고; 여기서
    W는 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신이고 Cys는 시스테인이고;
    V는 H2N-C(R)H-이고
    여기서, R은 발린, 이소류신, 류신 또는 5-메틸렌-이소류신의 α 측쇄이고;
    Thz는 V에 2' 커플링되고 Leu[3]의 α-탄소에 4' 커플링된 티아졸린 환(
    Figure pct00013
    )이고,
    여기서 아미노산 Leu[3], Glu[4], Orn[7], Phe[9], His[10] 또는 Asp[ 11 중의 하나 이상은 천연 또는 비-유전자적으로 인코딩된 아미노산으로부터 선택될 수 있는 또 다른 아미노산 잔기로 대체되거나 어떤 것도 대체되지 않는다.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 천연 또는 비-유전자적으로 인코딩된 아미노산이 류신, 트레오닌, 산, 페닐알라닌, 아르기닌, 히스티딘, 라이신, 아스파라긴, 세린, 시스테인, 호모라이신, 오르니틴, 디아미노부티르산 (예를 들어 α,γ-디아미노부티르산), 디아미노피멜산, 디아미노프로피온산, 호모아르기닌, 트리메틸리신, 트리메틸오르니틴, 4-아미노피페리딘-4-카복실산, 4-아미노-1-카밤이미도일피페리딘-4-카복실산 및 4-구아니디노페닐알라닌으로부터 선택되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  5. 청구항 1 내지 4 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 바시트라신-부류 항생제가 바시트라신 A (A1 및/또는 A2) 및 바시트라신 B (B1 및/또는 B2)로부터 선택되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  6. 청구항 1 내지 5 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 바시트라신-부류 항생제가 이가 금속 양이온, 예를 들어 Zn2 +, Mg2 +, Mn2 +, 및 Co2 +와 착화되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  7. 청구항 1 내지 6 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 알기네이트 올리고머가 35,000 달톤 미만, 바람직하게는 30,000, 25,000 또는 20,000 달톤 미만의 평균 분자량을 갖는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  8. 청구항 1 내지 7 중의 어느 한 항에 있어서, 알기네이트 올리고머가
    (i) 4 내지 100, 4 내지 75, 4 내지 50, 4 내지 35, 4 내지 30, 4 내지 25, 4 내지 22, 4 내지 20, 4 내지 18, 4 내지 16 또는 4 내지 14,
    (ii) 6 내지 50, 6 내지 35, 6 내지 30, 6 내지 25, 6 내지 22, 6 내지 20, 6 내지 18, 6 내지 16 또는 6 내지 14,
    (iii) 8 내지 50, 8 내지 35, 8 내지 30, 8 내지 25, 10 내지 25, 10 내지 22, 10 내지 20, 10 내지 18, 또는 10 내지 15, 또는
    (iv) 20 내지 100, 20 내지 90, 20 내지 80, 20 내지 75, 20 내지 70, 20 내지 65, 20 내지 60, 20 내지 55, 20 내지 50, 20 내지 45, 20 내지 40, 20 내지 35, 20 내지 30 또는 20 내지 25, 또는
    (v) 30 내지 100, 30 내지 90, 30 내지 80, 30 내지 75, 30 내지 70, 30 내지 65, 30 내지 60, 30 내지 55, 30 내지 50, 30 내지 45, 30 내지 40 또는 30 내지 35의 중합도 (DP), 또는 수 평균 중합도 (DPn)를 갖는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  9. 청구항 1 내지 8 중의 어느 한 항에 있어서, 알기네이트 올리고머가 적어도 70% G 잔기, 또는 적어도 80%, 또는 적어도 85%, 또는 적어도 90%, 또는 적어도 95% G 잔기를 갖는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  10. 청구항 9에 있어서, G 잔기의 적어도 80%가 G-블럭에 배열되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  11. 청구항 1 내지 8 중의 어느 한 항에 있어서, 알기네이트 올리고머가 적어도 70% M 잔기, 또는 적어도 80%, 또는 적어도 85%, 또는 적어도 90%, 또는 적어도 95% M 잔기를 갖는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  12. 청구항 11에 있어서, M 잔기의 적어도 80%가 M-블럭에 배열되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  13. 청구항 1 내지 12 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 직접적인 공유결합이 에스테르, 카보네이트 에스테르, 오르토에스테르, 케탈, 헤미케탈, 에테르, 아세탈, 헤미아세탈, 퍼옥시, 메틸렌디옥시, 아미드, 아민, 이민, 이미드, 아자이드, 아조, 옥심, 설파이드, 디설파이드, 설피닐, 설포닐, 카보노티오일, 티오에스테르, 포스핀 또는 포스포디에스테르 작용기의 일부인 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  14. 청구항 13에 있어서, 상기 직접적인 공유결합이 에스테르 또는 아미드의 일부인 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  15. 청구항 1 내지 12 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 공유 링커가
    (i) 아미노산 또는 펩타이드;
    (ii) 단당류 또는 굴루로네이트 또는 만누로네이트 이외의 올리고당 또는 이로부터 형성된 폴리머;
    (iii) 리보뉴클레오타이드 또는 데옥시리보뉴클레오타이드;
    (iv) 직쇄, 분지형 또는 환형의 치환된 또는 비치환된 알킬, 알케닐 또는 알키닐 그룹;
    (v) 아세틸, 석시닐, 아코니틸 (시스 또는 트랜스), 글루타릴, 메틸석시닐, 트리멜리틸 시스테아민, 페니실아민, N-(2-머캅토프로피오닐)글리신, 2-머캅토프로피온산, 호모시스테인, 3-머캅토프로피온산 또는 탈아미노-페니실아민 그룹으로부터 선택된 분자 그룹이거나 포함하는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  16. 청구항 1 내지 15 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 직접적인 공유결합, 상기 공유결합을 함유하는 작용기 또는 상기 공유 분자 링커가
    (i) 산 불안정성이고;
    (ii) 반응성 산소 종에 감수성이고/이거나;
    (iii) 박테리움 또는 면역 세포에 의해 분비된 효소에 의해 분해되는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  17. 청구항 1 내지 16 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 콘주게이트가 알기네이트 상의 카복실기 및 바시트라신 상의 하이드록실 그룹으로부터 형성된 에스테르 결합을 통해 바시트라신-부류 항생제에 공유결합된 적어도 하나의 알기네이트 올리고머로 이루어지는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  18. 청구항 1 내지 16 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 콘주게이트가 알기네이트 상의 카복실기 및 바시트라신 상의 아민 그룹으로부터 형성된 아미드 결합을 통해 바시트라신-부류 항생제에 공유결합된 적어도 하나의 알기네이트 올리고머로 이루어지는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  19. 청구항 16 내지 18 중의 어느 한 항에 있어서, 알기네이트 올리고머가 2 내지 100개 단량체 잔기를 함유하는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  20. 청구항 16 내지 19 중의 어느 한 항에 있어서, 알기네이트 올리고머가 적어도 70% G 잔기를 갖는, 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트.
  21. 청구항 1 내지 20 중의 어느 한 항에 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 및 약제학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물.
  22. (ia) 알기네이트 올리고머 및 바시트라신-부류 항생제를 제공하고 이들 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하는 단계; 또는
    (ib) 알기네이트 올리고머, 바시트라신-부류 항생제 및 공유 분자 링커를 제공하고 알기네이트 올리고머와 링커 분자 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하고 바시트라신-부류 항생제와 링커 분자 상의 두 개의 분자 그룹 간에 직접적인 공유결합을 형성하는 단계; 또는
    (ic) 알기네이트 올리고머 및 바시트라신-부류 항생제를 제공하고(여기서 하나 또는 둘 모두는 이에 공유결합된 공유 분자 링커 분자를 지닌다) 링커 분자 중 적어도 하나를 통해 알기네이트 올리고머를 바시트라신-부류 항생제에 공유적으로 연결시키는 단계; 및 선택적으로
    (ii) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함하는, 청구항 1 내지 20 중의 어느 한 항에 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머의 제조 방법.
  23. 청구항 22에 있어서, 상기 방법이
    (i) 이용가능한 카복실기를 갖는 알기네이트 올리고머의 수용액을 제공하는단계;
    (ii) 상기 알기네이트 용액을 알기네이트 올리고머 중의 적어도 하나의 카복실기를 활성화시키기에 충분한 양 및 조건하에서 1-에틸-3-[3-디메틸아미노프로필]카보디이미드 하이드로클로라이드 (EDC)와 접촉시키는 단계;
    (iii) 선택적으로 상기 카복실 활성화된 알기네이트 올리고머를 아민-반응성 설포-NHS 에스테르를 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 설포 N-하이드록시석신이미드 (설포-NHS)와 접촉시키는 단계;
    (iv) 상기 단계 (ii)의 카복실 활성화된 알기네이트 올리고머 또는 단계 (iii)의 아민-반응성 설포-NHS 에스테르를 알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간에 아미드 결합을 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 이용가능한 일차 아민 그룹을 갖는 바시트라신-부류 항생제와 접촉시키는 단계; 및
    (v) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함하는 방법.
  24. 청구항 22에 있어서, 상기 방법이
    (i) 이용가능한 카복실기를 갖는 알기네이트 올리고머의 용액, 바람직한 유기 (예를 들어 DMF 및/또는 DMSO) 용액을 제공하는 단계;
    (ii) 상기 알기네이트 용액을 O-아실이소우레아 중간체를 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 디사이클로헥실카보디이미드 (DCC)와 접촉시키는 단계;
    (iii) 상기 O-아실이소우레아 중간체를 알기네이트 올리고머와 바시트라신-부류 항생제 간에 에스테르 결합을 형성하기에 충분한 양 및 조건하에서 이용가능한 하이드록실 그룹을 갖는 바시트라신-부류 항생제 및 4-N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP)과 접촉시키는 단계; 및
    (iv) 반응 혼합물로부터 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트의 적어도 일부분을 분리하는 단계를 포함하고;
    여기서 단계 (ii) 및 (iii)이 동시에 수행될 수 있는 방법.
  25. 박테리아 감염의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 20 중의 어느 한 항에 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 또는 청구항 21에 정의된 바와 같은 약제학적 조성물.
  26. 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험에 있는 대상체에게 유효량의 청구항 1 내지 20 중의 어느 한 항에 정의된 바와 같은 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 또는 청구항 21에 정의된 바와 같은 약제학적 조성물을 투여함을 포함하여, 박테리아 감염을 갖거나, 갖는 것으로 의심되거나, 가질 위험에 있는 대상체에서 박테리아 감염을 치료 또는 예방하는 방법.
  27. 박테리아 감염이,
    (i) 상처, 바람직하게는 만성 상처에서의 감염;
    (ii) 바람직하게는 CF, COPD/COAD, 또는 천식으로부터 선택된 근원적인 호흡 장애 또는 병태로 고통받고 있는 대상체에서의 호흡기 감염;
    (iii) 이식가능 또는 보철 의료 기기와 관련된 디바이스 관련된 감염; 또는
    (iv) 전신 감염 또는 대상체 내의 또는 상의 다중 유전자좌의 감염인, 청구항 25의 용도 또는 청구항 26의 방법을 위한 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 또는 약제학적 조성물.
  28. 감염이 그램 음성 박테리아 감염인, 청구항 25 또는 청구항 27의 용도 또는 청구항 26 또는 27의 방법을 위한 바시트라신-알기네이트 올리고머 콘주게이트 또는 약제학적 조성물.
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