KR20190064907A - 비만 치료 및 개선용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 추출물, 보리지(Borage officinalis) 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 천연 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 치료 및 개선용 조성물이 제공된다.
상기 조성물은 지방세포분화와 관련된 전사인자의 발현을 적절히 조절함으로써 체중 및 체지방 감소와 혈중 지질 수치를 더욱 효과적으로 개선에 우수한 효과를 나타낼 수 있다. 이러한 효과를 바탕으로하여, 종래의 물질을 대체하여 비만치료에 유용하게 사용할 수 있는 약학적 조성물, 식품 조성물 및 건강식품으로 이용될 수 있다.

Description

비만 치료 및 개선용 조성물{COMPOSITION FOR OBESITY TREATMENT AND IMPROVEMENT}
본 발명은 비만 치료 및 개선용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로 일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 추출물, 보리지(Borage officinalis) 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효 성분으로 포함하여, 지방 세포 분화와 관련된 전사인자의 발현을 조절함으로써, 체중 및 체지방 감소와 혈중 지질 수치 개선 효과가 있는 비만 치료 및 개선용 조성물에 관한 것이다.
비만은 에너지 섭취와 소비의 불균형으로 인해 체내 지방이 과잉 축적되어 있어 여러 건강상의 문제들을 야기할 수 있는 상태를 말한다. 그 원인은 과다한 영양섭취, 신체활동 부족 등 생활방식으로 인한 경우가 대부분이며, 드물게는 약물 복용이나 질환에 의해 2차적으로 발생할 수 있다.
세계보건기구(WHO) 2014년의 통계에 따르면 전 세계적으로 18세 이상의 성인 중 19억이 과체중이며 그중 6억이 비만에 도달하였다. 비만은 심혈관계 질환, 제 2형 당뇨병 및 여러 유형의 암 발생 빈도를 증가시키는 주요 요인 중 하나로, 매년 280만 명 이상이 과체중이나 비만으로 인해 사망한다.
현대인들의 생활수준이 향상되면서 비만이 전 세계적인 사회 문제가 되고 있다. 2015년 국민건강영양조사에 따르면, 지난 10년간 우리나라 사람들의 지방 섭취량은 5.9g 증가하여 비만 유병률은 2005년 대비 1.9% 증가한 것으로 조사되었다. 특히, 남자 비만 유병률은 39.7%까지 크게 증가하였으며 고 콜레스테롤혈증 유병률이 17.9%로 9.9% 증가하였다. 현대인들의 생활수준이 향상되면서 비만이 전 세계적인 사회 문제가 되고 있다.
비만을 개선하기 위해 여러 가지 약물이 개발되었는데 약물은 크게 작용기전에 따라 식욕억제제와 지방흡수 억제제로 나누어진다. 그러나 식욕을 억제하는 시부트라민(sibutramine) 은 심혈관계 부작용이 있고, 펜터민(Phentermine)과 디에틸프로피온(Diethylpropion)등의 약물 들은 혈압 상승, 어지럼증, 두통, 진전, 구갈 등의 부작용이 있다. 지방흡수 억제제인 올리스타트(orlistat)의 경우 지방에 용해되는 비타민의 흡수가 억제되고 지방변, 지방배출, 빈번한 배변, 대변 실금이 있을 수 있다.
따라서 비만을 예방 또는 치료하기 위해 부작용이 적은 안전한 약물 개발의 필요성이 제기되고 있다. 이에 따라 식품과 천연물로부터 항비만 효능을 갖는 성분의 탐색 및 개발 연구가 진행되고있다. 천연 기능성 소재의 개발은 항비만 효능과 연계하여 의약품 혹은 다이어트 식품류 등으로 보다 안전하고 우수한 효능의 제품 개발이 가능할 것으로 사료되며, 그 효능을 과학적으로 검증하고자 하였다.
일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers)은 북아메리카 원상으로, 우리나라 각처의 밭, 들, 길가에 나는 월년초로 국화 속 식물이며 소화불량, 학질, 장염, 간염, 이뇨작용이나 혈당 강하 작용 등 여러 가지 생리 활성이 알려져 있다. 보리지(Borage officinalis)는 월년초로 원산지는 지중해 연안이며 고대 그리스나 로마시대부터 즐겨 이용한 허브로 꽃이나 잎을 술에 담갔다가 마시면 모든 슬픔이나 시름을 씻어 주어 기분을 즐겁고 명랑하게 해준다 하여 “쾌활초 (cuphorosium)”라고 불렸다. 전통의학에서는 보리지를 과민성 위장질환, 호흡기 및 심혈관계 질환에 사용하여 복통, 설사, 천식, 기관지염, 고혈압, 방광염 등을 치료하기 위한 약초로 알려져 있다.
일년봉과 보리지는 여러 생리 활성에 관한 연구자료가 보고되었으나, 현재까지 이들을 이용한 비만 예방 및 치료에 대한 연구는 보고되지 않았다.
(특허 문헌 1) KR 10-1595515 B1 (특허 문헌 2) KR 10-2015-0055876 A1
본 발명의 목적은 비만 개선 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 지방세포분화와 관련된 전사인자의 발현을 조절함으로써 체중 및 체지방 감소와 혈중 지질 수치 개선 효능이 우수한 비만 치료 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 체중 감소, 체지방 감소 및 혈중 지질 수치 개선용 조성물을 이용하여, 비자극성이며 비만 개선 및 치료 효과가 우수한 식품 조성물, 약학적 조성물 및 기능성 식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 비만 치료 및 개선용 조성물은 일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 추출물, 보리지(Borage officinalis) 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.
상기 일년봉 추출물 및 보리지 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 용매로 추출할 수 있다.
상기 일년봉 추출물은 추출 용매로 50% 에탄올을 이용하여 추출한 일년봉 에탄올 추출물일 수 있다.
상기 보리지 추출물은 추출 용매로 물을 이용하여 추출한 보리지 열수 추출물일 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 약학 조성물은 상기 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 기능성 식품은 상기 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 비만 치료 및 개선용 조성물은 일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 추출물, 보리지(Borage officinalis) 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.
상기 일년봉 추출물은 시료에 추출 용매인 50% 에탄올을 1:10(w:v)의 비율로 가한 다음 완전히 침지 시킨 후, 80℃에서 환류시키면서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였다. 여과액은 60℃에서 감압 농축하여 분말 시료를 제조하여 사용하였다.
상기 보리지 추출물은 시료에 추출 용매인 증류수를 1:10(w:v)의 비율로 가한 다음 충분히 침지 시킨 후, 80℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였다. 여과액은 60℃에서 감압 농축하여 분말 시료를 제조하여 사용하였다.
상기 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물은 각각의 시료를 감압 농축하여 제조한 분말 상태를 혼합하여 사용하였다.
본 발명의 비만 예방 및 개선 효과는 in vivo 시험으로 C57BL/6J 마우스에서 체중 및 체지방 감소와 혈중 지질 수치 감소를 통해 일년봉 추출물 및 보리지 추출물을 각 단독으로 사용한 경우에도 항미만 효과가 우수함을 확인하였다. 다만, 보다 바람직하게는 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물에서 항비만 효과가 더욱 우수함을 확인하였다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들어 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
본 발명의 일년봉 추출물 및 보리지 추출물은 예로부터 식용 및 약용으로 사용되어 온 것으로 그 투여용량에 특별한 제약은 없고, 체내 흡수도, 체중, 환자의 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다. 일반적으로 일년봉 추출물 및 보리지 추출물은 바람직하게는 체중 1 kg당 10 내지 1000 mg 정도를 투여할 수 있으며, 보다 바람직하게는 체중 1 kg당 50 내지 500 mg 정도 투여할 수 있다. 본 발명의 일년봉 추출물 및 보리지 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물은 유효량 범위를 고려하여 제조하도록 하며, 이렇게 제형화된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나 일정 시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
본 발명은 또한, 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효성분으로 포함하는 체중 감소, 체지방 감소 및 혈중 지질 수치 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다. 상기 천연 추출물의 제조 및 구성에 관해서는 상기에서 설명한 바와 같다. 보다 구체적으로, 본 발명의 천연 추출물은 지방세포분화와 관련된 전사인자의 발현 억제를 목적으로 건강기능식품 조성물에 첨가할 수 있다.
본 발명의 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 건강기능식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 천연 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출 혼합물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명에 있어서 '투여'는 어떠한 적절한 방법으로 염증 의심 개체에게 본 발명의 약학 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 치료 방법은 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 비만 치료 및 개선용 조성물에 의하면 지방세포분화와 관련된 전사인자의 발현을 조절함으로써 체중과 체지방을 감소하며, 혈중 지질 수치 개선 효과가 우수하다.
또한, 비자극성인 천연 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함하는 약학 조성물, 식품 조성물 및 기능성 식품으로 제공할 수 있다.
도 1은 C57BL/6J 마우스에서 일년봉과 보리지 추출물 그리고 이들의 추출 혼합물을 투여했을 때 8주 동안의 체중 변화를 나타낸 것이다.
도 2은 일년봉과 보리지 추출물 그리고 이들의 추출 혼합물을 투여했을 때 부고환 지방 조직에서 지방 생성에 관여하는 단백질의 발현 정도를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예: 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합 추출물의 제조]
1. 일년봉 추출물 제조
일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 시료에 추출 용매인 50% 에탄올을 1:10(w:v)의 비율로 가한 다음 완전히 침지 시킨 후, 80℃에서 환류시키면서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였다. 여과액은 60℃에서 감압 농축하여 분말 시료를 제조하여 실험에 사용하였다.
2. 보리지 추출물 제조
보리지(Borage officinalis) 시료에 추출 용매인 증류수를 1:10(w:v)의 비율로 가한 다음 충분히 침지 시킨 후, 80℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였다. 여과액은 60℃에서 감압 농축하여 분말 시료를 제조하여 실험에 사용하였다.
3. 일년봉과 보리지 추출물의 혼합물 제조
일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers)과 보리지(Borage officinalis) 추출물의 혼합물은 시료를 감압 농축하여 얻은 분말 상태에서 혼합하여 실험에 사용하였다.
[실험예: 비만 치료 및 개선 효과에 대한 평가]
1. 실험동물 및 비만 유도
특정 병원체 (specific pathogen free)가 없는 5주 령의 C57BL/6J 마우스를 ㈜중앙실험동물(Central Lab-Animal Inc., Seoul, Korea) 에서 구입하여 1주일간 사육실에서 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 동물 사육실의 온도 및 습도는 24±5℃, 55±5%로 설정하였으며 lighting cycle은 12시간 주기로 하였다.
실험 군으로는 정상식이군(Normal Fat)에게 총 칼로리의 10%가 지방인 일반 식이(NF; 10% kcal fat; Research Diet, Inc., No. D12450B)를 공급하였고 고지방식이군(High Fat)에는 비만 유도를 위하여 총 칼로리의 60%가 지방인 고지방식이(HF; 60% kcal fat; Research Diet, Inc., No. D12492)를 공급하여 비만 유도를 3주간 진행하였다(표 1).
Ingredient Normal Diet(Kcal) High Fat Diet(Kcal)
Casein, 80 Mesh 800 800
L-Cystine 12 12
Corn starch 1260 0
Maltodextrin 10 140 500
Sucrose 1400 275.2
Cellulose, BW200 0 0
Soybean oil 225 225
Lard* 180 2205
Mineral mix S10026 0 0
Dicalcium phosphate 0 0
Calcium carbonate 0 0
Potassium citrate, 1H2O 0 0
Vitamin mix V10001 40 40
Choline bitartrate 0 0
Total 4057 4057
비만 유도 후 실험동물은 난괴법으로 정상식이군(NF; n=6), 고지방식이군(HF; n=6), 양성대조군은 고지방식에 가르시니아 캄보지아 추출물 100 mg/kg/day 투여한군(HF+G100; n=6), 추출물 투여 군으로 고지방식에 일년봉 추출물(이하 'E'라 함) 100 mg/kg/day 투여한군(HF+E100; n=6), 고지방식이에 E 200 mg/kg/day 투여한군(HF+E200; n=6), 고지방식이에 보리지 추출물(이하 'B'라 함) 100 mg/kg/day 투여한 군(HF+B100; n=6), 고지방식이에 B 200 mg/kg/day 투여한 군(HF+B200; n=6), 고지방식이에 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물(이하 'EB'라 함) 100 mg/kg/day 투여한 군(HF+EB100; n=6), 고지방식이에 EB 200 mg/kg/day 투여한 군(HF+EB200; n=6)으로 총 9군으로 분류하여 모든 추출물을 증류수에 용해하여 8주간 경구투여를 실시하였다(표 2).
Group Treatment
Normal Fat(ND) Normal diet (10 Kcal % fat)
High Fat(HF) High fat diet (60 Kcal % fat)
High Fat 및 가르시니아 100 mg/kg
(HF+G100)		 HF + 가르시니아 100 mg/kg
High Fat 및 일년봉 100 mg/kg
(HF+E100)		 HF + 일년봉 100 mg/kg
High Fat 및 일년봉 200 mg/kg
(HF+E200)		 HF + 일년봉 200 mg/kg
High Fat 및 보리지 100 mg/kg
(HF+B100)		 HF + 보리지 100 mg/kg
High Fat 및 보리지 200 mg/kg
(HF+B200)		 HF + 보리지 200 mg/kg
High Fat 및 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물 100 mg/kg
(HF+EB100)		 HF + 일년봉 및 보리지 100 mg/kg
High Fat 및 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물 200 mg/kg
(HF+EB200)		 HF + 일년봉 및 보리지 200 mg/kg
2. 체중 및 식이 급여
본 실시 예에 실험동물이 자유롭게 물과 식이를 섭취하도록 하였고, 주 1회 체중을 측정하였으며(도 1), 매주 동일한 시간에 식이를 공급하여 전주에 남은 식이량과 그날 공급한 식이량의 차이로 섭취 식이량을 계산하였다(표 3).

Group		 Initial body
weight
(g)		 Final body weight
(g)		 Body weight gain
(g)		 Food
intake
(g/day)		 Water intake
(g/day)		 Energy intake
(Kcal/day)		 Food efficiency ratio
(%)
NF 20.08±1.00a 30.67±
0.86e 		10.58±
1.33e 		2.80±
0.24a 		4.62±
0.82a 		10.75±
0.93a 		3.40±
2.09c
HF 19.73±0.98a 43.15±
4.11a 		23.42±
4.26a 		2.99±
0.47a 		3.48±
0.49bcd 		15.65±
2.46b 		10.57±
1.89a
HF+G100 20.28±0.62a 39.02±
2.30bcd 		18.73±
2.62cd 		2.83±
0.39a 		3.77±
0.80bc 		14.82±
2.04b 		7.89±
2.48ab
HF+E100 19.63±0.65a 41.53±
1.71ab 		21.90±
1.71ab 		2.98±
0.56a 		3.86±
0.70b 		15.62±
2.91b 		9.23±
3.17ab
HF+E200 19.90±0.28a 39.75±
2.34bc 		19.85±
2.32bc 		2.99±
0.59a 		3.24±
0.39d 		15.67±
3.10b 		9.09±
1.96ab
HF+B100 19.87±
0.54a 		40.40±
2.69abc 		20.53±
2.68abc 		2.98±
0.49a 		3.27±
0.50cd 		15.64±
2.58b 		8.34±
1.89ab
HF+B200 20.12±
0.80a 		38.33±
1.05cd 		18.22±
1.13cd 		2.69±
0.47a 		3.48±
0.96bcd 		14.12±
2.49b 		7.95±
2.43ab
HF+EB100 20.30±
0.72a 		38.53±
1.44cd 		18.23±
1.59cd 		3.01±
0.76a 		3.00±
0.39d 		15.79±
4.00b 		6.69±
3.01b
HF+EB200 19.92±
0.79a 		36.27±
3.52d 		16.35±
3.02d 		3.06±
0.39a 		3.34±
0.55cd 		16.06±
2.03b 		6.98±
2.67b
실험동물 각 군의 체중 변화에서 Initial body weight에는 각 군별로 유의한 차이가 없었으나, Final body weight에는 현저한 체중 변화를 나타내었다. 고지방식이군(HF)은 일반 식이군(NF)에 비해 체중이 1.45배 증가하였으며 이는 고지방식이에 의해 비만이 유도되었음을 제시한다.
일년봉 추출물 투여 군(HF+E100, HF+E200), 보리지 추출물 투여 군(HF+B100, HF+B200)에서도 체중 감소 효과가 우수하였다.
다만, 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물 투여군(HF+EB100, HF+EB200)의 체중은 HF 군의 체중 보다 현저히 감소하여 일년봉 추출물 및 보리지 추출물을 단독으로 사용한 것에 비해, 상기 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물이 체중 감소 효과가 더욱 우수함을 확인하였다.
3. 장기 및 지방 조직 무게
채혈 후 실험동물을 희생시켜 신장, 비장, 간, 부고환 지방, 내장지방을 적출한 다음 생리식염수로 세척하여 여과지로 물기를 제거한 후 무게를 측정하였다(표 4).
Group Kidney (g) Spleen (g) Liver (g) Epididymal fat (g) Visceral fat (g)
NF 0.31±0.02cd 0.07±0.01cd 0.98±0.04d 0.49±0.07c 0.18±0.03d
HF 0.37±0.02a 0.09±0.01a 1.44±0.16a 2.53±0.13a 1.31±0.20a
HF+G100 0.34±0.01b 0.07±0.01b 1.13±0.08bc 2.37±0.38ab 0.88±0.17bc
HF+E100 0.33±0.01c 0.07±0.01b 1.16±0.07b 2.46±0.40ab 0.92±0.14b
HF+E200 0.31±0.01de 0.07±0.00bc 1.11±0.09bc 2.32±0.39ab 0.85±0.26bc
HF+B100 0.32±0.01cd 0.07±0.01bc 1.16±0.10b 2.44±0.36ab 0.95±0.27b
HF+B200 0.31±0.01cd 0.07±0.01cd 1.10±0.05bc 2.28±0.56ab 0.88±0.23bc
HF+EB100 0.29±0.01ef 0.06±0.00d 1.03±0.06cd 2.30±0.26ab 0.74±0.15bc
HF+EB200 0.28±0.01f 0.06±0.01d 0.96±0.10d 1.99±0.53b 0.66±0.20c
각 군의 장기 및 지방 조직 무게는 표 4에 나타내었다. 비장과 신장 무게에서 HF 군이 NF 군에 비해 유의하게 높았으나 추출물 투여 군은 HF 군에 비해 현저히 감소하였다.
간의 무게는 고지방식이를 섭취한 HF 군에서 현저히 증가하였다. 그러나 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물을 투여한 군에서 간의 무게가 HF 군에 비해 유의적으로 감소하였다.
이 결과는 고지방식이로 인하여 간조직에 콜레스테롤 및 중성지질이 축적되었으나 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물은 간의 비대 증상 완화에 효과가 우수함을 나타낸다.
일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물이 지방 조직에 미치는 영향을 조사하기 위하여 부고환 지방과 내장지방을 적출하여 무게를 측정하였다. 부고환 지방과 내장지방의 무게는 고지방식이 섭취에 의해 HF군이 현저히 증가하였으나 추출물 투여 군에서는 HF군에 비해 유의하게 감소하였다. 특히 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물은 지방 축적을 억제하여 우수한 체지방 감소 효과를 나타내었음을 알 수 있다.
4. 혈액 생화학 지표 분석
사육이 끝난 실험동물은 희생 전 12시간 동안 절식시킨 후 2,2,2-트리브로모에탄올(2,2,2-tribromoethanol, Sigma Aldrich) 및 2-메틸-2-부탄올(2-methyl-2-buthanol, Sigma Aldrich) 0.2 cc를 복강 주사하여 마취시켜 안와정맥채혈을 통해 공복 혈액을 채취하였으며 12,000g, 4℃에서 30분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다.
혈액 생화학 지표로서 glucose(GLU), triglyceride(TG), total cholesterol(TC), high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C), alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST)의 수치는 Automated Clinical Chemistry Analyzer(FUJI DRI-CHEM NX500i)를 사용하여 분석하였다(표 5).
Group GLU
(mg/dL)		 TG
(mg/dL)		 TC
(mg/dL)		 HDL-C
(mg/dL)		 LDL-C
(mg/dL)		 ALT
(U/L)		 AST
(U/L)
NF 114.33±
4.18d 		63.67±
1.53b 		123.17±
7.94e 		77.83±
7.86b 		25.50±
4.23d 		46.83±
11.46a 		91.00±
11.14a
HF 260.33±
16.37a 		86.67±
17.67a 		193.33±
7.61a 		125.00±
9.63a 		45.33±
1.03a 		65.67±
26.55a 		105.83±
17.13a
HF+G100 230.67±
28.99abc 		74.00±
4.58ab 		174.50±
11.48cd 		129.50±
5.68a 		36.57±
7.69bc 		64.00±
19.79a 		103.67±
10.50a
HF+E100 243.17±
26.42ab 		75.33±
12.10ab 		181.50±
7.58ab 		124.00±
6.42a 		39.47±
5.65b 		61.17±
13.63a 		103.00±
22.22a
HF+E200 219.50±
26.33bc 		74.33±
10.12ab 		173.83±
13.42cd 		131.50±
11.50a 		34.17±
4.58bc 		56.33±
17.56a 		106.83±
21.66a
HF+B100 242.00±
26.83ab 		79.33±
6.11ab 		181.00±16.92ab 125.83±
8.33a 		39.00±
4.69b 		60.00±
22.28a 		108.50±
20.98a
HF+B200 217.00±
14.97bc 		75.00±
8.72ab 		165.33±
13.60c 		128.50±
8.67a 		33.80±
2.17bc 		57.83±
14.74a 		92.17±
14.92a
HF+EB100 225.00±
22.50bc 		83.67±
7.77a 		174.83±
9.66cd 		120.00±
6.57a 		36.50±
4.89bc 		57.67±
11.00a 		100.17±
12.25a
HF+EB200 207.83±
34.23c 		70.33±
5.77ab 		151.50±
11.54d 		122.67±
11.04a 		30.63±
4.64cd 		58.33±
20.03a 		85.00±
22.21a
일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물이 혈중 지질 농도 및 간 독성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 혈청 중 GLU, TG, TC, HDL-C, LDL-C, ALT, AST를 측정하였다.
간 독성을 조사하기 위해 ALT와 AST를 측정하였으며 각 군별로 유의적인 차이가 나타나지 않아 추출물로 인한 독성이 나타나지 않음을 확인하였다.
HDL-cholesterol(HDL-C)에서 HF과 추출물 투여군은 유의한 차이가 없었지만, HF군의 total cholesterol(TC)이 추출물 투여군 보다 유의하게 높아, HDL-cholesterol/total cholesterol에 대한 비율은 추출물 투여군에서 유의적으로 높았다.
LDL-cholesterol(LDL-C)은 추출물 투여군이 HF군에 비하여 감소되었고 혈당에서도 추출물 투여군은 HF군보다 유의적으로 감소되었다. 그중 HF+EB200군이 가장 낮았고, HF+B200군과 HF+EB100군이 다음으로 낮았다. 이것으로 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물은 혈중 콜레스테롤의 상승을 억제시키고 혈당을 감소시키는 효과가 우수하다고 사료된다. 따라서 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물은 혈중 지질 수치 개선으로 항비만 효과가 높다는 것을 나타낸다.
5. Western blot analysis
본 실시예에서는 일년봉 추출물, 보리지 추출물 및 이들의 혼합물을 투여한 C57BL/6J 마우스의 부고환 지방 조직에서 지방 생성에 관여하는 전사인자들의 발현을 확인하기 위해 western blot 분석을 통해 확인하였다.
부고환 지방조직에 PRO-PREP protein extraction solution을 첨가하고 균질화하여 -20℃에 30분간 반응 시킨 후 12,000g, 4℃에서 30분간 원심분리하여 상등액을 얻어 Lowry 측정법으로 단백질을 정량하였다. 단백질은 SDS-PAGE로 분리하여 지방 생성에 관여하는 인자들의 항체와 반응시켜 단백질의 발현을 확인하였다.
도 2는 adipogenesis에 관여하는 단백질의 발현 정도를 나타낸 것이다. PPARγ의 발현은 HF군과 비교하였을 때 HF+B200군의 발현이 유의적으로 감소되었고, HF+EB200군과 HF+E200군이 다음으로 감소되었다. C/EBPα의 발현은 HF군과 비교하였을 때 HF+EB200군의 발현이 유의적으로 감소되었으며 HF+G100군과 HF+B200군이 다음으로 감소되었다. PPARγ와 C/EBPα의 목표 단백질인 Adipoenctin의 발현은 HF군과 비교하였을 때 HF+EB200군의 발현이 유의적으로 증가되었으며 HF+B200군과 HF+E200군이 다음으로 증가되었다.
이를 통해 일년봉 추출물 및 보리지 추출물을 단독 사용하는 경우 보다는 일년봉 추출물 및 보리지 추출물의 혼합물이 지방세포 분화를 보다 효과적으로 억제하여 우수한 항비만성을 나타내는 것을 확인하였다.
6. 통계처리
본 실험에서 얻은 결과는 평균 ± 표준편차(mean ± S.D.)로 나타냈으며, 통계처리는 SPSS (17.0, Statistical Package for Social Science Inc., USA)를 이용하여 일원 변량분석(One way ANOVA)을 실시한 후 Duncan's multiple range test로 유의성을 p<0.05 수준에서 검증하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (7)

  1. 일년봉(Erigeron annuus (L.) Pers) 추출물, 보리지(Borage officinalis) 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 천연 추출물을 유효 성분으로 포함하는
    비만 치료 및 개선용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 일년봉 추출물 및 보리지 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 용매로 추출하는
    비만 치료 및 개선용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 일년봉 추출물은 추출 용매로 50% 에탄올을 이용하여 추출한 일년봉 에탄올 추출물인
    비만 치료 및 개선용 조성물.
  4. 제 2항에 있어서,
    상기 보리지 추출물은 추출 용매로 물을 이용하여 추출한 보리지 열수 추출물인
    비만 치료 및 개선용 조성물.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 따른 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함하는
    약학 조성물.
  6. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 따른 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함하는
    식품 조성물.
  7. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 따른 비만 치료 및 개선용 조성물을 포함하는
    기능성 건강 식품.
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