KR20190052113A - 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의약 용도 - Google Patents

알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의약 용도 Download PDF

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KR20190052113A
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잉샹 가오
노먼 샹롱 콩
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베이징 이노케어 파마 테크 씨오., 엘티디.
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Abstract

본 발명은 FGFR 억제제로서 작용하는 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의약 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 하기 화학식 (I)에 나타내어진 바와 같은 화합물 및 이의 제약학적으로 허용가능한 염; 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 제약학적 조성물; 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염을 사용하여 FGFR-연관 질환, 특히 종양을 치료 및/또는 예방하는 방법; 및 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한, FGFR-연관 질환, 특히 종양의 치료 및/또는 예방을 위한 약물의 제조에서의, 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 제약학적 조성물의 용도에 관한 것이며, 화학식 (I)에서의 각각의 치환기의 정의는 상기 설명에서의 정의와 동일하다.

Description

알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의약 용도
본 발명은, FGFR 억제제로서 작용하는 신규한 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염; 상기 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 제약학적 조성물; 상기 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염의 제조 방법; FGFR-연관 질환, 특히 종양을 치료 및/또는 예방하기 위한 약물의 제조에서의, 상기 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 알키닐-치환된 헤테로시클릭 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 제약학적 조성물의 용도; 및 상기 화합물 또는 상기 조성물을 사용하여 FGFR-연관 질환, 특히 종양을 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.
섬유모세포 성장 인자 수용체 (FGFR)는, 구조적으로 막외(extra-membrane) 리간드 결합 도메인, 단일 막횡단 도메인 및 막내(intra-membrane) 티로신 키나아제로 구성된 수용체 티로신 키나아제 (RTK)의 유형이다. 이는 주로 4종의 아형 FGFR1, FGFR2, FGFR3 및 FGFR4를 포함한다. 이것 및 이것의 리간드 섬유모세포 성장 인자 (FGF)는 세포 신호전달에서 중요한 조절 역할을 한다. 세포외 자극 신호로서, FGF는 FGFR의 세포외 도메인에 결합하여, 이의 막내 티로신 키나아제의 인산화를 유발함으로써, 세포 증식, 분화 및 전이를 조절하는 일련의 하류 신호전달 경로를 활성화시킨다.
다양한 종양, 예컨대 비소세포 폐암, 유방암, 위암, 간암, 방광암, 자궁내막암, 전립선암, 자궁경부암, 대장암, 식도암, 골수종 및 흑색종 등은 FGF/FGFR 발현 및 활성화에 밀접하게 관련된다 (문헌 [Clin. Cancer Res. 2012, 18, 1855]). 연구들은, FGFR1 증폭(amplification)이 비소세포 폐암의 20%를 차지하고, FGFR2 증폭이 위암의 약 5%를 차지하고, FGFR3 돌연변이가 비침습성 방광암의 약 70%를 차지하고, FGFR4는 간암에서 증폭된다 (문헌 [PloS One 2012, 7, e36713)는 것을 나타냈다. 따라서, FGFR을 표적으로 하는 억제제의 개발은 항종양 약물 연구에서 관심이 많은 주제가 되었다 (문헌 [Drug Disc. Today 2014, 19, 51]).
현재 시판되어 있는 몇몇 비(non)-FGFR-특이적 약물, 예컨대 Pfizer로부터의 sunitinib, Eisai로부터의 lenvatini 및 Boehringer Ingelheim으로부터의 nintedanib가 있지만, 현재 이용가능한 FGFR-특이적 억제제는 없다. 임상에 진입되는 특이적 FGFR 억제제는 HMPL-453, BGJ-398, LY-2874455, AZ-4547, JNJ-42756493, TAS-120, ARQ-087 및 BLU-554를 포함한다.
FGFR 억제제의 개발은 다수의 생물제약사들의 주목을 끌었지만, 신규한 화합물은 다양한 악성 종양의 치료에서의 이들의 유망성으로 인하여 여전히 개발될 필요가 있다. 본 발명자들에 의한 지속적인 노력을 통해, 본 발명은 하기 화학식 (I)에 의해 나타내어진 구조를 갖는 화합물을 설계하였으며, 이러한 구조를 갖는 화합물은 탁월한 기능 및 효과를 나타낸다는 것이 발견되었다.
본 발명은 FGFR 억제제로서 하기 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물(prodrug), 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서,
A는 N 또는 CR2이고;
고리 B는 벤젠 고리 또는 5-6원 헤테로아릴 고리이며, 여기서 벤젠 고리 및 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 G1에 의해 선택적으로(optionally) 치환되고;
R1은 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬 또는 -NHR3으로부터 선택되고;
R2는 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬로부터 선택되며, 여기서 알킬은 할로겐, 시아노, 히드록시 또는 -OC1-6 알킬에 의해 선택적으로 치환되고;
R3은 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 할로겐, 시아니드, -OR4, -NR5R6, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴에 의해 선택적으로 치환되고;
X는 부재하거나 또는 C1-6 알킬렌이고;
Y는 부재하거나, 또는 C3-8 시클로알킬렌, 3-8원 헤테로시클릴렌, 아릴렌 또는 헤테로아릴렌으로부터 선택되며, 여기서 시클로알킬렌, 헤테로시클릴렌, 아릴렌 및 헤테로아릴렌은 하나 이상의 G2에 의해 선택적으로 치환되고;
Z는 독립적으로 시아노, -NR7CN,
Figure pct00002
로부터 선택되고;
결합 a는 이중 결합 또는 삼중 결합이고;
결합 a가 이중 결합인 경우, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G3에 의해 선택적으로 치환되고;
Ra 및 Rb, 또는 Rb 및 Rc는 선택적으로, 이들이 연결되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로 원자를 함유하는 선택적인(optional) 3-6원 고리를 형성하고;
결합 a가 삼중 결합인 경우, Ra 및 Rc는 부재하고, Rb는 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G4에 의해 선택적으로 치환되고;
R4는 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G5에 의해 선택적으로 치환되고;
G1, G2, G3, G4 및 G5는 각각 독립적으로 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, C6-10 아릴, 5-10원 헤테로아릴, -OR8, -OC(O)NR8R9, -C(O)OR8, -C(O)NR8R9, -C(O)R8, -NR8R9, -NR8C(O)R9, -NR8C(O)NR9R10, -S(O)mR8 및 -NR8S(O)mR9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11, -OC(O)NR11R12, -C(O)OR11, -C(O)NR11R12, -C(O)R11, -NR11R12, -NR11C(O)R12, -NR11C(O)NR12R13, -S(O)mR11 및 -NR11S(O)mR12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
R4, R5, R6, R8, R9, R10, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 모노시클릭 헤테로시클릴, 모노시클릭 헤테로아릴 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
m은 1 또는 2이다.
본 발명의 일 구현예는, A가 N 또는 CH이고, 바람직하게는 N인, 상기 언급된 바와 같은 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 구현예는, 고리 B가 벤젠 고리인, 상기 언급된 바와 같은 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 (II)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물을 제공한다:
Figure pct00003
상기 식에서,
Ga, Gb, Gc 및 Gd는 각각 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR8, -NR8R9 및 -C(O)NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11 및 -NR11R12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고, A, R1, R8, R9, R11, R12, X, Y, Z는 상기 정의된 바와 같다.
본 발명의 또 다른 구현예는 상기 언급된 바와 같은 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이며, 이는 하기 화학식 (III)에 나타낸 바와 같은 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물이다:
Figure pct00004
상기 식에서,
Ga 및 Gb는 각각 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR8, -NR8R9 및 -C(O)NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11 및 -NR11R12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고, A, R1, R8, R9, R11, R12, X, Y, Z는 상기 정의된 바와 같다.
본 발명의 또 다른 구현예는, R1이 독립적으로 H, -NH2 및 -NHC1-6 알킬로부터 선택된, 상기 언급된 바와 같은 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명의 일 구현예에서, R1은 H 또는 -NH2일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, Ga, Gb, Gc 및 Gd는 각각 독립적으로 -OC1-2 알킬 및 할로겐으로부터 선택된다.
본 발명의 일 구현예에서, R1은 독립적으로 H, -NH2 및 -NHR3으로부터 선택되고; R3은 독립적으로 C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 할로겐, 시아노, -OR4, -NR5R6, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴에 의해 치환된다.
본 발명의 또 다른 구현예는 화학식 (I), (II) 및 (III)에 나타내어진 바와 같은 화합물, 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이며, 여기서
X는 부재하거나 또는 C1-6 알킬렌이고;
Y는 부재하거나, 또는 C3-8 시클로알킬렌 또는 3-8원 헤테로시클릴렌이고,
Z는 독립적으로 시아노, -NR7CN,
Figure pct00005
으로부터 선택되고;
결합 a는 이중 결합 또는 삼중 결합이고;
결합 a가 이중 결합인 경우, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬, 3-6원 헤테로시클릴, -OR8 및 -NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
결합 a가 삼중 결합인 경우, Ra 및 Rc는 부재하고, Rb는 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 여기서 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬, 3-6원 헤테로시클릴, -OR8 및 -NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
R4, R8 및 R9는 각각 독립적으로 H 및 C1-6 알킬로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 구현예는 상기 언급된 바와 같은 화학식 (I)에 의해 나타내어진 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물에 관한 것이며, 여기서 화합물은 하기로부터 선택된다:
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
본 발명의 화합물은 FGFR의 활성에 대한 유의미한 억제 효과를 갖는다. 본 발명의 화합물은 FGFR1, FGFR2, FGFR3 또는 FGFR4의 활성의 억제에서 효과적이며, 바람직하게는 FGFR1, FGFR2, FGFR3 또는 FGFR4의 억제에 대해 100 내지 1000 nM의 IC50, 더욱 바람직하게는 100 nM 미만의 IC50, 가장 바람직하게는 10 nM 미만의 IC50 을 갖는다. 특히, 본 발명의 화합물은 종양 세포 (예를 들어, Hep3B, RT4 및 SNU-16 종양 세포)의 세포 증식에 대한 유의미한 억제 효과를 가지며, 바람직하게는 100 내지 1000 nM의 IC50, 더욱 바람직하게는 100 nM 미만의 IC50, 가장 바람직하게는 10 nM 미만의 IC50을 갖는다.
따라서, 본 발명의 화합물은 FGFR-연관 질환, 예컨대 비제한적으로 종양 및 염증성 질환, 예컨대 골관절염의 치료 또는 예방에 유용하다. 본 발명의 화합물은 FGFR-관련 종양, 예컨대 비소세포 폐암, 식도암, 흑색종, 횡문근육종, 신세포암종, 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 위암, 대장암, 방광암, 췌장암, 폐암, 유방암, 전립선암 및 간암 (예를 들어, 간세포 암종), 보다 구체적으로 간암, 위암, 비소세포 폐암 및 방광암의 치료 또는 예방에 유용하다. 따라서, 또 다른 측면에서, 본 발명은, 치료 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 또는 상기 화합물을 포함하는 제약학적 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, FGFR-매개 질환, 예컨대 종양을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은 FGFR-매개 질환, 예컨대 종양 또는 염증성 질환, 예컨대 비제한적으로 비소세포 폐암, 식도암, 흑색종, 횡문근육종, 신세포암, 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 위암, 대장암, 방광암, 췌장암, 폐암, 유방암, 전립선암 및 간암의 치료 또는 예방을 위한 의약의 제조에서의, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 본 발명의 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 및 제약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 FGFR 매개 질환, 예컨대 종양 및 염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용되는 의약의 제조를 위한, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 또는 제약학적 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 의약은 정제, 캡슐, 용액, 동결건조 제제 및 주사제를 비제한적으로 포함하는 임의의 제약 투여 형태일 수 있다.
본 발명의 제약 제제는 투여 단위당 사전결정된 양의 활성 구성성분을 함유하는 투여 단위의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 단위는 치료되는 질환, 투여 방법, 뿐만 아니라 환자의 연령, 체중 및 상태에 따라, 예를 들어 0.5 mg 내지 1 g, 바람직하게는 1 mg 내지 700 mg, 특히 바람직하게는 5 mg 내지 300 mg의 본 발명의 화합물을 포함할 수 있거나, 또는 제약 제제는 투여 단위당 사전결정된 양의 활성 구성성분을 함유하는 투여 단위의 형태로 투여될 수 있다. 바람직한 투여 단위 제제는 상기 명시된 일일 투여량 또는 분할된 투여량 또는 이들의 상응하는 분획의 활성 구성성분을 함유하는 것이다. 또한, 이러한 유형의 제약 제제는 제약 당업계에서 널리 공지되어 있는 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
본 발명의 제약 제제는 목적하는 임의의 적합한 방법에 의해, 예를 들어 경구 (구강 또는 설하 포함), 직장, 비강, 국소 (구강, 설하 또는 경피 포함), 질 또는 비경구 (피하, 근육내, 정맥내 또는 피내 포함) 투여 방법에 의한 투여에 적합화될 수 있다. 제제는, 예를 들어 제약 당업계에 공지되어 있는 방법 중 임의의 하나를 사용하여 활성 구성성분을 하나 이상의 부형제 또는 하나 이상의 보조제(adjuvant)와 조합함으로써 제조될 수 있다.
구현예의 설명
달리 언급되지 않는 한, 본원의 명세서 및 청구범위에 사용된 하기 용어는 하기 의미를 갖는다.
본원에 사용된 표현 "Cx-y"는 탄소 원자의 수의 범위를 나타내며, 여기서 x 및 y는 둘 모두 정수이고, 예를 들어 C3-8 시클로알킬 기는 3 내지 8개의 탄소 원자를 갖는 시클로알킬 기, 즉 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개의 탄소 원자를 갖는 시클로알킬 기를 의미한다. "C3-8"은 또한 그에 포함된 임의의 하위 범위, 예컨대 C3-7, C3-6, C4-7, C4-6, C5-6 등을 포함한다는 것이 또한 이해되어야 한다.
"알킬"은, 1 내지 20개의 탄소 원자, 예를 들어 1 내지 18개의 탄소 원자, 1 내지 12개의 탄소 원자, 1 내지 8개의 탄소 원자, 1 내지 6개의 탄소 원자 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 포화 직선형 또는 분지형 히드로카빌 기를 지칭한다. 알킬 기의 비제한적인 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, tert-부틸, sec-부틸, n-펜틸, 1,1-디메틸프로필, 1,2-디메틸프로필, 2,2-디메틸프로필, 1-에틸프로필, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, n-헥실, 1-에틸 -2-메틸프로필, 1,1,2-트리메틸프로필, 1,1-디메틸부틸, 1,2-디메틸부틸, 2,2-디메틸부틸, 1,3-디메틸부틸 및 2-에틸부틸을 포함한다. 알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"알케닐"은, 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합 및 통상적으로 2 내지 20개의 탄소 원자, 예를 들어 2 내지 8개의 탄소 원자, 2 내지 6개의 탄소 원자 또는 2 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 직선형 또는 분지형 히드로카빌 기를 지칭한다. 알케닐 기의 비제한적인 예는 에테닐, 1-프로페닐, 2-프로페닐, 1-부테닐, 2-부테닐, 3-부테닐, 2-메틸-2-프로페닐, 1,4-펜타디에닐 및 1,4-부타디에닐을 포함한다. 알케닐 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"알키닐"은, 적어도 1개의 탄소-탄소 삼중 결합 및 전형적으로 2 내지 20개의 탄소 원자, 예를 들어 2 내지 8개의 탄소 원자, 2 내지 6개의 탄소 원자 또는 2 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 히드로카빌 기를 지칭한다. 알키닐 기의 비제한적인 예는 에티닐, 1-프로피닐, 2-프로피닐, 1-부티닐, 2-부티닐 및 3-부티닐을 포함한다. 알키닐 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"시클로알킬"은 3 내지 14개의 시클릭 탄소 원자를 함유하는 포화 시클릭 히드로카빌 치환기를 지칭한다. 시클로알킬 기는 단일 탄소 고리일 수 있으며, 통상적으로 3 내지 7개의 탄소 고리 원자를 함유한다. 모노시클릭 시클로알킬 기의 비제한적인 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵틸을 포함한다. 시클로알킬 기는 대안적으로, 함께 접합된 2 또는 3개 고리 구조, 예컨대 데카히드로나프틸일 수 있다. 시클로알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 기"는, 3 내지 20개의 시클릭 원자, 예를 들어 3 내지 16개, 3 내지 14개, 3 내지 12개, 3 내지 10개, 3 내지 8개, 3 내지 6개, 또는 5 내지 6개의 시클릭 원자를 함유하는 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 또는 폴리시클릭 시클릭 기를 지칭하며, 여기서 시클릭 원자 중 1개 이상은 질소, 산소 또는 S(O)m (여기서, m은 0 내지 2의 정수임)으로 이루어진 군으로부터 선택되나, -O-O-, -O-S- 또는 -S-S-의 고리 모이어티를 포함하지 않고, 나머지 시클릭 원자는 탄소이다. 바람직하게는, 이는 3 내지 12개의 시클릭 원자, 더욱 바람직하게는 3 내지 10개의 시클릭 원자, 가장 바람직하게는 5 또는 6개의 시클릭 원자를 포함하며, 여기서 1 내지 4개는 헤테로원자이고, 더욱 바람직하게는 1 내지 3개는 헤테로원자이고, 가장 바람직하게는 1 내지 2개는 헤테로원자이다. 모노시클릭 헤테로시클릭 기의 비제한적인 예는 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 호모피페라지닐, 옥세아릴(oxearyl) 및 아제티디닐을 포함한다. 폴리시클릭 헤테로시클릭 기는 접합된, 브릿징된 또는 스피로 폴리시클릭 헤테로시클릭 기를 포함한다. 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"아릴"은 6 내지 14개의 탄소 원자를 함유하는, 바람직하게는 6 내지 10원의 방향족 모노시클릭 또는 접합된 폴리시클릭 기, 예컨대 페닐 및 나프틸, 가장 바람직하게는 페닐을 지칭한다. 아릴 고리는 헤테로아릴, 헤테로시클릴 또는 시클로알킬 고리에 접합될 수 있으며, 여기서 모 구조가 부착된 고리는 아릴 고리이고, 비제한적인 예는 하기를 포함한다:
Figure pct00013
상기 아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"헤테로아릴 또는 헤테로아릴 고리"는 5 내지 14개의 시클릭 원자를 함유하는 헤테로방향족 시스템을 지칭하며, 여기서 1 내지 4개의 시클릭 원자는 산소, 황 및 질소를 포함하는 헤테로원자로부터 선택된다. 헤테로아릴 기는 바람직하게는 5 내지 10원이다. 더욱 바람직하게는, 헤테로아릴 기는 5 또는 6원, 예컨대 푸릴, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, N-알킬피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 피라졸릴, 이미다졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴 등이다. 헤테로아릴 고리는 아릴, 헤테로시클릭 또는 시클로알킬 고리에 접합될 수 있으며, 여기서 모 구조가 연결된 고리는 헤테로아릴 고리이고, 비제한적인 예는 하기를 포함한다:
Figure pct00014
헤테로아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
"할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도를 지칭한다.
"시아노"는 -CN을 지칭한다.
"선택적인" 또는 "선택적으로"는 후속으로 기술되는 사건 또는 환경이 일어날 수 있지만 반드시 일어나지는 않으며, 해당 사건 또는 환경이 일어나는 경우 또는 일어나지 않는 경우를 포함한다는 것을 지칭한다. 예를 들어, "알킬 기에 의해 선택적으로 치환된 헤테로시클릭 기"는, 알킬 기가 존재할 수 있지만 반드시 존재하지는 않으며, 헤테로시클릭 기가 알킬 기로 치환된 경우 및 헤테로시클릭 기가 알킬 기로 치환되지 않은 경우를 포함한다는 것을 지칭한다.
"치환된"은, 기에서의 1개 이상의 수소 원자, 바람직하게는 5개, 더욱 바람직하게는 1 내지 3개의 수소 원자가 서로 독립적으로, 상응하는 수의 치환기에 의해 치환된다는 것을 지칭한다. 치환기는 오직 이들의 가능한 화학적 위치에 존재하며, 통상의 기술자가 과도한 노력 없이 가능할 수 있거나 또는 가능하지 않을 수 있는 치환을 (실험 또는 이론에 의해) 결정할 수 있을 것이라는 것은 당연하다. 예를 들어, 자유 수소를 갖는 아미노 기 또는 히드록실 기는 불포화 (예를 들어, 올레핀) 결합을 갖는 탄소 원자와 결합(association)되는 경우 불안정할 수 있다. 이러한 치환기는 히드록실, 아미노, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C3-8 시클로알킬 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
"제약학적 조성물"은, 본원에 기술된 하나 이상의 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물, 및 제약학적으로 허용가능한 담체 및 부형제와 같은 다른 성분을 포함하는 조성물을 지칭한다. 제약학적 조성물의 목적은, 유기체에의 투여를 촉진하고, 활성 구성성분의 흡수를 용이하게 하고, 이에 따라 목적하는 생물학적 활성을 발휘하는 것이다.
"이성질체"는, 동일한 분자식을 갖지만 이의 원자 결합의 성질 또는 순서, 또는 이의 원자의 공간적 배열에서 상이한 화합물을 지칭하며, 이러한 화합물은 "이성질체"로서 지칭된다. 원자 공간이 상이하게 배열된 이성질체는 "입체이성질체"로서 지칭된다. 입체이성질체는 광학 이성질체, 기하 이성질체 및 형태 이성질체(conformational isomer)를 포함한다.
본 발명의 화합물은 광학 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 이러한 광학 이성질체는 키랄 탄소 원자 둘레의 치환기의 배열(configuration)에 따라 "R" 또는 "S" 배열을 갖는다. 광학 이성질체는 거울상이성질체 및 부분입체이성질체를 포함한다. 광학 이성질체의 제조 및 단리 방법은 당업계에 공지되어 있다.
본 발명의 화합물은 또한 기하 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은 탄소-탄소 이중 결합, 탄소-질소 이중 결합, 시클로알킬 기 또는 헤테로시클릭 기 둘레의 치환기의 분포로부터 발생되는 다양한 기하 이성질체 및 이의 혼합물을 갖는다. 탄소-탄소 이중 결합 또는 탄소-질소 결합 둘레의 치환기는 Z 또는 E 배위로서 지정되며, 시클로알킬 또는 헤테로사이클 둘레의 치환기는 시스 또는 트랜스 배열로 지정된다.
본 발명의 화합물은 또한 호변이성질현상(tautomerism), 예컨대 케토-에놀 호변이성질화(tautomerization)가 존재할 수 있다.
본 발명은 임의의 호변이성질체 또는 입체이성질체 형태 및 이의 혼합물을 포함하며, 화합물의 명명법 또는 화학 구조식에 사용된 호변이성질체 또는 입체이성질체 형태 중 어느 하나에 제한되지 않는다는 것이 이해되어야 한다.
"동위원소"는 본 발명의 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소이다. 동위원소는, 동일한 원자 번호를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 그러한 원자를 포함한다. 본 발명의 화합물 내로 혼입되기에 적합한 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소이며, 예를 들어 비제한적으로 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F 및 36Cl이다. 동위원소 표지된 본 발명의 화합물은 일반적으로, 당업계의 통상의 기술자에게 공지되어 있는 종래 기술적 수단에 의해, 또는 비-동위원소 표지된 시약 대신에 적합한 동위원소 표지된 시약을 사용하여, 첨부되는 실시예에 기술된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 화합물은 다양한 잠재적 용도, 예를 들어 생물학적 활성의 결정에서의 표준물 및 시약으로서의 용도를 갖는다. 안정한 동위원소의 경우, 이러한 화합물은 생물학적, 약리학적 또는 약동학적 특성을 유리하게 변경하는 잠재성을 갖는다.
"전구약물"은 본 발명의 화합물이 전구약물의 형태로 투여될 수 있음을 지칭한다. 전구약물은, 생체내(in vivo) 생리적 상태 하에, 예를 들어 산화, 환원, 가수분해 등에 의해 생물학적으로 활성인 본 발명의 화합물로 전환될 수 있는 유도체이며, 이들 각각은 효소를 사용하거나 또는 효소의 참여 없이 수행된다. 전구약물의 예는, 본 발명의 화합물 내 아미노 기가 아실화되거나, 알킬화되거나 또는 인산화된 화합물, 예컨대 에이코실아미노, 알라닐아미노(alanylamino), 피발로일옥시메틸아미노이거나, 또는 히드록시 기가 아실화되거나, 알킬화되거나, 인산화되거나 또는 보레이트로 전환된 화합물, 예를 들어 아세톡시, 팔미토일옥시(palmitoyloxy), 피발로일옥시, 숙시닐옥시, 푸마릴옥시, 알라닐옥시 등이거나, 또는 카복실 기가 에스테르화되거나 또는 아미드화되거나, 또는 티올 기가 약물을 표적물 및/또는 세포의 시토졸(cytosol)로 선택적으로(selectively) 전달하는 기를 갖는 디술피드 브릿지를 형성하는 (예컨대, 펩티드) 담체 분자이다. 이러한 화합물은 특정의 공지되어 있는 방법에 따라 본 발명의 화합물로부터 제조될 수 있다.
"제약학적 염" 또는 "제약학적으로 허용가능한 염"은, 무기 염기 또는 산, 및 유기 염기 또는 산을 포함하는 제약학적으로 허용가능한 염기 또는 산으로부터 제조된 염을 지칭하며, 본 발명의 화합물이 하나 이상의 산성 또는 염기성 기를 함유하는 경우, 본 발명은 또한 이들의 상응하는 제약학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 따라서, 산성 기를 함유하는 본 발명의 화합물은 염의 형태로 존재할 수 있으며, 예를 들어 알칼리 금속 염, 알칼리 토금속 염 또는 암모늄 염으로서 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 이러한 염의 보다 구체적인 예는 소듐 염, 포타슘 염, 칼슘 염, 마그네슘 염, 또는 에틸아민, 에탄올아민, 트리에탄올아민 또는 아미노산과 같은 유기 아민 또는 암모니아와의 염을 포함한다. 염기성 기를 함유하는 본 발명의 화합물은 염의 형태로 존재할 수 있으며, 무기산 또는 유기산과의 이들의 부가염(addition salt)의 형태로 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 적합한 산의 예는 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산, 질산, 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌디술폰산, 옥살산, 아세트산, 타르타르산, 락트산, 살리실산, 벤조산, 포름산, 프로피온산, 피발산, 말론산, 숙신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 말산, 술팜산, 페닐프로피온산, 글루콘산, 아스코르브산, 이소니코틴산, 시트르산, 아디프산, 및 당업계의 통상의 기술자에게 공지되어 있는 다른 산을 포함한다. 본 발명의 화합물이 산성 및 염기성 기 둘 모두를 분자에 함유하는 경우, 본 발명은 상기 언급된 염 형태에 더하여, 내부 또는 외부 암모늄 염을 포함한다. 각각의 염은, 당업계의 통상의 기술자에게 공지되어 있는 종래 방법에 의해, 예를 들어 이들을 용매 또는 분산액 중 유기 또는 무기 산 또는 염기와 접촉시킴으로써 또는 다른 염과의 음이온 교환 또는 양이온 교환에 의해 얻어질 수 있다.
따라서, 본원에서 "화합물", "본 발명의 화합물" 또는 "본 발명의 화합물들"을 지칭하는 경우, 이는 모든 이러한 화합물 형태, 예컨대 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체, 이의 메조머(mesomer), 이의 라세미체, 이의 거울상이성질체, 이의 부분입체이성질체 및 이의 혼합물을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "종양(tumor)"은 양성 종양 및 악성 종양 (예를 들어, 암)을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "암"은 FGFR이 관여하는 다양한 악성 종양, 예컨대 비제한적으로 비소세포 폐암, 식도암, 흑색종, 횡문근육종, 신세포암종, 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 위암, 대장암, 방광암, 췌장암, 폐암, 유방암, 전립선암 및 간암 (예컨대, 간세포 암종), 보다 구체적으로 간암, 위암, 비소세포 폐암 및 방광암을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "염증성 질환"은 FGFR이 염증의 개시에 관여하는 임의의 염증성 질환, 예컨대 골관절염을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "치료 유효량"은 FGFR의 작용을 억제하고/거나 질환을 치료 또는 예방하는 데 효과적인, 본 발명의 화합물을 포함하는 양을 지칭한다.
합성 방법
본 발명은 또한 상기 화합물의 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 제조는 하기 예시적인 방법 및 구현예에 의해 수행될 수 있지만, 이러한 방법 및 구현예는 어떠한 방식으로도 본 발명의 범위를 제한하는 것으로서 이해되어서는 안 된다. 본 발명의 화합물은 또한 당업계의 통상의 기술자에게 공지되어 있는 다른 합성 기술에 의해 합성될 수 있거나, 또는 당업계에 공지되어 있는 방법 및 본 발명의 방법의 조합이 이용될 수 있다. 반응의 각각의 단계에서 얻어지는 생성물은 당업계에 공지되어 있는 분리 기술, 예컨대 비제한적으로 추출, 여과, 증류, 결정화, 크로마토그래피 분리 등에 의해 얻어진다. 출발 물질 및 합성에 요구되는 화학적 시약은 문헌에 따라 통상적으로 합성 또는 구입할 수 있다 (SciFinder로부터의 조사에 의해 입수가능함).
본 발명의 화학식 (I)의 피라졸 화합물은 접근방법 A에 기술된 경로에 따라 합성될 수 있다: 1) 출발 물질 A1을 샌드마이어 반응(Sandmeyer reaction)시켜 A2를 수득하거나, 또는 브롬화하여 A3을 수득할 수 있고, 여기서 R1은 -CN 또는 에스테르 (-COOR, 여기서 R은 알킬 기임)일 수 있고; 2) A2 또는 A3 및 전구체 X-L~N-P (여기서, X는 이탈기이고, L~N-P는 보호된 아미노 기를 함유하는 관능기이고, P는 아미노 기에 대한 보호기임)는 염기 촉매작용 하에 일어나는 치환 반응을 겪어 A4를 형성하고, 대안적으로, A2 또는 A3, 및 히드록실 기를 갖는 전구체 (HO-L~N-P)는 광 지연 반응(light delay reaction) (미쯔노부 반응(Mitsunobu reaction))을 겪어 A4를 수득할 수 있고; 3) A4의 R1이 -CN인 경우, 이는 NaOH/H2O2 조건 하에 아미드 A5로 가수분해되고; A4의 R1이 에스테르 (-COOR, 여기서 R은 알킬 기임)인 경우, 이는 먼저 염기성 조건 (예컨대, LiOH) 하에 카복실산으로 가수분해된 다음, 아미드화를 겪어 A5를 수득하고; 4) A5 및 알킨을 소노가시라 반응(Sonogashira reaction)을 통해 커플링하여 A6을 수득하고; 5) A6에서의 아미노 기를 탈보호하여 A7을 수득하고; 6) A7에서의 아미노 기를, 키나아제 리간드 결합 도메인 내 시스테인 잔기와 반응성인 관능기를 함유하는 화학적 시약 (예를 들어, BrCN, 아크릴로일 클로라이드 등)으로 유도체화하여 표적 화합물 A8을 수득한다.
접근방법 A:
Figure pct00015
대안적으로, 이는 접근방법 B에 기술된 경로에 따라 합성될 수 있다. 제2 단계에서, 피라졸 NH 보호기 Q가 도입되고, 제5 단계에서, 탈보호로부터 공통 중간체 B7이 수득되고, 후속으로 B7의 피라졸 NH는 보호된 아미노 기를 갖는 다양한 전구체와 치환 반응으로 반응하며, 이는 후속으로 탈보호 및 유도체화를 겪어 표적 생성물 A8이 수득된다.
접근방법 B:
Figure pct00016
본 발명의 화학식 (I)의 피라졸 화합물은 또한 접근방법 C에 기술된 경로에 따라 합성될 수 있다: 1) A4를 먼저 소노가시라를 통해 알킨과 커플링하여 C1을 수득하고; 2) C1에서의 -NH2는 염기 촉매작용 반응에서 치환되거나, 또는 환원성 아미노화를 겪어 C2를 형성하고; 3) C2에서의 CN은 NaOH/H2O2 조건 하에 아미드 C3으로 가수분해되고, 일부 경우에 이는 먼저 Boc-NH-로 보호된 다음, 가수분해되고; 최종적으로 탈보호 및 유도체화되어 표적 생성물 C5가 수득되고; C5는 또한 A8의 직접 치환에 의해 수득될 수 있다.
접근방법 C:
Figure pct00017
실시예
화합물의 구조는 핵 자기 공명 (NMR) 또는 질량 분광 검출 (MS)에 의해 결정된다. NMR은 Bruker AVANCE-400 또는 Varian Oxford-300 NMR에 의해 측정되었고, 용매는 중수소화 디메틸 술폭시드 (DMSO-d 6 ), 중수소화 클로로포름 (CDCl3), 중수소화 메탄올 (CD3OD)이었고, 내부 표준물은 테트라메틸실란 (TMS)이었고, 화학적 이동은 10-6 (ppm)의 단위로 제공된다.
MS는 Agilent SQD (ESI) 질량 분광기 (제조업체: Agilent, 모델: 6120)를 사용하여 측정하였다.
HPLC 측정은 Agilent 1200 DAD 고압 액체 크로마토그래피 (Sunfirc C18, 150 x 4.6 mm, 5 μm 칼럼) 및 Waters 2695-2996 고압 액체 크로마토그래피 (Gimini C18 150 x 4.6 mm, 5 μm 칼럼)를 사용하여 수행하였다.
박층 크로마토그래피 실리카 겔 플레이트는 Qingdao Ocean GF254 실리카 겔 플레이트를 사용한다. 박층 크로마토그래피 (TLC)에 사용된 실리카 겔 플레이트의 사양은 0.15 mm 내지 0.2 mm이다. 박층 크로마토그래피 분리 및 정제를 위한 사양은 0.4 mm 내지 0.5 mm의 실리콘 보드(silicone board)이다.
칼럼 크로마토그래피는 일반적으로 담체로서 Qingdao Ocean 200 내지 300 메쉬의 실리카 겔을 사용한다.
본 발명의 알려져 있는 출발 물질은 당업계에 공지되어 있는 방법에 따라 합성될 수 있거나, 또는 ABCR GmbH & Co. KG, Acros Organics, Aldrich Chemical Company, Accela ChemBio Inc., Beijing Coupling chemicals 및 다른 회사로부터 구입할 수 있다.
본 발명의 실시예에서, 달리 명시되지 않는 한, 반응은 모두 아르곤 분위기 또는 질소 분위기 하에 수행하였다.
아르곤 분위기 또는 질소 분위기는 반응 플라스크가 약 1 L의 부피를 갖는 아르곤 또는 질소 풍선에 연결된 것을 지칭한다.
수소 분위기는 반응 플라스크가 약 1 L 부피의 수소 풍선에 연결된 것을 지칭한다.
가압 수소화 반응은 Beijing Jiawei Kechuang Technology Co., Ltd로부터의 GCD-500G 고순도 수소 발생기 및 BLT-2000 중압(medium pressure) 수소 발생기를 사용하여 수행하였다.
수소화 반응은 통상적으로 배기되고, 수소로 충전되고, 3회 반복적으로 수행되었다.
마이크로파 반응은 CEM Discover-SP 유형의 마이크로파 반응기를 사용하였다.
본 발명의 실시예에서, 달리 명시되지 않는 한, 반응 온도는 실온이었고, 온도 범위는 20℃ 내지 30℃였다.
실시예에서 반응 진행은 박층 크로마토그래피 (TLC)에 의해 모니터링하였고, 반응에 사용된 시스템은 A: 디클로로메탄 및 메탄올 시스템; B: 석유 에테르 및 에틸 아세테이트 시스템이었으며, 용매들의 부피비는 화합물의 극성을 기초로 조정하였다.
화합물의 정제 방법에 사용된 칼럼 크로마토그래피 용리제의 시스템, 및 박층 크로마토그래피에서 전개를 위해 사용된 전개제 시스템은 A: 디클로로메탄 및 메탄올 시스템; B: 석유 에테르 및 에틸 아세테이트 시스템을 포함하며, 용매들의 부피비는 화합물의 극성에 따라 조정하였고, 조정을 위해 소량의 트리에틸아민 및 산성 또는 염기성 시약이 첨가될 수 있다.
실시예 1
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00018
단계 1
(R)-3-(톨루엔술포닐옥시) 피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
화합물 (R)-3-히드록시피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 1a (3.5 g, 18.7 mmol), 트리에틸아민 (5.25 mL, 37.9 mmol), 4-디메틸아미노피리딘 (0.35 g, 2.87 mmol)을 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시킨 다음, p-톨루엔술포닐 클로라이드 (5.4 g, 28.1 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하고, 후속으로 희석을 위해 물 (50 mL)을 첨가하고, 추출을 위해 후속으로 에틸 아세테이트 (100 mL Х 3)를 사용하였으며, 생성된 유기상을 합한 다음, 무수 소듐 술페이트를 사용하여 건조시키고, 후속으로 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (R)-3-(톨루엔술포닐옥시) 피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 1b (6.0 g, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 94%였다.
MS m/z (ESI): 364[M+23]
단계 2
((3,5-디메톡시페닐)에티닐) 트리메틸실란
혼합물 1-브로모-3,5-디메톡시벤젠 1c (6.51 g, 30 mmol), 트리메틸실릴 아세틸렌 (8.8 g, 90 mmol), 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐 클로라이드 (1.05 g, 1.5 mmol), 아이오딘화구리(cuprous iodide) (0.56 g, 3.0 mmol), 트리에틸아민 (80 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드 (150 mL)를 80℃로 가열하고, 12시간 동안 질소 하에 교반하고; 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고; 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르)에 의해 정제하여, 표제 생성물 ((3,5-디메톡시페닐)에티닐) 트리메틸실란 1d (6.2 g, 갈색 고체)를 수득하였고, 수율은 88%였다.
MS m/z (ESI): 235 [M+1]
단계 3
1-에티닐-3,5-디메톡시 벤젠
((3,5-디메톡시페닐)에티닐) 트리메틸실란 1d (3.0 g, 12.8 mmol)를 메탄올 (100 mL) 중에 용해시키고, 포타슘 카보네이트 (3.5 g, 25.6 mmol)를 첨가하고, 2시간 동안 실온에서 교반하고; 여과하고, 생성된 여과물을 감압 하에 농축하고; 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르)에 의해 정제하여, 표제 생성물 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠 1e (2 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 96%였다.
단계 4
3-아이오도-1H-피라졸-4-카복실산 에틸 에스테르
3-아미노-1H-피라졸-4-카복실산 에틸 에스테르 1f (4.7 g, 30.3 mmol)를 농축된 염산 (12 M, 40 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 소듐 니트라이트 (4.25 g, 60 mmol)의 용액 (7.5 mL)을 첨가한 다음, 5분 동안 교반하고, 이어서 포타슘 아이오다이드 (12.5 g, 75 mmol)의 용액 (17.5 mL)을 천천히 첨가하고, 30분 동안 교반을 지속하고, 반응 혼합물을 소듐 티오술페이트의 포화 수용액 (200 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (400 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트에 의해 건조시킨 다음, 건조제를 여과에 의해 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고; 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-아이오도-1H-피라졸-4-카복실산 에틸 에스테르 1 g (6.4 g, 미황색 고체)를 수득하였고, 수율은 80%였다.
MS m/z (ESI): 267 [M+1]
단계 5
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-아이오도-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트
1-아이오도-1H-피라졸-4-카복실산 에틸 에스테르 1 g (4.5 g, 17 mmol), (R)-3-(톨루엔술포닐옥시)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 1b (6.1 g, 17.8mmol), 세슘 카보네이트 (7.5 g, 20.4 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (50 mL)의 혼합물을 80℃로 가열하고, 3시간 동안 교반하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 다음, 포화 소듐 비카보네이트 용액 (200 mL)에 붓고, 이어서 이를 에틸 아세테이트 (300 mL Х 3)로 추출하고; 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 후속으로 여과하여 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5/1 내지 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-아이오도-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 1H (3.1 g, 미황색 고체)를 수득하였고, 수율은 42%였다.
MS m/z (ESI): 458 [M+23]
단계 6
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-아이오도-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 1 h (1 g, 2.25 mmol), 1-아세틸렌-3,5-디메톡시벤젠 1e (0.75 g, 4.5 mmol), 비스(트리페닐포스핀) 팔라듐 클로라이드 (175 mg, 0.25 mmol), 아이오딘화구리 (95 mg, 0.5 mmol), 트리에틸 아민 (12.5 ml) 및 N,N-디메틸포름아미드 (12.5 mL)의 혼합물을 80℃로 가열하고, 12시간 동안 교반하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 (0.95g, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 90%였다.
MS m/z (ESI): 414 [M+1-56]
단계 7
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-포름산
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 1i (0.30 g, 0.64 mmol)를 테트라히드로푸란 (3 mL) 중에 용해시키고, 소듐 히드록시드 용액 (4 M, 2 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 염산 (6 M, 1 mL)을 사용하여 산성화시킨 다음, 에틸 아세테이트 (10 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-포르메이트 1j (200 mg, 담황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 71%였다.
MS m/z (ESI): 386 [M+1-56]
단계 8
(S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-포르메이트 1j (220 mg, 0.5 mmol), 암모늄 클로라이드 (270 mg, 5 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) (228 mg, 0.6 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (129 mg, 1 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (5 mL)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반한 다음, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔의 박층 상에서 정제용 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 1k (140 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 64%였다.
MS m/z (ESI): 385 [M+1-56]
단계 9
(S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
(S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 1k (50 mg, 0.11 mmol), 염산 (6 M, 5 mL) 및 디옥산 (5 mL)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반한 다음, 용매를 감압 하에 제거하여, 표제 생성물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 1l (42 mg, 히드로클로라이드 염, 조 생성물)을 수득하였고, 수율은 100%였다.
MS m/z (ESI): 341 [M+1]
단계 10
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
(S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드 1l (30 mg, 0.08 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (31 mg, 0.24 mmol) 및 테트라히드로푸란 (15 mL)의 혼합물을 테트라히드로푸란 (5 mL) 중 아크릴로일 클로라이드 (11 mg, 0.12 mmol)의 용액에 적가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 다음, 물 (30 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시킨 다음, 여과하여 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔의 박층 상에서 정제용 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 1 (15 mg, 백색 고체)을 수득하였고, 수율은 50%였다.
MS m/z (ESI): 395[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 6.96 (brs, 1H), 6.71 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.54 - 6.52 (m, 1H), 6.46 - 6.39 (m, 2H), 5.80 (brs, 1H), 5.76 - 5.72 (m, 1H), 5.01 - 4.92 (m, 1H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.90 - 3.75 (m, 8H), 2.62 - 2.44 (m, 2H).
실시예 2
1-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00019
단계 1
3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트
화합물 3-아이오도-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 1g (2.01 g, 7.5 mmol)를 테트라히드로푸란 (80 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 소듐 히드라이드 (60% 미네랄 오일 분산액, 0.42 g, 10.5 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응 혼합물에 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드 (1.76 g, 10.5 mmol)를 첨가하고, 15시간 동안 교반을 지속한 다음, 포화 염수 (100 mL)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 이를 에틸 아세테이트 (150 mL Х 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 포화 염수 (100 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 5/1 내지 1/2)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 (2.6 g, 무색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 87%였다.
MS m/z (ESI): 397[M+1]
단계 2
3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복실산
화합물 3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-에틸 포르메이트 2a (2.6 g, 6.5 mmol)를 테트라히드로푸란 (40 mL) 중에 용해시키고, 리튬 히드록시드의 수용액 (1M, 13 mL)을 첨가하고, 15시간 동안 실온에서 교반한 다음, 이를 물 (20 mL)로 희석하고, 염산 (1M)을 사용하여 pH = 4 내지 5로 산성화시킨 다음, 이를 에틸 아세테이트 (50 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 포화 염수 (100 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거한 다음, 건조시켜, 표제 생성물3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복실산 2b (2.03 g, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 85%였다.
MS m/z (ESI): 391[M+23]
단계 3
3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복실산 2b (2.03 g, 5.5 mmol), 디이소프로필에틸아민 (2.13 g, 16.5 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL)를 혼합한 다음, 이에 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) (2.5 g, 6.6 mmol) 및 1-히드록시벤조트리아졸 (890 mg, 6.6 mmol)을 순차적으로 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 고체 암모늄 클로라이드 (1.47 g, 27.5 mmol)를 첨가하고, 15시간 동안 교반을 지속한 다음, 포화 염수 (30 mL)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 에틸 아세테이트 (50 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 포화 염수 (100 mL)로 세척하고, 감압 하에 용매를 제거한 후, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드 2c (2.3 g, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 100%였다.
MS m/z (ESI): 368[M+1]
단계 4
3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 3-아이오도-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드 2c (2.7 g, 7.3 mmol), 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠 (1.78 g, 11 mmol), 트리에틸아민 (2.2 g, 21.9 mmol), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐 클로라이드 (512 mg, 0.73 mmol) 및 무수 테트라히드로푸란 (70 mL)을 혼합한 다음, 탈산소화 처리하고, 아르곤 분위기 하에 15시간 동안 실온에서 교반한 다음, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (에틸 아세테이트/ 석유 에테르 = 10/1 내지 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드 2d (1.5 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 51%였다.
MS m/z (ESI): 402[M+1]
단계 5
3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-4-카복사미드 2d (1.4 g, 3.5mmol), 에틸렌디아민 (525 mg, 8.75 mmol) 및 테트라히드로푸란 (30 mL)을 함께 혼합한 다음, 테트라히드로푸란 중 테트라부틸암모늄 플루오라이드의 용액 (1 M, 17.5 mL, 17.5 mmol)을 첨가하고, 15시간 동안 가열하여 환류시킨 후, 실온으로 냉각하고, 포화 염수 (20 mL)를 첨가하고, 에틸 아세테이트 (100 mL Х 3)로 추출하고, 생성된 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시킨 다음, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 2e (600 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 63%였다.
MS m/z (ESI): 272[M+1]
단계 6
4-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
화합물 3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 2e (180 mg, 0.66 mmol), 4-브로모피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 (264 mg, 0.99 mmol), 포타슘 카보네이트 (182 mg, 1.32 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL)를 함께 혼합한 다음, 75℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하고, 후속으로 물을 첨가하고, 생성된 용액을 에틸 아세테이트 (50 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 포화 염수로 세척하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 4-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 2f (120 mg, 황색 고체, 위치이성질체를 함유함)를 수득하였고, 수율은 40%였다.
MS m/z (ESI): 477[M+23]
단계 7
3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 4-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 2f (120 mg, 0.26 mmol, 혼합물)를 에탄올 (20 mL) 중에 용해시킨 다음, 에탄올 중 수소 클로라이드 (4M, 1 mL, 4 mmol)를 첨가하고, 15시간 동안 실온에서 교반하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 메탄올 (20 mL) 중에 용해시킨 후, 포화 소듐 비카보네이트 용액을 사용하여 용액을 pH = 8 내지 9로 조정하고, 후속으로 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 2 g (25 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 27%였다.
MS m/z (ESI): 355[M+1]
단계 8
1-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 2 g (25 mg, 0.07 mmol), 알켄 프로피오닐 클로라이드 (10 mg, 0.11 mmol), 고체 소듐 수소 카보네이트 (18 mg, 0.21 mmol), 물 (2 mL) 및 테트라히드로푸란 (10 mL)을 0℃에서 혼합하고, 10시간 동안 이 온도에서 교반한 다음, 이를 에틸 아세테이트 (20 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시킨 다음, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 후속으로 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 1-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 2 (17 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 60%였다.
MS m/z (ESI): 409[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (s, 1H), 7.01 (brs, 1H), 6.72 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.62 (dd, J = 16.8, 10.6 Hz, 1H), 6.55 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.33 (dd, J = 16.8, 1.5 Hz, 1H), 5.80 (brs, 1H), 5.76 (dd, J = 10.6, 1.6 Hz, 1H), 4.81 (brs, 1H), 4.40 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 4.18 (brs, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.26 (brs, 1H), 2.89 (brs, 1H), 2.42 - 2.25 (m, 2H), 2.08 - 2.00 (m, 2H).
실시예 3 내지 6을 실시예 2에 제공된 절차에 따라 수행하였다:
실시예 3
1-(1-아크릴로일아제티딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00020
MS m/z (ESI): 381[M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.43 (s, 1H), 7.30 (s, 2H), 6.73 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.60 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.38 (dd, J = 17.0, 10.3 Hz, 1H), 6.16 (dd, J = 17.0, 2.1 Hz, 1H), 5.73 (dd, J = 10.3, 2.1 Hz, 1H), 5.41 - 5.28 (m, 1H), 4.71 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.50 (dd, J = 9.2, 4.9 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 1H), 4.20 (dd, J = 10.7, 4.8 Hz, 1H), 3.78 (s, 6H).
실시예 4
1-((1-아크릴로일피페리딘-4-일)메틸)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00021
MS m/z (ESI): 423[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.00 (s, 1H), 6.98 (brs, 1H), 6.72 (s, 2H), 6.61 - 6.54 (m, 2H), 6.28 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.87 (brs, 1H), 5.70 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.72 (brs, 1H), 4.04 (brs, 3H), 3.82 (s, 6H), 3.05 (brs, 1H), 2.64 (brs, 1H), 2.27 (brs, 1H), 1.69 (brs, 2H), 1.24 (brs, 2H).
실시예 5
1-(4-아크릴로일아미노시클로헥실)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00022
MS m/z (ESI): 423[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.25 (s, 1H), 6.77 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.58 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 6.38 (dd, J = 17.1, 10.0 Hz, 1H), 6.26 (dd, J = 17.1, 2.0 Hz, 1H), 5.68 (dd, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 4.38 - 4.33 (m, 1H), 4.13 - 4.11 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 2.28 - 2.18 (m, 2H), 2.07 - 2.02 (m, 2H), 1.96 - 1.80 (m, 4H).
실시예 6
3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(2-(N-메틸아크릴로일아미노)에틸)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00023
MS m/z (ESI): 383[M+1]
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.24 (s, 1H), 7.10 - 6.90 (m, 2H), 6.76 (s, 2H), 6.69 - 6.54 (m, 2H), 6.07 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.89 - 3.80 (m, 8H), 2.94 (s, 3H).
실시예 7
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00024
단계 1
5-아미노-3-브로모-1H-피라졸-4-카보니트릴
화합물 5-아미노-1H-피라졸-4-카보니트릴 7a (20 g, 185 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드 (200 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 후속으로 N-브로모숙신이미드 (34 g, 190 mmol)를 나누어 첨가하고, 온도를 실온으로 상승시키고, 2시간 동안 교반한 다음, 반응 용액을 소듐 술파이트 용액에 붓고, 에틸 아세테이트 (200 mL Х 3)로 추출한 다음, 상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과를 통해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 5-아미노-3-브로모-1H-피라졸-4-카보니트릴 7b (32 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 93%였다.
MS m/z (ESI): 187/189[M+1]
단계 2
(S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-시아노-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
5-아미노-3-브로모-1H-피라졸-4-카보니트릴 7b (10 g, 53.8 mmol), 3-(톨루엔술포닐옥시)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 (22 g, 64.5 mmol), 세슘 카보네이트 (58 g, 107.6 mmol) 및 아세토니트릴 (250 mL)의 혼합물을 90℃로 가열하고, 4시간 동안 반응시킨 다음, 실온으로 냉각하고, 여과하고, 생성된 여과 케이크를 디클로로메탄으로 세척하고, 여과물을 합하고, 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 5/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-시아노-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7c (5 g, 황색 오일)를 수득하였고, 수율은 26%였다.
MS m/z (ESI): 300/302[M+1-56]
단계 3
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-시아노-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7c (5 g, 14.1 mmol), 아이오딘화구리 (0.6 g, 2.8 mmol), 트리에틸아민 (9 mL), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로라이드 (2 g, 2.8 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (150 mL)의 혼합물을 아르곤 하에 80℃로 가열한 다음, 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠 (14 g, 84.5 mmol)을 나누어 첨가하고, 후속으로 2시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각하고, 반응 용액을 물에 붓고, 에틸 아세테이트 (200 mL Х 3)로 추출하고; 후속으로 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 5/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (5 g, 갈색 오일)를 수득하였고, 수율은 81%였다.
MS m/z (ESI): 382[M+1-56]
단계 4
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (5 g, 11.4 mmol), 소듐 히드록시드 (1.5 g, 37.5 mmol, 2 mL의 물 중에 용해됨), 에탄올 (50 mL) 및 디메틸 술폭시드 (10 mL)의 혼합물을 0℃로 냉각하고, 과산화수소 (20 mL)를 첨가하고, 2시간 동안 실온에서 교반하고, 후속으로 반응 용액을 소듐 술파이트 용액에 붓고, 에틸 아세테이트 (100 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르를 수득하였고, 수율은 96%였다.
MS m/z (ESI): 400[M+1-56]
단계 5
(S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7e (5 g, 11 mmol)를 디클로로메탄 (100 mL) 중에 용해시키고, 후속으로 트리플루오로아세트산 (15 mL)을 첨가한 다음, 2시간 동안 실온에서 교반하고, 이어서 감압 하에 농축하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (7.1 g, 갈색 오일성 물질, 트리플루오로아세테이트, 조질)를 수득하였고, 수율은 >100%였고, 생성물을 정제 없이 후속 반응에 사용하였다.
MS m/z (ESI): 356[M+1]
단계 6
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (7.1 g, 11 mmol, 트리플루오로아세테이트, 조질)를 테트라히드로푸란 (50 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 포화 소듐 비카보네이트 용액 (20 mL) 및 아크릴로일 클로라이드 (900 mg, 10 mmol)를 순차적으로 첨가하고, 30분 동안 교반한 다음, 반응 용액을 물 (100 mL)에 붓고, 디클로로메탄 (100 mL x 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 1/2)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 7 (1.9 g, 백색 고체)을 수득하였고, 수율은 42%였다.
MS m/z (ESI): 410[M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.18 (brs, 1H), 6.75 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.69 - 6.55 (m, 3H), 6.20 - 6.14 (m, 1H), 5.72 - 5.67 (m, 1H), 5.03 - 4.91 (m, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 7H), 3.66 - 3.60 (m, 1H), 3.55 - 3.48 (m, 1H), 2.36 - 2.21 (m, 2H).
실시예 8
(S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일) 피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00025
단계 1
(S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일) 피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
(E)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔산 (23 mg, 0.14 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트 (HATU) (64 mg, 0.17 mmol), (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (50 mg, 0.14 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (2 mL) 및 디클로로메탄 (3 mL)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응 용액을 물에 붓고, 디클로로메탄 (20 mLХ3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-(디메틸아미노)부트-2-에노일) 피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 8 (2.4 mg, 백색 고체, 포르메이트)을 수득하였고, 수율은 4%였다.
MS m/z (ESI): 467[M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.27 (brs, 1H), 7.20 (brs, 1H), 6.75 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.70 - 6.61 (m, 3H), 6.44 - 6.35 (m, 1H), 5.01 - 4.93 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m,1H), 3.77 (s, 6H), 3.74 - 3.64 (m, 3H), 3.06 - 3.03 (m, 2H), 2.38 - 2.24 (m, 2H), 2.17 - 2.15 (m, 6H).
실시예 9
(S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(2-플루오로아크릴로일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00026
단계 1
(S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(2-플루오로아크릴로일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (50 mg, 0.14 mmol) 및 2-플루오로아크릴산 (15 mg, 0.17 mmol)을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 후속으로 N,N-디이소프로필에틸아민 (54 mg, 0.42 mmol) 및 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) (69 mg, 0.18 mmol)를 첨가하고, 2시간 동안 실온에서 교반한 다음, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (10 mL x 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 박층 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(2-플루오로아크릴로일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 9 (3.6 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 6%였다.
MS m/z (ESI): 428 [M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.62 (t, J = 2.5 Hz, 2H), 6.47 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 5.39 (dd, J = 47.2, 3.5 Hz, 1H), 5.16 (ddd, J = 16.6, 5.7, 3.5 Hz, 1H), 4.86 - 4.81 (m, 1H), 4.02 - 3.91 (m, 2H), 3.87 - 3.72 (m, 2H), 3.71 (s, 6H), 2.34 - 2.23 (m, 2H).
실시예 10
(S)-5-아미노-1-(1-(부트-2-이닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00027
단계 1
(S)-5-아미노-1-(1-(부트-2-이닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
(S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (50 mg, 0.14 mmol) 및 2-부티노산 (14 mg, 0.17 mmol)을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 후속으로 N,N-디이소프로필에틸아민 (54 mg, 0.42 mmol) 및 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU) (69 mg, 0.18 mmol)를 첨가하고, 2시간 동안 실온에서 교반한 다음, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (10 mL x 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 박층 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-1-(1-(부트-2-이닐)피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 10 (5.1 mg, 미황색 고체)을 수득하였고, 수율은 9%였다.
MS m/z (ESI): 422 [M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.62 (t, J = 2.1 Hz, 2H), 6.47 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 4.85 - 4.81 (m, 1H), 4.01 - 3.86 (m, 2H), 3.77 - 3.62 (m, 7.5H), 3.54 - 3.46 (m, 0.5H), 2.32 - 2.27 (m, 2H), 1.95 - 1.93 (m, 3H).
실시예 11
(S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-메톡시부트-2-에노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00028
단계 1
(E)-4-브로모부트-2-엔산
메틸 (E)-4-브로모부트-2-에노에이트 11a (3 g, 16.8 mmol), 리튬 히드록시드 모노히드레이트 (1.1 g, 25.3 mmol), 테트라히드로푸란 (50 mL) 및 물 (50 mL)을 0℃에서 혼합하고, 2시간 초과 동안 교반하고; 반응의 완결 후, 테트라히드로푸란을 석유 에테르로 세척하고, 수성상을 2M 염산을 사용하여 pH = 1로 조정한 다음, 에틸 아세테이트 (100 mL Х 2)로 추출하고, 유기상을 합한 후, 용매를 감압 하에 증발시켜, 표제 생성물 (E)-4-브로모부트-2-엔산 11b (2.3 g, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 83%였다.
MS m/z (ESI): 163[M-1]
단계 2
(E)-4-메톡시부트-2-엔산
화합물 (E)-4-브로모부트-2-엔산 11b (100 mg, 0.61 mmol)를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 중 소듐 메톡시드 (30%, 0.55 mL, 3.05 mmol)를 첨가한 다음, 15시간 동안 교반하고, 반응 혼합물에서 감압 하에 용매를 제거한 다음, 물 중에 용해시키고, 후속으로 희석 염산을 사용하여 pH = 1로 조정한 다음, 디클로로메탄 (10 mL Х 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 증발시켜, 표제 생성물 (E)-4-메톡시부트-2-엔산 11c (50 mg, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 71%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.13 - 7.03 (m, 1H), 6.15 - 6.07 (m, 1H), 4.18 - 4.11 (m, 2H), 3.48 - 3.38 (s, 3H).
단계 3
(S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-메톡시부트-2-에노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (E)-4-메톡시부트-2-엔산 11c (22 mg, 0.19 mmol), 디이소프로필에틸아민 (67 mg, 0.52 mmol), (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (50 mg, 0.13 mmol), 2-(7-옥소벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (72 mg, 0.19 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL)를 혼합하고, 2시간 동안 교반하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (30 mL) 중에 용해시킨 다음, 물 및 포화 염수로 순차적으로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S,E)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(1-(4-메톡시부트-2-에노일)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 (30 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 51%였다.
MS m/z (ESI): 454[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.98 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 6.86 (brs, 1H), 6.72 (d, J = 2.1 Hz, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.39 (dd, J = 27.7, 16.0 Hz, 1H), 5.54 (brs, 1H), 4.73 - 4.70 (m, 1H), 4.14 - 4.12 (m, 2H), 4.05 - 4.00 (m, 2H), 3.95 - 3.93 (m, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.77 - 3.68 (m, 1H), 3.43 (d, J = 10.1 Hz, 3H), 2.72 (brs, 0.5H), 2.54 (brs, 0.5H), 2.43 - 2.35 (m, 1H).
실시예 12
(S)-5-아미노-1-(1-시아노피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00029
단계 1
(S)-5-아미노-1-(1-시아노피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 7f (50 mg, 0.14 mmol)를 테트라히드로푸란 (2 mL) 중에 용해시킨 다음, 트리에틸아민 (1 mL)을 첨가하고, 0℃로 냉각하고, 시아노젠 브로마이드 (17 mg, 0.15 mmol)를 첨가하고, 2시간 동안 0℃에서 교반하고, 후속으로 반응 온도를 실온으로 상승시키고, 2시간 동안 교반을 지속하고, 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 박층 실리카 겔 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 15/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-1-(1-시아노피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 12 (18 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 34%였다.
MS m/z (ESI): 381[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.77 (brs, 1H), 6.68 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.75 (s, 2H), 5.67 (brs, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 9H), 3.61 - 3.53 (m, 1H), 2.53 - 2.43 (m, 1H), 2.37 - 2.26 (m, 1H).
실시예 13 내지 16은 실시예 7의 작업 단계를 참조하여 합성하였다:
실시예 13
(R)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00030
MS m/z (ESI): 410[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.73 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 6.71 - 6.60 (m, 1H), 6.58 (brs, 1H), 6.32 (dd, J = 16.8, 1.7 Hz, 1H), 5.84 - 5.74 (m, 1H), 5.04 - 4.91 (m, 1H), 4.09 (m, 0.5H), 3.98 (td, J = 11.1, 4.0 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 7.8, 5.6 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 9.9, 4.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.73 - 3.63 (m, 0.5H), 2.47 (dd, J = 13.2, 6.7 Hz, 1H), 2.38 (dd, J = 13.6, 7.0 Hz, 1H).
실시예 14
1-(1-아크릴로일아제티딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00031
MS m/z (ESI): 396[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.75 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.60 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.45 - 6.28 (m, 2H), 5.80 (dd, J = 10.1, 2.1 Hz, 1H), 5.29 - 5.21 (m, 1H), 4.79 - 4.64 (m, 2H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 4.46 - 4.39 (m, 1H), 3.82 (s, 6H).
실시예 15
1-(1-아크릴로일피페리딘-4-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00032
MS m/z (ESI): 424[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.88 - 6.78 (m, 1H), 6.73 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.58 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.24 (dd, J = 16.8, 1.7 Hz, 1H), 5.78 (dd, J = 10.7, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.47 - 4.36 (m, 1H), 4.30 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.32 - 3.24 (m, 1H), 2.91 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 4.5 Hz, 4H).
실시예 16
1-((1-아크릴로일피롤리딘-3-일)메틸)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00033
MS m/z (ESI): 424[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.73 (s, 2H), 6.66 - 6.55 (m, 2H), 6.28 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 5.75 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.13 - 3.99 (m, 2H), 3.82 (s, 6H), 3.78 - 3.61 (m, 2H), 3.48 (dd, J = 14.8, 7.4 Hz, 1H), 3.39 - 3.34 (m, 1H), 2.94 - 2.75 (m, 1H), 2.20 - 2.02 (m, 1H), 1.94 - 1.71 (m, 1H).
실시예 17
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((2-플루오로-3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00034
단계 1
1-에티닐-2-플루오로-3,5-디메톡시벤젠
화합물 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠 1e (2 g, 12.3 mmol)를 아세토니트릴 (15 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각한 다음, 1-클로로메틸-4-플루오로-1,4-디아조늄 디시클로 2.2.2 옥탄 비스(테트라플루오로보레이트)의 염 (6.6 g, 18.5 mmol)을 나누어 첨가한 다음, 밤새 실온에서 교반하고, 반응 용액을 물 (50 mL)에 붓고, 디클로로메탄 (30 mLХ3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 후속으로 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 30/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 1-에티닐-2-플루오로-3,5-디메톡시벤젠 17a (800 mg, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 36%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.46 (dd, J = 6.9, 2.9 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 4.5, 3.0 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.22 (s, 1H).
이어서, 상기 제공된 실시예 7의 제1 내지 제6 단계의 절차를 참고하나, 제3 단계에서 1-에티닐-2-플루오로-3,5-디메톡시벤젠을 사용하여 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠을 대체하여 실시예 17을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 428[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.00 (brs, 1H), 6.59 - 6.57 (m, 2H), 6.49 - 6.39 (m, 2H), 5.74 - 5.70 (m, 1H), 5.52 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.35 (brs, 1H), 4.73 - 4.64 (m, 1H), 4.07 - 3.90 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.78 (d, J = 5.3 Hz, 3H), 3.75 - 3.67 (m, 1H), 2.72 - 2.67 (m, 0.5H), 2.54 - 2.31 (m, 1.5H).
실시예 18
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((5-클로로-2-플루오로페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00035
단계 1
((2-플루오로-5-클로로페닐)에티닐)트리메틸실란
2-플루오로-5-클로로브로모벤젠 18a (11.0 g, 52.8 mmol), 에티닐트리메틸실란 (7.7 g, 79 mmol) 및 트리에틸아민 (60 mL)을 함께 혼합한 다음, 아이오딘화구리 (100 mg, 0.53 mmol) 및 디트리페닐포스핀 팔라듐 클로라이드 (1.86 g, 2.65 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 질소 분위기 하에 80℃로 가열하고, 4시간 동안 교반을 지속하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 용액으로부터 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/ 에틸 아세테이트 = 100/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 ((2-플루오로-5-클로로페닐)에티닐)트리메틸실란 18b (11.0 g, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 90%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (dd, J = 6.0, 2.7 Hz, 1H), 7.28 - 7.22 (m, 1H), 7.02 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 0.29 (s, 9H).
단계 2
4-클로로-2-에티닐-1-플루오로벤젠
((2-플루오로-5-클로로페닐)에티닐)트리메틸실란 18b (11.0 g, 48 mmol), 포타슘 카보네이트 (8.1 g, 58 mmol), 디클로로메탄 (80 mL) 및 메탄올 (40 mL)을 함께 혼합하고, 18시간 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완료된 후, 용매를 감압 하에 용액으로부터 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 4-클로로-2-에티닐-1-플루오로벤젠 18c (5.5 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 74%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (dd, J = 6.0, 2.7 Hz, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 1H), 7.04 (t, J = 8.0, 1H), 3.35 (s, 1H).
이어서, 상기 제공된 실시예 7의 제1 내지 제6 단계의 절차를 참고하나, 제3 단계에서 4-클로로-2-에티닐-1-플루오로벤젠을 사용하여 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠을 대체하여 실시예 18을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 402[M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.62 - 7.61 (m, 1H), 7.47 - 7.45 (m, 1H), 7.24 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 6.69 - 6.56 (m, 1H), 6.30 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.77 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.02 - 1.91 (m, 1H), 4.09 - 3.95 (m, 2H), 3.84 - 3.78 (m, 2H), 2.46 (dd, J = 13.1, 6.6 Hz, 1H), 2.37 (dd, J = 13.6, 6.9 Hz, 1H).
실시예 19
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00036
단계 1
메틸 4-클로로-3-브로모벤조에이트
4-클로로-3-브로모벤조산 19a (2 g, 8.5 mmol)를 메탄올 (400 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각한 다음, 후속으로 아세틸 클로라이드 (2.3 g, 30 mmol)를 적가하고, 18시간 동안 교반을 지속하고, 반응이 완료된 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 메틸 4-클로로-3-브로모벤조에이트 19b (1.2 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 57%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 8.3, 1.9 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H).
단계 2
메틸 4-클로로-3-((트리메틸실릴)에티닐)벤조에이트
화합물 메틸 4-클로로-3-브로모벤조에이트 19b (1.2 g, 4.8 mmol), 트리메틸실릴아세틸렌 (0.95 g, 9.7 mmol), 팔라듐 아세테이트 (108 mg, 0.48 mmol), 트리페닐포스핀 (254 mg, 0.97 mmol), 아이오딘화구리 (185 mg, 0.97 mmol) 및 트리에틸아민 (25 mL)을 밀봉된 튜브에서 혼합하고, 15시간 동안 100℃에서 가열 및 교반하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 메틸 4-클로로-3-((트리메틸실릴)에티닐)벤조에이트 19c (1 g, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 78%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.91 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 0.30 (s, 9H).
단계 3
메틸 4-클로로-3-에티닐벤조에이트
메틸 4-클로로-3-((트리메틸실릴)에티닐)벤조에이트 19c (1 g, 3.76 mmol)를 메탄올 (20 mL) 중에 용해시킨 다음, 포타슘 카보네이트 (1.04 g, 7.52 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 물로 세척한 다음, 여과하여, 표제 생성물 메틸 4-클로로-3-에티닐벤조에이트 19d (380 mg, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 52%였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.96 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.44 (s, 1H).
단계 4
(S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-카바모일-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
화합물 (S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-시아노-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7c (2.20 g, 6.2 mmol), 소듐 히드록시드의 수용액 (0.5 M, 12.4 mL, 6.2 mmol), 과산화수소의 수용액 (30%, 15 mL) 및 디메틸 술폭시드 (30 mL)를 함께 혼합하고, 2시간 동안 실온에서 교반한 후, 반응물을 포화 염수 (50 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트 (50 mL Х 3)로 추출하고, 이어서 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 100/1 내지 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-카바모일-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19e (1.92g, 담황색 고체)를 수득하였고, 수율은 83%였다.
MS m/z (ESI): 374[M+1]
단계 5
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(카보메톡시 <메톡시카보닐>)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-카바모일-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19e (770 mg, 2.1 mmol), 트리에틸아민 (6 mL), 1,1'-비스디페닐포스피노페로센 팔라듐 디클로라이드 (307 mg, 0.42 mmol), 아이오딘화구리 (80 mg, 0.42 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 ( 20 mL)를 혼합하고, 탈산소화한 다음, 아르곤 분위기 하에 90℃로 가열하고, 후속으로 N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 메틸 4-클로로-3-에티닐벤조에이트 19d (3.20 g, 16.5 mmol)의 용액을 적가하고, 12시간 동안 교반을 지속하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(카보메톡시 <메톡시카보닐>)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19f (420 mg, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 41%였다.
MS m/z (ESI): 488[M+1]
단계 6
(S)-3-((5-아미노-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-4-카바모일-1H-피라졸-3-일)에티닐)-4-클로로벤조산
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(카보메톡시 <메톡시카보닐>)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19f (100 mg, 0.2 mmol)를 메탄올 (4 mL) 및 물 (4 mL)의 혼합 용매 중에 용해시킨 다음, 소듐 히드록시드 (25 mg, 0.61 mmol)를 첨가하고, 2시간 동안 교반을 지속하고, 반응이 완결된 후, 유기 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 염산 (1M)을 사용하여 pH = 4 내지 5로 조정한 다음, 에틸 아세테이트 (30 mL x 2)로 추출하고, 생성된 유기상을 합하고, 포화 염수로 세척한 다음, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 여과물에서 감압 하에 용매를 제거하여, 표제 생성물 (S)-3-((5-아미노-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-4-카바모일-1H-피라졸-3-일)에티닐)-4-클로로벤조산 19g (80 mg, 갈색 고체)를 수득하였고, 수율은 84%였다.
MS m/z (ESI): 418[M+H-56]
단계 7
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-((5-아미노-1-(1-(tert-부톡시카보닐)피롤리딘-3-일)-4-카바모일-1H-피라졸-3-일)에티닐)-4-클로로벤조산 19g (80 mg, 0.17 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드 (2.5 mL) 중에 용해시킨 다음, 메틸아민 히드로클로라이드 (34 mg, 0.50 mmol), 디이소프로필에틸아민 (129 mg, 1 mmol) 및 2-(7-벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트 (64 mg, 0.17 mmol)를 순차적으로 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반한 다음, 물로 켄칭하고, 후속으로 에틸 아세테이트 (20 mL x 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 0/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19h (41 mg, 갈색 고체)를 수득하였고, 수율은 50%였다.
MS m/z (ESI): 387[M+H-Boc]
단계 8
(S)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-포름아미드 히드로클로라이드
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19h (40mg, 0.08 mmol)를 에틸 아세테이트 (5 mL) 중에 용해시킨 다음, 에탄올 중 수소 클로라이드의 용액 (33%, 3 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 제거하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-포름아미드 히드로클로라이드 19i (40 mg, 조질, 갈색 고체)를 수득하였고, 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 바로 사용하였다.
MS m/z (ESI): 387[M+H]
단계 9
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-포름아미드 히드로클로라이드 19i (40 mg, 0.08 mmol, 조질), 아크릴로일 클로라이드 (7.5 mg, 0.08 mmol), 포타슘 카보네이트의 수용액 (0.4 M, 1.0 mL, 0.4 mmol) 및 테트라히드로푸란 (5 mL)을 0℃에서 혼합하고, 0.5시간 동안 이 온도에서 교반하고, 후속으로 에틸 아세테이트 (20 mL Х 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 100/1 내지 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((2-클로로-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 19 (18 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 2 단계로 51%였다.
MS m/z (ESI): 441[M+H]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.65 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H),7.43 (s, 1H), 6.70 - 6.62 (m, 4H), 6.19 - 6.15 (m, 1H), 5.70 (t, J = 10.2 Hz, 1H), 5.03 - 4.94 (m, 1H), 3.80 - 3.54 (m, 4H), 2.78 (d, J = 3.8 Hz, 3H), 2.36 - 2.25 (m, 2H).
실시예 20
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00037
단계 1
3-브로모-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드
3-브로모-5-메톡시벤조산 20a (500 mg, 2.17 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드 (15 mL) 중에 용해시킨 다음, 메틸아민 히드로클로라이드 (291 mg, 4.35 mmol), 디이소프로필에틸아민 (1.12 g, 8.68 mmol) 및 2-(7-벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트 (1.24 g, 3.26 mmol)를 순차적으로 첨가하고, 반응 시스템을 2시간 동안 실온에서 교반한 다음, 물로 켄칭하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-브로모-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드 20b (500 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 95%였다.
MS m/z (ESI): 244[M+H]
단계 2
3-메톡시-N-메틸-5-((트리메틸실릴)에티닐)벤즈아미드
화합물 3-브로모-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드 20b (500 mg, 2.1 mmol), 트리메틸실릴아세틸렌 (302 mg, 3.1 mmol), 팔라듐 아세테이트 (47 mg, 0.21 mmol), 트리페닐 포스핀 (110 mg, 0.42 mmol), 아이오딘화구리 (80 mg, 0.42 mmol) 및 트리에틸아민 (20 mL)을 밀봉된 튜브에서 혼합한 다음, 100℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-메톡시-N-메틸-5-((트리메틸실릴)에티닐)벤즈아미드 20c (220 mg, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 41%였다.
MS m/z (ESI): 262[M+H]
단계 3
3-에티닐-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드
3-메톡시-N-메틸-5-((트리메틸실릴)에티닐)벤즈아미드 20c (220 mg, 0.84 mmol)를 메탄올 (8 mL) 중에 용해시킨 다음, 포타슘 카보네이트 (233 mg, 1.68 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-에티닐-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드 20d (140 mg, 담황색 고체)를 수득하였고, 수율은 88%였다.
MS m/z (ESI): 190[M+H]
단계 4
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-카바모일-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 19e (329 mg, 0.88 mmol), 트리에틸아민 (2 mL), 1,1'-비스디페닐포스피노페로센 팔라듐 디클로라이드 (129 mg, 0.2 mmol), 아이오딘화구리 (34 mg, 0.18 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (8 mL)를 혼합한 다음, 탈산소화하고, 아르곤 분위기 하에 90℃로 가열한 다음, N,N-디메틸포름아미드 (2 mL) 중 3-에티닐-5-메톡시-N-메틸벤즈아미드 20d (1.00 g, 5.3 mmol)의 용액을 적가하고, 12시간 동안 교반을 지속하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 20e (400 mg, 조질, 갈색 고체)를 수득하였다.
MS m/z (ESI): 383[M+H-100]
단계 5
(S)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드
(S)-3-(5-아미노-4-카바모일-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 20e (400 mg, 조질)를 디클로로메탄 (5 mL) 중에 용해시킨 다음, 에탄올 중 수소 클로라이드의 용액 (30%, 3mL)을 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 제거하여, 표제 생성물 (S)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드 20f (300 mg, 조질, 갈색 고체)를 수득하였다. 생성물을 정제 없이 후속 반응에 바로 사용하였다.
MS m/z (ESI): 383[M+H]
단계 6
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드 20f (150 mg, 0.39 mmol, 조질), 아크릴로일 클로라이드 (42 mg, 0.47 mmol), 소듐 비카보네이트 (131 mg, 1.56 mmol), 물 (4mL) 및 테트라히드로푸란 (8 mL)을 0℃에서 혼합하고, 0.5시간 동안 이 온도에서 교반하고, 에틸 아세테이트 (20 mLХ2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 20/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3-메톡시-5-(메틸카바모일)페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 20 (60 mg, 백색 고체)을 수득하였고, 수율은 2 단계로 35%였다.
MS m/z (ESI): 437[M+H]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.73 - 6.58 (m, 1H), 6.36 - 6.28 (m, 1H), 5.83 - 5.75 (m, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 1H), 4.12 - 3.91 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.86 - 3.66 (m, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 2.42 - 2.34 (m, 1H).
실시예 21
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00038
단계 1
(S)-3-(3-브로모-4-시아노-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
화합물 (S)-3-(5-아미노-3-브로모-4-시아노-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7c (178 mg, 0.5 mmol) 및 벤젠술폰산 모노히드레이트 (12 mg, 0.07 mmol)를 트리에틸 오르토포르메이트 (4 mL) 중에 용해시키고, 2시간 동안 가열하여 환류시키고, 반응이 완료된 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 물 중에 분산시키고, 후속으로 에틸 아세테이트 (30 mL x 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 여과물에서 감압 하에 용매를 제거하고, 잔류물을 에탄올 (10 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 소듐 보로히드라이드 (89 mg, 2.35 mmol)를 첨가한 다음, 2시간 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 이를 포화 염수로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트 (30 mL x 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 갑압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(3-브로모-4-시아노-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21a (178 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 100%였다.
MS m/z (ESI): 314[M+H-56]
단계 2
(S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(3-브로모-4-시아노-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21a (1.85 g, 5.0 mmol), 트리에틸아민 (20 mL), 1,1'-비스디페닐포스피노페로센 팔라듐 디클로라이드 (816 mg, 1 mmol), 아이오딘화구리 (190 mg, 1 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 (20 mL)를 함께 혼합하고, 탈산소화한 다음, 아르곤 분위기 하에 90℃로 가열하고, 이어서 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠 (4.86 g, 30 mmol)의 용액을 적가하고, 12시간 동안 교반을 지속하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 50/1 내지 0/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21b (2.1g, 갈색 고체)를 수득하였고, 수율은 80%였다.
MS m/z (ESI): 496[M+H-56]
단계 3
(S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21b (225 mg, 0.5 mmol)를 디클로로메탄 (10 mL) 중에 용해시킨 다음, 트리에틸아민 (150 mg, 1.5 mmol), Boc 무수물 (218 mg, 1 mmol) 및 4-디메틸 아미노피리딘 (6 mg, 0.05 mmol)을 순차적으로 첨가하고, 2시간 동안 실온에서 교반한 후, 포화 염수 (10 mL)를 첨가한 다음, 에틸 아세테이트 (20 mL Х 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 50/1 내지 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21c (200 mg, 미황색 고체)를 수득하였고, 수율은 72%였다.
MS m/z (ESI): 440[M+H-112]
단계 4
(S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21c (55 mg, 0.1 mmol), 소듐 히드록시드의 수용액 (0.5 M, 0.1 mL, 0.05 mmol), 과산화수소의 수용액 (30%, 0.5 mL) 및 디메틸 술폭시드 (1 mL)를 혼합하고, 2시간 동안 실온에서 교반하고, 반응물을 포화 염수 (10 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (20 mL Х 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1/100)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21d (30 mg, 갈색 고체)를 수득하였고, 수율은 50%였다.
MS m/z (ESI): 414[M+H-156]
단계 5
(S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드
(S)-3-(5-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 21d (570 mg, 1 mmol)를 에틸 아세테이트 (10 mL) 중에 용해시킨 다음, 에탄올 중 수소 클로라이드의 용액 (33%, 5 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 용매를 감압 하에 제거하여, 표제 생성물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드 21e (400 mg, 조질, 갈색 고체)를 수득하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 바로 사용하였다.
MS m/z (ESI): 370[M+H]
단계 6
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 히드로클로라이드 21e, 아크릴로일 클로라이드 (254 mg, 2.82 mmol), 포타슘 카보네이트의 수용액 (2.5 M, 4.7 mL, 11.78 mmol) 및 테트라히드로푸란 (10 mL)을 혼합하고, 0.5시간 동안 이 온도에서 교반하고, 후속으로 에틸 아세테이트 (50 mLХ2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 100/1 내지 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드 21 (720 mg, 백색 고체)을 수득하였고, 수율은 76%였다.
MS m/z (ESI): 424[M+H]
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.88 (s, 1H), 6.69 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 6.51 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.46 - 6.40 (m, 2H), 5.74 - 5.72 (m, 1H), 5.52 - 5.48 (m, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.09 - 3.94 (m, 3H), 3.80 (s, 6H), 3.72 - 3.70 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 2.71 - 2.56 (m, 1H), 2.45 - 2.35 (m, 1H).
실시예 22
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((2-플루오로-3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00039
실시예 21의 절차에 따라, 그러나 제2 단계에서 1-에티닐-2-플루오로-3,5-디메톡시벤젠을 사용하여 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠을 대체하여 실시예 22를 합성하였다.
MS m/z (ESI): 442[M+H]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.08 (s, 1H), 6.68 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.60 - 6.57 (m, 2H), 6.51 - 6.40 (m, 2H), 5.74 - 5.69 (m, 1H), 5.35 (s, 1H), 5.08 - 4.99 (m, 1H), 4.11 - 4.08 (m, 1H),4.05 - 3.94 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.75 - 3.65 (m, 1H), 3.00 (t, J = 5.2 Hz, 3H), 2.72 - 2.58 (m, 1H), 2.44 - 2.33 (m, 1H).
실시예 23
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((5-클로로-2-플루오로페닐)에티닐)-5-(메틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00040
실시예 21의 절차에 따라, 그러나 제2 단계에서 4-클로로-2-에티닐-1-플루오로벤젠을 사용하여 1-에티닐-3,5-디메톡시벤젠을 대체하여 실시예 23을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 416[M+H]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 - 7.52 (m, 1H), 7.35 - 7.33 (m, 1H), 7.08 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.02 - 6.92 (m, 1H), 6.51 - 6.39 (m, 2H), 5.74 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 5.55 - 5.44 (m, 1H), 5.09 - 4.98 (m, 1H), 4.14 - 3.90 (m, 3H), 3.80 - 3.65 (m, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.74 - 2.55 (m, 1H), 2.49 - 2.34 (m, 1H).
실시예 24
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00041
단계 1
(S)-3-(5-에틸아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (500 mg, 1.14 mmol) 및 소듐 히드라이드 (91 mg, 2.28 mmol, 60%)의 혼합물을 N,N-디에틸아세트아미드 (5 mL)에 첨가하고, 10분 동안 교반한 다음, 아이오도에탄 (106 mg, 0.68 mmol)을 첨가하고, 0.5시간 동안 교반하고, 반응 용액을 물에 부은 다음, 감압 하에 농축하고, 잔류물을 역상 고성능 액체 정제용 크로마토그래피 [아세토니트릴/물 (0.1% 포름산을 함유함): 50%-90%]에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-에틸아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 24a (70 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 22%였다.
MS m/z (ESI): 410[M+1-56]
단계 2
(S)-3-(5-에틸아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-에틸아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 24a (55 mg, 0.12 mmol)를 디메틸 술폭시드 (3 mL) 중에 용해시키고, 후속으로 과산화수소 (2 mL) 및 소듐 히드록시드 (300 mg, 7.5 mmol)를 첨가하고, 10분 동안 실온에서 교반한 후, 40℃까지 가온시키고, 반응이 완결된 후, 냉각 후 이를 물 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (30 mL)로 추출하고, 물 (20 mL Х 3)로 세척하고, 유기상을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 역상 고성능 액체 정제용 크로마토그래피 [아세토니트릴/물 (0.1% 포름산을 함유함): 50%-90%]에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-에틸아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 24b (15 mg)를 수득하였고, 수율은 26%였다.
MS m/z (ESI): 484 [M+1]
단계 3
(S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
(S)-3-(5-에틸아미노-4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 24b (15 mg, 0.031 mmol)를 디클로로메탄 (2 mL) 중에 용해시킨 다음, 트리플루오로아세트산 (0.5 mL)을 첨가하고, 0.5시간 동안 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응 시스템을 감압 하에 농축하여, 표제 생성물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 24c (20 mg, 조질, 갈색 오일)를 수득하였고, 수율은 >100%였다. 생성물을 정제 없이 후속 반응에 사용하였다.
MS m/z (ESI): 384[M+1]
단계 4
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 24c (20 mg, 0.031 mmol, 조질)를 테트라히드로푸란 (5 mL) 중에 용해시킨 다음, 포화 소듐 비카보네이트 용액 (2 mL)을 첨가하고, 후속으로 테트라히드로푸란 중 아크릴로일 클로라이드 (2.7 mg, 0.03 mmol)의 용액을 첨가하고, 0.5시간 동안 교반하고, 반응 용액을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (30 mL) 중에 용해시킨 다음, 물 (20 mL x 3)로 세척하고, 이어서 유기상을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 역상 고성능 액체 정제용 크로마토그래피 [아세토니트릴/물 (0.1% 포름산을 함유함): 20%-70%]에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(에틸아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드 24 (4.7 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 24%였다.
MS m/z (ESI): 438[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.87 (brs, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.48 - 6.40 (m, 2H), 5.74 - 5.69 (m, 1H), 5.06 - 4.97 (m, 2H), 4.13 - 3.93 (m, 3H), 3.84 (s, 6H), 3.80 - 3.67 (m, 1H), 3.42 (brs, 2H), 2.75 - 2.35 (m, 2H), 1.31 - 1.25 (m, 3H).
실시예 25
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(이소프로필아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00042
단계 1
(S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(이소프로필아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (600 mg, 1.37 mmol), 세슘 카보네이트 (893 mg, 2.74 mmol) 및 아세토니트릴 (25 mL)의 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 2-브로모프로판 (186 mg, 1.51 mmol)을 신속하게 교반하고, 72℃로 가열하고, 6시간 동안 교반한 다음, 실온으로 냉각하고, 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-(이소프로필아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 25a (600 mg, 미황색 고체)를 수득하였고, 수율은 91%였다.
MS m/z (ESI): 424[M+1-56]
실시예 24에서 수행된 제2 내지 제4 단계의 작업을 참조하여 실시예 25를 합성하였다.
MS m/z (ESI): 452[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.88 (brs, 1H), 6.70 (s, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.51 - 6.39 (m, 2H), 6.03 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 5.74 - 5.69 (m, 1H), 5.49 (brs, 1H), 4.96 - 4.87 (m, 1H), 4.09 - 3.86 (m, 3H), 3.80 - 3.66 (m, 7H), 3.45 - 3.43 (m, 1H), 2.69 - 2.32 (m, 2H), 1.27 - 1.15 (m, 6H).
실시예 26
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-((시클로프로필메틸)아미노)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00043
단계 1
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-((시클로프로필메틸)아미노)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 7 (50 mg, 0.12 mmol)을 아세토니트릴 (2 mL) 중에 용해시킨 다음, 세슘 카보네이트 (80 mg, 0.24 mmol) 및 (브로모메틸)시클로프로판 (19 mg, 0.13 mmol)을 첨가하고, 70℃로 가열하고, 4시간 동안 교반하고, 후속으로 반응 용액을 물 (30 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (30 mL Х 3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 정제를 위해 실리카 겔의 박층 상에서 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 12/1)에 의해 잔류물을 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-((시클로프로필메틸)아미노)-3-((3,5-디메톡시페닐) 에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 26 (14 mg, 백색 고체)을 수득하였고, 수율은 28%였다.
MS m/z (ESI): 464[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.89 (brs, 1H), 6.71 (s, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.51 - 6.37 (m, 2H), 5.76 - 5.71 (m, 1H), 5.40 (brs, 1H), 5.03 - 4.95 (m, 1H), 4.06 - 3.89 (m, 3H), 3.82 (s, 6H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.06 - 3.02 (m, 2H), 2.69 - 2.52 (m, 1H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 1.15 - 0.98 (m, 1H), 0.63 - 0.60 (m, 2H), 0.29 - 0.27 (m, 2H).
실시예 27
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2,2,2-트리플루오로에틸) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00044
단계 1
(S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (430 mg, 0.98 mmol), 트리플루오로아세트알데히드의 수용액 (75%) (304 mg, 1.96 mmol) 및 테트라에틸 티타네이트 (448 mg, 1.96 mmol)를 디클로로메탄 (15 mL)에 첨가하고, 2시간 동안 교반하고, 반응이 완결된 후, 소듐 보로히드라이드 (75 mg, 1.96 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반을 지속하고, 반응 혼합물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트 (20 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 칼럼에 의해 신속하게 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 27a (120 mg, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 26%였다.
MS m/z (ESI): 464[M+1-56]
실시예 24에서 수행된 제2 내지 제4 단계의 작업을 참조하여 실시예 27을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 492[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.92 (brs, 1H), 6.70 (s, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.47 - 6.39 (m, 2H), 6.31 - 6.25 (m, 1H), 5.75 - 5.65 (m, 1H), 5.65 (brs, 1H), 5.05 - 4.98 (m, 1H), 4.10 - 3.88 (m, 3H), 3.80 (s, 6H), 3.75 - 3.61 (m, 3H), 2.63 - 2.34 (m, 2H).
실시예 28
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-메톡시에틸) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00045
실시예 25의 절차에 따라, 그러나 제1 단계에서 1-브로모-2-메톡시에탄을 사용하여 2-브로모프로판을 대체하여 실시예 28을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 468[M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.32 (brs, 1H), 6.74 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 6.64 (dd, J = 16.8, 10.4 Hz, 1H), 6.60 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.50 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 6.16 (dd, J = 16.8, 5.0 Hz, 1H), 5.68 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 5.15 - 5.05 (m, 1H), 4.05 - 4.01 (m, 0.5H), 3.86 - 3.81 (m, 1.5H), 3.77 (s, 6H), 3.70 - 3.61 (m, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 1H), 3.46 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.39 - 3.34 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.42 - 2.23 (m, 2H).
실시예 29
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00046
단계 1
(S)-3-(5-((2-아세톡시에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (300 mg, 0.685 mmol), 2-브로모에틸 아세테이트 (126 mg, 0.753 mmol), 세슘 카보네이트 (447 mg, 1.37 mmol) 및 아세토니트릴 (4 mL)의 혼합물을 90℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하고, 반응 용액을 실온으로 냉각하고, 물 (50 mL)에 부은 다음, 에틸 아세테이트 (30 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 15/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-((2-아세톡시에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 29a (148 mg, 황색 고체)를 수득하였고, 수율은 41%였다.
MS m/z (ESI): 468[M+1-56]
단계 2
(S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-((2-아세톡시에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 29a (68 mg, 0.146 mmol), 에탄올 (5 mL) 및 디메틸 술폭시드 (1 mL)의 혼합물을 포화 소듐 히드록시드 용액 (3 mL) 및 과산화수소 (4 mL)와 함께 첨가하고, 1시간 동안 30℃에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응 용액을 포화 소듐 술파이트 용액 (30 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (30 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 29b (110 mg, 조질, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 >100%였다. 생성물을 정제 없이 후속 반응에 사용하였다.
MS m/z (ESI): 444[M+1-56]
단계 3
(S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-3-(4-카바모일-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 29b (110 mg, 0.146 mmol, 조질)를 메탄올 중 염산의 용액 (5 mL) 중에 용해시키고, 40℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응 시스템을 감압 하에 농축하여, 표제 생성물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 29c (160 mg, 조질, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 >100%였다. 생성물을 정제 없이 후속 반응에 사용하였다.
MS m/z (ESI): 400[M+1]
단계 4
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-카복사미드 29c (160 mg, 0.146 mmol, 조질)를 테트라히드로푸란 (5 mL) 중에 용해시킨 다음, 포화 소듐 비카보네이트 용액 (10 mL)을 첨가하고, 이어서 아크릴로일 클로라이드 (12 mg, 0.13 mmol)를 첨가하고, 10분 동안 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응 용액을 물 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (30 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 역상 고성능 정제용 크로마토그래피 [아세토니트릴/물 (0.2% 포름산을 함유함): 20%-60%]에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-히드록시에틸)아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드 29 (6 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 9%였다.
MS m/z (ESI): 454[M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.36 (brs, 1H), 6.76 (brs, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.70 - 6.60 (m, 2H), 6.55 - 6.52 (m, 1H), 6.17 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 5.69 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 5.16 - 5.10 (m, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.06 - 4.0 (m, 0.5H), 3.83 - 3.81 (m, 1.5H), 3.77 (s, 6H), 3.68 - 3.63 (m, 2H), 3.55 - 3.53 (m, 2H), 3.28 - 3.26 (m, 2H), 2.38 - 2.27 (m, 2H).
실시예 30
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((3-모르폴리노프로필) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00047
단계 1
3-모르폴리노프로필 4-메틸벤젠술포네이트
화합물 3-모르폴리노프로판-1-올 30a (500 mg, 3.45 mmol)를 디클로로메탄 (100 ml) 중에 용해시킨 다음, 4-디메틸아미노피리딘 (42 mg, 0.34 mmol), 트리에틸아민 (1.04 g, 10.3 mmol) 및 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (988 mg, 5.17 mmol)를 첨가하고, 밤새 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응 용액을 물 (50 mL)에 부은 다음, 디클로로메탄 (50 mL Х 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 2/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 3-모르폴리노프로필 4-메틸벤젠술포네이트 30b (660 mg, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 64%였다.
MS m/z (ESI): 300[M+1]
실시예 25의 절차를 참조하여, 그러나 제1 단계에서 3-모르폴리노프로필 4-메틸벤젠술포네이트를 사용하여 2-브로모프로판을 대체하여 실시예 30을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 537[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.23 (brs, 1H), 7.12 (brs, 1H), 6.94 (brs, 1H), 6.69 (s, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.49 - 6.40 (m, 2H), 5.92 (brs, 1H), 5.74 - 5.70 (m, 1H), 5.03 - 4.96 (m, 1H), 4.09 - 3.90 (m, 3H), 3.80 - 3.68 (m, 11H), 3.28 (brs, 2H), 2.89 (brs, 6H), 2.69 - 2.33 (m, 2H), 1.93 (brs, 2H).
실시예 31
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-모르폴리노에틸) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00048
실시예 25의 절차를 참조하여, 그러나 제1 단계에서 2-브로모프로판을 4-(2-클로로에틸)모르폴린에 의해 대체하여 실시예 31을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 523[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14 (s, 1H), 6.95 (brs, 1H), 6.69 (s, 2H), 6.63 (brs, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.49 - 6.39 (m, 2H), 6.14 (brs, 1H), 5.75 - 5.70 (m, 1H), 5.06 - 4.98 (m, 1H), 4.11 - 3.85 (m, 3H), 3.80 - 3.72 (m, 11H), 3.37 - 3.33 (m, 2H), 2.80 - 2.73 (m, 2H), 2.65 (brs, 4H), 2.45 - 2.32 (m, 2H).
실시예 32
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-(피롤리딘-1-일)에틸) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00049
단계 1
2-브로모에틸 4-메틸벤젠술포네이트
화합물 2-브로모에탄올 32a (500 mg, 4.0 mmol), 4-디메틸아미노피리딘 (246 mg, 2.02 mmol) 및 트리에틸아민 (1.22 g, 12.1 mmol)을 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각하고, 후속으로 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (1.15 g, 6.05 mmol)를 나누어 첨가하고, 첨가가 완료된 후, 밤새 실온에서 교반하고, 반응이 완결된 후, 반응물을 물 (50 mL)에 붓고, 디클로로메탄 (50 mL Х 3)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 2-브로모에틸 4-메틸벤젠술포네이트 32b (600 mg, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 53%였다.
MS m/z (ESI): 277[M+1]
단계 2
(S)-3-(5-((2-브로모에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-아미노-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 7d (400 mg, 0.92 mmol), 2-브로모에틸 4-메틸벤젠술포네이트 (380 mg, 1.37 mmol), 세슘 카보네이트 (600 mg, 1.84 mmol) 및 아세토니트릴 (10 mL)의 혼합물을 70℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하고, 반응 용액을 물 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (50 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 정제를 위한 칼럼에 의해 잔류물을 신속하게 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(5-((2-브로모에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 32c (240 mg, 갈색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 48%였다.
MS m/z (ESI): 408[M+1-56-80]
단계 3
(S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-(피롤리딘-1-일)에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르
(S)-3-(5-((2-브로모에틸)아미노)-4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 32c (240 mg, 0.44 mmol), 피롤리딘 (47 mg, 0.66 mmol), 세슘 카보네이트 (288 mg, 0.88 mmol) 및 아세토니트릴 (5 mL)의 혼합물을 70℃로 가열하고, 1.5시간 동안 교반하고, 반응 용액을 물 (30 mL)에 부은 다음, 에틸 아세테이트 (30 mLХ3)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/메탄올 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-3-(4-시아노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((2-(피롤리딘-1-일)에틸)아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 32d (200 mg, 황색 오일성 물질)를 수득하였고, 수율은 85%였다.
MS m/z (ESI): 479[M+1-56]
실시예 24에서 수행된 제2 내지 제4 단계의 작업 단계를 참조하여 실시예 32를 합성하였다.
MS m/z (ESI): 507[M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 6.99 (brs, 1H), 6.69 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.47 - 6.36 (m, 2H), 5.72 - 5.67 m, 2H), 5.16 - 5.08 (m, 1H), 4.12 - 3.86 (m, 3H), 3.80 - 3.62 (m, 9H), 3.33 - 3.29 (m, 6H), 2.62 - 2.34 (m, 2H), 2.07 (brs, 4H).
실시예 33
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((테트라히드로-2H-피란-4-일) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00050
단계 1
4-아이오도테트라히드로-2H-피란
4-히드록시테트라히드로-2H-피란 33a (2.04 g, 20 mmol), 트리페닐포스핀 (6.81 g, 26 mmol) 및 이미다졸 (2.04 g, 30 mmol)을 디클로로메탄 (100 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각한 다음, 아이오딘 (6.09 g, 24 mmol)을 첨가하고, 14시간 동안 45℃에서 교반하고, 반응물을 물로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트 (50 mLХ2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 4-아이오도테트라히드로-2H-피란 33b (2.12 g, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 50%였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 4.62 (dt, J = 13.9, 4.5 Hz, 1H), 3.68 - 3.64 (m, 2H), 3.47 - 3.42 (m, 2H), 2.13 - 1.97 (m, 4H).
실시예 24의 절차에 따라, 그러나 제1 단계에서 4-아이오도테트라히드로-2H-피란을 사용하여 에틸 아이오다이드를 대체하여 실시예 33을 합성하였다.
MS m/z (ESI): 494[M+H]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.74 (t, J = 2.2 Hz, 2H), 6.71 - 6.62 (m, 1H), 6.60 - 6.58(m, 1H), 6.36 - 6.30 (m, 1H), 5.82 - 5.77 (m, 1H), 5.18 - 5.12 (m, 1H), 4.04 - 3.94 (m, 6H), 3.81 (s, 6H), 3.52 - 3.46 (m, 3H), 2.55 - 2.39 (m, 2H), 1.94 - 1.92 (m, 2H), 1.60 - 1.55 (m, 2H).
실시예 34
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((1-메틸피페리딘-4-일) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
Figure pct00051
단계 1
4-아이오도-1-메틸피페리딘
4-히드록시-1-메틸피페리딘 34a (2.3 g, 20 mmol), 트리페닐포스핀 (6.81 g, 26 mmol), 이미다졸 (2.04 g, 30 mmol) 및 디클로로메탄 (100 mL)을 혼합하고, 0℃로 냉각한 다음, 아이오딘 (6.09 g, 24 mmol)을 첨가하고, 18시간 동안 교반을 지속하고, 반응이 종료된 후, 이를 물로 켄칭한 다음, 디클로로메탄 (50 mL x 2)으로 추출하고, 유기상을 합하고, 무수 소듐 술페이트 상에서 건조시키고, 여과에 의해 건조제를 제거하고, 반응 시스템을 감압 하에 농축하고, 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (디클로로메탄/ 메탄올 = 10/1)에 의해 정제하여, 표제 생성물 4-아이오도-1-메틸피페리딘 34b (2.25 g, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 50%였다.
MS m/z (ESI): 226[M+H]
단계 2
(S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((1-메틸피페리딘-4-일) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드
화합물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-5-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸-4-카복사미드 7 (210 mg, 0.5 mmol), 4-아이오도-1-메틸피페리딘 34b (450 mg, 2 mmol), 포타슘 카보네이트 (207 mg, 1.5 mmol) 및 아세토니트릴 (10 mL)을 혼합하고, 13시간 동안 90℃에서 가열 및 교반하고, 용매를 감압 하에 반응 혼합물로부터 제거한 다음, 반응 혼합물을 물 중에 용해시키고, 이어서 에틸 아세테이트 (50 mL x 2)로 추출하고, 유기상을 합하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 역상 정제용 액체 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 생성물 (S)-1-(1-아크릴로일피롤리딘-3-일)-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-5-((1-메틸피페리딘-4-일) 아미노)-1H-피라졸-4-카복사미드 34 (8.1 mg, 백색 고체)를 수득하였고, 수율은 3.2%였다.
MS m/z (ESI): 507[M+H]
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.77 (s, 2H), 6.68-6.65 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.34 - 6.30 (m, 1H), 5.81 - 5.78 (m, 1H), 5.69 - 5.67 (m, 1H), 5.03 - 5.00 (m, 1H), 4.98 - 5.95(m, 1H), 4.92 - 4.90 (m, 1H), 4.36 (s, 2H), 4.12 - 4.07 (m, 1H), 4.00 - 3.98 (m, 1H), 3.93 - 3.90 (m, 1H), 3.86 - 3.84 (m, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.72 - 3.68 (m, 1H), 2.53 - 2.47 (m, 3H), 2.40 - 2.38 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.27 - 2.21 (m, 1H).
생물학적 실험
FGFR 활성 억제 시험
FGFR의 시험관내(in vitro) 활성에 대한 본 발명의 화합물의 효과를 HTRF 키나아제 분석 키트를 사용하여 키나아제 반응에서의 기질의 인산화 수준을 측정함으로써 평가하였다 (표 1).
FGFR1 활성 억제 시험
실험적인 방법은 하기와 같이 요약된다:
반응 완충액은 하기 성분들을 함유한다: 5배 희석된 효소 완충액/키나아제 5X (Cisbio, 카탈로그 번호 62EZBFDD) (이의 주요 성분은 50 mM HEPES, pH 7.0임), 5 mM의 MgCl2 및 1 mM의 DTT; 인간 재조합 FGFR1 촉매 도메인 단백질 (아미노산 308-731) (이는 회사에 의해 정제됨), 반응 완충액에 의해 희석된, 0.6 ng/μL의 키나아제 용액; 반응 완충액에 의해 희석된 400 nM의 비오틴화 티로신 키나아제 기질 (Cisbio, 카탈로그 번호 62TK0PEC) 및 40 μM의 ATP를 함유하는 기질 반응 용액; 시험 완충액 (Cisbio, 카탈로그 번호 62SDBRDF)에 의해 희석된 0.125 ng/μL의 Eu3+ 표지된 케이지(cage) 항체 (Cisbio, 카탈로그 번호 61T66KLB) 및 25 nM의 스트렙트아비딘-표지된 XL665 (Cisbio, 카탈로그 번호 610SAXLB)를 함유하는 시험 용액.
화합물을 DMSO 중 1 mM로 희석한 다음, DMSO를 사용하여 0.061 μM의 최소 농도로 4배 연속으로 희석하고, 각각의 농도를 반응 완충액을 사용하여 40배 추가 희석하였다. 화합물의 IC50 값이 매우 낮은 경우, 화합물의 초기 농도는 낮춰질 수 있다.
4 μL의 화합물 용액 및 2 μL의 FGFR1 키나아제 용액을 384-웰 분석 플레이트 (Thermo, 카탈로그 번호 264706)에 첨가하고, 충분히 혼합하고, 실온에서 15분 동안 인큐베이션한 다음; 4 μL의 기질 반응 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 60분 동안 인큐베이션한 다음; 10 μL의 동일한 부피의 시험 용액을 첨가함으로써 반응을 종결시키고, 혼합물을 균일하게 혼합하고, 실온에서 정치되도록 하였다. 60분 후, 인산화된 생성물이 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (공여체) 및 스트렙트아비딘-표지된 XL665 항체 (수용체)에 의해 동시에 인식되었고, 레이저 여기 후, 서로에게 근접한 공여체 및 수용체 사이에 에너지 공명 전달이 발생하고, 공여체 (620 nm)로부터 수용체 (665 nm)로 에너지가 전달되었고, 이는 마이크로플레이트 판독기 EnVision (Perkin Elmer)에 의해 검출될 수 있었다. 665/620의 비는 기질의 인산화 정도와 양의(positively) 상관관계를 가지며, 따라서 FGFR1 키나아제의 활성이 검출되었다.
본 실험에서, 효소가 없는 그룹은 100% 억제 그룹이었고, 효소를 갖지만 화합물이 없는 그룹은 0% 억제 그룹이었다. 따라서, 화합물에 의한, FGFR1 활성에 대한 억제 백분율은 하기 식을 사용하여 계산되었다:
억제 백분율 = 100-100* (비(ratio)화합물 - 비100% 억제) / (비0% 억제 - 비100% 억제)
XLfit 소프트웨어 (엑셀(Excel))를 사용하여 하기 식에 의해 10개 농도 포인트로부터 화합물의 IC50 값을 계산하였다:
Y = Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((logIC50-X)*경사도 인자))
여기서, Y는 억제 백분율이고, Bottom은 S형 곡선의 하단(bottom platform) 값이고, Top은 S형 곡선의 상단(top platform) 값이고, X는 시험되는 화합물의 농도의 로그이고, 경사도 인자는 곡선의 경사 계수이다.
FGFR2 활성 억제 시험
실험적인 방법은 하기와 같이 요약된다:
반응 완충액은 하기 성분들을 함유한다: 5배 희석된 효소 완충액/키나아제 5X (Cisbio, 카탈로그 번호 62EZBFDD) (이의 주요 성분은 50 mM HEPES, pH 7.0임), 5 mM의 MgCl2 및 1 mM의 DTT; 인간 재조합 FGFR2 촉매 도메인 단백질 (아미노산 400-821) (이는 Yiqiao Shenzhou Biotech Co., Ltd.로부터 구입함), 반응 완충액에 의해 희석된 0.45 ng/μL의 키나아제 용액; 반응 완충액에 의해 희석된 800 nM의 비오틴화 티로신 키나아제 기질 (Cisbio, 카탈로그 번호 62TK0PEC) 및 50 μM의 ATP를 함유하는 기질 반응 용액; 시험 완충액 (Cisbio, 카탈로그 번호 62SDBRDF)에 의해 희석된 0.125 ng/μL의 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (Cisbio, 카탈로그 번호 61T66KLB) 및 50 nM의 스트렙트아비딘-표지된 XL665 (Cisbio, 카탈로그 번호 610SAXLB)를 함유하는 시험 용액.
화합물을 DMSO 중 1 mM로 희석한 다음, DMSO를 사용하여 0.061 μM의 최소 농도로 4배 연속으로 희석하고, 각각의 농도를 반응 완충액을 사용하여 40배 추가 희석하였다. 화합물의 IC50 값이 매우 낮은 경우, 화합물의 초기 농도는 낮춰질 수 있다.
4 μL의 화합물 용액 및 2 μL의 FGFR2 키나아제 용액을 384-웰 분석 플레이트 (Thermo, 카탈로그 번호 264706)에 첨가하고, 충분히 혼합하고, 실온에서 15분 동안 인큐베이션한 다음; 4 μL의 기질 반응 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 60분 동안 인큐베이션한 다음; 10 μL의 동일한 부피의 시험 용액을 첨가함으로써 반응을 종결시키고, 혼합물을 균일하게 혼합하고, 실온에서 정치되도록 하였다. 60분 후, 인산화된 생성물이 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (공여체) 및 스트렙트아비딘-표지된 XL665 항체 (수용체)에 의해 동시에 인식되었고, 레이저 여기 후, 서로에 근접한 공여체 및 수용체 사이에 에너지 공명 전달이 발생하고, 공여체 (620 nm)로부터 수용체 (665 nm)로 에너지가 전달되었고, 이는 마이크로플레이트 판독기 EnVision (Perkin Elmer)에 의해 검출될 수 있었다. 665/620의 비는 기질의 인산화 정도와 양의 상관관계를 갖고, 따라서 FGFR2 키나아제의 활성이 검출되었다.
본 실험에서, 효소가 없는 그룹은 100% 억제 그룹이었고, 효소를 갖지만 화합물이 없는 그룹은 0% 억제 그룹이었다. 따라서, 화합물에 의한, FGFR2 활성에 대한 억제 백분율은 하기 식을 사용하여 계산되었다:
억제 백분율 = 100-100* (비화합물 - 비100% 억제) / (비0% 억제 - 비100% 억제)
XLfit 소프트웨어 (엑셀)를 사용하여 하기 식에 의해 10개 농도 포인트로부터 화합물의 IC50 값을 계산하였다:
Y = Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((logIC50-X)*경사도 인자))
여기서, Y는 억제 백분율이고, Bottom은 S형 곡선의 하단 값이고, Top은 S형 곡선의 상단 값이고, X는 시험되는 화합물의 농도의 로그이고, 경사도 인자는 곡선의 경사 계수이다.
FGFR3 활성 억제 시험
실험적인 방법은 하기와 같이 요약된다:
반응 완충액은 하기 성분들을 함유한다: 5배 희석된 효소 완충액/키나아제 5X (Cisbio, 카탈로그 번호 62EZBFDD) (이의 주요 성분은 50 mM HEPES, pH 7.0임), 5 Mm의 MgCl2 및 1 mM의 DTT; 인간 재조합 FGFR3 촉매 도메인 단백질 (아미노산 399-806) (이는 Yiqiao Shenzhou Biotech Co., Ltd.로부터 구입함), 반응 완충액에 의해 희석된 0.3 ng/μL의 키나아제 용액; 반응 완충액에 의해 희석된 1000 nM의 비오틴화 티로신 키나아제 기질 (Cisbio, 카탈로그 번호 62TK0PEC) 및 90 μM의 ATP를 함유하는 기질 반응 용액; 시험 완충액 (Cisbio, 카탈로그 번호 62SDBRDF)에 의해 희석된 0.125 ng/μL의 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (Cisbio, 카탈로그 번호 61T66KLB) 및 62.5 nM의 스트렙트아비딘-표지된 XL665 (Cisbio, 카탈로그 번호 610SAXLB)를 함유하는 시험 용액.
화합물을 DMSO 중 1 mM로 희석한 다음, DMSO를 사용하여 0.061 μM의 최소 농도로 4배 연속으로 희석하고, 각각의 농도를 반응 완충액을 사용하여 40배 추가 희석하였다. 화합물의 IC50 값이 매우 낮은 경우, 화합물의 초기 농도는 낮춰질 수 있다.
4 μL의 화합물 용액 및 2 μL의 FGFR3 키나아제 용액을 384-웰 분석 플레이트 (Thermo, 카탈로그 번호 264706)에 첨가하고, 충분히 혼합하고, 실온에서 15분 동안 인큐베이션한 다음; 4 μL의 기질 반응 용액을 첨가하고, 실온에서 60분 동안 반응 혼합물을 인큐베이션한 다음; 10 μL의 동일한 부피의 시험 용액을 첨가함으로써 반응을 종결시키고, 혼합물을 균일하게 혼합하고, 실온에서 정치되도록 하였다. 60분 후, 인산화된 생성물이 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (공여체) 및 스트렙트아비딘-표지된 XL665 항체 (수용체)에 의해 동시에 인식되었고, 레이저 여기 후, 서로 근접한 공여체 및 수용체 사이에 에너지 공명 전달이 발생하고, 공여체 (620 nm)로부터 수용체 (665 nm)로 에너지가 전달되었고, 이는 마이크로플레이트 판독기 EnVision (Perkin Elmer)에 의해 검출되었다. 665/620의 비는 기질의 인산화 정도와 양의 상관관계를 갖고, 따라서 FGFR3 키나아제의 활성이 검출되었다.
본 실험에서, 효소가 없는 그룹은 100% 억제 그룹이었고, 효소를 갖지만 화합물이 없는 그룹은 0% 억제 그룹이었다. 화합물에 의한, FGFR3 활성에 대한 억제 백분율은 하기 식을 사용하여 계산되었다:
억제 백분율 = 100-100* (비화합물 - 비100% 억제) / (비0% 억제 - 비100% 억제)
XLfit 소프트웨어 (엑셀)를 사용하여 하기 식에 의해 10개 농도 포인트로부터 화합물의 IC50 값을 계산하였다:
Y = Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((logIC50-X)*경사도 인자))
여기서, Y는 억제 백분율이고, Bottom은 S형 곡선의 하단 값이고, Top은 S형 곡선의 상단 값이고, X는 시험되는 화합물의 농도의 로그이고, 경사도 인자는 곡선의 경사 계수이다.
FGFR4 활성 억제 시험
실험적인 방법은 하기와 같이 요약된다:
반응 완충액은 하기 성분들을 함유한다: 5배 희석된 효소 완충액/키나아제 5X (Cisbio, 카탈로그 번호 62EZBFDD) (이의 주요 성분은 50 mM HEPES, pH 7.0임), 5 Mm의 MgCl2 및 1 mM의 DTT; 인간 재조합 FGFR4 촉매 도메인 단백질 (아미노산 460-802) (이는 Tsinghua University Protein Research Technology Center로부터 구입함), 반응 완충액에 의해 희석된 0.5 ng/μL의 키나아제 용액; 반응 완충액에 의해 희석된 500 nM의 비오틴화 티로신 키나아제 기질 (Cisbio, 카탈로그 번호 62TK0PEC) 및 90 μM의 ATP를 함유하는 기질 반응 용액; 시험 완충액 (Cisbio, 카탈로그 번호 62SDBRDF)에 의해 희석된 0.125 ng/μL의 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (Cisbio, 카탈로그 번호 61T66KLB) 및 31.25 nM의 스트렙트아비딘-표지된 XL665 (Cisbio, 카탈로그 번호 610SAXLB)를 함유하는 시험 용액.
화합물을 DMSO 중 1 mM로 희석한 다음, DMSO를 사용하여 0.061 μM의 최소 농도로 4배 연속으로 희석하고, 각각의 농도를 반응 완충액을 사용하여 40배 추가 희석하였다. 화합물의 IC50 값이 매우 낮은 경우, 화합물의 초기 농도는 낮춰질 수 있다.
4 μL의 화합물 용액 및 2 μL의 FGFR4 키나아제 용액을 384-웰 분석 플레이트 (Thermo, 카탈로그 번호 264706)에 첨가하고, 충분히 혼합하고, 실온에서 15분 동안 인큐베이션한 다음; 4 μL의 기질 반응 용액을 첨가하고, 실온에서 60분 동안 반응 혼합물을 인큐베이션한 다음; 10 μL의 동일한 부피의 시험 용액을 첨가함으로써 반응을 종결시키고, 혼합물을 균일하게 혼합하고, 실온에서 정치되도록 하였다. 60분 후, 인산화된 생성물이 Eu3+ 표지된 케이지 항체 (공여체) 및 스트렙트아비딘-표지된 XL665 항체 (수용체)에 의해 동시에 인식되었고, 레이저 여기 후, 서로 근접한 공여체 및 수용체 사이에 에너지 공명 전달이 발생하고, 공여체 (620 nm)로부터 수용체 (665 nm)로 에너지가 전달되었고, 이는 마이크로플레이트 판독기 EnVision (Perkin Elmer)에 의해 검출될 수 있었다. 665/620의 비는 기질의 인산환 정도와 양의 상관관계를 갖고, 따라서 FGFR4 키나아제의 활성이 검출되었다.
본 실험에서, 효소가 없는 그룹은 100% 억제 그룹이었고, 효소를 갖지만 화합물이 없는 그룹은 0% 억제 그룹이었다. 따라서, 화합물에 의한, FGFR4 활성에 대한 억제 백분율은 하기 식을 사용하여 계산되었다:
억제 백분율 = 100-100* (비화합물 - 비100% 억제) / (비0% 억제 - 비100% 억제)
XLfit 소프트웨어 (엑셀)를 사용하여 하기 식에 의해 10개 농도 포인트로부터 화합물의 IC50 값을 계산하였다:
Y = Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((logIC50-X)*경사도 인자))
여기서, Y는 억제 백분율이고, Bottom은 S형 곡선의 하단 값이고, Top은 S형 곡선의 상단 값이고, X는 시험되는 화합물의 농도의 로그이고, 경사도 인자는 곡선의 경사 계수이다.

화합물 번호		 IC50
FGFR1 FGFR2 FGFR3 FGFR4
1 B B B B
3 C B B B
7 A A A A
8 C B B C
9 C B C C
10 B A A B
11 B B B B
12 C A A B
13 B A A B
14 A A A A
15 C B B B
16 B B A B
17 A A A A
18 B A B B
19 A A A A
20 A A A A
21 A A A A
22 A A A A
23 B A A B
25 B B B B
26 A A A A
27 B A B B
28 B B A B
29 B A A B
30 B A A B
31 B A A B
32 C B B C
33 B C C B
34 B A A B
A<10 nM; 10 nM ≤ B < 100 nM; 100 nM ≤ C < 1000 nM
본 발명의 실시예에서의 화합물은 FGFR의 활성에 대한 유의미한 억제 효과를 가지며, 바람직하게는 100 내지 1000 nM의 IC50, 더욱 바람직하게는 100 nM 미만의 IC50, 가장 바람직하게는 10 nM 미만의 IC50을 갖는다.
Hep3B 세포의 증식에 대한 억제의 결정
Hep3B 간세포암 세포주의 세포 증식에 대한 본 발명의 화합물의 효과를 발광 세포 생존능 분석을 사용하여 평가하였다 (표 2).
실험적인 방법은 하기와 같이 요약된다:
CellTiter-Glo 시약 (Promega, 카탈로그 번호 G7572)은 CTG 동결건조 분말 및 CTG 완충액으로 이루어진다. 사용 전에, 동결건조 분말은 완충액 중에 용해될 필요가 있다.
화합물을 DMSO (Sigma, 카탈로그 번호 D5879)를 사용하여 5 Mm로 희석한 다음, DMSO를 사용하여 0.31 μM의 최소 농도로 4배 연속으로 희석하고, 각각의 농도 포인트를 FBS 무함유 DMEM 배지 (ThermoFisher, 카탈로그 번호 11995073)를 사용하여 50배 추가 희석하였다. 화합물 IC50 값이 매우 낮은 경우, 화합물의 초기 농도는 낮춰질 수 있다.
Hep3B 세포 (Cell Resource Center of Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences로부터 입수함)를 10% FBS (GBICO, 카탈로그 번호 10099-141) 및 100 U/mL의 스트렙토마이신 (ThermoFisher, 카탈로그 번호 15140122)의 혼합물 용액을 함유하는 DMEM 완전 배양 배지 중에 배양하였다. 세포가 배양 용기에서 80 내지 90%의 배양률(confluency)에 도달했을 때, 세포를 0.25% 트립신 (EDTA를 함유함) (ThermoFisher, 카탈로그 번호 25200056)으로 소화시키고, 분산시킨 다음, 백색 384-웰 배양 플레이트 (ThermoFisher, 카탈로그 번호 164610) 상에 플레이팅하였고 (각각의 웰은 약 1000개의 세포 (27 μL의 DMEM 완전 배양 배지)를 함유함), 이어서 384-웰 플레이트를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 밤새 (18 내지 20시간) 인큐베이션하였다.
밤새 인큐베이션한 후, 3 μL의 DMEM 희석된 화합물을 각각의 웰에 첨가한 다음, 이를 온화하게 원심분리하여 충분히 혼합하고, 이어서 384-웰 플레이트를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에 두어 배양을 지속하고, 72시간 후, 플레이트를 꺼내고, 30분 동안 실온에서 정치되도록 하고, 후속으로 웰당 15 μL의 CTG 시약을 첨가하고, 이를 실온까지 가온시키고, 플레이트를 3분 동안 진탕기 상에서 온화하게 진탕시켜 충분한 세포 용해를 보장하고, 10분 동안 정치되도록 하여, 발광 신호를 안정화시킨 다음, EnVision (Perkin Elmer)을 사용하여 발광 신호를 판독하였다.
10 μM의 Blueprint를 갖는 BLU9931 (Cancer Discovery 2015, 5, 424) 그룹의 발광 신호를 신호100% 억제로서 사용하고, 0.2% DMSO 그룹의 발광 신호를 신호0% 억제로서 사용하였다.
화합물에 의한, Hep3B 세포 증식에 대한 억제 백분율은 하기 식에 의해 계산될 수 있었다:
억제 백분율 = 100-100* (신호화합물 - 신호100% 억제) / (신호0% 억제 - 신호100% 억제)
XLfit (ID Business Soluions Ltd., UK) 소프트웨어를 사용하여 하기 식에 의해 8개 농도 포인트로부터 화합물 IC50 값을 계산하였다:
Y = Bottom + (Top- Bottom)/(1+10^((logIC50-X)*경사도 인자))
여기서, Y는 억제 백분율이고, Bottom은 S형 곡선의 하단 값이고, Top은 S형 곡선의 상단 값이고, X는 시험되는 화합물의 농도의 로그이고, 경사도 인자는 곡선의 경사 계수이다.
RT4 세포의 증식에 대한 억제의 결정
RT4 방광암 세포주의 세포 증식에 대한 본 발명의 화합물의 효과를 발광 세포 생존능 분석을 사용하여 평가하였다 (표 2).
실험적인 방법에 대해, Hep3B 세포의 증식에 대한 억제의 결정 방법을 참조한다. RT4 세포는 Cell Resource Center of the Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences로부터 입수하였고, 양성 대조군은 Taiho 특허 출원 WO2015008844A1의 실시예 1에 개시된 ((S)-1-(3-(4-아미노-3-((3,5-디메톡시페닐)에티닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)피롤리딘-1-일)프로프-2-엔-1-온)이었다.
SNU-16 세포의 증식에 대한 억제의 결정
SNU-16 위암 세포주의 세포 증식에 대한 본 발명의 화합물의 효과를 발광 세포 생존능 분석을 사용하여 평가하였다 (표 2).
실험적인 방법에 대해, Hep3B 세포의 증식에 대한 억제의 결정 방법을 참조한다. SNU-16 세포는 ATCC로부터의 HB-8064이고, 양성 대조군은 Novartis로부터의 BJG398이었다.
화합물 번호 IC50
Hep3B RT4 SNU-16
1 B B B
7 A A A
10 B B A
12 C C N.D.
17 A A A
18 N.D. B A
19 N.D. N.D. B
20 N.D. N.D. B
21 A A A
22 A A A
23 A B A
26 B A A
28 N.D. A A
29 A A A
30 B A A
31 B A A
34 B A A
주목: A<10nM; 10 nM ≤ B < 100 nM; 100 nM ≤ C < 1000Nm
N.D.: 검출되지 않음
본 발명의 실시예에서의 화합물은 각각 Hep3B, RT4 및 SNU-16의 세포 증식에 대한 유의미한 억제 효과를 가지며, 바람직하게는 100 내지 1000 nM의 IC50, 더욱 바람직하게는 100 nM 미만의 IC50를 갖는다.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 (I)에 나타내어진 바와 같은 화합물 또는 이의 전구약물(prodrug), 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물:
    Figure pct00052

    상기 식에서,
    A는 N 또는 CR2이고;
    고리 B는 벤젠 고리 또는 5-6원 헤테로아릴 고리이며, 상기 벤젠 고리 및 상기 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 G1에 의해 선택적으로(optionally) 치환되고;
    R1은 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬 또는 -NHR3으로부터 선택되고;
    R2는 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬로부터 선택되며, 상기 알킬은 할로겐, 시아노, 히드록시 또는 -OC1-6 알킬에 의해 선택적으로 치환되고;
    R3은 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 할로겐, 시아니드, -OR4, -NR5R6, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴에 의해 선택적으로 치환되고;
    X는 부재하거나 또는 C1-6 알킬렌이고;
    Y는 부재하거나 또는 C3-8 시클로알킬렌, 3-8원 헤테로시클릴렌, 아릴렌 또는 헤테로아릴렌으로부터 선택되며, 상기 시클로알킬렌, 헤테로시클릴렌, 아릴렌 및 헤테로아릴렌은 하나 이상의 G2에 의해 선택적으로 치환되고;
    Z는 독립적으로 시아노, -NR7CN,
    Figure pct00053
    로부터 선택되고;
    결합 a는 이중 결합 또는 삼중 결합이고;
    상기 결합 a가 이중 결합인 경우, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G3에 의해 선택적으로 치환되고;
    Ra 및 Rb, 또는 Rb 및 Rc는 선택적으로, 이들이 연결되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로 원자를 함유하는 선택적인(optional) 3-6원 고리를 형성하고;
    상기 결합 a가 삼중 결합인 경우, Ra 및 Rc는 부재하고, Rb는 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G4에 의해 선택적으로 치환되고;
    R7은 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 하나 이상의 G5에 의해 선택적으로 치환되고;
    G1, G2, G3, G4 및 G5는 각각 독립적으로 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, C6-10 아릴, 5-10원 헤테로아릴, -OR8, -OC(O)NR8R9, -C(O)OR8, -C(O)NR8R9, -C(O)R8, -NR8R9, -NR8C(O)R9, -NR8C(O)NR9R10, -S(O)mR8 및 -NR8S(O)mR9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11, -OC(O)NR11R12, -C(O)OR11, -C(O)NR11R12, -C(O)R11, -NR11R12, -NR11C(O)R12,- NR11C(O)NR12R13, -S(O)mR11 및 -NR11S(O)mR12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
    R4, R5, R6, R8, R9, R10, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 모노시클릭 헤테로시클릴, 모노시클릭 헤테로아릴 및 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    m은 1 또는 2이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 A가 N 또는 CH이고, 바람직하게는 N인 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 고리 B가 벤젠 고리인 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 하기 화학식 (II)에 나타내어진 바와 같은 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물:
    Figure pct00054

    상기 식에서,
    Ga, Gb, Gc 및 Gd는 각각 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR8, -NR8R9 및 -C(O)NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11 및 -NR11R12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고, Ga, Gb, Gc 및 Gd는 각각 독립적으로 바람직하게는 -OC1-2 알킬 또는 할로겐이고;
    A, R1, R8, R9, R11, R12, X, Y, Z는 제1항에 정의된 바와 같다.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 하기 화학식 (III)에 나타내어진 바와 같은 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물:
    Figure pct00055

    상기 식에서,
    Ga 및 Gb는 각각 독립적으로 H, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR8, -NR8R9 및 -C(O)NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, -OR11 및 -NR11R12로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고, Ga 및 Gb는 각각 독립적으로 바람직하게는 -OC1-2 알킬이고;
    A, R1, R8, R9, R11, R12, X, Y, Z는 제1항에 정의된 바와 같다.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 독립적으로 H, -NH2 및 -NHR3으로부터 선택되고;
    R3이 독립적으로 C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 할로겐, 시아노, -OR4, -NR5R6, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 또는 3-6원 헤테로시클릴에 의해 치환된, 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 독립적으로 H, -NH2 및 -NHC1-6 알킬로부터 선택된, 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    X가 부재하거나 또는 C1-6 알킬렌이고;
    Y가 부재하거나 또는 C3-8 시클로알킬렌 또는 3-8원 헤테로시클릴렌이고,
    Z가 독립적으로 시아노, -NR7CN,
    Figure pct00056
    로부터 선택되고;
    결합 a가 이중 결합 또는 삼중 결합이고;
    상기 결합 a가 이중 결합인 경우, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬, 3-6원 헤테로시클릴, -OR8 및 -NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
    상기 결합 a가 삼중 결합인 경우, Ra 및 Rc는 부재하고, Rb는 독립적으로 H, 시아노, 할로겐, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 및 3-6원 헤테로시클릴로부터 선택되며, 상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은, 할로겐, 시아노, C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬, 3-6원 헤테로시클릴, -OR8 및 -NR8R9로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환되고;
    R4, R8 및 R9는 각각 독립적으로 H 및 C1-6 알킬로부터 선택된, 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물.
  9. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 하기로부터 선택된 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 혼합물:
    Figure pct00057

    Figure pct00058
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 및 제약학적으로 허용가능한 담체 및 부형제를 포함하는 제약학적 조성물.
  11. FGFR-연관 질환, 바람직하게는 종양 (예를 들어, 비소세포 폐암, 식도암, 흑색종, 횡문근육종, 신세포암종, 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 위암, 대장암, 방광암, 췌장암, 폐암, 유방암, 전립선암 및 간암, 더욱 바람직하게는 간암, 위암, 비소세포 폐암 및 방광암)의 치료 및/또는 예방을 위한 의약의 제조에서의, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 또는 제10항에 따른 제약학적 조성물의 용도.
  12. 의약으로서의, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물, 또는 제10항에 따른 제약학적 조성물의 용도.
  13. 치료 유효량의 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 전구약물, 이의 안정한 동위원소 유도체, 이의 제약학적으로 허용가능한 염, 이의 이성질체 또는 이의 혼합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, FGFR-연관 질환의 치료 방법.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3894403A1 (en) * 2018-12-13 2021-10-20 Intervet International B.V. Process for preparing 1-[(3r,4s)-4-cyanotetrahydropyran-3-yl]-3-[(2-fluoro-6-methoxy-4-pyridyl)amino]p yrazole-4-carboxamide
EP3898615A1 (en) 2018-12-19 2021-10-27 Array Biopharma, Inc. 7-((3,5-dimethoxyphenyl)amino)quinoxaline derivatives as fgfr inhibitors for treating cancer
AU2020242287A1 (en) 2019-03-21 2021-09-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A Dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
WO2021089791A1 (en) 2019-11-08 2021-05-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of cancers that have acquired resistance to kinase inhibitors
JP2023509399A (ja) * 2019-12-26 2023-03-08 ベイジン・イノケア・ファーマ・テク・カンパニー・リミテッド （ｓ）－１－（１－アクリロイルピロリジン－３－イル）－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－５－（メチルアミノ）－１ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミドの結晶形
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
CA3181162A1 (en) * 2020-06-05 2021-12-09 Stephen W. Kaldor Inhibitors of fibroblast growth factor receptor kinases
WO2021247971A1 (en) * 2020-06-05 2021-12-09 Kinnate Biopharma Inc. Inhibitors of fibroblast growth factor receptor kinases
MX2023008186A (es) * 2021-01-12 2023-07-18 Beijing Innocare Pharma Tech Co Ltd Proceso para preparar (s)-1-(1-acriloilpirrolidin-3-il)-3-((3,5-di metoxifenil)etinil)-5-(metilamino)-1h-pirazol-4-carboxamida.
CN114853739B (zh) * 2021-02-03 2023-09-22 药雅科技(上海)有限公司 一种炔代吡嗪类fgfr抑制剂及其制备方法和用途
CN115433190A (zh) * 2021-06-02 2022-12-06 药雅科技(上海)有限公司 不可逆杂环化合物fgfr抑制剂的制备方法和用途
CN115043832B (zh) * 2021-03-08 2023-08-22 药雅科技(上海)有限公司 一种fgfr抑制剂炔代杂环类化合物及其制备方法和用途
CA3235435A1 (en) * 2021-11-03 2023-05-11 Xiangyang Chen Amorphous solid dispersion comprising (s)-1-(1-acryloylpyrrolidin-3-yl)-3-((3,5-dimethoxyphenyl) ethynyl)-5-(methylamino)-1h-pyrazole-4-carboxamide
WO2023088105A1 (en) * 2021-11-16 2023-05-25 Beijing Innocare Pharma Tech Co., Ltd. Method for treating head and neck cancer
TW202333686A (zh) * 2021-12-08 2023-09-01 美商奇奈特生物製藥公司 以fgfr激酶抑制劑治療癌症
WO2023107870A1 (en) * 2021-12-08 2023-06-15 Kinnate Biopharma Inc. Inhibitors of fibroblast growth factor receptor kinases
TW202332432A (zh) * 2021-12-08 2023-08-16 美商奇奈特生物製藥公司 Egfr抑制劑的固態形式

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2833948B1 (fr) * 2001-12-21 2004-02-06 Sod Conseils Rech Applic Nouveaux derives de benzimidazole et leur utilisation en tant que medicament
KR101124245B1 (ko) 2002-06-27 2012-07-02 노보 노르디스크 에이/에스 치료제로서 아릴 카르보닐 유도체
CN1508130A (zh) 2002-12-18 2004-06-30 中国科学院大连化学物理研究所 N-苯基-n’-嘧啶基取代脲类衍生物的合成方法
US7150894B2 (en) * 2003-05-01 2006-12-19 Kraft Foods Holdings, Inc. Acid whey texture system
SI1761520T1 (sl) 2004-06-23 2008-10-31 Lilly Co Eli Inhibitorji kinaze
FR2889526B1 (fr) 2005-08-04 2012-02-17 Aventis Pharma Sa 7-aza-indazoles substitues, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation
EP1966222A2 (en) 2005-11-16 2008-09-10 SGX Pharmaceuticals, Inc. Pyrazolothiazole protein kinase modulators
FR2908409B1 (fr) 2006-11-10 2009-01-09 Sanofi Aventis Sa Pyrazoles substituees,compositions les contenant,procede de fabrication et utilisation
ES2364864T3 (es) * 2006-12-21 2011-09-15 Astrazeneca Ab Acilaminopirazoles como inhibidores de fgfr.
US7737149B2 (en) * 2006-12-21 2010-06-15 Astrazeneca Ab N-[5-[2-(3,5-dimethoxyphenyl)ethyl]-2H-pyrazol-3-yl]-4-(3,5-dimethylpiperazin-1-yl)benzamide and salts thereof
KR20110022672A (ko) * 2008-06-16 2011-03-07 유니버시티 오브 테네시 리서치 파운데이션 암 치료용 화합물
FR2947546B1 (fr) 2009-07-03 2011-07-01 Sanofi Aventis Derives de pyrazoles, leur preparation et leur application en therapeutique
GB2474748B (en) 2009-10-01 2011-10-12 Amira Pharmaceuticals Inc Polycyclic compounds as lysophosphatidic acid receptor antagonists
CA2791738C (en) * 2010-03-01 2020-06-09 Gtx, Inc. Aryl imidazolyl compounds for the treatment of cancer
EP2736514B1 (en) * 2011-07-28 2017-10-18 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Alkynyl substituted pyrimidinyl-pyrroles active as kinases inhibitors
WO2013024427A1 (en) 2011-08-16 2013-02-21 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Novel urea derivatives as tec kinase inhibitors and uses thereof
CN103848810A (zh) * 2012-11-30 2014-06-11 北京赛林泰医药技术有限公司 鲁顿酪氨酸激酶抑制剂
AU2014291161B2 (en) * 2013-07-18 2018-04-26 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Antitumor drug for intermittent administration of FGFR inhibitor
WO2015008844A1 (ja) * 2013-07-18 2015-01-22 大鵬薬品工業株式会社 Ｆｇｆｒ阻害剤耐性癌の治療薬
BR112016008276B1 (pt) 2013-10-25 2021-03-02 Novartis Ag derivados bicíclicos de piridila fundidos ao anel, seus usos e seu intermediário, e composição farmacêutica
AU2016238436A1 (en) 2015-03-25 2017-08-17 Novartis Ag Formylated N-heterocyclic derivatives as FGFR4 inhibitors

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