KR20190048152A - 유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents
유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로, 구체적으로 항노화 정도의 대표적 척도로도 통용되는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용 및 이의 다양한 적용에 관한것이다. 본 발명의 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 또는 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.) 균주의 유크림 발효액은 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화, 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선하여 피부 노화를 예방 및 개선하는 효과가 있다. 또한, 안면 및 목 피부 표면의 수분보유량 증가, 유분 보유량의 증가 및 경피수분 증발량(TEWL)을 감소시켜 피부 손상을 예방 및 개선한다. 또한, 기미, 잡티 및 노인성 검은 반점의 개선, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤을 개선하여 피부 미백을 증진시키는 효과가 존재하므로, 이와 관련된 화장품 또는 식품 분야에 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로 구체적으로 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용;및 피부 미백용 및 이의 다양한 적용에 관한 것이다.
피부의 표피는 신체 최외각의 역동적인 기관으로 항상성을 유지하며 피부장벽기능을 중심적으로 담당한다. 피부장벽(skin barrier)이란 피부의 최 외층에 위치한 표피(epidermis)의 대표적 기능이며, 이는 피부의 항상성 유지를 위해 표피세포의 형성 및 분화, 각질탈락 과정을 끊임없이 반복하여 인체와 외부환경 사이에서 물질의 선택적 투과에 관여하게 된다. 이러한 피부장벽은 만성적인 자외선, 열 및 자극적인 도포제 등의 물리·화학적 손상과 피부노화 등이 진행되면 표피의 투과기능은 급속히 저하되고 더구나 각질층의 NMF(Natural moisturizing factor) 기능까지 약화되어 피부장벽 손상이 가속화된다.
어떤 경우든 피부장벽이 손상을 받으면 표피의 항상성 유지를 위해 즉각적인 복구기전이 이루어지게 된다. 그러나 이미 손상된 피부장벽을 완벽하게 회복시킬 수는 없으며, 지속적인 피부장벽 손상이 일어나게 되면 병리학적인 각질세포의 탈락이 일어나고 경피수분증발량(Transepidermal water loss, TEWL)이 지속적으로 증가하게 된다. 게다가 각질층의 구조적 변형이 초래되어 NMF가 감소되고 표피의 수화도(hydration)가 떨어져 피부는 건조해지고 인설, 비듬 등의 생성이 두드러지며 피부자극에 대한 염증반응이 동반되기도 한다. 즉 만성적인 피부장벽 손상에 노출되면 피부의 유수분 밸런스 등의 피부 항상성이 무너져, 피부 건조증이 심화되고 투과장벽의 손상을 가져와 경피수분증발량(TEWL)이 증가하고 칼슘기울기가 소실되면서 염증성 피부질환이나 피부노화가 촉진된다.
일반적으로 피부노화는 연령의 증가, 질병, 스트레스 그리고 이에 따른 내분비의 변화 등으로 누적되어 나타나는 내인성 노화(intrinsic ageing)와 열, 대기, 자외선, 화학물질 등 외부환경요인의 급·만성 자극 등으로 나타나는 외인성 노화(extrinsic aging)로 나뉜다. 어떤 요인에서든 피부노화가 진행되면 피부에 기능적, 구조적, 생화학적 변화가 나타나게 되는데, 요인에 따라 형태학적으로 표피의 두께, 거칠기, 주름의 깊이, 색소침착의 형태 등에서 각기 다른 양상을 보이기는 하나, 전반적으로 표피의 투과 능력과 면역기능이 저하되고 피부의 심한 건조증이 나타나게 된다. 특히 여성이 폐경기 전후가 되면 여성호르몬과 상관관계가 있는 콜라겐, 엘라스틴의 합성 능력이 현격히 감소하여 피부의 두께가 얇아지고, 피부 건조, 피부 거칠음, 주름, 피부 늘어짐, 색소침착에 이르기 까지 현격한 피부 변화를 경험하게 된다.
한편 유산균은 장내 유해균억제작용, 정장작용, 항암작용, 면역증강작용 및 콜레스테롤 감소기능까지 있어 발효식품이나 제약 산업 및 사료 산업에 이르기까지 광범위하게 이용되고 있다(조윤희, 오세종, 2010). 특히 항 미생물 효과와 항산화 활성이 높고 열처리에도 비교적 안정적이어서 각종 보존제로서 중요한 역할을 담당하기도 한다. 뿐만 아니라 피부의 지질 장벽과 보습효과를 향상시켜 피부장벽을 보호하는 기능도 있다. 실제로 유산균 발효액은 박테리오신 등의 항균물질과 피부에 유용한 성분들로 구성이 되어 건조하거나 파쇄 등의 가공을 거치지 않고 발효액 원액을 그대로 화장품에 사용할 수 있다는 장점이 있다. 또한 피부에 산성피막을 형성해 보습을 유도할 뿐 아니라 손상된 피부장벽의 회복을 위한 피부 도포제로서의 기능도 우수하다.
특히 우유와 유크림에 함유되어 자체 항염 및 항산화제로서 작용하는 물질들과 포화 지방산은 항진균, 항염 및 항산화 활성을 나타내는데다 유산균으로 우유를 발효시키면 엽산(folic acid)이 증가되고 피부에 수분을 유지시키거나 피부에 도포되었을 경우 피지를 조절하는 물질 등이 생성되고, 단백질 합성에 관여하거나 항산화작용을 하는 지용성 비타민 등이 활성화되거나 증가한다. 또한 NMF의 구성물질인 유리아미노산 함량이 증가하여 우유의 적절한 영양균형을 이루게 한다. 또한 발효과정에서 생성되는 것으로 알려진 박테리오신은 내열성 및 생존력이 매우 높아, 유크림 발효액을 소재로 한 화장품은 항 미생물 작용으로 화장품 안정성도 뛰어날 것으로 기대할 수 있다.
본 발명의 목적은 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 피부 외용제를 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 식품 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은피부 노화의 예방 및 개선용;피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유크림 발효액 제조 방법을 제공할 수 있다.
상기 목적의 달성을 위해, 본 발명은 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림(milk-cream) 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 피부 외용제를 제공한다.
또한, 본 발명은 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주를 유크림 배지에 배양하여 발효액을 수득하는 단계;를 포함하는 화장료 조성물의 유효성분인 피부 노화의 예방 및 개선용;피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유크림 발효액 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 또는 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.) 균주의 유크림 발효액은 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화, 피부 탄력을 증진하여 피부 노화를 예방 및 개선하는 효과가 있다. 또한, 안면 및 목 피부 표면의 수분보유량 증가 및 유분보유량의 증가, 경피수분 증발량(TEWL) 감소, 피부 거칠기를 감소시켜 피부의 손상을 예방 및 개선한다. 또한 피부 탄력의 증진, 주름깊이를 감소시켜 피부탄력 저하 및 주름을 예방 및 개선한다. 또한, 기미, 잡티 및 노인성 검은 반점의 개선, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤을 개선하여 피부 미백을 증진시키는 효과가 존재하므로, 이와 관련된 화장품 또는 식품 분야에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1 내지 도 3은 본 발명의 <실시예 1>의 다양한 유크림 발효액의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선, 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선, 피부 미백 증진효과를 확인한 도이다.
본 발명은 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림(milk-cream) 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 유크림 발효액은 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)을 배양 배지에서 배양하여 수득한 발효액, 농축 발효액, 발효액의 건조물, 배양 여과액, 농축배양 여과액, 또는 배양 여과액의 건조물을 의미하는 것으로, 상기 균주를 포함하는 것 또는 배양한 후 균주를 제거한 배양 여액일 수 있다. 또한 상기 발효액은 그 제형이 한정되지 아니하고, 일 예로 액체, 에멀젼, 또는 고체일 수 있다.
상기 발효액은 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230) 및 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지로 배양할 수 있고, 바람직하게는 유크림, 우유 또는 Lactobacilli MRS 배지이나,상기 각 속의 균주를 배양하기 위한 배지라면,이에 제한되지 않는다.
상기 유크림은 원유나 우유에서 분리한 유지방분, 유지방구의 농축물, 가공 유크림 및 분말 유크림으로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상으로 일반적으로 유지방분이 30~40%인 생크림(Single cream)이며, 유지방분이 3~10%인 저지방 크림(Extra light cream), 유지방분이 10~20%인 유크림(Light cream), 유지방분이20~30%인 테이블 크림(Table cream), 유지방분이 48~60%인 더블 크림(Double cream), 상기 생크림(milk-cream)에 식품 또는 식품 첨가물을 가한 가공 크림인 유지방분 18% 이상의 테이블 크림(Table cream), 사워크림(Sour cream), 휘핑크림(Whipping cream), 또는 유크림에 식품 또는 식품 첨가물을 가한 후 분말화한 유지방분 50% 이상의 분말 유크림을 생크림 대신 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 우유는 원유, 무지방 우유, 유지방 함량이 1 중량부 이하로 첨가된 저지방 및 탈지유로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이고, 상기 우유는 젖소(cow), 양(sheep), 산양(goat), 말(horse), 당나귀(donkey), 물소(water buffalo), 또는 낙타(camel) 등 포유류의 젖 유래일수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 유크림 발효액은 다양한 유산균으로 발효한 유크림 발효액, 또는 간헐멸균(Tyndallization)된 유크림 발효액, 또는 다양한 유산균 유크림 발효액 및 유산균 발효농축액의 혼합 발효액, 또는 다양한 유산균으로 발효한 유크림 발효액의 혼합 유크림 발효액, 또는 다양한 유크림배지 발효액으로 제조할 수 있다.
상기 유크림 발효액은 간헐멸균(Tyndallization) 처리할 수 있고, 단독 처리하거나처리 후 다양한 유크림 발효액에 처리할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 간헐멸균(Tyndallization)된 유크림 발효액은 상기 다양한 유산균으로 발효된 유크림을 80℃ 이상에서 일정한 기압으로 15분 이상 가온하여 간헐멸균(Tyndallization) 처리할 수 있으나,이에 제한되지 않는다.
상기 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.), 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.), 락토코커스 속(Lactococcus spp.) 등의 다양한 유산균으로유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230) 및 카제인 가수분해물(casamino acid) 포함 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지로 배양한 유산균 발효액을 감압농축 처리할 수 있고, 다양한 유크림 발효액에 1종 이상을 처리할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 다양한 유산균 발효액의 감압농축 처리는 상기 다양한 유산균으로 발효된 유산균 발효액을 간헐멸균 처리한 후 50-70℃ 이상에서 50분 이상 가온을 실시하여 감압 2배 이상 농축할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 다양한 유크림배지 발효액은 효모추출물(Yeast extract) 및 MRS broth, LB 배지, R2A 배지, 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지군에서 선택된 1종이상을 총 배지 중량의 0.1 중량% 이상으로 유크림에 처리한 후 수득한 유크림배지를 상기 다양한 유산균군에서 선택된 단독 또는 1종 이상의 균주로 발효할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.)은 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루에키 (Lactobacillus delbrueckiisubsp. bulgaricus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 및 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이나, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진을 위한 락토바실러스 속 균주라면, 이에 제한되지 않는다.
비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)은 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)이나, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진을 위한 비피도박테리움 속 균주라면, 이에 제한되지 않는다.
락토코커스 속(Lactococcus spp.)은 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)이나, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진을 위한 락토코커스 속 균주라면, 이에 제한되지 않는다.
상기 피부 노화는 피부 표면의 수분보유량 증가, 유분보유량의 증가, 경피수분증발량(TEWL)의 감소, 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화, 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로 예방 또는 개선될 수 있고, 더불어 상기 효과는 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 미백 증진에도 영향을 미칠 수 있다.
상기 피부손상은 피부 표면의 수분보유량 증가, 유분보유량의 증가 및 경피수분증발량(TEWL)의 감소, 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로 신체 내외적인 환경의 영향으로 과민해진 피부 감수성을 낮추고 피부장벽의 손상을 예방 또는 개선할 수 있으며, 더불어 상기 효과는 피부 노화의 개선, 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선, 또는피부 미백 증진에도 영향을 미칠 수 있다.
상기 피부 미백은기미, 잡티 및 노인성 검은 반점의 개선, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤 개선으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로 개선될 수 있고,더불어 상기 효과는 피부노화, 피부손상의 예방 및 개선, 또는 피부탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선에도 영향을 미칠 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 다양한 유산균으로 발효한 유크림 발효액의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과를 각각 확인한 결과, 상기 유산균들을 포함하는 유크림 발효액들이 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)과 유사하게 안면 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수를 감소시켜 피부 톤을 개선하고 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등에 대한 미백효과를 나타내며, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소시켜, 피부 노화, 피부 손상의 예방 및 개선, 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과에 기여하는 것을 확인하였다(표 5 내지 표 16 및 도 1 내지 도 3 참조).
또한 간헐멸균된 유크림 발효액, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액, 또는 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액, 또는 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과를 각각 확인한 결과, 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)에 비해 안면 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수를 감소시켜 피부 톤을 개선하고 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등에 대한 미백효과를 나타내며, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소 등에서 더 월등한 효과를 나타내어, 피부 노화, 피부 손상의 예방 및 개선, 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과에 더 높게 기여하는 것을 확인하였다(표 17 내지 표 28 및 도 1 내지 도 3 참조).
또한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%와 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 각각 혼합한 다양한 유산균 발효액의 혼합 유크림 발효액의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과를 확인한 결과, 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)과 유사하게 안면 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수를 감소시켜 피부 톤을 개선하고 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등에 대한 미백효과를 나타내며, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소시켜, 피부 노화, 피부 손상의 예방 및 개선, 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과에 기여하는 것을 확인하였다(표 17 내지 표 28 참조).
또한 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액 및 유크림MRS발효액의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과를 각각 확인한 결과, 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)에 비해 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수를 감소시켜 피부 톤을 개선하고 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등에 대한 미백효과를 나타내며, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소 등에서 더 월등한 효과를 나타내어, 피부 노화, 피부 손상의 예방 및 개선, 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과에 더 높게 기여하는 것을 확인하였다(표 31 내지 표 42 참조).
또한 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용한 후 피부 손상 또는 피부노화의 개선 효과를 확인한 결과 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)에 비해 다소 변화율이 떨어지기는 하나, 피부 손상 또는 피부노화의 개선 효과효과에 기여하는 것을 확인하였으며, 특히 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액 로션을 바른 경우에는 본 발명자들의 2016년 10월 28일 출원(10-2016-0141734) 및 2016년 12월 8일 출원(10-2016-0166775)의 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)에 비해 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수를 감소시켜 피부 톤을 개선하고 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등에 대한 미백효과를 나타내며, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소 등에서 모두 유의적으로 더 높게 변화하여, 피부 노화, 피부 손상의 예방 및 개선, 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과에 더 높게 기여하는 것을 확인하였다(표 43 내지 표 54 참조).
따라서 본 발명의 화장료 조성물은 피부장벽 손상이나 피부노화의 여부를 가늠하는 척도로 주로 사용되는 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량의 증가, 경피수분증발량(TEWL)및 피부 거칠기 감소, 피부 탄력도 증가, 주름깊이의 감소 효과를 나타내므로 피부 손상 또는 피부 노화의 예방 및 개선을 할 뿐 아니라,피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백 개선효과도 나타내므로 화장료 조성물 및 피부 외용제로 유용하게 사용될 수 있다.
또한 상기 화장료 조성물은 경구용 또는 피부 도포용으로 이를 혼합하는 용도로 이용할 수 있다. 경구용은 생균 또는 사균인 균주를 이용하고, 상기 생균 또는 사균의 혼합 비율(w/g)은 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진을 위한 목적을 달성하기 위해서라면, 적의 선택하여 혼합할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 단독 또는 1종 이상이 선택되는 화장료 형태의 제형이거나, 비누, 폼 클렌저, 바디 클렌저, 샴푸 등 인체의 세정을 위한 목적으로 사용하는 세정제 형태의 제형 등의 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 때에는 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 에멀젼, 로션, 크림, 에센스, 젤, 팩,마사지크림, 바디 로션 및 크림, 클렌징크림 및 오일, 클렌징 워터 및 폼 클렌저, 바디 클렌저 등으로부터 선택되는 기초 화장료; 선스크린 크림, 선 오일,썬블럭, 메이크업 베이스, 화운데이션,파우더, 립스틱, 아이새도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬 등으로부터 선택되는 메이크업 화장료; 샴푸, 린스, 컬러린스, 스타일링제, 헤어 트리트먼트제, 헤어 컬러링제, 헤어 팩, 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드 및 헤어 토닉, 스칼프 트리트먼트 등으로부터 선택되는 모발 화장료; 애프터셰이브로션, 셰이빙 크림 등으로부터 선택되는 면도용 화장료등으로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형으로 제조될 수 있으며, 상기 제형에 의해 본 발명의 화장료 제형 및 형태가 제한되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물에는 본 발명에 따른 유크림 발효액 이외에통상 화장료의 각 제형에적합하도록 주지된담체와 첨가제 등모든 종류의 성분을 상기 화장료 제형화에 필요에 따라 추가로 적절하게 혼합또는 첨가하여 사용할 수 있다.보다 상세하게는 통상적으로 화장료에 혼합 또는 첨가되는정제수, 증류수, 꽃물, 발효여과액, 발효용해물, 에탄올 등일 수 있고, 이들 중 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있는 물; 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지로 응용되는 동물성 유지, 식물성 유지, 광물성 유지 등일 수 있고, 이들 중 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있는 유지 성분; 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 또는 양쪽성 계면활성제일 수 있으며, 이들 중 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있는 계면활성제; 유기안료, 무기안료 및 이들의 복합 안료 등일 수 있고, 이들 중 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있는 안료; 유기 자외선차단제(자외선 흡수제) 또는 무기 자외선차단제(자외선 산란제) 등일 수 있고, 이들 중 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있는 자외선 차단제 등을 필요에 따라 적절히 추가로 배합하여 사용할 수 있으며, 이외에도 다가알콜류 및 폴리비닐알콜류, 왁스류, 보습제, 에몰리엔트제, 합성 고분자 물질, 유기 분체, 방부제, 살균제, 부형제, 희석제, 저급 알코올 및 탄소수가 12 내지 20인고급 알코올, 지방족 글리세롤, 증점제, 킬레이트제, 산화 방지제, 비타민 및 식물 추출물 등의 약효 성분, pH 조절제, 알콜, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제등으로, 이들 중 선택된 단독 또는 1종 이상을 필요에 따라 적절히 추가로 혼합 또는 첨가하여 사용할 수 있다.
본 발명은 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림(milk-cream) 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 피부 외용제를 제공한다.
본 발명에서 피부 외용제란 일반적으로 외용에 사용하는 조성물 전반을 포괄하는 개념이고, 구체적으로 기초 화장료, 메이크업 화장료, 모발용 화장료, 면도용 화장료 등 각종 화장료를 포함하는 화장료 조성물이나 연고제 등의 다양한 의약품 내지 의약외품 등으로 폭넓게 적용 가능한 것을 말하며, 바람직하게는 화장료 조성물, 더욱 바람직하게는 기능성 화장료 조성물 또는 기능성 화장품일 수 있다.
상기피부 외용제에는 유효성분 외에 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 통상 외용제에 배합되고 있는 성분, 구체적으로 보습제, 자외선 흡수제, 비타민류, 동식 물 추출성분, 소화제, 미백제, 혈관확장제, 수렴제, 청량제, 호르몬제 등을 추가로 배합한 것일 수 있다.
상기피부 외용제의 제형은 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 적절한 형태를 취할 수 있으며, 구체적으로 수용액계, 가용화계, 유화계, 유액계, 겔계, 페이스트계, 연고계, 에어졸계, 물-기름 2층계, 물-기름-분말 3층계일 수 있으며, 상기 제형에 의해 본 발명의 외용제의 제형 및 형태가 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 피부 외용제는 유효성분을 피부조직으로 침투 또는 이행시키기 위해서 필요한 기제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 식품 조성물을 제공한다.
상기 유효성분을 식품, 음료 등의 건강보조 식품에 첨가할 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 각종 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 유크림 발효액은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 경우에는 유효성분은 상기 범위 이하 또는 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 및 합성 향미제를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 유크림 발효액은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 발효액은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 또한 이러한 성분은 단독 또는 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.
상기 유크림 발효액을 캡슐화 하여 경구용으로 제조하는 단계를 포함할 수 있으나, 이는 경구용으로 제작 시에 포함되는 단계이고, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주를 유크림 배지에 배양하여 다양한 유산균주를 이용한 유크림 발효액을 수득하는 단계; 상기 유크림 발효액을 간헐멸균(Tyndallization) 처리하여 단독 처리하거나 선택된 1종 이상을 다양한 유크림 발효액에 처리하여 다양하게 제조된 유크림 발효액을 수득하는 단계; 락토코커스 속, 락토바실러스 속 및 비피도박테리움 속으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주를 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230), 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상에 배양하여 수득한 다양한유산균 발효액의 감압농축 처리로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 다양한 유크림 발효액에처리하여 다양하게 제조된 유크림 발효액을 수득하는 단계; 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), 효모추출물(Yeast extract), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230), 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유크림에 처리한 후 수득한 유크림배지를 상기 다양한 유산균 군에서 선택된 1종 이상의 균주로 발효하여 다양한 유크림배지 발효액을 수득하는 단계를 포함하는 군에서 선택된 1종 이상의 유크림 발효액 제조 방법을 제공하며, 구체적으로 피부 노화의 예방 및 개선 및 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 증진을 위해서라면 제조 방법은 제한되지 않고, 상기 방법으로 제조된 유크림 발효액 또한 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 조성물은 피부 노화의 예방 및 개선 및 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진을 더욱 증진시키기 위해, 현재까지 알려진 항노화제, 구체적으로 피부 노화의 예방 및 개선 및 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진의 개선제와 병용하여 사용할 수도 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 다양한 유산균 균주로 발효한 유크림 발효액, 간헐멸균된 유크림 발효액, 발효농축액, 혼합유크림 발효액 준비
<실시예 1-1> 다양한 유산균 균주를 이용한 유크림 발효액의 제조
유지방이 35% 이상 함유된 유크림에 1ℓ에 전배양한 락토코커스 락티스(Lactococcus lactissubsp.lactis KCTC 3115)(N1), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum ATCC 8014)(N2), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei subsp. paracaseiKCTC 3510)(N3), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseriKCTC 3162)(N4), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricusKCTC 3635)(N5), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteriKCTC 3594)(N6) 또는 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentumKCTC 3112)(N7) 1× 106cfu/㎖를 각각 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 72시간 배양하여, 유크림 발효액을 제조하였다.
또는 상기와 동일한 방법으로 유지방이 35% 이상 함유된 유크림에 1ℓ에 전배양한 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidumKCTC 3202)(N8) 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 유크림 발효액을 제조하되, 배양 중 배양조건 달성을 위한 산소차단을 위해 anaerobic jar와 이산화탄소 가스팩(Anaerogen 2.5L, Thermo scientific, U.S.A)을 이용하여 내부 산소를 제거하였다.
또한, 상기 다양한 유산균 균주의 유크림 발효액의 대조군으로서, 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosusKCTC 5033) 유크림 발효액(B2)을 이용하였다. 상기 락토바실러스 람노서스는 유지방이 35% 이상 함유된 유크림에 1ℓ에 전배양한 락토바실러스 람노서스 균 주 1× 106cfu/㎖를 접종한 후, 항온 37 배양기에서 72시간 배양하여, 유크림 발효액을 수득하였다.
<실시예 1-2> 다양한 유산균 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형 준비
상기 <실시예 1-1>의 다양한 유산균 균주로 발효한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형을 하기 표와 같이 제조하였다(표 1 내지 표 2).
또한, 대조군으로서 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션(B2)은 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775), 상기 <실시예 1-1>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 80 중량%와 증류수 18 중량%을 혼합한 수성 베이스에 올리브 리퀴드 1 중량%, 나프리 1 중량%를 첨가물로 배합하여 에멀션을 제조하였으며, 상기 <실시예 1-1>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 75 중량%를 수성 베이스, 포도씨 오일 18 중량% 및 올리브 유래 왁스 5 중량%를 유성 베이스로 하여 유화한 후 나프리 1 중량%를 배합하여 로션을 제조하였으며, 상기 다양한 유산균 유크림 발효액 에멀션 및 로션의 대조군으로 이용하였다.
| Ingredient | Unit (g) | |
| A | Olive liquid | 1 |
| Napre | 1 | |
| W | Fermented sterilized milk cream(N1, N2, N3, N4, N5, N6, N7, N8) | 80 |
| Sterile water | 18 | |
| Total weight | 100 | |
| Abbreviation: A, additives (olive liquid, olive oil peg-7 esters 99.9%, clear & yellowish liquid type, Italy; Napre, Zanthoxylum piperitumfruit extract & pulsatilla koreana extract & usnea barbata (Lichen) extract, water soluble liquid type, Koera); W, water base (N1,fermented milk cream with KCTC 3115; N2,fermented milk-cream with ATCC 8014; N3,fermented milk cream with KCTC 3510; N4,fermented milk cream with KCTC 3162; N5,fermented milk cream with KCTC 3635; N6,fermented milk cream with KCTC 3594; N7,fermented milk cream with KCTC 3112; N8,fermented milk cream with KCTC 3202; Sterile water, Daihan sterile water for irrigation, Korea); The biological resources used in this research were distributed from KCTC. | ||
| Ingredient | Unit(g) | ||
| Lotion | W | Fermented sterilized milk cream(N1, N2, N3, N4, N5, N6, N7, N8) | 75 |
| O | Grape seed oil | 19 | |
| Olive derived wax | 5 | ||
| A | Napre | 1 | |
| Total weight | 100 | ||
| Abbreviation: O, oil basee (grape seed oil, vitis vinifera oganic, cold press, virgin, Spain; olive wax, cerearyl olivate & sorbitan olivate, waxy solid flake type, Italy); W, water base &A, additives were the same as Table 1. | |||
<실시예 1-3> 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액의 제조
상기 <실시예 1>와 동일한 방법으로 유지방이 35% 이상 함유된 유크림 1ℓ에 전배양한 락토바실러스 람노서스 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 유크림 발효액을 수득하였다.
<실시예 1-4> 간헐멸균(Tyndallization)된 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액의 제조
상기 <실시예 1-3>과 동일한 방법으로 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액을 80℃ 이상에서 일정한 기압으로 15분 이상 가온한 후 간헐멸균된 유크림 발효액을 수득하였다.
<실시예 1-5> 다양한 유산균 발효농축액의 제조
Lactobacilli MRS, 또는 skim milk 1ℓ에 <실시예 1>과 동일한 방법으로 전배양한 락토바실러스 람노서스, 락토코커스 락티스를 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 락토바실러스람노서스 발효액 및 락토코커스락티스 발효액을 수득하였다. 또한 전배양한 비피도박테리움 비피덤을 Lactobacilli MRS, 또는 skim milk 1ℓ에 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, <실시예 1>와 동일한 방법의 배양 조건으로 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 비피도박테리움비피덤 발효액을 수득하였다. 그 후, 다양한 유산균 발효액을 80℃ 이상에서 일정한 기압으로 15분 이상 가온하는 등으로 간헐멸균(Tyndallization)한 후, 60℃ 이상에서 60분 이상 가온을 실시하여 감압농축한 다양한 유산균 10배 발효농축액을 수득하였다.
<실시예 1-6> 다양하게 제조된 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형 준비
상기 <실시예 1-4>에서 수득한 간헐멸균(Tyndallization)된 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(N9), 상기 <실시예 1-3>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액과 <실시예 1-5>에서 다양한 유산균 농축 발효액을 하기 표 2와 같은 비율로 배합하여 수득한 다양한 유크림 발효액(N10, N11, N12), 상기 <실시예 3>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 상기 <실시예 1>에서 수득한 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)을 함유한 에멀션 및 로션 제형을 하기와 같이 제조하였다(표 3 내지 표 4).
또한, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션은 상기 <실시예 1-2>의 락토바실러스 람노서스 유크림을 함유한 에멀션 및 로션(B2)과 동일하며, 상기 다양한 유크림 발효액 에멀션 및 로션의 대조군으로 이용하였다.
| Ingredient | Unit (g) | |
| A | Olive liquid | 1 |
| Napre | 1 | |
| W | Fermented sterilized milk cream(N9, N10, N11, N12, N13) | 80 |
| Sterile water | 18 | |
| Total weight | 100 | |
| Abbreviation: W, water base (N9,tyndalized fermented milk-cream broth with KCTC 5033; N10,mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 5033 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N11, mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 3115 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N12, mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 3202 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N13, Fermented milk-cream mixture, mixing fermented milk-cream KCTC 5033, fermented milk-cream with KCTC 3115, fermented milk-cream with KCTC 3162 and fermented milk-cream with KCTC 3635);A, additiveswere the same as Table 1. | ||
| Ingredient | Unit(g) | ||
| Lotion | W | Fermented sterilized milk cream(N9, N10, N11, N12, N13) | 75 |
| O | Grape seed oil | 19 | |
| Olive derived wax | 5 | ||
| A | Napre | 1 | |
| Total weight | 100 | ||
| Abbreviation: W, water base weresame as Table 3; O, oil base & A, additives were the same as Table 2. | |||
<실험예 1-1> 피부장벽 손상 및 노화피부 시험대상자의 선정
임상시험 모집공고를 통하여 모집된 신체 노화가 시작되거나 진행된 연령대인 만 40세 이상에서 만 59세 이하의 여성 중 현재 특별한 질병 치료나 약물을 복용하지 않았으며, 최근 6개월 이내 피부과 시술 등의 피부에 물리적 자극을 가하지 않은 참여희망자를 1차 시험대상자로 선정하고, 이들에게 임상시험을 통해 연구하려는 목적과 절차 등의 내용을 상세히 설명한 후, 시험 기간 동안 피부에 뚜렷한 변화를 초래할 수도 있는 혈액 순환제재 및 항산화제재 등의 건강보조식품 및 기타약물 복용이나, 시험을 위해 공급하는 제품 이외에는 다른 화장품을 사용하지 않으며, 피부 변화에 직접적인 영향을 미치는 어떠한 시술이나 피부 관리 등을 행하지 않기로 하는 등 시험에 대한 동의를 한 대상자만을 최종 연구대상자로 선정하였다. 아울러, 시험기간은 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775) 총 7주(49일)간으로 하였다.
<실험예 1-2> 피부장벽 손상 및 노화피부 개선효과 확인 방법
임상시험 전후 피부변화에 대한 확인을 위하여 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775) 육안평가와 과학적인 측정을 위하여 피부측정 기기를 이용한 기기평가를 병행하였다.
육안평가를 위해 임상시험 전후 2차례에 걸쳐 디지털 카메라(SAMSUNG, VLUU PL150, Korea)를 이용하여 임상시험 전후 총 2회에 걸쳐 임상시험자의 안면피부 및 목피부 부위의 정면과 측면을 촬영하여 피부표면 변화를 평가하였다. 동일한 결과를 얻기 위하여 피부 측정실 입실 직전 세안을 한 후, 지정된 촬영 장소에서 촬영자 동일인 1인이 지정한 동일 부위에 이미지 촬영하였다.
또한 피부측정 기기를 이용한 기기평가는 비침습적 피부측정장비인 Cutometer Dual MPA 580(Multi Probe Adapter system, C+K Electronic GmbH, Cologne, Germany)을 이용하여 임상시험 전후 총 2회에 걸쳐 실시하였으며, 보다 객관적인 결과를 위하여 동일인이 실제 측정하고, 임상시험 전후 기록 또한 동일인이 하였다. 이때 피부의 정확한 상태를 측정하기 위한 최적 항온, 항습 조건으로 제시된 실내온도 20～25℃, 상대습도 40～60%로 설정한 피부 측정실에서 시험대상자가 입실 후에 바로 누운 상태에서 30분 이상 안정을 취한 후 측정을 진행하였다.
기기 평가의 측정부위는 안면피부 변화를 관찰하기위해 총 3부위로 이마(forehead), 오른쪽 볼(cheek), 그리고 오른쪽 눈가(temple)를, 목피부의 변화를 관찰하기 위하여 총 2부위로 앞목(center of the neck)과 옆목(side of the neck)을 측정 부위로 정하고, 측정기기의 해당 프로브(prob)를 이용하여 각 부위의 피부표면에 측정하였다. 즉, 피부 NMF 활성화의 척도가 되는 수분보유량(skin surface moisture content)과 유분보유량(skin surface sebum content), 피부장벽 회복기능 여부의 척도가 되는 경피수분증발량(경피수분증발량(TEWL)), 미백 활성도의 척도가 되는 멜라닌지수(melanin index) 및 항 노화의 척도가 되는 거칠기(skin surface roughness)와 피부탄력도(skin elasticity) 등 6항목을 각 부위 별로 총 5회 측정 후 평균값을 취하여, 안면피부 및 목피부 부위의 각 항목별 평균을 최종 측정값으로 취하여 피부표면 변화를 평가하였다.
<실험예 1-3> 다양한 유산균 균주를 이용한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션의 도포 후 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선, 피부 탄력 저하 및 주름의 예방, 개선과 피부 미백 증진효과 확인
<1-3-1> 피부 표면의 수분보유량 변화 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 수분보유량의 변화를 확인하였다.
그 결과, 하기 표 5와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 17% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 19% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 16% 증가경향을 보였으며, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 16% 유의하게 증가, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 14% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 20% 유의하게 증가하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 16% 유의하게 증가, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 18% 유의하게 증가하였으며 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 17% 유의하게 수분보유량이 증가하였다(표 5).
한편, 하기 표 6과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 25% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 26% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 19% 유의하게 증가, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 22% 유의하게 증가, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 28% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 29% 증가하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 19% 유의하게 증가, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 29% 유의하게 증가, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 24% 유의하게 수분보유량이 증가하였다(표 6).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 수분보유량이 증가되는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 58.17±6.19 | 67.83±8.92 | -9.65±8.37 | -4.161 (.001**) |
| N1 | 3 | 62.44±6.10 | 74.12±9.63 | -11.68±3.86 | -5.234 (.035*) |
| N2 | 3 | 62.32±1.97 | 72.33±5.73 | -10.00±4.11 | -4.212 (.052) |
| N3 | 3 | 56.26±2.99 | 65.60±6.32 | -9.34±3.40 | -4.752 (.042*) |
| N4 | 3 | 60.82±3.80 | 69.07±3.52 | -8.25±0.51 | -27.844 (.001**) |
| N5 | 3 | 64.32±6.10 | 76.94±8.58 | -12.62±2.92 | -7.494 (.017*) |
| N6 | 3 | 56.48±7.29 | 65.48±4.97 | -9.00±2.51 | -6.212 (.025*) |
| N7 | 3 | 52.85±4.86 | 62.20±2.78 | -9.35±2.20 | -7.359 (.018*) |
| N8 | 3 | 59.38±3.28 | 69.28±2.39 | -9.90±0.99 | -17.253 (.003**) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviation: B2,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 5033; N1,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3115; N2,testing productsmade from fermented milk-cream with ATCC 8014; N3,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3510; N4,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3162; N5,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3635; N6,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3594; N7,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3112; N8,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 3202; N, The number of people in group |
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<1-3-2> 피부 표면의 유분보유량 변화 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 유분보유량의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 7과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 15% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 17% 증가경향을 보였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 14% 유의하게 증가, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 14% 유의하게 증가, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 14% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 19% 유의하게 증가하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 13% 증가경향, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 15% 유의하게 증가, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가하였다(표 7).
한편, 하기 표 8과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 14% 증가경향을 보였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 10% 유의하게 증가, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 10% 유의하게 증가하였고, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 13% 증가경향, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 15% 증가경향, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 11% 유의하게 증가, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 13% 증가경향, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가하였다(표 8).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 유분보유량이 증가되는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 67.05±6.05 | 77.41±8.03 | -10.35±7.92 | -4.714 (.001**) |
| N1 | 3 | 61.22±1.87 | 71.70±3.54 | -10.48±5.08 | -3.574 (.070) |
| N2 | 3 | 64.74±4.08 | 73.74±1.81 | -9.00±2.94 | -5.303 (.034*) |
| N3 | 3 | 65.22±4.29 | 74.22±3.62 | -9.00±1.31 | -11.900 (.007**) |
| N4 | 3 | 64.61±4.11 | 73.78±1.26 | -9.17±3.69 | -4.308 (.049*) |
| N5 | 3 | 60.78±6.62 | 72.22±3.23 | -11.44±3.68 | -5.381 (.033*) |
| N6 | 3 | 68.33±3.28 | 77.33±3.51 | -9.00±4.37 | -3.566 (.070) |
| N7 | 3 | 63.56±3.89 | 73.00±3.21 | -9.44±1.90 | -8.630 (.013*) |
| N8 | 3 | 63.33±6.08 | 71.09±6.25 | -7.76±1.71 | -7.851 (.016*) |
| *p<.05 , **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 33.88±8.07 | 37.88±7.62 | -4.00±4.84 | -2.978 (.012*) |
| N1 | 3 | 37.33±3.25 | 42.50±3.77 | -5.17±3.06 | -2.929 (.099) |
| N2 | 3 | 38.00±4.04 | 41.67±3.01 | -3.67±1.32 | -4.801 (.041*) |
| N3 | 3 | 29.17±1.89 | 32.11±1.60 | -2.94±0.92 | -5.556 (.031*) |
| N4 | 3 | 37.83±5.06 | 42.83±5.48 | -5.00±3.97 | -2.182 (.161) |
| N5 | 3 | 31.44±1.42 | 36.28±3.56 | -4.83±2.46 | -3.410 (.076) |
| N6 | 3 | 35.78±2.62 | 39.61±2.71 | -3.83±0.93 | -5.713 (.029*) |
| N7 | 3 | 38.33±4.19 | 43.17±2.57 | -4.83±4.25 | -1.969 (.188) |
| N8 | 3 | 32.33±1.04 | 36.17±0.58 | -3.83±0.76 | -8.693 (.013*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 5. |
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<1-3-3> 피부 표면의 멜라닌지수 변화 및 미백효과 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 멜라닌지수의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 9와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 7% 유의하게 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 5% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 6% 유의하게 감소, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 6% 유의하게 감소, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 7% 감소경향을 보였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 7% 유의하게 감소하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 7% 유의하게 감소, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 6% 감소경향, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 7% 유의하게 멜라닌지수가 감소하였다(표 9 및 도 1).
한편, 하기 표 10과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 4% 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 3% 감소경향, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 4% 감소경향, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 3% 감소경향을 보였으며, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 4% 유의하게 감소하였고, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 5% 감소경향, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 3% 감소경향, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 4% 감소경향, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 3% 유의하게 멜라닌지수가 감소하였다(표 10).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 멜라닌지수가 감소되는 것을 확인하였으며, 특히 도 1에서와 같이 피부 표면의 멜라닌지수가 감소되어 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되어졌으며, 더불어 피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 158.74±25.93 | 147.30±33.07 | 11.43±18.03 | 2.286 (.041*) |
| N1 | 3 | 170.00±5.30 | 157.44±7.37 | 8.22±2.34 | 6.083 (.026*) |
| N2 | 3 | 150.52±6.81 | 141.44±6.75 | 9.07±2.57 | 6.119 (.026*) |
| N3 | 3 | 202.11±16.55 | 189.00±12.12 | 13.11±4.53 | 5.018 (.038*) |
| N4 | 3 | 158.81±5.37 | 147.89±3.28 | 10.93±8.54 | 2.215 (.157) |
| N5 | 3 | 155.11±6.09 | 143.96±9.20 | 11.15±3.99 | 4.838 (.040*) |
| N6 | 3 | 179.44±14.81 | 166.78±11.11 | 12.67±4.70 | 4.666 (.043*) |
| N7 | 3 | 198.44±40.17 | 186.44±46.54 | 12.00±7.54 | 2.758 (.110) |
| N8 | 3 | 167.44±2.52 | 155.56±4.22 | 11.89±2.01 | 10.249 (.009**) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 173.38±33.82 | 166.34±33.63 | 7.03±13.76 | 1.843 (.090) |
| N1 | 3 | 166.61±9.05 | 162.33±7.81 | 4.28±1.69 | 4.395 (.048*) |
| N2 | 3 | 170.61±15.05 | 163.61±10.67 | 7.00±6.25 | 1.939 (.192) |
| N3 | 3 | 173.61±29.44 | 167.94±25.42 | 5.67±4.16 | 2.358 (.143) |
| N4 | 3 | 182.83±13.87 | 175.33±13.14 | 7.50±1.32 | 9.820 (.010*) |
| N5 | 3 | 175.00±13.94 | 166.94±21.02 | 8.06±7.13 | 1.957 (.190) |
| N6 | 3 | 165.50±25.71 | 160.17±10.32 | 5.33±19.11 | .484 (.677) |
| N7 | 3 | 184.50±13.00 | 178.17±11.24 | 6.33±3.06 | 3.591 (.070) |
| N8 | 3 | 143.50±15.16 | 139.17±13.58 | 4.33±1.61 | 4.670 (.043*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
<1-3-4> 경피수분증발량(TEWL)변화 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 경피수분증발량(TEWL)의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 11과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 24% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 24% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 16% 유의하게 감소, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 18% 유의하게 감소, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 23% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 26% 유의하게 감소하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 20% 유의하게 감소, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 20% 유의하게 감소, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 23% 경피수분증발량(TEWL)이 감소경향을 보였다(표 11).
한편, 하기 표 12와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 29% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 28% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 22% 유의하게 감소, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 20% 감소경향, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 26% 감소경향을 보였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 29% 유의하게 감소하였고, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 28% 유의하게 감소, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 20% 유의하게 감소, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 24% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소하였다(표 12).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소되는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.40±5.83 | 12.55±3.51 | 3.84±4.45 | 3.112 (.009**) |
| N1 | 3 | 16.96±1.95 | 12.90±3.03 | 4.06±1.41 | 4.999 (.038*) |
| N2 | 3 | 15.97±0.99 | 13.37±1.30 | 2.60±0.79 | 5.698(.029*) |
| N3 | 3 | 15.04±0.38 | 12.39±0.31 | 2.65±0.39 | 11.654 (.007**) |
| N4 | 3 | 16.32±1.22 | 12.50±1.33 | 3.81±0.31 | 21.166 (.002**) |
| N5 | 3 | 15.54±0.50 | 11.52±1.52 | 4.02±1.55 | 11.711 (.007**) |
| N6 | 3 | 19.54±1.39 | 15.73±1.35 | 3.81±1.32 | 5.006 (.038*) |
| N7 | 3 | 20.88±2.27 | 16.23±3.25 | 4.14±1.08 | 6.664(.022*) |
| N8 | 3 | 15.27±2.71 | 11.82±0.65 | 3.44±2.79 | 2.399 (.139) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.08±7.10 | 11.38±3.62 | 4.69±5.57 | 3.041 (.010*) |
| N1 | 3 | 18.71±3.59 | 13.48±3.11 | 5.23±0.51 | 17.668 (.003**) |
| N2 | 3 | 16.57±1.36 | 12.99±1.50 | 3.58±0.73 | 8.490 (.014*) |
| N3 | 3 | 14.59±1.25 | 11.62±2.69 | 2.98±1.49 | 3.455 (.075) |
| N4 | 3 | 19.37±3.70 | 14.28±4.08 | 5.08±3.23 | 2.726 (.112) |
| N5 | 3 | 18.76±4.26 | 13.39±2.76 | 5.37±1.82 | 5.126 (.036*) |
| N6 | 3 | 17.63±0.78 | 12.68±1.88 | 4.95±1.10 | 7.819 (.016*) |
| N7 | 3 | 17.97±0.26 | 14.35±1.66 | 3.62±1.43 | 4.390 (.048*) |
| N8 | 3 | 18.08±0.55 | 13.68±1.79 | 4.41±1.36 | 5.631 (.030*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
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<1-3-5> 피부 표면의 거칠기 변화 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 거칠기의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 13과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 8% 피부 거칠기가 감소경향을 보인데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 6% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 7% 유의하게 감소, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 7% 유의하게 감소, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 7% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 9% 감소경향, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 7% 감소경향, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 7% 감소경향을 보였고, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 7% 피부 거칠기가 감소경향을 보였다(표 13 및 도 2).
한편, 하기 표 14와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 10% 유의하게 피부 거칠기가 감소한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 9% 유의하게 감소하였으며, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 7% 감소경향, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 9% 유의하게 감소, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 9% 감소경향, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 10% 감소경향, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 10% 감소경향을 보였고, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 8% 유의하게 감소, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 11% 피부 거칠기가 감소경향을 보였다(표 14 및 도 2).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부표면의 거칠기가 감소되는 것을 확인하였으며, 특히 도 2에서와 같이 거칠기가 감소되는 것과 동시에 피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 181.41±62.06 | 166.82±60.85 | 14.58±30.12 | 1.746 (.106) |
| N1 | 3 | 228.13±11.84 | 213.61±9.26 | 14.52±3.15 | 7.983 (.015*) |
| N2 | 3 | 185.33±35.76 | 172.41±33.48 | 12.93±2.57 | 8.717 (.013*) |
| N3 | 3 | 178.89±10.86 | 165.84±13.69 | 13.04±3.36 | 6.724 (.021*) |
| N4 | 3 | 232.00±97.02 | 215.50±94.97 | 16.50±3.63 | 7.870 (.016*) |
| N5 | 3 | 157.27±10.57 | 142.40±26.92 | 14.87±16.35 | 1.575 (.256) |
| N6 | 3 | 193.24±26.76 | 179.93±16.37 | 13.32±11.06 | 2.086 (.172) |
| N7 | 3 | 256.44±19.02 | 238.22±16.41 | 18.22±8.00 | 3.944 (.059) |
| N8 | 3 | 182.56±72.19 | 169.00±57.03 | 13.56±15.76 | 1.490 (.275) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 288.87±76.11 | 261.19±88.11 | 27.68±30.24 | 3.300 (.006**) |
| N1 | 3 | 236.19±22.01 | 214.61±23.90 | 21.58±7.16 | 5.223 (.035*) |
| N2 | 3 | 297.33±49.05 | 275.78±60.26 | 21.56±11.92 | 3.133 (.089) |
| N3 | 3 | 253.67±17.36 | 231.28±14.39 | 22.39±5.62 | 6.899 (.020*) |
| N4 | 3 | 264.35±38.25 | 239.40±28.13 | 24.94±10.38 | 4.161 (.053) |
| N5 | 3 | 251.28±11.59 | 226.33±14.30 | 24.94±16.75 | 2.579 (.123) |
| N6 | 3 | 238.30±38.01 | 214.00±28.41 | 24.30±12.40 | 3.3947 (.077) |
| N7 | 3 | 290.00±9.26 | 265.59±7.82 | 24.41±6.69 | 6.323 (.024*) |
| N8 | 3 | 268.33±54.52 | 239.50±101.52 | 28.83±47.57 | 1.050 (.404) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
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<1-3-6> 피부 탄력도 변화 및 주름 개선 확인
상기 <실시예 1-2>에서 제조한 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 탄력도의 변화를 측정하고 시험 전후 사진촬영을 통해 주름의 변화에 대한 육안평가를 하였다.
그 결과, 하기 표 15와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 28% 유의하게 피부 탄력도가 증가경향을 보인데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 27% 유의하게 증가, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 17% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 15% 증가경향, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 25% 유의하게 증가, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 27% 유의하게 증가, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 25% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 20% 증가경향, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 24% 유의하게 피부 탄력도가 증가하였다. 또한 하기 도 3과 같이 이마, 미간, 안검, 눈가, 팔자, 입가 및 턱 등에 보이는 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워져 팽팽하게 보이고 늘어졌던 턱 라인이 들어 올려져 얼굴선이 매끈해진 것을 확인하였다(표 15 및 도 3).
한편, 하기 표 16과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 락토코커스 락티스(N1)는 약 14% 증가경향, 락토바실러스 플란타룸(N2)는 약 9% 증가경향, 락토바실러스 파라카제이(N3)는 약 5% 유의하게 증가, 락토바실러스 가세리(N4)는 약 10% 유의하게 증가하였고, 락토바실러스 델브루에키(N5)는 약 12% 증가경향, 락토바실러스 루테리(N6)는 약 12% 증가경향, 락토바실러스 퍼멘텀(N7)은 약 10% 증가경향을 보였으며, 비피도박테리움 비피덤(N8)은 약 9% 유의하게 피부 탄력도가 증가하였다. 또한 하기 도 3과 같이 목에 보이는 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워지고 늘어졌던 목피부가 들어 올려져 팽팽하게 보이는 것을 확인하였다(표 15 및 도 3).
이로써 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 탄력도가 증가되는 것을 확인하였다. 또한 다양하게 나타난 얼굴과 목의 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워지고 늘어졌던 피부가 들어 올려져 팽팽하게 보이는 것을 육안으로 확인하였다.
따라서, 본 발명의 다양한 유산균주로 발효시킨 유크림 발효액들도 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량을 증가시키고, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백효과, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기를 감소시킬 뿐 아니라 피부 탄력도를 증가시키고 주름의 깊이를 감소시키는 효과를 나타내므로, 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)과 유사하게 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에 기여하여 하는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.39±0.15 | 0.51±0.16 | -0.11±0.11 | -3.624 (.003**) |
| N1 | 3 | 0.38±0.01 | 0.49±0.03 | -0.10±0.02 | -7.190 (.019*) |
| N2 | 3 | 0.38±0.02 | 0.45±0.03 | -0.07±0.01 | -15.671 (.004**) |
| N3 | 3 | 0.54±0.03 | 0.62±0.02 | -0.08±0.04 | -3.223 (.084) |
| N4 | 3 | 0.40±0.03 | 0.50±0.05 | -0.10±0.04 | -4.343 (.049*) |
| N5 | 3 | 0.39±0.05 | 0.49±0.06 | -0.11±0.01 | -15.898 (.003**) |
| N6 | 3 | 0.34±0.08 | 0.43±0.16 | -0.09±0.08 | -1.820 (.021) |
| N7 | 3 | 0.50±0.29 | 0.60±0.21 | -0.10±0.13 | -1.383 (.301) |
| N8 | 3 | 0.37±0.03 | 0.46±0.04 | -0.09±0.03 | -5.978 (.027*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.66±0.16 | 0.75±0.13 | -0.08±0.11 | -2.826 (.015*) |
| N1 | 3 | 0.58±0.05 | 0.63±0.02 | -0.05±0.05 | -2.007 (.183) |
| N2 | 3 | 0.71±0.05 | 0.75±0.03 | -0.04±0.03 | -2.153 (.164) |
| N3 | 3 | 0.69±0.03 | 0.75±0.03 | -0.07±0.01 | -15.635 (.004**) |
| N4 | 3 | 0.46±0.03 | 0.53±0.01 | -0.06±0.01 | -8.595 (.013*) |
| N5 | 3 | 0.58±0.17 | 0.65±0.17 | -0.07±0.04 | -3.023 (.094) |
| N6 | 3 | 0.37±0.05 | 0.41±0.07 | -0.05±0.03 | -2.864(.103) |
| N7 | 3 | 0.67±0.31 | 0.74±0.29 | -0.07±0.05 | -2.326 (.147) |
| N8 | 3 | 0.65±0.08 | 0.71±0.09 | -0.06±0.02 | -5.475 (.032*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 5. |
|||||
<실험예 1-4> 다양하게 제조된 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션의 도포 후
피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과 확인
<1-4-1> 피부 표면의 수분보유량 변화 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 수분보유량의 변화를 확인하였다.
그 결과, 하기 표 17과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 17% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 22% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 23% 증가경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 25% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 23% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 수분보유량을 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 15% 증가경향을 나타내어, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 수분보유량을 증가시키는 것을 확인하였다(표 17).
한편, 하기 표 18과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 25% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 26% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 29% 유의하게 증가하였으며, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 31% 증가경향을 보였고, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 피부수분보유량이 약 28% 증가경향을 나타내어, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 수분보유량을 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 17% 증가경향을 나타내어, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 수분보유량을 증가시키는 것을 확인하였다(표 18).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 58.17±6.19 | 67.83±8.92 | -9.65±8.37 | -4.161 (.001**) |
| N9 | 3 | 58.14±5.48 | 70.75±2.57 | -12.61±3.38 | -6.471 (.023*) |
| N10 | 3 | 57.47±4.37 | 70.42±1.24 | -12.94±5.51 | -4.071 (.055) |
| N11 | 3 | 54.34±1.62 | 67.67±3.77 | -13.33±5.24 | -4.408 (.048*) |
| N12 | 3 | 54.59±3.16 | 66.96±6.71 | -12.37±3.75 | -5.716 (.029*) |
| N13 | 3 | 56.46±0.93 | 65.17±3.03 | -8.71±3.54 | -4.267 (.051) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviation: B2,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 5033; N9,testing productsmade from tyndalized fermented milk-cream broth with KCTC 5033; N10,testing productsmade from mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 5033 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N11, testing productsmade from mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 3115 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N12, testing productsmade from mixture, added 10% concentrated fermented broth with KCTC 3202 to fermented milk-cream with KCTC 5033; N13, testing productsmade from fermented milk-cream mixture, mixing fermented milk-cream KCTC 5033, fermented milk-cream with KCTC 3115, fermented milk-cream with KCTC 3162 and fermented milk-cream with KCTC 3635; N, The number of people in group. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 52.89±5.66 | 66.01±7.83 | -13.12±8.37 | -5.651 (.000***) |
| N9 | 3 | 48.27±7.81 | 61.02±9.42 | -12.75±4.80 | -4.604 (.044*) |
| N10 | 3 | 48.26±8.31 | 62.35±6.37 | -14.09±2.07 | -12.029 (.007**) |
| N11 | 3 | 46.98±5.35 | 61.75±9.23 | -14.77±8.68 | -2.947 (.098) |
| N12 | 3 | 54.63±2.33 | 69.74±5.07 | -15.10±6.61 | -3.959 (.053) |
| N13 | 3 | 52.85±2.12 | 61.68±6.13 | -8.83±7.90 | -1.938 (.192) |
| *p<.05 , **p<.01, ***p<.001 Abbreviations were the same as Table 17. |
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<1-4-2> 피부 표면의 유분보유량 변화 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 유분보유량의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 19와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 15% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 17% 증가경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 18% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 17% 증가경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 17% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 유분보유량을 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 13% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 보다는 다소 낮게 피부 표면의 유분보유량을 증가시키는 것을 확인하였다(표 19).
한편, 하기 표 20과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 14% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 14% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 13% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 12% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 유분보유량을 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 9% 증가경향을 나타내어, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 유분보유량을 증가시키는 것을 확인하였다(표 20).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 67.05±6.05 | 77.41±8.03 | -10.35±7.92 | -4.714 (.001**) |
| N9 | 3 | 60.67±3.53 | 71.00±1.67 | -10.33±5.13 | -3.489 (.073) |
| N10 | 3 | 61.33±2.91 | 72.44±2.17 | -11.11±3.50 | -5.496 (.032*) |
| N11 | 3 | 65.62±1.68 | 76.93±6.98 | -11.31±6.24 | -3.140 (.088) |
| N12 | 3 | 65.26±2.38 | 76.26±2.48 | -11.00±4.23 | -4.508 (.046*) |
| N13 | 3 | 62.44±3.86 | 70.63±1.50 | -8.19±3.03 | -4.677 (.043*) |
| *p<.05 , **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 33.88±8.07 | 37.88±7.62 | -4.00±4.84 | -2.978 (.012*) |
| N9 | 3 | 29.56±7.85 | 33.61±7.03 | -4.06±1.00 | -6.992 (.020*) |
| N10 | 3 | 30.89±5.55 | 35.28±5.05 | -4.39±1.21 | -6.305 (.024*) |
| N11 | 3 | 31.61±2.51 | 35.72±1.58 | -4.11±1.08 | -6.566 (.022*) |
| N12 | 3 | 30.28±1.93 | 34.06±3.20 | -3.78±1.46 | -4.494 (.046*) |
| N13 | 3 | 30.33±10.89 | 33.17±9.41 | -2.83±3.69 | -1.332 (.341) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 17. |
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<1-4-3> 피부 표면의 멜라닌지수 변화 및 미백효과 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 멜라닌지수의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 21과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 7% 유의하게 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 9% 감소경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 13% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 10% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 10% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 멜라닌지수를 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 5% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 멜라닌지수를 감소시키는 것을 확인하였다(표 21).
한편, 하기 표 22와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 4% 멜라닌지수가 감소경향을 보인데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 6% 감소경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 9% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 7% 감소경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 8% 감소경향을 보여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 멜라닌지수를 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 4% 감소경향을 보여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 멜라닌지수를 감소시키는 것을 확인하였다(표 22). 또한 피부 표면의 멜라닌지수가 감소되어 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되어졌으며, 더불어피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다(도 1).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 158.74±25.93 | 147.30±33.07 | 11.43±18.03 | 2.286 (.041*) |
| N9 | 3 | 185.56±13.56 | 169.19±7.97 | 16.37±6.80 | 4.167 (.053) |
| N10 | 3 | 172.67±8.11 | 150.00±3.76 | 22.67±4.69 | 8.368 (.014*) |
| N11 | 3 | 182.92±8.34 | 165.25±6.72 | 17.67±4.76 | 6.430 (.023*) |
| N12 | 3 | 159.33±6.77 | 143.31±7.48 | 16.02±2.84 | 9.766 (.010*) |
| N13 | 3 | 170.00±5.03 | 161.78±7.37 | 8.22±2.34 | 6.083 (.026*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 173.38±33.82 | 166.34±33.63 | 7.03±13.76 | 1.843 (.090) |
| N9 | 3 | 163.17±6.05 | 154.06±10.22 | 9.11±5.61 | 2.814 (.107) |
| N10 | 3 | 171.00±10.00 | 156.11±8.06 | 14.89±3.42 | 7.535 (.017*) |
| N11 | 3 | 164.83±8.89 | 153.91±10.18 | 10.93±5.09 | 3.719 (.065) |
| N12 | 3 | 184.33±25.17 | 169.33±32.08 | 15.00±8.72 | 2.980 (.097) |
| N13 | 3 | 211.00±29.42 | 201.67±19.11 | 9.33±24.04 | .672 (.571) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
<1-4-4> 경피수분증발량(TEWL)변화 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 경피수분증발량(TEWL)의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 23과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 24% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 27% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 29% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 26% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 27% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 경피수분증발량(TEWL)을 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 17% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 경피수분증발량(TEWL)이 감소되는 것을 확인하였다(표 23).
한편, 하기 표 24와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 29% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 31% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 35% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 32% 감소경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 31% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 경피수분증발량(TEWL)을 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 24% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 경피수분증발량(TEWL)이 감소되는 것을 확인하였다(표 24).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.40±5.83 | 12.55±3.51 | 3.84±4.45 | 3.112 (.009**) |
| N9 | 3 | 18.58±2.71 | 13.48±1.85 | 5.10±0.89 | 9.894 (.010*) |
| N10 | 3 | 15.67±0.90 | 11.16±1.07 | 4.50±1.16 | 6.745 (.021*) |
| N11 | 3 | 20.57±1.98 | 15.15±1.66 | 5.42±0.97 | 9.667 (.011*) |
| N12 | 3 | 20.23±1.95 | 14.81±3.48 | 5.42±1.68 | 5.594 (.031*) |
| N13 | 3 | 18.61±2.30 | 15.44±1.92 | 3.17±1.25 | 4.371 (.049*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.08±7.10 | 11.38±3.62 | 4.69±5.57 | 3.041 (.010*) |
| N9 | 3 | 16.68±3.35 | 11.48±1.56 | 5.20±1.83 | 4.934 (.039*) |
| N10 | 3 | 16.02±3.71 | 10.48±2.40 | 5.53±1.37 | 7.016 (.020*) |
| N11 | 3 | 15.33±2.79 | 10.50±1.49 | 4.84±2.92 | 2.870 (.103) |
| N12 | 3 | 17.43±1.57 | 12.11±1.54 | 5.32±1.71 | 5.375 (.032*) |
| N13 | 3 | 18.91±2.27 | 14.14±2.26 | 4.77±1.04 | 5.337 (.033*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
<1-4-5> 피부 표면의 거칠기 변화 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 거칠기의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 25와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 8% 피부 거칠기가 감소경향을 보인데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 10% 감소경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 12% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 11% 감소경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 10% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 거칠기를 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 6% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 거칠기를 감소시키는 것을 확인하였다(표 25).
한편, 하기 표 26과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 10% 유의하게 피부 거칠기가 감소한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 12% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 13% 감소경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 13% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 11% 유의하게 감소하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 표면의 거칠기를 감소시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 6% 감소경향을 보여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 표면의 거칠기를 감소시키는 것을 확인하였다(표 26). 또한 거칠기가 감소되는 것과 동시에 피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다(도 2).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 181.41±62.06 | 166.82±60.85 | 14.58±30.12 | 1.746 (.106) |
| N9 | 3 | 159.01±20.95 | 142.78±14.60 | 16.23±11.23 | 2.504 (.130) |
| N10 | 3 | 165.67±13.22 | 146.11±20.35 | 19.56±7.13 | 4.749 (.042*) |
| N11 | 3 | 155.38±14.20 | 138.39±13.84 | 16.99±7.27 | 4.047 (.056) |
| N12 | 3 | 162.71±10.40 | 146.93±12.52 | 15.79±4.78 | 5.725 (.030*) |
| N13 | 3 | 168.22±20.05 | 158.20±20.82 | 10.02±2.48 | 6.996 (.020*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 288.87±76.11 | 261.19±88.11 | 27.68±30.24 | 3.300 (.006**) |
| N9 | 3 | 285.33±50.89 | 252.50±57.29 | 32.83±11.41 | 4.986 (.038*) |
| N10 | 3 | 272.00±28.23 | 235.83±46.46 | 36.17±18.89 | 3.316 (.080) |
| N11 | 3 | 255.44±6.87 | 221.78±17.29 | 33.67±10.77 | 5.412 (.033*) |
| N12 | 3 | 226.11±17.49 | 201.18±9.07 | 24.93±8.60 | 5.021 (.038*) |
| N13 | 3 | 224.67±22.89 | 210.83±16.65 | 13.83±7.01 | 3.420 (.076) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
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<1-4-6> 피부 탄력도 변화 및 주름 개선 확인
상기 <실시예 1-6>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 탄력도의 변화를 측정하고 시험 전후 사진촬영을 통해 주름의 변화에 대한 육안평가를 하였다.
그 결과, 하기 표 27과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 28% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 32% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 32% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 33% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 31% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 탄력도를 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 19% 증가경향을 보여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 탄력도를 증가시키는 것을 확인하였다(표 27).
한편, 하기 표 28과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 간헐멸균된 유크림 발효액(N9)은 약 14% 증가경향, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N10)은 약 17% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액(N11)은 약 21% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액(N12)은 약 19% 유의하게 증가하여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다 피부 탄력도를 증가시키는 데 더 우수한 것을 확인하였다. 한편, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액(N13)은 약 10% 증가경향을 보여, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮게 피부 탄력도를 증가시키는 것을 확인하였다(표 28).
또한 탄력도 증가와 더불어 다양하게 나타난 얼굴과 목의 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워지고 늘어졌던 피부가 들어 올려져 팽팽하게 보이는 것을 육안으로 확인하였다(도 3).
따라서, 본 발명의 간헐멸균된 유크림 발효액, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토바실러스 람노서스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 락토코커스 락티스 발효농축액 10 중량%의 혼합 유크림 발효액, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 90 중량%와 비피도박테리움 비피덤 발효농축액 10 중량%의 혼합 발효액 등으로 다양하게 제조된 유크림 발효액이 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량의 증가, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백효과, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기의 감소, 피부 탄력도 증가, 및 주름깊이의 감소 등에서 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)에 비해 유의적으로 더 높게 변화함으로써, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에 더 높게 기여하는 것을 확인하였다.
또한, 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 25 중량%에 락토코커스 락티스 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 가세리 유크림 발효액 25 중량%, 락토바실러스 델브루에키 유크림 발효액 25 중량%를 혼합한 혼합 유크림 발효액은 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량의 증가, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백효과, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기의 감소, 피부 탄력도 증가 및 주름깊이의 감소 등에서 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우보다는 다소 낮은 변화율을 보였으나, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에는 기여하는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.39±0.15 | 0.51±0.16 | -0.11±0.11 | -3.624 (.003**) |
| N9 | 3 | 0.30±0.04 | 0.39±0.02 | -0.09±0.02 | -8.796 (.012*) |
| N10 | 3 | 0.31±0.03 | 0.41±0.06 | -0.10±0.03 | -6.064 (.026*) |
| N11 | 3 | 0.35±0.06 | 0.47±0.07 | -0.12±0.03 | -5.952 (.027*) |
| N12 | 3 | 0.37±0.03 | 0.49±0.02 | -0.11±0.04 | -4.536 (.045*) |
| N13 | 3 | 0.34±0.12 | 0.41±0.09 | -0.07±0.09 | -1.278 (.330) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.66±0.16 | 0.75±0.13 | -0.08±0.11 | -2.826 (.015*) |
| N9 | 3 | 0.72±0.20 | 0.82±0.11 | -0.10±0.09 | -1.873 (.202) |
| N10 | 3 | 0.70±0.08 | 0.82±0.09 | -0.12±0.08 | -5.352 (.033*) |
| N11 | 3 | 0.68±0.05 | 0.83±0.06 | -0.14±0.02 | -10.022 (.009**) |
| N12 | 3 | 0.64±0.05 | 0.76±0.02 | -0.12±0.03 | -6.507 (.023*) |
| N13 | 3 | 0.67±0.31 | 0.74±0.29 | -0.07±0.05 | -2.326 (.146) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 17. |
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<실시예 2> 다양한 유크림배지 발효액 준비
<실시예 2-1> 다양한 유크림배지 발효액의 제조
유지방이 35% 이상 함유된 유크림 99 중량%에 효모추출물(Yeast extract, Becton, Dickinson & Co, Calif., U.S.A)1 중량%를 혼합한 유크림효모 배지 1ℓ에 락토바실러스 람노서스 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 유크림효모 발효액(P1)을 수득하였다.
또한, 유지방이 35% 이상 함유된 유크림 95 중량%에 Lactobacilli MRS broth(Becton, Dickinson & Co, Calif., U.S.A)5 중량%를 혼합한 유크림MRS 배지 1ℓ에 락토바실러스 람노서스 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 유크림MRS발효액(P2)을 수득하였다.
<실시예 2-2> 다양한 유크림배지 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형 준비
상기 <실시예 2-1>에서 수득한 유크림효모 발효액, 유크림MRS 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형을 하기와 같이 제조하였다(표 29 내지 표 30).
또한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션은 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775) 상기 <실시예 1-2>의 락토바실러스 람노서스 유크림을 함유한 에멀션 및 로션(B2)과 동일하며, 상기 다양한 유크림 발효액 에멀션 및 로션의 대조군으로 이용하였다.
| Ingredient | Unit (g) | |
| A | Olive liquid | 1 |
| Napre | 1 | |
| W | Fermented sterilized milk cream(P1, P2) | 80 |
| Sterile water | 18 | |
| Total weight | 100 | |
| Abbreviation: W, water base (P1,fermented milk-cream & yeast broth with KCTC 5033; P2, fermented milk-cream & MRS broth with KCTC 5033);A, additiveswere the same as Table 1. | ||
| Ingredient | Unit(g) | ||
| Lotion | W | Fermented sterilized milk cream(P1, P2) | 75 |
| O | Grape seed oil | 19 | |
| Olive derived wax | 5 | ||
| A | Napre | 1 | |
| Total weight | 100 | ||
| Abbreviation: W, water base weresame as Table 30; O, oil base & A, additives were the same as Table 2. | |||
<실험예 2> 다양한 유크림배지 발효액을 함유한 에멀션 및 로션을 도포한 후의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과 확인
<2-1> 피부 표면의 수분보유량 변화 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 수분보유량의 변화를 확인하였다.
그 결과, 하기 표 31과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 17% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 16% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 18% 유의하게 수분보유량이 증가하였다(표 31).
한편, 하기 표 32와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 25% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 24% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 25% 수분보유량이 증가경향을 보였다(표 32).
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 수분보유량이 증가되는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 58.17±6.19 | 67.83±8.92 | -9.65±8.37 | -4.161 (.001**) |
| P1 | 3 | 60.32±4.03 | 70.06±1.17 | -9.74±3.22 | -5.238 (.035*) |
| P2 | 3 | 63.66±5.90 | 74.94±9.07 | -11.29±4.37 | -4.470 (.047*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviation: B2,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 5033; P1,testing productsmade from fermented milk-cream & yeast broth with KCTC 5033; P2,testing productsmade from fermented milk-cream & MRS broth with KCTC 5033; N, The number of people in group. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 52.89±5.66 | 66.01±7.83 | -13.12±8.37 | -5.651 (.000***) |
| P1 | 3 | 54.94±1.15 | 68.11±3.45 | -13.17±4.42 | -5.164 (.036*) |
| P2 | 3 | 53.32±3.93 | 66.75±2.08 | -13.43±5.85 | -3.978 (.058) |
| *p<.05 , **p<.01, ***p<.001 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<2-2> 피부 표면의 유분보유량 변화 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 유분보유량의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 33과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 15% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 14% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 14% 유의하게 유분보유량이 증가하였다(표 33).
한편, 하기 표 34와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 11% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 11% 유분보유량이 증가 경향을 보였다(표 34).
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 유분보유량을 증가시키는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 67.05±6.05 | 77.41±8.03 | -10.35±7.92 | -4.714 (.001**) |
| P1 | 3 | 64.61±4.11 | 73.78±1.26 | -9.17±3.69 | -4.308 (.049*) |
| P2 | 3 | 66.04±0.86 | 75.06±2.60 | -9.01±3.45 | -4.524 (.046*) |
| *p<.05 , **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 33.88±8.07 | 37.88±7.62 | -4.00±4.84 | -2.978 (.012*) |
| P1 | 3 | 38.00±4.04 | 42.33±4.09 | -4.33±1.44 | -5.200 (.035*) |
| P2 | 3 | 29.56±7.63 | 32.94±7.50 | -3.39±1.46 | -4.031 (.056) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<2-3> 피부 표면의 멜라닌지수 변화 및 미백효과 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 멜라닌지수의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 35와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 7% 유의하게 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 7% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 9% 유의하게 피부 표면의 멜라닌지수가 감소하였다(표 35).
한편, 하기 표 36과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 4% 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 4% 감소경향, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 5% 유의하게 피부 표면의 멜라닌지수가 감소하였다(표 36).
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 멜라닌지수를 감소시키는 것을 확인하였다. 또한 피부 표면의 멜라닌지수가 감소되어 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되어졌으며, 더불어피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 158.74±25.93 | 147.30±33.07 | 11.43±18.03 | 2.286 (.041*) |
| P1 | 3 | 155.11±6.09 | 143.96±9.20 | 11.15±3.99 | 4.838 (.040*) |
| P2 | 3 | 164.38±29.33 | 151.55±28.24 | 12.82±3.40 | 6.525 (.023*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 173.38±33.82 | 166.34±33.63 | 7.03±13.76 | 1.843 (.090) |
| P1 | 3 | 170.61±15.05 | 163.61±10.67 | 7.00±6.25 | 1.939 (.192) |
| P2 | 3 | 174.50±7.00 | 166.17±5.13 | 8.33±2.31 | 6.250 (.025*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<2-4> 경피수분증발량(TEWL)변화 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 경피수분증발량(TEWL)의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 37과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 24% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 24% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 23% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소하였다(표 37).
한편, 하기 표 38과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 29% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 28% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 29% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소하였다(표 38).
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 경피수분증발량(TEWL)을 감소시키는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.40±5.83 | 12.55±3.51 | 3.84±4.45 | 3.112 (.009**) |
| P1 | 3 | 16.32±1.22 | 12.44±1.23 | 3.88±0.69 | 9.749 (.011*) |
| P2 | 3 | 15.27±2.71 | 11.82±0.65 | 3.44±2.79 | 7.521 (.017*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.08±7.10 | 11.38±3.62 | 4.69±5.57 | 3.041 (.010*) |
| P1 | 3 | 16.57±1.36 | 11.99±2.44 | 4.58±1.63 | 4.860 (.040*) |
| P2 | 3 | 18.00±2.25 | 12.72±1.20 | 5.28±1.82 | 5.018 (.038*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<2-5> 피부 표면의 거칠기 변화 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 거칠기의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 39와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 8% 피부 거칠기가 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 8% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 8% 피부 거칠기가 감소경향을 보였다(표 39).
한편, 하기 표 40과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 10% 유의하게 피부 거칠기가 감소한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 10% 유의하게 감소, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 10% 피부 거칠기가 감소경향을 보였다(표 40).
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 표면의 거칠기를 감소시키는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 181.41±62.06 | 166.82±60.85 | 14.58±30.12 | 1.746 (.106) |
| P1 | 3 | 185.33±35.76 | 169.74±38.42 | 15.59±6.12 | 4.416 (.048*) |
| P2 | 3 | 189.78±49.50 | 173.89±37.79 | 15.89±11.74 | 2.343 (.144) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 288.87±76.11 | 261.19±88.11 | 27.68±30.24 | 3.300 (.006**) |
| P1 | 3 | 324.00±21.59 | 291.44±20.42 | 32.56±7.95 | 7.094 (.019*) |
| P2 | 3 | 268.33±54.52 | 242.83±47.37 | 25.50±14.31 | 3.087 (.091) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<2-6> 피부 탄력도 변화 및 주름 개선 확인
상기 <실시예 2-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 탄력도의 변화를 측정하고 시험 전후 사진촬영을 통해 주름의 변화에 대한 육안평가를 하였다.
그 결과, 하기 표 41과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 28% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 28% 유의하게 증가, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 28% 유의하게 피부 탄력도가 증가하였다(표 41).
한편, 하기 표 42와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 락토바실러스 람노서스 유크림효모 발효액(P1)은 약 12% 증가경향을, 락토바실러스 람노서스 유크림MRS 발효액(P2)은 약 13% 피부 탄력도가 증가경향을 보였다(표 42).
또한 다양하게 나타난 얼굴과 목의 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워지고 늘어졌던 피부가 들어 올려져 팽팽하게 보이는 것을 육안으로 확인하였다.
이로써 다양한 유크림배지 발효액들도 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우와 유사하게 피부 탄력도를 증가시킬 뿐 아니라 육안평가를 통해 주름의 깊이를 감소시키는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명의 다양한 유크림배지 발효액들이 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량의 증가, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백효과, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기의 감소, 피부 탄력도 증가, 및 주름깊이의 감소 등에서 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포하였을 경우와 유사하게 변화함으로써, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에기여하는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.39±0.15 | 0.51±0.16 | -0.11±0.11 | -3.624 (.003**) |
| P1 | 3 | 0.53±0.04 | 0.68±0.01 | -0.15±0.04 | -6.538 (.023*) |
| P2 | 3 | 0.47±0.08 | 0.60±0.09 | -0.13±0.02 | -9.466 (.011*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.66±0.16 | 0.75±0.13 | -0.08±0.11 | -2.826 (.015*) |
| P1 | 3 | 0.54±0.03 | 0.61±0.06 | -0.07±0.03 | -3.662 (.067) |
| P2 | 3 | 0.70±0.06 | 0.79±0.08 | -0.09±0.04 | -3.549 (.071) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 31. |
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<실시예 3> 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하거나 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균 복용과 동시에 락토바실러스 람노서스유크림 발효액 도포의 준비
<실시예 3-1> 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균 캡슐의 제조
상기 <실시예 1-5>와 동일한 방법으로 Lactobacilli MRS, 또는 skim milk 1ℓ에 전배양한 락토바실러스 람노서스(KCTC 5033)를 1× 106cfu/㎖ 이상을 접종한 후, 항온 37℃ 배양기에서 24시간이상 배양하여 락토바실러스 람노서스 발효액을 수득하였다.
그런 다음, 락토바실러스 람노서스 발효액을 60℃이하에서 1시간 이상 가온을 실시하여 감압농축한 다음 동결건조시켜 분말하여 수득한 것을 락토바실러스 람노서스 생균체로 사용하였다.
또한, 상기 락토바실러스 람노서스 발효액의 생균을 사균 하기 위하여 80℃ 이상에서 일정한 기압으로 15분 이상 가온하는 간헐멸균(Tyndallization)을 시행한 후 60℃이하에서 1시간 이상 가온을 실시하여 감압농축한 다음 동결건조시켜 분말하여 수득한 것을 락토바실러스 람노서스 사균체로 사용하였다.
본 실험을 위한 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균은 생균체 50 중량% + 락토바실러스 람노서스 사균체 50 중량%를 혼합한 후 캡슐에 충전하여 제조하되, 용량은 500mg/capsule, 한 캡슐 당 생균수는 5.0×1010CFU 이상으로, 사균수는 5.0×1010CFU 이상으로 정하여 총 중량 10.0×1010CFU 이상으로 배합하였다.
또한 대조군으로 경구용 락토바실러스 람노서스 생균은 락토바실러스 람노서스 생균체 100 중량%으로 캡슐에 충전하되, 용량은 500mg/capsule, 한 캡슐 당 생균수는 10.0×1010CFU 이상으로 정하였으며, 경구용 락토바실러스 람노서스 사균은 락토바실러스 람노서스 사균체 100 중량%으로 캡슐에 충전하되, 용량은 500mg/capsule, 한 캡슐 당 사균수는 10.0×1010CFU 이상으로 정하여 각각 수득하였다.
아울러 실험을 위한 대조군과 혼합균 복용과 동시에 도포하는 유크림 발효액으로, 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775), 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 이용하였다. 상기 락토바실러스 람노서스는 유지방이 35% 이상 함유된 유크림에 1ℓ에 전배양한 락토바실러스 람노서스 균 주 1× 106cfu/㎖를 접종한 후, 항온 37 배양기에서 72시간 배양하여, 유크림 발효액을 수득하였다.
<실시예 3-2> 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션 제형 준비
상기 <실시예 3-1>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 혼합균 복용과 동시에 도포할 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액을 함유한 에멀션 및 로션(B2)은 종래 문헌에 기재된 방법에 따라(10-2016-0166775), 상기 <실시예 1-1>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 80 중량%와 증류수 18 중량%을 혼합한 수성 베이스에 올리브 리퀴드 1 중량%, 나프리 1 중량%를 첨가물로 배합하여 에멀션을 제조하였으며, 상기 <실시예 1-1>에서 수득한 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액 75 중량%를 수성 베이스, 포도씨 오일 18 중량% 및 올리브 유래 왁스 5 중량%를 유성 베이스로 하여 유화한 후 나프리 1 중량%를 배합하여 로션을 제조하였다.
<실험예 3> 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하거나 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균 복용과 동시에 유크림 발효액을 도포한 후의 피부 노화의 예방 및 개선, 피부 손상의 예방 및 개선 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부 미백 증진효과 확인
<실험예 3-1> 피부 표면의 수분보유량 변화 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 수분보유량의 변화를 확인하였다.
그 결과, 하기 표 43과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 17% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 6% 증가경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 5% 증가경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 11% 유의하게 수분보유량이 증가하였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 19% 유의하게 수분보유량이 증가한 것을 확인하였다(표 43).
한편, 하기 표 44와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 25% 유의하게 수분보유량이 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 11% 유의하게 증가, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 10% 유의하게 증가, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 17% 증가경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 26% 유의하게 수분보유량이 증가한 것을 확인하였다(표 44).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 58.17±6.19 | 67.83±8.92 | -9.65±8.37 | -4.161 (.001**) |
| R1 | 3 | 59.26±4.81 | 62.93±2.83 | -3.67±1.98 | -3.209 (.085) |
| R2 | 3 | 60.06±0.35 | 63.28±1.49 | -3.22±1.56 | -3.572 (.070) |
| R3 | 3 | 45.96±3.71 | 59.58±0.89 | -6.01±2.13 | -4.885 (.039*) |
| R4 | 3 | 62.44±6.10 | 74.12±9.63 | -11.68±3.86 | -5.234 (.035*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviation: B2,testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 5033; R1, ate oral L. rhamnosus,live cells; R2, ate oral L. rhamnosus, dead cells; R3, ate oral L. rhamnosus,mixed cells; R4, ate oral L. rhamnosus, mixed cells and applied the testing productsmade from fermented milk cream with KCTC 5033with on skin.; N, The number of people in group. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 52.89±5.66 | 66.01± 7.83 | -13.12±8.37 | -5.651 (.000***) |
| R1 | 3 | 60.64±6.73 | 67.60±6.45 | -6.96±2.61 | -4.613 (.044*) |
| R2 | 3 | 58.67±1.29 | 64.32±1.75 | -5.65±2.11 | -4.643 (.043*) |
| R3 | 3 | 49.30±3.35 | 57.67±6.54 | -8.37±5.41 | -2.679 (.116) |
| R4 | 3 | 53.08±4.15 | 67.00±3.18 | -13.92±4.46 | -5.408 (.033*) |
| *p<.05 , ***p<.001 Abbreviations were the same as Table 43. |
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<실험예 3-2> 피부 표면의 유분보유량 변화 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 유분보유량의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 45와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 15% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 4% 증가경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 4% 증가경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 9% 증가경향을 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 19% 유의하게 유분보유량이 증가하였다(표 45).
한편, 하기 표 46과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 유분보유량이 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 4% 유의하게 증가, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 4% 유의하게 증가, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 7% 유의하게 증가하였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 13% 유의하게 유분보유량이 증가하였다(표 46).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 67.05±6.05 | 77.41±8.03 | -10.35±7.92 | -4.714 (.001**) |
| R1 | 3 | 61.89±2.12 | 64.19±2.97 | -2.30±2.17 | -1.836 (.208) |
| R2 | 3 | 61.00±5.04 | 63.33±2.73 | -2.33±3.06 | -1.323 (.317) |
| R3 | 3 | 63.33±6.08 | 68.76±4.19 | -5.42±2.53 | -3.709 (.066) |
| R4 | 3 | 61.22±1.87 | 73.04±2.13 | -11.81±2.33 | -8.777 (.013*) |
| *p<.05 , **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 33.88±8.07 | 37.88±7.62 | -4.00±4.84 | -2.978 (.012*) |
| R1 | 3 | 28.11±3.02 | 29.17±2.64 | -1.06±0.40 | -4.578 (.045*) |
| R2 | 3 | 28.00±3.50 | 29.03±3.76 | -1.03±0.30 | -5.939 (.027*) |
| R3 | 3 | 42.00±2.18 | 45.10±2.36 | -3.10±0.86 | -6.243 (.025*) |
| R4 | 3 | 37.83±5.06 | 42.83±3.88 | -5.00±1.50 | -5.774 (.029*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 43. |
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<실험예 3-3> 피부 표면의 멜라닌지수 변화 및 미백효과 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 멜라닌지수의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 47과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 7% 유의하게 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 2% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 3% 감소경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 7% 감소경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 13% 유의하게 멜라닌지수가 감소하였다(표 47).
한편, 하기 표 48과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 4% 멜라닌지수가 감소한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 1% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 1% 감소경향을 보였고, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 4% 유의하게 감소하였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 9% 유의하게 멜라닌지수가 감소하였다(표 48). 또한 피부 표면의 멜라닌지수가 감소되어 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되어졌으며, 더불어피부의 탄력도 증가한 것을 육안으로 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 158.74±25.93 | 147.30±33.07 | 11.43±18.03 | 2.286 (.041*) |
| R1 | 3 | 148.81±5.67 | 145.56±3.93 | 3.26±1.99 | 2.839 (.105) |
| R2 | 3 | 175.44±13.27 | 170.22±11.55 | 5.22±2.41 | 3.751 (.064) |
| R3 | 3 | 188.89±15.22 | 176.19±9.99 | 12.70±5.80 | 3.796 (.063) |
| R4 | 3 | 175.44±19.17 | 153.44±16.06 | 22.00±5.67 | 6.724 (.021*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 173.38±33.82 | 166.34±33.63 | 7.03±13.76 | 1.843 (.090) |
| R1 | 3 | 158.61±5.86 | 156.54±4.40 | 2.07±1.49 | 2.408 (.138) |
| R2 | 3 | 180.17±6.93 | 177.61±5.22 | 2.56±2.40 | 1.851 (.205) |
| R3 | 3 | 179.50±10.44 | 173.00±11.72 | 6.50±2.18 | 5.166 (.036*) |
| R4 | 3 | 169.50±7.26 | 155.09±10.89 | 14.41±3.73 | 6.695 (.022*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 43. |
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<실험예 3-4> 경피수분증발량(TEWL)변화 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 경피수분증발량(TEWL)의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 49와 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 24% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 8% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 10% 감소경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 17% 유의하게 감소하였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 26% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소하였다(표 49).
한편, 하기 표 50과 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 29% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 12% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 13% 감소경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 19% 감소경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 32% 유의하게 경피수분증발량(TEWL)이 감소하였다(표 50).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.40±5.83 | 12.55±3.51 | 3.84±4.45 | 3.112 (.009**) |
| R1 | 3 | 14.02±1.22 | 12.90±0.89 | 1.12±0.67 | 2.911 (.101) |
| R2 | 3 | 15.01±1.72 | 13.58±0.57 | 1.43±1.15 | 2.165 (.163) |
| R3 | 3 | 14.67±1.73 | 12.16±1.82 | 2.50±0.94 | 4.589 (.044*) |
| R4 | 3 | 14.21±1.14 | 10.52±0.62 | 3.69±1.34 | 4.774 (.041*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 16.08±7.10 | 11.38±3.62 | 4.69±5.57 | 3.041 (.010*) |
| R1 | 3 | 16.04±3.15 | 14.15±2.90 | 1.90±1.02 | 3.220 (.084) |
| R2 | 3 | 18.08±0.55 | 15.68±1.55 | 2.41±1.10 | 3.789 (.063) |
| R3 | 3 | 16.02±0.30 | 12.98±1.82 | 3.03±1.53 | 3.427 (.076) |
| R4 | 3 | 17.37±1.08 | 11.82±0.23 | 5.55±1.02 | 9.415 (.011*) |
| *p<.05 Abbreviations were the same as Table 43. |
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<실험예 3-5> 피부 표면의 거칠기 변화 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 표면의 거칠기의 변화를 측정하였다.
그 결과, 하기 표 51과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 8% 피부 거칠기가 감소경향을 보인데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 2% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 2% 감소경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 5% 감소경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 10% 거칠기가 감소경향을 보였다(표 51).
한편, 하기 표 52와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 10% 유의하게 피부 거칠기가 감소경향을 보인데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 2% 감소경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 2% 감소경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 5% 감소경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 11% 피부 거칠기가 감소경향을 보였다(표 52).
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 181.41±62.06 | 166.82±60.85 | 14.58±30.12 | 1.746 (.106) |
| R1 | 3 | 182.22±5.40 | 178.51±6.61 | 3.71±1.84 | 2.000 (.073) |
| R2 | 3 | 199.22±58.74 | 196.00±60.05 | 3.22±1.35 | 4.143 (.054) |
| R3 | 3 | 188.67±22.06 | 179.50±26.44 | 9.16±5.73 | 2.769 (.109) |
| R4 | 3 | 149.34±23.45 | 133.78±19.48 | 15.56±6.85 | 3.934 (.059) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
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| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 288.87±76.11 | 261.19±88.11 | 27.68±30.24 | 3.300 (.006**) |
| R1 | 3 | 227.00±28.60 | 221.61±28.78 | 5.39±2.87 | 3.248 (.083) |
| R2 | 3 | 219.33±55.78 | 214.93±51.57 | 4.41±4.43 | 1.725 (.227) |
| R3 | 3 | 264.35±38.25 | 251.07±37.38 | 13.28±8.30 | 2.770 (.109) |
| R4 | 3 | 228.67±15.00 | 202.50±3.22 | 26.17±11.84 | 3.829 (.062) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
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<3-6> 피부 탄력도 변화 및 주름 개선 확인
상기 <실시예 3-1> 제조한 경구용 락토바실러스 람노서스 생균, 사균 또는 혼합균을 복용하거나 혼합균 복용과 동시에 <실시예 3-2>에서 제조한 에멀션 및 로션을 도포한 후, 시험 전후 피부 탄력도의 변화를 측정하고 시험 전후 사진촬영을 통해 주름의 변화에 대한 육안평가를 하였다.
그 결과, 하기 표 53과 같이, 안면피부의 경우 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 28% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 5% 증가경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 7% 증가경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 21% 증가경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 32% 유의하게 피부 탄력도가 증가하였다(표 53).
한편, 하기 표 54와 같이 목피부의 경우에도 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)이 약 12% 유의하게 피부 탄력도가 증가한데 비하여, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 캡슐을 복용한 경우(R1) 약 2% 증가경향을, 사균 캡슐을 복용한 경우(R2)에는 약 5% 증가경향을, 혼합균 캡슐을 복용한 경우(R3)에는 약 7% 증가경향을 각각 보였다. 반면, 경구용 락토바실러스 람노서스 혼합균을 복용하는 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우(R4)에는 약 13% 유의하게 피부 탄력도가 증가하였다(표 54). 또한 다양하게 나타난 얼굴과 목의 굵고 가는 주름들의 깊이가 채워지고 늘어졌던 피부가 들어 올려져 팽팽하게 보이는 것을 육안으로 확인하였다.
따라서, 경구용 락토바실러스 람노서스 생균 또는 사균을 복용한 경우에는 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포한 경우에는 미치지 못하나 미미하게나마 피부 손상 또는 피부노화의 예방 및 개선에 긍정적인 영향을 미쳤으며, 혼합균을 복용한 경우에는 이보다 월등히 높은 변화를 나타내어 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에다소 기여하는 것을 확인하였다.
특히 혼합균 복용과 동시에 유크림 발효액을 함유한 로션을 도포한 경우에는 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포하였을 경우보다 안면피부 및 목 피부 표면의 수분보유량 및 유분보유량의 증가, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤이 개선되는 것과 동시에 기미, 잡티, 노인성 검은 반점 등이 옅어지거나 개선되는 미백효과, 경피수분증발량(TEWL) 및 피부 거칠기의 감소, 피부 탄력도 증가, 및 주름깊이의 감소 등에서 본 발명자들의 종래 문헌에 기재된(10-2016-0166775) 락토바실러스 람노서스 유크림 발효액(B2)을 도포하였을 경우보다 유의적으로 더 높게 변화함으로써, 피부 노화, 피부 손상 또는 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선과 피부미백 효과에 더 높게 기여하는 것을 확인하였다.
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.39±0.15 | 0.51±0.16 | -0.11±0.11 | -3.624 (.003**) |
| R1 | 3 | 0.38±0.01 | 0.40±0.02 | -0.02±0.01 | -2.479 (.131) |
| R2 | 3 | 0.40±0.09 | 0.42±0.11 | -0.03±0.01 | -3.694 (.066) |
| R3 | 3 | 0.41±0.06 | 0.48±0.03 | -0.07±0.03 | -4.185 (.053) |
| R4 | 3 | 0.29±0.08 | 0.38±0.12 | -0.09±0.04 | -4.304 (.049*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
|||||
| Group | N | Measurement (Pean±SD) |
Analysis of variance | ||
| Before | After | t1-t2 (P±SD) | t (p) | ||
| B2 | 13 | 0.66±0.16 | 0.75±0.13 | -0.08±0.11 | -2.826 (.015*) |
| R1 | 3 | 0.69±0.03 | 0.70±0.04 | -0.02±0.01 | -4.048 (.056) |
| R2 | 3 | 0.71±0.05 | 0.75±0.03 | -0.03±0.03 | -2.157 (.164) |
| R3 | 3 | 0.59±0.02 | 0.63±0.04 | -0.04±0.02 | -3.617 (.069) |
| R4 | 3 | 0.47±0.06 | 0.53±0.06 | -0.06±0.02 | -4.960 (.038*) |
| *p<.05, **p<.01 Abbreviations were the same as Table 43. |
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Claims (22)
- 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림(milk-cream) 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230) 및 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지에 상기락토코커스속(Lactococcus spp.), 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주로 발효시킨 것을 상기 유크림 발효액에 더 첨가하거나, 상기 발효시킨 것을 간헐멸균(Tyndallization)후 감압농축하여 유크림 발효액에 더 첨가하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.)은 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 델브루에키 (Lactobacillus delbrueckiisubsp. bulgaricus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 및 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)은 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 락토코커스 속(Lactococcus spp.)은 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유크림 발효액은 상기 유크림 발효액을 간헐멸균(Tyndallization) 처리, 간헐멸균(Tyndallization)된 유크림 발효액을 추가 처리 및 감압농축된 유산균 발효액의 추가 처리로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 처리가 수행된 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유크림 발효액은, 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), 효모추출물(Yeast extract), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230), 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지에유크림을 처리한 후 수득한 유크림배지에 상기 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주로 발효시킨 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유크림(milk-cream)은 원유나 우유에서 분리한 유지방분으로서, 유지방분이 30~40%인 생크림(Single cream), 유지방분이 3~10%인 저지방크림(Extra light cream), 유지방분이 10~20%인 유크림(Light cream), 유지방분이 20~30%인 테이블크림(Table cream), 유지방분이 48~60%인 더블크림(Double cream), 유지방분이 18%이상인 테이블크림(Table cream), 사워크림(Sour cream), 휘핑크림(Whipping cream) 및 유지방분이 50%이상인 분말유크림으로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제8항에 있어서, 상기 우유(milk)는 원유, 무지방 우유, 유지방 함량이 1 중량부 이하로 첨가된 저지방 및 탈지유로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하며, 상기 우유는 젖소(cow), 양(sheep), 산양(goat), 말(horse), 당나귀(donkey), 물소(water buffalo), 또는 낙타(camel) 등 포유류의 젖 유래인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 피부 노화는 피부 표면의 수분보유량 증가, 유분보유량의 증가, 경피수분증발량(TEWL)의 감소, 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화, 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로 노화가 예방 또는 개선되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서,상기 피부 손상은 피부 표면의 수분보유량 증가, 유분보유량의 증가 및 경피수분증발량(TEWL)의 감소, 피부 거칠기의 감소, 피부 유연성 강화로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과로피부 감수성을 낮추고 피부 장벽의 손상의예방 또는 개선되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 피부 미백은 기미, 잡티 및 노인성 검은 반점의 개선, 피부 표면의 멜라닌 지수 감소 및 피부 톤 개선으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 효과인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 경구용 또는 피부 도포용인 것을 특징으로 하는조성물.
- 제13항에 있어서, 상기 경구용은 생균 또는 사균인 균주를 이용하는 것을 특징으로 하는조성물.
- 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 유크림(milk-cream) 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의 예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 피부 외용제.
- 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주의 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화의 예방 및 개선용; 피부 손상의예방 및 개선용; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선용; 및 피부 미백용으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 식품 조성물.
- 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주를 유크림 배지에서 배양하는 단계;를 포함하는, 피부 노화의 예방 및 개선 효과; 피부 손상의 예방 및 개선 효과; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선 효과; 및 피부 미백 효과를 갖는 유크림 발효액 제조 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 방법은, 상기 유크림 발효액을 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230), 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지로 배양하는 단계;를 더 포함하는, 피부 노화의 예방 및 개선 효과; 피부 손상의 예방 및 개선 효과; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선 효과; 및 피부 미백 효과를 갖는 유크림 발효액 제조 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 유크림 배지에서 배양된 락토코커스 속(Lactococcus spp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus spp.) 및 비피도박테리움 속(Bifidobacterium spp.)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 균주를 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), Lactobacilli MRS 배지, LB(lysogeny broth) 배지, R2A 배지(MB-R2230), 카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 배지에서 배양하여 감압농축하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부노화의 예방 및 개선효과; 피부손상의 예방 및 개선효과; 피부 탄력 저하 및 주름의 예방 및 개선효과; 및 피부미백효과를 갖는 유크림 발효액 제조 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 방법은, 상기 유크림 발효액에 간헐멸균(Tyndallization) 처리, 상기 유크림 발효액에 간헐멸균(Tyndallization)된 유크림 발효액을 처리 및 감압농축된 유산균 발효액처리로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 처리 단계;가 더 포함되는 것을 특징으로 하는 유크림 발효액 제조 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 유크림 배지는 유크림(milk-cream), 우유(milk), 스킴밀크(skim-milk), 효모추출물(Yeast extract), MRS broth, LB 배지, R2A 배지,카제인가수분해물(casamino acid) 포함 배지 및 일반 유산균 발효용 상업용 배지 군에서 선택된 1종 이상을 유크림에 처리한 후 수득한 유크림 배지인 것인 제조 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 조성물을 캡슐화하여 경구용으로 제조하는 단계;를 포함하는, 제조 방법.
Priority Applications (2)
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|---|---|---|---|
| KR1020170142730A KR102015180B1 (ko) | 2017-10-30 | 2017-10-30 | 유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 |
| PCT/KR2018/011110 WO2019059668A2 (ko) | 2017-09-22 | 2018-09-20 | 유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 피부용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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| KR1020170142730A KR102015180B1 (ko) | 2017-10-30 | 2017-10-30 | 유산균의 유크림 발효액을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 |
Publications (2)
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