KR20190038702A - 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염증제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물에 관한 것이다. 상기 본 발명의 유효성분인 다시마 발효물은 기존의 항염물질과 달리 식용으로 사용될 수 있는 천연물에서 비롯하여 부작용 등이 문제되지 아니하고, 안전성이 우수할 뿐만 아니라, 염증과 관련된 NO 생성 억제 효과를 개선하기 위하여 식용으로 섭취되는 발효차 유래 특정 균주를 이용하여 발효함으로써 NO 생성 억제 효과 즉, 항염 효과가 현저하게 개선된 것임을 확인하여 완성한 것으로, 이를 유효성분으로 포함하는 상기 항염 조성물은 염증과 관련된 질병에서 염증을 억제하는 항염증제 및 항염효과가 있는 화장료 조성물 등으로 응용될 수 있다.

Description

다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염증제{ANTI-INFLAMMATORY AGENT CONTAINING FERMENTED LAMINARIA JAPONICA}

본 발명은 항염효과가 있는 천연물, 구체적으로 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물에 관한 것이다.

염증은 외부에서 들어온 해로운 물질이나 유기체 등과 같은 여러 요인에 의하여 세포나 조직이 손상을 입거나 파괴되었을 때 그 손상을 최소화하고 손상된 부위를 원상으로 회복시키기 위하여 국소적으로 일어나는 면역반응으로서, 생체를 보호하고 조직 손상으로 생성된 산물들을 제거하는데 유용한 방어 메카니즘이다. 상기 방어 메카니즘에 의해, 결과적으로 통증, 부종, 발적 또는 발열 등이 일어나 기능장애가 유발되기도 한다. 상기 염증을 유발하는 여러 요인에는 외상, 화상, 동상, 방사능 등에 의한 물리적 요인, 산(acid)과 같은 화학물질에 의한 화학적 요인 및 항체반응에 의한 면역학적 요인들이 있으며, 그 외에 혈관이나 호르몬 불균형에 의해 발생되기도 한다.

상기 염증은 정상적인 경우에는 생체 내에서 염증반응을 통하여 발병 요인을 중화시키거나 제거하고 상한 조직을 재생시켜서 정상적인 구조와 기능을 회복시키는 작용을 하지만, 염증의 정도가 일정 수준 이상이 되거나 만성화되어 만성염증과 같은 질병 상태로 진행되는 경우 문제가 된다. 임상질환 가운데 거의 모든 질환에서 염증 반응을 관찰할 수 있을 뿐만 아니라, 과도하고 부적절한 염증반응이 진행되어, nitric oxide(NO)가 많이 생성되면, 염증 반응의 항진, 상처 치유의 억제, 신경조직 손상, 과도한 혈관확장에 의한 패혈성 쇼크 유발 등이 일어나게 된다. 또한, 최근 연구에 의하면 암발생과정(carcinogenesis)에서도 염증 반응과 관련된 효소들이 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다.

특히, 급성염증 반응은 외부물질의 자극에 의해 대식 세포에서 염증 반응의 전사 인자가 활성화되면, inducible nitric oxide synthase(iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2)가 발현되어, nitric oxide(NO)와 prostaglandin E2(PGE2)가 생성됨으로써, 염증이 일어나는 메커니즘을 갖는다.

체내에서의 염증반응의 진행과 관련된 COX(cyclooxygenase) 효소는 생체 내에 존재하는 프로스타그란딘(prostaglandin)의 생합성에 관련하는 주 효소로서(Smith 등, J. Biol.Chem., 271, 33157(1996)), 두 종류의 이성 효소인 COX-1과 COX-2가 존재하는 것으로 알려져 있다. 상기 COX-1은 위나 신장과 같은 조직에 일정하게 존재하며, 정상적인 항상성을 유지하는데 관여하는 반면, 상기 COX-2는 염증이나 기타 면역 반응 시 세포분열인자(mitogen)나 사이토카인(cytokines)류에 의해 세포 내에서 일시적이고 빠르게 발현되는 효소이다.

또 하나의 강력한 염증 매개물인 나이트릭 옥사이드(Nitric oxide, NO)는 NO 합성효소(NOS)에 의해 L-알지닌으로부터 생성되며, UV와 같은 외부 스트레스나 엔도톡신 또는 사이토카인과 같은 물질에 의해 많은 종류의 세포에서 생성된다. 상기와 같은 염증 자극들은 세포 내의 유도성 NOS(iNOS)의 발현을 증가시키고, 이를 통하여 세포 내에서 NO 생성을 유도하여, 대식 세포를 활성화시킴으로써 염증 반응을 일으킬 수 있다.

따라서, 최근 효과적인 염증 완화를 위하여, NO의 생성 및 COX-2 생성을 억제할 수 있는 물질에 대한 연구가 진행되고 있다. 그러나, 이러한 연구에 의해 개발된 항염물질의 경우 몇 가지 부작용이 문제되고 있다. 일 예로, 급성 또는 류마티스성 관절염과 같은 만성 염증 질환의 치료에 사용되는 비스테로이드성 소염 약물들은 COX-2 효소를 억제할 뿐만 아니라 COX-1 효소도 억제함으로써 위장관 장애와 같은 부작용을 나타내는 것으로 알려져 있다.

한편, 일상생활에 사용되는 화장품은 피부를 보호하고 미화 청결을 위해 사용되는 제품이지만 화장품 조성물을 살펴보면 피부 보호 목적과는 상이한 성분들이 제품 형성에 필수 불가결한 존재로서 사용된다. 예를 들어, 계면활성제, 방부제, 향료, 자외선 차단제, 색소 및 기타 효능이나 효과를 부여하기 위해 쓰이는 여러 가지 성분들을 들 수 있다. 상기 화장품 제조에 필수적으로 사용되는 성분은 일반적으로 피부에 염증이나, 뾰루지 또는 부종 등과 여러 가지 부작용을 발생하는 것으로 알려져 있다.

또한, 체내로부터 배출되는 피지 성분, 땀 성분 및 화장품 성분 중의 지방산, 고급 알코올, 단백질 등이 피부 상에 존재하는 피부 상재 균들에 의해 독성이 강한 물질로 분해되면, 이들에 의해 피부 염증이 유발될 수도 있으며, 태양으로부터 나오는 자외선에 의해서도 피부 염증이 유발된다는 것은 잘 알려진 사실이다.

이렇듯 화장품에 있어서 피부 부작용 유발요인은 항상 잠재되어 있으며 이를 해결 하고자 여러 가지 연구가 진행되어 왔다. 현재까지 홍반이나 부종 같은 자극완화 및 염증 완화 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드계로 플루페나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin)등이 있고, 스테로이드계로는 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone) 등이 있으며, 알란토인, 아즈렌, ε-아미노키프론산, 하이드로코티존, 감초산 및 그 유도체(β-글리칠레친산, 글리칠레친산 유도체) 등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

그러나, 일반적으로 항염제로 쓰이는 상기 인도메타신은 화장료에는 사용할 수 없는 물질이고, 상기 하이드로코티존은 사용량이 제한되어 있으며, 감초산 및 그 유도체는 안정화시키기 어렵거나 용해도가 좋지 않아 실제 적용 시 농도의 제한으로 인하여 실질적인 효과를 거두기가 어려운 점이 있는 등 지금까지 알려진 항염제는 피부안전성 면이나 화장료 배합시의 안정성 면에서 대부분 문제점을 가지고 있어서 그 사용이 제한되고 있다.

그러므로, 천연물질 유래 물질로 이러한 부작용이나 세포독성에 대한 위험이 없거나 적으면서, 효과적으로 NO의 생성이나 COX-2의 발현을 억제할 수 있어 항염 효과가 우수하여, 부작용 없이 염증을 억제할 수 있을 뿐만 아니라 그 함량의 제한 없이 화장품에 사용될 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다.

특히, 최근에는 소비자들의 욕구에 부응하기 위하여 천연 원료를 이용한 화장료에 대한 연구개발이 활발히 진행되고 있는 실정이다.

KR 10-1193558 B KR 10-0842022 B KR 10-2004-0095492A KR 10-2011-0106640A

상기와 같은 요구에 부응하기 위하여, 본 발명은 부작용과 관련된 문제가 발생될 가능성이 적은 천연물 유래 물질을 유효성분으로 하는 항염 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 기존의 항염물질과 달리 식용으로 사용될 수 있는 천연물에서 비롯하여 부작용 등이 문제되지 아니하고, 안전성이 우수할 뿐만 아니라, 염증과 관련된 NO 생성 억제 효과를 개선하기 위하여 특정 균주를 이용하여 발효함으로써 NO 생성 억제 효과 즉, 항염 효과가 현저하게 개선된 성분을 유효성분으로 포함하는 항염증제 또는 화장품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물을 제공한다.

상기 다시마 발효물, 구체적으로 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고 발효시켜 제조된 다시마 발효물은 다시마 자체 또는 다시마 추출물에 비해 NO 소거능이 우수할 뿐만 아니라 항비만 효과도 뛰어나고, 더 나아가 다른 발효 균주를 이용하여 발효시킨 것에 비하여 현저하게 우수한 항염 효과가 있는 것으로 확인되었다.

따라서, 본 발명의 항염 조성물은 항염증제의 유효성분 또는 염증을 억제하기 위한 목적으로 화장료 조성물의 유효성분으로 제공될 수 있다.

본 발명자들은 다시마가 다양한 기능성 효과를 가지는 것을 확인하고, 이러한 다시마의 기능성 효과를 개선하기 위하여 다양한 연구를 진행하던 중, 다시마에 발효균주를 접종시켜 발효를 진행하면 기능성이 개선될 수 있음을 확인하였고, 나아가 발효균주의 종류에 따라 특정 기능성에 대해서 기능성을 개선 또는 감소시킬 수 있으며, 다시마의 항염 효과와 관련하여, 본 발명의 발명자들이 동정하여 연구를 진행하였던 균주 중에서 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 이용하여 발효시키는 경우 다른 균주에 비하여 NO 소거능이 현저하게 개선될 수 있음을 실험 결과를 통하여 확인하여, 본 발명을 완성하였다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 다시마 발효물, 바람직하게는 다시마(Laminaria japonica)에 발효 균주, 바람직하게는 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고 발효시켜 제조된 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물에 관한 것이다.

상기 다시마 발효물은 다시마에 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 다시마 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하는 다시마 추출물 제조단계; 및 상기 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 감압농축한 다음 건조하여 다시마 발효물을 제조하는 다시마 발효물 제조단계를 포함하는 방법으로 제조된 것일 수 있다.

상기 다시마(Laminaria japonica)는 한국, 중국 및 일본의 해안 지방에서 널리 소비되고 있는 갈조류이다. 상기 다시마는 태평양 연안에 20여 종이 자라고 있으며 10 m 이상의 큰 종류도 있는데, 주요 종으로는 참다시마(L. japonica), 오호츠크다시마(L. ochotensis), 애기다시마(L. religiosa) 등이 있다. 옛날부터 한국을 비롯하여 일본 및 중국 등 동아시아에서 식용해왔으며, 특히, 단백질 성분인 글루탐산과 아스파탐산을 다량 함유하고 있어 조미재료로 예부터 널리 이용되어 왔다. 상기 다시마에는 다당류가 가장 많으며, 그 종류로는 알긴산과 셀룰로오스, 그리고 수용성인 퓨코이딘 등이 있다.

상기 다시마 발효물은 다시마(Laminaria japonica)에 발효 균주를 접종시키고 배양하여 수득한 다시마 발효물을 의미한다.

상기 다시마 발효물 제조단계는 발효균주로 유산균, 구체적으로 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 그 혼합 균주일 수 있으며, 바람직하게는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis)일 수 있고, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 접종하고 발효시켜 제조된 것일 수 있다.

보다 구체적으로, 상기 다시마 발효물은 다시마에 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 다시마 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하는 다시마 추출물 제조단계; 및 상기 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 감압농축한 다음 건조하여 다시마 발효물을 제조하는 다시마 발효물 제조단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.

상기 다시마 추출물 제조단계는 추출용매, 구체적으로 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 또는 이들의 혼합물, 바람직하게는 에탄올 수용액, 더욱 바람직하게는 30%(v/v) 에탄올 수용액을 이용하여 추출하는 방법으로 수행할 수 있다.

더욱 구체적으로는, 상기 다시마 추출물 제조단계는 다시마에 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 다시마 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하는 방법으로 수행할 수 있다.

상기 다시마 발효물 제조단계는 발효균주로 유산균, 구체적으로 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 또는 그 혼합 균주일 수 있으며, 바람직하게는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis)일 수 있고, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 사용할 수 있다.

더욱 구체적으로는, 상기 다시마 발효물 제조단계는 상기 다시마 추출물 제조단계에서 제조된 상기 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 감압농축한 다음 건조하여 다시마 발효물을 제조하는 방법으로 수행할 수 있다.

상기 다시마 발효물은 바람직하게는 유산균을 이용하여 다시마 추출물을 발효시킨 후, 여과 및 감압농축하고 다시 동결 건조한 분말형태의 것일 수 있다. 상기 수득한 다시마 발효물은 사용 시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관할 수 있다.

상기 항염 조성물은 염증을 억제하거나 염증을 치료 또는 예방하기 위하여 사용될 수 있다.

상기 염증은 일반적인 염증질환을 포함하는 개념이며, 일 예로 상기 염증질환은 각종 피부염, 알레르기, 전신성 홍반성 낭창, 망막염, 위염, 간염, 장염, 췌장염 및 신장염으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 상기 알레르기는 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 천식(asthma), 알러지성 결막염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염, 두드러기(urticaria), 곤충 알러지, 식품 알러지 및 약품 알러지를 포함한다.

따라서, 본 발명의 항염 조성물은 염증질환의 치료 또는 예방용 조성물로 응용되거나, 상기 염증질환의 예방 또는 개선용 식품조성물로 응용될 수 있다. 상기 식품조성물은 일 예로 상기 염증질환의 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품 조성물일 수 있다.

상기 건강기능식품은 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 건강기능식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 건강기능식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 발명의 염증질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물은 상기 다시마 발효물을 전체 식품 중량의 0.001 중량% 내지 99.9 중량% 또는 0.01 중량% 내지 50 중량% 또는 0.1 중량% 내지 30 중량% 또는 0.1 중량% 내지 15 중량% 포함될 수 있다.

상기 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물은 인간을 포함한 동물에 직접 적용될 수 있다. 상기 동물은 식물에 대응하는 생물군으로 주로 유기물을 영양분으로 섭취하고, 소화기관, 배설기관 및 호흡기관이 분화되어 있는 것을 말하며, 바람직하게는 포유류, 더욱 바람직하게는 인간일 수 있다.

상기 다시마 발효물은 상기 항염 조성물 내에 단독으로 사용될 수 있으며, 그 외 약리학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 희석제 또는 부성분을 추가로 포함할 수 있다. 보다 상세하게는, 상기 다시마 발효물을 포함하는 조성물이 약제로 사용되거나, 의약 또는 약학적 용도로 사용되는 경우, 상기 다시마 발효물은 통상적인 방법에 따라 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합하거나 희석제로 희석하여 사용될 수 있다.

이 경우 상기 조성물 내 다시마 발효물의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량 % 내지 99.9 중량 %, 0.1 중량% 내지 99 중량% 또는 1 중량% 내지 50 중량%일 수 있으나, 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도와 조성물의 사용태양 및 사용방법에 따라 상기 다시마 발효물의 함량은 바람직한 함량으로 적절히 조절하여 사용될 수 있다.

상기 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이트, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀 및 생리식염수로 이루어진 군에서 선택된 1 이상을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용가능하다.

또한, 상기 약학 조성물은 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, pH 조절제, 영양제, 비타민, 전해질, 알긴산 및 그의 염, 펙트산 및 그의 염, 보호성 콜로라이드, 글리세린, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. 상기 성분들은 상기 유효성분인 다시마 발효물에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 상기 유효성분 이외에 공지의 항염효과가 있는 것으로 인정된 물질, 일 예로 COX-2 저해제, NO 저해제 또는 항염증제 등으로 사용되는 물질을 더욱 포함할 수 있다.

상기 조성물이 약제로 사용하는 경우 투여방법은 경구 또는 비경구 모두 가능하며, 일 예로는 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다.

또한, 상기 조성물의 제형은 사용방법에 따라 달라질 수 있으며, 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 본 발명이 속하는 기술분야에 잘 알려진 방법을 사용하여 제형화될 수 있다.

일반적으로는, 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제(TABLETS), 알약, 연질 또는 경질 캅셀제(CAPSULES), 환제(PILLS), 산제(POWDERS) 및 과립제(GRANULES) 등이 포함되고, 이러한 제제는 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다.

또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제(SUSTESIONS), 내용액제, 유제(EMULSIONS) 및 시럽제(SYRUPS) 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구투여를 위한 형태는 크림(CREAM), 로션제(LOTIONS), 연고제(ONITMENTS), 경고제(PLASTERS), 액제(LIQUIDS AND SOULTIONS), 에어로솔제(AEROSOLS), 유동엑스제(FRUIDEXTRACTS), 엘릭서(ELIXIR), 침제(INFUSIONS), 향낭(SACHET), 패취제(PATCH) 또는 주사제(INJECTIONS) 등의 형태일 수 있다.

더 나아가, 본 발명의 조성물은 당해 기술 분야의 공지된 적절한 방법을 사용하여 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 제형화될 수 있다.

상기 조성물의 투여량은 투여방법, 복용자의 연령, 성별, 환자의 중증도, 상태, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성률 및 병용되는 약물을 고려하여 결정할 수 있으며, 일 예로 1일 유효성분을 기준으로 하였을 때 0.1 mg/kg(체중) 내지 500 mg/kg(체중), 0.1 mg/kg(체중) 내지 400 mg/kg(체중) 또는 1 mg/kg(체중) 내지 300 mg/kg(체중)으로 투여할 수 있으며, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명은 또한, 상기 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물 또는 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염증제를 제공한다.

상기 다시마 발효물은 바람직하게는 다시마(Laminaria japonica)에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 접종하고 발효시켜 제조된 다시마 발효물일 수 있다.

상기 항염증제는 상기 유효성분을 단독으로 포함할 수 있으며, 이외 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 더욱 포함할 수 있다. 혼합물로 제공되는 경우, 상기 유효성분은 항염증제 전체에 대해 0.1 중량% 내지 99.9 중량%로 포함될 수 있으나, 통상 0.001 중량% 내지 50 중량%의 함량으로 포함되는 것이 일반적이다.

상기 항염제는 류마티스 관절염, 루푸스, 다발성 경화증과 같은 각종 만성 염증 질환, 패혈증, 쇼크, 장기이식의 거부반응과 같은 각종 급성 염증 질환, 안과질환, 기관지염, 또는 염증성 장질환의 예방 및 치료의 목적으로 사용가능하다.

상기 담체 또는 부형제의 일예로는 물, 덱스트린, 칼슘카보네이드, 락토스, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀, 생리식염수, 덱스트로스, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자이리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유가 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 담체 또는 부형제는 2종이상 사용될 수 있다.

또한 항염증제를 약제화하는 경우, 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 계면활성제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 더욱 포함할 수 있다.

또한 본 발명의 항염증제는, 상기 유효성분 이외에 공지의 항염활성을 갖는 화합물 또는 식물 추출물을 더욱 포함할 수 있으며, 상기 유효성분 100 중량부에 대하여 각각 5 중량부 내지 20 중량부로 포함될 수 있다.

항염증제의 제형은 사용방법에 따라 바람직한 형태일 수 있으며, 특히 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 채택하여 제형화할 수 있다.

구체적인 제형의 예로는 경고제, 과립제, 로션제, 리니멘트제, 리모나데제, 산제, 시럽제, 안연고제, 액제, 에어로솔제, 엑스제(EXTRACTS), 엘릭실제, 연고제, 유동엑스제, 유제, 현탁제, 전제, 침제, 점안제, 정제, 좌제, 주사제, 주정제, 캅셀제, 크림제, 환제, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀 등이 있다.

본 발명에 따른 항염증제는 경구 또는 비경구로 사용될 수 있으며, 예컨대 진피내, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하내, 코안, 경막외 및 구강경로를 통하여 사용될 수 있으며, 이의 투여량은, 투여방법, 복용자의 연령, 성별 및 체중, 및 질환의 중증도 등을 고려하여 결정하는 것이 좋다. 일 예로, 본 발명의 항염증제는 유효성분을 기준으로 하였을 때 1일 0.1 ㎎/㎏(체중) 내지 100 ㎎/㎏(체중)으로 1회 이상 투여가능하다. 그러나 상기한 투여량은 예시하기 위한 일예에 불과하며 상기 범위에 한정되지는 않는다.

본 발명은 또한, 상기 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물 또는 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 다시마 발효물은 천연물질 유래이므로 부작용이 문제되지 아니하고, 세포독성도 없을 뿐만 아니라, 염증 억제 효과가 뛰어나기 때문에 항염 및 항산화 활성이 뛰어나므로, 화장품에 포함된 성분들에 의해 유도되는 염증 및 외부 환경에 의해 유도되는 염증을 효과적으로 제어할 수 다. 따라서, 상기 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물 또는 다시마 발효물은 염증 개선 및 완화효과를 갖는 화장료 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.

상기 다시마 발효물은 바람직하게는 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 접종하고 발효시켜 제조된 다시마 발효물일 수 있다.

상기 화장료 조성물은 기초 화장료, 메이크업 화장료, 바디 화장료, 두발용 화장료, 두피용 화장료, 면도용 화장료 또는 구강용 화장료의 용도로 제공될 수 있다.

상기 기초 화장료의 예로는 크림, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있고, 상기 메이크업 화장료의 예로는 파운데이션, 메이크업 베이스, 립스틱, 아이섀도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬 등이 있으며, 상기 바디 화장료의 예로는 비누, 액체 세정제, 입욕제, 선스크린 크림, 선 오일 등이 있고, 상기 두발용 화장료의 예로는 샴푸, 린스, 헤어 트리트먼트, 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드, 헤어 칼라제, 헤어 블리치제 또는 칼라 린스 등이 있으며, 상기 두피용 화장료의 예로는 헤어 토닉 또는 스칼프 트리트먼트 등이 있고, 상기 면도용 화장료의 예로는 애프터셰이브로션 또는 셰이빙 크림 등이 있으며, 상기 구강용 화장료의 예로는 치약 또는 마우스 워셔 등이 있다.

상기 화장료 조성물에는 유효성분 외에 사용용도 및 화장료 조성물의 성질에 따라 통상 화장료 조성물에 배합되고 있는 성분, 일예로 보습제, 자외선 흡수제, 비타민류, 동식물 추출성분, 소화제, 미백제, 혈관확장제, 수렴제, 청량제, 호르몬제 등을 추가로 배합될 수 있다. 또한, 상기 화장료 조성물은 약물 또는 유효성분을 피부조직으로 침투 또는 이행시키기 위해서 필요한 기제를 추가로 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물의 제형은 사용용도 및 화장료 조성물의 성질에 따라 적절한 형태를 취할 수 있으며, 일 예로 수용액계, 가용화계, 유화계, 유액계, 겔계, 페이스트계, 연고계, 에어졸계, 물-기름 2층계 또는 물-기름-분말 3층계일 수 있으며, 상기 제형의 예는 단순한 예시일 뿐, 상기 예시에 의해 본 발명의 화장료 조성물의 제형 및 형태가 제한되는 것은 아니다.

상기 유효성분은 상기 화장료 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 중량% 내지 50 중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하기로는 0.01 중량% 내지 20 중량%일 수 있으나, 상기 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 유효성분외의 성분의 함량에 따라 적절히 조절할 수 있으며, 상기 함량에 의해 본 발명에 포함되는 유효성분의 함량이 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 다시마 발효물은 식용으로 사용되는 식물 유래 발효물로서 부작용이나 안전성에 대한 문제가 없고, 염증과 관련된 아질산염(NO) 소거능 분석 결과, 항염 효과도 현저하게 개선될 수 있는 것으로 확인되었다. 따라서, 상기 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물은 염증을 억제하여 염증과 관련된 질병을 치료 또는 예방하기 위한 항염증제 및 특정 제형 등과 관련하여 화장품 제조에 필수적으로 사용되는 성분 또는 외부환경으로 인한 피부의 염증을 효과적으로 억제할 수 있는 특징을 갖는 화장료 조성물 등에 응용될 수 있다. 그러므로, 본 발명은 염증과 관련된 질병에 대한 치료와 관련된 의료산업 및 피부염증의 제어와 관련된 화장품 산업의 분야에서 널리 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 다시마와 관련된 다양한 산업적 용도를 제공하는 것이므로, 다시마 농가의 수익 향상과 지역 경제 발전에 이바지할 수 있을 것으로 평가된다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른, 다시마 발효물의 세포독성을 나타낸 것으로, 그래프의 가로축은 다시마 발효물을 처리한 양을 나타내고, 세로축은 대조군 대비 세포의 생존능을 나타낸 결과이다.
도 2 및 도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른, 다시마 발효물의 항염 활성을 나타낸 결과로, 도 2는 NO 소거능을 나타낸 것으로, 그래프의 가로축은 시료 처리 여부 또는 다시마 발효물을 처리한 양을 나타내고, 세로축은 대조군 대비 NO의 생성정도를 나타낸 결과이며, 도 3은 iNOS 발현량을 나타낸 것으로, 도 3a는 iNOS mRNA 생성정도를 확인한 사진이고, 도 3b는 이에 근거한, iNOS mRNA 발현정도를 확인한 그래프로, 각 그래프의 가로축은 다시마 발효물을 동안 처리한 양을 나타내고, 세로축은 각 시료에 대해 대조군 대비 항염 활성(%)을 나타낸 결과이다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 구체적인 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 보다 상세히 설명하기로 한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 보다 명확하기 이해시키기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 하기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 보호 범위는 특허청구범위에 의하여 해석되어야 하고, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

[ 제조예 . 다시마 발효물의 제조]

제조예 . 다시마 유산균 발효물의 제조

본 연구에 사용한 다시마(Laminaria japonica)은 2017년에 채취된 것을 (주)만승수산을 통해 구입하여 사용하였다. 상기 다시마는 유수에서 세척하고, 드라이오븐을 이용하여, 60℃에서 24시간 건조한 후, 탈염하고, 분쇄기(ball mill, Daesung Artlon, 대한민국)를 사용하여 파쇄하여 분말로 제조하였다. 상기 다시마 분말은 실험 전까지 -20℃에 보관하면서 사용하였다.

상기 다시마 분말의 발효물은 다음과 같이 제조하였다. 구체적으로, 상기 다시마 분말 1 kg에 30%(v/v) 에탄올 수용액 1.5 kg을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 후, 20 mesh 망을 이용하여 다시마 박을 분리한 다음, 수득한 추출액을 40℃ 이하로 냉각하고, 외부순환식 감압형 분리막 장치를 이용하여 정밀여과하고, 건조하여 다시마 30% 에탄올 수용액 추출물을 제조하였다. 이후, 상기 수득한 다시마 30% 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하였다.

상기 최종 제조된 다시마 추출물 50 g을 첨가한 배양배지에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 균체를 제거한 후, 감압농축한 다음 -20℃에서 동결건조하여 다시마 발효물을 제조하였다.

< 실시예 > 다시마 발효물의 항염 활성 확인

상기 제조예에서 제조된 다시마 발효물의 안전성과 항염 활성을 측정하기 위하여, 세포독성 실험과 아질산염 소거능 측정을 수행하였다.

구체적으로, 상기 세포독성 실험은 - 쥐의 대식세포주인 RAW264.7 세포를 이용하여 다시마 발효물을 25, 50, 100 ㎍/ml의 농도로 처리하여 대식세포의 cell viability를 측정하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.

또한, 상기 아질산염 소거능 측정은 Kato (1987)의 방법을 변형하여 다음과 같이 측정하였다. 우선, 1 mM NaNO₃ 1mL에 각각의 농도별로 해당용매에 녹인 발효시료 1mL를 첨가한 후 0.1 N HCl (pH 1.2)로 10 mL이 되도록 정용하였다. 이를 37℃에서 1 시간 동안 반응시킨 후 반응액 1 mL를 취하여 tesr tube에 옮긴 후 2% Acetic acid 5 mL과 griess시약을 400 μL첨가하여 상온에서 15분 간 반응시켰다. 반응 종료 후 540 nm 에서 흡광도를 측정하여 시료에 의한 아질산염 소거활성을 측정하였다. 상기 방법으로 아질산염 소거능을 확인하여 그 결과를 도 2 에 나타내었다.

상기 도 1에 나타낸 바와 같이, 전체 농도에서 다시마 발효물을 처리한 결과, 세포독성이 없는 것으로 확인되었다.

또한, 상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 다시마 추출물을 처리한 결과, 아질산염 소거능이 농도의존적으로 증가하는 것이 확인되었다.

상기 아질산염 소거능에 추가로 과민면역반응을 유도한 E. coli LPS (1 ㎍/ml)를 이용하여 다시마 유산균 발효물의 산화질소합성효소 mRNA와 단백질 발현 억제 효과를 측정한 결과, E. coli LPS에 의해 발현이 유도된 산화질소합성효소 mRNA와 단백질의 발현을 다시마 유산균 발효물이 유의적으로 감소시킴이 확인되었다.

상기 실험결과에 의하면, 식용으로 사용가능한 다시마의 발효물은 항염효과와 관련하여 아질산염 효과가 현저하게 개선되어, 매우 효과적으로 염증을 저해할 수 있을 것으로 확인되었으므로, 본 발명의 다시마 발효물 특히, 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)을 이용한 다시마 발효물은 기존 염증 치료제를 대체할 수 있을 뿐만 아니라, 기존 화장품에 사용되는 성분으로 인한 염증 발생을 적절하게 제어할 수 있어 화장료 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

Claims (5)

1. 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 다시마 발효물은 다시마에 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 다시마 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하는 다시마 추출물 제조단계; 및 상기 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 감압농축한 다음 건조하여 다시마 발효물을 제조하는 다시마 발효물 제조단계를 포함하는 방법으로 제조된 것임을 특징으로 하는 항염 조성물.
3. 다시마 발효물을 유효성분으로 포함하는 항염증제.
4. 제3항에 있어서,
   상기 다시마 발효물은 다시마에 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고 70℃에서 30분 동안 추출한 다시마 에탄올 수용액 추출물과 물을 혼합한 다음 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 후, 냉각하여 다시마 추출물을 제조하는 다시마 추출물 제조단계; 및 상기 다시마 추출물에 락토바실러스 브레비스 BJ21(Lactobacillus brevis BJ21)를 접종하고, 36℃ 내지 38℃에서 48시간 동안 발효한 후, 120℃ 내지 125℃에서 15분 내지 30분 동안 고온고압멸균기(Autoclave)를 이용하여 고온가압살균한 다음 여과지를 이용하여 여과하고, 감압농축한 다음 건조하여 다시마 발효물을 제조하는 다시마 발효물 제조단계를 포함하는 방법으로 제조된 것임을 특징으로 하는 항염증제.
5. 제1항의 항염 조성물을 유효성분으로 포함하는 항염효과가 있는 화장품 조성물.

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