KR20190034319A - 엽산 반추위 우회 방법 및 조성물 - Google Patents

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Abstract

밀크 생산을 향상시키기 위해 엽산이 반추위 박테리아에 의해 소비되지 않고, 대신에 장 및 동물의 혈중 혈청으로 통과되는 것을 보장하는 방식의 엽산이 있는 반추류의 식이 보충을 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 물 중의 엽산은 아연, 구리, 철 또는 망간 또는 이들의 혼합물의 수용성 금속 염과 혼합된다.

Description

엽산 반추위 우회 방법 및 조성물
본 발명은 엽산이 반추위(rumen)를 우회하여 반추위 박테리아에 의해 소비되지 않고 반추류 동물에 의해 밀크(milk) 생산 및 건강을 지원하는데 사용되는 것을 가능하게 할 수 있음을 보장하는 방법 및 조성물에 관한 것이다.
발명의 배경
반추류의 경우에 효율적이고 최대화된 밀크 생산을 위해서 적절한 영양이 필수적이라는 것은 잘 알려져 있다. 엽산과 같은 비타민을 포함한 적절한 영양소의 최소 필요량이 충족되지 않는 경우, 동물은 최적의 수율로 밀크를 생산하지 않을 것이고, 동물의 건강은 일반적으로 저하될 것이다.
반추류의 식이에 도입되는 97%만큼 많은 엽산은 제어되거나, 약간 더 좋게 표현하자면, 반추위에서 박테리아에 의해 소비되는 것으로 보고되어 있다[참조: J. Dairy Sci . 88:2043-2054]. 실제로, 상기 문제는 이전에 알려져 있었고, 진짜 딜레마는 엽산이 반추위를 효과적으로 우회하고, 소장으로 들어가고, 결국 이후 밀크 생산 증가의 지표가 되는 혈청 중 엽산 함량을 증가시킬 수 있는 방식으로 엽산을 투여하는 것이다[참조: Dietary Supplements of Folic Acid During Lactation: Effect on the Performance of Dairy Cows, 1998 J. Dairy Sci. 81:1412-1419].
과거에, 이러한 문제가 인식되었고, 사료 개발자는 지방, 탄수화물 및 결합제를 사용하여 엽산을 캡슐화시켰다. 이러한 기술은 코팅된 물질이 반추위 안정성이기를 바라는 물질의 간단한 코팅을 포함한다. 그러나, 이는 이론에서보다 적용에서 더 어려운 것으로 판명되었다. 반추위 안정성을 위해 어떠한 종류의 코팅에 의존하는 어떠한 제품의 주된 문제는 취급하고 씹는 동안 마모되어 코팅의 제거를 초래할 수 있다는 것이다. 더욱이, 코팅이 너무 효과인 경우에는 장 어느 한 곳에서도 효과적으로 흡수되지 않고, 그러면 동물에게 유익을 주지 못한다.
상기 설명으로부터, 엽산의 혈중 혈청 수준을 향상시켜 밀크 생산 및 동물 건강을 향상시키기 위해 반추위에서 안정하게 유지되고(박테리아에 의해 소비되지 않을 것임), 장에 있을 때에도 혈중 혈청으로 흡수될 엽산 강화 영양 보충제의 개발에 대한 실질적이고 지속적인 요구가 있다는 것을 알 수 있다. 본 발명의 주된 목적은 이러한 요구를 안전하고, 효과적으로, 효율적으로, 그리고 저비용으로 충족시키는 것이다. 이러한 주된 목적뿐만 아니라 다른 목적들을 달성하는 방법 및 수단은 이하의 본 발명의 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다.
발명의 요약
밀크 생산 및 동물 건강을 향상시키기 위해 엽산이 반추위 박테리아에 의해 소비되지 않고, 대신 장 및 동물의 혈중 혈청을 통과되는 것을 보장하는 방식의 엽산이 있는 반추류의 식이 보충을 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 엽산은 아연, 구리, 철 또는 망간의 수용성 금속 염과 혼합된다.
도 1은 처리 전 및 후 양의 평균 혈청 엽산 농도에 대한 처리 효과이다.
도 2는 비처리, 단독의 엽산, 및 아연 엽산염을 비교하는 양의 중간 혈청 엽산 농도에 대한 처리 효과이다.
도 3은 처리 전 및 후 양의 중간 혈청 엽산 농도의 변화에 대한 막대 그래프이다.
도 4는 양에 대한 중간 혈청 엽산의 % 변화의 막대 그래프이다.
도 5는 실시예 3 및 16의 제형을 사용한 소에 대한 엽산의 평균 변화이다.
도 6은 실시예 5 및 7의 생성물에 대한 양의 평균 변화 그래프이다.
도 7은 자유 유동 후 분쇄 옥수수 속대와 배합될 때까지의 실리카 겔과 아연 엽산 혼합물을 보여주는 것이다.
도 8은 분쇄 옥수수 상에 바로 분무된 아연 엽산과 망간 엽산 둘 모두의 액체 혼합물을 보여주는 것이다.
바람직한 구체예의 상세한 설명
본 발명은 반추류 동물을 위한 것이다. 반추류는 사료를 섭취하고, 사료는 먼저 반추위로 통과하고, 반추위에서 사료는 박테리아 발효에 의해 일부 분해된다. 발효 동안, 반추위 미생물은 이들이 분해한 질소 화합물로부터 질소를 이용하여 미생물 단백질을 형성시킨다. 반추위 미생물을 위한 질소 공급원은 반추위에서 분해되는 단백질, 반추위 분해가능한 펩타이드, 유리 아미노산, 예컨대, 결정질 아미노산, 및 엽산을 포함한 비타민을 포함한다. 미생물 단백질 및 분해되지 않은 사료 단백질은 제사위(abomasum) 및 소장으로 통과하고, 여기서 염산 및 포유류 효소가 미생물 단백질 및 분해되지 않은 사료 단백질을 유리 아미노산 및 짧은 펩타이드로 분해한다. 아미노산 및 짧은 펩타이드는 장으로 흡수되고, 반추류 동물은 단백질의 합성을 위해 아미노산을 이용하여 생명을 유지하고, 성장하고, 번식하며, 밀크를 생산한다. 그러나, 비타민 B9 엽산과 같은 비타민이 반추위 미생물에 의해 "사용되거나" 대사되는 경우, 숙주 동물에 대한 이의 가치는 상실된다.
이는, 연구원들은 엽산이 밀크 생산의 증가에 필수적이라는 것을 알아냈기 때문에, 밀크 생산에 이용되는 반추류에게 특히 중요하다.
앞서 언급된 바와 같이, 캡슐화된 형태의 엽산에 대한 몇몇 특허 및 문헌이 존재하지만, 본 출원인이 알고 있는 한, 캡슐화에 의존하지 않는 현재 제시된 화학물질과 같은 것은 것은 없다.
하기 구조식은 엽산이다:
Figure pct00001
엽산
본 출원인이 발견한 것은, 엽산이 아연, 구리, 철 또는 망간인 금속의 수용성 금속 염(그러한 염은 설페이트, 클로라이드, 아세테이트, 포스페이트 또는 니트레이트임)과 물에서 혼합되는 경우에, 엽산이 반추위에서 미생물에 의해 소비되는 것을 억제하는 무언가가 발생한다는 것이다. 더욱이, 출원인에게 놀라웠던 점은, 다른 가용성 금속 염(구체적으로 언급된 네 개의 금속 이외의)이 동일한 결과를 달성하도록 작용하지 않는다는 것이다. 예를 들어, 칼슘 및 마그네슘 염은 후술되는 몇몇 비교예에 의해 입증되는 바와 같이 동일한 결과를 제공하지 않는다. 본 발명이 효과를 발휘하기 위해서, 엽산과 수용성 금속 염의 원래의 혼합은 물에서 일어나야 한다. 혼합이 일어난 후, 용액은 이후, 요망되는 경우, 어떠한 적합한 비독성 담체와 혼합되거나 사료에 바로 첨가될 수 있다.
이러한 조성물을 동물의 식이에 첨가하기 위한 영양 보충제를 제조하는데 있어서, 본 발명의 혼합물은 가공성, 취급 용이성 및 판매를 위해 담체 또는 충전제 물질에 첨가되는 것이 바람직하다. 그러나, 이는 또한 어떠한 담체도 없는 분무 건조된 분말로서 판매될 수 있다. 담체의 사용 여부는 가공 제조업체 및 사료 공급업체의 선호에 좌우된다. 담체가 사용되는 경우, 적합한 담체의 예로는 증류기의 발효 가용물, 사료 곡물, 옥수수 속대 가루, 유청(whey), 및 다른 셀룰로즈성 담체 물질이 포함되고, 이들 모두는 미량의 미네랄 제제를 운반하는 것으로 잘 알려져 있다.
급여량에 첨가되는 보충제의 양은, 물론, 순수한 분무 건조된 분말을 사용하는지의 여부, 또는 옥수수 속대 가루와 같은 담체와 함께 사용하는지의 여부에 좌우될 것이다. 기본적으로, 보충제는 판매된 대로의 급여량으로 간단히 혼합될 것이다.
일반적으로, 혼합물은 약 20 mg/마리(head)/일 내지 약 160 mg/마리/일, 바람직하게는 약 40 mg/마리/일 내지 80 mg/마리/일의 엽산 등가물을 제공하는 수준으로 보충되어야 한다.
엽산 대 수용성 금속 염의 비율은 몰비 기준으로 약 1:1 내지 1:25여야 한다. 혼합물은 용액에서 혼합되어야 하지만, 이들은 그대로, 건조되어, 추후 비독성 담체 상에서 건조되어 사용될 수 있거나, 담체가 액체 혼합물을 흡수하도록 흡수성 담체로서 사용될 수 있다.
혼합물이 자유 유동하면, 이는 다른 일반적인 사료 성분과 조합될 수 있다.
앞서 언급된 바와 같이, 이는 어떠한 반추류에게 적합하지만, 밀크 생산을 위해 사육되는 주된 것들은 젖소, 염소, 및 양이다.
하기 실시예들은 본 발명을 제한하는 것이 아니라 추가로 예시하고 입증하기 위해 제공된 것이며, 놀랍게도, 사용될 수용성 금속 염이 아연, 철, 망간 또는 구리의 금속 염이라는 점이 중요하게 보였다. 음이온은 앞서 언급된 것들이 가장 흔하지만 수용성인 한 중요하지 않다.
실시예 1
아연 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (54.42g, 1.36몰)를 3000mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (300.1g, 0.681몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (91.81g, 0.680몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였다. 이 혼합물을 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 적색-오렌지색 비-흡수성 고형물을 얻었다(415g, 98.3% 이론치).
실시예 2
실리카 혼합물 상의 아연 엽산염
소듐 하이드록사이드 (3.63g, 0.091몰)를 100.1mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.0g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (6.08g, 0.045몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (134.19g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 220.5g의 자유 유동 고형물.
실시예 3
구리 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.65g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.00g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화구리 이수화물 (7.75g, 0.045몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였다. 이 혼합물을 건조될 때까지 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 녹색-황색 비-흡수성 고형물을 얻었다(25.5g, 91.4% 이론치).
실시예 4
실리카 상의 구리 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.60g, 0.090몰)를 300mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.10g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반으로 용액이 되었다. 염화구리 이수화물 (7.74g, 0.045몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (271.56g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 603g의 자유 유동 고형물.
실시예 5
망간 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (7.32g, 0.182몰)를 400mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (39.93g, 0.091몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 자성 교반 막대로의 20분 교반으로 용액이 되었다. 용액에 무수 염화망간 (11.48g, 0.091몰)을 한 번에 첨가하였고, 이를 건조될 때까지 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 어두운 오렌지색/적색 비-흡수성 고형물을 얻었다(52.3g, 94.1% 이론치).
실시예 6
실리카 상의 망간 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.65g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.01g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반으로 용액이 되었다. 염화망간 (5.74g, 0.045몰)을 한 번에 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (307.6g)을 용액이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 537g의 자유 유동 고형물.
실시예 7
철 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.66g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (19.95g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 자성 교반 막대로의 20분 연속 교반으로 용액이 되었다. 밝은 오렌지색 용액에 염화철 사수화물 (9.05g, 0.045 몰)을 첨가하였고, 이를 건조될 때까지 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 녹색-갈색 비-흡수성 고형물을 얻었다(26.1g, 95.9% 이론치).
실시예 8
실리카 상의 철 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.63g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.05g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반으로 용액이 되었다. 염화철 사수화물 (9.00g, 0.045 몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (225.3g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 458g의 자유 유동 고형물.
실시예 9
마그네슘 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (5.44g, 0.132몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (30.01g, 0.068몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 자성 교반 막대로의 20분 교반으로 용액이 되었다. 이 용액에 염화마그네슘 육수화물 (13.80g, 0.068몰)을 첨가하였고, 이를 건조될 때까지 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 옅은 오렌지색 비-흡수성 고형물을 얻었다(37.3g, 94.6% 이론치).
실시예 10
실리카 상의 마그네슘 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.60g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (19.97g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반으로 용액이 되었다. 이 용액에 염화마그네슘 육수화물 (9.25g, 0.045몰)을 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (229.2g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 462g의 자유 유동 고형물.
실시예 11
칼슘 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (6.00g, 0.150몰)를 200mL의 dI H2O를 첨가하였다. 엽산 (33.05g, 0.075 몰)을 염기성 용액에 첨가하였는데, 밝은 오렌지색 현탁액으로 변했다. 현탁액은 자성 교반 막대로의 20분 교반 후에 서서히 용액으로 형성되었다. 이 용액에 염화칼슘 이수화물 (11.01g, 0.075 몰)을 첨가하였고, 이를 건조될 때까지 60℃로 진공 오븐에서 건조시켜 옅은 오렌지색 비-흡수성 고형물을 얻었다(42.6g, 95.3% 이론치).
실시예 12
실리카 상의 칼슘 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (3.61g, 0.090몰)를 200mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (20.07g, 0.045몰)을 첨가하였는데, 이는 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반으로 용액이 되었다. 이 용액에 염화칼슘 이수화물 (6.69g, 0.045몰)을 첨가하였다. 그 후에, 수성 혼합물에 실리카 겔 (281.6g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 512g의 자유 유동 고형물.
실시예 13
분쇄 옥수수 속대 상의 아연 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (1.81g, 0.045몰)를 100mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 용액에 엽산 (9.99g, 0.023몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (3.09g, 0.023몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하고, 혼합물에 분쇄 옥수수 속대 (4.36g)를 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 그 후에, 이 혼합물을 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 19.34g의 고운 고형물.
실시예 14
분쇄 옥수수 속대 상의 아연 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (0.91g, 0.023 몰)를 70mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (5.03g, 0.011 몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (30.87g, 0.23몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하고, 혼합물을 분쇄 옥수수 속대 (11.7g)에 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 이 혼합물을 이후 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 45.6g의 고운 고형물.
실시예 15
실리카 상의 아연 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (1.27g, 0.032 몰)를 100mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (7.00g, 0.016 몰)을 첨가하였는데, 이는 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (43.2g, 0.318몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하고, 혼합물에 실리카 겔 (99.98g)을 혼합물이 자유 유동 고형물이 될 때까지 첨가하였다. 총 중량: 251.71g의 자유 유동 고형물.
실시예 16
셀룰로즈 상의 구리 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (2.72g, 0.068몰)를 150mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (14.98g, 0.034 몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화구리 이수화물 (57.99g, 0.34 몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였고, 이를 셀룰로즈 (20.6g)에 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 이 혼합물을 이후 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 87.33g의 고운 고형물.
실시예 17
분쇄 옥수수 상의 망간 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (2.18g, 0.054몰)를 100mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (12.01g, 0.027몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화망간 사수화물 (5.39g, 0.027몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였고, 이를 분쇄 옥수수 (5.8g)에 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 이 혼합물을 이후 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 19.76g의 고운 고형물.
실시예 18
분쇄 옥수수 속대 상의 망간 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (1.45g, 0.036몰)를 120mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (8.00g, 0.018몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화망간 사수화물 (17.95g, 0.091몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였고, 이를 분쇄 옥수수 속대 (8.65g)에 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 담체 혼합물을 이후 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 32.80g의 고운 고형물.
실시예 19
분쇄 옥수수 속대 상의 철 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (2.00g, 0.05몰)를 250mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (11.05g, 0.025몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화철(II) 사수화물 (49.59g, 0.294몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하고, 이를 분쇄 옥수수 속대 (20.2g)에 첨가하고, 균질해질 때까지 교반하였다. 담체 혼합물을 이후 60℃로 진공 오븐에서 건조시켰다. 총 중량: 58.70g의 고운 고형물.
실시예 20
양의 혈청 농도
세 개의 상이한 샘플, 즉, 엽산이 존재하지 않는 샘플 CSK15083, 단독의 엽산인 CSK15084 및 실시예 1에서 제조된 바와 같은 본 발명의 아연 엽산염 혼합물의 실시예를 나타내는 CSK15085로 양을 시험하였다(도 1-4 참조).
동물들을 그룹으로 분류하고, 목초지로 접근 가능한 외양간에서 수용하였다. 투약 일정은 다음과 같았다. 일일 엽산 용량을 분쇄 옥수수와 혼합하여 0.5 파운드/양/일의 비율로 공급되는 시험 항목을 형성시켰다. 양에게 십사(14)일 동안 시험 사료를 공급하였다. 하루에 각 마리에 공급되는 엽산 등가물은 삼십(30) 밀리그램이었다.
연구 결과는 도 1 내지 4에 나타나 있다. 이들 모두는 평균 또는 중간에서 보았는지에 상관없이, 혈청 엽산 농도는 양에게 본 발명의 제품인 CSK15085이 투여되었을 때 가장 크게 증가되었음을 나타낸다(도 1 내지 4). CSK15084 또는 CSK15085이 공급된 양의 혈청 엽산 농도는 증가된 반면, CSK15083이 공급된 양의 혈청 엽산 농도는 시험 항목이 공급된 후에 변화되지 않았다. 엽산의 혈청 혈액 수준 향상은, 앞서 언급된 항목에서 지시된 바와 같이, 밀크 생산이 상당히 증가될 것이라는 지시이다. 더욱이, 아연 엽산염 혼합물은 단독의 엽산보다 우수하게 수행되었다.
실시예 9 내지 12의 칼슘 및 마그네슘 염이 공급된 양은 단독의 엽산 대조군과 비교해 볼 때 엽산의 혈중 혈청 수준의 증가를 나타내지 않았다.
실시예 21(송아지 연구)
실시예 21은 소 연구이다. 도면의 도 5에서, CSK 16083은 단독의 엽산을 나타내고; CSK16084는 구리-엽산 혼합물 1:1(실시예 3)이고, CSK 16085는 셀룰로즈 상의 구리-엽산 혼합물 1:10(실시예 16)이다.
소의 송아지에게 2lbs/마리의 비율로 사료와 함께 120 mg의 엽산 공급원/일을 14일 동안 공급하였다. 엽산이 없는 대조군과의 비교는 도 5에 나타나 있다. 혈중 혈청 엽산은 실시예 3 및 실시예 16의 제형이 있는 양성군의 경우에 유의하게 변했음을 알 수 있다.
실시예 22(양)
실시예 22는 각각 실시예 5 및 7의 Mn과 철 혼합물의 경우이지만 실시예 20의 프로토콜을 이용한 양 연구이다. 도 6에서, CSK16086은 단독의 엽산이고; CSK16087은 철과 엽산의 1:1 혼합물이고(실시예 7), CSK16088은 망간과 엽산의 혼합물이다[실시예 5]. 도 7에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 5 및 7의 혼합물에 대한 혈중 혈청 엽산 농도는 양성의 경우에 유의하게 변화된다. 이러한 시험에서, 어떠한 담체도 없이 건조되었지만 공급을 위해 분쇄 옥수수 상에서 혼합된 농축 금속 엽산염 혼합물을 암양에게 공급하였다.
실시예 23
이 실시예에서, 아연 엽산 혼합물을 자유 유동할 때까지 실리카 겔과 혼합하고, 이후 시험을 위해 분쇄 옥수수 속대와 배합하였다.
실시예 15에서 제조된 바와 같이, 아연 엽산 혼합물 20:1을 실리카 상에서 건조시켰다. 데이터는 도 7에 나타나 있다.
실시예 24
아연 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (0.96g, 0.024 몰)를 1100mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (5.40g, 0.012 몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화아연 (16.68g, 0.12 몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였는데, 이는 용이하게 교반되었다. 고운 현탁액은 건조 동물 사료(분쇄 옥수수) 상에서 용이하게 분무되었다.
실시예 25
망간 엽산염 혼합물
소듐 하이드록사이드 (0.98g, 0.024몰)를 1120mL의 dI H2O에 첨가하였다. 이러한 염기성 용액에 엽산 (5.30g, 0.012몰)을 첨가하였는데, 밝은 오렌지색으로 변했다. 현탁액은 20분의 연속 교반 동안 용액이 되었다. 염화망간 사수화물 (23.11g, 0.18몰)을 밝은 오렌지색 용액에 첨가하였고, 이는 용이하게 교반되었다. 고운 현탁액은 건조 동물 사료(분쇄 옥수수) 상에서 용이하게 분무되었다.
실시예 26
Zn 엽산 혼합물 10:1을 실시예 24에 기재된 바와 같이 제조하고, Mn 엽산 혼합물 (15:1)을 실시예 25에 기재된 바와 같이 제조하였다. 그 후에, 액체 혼합물을 분쇄 옥수수 상에 바로 분무하였다. 혈청 결과(양)는 도 8에 나타나 있고, 요망되는 경우, 담체 없이 효과가 달성될 수 있는 것으로 입증되었다.

Claims (12)

  1. 물에서, 엽산을 수용성 금속 염과 혼합하여 혼합물을 제공하고;
    상기 혼합물을 반추류에게 공급함을 포함하는, 반추위(rumen) 박테리아를 우회할 엽산이 있는 반추류의 식이 보충 방법으로서,
    상기 금속이 아연, 구리, 철 및 망간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 반추류가 소, 염소 및 양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 금속 염 음이온이 설페이트, 클로라이드, 아세테이트, 포스페이트 및 니트레이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 엽산 대 수용성 금속 염의 몰비가 약 1:1 내지 약 1:25인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 수용성 물질이 비독성 담체 상에 놓여지는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 담체가 증류기의 발효 가용물, 사료 곡물, 옥수수 속대 가루, 유청(whey), 및 다른 셀룰로즈성 물질로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 혼합물의 공급이 20 mg/마리(head)/일 내지 160 mg/마리/일의 엽산 등가물의 비율로 이루어지는 방법.
  8. 제7항에 있어서, 공급이 40 mg/마리/일 내지 80 mg/마리/일의 비율로 이루어지는 방법.
  9. 제5항에 있어서, 담체 상의 혼합물이 추가의 일반적인 사료 성분과 혼합되는 방법.
  10. 반추위에서는 안정하지만 장에서는 가용성이어서 반추류 동물의 혈중 혈청 엽산 수준의 증가를 제공하는 조성물로서,
    철, 구리, 아연 및 망간으로 이루어진 군으로부터 선택된 금속의 수용성 금속 염이 있는 용액에 엽산을 포함하는 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 증류기의 발효 가용물, 사료 곡물, 옥수수 속대 가루, 유청, 및 다른 셀룰로즈성 담체로 이루어진 군으로부터 선택된 담체와 혼합되는 조성물.
  12. 제10항에 있어서, 금속 염이 설페이트, 니트레이트, 포스페이트, 클로라이드, 및 아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 음이온을 갖는 조성물.
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