KR20180108504A

KR20180108504A - 초유의 발효산물과 이를 이용한 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20180108504A
Application number: KR1020180033727A
Authority: KR
Inventors: 곽태일; 김준혁; 김광일; 서상아; 서혜령; 안용대
Original assignee: 주식회사 팜스킨
Priority date: 2017-03-24
Filing date: 2018-03-23
Publication date: 2018-10-04
Also published as: WO2018174369A1; WO2018174669A1

Abstract

본 발명은 초유의 발효산물과 이를 이용한 화장료 조성물에 관한 것으로써, 더욱 상세하게는 초유를 발효균, 특정 유산균, 또는 복합균 등으로 발효 처리하여 얻어지는 초유의 발효산물과 이를 이용하여 항염 및 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과가 있는 기능성 원료 조성물에 관한 것으로, 이러한 초유의 발효산물은 화장료 조성물, 식품조성물, 약제조성물 등의 용도로 적용 가능한 것이다.

Description

초유의 발효산물과 이를 이용한 화장료 조성물{Fermented product of colostrum and a cosmetic composition using the same}

본 발명은 초유의 발효산물과 이를 이용한 화장료 조성물에 관한 것으로써, 더욱 상세하게는 초유를 발효균, 특정 유산균, 또는 복합균 등으로 발효 처리하여 얻어지는 초유의 발효산물과 이를 이용하여 항염 및 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과가 있는 새로운 조성으로 얻어지는 기능성 원료 조성물에 관한 것으로, 화장료조성물, 식품조성물, 약제조성물 등의 용도로 적용 가능한 것이다.

인간이 가지고 있는 기관 중 가장 큰 기관이 피부이다. 피부는 표피와 진피로 구성이 되어있다. 표피는 지속적으로 세포가 분열을 하며, 여러 종류의 층을 만들게 된다. 이때 가장 바깥쪽의 세포들은 죽고 단단해 지게 되어 외부의 스트레스로부터 신체를 보호하여 주는 가장 뛰어난 방어기관 중에 하나이며, 세균 또한 이 피부를 뚫지 못한다.

피부의 경우 피지선과 땀샘을 가지고 있기 때문에 피지선에서는 피지를, 땀샘에서는 수분을 분비하여 인간 스스로 피지 막을 만들어 내고 각질층을 보호하게 되는데, 이 때문에 사람의 피부는 항상 촉촉하며, 윤기가 흐르고 매끄러운 상태를 유지할 수 있게 된다.

사람의 경우 이 각질층의 수분함량이 20%가 되었을 때가 가장 이상적인 피부이며, 아름다움이 한껏 돋보이는 상태이다. 하지만, 수분 함량이 10% 이하로 떨어지게 되면 피부를 지켜주어야 할 각질이 제자리에 있을 수 없고 떨어져 나가거나 그 사이가 벌어지게 되어, 이물질이나 세균의 침투가 용이하게 되어 염증이 생기거나 질병, 알레르기 등이 발생할 확률이 증가한다. 또한, 신진대사를 원활히 못하게 되어 위와 같은 자극이 더 가중된다. 게다가 자연 공해, 자외선, 실내 환경 등에 의해 민감성 피부를 가진 사람들이 증가하고 있는 추세이다. 이런 민감성 피부의 경우, 대중적인 피부 화장품 조성물을 사용할 때에 부작용을 일으켜, 홍반, 따가움, 가려움, 심할 경우 염증반응을 나타내게 된다.

화장품이란 피부를 외부로부터 보호, 단장, 청결을 목적으로 하는 것이지만, 화장품의 조성물을 자세히 보게 되면 본래의 뜻과는 다르게 제품의 형성에 있어서 꼭 필요한 성분이 들어가게 되어 그 성분들이 오히려 피부를 자극할 수 있다. 예를 들어, 유화제, 향료 그리고 방부제 등이 이에 속한다. 이들은 화학 반응 합성으로 만들어지는 경우가 대부분이기 때문에 민감성 피부의 경우, 염증 반응, 알러지, 홍반 등을 동반할 확률이 증가하게 된다.

유산균은 물질대사에 의해 탄수화물을 젖산으로 분해시키는 세균을 칭한다. 젖산이 많아지면 산도가 낮아지게 되고 그 산도에 의해서 유산균 스스로 죽는 경우가 발생한다. 그렇기 때문에 발효시키는 시간은 중요하며, 산화적 스트레스에 내성을 가지게 하는 것 또한 방법이다.

유산균이 내놓는 젖산은 굉장히 많은 역할을 한다. 항산화, 항암, 항방사능 등 해독 역할을 하며 또한 항염 효과도 있다. 또한, 각질층의 수분결합을 증가시키는 능력도 있어 피부의 미세한 주름을 개선시키고 피부를 부드럽게 만들어 주기도 한다.

인터루킨(Interleukin)1(IL-1)은 활성화 된 단핵식균세포, 상피세포 또는 혈관내피세포 등 여러 세포에서 만들어지며, 염증반응을 매개하는 사이토카인(cytokine)의 한 종류이다. 또 다른 대표적인 염증성분에는 cytokine Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α)가 존재한다.

반대로 염증 반응을 감소시키는 사이토카인도 있는데 Interleukin-10이다. Interleukin-10의 경우는 대식세포에 존재하는 inducible nitric oxide synthase(iNOS)와 inducible cyclooxyganase (COX-2) 등 염증과 관계되는 효소의 표현을 억제하는 역할을 한다.(Niiro, Hiroaki, et al, 1995)

기존의 초유에는 락토페린(Lactoferrin)이 존재하기 때문에 항염의 효과가 있다. 락토페린의 경우, Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α) 이나 Interleukin1(IL-1)등의 조절에 대한 역할을 하는 것으로 익히 알려져 있다(Yamanaka, 2003).

또한, 초유에는 Insulin-like Growth Factor-1(IGF-1)이 함유되어 있는데, IGF-1은 전체적인 성장을 촉진하며, 세포 성장과 증폭을 조절할 수 있는 능력을 가지고 있는 것으로 알려져 있다 (Uruakpa et al, 2002).

초유에 함유되어 있는 카세인(casein)의 경우 우유 전체 성분의 3%, 유단백질중 약 80%를 차지하고 있고, 섭취시 우리 몸에 알러지를 일으키는 성분으로 밝혀져 있다(G. H. Docena et al, 1996). 또한, 카세인은 화장품 성분으로 쓰이고 있으나, 연구가 충분히 진행되어 있지 않다.

그 외에도, 초유에는 각질제거 성분이 함유되어 있으며(권유빈, et al. 2007), 멜라닌 색소를 억제하여 미백효과를 야기하는 TGF-beta가 함유되어 있는 것으로도 알려져 있고(Martinez-Esparza M, et al, 1997), 또 초유에는 보습 효과가 뛰어다나고 증명된 히알루론산이 많이 함유되어 있다(Pedersen, et al, 2014).

기존에 이러한 초유를 이용한 화장품 조성물로써, 한국등록특허 제10-0964831호에서는 초유를 유효성분을 함유하는 피부 각질분화 촉진용 화장료 조성물이 제안되어 있는데, 여기서는 초유 성분이 항염, 항알러지, 보습 효과에 대해 설명하고 있는 등 초유 성분의 피부각질분화 촉진 효능을 비롯한 화장품 적용의 다양한 유용성에 대해 설명하고 있다.

또한, 한국등록특허 제10-1003740호에서는 신규한 스트렙토코쿠스 서머필루스(Streptococcus thermophilus) 균주 및 이를 이용한 양돈용 발효 초유 프로바이오틱으로 가축의 증체율을 향상시키고, 대장균과 살모넬라 등 장내 유해 미생물의 증식을 억제시켜 세균성 설사 질병을 예방하고 가축의 폐사를 억제시켜 항생제 사용의 감소 및 생산성 향상에 관하여 제안하고 있다. 또한, 한국공개특허 제10-2002-0021908호에서는 초유를 젖산균을 이용해 발효시킨 건강보조식품으로써, 젖산균을 이용한 발효의 방법으로 초유 내 존재하는 유해 미생물의 함량을 줄이고, 초유가 지니는 각종 기능성 물질을 그대로 이용하는 것이 가능한 건강보조식품에 관하여 제안하고 있다.

그 외에도, 한국등록특허 제10-0619289호에서는 초유의 알부민을 미백제인 알부틴과 연계한 미백 화장품의 제조방법에 대해 공지되어 있고, 한국공개특허 10-2009-0071998호에서는 초유를 유효성분으로 하는 피부각질분화 촉진용 조성물이 제안되어 있으며, 미국등록특허 제5750149호에서는 말의 초유로부터 유래되는 물질을 함유하는 화장품에 관한 기술이 제안되어 있다.

그러나 상기와 같은 특허발명에서는 일부 초유의 유산균 발효 기술이 알려져 있고, 초유 성분의 여러 효능과 알부틴에 의한 미백 효과 및 초유의 면역 요소의 피부로의 흡수 효과를 제안하고 있지만, 화장품 등으로 적용 가능한 실효성이 있는 추출물이나 우수한 항염, 피부자극완화 효과가 향상된 화장료 성분에 관한 기술을 제대로 제안하고 있지 못하다.

한국등록특허 제10-0964831호 한국등록특허 제10-1003740호 한국공개특허 제10-2002-0021908호 한국등록특허 제10-0619289호 한국공개특허 제10-2009-0071998호 미국등록특허 제5,750,149호

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하고 초유 성분의 활용성을 연구하던 결과를 토대로 하여, 초유 성분을 천연 성분인 유산균으로 발효 처리하여 고기능성 발효산물을 제조하는 것을 해결과제로 한다.

따라서 본 발명의 목적은 초유를 유산균으로 발효 처리한 새로운 조성의 초유 발효산물을 제공하는데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 초유의 유산균 발효산물을 항염 및 피부자극완화용 화장품으로 적용하는 용도를 제공하는 데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 초유성분을 유산균으로 발효 처리하여 새로운 조성의 초유 발효산물을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 초유의 발효산물을 피부미백, 보습, 주름개선 등에 효과가 있는 화장료 조성물로 적용하는 용도를 제공하는 데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 초유의 발효산물을 피부미백용, 보습용, 또는 주름개선을 위한 식품조성물 및 약제조성물로 적용하는 용도를 제공하는 데 있다.

상기와 같은 과제해결을 위하여, 본 발명은 초유가 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus)와 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중 하나이상의 유산균, 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합 유산균을 포함하는 유산균으로 발효된 것을 함유하는, 초유의 유산균 발효산물을 제공한다.

또한, 본 발명은 초유를 급냉한 다음 저온 살균 처리하여 발효원료를 준비하는 단계; 상기 단계에서 얻은 발효원료에 유산균을 접종하고 발효하여 발효액을 얻는 단계를 포함하는 초유의 유산균 발효산물을 제조하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 발효산물을 추가적으로 효소를 이용하여 발효추출물을 얻는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물을 제조하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 특정의 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물을 포함하는 항염 및 피부자극완화용 화장품 조성물을 제공한다.

한편, 본 발명은 초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 피부미백용 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 피부보습용 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 피부의 주름개선 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 주름개선용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용, 피부미백용, 보습용 또는 주름개선용 화장료 조성물, 식품조성물 또는 약제조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 초유의 발효에 의한 발효산물은 예컨대 천연 성분인 유산균을 이용하여 초유에 함유된 특정 유효성분을 증대시키고 나아가 추출 효율을 개선함으로써 기존의 초유나 우유 등 유사 성분에 비해 우수한 활성성분이 함유되어 있다.

특히, 본 발명에 따른 초유의 발효산물은 그 제조가 간단하고 용이하며, 종래부터 식품제조에 이용되고 있는 천연 미생물을 이용한 것이므로 안정성이 높다. 또한, 유산균 발효에 의해 얻어진 초유 발효산물은 기존에 비해 항염 효과가 매우 우수하여 상승된 항염 효과 및 피부자극완화 효과를 나타낸다.

그러므로 본 발명에 따른 초유의 발효산물을 이용하여 화장품을 제조하는 경우 기존 초유성분에서 발현되는 미백, 보습, 각질 제거 효과 이외에도 피부염증 및 피부트러블의 완화 효과를 얻을 수가 있어서, 항염 및 피부자극완화용 화장품 제조에 매우 유용한 효과가 있다.

또한, 본 발명의 초유 발효산물은 피부미백용, 보습용 또는 주름개선용 화장품이나 식품조성물. 그리고 약제조성물로 유용한 효과가 있다.

도 1은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 일 구현예로써, 실시예에서 적용한 유산균 발효 초유 추출물의 제조과정의 일예를 도식화한 공정도이다.
도 2는 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조된 유산균 발효 초유 추출물의 항염 효과에 대한 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조된 초유의 호기성 발효산물의 피부자극완화 효과에 대한 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 타이로시나제 활성 저해 시험을 실시하고 미백효과에 대한 결과를 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 항산화 효과(DPPH)에 대한 비교 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 세포독성 효과에 대한 비교 실험결과로써, 각 시료의 농도별로 12시간 세포생존율을 MTT assay를 통해 측정결과를 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 Keratinocyte를 이용한 AQP3 mRNA 발현양 확인시험(아쿠아포린 실험) 결과로써, 각 시료의 농도별 mRNA 발현량 측정에 대한 비교 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 도 6에 대한 시료별 cDNA의 real-time PCR 사진이다.
도 9는 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 항산화 효능(SOD생성능 확인)에 대한 비교 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 10은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 수분손실량 측정을 통한 보습효과에 대한 비교 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 11은 본 발명에 따른 초유의 발효산물에 대한 실험예로써, 실시예에서 제조한 초유 발효산물과 우유, 우유 발효산물 및 초유에 대하여 프로스타글란딘(Prostaglandin E₂) 생성 억제 효과에 대한 비교 실험결과를 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명을 하나의 구현예로써 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 초유에서 얻어지는 보다 활용성이 우수한 발효산물로써 특정의 유산균으로 발효하여 얻어지는 새로운 조성의 초유의 유산균 발효산물에 관한 것이다.

본 발명에서 얻어진 초유의 유산균 발효로 얻어지는 발효산물은 항염 활성이 우수하므로 기존에 화학합성 화장품 조성물을 대체 및 보완하기 위하여, 유산균 발효를 통하여 천연 화장품 조성물 제조에 적용하면 피부염증완화 효과 및 피부자극완화 효과를 증진시킨 새로운 화장품 조성물로 제공될 수 있다.

본 발명은 발효 원료로써 초유를 효율적으로 사용하여 그 활용성을 높이고자 하는 것에서 출발한다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유가 특정 락토바실러스균(Lactobacillus)인 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus) 또는 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG)을 포함하는 유산균으로 발효된, 초유의 유산균 발효산물을 제공할 수 있다.

본 발명의 더욱 바람직한 구현예에 따르면, 초유가 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합 유산균을 포함하는 유산균으로 발효된, 초유의 유산균 발효산물을 제공할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유 발효산물은 일 예로써, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물이 바람직하게 사용될 수 있다.

본 발명의 더욱 바람직한 구현예에 따르면, 초유가 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균과 여기에 스트렙토코커스균(Streptococcus), 더욱 좋기로는 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합 유산균을 포함하는 유산균으로 발효된, 초유의 유산균 발효산물이 제공될 수 있다.

본 발명에 따르면, 이러한 초유의 유산균 발효산물은 항염 및 피부자극완화, 피부미맥, 피부보습, 주름개선 등에 예측할 수 없었던 우수한 효과를 나타낸다.

한편, 본 발명은 초유에서 얻어지는 보다 활용성이 우수한 발효산물로써 초유를 유산균에 한정되지 않고 발효가 가능한 균으로 발효하여 얻어지는 새로운 조성의 초유의 발효산물의 새로운 용도를 포함한다.

본 발명에서 얻어진 초유의 발효로 얻어지는 발효산물은 항염 및 피부자극완화, 미백 활성, 피부보습, 주름개선 등의 효능이 우수하므로 기존에 화학합성 화장품 조성물을 대체 및 보완하기 위하여, 초유의 발효를 통하여 천연 화장품 조성물 등의 제조에 적용하면 특히 항염 및 피부자극완화, 미백 활성, 피부보습, 주름개선 등의 효과를 월등하게 증진시킨 새로운 화장료, 식품조성물 또는 의약조성물로 제공될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유를 발효균으로 발효시킨 초유 발효산물의 기능성 조성물을 제공한다. 구체적으로는 항염 및 피부자극완화, 피부미백, 피부보습, 주름개선 등에 효과가 있는 조성물이 제공될 수 있다.

본 발명의 더욱 바람직한 구현예에 따르면, 초유를 발효시키기 위한 발효균으로써는, 예컨대 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균이 적용될 수 있는데, 그 구체적인 예로써는 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 퍼멘툼(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 헬베티커스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 등이 사용될 수 있고, 비피도박테리엄 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 아니말리스(Bifidobacterium animalis) 등이 사용될 수 있으며, 또한 스트렙토코커스 균으로써, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)가 사용될 수 있고, 그 외에도 엔테로코커스(Enterococcus), 락토코커스(Lactococcus) 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유의 발효산물은 초유를 발효균으로 발효시켜 얻은 발효액, 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액 중에서 어느 하나 이상을 포함할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유 발효산물은 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균과, 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것이 바람직할 수 있다.

본 발명의 더욱 바람직한 구현예에 따르면, 유산균으로 발효시키는 것이 바람직한 결과를 얻을 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유 발효산물은 발효균으로써 상기 언급한 유산균 또는 유산균과 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것이 더욱 바람직할 수 있다.

본 발명에서 발효 원료로써 사용되는 초유는 통상적으로 분만 후 3일 이내에 짠 젖을 바람직하게 사용할 수 있다.

본 발명은 발효 원료로써 사용되는 초유는 바람직하게는 소 초유를 사용할 수 있고, 여기서 초유는 통상적으로 염소, 산양 등 가축동물의 초유를 포함하는 개념이며, 이에 한정된 것은 아니다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유를 이용하기 위해서는 예컨대 초유를 급속 냉각한 다음 저온 살균 처리하여 발효원료를 준비하는 단계를 거친다.

본 발명에서의 저온 살균처리는 통상의 저온 살균법에 의해 수행할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 단계에서 얻은 발효원료에 유산균을 접종하고 발효하여 발효액을 얻는 단계를 거칠 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 유산균 발효에는 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균 또는 여기에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합 유산균을 바람직하게 사용할 수 있다. 이러한 특정 유산균의 선택적 사용은 예컨대 상승효과를 얻기 위한 바람직한 목적 달성을 위해 중요한 요소가 될 수 있다.

본 발명에 따르면, 예컨대 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus)은 발효 과정에서 D-락트산(D-Lactic acid)를 생산하여 해독역할 및 항염 효과를 나타내고, 주름개선 및 피부결을 개선하는 효과를 발현할 수 있다.

또한, 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG)는 습진 예방과 아토피 예방에 효과를 발현할 수 있으며, 그람양성균인 황색 포도상구균(staphylococcus aureus)이 각질세포에 자리 잡고 성장하는데 방해하거나, 각질 세포 이동과 세포 번식에 도움을 주어 재상피화(re-epithelialization)에 기여하는 효과를 발현할 수 있다.

그러므로 본 발명에서 락토바실러스균(Lactobacillus)만을 단일로 사용하는 경우는 상기 2개의 균에서 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.

또한, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 피부 각질층 구조 형성이나 이 기능에 필수적인 세라마이드 양을 증가시키는 등 피부에 바람직한 영향을 줄 수 있다.

또한, 본 발명에 따르면 예컨대 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG)와 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 그 혼합사용에 의한 상승효과로써 인터루킨-10(Interleukin-10)을 생성하여, 우수한 항염 효과를 나타낼 수 있다.

본 발명에 따르면 상기한 바와 같은 유산균을 사용하는 경우 이러한 유산균들의 사용으로 인해 초유의 락토페린과 함께 항염 효과를 증진시키는 상승효과를 나타내게 된다.

본 발명에 따르면, 상기한 바와 같이 초유의 발효를 통해 피부 미백 활성을 크게 증가시킬 수 있으며, 일부 특정 균이나 다양한 균을 복합적으로 사용하는 경우 초유의 TGF-ß와 함께 피부 미백 효과를 더욱 증진시키는 상승효과를 나타낼 수 있다.

또한, 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에서 초유 발효에 적용 가능한 발효균 중에서 일부 균은 그 자체로써 피부보습 및 피부건선치료 효과에 기여할 수 있다.

예컨대, 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG)는 습진 예방과 아토피 예방에 효과를 발현할 수 있으며, 그람양성균인 포도상구균(staphylococcus aureus)이 각질세포에 자리 잡고 성장하는데 방해하거나, 각질 세포 이동과 세포 번식에 도움을 주어 재상피화(re-epithelialization)에 기여하는 효과를 발현할 수 있다.

본 발명에 따르면, 상기한 바와 같이 초유의 발효를 통해 피부보습 및 피부건선치료 활성을 크게 증가시킬 수 있으며, 일부 특정 균이나 다양한 균을 복합적으로 사용하는 경우 초유의 락토페린과 함께 피부보습과 건선치료 효과를 더욱 증진시키는 상승효과를 나타낼 수 있다.

그러나 상기와 같은 여러 기능성 효과들은 일부 발효균에 의해 도움을 받지만 본질적으로는 초유의 발효 후에 얻어지는 발효산물의 효과에 기인하는 것이다. 특히, 초유를 유산균과 다른 균의 복합균으로 발효하는 경우 그 효과는 더욱 우수한 상승효과로 나타난다.

본 발명에 따르면, 예컨대 유산균으로 사용되는 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus)와 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)는 두 균의 서로에게 폴리아민을 제공하여 산화적 스트레스로부터 스스로를 지킬 수 있게 된다는 점에서 혼합 사용의 경우 더욱 바람직한 상승효과를 기대할 수 있다.

상기와 같은 결과로부터, 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합 유산균을 사용하는 경우는 젖산의 생성을 바람직하게 유도하고 항균, 항염 효과와 미백, 보습, 주름개선 등의 효과를 매우 현저하게 증진시키므로 상기와 같은 상승효과를 기대할 수 있을 것이다.

더욱 바람직하게는 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 및 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 등 상기 3종의 균을 함께 사용하는 경우에는 더욱 증진된 상승효과를 나타낼 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 발효균에 의한 발효 또는 더욱 바람직하게는 유산균이나 유산균과의 복합균에 의한 발효는 발효 원료인 저온 살균한 초유에 상기와 같은 유산균을 접종하고 온도 30~50℃에서 30~120분간 발효시킬 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 발효 과정을 거친 다음에는 이를 원심분리하여 발효액을 얻는 단계를 거쳐서 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물을 얻을 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명이 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물은 카세인이 제거된 것일 수 있다.

따라서 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물은 바람직하게도 추가적으로 상기 발효액을 효소를 이용하여 발효추출물을 얻는 단계를 포함할 수 있다.

본 발명에 따르면 상기 발효액을 효소를 이용하여 발효추출물을 얻는 단계는 예컨대, 발효과정을 거친 초유 발효액을 정제하기 위한 응집과정을 거치는 것이 바람직하다.

그러므로 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 발효액을 효소를 이용하여 응집하여 초유의 발효산물 또는 유산균 발효 초유 추출물을 얻는 단계를 포함할 수 있다.

이 과정에서는 유산균 발효에 의해 얻어진 발효액에 함유된 카세인(casein) 등의 부정적 영향을 줄 수 있는 것들을 제거하기 위하여, 또는 유단백질 중 함유량이 많은 카세인을 제거함으로써 기능성 성분 함량을 증가시킬 수 있다. 그러므로 효소를 첨가하여 응집반응을 통해 카세인 등의 성분을 제거하는 과정을 거치는 것이다.

따라서 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 효소 첨가 이후에는 추가적으로 효소 첨가물을 원심분리하고 여과하는 단계를 포함하는 정제 과정을 포함할 수 있다. 이러한 과정을 거친 후 보다 정제된 발효산물인 유산균 발효 초유 추출물 형태로 초유의 발효산물을 얻을 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 카세인 등의 제거를 위해 사용되는 효소로써는 예컨대 응고효소 역할을 위한 효소 복합체를 사용할 수 있으며, 구체적으로는 예를 들어 렌넷(rennet)을 바람직하게 사용할 수 있다.

여기서 예시된 렌넷은 반추동물의 배속에 있는 효소 복합체를 뜻한다. 즉, 렌넷은 단백질 가수 분해 효소의 하나인 레닌(rennin)을 함유하는 응고효소(凝固酵素)로써, 송아지의 위액(胃液) 속에 펩신과 함께 들어 있는 것으로 알려져 있으며, 이러한 렌넷은 우유에 작용하여 카세인을 침전시키는 특성을 가지는 것으로 알려져 있고, 소의 위장 효소 렌넷을 사용해 짧게 숙성시킨 치즈는 향이 좋고 입에 닿는 느낌이 매끄럽다고 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 효소는 상기 언급한 렌넷과 유사한 성질을 나타내는 효소를 모두 포함하는 것으로 이해될 수 있다.

본 발명에 따르면 이러한 렌넷으로 대표되는 효소를 사용하는 경우 유산균 발효 초유에 함유된 카세인과 응집반응을 일으켜 카세인을 제거하는데 바람직하게 사용될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 효소 첨가 과정에서는 바람직하게는 유산균 발효 후 얻어진 초유의 발효액을 30~40℃에서 효소를 첨가한 다음 30~120분간 응집시킬 수 있다.

또한, 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 효소 첨가 과정에서는 추가적으로 카세인 등의 성분에 대한 응집과정을 거친 다음 원심분리하고 여과하여 발효액을 회수하는 단계를 거칠 수 있다. 이러한 과정을 거침으로써 카세인 성분이 실질적으로 제거된 초유의 유산균 발효산물을 얻을 수가 있는 것이다. 이렇게 얻어진 초유의 유산균 발효산물은 예컨대 카세인이 제거된 유산균 발효 초유 추출물의 형태로 제조될 수 있는 것이다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유의 발효산물은 추가적으로 여과하여 살균하는 단계를 거쳐 제조될 수 있다.

이와 같이 본 발명에 따라 얻어진 유산균발효 초유 추출물은 제조 후에 2회 또는 수회의 여과를 거쳐 혹시 있을지 모를 균을 제거하여 사용할 수도 있다.

본 발명에 따라 상기와 같은 단계를 거쳐 얻은 유산균 발효 초유 추출물은 초유의 발효산물의 바람직한 일예로써, 기존에 초유로부터 유래된 어느 성분과도 상이한 매우 유용한 성질을 나타내는 것으로 확인되었다.

따라서 이러한 본 발명에 따른 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물은 초유를 특정 유산균으로 발효하여 얻어지는 발효액, 실질적으로 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액, 발효액이 정제 처리된 발효산물 또는 유산균 발효 초유 추출물 중에서 어느 하나 이상을 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 초유의 발효산물로써 가장 바람직한 유형의 일 예는 발효액을 정제하여 카세인이 함유되지 않고 살균 처리한 정제된 유산균 발효 초유 추출물일 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기와 같이 초유를 특정 유산균으로 발효 처리함으로써 종래와는 달리 우수한 효과를 나타낼 수 있으며, 특히 본 발명의 유산균과 다른 균을 복합적으로 사용하게 되면 상승효과를 발휘하기 때문에, 단독의 유산균을 사용하는 것에 비해 월등하게 우수한 활성을 나타내는 것이 확인되었다. 대표적으로 유산균과 스트렙토코커스균을 복합적으로 사용하는 경우 우수한 상승효과를 기대할 수 있는 놀라운 결과를 얻을 수 있다.

이와 같이, 본 발명에 따른 초유의 발효산물 또는 유산균 발효산물, 예컨대 특히 유산균발효 초유 추출물은 유산균 발효에 의해 사이토카인 발생의 억제, 항염 활성, 미백, 보습, 주름개선 등의 유용한 효과에 대한 효과를 얻음과 동시에 정제 과정을 거치는 경우 카세인 등에 의한 단점을 배제함과 동시에 기능성 성분의 함유량을 증가시킴으로써, 더욱 바람직한 결과를 보이는 항염과 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과를 동시에 얻을 수가 있어서 기존에 예측할 수 없었던 우수한 상승효과를 나타낼 수 있는 것이다.

한편, 본 발명은 기존에 사용되고 있는 화장품인 화학합성 화장료 조성물을 대체 및 보완하기 위하여, 본 발명에 따른 초산의 발효산물을 이용하여 천연 화장료 조성물을 제조함으로써 피부염증완화, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과를 증진시킨 새로운 화장료 조성물의 제공을 포함한다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 초유의 발효산물을 함유하는 화장료 조성물의 경우 염증유발 사토카인의 발생을 억제하고 인터루킨-10 (Interleukin-10) 발현이 촉진됨으로써 매우 유의성이 있는 피부의 항염 및 피부자극완화 효과를 나타낼 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 초유의 발효산물, 예컨대 특히 초유 발효추출물은 초유의 발효에 의해 타이로신 억제 활성, 즉 멜라닌 생성 억제 효과를 발현하는 것으로 나타났다.

멜라닌은 페놀류가 산화효소에 의해 산화되어 유도된 갈색 또는 흑색 고분자 색소의 총칭으로 생체 안에서는 빛을 흡수하는 역할을 한다. 멜라닌의 전구체인 Tyrosine이 자연 산화하면 Tyrosinase라는 효소의 작용으로 멜라닌이 합성된다. 이 때, Tyrosinase는 인체 내의 멜라닌 생합성 경로에서 가장 중요한 초기 속도 결정 단계에 관여하는 효소로써 본 발명에 따른 초유 발효산물은 이러한 Tyrosinase 효소를 억제하는 놀라운 효과가 있다.

또한, 초유의 발효산물은 정제 과정을 거치는 경우 카세인 등에 의한 단점을 배제함과 동시에 기능성 성분의 함유량을 증가시킴으로써, 특히 우유 발효산물이나 초유에 비해 예측할 수 없었던 더욱 우수한 피부미백 효과를 나타낼 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 초유 발효산물은 기존의 우유나 초유와는 달리 멜라닌 생성 억제에 대한 실질적인 피부미백 활성을 나타내면서 초유 발효산물에 함유된 다양한 성분들에 의해 피부환경을 개선해 줌으로써, 천연 화장품으로 피부에 색소침착 등이 생기지 않도록 피부환경을 만들어 줄 수 있으므로 피부미백용 화장료로 적합하게 이용될 수 있는 것이다.

따라서 본 발명에 따른 초유 발효산물의 피부미백용 조성물을 화장료로 사용하는 용도는 기존에 알려진바 없는 신개념의 천연 화장료인 것이다.

본 발명에 따르면 이러한 초유 발효산물의 미백용 화장료 조성물을 멜라닌 생성을 유발하는 Tyrosinase 효소를 억제하여 매우 유의성이 있는 피부의 미백 효과를 나타낼 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 초유의 발효산물, 예컨대 특히 초유 발효추출물은 초유의 발효에 의해 사이토카인 발생의 억제, 항염 활성 등 유용한 효과 이외에도 특히 피부보습 및 건선치료에 대한 효과를 나타내는 놀라운 효과가 있다.

초유 발효산물은 정제 과정을 거치는 경우 카세인 등에 의한 단점을 배제함과 동시에 기능성 성분의 함유량을 증가시킴으로써, 특히 우유 발효산물이나 초유에 비해 예측할 수 없었던 우수한 피부보습 효과를 나타낼 수 있는 것이다.

건선(psoriasis)은 피부에 은백색의 비늘로 덮여 있는, 경계가 뚜렷하며 크기가 다양한 홍반성 구진 및 판을 형성하는 질환으로, 조직학적으로 상피의 과다증식을 특징으로 하며 악화와 호전이 반복되는 만성염증성 피부병이다.

건선의 원인은 일반적으로 유전적 요인, 환경적 악화 혹은 유발요인, 면역학적 요인 등이 건선의 원인으로 보고 있으나 명확하지는 않다. 현재 건선은 유전적 요인 하에 개인의 생활과 환경적 요인이 유발인자로 작용하며, 면역학적 요인에 의해 각질형성세포의 증식과 염증반응이 일어나는 것으로 알려져 있다. 건선의 악화 또는 유발요인으로는 피부외상, 감염, 겨울 같은 차고 건조한 기후, 건조한 피부, 스트레스, 약물 등이 있어서 피부보습과 관련성이 있다.

건선은 주로 대칭성으로 발생하며, 정강이, 팔꿈치, 무릎, 엉치뼈, 두피, 목 등 자극을 많이 받는 부위에 발생한다. 건선은 초기에는 피부에 붉은색의 작은 좁쌀알 같은 발진이 생기고, 이것이 점점 커진다. 그리고 주위에서 새로운 좁쌀 같은 발진이 생기는데 이것도 커지면 서로 합쳐지게 된다. 건선 부위에는 하얀 비늘과 같은 인설이 겹겹이 쌓여 나타나고, 인설을 제거하게 되면 점상 출혈이 나타나는 문제가 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 초유 발효산물은 기존의 우유나 초유와는 달리 항염, 항균 효과가 우수하며, 여드름 원인균에 대해서도 활성을 나타내고 보습효과도 나타낸다. 그러므로 실질적인 보습효과와 건선치료 활성을 나타내면서 초유 발효산물에 함유된 다양한 성분들에 의해 피부환경을 개선해 줌으로써, 천연성분의 보습용 화장료 조성물로 적합하게 이용될 수 있는 것이다.

따라서 본 발명에 따른 초유 발효산물의 보습용 화장료 조성물은 기존에 알려진바 없는 신개념의 천연 화장료인 것이다.

본 발명에 따르면 이러한 초유 발효산물의 피부보습용 조성물은 건선치료에도 유용한 유효성분으로써, 바람직하게는 직접적인 항염, 항균, 피부건조, 알러지 등 발생 원인에도 강력한 억제 효과가 있다.

또한, 초유 발효산물은 정제 과정을 거치는 경우 카세인 등에 의한 단점을 배제함과 동시에 기능성 성분의 함유량을 증가시킴으로써, 특히 우유 발효산물이나 초유에 비해 예측할 수 없었던 우수한 주름개선 효과를 나타낼 수 있는 것이다.

피부 노화 및 피부 주름을 개선시키기 위해서 피부 자체에 영양을 공급하거나 피부 재생을 돕거나 피부 노화를 발생시키는 환경들을 배제하는 방법들이 주로 사용되고 있다. 주름살의 시작은 진피의 노화에서부터 진행되는데, 표피와 진피의 경계부위인 유두층의 굴곡이 점점 펴지며 탄력섬유인 엘라스틴 섬유와의 부착력을 잃게 되고 엘라스틴의 구조가 변화되고 피부는 늘어지면서 주름이 접히게 된다. 한 개의 주름살을 형성하기 위해서는 늘어진 피부가 필요하다. 노화 과정 중에 피부는 늘어지게 되고, 장기간에 걸쳐 확실한 물리적인 변화들이 나타나게 된다.

노화의 이론 중 최근 주목받고 있는 이론은 활성산소설에 의한 자유유리설이다. 인체가 섭취한 산소의 약 95% 이상은 세포의 대사과정에서 생성되는 전자와 결합하여 물로 환원되지만 2∼3%의 일부 산소가 불완전 환원으로 전자를 흡수하려는 Free radical 과정에서 세포의 파괴 작용을 초래하는데 이를 활성산소(Active oxygen)라고 한다. 활성산소가 지질과 단백질로 구성된 세포막에 작용하면 지질과산화가 유발되고 최종산물인 Malondialdehyde(MDA)의 함량이 증가된다. MDA는 혈관벽 내막에서 저밀도지단백(Low Density Lipoprotein, LDL)을 화학적으로 변형시키며, 변형된 저밀도지단백은 대식세포 내에서 콜레스테롤을 새로이 합성하여 에스터가 침착되면서 포말세포를 형성하는데 이러한 세포의 산화적 손상이 생리적 기능을 저하시키므로 노화가 이루어진다.

노화에 따라 생체에는 산화 물질인 활성산소(O2-, OH-), 산화질소(NO), 과산화수소(H₂O₂) 등의 혈액 내 농도가 올라가게 되어 각종 질환과 세포의 노화가 촉진된다. 활성산소는 피부 세포의 손상을 유발한다. 활성산소가 지나치게 많아지면 체내의 항산화 방어계를 무너뜨리고 그 결과 단백질, 지질, DNA와 같은 세포 성분이 손상 받게 되어 세포 기능이 변질되어 궁극적으로 피부노화가 촉진된다. 또한, 활성산소는 결합조직을 손상시킨다. 활성산소는 교원질 대사에 작용하여 직접적으로 교원질을 파괴시킬 뿐 아니라 콜라겐의 결핍을 초래하게 된다. 인간은 지속적으로 활성산소의 위협에 노출되어 있는 것이고, 활성산소를 억제하는 항산화 활성은 활성산소 및 산화 물질을 억제하여 주름개선에도 기여한다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 초유 발효산물은 기존의 우유나 초유와는 달리 항염, 항균 효과와 항산화 효과도 우수하고 보습효과도 나타낸다. 그러므로 이러한 초유 발효산물은 실질적인 주름개선에 우수한 활성을 나타내면서 초유 발효산물에 함유된 다양한 성분들에 의해 피부환경을 개선해 줌으로써, 천연성분의 주름개선용 화장료 조성물로 적합하게 이용될 수 있는 것이다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 화장품 조성물에서 초유의 유산균 발효산물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~40중량%의 양으로 함유될 수 있다. 상기의 함량 범위의 하한치를 벗어나면 그 효과가 현저하게 감소되며, 상한치를 벗어나면 화장료 제형으로 제조하기 곤란하거나, 경제적인 측면에서 바람직하지 아니하다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기와 같은 방법으로 제조된 초유의 유산균 발효산물은 예컨대 유산균 발효 초유 추출물로써 화장품 조성물에 여러 가지 성상으로 첨가할 수 있으며, 예컨대, 분말상, 액상, 나노캡슐, 복합체 등의 형태로 첨가될 수 있으며, 바람직한 예로써는 액상으로 첨가될 수 있다.

본 발명에 따르면, 초유의 유산균 발효산물이 함유된 화장품 조성물로써는 화장수(스킨로션), 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 영양에센스, 클렌져, 마스크팩 등의 화장료 제형으로 사용될 수 있으며, 특별히 여기에 한정하는 것은 아니며, 기타 모발용 제제나 다양한 기능성 효과를 위한 피부용 제제에 사용될 수 있다.

본 발명에 따라 제조된 화장품 조성물에 함유된 초유의 유산균 발효산물은 그 제조과정에서 사용된 원료는 초유이고 이를 발효하는데 사용된 유산균은 종래부터 식품제조에 이용되고 있는 천연 미생물이므로 추출물 자체에 대한 안정성이 높으며, 특히 유산균 발효를 통해 상승효과로 발현되는 우수한 항염 및 피부자극완화 효과와 미백, 보습, 주름개선 등의 효과로 인하여 이러한 성분이 함유된 화장품을 피부에 사용하는 경우 염증 발생을 사전에 예방할 수 있을 뿐만 아니라, 현저하게 우수한 피부염증완화 효과 및 피부자극완화 효과를 나타낼 수 있고, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과가 있어서 신개념 화장품 조성물로 매우 유용할 것으로 기대된다.

본 발명에 따른 초유 발효산물의 화장료 조성물의 경우 그 원료는 초유이고 이를 발효하는데 사용된 발효균은 종래부터 식품제조에 이용되고 있는 천연 미생물이므로 추출물 자체에 대한 안전성이 높으며, 피부염증완화, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과에 있어서 우유나 발효 우유, 초유 등에 비해 월등하게 우수한 효과를 나타낸다.

특히, 초유를 발효시키되 유산균과 다른 균의 복합균을 사용하여 발효한 초유 발효산물의 경우는 그 복합균 발효에 의한 상승효과로 항염, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 효과가 더욱 우수하다.

이와 같이, 본 발명에 따른 초유 발효산물의 항염, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 용도로 적용되는 화장료 조성물을 적용하여 피부에 화장품으로 사용하는 경우 또는 약제조성물로써 적용하여 예컨대 피부연고제로 사용하는 경우 피부염증완화, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선, 건선치료 등의 효과를 기대할 수 있어서 신개념 화장료 조성물 또는 약제조성물로 매우 유용할 것으로 기대된다.

또한, 본 발명이 바람직한 구현예에 따르면, 상기 초유의 발효산물로 얻어지는 조성물은 식품조성물로 적용될 수 있다. 예컨대 항염, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 및 건선치료용 건강기능식품으로 적용될 수 있다.

본 발명의 초유 발효산물은 구체적으로는 1-500mg/ml로 피부에 수회 도포하여 적용할 수 있다.

이러한 형태는 피부에 적용하는 항여드름 화장료를 적용한 화장품으로 제조하여 적용하는 경우에도 역시 1-500mg/ml로 구성하여 제조할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 더욱 바람직하게는 10-400mg/ml로 적용할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 초유 발효산물을 유효성분으로 함유하는 보습용 화장료 조성물을 이용한 화장품이나, 초유 발효산물을 유효성분으로 함유하는 피부연고제는 상기 함량 범위 내에서 예컨대 50mg/ml, 100mg/ml, 200mg/ml, 400mg/ml로 등의 다양한 함량으로 제조하여 적용할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 건강식품이나 약제조성물은 예컨대 경구제로써 1회 50mg, 100mg, 200mg, 400mg, 500mg 또는 1,000mg로 하루 1-3회 경구 투여할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 초유 발효산물이 상기의 함량 범위의 하한치를 벗어나면 그 효과가 현저하게 감소되며, 상한치를 벗어나면 피부 적용을 위한 조성물이나 제형으로 제조하기 곤란하거나, 첨가량에 비하여 기대 효과가 크게 향상하지 않으므로 경제적인 측면에서 바람직하지 아니하다.

위와 같이, 본 발명에 따르면 상기와 같은 초유 발효산물을 항염, 피부자극완화, 미백, 보습, 주름개선 등의 용도를 가지는 화장료로 사용할 수 있으며, 이를 이용하여 화장품을 제조할 수 있을 뿐만 아니라 필요시 식품용 조성물 또는 약제조성물 예컨대 피부연고제로 적용할 수 있을 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세하게 설명하겠는바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

초유로부터 유산균 발효산물인 유산균 발효 초유 추출물을 제조하기 위하여 도 1의 공정도와 같은 과정을 거쳐서 발효 초유 추출물을 제조하였다.

각 단계별 과정은 다음과 같이 실시하였다.

제1단계 : 원료 준비

갓 짠 소의 초유를 급속 냉각한 후 항온수조에 넣어 초유의 온도가 63℃가 된 후부터 30분간 살균처리한 후 35℃까지 온도를 낮추어 발효 원료를 준비한다.

제2단계 : 유산균 발효액의 제조

락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103)의 3종의 복합균을 상기 제1단계의 발효 원료에 접종하고 온도 35℃에서 60분간 발효시켜 발효물(발효액)을 얻는다.

제3단계 : 유산균 발효 초유 추출물의 제조

상기 제2단계에서 얻은 발효액을 2000rpm, 20분 원심분리하여 부유물을 제거하고 침전물을 제외한 상층액을 회수하여 발효초유액을 초유의 발효산물로 얻는다.

상기 발효초유액을 33℃로 맞추고 렌넷(Rennet)을 첨가하여 60분간 응집시킨 후 발효액 초유가공물을 회수한다. 상기에서 얻은 발효액 초유가공물을 13000rpm에서 60분 원심분리하여 상층액을 유산균 발효산물인 발효 초유 추출물로 얻는다.

상기 상층액을 0.4 ㎛와 0.2㎛의 여과지로 2차 여과시킨 후 최종적인 유산균 발효산물로써 유산균발효 초유 추출물을 초유의 발효산물로 제조하였다.

실시예 2 - 6

상기 실시예 1에서 제1단계의 발효 원료에 접종시킨 균 또는 복합균을 하기 표 1과 같이 조정하여 실시예 1과 동일한 방법으로 초유 발효산물을 제조하였다.

구분	사용 균주
실시예 2	락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842)
실시예 3	락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103)
실시예 4	락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842) + 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103)
실시예 5	락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842) + 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)
실시예 6	락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103) + 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)

실시예 7

상기 실시예 1과 동일하게 실시하되 발효에 사용된 균으로 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)를 단독으로 사용하여 초유의 발효산물을 제조하였다.

실시예 8

상기 실시예 2의 방법에서, 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus, ATCC 11842) 대신에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus, ATCC 4356)를 사용한 것을 제외하고는 실시예 2의 방법과 동일한 방법으로 실시하여, 유산균 발효 초유 추출물을 제조하였다.

실시예 9

상기 실시예 6의 방법에서, 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus, ATCC 11842), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258) 대신에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus, ATCC 4356), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 6의 방법과 동일한 방법으로 실시하여, 유산균 발효 초유 추출물을 제조하였다.

실험예 1 : 발효균에 따른 Nitric oxide(NO) 생성 억제 활성 측정

상기 실시예에서 사용된 각 사용균을 이용하여 제조한 초유의 발효산물에 대하여 항염 효과를 비교 확인하기 위하여 실험을 진행하였다.

염증 모델로 주로 사용되는 Lipopolysaccharide(LPS)는 대식세포를 활성화 시킨다. 활성화된 대식세포는 염증 유발 사이토카인인 TNF-α. IL-1β, IL-12, IFNγ 등의 발현 양을 증가시킨다. 염증 유발 사이토카인은 Nitric oxide(NO)을 생성한다. 따라서 NO 발현 양 감소를 통해 항염증 효과를 평가했다.

실험 방법으로는 RAW 264.7 cell을 10% FBS를 포함하는 DMEM(Dubelccos Modified Eagle Medium, Gibco) 동물세포배양 배지에 현탁하여 24 well plate 각 well 당 5 X 105 개씩 넣어 37℃, 5% CO2 조건에서 하루 동안 배양한다. 그 후, 배지를 2번 세척하고 시료를 준비한 후 준비된 시료에 LPS를 1㎍/㎖의 농도로 혼합하여 cell에 동시에 처리하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 18시간 더 배양하였다. 배양 후에는 세포 상등액 100㎕와 Griess 시약 100㎕를 혼합하여 96 well plate에서 10분 동안 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정한다. 생성된 NO의 양은 Griess 시약을 이용하여 세포 배양액에 존재하는 NO2-의 형태로 측정하였으며 sodium nitrite (NaNO2)를 standard로 사용하였다.

LPS 단독 처리 군은 NO의 생성을 유도하였고, 각 시료에 대한 NO 생성 억제 활성을 측정하였다. 각 시료는 실시예에서 제조된 초유의 발효산물을 사용하였으며, 그 실험결과는 하기 표 2에 기재하였다.

Sample	NO production (%)
LPS ( - )	-
LPS (+, 1 ㎍/㎖ )	100
LPS (1㎍/㎖) + a 발효 초유 추출물	48.8 ± 2.7
LPS (1㎍/㎖) + b 발효 초유 추출물	50.3 ± 2.0
LPS (1㎍/㎖) + c 발효 초유 추출물	60.7 ± 1.8
LPS (1㎍/㎖) + (a + b) 발효 초유 추출물	49.8 ± 2.4
LPS (1㎍/㎖) + (a + c) 발효 초유 추출물	28.1 ± 3.9
LPS (1㎍/㎖) + (b + c) 발효 초유 추출물	30.6 ± 1.7
LPS (1㎍/㎖) + (a + b + c) 발효 초유 추출물	21.6 ± 2.3
LPS (1㎍/㎖) + (a + b + c) 초유 발효액(실시예1의 2단계)	24.9 ± 1,9
a : 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842) b : 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103) c : 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)

이 실험 결과, 상기와 같이 실시예 1에서 제조된 발효 초유 추출물을 사용하였을 때 복합균의 상승효과로 인해 NO 생성 억제 효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다.

특히, 특정 유산균을 사용한 경우와 복합균을 사용한 경우가 비교예에 비해 월등하게 우수함을 확인할 수 있었다.

이 결과로부터, 초유의 발효산물 중에서 특정 유산균을 선택적으로 사용한 경우 더욱 우수한 항균 효과가 있고, 또한 유산균과 스트렙토코커스균의 복합균을 사용하는 경우에는 복합균에 의한 상승효과가 있는 것으로 확인되었다.

실험예 2 : 피부자극완화 효과 평가

피부반응은 CTFA(The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association) 가이드라인에 제시된 방법에 의거하여 검사하였고, 평균 피부반응도(Mean score)는 하기의 수학식 1에 따라 산정하였다.

[수학식 1]

평균 반응도 = (반응값 × 반응인원수) / (최대값 × 전체인원수 × No. of visual scoring) × 100

실험 방법으로는 피시험자 20대 성인 남녀 20명(남자 10명, 여자 10명)의 전완부에 IQ 챔버를 이용하여 첩포 시험을 실시하였다. 피부자극은 0.1중량% SLS(sodium lauryl sulfate)를 사용하였고, A군은 SLS만, B군은 SLS + 비발효 초유 추출물, C군 은 SLS + 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus, ATCC 19258) 발효 초유 추출물, D군은 발효 초유 추출물(실시예1)로 하여 각각 피부에 하루 동안 첩포하였다. 첩포가 끝난 후에는 펜으로 시험 부위를 표시하고 24시간 경과한 다음 시험 부위의 피부 반응을 하기 표 3의 판정기준에 따라 판정하였다.

점수	판정기준
0.0	염증성의 징후를 보이지 않음(건강하고 정상적 피부).
0.5	부위 외관에 광택이 있거나 또는 겨우 인지될 정도의 홍반 발생
1.0	약간의 홍반 발생
2.0	중등도의 홍반 발생, 가장자리에 겨우 인지될 정도의 부종을 수반하는 가능성, 구진(丘疹)의 가능성
3.0	전체에 부종을 수반하는 중등도의 홍반 발생
4.0	강도의 부종을 수반하는 강도의 홍반 발생, 그러나 작은 수포를 수반하거나 수반하지 않음.
5.0	첩포부위를 넘어서 퍼진 강도의 반응을 나타냄.

상기와 같은 피부자극완화 효과에 대한 평가결과는 다음 표 4와 도 2에 도시한 바와 같다.

시험군	평균 반응도
A	5.41
B	3.49
C	3.03
D	1.67

표 4 및 도 2의 결과에 따르면, 실시예에 의한 초유의 발효산물은 미발효 초유 추출물보다 피부자극을 현저하게 억제시킴을 확인할 수 있었다.

실험예 3 : In vitro tyrosinase inhibition assay (타이로시나제 활성저해시험)

멜라닌은 페놀류가 산화효소에 의해 산화되어 유도된 갈색 또는 흑색 고분자 색소의 총칭으로 동식물계에 널리 분포하고 있으며, 생체 안에서는 빛을 흡수하는 역할을 한다. 멜라닌의 전구체인 Tyrosine이 자연산화하면 Tyrosinase라는 효소의 작용으로 Dopa와 Dopaquinone을 거쳐 멜라닌이 합성된다. 이때, Tyrosinase는 인체 내의 멜라닌 생합성 경로에서 가장 중요한 초기 속도 결정 단계에 관여하는 효소로써 많은 미백 성분이 이 효소를 억제하는 작용기전을 가지고 있다.

따라서 시험관 내에서 실시예에 따른 초유 발효산물(발효초유)에 대하여 Tyrosinase 효소의 활성을 저해하는 정도를 평가하여 미백 효능을 평가하였다.

실험방법으로는 시험관에 0.1M 인산염완충액 220ul와 시료액 20ul 그리고 mushroom tyrosinase(1500U~2000U/ml)액 20ul를 순서대로 넣는다. 이 용액에 1.5mM tyrosine액 40ul를 넣고 37℃에서 10~15분 동안 반응시킨다. 그리고 이것을 ELISA reader를 이용하여 492nm에서 흡광도를 측정한다. 공시료액으로는 시료액 대신 0.1M 인산염완충액을 넣는다.

이렇게 나온 결과 값은 Tyrosinase 활성 저해율을 산출하기 위해 하기 수학식 2에 대입하여 구하였다. 시료는 우유, 발효우유, 초유, 발효초유를 사용하였다.

[수학식 2]

상기 식에서 a는 공시료액의 반응 후의 흡광도, b는 시료액의 반응 후의 흡광도, a’와 b’는 각각 Tyrosinase 대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도를 의미한다.

이렇게 평가된 미백 평가 결과는 하기 표 4에 나타낸 바와 같다. 또한 이 결과는 도 3에 그래프로 비교하여 나타내었다.

하기 표 5와 도 3에서 나타낸 바와 같이, 실시예의 호기성 발효산물이 Tyrosinase inhibition 효과가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다.

Tyrosinase inhibition(%)
Sample	Average	STDEV
우유	25.78	1.18
우유발효	20.90	1.20
초유	23.96	0.41
초유발효 (실시예 1)	32.66	0.4729

상기 표 5에서 보면, 초유 발효산물은 발효우유에 비해서는 약 56.27%, 그리고 초유에 비해서는 36.31%의 개선효과를 나타내는 것으로 확인되었다.

실험예 4 : 항산화 효능평가 시험(DPPH)

생명체는 호흡을 통해 에너지를 얻으며 사용한 산소의 2% 정도가 활성산소로 생성이 되는데, 이 활성산소는 free radical을 지닌 산소를 의미한다. 이 활성산소가 지질성분을 공격하면 세포독성으로 작용하는 과산화지질을 생성하여 세포막을 파괴하고, 암을 유발하며 질병과 노화를 촉진하며, 단백질을 공격하면 carbonyl group이 생성되어 세포를 파괴하고, DNA를 공격하면 다양한 유전적 돌연변이가 생기게 된다.

따라서 시험관 내에서 초유 추출물과 DPPH를 반응시켜, free radical이 감소하는 정도를 ELISA로 측정하여 항산화 활성도를 측정하였다.

실험 방법으로는 brown Eppendorf tube에 0.25mM DPPH 시약과 추출물을 각각 400㎕씩 mix한다. 그리고 15min 암실에서 반응시킨 후, centrifuge 3,000×g, 5min 동안 spin down하여 상층액만 96well plate에 각 well당 200㎕씩 분주하여 ELISA reader로 517nm에서 측정한다. 시료는 우유, 우유발효, 초유, 초유발효(실시예 1)를 농도별(20, 30, 40mg/mL)로 사용하였다.

실험결과 항산화 활성 평가는 다음 수학식 3으로 산출하였고, 그 결과는 다음 표 6과 도 4에 비교 그래프로 나타내었다.

[수학식 3]

Scavenging activity (%) = [(AcontrolAsample)/Acontrol]×100

sample	20mg/ml	30mg/ml	40mg/ml
우유	4.754	20.841	16.390
우유발효	6.910	23.002	21.301
초유	39.856	62.759	76.857
초유발효	44.887	70.337	85.758

위에서 나타낸 바와 같이, 실시예의 초유 발효산물이 항산화 효과가 우수함을 확인하였다.

이러한 초유 발효산물이 다른 비교군인 우유발효 또는 초유에 비해 항산화 효과의 개선 정도는 하기 표 7에 나타낸 바와 같이 현저하게 개선된 효과를 보였다.

	초유발효 대비%
	20mg/ml	30mg/ml	40mg/ml	Average
초유	12.62%	12.08%	11.58%	12.09%
우유발효	549.60%	205.79%	302.59%	352.66%

실험예 5 : 세포독성 실험

각 샘플에 대하여 세포생존율을 MTT assay를 통해 측정하였다.

MTT assay는 살아있는 세포의 수를 측정함으로써, 세포증식이나 독성에 많이 사용되는 실험법으로, 살아있는 세포는 미토콘드리아 내에서 수용성이고 노란색의 염인 MTT가 숙신산탈수소효소에 의해 수불용성인 파란색의 포르마잔 유도체로 환원되는 원리를 이용하는 것이다.

먼저 6-well plate에 1x10^5cells/well 의 밀도로 HaCaT cell을 접종하고 37℃에서 하루동안 배양하였다. 그 후 각각의 well에 각각의 샘플(우유, 우유발효, 초유, 초유발효)을 농도별(1,10,20ug/ml)로 처리하였다. 그 후 37℃에서 12시간 배양한 뒤에 MTT solution을 처리하고 1시간 activation을 시킨 후 ELISA reader로 450nm에서 측정하였다. 컨트롤은 H₂O₂로 진행하였으며, 컨트롤군 대비 세포 생존율을 나타내었다.

그 실험결과는 다음 표 8과 도 5에 나타내었는바, 초유 발효산물인 발효초유가 가른 비교군에 비해 월등한 생존율을 나타내는 것을 확인되었다.

		12H
control		100	0.2
우유	1ug/ml	90	0.05
	10ug/ml	118	0.1
	20ug/ml	107	0.04
우유발효	1ug/ml	100	0.06
	10ug/ml	105	0.18
	20ug/ml	94	0.1
초유	1ug/ml	81	0.1
	10ug/ml	108	0.11
	20ug/ml	106	0.07
초유발효	1ug/ml	122	0.18
	10ug/ml	126	0.14
	20ug/ml	125	0.26

실험예 6 : Keratinocyte를 이용한 AQP3 mRNA 발현양 확인

포유 동물에서 13가지의 aquaporins(AQP0-AQP12)이 존재한다. 인간의 각질형성 세포, 멜라닌 세포, 피부 섬유아세포 등 피부 관련 세포로 확인해보았을 때, AQP 1, 3, 5, 7, 9, 10총 6가지를 발견할 수 있다. 그 중에서 AQP3는 Epidermis에서 발견되어 물 및 글리세롤을 모두 투과시키는 역할을 한다. 결론적으로 AQP3 결실은 정상적인 피부 구조를 나타내지만, 각질층의 수분 감소, 물과 글리세롤 표피 투과성을 감소시키는 효과가 있다. 이에 따라 AQP3 mRNA 발현양을 이용하여 보습효과를 확인하였다.

실험방법으로는 먼저 6 well plate에 keratinocyte를 4x10^5cells/well이 되게 분주하고 24시간 배양후 각 시료(우유, 우유발효, 초유, 초유발효)를 농도별(0, 1, 10, 100ug/ml)로 처리하였다. 3시간 후 cell을 수거하여 RNA를 추출하여 cDNA를 합성하였다. 생산한 cDNA로 real-time PCR을 진행하여 mRNA의 발현양을 측정하였으며, 무첨가군 대비 증가율을 나타내었다.

그 결과는 하기 표 9와 도 6에 나타내었으며, 도 7은 각 시료에 대한 PCR 결과를 보여주는 것이다.

우유	평균	평균의 표준오차	우유발효	평균	평균의 표준오차
0	1.0017	0.04058	0	1.0040	0.06445
1	0.8835	0.02677	1	1.0072	0.01446
10	0.7559	0.04959	10	1.0743	0.00997
100	0.9325	0.05936	100	1.2329	0.04728

초유	평균	평균의 표준오차	초유발효	평균	평균의 표준오차
0	1.0026	0.05219	0	1.0009	0.03011
1	0.7684	0.05195	1	1.1256	0.02485
10	0.9013	0.00748	10	1.1945	0.12250
100	0.8787	0.00883	100	3.0555	0.31535

상기 시험 결과, 우유와 초유에서는 유의미한 보습 효과를 얻지 못하였다. 그러나 우유발효와 초유발효에서는 농도 의존적으로 mRNA 발현양이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 초유발효군 중 100ug/ml에서는 mRNA 발현량이 무첨가군 대비 무려 8배 이상 증가하여 보습효과가 매우 뛰어남을 확인하였다.

실험예 7 : 항산화 효능 시험(SOD생성능 확인)

SOD(Superoxide dismutase)는 Superoxide anion을 산소와 과산화수소로 전환시키는 반응을 촉매하는 중요한 항산화 효소이다. WST(Water Soluble Tetrazolium salt)는 XO(Xanthine Oxidase)에 의해 생성된 superoxide anion(O₂-)의해 환원되어 WST-1 formazan을 형성하여 주황색을 띄게 된다. 따라서 SOD 활성이 좋을수록 무색에 가까워 흡광도가 낮게 나오는 것을 이용하여 SOD 활성을 측정하였다.

실험방법으로는 인간 피부세포(HaCaT)에 6-well plate에 1x10^5cells/well 의 밀도로 HaCaT cell을 접종하고 37℃에서 하루동안 배양하였다. 그 후 무처리(control), 우유, 발효우유, 초유, 발효초유를 각각 30, 40, 50mg/ml의 농도로 처리하여 12시간동안 배양하였다. 그 후 세포와 WST-1 시약을 15분간 반응시킨 후, ELISA reader로 450nm에서 측정하였다.

SOD 생성능은 다음 수학식 4로 산출하였고, 그 결과는 다음 표 10과 도 8에 비교 그래프로 나타내었다.

[수학식 4]

(상기 식에서, S는 시료와 효소 포함 반응액의 흡광도이고, C는 시료 무첨가액의 흡광도이다.)

sample	30mg/ml	40mg/ml	50mg/ml
우유	-30.316	-29.835	-25.103
우유발효	-18.656	-15.295	-0.206
초유	39.438	47.257	54.733
초유발효	42.661	50.343	57.27

상기와 같이, 초유발효의 경우 가장 우수한 항산화 효능을 나타내는 것으로 확인되었다.

실험예 8 : 보습력 측정

시료의 보습력은 100 mL 비커 안에 우유, 우유발효, 초유, 초유발효를 각각 부어 25°C, 상대습도 50% 조건의 항온·항습기에서 2시간마다 24시간 동안 중량을 측정하여 중량감소율 차이로 보습력을 비교하였다. 컨트롤로는 1차 증류수를 사용하였다.

보습력 측정결과는 다음 표 11과 도 9에 그래프로 나타내었다.

시간(hr)	0	2	4	6	8	10	12	14	16	18	20	22	24
물	100	90.47	83.78	73.18	64.95	57.22	48.61	41.58	30.94	25.52	19.57	15.04	9.87
우유	100	92.43	85.1	78.18	71.09	63.81	56.7	49.22	42.08	34.18	27.22	20.38	13.84
우유발효	100	93.08	86.17	79.87	72.91	65.81	58.94	51.26	44.37	37.66	30.69	24.01	17.63
초유	100	93.31	86.66	79.08	73.41	66.57	60.00	53.15	46.81	39.81	33.51	26.47	20.1
초유발효	100	93.43	87.8	81.37	75.2	68.73	62.56	56.17	50.14	43.81	37.18	31.81	24.97

상기 보습력 측정 결과를 비교하면, 다른 비교군인 우유, 우유발효 및 초유에 비해 매우 현저한 차이로 초유발효에서 수분 손실량이 가장 적게 나타났다.

특히, 하기 표 12와 같이 초유 발효산물을 적용한 초유발효(실시예)의 경우 우유발효나 초유에 비해 월등하게 우수한 보습효과를 보이는 것으로 확인되었다.

초유발효 대비 중량감소율 (%)
측정시간(hr)	우유발효	초유
0	0.00	0.00
2	0.38	0.13
4	1.89	1.32
6	1.88	2.89
8	3.14	2.43
10	4.44	3.24
12	6.14	4.26
14	9.58	5.67
16	13.00	7.10
18	16.33	10.05
20	21.15	10.95
22	32.49	20.17
24	41.63	24.23

실험예 9 : 프로스타글란딘(Prostaglandin E₂) 생성 억제 효과 확인

염증 유발에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 프로스타글란딘 E₂(Prostaglandin E₂, PGE₂) 생성 억제 효과를 알아보았다. Cyclooxygenase(COX)는 아라키돈산(arachidonic acid)을 프로스타글란딘으로 전환하는 효소로 COX-1과 COX-2로 분류된다. COX-1은 체내에서 혈소판의 형성, 위벽보호, 신장기능의 유지 등 정상적인 생체기능에 작용하며, COX-2는 염증매개 물질인 PGE₂를 형성시킨다. PGE₂는 염증반응, 면역반응 그리고 혈관형성을 촉진하는 등 암 발생에도 깊이 관여하고 있는 것으로 알려져있다.

실험방법으로는 10% FBS를 포함하는 DMEM(Dubelccos Modified Eagle Medium, Gibco) 동물세포배양 배지에 현탁하여 6 well plate에 Raw 264.7 세포를 4x10^5cells/well이 되게 분주하고 24시간 배양하여 준비하였다. 그 후 시료(우유, 우유발효, 초유, 초유발효)를 처리하고 30분 배양후 LPS(Lipopolysaccharide, 1ug/ml)를 첨가하여 24시간 배양하였다. 생성된 PGE₂의 양은 PGE₂ ELISA kit를 이용하여 측정한 값을 하기 계산식으로 계산하여 나타내었다. 대조군은 LPS를 단독으로 처리한 실험군으로 하였다. PGE₂ 생성 억제율은 하기 수학식 5에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 13 및 도 10에 나타내었다.

[수학식 5]

(상기 식에서, S는 시료처리에서의 PGE₂ 양이고, C는 LPS를 단독으로 처리한 실험군에서의 PGE₂ 양이다.)

Sample	average
우유	15.7163 ± 0.31686
우유발효	20.3787 ± 0.2335
초유	34.4463 ± 0.3301
초유발효	48.333 ± 0.3620

상기 표 13의 결과를 보면, 프로스타글란딘(Prostaglandin E₂) 생성 억제를 위한 저해능 증가 정도에서 초유 발효산물을 적용하는 경우 우유발효에 비해 137.17% 로 현격하게 큰 개선 효과를 보이고, 초유에 비해서도 40.31%의 매우 우수한 개선효과를 보이는 것으로 확인되어, 초유 발효산물이 다른 비교군에 비해 월등하게 우수한 효과를 나타내는 것으로 확인되었다.

제조예 1 : 화장품(크림조성물)의 제조

하기 표 14에 기재된 조성 및 함량(중량%)으로 유상과 수상을 각각 75 ℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각하여 화장품 크림을 제조하였다.

성분명	함량(중량%)
초유발효산물	6.0
세토스테아릴 알코올	2.0
자기유화형 모노스테아린산 글리세린	2.5
친유형 모노스테아린산 글리세린	1.5
바셀린	3.5
파라옥시안식향산메틸	0.2
파라옥시안식향산프로필	0.1
유동파라핀	35.0
모노스테아린산 폴리에틸렌글리콜	3.5
모노스테아린산 소르비탄	1.0
트리 (카프릴, 카프린산) 글리세린	3.0
세스퀴올레인산 소르비탄	1.8
옥틸도데칸올	5.0
스쿠알란	2.0
농글리세린	5.0
향료	미량
정제수	잔량

제조예 2 : 화장품(로션)의 제조

하기 표 15에 기재된 조성 및 함량(중량%)으로 원료성분을 75 ℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각하여 화장품 로션을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
초유 발효산물	10.0
1,3-부틸렌글라이콜	4,0
글리세린	3.0
올레일알콜	0.1
폴리솔베이트 20	1.0
할미꽃추출물	1.0
향료	미량
정제수	잔량

제조예 3 : 화장품(마스크팩 조성물)의 제조

하기 표 16과 같은 조성과 함량으로 수상과 오일상을 각각 분산 용해하고 혼합한 다음 검화하고 실온으로 냉각하여 마스크 팩용 조성물을 제조하였다. 이를 이용하여 마스크 팩을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
스테아린산	6.5
미리스틴산	28.0
자기유화형 모노스테아린산 글리세린	3.0
초유발효 용해여과물	15.0
프로필렌 글리콜	5.0
농글리세린	10.0
수산화나트륨	7.0
에틸렌디아민테트라초산나트륨	0.1
할미꽃추출물	0.5.
향료	미량
정제서	잔량

실험예 10 : 발효균에 따른 피부자극완화 효과 평가

상기 실시예에서 사용된 초유의 발효균에 대한 각각의 초유의 호기성 발효산물에 대하여 피부자극완화 효과를 비교 확인하기 위하여, 상기 실험예 2와 동일한 방법으로 하여 피부반응은 CTFA(The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association) 가이드라인에 제시된 방법에 의거하여 검사하였고, 평균 피부반응도(Mean score)를 산정하였다.

실험결과로써, 시험 부위의 피부 반응 역시 상기 판정기준에 따라 판정하였다.

상기와 같은 피부자극완화 효과에 대한 평가결과는 하기 표 17에 도시한 바와 같다.

Sample	평균 반응도
0.1% SLS	5.41
0.1% SLS + a 발효 초유 추출물(실시예2)	3.02
0.1% SLS + b 발효 초유 추출물(실시예3)	3.09
0.1% SLS + c 발효 초유 추출물(실시예7)	3.41
0.1% SLS + (a + b) 발효 초유 추출물(실시예4)	3.05
0.1% SLS + (a + c) 발효 초유 추출물(실시예5)	2.25
0.1% SLS + (b + c) 발효 초유 추출물(실시예6)	2.33
0.1% SLS + (a + b + c) 발효 초유 추출물(실시예1)	1.67
0.1% SLS + (a + b + c) 초유 발효액(실시예1의 2단계)	1.98
a : 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus , ATCC 11842) b : 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG , ATCC 53103) c : 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus , ATCC 19258)

Claims

초유가 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus)와 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중 하나이상의 유산균, 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합 유산균을 포함하는 유산균으로 발효된 것을 함유하는, 초유의 유산균 발효산물.
청구항 1에 있어서, 유산균으로 발효된 것은 발효액, 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액, 발효액이 정제 처리된 유산균 발효 초유 추출물 중에서 어느 하나 이상을 포함하는 것임을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물.
청구항 1에 있어서, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물인 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물.
청구항 1에 있어서, 복합 유산균으로 발효된 것은 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균과 여기에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합 유산균 포함하는 유산균으로 발효된 유산균 발효 초유 추출물인 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물.
청구항 1에 있어서, 카세인 성분이 제거된 유산균 발효 초유 추출물인 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물.
초유를 급냉한 다음 저온 살균 처리하여 발효원료를 준비하는 단계와;
상기 단계에서 얻은 발효원료에 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus)와 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중 하나이상의 유산균, 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합 유산균을 포함하는 유산균을 접종하고 발효하여 발효액을 얻는 단계;
를 포함하는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물의 제조방법.
청구항 6에 있어서, 발효액은 유산균 접종 발효 후에 얻어진 발효물을 원심분리하여 발효액을 얻는 단계를 추가적으로 포함하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물의 제조방법.
청구항 6에 있어서, 상기 발효액을 효소를 이용하여 유산균 발효 초유 추출물을 얻는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물의 제조방법.
청구항 8에 있어서, 효소로는 렌넷(rennet)을 사용하는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물의 제조방법.
청구항 8에 있어서, 효소 첨가 이후에는 추가적으로 효소 첨가물을 원심분리하고 여과하는 단계를 포함하는 과정을 거친 후 유산균 발효 초유 추출물을 얻는 것을 특징으로 하는 초유의 유산균 발효산물의 제조방법.
초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 항염 및 피부자극완화의 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물은 초유를 발효균으로 발효시켜 얻은 발효액, 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액 중에서 어느 하나 이상을 포함하는 것임을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물은 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균과 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 락토바실러스균(Lactobacillus), 스트렙토코커스균(Streptococcus), 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물은 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물은 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균과 여기에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합균으로 발효된 유산균 발효 초유 추출물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물은 카세인 성분이 제거된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11에 있어서, 초유 발효산물이 1-500mg/ml로 함유되는 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물.
청구항 11 내지 청구항 18 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물을 포함하는 화장료 조성물.
청구항 1 내지 청구항 18 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물을 포함하는 식품 조성물.
청구항 11 내지 청구항 18 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 항염 및 피부자극완화용 조성물을 유효성분으로 포함하는 약제 조성물.
청구항 21에 따른 약제조성물을 함유하는 항염 및 피부자극완화용 피부연고제.
초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물은 초유를 발효균으로 발효시켜 얻은 발효액, 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액 중에서 어느 하나 이상을 포함하는 것임을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물은 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균과 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 락토바실러스균(Lactobacillus), 스트렙토코커스균(Streptococcus), 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물은 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물은 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균과 여기에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합균으로 발효된 유산균 발효 초유 추출물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물은 카세인 성분이 제거된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23에 있어서, 초유 발효산물이 1-500mg/ml로 함유되는 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부미백용 조성물.
청구항 23 내지 청구항 30 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부미백용 조성물을 포함하는 화장료 조성물.
청구항 23 내지 청구항 30 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부미백용 조성물을 포함하는 식품 조성물.
청구항 23 내지 청구항 30 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부미백용 조성물을 유효성분으로 포함하는 약제 조성물.
청구항 33에 따른 약제조성물을 함유하는 피부미백용 피부연고제.
초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 피부보습용 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물은 초유를 발효균으로 발효시켜 얻은 발효액, 카세인이 제거된 발효액, 살균 처리된 발효액 중에서 어느 하나 이상을 포함하는 것임을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물은 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균과 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 락토바실러스균(Lactobacillus), 스트렙토코커스균(Streptococcus), 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물은 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물은 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus), 락토바실러스 람노서스지지(Lactobacillus rhamnosus GG) 중에서 선택된 하나 이상의 유산균과 여기에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 복합균으로 발효된 유산균 발효 초유 추출물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물은 카세인 성분이 제거된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35에 있어서, 초유 발효산물이 1-500mg/ml로 함유되는 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 피부보습용 조성물.
청구항 35 내지 청구항 42 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부보습용 조성물을 포함하는 화장료 조성물.
청구항 35 내지 청구항 42 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부보습용 조성물을 포함하는 식품조성물.
청구항 44에 따른 식품조성물을 함유하는 피부보습 및 건선치료 효과가 있는 건강기능성 식품조성물.
청구항 35 내지 청구항 42 중에서 선택된 어느 하나의 항에 따른 초유 발효산물의 피부보습용 조성물을 포함하는 약제조성물.
청구항 46에 따른 약제조성물을 포함하는 피부보습 및 건선치료용 피부연고제.
초유가 발효되어 얻어진 초유의 발효산물을 피부의 주름개선 유효성분으로 함유하는 초유 발효산물의 주름개선용 화장료 조성물.
청구항 48에 있어서, 초유 발효산물은 프로바이오틱스(Probiotics) 또는 유산균과 다른 발효균의 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 주름개선용 화장료 조성물.
청구항 48에 있어서, 락토바실러스균(Lactobacillus), 스트렙토코커스균(Streptococcus), 또는 락토바실러스균(Lactobacillus)과 스트렙토코커스균(Streptococcus)이 혼합된 복합균으로 발효된 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 주름개선용 화장료 조성물.
청구항 48에 있어서, 초유 발효산물은 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 락토바실러스(Lactobacillus)로 초유를 발효하여 얻은 용해물을 여과한 락토바실러스 스트렙토코커스 써모필러스 초유 발효 용해 여과물인 것을 특징으로 하는 초유 발효산물의 주름개선용 화장료 조성물.