KR20180100839A - A composition comprising heat water extract of gojiberry, fig, and agastache rugosa as active ingredients - Google Patents

A composition comprising heat water extract of gojiberry, fig, and agastache rugosa as active ingredients Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a composition comprising heat water extracts of Lycium Barbarum, Ficus carica and Agastache rugosa, and it was confirmed that cytotoxicity was low while exhibiting a synergistic effect on antioxidant activity, immunity enhancement, whitening, wrinkle reduction, inhibition of collagenase and collagen production promoting activity, thereby being suitable for antioxidation, immunity enhancement, whitening, skin wrinkle reduction.

Description

고지베리, 무화과 및 배초향의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물{A COMPOSITION COMPRISING HEAT WATER EXTRACT OF GOJIBERRY, FIG, AND AGASTACHE RUGOSA AS ACTIVE INGREDIENTS}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a composition comprising an extract of hot pepper, a fig and a hot water extract of a persimmon as an active ingredient,

본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 면역 증강, 미백, 또는 주름 개선을 위한 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for antioxidant, immunity enhancement, whitening, or wrinkle improvement comprising hot water extract of goji berries, figs and syrup as an active ingredient.

최근 과학기술 및 현대 의학의 발달로 인하여 인간의 평균 수명은 점차 증가하고 있으며, 이에 따라 삶의 질 향상을 위하여 건강을 위한 관심이 증가되고 있다. 이러한 경향은 세대와 나이에 상관없이 증가하고 있다. 또한, 천연물을 포함하는 의약품, 건강보조식품 및 화장품에 많은 관심이 증가하면서 이에 대한 연구개발이 증가하고 있는 실정이다. 특히, 천연물 의약품의 효능 및 천연물을 포함하는 건강보조식품과 화장품의 기능은 항산화, 콜레스테롤 억제, 비만 예방 효과, 면역 및 질병예방 및 노화억제 등의 기초 의과학적 범위까지 확대되고 있다.Due to recent advances in science and technology and modern medicine, the average life expectancy of humans is gradually increasing, and interest in health is increasing to improve quality of life. This tendency is increasing regardless of generation and age. In addition, there is a growing interest in medicines, health supplements, and cosmetics containing natural products, and the research and development thereof is increasing. In particular, the functions of health supplement foods and cosmetics, including the efficacy of natural drug products and natural products, are expanding to scientific scopes such as antioxidants, cholesterol suppression, prevention of obesity, prevention of immune and disease, and prevention of aging.

고지베리(Gojiberry)는 구기자(Chinese boxthorn 또는 Matrimony Vine)로도 알려져 있으며, Solanacea과(family), Lycium속(genus)에 속하는 다양한 종(species)을 나타낸다. Lycium속의 다양한 종 가운데, Lycium barbarumLycium chinense가 동양 의학에서 가장 흔하게 사용된다. 예를 들면, Fructus lycii라고도 알려진 Lycium barbarum 과실은 특히, 아시아에서 일반적으로 건강을 유지하는데 도움을 주는 약용 식물로 오랫동안 알려져 왔다. 또한, 최근의 연구는 Lycium barbarum이 면역 체계를 증진하고 조절할 뿐만 아니라 노화 성분 및 항암 특성, 혈액의 지방 및 당의 수치 감소 특성 또는 동맥 혈압 감소 특성을 가짐을 보고한다. 미국 특허출원공개 제2006/0198810호는 피부 세포의 지방 합성을 촉진시키는, 특히, 장미 열매, 구릿대(Chinese angelica) 추출물과 울프베리 추출물의 혼합물의 효능을 개시하고 있다. 또한 Lycium barbarum의 특정 구성 성분의 특성은 이미 알려져 있다. 이에 따르면, 제아잔틴 디팔미테이트는 항산화 및 항염 특성으로 알려져 있는 반면, Lycium barbarum 다당류(LBP) 및 2-O-(β-D-글루코피라노실)-아스코르브산(비타민 C의 유사체)은 면역자극 및 항산화 특성으로 알려져 있다.Gojiberry, also known as Chinese boxthorn or Matrimony Vine, represents a variety of species belonging to the family Solanacea and the Lycium genus. Among the various species of the genus Lycium, Lycium Barbarum and Lycium chinense are most commonly used in oriental medicine. For example, Lycium, also known as Fructus lycii Barbarum fruit has long been known as a medicinal plant that helps maintain health in general, especially in Asia. In addition, recent studies report that Lycium barbarum not only enhances and controls the immune system, but also has aging and anti-cancer properties, decreased blood fat and sugar levels, and arterial blood pressure reduction. United States Patent Application Publication No. 2006/0198810 discloses the efficacy of a mixture of rosemary extract, Chinese angelica extract and wolfberry extract, which promotes lipid synthesis of skin cells. Also, Lycium The characteristics of certain components of barbarum are already known. According to this, zeaxanthin dipalmitate is known to be antioxidant and anti-inflammatory, while Lycium barbarum Polysaccharides (LBP) and 2-O- (β-D-glucopyranosyl) -ascorbic acid (analogs of vitamin C) are known for their immunostimulatory and antioxidant properties.

무화과 나무(Ficus carica L)는 뽕나무과에 속하는 낙엽관목으로서 아시아 서부 지중해 연안이 원산지이다. 2~4m의 높이로 나무껍질은 회백색이고, 잎은 어긋나고 넓은 달걀모양으로 두꺼우며, 표면은 거칠고 뒷면에는 털이 있다. 유액은 무좀, 종기, 치질에, 잎은 무좀이나 신경통에, 열매는 혈압 강하, 변비 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 대한민국 등록특허 제10-0512285호는 무화과 열매 또는 잎 추출 분리물을 함유하는 진균 및 항균 효과가 있는 약용 비누 조성물에 대하여 개시하고 있다.The fig tree (Ficus carica L) is a deciduous shrub belonging to the genus Phalaenopsis, originating in the western part of Asia. It is 2 ~ 4m in height. The bark is grayish white, the leaves are alternate, broad ovate, thick, surface rough, and hairs on the back. Latex is athlete's foot, boils, hemorrhoids, leaves athlete's foot or neuralgia, fruit is known to be effective in blood pressure lowering, constipation. Korean Patent No. 10-0512285 discloses a medicinal soap composition having an antimicrobial effect and a fungus containing fig fruit or leaf extract.

배초향(Agastache rugosa (Fisch. et Meyer) O. Kuntze, 곽향)은 꿀풀과 (Labiatae)의 다년생 초본으로서 지상부 및 전초를 건조하여 약으로 쓴다. 생약명은 곽향 또는 배초향(라틴명 : Agastachis herba)으로 불리우며, 중국에서는 동일과의 포고스테몬 카블린(Pogostemon cablin)을 광곽향(라틴명 : Pogostemonis herba)이라 하여 곽향과 함께 상용하고 있다. 곽향은 전통적으로 식욕부진, 구토, 건위, 설사, 해열 등의 한방약제(본초강목)로 사용되어 왔으며, 이에 대한 연구는 아미노산과 곽향 등의 식물 추출물을 병용하여 각질층의 보습, 윤활작용이 있는 피부외용제(일본 특개평 제9-71527호) 등의 연구가 있다. 곽향에 대한 성분 연구를 통해 메틸카비콜(methylchavicol), 로스마린산(rosmarinic acid), 아네톨(anethole) 등의 물질이 보고되어 있다. Agastache rugosa (Fisch. et Meyer) O. Kuntze, Kwakyeong) is a perennial herbaceous plant of Lamiaceae (Labiatae), which is dried and toppled over the ground. It is called Agastachis herba in Latin or Pogostemonis herba. In China, the same name Pogostemon cablin is commonly used together with Goguryeo as Pogostemonis herba (Latin name: Pogostemonis herba). It has been traditionally used as an herbal medicine (herbal medicine) such as anorexia, vomiting, dryness, diarrhea, and fever. The research on this has been carried out by combining plant extracts such as amino acids and Gwak (Japanese Patent Laid-Open No. 9-71527), and the like. Methylcavicol, rosmarinic acid, anethole, and other substances have been reported through studies on the composition of the wastewater.

본 발명자들은 천연물로부터 기원하는 항산화, 면역 증강, 미백, 피부 노화 방지 물질에 관하여 연구하던 중 고지베리, 무화과 및 배초향의 열수 추출물을 포함하는 조성물이, 항산화 활성, 면역 증강, 미백, 주름 개선, 콜라겐 분해효소 억제, 콜라겐 생성 촉진 활성에 있어 상승효과를 나타내면서도 세포독성은 낮음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.The inventors of the present invention have been studying antioxidative, immunostimulating, whitening and skin antiaging agents originating from natural products, and have found that a composition containing hot water extract of gojiberry, fig and syrup contains antioxidant activity, immunity enhancement, whitening, It was confirmed that cytotoxicity was low while exhibiting a synergistic effect on inhibition of decomposition enzyme and collagen production promoting activity, thereby completing the present invention.

본 발명의 목적은 고지베리, 무화과 및 배초향의 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 면역 증강, 미백, 콜라겐 분해효소 억제, 콜라겐 생성 촉진, 및 주름 개선용 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a composition for antioxidant, immunity enhancement, whitening, inhibition of collagenase, promotion of collagen production, and wrinkle improvement, which comprises hot water extract of goji berries, figs and syrups as an active ingredient.

본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 조성물을 제공한다. The present invention provides an antioxidative composition comprising, as an active ingredient, an extract of gojiberries, figs and pomegranates.

또 다른 양태에서, 본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강용 조성물을 제공한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "면역 증강"은 생체 내 면역시스템의 면역 반응 또는 활성을 증가시키는 것을 의미한다.In another aspect, the present invention provides a composition for enhancing immunity, which comprises an extract of goji berries, figs and pomegranate as an active ingredient. As used herein, the term "immunological enhancement" means increasing the immune response or activity of an in vivo immune system.

또 다른 양태에서, 본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다. 본 발명에서 "피부 미백"은 멜라닌의 생성이 저해됨에 따른 결과를 의미하며, 구체적으로는 멜라닌의 생성이 저해됨에 따라 멜라닌의 증가에서 비롯되는 증상, 예컨대 기미, 주근깨 개선, 피부 노화 등의 개선으로 이해될 수 있다. In another aspect, the present invention provides a composition for skin whitening comprising an extract of gojiberries, figs and pomegranate as an active ingredient. In the present invention, "skin whitening" means a result of inhibition of the production of melanin. More specifically, as the production of melanin is inhibited, symptoms caused by an increase in melanin such as stain, freckles, Can be understood.

또 다른 양태에서, 본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 분해효소 억제용 조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a composition for inhibiting collagenase, which comprises an extract of goji berries, figs and bamboo shoots as an active ingredient.

또 다른 양태에서, 본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a composition for promoting collagen production comprising an extract of gojiberries, figs, and chrysanthemum as an active ingredient.

또 다른 양태에서, 본 발명은 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a composition for improving wrinkles comprising an extract of gojiberries, figs and pearlescentes as an active ingredient.

상기 추출물을 추출 용매를 처리하여 얻는 경우에는, 다양한 추출 용매가 이용될 수 있으며, 바람직하게는, 극성 용매를 이용할 수 있다. 극성 용매로서 적합한 것은, 정제수, 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 또는 에틸렌글리콜 등), 아세트산, DMFO(dimethyl-formamide) 및 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 포함하며, 보다 바람직하게는, 본 발명에서 이용되는 추출 용매는 정제수, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 정제수와의 혼합용매를 포함할 수 있다. 가장 바람직하게는, 본 발명의 추출물은 열수 추출물이다.When the extract is obtained by treating an extraction solvent, various extraction solvents may be used, and a polar solvent may preferably be used. Suitable polar solvents include purified water, alcohols (such as methanol, ethanol, propanol, butanol, n-propanol, iso-propanol, n-butanol, 1-pentanol, 2-butoxyethanol or ethylene glycol) dimethyl-formamide) and DMSO (dimethyl sulfoxide). More preferably, the extraction solvent used in the present invention includes purified water, anhydrous or lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, propanol, And a mixed solvent of the lower alcohol and purified water. Most preferably, the extract of the present invention is a hot-water extract.

본 명세서에서 사용되는 용어, "추출물"은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 본 발명에 따른 추출물은 상술한 추출 용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제 과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예를 들어, 상기 추출물을 일정한 분자량으로 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 상기 추출물에 포함되는 것이다. 또한, 본 발명에 따른 추출물은 재추출, 감압 증류, 동결 건조, 분무 건조 또는 이들의 조합과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.As used herein, the term "extract" is meant to be used in the art as a crude extract as described above, but broadly it also includes a fraction that further fractionates the extract. That is, the extract according to the present invention includes not only those obtained by using the above-described extraction solvent but also those obtained by additionally applying a purification process thereto. For example, the extract may be fractionated by passing the fraction through an ultrafiltration membrane having a cut-off value at a constant molecular weight, or by separation by various chromatographies (prepared for separation by size, charge, hydrophobicity, or affinity) Fractions obtained through various purification methods performed are also included in the above extract. In addition, the extract according to the present invention can be prepared in powder form by an additional process such as re-extraction, vacuum distillation, freeze-drying, spray drying or a combination thereof.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 추출물은 (i) 고지베리 5 내지 20 중량부, 또는 7 내지 12 중량부, 또는 10 내지 15 중량부; (ii) 무화과 5 내지 20 중량부, 또는 7 내지 12 중량부, 또는 10 내지 15 중량부; 및 (iii) 배초향 60 내지 90 중량부, 또는 65 내지 85 중량부, 또는 70 내지 80 중량부로 혼합하여 추출한 것일 수 있다.According to one embodiment of the present invention, the extract comprises (i) 5 to 20 parts by weight, or 7 to 12 parts by weight, or 10 to 15 parts by weight of goji berries; (ii) 5 to 20 parts by weight, or 7 to 12 parts by weight, or 10 to 15 parts by weight of figs; And (iii) from 60 to 90 parts by weight, or from 65 to 85 parts by weight, or from 70 to 80 parts by weight, respectively.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 추출물은 고지베리, 무화과 및 배초향 각각에 대한 추출물을 1:1:1, 2:1:1, 또는 2:1:2의 중량비로 혼합한 것일 수 있다.According to one embodiment of the present invention, the extract may be a mixture of extracts for each of high-fat goji berries, figs, and sashes at a weight ratio of 1: 1: 1, 2: 1: 1, or 2: 1: 2.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 상술한 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물의 약학적 유효량; 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학적 조성물이다. 본 명세서에서 사용되는 용어, "약학적 유효량"은 상술한 상기 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.According to one embodiment of the present invention, the composition of the present invention comprises a pharmaceutically effective amount of the above-mentioned extract of Goji berries, figs and persimmon extracts of the present invention; And a pharmaceutically acceptable carrier. As used herein, the term "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the extract described above.

본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여 방식으로 적용된다.When the composition of the present invention is prepared from a pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carriers to be contained in the pharmaceutical composition of the present invention are those conventionally used in the present invention and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, But are not limited to, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrups, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. It is not. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc., in addition to the above components. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and is preferably administered orally.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있으며, 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg 범위 내이다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on such factors as formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, route of administration, excretion rate, And typical dosages range from 0.001-100 mg / kg on an adult basis.

본 발명의 다른 양태는 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a food composition comprising as an active ingredient an extract of Gojiberries, Figs, and Chrysanthemum of the present invention.

본 발명에 따른 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형들은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 예를 들어, 건강식품으로는 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물에 추가하여, 면역 증강, 미백, 콜라겐 분해효소 억제, 콜라겐 생성 촉진, 및 주름 개선 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분을 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.The food composition according to the present invention includes all forms such as functional food, nutritional supplement, health food and food additives. These types can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art. For example, as a health food, the extracts of Goji berries, figs and chrysanthemums of the present invention can be prepared in the form of tea, juice and drink and then drunk, granulated, encapsulated and powdered. Furthermore, in addition to the extracts of Koji Berry, Figs and Chrysanthemum according to the present invention, known substances or active ingredients known to have immunosuppression, whitening, collagenase inhibition, collagen production promotion, . ≪ / RTI >

본 발명의 조성물이 식품 조성물로 제조되는 경우, 유효성분으로서 상기 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물뿐만 아니라, 식품 제조시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 상기 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.When the composition of the present invention is prepared with a food composition, it contains not only extracts of the above-mentioned high-fat berry, fig and berry, but also components which are usually added during the production of food, for example, proteins, carbohydrates, fats, Nutrients, flavoring agents, and flavoring agents. Examples of the above-mentioned carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavors such as tau martin, stevia extract (e.g., rebaudioside A and glycyrrhizin), and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) may be used as flavorings. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink, it may further contain citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, mulberry extract, jujube extract, .

본 발명의 식품 조성물 중 상기 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물의 바람직한 함유량으로는 최종적으로 제조된 식품 중 0.01 내지 100 중량% 또는 0.01 내지 50 중량%이다. 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.In the food composition of the present invention, the preferred content of the extract of the present invention is 0.01 to 100% by weight or 0.01 to 50% by weight in the finally prepared food. In order to use the extract of the present invention as a food additive in the form of powder or concentrate, it can be used.

본 발명의 또 다른 양태는 본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a cosmetic composition comprising an extract of Gojiberries, figs and syrups as an active ingredient.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 이 경우 화장료 조성물의 제형에 통상적으로 사용되는 담체 등을 포함하여 제조될 수 있다. 일 구체예에 따르면, 상기 담체는 본 발명의 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 5 중량% 내지 약 99 중량 %로 포함될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention may be prepared in any form conventionally produced in the art, and in this case, it may be prepared by including a carrier and the like conventionally used in the formulation of cosmetic composition. According to one embodiment, the carrier may comprise from about 1% to about 99.99% by weight, preferably from about 5% to about 99% by weight of the composition, based on the total weight of the cosmetic composition of the present invention.

일 구체예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 경우에는 화장수, 에멀젼, 크림, 에센스, 젤, 팩 및 클렌징 크림으로부터 선택되는 기초 화장료용 제형; 화운데이션 등의 메이크업 화장료용 제형으로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형으로 제조될 수 있다.According to one embodiment, the cosmetic composition is in the form of a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray May be formulated, but are not limited thereto. More specifically, when the composition of the present invention is used as a cosmetic composition, it may be formulated into cosmetic formulations selected from lotions, emulsions, creams, essences, gels, packs and cleansing creams; And a makeup cosmetic formulation such as a foundation.

일 구체예에 따른 상기 화장료 조성물이 페이스트, 크림 또는 겔로 제형되는 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 조성물이 파우더 또는 스프레이로 제형화되는 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the cosmetic composition according to one embodiment is formulated into a paste, cream or gel, the carrier component may be an animal oil, a vegetable oil, a wax, a paraffin, a starch, a tracer, a cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, Zinc oxide and the like may be used. When the composition of the present invention is formulated into a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluorohydro Propellants such as carbon, propane / butane or dimethyl ether.

일 구체예에 따른 상기 화장료 조성물이 용액 또는 유탁액으로 제형되는 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the cosmetic composition according to one embodiment is formulated as a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl Benzoate, propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.

일 구체예에 따른 상기 화장료 조성물이 현탁액으로 제형되는 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제; 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제; 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the cosmetic composition according to one embodiment is formulated as a suspension, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol as a carrier component; Suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters; Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 항산화, 면역 증강, 미백, 콜라겐 분해효소 억제, 콜라겐 생성 촉진, 및 주름 개선 효과에 있어 상승작용을 통해 우수한 효과를 달성한다.The composition of the present invention comprising the extract of Gojiberries, figs and chrysanthemum as an active ingredient achieves an excellent effect through synergy in antioxidation, immunity enhancement, whitening, suppression of collagenase, promotion of collagen production and wrinkle improvement .

도 1은 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물의 항산화 효과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물의 세포 생존율을 나타내는 그래프이다.
도 3은 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 대식세포의 TNF-α 분비율에 미치는 효과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 멜라닌 생성량에 미치는 효과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 티로시나제(tyrosinase) 활성을 저해하는 효과를 나타내는 그래프이다.
도 6은 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 각질세포 유래 MMP-1 유전자 발현을 저해하는 효과를 나타내는 전기영동 결과이다.
도 7은 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 타입1 프로콜라겐 생성을 촉진하는 효과를 나타내는 그래프이다.
도 8은 고지베리, 무화과, 배초향의 열수 추출물이 PPAR-α,δ의 활성을 증가시키는 효과를 나타내는 그래프이다.
Fig. 1 is a graph showing the antioxidative effect of hot water extract of Gojiberry, Fig.
Fig. 2 is a graph showing the cell survival rate of the hot-water extract of Gojiberry, Fig.
FIG. 3 is a graph showing the effect of hot water extract of goji berries, figs, and pomace on the proportion of TNF-a fraction of macrophages.
Fig. 4 is a graph showing the effect of hot water extract of goji berries, figs, and syrups on melanin production.
FIG. 5 is a graph showing an effect of inhibiting tyrosinase activity by hot-water extract of goji berries, figs and syrups.
6 is an electrophoresis result showing the effect of hot water extract of goji berries, figs, and syrups to inhibit keratinocyte-derived MMP-1 gene expression.
FIG. 7 is a graph showing the effect of the hot-water extract of Goji berries, figs, and syrups to promote type 1 procollagen production.
FIG. 8 is a graph showing the effect of the hot-water extract of Gojiberry, Fig.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예를 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니며 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS The present invention is capable of various modifications and various embodiments, and specific embodiments are illustrated in the drawings and described in detail in the description. It is to be understood, however, that the scope of the present invention is not limited to these embodiments and that all changes, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the present invention are included . DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

제조예 1Production Example 1

제조예 1-1Production Example 1-1

고지베리 50 g, 무화과 50 g, 및 배초향 50 g 각각에 대해 10배수의 증류수를 가하고 환류냉각장치를 부착한 히팅 맨틀을 이용하여 95도에서 4시간 동안 가열하여 추출하고 이를 여과한 후 농축하고 동결건조하여 각각의 추출물을 수득하였다.10 g of distilled water was added to each of 50 g of goji berries, 50 g of figs and 50 g of sieve, and the mixture was heated at 95 ° C for 4 hours using a heating mantle equipped with a reflux condenser. The mixture was filtered, And dried to obtain respective extracts.

제조예 1-2Production Example 1-2

상기 제조예 1-1의 고지베리 추출물, 무화과 추출물, 및 배초향 추출물을 각각 1:1:1 및 2:1:2의 중량비로 혼합하였다.The koji berry extract, the fig extract, and the bamboo extract of Preparation Example 1-1 were mixed at a weight ratio of 1: 1: 1 and 2: 1: 2, respectively.

제조예 2Production Example 2

제조예 2-1Production Example 2-1

고지베리 14.93 g, 무화과 9.29 g, 및 배초향 75.78 g을 혼합한 후 10배수의 증류수를 넣고 환류냉각장치를 부착한 히팅 맨틀을 이용하여 95도에서 4시간 동안 가열하여 추출하고 이를 여과한 후 농축하고 동결건조하여 추출물을 수득하였다.14.93 g of goji berries, 9.29 g of figs and 75.78 g of bamboo shoots were mixed, and then 10 times of distilled water was added. The mixture was heated at 95 ° C for 4 hours using a heating mantle equipped with a reflux condenser, And lyophilized to obtain an extract.

제조예 2-2Production example 2-2

고지베리, 무화과, 및 배초향을 상기 제조예 2-1에서와 동일하게 추출, 여과, 농축한 후 분무건조하여 추출물을 수득하였다.The goji berries, figs, and syrups were extracted, filtered and concentrated as in Preparation Example 2-1, followed by spray drying to obtain an extract.

실험예 1: 항산화 활성의 측정Experimental Example 1: Measurement of antioxidant activity

DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)를 이용하여 항산화능을 조사하였다. DPPH (250 μM) 용액에 각 시료를 처리한 후(Positive control: Vitamin C, 50 ug/mL), 37℃에서 30분 동안 반응을 유도하였다. 항산화능은 반응 종료 후 517 nm에서 흡광도를 측정하여 얻어진 OD값을 통해 산출하고, 그 결과를 도 1에 나타내었다. DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl). After each sample was treated with DPPH (250 μM) (Positive control: Vitamin C, 50 μg / mL), the reaction was induced at 37 ° C for 30 minutes. The antioxidant activity was calculated from the OD value obtained by measuring the absorbance at 517 nm after completion of the reaction, and the results are shown in Fig.

도 1에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 항산화능을 측정한 결과, 혼합 후 추출한 실험군에서 항산화 효과가 가장 높음을 확인하였다. 도 1을 통해 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 추출한 후 혼합하는 방식보다 혼합 후 추출하는 방식이 항산화 효능면에서 상승효과가 보다 현저하였음을 확인할 수 있었다.As shown in Fig. 1, the extracts obtained by separately extracting hot water extract of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the mixture was mixed with 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight of gojiberry, The antioxidant activity was measured by extracting, lyophilization or spray drying. FIG. 1 shows that the method of extracting the mixture after mixing and extracting the goji berries, figs and syrups alone was more remarkable in terms of antioxidant efficacy.

실험예 2: 세포 생존율 측정Experimental Example 2: Measurement of cell viability

2-1. 세포배양2-1. Cell culture

마우스 대식세포주인 RAW264.7 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 RPMI 1640 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양한다.Mouse macrophage RAW264.7 cells were cultured in RPMI 1640 medium containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS in a 100 mm cell culture dish at a density of 70-80% Lt; / RTI >

2-2. 세포 생존율 측정2-2. Cell viability measurement

MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphinyltetrazolium bromide) assay법을 이용하여 분석하였다. 배양한 마우스 대식세포주 RAW264.7을 RPMI 1640 배지를 사용하여 1?106 cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 18시간 동안 전배양하였다. 이후 배지를 제거하고 추출물을 각각 100, 200, 400ug/mL의 농도로 함유하는 배지를 처리하여 배양하였다. 24시간 후 10 ㎕ MTT 용액 (stock concentration : 5 mg/ml)을 첨가하고 3시간 동안 추가반응을 유도하였다. 반응 종료 및 formazan crystal 용해를 위해 각 well에 100 ㎕ DMSO를 추가적으로 첨가하였다. 세포 생존율은 MTT가 formazan으로 환원된 양을 570 nm에서 흡광도를 측정하여 얻어진 OD 값을 통해 산출하고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphinyltetrazolium bromide) assay. The cultured mouse macrophage cell line RAW264.7 was adjusted to a concentration of 1 to 10 6 cells / ml using RPMI 1640 medium, then inoculated in a 96 well plate and preincubated for 18 hours at 5% CO 2 and 37 ° C. Then, the medium was removed and the extracts were treated with medium containing the concentrations of 100, 200 and 400 ug / mL, respectively. After 24 hours, 10 μl of MTT solution (stock concentration: 5 mg / ml) was added and an additional reaction was induced for 3 hours. 100 μl of DMSO was added to each well for reaction termination and formazan crystal dissolution. The cell viability was calculated from the OD value obtained by measuring the absorbance at 570 nm of the amount of MTT reduced to formazan, and the result is shown in Fig.

도 2에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조하여 세포에 처리한 군에서 세포 생존률이 80 ~ 120% 범위에 있음을 확인하였다. 상기 결과를 토대로, 상기 추출물들을 실험한 농도 범위에서는 세포 생존률에 영향을 주지 않는다는 것을 확인하였다.As shown in FIG. 2, the extracts obtained by separately extracting hot water extracts of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the seeds were mixed at 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight of gojiberry, The cell viability was found to be in the range of 80 to 120% in the cells treated with the extract and lyophilized or spray dried. Based on the above results, it was confirmed that the extracts did not affect cell viability at the concentration range tested.

실험예 3: 추출물 농도에 따른 면역 증진 효과-대식세포 유래 TNF-α 생성 측정EXPERIMENTAL EXAMPLE 3 Effect of Extract Concentration on Immune Enhancement - Measurement of TNF-α production from macrophages

배양한 마우스 대식세포주 RAW264.7을 RPMI 1640 배지를 사용하여 1?106 cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 18시간 동안 전배양하였다. 이후 배지를 제거하고 추출물 및 대조군(positive control: LPS, 100 ng/mL)을 각각 100, 200, 400ug/mL의 농도로 함유하는 배지를 처리하여 배양하였다. 24시간 후 상층액을 100 ?l씩 또 다른 96 well plate에 옮기고 R&D systems 사의 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit를 이용해 제조사 지시에 따라 TNF-α 농도를 측정하고, 그 결과를 도 3에 나타내었다.The cultured mouse macrophage cell line RAW264.7 was adjusted to a concentration of 1 to 10 6 cells / ml using RPMI 1640 medium, inoculated on a 96-well plate, and preincubated for 18 hours at 5% CO 2 and 37 ° C . After the medium was removed, the medium containing the extracts and the positive control (LPS, 100 ng / mL) at the concentrations of 100, 200 and 400 ug / mL was treated and cultured. Twenty-four hours later, the supernatant was transferred to another 96-well plate (100 l) and the concentration of TNF-α was measured according to manufacturer's instructions using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit from R & D Systems. .

도 3에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 TNF-α 생성을 측정한 결과, 혼합 후 추출한 실험군에서 가장 높음을 확인하였다. 상기 결과를 통해 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 추출한 후 혼합하는 방식보다 혼합 후 추출하는 방식이 면역 증진 효능 면에서 상승 효과가 현저함을 확인할 수 있었다.As shown in FIG. 3, the extracts obtained by separately extracting hot water extracts of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the mixture was mixed with 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight of gojiberry, TNF-α production was measured in the extract, lyophilized or spray-dried group, and the highest level was confirmed in the experimental group after mixing. From the above results, it was confirmed that the method of extracting after mixing alone is more effective in enhancing the immunity enhancing effect than the method of separately extracting and mixing the goji berries, figs, and pears.

실험예 4: 멜라닌 생성 측정Experimental Example 4: Measurement of melanin production

4-1. 세포배양4-1. Cell culture

마우스 흑색종 세포주인 B16-F10 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양한다.B16-F10 cells, a mouse melanoma cell line, were cultured in a 100 mm cell culture dish using DMEM medium containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS at a density of 70-80% Lt; / RTI >

4-2. 멜라닌 농도 측정4-2. Melanin concentration measurement

마우스 흑색종 세포주인 B16-F10 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 1×105 cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 18시간 동안 전배양하였다. 이후 배지를 제거하고 1600 ug/mL 농도의 각 추출물 및 대조군(positive control: PTU(Phenylthiourea), 10 uM) 함유 배지와 alpha-Melanocyte-stimulating hormone(α-MSH)를 동시에 처리하여 배양하였다. 24시간 후 배지를 제거하고 멜라닌 용해를 위해 1N NaOH를 첨가하였다. 멜라닌 함량은 405 nm에서 흡광도를 측정하여 산출하고, 그 결과를 도 4에 나타내었다.The mouse melanoma cell line B16-F10 cells were adjusted to a concentration of 1 × 10 5 cells / ml using DMEM medium containing penicillin (100 IU / ml) and streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS Then, the cells were inoculated into a 96-well plate and pre-cultured for 18 hours at 5% CO 2 and 37 ° C. The medium was then removed and cultured in the presence of 1600 ug / mL of each extract and a control (positive control: PTU (Phenylthiourea), 10 μM) containing medium and alpha-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH). After 24 hours, the medium was removed and 1N NaOH was added to dissolve melanin. The melanin content was calculated by measuring the absorbance at 405 nm, and the results are shown in Fig.

도 4에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 2:1:2 비율로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 멜라닌 생성을 측정한 결과, Positive control과 유사한 정도로 멜라닌 생성이 감소하였음을 확인하였다. As shown in Fig. 4, extracts obtained by separately extracting hot water extracts of goji berries, figs, and sake extracts were mixed at a ratio of 1: 1: 1 and the mixture of goji berries, figs, And melanogenesis in the freeze-dried or spray-dried group was confirmed to be similar to that of the positive control.

실험예 5: Tyrosinase 효소 활성 측정Experimental Example 5: Measurement of tyrosinase enzyme activity

마우스 흑색종 세포주인 B16-F10 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 1×105 cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 18시간 동안 전배양하였다. 이후 배지를 제거하고 1600 ug/mL 농도의 각 추출물 및 대조군 함유 배지와 alpha-Melanocyte-stimulating hormone(α-MSH)를 동시에 처리하여 배양하였다. 10분 후 RIPA 버퍼를 이용해 세포를 깬 후 14000 rpm 으로 20분 동안 4 ℃에서 원심분리 하여 상층액을 분리하였다. 이후 0.1% L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenylalanine)를 첨가한 후 37℃에서 3시간 동안 배양하였다. Tyrosinase 효소 활성은 475 nm에서 흡광도를 측정하여 산출하고, 그 결과를 도 5에 나타내었다.The mouse melanoma cell line B16-F10 cells were adjusted to a concentration of 1 × 10 5 cells / ml using DMEM medium containing penicillin (100 IU / ml) and streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS Then, the cells were inoculated into a 96-well plate and pre-cultured for 18 hours at 5% CO 2 and 37 ° C. The medium was then removed and cultured in the presence of 1600 ug / mL of each extract and control medium plus alpha-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH). After 10 minutes, the cells were disrupted using RIPA buffer, and the supernatant was separated by centrifugation at 14000 rpm for 20 minutes at 4 ° C. Then, 0.1% L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine) was added thereto, followed by incubation at 37 ° C for 3 hours. The tyrosinase enzyme activity was calculated by measuring the absorbance at 475 nm, and the results are shown in FIG.

도 5에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 Tyrosinase 효소 활성을 측정한 결과 대조군과 유사한 정도로 효소 활성이 감소하였음을 확인하였다.As shown in FIG. 5, the extracts obtained by separately extracting hot water extracts of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the mixture of the sesame seeds, figs, and syrups were mixed at 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight, respectively Tyrosinase activity was measured by extracting, lyophilization or spray drying. The activity of the enzyme was decreased to a similar extent as the control group.

실험예 6: 각질세포 유래 MMP-1 유전자 발현 측정Experimental Example 6: Measurement of expression of MMP-1 gene derived from keratinocytes

6-1. 세포배양6-1. Cell culture

인간 각질세포주인 HaCaT 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양한다. Human keratinocyte HaCaT cells are cultured in 100 mm cell culture dishes at a density of 70-80% using DMEM media containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS .

6-2. MMP-1 유전자 발현 측정6-2. MMP-1 gene expression measurement

MMP-1의 발현 정도를 전사수준에서 조사하기 위해 각 시료 및 대조군(positive control: Vitamin C, 50 ug/mL)를 일정시간 동안 처리하고 UVB 자외선을 조사한 후 Trizol reagent를 사용하여 total RNA를 추출하였다. 추출한 total RNA를 First strand cDNA synthesis kit (Thermo scientific)를 사용하여 cDNA를 제조한 다음, 동량의 cDNA를 PCR로 증폭하였다. 이때 사용한 표적단백질의 sense 및 antisense primer 염기서열은 기존문헌을 참조하여 제조하고, 대조군 유전자로는 GAPDH을 사용하였다. PCR 증폭은 Hipi PCR kit (Elpis biotech)을 사용하여 각 실험군 cDNA와 MMP-1 primers, 대조군 GAPDH primers를 dNTP 250 uM, Tris-HCL(pH 8.3) 10 mM, KCl 50 mM, NgCl2 1.5 mM를 포함한 Hipi PCR kit 20ul에서 시행하였다. PCR은 95 ℃에서 45초 간 denaturing, 60 ℃에서 45초 간 annealing 그리고 72 ℃에서 1분간 extension 하는 조건으로 시행하며, 총 30 cycles을 수행하였다. PCR로 증폭된 DNA는 1.5 % agarose gel에서 전기영동 하였고 분획된 DNA band의 intensity를 측정하고, 그 결과를 도 6에 나타내었다. In order to investigate the level of expression of MMP-1 at the transcription level, each sample and control (positive control: Vitamin C, 50 ug / mL) were treated for a certain period of time and irradiated with UVB ultraviolet light. Total RNA was extracted using Trizol reagent . The extracted total RNA was amplified by PCR using first strand cDNA synthesis kit (Thermo scientific). The sense and antisense primer sequences of the target proteins used were prepared by reference to the existing literature and GAPDH was used as a control gene. PCR amplification was carried out using a Hipi PCR kit (Elpis biotech) containing 250 mM dNTP, 10 mM KCl, 50 mM KCl and 1.5 mM NgCl 2 , and MMP-1 primers and control GAPDH primers Hipi PCR kit was used in 20ul. PCR was performed at 95 ° C for 45 seconds, annealing at 60 ° C for 45 seconds, and extension at 72 ° C for 1 minute. A total of 30 cycles were performed. The DNA amplified by PCR was electrophoresed on 1.5% agarose gel, and the intensity of the fractionated DNA bands was measured. The results are shown in FIG.

- MMP-1 forward 5'-ATT CTA CTG ATA TCG GGG CTT TGA-3', MMP-1 reverse 5'-ATG TCC TTG GGG TAT CCG TGT AG-3'- MMP-1 forward 5'-ATT CTA CTG ATA TCG GGG CTT TGA-3 ', MMP-1 reverse 5'-ATG TCC TTG GGG TAT CCG TGT AG-

- glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) forward 5'-CCA GCC GAG CCA CAT CGC TC-3', GAPDH reverse 5'-TGA CCT TGG CCA GGG GTG CT-3'- glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) forward 5'-CCA GCC GAG CCA CAT CGC TC-3 ', GAPDH reverse 5'-TGA CCT TGG CCA GGG GTG CT-

도 6에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 MMP-1 유전자 발현을 측정한 결과 유전자 발현이 감소하였음을 확인하였다.As shown in FIG. 6, the extracts obtained by separately extracting hot water extracts of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the mixture of goji berries, figs, and syrups were mixed at 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight, respectively The expression of MMP-1 gene in the extract and freeze-dried or spray-dried group was confirmed to be decreased in gene expression.

실험예 7: 섬유아세포 유래 콜라겐 생성능 측정Experimental Example 7: Measurement of collagen production ability derived from fibroblast

7-1. 세포배양7-1. Cell culture

인간 섬유아세포주인 HS68 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양한다.Human fibroblast HS68 cells were cultured in 100 mm cell culture dishes at a density of 70-80% using DMEM media containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS .

7-2. 타입1 프로콜라겐 측정7-2. Type 1 Procollagen Measurements

배양된 인간 섬유아세포주인 HS68 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 1×106 cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 18시간 동안 전배양하였다. 이후 배지를 제거하고 각 추출물 함유 배지를 동시에 처리하여 배양하였다. 24시간 후 상층액을 100μl씩 또 다른 96 well plate에 옮기고 Abcam 사의 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit를 이용해 제조사 지시에 따라 프로콜라겐 농도를 측정하고, 그 결과를 도 7에 나타내었다.The cultured human fibroblast HS68 cells were adjusted to a concentration of 1 × 10 6 cells / ml using DMEM medium containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS , And inoculated on a 96-well plate and preincubated for 18 hours at 37 ° C and 5% CO 2 . Then, the medium was removed and the extract-containing medium was simultaneously treated and cultured. After 24 hours, 100 μl of the supernatant was transferred to another 96 well plate, and the concentration of procollagen was measured according to the manufacturer's instruction using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit of Abcam. The results are shown in FIG.

도 7에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물을 1:1:1 비율로 혼합한 군과, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 동결건조 또는 분무건조한 군에서 타입1 프로콜라겐 생성을 측정한 결과 생성량이 증가하였음을 확인하였다.As shown in FIG. 7, the extracts obtained by separately extracting hot water extracts of gojiberries, figs, and syrups were mixed at a ratio of 1: 1: 1, and the mixture of gosyberries, figs, and syrups was mixed at 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight The production of type 1 procollagen was measured by extraction, lyophilization or spray drying and the results were confirmed to be increased.

실험예 8: 원숭이 신장세포 유래 PPAR-α,δ 활성 측정Experimental Example 8: Measurement of PPAR-α, δ activity derived from monkey kidney cells

8-1. 세포배양8-1. Cell culture

원숭이 신장 세포주인 Cos-7 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양한다.Monkey kidney cell line, Cos-7 cells, was cultured in 100 mm cell culture dish at 70-80% density using DMEM media containing penicillin (100 IU / ml), streptomycin (100 μg / ml) and 10% FBS Lt; / RTI >

8-2. 타입1 프로콜라겐 측정8-2. Type 1 Procollagen Measurements

원숭이 신장 유래 세포주인 Cos-7 세포를 DMEM 배지를 이용하여 4×106 cell/ml의 농도로 조절한 후, 24 well plate에 접종하고, 5% CO2 및 37℃에서 24시간 동안 전배양하였다. 이후 Thermo Fisher사의 Lipofectamine을 이용해 pFR-Luciferase (10 μg/ml) 및 pFR-PPAR (1.5 μg/ml)을 세포 내에 도입하여 24시간 배양하였다. 이후 배지를 제거하고 각 추출물 함유 phenol free DMEM 배지를 동시에 처리하여 24시간 배양하였다. 배양 후 lysis buffer를 이용하여 세포를 용해시키고 substrate와 1:1로 반응시켰다. 반응 후 바로 Luminometer로 흡광도를 측정하여 그 결과를 도 8에 나타내었다.Monkey kidney-derived cell line Cos-7 cells were adjusted to a concentration of 4 × 10 6 cells / ml using DMEM medium, inoculated into a 24-well plate, and preincubated for 24 hours at 5% CO 2 and 37 ° C. . Then, pFR-Luciferase (10 μg / ml) and pFR-PPAR (1.5 μg / ml) were introduced into the cells using Lipofectamine from Thermo Fisher and cultured for 24 hours. The medium was then removed and the phenol-free DMEM medium supplemented with each extract was treated at the same time for 24 hours. After incubation, cells were lysed with lysis buffer and reacted with substrate 1: 1. After the reaction, the absorbance was immediately measured with a luminometer. The results are shown in FIG.

도 8에 나타낸 바와 같이, 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 단독으로 열수 추출한 추출물과 고지베리, 무화과, 배초향을 각각 14.93, 9.29, 75.78 중량부로 혼합 후 추출 및 분무건조한 군에서 PPAR-α와 PPAR-δ 활성을 측정한 결과 혼합 추출물 및 혼합 분무건조군에서 활성이 증가하였음을 확인하였다. 이는 각각의 단일 추출물에 대한 효능보다 복합추출물에서 미백 및 피부 표피 세포 재생 효과에서 상승효과를 나타내는 것이다.As shown in Fig. 8, the extracts obtained by separately extracting hot water, goji berries, figs, and syrups were mixed with 14.93, 9.29, and 75.78 parts by weight of extracts, δ activity, it was confirmed that the activity was increased in mixed extract and mixed spray drying group. This shows a synergistic effect on the whitening and skin epidermal regeneration effects in the complex extracts rather than the efficacy of each single extract.

상기 실험예의 결과에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 고지베리, 무화과 및 배초향의 열수 추출물을 포함하는 조성물은 항산화, 면역 증강, 미백, 콜라겐 분해효소 억제, 콜라겐 생성 촉진, 및 주름 개선 효과에 있어 양성 대조군에 대등한 효과를 나타내며 이는 상기 고지베리, 무화과 및 배초향 생약의 추출물 간의 상승작용에 의한 것이다.As can be seen from the results of the above Experimental Examples, the composition comprising the hot water extract of Koji Berry, the fig and the sake according to the present invention is effective for antioxidation, immune enhancement, whitening, collagenase inhibition, collagen production promotion, , Which is equivalent to that of the positive control, which is due to the synergistic action between the extracts of Gojiberry, Fig.

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다. 또한, 본 발명에 개시된 실시예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.The above description is only illustrative of the technical idea of the present invention, and various changes and modifications may be made by those skilled in the art without departing from the essential characteristics of the present invention. It should be noted that the embodiments disclosed in the present invention are not intended to limit the scope of the present invention and are not intended to limit the scope of the present invention. The scope of protection of the present invention should be construed according to the following claims, and all technical ideas within the scope of equivalents should be construed as falling within the scope of the present invention.

Claims (8)

고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 포함하는 항산화 조성물.
An antioxidant composition comprising an extract of goji berries, figs and pomegranates.
고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 포함하는 면역 증강용 조성물.
A composition for enhancing immunity comprising an extract of Goji Berry, a fig and a pomegranate.
고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물.
A composition for skin whitening comprising an extract of Goji berries, figs and pomegranates.
고지베리, 무화과 및 배초향의 추출물을 포함하는 주름 개선용 조성물.
A composition for improving wrinkles comprising an extract of Goji berries, figs and pomegranates.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물은 열수로 추출한 것인 조성물.
5. The composition according to any one of claims 1 to 4, wherein the extract is extracted with hot water.
제5항에 있어서, 상기 추출물은 혼합 추출물로서 고지베리 5 내지 20 중량부, 무화과 5 내지 20 중량부, 및 배초향 60 내지 90 중량부를 혼합하여 열수로 추출한 것인 조성물.
[Claim 6] The composition according to claim 5, wherein the extract is a mixed extract of 5 to 20 parts by weight of goji berries, 5 to 20 parts by weight of figs, and 60 to 90 parts by weight of a sieving solution.
제5항에 있어서, 상기 추출물은 고지베리, 무화과 및 배초향을 각각 열수로 추출한 후 1:1:1, 2:1:1, 또는 2:1:2의 중량비로 혼합한 것인 조성물.
The composition according to claim 5, wherein the extract is prepared by extracting hot pepper, fig and syrup respectively with hot water and mixing in a weight ratio of 1: 1: 1, 2: 1: 1, or 2: 1: 2.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물은 조성물 총 100 중량부에 대하여 0.01 내지 100 중량부로 포함되는 것인 조성물.The composition according to any one of claims 1 to 4, wherein the extract is contained in an amount of 0.01 to 100 parts by weight based on 100 parts by weight of the total composition.
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