KR20180098883A - 땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만 및 체지방 감소 효과가 우수한 조성물 - Google Patents
땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만 및 체지방 감소 효과가 우수한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 가르시니아 캄보지아 추출물 10 내지 70중량%, 땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%, 이눌린 10 내지 70중량%, 팔라티노스 10 내지 70중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 조성물을 제공하며, 본 발명에 따른 조성물은 체내 흡수된 탄수화물이 지방으로 합성되는 것을 억제함으로써 체지방을효과적으로 감소시키고, 배변활동을 활성화시킬 수 있으며, 칼로리를 감소시키는 효과가 있다. 더더욱 다이어트로 인해 부족해질 수 있는 영양소를 체내에 공급하여 신진대사 기능과 면역기능을 향상시킬 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 은 신진대사 기능과 면역기능을 정상적으로 유지하면서도 효과적인 체지방 감소를 달성할 수 있어 다이어트 분야에서 널리 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
Description
본 발명은 항비만 및 체지방 감소 효과가 우수한 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 가르시니아 캄보지아 추출물과 함께 사용되어 항비만 및 체지방 감소에 대하여 상승 효과를 낼 수 있는 땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 포함하여 항비만 및 체지방 감소 효과가 우수한 조성물에 관한 것이다.
비만은 전 세계적으로 가장 흔한 영양장애 중의 하나로써, 비만은 소모하는 열량에 비해 과다한 열량을 섭취함으로써 여분의 열량이 체내에 지방의 형태로 축적되어지는 현상을 말한다.
비만은 유전적 영향, 서구화되는 식생활에 의한 환경적인 영향, 스트레스에 의한 심리적인 영향 등 다양한 원인에 의해 유발되는 것으로 생각되고 있으나 아직 그 정확한 원인이나 기작에 관해서는 명확히 정립된 바가 없는 상황이다. 그러나 비만은 비만 그 자체가 갖는 문제점뿐만 아니라, 심혈관계 질환이나 당뇨와 같은 질병의 원인으로도 작용할 수 있기 때문에(Manson, et al., New England J. Med., 333, pp677-685, 1995; Kopleman PG., Nature, 404, pp635-643, 2000; Must, et al., JAMA, 282, pp1523-1529, 1999) 전 세계적으로 비만치료에 많은 관심이 모아지고 있다.
또한, 비만은 외형적인 문제뿐 아니라 각종 성인병의 발병과 매우 깊은 관련을 갖는데, 비만도가 높아질수록 당뇨병과 담석증, 고혈압, 심장질환 및 뇌졸중 등의 유병율이 증가된다(Field AE., et al., Arch. Intern, Med,.161(13), pp1581- 1586, 2001; Cha BR., et al., Kor. J. Nutr., 36(5), pp483-490, 2003). 따라서 비만으로 야기되는 재정적 부담과 인명적 손실은 막대하다.
이와 같이 체중조절에 대한 관심이 증가하면서 20대 여성의 48.1%, 30대 여성의 40%가 지난 1년간 체중감량 시도를 한 경험이 있다고 보고되고 있다(Kae SH., Patterns of body weight and diet for Korean-1998 National health and nutrition survey- Proceeding for Korean Cummunity Nutrition., Society spring Conference, 7-28, 2001).
비만이 있는 질병 환자의 경우 질병 치료와 더불어 비만의 치료가 필요하기 때문에 평소에 비만의 예방과 이의 적극적인 치료가 반드시 필요하다. 비만을 억제하기 위해서는 음식물의 섭취를 줄이고 운동 등을 통하여 에너지 소비를 늘려서 지방의 체내 축적을 억제하는 것이 필요하다. 식이요법을 통한 식욕억제가 체중감소에 직접적인 효과를 낸다는 것은 주지의 사실이나 대개의 경우 식욕억제가 쉬운 일은 아니므로 음식 섭취량의 감소보다는 에너지 소모를 증가시키는 것이 비만억제에 보다 효과적이라 할 수 있다.
그러나 지속적인 운동 또한 어려운 다수의 현대인들은 결과적으로 비만 억제효과를 갖는 약물과 보조식품의 섭취에 의존하고 있어 비만 억제를 위한 식품, 건강기능식품, 의약품 등 관련시장규모 또한 해마다 증가하고 있는 추세이다.
비만방지 건강기능식품은 식욕억제 및 정장효과 분야에서 꾸준한 증가세를 보이고 있는데, 보통 식욕 억제가 주요 분야로 대두되고 있으며, 현재 상품명 미에로화이바, '팻다운', '디팻다이어트 식이섬유C', '타미실', '그린화이바' 등의 식이섬유 제품들이 시판되어 있다. 하지만, 상기와 같은 비만방지 건강기능식품들은 식욕억제 및 정장효과만을 갖는 것이 대부분으로서, 이들 제품은 장기 섭취에 의한 소화 불량, 메스꺼움, 어지러움, 두드러기 등의 부작용, 일시적인 효과와 낮은 부가가치의 문제점 등이 있다. 따라서 식품에 가까우면서도 안전한 천연물 유래의 항비만 식품소재 개발이 더욱 절실하게 요구되고 있다.
대한민국 공개특허 제 2013-0136095호에 감귤 초콜릿 과자의 제조방법에 개시되어 있고, 대한민국 등록특허 제0750952호에는 발아메밀분말을 함유한 기능성 제빵 반죽 조성물, 빵 및 이들의 제조방법이 개시되어 있다. 하지만 상기의 종래의 기술들은 항비만이나 다이어트 효과를 갖는다고 하나 이를 뒷받침할만한 근거가 없어 실제로 그러한 기능성을 인정하기 어렵다는 문제점이 있다.
최근에는 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia) 추출물을 이용하여 인체에 부작용을 최소화할 수 있으면서도, 비만 예방 또는 치료 효과를 구현할 수 있는 조성물에 대하여 연구 및 개발이 이루어지고 있는데, 그러나 가르시니아 캄보지아 추출물만으로는 체지방 감소를 통한 비만 개선의 충분한 효과를 얻기가 어려우며 가르시니아 캄보지아 추출물과 함께 사용되어 상승 효과를 낼 수 있는 조성물의 개발이 필요하다.
따라서 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 체지방 감소를 통한 비만 개선의 충분한 효과를 얻기가 어려우며 가르시니아 캄보지아 추출물과 함께 사용되어 상승 효과를 낼 수 있는 조성물을 제공하는 것이다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위하여 본 발명은,
가르시니아 캄보지아 추출물 10 내지 70중량%
땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%
이눌린 10 내지 70중량%
팔라티노스 10 내지 70중량%
포함하는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 조성물을 제공한다.
상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것이 바람직하다.
상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물은 상기 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함할 수 있다.
또한 상기 기술적 과제를 달성하기 위하여 본 발명은,
상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물 10 내지 70중량%와 잔부 중량%의 수소수를 포함하는 것으로 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 음료을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물은 체내 흡수된 탄수화물이 지방으로 합성되는 것을 억제함으로써 체지방을효과적으로 감소시키고, 배변활동을 활성화시킬 수 있으며, 칼로리를 감소시키는 효과가 있다. 더더욱 다이어트로 인해 부족해질 수 있는 영양소를 체내에 공급하여 신진대사 기능과 면역기능을 향상시킬 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 은 신진대사 기능과 면역기능을 정상적으로 유지하면서도 효과적인 체지방 감소를 달성할 수 있어 다이어트 분야에서 널리 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 세포 사멸 및 증식 억제 정도 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 in vitro 세포염색 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 in vitro 세포염색 결과를 나타낸 사진이다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 가르시니아 캄보지아 추출물은 Guttiferae과의 식물로서 인도 남서부에서 자생하는 열대 식물인 가르시니아 캄보지아 열매의 껍질 부위를 사용하며, 껍질에는 기능성분인 hydroxycitric acid(이하 HCA)가 약 10~30% 함유되어 있다.
동남아시아에서는 카레 등의 향신료로 사용되고, 남부 인디아 해안지역에서는 수세기 동안 돼지고기 및 생선의 산미제로서 사용되어온 것으로서 가르시니아 캄보지아 추출물은 1969년 Brandeis University의 연구자들이 HCA의 Krebs/citric acid cycle 억제제로서의 역할을 제시하여 신체 내에서 탄수화물로부터 지방합성을 감소시킨다는 사실이 연구되기 시작하였다.
가르시니아 캄보지아 추출물은 가르시니아 캄보지아(Garcinia cambogia) 열매의 껍질을 물 또는 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하여 칼슘, 칼륨, 나트륨의 염을 단독 또는 복합으로 결합하여 식용에 적합하도록 제조하였으며, 기능성분인 총 (-)-Hydroxycitric acid[(-)-HCA]가 600㎎/g 이상 함유되어 있다.
(-)-HCA는 free form과 lactone form이 있으며, free form은 제조과정 중 농축과 증발과정에서 lactone form으로 고리화(lactonization)가 쉽게 일어난다. 따라서 (-)-HCA를 안정화하기 위해 칼슘, 나트륨, 칼륨 등의 염의 형태로 제조하는 것이 보편적인 것으로 알려져 있다.
국내에서 가르시니아 캄보지아 추출물은 「식품공전」에 따라 체중조절용 조제식품에만 식품의 부원료로서 최소량(5% 이하를 사용하여야 하나, 1일 섭취량 6g을 초과할 수 없음)을 사용하도록 정하여 놓고 있다. 또한, 미국 등 제 외국에서는 500~4500㎎/일의 섭취량 수준에서 식이보충제 또는 식품원료 등으로 판매되고 있다.
또한 Shara 등(2003; 2004)은 SD rats를 대상으로 식이의 0.2, 2.0, 5.0%로 가르시니아 캄보지아 추출물을 90일간 경구 섭취시킨 결과 사료섭취량 및 체중이 유의하게 감소하였으나, 각종 장기무게 변화, 간에서의 지질과산화 및 DNA 분열, 그 밖의 혈액학적, 혈액생화학적, 조직병리학적인 변화 등이 관찰되지 않았다고 보고하였다. 한편, 가르시니아 캄보지아 추출물로 수행한 다수의 인체적용시험에서도 심각한 부작용 사례는 보고되지 않았다.
탄수화물을 과량 섭취하면 체내에서 지방으로 전환되어 축적되는데, (-)-HCA는 탄수화물이 지방으로 전환될 때 사용되는 효소(ATP-citrate lyase)의 활성을 억제하여 체중과 체지방량을 감소시키는 것으로 다음의 인체적용시험, 동물시험 및 시험관 시험을 통해서 확인되었다.
본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 가르시니아 캄보지아 추출물은 10 내지 70중량% 포함되는 것이 체지방 감소 효과가 우수하여 항미만의 목적을 달성하는데 바람직하며, 10중량% 미만으로 포함될 경우 체지방 감소 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.
본 발명에 따른 조성물 포함되는 땅콩새싹 추출물은 땅콩을 일정 배양조건에서 발아시켜 식용 가능한 수준인 4 내지 7일에 수확한 땅콩새싹을 물 또는 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하여 제조한 것으로서, 땅콩새싹 추출물이 건강식품 소재로 주목 받는 이유는 이 발아과정에서 기능성을 나타내는 성분인 레스베라트롤(resveratrol)이 다량 생성되기 때문이다. 땅콩새싹으로부터 추출물을 제조하는 방법은 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것으로서 특별한 제한이 없다.
레스베라트롤(resveratrol)은 식물이 스트레스를 받을 때 분비되는 피토알렉신(phytoalexin)으로서 항암 및 강력한 항산화 작용을 하는 것으로 알려져 있으며, 혈청 콜레스테롤을 낮춰 주는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이 외에도 항바이러스(antiviral), 신경보호작용(neuroprotective), 항염증작용(anti-inflammatory), 항노화(anti-aging) 및 수명을 연장시키는 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 프렌치 패러독스(French Paradox)는 레스베라트롤의 작용에 의한 것으로 프랑스인들이 비교적 지방이 많은 음식을 섭취하면서도 심장 질환의 발병률이 낮게 나타나는 현상을 말하는 것이다.
또한 레스베라트롤은 발암의 3단계인 개시, 촉진, 진행 단계 모두를 차단함으로써 강력한 항암 작용이 있다는 사실이 보고되었다. 레스베라트롤은 발암원으로 작용하는 유해한 물질들의 독성을 완화시켜 유전자의 변형을 막아줄 수 있으며, 개시에서 진행의 단계로 접어든 비정상 세포들의 증식을 강력하게 억제할 수 있는 작용이 있다. 최근 연구에 의하면 유방암, 전립선암, 대장암, 폐암 등을 포함한 많은 암세포에서 레스베라트롤은 세포 자살을 촉진하는 유전자들의 활성을 통하여 암세포의 증식을 억제할 수 있음이 밝혀졌다. 또한 레스베라트롤은 세포증식을 촉진하는 특정 유전자 신호전달계의 발현을 조절함으로써 손상을 입은 세포뿐만 아니라 빠르게 분열하는 각종 인체 암세포의 증식을 강력하게 차단할 수 있는 것으로 알려져 있다. 레스베라트롤은 포유동물의 노화를 효과적으로 억제하는 것으로 보고되었는데, 2003년 영국의 과학전문지 <네이처>에 발표한 논문에 따르면 적포도주와 적포도 속의 레스베라트롤(resveratrol)이라는 세포 사멸을 억제하는 SIRT1 유전자를 활성화하여 생명을 연장한다고 한다.
본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 땅콩새싹 추출물은 10 내지 70중량% 포함되는 것이 체지방 감소 효과가 우수하여 항미만의 목적을 달성하는데 바람직하며, 10중량% 미만으로 포함될 경우 체지방 감소 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 이눌린( inulin)은 백색의 둥근 결정으로 비교적 물에 잘 녹으며, 주로 국화과(菊花科)의 땅속줄기, 달리아의 알뿌리나 우엉 뿌리, 돼지감자, 치커리 등에 존재한다. 본 발명에서 사용되는 이눌린은 그 유래는 어떠한 것을 사용하여도 무방하며 콜레스테롤 개선, 배변활동 원활, 식후혈당상승억제의 기능성이 알려져 있다.
또한 본 발명에서의 이눌린은 치커리 추출물에서 얻어지는 것을 사용할 수 있는데 치커리추출물은 치커리의 뿌리를 열수로 추출, 정제하여 만든 것을 말하며, 식이섬유를 80% 이상 함유하고 있으며, 건강한 사람 12명에게 4주 동안 이눌린 9g을 섭취시킨 Brighenti 등(1999)의 연구에서는 총 콜레스테롤이 감소하였으며, 동시에 장내 유익균이 증가한 것으로서 보고되었으며, Kleessen 등(2007)은 45명의 성인에게 3주 동안 치커리 이눌린 8g을 섭취시켜 대변 경도가 감소하고 총 균수가 증가하는 것을 관찰하였으며, Hond 등(2000)은 건강한 사람 6명에게 2주 동안 치커리 이눌린 15g을 제공하여 배변 빈도가 증가하였다고 보고하였다. 20g의 치커리 이눌린을 콜레스테롤이 약간 높은 사람 12명에게 섭취시킨 Causey 등(2000)의 연구에서는 변 중 단쇄지방산이 증가하였다. 또한, Jackson 등(1999)은 건강한 사람 54명에게 이눌린 10g을 8주 동안 섭취시켜 공복 시 인슐린 분비가 감소함을 관찰하였다.
본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 이눌린은 10 내지 70중량% 포함되는 것이 체지방 감소 효과가 우수하여 항미만의 목적을 달성하는데 바람직하며, 10중량% 미만으로 포함될 경우 체지방 감소 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 팔라티노스(palatinose)는 자당(슈크로오스)에 미생물기원의 α-glucosyl 전달효소를 작용시켜 자당의 α-1,2 결합(1G-2F)을 분자 내 전위로 α-1,6결합(1G-6F)으로 바꾼 것을 말하며, Palatinose의 명명은 최초에 Protamino bactenum rubrun(균)이 발견된 독일 토지의 Latin명 Palatin에서 유래된 것으로서 용해도는 자당보다 낮고 결정화하기 쉽다. 감미도는 자당의 50% 정도로 미질은 좋다. 또한 자당과 공존하면 자당의 우식성을 억제하는 항우식성이 있으며, 환원기를 갖기 때문에 가열착색성은 자당보다 강하여 항우식성 감미료로 캔디 등에 쓰이고 있다.
본 발명에서 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 팔라티노스는 10 내지 70중량%, 10중량% 미만으로 포함될 경우 체지방 감소 효과를 수득할 수 없으며, 70중량%를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없다.
상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물은 음료, 칩류, 면류, 가공류, 곡류, 정제, 연질캅셀 및 과립제 중 선택된 하나 또는 그 이상의 형태로 식품으로 제공될 수 있으며. 이와 같은 경우 보존료, 착향료, 팽창제, 강화제, 개량제, 유화제, 여러 가지 영양제, 합성 풍미제와 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색료, 발색제, 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH조절제, 안정화제, 소포제, 용제, 이형제, 방부제, 품질 개량제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 등의 기타 식품제조용 첨가제를 더 포함할 수 있다.
구체적으로 살펴보면, 상기 식품은 과일, 야채, 과일이나 야채의 건조제품; 또는 절단제품, 과일쥬스, 야채쥬스 또는 이들의 혼합쥬스; 칩류, 면류, 축산가공식품, 수산가공식품, 유가공식품, 발효유식품, 두류식품, 곡류식품, 미생물발효식품, 제과제빵, 양념류, 육가공류, 음료수, 감초류, 허브류 중 어느 하나 또는 하나 이상이다.
예를 들어, 음료로 제조되는 경우 본 발명에 따른 조성물을 수소수에 용해시켜 제조할 수 있는데, 일반적으로, 수소수는 자화 처리, 초음파 처리, 광석 처리, 미네랄 처리, 또는 전기 분해 등의 방법에 의해 제조된다. 이들 방법 중 전기 분해 방법이 주로 사용되며, 전기 분해에 의해 제조된 수소수를 전해 수소수라 한다.전해 수소수는 알칼리 이온수 또는 수소 풍부수 등으로 불리며, 먹는 물, 미용, 산업 및 농업용 등으로 사용될 수 있다. 구체적으로, 전해 수소수는 아토피와 같은 피부염, 피부 미백, 노화, 생활 습관병 등에 효과가 있고, 노화 방지와 보습 효과로 화장품에도 사용될 수 있으며, 식품류 장기 원형 보존성에서 우수한 효과를 가진다.
또한 땅콩새싹 추출물을 이용하여 식품을 만드는 경우 두류의 비린 맛 및 비린내인데 수소수를 이용하여 음료로 하는 경우 두류에서 유래하는 특유의 비린 맛과 비린내가 없어져 음료로서의 기호도가 향상될 수 있다.
또한 본 발명에 따른 조성물을 선택적으로 참죽나물 추출물을 더 포함할 수 있으며, 본 발명에서의 본 발명에서 사용되는 참죽나물은 참죽나무의 잎 또는 순을 의미하는 것으로서, 참죽나무(Cedrela sinensis A. Juss.)는 원산지가 아시아지역인 멀구슬나무과의 낙엽교목이다. 이른 봄에 참죽나무 순이 돋아날 때는 붉은 색을 나타내 매우 아름다우며 맛, 향기, 색이 조화를 이루는 산채이며 데쳐서 무친 참죽나물은 봄의 미각을 돋아주는 식품으로서 잎은 장염이나 이질 등의 치료, 열매는 관절통, 뿌리껍질은 빈혈, 대하 등에 약용으로 쓰이기도한다.
상기 참죽나물 추출물은 참죽나물을 물 또는 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하여 제조한 것으로서, 추출법은 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것이라면 특별한 제한 없이 사용이 가능하며, 그 함량은 상술한 조성물의 기본 성분 전체 중량 대비 10 내지 30중량부이다.
함량 기준을 이와 같은 범위를 설정한 것은 10중량부 미만으로 포함될 경우 항비만 및 체지방 감소 효과를 수득할 수 없으며, 30중량부를 초과할 경우 다른 성분의 함량이 미비하여 상승 효과를 발휘할 수 없기 때문이다.
이하 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<
실시예
1: 조성물의 제조>
하기 표 1에 따른 각 성분을 혼합하여 본 발명에 따른 조성물을 제조하였다.
| 본 발명 조성물(중량%) | 비교 조성물(중량%) | |
| 가르시나아 캄보지아 추출물 | 40 | 100 |
| 땅콩새싹 추출물 | 30 | |
| 치커리 이눌린 | 15 | |
| 팔라티노스 | 15 |
<실험예 1: 항비만 효능 평가>
실시예 1의 본 발명에 따른 조성물을 각각 0.25 mg/L, 0.5mg/L, 1mg/L, 2mg/L 농도의 시료로 제조하였다.
전구지방세포인 3T3-L1 preadipocyte를 10% BCS와 1%(v/v) penicillin-streptomycin을 함유한 high-glucose DMEM을 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator 에서 배양하였다. 2일마다 배양액을 교환하였고 세포가 80% 이상 부착(confluent stage)하면 PBS 용액을 사용하여 세포표면을 세척한 후, 0.25% trypsin-EDTA를 첨가한 다음 배양기에서 3분간 방치하여 세포를 분리하였다. 그 후 원심분리기(Lager capacity Union 32R, (주)한일과학산업, 강릉, Korea)를 사용하여 1,000 rpm에서 3분간 원심분리 하여 세포를 모았다. 3T3-L1 preadipocyte를 6well plate에 1.5ml씩 균등하게 분주하여 100% confluency 2일 후, 10% FBS와1%(v/v) penicillin-streptomycin이 포함된 DMEM에 분화유도 호르몬인 IBMX(0.5 mM), dexamethasone (1.25μM) 그리고 insulin(4mg/mL)을 혼합하여 분화 유도를 시작하였다. 분화유도 3일 후, feeding medium을 insulin(4mg/mL)이 포함된 DMEM으로 교환하였고, 이후에는 2일 간격으로 10% FBS를 첨가한 DMEM으로 교환하여 배양하였다.
(1)
MTT
assay
3T3-L1 지방전구세포를 96well plate에 각 well 당 1.0×104 cells/ml이 되도록 분주하여 지방세포로 분화시켰다. 분화 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 새 배지와 시료를 혼합하여 첨가하여 동일한 조건에서 48시간 배양하였다. 48시간 후 시료를 제거한 다음 PBS에 5mg/ml의 농도로 제조한 MTT용액과 FM배지를 혼합하여 4시간 추가배양 하였다. 배양 후 생성된 formazan 결정을 DMSO에 녹여 ELISA reader로 595nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도 측정값을 통해 하기 식 1을 통해 MTT가 환원되어 formazan crystal로 침전되는 정도를 산출하여 세포가 사멸 또는 증식 억제 되는 정도를 확인하였다. 결과는 도 1에 그래프로 나타내었다.
[식 1]
Cytotoxicity (%)=[1-(Sample absorbance/Control absorbance)]×100
(2) Oil red O 염색
세포 배양액을 버리고 PBS로 3회 세척하고 10% formaldehyde를 500ul씩 각 well에 넣고 4℃에서 4시간 동안 고정시켰다. 그 후에 formaldehyde를 버리고 PBS로 세 번 씻은 후 Oil red O 염색약(Oil red O(Sigma, St. Louis, MO, USA) 0.25g을 isopropyl alcohol 50ml에 녹인 용액을 증류수와 3:2의 비율로 섞은 후 0.45uM filter로 여과한 용액)을 500ul씩 넣고 다시 상온에서 1시간 동안 염색한 후 PBS로 3번 씻어내었다. 염색이 된 세포는 현미경(CK2, Olympus, Tokyo, Japan)으로 관찰하였으며, 지방에 염색된 염색시약을 isopropyl alcohol로 30분간 탈염을 실시하고 염색약을 회수해 540nm에서 OD값을 측정하였다. 결과는 도 2에 나타내었다.
본 발명에 따른 실시예 1의 조성물을 0.10. 0.25, 0.5, 1, 2mg/ml의 농도로 3T3-L1 cell에 처리했을 때 지방세포의 크기와 수는 농도가 높을수록 대조군에 비해 감소함을 관찰할 수 있었으며 OD값도 농도 증가에 따라 대조군에 비해 감소함을관찰할 수 있었다. 이를 통해, 본 발명에 따른 조성물이 지방세포 내의 지방축적 억제 효능을 가짐을 알 수 있었다.
실험예
2: 동물 실험에 의한
항비만
효능 평가
(1) 실험동물의 준비
평균 체중 18±2g의 4주령 웅성 C57BL/6J mouse로 사육기간 중 온도는 22±2℃, 상대습도 55±5%, 조명시간은 12시간을 동물 사육 실험실에서 사육하였다. 1주일간 고형배합사료(SAM ＃3, ㈜ 샘타코)를 사용하여 적응시킨후 실험하였고 기간 동안 사료 및 음수는 자유로이 섭취하도록 하였다.
(2) 실험
상기의 실험 동물을 꼬리 표시법으로 10마리씩을 한 군으로 정하여, 하기와 같이 2 군으로 분류하였다.
가. 비만 유도 후,
실시예
1의 본 발명에 따른 조성물을 250mg/kg의 농도로 포함하는 시료를 투여함.
나.비만 유도 후,
비교예로서
가르시나이
캄보지아
추출물만을 250mg/kg의 농도로 포함하는 시료를 투여함.
상기에서, 45% 고지방식이를 공급하여 5주간 비만 유도하였다. 6주부터 10주까지는 비만 억제 효과를 확인하기 위해 45% 고지방식이를 공급하면 시료를 경구투여 하였다. 사료의 조성은 하기 표 1에 표시하였다.
시료 조제는 매일 경구투여 직전에 체중을 측정하여 체중 당 시료투여농도를 산출하여 시료를 D.D.W에 용해시켜 1일 1회 200ul씩 5주간 같은 시간에 경구 투여 하였다.
| 식이 조성 성분 | (45/Fat) |
| Casein | 245 |
| L-Cystine | 3.5 |
| Corn Starch | 85 |
| Maltodextrin | 115 |
| Sucrose | 200 |
| Lard | 195 |
| Soybean Oil | 30 |
| Cellulose | 58 |
| Mineral mix, AIN-93G-MX(94046) | 43 |
| Calcium Phosphate, dibasic | 3.4 |
| Vitamin mix, AIN-93-VX(94047) | 19 |
| Choline Bitartrate | 3 |
| Food Color | 0.1 |
(3) 시험 결과
실험동물의 체중은 1주에 한번씩 측정하여 체중의 증가를 확인하였는데, 비만이 유도되는 5주 동안에는 체중이 평균 10.5±0.1g 증가하였으나, 이후 5주 동안 실시예 1의 본 발명에 따른 조성물을 투여한 가군에서 체중 증가 1.7±0.2g 보여 고지방식이 계속하였는데 체중 증가가 아주 미비하였으며, 또한 가르시나이 캄보지아 추출물만을 투여한 나군의 경우에는 6.9±0.3g의 체중 중가를 보며 증가 속도를 감소시키는 효과가 있기는 하였으나 그 효과는 본 발명에 따른 조성물과는 많은 차이가 있었다.
<
실험예
3: 체지방 감소효과 인체 시험>
본 발명에 따른 조성물의 체지방효과를 임상시험을 통하여 확인하였다. 실험대상자는 PIBW(이상 체중 백분율) 110% 이상 또는 허리둘레가 남자는 90cm, 여자는 80cm 이상, 비만도지수(BMI)가 25 이상인 19세이상 60세 이하의 과체중 혹은 복부 비만인 성인을 대상으로 하여 공개적으로 지원자를 모집하였다.
총 지원자 45명을 각 15명씩 3 그룹으로 구분하고, 한 그룹(Group A)에는 실시예 1에서의 본 발명에 따른 조성물을 1일 1회 1000mg 섭취하도록 하고, 다른 한 그룹(Group B)에는 가르시아 캄보지아 추출물만으로 이루어진 조성물을 1일 1회 1000mg 섭취하도록 하였으며, 마지막 한 그룹(Group C)는 조성물을 제공하지 않으며, 3 그룹 모두 식사는 동일하게 제공하였으며 식사 외에는 어떠한 것도 섭취하지 않도록 제한 하였다.
본 발명의 조성물 복용 전후 신체 지수의 변화를 측정하여 비교한 결과는 하기 표 3과 같다.
| PIBW(%) | BMI(kg/m2) | 체지방율(%) | 허리둘레(cm) | ||
| Group A |
0주 | 133.5±3.1 | 28.1±0.2 | 39.2±1.2 | 90.5±1.2 |
| 1주 | 127.2±3.1 | 26.9±0.2 | 37.1±1.2 | 88.2±1.2 | |
| 4주 | 119.4±3.1 | 25.3±0.2 | 34.9±1.2 | 85.4±1.2 | |
| 6주 | 111.7±3.1 | 23.6±0.2 | 30.5±1.2 | 83.5±1.2 | |
| Group B |
0주 | 134.5±3.1 | 28.1±0.2 | 39.4±1.2 | 90.4±1.2 |
| 1주 | 133.1±3.1 | 27.9±0.2 | 38.9±1.2 | 89.9±1.2 | |
| 4주 | 129.4±3.1 | 27.5±0.2 | 37.8±1.2 | 88.1±1.2 | |
| 6주 | 125.2±3.1 | 26.4±0.2 | 36.4±1.2 | 86.4±1.2 | |
| Group v |
0주 | 133.4±3.1 | 28.7±0.2 | 39.5±1.2 | 90.2±1.2 |
| 1주 | 133.5±3.1 | 28.4±0.2 | 39.2±1.2 | 90.2±1.2 | |
| 4주 | 132.5±3.1 | 28.3±0.2 | 39.3±1.2 | 90.1±1.2 | |
| 6주 | 134.5±3.1 | 28.5±0.2 | 39.4±1.2 | 90.1±1.2 | |
상기 표 3에서 보듯이, 그룹 A에서는 체중백분율(PIBW), BMI, 체지방율, 허리둘레 등 모든 신체지수가 1주 후부터 감소하였으며, 6주 후에는 체지방 및 허리둘레, 엉덩이둘레가 현저하게 감소하였고 통계적인 유의성(p<0.05)을 나타내었으며, 그룹 B에서는 6주 후에 체중백분율(PIBW), BMI, 체지방율, 허리둘레 등 모든 신체지수가 감소하여 본 발명에 따른 조성물보다는 그 효과가 미비하였으며, 반면 대조군의 경우에는 거의 변화가 없었다.
<
실험예
4:
수소수
음료 체지방 감소효과 인체 시험>
실험예 3과 동일한 조건을 하였으며, 다만 본 발명에 따른 실시예 1의 조성물을 섭취할 때 수소수 100㎖에 녹여 섭취하도록 한 것에 차이가 있으며, 복용 전후 신체 지수의 변화를 측정하여 비교한 결과는 하기 표 4과 같다.
| PIBW(%) | BMI(kg/m2) | 체지방율(%) | 허리둘레(cm) | ||
| 수소수 추가 |
0주 | 133.5±3.1 | 28.1±0.2 | 39.2±1.2 | 90.5±1.2 |
| 1주 | 125.1±3.1 | 25.2±0.2 | 35.5±1.2 | 84.2±1.2 | |
| 4주 | 114.4±3.1 | 22.8±0.2 | 30.2±1.2 | 83.5±1.2 | |
| 6주 | 108.7±3.1 | 22.2±0.2 | 28.1±1.2 | 80.2±1.2 | |
상기 표 4에서 보듯이, 표 3의 그룹 A의 체중백분율(PIBW), BMI, 체지방율, 허리둘레 등 모든 신체지수의 감소 보다도 수소수와 함께 복용하는 경우 더욱 현저하게 신체지수가 감소가 일어나는 것을 확인할 수 있었습니다.
<
실험예
5:
땅콩새싹
추출물의 관능 평가>
땅콩새싹 추출물을 열수 추출한 후 농축한 농축액을 정제수과 수소수에 1.0%(w/w) 희석함으로써 음료를 제조한 후 관능평가를 실시하였다. 관능평가 시 고소한맛, 비린맛, 비린내, 텁텁함, 기호도 등 5항목을 9점 척도(0~9점)로 평가하여 검증하였다. 평가 결과, 표 5에서 나타냈다.
수소수는 솔고바이오메디칼 디스펜서 수소샘 수소수제조기 [SHD-100]을 이용하여 제조한 것을 사용하였다.
| 고소한맛 | 비린맛 | 비린내 | 텁텁함 | 기호도 | |
| 정제수 | 1.90±1.83 | 7.94 ±1.03 | 7.04 ±2.09 | 4.41±2.95 | 2.29 ±2.27 |
| 수소수 | 3.66±1.55 | 3.84 ±1.79 | 2.97 ±1.73 | 3.52 ±2.21 | 4.64 ±1.33 |
상기 표 5에서 보는 바와 같이 고소한 맛과 기호도는 증가하고, 비린맛, 비린내, 텁텁함은 감소하여 제품 품질 증진에 건조공정이 효과적임을 알 수 있었다. 특히 비린맛과 비린내에 대한 개선 정도가 매우 크다는 점을 확인할 수 있었다.
<
실험예
5: 참죽나물 추출물 체지방 감소효과 인체 시험>
실험예 3과 동일한 조건을 하였으며, 다만 본 발명에 따른 실시예 1의 조성물의 전제 중량 대비 참죽나무 추출물 15중량부를 더 포함시킨 조성물을 이용하였다는 것에 차이가 있으며, 복용 전후 신체 지수의 변화를 측정하여 비교한 결과는 하기 표 6과 같다.
| PIBW(%) | BMI(kg/m2) | 체지방율(%) | 허리둘레(cm) | ||
| 수소수 추가 |
0주 | 133.4±3.1 | 28.2±0.2 | 39.3±1.2 | 90.4±1.2 |
| 1주 | 125.2±3.1 | 25.3±0.2 | 35.4±1.2 | 84.2±1.2 | |
| 4주 | 114.3±3.1 | 22.8±0.2 | 30.1±1.2 | 83.3±1.2 | |
| 6주 | 108.3±3.1 | 22.3±0.2 | 28.1±1.2 | 80.1±1.2 | |
상기 표 6에서 보듯이, 표 3의 그룹 A의 체중백분율(PIBW), BMI, 체지방율, 허리둘레 등 모든 신체지수의 감소 보다도 참죽나물 추출물과 함께 복용하는 경우 더욱 현저하게 신체지수가 감소가 일어나는 것을 확인할 수 있었습니다.
Claims (6)
- 가르시니아 캄보지아 추출물 10 내지 70중량%
땅콩새싹 추출물 10 내지 70중량%
이눌린 10 내지 70중량%
팔라티노스 10 내지 70중량%
포함하는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 조성물.
- 제 1항에 따른 조성물 10 내지 70중량%와 잔부 중량%의 수소수를 포함하는 것으로 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 음료.
- 제 4항에 있어서,
상기 이눌린은 치커리로부터 추출 제조되는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 음료.
- 제 4항 또는 제 5항에 있어서,
상기 제 1항에 따른 조성물 전체 중량 대비 참죽나물 추출물을 10 내지 30중량부 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항비만 및 체지방 감소용 음료.
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| KR1020170025604A KR20180098883A (ko) | 2017-02-27 | 2017-02-27 | 땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만 및 체지방 감소 효과가 우수한 조성물 |
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|---|---|---|---|---|
| KR20210066370A (ko) | 2019-11-28 | 2021-06-07 | (주)바이오레스베 | 항비만 유용성분 증대를 위한 새싹땅콩의 배양방법 |
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-
2017
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| KR20220052815A (ko) | 2020-10-08 | 2022-04-28 | 재단법인춘천바이오산업진흥원 | 가래나무 추출물을 포함하는 비만 예방, 치료 및 개선용 조성물 |
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