KR20180082088A - 잣잎오일 추출물을 포함하는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 잣잎오일 추출물을 포함하는 화장료 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품, 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 잣잎오일 추출물은 멜라닌 합성을 억제하는 효과가 우수하므로 피부 색소 침착 질환의 예방, 개선 또는 치료에 우수한 효과가 있다.

Description

잣잎오일 추출물을 포함하는 조성물{A composition comprising the extract of essential oil of Pinus koraiensis}
본 발명은 잣잎오일(essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 화장료 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품, 약학적 조성물에 관한 것이다.
환경공해의 심화와 함께 자외선과 같은 유해환경으로부터의 피부 보호 및 피부 미용에 대한 관심이 높아지고 있고 내츄럴 화장으로 보다 맑고 깨끗한 피부를 추구함에 따라 피부 미백효과를 얻을 수 있는 방법에 대한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 사람의 피부 색깔은 일반적으로 멜라닌의 함량에 의해 결정되는데, 멜라닌은 피부, 머리카락, 눈동자 등 생물체에 널리 분포되어 있는 색소 성분으로 인체 표피층의 멜라닌 세포 (melanocyte) 내의 멜라노좀(melanosome)에서 합성되며 티로시나아제(tyrosinase) 효소에 의해 티로신(tyrosine)을 출발 물질로 하여 DOPA(3,4-dihydroxy-phenylalanine) 또는 도파퀴논(DOPAquinone)으로 변환되는 산화 및 중합 반응으로 생합성 된다.
생합성된 멜라닌은 자외선과 같은 피부자극에 대하여 저항력을 높여주지만, 과도한 멜라닌의 합성은 기미, 주근깨, 검버섯과 같은 색소 침착을 일으키므로 티로시나아제 활성 측정은 피부 미백효과를 나타내는 하나의 중요한 지표로 받아들여지고 있다. 상기 멜라닌은 햇빛의 UV(자외선)에 의한 손상으로부터 세포들을 보호하는 역할을 하고 있는, 표피에서 생성되는 색소로, 주로 멜라노사이트(melanocyte)에서 생성된다. 이렇게 생성된 멜라닌은 멜라노사이트의 수지상 돌기를 통하여 케라티노사이트로 옮겨지고 여기에서 약 28일간의 각화 과정을 거치면서 피부 표면으로 나와 각질과 함께 소실된다.
이러한 멜라닌은 체내에서 적정 수준으로 생성되어야 하는데, 예를 들어 자외선 등 각종 환경요인 등에 의해 피부의 기저층에 존재하는 멜라닌이 과다 생성되면 피부 색소침착이 증가되어 기미(melasma), 주근깨(freckle), 검버섯(seborrheic keratosis) 등을 일으키는 부작용이 발생하여 미용적인 측면에서 문제가 될 뿐만 아니라 심할 경우 피부암을 유발하기도 하는 등의 부작용을 일으킨다.
따라서 멜라닌 생성을 억제하고자 많은 연구가 이루어지고 있으며, 가장 많이 연구되는 방법은 티로시나제 효소를 억제하는 방법으로, 미백 물질로 알려진 코지산(Kojic acid), 하이드로퀴논(Hydroquinone), 알부틴(Arbutin), 비타민C(L-Ascorbic acid) 및 이들의 유도체 등이 일반적으로 사용된다.
그러나 상기 미백 물질들은 화장품 제형상 안정성이 낮아 분해에 의한 착색 및 이취 발생 등의 부작용, 생체 레벨에서의 효능 및 효과의 불분명성, 자극성과 같은 안전성의 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있다.
따라서 피부 미백 효율을 높이면서 동시에 안정성이 우수한 물질의 개발이 요구되고 있는 실정이다.
한편 잣나무는 홍송(紅松)이라고도 하며 서식지는 한국을 포함하여 일본, 중국 북동부, 우수리에 분포한다. 해발고도 1,000m 이상에서 자라며 높이 20~30m, 지름 1m에 달하는 커다란 나무이다. 나무껍질은 흑갈색이고 얇은 조각이 떨어지며 잎은 짧은 가지 끝에 5개씩 달린다. 잎은 3개의 능선이 있고 양면 흰 기공조선(氣孔條線:잎이 숨쉬는 부분으로 보통 잎 뒤에 흰 선으로 나타남)이 5∼6줄씩 있으며 가장자리에 잔 톱니가 있다. 꽃은 5월에 피고 수꽃이삭은 새가지 밑에 달리며 암꽃이삭은 새가지 끝에 달리고 단성화이다. 열매는 구과(毬果)로 긴 달걀 모양이며 길이 12∼15cm, 지름 6∼8cm이고 실편 끝이 길게 자라서 뒤로 젖혀진다. 종자는 날개가 없고 다음해 10월에 익으며 길이 12∼18mm, 지름 12mm로서 식용 또는 약용으로 한다. 그러나 그 외형이 비슷한 소나무와 비슷하여 많은 이들이 그 잎의 외형으로는 구분하지 못하지만 솔잎은 가지 끝에 잎이 3개가 하나로 달려 있지만 잣잎은 가지 끝에 잎이 5개로 자세히 살펴보면 그 외형이 다름을 알 수 있다.
본 발명자들은 피부 미백효과가 우수한 물질을 찾고자 예의 노력한 결과, 잣잎오일 추출물이 기존의 미백제로 알려진 물질들보다 더 우수한 티로시나아제 활성 저해 효과 및 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 잣잎 오일 추출물의 신규용도에 대해 기술하고자 한다.
본 발명에 따르면 피부 미백용 또는 색소침착 개선용 화장료 조성물 또는 식품 조성물을 개발할 수 있으며, 피부 미백을 개선하거나 색소침착을 예방 또는 개선하는 방법을 제공한다.
따라서 본 발명의 목적은 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 목적은 잣잎 오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 식품 조성물을 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 목적은 상기 식품 조성물을 포함하는 피부 미백용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
또한 본 발명은 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 색소침착저해 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 피부 미백용 또는 피부 색소침착억제용 조성물일 수 있다.
상기 미백이란 멜라닌 등의 색소 과다로 인하여 명도가 감소된 피부의 명도를 증가시키거나 또는 피부의 명도를 일정 수준으로 유지하는 방법, 상기 방법으로 형성된 명도가 증가된 피부 등을 포괄하여 의미할 수 있다.
상기 잣잎 오일 추출물은 티로시나아제를 억제하는 활성이 뛰어나며, 멜라닌 합성을 효과적으로 억제할 수 있고, 일반적인 추출방법에 따른 잣잎 추출물과 대비하여서 보다 현저한 효과를 나타낸다.
상기 잣잎 오일 추출물은 하기의 단계를 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 잣잎 오일 성분을 추출하는 방법이라면 어떠한 방법이라도 본 발명의 범주에 포함될 수 있다. 상기 잣잎 오일 추출물은 물 또는 탄소수 1 내지 4의 알코올에서 선택된 용매로 추출된 것이 이용되어 오일 성분이 분리될 수 있다.
바람직하게, 수증기 증류 추출방법에 의해 잣나무 오일이 추출될 수 있다.
보다 구체적으로, (a) 잣나무를 증류 탱크에 넣고 80 내지 150℃에서 물 하에 증류시키는 단계;
(b) 상기 (a)의 증류시키는 단계에 의해 생성된 증류 생성물을 냉각기에 통과 시켜 응축물을 분리하는 단계; 및
(c) 상기 (b)의 응축물로부터 오일 성분을 분리하는 단계를 포함하여 잣나무 오일이 추출될 수 있다.
상기 (a) 단계의 증류는 바람직하게 정제수 존재 하에 80 ℃ 내지 150 ℃, 바람직하게는 90℃에서, 약1 시간 내지 수일, 바람직하게는 3 내지 4 시간 동안 단회 또는 복수회로 증류시킬 수 있다. 잣잎과 정제수의 비율은 1:1 내지 1:10 이며, 바람직하게는 1:1 내지 1:3, 더욱 바람직하게는 1:2 일 수 있다.
상기 (b) 단계의 응축물의 분리는 추가로 농축 및 여과 단계를 더 포함할 수도 있다.
상기 (c) 단계의 오일 성분의 분리는 물과 오일 상의 성분을 분리할 수 있는 방법이라면 어떠한 방법이라도 사용될 수 있으며, 바람직하게, 냉장 상태에서 일정기간 반응하면 물과 기름층이 분리되고 기름층을 잘 걷어 내서 여과하여 분리한다.
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 팩, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 잣잎오일 추출물을 사용하여 통상의 화장료 제조방법에 따라, 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 화장료 조성물 분야에서 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 특히 화장수, 로션, 크림, 에센스 형태로 제조되는 것이 바람직하다.
본 발명의 화장료 조성물에서 잣잎오일 추출물은 화장료 조성물의 총 액상 중량에 대하여 0.1중량%~10중량%의 양으로 화장료에 첨가될 수 있고, 또한 화장료 조성물의 총 건조중량에 대하여 0.1중량%~10중량%의 양으로 화장료에 첨가될 수 있다.
또한 본 발명은 잣잎 오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
상기 잣잎오일 추출물은 피부에 침착된 멜라닌 색소의 색을 엷게 하는데 도움을 주는 기능을 가질 수 있으며, 피부에 멜라닌 색소가 과다 침착하는 것을 방지하여 피부 색소 침착 질환의 발생을 억제함으로써 피부의 미백에 도움을 주는 기능을 가질 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
상기 식품 조성물에는 잣잎오일 추출물 이외에도 미백 또는 피부 색소침착에 방해가 되지 않는 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로써 함유할 수 있다.
본 발명에서 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스오, 수크로오스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
또 다른 양태로서 본 발명은 상기 식품 조성물을 포함하는 피부 미백용 건강기능식품 또는 피부 색소침착억제 식품을 제공한다.
본 발명에서 용어 "건강기능 식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조 시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 잣잎오일 추출물은 원료 조성물 중 1 ~ 10 중량%, 바람직하게는 5 ~ 10 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, "식품첨가물"로서의 적합여부는 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전청에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 "식품첨가물공전"에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀롤로오스, 고랭색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합 제제류들을 들 수 있다.
본 발명의 건강기능식품을 제조하는 과정에서 음료를 포함한 식품에 첨가되는 본 발명의 잣잎오일 추출물은 필요에 따라 그 함량을 적절히 가감할 수 있으며, 바람직하게는 전체 식품 100 중량%에 대하여 1 내지 15 중량% 포함되도록 첨가하는 것이 바람직하다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한 본 발명은 잣잎오일 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 잣잎오일 추출물은 색소가 과다 침착된 피부에 적용되었을 때, 피부에서 멜라닌 세포가 억제되는 것을 효과적으로 억제, 예방할 수 있으며, 보다 구체적으로 멜라닌 합성 억제 및 피부 색소침착억제 효과를 통해 피부에 침착된 멜라닌을 제거하여 색소 침착과 관련된 질환, 병변을 효과적으로 제거할 수 있다.
상기 색소 침착 질환은, 피부에 비정상적으로 생성된 멜라닌에 의해 유발될 수 있는 모든 질환, 병변을 제한없이 포함할 수 있으나, 바람직하게는 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른 흑피증(cyanic melasma), 약물 사용 후의 과다색소침착, 임신성 갈색반(gravidic chloasma), 또는 찰상 및 화상을 비롯한 상처, 및 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 질환일 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 첨가하여 제제화할 수 있으며, 제제화에 관한 내용은 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA의 문헌을 참조할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 의약 발명 부분에 속하는 통상의 기술자에게 의약 조성물 제조시 통상적으로 사용되는 것을 의미한다. 예를 들어, 락토오즈, 덱스트로오즈, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오즈, 메틸 셀룰로오즈, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등이 있다. 또한, 약학적으로 허용되는 담체는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 포함한다.
예를 들어, 국소투여에 적합한 약학적 담체 및/또는 부형제는 본 발명에 따르면 피부 투여용 약학제제(예를 들어 피부질환 치료제)와 관련하여 해당 기술 분야의 당업자에 공지된 통상적인 담체 및/또는 부형제인 것이 바람직하다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘, 스티레이드, 탈크 같은 윤활제도 사용될 수 있다.
경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다.
피부 투여를 위해 언급할 수 있는 예로는 더스팅 파우더, 에멀젼, 현탁액, 오일, 스프레이, 연고, 그리지 연고, 크림 페이스트, 겔, 폼, 또는 용액을 생성시키는데 적합하고, 경피 약물 전달체(TTS: Transdermal therapeuticsystem)에 적합한 담체 및/또는 부형제가 있다. 본 발명의 국소용 약학제제는 반고체상 제형일 수 있으며 특히 연고(용액 연고, 현탁액 연고), 크림, 겔 또는 페이스트가 있다. 유상에 주로 사용되는 것은 지방 알콜, 예를 들면 라우릴 알코올, 세틸 알코올, 스테아릴 알코올, 지방산, 예를 들면 팔미트산 또는 스테아르산, 액상 또는 고체상 파라핀 또는 오조케라이트, 액상 내지 고체상 왁스, 예를 들면 이소프로필 미리스테이트, 천연 지방 또는 일부 합성 지방, 예를 들면 코코넛 지방산 트리글리세라이드, 경화유, 예를 들면 수소화된 피넛 또는 캐스터 오일, 또는 글리세롤의 지방산 부분 에스테르, 예를 들면 글리세롤 모노스테아레이트 또는 글리세롤 디스테아레이트가 있다. 적합한 유화제로는 계면활성제, 예를 들어 비이온성 계면활성제, 예를 들면 폴리알코올 또는 이것의 산화에틸렌 부가물의 지방산 에스테르, 예컨대 폴리글리세롤 지방산 에스테르 또는 폴리옥시 에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르, 소르비탄 지방산 에스테르, 예컨대 소르비탄 올레에이트 및/또는 소르비탄 이소스테아레이트 등, 이소스테아레이트, 스테롤, 또는 폴리옥시에틸렌 지방 알콜 에테르 또는 지방산 에스테르, 예를 들어 음이온성 계면활성제, 예를 들면 지방 알코올 설포네이트의 알칼리 금속염, 예컨대 나트륨라우릴 설페이트, 나트륨 세틸 설페이트 또는 나트륨 스테아릴 설페이트가 있으며 이들은 상기 지방 알코올, 예를 들면 세틸 알코올 또는 스테아릴 알코올의 존재 하에서 일반적으로 사용된다. 이 중에서도 특히 크림 건조를 방지하는 제제, 예를 들면 폴리알코올, 예컨대 글리세롤, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 및/또는 폴리에틸렌 글리콜을 수상에 첨가하거나 또는 보존제, 향료 등을 수상에 첨가하는 것이 가능하다.
본 발명의 약학제제는 무수상태의 연고일 수 있고, 국소용도에 적합하고 체온상태에서 액체인 파라핀, 특히 저점도 파라핀을 함유하거나, 또는 상기 천연지방 또는 부분합성 지방, 예를 들면, 코코넛 지방산 트리글리세라이드, 경화유, 예를 들면 수소화된 피넛 도는 캐스터 오일, 글리세롤의 지방산 부분 에스테르, 예를 들면 글리세롤 모노스테아레이트 및 디스테아레이트, 실리콘, 예를 들면 폴리메틸실록산, 예컨대 헥사메틸디실록산 도는 옥타메틸트리실록산을 함유할 수 있으며, 예를 들어 수성크림과 관련되어 있고 수분 흡수 용량을 증가시키는 지방 알코올, 그리고 스테롤, 울 왁스, 다른 유화제 및/또는 기타 첨가제를 함유할 수 있다.
그러나 상기 열거된 약제학적으로 허용되는 담체 등으로 본 발명이 한정되는 것은 아니며, 이들은 단지 예시에 불과하다.
상기 약학적 조성물에 함유되는 잣잎오일 추출물의 적용량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 경우에 따라 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들면, 상기 잣잎오일 추출물은 1일 0.0001 내지 1000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.1 내지 1000 mg/kg의 용량으로 투여될 수 있으며, 상기 적용은 하루에 한번 또는 수회 나누어 적용할 수도 있다. 또한, 상기 약학적 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 잣잎오일 추출물을 0.0001 내지 50 중량%로 포함할 수 있다. 상기 약학적 조성물은 사람등의 포유동물에 다양한 경로로, 예를 들면, 경피, 경구, 정맥, 근육, 또는 피하 주사에 의해 적용될 수 있다.
또한 본 발명의 약학적 조성물은 잣잎오일 추출물 외에 피부 색소 침착의 개선, 완화, 치료 또는 예방을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
또한 본 발명의 약학적 조성물은 피부 색소 침착의 개선, 완화, 치료 또는 예방을 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물은 멜라닌 합성을 억제하여 피부 미백 및 색소침착 질환의 예방 또는 치료에 우수한 효과가 있다.
도 1은 alpha-MSH로 유도한 B16F10 Melanoma 세포에서 잣잎 오일 추출물 또는 솔잎 오일 추출물을 처리에 따른 멜라닌 감소 효과를 확인한 결과를 나타낸다.
도 2는 alpha-MSH로 유도한 B16F10 Melanoma 세포에 잣잎 오일 추출물, 솔잎 오일 추출물 또는 Arbutin을 처리한 후 세포 내 멜라닌 색소의 함량을 측정한 결과를 나타낸다.
도 3은 alpha-MSH로 유도한 B16F10 Melanoma 세포에 잣잎 오일 추출물, 솔잎 오일 추출물 또는 Arbutin을 처리한 후 세포 외 멜라닌 색소의 함량을 측정한 결과를 나타낸다.
도 4는 alpha-MSH로 유도한 B16F10 Melanoma 세포에 잣잎 추출물, 솔잎 오일 추출물 또는 Arbutin을 처리한 후 멜라닌 색소 침착과 관련된 단백질 발현 억제를 웨스턴 블랏을 통해 확인한 결과를 나타낸다.
도 5는 임상적용 시험으로 지원자 4명에서 팔 부위(오른쪽 바깥부위 부분으로, 멜라닌 색소가 쉽게 침착되는 부위) 및 무작위 부위를 선정하여 Cetaphil(보습로션) 또는Cetaphil®에 잣잎 오일 추출물 (조성물 총 중량에 대하여 5%의 함량)을 섞어서 만든 제형을 바르기 전과 바른 후(8일째) 피부를 확인한 결과를 나타낸다.
도 6은 alpha-MSH로 유도된 B16F10 Melanoma 세포에서 잣잎 오일 추출물 처리에 의한 멜라닌 색소의 함량 감소를 측정한 결과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기의 실시예 는 본 발명을 예시하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 실시예 및 제제예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 잣잎 오일 추출물의 제조
신선한 잣나무잎(경기 가평군, 강원 홍천군)을 수집하고 병들거나 벌레먹은 것, 마른 것을 선별해서 제거하고, 선별한 잣잎을 세척탱크에 넣고 흐르는 물로 3번 세척하였다. 세척한 잣나무잎을 3일간 음건(陰乾)하고, 이를 절삭기를 이용하여 10 mm가량으로 일정하게 절단하였다. 절단된 잣나무을 증류탱크로 옮겼다. 증류탱크에 잣나무 잎과 정제수의 비율을 1:2정도로 하여 넣은 후 증류탱크의 잣나무잎의 추출온도를 90℃을 유지시켜 3~4시간 증류시켰다. 이때 냉각기 내부에 공급되는 냉각수의 온도는 18℃정도로 유지하며, 냉각기를 통과한 응축물을 응축물분리기에 수집하였다. 수집된 응축물은 기름과 물이 혼재되어 있기 때문에 감압농축기를 이용한 추가의 농축과정으로 수분을 증발 시켜 오일 성분만 남게 여과과정을 거처 순도 높은 추출물을 얻었다. 얻어진 추출물은 맑은 무색투명한 기름으로 잣나무향을 나타내었다. 상기추출물의 과정으로 얻어진 최종추출물을 냉암소에서 최종화학성분의 밸런스와 풍미와 향을 위해 10일 정도 숙성 시켰다.
< 실시예 2> 멜라닌 양 측정을 통한 피부 색소침착억제 효과 확인
잣잎오일 추출물의 피부 색소침착억제 효과를 확인하기 위해, 6well plate에 7X104개의 melanoma세포 B16F10(ATCC, USA)을 분주하고 24시간 경과 후 alpha-MSH (200 nM)와 100 ug/ml농도의 잣잎오일 추출물(EOPK)과 솔잎오일 추출물(EOSK) 각각을 96시간 처리한 후에 세포와 세포부유물 층을 수거하여 standard melanin 시료를 이용한 정량법을 통해 melanin양을 측정하였다.
그 결과를 도 1 내지 3에 나타내었다.
도 1은 멜라닌 생성을 더욱 촉진시키는 alpha-MSH의 존재에서 잣잎 오일 추출물과 솔잎 오일 추출물을 각각 처리 시 Melanin이 분비되는 세포배양액과 세포내(세포 pellet)에서 전체 멜라닌의 함량을 나타낸다.
도 1에서 확인되는 바와 같이, alpha-MSH로 인해 증가된 멜라닌의 양이 잣잎 오일 추출물의 처리로 인하여 크게 감소함이 확인되었으나, 대조군으로 이용된 솔잎오일 추출물의 경우 충분한 효과를 나타내지 못하였다.
도 2는 세포 내 멜라닌 함량 변화를 보여주는 결과이다.
도 2에서 확인되는 바와 같이, 잣잎 오일 추출물 처리에 따라 세포 내 멜라닌 수준이 크게 감소됨이 확인되었으며, 이는 알부틴 또는 솔잎 오일 추출물과 대비하여도 현저한 것임이 확인되었다.
도 3은 세포 밖(외로 분비되는) 멜라닌 함량 변화를 보여주는 결과이다.
도 3에서 확인되는 바와 같이, 잣잎 오일 추출물 처리에 따라 세포 밖 멜라닌 수준이 크게 감소됨이 확인되었으며, 이는 알부틴 또는 솔잎 오일 추출물과 대비하여도 현저한 것임이 확인되었다.
위 결과들로부터 잣잎 오일 추출물이 피부 색소침착억제에 효과적이며, 멜라닌 생성 억제 효과에 의해 예방, 치료 또는 개선 효과를 나타내어 피부 색소침착 등에 효과적임을 확인하였다.
< 실시예 3> 멜라닌 생성 관련 단백질 발현 억제 확인
멜라닌 생성과 관련이 높은 TRP-1과 2 및 MITF 억제 효과를 확인하기 위해, 웨스턴블럿법을 이용하여 하기 방법으로 실험을 수행하였다.
구체적으로 6well plate에 7X104 개의 melanoma세포 B16F10(ATCC, USA)을 분주하고 24시간 경과 후 alpha-MSH (200 nM)와 100 ug/ml농도의 잣잎 오일 추출물(EOPK), 솔잎 오일 추출물(EOSK) 각각을 96시간 처리한 후에 세포를 수거하여 단백질을 분리하는 용액인 RIPA 수용액(50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 300 mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 0.1% SDS, 5 mM EDTA, protease inhibitor cocktail)을 넣고 얼음에 30분간 방치한 후 원심분리기로 14000g의 속도로 30분간 처리하여 단백질을 분리 한 후 그 단백질을 Bradford 방법으로 단백질 정량을 실시하였다.
단백질 정량은 단백질 정량 키트 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)를 이용하였으며, 방법은 키트에서 제공하는 실험 사용설명서에 따라 시행 하였다. 정량한 단백질의 20 ug 농도를 SDS-PAGE gel에 처리하여 전기영동을 실시한 후 gel에 펼쳐진 단백질을 PVDF membranes (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)으로 단백질을 옮겨 놓았다. 그 후 5% 무지방분유에 1시간동안 담궈 두어 membrane 표면에 비특이적 단백질들을 제거시키고 1차 항체 TRP-1과 TRP-2 (Santacruz), MITF (Santacruz), beta-actin(Sigma Aldrich)를 각각 1:1000, 1:2000으로 희석하여 4℃ 하루 동안 처리해 두었다. 그 후 2차 항체 (HRPconjugated secondary antibody- AbD Serotec) 1시간동안 상온에서 처리하여 ECL system kit를 이용하여 kit가 제공하는 사용설명서대로 이행하여 TRP-1과 TRP-2 그리고 MITF의 단백질 발현을 확인하였다.
그 결과를 도 4에 나타내었다. 도 4에서 확인되는 바와 같이, 잣잎오일 추출물 처리군의 경우 TRP-1, TRP-2 와 MITF 발현량이 크게 감소함을 알 수 있었다. 특히 시험대조군으로 이용된 고농도 알부틴보다 현저한 감소 효과가 있었으며, 솔잎 오일 추출물과 대비하여도 현저한 감소 효과가 확인되었다.
< 실시예 4> 임상시험을 통한 피부에서의 멜라닌 색소침착 억제효과 확인
임상적용 시험으로 지원자 4명에서 팔 부위(오른쪽 바깥부위 부분으로 멜라닌 색소가 쉽게 침착되는 부위)와 무작위 부위의 두 부위를 선정하여 Cetaphil®(보습로션) 또는 Cetaphil®에 잣잎 오일 추출물 (조성물 전체에 대하여 5% 함량)을 섞어서 만든 제형의 150mg 정도(여성의 검지 손가락 손톱크기 정도의 양)로 손으로 문질러 흡수시키며 8일간 하루 1회 씩 발라서 미백 효과의 유무를 확인하였다.
그 결과를 도 5에 나타내었다. 도 5에서 확인되는 바와 같이, 임상지원자 4명 모두에서 Cetaphil®만 바른 피부는 바르기 전과 8일 동안 바른 후의 멜라닌 색소침착의 변화가 거의 없거나 증가한 것이 확인되었으나, 잣잎 오일 추출물이 포함하는 제형을 바른 시험자들 모두에서 바르기 전과 대비하여 8일 후 멜라닌 색소의 침착이 현저하게 감소됨이 확인되었다.
< 실시예 5> 잣잎 오일 추출물의 멜라닌 억제 활성 확인
잣잎 오일 추출물에 의한 현저한 효과를 확인하기 위하여, 실시예 2와 동일한 방법으로 멜라닌 억제 활성을 확인하였으며, 대조군으로 잣잎 에탄올 추출물(Epk) 100μg/ml, 잣잎 에탄올 추출물에서 분리되는 지표물질로 알려진, 램버티안산 (LA) 100μM 또는 flavnoid hispidulin(His) 50 μM 을 처리하고 이의 멜라닌 색소 함량 변화를 확인하였다.
그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에서 확인되는 바와 같이, 잣잎 오일 추출물 처리에 의해서만 멜라닌 함량이 크게 감소되는 것이 확인되었으며 일반적인 추출방법 중 하나에 의하여 추출된 잣잎 에탄올 추출물, 이의 지표 물질들은 멜라닌 색소의 감소에 어떠한 영향도 미치지 못함이 확인되었다.
상기 결과로부터 본 발명에 따른 잣잎 오일 추출물만이 피부 미백 및 색소 침착 개선에 현저한 효과가 있음이 확인되었다.
제제예 1. 의약품의 제조
1.1 산제의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
유당 100mg
탈 10mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1.2 정제의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
옥수수전분 100mg
유당 100mg
스테아린산 마그네슘 2mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1.3 캡슐제의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
옥수수전분 100mg
유당 100mg
스테아린산 마그네슘 2mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 정제를 제조한다.
1.4 주사제의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
1.5 액제의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
설탕 20g
이성화당 20g
레몬향 적량
정제수를 가하여 전체 1,00ml로 맞추었다. 통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 갈색병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 2. 건강기능식품의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조(예, 영양캔디 등)에 사용할 수 있다.
제제예 3. 건강기능성 음료의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
구연산 1000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ㎖
통상의 건강기능성 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제제예 4. 화장료의 제조
잣잎오일 추출물 100mg
글리세린 3.0 ㎎
하이드로제네이티드 레시친 1.0 ㎎
세토스테아릴알콜 2.0 ㎎
폴리소르베이트 60 1.5 ㎎
항산화제 0.3 ㎎
방부제 적량
정제수 적량

Claims (10)

  1. 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 미백용인 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 색소 침착 개선용인 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 잣잎오일 추출물은 멜라닌 생성을 억제하는 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 팩, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것인, 화장료 조성물.
  6. 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 식품 조성물.
  7. 제6항의 식품 조성물을 포함하는 피부 미백용 건강기능식품.
  8. 잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 색소 침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 색소 침착 질환은 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른 흑피증(cyanic melasma), 약물 사용 후의 과다 색소 침착, 임신성 갈색반(gravidic chloasma), 또는 찰상 및 화상을 비롯한 상처 및 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 질환인, 색소 침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. (a) 잣나무를 증류 탱크에 넣고 80 내지 150℃에서 물 또는 탄소수 1 내지 4의 알코올 용매 하에 증류시키는 단계;
    (b) 상기 (a)의 증류시키는 단계에 의해 생성된 증류 생성물을 냉각기에 통과 시켜 응축물을 분리하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)의 응축물로부터 오일 성분을 분리하는 단계를 포함하는 잣나무 오일 추출물의 제조방법에 의해 제조되는,
    잣잎오일 (essential oil of Pinus koraiensis) 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
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한국식생활문화학회지. 제11권, 제3호, 403-408쪽, 1996년 공개* *

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