KR20180081602A - 천연 추출물을 함유하는 조성물 및 피부 및 모발을 위한 그의 용도 - Google Patents

천연 추출물을 함유하는 조성물 및 피부 및 모발을 위한 그의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 추출물(들) 및 그들의 분획물(들)을 함유하는 조성물 및 피부, 모발 및 손발톱 치료를 위한 그와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 모발, 피부 및 손발톱상에 미용상 목적을 위해 사용하는 (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물, 또는 그의 조합 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 함유하는 조성물에 관한 것이다.

Description

천연 추출물을 함유하는 조성물 및 피부 및 모발을 위한 그의 용도
모발 회색화 (백모증), 또는 모간(hair shaft) 내 색소 생성 및 침착의 손실은, 노화의 명백한 징후이며, 이는 많은 문화권에서 매우 바람직하지 않다. 모발 회색화는 여러 내인성 및 외인성 요인의 상호작용으로부터 초래하는 복잡한 현상이다. 내인성 요인은 조발 백모, 유전병, 및 내인성 노화 과정을 유발하는 유전적으로 프로그램된 과정을 포함할 수 있다. 외인성 요인은 환경적인 요인 (예컨대, 바람, 열, 담배 연기, 화학물질, 자외선 조사 등), 영양적 효과, 약물 효과 및 감정적 스트레스를 포함할 수 있다. 이러한 모든 요소는 모발 색소형성의 손실에 기여하는 분자 및 세포 과정을 유도한다.
모발 회색화에 대응하기 위한 주요한 접근법은 기원전 약 1500 년경부터 고고학적으로 기록된 모발 염색 (“착색”)이며, 오늘날에도 여전히 인기가 있다. 그러나, 모발 착색은 여러 한계점을 갖는다. 모발 착색 영역의 경계선은 모발이 자라면서 눈에 보이게 되어, 원하는 것보다 덜 미적인 외모를 만들어내며, 원하지 않는 노화 과정을 드러낸다. 모발 염색은 과산화수소와 같이 모발 또는 주변 피부뿐만 아니라, 환경에도 건강하지 않거나 유해한 화학물질의 사용을 필요로 한다. 전문적인 모발 염색은 상당한 비용 및 일정 의무와 관련되며, 가정에서의 절차는 많은 시간 사용, 얼룩 및 혼란을 수반한다. 그러므로, 모발 회색화 문제를 해결하기 위해 더 나은 절차 및 방법을 갖는 것이 요구된다.
모발 회색화를 예방, 지연, 감소 또는 역전시킬 수 있는 국소 치료법을 가지는 것이 요구된다. 매일의 피부 및 모발 관리를 위한 한 번의 적당한 국소 치료법으로서의 그와 같은 치료법을 가질 것은 더욱 요구된다. 그와 같은 치료법은 자극이 적거나 없으며 부정적인 부작용이 거의 없거나 없는 모발 회색화에 대한 해결책을 제공해야 하며, 다른 원하는 두피 및 모발 건강, 안녕 및 아름다워지는 이점을 추가로 제공해야 한다. 약제의 처방을 필요로 하지 않는 국소 치료법을 갖는 것이 추가로 요구된다.
피부 노화는 피부 분자 및 구조의 기능성이 시간에 따라 감소되고 UV 노출로 추가로 손상되는, 느리고 만성적인 과정이다. 피부 노화는 얼굴의 늘어짐, 잔주름, 굵은 주름 및 검버섯의 출현에 의해 먼저 알게 되고, 둔하고 얇아지는 모발, 드문 눈썹과 속눈썹, 그리고 건조하고 부서지기 쉬운 피부와 손발톱의 출현이 뒤를 잇는다. 항-노화 시장은 주로 얼굴의 아름다움을 향상키는 것을 지향하는 구제책과 해결책을 제공한다. 노화 과정에 기여하는 분자 및 세포 과정에 영향을 미치며, 미용 효과뿐만 아니라 추가적인 기능적 이점을 제공하는 "항-노화" 제품을 갖는 것이 요구된다.
50 년대 중반의 "노화에 대한 자유 라디칼 이론"은 축적된 산화 손상과 노화의 정도를 서로 연관시킨다. 산화 스트레스 (또는 반응 산소 종 (ROS) 생성과 ROS를 해독하고 초래되는 손상을 복구하는 능력 사이의 불균형)는 나이에 따라 그리고 UV 노출에 따라 증가하는 반면, 노화 세포의 항산화 반응은 돌연변이의 축적과 함께 느려진다. ROS는 염증 과정 및 면역-억제를 유도하여, 추가로 장벽 손상에 기여하고 피부 완전성을 손상시킨다. 임상 데이터는 산화 스트레스를 감소시키는 것이 피부 건강과 안녕에 기여하며 노화 증상을 감소시킨다고 제시한다. 산화 스트레스를 감소시키는 것뿐만 아니라, 노화 세포의 내인성 항산화 반응을 향상시키는 "항-노화" 피부 관리 해결책을 갖는 것이 요구된다.
노화의 더 두드러지고 원치 않는 징후 중 하나는 피부 색소 병변이다. 자외선-노출된 피부 부위 나타나는 갈색 반점 ("검버섯")은 그와 같은 색소 문제 중 하나이다. 또한, 노화로 유도된 백색의 저-색소침착 반점(hypo-pigmented spot) (특발성 적상 저멜라닌증(Idiopathic guttate hypomelanosis), IGH)도 태양에-노출된, 노화된 피부 부위에 나타나며, 원하지 않는 "늙은" 모습을 드러낸다. 이러한 영향을 받은 부위는 멜라닌 생성을 완전히 멈추고, 그들이 색소를 완전히 잃게 하여, 보기 흉하나 양성인 병변을 초래할 수 있다. IGH 병변은 나이 든 및 노년의 사람 (나이가 40 세 이상)의 50 % 초과에서 흔히 발견되며, 약 30 %의 사람이 20 세 이전에 그들의 초기 IGH 병변을 발생시킨다.
IGH에서와 같은 피부 색소형성의 반점성 손실에 대한 치료법은 없다. 자연 피부 색깔을 보호하거나, IGH와 같은 피부의 색소-손실하는 부위에서 반점성 피부 색소 손실을 예방, 또는 지연, 또는 감소, 또는 역전시킬 수 있는 국소 치료법을 갖는 것이 요구된다. 매일의 피부 관리를 위한 한 번의 적당한 국소 치료법으로서의 그와 같은 치료법을 가질 것은 더욱 요구된다. 그와 같은 치료법은 반점성 피부 색소 손실에 대한 자극이 최소한이거나 없으며 부정적인 부작용이 거의 없거나 없는 해결책을 제공하여야 하고, 다른 원하는 피부 건강, 안녕 및 아름다워지는 이점을 추가로 제공해야 한다.
IGH는 피부 탈색 질환인 백반증(vitiligo)과 혼동해서는 안된다. 백반증은 백색의, 색소가-없는 피부의 패치가 신체의 상이한 부분에 나타나는 장애이다. 백반증 병변은 큰 패치로, 그들은 빠르게 확장하고, 그들은 태양 노출이나 노화와 관련이 없다. 백반증은 산화 스트레스뿐만 아니라 자가면역, 유전, 신경 또는 바이러스성 원인으로부터 기인할 수 있다. 어떤 경우에는 백반증이 천천히, 수년에 걸쳐 퍼지지만, 다른 경우에는 퍼짐은 매우 빠르게 발생한다. 일부 보고서는 흰색 패치의 증가를 신체적 또는 정서적 스트레스와 관련짓는다. 백반증에 대한 가장 일반적으로 처방되는 치료는 강력한 또는 초-강력한 국소 코르티코스테로이드이다. 불행히도, 약 45 %의 환자만이 이 치료의 수개월 후에 일부 피부 색깔을 되찾는다. 광선 요법은 매우 비효율적이며, PUVA 요법 또한 만족스러운 결과를 제공하지 않는다.
백반증에서 자연 피부 색깔을 보호할 수 있거나, 색소 손실을 예방, 또는 지연, 또는 감소 또는 역전시킬 수 있는 국소 치료법을 갖는 것이 요구된다. 매일의 피부 관리를 위한 한 번의 적당한 국소 치료법으로서의 그와 같은 치료법을 가질 것은 더욱 요구된다. 그와 같은 치료법은 백반증에 대한 자극이 적거나 없으며 부정적인 부작용이 거의 없거나 없는 해결책을 제공하여야 하고, 다른 원하는 피부 건강, 안녕 및 아름다워지는 이점을 추가로 제공해야 한다.
노인성 피부 (일반적으로 65 세 이상인 사람의 피부를 지칭하나, 나이는 수많은 요인에 의해 변할 수 있다)는 상당히 노화되어있고, 따라서 매우 약하다. 그것은 얇고 건조하고, 매우 가렵고, 쉽게 멍들며 상처, 찢어짐 및 감염에 취약하며, 따라서 건강과 삶의 질 모두에 영향을 미친다. 노년의 피부에서는, 노화 과정이 지속되고 확대된다. 염증 침투의 양이 증가하고, 상처 치유 및 면역 반응이 지연되고, 체온조절이 손상되며 땀과 피지 생성이 감소한다. 평생-동안의 환경적 노출의 누적 효과는 노년에서 기능성 피부 노화를 추가로 촉진시킨다. 여기에는 자외선 노출, 오염 및 연기뿐만 아니라 에어컨, 난방 및 온수 사용과 같은 요인이 포함된다. 질환, 특히 당뇨병, 면역 질환, 심장 질환, 신장 또는 간부전, 악성 종양 및 감염은 스테로이드, 항응고제, 혈액 희석제, 면역-조절제 및 암 치료제와 같은 약물의 장기간 사용과 마찬가지로 피부 노화 과정을 촉진시킨다. 느림 및 생활 방식 변화는 탈수 및 감소된 피부 영양에 추가로 기여하며, 노년 피부의 건조함과 취약성을 촉진시키고, "작은 부상"과 그 결과의 증가에 기여한다. 흥미롭게도 노화와 관련된 노년 피부 변화의 대부분은 광손상 또는 생활 방식보다는 내인성 노화에 의한 것이라고 제안되었다.
노인성 피부의 주된 니즈는 얼굴의 아름다움이 아니라, 신체 피부의 건강과 웰빙에 관련된다. 건조 및 가려움을 감소시키고, 피부 부상의 양 및 심각성을 감소시키며, 피부 벗겨짐을 감소시키고, 혈종을 감소시키며, 경미한 부상의 치유 시간을 향상시키고, 감염률을 감소시키는 것 등이 필요하다. 불행히도 이러한 노인성 피부 전용의 소비자 제품은 만약 있다고 하더라도, 거의 없다. 노인성 피부는 그자체의 생물학적 특성을 향상시키고 소양증(pruritis)이나 취약성과 같은 원하지 않는 특성을 보습만을 사용하는 것보다 우수한 방식으로 감소시키는 것으로부터 이익을 얻을 수 있다. 노인성 피부에서 피부 노화 과정을 예방, 지연, 감소 또는 역전시킬 수 있는 국소 치료법을 가지는 것이 요구된다. 매일의 관리를 위한 한 번의 적당한 국소 치료법으로서의 그와 같은 치료법을 가질 것은 더욱 요구된다. 그와 같은 치료법은 취약한 피부에 대해 자극이 적거나 없으며 부정적인 부작용이 거의 없거나 없는 노인성 피부의 필요에 대한 해결책을 제공해야 하며, 다른 원하는 건강, 안녕 및 미용상 이점을 추가로 제공해야 한다. 약제의 처방을 필요로 하지 않는 그와 같은 단일 국소 치료법을 갖는 것이 추가로 요구된다.
노년 환자는 통증을 유도하고 일상 활동에 영향을 미치며 미용적으로 우려되는 일반적인 손발톱 변화 및 영양실조를 경험한다. 나이가 들어감에 따라, 손발톱이 부서지기 쉽고 깨지는 경향이 있게 될 수 있으며, 곤봉모양으로 될 수 있으며 (매우 둥근 손발톱에서의 상당한 모양-변화), 또는 변색될 수 있다. 불행히도, 노년 손발톱 관리, 또는 손발톱의 일반적인 건강 및 웰빙 전용의 소비자 제품이 없다. 손발톱 및 그들의 주위 피부 및 큐티클의 생물학적 특성을 향상시키고, 손발톱 노화와 관련된 원하지 않는 특성을 감소시키는 제품을 갖는 것이 요구된다. 매일의 관리를 위한 한 번의 적당한 국소 치료법으로서의 그와 같은 제품을 가질 것은 더욱 요구된다. 그와 같은 치료법은 취약한 피부에 대해 자극이 적거나 없으며 부정적인 부작용이 거의 없거나 없는 노인성 피부의 필요에 대한 해결책을 제공해야 하며, 다른 원하는 건강, 안녕 및 미용상 이점을 추가로 제공해야 한다. 약제의 처방을 필요로 하지 않는 그와 같은 단일 국소 치료법을 갖는 것이 추가로 요구된다.
본 발명은 식물 추출물, 조류 추출물, 효모 추출물, 진균 추출물 또는 미생물 추출물, 또는 그와 같은 추출물의 분획물(들), 또는 그의 조합(들) (집합적으로 "천연 추출물"로 정의됨)을 포함하는 천연 추출물(들) 제품 (예컨대, 인간과 같이 그것을 필요로 하는 포유 동물)의 국소 전달을 위한 조성물을 특징으로 한다. 일 예에서, 본 발명의 천연 추출물은 (1) 활성, 비-변성된 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제를 함유하거나, 또는 (2) 카탈라아제-유사 활성 (예컨대 과산화수소 분해 또는 제거)을 갖거나, 또는 (3) 카탈라아제를 향상시키는 활성을 갖거나 (예컨대 유전자 발현, 단백질 번역 또는 과산화수소 분해 또는 제거의 증가로 이어지는 다른 활성을 향상시킴), 또는 (4) 카탈라아제를 안정화시키는 활성, 또는 하나 또는 그 이상의 그와 같은 활성의 조합 (집합적으로 "카탈라아제-관련 활성" 또는 "카탈라아제-유사 활성"으로 정의됨)을 갖는다. 또다른 실시양태에서, 본 발명의 천연 공급원 (예컨대 식물, 플랜트, 조류, 효모, 균류 또는 미생물)은 L-메티오닌으로 재배되거나, 또는 강화되거나, 또는 보충되거나, 또는 생산을 위해 조작되거나, 또는 조합될 수 있고, 또는 천연 추출물 그자체가 L-메티오닌과 조합될 수 있다.
일 실시양태에서, 본 발명은 천연 추출물 및 제약상의 또는 미용상의 담체를 기술한다. 한층 또다른 예에서, 본 발명의 조성물은 활성 카탈라아제-관련 활성을 유지시키는 것과 그와 같은 활성을 피부, 손발톱 또는 모낭 내로 전달하는 것을 가능하게 하는 전달 시스템(들), 또는 비히클(들), 또는 안정화 시스템(들)을 추가로 포함한다.
본 발명에 기술된 조성물은 피부, 모발 및 손발톱 관리를 위하여, 피부, 두피, 모발 및 손발톱에 건강 및 안녕 이점을 제공하는 데, 그리고 피부, 두피, 모발 및 손발톱에 항-노화 및 노인성 피부 이점을 제공하는 데 사용될 수 있다. 한층 또다른 특징에서, 본 발명에 기술된 조성물은 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후 및 노인성 피부의 징후의 가시성을 감소시키는데 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 포유 동물의 모발 회색화 과정을 감소시키는 방법을 특징으로 하며, 상기 방법은 본원에 기술된 조성물을 두피 또는 다른 원하는 모발이 있는 피부 부위 또는 털이 없지 않는 피부에 도포하는 단계를 포함한다. 회색 모발은 노화, 화학적 노출, 환경적 노출, 영양적 노출, 약물 노출 등과 같은 생물학적 과정으로 인해 원래의 자연적인 모발 색상에서 그 색깔이 변한 모발로 정의되며, 감소된 색깔이거나, 또는 무채색이거나, 또는 원래의 자연적인 모발 색깔보다 밝은 흰색 및 검정색의 사이의 중간이다. 인간의 털이 없지 않는 피부는 털이 있거나, 또는 모발이 자랄 수 있거나, 또는 모낭을 함유할 수 있는 모든 인간의 피부 부위로 정의된다. 털이 없지 않는 피부는 자연적으로 털이 없지 않는 모든 외부 피부를 지칭하며, 손가락의 하면부(ventral portion), 손바닥, 발바닥, 입술, 소음순, 및 귀두에서 발견되는 피부만을 제외한다. 모발 회색화를 감소시키는 것은, 모발의 자연적인 색을 보호하거나, 또는 자연적인 모발 색상의 손실 양 또는 질을 감소시키거나, 또는 모발 회색화의 과정을 느리게, 감소, 또는 역전시키거나, 또는 모발 회색화를 예방하거나, 또는 모발 회색화의 가시성을 감소시키는 것을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 본 명세서에 기재된 조성물은 또한 피부의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 피부상의 색소 손실이나 피부의 자연적인 색깔에서의 불균일한 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 감소시키거나, 또는 지연시키거나, 또는 역전시키거나, 또는 저-색소침착성 피부의 병변(색소-손실 병변, "백색 반점", IGH 및 백반증 병변을 포함하나, 이에 한정되지 않음)의 가시성을 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 그와 같은 병변은 노화로-유도된 백색, 또는 자연 피부 색깔보다 밝은, 또는 저-색소침착성 반점 (예컨대, 특발성 적상 저멜라닌증, IGH), 및 질환으로-유도된 색소 손실 (예컨대, 백반증)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명은 또한 포유동물의 색소가-없는 피부 부위의 출현을 감소시키는 방법을 기술하며, 상기 방법은 상기 조성물을 원하는 피부 부위에 도포하는 단계를 포함한다.
일 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 모발의 자연적인 색깔을 보존하거나, 또는 모낭의 자연적인 색소 생성의 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 모발 회색화의 중증도를 지연시키거나, 또는 느리게 하거나, 또는 감소시키거나, 또는 모발 회색화의 출현을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 또다른 측면에서, 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 모낭의 자연적인 색소 생성의 쇠퇴를 예방하고, 모발 회색화의 출현을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 일 측면에서 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 부분적으로 또는 완전히 모낭의 자연적인 색소 생성의 쇠퇴를 역전시키고, 모발 회색화의 출현을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 일 측면에서 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 천연 추출물을 포함하는 조성물 및 자연적인 모발 색깔을 보호하거나, 또는 모낭의 자연적인 색소 생성의 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하거나, 또는 모발 회색화의 출현을 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하기 위해 사용자에게 조성물을 모발, 두피, 또는 다른 모발이 있는 피부 부위 (털이 없지 않는 피부)에 도포하도록 지시하는 안내를 포함하는 제품을 특징으로 한다. 그와 같은 모발이 있는 피부 부위는 두피, 머리, 눈썹, 속눈썹, 수염, 콧수염, 가슴, 등, 팔, 다리 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명은 자연적인 모발 색깔을 보호하거나, 또는 모낭의 자연적인 색소 생성의 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하거나, 또는 모발 회색화의 출현을 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하기 위해 사용자에게 상기 조성물을 모발, 두피, 또는 털이 있는 피부 부위, 또는 털이 없지 않는 피부에 도포하도록 지시함으로써 천연 추출물을 함유하는 조성물을 포함하는 제품을 촉진시키는 방법을 특징으로 한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 피부의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 노화하는 피부의 자연적인 색소 생성에서의 불균일한 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 색소 손실 병변 (예컨대 IGH, “백색 반점", 또는 백반증)의 중증도 또는 가시성을 지연시키거나, 또는 느리게 하거나, 또는 감소시키는 방법에 관한 것이다. 또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 피부의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 피부 색소 손실의 진행을 느리게 하거나, 또는 반상(mottled) 색소 손실의 중증도를 지연시키거나, 또는 느리게 하거나, 또는 감소시키는 방법에 관한 것이다. 한층 또다른 측면에서, 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 피부의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 피부의 불균일한 색소 생성에서의 쇠퇴를 예방하거나, 또는 색소가-없는 피부 병변의 출현을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 한층 또다른 측면에서, 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명은 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 피부의 색소 생성에서의 불균일한 쇠퇴를 부분적으로 또는 완전히 역전시키거나, 또는 색소가-없는 피부 병변의 출현을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 한층 또다른 측면에서, 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 천연 추출물을 포함하는 조성물 및 자연적인 피부 색깔을 보호하거나, 또는 피부의 색소 생성에서의 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하거나, 또는 색소가-없는 피부 병변의 출현을 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하기 위해 사용자에게 조성물을 영향을 받은 또는 원하는 피부 부위에 도포하도록 지시하는 안내를 포함하는 제품을 특징으로 한다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명은 피부의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 피부의 색소 생성의 쇠퇴를 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하거나, 또는 색소가-없는 피부 병변의 출현을 느리게 하거나, 또는 예방하거나, 또는 역전하기 위해 사용자에게 상기 조성물을 영향을 받은 또는 원하는 피부 부위에 도포하도록 지시함으로써 천연 추출물을 함유하는 조성물을 포함하는 제품을 촉진시키는 방법을 특징으로 한다.
한층 또다른 예에서, 본 발명은 피부 건강, 안녕 및 외관을 향상시키기 위해 피부 (털이 없는 및 털이 없지 않는 부위 모두)에 안전하고 유효한 양의 천연 추출물을 함유하는 조성물을 도포함으로써 피부, 두피, 모발 및 손발톱의 건강 및 안녕을 향상시키거나, 피부, 모발 및 손발톱을 아름다워지게 하거나, 항-노화 이점을 제공하거나, 또는 노년 피부의 생물학적 특성 및 건강 및 안녕을 향상시키는 방법에 관한 것이다. 한층 또다른 측면에서, 천연 추출물은 L-메티오닌으로 보충되거나, 강화되거나, 또는 조합될 수 있다. 한층 또다른 측면에서, 본 발명 조성물의 항-노화 이점은 굵은 주름, 늘어짐, "노화 반점", 및 얼굴 피부 노화의 다른 징후 및 증상에 대한 원하는 구조적, 기능적 및 시각적 효과를 포함한다. 한층 또다른 측면에서, 본 발명의 조성물의 노인성 피부 이점은 노년 손발톱, 얼굴-, 두피- 및 신체-피부의 구조적 및 기능적 특성을 향상시키는 것, 얼굴, 두피 및 신체 피부의 건조함을 감소시키는 것, 피부 소양증을 감소시키는 것, 피부 및 손발톱 취약성을 감소시키는 것, 혈종의 양 및 중증도를 감소시키는 것, 피부 찢어짐 및 다른 피부 상처의 양 및 중증도를 감소시키는 것, 피부 감염을 감소시키는 것, 및 피부 상처의 상처 치유를 향상시키는 것이다. 신체 피부는 손발톱, 그리고 특히 팔, 손, 손가락, 다리 및 발의 피부를 포함하는 모든 인간의 피부 부위를 지칭한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 천연 추출물을 포함하는 조성물 및 피부, 두피 및 손발톱 건강 및 안녕을 향상시키거나, 피부 노화의 징후를 감소시키거나, 노인성 피부의 감소된 질 및 문제점과 싸우기 위해 사용자에게 영향을 받은 또는 원하는 피부, 두피 및 손발톱 부위에 조성물을 도포하도록 지시하는 안내를 포함하는 제품을 특징으로 한다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명은 피부, 두피 및 손발톱 건강 및 안녕을 향상시키거나, 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후를 감소시키거나, 노인성 피부의 감소된 질 및 문제점과 싸우기 위해 사용자에게 영향을 받은 또는 원하는 피부, 두피 및 손발톱 부위에 상기 조성물을 도포하도록 지시함으로써 천연 추출물을 함유하는 조성물을 포함하는 제품을 촉진시키는 방법을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 특징 및 장점은 본 발명의 상세한 설명으로부터 및 청구 범위로부터 분명해질 것이다. 당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여 본 발명을 그의 가장 넓은 범위로 활용할 수 있다고 여겨진다. 하기 특정 예는 단지 예시적이고 임의의 어떤 방법으로도 본 발명의 나머지를 제한하지 않는 것으로서 해석되어야 한다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본원에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 다른 참고 문헌은 본원에 참고로 도입된다. 달리 나타내지 않는 한, 백분율은 중량에 의한 백분율 (예컨대 % (w/v))을 지칭한다.
본 발명은 특정 천연 추출물은 과산화수소의 제거에 매우 효과적이고, 그러므로 그들이 피부 및 모발의 자연적인 색깔을 보호하거나, 또는 모발 회색화 또는 탈색되는 피부 병변의 출현을 예방하거나, 또는 느리게 하거나, 또는 감소시키거나 또는 역전시키거나, 또는 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 일반적인 징후 및 노인성 노년 피부의 구체적인 징후를 감소시키기 위해 사용될 수 있다는 인식과 관련이 있다.
아모르 세코(Amor Seco) (데스모디움 아드센덴스(Desmodium Adscendens), 데스모디움 코에룰레움(Desmodium coeruleum), 디. 카이스피토숨(D. caespitosum), 디. 글라우세스센스(D. glaucescens), 디. 헤테로필룸(D. heterophyllum), 디. 옥살리디폴리움(D. oxalidifolium), 디. 트리플로룸(D. triflorum), 헤디사룸 아드센덴스(Hedysarum adscendens), 에이치. 카이스피토숨(H. caespitosum), 마이보미아 아드센덴스(Meibomia adscendens))는 남미 원산인 아칼리포이데아에(Acalyphoideae)의 수종이다. 그것은 현지에서 타만퀘이로(tamanqueiro), 타피아(tapia) 또는 아모르 세코로 알려져 있다. 그것은 강기슭 산림에서 우선적으로 자라고, 10-20 m의 높이에 이른다. 더운 여름 달에는 더욱 눈에 띄는 잎의 전환이 있고, 가지가 어느 정도 노출되지만, 그것은 본질적으로 상록수이다. 아모르 세코 잎 분말은 아모르 세코 잎으로부터 이질적인 물질이 제거되고 밀링되고 분쇄되어 생산된다. 분말은 식품 첨가물로서 사용된다 (예컨대, http://www.nutricargo.com/herb-powders/amor-seco-powder 참고).
아모르 세코 잎 분말이 과산화수소 분해 활성을 갖는다는 것은 예기치 않게 발견되었다 (실시예 1 참고). 더욱이, 인간 케라티노사이트(keratinocyte)의 아모르 세코 잎 분말에 대한 노출은 과산화수소의 분해 또는 제거에서 케라티노사이트의 내인성 세포 활성의 향상을 초래한다 (실시예 2 참고). 또한, 아모르 세코 잎 분말은 과산화수소-유도된 산화 스트레스에 대해 강한 활성을 나타냈다 (실시예 3). 이러한 결과는 아모르 세코 잎 분말이 과산화수소 농도를 감소시키기 위해 피부, 두피, 손발톱 및 모발에 국소적으로 사용될 수 있으며, 그러므로 본 발명에서 유용하다는 것을 시사한다. 아모르 세코 잎 분말의 국소적 사용은 모발 회색화의 진행을 느리게 하고, 지연시키며 그리고 감소시킬 것이다. 유사하게, 아모르 세코 잎 분말의 국소적 사용은 탈색되는 피부 병변의 가시성을 감소시킬 것이고, 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후를 감소시키며 노년 피부 특성을 향상시킬 수 있을 것이다. 데스모디움 속으로부터의 것들뿐만 아니라, 파바세아에(Fabaceae) 과의 다른 식물도 유사한 생물학적 특성을 가지며 또한 유사한 방식으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
야콘(Yacon) (스말란투스 손치폴리우스(Smallanthus sonchifolius), 동의어: 폴림니아 에둘리스(Polymnia edulis), 피. 손치폴리아(P. sonchifolia), 페루 땅 사과(Peruvian ground apple))는 그의 파삭파삭하고, 달콤한-맛이 나는 덩이 뿌리를 위해 전통적으로 북부 및 중앙 안데스에서 콜롬비아로부터 북부 아르헨티나에 걸쳐 재배되는 다년생 식물이다. 에콰도르에서 통상적으로 “지카마(jicama)”로 불리며, 야콘은 때로는 관계가 없는 식물과 혼동된다. 야콘은 실제로 해바라기 및 예루살렘 아티초크(Jerusalem artichoke)의 가까운 친척이다.
야콘 잎 분말이 과산화수소 분해 또는 제거 활성을 가진다는 것이 예기치 않게 발견되었다 (실시예 1 참고). 더욱이, 인간 케라티노사이트의 야콘 잎 분말에 대한 노출은 과산화수소 분해 또는 제거에서 케라티노사이트의 내인성 세포 활성의 향상을 초래한다 (실시예 2 참고). 또한, 야콘 잎 분말은 과산화수소-유도된 산화 스트레스에 대한 강한 활성을 나타냈다 (실시예 3). 이러한 결과는 야콘 잎 분말이 과산화수소 농도를 감소시키고 유익한 효과를 제공하기 위해 피부, 두피, 손발톱 및 모발에 국소적으로 사용될 수 있음을 시사한다. 야콘 잎 분말의 국소적 사용은 모발 회색화의 진행을 느리게 하거나, 지연시키거나 또는 감소시킬 것이다. 유사하게, 야콘 잎 분말의 국소적 사용은 탈색되는 피부 병변의 가시성을 감소시킬 것이고, 피부, 두피, 모발, 및 손발톱 노화의 징후를 감소시키며 노년 피부 특성을 향상시킬 수 있을 것이다. 스말란투스 속으로부터의 것들뿐만 아니라, 아스테라세아에(Asteraceae) 과의 다른 식물도 유사한 생물학적 특성을 가지며 또한 유사한 방식으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
적색 미세조류인 포르피리디움(Porphyridium) (속: 포르피리디움, 피토코니스 푸르푸레아 보리 데 세인트-빈센트(Phytoconis purpurea Bory de Saint-Vincent), 1797, 포르피리디움 나겔리(Porphyridium Nageli), 비서스 푸르푸레아 라마르크(Byssus purpurea Lamarck), 올리비아 크루엔타 S.F.그레이(Olivia cruenta S.F.Gray), 올리비아 크루엔타 S.F.그레이(Olivia cruenta S.F.Gray), 포르피리디움 크루엔툼 (S.F.그레이) 나겔리(Porphyridium cruentum (S.F.Gray) Nageli), 포르피리디움 마리눔 기린(Porphyridium marinum Kylin), 사르코더마 산귀네움 에렌베르그(Sarcoderma sanguineum Ehrenberg), 포르피리디움 sp. UTEX 637(Porphyridium sp. UTEX 637) 또는 포르피리디움 sp. UTEX 637 유래 균주, 포르피리디움 크니엔툼 UTEX 161(Porphyridium cnientum UTEX 161) 또는 포르피리디움 오멘툼 UTEX 161(Porphyridium omentum UTEX 161) 유래 균주, 포르피리디움 아에루기네우른(Porphyridium aerugineurn) 또는 포르피리디움 아에른기네움(Porphyridium aerngineum) 유래 균주, 포르피리디움 소르디둠(Porphyridium sordidum) 또는 포르피리디움 소르디둠 유래 균주, 또는 포르피리디움 푸르푸레움(Porphyridium purpureum) 또는 포르피리디움 푸르푸레움 유래 균주를 포함하나, 이에 한정되지 않음)은 세포 직경이 10-20 μM인 단세포 적색 (로도피타(Rhodophyta)) 미세조류이다. 그 서식지는 담수, 기수, 해수 및 토양을 포함하며, 혹독한 기후 조건 및 높은 자외선 노출 하에서도 자랄 수 있다.
조류 다당류를 가공하는 동안, 조류 바이오매스 (조류 세포)는 분비된 다당류가 유지되는 동안 소거된다. 침전된 조류 바이오매스는 때로는 폐기물로 간주되어 다당류의 생성 중에 버려진다. 조류는 크산틴(xanthine) 유도체가 풍부하며, 이는 때때로 영양상의 용도를 위해 바이오매스로부터 추출된다. 다른 경우에는 바이오매스로부터 조류 색소가 추출된다.
건조 포르피리디움 바이오매스가 과산화수소 분해 및 제거 활성을 갖는다는 것은 예기치 않게 발견되었다 (실시예 1 참고). 더욱이, 인간 케라티노사이트의 건조 포르피리디움 바이오매스에 대한 노출은 과산화수소 분해 및 제거에서 케라티노사이트의 내인성 세포 활성의 향상을 초래한다 (실시예 2 참고). 이러한 결과는 건조 포르피리디움 바이오매스가 과산화수소 농도를 감소시키고, 유익한 효과를 제공하기 위해 피부, 두피, 손발톱 및 모발에 국소적으로 사용될 수 있음을 시사한다. 건조 포르피리디움 바이오매스의 국소적 사용은 모발 회색화의 진행을 느리게 하고, 지연시키며, 그리고 감소시킬 것이다. 유사하게, 건조 포르피리디움 바이오매스의 국소적 사용은 탈색되는 피부 병변의 가시성을 감소시킬 것이고, 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후를 감소시키며 노년 피부 특성을 향상시킬 수 있을 것이다. 포르피리디움 속으로부터의 것들뿐만 아니라, 포르피리디아세아에(Porphyridiaceae) 과 및 필룸 로도피타(Phylum Rhodophyta)의 다른 식물도 유사한 생물학적 특성을 가지며 또한 유사한 방식으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다. 본 발명에 적합한 다른 적색 미세조류의 비-제한적인 예로는 방기오피세아에(Bangiophyceae), 플로리데오피세아에(Florideophyceae), 고니오트리찰레스(Goniotrichales), 딕소니엘라 그리세아(Dixoniella grisea), 또는 다른 로도피타 일원의 단세포 조류를 포함한다.
본 발명의 조성물 및 방법의 정확한 농도와 효과는 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강 및 피부 및 모발 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 치료되는 특정 상태, 활용되는 특정 미용제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다.
본 발명은 (1) 활성인, 비-변성된 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제를 함유하거나, 또는 (2) 카탈라아제-유사 활성을 갖거나, 또는 (3) 카탈라아제를 향상시키는 활성을 갖거나, 또는 (4) 카탈라아제를 안정화시키는 활성을 갖는 천연 추출물(들) 또는 그의 분획물(들), 또는 그의 조합(들), 또는 그의 혼합물을 기술한다. 본 발명에서 기술된 천연 추출물은 식물 추출물, 조류 추출물, 효모 추출물, 균류 추출물, 미생물 추출물, 또는 그와 같은 추출물(들)의 분획물(들), 또는 그의 조합(들)일 수 있지만, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 천연 추출물은 수성이다. 수성 추출물은 물 자체 또는 임의의 비율의 수성/알콜성 용매, 또는 물 및 프로필렌글리콜과 같은 화합물을 임의의 비율로 포함하는 용매를 포함하나 이에 한정되지 않는, 전체적으로 또는 부분적으로 물로 구성된 임의의 용매에 의해 추출된 물질이다. 수성 추출물은 액체 형태일 수 있거나 고체 형태로 건조될 수 있다.
일 예로, 자연 공급원 내에서의 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 생성의 향상은 (1) 관련된 유전 변이체를 선택하거나, 또는 (2) 유전 공학 기술을 사용하거나, 또는 (3) 과산화수소에 대한 시간적 및 선택적 (예컨대 정의된 성장 단계에서 연속적인, 펄스의(pulsed)) 노출을 조절하거나, 또는 (4) 상이한 파장 (예컨대 UV, 청색 또는 기타)에 대한 시간적 및 선택적 노출을 조절하거나, 또는 (5) 추출을 위해 천연 공급원을 채취하기 전에, 천연 공급원의 성장 및 생물학적 특성에 영향을 미치는 특정 성분 (예컨대 화학물질, 영양제)을 제공함으로써 또는 이들을 조합하여 달성된다.
또다른 예에서, 천연 공급원은 (1) L-메티오닌이 강화된 영양 조건 하에서 재배될 수 있거나, 또는 (2) L-메티오닌의 생성을 향상시키는 영양 조건 하에서 재배될 수 있거나, 또는 (3) 성장하는 동안 L-메티오닌으로 보충될 수 있거나, 또는 (4) L-메티오닌을 생성 또는 유지하도록 조작될 수 있거나, (5) 천연 추출물의 제조 및 가공 중에 L-메티오닌과 조합될 수 있다. L-메티오닌이 강화된 추출물은 본원에 개시된 모든 조성물 및 방법에 사용될 수 있으며, 피부, 두피, 모발 및 손발톱의 과산화수소 농도를 감소시키는 데 우수한 효과를 가질 것으로 기대된다. 일 예에서, 식물의 수정은 높은 수준의 L-메티오닌을 포함하는 미량영양소 조성물로 수행된다. 또다른 예는 약 0.1-100 mM L-메티오닌에 의한 조류, 균류, 효모 및 다른 미생물 성장 배지의 강화에 관한 것으로, 이는 이러한 물질로부터 제조된 추출물에서 메티오닌의 증가로 이어질 수 있다. 추가적으로 또는 대안으로서, 천연 추출물 (예컨대 아모르 세코 잎 분말, 야콘 잎 분말 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스, 또는 그들의 수성 추출물)은 천연 추출물 생성 및 가공의 임의의 단계에서 0.1-100 mM의 L-메티오닌과 조합될 수 있다.
조성물 중의 L-메티오닌의 유효 농도는 영향을 받은 조직 (예컨대 회색화 모낭, 백반증 병변, 노년 피부 등) 내의 과산화수소 농도와 거의 같을 것이다. 이 농도는 개인의 연령, 성별, 피부 유형 및 모발 유형에 따라, 그리고 그들의 구체적인 필요 (예컨대 저-색소침착 병변, 회색 모발, 노년 피부 등)에 따라 달라진다. 더 낮은 농도 (높은 마이크로몰 범위)는 노인성 피부에 효과적일 수 있지만, 회색 모발 및 저-색소침착성 피부 병변에 영향을 미치기 위해서는 높은 농도 (낮은 밀리몰 범위)가 필요할 것이다.
또다른 예에서, 본 발명의 천연 추출물은 비-변성되고, 카탈라아제 효소 또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소와 같은 안정하고 활성인 단백질을 함유한다. "변성(denaturation)"은 반탐 의학 사전(Bantam Medical Dictionary) (1990 년판)에서 "열, X-선 또는 화학물질에 의해 야기되는 단백질의 물리적 및 생리학적 특성의 변화"로 정의된다. 이러한 변화에는 효소의 경우 활성의 손실이 포함된다." "비-변성된 제품"이 의미하는 것은, 그와 같은 제품의 유도를 위한 가공 (예컨대, 온도, 추출 매질)이 그의 특정한 과산화수소 제거 활성을 제거하지 않은 천연 제품이다.
한층 또다른 측면에서, 본 발명의 추출물은 카탈라아제 효소 또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소 또는 효소-유사 활성의 함량을 증가시키기 위해 추가로 정제되거나, 또는 농축되거나, 또는 분획되거나, 또는 조합될 수 있다.
환경 문제에 대한 인식이 증가하였으며, "녹색" 고찰이 제품 및 발명에 도입되었다. 일 예로, 본 발명의 천연 공급원은 사용되지 않은 또는 "낭비된" 천연 제품으로 구성된다. 그와 같은 공급원에 대한 예는 현장에서 채취되지 않거나, 또는 채취된 다음에 과일, 야채, 뿌리 및 곡물이 수확될 때 분리되거나, 그리고 그 이외에 버려지거나 동물 사료로 제공될 수 있는 잎 및 줄기를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 다른 예는 콩과 식물 꼬투리(legume pod)나 과일 및 야채 껍질과 같이 식품 가공 중에 소거되는 식물 부분을 포함한다. 또다른 예는 조류 다당류의 생성 중에 소거되는 조류 바이오매스와 같은 특정 식물성 제품의 가공 또는 생성 중에 소거되는 식물 부분을 포함한다.
이 발명의 추출물은 카이만 케미칼(Cayman Chemical) 사의 카탈라아제 분석 키트 (# 707002), 바이오비젼 인크.(BioVision Inc.) 사의 카탈라아제 활성 비색/형광 분석 키트 (#K773-100), 시그마 알드리치(Sigma Aldrich) 카탈라아제 효소 분석 키트 (EC 1.11.1.6), 몰레큘라 프로브스(Molecular Probes) 사의 암플렉스 레드(AmplexÆÆ Red) 카탈라아제 분석 키트 (#A22180) 등과 같은 비색 또는 분광광도 분석을 사용하여 그들의 과산화수소 제거 활성을 시험할 수 있다. 그와 같은 분석은 민감하여 샘플 내에서 카탈라아제 활성을 피코 단위로 검출한다. 카탈라아제 효소 자체는 또한 표준 절차를 사용하여 추출물 내에서 검출되고 정량화될 수 있지만, 단백질의 존재는 그 활성을 보장하지 않으며, 그러므로 활성 분석이 바람직하며, 천연 추출물을 정의하는 데 사용된다.
또다른 예에서, 본 발명의 천연 추출물은 카탈라아제-유사 활성, 즉 손상되지 않은 카탈라아제 또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소를 함유하지 않고 직접적으로 또는 간접적으로 과산화수소를 분해 또는 제거하는 능력을 함유한다. 일 측면에서, 그와 같은 추출물은 추가로 농축되거나, 또는 정제되거나, 또는 분획되거나, 또는 조합되어 카탈라아제-유사 활성의 함량을 증가시킬 수 있다. 또다른 측면에서, 분석은 효소 농도가 아닌 반응 산물을 측정하기 때문에, 그와 같은 추출물은 상기 기술된 것들과 유사한 분석을 사용하여 그들의 과산화수소 제거 활성을 시험할 수 있다. 따라서, 그와 같은 추출물은 그들의 과산화수소 제거 활성에 의해 정의될 수 있다.
상대적으로 큰 분자량을 갖는 국소 도포 제제는 적절한 전달 비히클로 적절히 제형화된 경우, 모구(hair bulb)에서 약리상 활성 농도에 도달할 가능성을 가진다. 전달은 내부 및 외부 모근초(root sheath)의 연결을 통해 발생하며, 더 큰 분자량의 분자는 모간(hair shaft)를 직접 둘러싸는 모낭 구조에 국한된다 (문헌[J Pharm Sci. 1997 86(9):1022-9. Description of the intrafollicular delivery of large molecular weight molecules to follicles of human scalp skin in vitro. Lieb LM, Liimatta AP, Bryan RN, Brown BD, Krueger GG]). 그러나, 때로는 그들의 유효 농도 및 그들의 효능을 증가시키고 향상시키기 위해서 모낭, 또는 피부에 직접적으로 더 작은 분자량의 활성 성분을 전달시키는 것이 바람직하다. 한층 또다른 예에서, 본 발명의 카탈라아제-유사 활성을 함유하는 천연 추출물은 크기로 분획화 및 선택되고, 그 다음 농축되거나, 또는 조합되어 조성물 내의 원하는 활성을 갖는 더 작은 분자량 성분의 농도를 증가시킬 수 있다. 일 측면에서, 원하는 활성을 갖는 성분의 분자량은 카탈라아제의 그것보다 작다. 또다른 측면에서, 원하는 활성을 갖는 성분의 분자량은 1 kDa보다 작다. ~0.5 kDa의 크기는 수동적인 피부 침투에 가장 큰 것으로 간주된다 (문헌[Bos JD, Meinardi MMHM, 화학적 화합물과 약물의 피부 침투에 대한 500 달튼 규칙, Exp Dermatol. 2000 9 : 165-16]). 한층 또다른 측면에서, 원하는 활성을 갖는 성분의 분자량은 ~ 0.5 kDa보다 작다.
본 발명의 천연 추출물은 피부, 또는 손발톱, 또는 모낭에서 내인성 카탈라아제 효소 또는 내인성 글루타티온 퍼옥시다아제 효소의 유전자 발현, 또는 단백질 번역, 또는 안정성, 또는 활성을 향상시킬 수 있다. 일 측면에서, 이러한 추출물은 추가로 농축되거나, 또는 정제되거나 또는 분획되거나 또는 조합되어 그와 같은 활성을 향상시킬 수 있다. 일 측면에서, 그와 같은 추출물은 그들의 과산화수소 제거 활성에 의해 정의될 수 있다.
한층 또다른 예에서, 내인성 피부, 두피, 손발톱, 또는 모낭 카탈라아제 효소 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소의 발현, 또는 안정성, 또는 활성을 향상시키는 본 발명의 추출물은 크기로 분획화 및 선택되고, 그 다음 농축되거나, 또는 조합되어 조성물 내의 원하는 활성을 갖는 더 작은 분자량 성분의 농도를 증가시킬 수 있다. 일 측면에서, 내인성 피부, 손발톱, 두피, 또는 모낭 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소의 발현, 또는 안정성, 또는 활성을 향상시키는 성분의 분자량은 카탈라아제의 그것보다 작다. 또다른 측면에서, 내인성 피부 또는 모낭 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소의 발현, 또는 안정성, 또는 활성을 향상시키는 성분의 분자량은 1 kDa보다 작다. 한층 또다른 측면에서, 내인성 피부 또는 모낭 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소의 발현, 또는 안정성, 또는 활성을 향상시키는 성분의 분자량은 0.5 kDa보다 작다.
본 발명의 천연 추출물은 피부, 두피, 모발, 또는 손발톱에서 또는 그들의 관련 생체 외 시스템에서 그들의 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 향상 활성에 대해 평가될 수 있다. 그와 같은 생체 외 시스템은 예컨대 매트텍 코포레이션(MatTek corporation)으로부터 상업적으로 입수할 수 있는 표피, 또는 진피, 또는 표피-진피 피부 구조물, 예컨대 ATTC로부터 상업적으로 입수할 수 있는 멜라노사이트, 표피 케라티노사이트, 진피 섬유아세포 또는 모낭 케라티노사이트의 단일층, 예컨대 인간 및 동물 생체검사로부터 입수할 수 있는 모발이 있거나 없는 피부 체외이식편(explant), 배양된 모발 플러그(plug) 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 그와 같은 분석의 예는 상이한 시점 (예컨대 24, 48 및 96 시간) 동안, 안전하고 효과적인 농도의 범위를 사용한 본 발명의 추출물이 있거나 없는 생물학적 샘플의 인큐베이션을 포함한다. 생물학적 샘플은 균질화되고, 전술한 분석을 사용하여 과산화수소 제거 활성에 대해 시험될 수 있고, 또는 그들은 알려진 절차를 사용하여 자극 바이오마커(biomarker), 감작(sensitization) 바이오마커, 염증 반응, 항-산화 반응 등에 대해 시험될 수 있다. 또한 표준 분자 절차를 사용하여 내인성 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소, 또는 기타 세포 항-산화 효소의 향상된 발현 또는 안정성을 시험할 수 있다. 또한, 생물학적 샘플을 (예컨대, UV 조사 또는 과산화수소 노출로) 시험할 수 있고, 그들의 생존능력 및 그들의 생물학적 반응 및 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 발현 및 활성은 예컨대 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 발현 또는 활성, 자극, 감작, 염증 반응, 항-산화 반응 등에 대해 알려진 및 검증된 분석을 사용하여 평가될 수 있다. 생존능력은 예컨대 표준 MTT 분석으로 평가될 수 있다. 자극 및 염증 반응은 예컨대 표준 ELISA 기술을 사용하여 IL-1 알파와 같은 염증성 시토카인의 배양 배지로의 방출을 측정함으로써 평가될 수 있다. 항-산화 반응은 예컨대 ABTS (트롤록스(trolox) 등가물) 또는 DPPH 키트를 사용하여 표준 분석으로 측정될 수 있다. 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 발현 및 안정성은 QPCR 또는 단백질 면역-반응성과 같은 표준 기술을 사용하여 시간에 따라 평가할 수 있다.
본 발명의 신규한 조성물은 수성 천연 추출물을 함유하며, 이는 유체 또는 고체와 같은 많은 형태로 존재할 수 있다. 일 예에서, 수성 천연 생성물은 현탁액의 형태이다. 천연 현탁액을 만드는 한 가지 방법은 신선하거나 건조한 천연 공급원을 약 10 분에서 수 시간 동안 액체 (예컨대 물)에 담그고, 그들이 완전히 수화된 다음에 그들을 압축하거나 분쇄하여 성분이 추출될 수 있도록 하는 것이다. 개선된 추출을 위해 생물학적 물질을 분해하기 위해, 분쇄 대신에 압력 파괴, 초음파 처리 및 밀링 (예컨대, 제트 밀링 및 볼 밀링, 때로는 저온 또는 냉동 조건 하에 수행됨)과 같은 절차를 사용할 수 있다. 현탁액을 여과하여 임의의 잔류 부분을 소거할 수 있다. 일 예에서 현탁액은 0.2 마이크로미터 공극 크기 필터를 사용하여 여과된다. 천연 현탁액은 예컨대 트레이 건조, 스핀 건조, 회전 건조, 스핀 플래시 건조, 냉동 건조, 또는 동결건조(lyophilization)에 의해 건조될 수 있다.
또다른 예는 천연 공급원을 압축하고, 천연 물질을 압축하여 생성된 "주스"를 채취하는 것이다. 채취 후, 현탁액을 여과하여 임의의 잔여 부분을 소거할 수 있다. 일 예에서, 현탁액은 0.2 마이크로미터 공극 크기 필터를 사용하여 여과된다.
본 명세서에 사용된 천연 현탁액 및 용액은 신선한 천연 공급원을 사용할 수 있거나, 건조되고 분말화된 천연 공급원 및 액체로부터 만들어질 수 있다. 분말은 천연 공급원 (예컨대 식물 부분, 조류, 균류 또는 미생물 배양물 등)으로부터 밀링되고 (예컨대 압력 파괴, 초음파 처리, 제트 밀링 또는 볼 밀링 등으로), 또한 건조될 수 있고 (예컨대 동결건조, 스핀-건조, 스프레이 건조, 트레이 건조, 스핀 플래시 건조, 냉동-건조 등), 초래된 분말은 여과되거나 되지 않을 수 있다. 일 예에서 현탁액 또는 용액은 0.2 마이크로미터 공극 크기 필터를 사용하여 여과된다. 그와 같은 제조된 현탁액 또는 용액은 중량에 대해 약 0.01 내지 약 90 %의 건조 분말을 가질 수 있다.
또다른 예는 예컨대 전술한 바와 같은 동결건조, 스프레이 건조 또는 냉동-건조된 현탁액 등으로부터 만들어진, 천연 추출물 분말의 액체의 첨가가 있는 그리고 여과 또는 균질화가 있거나 없는 사용이다.
다른 공지된 추출 방법이 또한 본 발명에서 사용된 활성 성분을 생성하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 이에 한정되는 것은 아니지만, 활성 성분이 에탄올/물 혼합물을 사용하여 분쇄된 천연 공급원으로부터 추출될 수 있고, 추출물로부터 에탄올의 소거가 뒤를 이으며, 그와 같은 방법으로 제제의 특정 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 활성 또는 카탈라아제-관련 활성이 유지될 것이다. 분획화의 알려진 방법은 본 발명의 원하는 활성을 분리 및 농축시키거나, 또는 천연 추출물을 크기 분획화하거나, 또는 억제하거나 원치 않는 활성을 제거하는 데 사용될 수 있다.
일 예에서, 본 발명의 천연 추출물은 계면동전위(electro-kinetic potential) (제타(Zeta)) 분획화 및 분리를 사용하여 생성될 수 있다 (예컨대 제타 프랙션(Zeta Fraction)™ 기술 (http://www.sc.akzonobel.com/en/personalcare/Pages/zeta-fraction.aspx)으로). 제타 프랙션 기술은 세포 내 구성요소를 생물학적 공급원으로부터, 예컨대 식물 “주스”로부터, 분리를 위한 외부 용매의 사용 없이 선택적으로 단리시킬 수 있다. 활성 카탈라아제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제를 갖는, 또는 카탈라아제-유사 활성을 갖는 표적화된 분획은 본 발명의 조성물에 사용되기 위해 그들의 계면동 (제타) 전위에 기초하여 기계적으로 분리될 수 있다. 제타 분획은 전술한 바와 같이 추가로 처리 (예컨대 여과, 건조, 조합)될 수 있다.
한층 또다른 예에서, 본 발명의 신선하거나 건조한 천연 공급원은 상술한 바와 같이 분쇄 또는 밀링되고, 액체 (예컨대 물)에 현탁된 다음에 기계적 균질화, 또는 입자-크기 감소 (예컨대 초음파 처리, 또는 전단 혼합(shear mixing), 또는 균질화, 또는 임의의 다른 알려진 반고체 가공, 때로는 저온 또는 냉동 조건 하에 수행됨)를 거쳐 균질화액을 생성할 수 있다 (따라서 천연 공급원의 세포 또는 바이오매스가 분해되거나 파괴되도록). 그 다음, 초래된 현탁액은 분리될 수 있고 (예컨대, 10 분 동안 500-1,000 RPM의 원심 분리에 의해, 또는 유사한 절차에 의해), 상등액은 추가로 크기-선택될 수 있다 (예컨대, 0.2 마이크로미터 이하 크기의 입자에 대해, 예컨대 크기 여과 막, 한외-여과(ultra-filtration) 등에 의해). 초래된 현탁액 또는 용액, 예컨대 0.2 마이크로미터 이하 크기 입자는 본 발명의 조성물을 위해 "현 상태 그대로" 사용될 수 있거나, 표준 절차 (예컨대 동결건조, 스핀-건조, 스프레이 건조, 트레이 건조, 스핀 플래시 건조, 냉동-건조 등)를 사용하여 건조되어 더욱 정제된 천연 추출물을 생성할 수 있다. 그와 같은 모든 과정은 천연 추출물의 생물학적 활성을 감소 또는 제거시킬 수 있는 불합리한 열을 생성해서는 안된다.
조성물 중의 수성 추출물의 양은 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강 및 피부 및 모발 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 활용되는 특정 화장제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 일부 경우, 수성 추출물은 액체 형태 (예컨대 용액 또는 현탁액)로 사용될 것이다. 따라서 조성물은 부피를 기준으로 0.001-99.9 %, 0.005-90 %, 0.01-50 %, 0.05- 25 %, 0.1-20 %, 0.5-20 %, 1-10 %, 0.01-25 %, 0.05-10 %, 0.1-5 % 등을 함유할 수 있다. 일부 다른 경우에, 수성 추출물은 고체 또는 분말 형태 또는 건조된 액체 분말 형태로 사용될 것이다. 따라서, 조성물은 부피 당 중량 기준으로 0.001-25 %, 0.005-20 %, 0.01-10 %, 0.05-5 %, 0.001-5 %, 0.005-10 % 등을 함유할 수 있다. 일부 다른 경우에, 조성물 중의 수성 추출물의 양은 조성물 중에 존재하는 추출물에 대해 사용된 천연 공급원 분말의 당량에 기초하여 평가될 수 있다. 그와 같은 조성물은 부피당 중량 기준으로 0.001-25 %, 0.005-20 %, 0.01-10 %, 0.05-5 %, 0.001-5 %, 0.005-10 % 등을 함유할 수 있다.
화장 또는 제약 담체
유용한 조성물은 하나 이상의 방부제, 또는 하나 이상의 항-산화제, 또는 하나 이상의 킬레이팅제, 또는 그의 조합을 포함할 수 있는 안정화 시스템을 포함할 수 있다. 방부제는 미생물 분해를 실질적으로 예방하는 데 유용하다. 방부제의 예는 페녹시에탄올, 파라벤 및 천연 방부제를 포함하나 이에 한정되지 않으며, 당업자에게 알려져 있다. 방부제의 다른 예는 문헌[the International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, eds. Wenninger and McEwen (CTFA, 7th ed., 1997)]의 1654-55 페이지에서 찾을 수 있으며, 이하에서 "화장품 핸드북"으로 지칭된다. 조성물은 중량에 대해 약 0.01 % 내지 약 20 % (때로는 더 바람직하게는, 중량에 대해 약 0.5 % 내지 약 5 %)의 방부제를 포함할 수 있다. 미생물 오염은 또한 감마선 조사, 또는 전자-빔 조사, 또는 X-선 조사 등에 의해, 정밀여과(microfiltration)에 의해, 또는 본 발명에서 기술된 특정 활성의 제거를 초래하지 않는 다른 표준 절차 (예컨대 짧은 열처리)에 의해 제거될 수 있다.
항산화제 및/또는 킬레이팅제는 또한 조성물의 저장 수명 및 안정성을 증가시키는 데 사용될 수 있다. 항산화제는 제형 안정화를 위해 그리고 생물학적 효능 모두를 위해 첨가될 수 있다. 항산화제 화합물 및 그들의 유도체는 술프하이드릴 화합물 및 그들의 유도체 (예컨대, 나트륨 메타비술파이트 및 N-아세틸-시스테인), 리포산 및 디히드로리포산, 레스베라트롤(resveratrol), 아세틸-시스테인 (이니페린(iniferine)®) 또는 락토페린, 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체 (예컨대, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩타이드)와 같은 수용성 항산화제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명의의 조성물에 사용하기에 적합한 유용성 항산화제는 부틸화 히드록시톨루엔, 레티노이드 (예컨대 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 토코페롤 (예컨대 토코페롤 아세테이트), 토코트리에놀, 및 유비퀴논을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기 적합한 항산화제를 함유하는 천연 추출물은 플라보노이드 및 이소플라보노이드 및 그들의 유도체 (예컨대, 게니스테인(genistein) 및 다이드제인(diadzein)를 함유하는 추출물, 레스베라트롤을 함유하는 추출물, 폴리페놀을 함유하는 추출물 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 그와 같은 천연 추출물의 예는 포도 종자, 차, 소나무 목피, 알로에 베라, 프로폴리스, 또는 콩과 식물 추출물을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 카탈라아제 모방체, SOD 모방체, 살렘(salem)-Mn 복합체 (예컨대 EUK 계열의 화합물) 등을 포함하나 이에 한정되지 않는 특정 항산화제 활성을 갖는 작은 분자가 또한 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합하다. 항산화제의 다른 예는 화장품 핸드북의 1612-13 페이지에서 찾을 수 있다. 본 발명의 조성물은 항산화제를 조성물의 중량에 대해 약 0.001 % 내지 약 20 %의 양으로 (예컨대, 중량에 대해 약 0.01 % 내지 약 10 %) 포함할 수 있다.
킬레이팅제는 또한 조성물의 안정화를 돕는 데 유용하다. 킬레이팅제의 예는 EDTA 및 그의 유도체 (예컨대, 디나트륨 EDTA 및 디칼륨 EDTA), 이니페린®, 락토페린, 및 시트르산을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 킬레이팅제의 다른 예는 화장품 핸드북의 1626 페이지에 실려있다. 본 발명의 조성물은 킬레이팅제를 조성물의 중량에 대해 약 0.001 % 내지 약 20 % (예컨대, 중량에 대해 약 0.01 % 내지 약 10 %)의 양으로 포함할 수 있다.
증점제 (예컨대 증점제 또는 점도 향상제)는 유용한 조성물의 점도를 변경하는 데 사용될 수 있다. 조성물의 원하는 점도는 의도된 용도 (예컨대, 샴푸, 컨디셔너, 무스, 크림, 로션, 연고, 세럼, 스프레이, 겔, 스틱 등으로서)에 좌우될 것이다. 예를 들어, 목욕 또는 세척 제품과 같은 적용에서, 조성물의 점도는 수용액과 유사하게 상대적으로 낮아야 한다. 크림, 로션, 또는 겔로서의 적용은 약간 더 높은 점도 (예컨대, 약 100 cps 및 100,000 cps 사이)를 가질 것이다. 점도를 변경하기 위해 본 발명의 조성물에 첨가될 수 있는 증점제는 세피겔(sepigel) 또는 폴리아크릴레이트 (예컨대 폴리아크릴아미드, 다른 카보머(carbomer)) 또는 다당류 (예컨대 키토산)와 같은 중합체를 포함한다. 점도 개질제의 다른 예는 화장품 핸드북의 1692-97 페이지에 실려 있다. 적절한 점도를 달성하기 위해, 본 발명의 조성물은 중량에 대해 약 0.01 % 내지 약 20 % (예컨대, 중량에 대해 약 0.1 % 내지 약 5 %)의 증점제를 포함할 수 있다.
추가적인 화장제용으로 활성인 약제
천연 추출물을 함유하는 조성물은 또한 다른 화장제용으로 활성인 약제 (예컨대, 합성 화합물(들) 또는 천연 공급원으로부터 단리된 화합물(들), 또는 조직에 대하여 화장 또는 치료 효과를 가지는 화합물의 혼합물을 함유하는 천연 추출물(들))를 함유할 수 있다. 본원에 기술된 유용한 조성물은 또한 천연 생성물(들) 이외에 다른 피부에-, 모발에- 및 손발톱에- 유익한 약제를 함유할 수 있다. 그와 같은 약제의 예는 항-염증제 (예컨대 코르티코스테로이드, NSAID, 또는 알로에 베라와 같은 항-염증 활성을 갖는 식물 추출물), 항-소양제, 국소 진통제, 항산화제 (예컨대 비타민 C 및 유도체, 비타민 E 및 유도체, 항산화 활성을 갖는 식물 추출물), 카탈라아제-유사 또는 SOD-유사 활성을 갖는 약제 (예컨대 EUK 계열의 약제와 같은 살렘 MN 화합물), 표피-, 진피- 및 모낭- 재생제 및 (예컨대 레티노이드, 레티노이드-유도체, 레티놀, 레티날, 알파히드록시산, 코-엔자임-Q, 성장 인자 등을 포함하는) 피부, 모발 및 손발톱 조직 재생제를 향상시키는 약제, 항생제 및 항-미생물제, 항-진균제, 항-효모제, 항-기생충, 면역계를 향상시키는 약제, (예컨대 미코나졸, 케토코나졸, 엘루비올, 이트라코나졸, 콜타르 등의 약제를 포함하는) 비듬-조절 및 광택-조절 약제, 세제, 계면활성제, 보습제, 영양분, 비타민, 미네랄, 에너지 증진제, 모발 또는 손발톱 성장 향상 약제, 모발 성장을 지연시키는 약제, 피부 컨디셔닝을 위한 약제, 악취-조절 약제 (예컨대 악취 차폐 또는 pH-변화 약제), 데오도란트, 항발한제, 착색제, 색소, 색깔-차폐 약제, 색소 생성 또는 색소 전달을 향상시키는 약제 (예컨대 펩타이드, PAR-2 활성제, MC1R 리간드, 알파 MSH 및 그의 모방체 등), 색소 생성을 향상시키거나 억제하는 약제, 메티오닌 술폭시드 환원효소 활성에 영향을 미치는 약제 (예컨대 L-메티오닌, 메티오닌의 산화를 예방하는 것) 및 다른 피부, 두피, 모발 또는 손발톱의 안녕 및 아름다움을 향상시키는 당업자에게 알려진 다른 약제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 기술된 유용한 조성물은 또한 사용자의 피부, 두피, 모발 또는 손발톱상의 조성물의 느낌을 향상시키는 화합물을 함유할 수 있다. 그와 같은 화합물의 예는 오일, 실리콘 (예컨대 디메티콘과 같은 실록산 중합체), 중합체, 다당류, 및 유연제 및 습윤제와 같은 피부-컨디셔닝 약제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 그와 같은 피부 컨디셔닝 약제의 일부 예는 화장품 핸드북의 1656-1670 페이지에서 찾을 수 있다. 추가적으로, 본원에 유용한 조성물은 본 발명의 기술분야에서 당업자에게 알려진 착색제 (예컨대 염료 및 색소), 불투명화제 (예컨대, 이산화 티타늄), 및 향수와 같은 통상적인 화장품 보조제를 함유할 수 있다. 본 발명의 그와 같은 조성물을 함유하는 조성물 및 제형은 당업자에게 잘 알려진 방법론을 사용하여 제조될 수 있다.
형태
본 발명의 조성물은 용액제, 현탁액제, (마이크로에멀젼제 및 나노에멀젼제를 포함하는) 에멀젼제, 로션, 크림, 겔, 스틱, 스프레이, 연고, 클렌징 액체, 세제, 고체 바, 샴푸, 모발 컨디셔너, 매니큐어, 손발톱 강화제, 페이스트, 폼, 분말, 무스, 면도 크림, 면도 겔, 와이프, 패치, 히드로겔, 필름-형성 제품, 마스크, 액적(liquid drop), 점막-점착제 등과 같은 화장제용으로 또는 제약상 허용되는 형태 및 담체와 함께 사용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 조성물은 튜브, 밀봉된 패킷, 단지, 펌프, 병, 캔, 플레짓(pledget), 타올렛(towelet), 디스펜서, 와이프, 스프레이 캔 등으로 포장될 수 있다. 기밀 또는 차광(light-blocking) 포장 (예컨대 알루미늄 튜브, 알루미늄 포켓, 펌프, 또는 적층(laminated) 튜브)이 제품 안정성을 추가로 향상시키기 위해 사용될 수 있다.
일 측면에서, 본 발명의 조성물은 활성 카탈라제 및/또는 글루타티온 퍼옥시다아제 효소 또는 카탈라아제-관련 활성을 유지할 수 있게 하고, 어쩌면 활성 단백질을 포함하는 활성 성분을 모낭으로, 또는 손발톱으로, 또는 피부로 전달하는 전달 시스템을 추가로 포함한다. 그와 같은 전달 시스템은 마이크로- 및 나노- 입자, 리포솜, 아스파솜(aspasome), 오가노겔, 니오솜(niosome), 트랜스퍼로솜(transferosome), 패치, 마이크로- 및 나노- 바늘, 마이크로- 및 나노- 캡슐, 마이크로- 및 나노- 스펀지, 필름, 중합체 등을 포함할 수 있다.
조성물 및 방법
본 발명은 포유동물의 모발 회색화 과정을 감소시키는 방법을 특징으로 하며, 상기 방법은 두피 또는 다른 원하는 털이 없지 않는 피부 부위에 본 발명의 조성물의 안전하고 유효한 양을 도포하는 단계를 포함한다. 도포 빈도는 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강, 모발 유형 및 피부 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 활용되는 특정 화장제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 어떤 경우에는 도포는 주기적인 반면, 다른 경우에는 도포는 하루에 한 번 또는 두 번이다.
또한, 본 발명은 포유동물의 피부상의 색소가-없는 병변 (예컨대 노화로 유도된 또는 자외선으로 유도된 색소 손실 반점, 또는 IGH, 또는 백반증)을 감소시키는 방법을 특징으로 하며, 상기 방법은 피부 부위에 본 발명의 조성물의 안전하고 유효한 양을 도포하는 단계를 포함한다. 도포 빈도는 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강 및 피부 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 활용되는 특정 화장제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 어떤 경우에는 도포는 주기적인 반면, 다른 경우에는 도포는 하루에 한 번 또는 두 번이다.
또한, 본 발명은 또한 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후 및 증상을 감소시키고 노인성 피부의 생물학적 특성 및 건강 및 웰빙을 향상시키는 방법을 특징으로 하며, 상기 방법은 필요로 하는 피부, 두피, 모발 또는 손발톱 부위에 본 발명의 조성물의 안전하고 유효한 양을 도포하는 단계를 포함한다. 도포 빈도는 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강 및 피부 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 활용되는 특정 화장제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 어떤 경우에는 도포는 주기적인 반면, 다른 경우에는 도포는 하루에 한 번 또는 두 번이다.
본원에서 사용된 바와 같은 "안전하고 유효한 양"은 모발, 손발톱 또는 피부에 원하는 효과를 유도하기에 충분한 조성물의 양을 의미하지만, 심각한 부작용을 피할 만큼 충분히 낮다. 조성물의 안전하고 유효한 양은 치료되는 부위, 최종 사용자의 연령, 건강, 모발 유형 및 피부 유형, 치료의 기간 및 성질, 이용된 구체적인 조성물, 활용되는 특정 화장제용으로- 또는 제약상- 허용되는 담체 등의 인자에 따라 달라질 것이다.
본 발명이 그의 상세한 설명과 함께 기술되었지만, 전술한 설명은 예시를 의도한 것이며 본 발명의 범위를 제한하지 않는 것으로 이해된다.
실시예 1
이 연구는 시험 약제의 과산화수소 분해 활성을 평가하였다. 카탈라아제 분석 키트는 카이만 케미칼 사 (앤 아버(Ann Arbor), 미시간주)로부터 입수하였다. 상기 분석은 비색 분석에서 색원체(chromogen)로서 푸르팔드(Purpald) (4-아미노-3-히드라지노-5-머캅토-1,2,4-트리아졸)을 사용하여 과산화수소 제거 활성 (예컨대 카탈라아제 활성)을 측정한다. 상기 시험은 540 nm에서의 광학 밀도 (OD)의 변화를 수반하며, 이는 과산화수소의 존재 하에서 메탄올과의 반응에 기초한 샘플에 존재하는 유효 활성에 비례한다. 색원체로 사용되는 푸르팔드는 생산되는 포름알데히드와 함께 바이시클릭 헤테로사이클을 형성하며, 이는 산화 시 무색에서 보라색으로 변화한다.
천연물의 샘플 분말을 5 % (w/v)의 물 또는 PBS에 현탁하고, 초음파 처리하여 물질을 서브-마이크로미터 입자로 분해하고, 균질화하고, 1,000 RPM에서 10 분 동안 원심분리하여 불용성 물질을 소거하였다. 연속 희석액을 각 시험 물질에 대해 제조하고 분석 완충액에서 메탄올 및 과산화수소와 혼합하였다. 반응은 실온에서 20 분 동안 설정되었다. 모든 샘플을 분석 완충액-처리 샘플 (음성 대조군으로 사용함)과 비교하였다. 소과동물의 간으로부터 유래된 카탈라아제 효소 표준을 양성 대조군으로 사용하였다. 540 nm에서의 광학 밀도 변화는 수산화칼륨, 푸르팔드 및 과아이오딘산칼륨의 첨가 후에 평가되었다.
이 연구의 결과는 표 1에 나타내었다. 이들 결과는 아모르 세코 및 야콘의 건조 잎 분말 및 건조된 포르피리디움 바이오매스가 높은 과산화수소 제거 활성을 보유함을 나타낸다.
참고로서 및 비교를 위하여, 문헌[Nadira Binte Samad, Trishna Debnath, Michael Ye, Abul Hasnat, Beong Ou Lim. In vitro antioxidant and anti-inflammatory activities of Korean blueberry (Vaccinium corymbosum L.) extracts. Asian Pac J Trop Biomed 4(10): 807-815 (2014)]은 강한 항산화 활성을 갖는 것으로 알려진 2 종의 한국 블루베리 (바시니움 코림보숨(Vaccinium corymbosum) L.) 잎 추출물을 언급한다. 이 추출물은 0.33 % (w/v)에서 0.67 nmol/min/ml에 이르는 카탈라아제 활성을 갖는 것으로 기록되었다. 대조적으로, 낮은 (0.1 % w/v) 농도에서 본 발명의 천연 추출물은 1.5-2.8 nmol/min/ml으로부터 그들의 활성 범위를 가졌다.
표 1: 시험 약제의 과산화수소 제거 활성
Figure pct00001
(*)이 천연 추출물의 적-갈색은, 더 높은 시험 농도에서, 푸르팔드 적-자색 판독 색깔보다 더 강했으며, 그러므로 결과의 정확한 읽기를 방해하였다.
이러한 결과는 아모르 세코 및 야콘의 건조 잎 분말 및 건조된 포르피리디움 바이오매스가 높은 과산화수소 제거 활성을 가지며, 그러므로 그들이 약 0.001 % (w/v) 이상의 농도에서 본 발명의 국소 제제에 사용되기에 적합함을 나타낸다.
실시예 2
이 연구는 배양된 정상 인간 케라티노사이트의 내인성 세포 과산화수소 분해 및 제거 활성에 대한 시험 물질의 영향을 평가하였다. 처리된 세포의 단백질 용해물을 비색 분석에서 색원체로서 푸르팔드 (4-아미노-3-히드라지노-5-머캅토-1,2,4-트리아졸)을 사용하여 과산화수소 분해 활성을 측정하는 데 사용하였다. 상기 테스트는 540 nm에서 광학 밀도 (OD)의 변화를 수반했으며, 이는 과산화수소의 존재 하에서 메탄올과의 반응에 기초한 샘플에 존재하는 유효 활성에 비례한다. 색원체로 사용되는 푸르팔드는 생산되는 포름알데히드와 함께 바이시클릭 헤테로사이클을 형성하며, 이는 산화 시 무색에서 보라색으로 변화한다.
천연 시험 약제의 샘플 분말을 5 % w/v의 포스페이트 완충액 (1xPBS)에 현탁하고, 초음파 처리에 의해 균질화시켰다. 이어서 10 분 동안 1,000 RPM 스핀 후, 상등액을 0.2 μm 주사기 필터를 사용하여 여과에 의해 멸균시켰다.
그 다음 샘플 (5 % 현탁액의 초음파 처리된 여과 상등액)을 원하는 시험 농도로 연속하여 희석하였다. 1 차 정상 인간 표피 케라티노사이트 (NHEK)를 6-웰 플레이트에 접종하고 24 시간 동안 배양하였다. 그 후에, 세포를 배양 배지에서 0.005, 0.05 및 0.5 % (농도는 원래의 5 % 현탁액을 기준으로 함) 시험 물질을 하루에 한 번 3 일 동안 사용하거나 사용하지 않고 처리하였다. 세포를 4 일째에 수확한 다음 용해시키고 BSA-브래드포드(Bradford) 분석을 사용하여 용해물 내 총 단백질 농도를 측정하였다. 세포 용해물을 분석 완충액에서 메탄올 및 과산화수소와 혼합하였다. 반응은 실온에서 20 분 동안 설정되었다. 모든 샘플을 분석 완충액-처리 세포 (음성 대조군으로 사용됨)와 비교했다. 소과동물의 간으로부터 유래된 카탈라아제 효소 표준을 양성 대조군으로 사용하였다. 540 nm에서의 광학 밀도 변화는 수산화칼륨, 푸르팔드 및 과아이오딘산칼륨의 첨가 후에 평가되었다. 분석을 위해, 평균 흡광도를 계산하고 각 샘플 및 표준에 대하여 음성 대조군에서 뺄셈하였다.
이 연구의 결과를 표 2에 나타내었다. 이들 결과는 처리되지 않은 케라티노사이트의 내인성 활성과 비교하여, 처리된 케라티노사이트 내에서 각 시험 약제에 의해 유도된 과산화수소 분해 활성을 나타낸다. 모든 시험 물질은 과산화수소 제거의 케라티노사이트 내인성 활성에서 용량-반응 증가를 생성했다. 처리되지 않은 케라티노사이트는 1.5 ± 0.2 단위/mg 단백질 (U/mg)의 활성을 나타내었고, 시험 약제는 0.5 % (w/v)에서 이 활성을 210 % 이상 (3.2± 0.1 (U/mg))까지 증가시킬 수 있었다.
참고로서 및 비교를 위하여, 강한 항산화 활성을 갖는 카멜리아 자포니카(Camellia japonica) 추출물은 0.005 %에서 HaCaT 케라티노사이트의 카탈라아제 활성을 약 50 %만 향상시킨 것으로 보고되었고, 사르가숨 무티쿰(Sargassum muticum) 추출물의 에탄올 분획물은 항-산화 활성을 위해 농축된 10 %에서 HaCaT 세포의 카탈라아제 활성을 25 %만 향상시켰다 (문헌[Antioxidant Effects of the Ethanol Extract from Flower of Camellia japonica via Scavenging of Reactive Oxygen Species and Induction of Antioxidant Enzymes. Mei Jing Piao, Eun Sook Yoo, Young Sang Koh, Hee Kyoung Kang, Junoh Kim, Yong Jin Kim, Hak Hee Kang and Jin Won Hyun, Int. J. Mol. Sci. 2011, 12:2618-2630], 문헌[Protective Effect of the Ethyl Acetate Fraction of Sargassum muticum Against Ultraviolet B-Irradiated Damage in Human Keratinocytes. Mei Jing Piao, Weon Jong Yoon, Hee Kyoung Kang, Eun Sook Yoo, Young Sang Koh, Dong Sam Kim, Nam Ho Lee and Jin Won Hyun, Int. J. Mol. Sci. 2011, 12:8146-8160]).
표 2a: 카탈라아제 분석 측정
Figure pct00002
표 2b: 세포 과산화수소 제거, 시험 약제/총 단백질 활성 (U/mg)
Figure pct00003
활성 (U)은 nmol/min/mL로 정의된다. 활성은 각 세포 용해물 샘플 내의 전체 단백질 양에 대해 표준화되며, 이는 U/mg로 정의된다.
이러한 결과는 인간 케라티노사이트의 야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말, 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스 분말에 대한 노출은 케라티노사이트의 내인성 세포 활성의 향상을 초래하여, 그들의 과산화수소 소거, 분해 또는 제거 능력을 증가시킨다. 이러한 결과는 이들 약제가 과산화수소 농도를 감소시키기 위해 피부, 두피, 모발 및 손발톱에 국소적으로 사용될 수 있으며, 그러므로 본 발명에서 유용하다는 것을 시사한다. 야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스 분말의 국소적 사용은 높은 내인성 과산화수소 수준에 의해 개시되고 향상되는 모발 회색화의 진행을 느리게 하고, 지연시키며 그리고 감소시킬 것이다. 유사하게, 야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스 분말의 국소적 사용은 탈색되는 피부 병변의 진행 및 가시성, 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후, 및 노인성 피부와 관련된 문제를 감소시킬 것이다.
실시예 3
이 연구의 목적은 배양된 인간 표피 케라티노사이트에서 시험 물질의 세포 내 항산화 활성을 과산화수소 손상(insult)에 대한 반응으로 평가하는 것이다. 세포를 시험 물질로 처리하고, H2DCFDA로 표지하고 나중에 과산화수소에 노출시켰다. 상대적인 형광은 세포 내 활성 산소 종 (ROS)에 대한 지표로서 측정되었다. 시험은 형광의 변화를 수반했으며, 이는 처리되지 않은 및 과산화수소-만 처리된 샘플과 비교할 때 세포 내 유효 항산화 활성에 비례한다.
시험 약제는 사용하기 전까지 실온에서 보관하였다. 10 mg/mL (1 % w/v)의 스톡(stock) 용액을 만들기 위해 샘플 분말을 포스페이트 완충액 (1xPBS)에 현탁하고, 1 분 동안 볼텍싱하고, 얼음 위에서 30-50 % 출력으로 10 분 동안 초음파 처리하고, 1000 rpm에서 10 분 동안 4 ℃에서 원심분리 하고, 상등액은 0.2 μm-주사기 필터를 사용하여 멸균하였다. 그와 같은 균질화된 용액을 각 시험 물질에 대해 제조하였다.
1차 정상 인간 표피 케라티노사이트 (NHEK)를 96-웰 플레이트에 접종하고 75-80 %에 도달할 때까지 배양하였다. 그 후에, 세포를 24 시간 동안 배양 배지에서 시험 물질을 사용하거나 사용하지 않고 처리하였다. 시험 물질은 0.05와 0.1 % (w/v)의 최종 농도를 만들기 위해 신선한 에피라이프(EpiLife) 배지에서 스톡 용액을 희석하여 (1:10) 만들었다. 처리되지 않은 세포는 시험 물질 없이 동일한 부피의 신선한 에피라이프 배지를 받았다. 24 시간 후에, 세포를 세포-투과성 2',7'-디클로로디히드로플루오레세인 디아세테이트 (H2DCFDA)로 60 분 동안 표지하고, 세포 내 ROS 수준을 과산화수소 처리 (250 μM)로 30 분 동안 유도하였다. 플레이트 판독기를 사용하여 492 nm (여기) 및 535 nm (방출)에서의 상대적인 형광을 측정하였다.
각 샘플에 대해 평균 형광을 계산하고 음성 대조군으로 사용된 미처리 (H2O2 없음) 세포와 비교하였다. H2O2-만 처리된 세포에 의해 생성된 결과는 과산화수소가 상대적인 형광을 현저하게 증가시켜 세포 내 ROS 수준의 증가를 나타냄을 보여주었다.
이 연구의 결과는 표 3에 나타내었다. 0.05 % (w/v) 및 0.1 % (w/v)에서 시험했을 때, 아모르 세코 잎 추출물 및 야콘 잎 추출물은 상대적인 형광의 현저한 감소를 생성하였다. 아모르 세코 잎 추출물은 세포 내 항-ROS 활성을 유도하여, 92-100 %로 억제했다. 야콘 잎 추출물은 49-67 % 억제로 이어졌다. 포르피리디움 바이오매스 추출물은 이 분석에서 평가될 수 없었는데, 그 형광 분석 결과가 강한 자가-형광을 기록하여, 이 분석의 판독을 가렸기 때문이다.
표 3a: H2DCFDA 형광 * 결과 요약
Figure pct00004
*나타낸 데이터는 두 개의 독립적인 실험으로부터의 상대적인 형광의 평균 ± SEM을 표현한다 (상이한 날짜에 동일한 실험 디자인 실행).
표 3b: ROS 억제 * 결과 요약
Figure pct00005
*나타낸 데이터는 두 개의 독립적인 실험으로부터의 ROS 억제의 평균 ± SEM을 표현한다 (상이한 날짜에 동일한 실험 디자인 실행).
이러한 결과는 인간 케라티노사이트를 야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말에 노출 시키면 과산화수소를 소거, 분해 또는 제거하는 내인성 세포 능력 향상을 초래한다는 것을 나타낸다. 이러한 결과는 이들 약제가 과산화수소 농도를 감소시키기 위해 피부, 두피, 모발 및 손발톱에 국소적으로 사용될 수 있으며, 그러므로 본 발명에서 유용하다는 것을 시사한다. 이전의 결과 (실시예 1 및 실시예 2)는 건조된 포르피리디움 바이오매스가 야콘 또는 아모르 세코 잎 추출물보다 카탈라아제 활성을 더 크게 증가시켰음을 보여주었기 때문에, 건조된 포르피리디움 바이오매스는 이 분석에서도 우수한 결과를 생성할 것으로 예상된다.
야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스 분말의 국소적 사용은 높은 내인성 과산화수소 수준에 의해 개시되고 향상되는 모발 회색화의 진행을 느리게 하고, 지연시키며 그리고 감소시킬 것이다. 유사하게, 야콘 잎 분말, 또는 아모르 세코 잎 분말, 또는 건조된 포르피리디움 바이오매스의 국소적 사용은 탈색되는 피부 병변의 진행 및 가시성, 피부, 두피, 모발 및 손발톱 노화의 징후, 및 노인성 피부와 관련된 문제를 감소시킬 것이다.
이들 연구에 대한 지식을 종합하면, 본 발명의 천연 약제로의 국소 치료는 약제 자체의 과산화수소 제거 활성을 가져올 것이고, 또한 케라티노사이트의 내인성 과산화수소 분해 또는 제거 활성을 추가적으로 향상시킬 것으로 기대된다. 이러한 약제의 효과는 약 0.001 % (천연 가루의 w/v) 이상부터의 농도에서 예상된다.
실시예 4
천연 추출물 겔 제형의 제조. 천연 추출물은 액체 샘플 (현탁액)로서 또는 예컨대 10-100 mg/mL (1-10 % w/v) 스톡 현탁액을 만들기 위해 물 또는 포스페이트 완충액 또는 다른 수용액에 현탁된 천연 공급원의 샘플 분말로서 제조될 수 있다. 상기 현탁액은 예컨대 1-10 분 동안 혼합되어야 하고 (예컨대 볼텍싱), 그 다음 천연 물질은 세포를 분해하기 위해 예컨대 4 ℃에서 크기-감소되어야 한다 (예컨대 압력 파괴, 제트 밀링, 볼 밀링, 또는 초음파 처리, 예컨대 10 분 동안 예컨대 30-50 % 출력으로). 더 큰 입자는 이어서 분리되어야 하고 (예컨대 4 ℃에서 10 분 동안 500-1000 rpm에서 원심 분리하여), 펠렛은 버려야 한다. 상등액은 제형에서 직접 사용될 수 있거나, 또는 추가의 크기 선택을 받을 수 있다 (예컨대 현탁액 또는 용액은 0.2 마이크로미터 공극 크기 필터를 사용하여 여과할 수 있음). 초래된 천연 물질의 균질화된 용액은 제형에 직접 사용될 수 있거나, 또는 추가로 건조 (예컨대, 동결건조, 스프레이 건조 또는 냉동-건조)될 수 있고, 건조 분말로서 제형에 사용된다.
본 발명에 적합한 일부 겔 조성물의 제한된 실시예는 표 4에 제시되어 있다. 방부제 (예컨대 페노닙(Phenonip)® 페녹시에탄올), 및/또는 킬레이팅제 (예컨대 디나트륨 EDTA), 및/또는 보습제 (예컨대 글리세린)를 천연 추출물 (액체 형태 또는 액체, 예컨대 물에 현탁된 분말)에 먼저 첨가할 수 있다. 이 단계에서 유용성 실리콘, 연화제, 점도 빌더(viscosity builder) 또는 유화제 (예컨대 시클로메티콘, 디메티콘, 폴리소르베이트 20, 알루미늄 녹말 옥틸 숙시네이트, 수크로스 코코에이트, PEG-6 카프르산/카프릴산 트리글리세라이드)를 또한 천연 추출물 혼합물에 추가로 첨가할 수 있다. 항-산화제 (예컨대 BHT)와 함께 증점제(들) (예컨대 세피겔®, 폴리아쿠올(PolyAquol) 2W)의 두 번째 혼합물을 제조하는 것이 제안된다. 그 다음 두 혼합물을 조합하고 균질할 때까지 혼합해야 한다. 다른 항-산화제 (예컨대 아스코르브산, 나트륨 아스코르빌 포스페이트, 락토페린, 또는 토코페롤)를 그 다음 조합된 혼합물에 첨가하고 골고루 혼합하여 초래되는 겔을 형성할 수 있다.
표 4
Figure pct00006
실시예 5
천연 추출물 수중유(oil-in-water) 제형의 제조. 천연 추출물은 실시예 4에서와 같이 제조될 수 있다. 수중유 에멀젼의 두 가지 예가 표 5에 제시되어 있다. 이 유형의 제형을 제조하기 위해서는 지질 상의 성분을 약 50-85 ℃에서 조합 및 혼합한 다음, 약 40-60 ℃로 냉각시켜야 한다. 별도의 용기에서, 증점제는 수성 천연 추출물 또는 물 또는 수용액에서 재구성된 분말 천연 추출물과 천천히 조합될 수 있다. 예컨대 약 10 분 동안 혼합한 후에, 나머지 수성상 성분을 첨가 및 혼합한 다음 지질상의 대략 가능한 최저 온도로 가열할 수 있다. 이어서, 두 상을 조합하고, 예컨대 약 10 분 동안 혼합하고, 실온으로 냉각시켰다. 추가적인 활성제는 양 상으로 또는 그들의 혼합 후에 조합될 수 있다. 과도한 열이 원하는 활성을 감소시킬 수 있으므로, 본 발명에 기술된 생물학적 활성은 관찰되어야 한다.
표 5
Figure pct00007
실시예 6
천연 추출물 유중수(water-in-oil) 제형의 제조. 천연 추출물은 실시예 4에서와 같이 제조될 수 있다. 유중수 제형의 두 가지 예가 표 6에 제시되어 있다. 이 유형의 제형을 제조하기 위해 유연제 (예컨대 미네랄 오일)가 용융될 수 있다. 이어서 다른 유(油)상 성분을 첨가할 수 있고, 혼합물을 예컨대 약 75 ℃로 가열하여 균일한 혼합을 가능하게 할 수 있다. 수성상 성분은 따로 혼합될 수 있고 액체 유상의 가능한 최저 온도로 가온되어야 하며 (천연 추출물의 생물학적 활성의 유지를 확인하면서), 그 다음 두 혼합물은 응고될 때까지 교반될 수 있다. 추가적인 활성제는 양 상으로 또는 그들의 혼합 후에 조합될 수 있다.
표 6
Figure pct00008
본 발명이 그의 상세한 설명과 함께 기술되었지만, 전술한 설명은 예시를 의도한 것이며 본 발명의 범위를 제한하지 않는 것으로 이해된다.

Claims (52)

  1. (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물, 또는 그의 조합 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 피부에 도포하는 것을 포함하는, 대상체에서의 저-색소침착 피부 병변의 출현을 감소시키는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 조성물은 야콘 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 조성물은 아모르 세코 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 조성물은 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 조성물은 L-메티오닌을 더 포함하는 것인 방법.
  6. 제1항에 있어서, (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 공급원은 L-메티오닌을 강화하는 조건 하에 재배된 것인 방법.
  7. 제1항에 있어서, 조성물은 하나 이상의 안정제, 유화제, 증점제, 투과 향상제, 방부제, 계면활성제, 킬레이팅제, 보습제 및 항-산화제를 포함하는 것인 방법.
  8. 제1항에 있어서, 수성 추출물은 0.2 마이크로미터 초과의 직경을 갖는 고체 입자가 실질적으로 없는 것인 방법.
  9. 제1항에 있어서, 저-색소침착 병변은 특발성 적상 저멜라닌증인 방법.
  10. 제1항에 있어서, 저-색소침착 병변은 백반증인 방법.
  11. 제1항에 있어서, 저-색소침착 병변의 진행을 느리게 하고, (ii) 자연적인 피부 색깔을 보호하고, (iii) 저-색소침착 병변의 진행을 역전시키고/시키거나 (iv) 저-색소침착 병변의 진행을 지연시키는 방법.
  12. 제1항에 있어서, 수성 추출물은 0.5 % (w/v)에서 2 nmol/min/ml 이상의 과산화수소 분해 활성 또는 (ii) 0.5 % (w/v)에서 내인성 케라티노사이트 과산화수소 분해 및 제거 활성을 적어도 50 % 향상시키는 활성을 갖는 것인 방법
  13. 제1항에 있어서, 조성물은 비-변성된 것인 방법.
  14. 약 65 세 초과인 대상체의 피부에 (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물, 또는 그의 조합 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 도포하는 것을 포함하는, 노인성 피부의 상태를 개선시키기 위한 방법.
  15. 제14항에 있어서, 조성물은 야콘 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  16. 제14항에 있어서, 조성물은 아모르 세코 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  17. 제14항에 있어서, 조성물은 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  18. 제14항에 있어서, 조성물은 L-메티오닌을 더 포함하는 것인 방법.
  19. 제14항에 있어서, (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 공급원은 L-메티오닌을 강화하는 조건 하에 재배된 것인 방법.
  20. 제14항에 있어서, 조성물은 하나 이상의 안정제, 유화제, 증점제, 투과 향상제, 방부제, 계면활성제, 킬레이팅제, 보습제 및 항-산화제를 포함하는 것인 방법.
  21. 제14항에 있어서, 수성 추출물은 0.2 마이크로미터 초과의 직경을 갖는 고체 입자가 실질적으로 없는 것인 방법.
  22. 제14항에 있어서, (i) 피부의 얇아짐을 느리게 하거나, 또는 (ii) 피부의 건조함을 감소시키거나, 또는 (iii) 피부 소양증을 감소시키거나, 또는 (iv) 혈종 진행의 중증도를 감소시키거나, 또는 (v) 피부의 표피상의 상처의 치유를 향상시키고/거나 (vi) 피부 취약성을 감소시키는 방법.
  23. 제14항에 있어서, 수성 추출물은 0.5 % (w/v)에서 2 nmol/min/ml 이상의 과산화수소 분해 활성 또는 (ii) 0.5 % (w/v)에서 내인성 케라티노사이트 과산화수소 분해 및 제거 활성을 적어도 50 % 향상시키는 활성을 갖는 것인 방법.
  24. 제14항에 있어서, 조성물은 비-변성된 것인 방법.
  25. (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물, 또는 그의 조합 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 국소 조성물.
  26. 제25항에 있어서, 야콘 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 국소 조성물.
  27. 제25항에 있어서, 아모르 세코 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 국소 조성물.
  28. 제25항에 있어서, 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 국소 조성물.
  29. 제25항에 있어서, L-메티오닌을 더 포함하는 국소 조성물.
  30. 제25항에 있어서, (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 공급원은 L-메티오닌을 강화하는 조건 하에 재배된 것인 국소 조성물.
  31. 제25항에 있어서, 하나 이상의 안정제, 유화제, 증점제, 투과 향상제, 방부제, 계면활성제, 킬레이팅제, 보습제 및 항-산화제를 포함하는 국소 조성물.
  32. 제25항에 있어서, 수성 추출물은 0.2 마이크로미터 초과의 직경을 갖는 고체 입자가 실질적으로 없는 것인 국소 조성물.
  33. 제25항에 있어서, 수성 추출물은 0.5 % (w/v)에서 2 nmol/min/ml 이상의 과산화수소 분해 활성 또는 (ii) 0.5 % (w/v)에서 내인성 케라티노사이트 과산화수소 분해 및 제거 활성을 적어도 50 % 향상시키는 활성을 갖는 것인 국소 조성물
  34. 제19항에 있어서, 비-변성된 국소 조성물.
  35. 제1항에 있어서, 조성물의 도포가 피부에서 수소 퍼옥시다아제의 농도를 감소시키는 방법.
  36. 제14항에 있어서, 조성물의 도포가 노인성 피부에서 수소 퍼옥시다아제의 농도를 감소시키는 방법.
  37. (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물, 또는 그의 조합 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 두피 또는 털이 없지 않는 피부에 도포하는 것을 포함하는, 모발 회색화를 감소시키는 방법.
  38. 제37항에 있어서, 두피에 도포하는 방법.
  39. 제37항에 있어서, 조성물은 야콘 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  40. 제37항에 있어서, 조성물은 아모르 세코 잎의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  41. 제37항에 있어서, 조성물은 포르피리디움 바이오매스의 수성 추출물 및 제약상 또는 미용상 허용되는 담체를 포함하는 것인 방법.
  42. 제37항에 있어서, 조성물은 하나 이상의 안정제, 유화제, 증점제, 투과 향상제, 방부제, 계면활성제, 킬레이팅제, 보습제 및 항-산화제를 포함하는 것인 방법.
  43. 제37항에 있어서, 조성물은 L-메티오닌을 더 포함하는 것인 방법.
  44. 제37항에 있어서, (i) 야콘 잎, (ii) 아모르 세코 잎, 또는 (iii) 포르피리디움 바이오매스의 공급원은 L-메티오닌을 강화하는 조건 하에 재배된 것인 방법.
  45. 제37항에 있어서, 수성 추출물은 0.2 마이크로미터 초과의 직경을 갖는 고체 입자가 실질적으로 없는 것인 방법.
  46. 제37항에 있어서, 조성물을 도포하는 것이 두피 및 털이 없지 않는 피부에서 수소 퍼옥시다아제 농도를 감소시키는 방법.
  47. 제37항에 있어서, (i) 모발 회색화를 느리게 하거나, (ii) 자연적인 모발 색깔을 보호하거나, (iii) 모발 회색화를 역전시키고/시키거나 (iv) 모발 회색화를 지연시키는 방법.
  48. 제37항에 있어서, 수성 추출물은 0.5 % (w/v)에서 2 nmol/min/ml 이상의 과산화수소 분해 활성 또는 (ii) 0.5 % (w/v)에서 내인성 케라티노사이트 과산화수소 분해 및 제거 활성을 적어도 50 % 향상시키는 활성을 갖는 것인 방법.
  49. 제37항에 있어서, 조성물은 비-변성된 것인 방법.
  50. 제14항에 있어서, 조성물은 약 0.001 % 내지 약 99 %의 수성 추출물을 포함하는 것인 방법.
  51. 제37항에 있어서, 조성물은 약 0.001 % 내지 약 99 %의 수성 추출물을 포함하는 것인 방법.
  52. 제25항에 있어서, 약 0.001 % 내지 약 99 %의 수성 추출물을 포함하는 국소 조성물.
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