KR20180055103A - 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 염증 조절 전사인자의 발현을 억제시킬 수 있다.
Description
본 발명은 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 여드름은 모피지선의 염증성 질환으로, 얼굴피부 모낭에 염증을 일으키는 매우 흔한 피부 질환이다.
여드름은 안드로겐 호르몬이 피지선을 과도하게 자극하여 증식시켜 피지 분비를 증가시키고 여기에 피지선 주변의 모낭을 구성하는 피부세포의 탈락이 빠르게 진행되어 모낭을 통해 피부 밖으로 채 빠져 나가지 못한 피지와 죽은 피부세포가 서로 뭉치고 엉켜 모낭을 막음으로써 여드름의 전형적인 병변인 면포로 발생되며, 정상적으로 피부에 존재하는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)와 같은 박테리아가 막혀 있는 모낭 내에서 피지를 섭취하여 빠르게 증식하면서 유리 지방산(Free fatty acid) 등의 여러 화학물질을 방출하여 주위 피부 조직에 다양한 염증 반응을 발생시키므로써 여드름을 유발한다.
여드름을 치료하기 위한 방법으로 경구제 또는 외용제 형태의 약제를 사용하였는데, 예를 들면, 항남성 호르몬제를 사용한 피지생성의 억제, 스테로이드 호르몬 및 비스테로이드성 소염 진통제의 항염증 작용에 의한 치료를 위하여 레소치놀, 유황, 살리실산, 벤조일퍼옥사이드, 레티노익산이나 이소트레티노안과 같은 항균제 및 각질박리제, 테트라사이클린, 에리스로마이신, 메크로사이클린 등의 항생물질에 의한 프로피오니박테리움 아크네균(Propionibacterium acnes)의 활성억제 방법 등이 있다. 한편, 최근에는 이용한 방법도 많이 사용되고 있다.
그러나, 상기에서 설명한 방법들은 여드름 치료에 어느 정도 성과를 거두고 있으나 효과적인 면이나 부작용 측면 그리고 사용성 면에서 몇 가지 문제점들을 가지고 있다. 즉, 호르몬제의 사용은 표피의 생장억제나 기타 호르몬 남용 부작용이 보고되어 있으며, 레티노익산과 벤조일퍼옥사이드 등의 각질박리제는 각질박리에 따른 피부의 자극성과 접촉성 피부염의 우려가 있고, 테트라사이클린을 위시한 항생물질은 내성균의 출현 및 광과민성 작용의 가능성이 알려져 있다. 특히, 이소트레티노인은 태아에 최기성 작용이 있음이 알려져 있다.
이에 대해, 최근에는 식물을 비롯한 천연자원으로부터 상기 부작용들을 줄이고 지속적으로 사용할 수 있으며 인체에 무해하면서도 강력한 항여드름균 효과를 갖는 유효성분들을 탐색하는 연구가 활발하게 진행되고 있다.
본 발명은 인체에 무해하여 부작용이 발생하지 않는, 천연 추출물인 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료 또는 예방용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 원인균에 대한 항균용 조성물을 제공한다.
본 발명의 여드름 피부 개선용 화장료 조성물은 천연물인 유칼립투스 추출물을 포함하여 부작용이 없는 효과를 지니고 있다.
또한, 본 발명의 여드름 피부 개선용 화장료 조성물은 여드름에 의해 발생하는 염증 반응을 억제하는 효과를 지니고 있다.
도 1은 유칼립투스 추출물의 농도에 따른 세포 생존율을 측정한 그래프이다.
도 2는 MTT assay를 이용한 유칼립투스 추출물의 농도에 따른 세포 생존율을 측정한 그래프이다.
도 3은 Raw264.7 세포주에서 프로피오니박테리움 아크네스 농도에 따라 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-2, NLRP3, NLRP1 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 증가하는 것을 나타낸 RT-PCR 결과이다.
도 4는 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-2, NLRP3 및 TNF-α의 mRNA 발현량을 측정한 RT-PCR 결과이다.
도 5는 Raw264.7 세포주에 NK-κB 발광효소 리포터 벡터(luciferase reporter vector) 및 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤의 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 6은 Raw264.7 세포주에 NFAT 발광효소 리포터 벡터(luciferase reporter vector) 및 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤의 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 7은 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, NK-κB 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 8은 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, NFAT 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 2는 MTT assay를 이용한 유칼립투스 추출물의 농도에 따른 세포 생존율을 측정한 그래프이다.
도 3은 Raw264.7 세포주에서 프로피오니박테리움 아크네스 농도에 따라 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-2, NLRP3, NLRP1 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 증가하는 것을 나타낸 RT-PCR 결과이다.
도 4는 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, 염증성 사이토카인인 IL-1β, IL-2, NLRP3 및 TNF-α의 mRNA 발현량을 측정한 RT-PCR 결과이다.
도 5는 Raw264.7 세포주에 NK-κB 발광효소 리포터 벡터(luciferase reporter vector) 및 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤의 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 6은 Raw264.7 세포주에 NFAT 발광효소 리포터 벡터(luciferase reporter vector) 및 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤의 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 7은 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, NK-κB 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
도 8은 Raw264.7 세포주에 유칼립투스 추출물을 전처리한 후, 프로피오니박테리움 아크네스를 처리한 뒤, NFAT 발광효소 활성을 측정한 그래프이다.
이하, 본 발명을 보다 자세히 설명한다.
본 발명은 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
여드름의 주요한 원인균으로 통성 혐기성 그람 양성균인 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes, P. acnes)가 알려져 있다.
염증성 여드름 치료를 위하여 상기 프로피오니박테리움 아크네스의 증식을 억제해야 하며, 증식 억제를 위하여 항생제 복용 등의 방법이 사용되어 왔으나, 상기 방법은 치료 효과는 증진되더라도 부작용이 발생하는 문제가 있다.
따라서, 본 발명에서는 부작용이 발생하지 않는 천연물을 이용하여 여드름을 치료 또는 예방하고자 하였으며, 구체적으로 천연물인 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 하였다.
여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)의 염증반응에 기인한 것으로, 유칼립투스 추출물은 상기 염증반응에서 염증 조절 전사인자의 발현을 억제시킴으로써, 여드름을 치료 또는 예방할 수 있어 여드름 피부를 개선시킬 수 있다.
상기 염증 조절 전사인자는 NK-κB(Nuclear factor kappa B) 또는 NFAT(Nuclear factor of activated T-cells)이며, 유칼립투스 추출물에 의하여 상기 염증 조절 전사인자의 발현이 억제된다.
또한, 상기 염증 조절 전사인자의 발현이 억제됨에 따라 상기 프로피오니박테리움 아크네스에 의해 유발된 염증성 사이토카인의 mRNA 발현이 억제될 수 있으며, 상기 염증성 사이토카인은 IL-1β(인터루킨-1β), IL-2(인터루킨-2), NLRP3(nucleotide-binding domain, leucine-rich repeats containing family, pyrin domain-containing-3) 및 TNF-α(tuner necrosis factor-α)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함한다.
즉, 유칼립투스 추출물은 염증 조절 전사인자의 발현을 억제시키고, 그에 따라 염증성 사이토카인의 mRNA 발현이 억제됨으로써 여드름에 의해 유발되는 염증을 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명에서 유칼립투스 추출물은 통상의 추출 방법으로 유칼립투스 추출물을 제공할 수 있으며, 상기 추출물은 여드름 피부 개선용 화장료 조성물에 유효성분으로 포함된다.
한편, 본 발명에서 "유효성분으로 포함된다"는 의미는 본 발명의 여드름 피부 개선용 화장료 조성물로부터 여드름 피부 개선의 효과를 나타낼 수 있는 정도로, 상기 조성물에 유칼립투스 추출물이 첨가되는 것을 의미한다.
상기 유칼립투스 추출물은 유칼립투스에 물, 유기용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 사용하여 추출할 수 있으며, 이 때 추출용매는 유칼립투스 분말의 약 15 내지 30 중량배를 사용하며, 바람직하게는 약 15 내지 25 중량배를 사용한다. 또한, 10 내지 30℃의 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출 방법을 이용할 수 있다.
또한, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 1,3-부틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하며, 바람직하게는 에탄올을 포함한다.
또한, 본 발명의 유칼립투스 추출물을 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 포함할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
상기 여드름 피부 개선용 화장료 조성물의 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 또는 바디에센스 등의 제형일 수 있다.
또한, 본 발명은 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
상기 여드름 치료 또는 예방용 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 포함할 수 있다. 상기 의약품제 조성물은 정제, 캅셀제, 산제, 과립, 현탁제, 유제, 시럽제, 유탁제, 경고제, 연고제, 스프레이제, 오일제, 겔제, 주정제, 틴크제, 욕제, 리니먼트제, 로션제, 패취제, 패드제 또는 크림제 등으로 제형화될 수 있다.
상기 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 비경구 투여, 보다 바람직하게는 도포에 의한 국부 투여 방식으로 적용될 수 있다.
상기 의약품제 조성물의 유효성분인 유칼립투스 추출물의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 수 있다. 상기 조건에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있다. 일반적으로 투여량은 0.0001 mg/kg/일 내지 대략 2000 g/kg/일 범위이다.
또한, 본 발명은 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 원인균에 대한 항균 조성물에 관한 것이다.
상기 유칼립투스 추출물이 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항균 능력을 지니고 있어 여드름 항균 조성물로 사용할 수 있다.
이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
실시예
1. 유칼립투스 추출물 제조
유칼립투스를 세절한 후 50.0mg에 70% 에탄올 1,000mL을 이용하여 유칼립투스 추출물을 제조하고 추출물을 감압 농축 또는 동결건조를 통하여 분말화하였다. 분말화된 천연 추출물을 세포에 처리하기 위해 50mg을 DMSO 용매 1mL에 첨가하여 유칼립투스 추출물 50mg/mL을 제조하였다.
제조예
1.
프로피오니박테리움
아크네스 준비
프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes, P.acnes)의 membrane fraction을 분리하기 위해 Focus™ Membrane Protein Extraction Kit (GBiosciences)를 이용하였다. 먼저 MPE Buffer-을 넣어준 후 sonicator를 이용하여 P.acnes의 세포를 용균(lysis)하였다. 그 다음 MPE Buffer-를 넣어주어 원심분리한 후 상층액만을 분리하여 P.acnes를 준비하였다.
제조예
2.
Raw264
.7 세포 배양
Raw264.7 세포주는 10% fetalbovine serum (FBS), penicillin/streptomycin을 첨가한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)배지를 사용하여 37, 5% CO2 incubator에서 배양하였다.
실험예
1. 세포독성 측정
1-1.
혈구계산판
측정
제조예 2에서 제조한 Raw264.7 세포주를 24시간 동안 배양한 후, 상기 실시예 1에서 제조한 유칼립투스 추출물 25, 50, 100, 200 및 500μg/mL 농도의 배양액에서 12시간 동안 배양한 후, 혈구계산판(hemocytomerter)를 이용하여 trypan dye exclusion 방법에 의해 세포생존율을 측정하였다(도 1).
유칼립투스 추출물을 포함하지 않은 배양액에서 배양된 세포주를 대조군으로 하였으며, 상기 세포주의 세포생존율을 100%로 하였을 때, 유칼립투스 추출물 50μg/mL의 농도까지는 세포 생존율이 80% 이상 나타났으나, 100μg/mL의 농도에서는 세포의 생존율이 70% 이하로 나타났다.
1-2.
MTT
assay
제조예 2에서 제조한 Raw264.7 세포주를 96 well plate에 분주하여 24시간 배양한 후, 상기 실시예 1에서 제조한 유칼립투스 추출물 25, 50, 100, 200 및 500μg/mL 농도의 배양액에서 12시간 동안 배양하였다.
각각의 well에 MTT stock solution(5mg/mL)을 25mL씩 넣고, 37, 5% CO2 incubator에서 1시간 동안 배양한 후, DMSO를 200μL/well씩 넣어 10분간 방치하며 Formazan을 용해하였다. 그 후, Microplate Reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다(도 2).
MTT assay의 결과도 상기 혈구계산판과 동일한 결과를 보였다.
따라서, 유칼립투스 추출물은 50μg/mL 이하의 농도에서 세포독성이 낮아 세포 생존율에 큰 영향을 주지 않음을 알 수 있었다.
상기 실험 결과를 바탕으로 Raw264.7 세포주를 이용한 항염증 효과 실험에서 최대 농도를 50μg/mL로 설정하여 실험을 수행하였다.
실험예
2. 여드름균에 의한 염증성 사이토카인의
mRNA
발현량 측정
우선, mRNA를 측정하기 위한 RT-PCR의 측정 방법은 하기와 같다.
배양한 세포에서 배양액을 제거하고, RiboEX(GeneAll) 1 mL을 처리한 후, 상온에서 5분간 방치하였다. 200μL의 클로로포름(chloroform)을 샘플에 첨가하여 강하게 섞어준 후, 원심분리하여 상층액만 새로운 튜브에 옮겨 이소프로판올(isopropanol)을 500μL 첨가하고 10분간 상온에서 방치 후 다시 원심분리 하였다. 분리한 RNA를 디에틸피로카보네이트(diethyl pyrocarbonate)로 처리된 증류수(RNase-free water)에 녹여 UV spectrometer를 이용하여 RNA를 정량하였다.
분리한 RNA를 이용하여 cDNA 합성을 위해 RNA 1 μg을 0.1μg의 oligo(dT)15(promega), 10mm Tris-HCl(pH8.3), 50mM MgCl2, 1mM dNTP와 20U의 RNaseOUT(ribonuclease inhibitor: Invitrogen)을 모두 포함하는 버퍼 20μL를 PCR 튜브에 넣고 37℃에서 1시간 동안 역전사, 95℃에서 10분 동안 인큐베이션 시킨 후, 4℃에서 안정화시켰다.
역전사를 통해 얻어진 cDNA를 PCR 버퍼(200 μM dNTP, 50mM KCl, 2mM NgCl2, 10mM Tris)에 넣고, 염증성 사이토카인의 sense 및 antisense 프라이머를 각각 10pmol의 농도로 넣은 후 PCR을 수행하였다.
염증성 사이토카인의 프라이머를 하기 표 1에 나타내었다.
mRNA | Sequence(5'-> 3') | 서열번호 | |
β-actin | Forward | 5'-CATGTTTGAGACCTTCAACACCCC-3' | 서열번호 1 |
Reverse | 5'-GCCATCTCTTGCTCGAAGTCTAG-3' | 서열번호 2 | |
IL-1β | Forward | 5'-ACGTGTTCTTTGAGGCTGAC-3' | 서열번호 3 |
Reverse | 5'-CTTCTTTGGGTATTGTTTGG-3' | 서열번호 4 | |
IL-2 | Forward | 5'-CCCAAGAAGGCCACACT -3' | 서열번호 5 |
Reverse | 5'-TGCTGATTAAGTCCCTGGGTCTTA -3' | 서열번호 6 | |
NLRP3 | Forward | 5'-ATGGTATGCCAGGAGGACAG-3' | 서열번호 7 |
Reverse | 5'-ATGCTCCTTGACCAGTTGGA-3' | 서열번호 8 | |
NLRP1 | Forward | 5'-ACCTGGTCCCCAATGACTGC-3' | 서열번호 9 |
Reverse | 5'-GATTCCCCAGGGCTTCGGTA-3' | 서열번호 10 | |
TNF-α | Forward | 5'-TAGCCCACGTCGTAGCAAAC-3' | 서열번호 11 |
Reverse | 5'-GGAGGGTGACTTTCTCCTGG-3' | 서열번호 12 |
1X TAE buffer와 EtBr(ethidium bromide)로 1% agarose gel을 만들고 각 well에 PCR 산물과 loading dye를 잘 섞어 10μL loading한 후 전기영동을 수행하였다. 전기영동 후 UV하에서 mRNA의 발현 양상을 확인하였다.
2-1. 여드름균에 의한 염증성 사이토카인의 mRNA 발현량 측정
제조예 2에서 배양한 Raw264.7 세포주에, 제조예 1에서 제조한 프로피오니박테리움 아크네스(P. acnes)를 10, 20 및 50μg/mL의 농도로 처리하고, 6시간 동안 배양한 후, 상기 RT-PCR 방법을 이용하여 염증성 사이토카인의 mRNA 발현량을 측정하였다.
그 결과, 염증반응이 유도된 Raw264.7 세포주에서 염증성 사이토카인으로 알려진 IL-1β, IL-2, NLRP3, NLRP1 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 P. acnes 를 처리한 농도에 의존적으로 증가함을 확인할 수 있었다(도 3).
2-2. 유칼립투스 추출물에 의한 염증성 사이토카인의 mRNA 발현량 측정
프로피오니박테리움 아크네스(P. acnes)에 유도되는 염증 반응을 유칼립투스 추출물이 제어할 수 있는지 확인하기 위하여, 제조예 2에서 배양한 Raw264.7 세포주에 실시예 1에서 제조한 유칼립투스 추출물을 전처리하였다. 그 후, 제조예 1에서 준비한 P. acnes를 50μg/mL의 농도로 처리하고, 6시간 뒤 염증성 사이토카인의 mRNA 발현량을 측정하였다.
그 결과, P. acnes에 의해 증가했던 IL-1β, IL-2, NLRP3 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 크게 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 4).
따라서, 유칼립투스 추출물이 염증성 사이토카인의 발현량을 감소시켜 여드름균에 의한 염증 반응을 억제할 수 있다는 것을 확인할 수 있었다.
실험예 3. 염증 조절 전사인자의 발현 측정
NFAT 및 NF-κB는 전사인자로 염증 반응과 같은 세포 자극에 의해 세포질에서 핵 내로 이동하며 활성되어 염증성 사이토카인의 발현을 증가시키는 것을 알려져 있다. P. acnes의 처리 및 유칼립투스 추출물이 전사인자의 활성을 조절하는지 확인하고자 하였다.
3-1. 여드름균의 의한 염증 조절 전사인자의 발현 측정
상기 제조예 2에서 배양한 Raw 264.7 세포주에 NFAT 및 NF-κB의 luciferase reporter vector 각각을 transfection한 후 24시간 뒤, 제조예 1에서 준비한 P. acnes를 50μg/mL로 처리하고 6시간 배양하였다. 세포를 용균(lysis)한 후, luminometer를 이용하여 발광효소 활성(luciferase activity)을 측정하였다(도 5 및 6).
그 결과, P. acnes를 처리하지 않은 것에 비하여 P.acnes를 처리한 결과에서 발광효소 활성이 현저히 증가함을 볼 수 있었으며, 이는 NFAT 및 NF-κB의 활성이 증가됨을 의미하는 것이었다.
따라서, P. acnes로 염증이 유도된 Raw264.7 세포주에서 활성화된 전사인자들인 NFAT 및 NF-κB의 조절을 통해 염증성 사이토카인(IL-1β, IL-2, NLRP3, NLRP1 및 TNF-α)의 발현이 증가함을 알 수 있다.
3-2. 유칼립투스 추출물에 의한 염증 조절 전사인자의 발현 측정
P. acnes에 의한 염증 반응에서 유칼립투스 추출물에 의해 염증성 사이토카인의 발현 감소가 NFAT 및 NF-κB 발현과 관련이 있는지 확인하고자 하였다.
제조예 2에서 배양한 Raw264.7 세포주에 실시예 1에서 제조한 유칼립투스 추출물을 30분 동안 전처리하였다. 그 후, 제조예 1에서 준비한 P. acnes를 50μg/mL의 농도로 처리하고 6시간 배양하였다. 세포를 용균(lysis)한 후, luminometer를 이용하여 발광효소 활성(luciferase activity)을 측정하였다(도 7 및 8).
그 결과, P. acnes에 의해 증가했던 NFAT 및 NF-κB의 reporter gene activity가 유칼립투스 추출물에 의해 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
따라서, 유칼립투스 추출물이 NFAT 및 NF-κB와 같은 염증 조절 전사인자들의 발현을 억제시킴으로써, 염증성 사이토카인의 발현을 감소시킬 수 있음을 확인할 수 있었다.
유칼립투스 추출물은 Raw264.7 세포주에 염증 관련 전사인자들의 발현을 억제함으로써, 여드름균(P. acnes)에 의해 유발된 염증성 사이토카인의 mRNA 발현을 감소시킬 수 있다. 따라서, 유칼립투스 추출물은 여드름에 의해 유발되는 염증을 완화시키는 효능이 있음을 알 수 있었다.
Claims (13)
- 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 피부 개선용 화장료 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)의 염증반응에 기인한 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 상기 프로피오니박테리움 아크네스에 기인한 염증반응에서, 상기 유칼립투스 추출물이 염증 조절 전사인자의 발현을 억제시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 3에 있어서, 상기 염증 조절 전사인자는 NK-κB 또는 NFAT인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 3에 있어서, 상기 염증 조절 전사인자의 발현 억제는 염증성 사이토카인의 mRNA 발현을 억제시키는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 염증성 사이토카인은 IL-1β, IL-2, NLRP3 및 TNF-α로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 물, 유기용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 7에 있어서, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부틸렌글리콜, 글리세린, 1,3-부틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 또는 바디에센스의 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료 또는 예방용 조성물.
- 청구항 10에 있어서, 상기 여드름 치료 또는 예방 조성물은 정제, 캅셀제, 산제, 과립, 현탁제, 유제, 시럽제, 유탁제, 경고제, 연고제, 스프레이제, 오일제, 겔제, 주정제, 틴크제, 욕제, 리니먼트제, 로션제, 패취제, 패드제 또는 크림제로 제형화된 것을 특징으로 하는 조성물.
- 유칼립투스 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 원인균에 대한 항균용 조성물.
- 청구항 12에 있어서, 상기 여드름 원인균은 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)인 것을 특징으로 하는 항균용 조성물.
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CN109481353A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-03-19 | 浙江神首生物科技有限公司 | 一种凝时肌透紧致眼霜及其制备方法 |
KR20200114768A (ko) * | 2019-03-29 | 2020-10-07 | 한국수력원자력 주식회사 | 비만세포를 이용한 알러지 반응 시스템에서 전사인자인 Nr4a2를 이용한 사이토카인(cytokine) 조절방법. |
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- 2016-11-16 KR KR1020160152507A patent/KR20180055103A/ko unknown
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