KR20170106103A - 돌콩 발효물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물 - Google Patents
돌콩 발효물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 특히 돌콩(Glycine soja)을 발효시킨 돌콩 발효물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것이다. 본 발명에서 db/db생쥐모델을 이용한 혈중 포도당 측정실험, 혈청중 중성지방, 총콜레스테롤 등의 다양한 시험을 통해 확인한 결과, 본 발명에 따라 얻어진 돌콩 발효물은, 돌콩을 발효시키지 않은 증자분말 및 추출물에 비해서는 물론 기존 항당뇨 약물로 사용되고 있는 메트포르민에 비해서도 월등한 혈당강하 효과, 지질대사 개선 등의 당뇨 합병증 개선 효과가 있었다. 본 발명의 돌콩 발효물은 당뇨병 및 당뇨 합병증의 예방 및 치료(개선)를 위해 유용하게 사용될 수 있으며, 치료 또는 예방 의약품, 기능성 식품 등으로 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 특히 돌콩을 발효시킨 돌콩 발효물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
당뇨병(diabetes mellitus)은 인슐린 분비가 감소되거나 인슐린의 기능이 저하되어 체내의 세포가 당을 이용하지 못하여 고혈당이 나타나는 질환이다. 당뇨병의 경우 인슐린을 비롯한 호르몬 불균형으로 탄수화물을 비롯한 단백질, 지질 및 전해질 대사 등 생리적 대사 조절 기능 이상으로 고혈당의 특징적인 증세를 나타내며, 이러한 고혈당 증세가 지속되면 혈액순환 장애, 망막손상, 신경세포 손상, 신장 기능 저하, 혈관 합병증 등을 유발하고 심각한 만성적 합병증을 가져오게 된다.
특히, 정상인에 비해서 당뇨환자에 있어서는 동맥경화증, 뇌경색, 뇌혈전, 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 발병율이 높다(Fuller, J.H., Lancet, 1, pp1373-1376, 1980). 당뇨병환자는 관상동맥질환이나 뇌혈관질환에 의한 사망 위험률이 높고, 이는 고혈압과 고지혈증, 비만 등에 의해 흔히 발병된다(허갑범. 한국영양학회. 초록발표논문집. pp15-18, 1984). 제2형 당뇨환자 중 67%가 한 종류 또는 그 이상의 지질대사 이상을 가지고 있다고 보고되었다(Harris, M.I. Diabetes Care, 23, pp754-758, 2000). 제2형 당뇨환자는 중성지방 및 콜레스테롤 농도가 증가하고 HDL-콜레스테롤이 감소하는 지질대사의 이상이 일어나며(Goldberg, R.B. Diabetes Care, 4, pp561-572, 1981), 이것은 당뇨 합병증인 관상동맥 질환의 원인이 된다(Reaven, J.W. Am. J. Med., 83, pp31-40, 1987).
당뇨병은 췌장 세포에서 분비되는 인슐린의 분비 장애 및 작용 부족에 의해 유발된 대사장애로 정의되며 포도당의 과잉생산, 체지방의 분해 및 단백질의 낭비를 수반하고 글루카곤의 분비를 비정상적으로 항진시켜 대사상의 혼란을 야기시킨다(Abrams, J.J., Ginsberg, H, et al., Diabetes, 31, pp903-910, 1982).
진성 당뇨병 (Diabetes mellitus)은 두 가지 유형으로 특징 지워지는데, 제 1형 당뇨병 (Type 1 diabetes mellitus)은 혈액 내의 글루코스 (Glucose) 조절 호르몬인 인슐린 (Insulin)의 분비 결핍으로 야기되며, 주로 10~20대의 젊은 연령층에서 발병되기 때문에 소아당뇨병 (Juvenile diabetes)이라 불리기도 한다. 제2 형 당뇨병 (Type 2 diabetes mellitus)은 주로 40대 이후에 발병되며, 우리나라 당뇨병 환자의 대부분을 차지한다. 제2형 당뇨병은 성인형 당뇨병이라 불리며 발병원인은 아직 명확히 밝혀져 있지 않으나, 유전적인 요인과 환경적 요인이 함께 관여되어 발생하는 것으로 알려져 있다. 제2형 당뇨병의 병인으로는, 췌장베타세포에서의 인슐린 분비 장애와 표적세포에서의 인슐린 작용 결함 (인슐린 저항성)이 모두 관찰된다.
당뇨병 치료에 있어서 가장 중요한 목표는 혈당치를 가능한 정상치에 가깝게 조절하는 것인데, 공복혈당과 함께 식후 혈당 조절이 당뇨병 증세의 개선과 합병증의 예방 및 치료에 있어서 중요하며, 치료 방법으로 약물요법, 식이요법 및 운동요법이 있다.
현재 제 1형 및 제2형 당뇨병환자에게 사용되는 경구혈당강하제로 알파-글리코시다제 (Alpha-glucosidase) 억제제, 설포닐우레아 (Sulfonylurea) 제제 및 비구아니드 (Biguanide) 제제가 있다. 알파-글루코시다제 억제제는 섭취한 식이 중의 탄수화물의 소화와 흡수를 지연시켜 식후 혈당 및 혈중 인슐린의 상승을 감소시킴으로써 당뇨병의 치료효과를 나타내는데, 고인슐린혈증이나 저혈당을 유발하지 않고, 인슐린분비를 촉진시키며 글루카곤 분비를 억제하는 글루카곤-유사-펩티드-1 (Glucagon-like peptide-1)의 소장에서의 분비를 촉진하는 장점을 가지고 있다(Mooradian, A.D., Thurman, J.E. et al., Drugs, 57, pp19-29, 1999; Baron, A.D. et al., Diabetes Research and Clinical Practice, 40, ppS54-S55, 1998). 그러나 알파-글리코시다제 저해제를 장기 복용한 경우, 일부 환자에 있어서 복부 팽만감, 구토, 설사 등 부작용을 나타낼 수 있어 그 사용이 제한될 수 있다 (Hanefeld, M. et al., Journal of Diabetes and its Complications, 12, pp228-237, 1998). 알파-글루코시다제 억제제로 현재 임상에서 사용하고 있는 것으로는, 아카보스 (Acarbose), 보글리보스 (Voglibose) 및 미글리톨 (Miglitol) 등이 있다. 설포닐우레아 제제는 인체가 인슐린을 더 많이 배출하도록 하고, 인체가 인슐린에 반응하는 것을 도와주며, 또 간에 저장된 글루코오스를 혈액 속에 내보내는 것을 막아줌으로써 혈당을 낮춰준다. 설포닐우레아 제제의 부작용으로는, 변비, 설사, 구역, 구토 등의 위장관 장해, 가려움, 두드러기 등의 피부반응, 체중 증가 등이 보고되어 있다. 이 계열에 속하는 약으로는, 글리메피리드(아마릴™), 글리피자이드(글루코트롤™), 글리부라이드(다이아베타™) 등이 있다. 비구아니드 (Biguanide) 제제로는 메트포르민(글루코파지™)이 현재 시판되고 있는데, 비구아니드 제제는 간이 저장 포도당을 보다 서서히 내놓게 하고 또한 인체가 인슐린에 반응하는 것을 도와줌으로써 혈당을 보다 일정하게 유지시켜 준다. 비구아니드 제제의 부작용으로는, 구역, 팽만감, 갑갑함, 설사, 식욕부진 등이 보고되어 있다.
돌콩 (Glycine soja Siebold & Zucc.)은 콩과 (Zingiberaceae)에 속하는 덩굴성 1년초로 길이는 2m이며 전체에 갈색의 거친 털이 난다. 잎은 호생이고 잎자루는 길며 3출엽이다. 작은잎은 타원상 피침형으로 끝이 둔하고 길이는 3-8cm이고 가장자리는 밋밋하며, 턱잎은 넓은 피침형이다. 꽃은 7~8월에 홍자색으로 피는데 총상꽃차례[總狀花序]는 길이 2~5cm이다. 꽃받침은 종형이고 털이 있으며 5개로 갈라진다. 화관은 나비모양이다. 수술은 10개로서 각각 2개로 갈라진다. 열매는 2~3cm로 털이 많고 콩꼬투리와 비슷하며, 종자는 타원형이거나 신장형 비슷하며 약간 편평하다 (이영노. 원색한국식물도감, (주)교학사, 403p, 1998). 돌콩은 이명으로 갱미두, 녹곽으로 불리며, 생약명으로는 야대두등(野大豆藤), 야료두(野料豆)로 불리운다 (안덕균, 한국본초도감, 교학사, 728p, 2000). 돌콩은 콩(Glycine max)의 기원종으로 여겨지고 있으며, 현재 식용 가능한 것으로 인정되고 있으나 실제 식용으로 이용되는 경우는 거의 없으며, 대부분 자연계에서 자생하고 있고 강한 유전자를 지니고 있어 콩의 유전적 개량 연구 등을 위해 일부 재배되기도 한다.
콩과식물의 항당뇨효과와 관련하여, 한국 공개특허 제10-2006-0107183호에서는, 쥐눈이콩 또는 쥐눈이콩을 식초에 10일 정도 담가 절인 쥐눈이식초콩의 분말이나 추출물의 항당뇨효과를 개시하고 있다. 쥐눈이콩은 콩과의 다년생 만초로 서목태, 여두 등으로도 불리는데, 예로부터 약성이 좋아 약콩으로 사용되고 있다. 특히 신장병, 혈액순환 등에 좋고 해독작용이 있으며 소갈증에 사용하는 것으로 알려져 있는데, 본초강목 등에도 약으로 기재되어 있다. 쥐눈이콩은 앞에서 설명한 돌콩에 비해 콩이 커 외관상으로도 돌콩과 잘 구분이 되는데, 돌콩과 달리 현재 식용으로도 많이 사용되고 있다.
한국 공개특허 제10-2009-004503호에서는, 검정콩(Glycine max) 껍질로부터 추출한 안토시아닌을 유효성분으로 함유하는 당뇨 예방 및 치료용 약학조성물을 개시하고 있는데, 검정콩으로부터 추출한 안토시아닌이 체내 글루코스를 감소시키거나 또는 췌장세포의 자멸사를 억제함으로써 당뇨를 예방 또는 치료하는 효과가 있다고 기재하고 있다. 한국 공개특허 제10-2010-0127728호에서는, 저농도 저급 알코올로 추출한 콩 추출물 또는 그 분획물이 혈액순환 개선효과가 우수하고, 비만상태를 개선시키며, 당뇨, 고지혈증 등의 예방, 증상 완화 또는 치료에 효과적이라고 기재하고 있다. 한국 공개특허 제10-2006-0107183호에서는, 쥐눈이콩 및 쥐눈이식초콩 분말 또는 추출물이, 당뇨가 유발된 실험쥐에서 높은 인슐린감수성을 가짐으로써 식이이용효율증가, 혈당강하효과 및 장기의 무게를 감소시키는 등의 효과를 나타낸다고 기재하고 있다. EP 2172206에서는, 콩과식물로부터 당뇨병 치료효과가 있는 세퀴이톨(sequoyitol) 함유 추출물을 얻는 방법을 개시하고 있다. 그러나 상기 문헌들에 개시된 콩과식물의 항당뇨효과는, 유효성분으로 알려진 안토시아닌이나 세퀴이톨에 기반한 것으로, 콩 추출물 자체는 유의성이 없거나 낮은 혈당강하효과를 보이는 정도에 불과하다.
본 출원인에 의한 선등록 특허인 한국 등록특허 제10-1400368호에서는, 열처리된 돌콩 분말 또는 돌콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물을 개시하고 있다.
한국 등록특허 10-1400368에서는 돌콩 증자분말 또는 추출물을 생체에 부작용이 없으면서 효능이 우수한 새로운 혈당강하 소재로 제공한다. 돌콩 증자분말 및 추출물은 천연식품 소재로서 인체에 부작용이 없고 안전하면서도 기존에 항당뇨성 건강기능식품으로 사용되던 바나바 잎에 비해 월등한 혈당강하 효과 및 지질대사 개선 등의 당뇨 합병증 개선 효과를 나타내고, 항당뇨 약물인 메트포르민과도 비등한 정도의 효과를 나타내었다. 이 특허에 개시된 돌콩 증자분말 및 추출물의 효과는 기존에 콩과식물에 대해 알려져 있는 항당뇨 효과를 훨씬 뛰어넘는 새로운 효과이다.
본 발명에서는 한국 등록특허 제10-1400368호에 개시된 돌콩의 효과를 향상시켜 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료 효과를 더욱 크게 높이는 것을 목적으로 하며, 돌콩이 단독으로 뛰어난 항당뇨성 의약품 및 건강기능식품으로 사용될 수 있도록 하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에서는,
돌콩(Glycine soja)을 발효시킨 돌콩 발효물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물을 제공한다.
상기 발효는 본 발명의 일 실시예에서 미생물을 접종하고 발효시키는 방법으로 실시될 수 있다. 또한, 상기 발효는 본 발명의 다른 실시예에서 미생물의 의도적인 접종 없이 자연 발효시키는 방법으로 실시될 수 있다.
상기 돌콩 발효물은 바람직하게는,
(a) 생돌콩, 열처리 또는 비열처리된 건조돌콩, 돌콩 추출물, 열처리 또는 비열처리된 돌콩 분쇄물 및 이들을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상을 발효시킨 것;
(b) (a)에서 얻은 발효물을 용매로 추출하여 얻은 추출물; 및
(c) (b)에서 얻은 추출물을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상이다.
또한, 본 발명에서는, 상기 조성물을 포함하는 당뇨병 또는 당뇨합병증의 예방 및 개선을 위한 기능성 식품을 제공한다.
상기 기능성 식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 중 어느 하나의 형태를 가질 수 있다. 또한, 상기 기능성 식품은 음료, 분말음료, 고형물, 츄잉검, 차, 비타민 복합제, 식품 첨가제 중 어느 하나의 형태를 가질 수 있다.
본 발명에서 db/db생쥐모델을 이용한 혈중 포도당 측정실험, 혈청중 중성지방, 총콜레스테롤 등의 다양한 시험을 통해 확인한 결과, 본 발명에 따라 얻어진 돌콩 발효물은, 돌콩을 발효시키지 않은 증자분말 및 추출물에 비해서는 물론 기존 항당뇨 약물로 사용되고 있는 메트포르민에 비해서도 월등한 혈당강하 효과, 지질대사 개선 등의 당뇨 합병증 개선 효과가 있었다. 본 발명의 돌콩 발효물은 당뇨병 및 당뇨 합병증의 예방 및 치료(개선)를 위해 유용하게 사용될 수 있으며, 치료 또는 예방 의약품, 기능성 식품 등으로 이용될 수 있다.
도 1은 6 주령 db/db 생쥐모델에서 혈청 중 포도당(glucose) 변화를 측정한 결과이다.
도 2는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 당화혈색소(Glycohaemoglobin; HbA1c) 변화를 측정한 결과이다.
도 3은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 포도당(glucose) 변화를 측정한 결과이다.
도 4는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 중성지방(Triglyceride) 변화를 측정한 결과이다.
도 5는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 총콜레스테롤 양을 측정한 결과이다.
도 6은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 고밀도-콜레스테롤 양을 측정을 측정한 결과이다.
도 7은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 저밀도-콜레스테롤 양을 측정한 결과이다.
도 8은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 비에스테르 지방산을 측정한 결과이다.
도 2는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 당화혈색소(Glycohaemoglobin; HbA1c) 변화를 측정한 결과이다.
도 3은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 포도당(glucose) 변화를 측정한 결과이다.
도 4는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 중성지방(Triglyceride) 변화를 측정한 결과이다.
도 5는 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 총콜레스테롤 양을 측정한 결과이다.
도 6은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 고밀도-콜레스테롤 양을 측정을 측정한 결과이다.
도 7은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 저밀도-콜레스테롤 양을 측정한 결과이다.
도 8은 9 주령에서 실험 종료 후, 전날에 diet를 제거한 상태에서, 혈청 중 비에스테르 지방산을 측정한 결과이다.
본 발명의 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물은, 돌콩(Glycine soja)을 발효시킨 돌콩 발효물을 유효성분으로 함유한다.
본 발명에서 정의되는 "돌콩"은 학명이 "Glycine soja Siebold & Zucc."로, 콩과(Zingiberaceae)에 속하는 덩굴성 1년초이며, 이명으로 갱미두, 녹곽 등으로 불리고, 생약명으로 야대두등(野大豆藤), 야료두(野料豆)로 불리는 식물이다. 돌콩 열매는 2~3cm로 털이 많고 콩꼬투리와 비슷하다. 돌콩 종자는 타원형이거나 신장형 비슷하며 약간 편평한데, 본 발명에서 "돌콩"은 바로 이 돌콩 종자를 의미한다. 본 발명에서 돌콩은 자연계에서 자생하는 것이나 재배된 것 모두 이용 가능하다.
본 발명에서 “돌콩 발효물”은 돌콩 또는 가공된 돌콩이 미생물의 작용으로 발효된 상태를 의미한다. 여기서 돌콩 발효물을 얻기 위한 발효 대상으로서의 “돌콩 또는 가공된 돌콩”은 비열처리 돌콩과 열처리 돌콩, 돌콩 추출물 및 이들을 동결건조시킨 것을 모두 포함한다. 비열처리 돌콩은 수확된 상태 그대로의 생돌콩, 이를 건조시킨 건조돌콩, 상기 생돌콩 또는 건조돌콩을 분쇄시킨 돌콩 분쇄물을 포함한다. 열처리 돌콩은 상기 생돌콩이나 건조돌콩을 열처리한 것, 열처리한 후 건조시킨 것, 열처리한 후 분쇄한 것, 분쇄 후 열처리한 것 등을 모두 포함한다. 상기 열처리는 100℃ 이하의 열처리가 바람직하며, 더욱 바람직하게는 40~100℃의 열처리, 특히 바람직하게는 60~90℃로 증자시키는 것이 좋다.
상기 돌콩 추출물은 돌콩을 일정한 용매에서 추출시킨 것으로, 바람직하게는 상기 생돌콩, 열처리 또는 비열처리된 건조돌콩, 열처리 또는 비열처리된 돌콩 분쇄물, 이들을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상을 용매에서 100℃ 이하의 조건으로 추출하여 얻는다. 본 발명의 바람직한 실시예에서 상기 돌콩 추출물은, 돌콩에 시료 중량의 약 2 내지 20배에 달하는 부피의 용매를 가하고 바람직하게는 0~100℃로 추출하여 얻으며, 더욱 바람직하게는 0~90℃로 추출하여 얻는다. 상기 용매로는, 바람직하게는 물 또는 탄소수 1 내지 4의 유기용매, 또는 이들의 혼합용매를 사용하며, 특히 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등) 및 이들의 혼합용매 중에서 선택된 어느 하나의 극성 용매를 사용할 수 있다. 추출방법은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 공지의 추출방법을 적용할 수 있으며, 바람직하게는 90℃ 이하에서 온수 추출한 후 감압여과 및 농축하여 본 발명의 돌콩 추출물을 수득할 수 있다. 상기 돌콩 추출물은, 추출물을 다시 물 또는 탄소수 1 내지 4의 유기용매로 분획하여 얻은 분획물을 포함한다. 돌콩 분획물은 상기 돌콩 추출물에 대해 통상의 분획 공정을 수행하여 수득할 수 있다 (Harborne J.B. Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant analysis, 3rd Ed., pp6-7, 1998).
본 발명의 돌콩 발효물은 상기와 같이 생돌콩, 열처리 또는 비열처리된 건조돌콩, 돌콩 추출물, 열처리 또는 비열처리된 돌콩 분쇄물 및 이들을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상을 발효시킨 후 용매로 추출하여 얻은 추출물과 이 추출물을 동결건조시킨 것을 포함한다. 본 발명에서 동결건조는 의약품 및 식품분야에서 실시하는 통상의 방법에 따라 수행할 수 있다.
상기 발효는 미생물을 접종하고 발효시키는 방법으로 실시되거나 또는 미생물의 의도적인 접종 없이 자연 발효시키는 방법으로 실시될 수 있다. 본 발명에서 “자연발효”는 온도 등을 조절한 적당한 조건에서 별도의 미생물 접종 없이 자연 상태 그대로 발효시키는 것을 의미하며, 이는 전통적인 식품 분야의 발효와 비슷하다.
미생물을 접종하고 발효시키는 방법의 경우는, 다양한 미생물을 접종시켜 돌콩을 보다 균일하고 안정적으로 발효시킬 수 있다. 상기 미생물은, 돌콩을 발효시킬 수 있고, 식품 또는 의약품에 사용 가능한 미생물이면 모두 사용 가능하다. 사용된 미생물에 따라 돌콩 발효물의 효능에 다소의 차이가 생길 수 있으나, 본 발명의 실시예를 통해 확인한 결과 미생물의 종류에 관계없이 발효된 돌콩은 발효되지 않은 돌콩에 비해 모두 월등한 효능을 나타내었다.
본 발명의 바람직한 실시예에서는 미생물로, 누룩과 몇 종의 유산균을 사용하였으나 사용 가능한 미생물은 이에 한정되지 않느다. 상기 “누룩”은 곡류에 미생물을 번식시켜 건조시킨 발효제로 정의된다. 누룩은 통상 술을 만드는 효소를 갖는 곰팡이를 곡류에 번식시킨 것을 의미한다. 누룩곰팡이는 빛깔에 따라 황국균(黃麴菌) ·흑국균(黑麴菌) ·홍국균(紅麴菌) 등이 있는데, 막걸리나 약주에 쓰이는 것은 주로 황국균이나 본 발명에서는 이에 한정하지 않고 모든 종류의 누룩곰팡이가 사용 가능하다.
상기 발효 조건은 사용 미생물에 따라 달라질 수 있으므로, 특별히 한정되지 않는다. 바람직하게는, 일반적으로 20~60℃ 범위에서 1~30일간 발효시킬 수 있으며, 더욱 바람직하게는 30~50℃에서 1~7일간 발효시킬 수 있다. 그러나, 미생물의 종류에 따라서는 20℃ 이하의 낮은 온도와 고온 미생물의 경우 60℃ 이상의 고온에서도 발효가 가능하다.
상기 당뇨합병증은 당뇨 또는 당대사 이상과 관련하여 생긴 질환으로 혈당 조절이 필요하거나 혈당 조절로 개선되는 질환을 의미한다. 상기 당뇨합병증은 특별히 한정되는 것은 아니나 특히 동맥경화증, 뇌경색, 뇌혈전, 심근경색증, 고혈압, 고지혈증, 비만증을 포함한다.
본 발명에서는, 본 발명의 돌콩 발효물에 대해 db/db생쥐모델을 이용한 다양한 실험을 통해 항당뇨 및 당뇨합병증에 대한 치료 및 개선효과를 확인할 수 있었다. 본 발명의 돌콩 발효물은 양성 대조군으로 사용된 메트포르민에 비해서도 모든 실험항목에서 우수한 결과를 나타냈다.
메트포르민의 주요 효과 중 하나는 인슐린민감성 (insulin sensitivity)을 개선시키는 것이다. 이 메트포르민이 인슐린민감성을 증가시키는 주된 기전은 내인성 당생성(endogenous glucose production)을 감소시키는 것이고, 그 중에서도 주로 당신생 (gluconeogenesis)을 감소시킨다. 또 메트포르민은 유리지방산 수치 (FFA level)를 낮추는 것으로도 알려져 있다. 현재까지의 연구결과들을 보면, 이상 지질혈증을 가진 제2형 당뇨병 환자에서 메트포르민은 총콜레스테롤과 LDL콜레스테롤을 유의하게 떨어뜨리고, 또 통계적으로 의미는 없지만 중성지방 (TG)을 낮추고 HDL콜레스테롤을 높여주는 추세(trend)가 관찰되고 있다. 본 발명의 실험에서도 메트포르민 투여군에서 총콜레스테롤 수치와 LDL-콜레스테롤 수치, 그리고 중성지방 수치가 비처리군 (NC)에 비하여 현저하게 감소되는 결과를 나타내었고, 본 발명의 돌콩 발효물 투여군에서는 메트포르민 보다도 총콜레스테롤 수치와 LDL-콜레스테롤 수치, 그리고 중성지방 (TG) 수치가 더욱 현저하게 통계학적 유의성 있게 감소되는 경향을 나타내었다.
본 발명의 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물은, 의약품 용도로 이용될 수 있는 것 외에 기능성 식품으로도 이용될 수 있다. 돌콩은 오랫동안 식용되거나 생약으로 사용되어 오던 식품소재 및 약재로서 이로부터 얻은 본 발명의 돌콩 발효물 역시 독성이나 부작용 등의 문제가 없다.
상기 본 발명의 돌콩 발효물을 함유하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료용 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 돌콩 발효물을 0.1 내지 99.9 중량%로 포함한다.
본 발명의 조성물은 약제에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 돌콩 발효물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 돌콩 발효물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물 형태의 돌콩 발효물의 경우 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose) 또는 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (Witepsol), 마크로골, 트윈 (Tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 돌콩 발효물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 돌콩 발효물은 1일 0.0001 내지 10000 ㎎/㎏으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 돌콩 발효물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (Intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본원 발명의 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향료 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함한다 (대한약전 해설편, 문성사, 한국약학대학협의회, 제 5 개정판, p33-48, 1989 ).
상기 본 발명의 돌콩 발효물을 함유하는 기능성 식품은 식품 총 중량에 대하여 상기 돌콩 발효물을 0.1 내지 99.9 중량%로 포함한다. 상기 기능성 식품은 건강기능식품을 포함한다. 본 발명에서 정의되는 "건강기능식품"은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 상기 건강기능식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 중 어느 하나의 형태를 가질 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물은 상기 돌콩 발효물을 혈당 개선, 지질대사 개선 및 당뇨합병증의 예방 및 치료 효과를 목적으로 다양한 식품 또는 음료 등에 첨가한 형태의 식품 조성물이 될 수 있으며, 특히 건강보조식품의 형태로 제공될 수 있다. 상기 식품은, 예를 들어, 음료, 분말음료, 고형물, 츄잉검, 차, 비타민 복합제, 식품 첨가제 중 어느 하나의 형태를 가질 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 필수 성분으로 상기 돌콩 발효물을 함유하는 것 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 식품이나 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등의 다양한 성분을 추가로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 시료는 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 전체 중량 중 0 내지 약 20 중량%의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
[실시예]
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 발효 돌콩의 제조
1. 돌콩 분말
돌콩은 경북 문경시 우지동에서 자생하는 돌콩을 채집하여 사용하였다. 채집된 돌콩을 건조시킨 후 믹서로 분쇄하여 돌콩 분말을 얻었다.
2. 자연발효 돌콩분말
1 에서 얻은 돌콩 분말에 시료 중량의 약 3 배에 달하는 부피의 물을 첨가하여 상온에서 24 시간 침지시키고 85℃에서 3시간동안 끓이고 식힌 후, 42℃에서 72 시간동안 발효한 뒤, 동결건조하여 준비하였다.
3. 누룩발효 돌콩분말
1 에서 얻은 돌콩 분말에 시료 중량의 약 3 배에 달하는 부피의 물을 첨가하여 24 시간 침지시키고 85℃에서 3시간동안 끓이고 식힌 후, 잘게 분쇄된 누룩(화왕산 전통누룩™)을 1% 비율로 돌콩분말에 균질하게 접종하여 42℃에서 72 시간동안 발효한 후, 동결건조하여 준비하였다.
4. 유산균발효 돌콩분말
1 에서 얻은 돌콩 분말에 시료 중량의 약 3 배에 달하는 부피의 물을 첨가하여 상온에서 24 시간 침지시키고 85℃에서 3시간동안 끓이고 식힌 후, 1×107 cfu/mL로 준비된 복합 유산균주(제조원: 한남바이오 주식회사)인 락토바실러스 플란타룸 (Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이 (Lactobacillus casei), 락토바실러스 아시도필루스 (Lactobacilus acidophilies), 엔테로코커스 패시움 (Enterococcus faecium)을 0.1% 비율로 접종하여 42℃에서 72시간동안 발효한 뒤, 동결건조하여 준비하였다.
<실시예 2> 발효 돌콩 추출물의 제조
1. 발효돌콩 물 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 얻은 돌콩 분말 및 발효돌콩 분말 1 g에 10배의 증류수를 가하고 수용액상에서 80℃에서 3시간 추출한 다음 이를 여과하여 추출액을 얻었다. 얻어진 추출액을 동결건조 후, 분쇄하여 발효 돌콩 물 추출물을 제조하였다. 제조 수율은 아래 표 1과 같다.
[표 1]
2.
발효돌콩
에탄올 추출물의 제조
상기 실시예 1에서 얻은 돌콩 및 발효돌콩 분말 1 g에 10배의 50% 에탄올 용액을 가하고 수용액상에서 80℃에서 3시간 추출한 다음 이를 여과하여 추출액을 얻었다. 얻어진 추출액은 감압농축기를 이용하여 농축한 뒤 동결건조하고 분쇄하여 발효 돌콩 에탄올 추출물을 제조하였다. 제조 수율은 아래 표 2와 같다.
[표 2]
<시험예 1> 발효 돌콩 분말의 당뇨 및 당뇨합병증에 대한 효과
1. 재료 및 방법
1-1. 항 당뇨병제 투여 효능평가 예비 동물실험
6 주령의 수컷 db/db 마우스(26 g, Taconic Farms, Inc.)를 이용하여 각각의 항 당뇨병제 투여군마다 7 마리씩 5개 군으로 분류한 다음 온도 22 ± 2℃, 습도 55 ± 10 % 및 12시간 간격의 명암으로 조절되는 SPF (specific pathogen free) 사육환경 하에서 유지하면서 시료 투여 후 0, 3, 6, 9, 12 및 15일에 체중과 혈당을 측정하여 각각의 시료별로 혈당강하 효능이 확인되는 적정한 농도를 선택하였다.
1-2. 시험물질 및 투여방법
상기 실시예 1에서 얻은 돌콩 분말, 자연발효 돌콩 분말, 누룩발효 돌콩 분말, 유산균발효 돌콩 분말을 생리식염수에 희석시켜 1일 2회 경구투여하였다 (오전 10시, 오후 6시). 양성대조군은 메트포민을 분말로 만든 후에 생리식염수에 녹여 동일하게 1일 2회 경구투여하였다 (오전 10시, 오후 6시). 음성대조군은 동일한 양의 생리식염수를 동일한 방법으로 투여하였다.
1-3. 항 당뇨병제 투여 효능평가 동물실험 및 시료 채취
비만이면서 당뇨병 증상이 나타나는 6 주령의 수컷 db/db 마우스는 인위적으로 유전적변이를 일으켜 렙틴(leptin)의 피드백 신호전달을 차단하여 성장함에 따라 체중과다와 함께 제 2형 당뇨병이 유발되도록 한 실험용 생쥐로서 이 생쥐모델을 대상으로 시료를 경구투여 하였다. 실험군은 6 개군으로 나누어 db/db 마우스를 각 군당 7 마리씩 무작위로 배정하였다. 3 개군은 시험군으로 자연발효 돌콩분말, 누룩 발효 돌콩 분말, 유산균발효 돌콩분말 1 g/㎏/day를 매일 오전 10 시와 오후 18 시에 경구투여하였으며, 2개군은 양성대조군으로 메트포민 150 ㎎/㎏/day을, 그리고 돌콩 분말 1 g/㎏/day를 동일한 방법으로 투여하였고, 1개군은 음성대조군으로 동량의 생리식염수를 같은 방법으로 투여하였다. 각 군의 사육조건은 예비 동물실험과 동일하게 온도 22 ± 2℃, 습도 55 ± 10% 및 12시간 간격의 명암으로 조절되는 SPF 환경을 유지하였다. 투여 0, 7, 14, 21일에 체중과 혈당 변화를 휴대용 혈당계 (OneTouchTM, Johnson & Johnson, USA)를 사용하여 측정하였으며, 실험군별로 평균값을 나타내었다.
1-4. 혈액분석부검 및 병리조직분석
위와 같은 실험군의 동물들로부터 혈액을 채혈하여 3,000 rpm에서 10분간 원심분리한 다음 상층액 혈장을 분리하여 글루코오스 및 트리글리세라이드에 대한 분석을 시행하였다. 혈액 내 당 지질 등과 관련된 혈액생화학적 지표들에 대하여 대조군과의 차이를 통계학적 방법 (student t-test)을 이용하여 유의성 분석을 수행하였다.
또한, 주요 장기들에 대한 조직병리학적 관찰을 수행하기 위해 간, 신장, 심장, 췌장, 및 폐장 등을 절취하여 10% neutral buffered formalin에 보관 및 장기 일부를 RNASolB에 보관하였다.
1-5.
통계처리
다양한 실험으로부터 얻은 결과는 mean ± standard error로 기록하였고, 유의성 검증은 Student's T-test 분석방법을 이용하여 결정하였다.
2. 결과
2-1. 혈청 중 포도당(glucose) 변화
6 주령 db/db 생쥐모델에서 시험군 (자연발효 돌콩분말 1 g/㎏/day, 누룩발효 돌콩분말 1 g/㎏/day, 유산균발효 돌콩분말 1 g/㎏/day)과 대조군 (양성대조군: 메트포민 150 ㎎/㎏/day, 음성 대조군: 생리식염수), 비교시험군으로 돌콩 분말 1 g/㎏/day를 오전과 오후에 일일 2회 3주간 경구투여하면서 주 1회 휴대용 혈당 측정기로 생쥐의 꼬리정맥에서 혈액을 채혈하여 혈당을 측정하였고, 측정 전날에 모든 생쥐의 diet를 제거하였다 (약 12 시간). 시험 결과는 도 1과 같다. NC의 포도당(glucose) 수준은 659.8 ㎎/dL이었고, metformin 투여군의 포도당 수준은 454.0 ㎎/dL로 31.2%의 감소효과를 보였다. 비교 시험군으로써, 돌콩분말 투여군은 398.8 ㎎/dL로 NC 대비 39.6%의 감소효과를 보였으며, 자연발효 돌콩분말 투여군은 338.2 ㎎/dL로 NC 대비 48.7%의 감소효과를 보였다. 누룩발효 돌콩분말 투여군은 351.0 ㎎/dL로 46.8%의 저해효과를 보였으며, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 297.0 ㎎/dL로 55.0%의 저해효과를 보였다 (도 1).
2-2. 혈청 중 당화혈색소(Glycohaemoglobin; HbA1c) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태 (약 12 시간)에서 에틸에테르로 마취하고, 3 mL syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 affinity chromatography를 이용한 kit를 이용하여 당화혈색소 (HbA1c)의 농도를 측정하였다. 결과는 도 2와 같다. NC의 당화혈색소(HbA1c)수준은 7.25%이었고, metformin 투여군의 당화혈색소 수준은 5.1%로 NC 대비 29.7%의 유의적인 감소효과 (p < 0.005)를 보였다. 비교 시험군으로써, 돌콩분말 투여군은 5.2%로 NC 대비 28.3%의 감소효과를 보였으며, 자연발효 돌콩분말 투여군은 4.65%로 NC 대비 35.9%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다. 누룩발효 돌콩분말 투여군은 4.40%로 39.3%의 유의적인 감소효과 (p < 0.05)를 보였으며, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 4.35%로 40.0%의 유의적인 감소효과 (p < 0.005)를 보였다 (도 2).
2-3. 혈청 중 포도당(glucose) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태 (약 12 시간)에서 에틸에테르로 마취하고, 3 mL syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1시간 방치한 다음 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 혈청자동측정기로 혈청 중 포도당(glucose)변화를 측정하였다. 결과는 도 3과 같다. NC의 포도당(glucose) 수준은 659.8 ㎎/dL이었고, metformin 투여군은 454.0 ㎎/dL로 NC 대비 31.2%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 돌콩분말 투여군은 416.5 ㎎/dL로 NC 대비 36.9%의 유의적인 감소효과(p < 0.001)를 보였고, 자연발효 돌콩분말 투여군은 341.0 ㎎/dL로 48.3%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다. 누룩발효 돌콩분말 투여군은 382.5 ㎎/dL로 42.0%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 317.0 ㎎/dL로 49.8%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다 (도 3).
2-4. 지질대사 및 당뇨합병증에 대한 효과
지질대사 및 당뇨합병증 효과를 확인하기 위하여 혈청 중 중성지방 (triglyceride, TG) 변화 측정하였다. 9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태(약 12시간)에서 에틸에테르로 마취하고, 3 ㎖ syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1 시간 방치한 다음 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 혈청자동측정기로 혈청 중 중성지방(Triglyceride) 변화를 측정하였다. 도 4에서 보듯이 NC의 중성지방 (TG) 수준은 139.3 ㎎/dL이었고, metformin 투여군은 132.5 ㎎/dL를 보였으며, 돌콩분말 투여군에서는 143.5 ㎎/dL로 NC군 대비 큰 변화를 보이지 않았다. 자연발효 돌콩 분말 투여군은 104.7 ㎎/dL로 NC군 대비 24.8%의 유의적인 감소효과 (p < 0.05)를 보였으며, 누룩발효 돌콩분말 투여군은 130.0 ㎎/dL로 NC 군 대비 6.7%의 유의적인 감소효과(p < 0.001)를 보였고, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 123.5 ㎎/dL로 NC 군 대비 11.3%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다 (도 4).
2-5. 혈청 중 총콜레스테롤 (total cholesterol) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태 (약 16시간)에서 에틸 에테르로 마취하고, 3 ml syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1 시간 방치한 후 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고, 혈청자동측정기로 혈청 중 총콜레스테롤 양을 측정하였다. 결과는 도 5와 같다. 비투여군 (NC)의 총콜레스테롤 수준은 173.0 ㎎/dL이었고, metformin 투여군의 총콜레스테롤 수준은 160.3 ㎎/dL로 NC군 대비 약 7.3%의 감소효과를 보였으며, 돌콩분말 투여군의 총콜레스테롤 수준은 145.5 ㎎/dL로 NC군 대비 15.9%의 감소효과를 보였다. 자연발효 돌콩분말 투여군은 136.3 ㎎/dL로 NC 대비 21.2%의 감소효과를 보였으며, 누룩발효 돌콩분말 투여군은 145.0 ㎎/dL로 16.2%의 감소효과를 보였고, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 127.0 ㎎/dL로 약 26.6%의 감소효과를 보였다 (도 5).
2-6. 혈청 중 고밀도-콜레스테롤 (High Density Lipoprotein-Cholesterol) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태(약 16시간)에서 에틸 에테르로 마취하고, 3 ml syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1 시간 방치한 후 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 혈청자동측정기로 혈청 중 고밀도-콜레스테롤양을 측정하였다. 결과는 도 6과 같다. 메트포민 투여군, 돌콩 분말 투여군, 자연발효 돌콩분말 투여군, 누룩발효 돌콩분말 투여군, 유산균발효 돌콩분말 투여군 모두 비투여군(NC)에 비하여 고밀도 콜레스테롤 수준이 높아지는 것으로 나타났다 (도 6).
2-7. 혈청 중 저밀도-콜레스테롤 (Low Density Lipoprotein-Cholesterol) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태 (약 16시간)에서 에틸 에테르로 마취하고, 3 ml syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1 시간 방치한 후 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 혈청자동측정기로 혈청 중 저밀도-콜레스테롤양을 측정하였다. 결과는 도 7과 같다. 비투여군 (NC)의 저밀도 콜레스테롤 수준은 15.9 ㎎/dL이었고, metformin 투여군은 13.0 ㎎/dL로 NC군 대비 약 18.2%의 감소효과를 보였다. 돌콩분말 투여군은 9.4 ㎎/dL로 NC군 대비 40.9%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 자연발효 돌콩분말 투여군은 8.7 ㎎/dL로 45.3%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 누룩발효 돌콩분말 투여군은 9.6 ㎎/dL로 39.6%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였고, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 8.9 ㎎/dL로 44.0%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다 (도 7).
2-8. 혈청 중 비에스테르 지방산 (nonesterified fatty acid) 변화
9 주령에서 실험 종료 후 전날에 diet를 제거하여 공복상태 (약 16시간)에서 에틸 에테르로 마취하고, 3 ml syringe로 심장에서 혈액을 채혈한 후 실온에서 1 시간 방치한 후 3000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 혈청자동측정기로 혈청 중 비에스테르 지방산을 측정하였다. 결과는 도 8과 같다. 비투여군 (NC)의 비에스테르 지방산 수준은 1.750 mEq/L이었고, metformin 투여군은 1.655 mEq/L로 NC군 대비 약 5.4%의 감소효과를 보였다. 돌콩분말 투여군은 1.200 mEq/L로 NC군 대비 31.4%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 자연발효 돌콩분말 투여군은 1.150 mEq/L로 34.3%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였으며, 누룩발효 돌콩분말 투여군은 1.110 mEq/L로 36.6%의 유의적인 감소효과 (p < 0.005)를 보였으며, 유산균발효 돌콩분말 투여군은 1.085 mEq/L로 38.0%의 유의적인 감소효과 (p < 0.001)를 보였다 (도 8).
<실시예 3>
하기에 본 발명의 돌콩 발효물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 1의 누룩발효 돌콩분말 20 ㎎
유당 100 ㎎
탈크 10 ㎎
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예
2. 정제의 제조
실시예 1의 누룩발효 돌콩분말 10 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 1의 누룩발효 돌콩분말 10 ㎎
결정성 셀룰로오스 3 ㎎
락토오스 14.8 ㎎
마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
실시예 1의 누룩발효 돌콩분말 10 ㎎
만니톨 180 ㎎
주사용 멸균 증류수 2974 ㎎
Na2HPO412H2O 26 ㎎
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
실시예 1의 누룩발효 돌콩분말 20 ㎎
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체 100 ㎖ 로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
Claims (7)
- 돌콩(Glycine soja)을 발효시킨 돌콩 발효물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 발효는 미생물을 접종하고 발효시키는 방법으로 실시되는 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 발효는 미생물의 의도적인 접종 없이 자연 발효시키는 방법으로 실시되는 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 돌콩 발효물은,
(a) 생돌콩, 열처리 또는 비열처리된 건조돌콩, 돌콩 추출물, 열처리 또는 비열처리된 돌콩 분쇄물 및 이들을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상을 발효시킨 것;
(b) (a)에서 얻은 발효물을 용매로 추출하여 얻은 추출물; 및
(c) (b)에서 얻은 추출물을 동결건조시킨 것 중 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제4항의 조성물을 포함하는 당뇨병 또는 당뇨합병증의 예방 및 개선을 위한 기능성 식품.
- 제5항에 있어서,
상기 식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 중 어느 하나의 형태를 갖는 것을 특징으로 하는 기능성 식품. - 제5항에 있어서,
상기 식품은 음료, 분말음료, 고형물, 츄잉검, 차, 비타민 복합제, 식품 첨가제 중 어느 하나의 형태를 갖는 것을 특징으로 하는 기능성 식품.
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| KR1020160029818A KR102624358B1 (ko) | 2016-03-11 | 2016-03-11 | 돌콩 발효물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20170106103A true KR20170106103A (ko) | 2017-09-20 |
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| KR (1) | KR102624358B1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210108916A (ko) * | 2020-02-26 | 2021-09-03 | 한국 한의학 연구원 | 돌콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 근력강화, 근육증강, 근육분화, 근육재생 또는 근감소의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| KR20060107183A (ko) | 2005-04-08 | 2006-10-13 | 영농조합법인 영산식품 | 쥐눈이콩 및 쥐눈이식초콩 분말 또는 추출물을 포함하는당뇨병 예방 및 치료를 위한 조성물 |
| KR20090004503A (ko) | 2007-06-29 | 2009-01-12 | 산요덴키가부시키가이샤 | 밀폐형 전지 및 그 제조 방법 |
| EP2172206A1 (en) | 2007-05-30 | 2010-04-07 | Lianchuangsiyuanli Biology And Science And Technology Co. Ltd. | The method for a sequoyitol-containing extract obtaining from the genus of trifolium, sobyean and ginkgo biloba and use thereof |
| KR20100127728A (ko) | 2009-05-26 | 2010-12-06 | (주)아모레퍼시픽 | 콩 추출물을 함유하는 혈액 순환 개선 및 혈관 건강 증진용 조성물 |
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-
2016
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| KR101400368B1 (ko) | 2011-04-08 | 2014-06-19 | 주식회사 케이오씨바이오텍 | 돌콩의 열처리 분말 또는 추출물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물 |
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