KR20170082249A - 참옻나무 목심 추출물을 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

참옻나무 목심 추출물을 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 항암치료 과정에서 발생하는 부작용 중에서 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 부작용이 없이 안전하게 개선, 예방 또는 치료할 수 있다.

Description

참옻나무 목심 추출물을 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물{A composition for improving, preventing and treating digestion dysfunction, leukocyte reduce, bone marrow suppression by side effects after anti-cancer therapy comprising Rhus verniciflua stoke extract}
본 발명은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 개선, 예방 또는 치료할 수 있는 조성물에 관한 것이다.
암이란 특정 세포가 분화 과정 중 어느 단계에서 무한정으로 성장하여 정상 조직들을 침범 및 파괴하는 질환으로 정의된다. 암에 관하여 많은 연구가 진행되고 있으나 아직 그 발생 원인은 정확하게 밝혀지지 않고 있다. 다만 암의 발생은 여러가지 화학적 발암 물질, 종양 유발 바이러스 또는 다량의 방사선에 노출된 후 암 유전자의 활성화와 암 억제 유전자의 기능소실에 의해 시작되는 것으로 알려져 있다.
현재까지 암 환자를 대상으로 한 치료 방법에는 외과 수술(Operation), 화학 요법(Chemotherapy), 방사선 요법(Radiotherapy), 호르몬 요법 및 면역 요법 등이 있다. 이 중에서 호르몬 요법과 면역 요법은 치료 효과 및 인체에 대한 안전성이 아직 확립되지 않아 임상에서 널리 이용되지 못하고 있다. 외과 수술은 병소(즉, 암)를 제거하는 치료 방법으로서 초기 암의 경우에는 외과 수술만으로도 완치가 가능하지만, 중기 이후의 암의 경우에는 외과 수술을 이용하는 것 자체가 불가능하다는 단점이 있다.
한편, 화학 요법이나 방사선 치료 또는 이의 병행 치료는 공통적으로 유리 라디칼을 생성시켜 표적 암세포를 제거하는 것이지만, 이들은 특이성이 낮기 때문에 조혈 세포나 면역 세포 등 빠르게 분열 및 증식하는 특성을 가진 정상 세포도 손상시킴으로써 구토증세, 식욕감퇴, 구내염, 설사, 변비, 발열, 감염증, 백혈구감소증, 혈소판 감소증, 빈혈, 복통, 신장 독성, 간 독성, 심장 독성, 말초신경 독성, 중추신경 독성, 근육 통증, 뼈 통증, 골수 억제 등의 부작용을 유발한다.
암 환자 및 암발생률의 지속적인 증가와 더불어 항암치료 과정에서 발생하는 부작용 또한 하나의 의학적 문제로 제기되고 있다. 국내 의약품 부작용 안전성정보는 총 18만 건 정도로 이중 약 3만 건이 항암제에 의한 것으로서 약 16.1%를 차지하고 있다.
최근 항암치료에 따른 부작용, 후유증 또는 합병증에 대한 약물 연구가 임상적으로 더욱 중요하게 취급되고 있는데, 이는 환자에 대한 삶의 질과 밀접하게 관련되기 때문이다.
따라서, 항암치료에 따른 부작용에서 유래된 질병을 치료하면서 인체에 안전한 천연소재를 이용한 물질이 요구되고 있다.
대한민국 공개특허 제2002-0015906호 대한민국 공개특허 제2002-0040532호 대한민국 공개특허 제2010-0041431호
본 발명의 목적은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 개선 또는 예방할 수 있는 식품 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 예방 또는 치료할 수 있는 약학 조성물을 제공하는데 있다.
상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
상기 참옻나무 목심 추출물은 껍질이 제거된 참옻나무 목심을 응달에서 1 내지 10일 동안 건조시켜 추출한 것일 수 있다.
상기 참옻나무 목심 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄, 클로로포름 또는 이들의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다.
상기 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유효성분으로는 푸스틴(fustin), 피세틴(fisetin), 설푸레틴(sulfuretin) 및 프로토카테츄산(protocatechuic acid)을 포함할 수 있다.
상기 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유효성분으로 55 내지 75 ㎍/mg의 푸스틴(fustin), 3 내지 15 ㎍/mg의 피세틴(fisetin), 0.1 내지 1 ㎍/mg의 설푸레틴(sulfuretin) 및 0.3 내지 1.5 ㎍/mg의 프로토카테츄산(protocatechuic acid)을 포함할 수 있다.
또한, 상기한 다른 목적을 달성하기 위한 본 발명의 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
본 발명의 참옻나무 목심 추출물을 함유하는 조성물은 항암치료 부작용에서 유래된 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증이 발생한 동물모델에서 우수한 개선, 예방 또는 치료효과가 있는 것을 확인하였으며, 천연물질을 사용하여 독성이 없으므로 식품의 형태로 섭취할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유기 화합물을 HPLC로 분석한 그래프이다.
도 2는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 위장조직에 대한 사진이다.
도 3은 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 소장조직에 대한 시진이다.
도 4는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 대장조직에 대한 시진이다.
도 5A는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 백혈구 세포수를 나타낸 그래프(절대량)이다.
도 5B는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 백혈구 세포 개체군을 나타낸 그래프(상대량)이다.
도 6은 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 골수에 대한 사진이다.
본 발명은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 개선, 예방 또는 치료할 수 있는 조성물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증을 개선, 예방 또는 치료할 수 있는 조성물은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유한다.
상기 참옻나무(Rhus verniciflua stoke)는 옻나무과(Anacardiaceae)에 속하는 식물로서, 한의학에서는 수지(樹脂)에서 얻어진 건칠(乾漆)을 전통적으로 약용에 사용하여 임상에 적용해오고 있다. 특히, 어혈(瘀血)로 인한 질환인 어혈조제인기적경폐불통(瘀血阻濟引起的經閉不通), 제복동통(制服疼痛) 등에 사용되어 왔으며, 혈관확장 및 혈압강하작용이 있는 것으로 알려진 식물로서 근래에는 탁월한 항암 효능을 바탕으로 다용되어져오고 있다.
상기 참옻나무 목심은 참옻나무의 껍질(주피)을 제거한 나무줄기의 한가운데에 있는 연한 부분을 의미하는 것이다. 본 발명에서는 참옻나무 목심이 아닌 참옻나무 껍질, 또는 참옻나무 목심과 껍질을 혼합하여 사용하는 경우에는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증에 대한 효과가 현저히 감소된다.
또한, 상기 참옻나무 목심은 햇빛이 들지 않는 응달에서 1 내지 10일 동안 건조시킴으로써 수지(樹脂)가 완전히 제거된 목심을 이용하는 것이 바람직하다. 만약, 수지가 제거되지 않은 목심을 사용하는 경우에는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증에 대한 효과가 현저히 감소되며; 목심을 햇빛에서 건조시키는 경우에는 원하는 효과를 얻을 수 없다.
상기 참옻나무 목심은 추출용매와 1 : 5 내지 25, 바람직하게는 1 : 8 내지 15의 중량비로 혼합하여 80 내지 120 ℃에서 100 내지 200분 동안 추출함으로써 추출물을 제조한다. 상기 참옻나무 목심과 추출용매의 중량비가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 추출물에 참옻나무 목심의 유효성분이 적은 양으로 추출될 수 있다. 또한, 추출온도가 상기 하한치 미만인 경우에는 참옻나무 목심의 유효성분이 추출되지 않을 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 참옻나무 목심의 유효성분이 적은 양으로 추출되고 특히, 압력을 가한 상태에서 120 ℃ 초과 되면 추출물이 변질될 수 있다.
상기 참옻나무 목심 추출물을 추출하는 추출용매로는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄, 클로로포름 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 상기 혼합용매로는 특별히 한정하는 것은 아니지만, 바람직하게는 20 내지 80 부피%의 메탄올, 에탄올, 부탄올 또는 프로판올 수용액, 더욱 바람직하게는 물로 추출된 추출물을 들 수 있다.
본 발명의 참옻나무 목심 추출물은 55 내지 75 ㎍/mg의 푸스틴(fustin), 3 내지 15 ㎍/mg의 피세틴(fisetin), 0.1 내지 1 ㎍/mg의 설푸레틴(sulfuretin) 및 0.3 내지 1.5 ㎍/mg의 프로토카테츄산(protocatechuic acid)이 유효성분으로 함유하므로 항암치료 부작용으로 유도된 소화기 장애 및 백혈구 수치의 감소증과 골수부전의 개선, 예방 및 치료에 효과적이다. 일예로, 단회의 cisplatin(6 mg/kg)를 복강내에 투여함으로써 유도된 소화기 장애, 백혈구 감소 및 골수부전의 증상을 보이는 실험군에 본 발명의 참옻나무 목심 추출물을 투여하면 위장조직, 소장조직 및 대장조직의 손상, 백혈구 수치의 감소 및 골수부전에 대해서 상당한 개선 효과를 보였다.
본 발명에서 항암치료 부작용은 특별히 한정되지 않은 각종 암의 치료를 목적으로 하며 특히 화학약물을 이용한 항암치료요법 시 발생되는 모든 부작용을 의미한다.
상기와 같이 제조된 참옻나무 목심 추출물은 추출물 자체로 이용하거나 사용이 편리하도록 분말 화하여 이용할 수 있다. 상기 추출물을 분말화하기 위하여 수행되는 건조 방법으로는 동결건조, 냉풍건조 또는 자연건조를 들 수 있으나, 성분의 변질이 없고 빠르게 분말을 얻기 위하여 동결건조 방법을 이용하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명에서는 참옻나무 목심 자체를 분쇄하여 분말로 사용할 수도 있다.
한편, 본 명세서에서 용어 '유효성분으로 함유하는'이란 참옻나무 목심 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 일예로, 상기 참옻나무 목심 추출물은 10 내지 1500 mg/kg 바람직하게는 100 내지 1000 mg/kg의 농도로 사용된다. 참옻나무 목심 추출물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 참옻나무 목심 추출물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 상기 유효 성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약제학적 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약제학적 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.
액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥 내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 약제학적 조성물의 1일 투여량은 0.001-10 g/kg이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 참옻나무 목심 추출물뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 참옻나무 목심 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
본 발명은 상기 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 포함하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 건강기능식품이란, 참옻나무 목심 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품에 있어서의 참옻나무 목심 추출물의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 환제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태의 건강기능식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 환제, 정제, 캡슐제 또는 음료의 형태일 수 있다.
또한, 본 발명은 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료용 의약 또는 식품의 제조를 위한 참옻나무 목심 추출물의 용도를 제공한다. 상기한 바와 같이 참옻나무 목심 추출물은 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료를 위한 용도로 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 포유동물에게 유효량의 참옻나무 목심 추출물을 투여하는 것을 포함하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선, 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.
여기에서 사용된 용어 "유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상의에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 해당 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 유효량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 것임은 당업자에게 자명하다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 예방, 치료 또는 개선 방법에 있어서, 성인의 경우, 참옻나무 목심 추출물을 1일 1회 내지 수회 투여 시, 0.001 g/kg 내지 10 g/kg의 용량으로 투여하는 것이 바람직하다.
본 발명의 치료방법에서 참옻나무 목심 추출물을 유효 성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시 예를 제시하나, 하기 실시 예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
실시예 1. 물을 이용한 추출
참옻나무(Rhus verniciflua stoke)에서 주피(珠被)를 제거한 목심을 10일 동안 음건(陰乾, 응달에서 건조)하여 수지(樹脂)를 완전 건조 시킨 후 이를 분쇄기로 분쇄 후 증류수와 1:10의 중량비로 혼합하고 100 ℃에서 150분간 가열하여 추출한 다음 고형분을 제거하고 이를 다시 180분간 농축시켜 여과와 원심분리 과정을 거친 후 동결 건조하였다. 최종적으로 전탕 전의 건조성물의 무게 대비 약 6.8 중량%의 건조 엑스를 각각 회수하였다.
실시예 2. 80% 에탄올을 이용한 추출
상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 추출용매로 중류수 대신 80% 에탄올 수용액을 사용하였다.
비교예 1. 참옻나무 주피
상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 참옻나무 목심 대신 참옻나무 주피(껍질)을 이용하였다.
비교예 2. 참옻나무 주피+ 목심
상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 참옻나무 목심 대신 참옻나무 주피(껍질)와 목심이 1 : 1의 중량비로 혼합된 혼합물을 사용하였다.
비교예 3. 참옻나무 목심 건조 생략
상기 실시예 1과 동일하게 실시하되, 참옻나무 목심을 음건시키지 않고 사용하였다.
<시험예>
시험예 1. 유기화합물 분석
실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유기화합물성분은 섬유(polydimethyl siloxane, PDMS)가 장착된 solid phase microextraction(SPME) 장치에 흡착시킨 다음, 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)로 분석하였다.
도 1은 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유기 화합물을 HPLC로 분석한 그래프이다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 1의 참옻나무 목심 추출물은 푸스틴(fustin), 피세틴(fisetin), 설푸레틴(sulfuretin) 및 프로토카테츄산(protocatechuic acid)을 유효물질로 함유하고 있는 것을 확인하였다. 상기 유기 화합물을 정량적으로 확인한 결과, 상기 참옻나무 목심 추출물 내에 푸스틴은 61.61 ± 0.20 ㎍/mg, 피세틴은 7.66 ± 0.18 ㎍/mg, 설푸레틴(sulfuretin)은 0.26 ± 0.03 ㎍/mg 및 프로토카테츄산(protocatechuic acid)은 0.60 ± 0.01 ㎍/mg으로 함유되는 것을 확인하였다.
시험예 2. 세포 독성 측정
실시예 및 비교예에서 제조된 추출물에 대한 세포독성을 측정하였다.
시료의 안전성 농도 범위에서 시험을 실행하기 위해 세포독성은 Rochem 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 24 wells plate에 2 X 105 cells/well의 세포(HepG2 cell)를 분주한 후 24 시간동안 배양하였다. 이후 배지를 제거하고 추출물이 용해된 Fetal Bovine Serum이 10% 함유된 배지 1 mL을 분주하고 재배양을 24시간 동안 하였다. 24 시간 후 각 well에 0.25 mL의 XTT-PMS 용액(1 mg XTT and 10 g PMS/mL of MEM without phenol red)을 첨가하고 다시 2시간 배양하였다. 세포독성도는 formazan의 형성 정도를 microplate reader를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하여 안전성 농도 범위 확인 후 실험을 진행하였다. 상기 배지는 10%(v/v) fetal bovine serum(FBS), 0.5%(v/v) 50 g/mL streptomycin, 50 IU/mL penicillin, 0.125 g/mL fungizone, 3.024 g sodium bicarbonate를 함유한 DMEM을 사용하였고, 배양은 37 ℃, 5% CO2, 95% humid air로 조절된 배양기를 사용하였다. 추출물의 농도는 1 ㎍/㎖이다.
구분 실시예 1 실시예 2 비교예 1 비교예 2 비교예 3
세포 생존능(%) 99.6 99.4 98.2 98.5 97.3
위 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 및 비교예에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물은 모두 세포 생존능이 우수한 것을 확인하였다.
실험 동물 준비
이 실험에서 사용한 실험동물은 6주령의 숫컷 랫드(SD rat, 180-200g)로, 중앙실험동물(주)에서 공급받아 실험동물 사육장에서 1주일간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험 기간 중 고형사료와 물은 자유로이 섭취시켰으며 사육실의 온도(22 ± 2 ℃), 상대습도(60 ± 5%)와 명암은 12시간 주기를 유지하였다.
각 그룹당 9마리씩 나누어 대조군을 제외한 나머지 그룹에는 임상에서 대표적으로 사용하는 화학약물인 시스플라틴(cisplatin)을 6 mg/kg의 농도로 단회 복강 내 주사 방법으로 투여하여, 항암 부작용을 유도하였다. 시스플라틴의 단회 주사 두 시간 이후 24시간 간격으로 각 그룹에 증류수(유도군), 실시예 및 비교예의 추출물(25, 50, 100 mg/kg) 및 대표적인 구토 억제제인 메토클로프라미드(Metclopramide, 25 mg/kg)를 각각 5일 동안 총 5회에 걸쳐 경구 투여하였다.
시험예 3. 항암 부작용으로 유래된 오심 및 구토에 대한 효능
실시예 및 비교예의 추출물의 경구 투여와 동시에, 임상에서 대표적으로 발생할 수 있는 항암 부작용인 오심 및 구토에 대한 행동관찰을 실시하기 위하여, 카오린(Kaolin) 식이를 공급하였고 동시에 정상식이도 공급하여 120시간 동안 매 24시간 간격으로 각각의 섭취량과 체중을 기록하였다.
마지막 식이 공급에 대한 기록이 종료된 이후, 18시간 동안 공복상태를 유지한 이후 마무스를 희생시켰다.
하기 [표 2]는 카올린(Kaolin) 식이의 섭취량을 나타낸 것이고, 하기 [표 3]은 정상식이의 섭취량을 나타낸 것이다.
구분 g/day
24h 48h 72h 96h 120h
대조군 2.0 1.8 0.7 0.7 0.4
유도군 6.3 4.0 2.1 2.3 2.1
메토클로프라미드
(25 mg/kg)		 5.8 1.9 1.5 2.2 1.8
실시예 1 25mg/kg 6.2 2.9 0.6 2.0 0.4
50mg/kg 7.1 1.6 0.3 2.1 3.9
100mg/kg 4.4 0.5 1.7 2.0 1.7
실시예 2 25mg/kg 7.0 3.4 1.0 2.6 0.8
50mg/kg 7.4 2.0 0.7 2.8 3.8
100mg/kg 4.8 0.9 2.1 2.5 2.1
비교예 1 25mg/kg 8.7 4.9 4.7 5.5 4.8
50mg/kg 8.0 3.1 3.0 4.0 3.3
100mg/kg 5.1 2.1 1.9 2.8 2.1
비교예 2 25mg/kg 8.3 4.7 4.3 5.3 4.4
50mg/kg 7.6 2.8 2.5 3.6 2.3
100mg/kg 4.8 1.7 1.6 2.8 1.8
비교예 3 25mg/kg 8.6 4.8 4.7 5.8 4.9
50mg/kg 7.8 3.2 3.0 3.8 2.8
100mg/kg 5.4 1.9 1.6 2.4 2.0
구분 g/day
24h 48h 72h 96h 120h
대조군 22.9 25.7 22.4 23.9 23.0
유도군 15.6 13.2 12.9 11.8 16.2
메토클로프라미드
(25 mg/kg)		 16.7 16.9 17.2 20.1 14.9
실시예 1 25mg/kg 16.0 10.3 9.8 12.1 15.0
50mg/kg 16.5 16.8 16.8 16.4 14.7
100mg/kg 17.8 15.9 16.5 16.9 16.1
실시예 2 25mg/kg 15.4 9.9 9.4 11.5 14.2
50mg/kg 16.1 16.3 16.0 15.8 14.0
100mg/kg 17.3 15.0 16.1 16.0 15.8
비교예 1 25mg/kg 10.2 8.1 7.8 9.9 10.1
50mg/kg 10.3 13.4 13.9 13.2 10.0
100mg/kg 11.4 14.8 14.2 14.0 11.6
비교예 2 25mg/kg 11.5 8.8 8.1 8.9 11.6
50mg/kg 11.9 13.9 13.3 13.7 12.1
100mg/kg 12.7 14.7 14.0 13.9 12.5
비교예 3 25mg/kg 10.8 9.3 9.2 10.1 11.3
50mg/kg 11.1 13.6 13.4 10.9 11.5
100mg/kg 12.3 14.0 13.1 11.7 12.7
특히, 설치류들은 오심 및 구토증상을 생리적으로 표현하지 못하여 이를 예방 또는 치료의 목적으로 규소 등이 함유된 미네랄 식이를 섭취함으로써, 오심 및 구토의 증상을 완화하려는 행동적 관찰 소견을 보인다. 따라서 본 실시예에서는 이러한 행동관찰의 목적으로 식이 섭취에 대한 행동관찰을 실시하였다.
상기 표 2 및 3에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물을 투여한 군은 정상식이의 섭취량이 유의적으로 증가하였으며, 카올린식이의 섭취량은 유의적으로 감소하는 것을 확인하였다.
반면, 비교예 1 내지 3에 따라 제조된 추출물은 실시예 1 및 2의 추출물에 비하여 정상식이의 섭취량이 적고, 카올린식이의 섭취량이 많은 것을 확인하였다.
그러므로, 본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물이 항암 부작용에 의해 오심 및 구토 증상에 대하여 우수한 효능을 보이는 것을 확인하였다.
시험예 4. 위장조직, 소장조직 및 대장조직에 대한 효능
도 2는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 위장조직에 대한 사진이며; 도 3은 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 소장조직에 대한 시진이고; 도 4는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 대장조직에 대한 사진이다.
상기 위장조직, 소장조직 및 대장조직은 시험예 3에서 희생된 마우스에서 축출하여 조직염색학적 기법을 통해 Hemaoxyline & Eosin의 시약을 이용하여 조직을으로 염색하였다.
도 2에 도시된 바와 같이, 유도군 및 메토클로프라미드 투여군에 비하여 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군(25 mg/kg 농도로 처리한 군, 50 mg/kg 농도로 처리한 군, 100 mg/kg 농도로 처리한 군)에서 위장의 내피세포와 점막의 손상 및 염증 정도가 개선된 것을 확인하였다.
또한, 도 3에 도시된 바와 같이, 유도군 및 메토클로프라미드 투여군에 비하여 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군에서 소장의 융모세포의 손상 및 융모의 구조에 대한 손상이 현저히 개선된 것을 확인하였다. 또한, 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군은 융모세포의 괴사가 발생되지 않았다.
또한, 도 4에 도시된 바와 같이, 유도군 및 메토클로프라미드 투여군에 비하여 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군에서 대장조직의 손상이 크게 개선된 것을 확인하였다. 또한, 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군은 대장조직의 괴사가 발생되지 않았다.
상기 도 2 내지 도 4에서 확인한 바와 같이, 본 발명의 참옻나무 목심 추출물은 소화기관의 손상 및 염증을 개선하는데 우수한 효과를 보인다.
시험예 5. 백혈구 및 백혈구 조성 세포에 대한 효능
도 5A는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 백혈구 세포수를 나타낸 그래프(절대량)이며; 도 5B는 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 백혈구 세포 개체군을 나타낸 그래프(상대량)이다.
상기 백혈구 세포는 시험예 3에서 희생된 마우스의 복대정맥의 전혈에서 채취하였다. 도 5에서 백혈구(WBC), 림프구(Lymphocytes), 단핵구(Monocytes), 호중구(Segmental Neutrophils), 호산구(Eosinophil) 및 호염기구(Basophils)의 수치를 나타내었다. 상기 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구는 백혈구를 세부적으로 나눈 종류이다. 상기 림프구는 세균과 싸우며 다양한 병균과 싸울 수 있는 항체를 만들며; 상기 단핵구는 호중구가 감염균과 싸우는데 도움을 주고(항원 전달); 상기 호중구는 신체에 감염이 있을시 병균과 싸우며; 상기 호산구는 주로 알레르기나 기생충에 저항하는 역할을 하고; 상기 호염기구는 면역쪽에서 박테리아나 다른 외부세균을 제거하는 역할을 한다.
도 5에 도시된 바와 같이, 유도군에 비하여 실시예 1의 추출물로 처리한 3개의 군에서 백혈구가 더 많은 것을 확인하였으며; 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구 역시 더 많은 것을 확인하였다.
그러므로, 본 발명의 참옻나무 목심 추출물은 백혈구 감소증에 우수한 효능을 보이는 것을 확인하였다.
시험예 6. 골수부전에 대한 효능
도 6은 대조군, 유도군, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 참옻나무 목심 추출물 투여군 및 메토클로프라미드 투여군의 골수에 대한 사진이다.
상기 골수는 희생된 마우스에서 축출하여 조직염색학적 기법을 통해 Hemaoxyline & Eosin의 시약을 이용하여 조직을 염색하였다.
도 6에 도시된 바와 같이, 조직병리검사시 확인된 유도군의 골수부전이 실시예 1의 추출물(3개 군)의 처리에 의하여 상당히 개선된 것을 확인하였다.
하기에 본 발명의 분말을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 500 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 300 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 200 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 600 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4,12H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 4 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 6. 과립제의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7. 기능성 음료의 제조
실시예 1에서 얻은 추출물 분말 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (7)

  1. 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 참옻나무 목심 추출물은 껍질이 제거된 참옻나무 목심을 응달에서 3 내지 10일 동안 건조시켜 추출한 것을 특징으로 하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 참옻나무 목심 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄, 클로로포름 또는 이들의 혼합용매로 추출된 것을 특징으로 하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유효성분은 푸스틴(fustin), 피세틴(fisetin), 설푸레틴(sulfuretin) 및 프로토카테츄산(protocatechuic acid)을 포함하는 것을 특징으로 하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 참옻나무 목심 추출물에 함유된 유효성분은 55 내지 75 ㎍/mg의 푸스틴(fustin), 3 내지 15 ㎍/mg의 피세틴(fisetin), 0.1 내지 1 ㎍/mg의 설푸레틴(sulfuretin) 및 0.3 내지 1.5 ㎍/mg의 프로토카테츄산(protocatechuic acid)을 포함하는 것을 특징으로 하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  6. 참옻나무 목심 추출물을 유효성분으로 함유하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 참옻나무 목심 추출물은 껍질이 제거된 참옻나무 목심을 응달에서 1 내지 10일 동안 건조시켜 추출한 것을 특징으로 하는 항암치료 부작용에 따른 소화기능장애, 백혈구 감소증 및 골수부전증의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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