KR20170076967A - 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 본 발명은 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 에 관한 것으로, 본 발명에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 괭생이모자반(Sargassum horneri) 추출물을 포함하고, 피부 미백 효과를 가지는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 세포독성이 없어 부작용을 일으키지 않으면서도 멜라닌 생성을 저해함으로써 피부 미백 활성을 향상시킬 수 있다. 따라서 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 활용함으로서, 부작용 없으면서도 우수한 미백 효과를 가지는 다양한 제품 또는 제형으로 제공될 수 있다.
본 발명에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 세포독성이 없어 부작용을 일으키지 않으면서도 멜라닌 생성을 저해함으로써 피부 미백 활성을 향상시킬 수 있다. 따라서 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 활용함으로서, 부작용 없으면서도 우수한 미백 효과를 가지는 다양한 제품 또는 제형으로 제공될 수 있다.
Description
본 발명은 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 에 관한 것이다. 보다 상세하게는 괭생이모자반 추출물을 포함하면서 부작용이 없고, 미백활성 효과가 높은 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
사람의 피부색을 결정하는 데는 여러가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드, 빌리루빈 등의 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다.
이중 특히 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.
신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다.
이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은, 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미나 주근깨, 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다. 또한, 레저 인구의 증가로 외부에서 활동하는 것을 즐기는 사람들이 많아지면서 자외선에 의한 멜라닌 색소침착을 막고자 하는 요구가 늘어나게 되었다.
이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백 효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.
따라서, 인체에 대해서 미백의 우수한 효능을 나타내면서도 안전성이 보장되는 물질의 개발이 요구되고 있는데, 이에 부작용이 적은 천연 추출물을 기초로 한 미백용 조성물이 주목 받고 있는 실정이며, 이와 관련한 다양한 연구가 진행되고 있다.
관련 선행기술을 보면, 선행기술 1(KR 10-2012-0028536 A, 공개일자: 2012년 3월 23일)은 수분 함량 85 % 이상, 당도 7 Brix 이상인 과일이 분쇄되어 형성된 과일 분쇄물, 물, 식품용 또는 의료용 가수분해 효소가 혼합된 추출용 혼합물이 효소 가수분해 처리되어 옥살산(oxalic acid)과 사과산(malic acid)이 강화된 유기산을 25 ㎍/g 이상 포함하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물 제조용 과일 추출액을 개시하고 있다.
선행기술 2(KR 10-2007-0089327 A, 공개일자: 2007년08월31일)는 대표적 항산화 물질인 비타민 C 유도체와 함께, 야로우, 밤민트, 페퍼민트 등의 허브 식물 성분을 함유하여 피부의 멜라닌 생성을 억제하고, 나아가 pH를 6 내지 7의 범위로 유지시키는 pH 완충제로서 구연산과 구연산 나트륨을 함유하여 비타민 C 유도체를 안정화시켜 미백 효과를 오래 유지 시키는 피부 미백용 화장료 조성물을 개시하고 있다.
다만, 높은 미백 효과와 함께 부작용이 없는 미백용 조성물을 개발하기 위해 보다 다양한 천연물에 대한 연구가 필요하다.
본 발명의 목적은 세포독성이 없어 부작용을 일으키지 않으면서도 멜라닌 생성을 억제하는 효과를 가지는 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 이용하여 제조한 미백용 식품 등의 기능성 제품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 괭생이모자반(Sargassum horneri) 추출물을 포함하고, 피부 미백 효과를 가지는 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물은 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 하여 추출된 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 점도가 1.2 내지 100cP인 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반은 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 노간주나무 열수추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 병조희풀 열수추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 따른 일 실시예에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물의 제조방법은 괭생이모자반을 일정한 크기로 절단하여 1기압 상태에서 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 혼합하여 용매혼합물을 제조하는 용매혼합단계; 상기 혼매혼합물을 반응기에 넣고 15 내지 75℃의 온도를 유지하면서 불활성 기체를 주입하여 반응기 내 압력이 20 내지 35 기압이 되도록 하는 반응단계; 상기 반응단계 이후 상기 반응기에서 상기 불활성 기체와 함께 상기 용매를 배출하여 입자화 된 괭생이모자반 추출물을 제조하는 배출단계; 및 상기 입자화된 괭생이모자반 추출물을 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 혼합하여 혼합 추출물을 제조하는 혼합단계를 포함하는 것일 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 괭생이모자반(Sargassum horneri) 추출물을 포함하고, 피부 미백 효과를 가지는 것일 수 있다.
괭생이모자반은 학명은 Sargassum horneri (Turner) C. Agardh 이고, 갈조식물문(Phaeophyta) > 갈조강(Phaeophyceae) > 모자반목(Fucales) > 모자반과(Sargassaceae)에 속한다. 상기 괭생이모자반은 암초의 황갈색이며 바다 밑에서 자라는 여러해살이이고, 식물체의 길이는 3 내지 5m 정도로 자란다. 헛뿌리는 쟁반 모양이며 중심에서 원기둥 모양의 줄기가 나오고 곁가지를 치며, 줄기의 가운데와 윗부분은 원기둥 모양이고 미끈하지만 밑부분과 가지에는 가시가 있다. 그 잎은 긴 타원 모양이거나 줄 모양이며 가장자리가 깃꼴로 갈라진다.
상기 괭생이모자반의 공기주머니는 원기둥 모양이며 길이 10 내지 14mm, 지름 2 내지 2.5mm이고 짧은 자루가 있다. 생식기탁(生殖器托)은 원기둥 모양이고 작은가지에 생기며 암수딴그루이다. 점심대(漸深帶) 윗부분의 바위 위에서 자라고 썰물 때 몸의 끝부분이 물 위에 떠다닌다. 사료로 쓰거나 식용한다. 한국(남해안) 또는 일본에 분포한다.
바람직하게 상기 괭생이모자반 추출물은 티로시나아제(Tyrosinase)의 활성을 억제하는 것일 수 있다.
즉, 상기 미백 효과는 멜라닌 생성의 억제 및 멜라닌 합성 과정에서 핵심 역할을 하는 효소인 티로시나아제(Tyrosinase)의 활성을 억제하는 것을 포함하는 개념으로 이해될 수 있다.
멜라닌은 생물체에 널리 분포되어 있는 색소로 인체에서는 표피층에 있는 멜라노사이트에서 합성된다. 멜라닌 생합성 과정에 작용하는 주요 효소가 티로시나제(tyrosinase)이다. 티로시나아제는 폴리페노 옥시다아제(polyphenol oxidase)의 일종으로 구리를 함유하는 효소로써 멜라노사이트에서 티로신(tyrosine)을 산화시켜 L-3,4-디히드록시페닐알라닌(L-3,4-dihydroxyphenylalanine, DOPA)로 변환시키고, DOPA가 다시 산화되어 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후, 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다.
따라서, 티로시나아제 효소의 활성을 저해하고 멜라닌 생성을 억제시켜 피부 미백 효과를 가질 수 있다.
그러므로, 상기 괭생이모자반 추출물은 멜라닌 합성 과정에서 핵심 역할을 하는 효소인 티로시나아제(Tyrosinase)의 활성을 억제하여 효과가 우수하여 높은 미백 효과를 가진다.
상기 괭생이모자반 추출물은 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 하여 추출된 것일 수 있다.
바람직하게, 탄소수 1 내지 10인 알코올 추출물일 수 있고, 상기 괭생이모자반과 탄소수 1 내지 10인 알코올을 1 : 10 내지 10 : 1 중량비로 혼합하여 사용하는 것일 수 있다. 상기 알코올을 사용하는 경우 미백 유효성분의 추출에 유용하며, 상기 범위에 의하는 경우 상기 괭생이모자반에 포함된 미백 유효성분을 추출하는데 적합할 수 있다.
더 바람직하게는 상기 괭생이모자반과 탄소수 에탄올 1 : 7 내지 1 : 1 중량비로 혼합되는 것일 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 상기 괭생이모자반에 포함된 미백 유효성분의 수득률이 높아질 수 있다.
바람직하게 상기 괭생이모자반 추출물은 700 내지 1000 mg/l로 포함되는 것일 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 상기 괭생이모자반 추출물 300mg/l 이하로 포함되는 경우에 비하여 티로시나아제에 대한 활성 저하로 미백효과가 우수할 수 있으며, 상기 괭생이모자반 추출물이 300mg/l를 초과하고, 700mg/l를 초과하여 사용하는 경우에 비하여 세포독성이 저하되어 부작용 없이 높은 미백효과를 낼 수 있다. 본 발명에 따른 부작용 없이 높은 미백 효과를 내는 조성물로 사용하기 위해서는 상기 범위가 적합할 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 점도가 1.2 내지 100cP인 것일 수 있다.
상기 점도 범위에 의하는 경우 상기 점도 범위에 의하는 경우 괭생이모자반 특유의 향을 느낄 수 있어 향미와 식감이 높이질 수 있다. 미백용 조성물의 꾸준한 복용을 위해 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물의 식감 및 향미가 높아야 한다.
상기 점도를 맞추기 위해 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 증점제를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 증점제는 식품으로 사용하는데 허용된 것으로서 해당 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 사용할 수 있는 증점제를 포함하는 것으로 본다.
바람직하게는 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 점도가 1.2 내지 10cP인 것일 수 있다. 상기 범위에 의하는 경우 식감과 향미가 매우 좋아 일정기간 꾸준히 섭취하는데 도움이 될 수 있다.
상기 괭생이모자반은 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것일 수 있다.
상기 상엽 추출물은 발효된 상엽을 사용하여 추출된 것일 수 있다. 발효된 상엽을 사용하는 경우 세포독성이 낮아 상대적으로 높은 농도에서 안정적으로 사용할 수 있는 장점이 있다.
바람직하게 상기 괭생이모자반은 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus)을 접종한 것일 수 있다. 상기 미생물 발효에 의하는 경우 세포독성이 낮아질 수 있을 뿐만 아니라, 상기 미생물 접종에 의한 발효과정에 따라 발효된 괭생이모자반을 사용하여 상기 괭생이모자반 추출물을 제조하는 경우 미백 활성의 유효물질이 증가하여 미백 효과를 더 높일 수 있는 장점이 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 노간주나무 열수추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
본 명세서에서 말하는 '병조희풀'은 낙엽 관목으로 미나리아재빗과 에 속한다. 그 잎은 마주나고 3개의 작은 잎으로 구성되는 3출 겹잎이다. 작은 잎은 넓은 달걀꼴이며 3개 중 옆에 달린 2개는 작다. 잎은 위로 올라갈수록 커지는데 끝이 뾰족하고 거칠며 가장자리에 약간 붉은빛이 도는 거친 톱니가 드문드문 있으나 흔히 3개로 얕게 갈라진다.
상기 병조희풀을 사용하는 혼합하여 사용하는 경우 미백효과가 더 높아지며, 주름개선에 효과가 있다. 다만 상기 병조희풀은 자체의 독성이 있으므로 발효과정을 통하여 독성을 제거할 필요가 있다.
바람직하게 상기 병조희풀 추출물은 발효 추출법에 의해 제조된 병조희풀 발효 추출물인 것일 수 있다. 상기 병조희풀은 약한 독성이 있으므로 발효과정을 통하여 독성을 제거할 필요가 있다.
본 발명에서 말하는 병조희풀 발효 추출물은 쌀뜨물 100 부피부에 대하여, 1 내지 3 부피부의 당류 및 0.05 내지 0.25 부피부의 천일염을 첨가하고, 0.5 내지 2.0 부피부의 미생물액을 혼합한 혼합물에 병조희풀 분쇄물을 10 내지 30 부피비로 부피부로 침지시킨 후, 공기와 차단된 상온 분위기에서 3 ~ 15일 발효시켜 수득할 수 있다.
상기 미생물은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것일 수 있다.
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 병조희풀 열수추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서 사용하는 노간주나무는 두송(杜松)이라고도 불리우며, 측백나뭇과에 속한다. 잎은 좁고 가는 선형의 바늘잎이 한 마디에서 3개씩 돌려나는데 길이는 12~20mm이고 끝이 뾰족하며 표면의 가운데에 흰색의 좁은 홈이 있다.
바람직하게 상기 노간주나무는 상기 병조희풀과 동일한 방법으로 발효된 것일 수 있다. 상기 노간주나무를 발효시키는 경우 괭생이모자반이 가지는 고유한 향을 제거하는 효과가 높고 향미가 증진될 수 있도록 하는 장점을 가진다.
본 발명에서 사용하는 '낭아초'는 장미과에 속한 여러해살이풀. 높이는 30 내지 100센티미터 정도이고, 굵은 뿌리줄기에서 줄기가 나와 자라며 전체에 털이 있다. 잎은 어긋나고 깃꼴 겹잎이며 작은 잎은 5~7개이다. 6~8월에 노란 꽃이 총상(總狀) 꽃차례로 피고, 열매에는 가시 모양의 털이 있어 다른 것에 잘 붙는다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 제한없이 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이 등의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 건강기능식품을 포함하는 것으로 그 종류를 특별하게 제한하는 것은 아니다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 또 따른 일 실시예에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물의 제조방법은 괭생이모자반을 일정한 크기로 절단하여 1기압 상태에서 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 혼합하여 용매혼합물을 제조하는 용매혼합단계; 상기 혼매혼합물을 반응기에 넣고 15 내지 75℃의 온도를 유지하면서 불활성 기체를 주입하여 반응기 내 압력이 20 내지 35 기압이 되도록 하는 반응단계; 상기 반응단계 이후 상기 반응기에서 상기 불활성 기체와 함께 상기 용매를 배출하여 입자화 된 괭생이모자반 추출물을 제조하는 배출단계; 및 상기 입자화된 괭생이모자반 추출물을 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 혼합하여 혼합 추출물을 제조하는 혼합단계를 포함하는 것일 수 있다.
상기 배출단계에서 얻어진 고형물은 10℃ 이하의 온도에서 급속냉각하고, 상기 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나와 혼합하여 괭생이모자반 추출물의 농도가 조정되는 것일 수 있다.
상기 급속냉각에 의하는 경우 유효성분의 손실이 없고 비교적 표면적인 넓고 용해도가 높은 나노사이즈의 입자형성이 가능하므로 조성물에 대한 분산성이 높을 뿐 아니라, 경구 투여시 체내에 흡수율이 보다 높아질 수 있고, 외형제로 사용하는 경우 피부장벽에 쉽게 침투될 수 있는 장점을 가진다.
본 발명에 따른 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은 세포독성이 없어 부작용을 일으키지 않으면서도 멜라닌 생성을 저해함으로써 피부 미백 활성을 향상시킬 수 있다. 따라서 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 활용함으로서, 부작용 없으면서도 우수한 미백 효과를 가지는 다양한 제품 또는 제형으로 제공될 수 있다.
또한, 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물의 효과를 기초로 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 이용하여 제조한 미백용 식품 등의 기능성 제품을 제공할 수 있다.
도 1은 괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell 생존율에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 2는 발효된 괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell 생존율에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 3은 괭생이모자반 추출물이 세포 내 Tyrosinase 활성에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 4는 괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell의 Melanin 생성에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 5는 괭생이모자반 추출물이 멜라닌 합성 관련 효소의 단백질 발현량에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 2는 발효된 괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell 생존율에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 3은 괭생이모자반 추출물이 세포 내 Tyrosinase 활성에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 4는 괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell의 Melanin 생성에 미치는 영향에 관한 것이다.
도 5는 괭생이모자반 추출물이 멜라닌 합성 관련 효소의 단백질 발현량에 미치는 영향에 관한 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예: 시료의 제조]
1.
괭생이모자반 추출물의 제조
본 발명에 따른 효과를 확인하게 위하여 에탄올을 사용하여 괭생이모자반 추출물(Sargassum horneri ethanol extracts: SHEE) 제조하였다.
2.
혼합추출물의 제조
상기 괭생이모자반 추출물 A 및 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)로 발효시킨 발효 괭생이모자반 추출물 B를 제조하였다.
또한 이를 쌀뜨물로 발효시킨 노간주나무에 대한 열수추출물(추출물 C), 이를 쌀뜨물로 발효시킨 병조희풀에 대한 열수추출물(추출물 D), 낭아초 열수추출물(추출물 E), 녹두에 대한 열수추출물(추출물 F)를 제조하였다.
이후 상기 추출물을 하기의 [표 1]에 따라 혼합하여 실시예를 제조하였다.
| A | B | C | D | E | F | |
| T1 | 500 | - | - | - | - | - |
| T2 | 500 | - | - | - | - | |
| T3 | 500 | 500 | - | - | - | |
| T4 | - | 500 | - | 500 | - | - |
| T5 | - | 500 | 250 | 250 | - | - |
| T6 | - | 500 | 100 | 400 | - | - |
| T7 | - | 500 | 400 | 100 | - | - |
| T8 | - | 500 | 300 | 100 | 100 | - |
| T9 | - | 500 | 300 | 100 | - | 100 |
| T10 | - | 500 | 300 | 100 | 50 | 50 |
[실험예: 괭생이모자반 추출물에 대한 시험방법]
1. 시약 및 항체
단백질 분석을 위하여 사용된 Tyrosinase, MITF, TRP1, TRP2 및 actin 항체는 Santa Cruz Biotechnology Inc. (Santa Cruz, CA, USA) 및 Cell Signaling Technology (Beverly, Ma, USA)에서 구입하였다. Immunoblotting을 위해 2차 항체로 사용된 peroxidase-labeled donkey anti- rabbit 및 peroxidase- labeled sheep anti-mouse immunoglobulin은 Amersham Life Science Corp. (Arlington Heights, IL, USA)에서 구입하였다. α-Melanocyte stimulating hormone(α-MSH)과 L-DOPA는 Sigma- Aldrich(St. Luis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.
2. 세포주 및 세포 배양
한국 세포주은행에서 B16F10 mouse melanoma cell을 분양받아 10% FBS(fetal bovine serum, WelGENE, Daegu, Korea)와 1% penicillin-streptomycin(Gibco BRL)이 첨가된 DMEM(WelGENE, Daegu, Korea)을 사용하여 37℃, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다. 세포수의 증식에 따른 과밀도 현상을 해소하기 위하여 배양한 B16F10 세포를 trypsin(Hyclone, USA)을 이용하여 적정수의 세포를 유지하였다.
3.
세포생존능(cell viability)의
측정
세포 배양용 6 well plate에 B16F10 melanoma 세포를 3×104/ml로 분주하여 괭생이모자반 추출물을 각 well 당 적정농도로 처리하였다. 72시간 후 희석된 0.5mg/ml 농도의 tetrazolium bromide salt (MTT, Amresco, Solon, OH, USA)를 200μl씩 분주하고 2시간 동안 CO2 incubator에서 배양시킨 다음 배지와 MTT 시약을 깨끗하게 제거하고 DMSO를 2ml 씩 분주하여 well에 생성된 formazin을 모두 녹인 후 96 well plate에 200μl씩 옮겨서 ELISA reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 세포에 대한 독성은 각각의 대조군의 평균 흡광도 값을 구하여 평균 흡광도 값에 대한 백분율로 나타내었다.
4.
B16F10
melanoma cell 내의 멜라닌 생성량 측정
B16F10 세포에α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH)와 SHEE를 함께 처리하여 3일간 배양하고 세포를 수거하여 Phosphate-buffered saline(PBS)로 2번 세척하였다. 그 후에 10% dimethylsulfoxide (DMSO, Ameresco, Solon, Ohio, USA)가 함유된 1N NaOH를 적정량 넣고 80℃에서 1시간 반응시킨 후 ELISA reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 475 nm에서 흡광도를 측정하였다.
5.
B16F10
melanoma cell 내의
tyrosinase
활성 측정
B16F10 세포에 α-MSH와 SHEE를 함께 처리하여 3일간 배양하고 세포를 수거하여 lysis buffer(1% Triton X-100, 0.1M PMSF)를 첨가하여 1시간 얼음에서 반응시켜 세포들을 용해시킨 후 원심 분리하여 상층액을 수집하였다. 수집한 단백질을 정량한 후 L-DOPA(mg/ml)을 첨가한 뒤 37℃에서 반응시키고 흡광도의 변화를 1시간 동안 관찰하면서 420nm에서 흡광도를 측정하였다.
6. Western blot analysis에 의한 단백질 발현의 분석
동일한 방법으로 준비된 B16F10 mouse melanoma cell에 적당량의 lysis buffer (1% Triton X-100, 0.1M PMSF)를 첨가하여 4℃에서 1시간 동안 반응시킨 후, 14,000 rpm으로 30분간 원심분리하여 상층액에 있는 총 단백질을 분리하였다. 상층액의 단백질 농도는 Bio-Rad 단백질 정량 시약(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)과 그 사용방법에 따라 정량 한 다음 동량의 Laemmli sample buffer (Bio-Rad)를 섞어서 sample을 만들었다. 동량의 sample을 sodium dodecyl sulphate (SDS)-polyacrylamide gel을 이용하여 전기영동으로 분리한 후, PVDF membrane(Bio-Rad, USA)으로 electroblotting에 의해 전이시켰다. 분리된 단백질이 전이된 PVDF membrane을 5w% skim milk를 처리하여 비특이적인 단백질들에 대한 blocking을 실시하고 1차 항체를 처리하여 상온에서 2시간 이상 또는 4℃에서 over night 시킨 다음 PBS-T로 세척(10분간 4번)하고 처리된 1차 항체에 맞는 2차 항체(PBS-T로 1:1500으로 희석하여 사용)를 사용하여 상온에서 1시간 정도 반응시켰다. 반응이 끝난 후 암실에서 Enhanced Chemiluminoesence (ECL) solution (Amersham Life Science Corp.)을 적용시킨 다음 X-ray film에 감광시켜 특정 단백질의 발현 양을 분석하였다.
7. Statistical analysis
모든 실험 결과는 Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) 통계 프로그램을 이용하여 평균(mean)±표준편차(S.D.)로 나타냈다. 각 실험군의 분석 항목별 통계의 유의성은 Duncan's multiple range test 를 이용하여 p<0.05 수준에서 검증하였다.
[실험예: 괭생이모자반 추출물에 대한 시험결과]
1.
괭생이모자반
추출물이
B16F10
melanoma cell 생존율에 미치는 영향
괭생이모자반 추출물이 B16F10 melanoma cell 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위하여 세포독성을 측정하였고 그 결과를 도 1에 나타내었다. 상기 도 1을 참조하면, 괭생이모자반 추출물을 각각 100 내지 1,000 μg/ml의 농도로 처리한 결과 300 μg/ml 농도까지는 90% 이상의 생존율을 보였다. 특히 700 내지 1000μg/ml의 농도에서는 세포독성이 다시 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
한편, 발효 괭생이모자반 추출물을 사용한 경우로서 도 2를 참조하면, 세포생존율이 상당히 우수하였으며, 1000㎍/ml에서도 생존율이 상대적으로 높게 유지될 수 있다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 발효 괭생이모자반 추출물을 사용하는 경우 세포독성이 낮아 부작용 없이 제공될 수 있는 장점이 있다.
2.
괭생이모자반
추출물이 세포 내
Tyrosinase
활성에 미치는 영향
멜라닌 합성 과정에서 핵심 역할을 하는 효소인 tyrosinase의 활성을 괭생이모자반 추출물이 억제하는지 알아보기 위하여 추출물을 농도별로 처리한 후 tyrosinase의 활성을 측정하였고 그 결과를 도 3에 나타내었다. MTT 결과를 참고하여 동일한 농도 범위에서 실험을 진행하였다. 괭생이모자반 추출물을 50, 100, 150, 200 μg/ml의 농도로 각각 처리한 결과 α-MSH만을 처리한 것에 비해 18%, 46%, 62%, 71%로 농도 의존적으로 감소하는 것으로 나타났다. 따라서 상기 괭생이모자반 추출물은 α-MSH에 의해 유도된 tyrosinase 활성에 억제효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
3.
괭생이모자반
추출물이
B16F10
melanoma cell의 Melanin 생성에 미치는 영향
괭생이모자반 추출물을 농도별로 처리한 후 합성된 멜라닌의 양을 측정하였다. Tyrosinase activity 측정 실험과 동일한 농도 범위에서 진행하였다. 멜라닌 생성은 대조군에 비하여 α-MSH만 처리한 경우 뚜렷하게 증가하였고, 괭생이모자반 추출물을 50 내지 200 μg/ml의 농도로 각각 처리한 결과 α-MSH만을 처리한 것에 비해 31%, 47%, 64%, 68%로 농도 의존적으로 감소하였다. 또한 멜라닌 색소 침착을 육안으로 관찰한 결과 α-MSH만 처리했을 때 짙은 색을 나타냈었다. (도 4 참조)
한편, 불등풀가사리 추출물을 상기 괭생이모자반 추출물을 1 :3 내지 3: 1로 혼합하여 사용하는 경우 농도 의존적으로 멜라닌 색이 급격히 감소하였으며, 200 μg/ml의 농도에서는 대조군과 유사한 색을 관찰할 수 있어, 상기 불등풀가사리 추출물을 상기 괭생이모자반 추출물을 함께 사용하는 경우 멜라닌 생성의 억제 효과가 증가되는 것을 확인할 수 있었다.
4.
괭생이모자반
추출물이 멜라닌 합성 관련 효소의 단백질 발현량에 미치는 영향
상기 괭생이모자반 추출물이 α-MSH 자극에 의해 유도된 tyrosinase 활성과 멜라닌 생성을 억제시키는 것을 확인하여 멜라닌 합성 관련 단백질 발현에 대한 영향을 확인하기 위하여 Western blot 으로 MITF, TRP-1, TRP-2, Tyrosinase 발현을 실험하고 그 결과를 하기의 도 4에 나타내었다. 상기 도 4를 참조하면, 멜라닌 색소 침착을 육안으로 관찰한 결과 α-MSH만 처리했을 때 짙은 색을 나타냈으며, 괭생이모자반 추출물을 병용처리하였을 때 처리군은 농도 의존적으로 멜라닌 색이 감소하였다. 따라서 괭생이모자반 추출물은 α-MSH에 의해 유도된 멜라닌 생성에 억제효과를 나타냈다.
5. 복합추출물의 미백 및 보습성능 평가
위 복합추출물 T1 내지 T10를 사용하여 스프레이형 에센스를 제조하였고, 미백성능, 보습만족도, 피부안정감 및 향(풍미성)에 대하여 1 내지 10의 지수로 평가하여 평균지수로 구분하였고 그 결과를 [표 2]에 나타내었다.(하기의 지수는 그 숫자가 높을수록 성능이 우수한 것이다) 패널은 20 내지 30 대성인 남녀 각각 20명을 대상으로 하였다.
| T1 | T2 | T3 | T4 | T5 | T6 | T7 | T8 | T9 | T10 | |
| 미백성능 | 5 | 7 | 9 | 7 | 7 | 6 | 9 | 9 | 9 | 9 |
| 보습성능 | 3 | 2 | 4 | 7 | 4 | 7 | 8 | 9 | 9 | 9 |
| 피부안정감 | 5 | 7 | 3 | 7 | 5.5 | 5.5 | 7 | 8 | 9 | 9 |
| 향(풍미성) | 5 | 3 | 4 | 5 | 8 | 8 | 9 | 8 | 9 | 9 |
(단위: 지수)
상기 표 2를 참조하면, 괭생이모자반 추출물을 단독으로 사용하는 경우보다 발효물을 사용하는 경우 미백활성이 더 우수하다는 사실을 확인할 수 있었다.
나아가 복합 추출물을 사용하는 경우 미백활성이 증가함과 더불어 보습성능과 피부안정감 및 향미가 향상되는 것을 확인할 수 있었다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.
Claims (9)
- 괭생이모자반(Sargassum horneri) 추출물을 포함하고,
피부 미백 효과를 가지는 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 괭생이모자반 추출물은 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 하여 추출된 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물은
점도가 1.2 내지 100cP인 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 괭생이모자반은 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제 4항에 있어서,
노간주나무 열수추출물을 더 포함하는 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제5항에 있어서,
병조희풀 열수추출물을 더 포함하는 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물. - 제 1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것인
화장료 조성물. - 제 1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 상기 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물을 포함하는 것인
식품 조성물. - 괭생이모자반을 일정한 크기로 절단하여 1기압 상태에서 물, 탄소수 1 내지 10인 알코올, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 용매로 혼합하여 용매혼합물을 제조하는 용매혼합단계;
상기 혼매혼합물을 반응기에 넣고 15 내지 75℃의 온도를 유지하면서 불활성 기체를 주입하여 반응기 내 압력이 20 내지 35 기압이 되도록 하는 반응단계;
상기 반응단계 이후 상기 반응기에서 상기 불활성 기체와 함께 상기 용매를 배출하여 입자화 된 괭생이모자반 추출물을 제조하는 배출단계; 및
상기 입자화된 괭생이모자반 추출물을 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 혼합하여 혼합 추출물을 제조하는 혼합단계를 포함하는 것인
괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물의 제조방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150186825A KR101772494B1 (ko) | 2015-12-24 | 2015-12-24 | 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 |
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| KR1020150186825A KR101772494B1 (ko) | 2015-12-24 | 2015-12-24 | 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 |
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| KR1020150186825A KR101772494B1 (ko) | 2015-12-24 | 2015-12-24 | 괭생이모자반 추출물을 포함하는 미백용 조성물 및 그 제조방법 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200064240A (ko) * | 2018-11-28 | 2020-06-08 | 주식회사 단정바이오 | 초임계 유체 추출법을 이용한 괭생이모자반 추출물을 함유하는 항산화 또는 피부미백 화장료 조성물 |
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| KR102157605B1 (ko) | 2018-10-17 | 2020-09-18 | 한국프라임제약주식회사 | 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강용 조성물 |
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| KR101035858B1 (ko) * | 2009-07-14 | 2011-05-19 | 한불화장품주식회사 | 광독성이 낮은 모자반 추출물 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물 |
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2015
- 2015-12-24 KR KR1020150186825A patent/KR101772494B1/ko active IP Right Grant
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